抗体药

质谱技术是抗体药物分析最重要的技术手段之一。本文简述了抗体药物的发展和质谱技术的原理。对于质谱技术在抗体药物的分析中应用进行了归类整理，主要分为在一级结构和高级结构分析中的应用。抗体类药物是指含有抗体片段的蛋白类药物，所以在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快速的发展，是当前生物药物领域增长最快的一类药物.1.抗体药物发展新趋势在生物药物领域，抗体药物占据着越来越重要的地位，全球销售排名前10位的药物中有6个为抗体药物，抗体药物按来源分类可以分为：鼠源单克隆抗体、人鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。目前，批准的单克隆抗体药物中，人源化单抗和全人源单抗数量已占据大多数。1.1 抗体药物偶联物（ADC）抗体药物偶联物（ADC）由单克隆抗体和小分子化合物两部分组成。通过抗体的靶向作用，ADC 的抗体部分和肿瘤细胞表面抗原特异性识别并结合，通过细胞内吞作用，将抗体和小分子化合物一起带进肿瘤细胞内部，释放出小分子化合物。这样既可以降低小分子药物的毒性，同时具有靶向结合的作用。已经上市的两个ADC 是Kadyla 和Adcetris。1.2 双特异性抗体（BsAb）双特异性抗体（BsAb）是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子（细胞）之间架起桥梁，由于基因工程的发展，目前双特异性抗体已经研发出多种类型，主要类型有三功能双特异性抗体、IgG-scFv、三价双特异性分子、串联单链抗体（串联scFv）、DVD-Ig 等多种形式。2.质谱技术近年来质谱仪性能的显著改进主要基于开发出的两种离子化技术：一种是介质辅助的激光解吸/离子化技术。另一种是电喷雾离子化技术。由于这两种电离技术的出现，使原本只能检测小分子的质谱技术，可以运用于检测生物大分子。在过去质谱技术主要运用于对一级结构和序列的表征，而现在质谱技术越来越多地运用于高级结构的分析，而高级结构对于抗体药物的生物活性至关重要。3.质谱技术在抗体药物一级结构分析中的应用3.1 完整抗体药物精确分子量测定当得到抗体药物时，可以直接通过高分辨率的MALDI-TOF或者ESI-MS进行分子量的检测。通过对于脱糖后分子量的检测，可以对于抗体药物进行初步定性分析，并将可以作为药物常规放行的分析方法。对于脱糖前的抗体药物进行分析，可以得到抗体药物的糖基化类型的信息及糖基化水平的分布，对于快速了解生产工艺与药物质量的关系具有十分重要的意义。3.2 药物抗体偶联比（DAR）对于赖氨酸链接的抗体偶联药物，采用C4色谱柱及联用的质谱对去糖基化样品进行分析，根据偶联不同数目药物分子的质量数增加判断偶联数目。对于质谱测定的结果，不仅可以给出确切的药物抗体偶联比值，更能够给出链接不同个小分子药物的分布情况，及反应过程副产物空链接头的分布情况。3.3 肽图谱分析蛋白被特异酶切后的蛋白酶水解后得到的肽片段质量图谱。由于不同的抗体药物具有不同的氨基酸序列，蛋白质被酶水解后，产生的肽片段也各不相同，肽混合物的质量数具有唯一特征。可以通过LC-ESI-MS进行肽片段的一级质量数的鉴定，也可以通过LC-ESI-MS/MS对于每个肽片段进行进一步确证，提高肽图谱的准确性。3.4 翻译后修饰研究蛋白质的翻译后修饰（PTM）对于抗体药物的生物学功能十分重要。常见的翻译后修饰有：磷酸化、脱酰胺、甲硫氨酸氧化、糖基化修饰、N端焦谷氨酸环化，C端赖氨酸切除等。质谱分析仪检测蛋白和肽片段的分子量偏差，可以实现高灵敏、高通量和高精确地鉴别蛋白质的翻译后修饰的种类。3.5 N端氨基酸序列检测常规N端氨基酸检测用Edman降解法进行检测，但是抗体药物有时候会出现N 端环化的现象，在这种情况下用Edman降解法需要先对抗体进行去封闭处理，而直接使用质谱可以直接测出N端的氨基酸序列，同时可以检测出N端环化的相对比例。4.质谱技术在抗体药物高级结构分析中的应用4.1 氢/氘交换质谱（HDX-MS）常规的质谱只能获得蛋白的一级结构信息。氢/氘交换质谱（HDX-MS）可以进行蛋白质构象，溶液动力学和表位映射进行分析。在能够调查的蛋白质的高阶结构和动态结构技术中，HDX-MS已经证明适合单克隆抗体和单克隆抗体-抗原复合物的构象分析。4.2 离子淌度质谱法（IM-MS）离子淌度是根据蛋白的电荷和形状选择性分离的方法，可以区分相同分子量的蛋白和肽段，可用于检测蛋白的简单高级结构。4.3 高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱（FTICR-MS）高分辨率傅立叶变换离子回旋共振质谱（FTICR-MS）能够检测最高质量数的质谱仪器，并且有着很高的分辨率。FTICR-MS 是目前被公认为是蛋白质组学研究的有力工具，特别是和完整的蛋白质鉴定和上/下调翻译后修饰（PTM）蛋白质的鉴定。

[font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody][b]抗独特型抗体[/b][/url]是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇（[/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体]）组成，每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区，也可存在于轻链可变区，或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体在治疗性抗体药物开发过程中有着非常广泛的应用。由于抗独特型抗体与抗药抗体（[/font][font=Calibri]Anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体]）之间的相似性，抗独特型抗体在免疫原性（[/font][font=Calibri]Immunogenicity[/font][font=宋体]）分析中可作为阳性对照用于抗药物抗体总量的测定。另外，在抗体药的药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）和药效学（[/font][font=Calibri]PD[/font][font=宋体]）分析中，抗独特型抗体可用于检测血液中抗体药物的含量（游离型、结合型和总量）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）描述并表征了药物在人或动物体内的四个不同阶段：吸收、分布、代谢和排泄（也称为[/font][font=Calibri]ADME[/font][font=宋体]）。在药物开发中，[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析提供了药物与身体相互作用以及疗效强度和疗效持续时间的基本信息。在开发生物仿制药时，需要通过比较[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析来评价与原研药在生物活性的潜在差异。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据结合模式和性质的不同，抗独特型抗体可分为三种类型：抗原阻断型、抗原非阻断型和药物靶标复合物型。基于这些特点，可以建立不同形式的[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]检测，以测量血清中的抗体药物含量，包括游离型、结合型或总量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体可用于定量检测动物或人血清中的抗体药物水平，是[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]研究的关键检测试剂。抗体药物定量分析有多种分析方法，其中[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]为最常用的形式。在抗独特型抗体捕获[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中，将抗独特型抗体包被在平板上，再将含有抗体药物的样本加入系统中，然后用特异性结合药物的标记抗独特型抗体定量抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②免疫原性[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗药抗体（[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性评价主要采用抗药抗体（[/font][font=Calibri]anti-drug antibody, ADA[/font][font=宋体]）分析的方法进行，这是治疗性蛋白药物（如单克隆抗体、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]和融合蛋白）开发过程中的关键步骤。在这些情况下，通常采用多层次递进式进行（图[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）。该方法首先采用高灵敏的筛选试验鉴别阳性抗体样本，使用验证性试验尽量减少假阳性结果，然后使用表征试验评估抗体的中和能力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在整个过程中，抗独特型抗体是必要的试剂。检测[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的检测方法有多种，包括[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、放射免疫沉淀法（[/font][font=Calibri]RIPA[/font][font=宋体]）、表面等离子体共振（[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]）和电化学发光检测（[/font][font=Calibri]ECL[/font][font=宋体]）。其中，桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]是最常用方法，可用于检测所有[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]同种型（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）。在典型的桥联[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]中，将抗体药物预包被在平板上，并将标记的抗体药物与患者样本一起孵育，以检测是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]（图[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]）。抗独特型抗体将用作阳性对照或参比标准品，用于样本中[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]的定性分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备[/b][/url][b]套餐[/b][/font][font=宋体][font=宋体]为支持药物开发，义翘神州为客户提供了从抗原制备、抗独特型抗体开发到检测方法建立和试剂盒开发的全方位、一站式的定制抗独特型抗体生产服务。我们拥有丰富的开发经验，包括不同抗体类型如全长[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]F(ab')2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。定制的抗独特型抗体可用于建立药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）[/font][font=Calibri]/ADA[/font][font=宋体]检测方法，以测定样本中的特异性抗体药物或[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]水平。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]服务：[/font][font=宋体]①抗独特型兔多抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容：[/font][font=宋体]? 纯化抗体[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期：[/font][font=Calibri]2-3[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗独特型鼠单抗制备服务[/font][font=宋体]交付内容[/font][font=宋体][font=宋体]? 阳性克隆，[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]管细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 纯化抗体，[/font][font=Calibri]10 mg/[/font][font=宋体]克隆[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]抗体对（可选）[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]CoA[/font][/font][font=宋体][font=宋体]周期：[/font][font=Calibri]4~6[/font][font=宋体]个月[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/anti-idiotype-antibody[/font][/font]

