人急性单核细胞白血病单核

基本原理本分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材•外周血单个核细胞（参见实验1）•PBS1×和PBS10×（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA•胎牛血清（56℃，30分钟加热灭活）•HCl 1mol/l•Percoll分层液（密度=1.130g/ml,商品）•4g/l台盼蓝染液（溶解在PBS液中）•50ml聚丙烯圆锥管•毛细吸管•移液管（1、2、10ml）•CO2孵箱•超净台•有旋转桶转子装置的离心机•PH计操作步骤所有的操作应该在无菌条件下进行一．不同密度Percoll分层液的配制1. Percoll分层液储备液的制备：取未稀释的Percoll原液（从瓶中取）9ml+1ml PBS 10×（无Ca2+、Mg2+），用HCl 1PH至7.42. Percoll分层液（Ⅰ）（密度=1.080g/ml）的配制：取Percoll储备液3.12 ml（前一步配制）+1.88 ml PBS1×（无Ca2+、 Mg2+）3. Percoll分层液 （Ⅱ）（密度=1.069g/ml）的配制：取Percoll分层液（Ⅰ）2.68 ml+2.32ml PBS 1×（无Ca2+、Mg2+）4. Percoll分层液（Ⅲ）（密度=1.060g/ml）的配制：取Percoll分层液（Ⅱ）2.32 ml +2.68 ml PBS 1×（无Ca2+、Mg2+）二．不连续密度梯度制备1. 将洗涤过的8×107外周血单个核细胞重新悬浮在2ml的Percoll分层液（Ⅰ）（密度=1.080g/ml）在这层液体的表面上轻轻铺上2ml Percoll分层液（Ⅱ）（密度=1.069g/ml），后再于第二层液面上轻轻铺上2ml的Percoll分层液（Ⅲ）（密度=1.060g/ml）2. 20℃，在旋转转子中1000×g离心上步所形成的密度梯度90分钟（慢慢增加速度，无制动停转）。三．单核细胞的分离1. 离心后单核细胞存在于Percoll分层液（Ⅱ）和（Ⅲ）（密度较小的部分）之间的界面中。 （图1）图略(暂时)图1. Percoll非连续性密度梯度离心分离法2. 用毛细吸管仔细收集单核细胞。3. 用含1-5%胎牛血清的PBS 1×液洗涤细胞3次，4℃，400×g离心5分钟，弃上清液。4. 若需要进一步实验，将细胞重新悬浮于培养基中。5. 用台盼蓝拒染法测定细胞存活率。（参见第一章第一篇第一节）结果本法回收的细胞中单核细胞占70-100%（存活率应大于90%），淋巴细胞占0-20%，粒细胞占0-5%，红细胞占0-7%，血小板小于0.5%。实验要点1. 为了得到较好的结果，外周血单个核细胞分离后应立即使用。2. 所有操作过程应在18-20℃中进行。3. 仔细覆盖各种Percoll分层液，避免破坏其界面。4. 洗涤分离细胞3次，以除去残存的Percoll分层液和血小板。5. 如果所制备的细胞仍不纯，可使用包被有抗CD2、抗CD3、抗CD19抗体分子的磁珠， 以除去残存的NK、T、B淋巴细胞。

单核细胞增生李斯特菌的 生化血清型有哪些？

SNT 2521-2010 单核细胞增生李斯特式菌血清分型方法

食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染情况 了解食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染情况，预防李斯特菌病的发生和流行。方法样品的分离和菌株鉴定均按GB4789.30—2010《单核细胞增生李斯特氏菌检验》进行。 食品受到单核细胞增生李斯特氏菌污染较严重。

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PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

[color=#444444]氯霉素、铅、单核细胞增生李斯特氏菌检测标准（方法）的[/color][color=#444444]编号是什么？[/color]

异曲同工之妙——单核细胞增生李斯特氏菌血清型的多重PCR鉴定摘要：本研究采用多重PCR方法，鉴定来自病发地区部分羊场的发病绵羊、健康绵羊、羊舍环境和乌鸦粪分离的李斯特氏菌的血清型。总结：本试验采用多重PCR方法鉴定血清型方法成立，且准确性高。多重PCR血清分型方法简易，材料易获取，且价格低廉，灵敏度高和特异性好，速度快同时结果直观，使得LM血清型分型方法与常规PCR更好的结合，且有效提高了LM血清型分型方法的准确性和可行性。

美国食品药品监督管理局（FDA）近日批准了Gazyva（obinutuzumab）与苯丁酸氮芥联用治疗初治型慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者。CLL是一种缓慢加重的渐进性血液与骨髓系统疾病。根据美国国家癌症研究所估计，今年将有15680名美国人被确诊患有该疾病，4580人因CLL死亡。Gazyva有助于免疫系统的某些细胞攻击癌细胞，并且需要与另一种CLL治疗药物——苯丁酸氮芥合用。在对重症CLL患者的治疗过程中，Gazyva在安全性和有效性方面表现出显著改善，此外，FDA还授予此药优先审查和孤儿药地位。FDA药物评价研究中心血液/肿瘤部门主管，Richard Pazdur博士说：“FDA对Gazyva的批准意味着对CLL患者疗法的重要补充，同时也反映了突破性疗法认定的优势，此项认定使我们与企业共同合作，加快重要新药物的开发、评估和上市。”此次批准是基于一项涉及356名受试者的随机、开放性、多中心临床研究，评估了Gazyva-苯丁酸氮芥联用组和苯丁酸氮芥单用组的药效。结果表明，联用组患者的无进展生存期得到显著提高（23个月vs11.1个月）。联用组患者的最常见不良反应包括输液反应、白细胞减少（中性粒细胞减少症）、血小板水平降低（血小板减少症）、红细胞数目降低（贫血）、肌肉和骨骼疼痛、发热等。Gazyva的说明书中含有黑框警告，提示Gazyva与乙肝病毒的再活化及一种罕见病有关，该罕见病（进行性多灶性白质脑病）能损伤大脑白质中覆盖和保护神经的物质，这是此类药物（包括其它单克隆抗体）共有的已知风险。Gazyva由罗氏子公司基因泰克上市销售。转自：http://www.hfoom.com/industry/20131106/376.html

