仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原

本文以2% HNO3稀释样品，使用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）对仓鼠卵巢细胞（CHO）培养上清液中无机元素含量进行了测试。该方法操作简单，分析速度快，灵敏度高，可以对多元素进行同时测定。利用该方法，考察了CHO在2种不同培养工艺过程中不同时间点细胞培养上清液无机元素含量变化情况，并绘制出时间变化趋势图，对相关研究人员判断细胞状态、改进培养基组成、优化培养工艺具有一定参考意义。

本文中，我们使用岛津细胞培养分析方法包通过LC-MS/MS方法监测mAb生产中的细胞培养工艺，该方法包能够在单个分析批中同时分析125种培养基组分。

人卵巢癌标志物CA125检测试剂盒人卵巢癌标志物CA125检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人卵巢癌标志物CA125含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人卵巢癌标志物CA125水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人卵巢癌标志物CA125抗原、生物素化的人卵巢癌标志物CA125抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人卵巢癌标志物CA125呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

本文参照2020版《中国药典》，采用全多孔色谱柱Alphasil VC-C18，对苍术供试品进行分析，结果显示，苍术中目标峰峰形良好，苍术素目标峰理论塔板数大于5000，符合《中国药典》要求。本方案可为苍术中苍术素的测定提供参考。

在西方国家，顺铂，卡铂和奥沙利铂是使用最广泛的铂类癌症化疗药物。卡铂的有效性是由于其可以与DNA结合从而导致DNA- 铂（Pt）加合物的形成，但这也会造成DNA 的弯曲。因此在化疗后细胞必须修复DNA损伤，否则DNA复制受阻会导致细胞死亡。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对顺铂治疗表现出耐药性，导致了癌症的复发。顺铂耐药性归因于三种主要的分子机制：DNA 修复的加速，胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低或者顺铂转运的加速。细胞内顺铂的摄入与肿瘤负荷相关，也就是说肿瘤对顺铂反应降低会导致细胞内顺铂的含量降低。所以，分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。过多顺铂进入细胞内会增加DNA 损伤和细胞死亡的频率。了解细胞对顺铂的摄入将能为新疗法的开发提供参考，以提高肿瘤对顺铂的敏感性。传统方法的缺陷在于铂的浓度只反映整体细胞群内的浓度而不是个体细胞内的浓度。因此，顺铂摄入在个体细胞之间的分布和差异无法通过传统方法体现。实际上，细胞对顺铂的摄入最有可能根据个体有很大差异，但至今还没有有效的方法来评估。本文介绍了一种全新的技术，可对金属在单一细胞水平上进行定量：单细胞电感耦合等离子体质谱 (SCICP-MS)。SC-ICP-MS 是以单颗粒电感耦合等离子体质谱（SP-ICP-MS）技术为基础，后者能够在溶液中对纳米粒子进行评估与定量。两种技术都基于测量单个细胞（或单个纳米颗粒）在进入等离子体时产生的离散信号的原理。每个细胞中的金属成分离子化，产生离子流，检测器以每秒100000 数据点的速度快速对信号采集测量，从而使得单个细胞中的金属含量能被定量到阿克（ag）/ 每细胞的水平。相比测量细胞内顺铂摄入的传统方法，SC-ICP-MS 所得结果的信息量更加全面。

烟酸属于B 族维生素，又称尼克酸或维生素B5，具有促进细胞新陈代谢，扩张血管的作用，也有缓解末梢血管痉挛的效果。烟酸作为微量营养素对动物脂肪代谢、生产性能、疾病预防、预防奶牛酮血症有积极的作用；肌体缺乏烟酸时会引起新陈代谢障碍。 叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的B 族维生素，通过对一碳基团的传递参与嘌吟、嘧啶的合成以及氨基酸的代谢，从而影响核酸的合成和蛋白质的代谢，对正常血细胞的形成有促进作用，并能促进免疫球蛋白的生成。动物缺乏叶酸会引起贫血、红细胞减少、生长停止等病症。 对于烟酸和叶酸的分析，经典的方法有微生物法和分光光度法，近年来普遍采用高效液相色谱法。本次实验根据GB/T17813.7-1999《复合预混料中烟酸、叶酸的测定 高效液相色谱法》，采用日立高效液相色谱仪Primaide 配紫外检测器对烟酸和叶酸进行检测，重现性良好。

电融合仪BLS在猪卵母细胞孤雌激活中的应用 电融合仪BLS在猪卵母细胞孤雌激活中的应用*刘晓1，2 张庆桥3 潘登科2** 陈扣扣2，4 张卫红2，4冯冲2，4 冯书堂2（1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所, 兰州,730050；2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094；3.河北工程大学，邯郸，056038；4.甘肃农业大学,兰州,730070)摘要:目的 建立并优化BLS细胞融合仪在猪孤雌胚体外生产中的使用条件，同时为克隆胚的生产提供数据参考。方法 以体外成熟的猪卵母细胞为研究对象，研究了不同的电场强度、脉冲时程和脉冲次数对猪卵母细胞电激活效果及其对孤雌胚发育率的影响。结论 电激参数(1.2KV/cm 、100μs、2次脉冲)能够得到较高的卵裂率和囊胚率(70%、30%左右)；BLS细胞融合仪是一种经济高效的胚胎激活仪。关键词: 猪；孤雌激活；BLS融合仪