[font=宋体][b]什么是纳米抗体？[/b][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody][b]纳米抗体[/b][/url]（[/font][font=Calibri]nanobody, Nb[/font][font=宋体]）是一种人工设计的抗体分子，又称为单域抗体（[/font][font=Calibri]single-domain antibodies, sdAbs[/font][font=宋体]）、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体或[/font][font=Calibri]camelid[/font][font=宋体]抗体，是发现于羊驼、单峰驼等驼科以及鲨鱼、鳐鱼等软骨鱼中的一种天然缺失轻链的重链抗体（[/font][font=Calibri]heavy-chain antibodies, HCAbs)[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]1993[/font][font=宋体]年，比利时的科学家在骆驼的血清中发现了一种天然轻链缺失的重链抗体，分子量约[/font][font=Calibri]95 kDa[/font][font=宋体]，其中包括两个恒定区（[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]）、一个铰链区和一个重链可变区（[/font][font=Calibri]variable heavy chain domain, VHH[/font][font=宋体]），接着克隆得到只包含一个重链可变区的单域抗体，即[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体。[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体的晶体结构为[/font][font=Calibri]4 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]2.5 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]3 nm[/font][font=宋体]的椭圆形，分子量大小仅普通抗体的[/font][font=Calibri]1/10[/font][font=宋体]，约[/font][font=Calibri]12-14 kDa[/font][font=宋体]，是最小的完整抗原结合片段，因此又被称为纳米抗体。纳米抗体可用于肿瘤等疾病的治疗、疾病的检测、疫苗的研发等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体特性：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]高耐热性和稳定性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]将不同的纳米抗体在[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃放置[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周，结果其抗原结合活性均在[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]以上，表明纳米抗体在室温下保存相当稳定，这使其比常规抗体更易于储藏和运输。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]比较了鼠单抗和纳米抗体在高达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃高温长时间处理的抗原结合活性，发现纳米抗体都保持了较高的活性仍能重新获得抗原结合能力，而所有常规抗体在[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃处理后都丧失了活性，发生了不可逆的聚合。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在恶劣条件，如在高热、离液剂、存在蛋白酶和极度[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值变性的条件下（如胃液和内脏中），正常抗体会失效或分解，而纳米抗体仍具有高度的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]高抗原结合性：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体独特的结构决定了其高抗原结合特性：纳米抗体较长的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]，可形成一稳定的暴露的凸环结构（凸环中具有稳定结构的二硫键），能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]而传统抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段及单链抗体[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的抗原结合表面常形成凹形拓扑结构[/font][font=Calibri], [/font][font=宋体]通常只能识别位于抗原表面的位点，因此纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]单域具有更加广泛的抗原结合力，甚至当靶蛋白紧密包裹隐藏了普通抗体识别的位点时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]纳米抗体也可以对其进行表位识别。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]较强的组织穿透力：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]纳米抗体具有强而快的组织穿透能力，可以进入致密的组织如实体瘤发挥作用；并且多余未结合的纳米抗体能够很快的被清除，这相对于单克隆抗体组织穿透力差，不易被清除的不足，更有利于疾病的诊断。另外，纳米抗体能够有效的穿透血脑屏障，这样的特性为脑部给药提供了新方法，有望成为治疗老年痴呆症的新药。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]高水溶性、高表达性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]正常抗体[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]结构域单独表达时通常形成包涵体，或者暴露的疏水域相互黏附；而纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]由于其[/font][font=Calibri]FR2[/font][font=宋体]中的疏水残基被亲水残基所取代，使得纳米抗体的水溶性增加，聚合性减少；而且即使以包涵体形式表达，也很容易复性，这样可以大大提高作为药物的利用率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]因纳米抗体分子量小、结构简单，由单一的基因编码，所以它很容易在微生物中合成，能在噬菌体、酵母等微生物中大量的表达，而且其相对价格低廉、可进行大规模生产，易于普及和应用。有报道，可通过酵母反应器酿造将纳米抗体的产量提高，每公升可达[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]克的产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体的应用优势[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①用于生物医药研发（基因工程药物研发、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]药物研发）；[/font][/font][font=宋体]②用于临床体外诊断（胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法）；[/font][font=宋体]③用于肿瘤研究、免疫学研究等基础研究；申请具有自主知识产权的发明专利及科研奖项；[/font][font=宋体]④拓展研究思路、发表国际知名学术刊物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术，受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现，义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台，已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外，我们的高通量纳米抗体表达平台，已成功表达和生产了多种纳米抗体形式，包括单价、多价或多特异性[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]，满足客户的各种定制需求。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]抗体是体液免疫应答的主要效应因子，存在与血液和组织中，它们能特异性的结合或识别入侵的病原体，一次构成机体预防系统的重要组成部分。抗体具有相似的结构，由两条相同的重链和和轻链组成的对称结构。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体的生产目前最常用的两种方式是利用哺乳动物细胞生产的重组抗体和免疫动物生产的普通抗体。传统的免疫动物生产的抗体，是获取动物血清纯化得到的，如果用于药用人体往往会产生排异反应。利用重组技术生产抗体不仅能够满足抗体的大规模生产需求，同时，重组抗体药物的发展已成为目前生物制药的主流。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体的发展经历了鼠源单抗（[/font][font=Calibri]McAb[/font][font=宋体]），人鼠嵌合抗体，人源化抗体和全人抗体四个阶段。下面从抗体生产和抗体技术两方面入手，系统的阐述重组抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组抗体技术：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]Fab[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]Fab[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]片段[/b][/url]（[/font][font=Calibri]Fragment of antigen binding[/font][font=宋体]）也叫做抗原结合片段，是抗体结构中可以与抗原结合的区域。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段由一条完整的轻链与重链的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构域（[/font][font=Calibri]Fd[/font][font=宋体]段）组成，分子量约[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]104[/font][font=宋体]。轻链与重链均存在一个恒定区与一个可变区，轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]scFv[/font][/font][font=宋体][font=宋体]单链抗体（[/font][font=Calibri]single-chain variable fragment[/font][font=宋体]， [/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]）是由抗体重链的下载可变区与轻链的可变区在一段肽链的连接下构成的小分子，是具有抗体活性的最小功能结构单位。单链抗体可以由表达系统进行表达，也可以用噬菌体展示技术进行制备。由于其分子质量小，穿透力强，半衰期短，免疫原性低等特点，在疾病临床诊断、治疗、预防等方面具有重要作用和广阔的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③双特异性抗体[/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体（[/font][font=Calibri]bispecific monoclonal antibody, BsAb[/font][font=宋体]）是一种人工制作出来的可以同时结合两种不同抗原的特殊抗体。双特异性抗体在自然状态下不存在，只能通过人工制备。研究双特异性抗体，对于癌症的免疫治疗有着重大的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是指利用基因工程技术将免疫球蛋白（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等）的下载[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与某种具有生物学活性的功能蛋白分子融合而产生的新型蛋白。具有生物学活性的功能蛋白可以是细胞因子、毒素、受体、酶、抗原肽等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白不仅可发挥所融合蛋白的生物学活性，还具有一些抗体的性质，如可引起抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）、补体依赖的细胞毒作用（ [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）与抗体依赖细胞介导的吞噬作用（[/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体]）等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白类药物在血浆内半衰期较短，为了达到治疗效果需要大剂量给药，这样会造成严重的副作用，给患者造成巨大的负担。将功能蛋白与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段融合，可以延长药物在血浆内的半衰期，降低药物的免疫原性，在疾病的诊断与治疗方面有重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体人源化的发展经过三个阶段，从人鼠嵌合[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]人源化抗体和全人抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri](antibody affinity maturation)[/font][font=宋体]下载是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中，再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。机体的这种功能状态是长期进化和对外界环境不断适应的结果，对机体防御和维持自身免疫监控有着十分重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦抗体亲和力测定[/font][font=宋体]抗体与抗原表位或抗原决定簇之间的结合力称为抗体亲和力，下载其本质是一种非共价作用力，包括对氨基酸之间的吸引力，氢键，疏水性作用力等。抗体亲和力体现了一个抗体分子和一个半抗原分子或抗原分子的一个决定簇起反应的能力。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑧[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display][b]噬菌体展示技术[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体展示技术[/font][font=Calibri](phage display technology)[/font][font=宋体]的本质是一种筛选技术。下载将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中，随着噬菌体的传代，外源蛋白会展现在噬菌体表面，形成噬菌体文库。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选，便可快速的得到与该蛋白具有高度亲和力的抗体。筛选出的抗体可以进一步用于生物学功能研究。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务详情。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font]