流式细胞仪在白血病诊断的应用 。正文在附件里。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=2421]相关附件[/url]

SN_T 0184.1-2005 进出口食品中单核细胞增生李斯特菌氏检测方法[URL=http://blog.xunlei.com/web/category.html?uin=arlen888&category_id=1475]http://blog.xunlei.com/web/category.html?uin=arlen888&category_id=1475[/URL]

新华社悉尼１２月１１日电（记者赵小娜）澳大利亚研究者日前表示，他们对一种白血病新药的试验显示出较好的初步效果，有２０％的患者血液中已检测不到癌细胞，这种新药有可能为白血病患者带来治愈希望。 据当地媒体报道，慢性淋巴细胞性白血病是澳大利亚最常见的白血病类型，对这种病一直缺乏有效的治疗方法。澳大利亚“沃尔特与伊丽莎?霍尔医学研究所”经数年研究开发出了这种代号为ＡＢＴ－１９９的新药，目前正在墨尔本两家医院对数十名患者进行临床试验。 研究人员康宁·塔姆博士说，经过一年半的试验，有２０％的患者血液中已检测不到癌细胞。他说，之前很多患者对化疗和其他治疗方法没有任何积极反应，只能任病情恶化，而“新药完全改变了这一现状”，患者有望恢复健康重回正常生活。 塔姆博士表示，这种药物上市销售还需几年时间，但对愿意参与试验的患者，研究者现在即可提供这种药物。（完）

根据流行病学的统计，中国白血病的自然发病率为3/10万～4/10万，并成增长趋势。卫生纸是每个家庭必备的生活用品，但是你可能不知道，它居然也会引发白血病。白血病又叫血癌，是一种难以治疗的疾病。劣质卫生纸易引发白血病 有些女孩子平时在穿着打扮上非常注意，舍得花几百几千买新衣服和化妆品，但在选择卫生纸这样的细节化商品时，却不太在意，往往拣廉价便宜的买。殊不知，有些劣质卫生纸虽然颜色亮白，是因为其中添加了荧光增白剂或滑石粉，长期与皮肤接触容易引发白血病。还有的用废纸经过漂白后加工而成，很可能含大肠杆菌、肝炎病毒等。所以对小小的卫生用品千万不能掉以轻心，一定要选购正规品牌的产品，不要因追求一时的廉价而伤害了自己的一生健康。从生活点滴中学会预防白血病 近年来，有关白血病的报道频现报端，引起了广大读者的关注。由于白血病病情发展变化快、治疗难度大、死亡率高，以至于让人感到“谈白色变”。专家级介绍，人类白血病的确切病因至今未明，许多因素被认为和白血病的发病有关。病毒被认为是主要的因素。此外尚有遗传因素，放射性因素，化学毒物或药物等要素。 全国目前有400万名白血病患者，每年新增约4万名白血病患者，其中2万多名是儿童，而且以2～9岁的儿童居多，其中城市白血病患儿比例占1/3，导致城市白血病患儿增多的罪魁祸首不排除家庭装修造成的污染。因为装修中常用的黏合剂、涂料、地板砖、夹板等材料会释放出甲醛、铅、苯等有毒物质，对人体的血液系统造成损害，抵抗力较弱的人就容易引发白血病。 因此建议，第一，装修住宅最好选用符合环保要求对人体无害的材料，入住前最好开窗通风一周以上，请室内环境监测部门进行监测，合格后再入住，一旦出现不明原因的出血、低烧、关节痛、头晕等症状就要到医院进行检查。 第二，不要滥用药物。使用氯霉素、细胞毒类抗癌药、免疫抑制剂等药物时要小心谨慎，必须有医生指导，切勿长期使用或滥用。此外，尽量少用或不用染发剂。美国研究人员发现使用染发剂(尤其是大量使用)的女性，患白血病的危险是普通人的3.8倍。经常接触染发剂的理发师、美容师、整容师也有潜在危害。 第三，避免辐射。一项最新研究发现，开灯睡觉的儿童或者自然睡眠模式受人造光线干扰的人，患癌症的可能性比平常人要大。最近，研究人员在伦敦举行的儿童白血病大会上提出，儿童白血病发病率增多与夜晚暴露在灯光下有关系。因此，一上床睡觉，人们就应该把灯关掉，直到第二天早晨醒来。还应注意远离高压线、变电站及正在使用的微波炉等。 第四，注意饮食卫生。因为含有化肥、农药的蔬菜水果等食物，食用后经消化吸收进入血液，容易破坏骨髓的正常造血功能，从而发病。所以，蔬菜、水果食用前要清洗干净，把化肥农药的残留量降至最低限度。 第五，预防疾病就是要多运动，中医讲“正气存内，邪不可干”，意思是说人体正气(即免疫力)充足了，病邪就不容易侵犯人体。而增强正气的最有效的方法就是多运动。

