次黄嘌呤核苷一磷酸二钠纯

采用东曹C18柱TSKgel ODS-100V（4.6 mmI.D.X250mm,5 μ m），参照GB 5413.40-2016，对婴幼儿奶粉中的胞嘧啶核苷酸（CMP）、腺嘌呤核苷酸（AMP）、尿嘧啶核苷酸（UMP）、次黄嘌呤核苷酸（IMP）、鸟嘌呤核苷酸进行含量测定。实验结果表明，该方法可以满足国标中对核苷酸的分析测定要求。

核苷酸类化合物的极性较强，在常规反相C18色谱柱上难以保留，通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。食品中核苷酸的检测，推荐使用色谱柱 CAPCELL PAK C18 AQ , CAPCELL PAK ADME。CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱可在纯水相下稳定使用，适用于极性较大物质的高水相条件下的分析；CAPCELL PAK ADME键合了笼状金刚烷基团，兼具高极性和疏水性特点，对高极性化合物有出色的保持和分离效果。

肌苷也称为次黄苷、次黄嘌呤核苷等。是由次黄嘌呤于核糖结合而成的核苷类化合物。其适用于各种原因引起的白细胞减少症、血小板减少症、各种心脏疾患、急性及慢性肝炎、肝硬化等病症，此外也可治疗中心视网膜炎、视神经萎缩等。本次实验测定某厂家生产的肌苷含量是否达标，采用T960全自动电位滴定仪测按照其电位突跃点确定终点，测定其含量。

选用ChromCore 120 C18反相色谱柱，结合四丁基硫酸氢铵/磷酸二氢钾系统在酸性甲醇溶液中进行分离，在该色谱条件下，各主要组分与其他未知组分间有较好的分离度和峰型。Column:ChromCore 120 C18, 5 μ mDimension:4.6 × 250 mmMobile phase:96/4 v/v 1.4mmol/L四丁基硫酸氢铵& 10mmol/L磷酸二氢钾，pH2.5/甲醇Flow rate:1.0 mL/minTemperature:25 ℃Injection:10 μ LDetection:UV 254 nm

吗替麦考酚酯MPA是一种药物，能特异性地抑制淋巴细胞嘌呤合成途径中次黄嘌呤核苷酸脱氢酸(1MPDH)的活性，因而具有强大的抑制淋巴细胞增殖的作用。药品的含量测定是评价药品质量、判断药物优劣和保证药品疗效的重要手段，因此，能快速而准确的测定出药品的含量是非常有意义的。本文用电位滴定法来检测吗替麦考酚酯的含量，操作简单、结果准确。

药物杂质研究对于研究者来讲是一个具有挑战性的领域。该实验使用离子阱串联飞行时间分析器对国际计量局（BIPM）分发的CCQM（国际物质量咨询委员会）样品进行了杂质的定性分析，LC-PDA-ESI-IT-TOF的结果显示该样品含有种杂质成分。根据从不同串级质谱采集的精确质量，4种杂质被分别确认为3-甲基黄嘌呤；可可碱；咖啡因和三甲基黄嘌呤，定性结果也被其他参与对比的国际实验室所证实。第5种杂质相对更加复杂并详细研究了其结构和裂解途径。

药物杂质研究对于研究者来讲是一个具有挑战性的领域。该实验使用离子阱串联飞行时间分析器对国际计量局（BIPM）分发的CCQM（国际物质量咨询委员会）样品进行了杂质的定性分析，LC-PDA-ESI-IT-TOF的结果显示该样品含有种杂质成分。根据从不同串级质谱采集的精确质量，4种杂质被分别确认为3-甲基黄嘌呤；可可碱；咖啡因和三甲基黄嘌呤，定性结果也被其他参与对比的国际实验室所证实。第5种杂质相对更加复杂并详细研究了其结构和裂解途径。