[align=center]抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展[/align][align=center] [/align][align=center]摘　　要[/align][align=center] [/align]　通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备单克隆抗体药物,已经成为生物制药领域的一个重要方面,特别是对抗肿瘤单克隆抗体药物的研究已获得了重要进展。多年来,许多研究证实了抗肿瘤单克隆抗体药物的作用,为其应用于肿瘤治疗提供了重要依据。这类药物的特异性强，疗效显著。本文主要就近年来抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展进行了综述，并对抗肿瘤单克隆抗体药物的发展前景进行了展望。[align=left] [/align][align=left]关键词：抗肿瘤；单克隆抗体；研究进展[/align][align=center] [/align][align=center] [/align][b]一 引言[/b]抗肿瘤单抗药物因与烷化剂、抗代谢药、抗肿瘤抗生素、铂类配合物、植物药等抗肿瘤药物相比,具有高效价、高特异性、血清交叉反应少等特点与优点,在肿瘤治疗中起着不可替代的作用。单抗药物是当前生物技术药物领域甚为活跃的部分。针对特定的分子靶点(抗原),单抗有高度特异性。针对各种不同的抗原,可以制备为数众多的、各不相同的单抗；因此,作为药物来源,单抗又具有高度多样性。由于其特异性和多样性,研制单抗药物有巨大的潜力。单克隆抗体药物治疗恶性瘤主要机制有两种[sup][/sup]:一是利用单克隆抗体本身来阻断癌细胞生长的信号,单克隆抗体在癌细胞膜外与生长因子竞争结合受体,阻断信号传递过程,从而阻止癌细胞的生长和扩散,诱导细胞凋亡或者间接激活宿主的抗肿瘤免疫反应；二是利用单克隆抗体作为药物载体的靶向治疗,如将有细胞毒性的药物或有放射性的药物靶向性的运送到肿瘤细胞,从而杀伤肿瘤细胞。目前,国际上与肿瘤治疗相关的抗体研究主要集中在将抗体与耦联物作用后直接杀伤肿瘤细胞,利用抗体促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成等方面。此外，研究表明静脉内注射抗肿瘤单抗,在肿瘤部位的浓度较高,显示特异性定位；单抗与药物的偶联物通常仍保留原来单抗的分布特征,在靶肿瘤的浓度较高[sup][/sup]。[align=center]二　　单克隆抗体药物作用靶点[/align]特定受体或特定的基因表达蛋白可能作为单抗药物的靶点。Rituxan是以B细胞的CD20分子作为靶点的人鼠嵌合抗体,对非霍奇金氏B细胞淋巴瘤有疗效,是第一个获美国FDA批准用于治疗恶性肿瘤的单抗。Herceptin是抗HER-2/neu癌基因编码蛋白的单抗,临床研究对乳腺癌有效,与化疗药物联合有更显著的疗效。Mylotarg是由抗CD33单抗与calicheamicin构成的偶联物,已获批准用于治疗急性复发性髓性白血病[sup][/sup]。表皮细胞生长因子受体(EGFr)在人的鳞癌、乳腺癌和脑胶质瘤等均有较高的表达。有报道,抗EGFr单抗与长春碱衍生物的偶联物在裸鼠体内试验,显示良好的抗癌效果。抗EGFr的人鼠嵌合抗体已进入临床研究。血管内皮生长因子(VEGF)在血管生成中有重要作用。据报道,抗VEGF的中和性单抗具有广谱的抗肿瘤作用,对移植于裸鼠的人体癌瘤有显著疗效[sup][/sup]。[b]三 单抗诱发肿瘤细胞凋亡[/b][align=left] 3.1 通过免疫细胞表面抗原的交联作用而诱导恶性肿瘤细胞的凋亡[/align]用于治疗血液系统恶性肿瘤的单克隆抗体药物大多是通过免疫细胞表面抗原的交联作用诱导恶性肿瘤细胞凋亡而起作用的,如目前用的抗-CD20的单克隆抗体——美罗华。其单克隆抗体的作用机制是通过诱导CD20分子在B细胞膜上的脂筏区聚集,再在一系列激酶的作用下使脂筏信号传导区域的CD20分子亲和性增强,从而形成CD20交联形式；交联的CD20分子启动了细胞内凋亡信号的传导通路,使线粒体释放出细胞色素C,激活下游的caspase级联反应,最终导致细胞凋亡[sup][/sup]。3.2 作用于恶性肿瘤细胞膜上的生长因子及其受体而诱导细胞凋亡许多生长因子及其受体通过作用于细胞的存活途径、刺激细胞的有丝分裂、促进细胞的生长增殖来阻止细胞凋亡。与正常细胞中生长因子信号传导的严格调控相比,肿瘤细胞中的失控则导致细胞的恶性增殖,从而使恶性细胞获得“永生”。单克隆抗体通过作用于恶性肿瘤细胞膜上的生长因子及其受体可阻断存活信号传导通路,从而导致其凋亡,同时还能对化疗和放疗有正协同作用。目前主要集中在对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体、表皮生长因子受体(EGFR)等的研究。美国FDA于2006年批准了第一个用于治疗头颈部鳞状细胞癌的单克隆抗体药物——Cetuximab,它为一种IgG1单克隆抗体,主要通过干扰癌细胞表面EGFR的生长,从而减少癌细胞进入正常组织的概率,控制癌细胞的转移,达到抗癌目的[sup][/sup]。最初想到制备针对恶性肿瘤凋亡相关分子的单克隆抗体药物时,虽然从理论上来说无疑是给人们注入了一针兴奋剂,但在实际应用中则并不然,所以在通过单克隆抗体药物诱导恶性肿瘤细胞凋亡的研究和治疗中,还有待进一步开发新的、更经济、更有效地药物。[b]四　 单克隆抗体耦联物[/b]4.1 抗体与化疗药物耦联目前,国内外研究较多的与单克隆抗体耦联的化学药物有平阳霉素、柔红霉素、丝裂霉素、多柔比星(阿霉素)、顺铂以及长春碱类衍生物等。同时还可以通过脂质体靶向制剂作为化疗药靶向治疗肿瘤,利用脂质体制剂将药物导向靶标进行有选择性地杀伤癌细胞和抑制癌细胞的繁殖,以达到提高疗效和高度定向作用。目前已上市的脂质体有复方氟脲嘧多相脂质体、喜树碱多相脂质体、阿霉素脂质体和紫杉醇脂质体等。4.2 抗体导向酶耦联利用抗体与肿瘤细胞表面抗原的特异性结合,将前体药物的专一性活化酶与单抗耦联,导向输入到靶细胞部分,再注入前体药物,使其在酶的作用下转化为活性药物,进而杀伤肿瘤细胞[sup][/sup]。目前这种用作前体药物的抗癌药有苦杏仁苷、氮芥、鬼臼乙叉苷、阿霉素、丝裂霉素等。而作为活化前体药物的导向酶有碱性磷酸酶、青霉素V或G酰胺酶、羧基酶肽、胸腺嘧啶核苷酶、β葡萄苷酶等。临床研究表明，单抗耦联物对于抗药性肿瘤细胞仍显示较强的杀伤活性。对由于长期使用氨甲蝶呤而出现抗药性的成骨肉瘤细胞,单抗氨甲蝶呤耦联物仍显示较强的杀伤作用。对于具有多药抗药性(MDR)的肿瘤细胞,抗P-170糖蛋白单抗构成的免疫毒素可显示选择性杀伤作用[sup][/sup]。这说明,单抗药物有可能用于克服肿瘤细胞抗药性。[b]五　　单克隆抗体靶向药物[/b]单抗靶向药物是利用单抗对肿瘤表面相关抗原或特定的受体特异性识别,从而把药物直接导向肿瘤细胞,提高药物的疗效,降低药物对循环系统及其他部位的毒性。研究表明,单抗靶向药物具有很好的疗效,在免疫偶联物对移植于裸鼠的相应人体肿瘤生长有抑制作用。免疫偶联物与相应的游离物比较,具有更高更好的疗效和较低的细胞毒性[sup][/sup]。单克隆抗体体积小,能更有效地透入肿瘤；分子小、消除快、累积毒性小；所携带的弹头脱离后,可较快被清除 循环中免疫靶向结合物对靶细胞的竞争作用小；半衰期短；穿透性好；能穿过血脑屏障[sup][/sup],因而还可以作为新一代靶向载体。与化学药物、毒素、放射性核素、生物因子、基因、分化诱导剂、光敏剂、酶等物质构成单克隆抗体靶向药物,把杀伤肿瘤细胞的活性物质特异的输送到肿瘤部位,利用单抗对肿瘤表面相关抗原或特定的受体特异性识别,从而把药物直接导向肿瘤细胞,提高药物疗效,降低药物对循环系统及其他部位的毒性。近年来,随着医学、药学和生物工程学及技术的进步,临床对肿瘤的根治和对癌细胞的攻击锁定于表皮生长因子和血管内皮生长因子等靶位,使药物治疗的切入点由细胞水平提升到分子和抗体水平,从而提高了肿瘤综合治疗的效果。[align=center]六　　人源化单克隆抗体[/align]单克隆抗体是近年竞相开发的品种,自1997年第1个单克隆抗体rituximab通过食品与药物管理局(FDA)批准应用于临床以来,目前已经上市的单克隆抗体靶向药物的疗效令人瞩目,在抗肿瘤、类风湿性关节炎和自身免疫系统缺陷治疗领域得到了有力的推广,其以独特的作用优势,在肿瘤的治疗中不但能够选择性杀伤癌细胞,且在体内表现出特异的分布特性,具有高效、低毒的特点,从而在生物技术产品领域中占据了1/3的市场[sup][/sup]。目前用于治疗肿瘤的单克隆抗体药已有多个,包括伊珠单抗奥加米星、帕尼单抗、曲妥珠单抗等。伊珠单抗奥加米星又名CMC-544，是以人源化抗CD22的抗体伊珠单抗与 CalichDMH偶联形成的ADC药物，用来治疗复发性或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B cell-NHL）和急性淋巴细胞白血病（ALL），目前已经进入临床 III期试验[sup][/sup]。帕尼单抗是一种IgG2单克隆抗体完全人源化可以与EGFR高度特异性地结合，进而阻断配体诱导的信号激活，从而抑制肿瘤生长。有临床研究选择既往未治疗过的ⅢB或Ⅳ期非小细胞肺癌患者比较卡铂(AUC=6，每3周)，加紫杉醇(200mg/m21次/3周) 联合或不联合帕尼单抗(2.5 mg/m2，1次/周) 化疗的疗效及其安全性。研究结果显示，单纯化疗组与帕尼单抗联合化疗组之间在PFS(5.3个月对比4.2个月、P=0.55)和总生存( Overall survival，OS)(8.0个月对比8.5个月，P =0.81)上均无显著差异。结果提示帕尼单抗联合一线化疗方案可能对晚期非小细胞肺癌无明显疗效[sup][/sup]。曲妥珠单抗是一种抗Her2的单克隆抗体，他可以和肿瘤细胞的HER2/neu特异性地结合，从而阻断细胞内生长信号的转导，同时曲妥珠单抗还可以诱导体内巨噬细胞以及自然杀伤细胞攻击肿瘤细胞，以达到抑制和杀伤肿瘤细胞的目的。比较用或不用曲妥珠单抗联合一线化疗方案用以治疗ⅡB/Ⅲ期HER2/neu阳性的 NSCLC患者差异的两项大型的随机Ⅱ期临床试验，其结果显示两个试验结论相似，曲妥珠单抗不能提高化疗的疗效,但也不加重化疗的不良反应。试验中HER2/neu值为3+的患者对曲妥珠单抗治疗的反应性较好，提示曲妥珠单抗对这一较少见类型的NSCLC效果要更好[sup][/sup]。在临床治疗中使用鼠派生单抗的主要障碍之一是产生人抗鼠抗体(HAMA)反应,通过基因工程技术制备嵌合抗体的I-IPdVIA反应率较鼠源性单抗低,但完全的人源抗体才是单抗药物的发展目标。噬茵体抗体库技术和转基因小鼠技术是制备完全人源单抗的两种方法[sup][/sup]。因此,只有不断地完善单克隆抗体人源化的技术,才能更好地将完全人源化的单克隆抗体用于肿瘤分子靶向治疗中,从而使医学界迈向更高的台阶。[b]七　　问题与对策[/b]在限制单克隆抗体临床治疗效果的因素有:(l)循环免疫复合物导致的肝肾功能损害。(2)可溶性肿瘤抗原释放造成的体液中的封闭作用。(3)异种蛋白反应。(4)特异性还不够专一,引起了正常细胞的伤害。(5)天然免疫功能低下(如补体介异的细胞毒,网状内皮系统清除和ADCC作用等)。(6)主要的问题还在这种免疫疗法会导致靶细胞(肿瘤细胞)上抗原的转换。为了解决这些问题,今后的研究应着重:(1)制备对肿瘤抗原有高度特异性的单克隆抗体。(2)选择不易诱导抗原转换的单克隆抗体。(3)研究副作用较少,既安全疗效又高的偶联制剂。单抗（Mab）药物存在的一个最关键问题就是人抗鼠抗体反应（HAMA）。由于用于临床研究的Mab药物一般使用鼠源Mab,这不可避免地会引起HAMA反应,所以尽量避免HAMA反应这一副作用才是Mab药物能否真正适合治疗肿瘤性疾病的重点[sup][/sup]。近些年来,Mab药物的研究主要是向减轻宿主对外源抗体的排斥,促进抗体人源化,改变抗体的氨基酸序列而增加或降低该抗体的生物学效应,加抗体的亲和力,制备双特异性抗体,改造抗体重链恒定区以增强抗体功能,以及寻找新的分子靶点(相对特异的肿瘤抗原)等方向发展[sup][/sup]。Mab药物的不断更新,必将为全球的肿瘤患者带来更大的希望。[align=center]八　　总结与展望[/align]目前肿瘤治疗中使用最广泛的仍是化疗以及放射性疗法,其毒副作用较大。随着基因工程技术和DNA重组技术的兴起,利用单克隆抗体治疗肿瘤已经日渐取代副作用较大的传统疗法而成为新的发展趋向。所以,如何研制更多的单克隆抗体以及怎样更好的利用单克隆抗体治疗肿瘤,将成为肿瘤治疗研究中的又一艰巨任务。同时,生物技术以及抗肿瘤化学药物的发展也必将推动单抗药物的发展与进步,单克隆抗体药物将在各种肿瘤的治疗中发挥越来越重要的作用。在未来10年内,单克隆抗体药将成为国内、外生物药品发展的主旋律。此外，利用与肿瘤细胞相关抗原的特异结合力,相应的单克隆抗体可以用于肿瘤早期诊断和预后判定。例如用放射标记抗体能够确定肿瘤存在的位置,扩散的部位和范围,以便确定手术时机和化疗方案。通过测定抗体结合白血病细胞的增减,可以检查白血病的化疗效果[sup][/sup]。利用单克隆抗体检测某些癌的特异性产物,如前列腺癌产生的酸性磷酸酶,绒毛膜上皮癌产生的促性腺激素,结肠癌产生的癌胚抗原及肝癌产生的甲胎蛋白等,有助于癌肿的早期诊断[sup][/sup]。单克隆抗体在肿瘤的治疗中的作用功不可没，但同时也面临着巨大的挑战，例如如何选择优势人群、进一步提高疗效、降低不良反应的发生都是需要进一步解决的。如贝伐单抗的突出不良反应是出血，在NCCN指南中特别指出贝伐单抗仅适用非鳞癌的[sup][/sup]，既往无咯血史的患者，限制了贝伐单抗的临床应用。而其他大部分单克隆抗体均需与其他化疗药物联用，单独应用的疗效仍有限，选择合适的指标以及合适人群应用单克隆抗体仍任重而道远。