多维流式细胞仪可同时进行多参数测量，在特定空间内对细胞群进行分析。若要实现该多维空间的合理使用，每个特定参数需提供额外信息来识别细胞群，并确保其动态范围能够最大限度地加以利用。本研究就白细胞的光信号散射情况进行了详细说明，从而促进了多维流式细胞分析的开展。细胞制备技术的提升对获得高分辨率光散射信号至关重要，可以实现粒细胞、单核细胞、颗粒状和非颗粒状淋巴球的完全分离。对搜集前向散射光的角度进行了改进，以提升白细胞的区分度。尽管正交光散射信号能够区分颗粒状和非颗粒状淋巴细胞，但仍无法利用线性或对数函数的形式将分辨率和动态范围显示出来。而在正交光散射信号中应用多项式函数，则可将白细胞全部以高分辨率显示出来。关联前向和正交光散射信号可实现高分辨率光散射与非线性显示的结合，使细胞群呈现等距分布状态。使用这种方式，可将外周血中性粒细胞、嗜酸细胞、嗜碱粒细胞、单核细胞、颗粒状和非颗粒状淋巴细胞等都显示出来，占据与正交和前向光散射相关的不同位置。出人意料的是，嗜碱粒细胞是处在了颗粒状淋巴和单核细胞附近而非中性和嗜酸性粒细胞。流式细胞术中的人体白细胞光散射特性主要应用于区分淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。前向光散射信号与细胞的大小和折光率有关，而正交光散射信号则与细胞的粒度有关。一项对正交光散射信号更进一步的分析显示出了淋巴细胞成分的差异，即非颗粒状淋巴细胞的信号比颗粒状的要低。此外，该方法还显示了白血球的正交光散射信号在不同疾病状态下的变化情况。高分辨率光散射要在最佳角度收集散射参数，并对散射光的收集光路进行优化。改进细胞制备方法对最大限度地实现对细胞群的分离至关重要。改变制备流程可能导致细胞群分辨率的提高或降低。通过光散射，可从测量中排除受损细胞和无核细胞的干扰，从而提高细胞群的分辨率。正交光散射信号的动态范围不允许在相同线性尺度上同时观察淋巴细胞群和中性粒细胞。本研究提供了一种新方法，通过对正交光散射信号进行数字信号处理转换，实现了白细胞群在光散射显示中更加均衡的分布。这种转换提升了淋巴细胞分辨率，实现了细胞的可视化，而动态范围的确定对中性粒细胞的观察也十分重要。因此，重新对细胞群在多维空间进行定位可使细胞群在制备过程中实现完美分离。