Thermo Ultimate 3000系统串联TSQ Vantage MS：泵：DGP-3600RS自动进样器：WPS-3000RS柱温箱：TCC-3000RS检测器：DAD-3000RS and TSQ Vantage色谱软件：Chromeleon 6.8 and Xcalibur

用YMC-UltraHT Hydrosphere C18色谱柱（P/N：HS12S02-0502WT)按照超高压液相色谱法（UPLC）测定血清中黄嘌呤与氧化酶抑制剂及代谢物，样品处理简单，分离效果好。

寡核苷酸是一类短链核苷酸的总称（包括脱氧核糖核酸及核糖核酸），如用于基因扩增和基因诊断的 PCR 引物和反义核酸，介导基因沉默的小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）等，努力研究开发基因靶向治疗药物用于治疗病毒、肿瘤和遗传疾病。天然的寡核苷酸在体内容易降解，稳定性差。通过修饰的寡核苷酸具有较好的药学特性和体内稳定性 [1-2]，但合成的寡核苷酸产物含有各种杂质，需纯化精制，产物的鉴定和产品的质量控制至关重要。液相和液质联用于寡核苷酸目标产物的高分辨分离和鉴定， 可以判断待测寡核苷酸结构的变化，比如脱嘌呤、氧化、磷酸化等。寡核苷酸样品中存在的盐分会影响其离子化过程和造成峰强度降低，因此有必要进行质谱鉴定前的除盐处理。常规离线除盐方法耗时；可以利用在线除盐方式进行寡核苷酸的分离鉴定，但样品通量需要提高，以满足高通量的要求，如平均每天 2000 个样品的需求等。

人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)检测试剂盒人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)抗原、生物素化的人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

本方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，磷酸二氢钠溶液- 甲醇 (90 : 10) 作为流动相对枸橼酸和腺嘌呤同时进行含量测定。经验证，该方法精密度好、回收率较高。相较原来的方法，腺嘌呤保留更强，分离度好，试剂更经济环保，可应用于红细胞保存液中枸橼酸和腺嘌呤的同时含量测定。

脱氧核苷酸钠是一种具有遗传特性的化学物质，其在个体的生长、繁殖、遗传、变异等生理生化功能方面起着非常重要的作用。目前常用注射用脱氧核苷酸是用脱氧核糖核酸（DNA）为原料，经生物酶催化水解反应生成脱氧腺苷酸（dAMP），脱氧鸟苷酸（dGMP）、脱氧胞苷酸（dCMP）和脱氧胸苷酸（TMP）等四种脱氧核苷酸，然后经层析分离获得高纯度四种单一脱氧核苷酸产品。医药常使用复方制剂，组分包含脱氧糖胞嘧啶核苷酸、脱氧核糖腺嘌呤核苷酸、脱氧核糖胸腺嘧啶核苷酸及脱氧核糖鸟嘌呤核苷酸钠盐。用于急、慢性肝炎，白细胞减少症，血小板减少症及再生障碍性贫血等的辅助治疗。

摘 　 要 　：测定三磷酸腺苷二钠的水分含量 。 方法 卡尔费休氏法 : ① 采用国产卡氏试剂 ,以 ψ( 乙二醇 ∶ 甲醇 ) = 60∶ 40为溶剂滴定 ② 采用进口 ( 双溶液 )卡氏试剂滴定 。 结果 两种试剂测定的回收率分别为 96 . 0 % , RSD = 4 . 9% ( n = 10 ) 99 . 0% ,RSD = 315 % ( n = 11 ) ,样品测得结果相符 。 结论 国产与进口的卡氏试剂均可用于三磷酸腺苷二钠的水分含量测定 , 方法简便 ,准确 。 适用于药品的质量控制 。

核苷酸类化合物的极性较强，在常规反相C18色谱柱上难以保留，通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。食品中核苷酸的检测，推荐使用色谱柱 CAPCELL PAK C18 AQ , CAPCELL PAK ADME。CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱可在纯水相下稳定使用，适用于极性较大物质的高水相条件下的分析；CAPCELL PAK ADME键合了笼状金刚烷基团，兼具高极性和疏水性特点，对高极性化合物有出色的保持和分离效果。