[b]参考文献[/b] 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[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇（[/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体]）组成，每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区，也可存在于轻链可变区，或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体三种类型：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原非中和型[/font][font=宋体]不具有抗体结合区特异性，治疗性抗体仍可与其目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体可用于检测抗体药物总量。[/font][font=宋体]②抗原中和型[/font][font=宋体]具有抗体结合区特异性，与其目标抗原相互竞争，因此，此类型可用于检测游离型抗体药物。[/font][font=宋体]③药物靶标复合物型[/font][font=宋体][font=宋体]仅特异性地识别抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]靶标复合物，不与未结合的抗体或未结合的目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体仅能检测结合型抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体]①免疫原性分析[/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性分析对于生物药物开发具有重要的意义。几乎所有的生物制药产品（如蛋白、抗体、多肽偶联药物或寡核苷酸等）都会诱导机体内免疫应答，从而导致抗药抗体（[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]）的产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体属于高度特异性[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]。多克隆抗体能较大限度地模拟血样中的真实情况，还具有制备周期较短和成本低的优势。因此，大多数情况下，在分析患者样本中是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]时，抗独特型多克隆抗体通常用作阳性对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体也是药代动力学（[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]）分析的关键工具试剂之一。 在临床前研究和临床研究中，[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析可用于评估抗体药物的用药剂量和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体特异性强，可作为[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析的检测试剂，用于检测人或动物血清中的抗体药物含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url]，同时拥有综合性的抗独特型抗体开发平台，涵盖兔多抗、杂交瘤、噬菌体、流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术，为客户提供更多选择。详情可以关注抗独特型抗体制备服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]目前，用细胞工程制备人单抗在技术上和伦理上都存在一些难题，治疗性抗体的开发就集中在具有治疗前景的鼠源单抗上。但是鼠源单抗对人体具有异源性反应，可诱发人抗鼠抗体效应[/font][font=Calibri](Humananti-mouseantibodies,HAMA[/font][font=宋体]反应[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，使得单抗的治疗效果明显滞后。随着基因重组技术的发展和人们对抗体结构认识的深入，研究者们尝试对鼠源性抗体进行改造，致力于在保留与抗原结合的高亲和力的基础上，减少异源性抗体的免疫原性，推动抗体人源化研发的进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人源化抗体主要指以用基因克隆及[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术对鼠源单克隆抗体改造，重新表达产生的抗体。其大部分氨基酸序列被人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据人源化程度不同，单抗又可分为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=Calibri](60%-70%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR(complementarity-determiningregion)[/font][font=宋体]移植抗体[/font][font=Calibri](90%-95%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体：[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体[/font][font=Calibri](chimericantibody)[/font][font=宋体]：第一代人源化抗体。其是在基因水平上将鼠源单克隆抗体的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区和人抗体的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](variableregion,[/font][font=宋体]可变区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]连接，在合适的宿主细胞内表达可得到人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体。嵌合抗体用于人体所产生的[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应比鼠源单抗明显减弱[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]另外，人源[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](constantregion[/font][font=宋体]，恒定区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可更有效地介导人体一些免疫反应，如[/font][font=Calibri]CDC(complement-dependentcytotoxicity,CDC,[/font][font=宋体]依赖补体的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADCC(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,[/font][font=宋体]抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]嵌合抗体虽然可以部分解决异种蛋白的排斥问题，但由于其还含有鼠源[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区，依然有可能会诱发[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应，干扰抗体疗效，诱发超敏反应，在临床上其应用会受到一定限制。因此人们进一步研究鼠源可变区的改造，研发出了[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的人源化抗体，即第二代人源化抗体也是现在普遍所说的人源化抗体[/font][font=Calibri](humanizedantibody)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体是研究者们在嵌合抗体的基础上进一步用人源框架区[/font][font=Calibri](Frameworkregion,FR)[/font][font=宋体]替代鼠源框架区[/font][font=Calibri](FR)[/font][font=宋体]，仅保留了[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个鼠源性[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]，其他全部为人源结构，人源性可达[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]以上。但对于特定的抗原分子，[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]并不能随意替换。多方面研究均证实，具有支持作用的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]不仅为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的构象提供了环境，有时还参与抗体结合。因此简单的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植往往明显降低抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体结合的亲和力，甚至是丧失抗原抗体结合的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]针对这种状况，目前主要有四种策略：[/font][font=宋体][font=宋体]①同源替换，使用与鼠源对应部分具有较大同源性的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]进行替换[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②表面重塑，对鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]表面氨基酸残基进行重塑，以使其类似于人抗体[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的轮廓或者[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]型式[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]③补偿变化，改编关键位置氨基酸残基，以补偿完全的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]④定位保守，人源化单抗以[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]保守序列为模板进行人源化，但保留鼠源单抗可变区的关键氨基酸残基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、全人源抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]为了彻底消除异源性抗体的不良影响，[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代以后，人们将噬菌体展示技术应用到抗体的表达和克隆上，产生了噬菌体抗体库技术。由此，抗体工程技术进入到了一个新的发展阶段，全人源化抗体的生产和应用也逐渐走向成熟。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术，将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中，使动物表达人类抗体，达到抗体全人源化的目的。目前已建立多种方法生产完全人源性抗体，主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和[/font][font=Calibri]RNA-[/font][font=宋体]多肽技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]人源化抗体的应用[/b][/font][font=宋体]目前，人源化抗体在肿瘤，器官移植排斥反应，病毒感染，血液性疾病，自身免疫性疾病等方面的治疗和临床诊断中显示出越来越大的应用前景。[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在肿瘤治疗中的应用[/font][/font][font=宋体]近年来，兴起的分子靶向治疗，是根本意义上的肿瘤特异性治疗手段，是以肿瘤抗原特异性结合的单抗为载体，连接放射性核素，化疗药物等对肿瘤有杀伤作用的负载而成的抗体导向疗法。其靶向性好，毒性小等特点，非常适合肿瘤的内放射治疗。采用该技术用于临床的人源性抗体有治疗转移性乳腺癌的赫赛汀，用于治疗结直肠癌的西妥昔单抗等。[/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、自身免疫性疾病治疗[/font][/font][font=宋体]自身免疫疾病多于自身抗体异常增多有关。很多临床研究发现，一些具有免疫疾病的病毒感染患者，体内病毒水平常伴随某些免疫分子水平的升高而升高，因此很多免疫分子的人源化抗体在此类病毒的治疗中显示出很好的效果。[/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒感染中的应用[/font][/font][font=宋体]病毒感染几乎无特效药，现有的核苷酸类抗病毒药物效果并不理想，且毒副作用大，单抗治疗因其针对性强，和相对比较安全，已越来越多研究者将其应用于抗病毒的治疗中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]