●数据　　省第一人民医院每年新增诊断的白血病患儿病例达20～30个。我省白血病患儿每年至少超过150名。我国目前至少有400万白血病患者，每年新增约4万名白血病患者，其中50%是儿童。　　●费用　　儿童急性淋巴性白血病分为低危、中危和高危，其中低危、中危的患儿在2～2年半的治疗时间里至少要花费8～10万元，如是高危，要考虑骨髓移植，费用达30～40万元。　　●痛心　　被检查出的白血病患儿，大多因为没钱选择了放弃。然而，放弃的后果只有一个——死亡。　　有钱没钱，回家过年。可是，两岁的小雨和12岁的小杰，一时却回不了家。　　他们患了白血病，春节期间需要留在医院接受治疗。小雨的父亲龙中祥不得不接受这个事实，整日苦思下一步该去哪里筹借那“无底洞”般的医药费。　　小杰的母亲李琼华今年40岁，却陡然间苍老了许多，除了向亲朋借钱给儿子治病，她不知道还能走何种途径来拯救儿子。问题是，亲朋能借的都借了，治疗却刚刚起步。　　面对巨额的治疗费用，越来越多的父母发出了无奈的呐喊：拿什么来拯救你，白血病患儿？　　病例　　一人患病全家皆悲　　如果不是因为患有白血病，12岁的小杰，此刻应该正与小伙伴们享受着愉快的寒假。不幸的是，他住进了省第一人民医院儿科。　　母亲李琼华清楚地记得，去年8月13日，小杰突然出现发热症状，领去县医院检查后，被告知可能患有白血病。由于县城医院条件有限，李琼华领着儿子来到昆明。医生说，小杰至少要花三年时间治疗，否则就只能等死。　　他们本是石林县一个乡村的普通农民家庭，过着平时种地闲暇打工的日子，碰上老天眷顾收成好时，年收入可达一万元。年关将至，其他人忙着回家过年，李琼华却只能留在医院照顾儿子，丈夫依旧在外打工挣医药费。　　无独有偶，小杰病房的隔壁，还住着一个年仅两岁的娃娃小雨，患的是急性淋巴性白血病。父亲龙忠祥是位退伍军人，一向坚强乐观，近期的心情却日益沉重起来。　　妻子和儿子都是东川户口，每月领取低保过日子，他自己打点零工月收入不过2000元。如今，他们不得不面对的现实是：前两个月的治疗费用就达6万多，这以后该怎么办？　　现状　　发病率呈上升趋势　　根据近五年的统计，省第一人民医院每年新增诊断的白血病患儿病例达20～30个。而昆明市儿童医院每年收治白血病及恶性肿瘤患儿可达百余名。目前昆明市儿童医院血液科病房里仍有10多名白血病患儿。照此估算，如果再加上昆医附一院和解放军昆明总医院这两家具备收治白血病患儿资质的医院，我省白血病患儿每年至少超过150名。　　在省第一人民医院儿科副主任医师马燕看来，长达10余年与白血病儿打交道，她明显感觉白血病发病率呈上升趋势。　　据中国发布的流行病学统计，目前至少有400万白血病患者，每年新增约4万名白血病患者，其中50%是儿童。马医生介绍，白血病已成为威胁儿童健康的“主要杀手”。　　探因　　或与环境污染有关　　究竟是什么因素导致儿童白血病患病率增加呢？“确切的病因还是个谜。”马医生告诉记者，迄今为止，国内外科学家并没有发现导致儿童白血病的明显诱因。　　不过，根据多年来的临床经验及相关研究发现，马医生认为环境因素是导致白血病的重要诱因之一。根据医学记载，当年日本长崎广岛两颗原子弹爆炸后，当地白血病患者3到7年间白血病发病率比正常的地区高20倍，一直到20年以后它才逐渐下降，这让科学家将白血病与环境污染挂上了钩。　　马医生举例说，目前正在住院接受化疗的小雨，极有可能就是受了装修油漆的刺激，因为小雨和家人搬到新装修一个月的房子后，就检查出患了白血病。此前，还有一位4岁左右的白血病患儿，其母亲在怀孕期间和生育之后一直留在发廊工作，估计是长期接触发胶所致。　　昆明市儿童医院大内科主任田新是儿童医院从华西医科大引进的医学专家，谈及儿童白血病的病因时，他也表示“目前尚未完全明了”。但根据经验，白血病病因可能与病毒感染、物理和化学、遗传素质等因素有关。　　纠正　　白血病并非“不治之症”　　包括李琼华和龙忠祥在内，在很多人看来，患上白血病俨然就等于宣判了死刑。事实上，时代在发展，医学在进步，如果得到规范治疗，大部分白血病患儿都可以救治。　　马医生告诉记者，长久以来儿童白血病治疗面临着两大阻碍：一是对白血病的认知度不够，认为白血病是“不治之症”；二是白血病的治疗费用过高，一般家庭无法承担。随着医学技术的发展，儿童白血病早已摆脱了70年代以前的“死刑宣判”。以占据白血病总类比例85%的急性淋巴性白血病的治疗情况为例，从仅能存活数月到可获得完全缓解，如今已经逐步提高到五年无病生存率。目前，国际上5年无病生存率已达90%；国内经过30多年的努力，治疗方法也日趋成熟。　　困境　　治疗周期长且费用贵　　在马医生看来，即便可以提高家长对儿童白血病救治的认知度，目前却无力解除另一个阻碍——巨额的治疗费用。　　据儿童医院田医生介绍，儿童急性淋巴性白血病分为低危、中危和高危，其中低危、中危的患儿在2～2年半的治疗时间里至少要花费8～10万元，如是高危，要考虑骨髓移植，费用达30～40万元。　　少则10万多则40万的治疗费用，对于原本拮据的家庭来说，无异于一笔天文数字。据马医生透露，此前虽然每年被检查出的白血病患儿将近二三十个，但大多因为没钱选择了放弃，最终留下了接受规范治疗的不过两三个。　　去年9月份起，昆明市儿童医院等单位成立了“‘绿叶爱心’行动——贫困白血病儿童救助项目”，希望通过多渠道募集资金帮助贫困儿童获得治疗。不料，由于宣传力度不够，4个多月过去了，募集到的资金还不够救助一个孩子。　　期待　　建立白血病救助资金　　田医生告诉记者，针对不少农村家庭无足够费用医治的状况，昆明市儿童医院现已开展白血病儿童经济治疗方案，整个近3年的治疗只需几千元。同时，因为新农合医保政策的建立，近年来前来看病治疗的农村儿童增多，白血病报销比例为30%。　　从2009年10月起，经中国红十字基金会批准，确定云南省第一人民医院为　　“小天使基金”在云南省的定点医院，收治“小天使基金”资助的白血病儿童。不过，由于申请人数较多，“小天使基金”资助金额不超过5万元，马医生忧心忡忡：“真正能受到帮助的，毕竟只是少数”。　　记者从省红十字会和省慈善总会获悉，在中国红十字会“小天使基金”进入云南之前，我省在白血病患儿的救助政策方面一直处于空白状态。马医生坦言，媒体呼吁、社会募捐只能解一时之忧，难以解决治疗白血病这类大病所需的巨额费用，更不可能恩泽所有的患儿。　　田医生指出，目前成都、上海已经通过给儿童购买40元/年的保险建立白血病等大病救助资金，昆明可以借鉴。此外，武汉早在2009年12月就成立了白血病患儿救助基金，由政府注入200万元，市红十字会和市慈善会分别拿出10万元作为启动资金。　　温馨提醒　　两岁的小雨，12岁的小杰，目前分别住院于省第一人民医院住院楼4楼儿科一区2402病房和2403病房。