核苷酸类化合物的极性较强，在常规反相C18色谱柱上难以保留，通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。食品中核苷酸的检测，推荐使用色谱柱 CAPCELL PAK C18 AQ , CAPCELL PAK ADME。CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱可在纯水相下稳定使用，适用于极性较大物质的高水相条件下的分析；CAPCELL PAK ADME键合了笼状金刚烷基团，兼具高极性和疏水性特点，对高极性化合物有出色的保持和分离效果。

本文采用Nexera XS Inert生物惰性超高效液相色谱和单四极杆质谱LCMS-2050联用仪对mRNA和DNA生产用核苷酸原料NTP和dNTP进行定性分析。NTP和dNTP中含磷酸基团，易与金属产生吸附作用，Nexera XS Inert在保证超高耐压的前提下，管路经peek材料内衬，实现全流路惰性化，抑制金属吸附，使NTP和dNTP的色谱峰型良好。通过优化流动相和质谱采集参数，采用DUIS（ESI+APCI）离子源的负离子模式分析待测样品。结果显示，该方法无需复杂的样品前处理、操作简单，检测的NTP和dNTP色谱峰型良好且均有较好的保留，适用于mRNA和DNA原料进厂质控分析，可对其原料进行快速分子量确认。

报告了在碳酸胍体系中研究6种5'-单磷酸核苷酸的分离工作，考察了分离条件对分离结果的影响。在最佳条件下，TMP、AMP、CMP、GMP、IMP、UMP等6，种核苷酸的线性范围分别为：5～350、2～300、10～40、5～350、10～4o0和10～4o0 rag／L；其检出限分别为：1、0．5、2、1、2和2 ms／L。初步探讨了胍基与不同核苷酸之间的相互作用及这种作用对毛细管电泳分离的影响。并将实验结果与普通碳酸盐体系作了比较。

检测波长：UV 259 nm流动相：0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液-甲醇（95:5）缓冲溶液：取磷酸氢二钠35.8g、磷酸二氢钾13.6g，加水900ml溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调pH至7.0，加入四丁基溴化铵1.61g，加水至1000ml，摇匀。洗脱方式：等度柱温：35℃进样量：10 ul

由亚磷酰胺化学法合成的寡核苷酸通常使用离子对反相液相色谱 (IP-RPLC) 和阴离子交换色谱进行分析和纯化。在 IP-RPLC 分析中，阴离子交换纯化馏分的高含盐量会削弱寡核苷酸参与离子配对的能力。这就需要在 IP-RPLC 分析之前对样品进行脱盐，这一步骤通常使用离心过滤器手动完成。本应用简报展示了高盐浓度溶液中寡核苷酸的直接二维液相色谱分析：在第一维(1D) 中进行在线脱盐，随后在第二维 (2D) 中进行 IP-RPLC 分析。在该设置中，二维液相色谱的使用提高了工作流程速度，同时避免了手动的样品前处理过程。

磷酸氢二钠是一种实验室常见试剂，常用作一些缓冲溶液的配制，也可以用来制作柠檬酸、软水剂、织物增重剂、防火剂等化工消防用品。含量的多少通常是体现磷酸氢二钠品质好坏的主要参考依据。

2010年中国药典方法中针对帕米磷酸二钠注射液以及注射用帕米磷酸二钠中帕米膦酸二钠含量测定有了确定的方法：● 色谱柱：IonPac AS22戴安阴离子分析柱，250×4mmIonPac AG22戴安阴离子保护柱，50×4mm● 检测器：非抑制型电导检测器● 淋洗液：3mM草酸● 流速：1.2mL/min● 进样体积：25μL