[font=宋体]在生物医药领域，抗体作为一类重要的生物分子，被广泛应用于疾病诊断、治疗以及基础研究中。其中，单克隆抗体和单链抗体是两种常见的抗体类型，尽管它们都是从杂交瘤或基因工程方法中获得，但在结构、功能和制备方法等方面存在显著差异。本文将对单克隆抗体和单链抗体的区别进行深入解析。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、结构差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-development][b]单克隆抗体[/b][/url]是由一个单一的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生，具有高度的均一性和特异性。其结构包括重链和轻链，通过二硫键连接在一起，形成一个完整的抗体分子。而单链抗体则是由一段柔性连接肽把抗体重链可变区（[/font][font=Calibri]V~H[/font][font=宋体]）和轻链可变区（[/font][font=Calibri]V~L[/font][font=宋体]）连接而成，是具有亲代抗体全部抗原结合位点的最小功能结构单位。单链抗体的结构相对简单，没有重链和轻链的连接，分子量也较小。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、功能差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体具有高度的特异性，可以用于疾病的诊断和治疗。由于其结构均一，单克隆抗体的生产和质量控制相对容易，因此在临床应用中具有较高的可靠性。而单链抗体则具有特异的抗原结合活性，能够较好地保持亲本抗体的抗原亲和活性，同时分子量小、结构简单，更适于抗体结构与功能的分析。此外，单链抗体还具有较好的组织穿透能力和低免疫原性等优点，使其在药物研发以及导向治疗等方面具有广泛的应用前景。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]三、制备方法差异[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体的制备通常采用[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]，将能够产生特异性抗体的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，再通过筛选和克隆化培养获得能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。这种方法需要经过多次筛选和克隆化培养，制备过程相对复杂。而单链抗体的制备则多采用基因工程方法，通过设计和构建基因表达载体，在体外表达单链抗体基因，然后进行分离和纯化得到单链抗体。这种方法相对简单快捷，但需要设计和构建基因表达载体，对技术要求较高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，单克隆抗体和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体[/b][/url]在结构、功能和制备方法等方面存在显著差异。在实际应用中，应根据具体需求选择合适的抗体类型。单克隆抗体具有高度的特异性和可靠性，适用于疾病的诊断和治疗；而单链抗体则具有特异的抗原结合活性、分子量小、结构简单等特点，适用于抗体结构与功能的分析、药物研发以及导向治疗等领域。随着生物技术的不断发展，相信单克隆抗体和单链抗体的应用前景将更加广阔。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体制备服务[/b][/url]和[url=https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service][b]抗体片段生产服务[/b][/url]，同时拥有一整套的抗体开发解决方案，包括免疫原制备、动物免疫、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体库构建和筛选等步骤。此外，我们在[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体表达纯化方面具有丰富的经验，已成功为客户表达[/font][font=Calibri]di-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]tri-scFvs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv-(H)IgG[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]scFv-(L)IgG[/font][font=宋体]等多种[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]形式。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[align=center]抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展[/align][align=center] [/align][align=center]摘　　要[/align][align=center] [/align]　通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备单克隆抗体药物,已经成为生物制药领域的一个重要方面,特别是对抗肿瘤单克隆抗体药物的研究已获得了重要进展。多年来,许多研究证实了抗肿瘤单克隆抗体药物的作用,为其应用于肿瘤治疗提供了重要依据。这类药物的特异性强，疗效显著。本文主要就近年来抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展进行了综述，并对抗肿瘤单克隆抗体药物的发展前景进行了展望。[align=left] [/align][align=left]关键词：抗肿瘤；单克隆抗体；研究进展[/align][align=center] [/align][align=center] [/align][b]一 引言[/b]抗肿瘤单抗药物因与烷化剂、抗代谢药、抗肿瘤抗生素、铂类配合物、植物药等抗肿瘤药物相比,具有高效价、高特异性、血清交叉反应少等特点与优点,在肿瘤治疗中起着不可替代的作用。单抗药物是当前生物技术药物领域甚为活跃的部分。针对特定的分子靶点(抗原),单抗有高度特异性。针对各种不同的抗原,可以制备为数众多的、各不相同的单抗；因此,作为药物来源,单抗又具有高度多样性。由于其特异性和多样性,研制单抗药物有巨大的潜力。单克隆抗体药物治疗恶性瘤主要机制有两种[sup][/sup]:一是利用单克隆抗体本身来阻断癌细胞生长的信号,单克隆抗体在癌细胞膜外与生长因子竞争结合受体,阻断信号传递过程,从而阻止癌细胞的生长和扩散,诱导细胞凋亡或者间接激活宿主的抗肿瘤免疫反应；二是利用单克隆抗体作为药物载体的靶向治疗,如将有细胞毒性的药物或有放射性的药物靶向性的运送到肿瘤细胞,从而杀伤肿瘤细胞。目前,国际上与肿瘤治疗相关的抗体研究主要集中在将抗体与耦联物作用后直接杀伤肿瘤细胞,利用抗体促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管生成等方面。此外，研究表明静脉内注射抗肿瘤单抗,在肿瘤部位的浓度较高,显示特异性定位；单抗与药物的偶联物通常仍保留原来单抗的分布特征,在靶肿瘤的浓度较高[sup][/sup]。[align=center]二　　单克隆抗体药物作用靶点[/align]特定受体或特定的基因表达蛋白可能作为单抗药物的靶点。Rituxan是以B细胞的CD20分子作为靶点的人鼠嵌合抗体,对非霍奇金氏B细胞淋巴瘤有疗效,是第一个获美国FDA批准用于治疗恶性肿瘤的单抗。Herceptin是抗HER-2/neu癌基因编码蛋白的单抗,临床研究对乳腺癌有效,与化疗药物联合有更显著的疗效。Mylotarg是由抗CD33单抗与calicheamicin构成的偶联物,已获批准用于治疗急性复发性髓性白血病[sup][/sup]。表皮细胞生长因子受体(EGFr)在人的鳞癌、乳腺癌和脑胶质瘤等均有较高的表达。有报道,抗EGFr单抗与长春碱衍生物的偶联物在裸鼠体内试验,显示良好的抗癌效果。抗EGFr的人鼠嵌合抗体已进入临床研究。血管内皮生长因子(VEGF)在血管生成中有重要作用。据报道,抗VEGF的中和性单抗具有广谱的抗肿瘤作用,对移植于裸鼠的人体癌瘤有显著疗效[sup][/sup]。[b]三 单抗诱发肿瘤细胞凋亡[/b][align=left] 3.1 通过免疫细胞表面抗原的交联作用而诱导恶性肿瘤细胞的凋亡[/align]用于治疗血液系统恶性肿瘤的单克隆抗体药物大多是通过免疫细胞表面抗原的交联作用诱导恶性肿瘤细胞凋亡而起作用的,如目前用的抗-CD20的单克隆抗体——美罗华。其单克隆抗体的作用机制是通过诱导CD20分子在B细胞膜上的脂筏区聚集,再在一系列激酶的作用下使脂筏信号传导区域的CD20分子亲和性增强,从而形成CD20交联形式；交联的CD20分子启动了细胞内凋亡信号的传导通路,使线粒体释放出细胞色素C,激活下游的caspase级联反应,最终导致细胞凋亡[sup][/sup]。3.2 作用于恶性肿瘤细胞膜上的生长因子及其受体而诱导细胞凋亡许多生长因子及其受体通过作用于细胞的存活途径、刺激细胞的有丝分裂、促进细胞的生长增殖来阻止细胞凋亡。与正常细胞中生长因子信号传导的严格调控相比,肿瘤细胞中的失控则导致细胞的恶性增殖,从而使恶性细胞获得“永生”。单克隆抗体通过作用于恶性肿瘤细胞膜上的生长因子及其受体可阻断存活信号传导通路,从而导致其凋亡,同时还能对化疗和放疗有正协同作用。目前主要集中在对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体、表皮生长因子受体(EGFR)等的研究。美国FDA于2006年批准了第一个用于治疗头颈部鳞状细胞癌的单克隆抗体药物——Cetuximab,它为一种IgG1单克隆抗体,主要通过干扰癌细胞表面EGFR的生长,从而减少癌细胞进入正常组织的概率,控制癌细胞的转移,达到抗癌目的[sup][/sup]。最初想到制备针对恶性肿瘤凋亡相关分子的单克隆抗体药物时,虽然从理论上来说无疑是给人们注入了一针兴奋剂,但在实际应用中则并不然,所以在通过单克隆抗体药物诱导恶性肿瘤细胞凋亡的研究和治疗中,还有待进一步开发新的、更经济、更有效地药物。[b]四　 单克隆抗体耦联物[/b]4.1 抗体与化疗药物耦联目前,国内外研究较多的与单克隆抗体耦联的化学药物有平阳霉素、柔红霉素、丝裂霉素、多柔比星(阿霉素)、顺铂以及长春碱类衍生物等。同时还可以通过脂质体靶向制剂作为化疗药靶向治疗肿瘤,利用脂质体制剂将药物导向靶标进行有选择性地杀伤癌细胞和抑制癌细胞的繁殖,以达到提高疗效和高度定向作用。目前已上市的脂质体有复方氟脲嘧多相脂质体、喜树碱多相脂质体、阿霉素脂质体和紫杉醇脂质体等。4.2 抗体导向酶耦联利用抗体与肿瘤细胞表面抗原的特异性结合,将前体药物的专一性活化酶与单抗耦联,导向输入到靶细胞部分,再注入前体药物,使其在酶的作用下转化为活性药物,进而杀伤肿瘤细胞[sup][/sup]。目前这种用作前体药物的抗癌药有苦杏仁苷、氮芥、鬼臼乙叉苷、阿霉素、丝裂霉素等。而作为活化前体药物的导向酶有碱性磷酸酶、青霉素V或G酰胺酶、羧基酶肽、胸腺嘧啶核苷酶、β葡萄苷酶等。临床研究表明，单抗耦联物对于抗药性肿瘤细胞仍显示较强的杀伤活性。对由于长期使用氨甲蝶呤而出现抗药性的成骨肉瘤细胞,单抗氨甲蝶呤耦联物仍显示较强的杀伤作用。对于具有多药抗药性(MDR)的肿瘤细胞,抗P-170糖蛋白单抗构成的免疫毒素可显示选择性杀伤作用[sup][/sup]。这说明,单抗药物有可能用于克服肿瘤细胞抗药性。[b]五　　单克隆抗体靶向药物[/b]单抗靶向药物是利用单抗对肿瘤表面相关抗原或特定的受体特异性识别,从而把药物直接导向肿瘤细胞,提高药物的疗效,降低药物对循环系统及其他部位的毒性。研究表明,单抗靶向药物具有很好的疗效,在免疫偶联物对移植于裸鼠的相应人体肿瘤生长有抑制作用。免疫偶联物与相应的游离物比较,具有更高更好的疗效和较低的细胞毒性[sup][/sup]。单克隆抗体体积小,能更有效地透入肿瘤；分子小、消除快、累积毒性小；所携带的弹头脱离后,可较快被清除 循环中免疫靶向结合物对靶细胞的竞争作用小；半衰期短；穿透性好；能穿过血脑屏障[sup][/sup],因而还可以作为新一代靶向载体。与化学药物、毒素、放射性核素、生物因子、基因、分化诱导剂、光敏剂、酶等物质构成单克隆抗体靶向药物,把杀伤肿瘤细胞的活性物质特异的输送到肿瘤部位,利用单抗对肿瘤表面相关抗原或特定的受体特异性识别,从而把药物直接导向肿瘤细胞,提高药物疗效,降低药物对循环系统及其他部位的毒性。近年来,随着医学、药学和生物工程学及技术的进步,临床对肿瘤的根治和对癌细胞的攻击锁定于表皮生长因子和血管内皮生长因子等靶位,使药物治疗的切入点由细胞水平提升到分子和抗体水平,从而提高了肿瘤综合治疗的效果。[align=center]六　　人源化单克隆抗体[/align]单克隆抗体是近年竞相开发的品种,自1997年第1个单克隆抗体rituximab通过食品与药物管理局(FDA)批准应用于临床以来,目前已经上市的单克隆抗体靶向药物的疗效令人瞩目,在抗肿瘤、类风湿性关节炎和自身免疫系统缺陷治疗领域得到了有力的推广,其以独特的作用优势,在肿瘤的治疗中不但能够选择性杀伤癌细胞,且在体内表现出特异的分布特性,具有高效、低毒的特点,从而在生物技术产品领域中占据了1/3的市场[sup][/sup]。目前用于治疗肿瘤的单克隆抗体药已有多个,包括伊珠单抗奥加米星、帕尼单抗、曲妥珠单抗等。伊珠单抗奥加米星又名CMC-544，是以人源化抗CD22的抗体伊珠单抗与 CalichDMH偶联形成的ADC药物，用来治疗复发性或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B cell-NHL）和急性淋巴细胞白血病（ALL），目前已经进入临床 III期试验[sup][/sup]。帕尼单抗是一种IgG2单克隆抗体完全人源化可以与EGFR高度特异性地结合，进而阻断配体诱导的信号激活，从而抑制肿瘤生长。有临床研究选择既往未治疗过的ⅢB或Ⅳ期非小细胞肺癌患者比较卡铂(AUC=6，每3周)，加紫杉醇(200mg/m21次/3周) 联合或不联合帕尼单抗(2.5 mg/m2，1次/周) 化疗的疗效及其安全性。研究结果显示，单纯化疗组与帕尼单抗联合化疗组之间在PFS(5.3个月对比4.2个月、P=0.55)和总生存( Overall survival，OS)(8.0个月对比8.5个月，P =0.81)上均无显著差异。结果提示帕尼单抗联合一线化疗方案可能对晚期非小细胞肺癌无明显疗效[sup][/sup]。曲妥珠单抗是一种抗Her2的单克隆抗体，他可以和肿瘤细胞的HER2/neu特异性地结合，从而阻断细胞内生长信号的转导，同时曲妥珠单抗还可以诱导体内巨噬细胞以及自然杀伤细胞攻击肿瘤细胞，以达到抑制和杀伤肿瘤细胞的目的。比较用或不用曲妥珠单抗联合一线化疗方案用以治疗ⅡB/Ⅲ期HER2/neu阳性的 NSCLC患者差异的两项大型的随机Ⅱ期临床试验，其结果显示两个试验结论相似，曲妥珠单抗不能提高化疗的疗效,但也不加重化疗的不良反应。试验中HER2/neu值为3+的患者对曲妥珠单抗治疗的反应性较好，提示曲妥珠单抗对这一较少见类型的NSCLC效果要更好[sup][/sup]。