一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 　　2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合，是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡具有可鉴别的形态学和生物化学特征。在形态上可见凋亡细胞与周围细胞脱离接触，细胞变园，细胞膜向内皱缩、胞浆浓缩、内质网扩张、细胞核固缩破裂呈团块状或新月状分布、内质网和细胞膜进一步融合将细胞分成多个完整包裹的凋亡小体，凋亡小体最后被吞噬细胞吞噬消化。在凋亡过程中细胞内容物并不释放到细胞外，不会影响其它细胞，因而不引起炎症反应。在生物化学上，多数细胞凋亡的过程中，内源性核酸内切酶活化，活性增加。核DNA随机地在核小体的连接部位被酶切断，降解为180-200bp或它的整倍数的各种片断。如果对核DNA进行琼脂糖电泳，可显示以180-200bp为基数的DNA ladder（梯状带纹）的特征。相比之下，坏死是细胞处于剧烈损伤条件下发生的细胞死亡。细胞在坏死早期即丧失质膜完整性，各种细胞器膨胀，进而质膜崩解释放出其中的内容物，引起炎症反应，坏死过程中细胞核DNA虽也降解，但由于存在各种长度不等的DNA片断，不能形成梯状带纹，而呈弥散状。一些温和的损伤刺激及一些抗肿瘤药物可诱导细胞凋亡，通常这些因素在诱导凋亡的同时，也可产生细胞坏死，这取决于损伤的剧烈程度和细胞本身对刺激的敏感程度。三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，急性单核白血病等有良好疗效的抗肿瘤药物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范围内作用2小时，即可诱导HL-60细胞凋亡，并表现出典型的凋亡特征。本实验用1μg/ml HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。细胞膜是一选择性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时，质膜不完整，PI就进入细胞内部，它可嵌入到DNA或RNA中，使坏死细胞着色，凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质，可跨膜进入活细胞，因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱，它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合（主要结合于A-T）碱基区），显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。三、实验用品1、试剂：三尖杉酯碱（HT），300μg/ml，100mmol/L Tris-HCl（pH7.5），5mol/L EDTA缓冲液、碱性裂解液：0.2mol/L NaOH, 1%SDS、醋酸钠：3mol/L KAc（pH4.8）；异丙醇；70%乙醇；溴酚蓝，蔗糖指示剂。TBE电泳缓冲液，1%琼脂糖，溴乙锭。PI母液：500μg/ml；Ho33342母液：2mmol/L。 　　2、仪器设备：荧光显微镜，电泳仪，电泳槽，微量加样器（1ml，100μl）0.5、1.5ml离心管，载玻片，盖玻片。四、实验材料人早幼粒白血病HL-60细胞，用含10%小牛血清的RPMI1640培养基在37℃，5%CO2条件下培养。五、方法步骤 1、三尖杉酯碱诱发HL-60细胞凋亡 　　（1）实验前约24小时，接种两瓶HL-60细胞，标记①、②，每瓶含约6ml培养液，置37℃，5%CO2培养箱培养。 　　（2）实验前约2.5小时，当细胞密度达到70%，①号瓶加入三尖杉酯碱200μl，使终浓度为1μg/ml，②号瓶中加入同等量PBS（pH7.4）作对照。共同放入培养箱中继续培养2.5小时。2、Ho33342和PI双重染色鉴别三种细胞 　　（1）染色：将瓶中的细胞摇匀取200μl于1.5ml的离心管中，加入Ho33342母液2μl，PI 20μl，染色15分钟。 　　（2）滴片：取一载玻片用双面胶围成一小室，从离心管中各取以上染色后的细胞悬液10μl，加入小室内盖上盖玻片，荧光镜下用紫外激发光，高倍镜下观察，区别三种细胞，并注意三者比例。六、注意事项1、诱导培养HL-60细胞时间要准确；　　2、荧光显微镜下观察细胞时，由于荧光易碎灭，观察时要尽量快。

日前，本市闸北区法院一审判决了一起白血病患儿状告家具厂和家具商场案,家具厂被判补偿原告医疗费、护理费、精神损失费等共计人民币8万元,家具商场对补偿款承担连带责任。 这名现年10岁的白血病患儿叫瑛瑛。2000年6月，瑛瑛的家人在本市沪太路上的一家家具商场订购了一套木制儿童家具，总价为人民币2300元。2002年9月，瑛瑛开始入住这套家具所在的房屋。同年年底，瑛瑛身体开始出现咳嗽、发烧等症状，虽经治疗仍未见好转。直至2005年6月，瑛瑛被上海第二医科大学附属上海儿童医学中心确诊为急性白血病。2005年7月，瑛瑛的家人委托有关部门对这套家具中的大橱隔板进行检验，结论为：该样品甲醛释放量为5.3mg/L，属于严重超标。 瑛瑛的家人在起诉时认为：因这套家具甲醛严重超标,致使瑛瑛患上白血病，要求家具厂赔偿瑛瑛已支付的医疗费、护理费、精神损失费等共计人民币16万余元，并对今后治疗费保留诉权。原告还要求家具商场承担连带赔偿责任。 法院在判决中认为：本案中这套家具在出售五年后仍被检验出甲醛释放量严重超标，应认定该家具存在严重的质量缺陷，该质量缺陷显然会对人体健康造成影响和损害。由于技术原因，目前无法对家具的甲醛释放量超标与瑛瑛罹患急性白血病之间的因果关系进行鉴定，但并不能就此排除两者之间不存在因果关系，如由原告来承担本案无法鉴定所导致的诉讼风险，明显有违公平正义之原则，所以作出了上述判决。来源:文汇报

近日，中科院广州生物医药与健康研究院曾令文研究组成功开发出一种基于核酸等温链置换反应技术、T4连接酶反应与胶体金技术的单核苷酸多态性检测的生物传感器。 该生物传感具有以下三个特点：1.简单，无需复杂的检测仪器，仅需室温反应；2.高灵敏度，单次反应可检测约6个核酸分子；3.高特异性，可区分单碱基突变。该生物传感器克服了传统检测方法的操作技术复杂、耗时长、需要特殊仪器等缺陷。 该生物传感器可用于检测/诊断由单核苷酸多态性引起的遗传病、耐药性病原微生物、肿瘤等疾病易感基因。相关成果于7月6日发表在国际著名学术期刊Chemical Communications，2012，48(68): 8547-8549。 该项目由国家重大专项（2008ZX10004-004）、（2009ZX1004-109）经费资助。http://www.cas.cn/ky/kyjz/201208/W020120830533626771243.jpg单核苷酸多态性检测生物传感器