［摘要］　目的：建立苍术药材中有效成分β-桉叶醇的含量测定方法。方法：气相色谱法，不锈钢柱3　mm×2　m，固定液　15%QF-1，载体Chromosorb WAW(80～100目)，氢火焰离子检测器，气化室温度 210 ℃，柱温174 ℃，载气　50 ml.min－1氮气，空气 49 kPa，氢气 58.8 kPa。结果：平均回收率为100.7%(n＝5)。结论：该法可用于苍术药材的质量控制。

叶酸具有促进骨髓中幼细胞成熟的作用，同时参与不同酶系统中辅酶及嘌呤的合成，对DNA和RNA的合成十分重要。作为一种重要的营养素，在不同生理阶段补给叶酸，能够改善机体的生长性能和免疫机能，对动物机体的许多生理功能产生促进作用。

采用AKF-2010V卡尔费休水分测定仪测定L-5-甲基四氢叶酸钙样品中的含水量，采用直接进样测量，检测快速方便，重复性较好，能有效检测出其中的含水量。

本实验采用微量样品注入的方式对叶酸等样品进行水分含量测试。当水分含量占比较高时，需要降低加样量。如果样品是粉末状的，使用“超微固体取样器”采集使测量变得容易和准确。这里介绍了一个使用超微固体采样器测量氯化硫胺盐酸盐和叶酸的水含量的案例。

本文采用Ultimate 3000液相系统，发展了一种食盐中叶酸检测的方法：一.方法得到的叶酸色谱峰峰型尖锐、对称，保留时间适宜；二.方法线性范围较宽，线性关系良好，可实现叶酸的定量分析；三.方法具有良好的保留时间和峰面积重复性，证明该方法稳定性较好。

紫杉醇(Taxol)是国内外现今继阿霉素及顺铂后最热点的新抗癌药,它主要从红豆杉属(Taxus)植物的茎皮中提取分离获得。紫杉醇对晚期卵巢癌、转移性乳腺癌和非小细胞肺癌等多种癌症有显著疗效。

细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的“D途径”。

针对微生物法、放射免疫法测定过程中出现的操作繁琐、定量模糊、易受同类物质干扰的缺点，天津兰博参考相关文献推出婴幼儿食品中叶酸检测的解决方案，供相关用户参考。

雌激素，雌二醇，是一类有广泛生物活性的类固醇化合物，主要由卵巢、滤泡、黄体及妊娠胎盘生成，它不仅有促进和维持女性生殖器官和第二性征的生理作用，并对内分泌系统、心血管系统、肌体的代谢、骨骼的生长和成熟，皮肤等各方面均有明显的影响，测定雌激素对妇科疾病有一定价值。更年期综合症、动脉硬化、脑血管阻塞、骨质疏松症、早老性痴呆症、怠倦、腰痛、肩酸、性冷淡、月经不调、不孕症，乳房发育不良、皮肤干燥、皱纹、黄褐斑等等都雌激素分泌低下导致内分泌失调有关。雌激素也会对男性生殖系统产生明显影响，包括影响雄激素的水平，引发睾丸组织结构变化，引起睾丸癌，降低精液中的精子数量，造成男性乳房发育，导致内分泌紊乱。雌二醇偏高可能是由于卵巢疾病，心脏病，系统性红斑狼疮，肝硬化，男性肥胖症等原因。雌二醇偏低可能是由于卵巢疾病，垂体性闭经或不孕，甲低或甲亢，柯兴综合征等疾病。雌二醇的检测常规采用免疫学方法，但是免疫学的方法有很高的交叉反应，结果不准确，因此需要灵敏高、选择性好的方法测定雌二醇。沃特世开发了固相萃取(SPE)和LC-MS/MS的方法分析人体血浆中低浓度的雌激素。

人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)抗原、生物素化的人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

本方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，磷酸二氢钠溶液- 甲醇 (90 : 10) 作为流动相对枸橼酸和腺嘌呤同时进行含量测定。经验证，该方法精密度好、回收率较高。相较原来的方法，腺嘌呤保留更强，分离度好，试剂更经济环保，可应用于红细胞保存液中枸橼酸和腺嘌呤的同时含量测定。

针对微生物法、放射免疫法测定过程中出现的操作繁琐、定量模糊、易受同类物质干扰的缺点，天津兰博参考相关文献推出婴幼儿食品中叶酸检测的解决方案，供相关用户参考。

人叶酸(FA)检测试剂盒人叶酸(FA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人叶酸(FA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人叶酸(FA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人叶酸(FA)抗原、生物素化的人叶酸(FA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人叶酸(FA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