在临床治疗中使用鼠派生单抗的主要障碍之一是产生人抗鼠抗体(HAMA)反应,通过基因工程技术制备嵌合抗体的I-IPdVIA反应率较鼠源性单抗低,但完全的人源抗体才是单抗药物的发展目标。噬茵体抗体库技术和转基因小鼠技术是制备完全人源单抗的两种方法[sup][/sup]。因此,只有不断地完善单克隆抗体人源化的技术,才能更好地将完全人源化的单克隆抗体用于肿瘤分子靶向治疗中,从而使医学界迈向更高的台阶。[b]七　　问题与对策[/b]在限制单克隆抗体临床治疗效果的因素有:(l)循环免疫复合物导致的肝肾功能损害。(2)可溶性肿瘤抗原释放造成的体液中的封闭作用。(3)异种蛋白反应。(4)特异性还不够专一,引起了正常细胞的伤害。(5)天然免疫功能低下(如补体介异的细胞毒,网状内皮系统清除和ADCC作用等)。(6)主要的问题还在这种免疫疗法会导致靶细胞(肿瘤细胞)上抗原的转换。为了解决这些问题,今后的研究应着重:(1)制备对肿瘤抗原有高度特异性的单克隆抗体。(2)选择不易诱导抗原转换的单克隆抗体。(3)研究副作用较少,既安全疗效又高的偶联制剂。单抗（Mab）药物存在的一个最关键问题就是人抗鼠抗体反应（HAMA）。由于用于临床研究的Mab药物一般使用鼠源Mab,这不可避免地会引起HAMA反应,所以尽量避免HAMA反应这一副作用才是Mab药物能否真正适合治疗肿瘤性疾病的重点[sup][/sup]。近些年来,Mab药物的研究主要是向减轻宿主对外源抗体的排斥,促进抗体人源化,改变抗体的氨基酸序列而增加或降低该抗体的生物学效应,加抗体的亲和力,制备双特异性抗体,改造抗体重链恒定区以增强抗体功能,以及寻找新的分子靶点(相对特异的肿瘤抗原)等方向发展[sup][/sup]。Mab药物的不断更新,必将为全球的肿瘤患者带来更大的希望。[align=center]八　　总结与展望[/align]目前肿瘤治疗中使用最广泛的仍是化疗以及放射性疗法,其毒副作用较大。随着基因工程技术和DNA重组技术的兴起,利用单克隆抗体治疗肿瘤已经日渐取代副作用较大的传统疗法而成为新的发展趋向。所以,如何研制更多的单克隆抗体以及怎样更好的利用单克隆抗体治疗肿瘤,将成为肿瘤治疗研究中的又一艰巨任务。同时,生物技术以及抗肿瘤化学药物的发展也必将推动单抗药物的发展与进步,单克隆抗体药物将在各种肿瘤的治疗中发挥越来越重要的作用。在未来10年内,单克隆抗体药将成为国内、外生物药品发展的主旋律。此外，利用与肿瘤细胞相关抗原的特异结合力,相应的单克隆抗体可以用于肿瘤早期诊断和预后判定。例如用放射标记抗体能够确定肿瘤存在的位置,扩散的部位和范围,以便确定手术时机和化疗方案。通过测定抗体结合白血病细胞的增减,可以检查白血病的化疗效果[sup][/sup]。利用单克隆抗体检测某些癌的特异性产物,如前列腺癌产生的酸性磷酸酶,绒毛膜上皮癌产生的促性腺激素,结肠癌产生的癌胚抗原及肝癌产生的甲胎蛋白等,有助于癌肿的早期诊断[sup][/sup]。单克隆抗体在肿瘤的治疗中的作用功不可没，但同时也面临着巨大的挑战，例如如何选择优势人群、进一步提高疗效、降低不良反应的发生都是需要进一步解决的。如贝伐单抗的突出不良反应是出血，在NCCN指南中特别指出贝伐单抗仅适用非鳞癌的[sup][/sup]，既往无咯血史的患者，限制了贝伐单抗的临床应用。而其他大部分单克隆抗体均需与其他化疗药物联用，单独应用的疗效仍有限，选择合适的指标以及合适人群应用单克隆抗体仍任重而道远。[b]参考文献[/b] Adams GP, Weiner LM．Monoclonalantibody therapy of cancer ．Nat Biotechnol，2005，23（9）：1147~1148 甄永苏．抗肿瘤抗生素和单克隆抗体药物的研究进展．中国抗生素杂志，2002，27（1）：1~5 Sievers E L, Larson R A, Stadtmauer E A, [i]et al[/i]．Effica-cy and safety ofgemtuzumab ozogamicin in patients withCD33-positive acute myeloid leukemia infirst relapse ．Clin Oncol，2001，19（21）：3244~3246 Kamiya K, Konno H, Tanaka T, [i]et al[/i]．Antitumor effect on humangastric cancer and induction of apoptosis by vascular endothelial growth factorneutralizing antibody ．Jpn J Cancer Res，1999，4（21）：794~798 邹学，李俊，尹庆春．单克隆抗体药物诱发肿瘤细胞凋亡的研究进展．总装备部医学学报，2008，10（2）：115~117 Rao AV, Schmader K．Monoclonalantibodies as targeted therapy in hematologic malignancies in older adults ．Am J GeriatrPharmacother，2007，5（3）：247~250 杨海东，罗傲雪，范益军．单克隆抗体在治疗肿瘤中的研究进展．时珍国医国药，2007，18（11）：2685~2686 甄红英，薛玉川，甄永苏．抗肿瘤抗生素C1027抑制血管生成及其抗肿瘤转移作用．中华医学杂志，1997，77（21）：657~660 刘霆．抗肿瘤单克隆抗体靶向药物的研究进展．国外医学生理、病理科学与临床分册，2003，23（3）：254~257 Plw a JL，Britta E，Jayne L，[i]et al[/i]．Targeting rat anti-mouse 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抗体药物质量指标都有哪些？用什么仪器和方法来测呢？

目前我们公司已经开发出兽药残留方面的小分子抗原抗体，但是远远不能满足市场需求，请问各位同行大侠，哪里能买到相关的抗原抗体。

[font=宋体]抗体偶联是一种技术，它将抗体与另一种物质（如药物、毒素、荧光染料等）连接在一起，形成偶联物。这种偶联物可以用于治疗或诊断目的。在抗体偶联过程中，抗体的特异性结合能力被用来识别和结合靶细胞或靶分子，而偶联的物质则可以发挥治疗、标记或杀伤作用。抗体偶联技术在肿瘤治疗、免疫疗法、诊断试剂等领域有广泛应用。例如，在肿瘤免疫治疗中，抗体偶联技术可以用来制备抗体药物，通过结合肿瘤细胞表面的抗原，实现定向药物治疗，提高疗效并降低副作用。总之，抗体偶联技术是一种利用抗体的特异性识别能力与其它物质的特定功能相结合，实现定向治疗或诊断的技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体药物偶联物[/font] [font=Calibri](antibody-drug conjugate[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]ADC)[/font][font=宋体]是一种生物技术药物，它通过将具有生物活性的小分子药物连接到[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体[/b][/url]上，利用单抗的特异性识别能力，将小分子药物精确地导向到目标细胞中。这样既提高了药物的疗效，又降低了对其他细胞的损伤。[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]在癌症治疗等领域有广泛应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体偶联物研究前景如何？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]一、肿瘤治疗领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体偶联物在肿瘤治疗领域具有巨大的潜力。利用抗体偶联物将药物定向输送至肿瘤细胞，可以实现对肿瘤的精准打击，提高疗效并降低副作用。随着免疫疗法的兴起，抗体偶联物在免疫治疗中也发挥着越来越重要的作用。例如，免疫检查点抑制剂、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法等免疫治疗方法中，抗体偶联物成为了重要的组成部分。未来，随着抗癌药物研发的不断推进，抗体偶联物在肿瘤治疗领域中的应用将更加广泛。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、诊断领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体偶联物在诊断领域也有广泛的应用前景。通过将抗体偶联物与荧光染料、放射性同位素等标记物结合，可以对疾病进行灵敏、特异的诊断。例如，在免疫组织化学、[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光染色[/b][/url]等病理学诊断中，抗体偶联物被广泛应用于标记抗原，提高检测的敏感性和特异性。此外，抗体偶联物还可以用于制备免疫检测试剂盒，用于临床检验和科研实验。未来，随着诊断技术的发展和个性化医疗的需求，抗体偶联物在诊断领域的应用将更加多样化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、细胞疗法和基因治疗领域[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着基因工程和细胞疗法的不断发展，抗体偶联物在细胞治疗和基因治疗等领域也展现出巨大的潜力。例如，将抗体偶联物与细胞因子、生长因子等结合，可以实现对细胞生长、分化的调控，为细胞疗法和再生医学提供新的手段。此外，抗体偶联物还可以用于基因治疗的靶向输送，提高基因治疗的效率和安全性。未来，抗体偶联物在细胞疗法和基因治疗领域中的应用将不断拓展，为疾病的治疗提供更多的可能性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、技术进步和应用拓展[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体偶联物的应用前景还与其技术进步密切相关。随着抗体工程、连接子技术和药物递送技术的不断发展，抗体偶联物的稳定性、活性和靶向性将得到进一步提高。此外，随着生物技术的不断创新，抗体偶联物的研究也将不断拓展新的应用领域。例如，利用抗体偶联物进行体内成像、药物研发和疫苗开发等领域都可能取得重要进展。总之，抗体偶联物的研究前景非常广阔，随着技术的不断进步和应用领域的拓展，相信抗体偶联物将会在未来的生物医学领域中发挥更加重要的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview][b]重组抗体[/b][/url]详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体，是免疫电镜样品制备的一种方法，用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的定位分析，在某些情况下，也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力，因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原，并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]荧光素标记[/b][/font][font=宋体]荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光，从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]酶标记[/b][/font][font=宋体]酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高，但较难应用于定量分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]生物素标记[/b][/font][font=宋体]生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]产品，拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白，覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势，适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发，义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

抗体是一种结构复杂的生物大分子，由多个氨基酸组成。即便是天然的抗体，其结构也是各不相同。抗体药物中使用到的单克隆抗体（IgG）在生产工艺（细胞培养、分离纯化）与保存过程中易发生不均一性的变化，包括抗体蛋白的二聚体、多聚体、脱酰胺化、末端氨基酸突变以及糖链部分的结构差异。这些不均一性会使药物的药效、安全性方面受到影响。 而随着生产工艺及分析手段的进步，单克隆抗体类药物的质量控制将更加严格。高效液相色谱（HPLC）作为一种分离技术，在蛋白质、抗体等生物大分子的分离分析方面已得到越来越广泛的应用。 高效液相色谱法（HPLC）可对抗体药物以及重组蛋白药物中的不均一性进行有效地分析。比如，尺寸排阻色谱法（SEC）利用了分子空间结构的不同，可对抗体多聚体、片段、PEG化蛋白等样品进行有效分析。离子交换色谱（IEC）、疏水色谱（HIC）、反相（RPC）以及亲水色谱法（NPC/HILIC）可对抗体中的带电异构体、结构异构体，或者由于糖基化、脱酰胺化和氧化等作用引起的杂质进行高分辨率分析。 近年来，科学家们一直致力于在生物药分离领域开发具有革新性的色谱分离介质，基于尺寸排阻、离子交换色谱等多种HPLC分离技术实现了对抗体多聚体、各种抗体异构体的高效分离，在抗体药物的质量控制方面提供了有效地监控手段。