自2004年以来，加拿大首个新的即食食品李斯特菌政策将于2011年4月1日生效。该政策是加拿大政府应对韦瑟里尔报告所采取的又一措施，该报告是对加拿大2008年李斯特菌感染事件的独立调查。2008年，加拿大共发生57起李斯特菌感染，造成23人死亡，死者大部分为老年人。 国际上公认的李斯特菌共有7个菌株：其中单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人、畜的李斯特菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。单核细胞增生李斯特菌广泛存在于自然界中，肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品、蔬菜等都已被证实是李斯特菌的感染源。食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，很多国家都已经采取措施来控制食品中的李斯特菌，并制定了相应的标准。 此次的新政策主要有6处重大修改：制定了与国际标准类似的、新的最终产品符合性标准；针对能否造成李斯特菌生长，对即食食品的定义作了修改或制定，更新了李斯特菌暴发涉及的食品列表；鼓励使用后灭活处理和/或李斯特菌生长抑制剂；规定了从环境到最终产品检测的具体抽样；要求所有即食食品厂实施环境监督；加强对高风险人群的调查。 新政策将适用于在加拿大销售的所有即食食品，包括国内产品和进口产品。因此，检验检疫部门提醒出口食品加工企业：密切关注国外信息，及时调整产品结构，确保出口产品的安全卫生。

新华社温哥华5月26日电（记者马晓澄）加拿大研究人员日前在学术期刊《细胞》上发表研究报告说，他们在实验中发现，抗精神病药物甲硫达嗪可使癌症干细胞“改邪归正”，成为正常细胞，而药物使用不会对其他正常的人体细胞产生副作用。研究人员称，基于这项研究成果，有望研发出新的癌症治疗药物。 癌症干细胞被认为是很多癌症的“罪魁祸首”，传统的癌症疗法如化疗不仅会杀死癌症干细胞，同时也会伤害人体其他正常细胞，从而导致脱发、恶心和贫血等副作用，而且病症还容易复发。 由于癌症干细胞有别于普通干细胞，并不容易分化成稳定且不会分裂的细胞类型。来自加拿大麦克马斯特大学的研究人员利用这种差异性对大量药剂进行筛选，从中找到了近20种可对抗癌症干细胞的药物，其中抗精神病药物甲硫达嗪的实验效果最为理想。 他们在实验中发现，甲硫达嗪虽然不会直接杀灭癌症干细胞，但能促使它们分化成稳定的正常细胞类型，从而消除这种干细胞。研究报告的主要作者巴蒂亚说，甲硫达嗪通过把癌症干细胞转化成正常细胞类型，实现了消除癌症干细胞的目的，这一过程中不会对其他正常细胞产生副作用，这显然更有利于癌症病人的治疗和康复。 巴蒂亚说，他们下一步将在临床试验中检测甲硫达嗪的实际疗效，尤其是对那些经化疗后复发的急性骨髓性白血病病人。

单核增生李斯特菌的单核增生如何理解

上次看到每周质量报告报道的。关于染发剂的。一中年妇女三个月染发一次，染发十几年，导致白血病。是因为染发剂中含有一种化学物质，这是一种什么物质，大家都知道吗？

十三.流式细胞术在血液学中的应用 淋巴瘤免疫分型 目前淋巴瘤的分类方法已从LSG的形态学分类逐渐转变为REAL分类法, REAL分类法是以肿瘤发生源为基础的分类方法,在原来的形态学基础上加上免疫学分型后再加以分类,这种分类方法不仅能够推断肿瘤的发生源,对治疗也有指导意义。因此淋巴瘤的免疫分型越来越重要。如同白血病免疫分型一样，淋巴瘤的免疫分型也是利用单克隆抗体检测淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原,分析其表现型,以了解被测淋巴瘤细胞所属细胞系列及其分化程度。流式细胞仪能对多数的淋巴瘤细胞的细胞膜和细胞浆抗原迅速客观地做出检测，在淋巴瘤的免疫分型中起着不可替代的作用。临床淋巴瘤的免疫分型的检测标本一般是淋巴结、脾脏、胸水、腹水等。在临床淋巴瘤的免疫分型工作中常可遇到以下四种情况：①B细胞系淋巴瘤②T/NK细胞系淋巴瘤③淋巴细胞系以外的造血细胞肿瘤④造血细胞以外的肿瘤。REAL分类淋巴瘤的免疫表型见表12.8。*：弱表达或阴性。BLBL :前B原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; BSLL: B-小淋巴细胞淋巴瘤; LPL:淋巴浆细胞样淋巴瘤; MCL: 斗篷细胞淋巴瘤; FCL:滤泡中心淋巴瘤; MZL: 边缘带B细胞淋巴瘤; SMZL :脾MZL ;HCL:毛细胞白血病; PC:浆细胞瘤;DLBL: B-弥漫性大细胞淋巴瘤; BL: Burkitts淋巴瘤; HBLB:高度B细胞淋巴瘤, Burkitts样; TLB L: 前T原始淋巴细胞淋巴瘤/白血病; TPLL: T幼淋细胞白血病; LGLT:大颗粒淋巴细胞白血病, T细胞型[col