睾酮是人体最主要的雄性激素，属类固醇激素，是促进男性内外生殖器发育，维持男性性功能及第二性征的重要激素。不论是男性或女性，它对健康有着重要的影响，包括增强性欲、力量、免疫功能、对抗骨质疏松症等重要生理作用。如果女性睾酮长期处于过高水平，雌激素水平过低，会抑制促卵泡激素水平，引起卵巢卵泡不能发育成熟，不能排卵，而形成囊状卵泡，最后成为多囊卵巢综合征，而导致不孕症。此外，睾酮高还会导致女性体毛增多、变黑，男性化特征明显。测定睾酮水平是判断性激素紊乱疾病的常用临床检验方式。一直以来，人们都采用免疫检测方法来分析睾酮。然而，有研究表明，由于会与结构相似的类固醇激素(即二氢睾酮)发生交叉反应，这些免疫检测方法往往缺乏专属性，而这会极大地影响检测的精密度和准确度，分析血清样品中的低浓度睾酮时尤其如此，GC-MS分析需要衍生步骤或者复杂长时间的样品制备。本研究中，沃特世开发一种检测睾酮的方法，通过LC-MS/MS平台利用色谱分离和选择性MRM来区分结构相似的类固醇，为上述问题提供了解决方案。

小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）水平。用纯化的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE），再与HRP标记的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）的浓度。

设备和试剂--6厘米细菌培养皿--M2培养基+1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --M16培养基+ 1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --BLS胚胎聚集针（DN-10 或DN-09）--ES细胞单细胞悬液--窄口移液管（处理细胞和胚胎）来自Pasteur移液管或其他合适的玻璃毛细管（移液管内径的应? 100μm ）--来自雌性促排卵的八细胞胚胎-- Tyrode’s液，酸性（ sigma） --CO2孵化器

本研究利用 Acchrom S6000 PLUS 高效液相色谱仪，搭配 Aphasil VC-C18（3.0 × 150 mm, 2.5 μ m）色谱柱，利用 PHRED-HR 光化学衍生器对叶酸进行衍生化，在荧光检测器下对叶酸进行分析定量。前处理采用叶酸免疫亲和柱对样品进行提取净化，基线平稳，净化效果好无干扰，特异性保留目标峰，回收率在 75%~120% 之间。本测定方法的重复性，线性，加标回收率均满足标准要求，检出限为 0.5 ng/mL，定量限为0.1µ g/mL。该高效液相色谱法测定食品中叶酸含量具有较高的准确度和精密度，且重复性较好。

叶酸是一种对人体健康非常重要的维生素，特别是对妇女在怀孕前后和怀孕期间的摄入量非常重要。缺乏叶酸会导致神经管畸形等严重的先天性缺陷，因此，对食品中叶酸含量的检测和标准是非常有必要的。本方法利用96微孔板法快速测定食品（奶粉）中叶酸的测定。

样品介绍：小鼠肺组织是实验研究中经常出现的实验组织。通过制备小鼠肺组织的单细胞悬液，可以将肺组织中的细胞分散为单个细胞，并保持其完整的细胞膜和细胞器结构。通过单细胞悬液的制备，研究人员可以对每个单个细胞进行分析，了解其基因表达、蛋白质水平、代谢状态等信息。

叶酸是鼠李糖乳杆菌（lactobacillus rhamnosus）生长所必需的营养素。在一定控制条件下，将鼠李糖乳杆菌菌液接种至含有试样液的培养基中，培养一段时间后测定透光率（或吸光度值）

不需显微操作体细胞核移植的利益和前景远大。当前的成果包括降低装备费用，简化预备工作及实验技术要求低。任何做过胚胎方面试验和口吸管方面工作的人都能很快掌握。尽管用卵母细胞试验的直接工作没有显著减少，但降低了这些工作的技术难度。此外，与早期的技术相比，预备工作如制作工具可以省略。然而，应该注意到产生三倍体需要较多的卵母细胞。无透明带的胚胎可能有利于嵌合体的制作，克隆方法的简化也将有利于核移植的自动化。在卵母细胞成熟期间，用于建立该方法的供体细胞是贴壁的原代培养的颗粒细胞，这些细胞并不是都很适合做供体。随着方法的进一步改进，可能能用不同器官组织的传代细胞和血清饥饿培养的细胞。

本文建立了利用东西分析LC-5510型高效液相色谱仪测定饲料中的烟酸和叶酸含量的方法，该方法操作简单，结果准确，能够满足相关标准的需求。

目的：探讨丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤的预防作用及其机制。方法：取小鼠随机分为假手术组、模型组和丙戊酸镁高、低剂量（0.04、0.02 mgg－1）组，每组10 只，灌胃给予相应药物，每日2 次，连续14 d，末次给药1 h 后对后3 组小鼠建立急性脑缺血再灌注损伤模型，建模成功后检测各组小鼠脑指数和脑组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，并观察大脑皮层和海马CA1 区细胞形态的变化。结果：与模型组比较，丙戊酸镁高、低剂量组小鼠神经元损伤减轻，脑指数和MDA含量明显降低，GSH-Px活性明显升高（P＜0.01 或P＜0.05），且丙戊酸镁高剂量组SOD活性明显升高（P＜0.01）。结论：丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤具有预防作用，其机制可能与抗氧化作用有关。