一 抗体选择指南:检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素：1. 分析或应用的类型2. 样本蛋白的结构性质3. 样本的种属4. 抗体宿主的种类5. 抗体的标记和检测1 分析试验的应用类型一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等，如果抗体说明书没有提及的应用类型，并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型，而仅是说明尚未经过此种分析试验验证，如果抗体不适用某些分析试验，则会在抗体说明书上标注出来不适于某分析试验。2 样本蛋白的结构性质了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体，至少两方面因素需要考虑(1)..待测样本蛋白的结构域：抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来，其中的免疫原包括：全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体（如：细菌）或细胞，抗体说明书一般都有免疫原的描述，如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域，则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FACS 流式检测活细胞的表面蛋白，则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。(2)样本的提取或处理过程：某些抗体要求样本经过某些特殊处理，例如：许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本，另一方面，某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时，应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织，而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织，这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来3 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体，抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应，因其氨基酸序列同源性较高，如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中，并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白，而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过，应通过序列比对的方法来预测交叉反应，可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。4 一抗宿主物种的选择一般说来，在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时，一抗宿主动物的物种选择较为重要，对于免疫组化而言，尽可能选择与样本不同种系物种的一抗，从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应，例如：检测小鼠样本蛋白，则不应选择小鼠或大鼠源的一抗，最好选兔源的一抗，则二抗则可选择偶联了检测分子（酶、荧光素、生物素等）的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况，除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法，则抗体宿主物种的影响不大，如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测，尽管如此，含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白，还原变性样本中含IgG，在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。5 二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用， 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。6 双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一，二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

[font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview][b]重组抗体[/b][/url]，也被称为重组免疫球蛋白，是通过基因工程技术将抗体的基因在合适的宿主细胞中表达并生产出来的一类抗体。与传统的多克隆抗体和单克隆抗体相比，重组抗体具有更高的特异性和亲和力，并且可以针对特定的抗原表位进行设计和优化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体的类型包括嵌合抗体、双特异性抗体、抗体片段和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白等。下面一起来看一下他们各种的应用：[/font][/font][font=宋体]①[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]1975[/font][font=宋体]年，杂交瘤技术的发现彻底改变了抗体研究和临床开发。然而，鼠源性抗体的疗效受到人抗鼠抗体（[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]）效应的限制，鼠源性单抗对人体具有异种蛋白的免疫原性 [/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]在人体内半衰期较短。[/font][font=Calibri]1984[/font][font=宋体]年，研究人员通过基因工程构建了第一个嵌合抗体，也是公认的第一种重组抗体，以降低鼠源抗体在人体内的免疫原性。其中，约[/font][font=Calibri]30%-35%[/font][font=宋体]的分子来源于小鼠的抗体序列，约[/font][font=Calibri]65%-70%[/font][font=宋体]来源于人的抗体序列。所得嵌合抗体保留了亲代小鼠抗体的抗原结合能力。抗体嵌合是开发治疗性人源化抗体的第一步。义翘神州采用[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植技术和计算机辅助分子建模，提供高质量的单克隆抗体人源化服务，成功率高，人源化程度[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②抗体片段[/font][font=宋体][font=宋体]每一个完整的免疫球蛋白（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]）分子包含通过二硫键连接的两条重链和两条轻链。抗体片段（如[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]）体积小，比其全长抗体具有更好的组织或肿瘤穿透力。因此，它们在免疫治疗方面具有巨大的前景，尤其是在实体瘤方面。此外，它们的半衰期也较短，可用作放射性显像剂。然而，由于缺乏[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，它们不能引起[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]介导的抗体效应功能，如抗体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]）和补体依赖性细胞毒性（[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]起初采用酶解法对[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体进行片段化。胃蛋白酶作用于铰链区二硫键所连接的两条重链的近[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端，水解产生被称为[/font][font=Calibri]F(ab[/font][font=宋体]’[/font][font=Calibri])2[/font][font=宋体]的二价[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段。然后，通过木瓜蛋白酶将该片段裂解为两个相同的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段。然而，酶解法限制了可制备的抗体片段类型，而且不适合工业化大规模生产和纯化。随着抗体工程技术的进步，这些问题可以通过重组生产抗体片段来解决。抗体基因克隆测序成功后，可通过瞬时转染在原核表达系统（如大肠杆菌）和哺乳动物系统（[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞）中表达抗体片段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]凭借丰富的重组生产经验，义翘神州建立了高通量[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]表达平台，交付了多个[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体生产项目，总体成功率超过[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]。除了常见的[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]形式，我们还可以表达双特异和多特异[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]。此外，义翘神州还可以表达其他各种高特异性和亲和力的抗体片段，如[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]与常规单克隆抗体不同，双特异性抗体（[/font][font=Calibri]bsAb[/font][font=宋体]）具有两个结合位点，可识别同一抗原上两个不同抗原或表位。由于这一特性，双特异性抗体备受研究者和制药业的关注。截止目前，美国食品药品监督管理局（[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]）已批准了[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]种双抗药物，而且[/font][font=Calibri]160[/font][font=宋体]多种双抗正在进行临床试验，用于治疗癌症、糖尿病、阿尔茨海默病和其他疾病。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]起初，双特异性抗体通过四源杂交瘤技术制备，但这对下游抗体生产和纯化构成了巨大的挑战。随着过去[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]年重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术的发展，出现了几种双特异性抗体形式，以适应所需的靶标[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]产品特征。为了解决重链错配问题，[/font][font=Calibri]Genentech[/font][font=宋体]首先提出了“[/font][font=Calibri]knob-into-hole[/font][font=宋体]”（[/font][font=Calibri]KiH[/font][font=宋体]）技术，该技术通过对[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]结构域进行改造，在每条重链中创建一个“[/font][font=Calibri]knob[/font][font=宋体]”或一个“[/font][font=Calibri]hole[/font][font=宋体]”，以诱导异源二聚化。同样地，研究人员也采用了[/font][font=Calibri]common light chain [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CrossMab[/font][font=宋体]等其他技术来解决轻链错配问题。表达双特异性抗体主要在哺乳动物细胞中进行。由于单克隆抗体和双特异性抗体之间的各种结构相似性，许多已建立的常规单抗纯化工艺也可适用于双特异性抗体。（参见另一篇文章：“双特异性抗体：抗体治疗中的新星”）[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白（又称[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]嵌合融合蛋白、[/font][font=Calibri]Fc-Ig[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]标签蛋白）是一种同源二聚体，由免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与具有生物学活性的蛋白分子组成。虽然单克隆抗体是治疗性生物制剂开发的重点，但[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白也是一类成功的生物制药产品，至少有[/font][font=Calibri]13[/font][font=宋体]种药物获得了欧洲药品管理局（[/font][font=Calibri]EMA[/font][font=宋体]）和美国[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的批准。除治疗应用外，[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白还是基础研究中的检测试剂，包括流式细胞术、免疫组织化学和蛋白结合试验。事实上，与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的连接可以提高一些结合蛋白的溶解度和稳定性。鉴于其大小和对糖基化的需求（大多数是糖蛋白），[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白主要在哺乳动物表达系统中产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前，抗体工程技术取得了一定的进步，这极大地促进了各种形式重组抗体的开发，用于疾病治疗。[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]已批准了[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]多种抗体药物，目前有多种抗体处于临床后期开发阶段。此外，重组抗体还可用于许多研究应用：蛋白免疫印迹（[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]）、免疫组织化学（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）、流式细胞术（[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]）和表面等离子体共振（[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之，重组抗体是基因工程技术的重要应用之一，其类型多样，具有广泛的应用前景。