[font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法，近几年通过优化改良在临床肿瘤治疗上取得很好的效果，是一种非常有前景的，能够精准、快速、高效，且有可能治愈癌症的新型肿瘤免疫治疗方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法是如何治疗肿瘤疾病的？治疗的流程是什么样？[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]步骤一：分离[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞[/font][/font][font=宋体][font=宋体]从患者身上分离[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，通过白细胞分离术收集患者的外周血单核细胞，再分离出特定的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞亚群。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]步骤二：[/font] [font=宋体]改造[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞[/font][/font][font=宋体][font=宋体]被改造过的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞如同带有[/font][font=Calibri]GPS[/font][font=宋体]导航的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，能够随时准备找到癌细胞，并发动自杀性袭击，与之同归于尽。[/font][/font][font=宋体]步骤三：扩增[/font][font=宋体][font=宋体]在体外培养，大量扩增[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞，一般一个病人需要几亿个[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞。[/font][/font][font=宋体]步骤四：回输[/font][font=宋体][font=宋体]把扩增好的[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞输回病人体内。[/font][/font][font=宋体]步骤五：监护[/font][font=宋体]再回输治疗后，严密监护患者的身体状况。[/font][font=宋体][b][font=宋体]二、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法有哪些优势？[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、治疗更精准[/font][/font][font=宋体][font=宋体]由于[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞是应用基因修饰病人自体的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，利用抗原抗体结合的机制，能克服肿瘤细胞通过下调[/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]分子表达以及降低抗原递呈等免疫逃逸，让肿瘤细胞无所逃遁；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、多靶向更精准[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围，[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞作用过程不受[/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]的限制；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、杀瘤范围更广[/font][/font][font=宋体][font=宋体]鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]基因构建一旦完成，便可以被广泛利用；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、杀瘤效果更持久[/font][/font][font=宋体][font=宋体]新一代[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]结构中加入了促进[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞增殖与活化的基因序列，能保证[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞进入体内后还可以增殖，[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]三、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法适用于哪些患者？[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]目前在部分白血病和淋巴瘤的治疗中效果非常好，在多发性骨髓瘤治疗中也取得了巨大进展。针对实体肿瘤的治疗，全球有多项针对不同靶点的临床研究正在开展，一些早期研究结果证实了在实体瘤中应用的安全性和初步有效性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]综合性的[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]CAR-T[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]细胞疗法开发解决方案[/b][/url]，从[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]开发、[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞激活、慢病毒包装、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞扩增到[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞质量控制的完整解决方案，全面支持药企进行[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]研究。覆盖开发全流程，详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy[/font][/font]

细胞因子（cytokine）是由免疫细胞及相关细胞产生的一类调节细胞功能的高活性、多功能的多肽分子，不包括免疫球蛋白、补体和一般生理性的细胞产物。细胞因子通常由淋巴细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞等相关细胞产生，按其功能及与免疫学的关系可分为：⑴具有抗病毒活性的细胞因子，如干扰素（interferon，IFN）；⑵具有免疫调节活性的细胞因子，包括白细胞介素（interleukin，IL）类的IL 2、IL 4、IL 5、IL 7、IL 9、IL 10和IL 12，以及β型转化生长因子（transforming growth factor β，TGF β）；⑶具有炎症介导活性的细胞因子，包括以肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）及IL 1、IL 6和IL 8为代表的结构相似的小分子趋化因子；⑷具有造血生长活性的细胞因子，包括IL 3、IL 11、集落刺激因子（colony-stimulating factor，CSF）、促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）、干细胞因子（stem cell factor，SCF）和白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）等。 重组细胞因子是利用基因工程技术生产的细胞因子产品，作为药物用于治疗肿瘤、感染、造血障碍等，可收到良好的疗效。近十多年来，重组细胞因子类药物的研制有较快发展，相关的新药陆续上市。本文重点介绍各类药物的研究进展、不同表达系统的表达水平和基因来源情况，以及各类重组细胞因子的基本特点和适应症。 国内外研究动态和市场现状 目前国内市场上主要的国产重组细胞因子类药物包括乙肝疫苗、IFN、IL 2、G-CSF、重组链激酶（recombinant streptokinase， rSK）、重组表皮生长因子（recombinant endothelial growth factor，rEGF）等15种基因工程药物。组织溶纤原激活剂（tissue plasminogen activator，T-PA）、IL 3、重组人胰岛素、尿激酶等十几种多肽药物正处于临床Ⅱ期试验阶段，单克隆抗体的研制已从实验阶段进入临床阶段。正在开发研究中的项目包括采用新的高效表达系统生产重组凝乳酶等40多种基因工程新药。 在欧美市场上，对现有重组药物进行分子改造而开发的某些第二代基因药物已经上市，如重组新钠素、胞内多肽等。另外，重组细胞因子融合蛋白、人源单克隆抗体、反义核酸，以及基因治疗、新的抗原制备技术、转基因动物生产等，均取得了实质性的进展。国外生物医药的目前发展动向，主要反映在以下几方面。 与血管发生有关的细胞因子 肿瘤血管生长因子（tumor angiogenesis factors，TAF）包括研究较多的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、血小板源生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）等，它们促进肿瘤新生微血管的生长。临床研究表明，阻断VEGF受体2（VEGFR 2）和PDGF受体β（PDGFR β）等，可达到通过抗血管生成来治疗肿瘤的目的。1998年，美国科研人员发现两种用于治疗癌症的血管发生抑制因子（即抗血管生长因子）和内皮抑制素，以及一种抗血管生长蛋白，即血管抑制素（vasculostatin），都有较好的疗效。另外，VEGF、FGF和血管生长素（angiopoietin）等能够通过刺激动脉内壁的内皮细胞生长来促进形成新的血管，从而对冠状动脉疾病和局部缺血产生治疗作用。