由亚磷酰胺化学法合成的寡核苷酸通常使用离子对反相液相色谱 (IP-RPLC) 和阴离子交换色谱进行分析和纯化。在 IP-RPLC 分析中，阴离子交换纯化馏分的高含盐量会削弱寡核苷酸参与离子配对的能力。这就需要在 IP-RPLC 分析之前对样品进行脱盐，这一步骤通常使用离心过滤器手动完成。本应用简报展示了高盐浓度溶液中寡核苷酸的直接二维液相色谱分析：在第一维( 1 D) 中进行在线脱盐，随后在第二维 ( 2 D) 中进行 IP-RPLC 分析。在该设置中，二维液相色谱的使用提高了工作流程速度，同时避免了手动的样品前处理过程。

帕米磷酸二钠为双膦酸类药物，体外和动物试验表明可强烈抑制羟磷灰石的溶解和破骨细胞的活性，对骨质的吸收具有十分显著的抑制作用。对癌症的溶骨性骨转移所致的疼痛有止痛作用，亦可用于治疗癌症所致的高钙血症。 2010年药典规定，采用阴离子色谱柱，以草酸溶液为流动相、非抑制电导检测的方法测定注射用帕米磷酸二钠的含量。

甘油在甘油激酶催化作用下,与腺苷-5，-三磷酸盐反应生成L-甘油-3-磷酸盐和腺苷-5'-二磷酸盐。而生成的腺苷-5’-二磷酸盐在丙酮酸盐激酶的存在下,又与磷酸烯醇丙酮酸盐反应,再转化成腺苷-5'-三磷酸盐和丙酮酸盐。丙酮酸盐在L-乳酸盐脱氢酶的作用下﹐被烟酰胺腺嗫呤二核苷酸还原为L-乳酸盐。通过在340 nm测定烟酰胺腺嘌呤二核苷酸消耗量,计算出甘油含量。

选用ChromCore 120 C18反相色谱柱，结合四丁基硫酸氢铵/磷酸二氢钾系统在酸性甲醇溶液中进行分离，在该色谱条件下，各主要组分与其他未知组分间有较好的分离度和峰型。Column:ChromCore 120 C18, 5 μ mDimension:4.6 × 250 mmMobile phase:96/4 v/v 1.4mmol/L四丁基硫酸氢铵& 10mmol/L磷酸二氢钾，pH2.5/甲醇Flow rate:1.0 mL/minTemperature:25 ℃Injection:10 μ LDetection:UV 254 nm

选用ChromCore 120 C18反相色谱柱，结合四丁基硫酸氢铵/磷酸二氢钾系统在酸性甲醇溶液中进行分离，在该色谱条件下，各主要组分与其他未知组分间有较好的分离度和峰型。Column:ChromCore 120 C18, 5 μ mDimension:4.6 × 250 mmMobile phase:96/4 v/v 1.4mmol/L四丁基硫酸氢铵& 10mmol/L磷酸二氢钾，pH2.5/甲醇Flow rate:1.0 mL/minTemperature:25 ℃Injection:10 μ LDetection:UV 254 nm

本文使用生物惰性超高效液相色谱仪Nexera XS inert与LCMS-2050连用，测定了小干扰核苷酸siRNA分子量。采用DUIS（ESI+APCI）离子源的负离子模式分析待测样品，通过优化流动相和质谱采集参数，去除干扰质谱峰，使用LabSolutions软件自带的“质谱多电荷分析”功能准确测定siRNA分子量。结果显示，siRNA正义链质谱图中含8种多电荷离子，电荷数量分布为4~11，多电荷分析测定分子量为6631.63 Da，与理论值的偏差为0.34 Da。siRNA反义链质谱图中含7种多电荷离子，电荷数量为4~10，多电荷分析测定分子量为6637.64 Da，与理论值的偏差为0.39 Da，质量准确度高。LCMS-2050具有质量范围宽的特点，结合LabSolutions软件自带的“质谱多电荷分析”功能，可以用于测定siRNA分子量。

摘 要: 目的 建立复合固相萃取净化-液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中的 5 种核苷酸含量的分析方法。方法 样品用纯水涡旋提取, 10%乙酸水溶液调 pH 到 4.1, 离心将上清液全部转移到 25 mL 容量瓶中, 用纯水定容, 混匀。提取液用复合固相萃取小柱(弱阴离子交换和强阳离子交换固相萃取小柱)净化, 以磷酸盐缓冲液和甲醇为流动相, 等度洗脱, Spursil C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱分离, 液相色谱-紫外检测器进行测定, 外标法定量。结果 5 种核苷酸在一定范围内(0.1~10 mg/L、0.2~20 mg/L)线性关系良好, 相关系数均大于 0.999, 定量限为 1.0、2.0 mg/kg, 检出限为 0.3、0.6 mg/kg。3 水平加标浓度(1.0、5.0、10.0 mg/kg, 2.0、10.0、 20.0 mg/kg)的回收率在 91.0%~103%之间, 精密度在 8%以内。结论 该方法具有操作简单、灵敏度高、重现性好等特点, 为奶粉中核苷酸含量测定提供一个简单准确的方法。

FJA-2型微机控制自动滴定系统测定食品添加剂磷酸氢二钠　　　　　　　　　方建安 张振兴（南京传滴仪器设备有限公司、徐州天嘉食用化工有限公司）徐州天嘉食用化工有限公司携带样品与有关分析试剂前来我公司，利用FJA-2型微机控制自动滴定系统对磷酸氢二钠含量的测定，对多个样品的测试结果表明，电位滴定法测定磷酸氢二钠含量，具有较高的灵敏度与好的测定精度，滴定图谱清晰。现将测试结果报告如下，供能考。（一）磷酸氢二钠测定方法与结果用天平称取样品溶液零点几克，精确到0.001g（视样品含量不同而不同）于100ml烧杯中，加c1mol/L盐酸10ml，加50 ml蒸馏水，待样品溶解后，以PH复合电极为指示电极，用NaOH［C(NaOH)＝0.9795mol/L］为滴定剂，在FJA-2微机控制自动滴定系统上进行自动滴定，叁个样品测量结果如下表。滴定曲线如图所示。测量次数样品号样重（克）滴定剂体积终点1 (ml)滴定剂体积终点2(ml)磷酸氢二钠含量（%）NaN20.5166.2659.89497.82NaN20.5266.0479.75097.92NaN20.6525.4059.98797.75计算磷酸氢二钠%=[CX(V2-V1)X0.1420X100]/m式中：C——NaOH滴定剂的摩尔浓度；V——滴定剂NaOH的耗用量（ml）；m——试样重量；0.1420——为磷酸氢二钠的毫摩尔质量。 （二）讨论1、上述是连续3次测定结果，可以看出，几次测定结果的最大值减最小值的绝对差值都在于0.2% 以内。最后一个图谱为体积对pH滴定曲线。2、为了保证测定的精度要注意下面几个重要环节：（1）、正确配置NaOH溶液也是控制滴定的精度的一个重要因素。要点是要用饱和NaOH溶液来配制滴定剂，不要固体称重来配制；要用新的去离子水（电导值小于5µ S）来配制滴定剂；滴定剂瓶上要装吸收二氧化碳的过滤器等。（2）、pH复合电极要靠滴定池边，磁力搅拌要平稳，不要太剧烈，以防样液的损失。参考文献【1】斯维拉。G著，高立译。自动电位滴定。北京。原子能出版社。1985【2】方建安，夏 权编著。电化学分析仪器。南京，东南大学出版社，1992【3】方建安，影响电位滴定精度的几个问题，分析仪器，（4），1993【4】方建安，方 晖等，一种微机控制的自动光度滴定系统，分析化学，（10）24，1233，1996