【央视调查：90%的白血病患儿，家中曾在半年内做过装修】装修不当导致室内装修污染，很可能诱发人体多种疾病。北京儿童医院的数据显示，90%的白血病患儿家中曾在半年内做过装修，国际卫生组织也表示，每年全世界大概有400余万人死于室内空气污染，而造成室内空气污染的最重要因素就是油性涂料。

[align=left][color=#333333] 日前获悉，国家公布了15个新版食品微生物学检验系列国家标准，并将于2017年6月正式实施。此次更新的15个标准中，对适用范围、试剂和材料、检测流程、附录等均做出了部分删增和修改，力争使食品微生物学的检验方法更加科学、合理、完善。[/color][/align][align=left][color=#333333]　　食品微生物学检验6月起施行新标准[/color][/align][align=left][color=#333333]　　其中有的标准增加了可选方法，如GB4789.30-2016《单核细胞增生李斯特氏菌检验》与2010版相比，增加了“第二法单核细胞增生李斯特氏菌平板计数法”和“第三法单核细胞增生李斯特氏菌MPN计数法”，进一步满足了单核细胞增生李斯特氏菌的计数要求，同时方法的可操作性大大提升，有利于基础条件相对薄弱的实验室同样能够开展检测 [/color][/align][align=left][color=#333333]　　有的标准修改后则更加严谨科学，如GB4789.36—2016《大肠埃希氏菌0157H7NM检验》，与2008版相比，删除了“第二法免疫磁珠捕获法的原理”和“第三法全自动酶联荧光免疫分析仪筛选法”以及“第四法全自动病原菌检测系统筛选法”，这些方法都属于备选方法，经过多年试验证明其结果的准确性仍存在一些不确定因素，同时对实验仪器设备的要求也较高，因此不适宜作为国家标准方法。[/color][/align]

[font=微软雅黑][color=#333333]单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）在自然界分布非常广泛，是一种革兰阳性菌，兼性厌氧，不产芽孢，可以运动。它主要以食物为传染媒介，是最致命的食源性病原体之一。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333][/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333]单核细胞增生李斯特氏菌在环境中无处不在，在绝大多数食品中都能找到单核细胞增生李斯特氏菌。乳制品、肉类、蛋类等都已被证实是单核细胞增生李斯特氏菌的感染源。单核细胞增生李斯特氏菌中毒严重的可引起血液和脑组织感染，很多国家都已经采取措施来控制食品中的单核细胞增生李斯特氏菌，并制定了相应的限量要求。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333][/color][/font][b][font=微软雅黑][color=#333333]单增李斯特属于革兰氏阳性短杆菌，可以在表面形成生物膜，[/color][/font][/b][font=微软雅黑][color=#333333]冰冻温度下存活，具有一定的耐酸性、耐盐性，会引起胃肠炎，严重时会侵袭人的大脑，造成脑膜炎，由于其危害较大，并且还能形成生物膜，食品加工厂一旦感染，很难有效控制，而对于生物膜的降解一般消毒剂也很难去除。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333][/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333]出口食品对于李斯特的要求严格，近期美国和欧盟通报我国出口的金针菇及乳制品被检出李斯特菌超标，实施自动扣留。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333][/color][/font][b][color=#333333]单增李斯特菌高风险污染源食品：熟肉制品及即食生肉制品 ，干酪、再制干酪制品，冷冻饮品，即食鲜切果蔬，即食生物动物性水产制品 其他需要控制的即食食品[font=微软雅黑]（转载自[/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'PingFang SC', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif][color=rgba(0, 0, 0, 0.298039)]食品微生物工程师[/color][/font][font=微软雅黑]）[/font][/color][/b]

最近网络上一直在传小孩只喝饮料容易患白血病，谣言一出立刻引起家长们的恐慌。但是事情的真相果真如此么?专家解释，常喝的饮料中含量最多的是一种叫甜味素的添加剂，下面来为您介绍关于甜味素对人体有何危害。甜味素白色粉末，无臭，有强烈甜味。又名天冬甜素(Aspartame)，俗名甜味素，别名为阿司帕坦、阿斯巴甜、天冬甜精、依括片。是由L-天冬氨酸和L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐缩合合成而得。化学名为天冬酰苯丙氨酸甲酯，其甜度为蔗糖的180倍，甜味与砂糖十分相似，并有清凉感，无苦味或金属味。0.8%的水溶液PH值为4.5—6。长时间加热或高温可致破坏。在水溶液中不稳定，易分解而失去甜味，低温时和PH值3~5较稳定。用时现配或在降冻食品中使用较为理想。甜味素于1965年被发现。由美国Seark公司开发并取得专利，1974年美国食品药品管理局(FDA)批准用作食品添加剂，甜味素以其无毒、低热、高甜、不致肥胖、不引起龋齿，不致心血管疾病等优点而被广为使用。恒远温馨提示：天冬甜素分解的苯丙氨酸不是含苯环的有机化合物，因此不会致癌。小孩常喝饮料不会导致白血病，但是太依赖饮料可能导致儿童食欲下降、营养状况不良、体质下降，使得免疫力下降。饮料中的添加剂是食用性的，在安全范围内对人体没有太大影响。但是超标超量会对人体的肾脏产生影响，造成人体免疫系统紊乱。