随着基因工程技术的发展，重组抗体的生产成本和安全性问题也将得到进一步优化，为临床治疗和科学研究提供更多有效的工具。同时，我们也应该认识到重组抗体的潜在风险和挑战，加强对其安全性和有效性的评估和监管，以确保其能够更好地服务于人类的健康事业。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多重组抗体详情关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/news/recombinant-antibodies-formats[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]什么是抗体开发？抗体开发包含了抗体生成和表征的全过程。首先，将目的抗原注射入实验动物体内，使其免疫系统生成大量抗体。[/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发[/b][/url]的方法各有不同。例如，多克隆抗体可直接从血清中纯化，而单克隆抗体则需要先培养杂交瘤或先构建噬菌体展示抗体库。[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州作为行业领先的抗体研发公司，提供从抗原合成、研发和生产的一站式[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务。通过我们的抗体制备平台，我们随时准备帮助您应对研究中遇到的严峻挑战。[/font][/font][b][font=宋体]义翘神州提供抗体定制开发服务：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]快速单克隆抗体开发、[url=https://cn.sinobiological.com/services/fast-antibody-service][b]快速多克隆抗体开发[/b][/url]、磷酸化抗体定制服务、[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体服务[/b][/url][/font][b][font=宋体]抗体开发技术平台：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的定制抗体开发服务，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速高通量抗体生产和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]详情可以关注义翘神州抗体开发页面。[/font][font=宋体][font=宋体]文章来源：抗体开发[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体]在生物学和医学领域，抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作，而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原，通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素，也可能是机体自身的异常成分。抗体，则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白，能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合，依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位，即其表面能够与抗体结合的区域，通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位，即其能够与抗原结合的区域，由重链和轻链上的可变区组成，形成了特定的空间结构，能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应速度极快，仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的，一旦找到合适的配对，它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段，此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢，往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中，它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中，利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如，利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外，抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域，如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一，其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制，也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

[font='calibri'][size=13px]人源化抗体和全人源抗体区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]？[/size][/font][font='calibri'][size=13px]义翘[/size][/font][font='calibri'][size=13px]抗体人源化[/size][/font][font='calibri'][size=13px]服务内容[/size][/font][font='宋体']人源化抗体和全人源抗体区别:[/font][font='宋体']根据单克隆抗体的来源不同，可分为鼠源抗体、嵌合体抗体、人源化抗体和全人源抗体。[/font][font='宋体']所谓的全人源单抗，就是基因来源100%都是人源的。不过，事实上全人源单抗也是在小鼠身上产生的，通过把产生抗体相关的人类基因转移到小鼠，此后小鼠体内的抗体结构可以跟人类抗体结构一样。所以全人源抗体直接用人体[/font][font='宋体']细胞制作的抗体，只是抗体结构100%按照人类基因编码而成。[/font][font='宋体']人源化单抗则是大部分来源是人源，同时融合了鼠源成分。近年来，科学家通过基因工程特意将鼠抗的关键有利基因结构保留在人源框架上，起到特殊的作用，就像优化再加工(2l。例如，依奇珠单抗(人源化单抗)中保留了1.8%的鼠源成分，这部分整合了优势有利的基因，成就了依奇珠单抗的高亲和力，其起效速度快可能也和其亲和力高有关。[/font][font='宋体'] [/font][font='宋体'] [/font][font='宋体']义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url]：[/font][font='宋体']抗体人源化[/font][font='宋体']非人源性抗体进入人体内会引起严重的机体排异反应，进而影响抗体在临床应用时的安全性和治疗效果。抗体人源化通过基因改造，使鼠源抗体具有与人体内抗体类似的结构，从而逃避免疫系统的识别。抗体人源化经历了从嵌合抗体到CDR移植、SDR移植等技术演变，力求在保持高亲和力、高特异性结合能力的同时克服传统鼠源抗体的免疫原性，在肿瘤治疗等领域具有极为广泛的应用前景。[/font][font='宋体']义翘神州利用CDR置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对鼠源单抗等进行人源化改造，保证人源化程度 95%，为客户提供优质的单克隆抗体人源化服务。[/font]

[font=宋体]主流的[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development][b]抗体开发平台[/b][/url]有多个，其中最常用的是基于杂交瘤技术的平台。该技术通过将免疫细胞与肿瘤细胞融合，产生能够产生抗体的杂交瘤细胞，从而制备出单克隆抗体。随着技术的发展，基于噬菌体展示技术的平台也逐渐成为主流。该技术通过将抗体片段与噬菌体蛋白融合，展示在噬菌体表面，从而筛选出具有所需特性的抗体。此外，基于转基因小鼠技术的平台也是常用的抗体开发平台之一。这些平台为抗体开发提供了强大的技术支持，使得研究人员能够快速、高效地开发出针对特定抗原的抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供一站式的[url=https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services][b]定制抗体开发服务[/b][/url]，包括多克隆抗体开发、单克隆抗体开发，以及针对特定应用的抗体开发，例如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹、免疫组化和流式细胞术。多年来，从抗原设计到抗体纯化和鉴定，我们花费了多年时间优化和调整抗体开发过程中的关键参数。我们以自主研发的技术和极具竞争力的效率为优势，为客户提供专业服务。由我们开发的高成功率和更高质量的抗体将使我们的客户受益其中。下面是义翘神州抗体开发平台：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原制备[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州利用计算机辅助模拟和设计机制，开发出应用在多肽抗原设计中的自主研发技术。这种经过优化的方法大大地提高了抗体的质量和成功的概率。义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白质，可线上购买，作为抗原用于免疫反应和筛选。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②优化小鼠杂交瘤技术[/font][font=宋体]义翘神州多年来一直致力于优化小鼠杂交瘤技术，极大程度提高抗体质量和成功率。因此，义翘神州已经开发出适用多种应用的优质抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③自主研发二代兔单克隆技术[/font][font=宋体]义翘神州花费多年时间优化其自主研发的兔单克隆抗体开发平台，该平台能以合理的成本制备出高亲和力的抗体。义翘神州曾利用该平台制备出优质兔单克隆抗体产品作为目录产品，还为定制客户开发过治疗性抗体候选产品，并取得了巨大的成功。义翘神州利用这一先进平台助力于全球客户开发兔单克隆抗体，作为试剂或治疗性候选产品。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④重组抗体生产[/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已建立四种抗体生产平台，可用于快速[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量抗体生产[/b][/url]和大规模抗体批量生产。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，即可将成品送至您手中。义翘神州拥有先进的技术，极大节省了抗体生产的时间和成本。很多大型医药公司都利用我们的平台来支撑他们的抗体研究和开发项目。在过去的几年里，我们实现了几乎[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]的成功率，生产了成千上万的高质量单克隆抗体产品。为制药和生物技术领域客户带来了好的业务发展和市场营销。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤抗体应用验证平台[/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了多个抗体应用验证平台，包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]检测平台、免疫组化（[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]）检测平台、流式（[/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体]）检测平台、免疫荧光（[/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体]）检测平台以及免疫沉淀（[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]）检测平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-development[/font][/font]

[b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是生物学和医学领域中常用的可视化技术，其中荧光标记抗体凭借其独特的应用优势，在许多研究方向中发挥了重要作用。本文将详细介绍荧光标记抗体的原理、应用及最新进展。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、荧光标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是一种利用荧光物质对目标进行标记，通过特定波长的光激发后发出荧光，从而实现可视化检测的方法。荧光标记抗体则是将荧光物质与特异性抗体结合，形成荧光标记抗体，用于对目标抗原进行特异性结合和荧光标记。常见的荧光物质有荧光素、量子点、上转换纳米颗粒等。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、荧光标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分析：荧光标记抗体在免疫分析中具有广泛的应用，如酶联免疫吸附试验（[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]）、流式细胞术、免疫荧光染色等。通过荧光标记抗体与抗原的特异性结合，可以实现对目标抗原的高灵敏度、高特异性检测。例如，利用荧光标记抗体检测肿瘤标志物，有助于肿瘤的早期诊断和治疗监测。[/font][/font][font=宋体]细胞成像：荧光标记抗体在细胞成像中具有重要作用，可以用于观察细胞内特定抗原的表达情况，了解细胞的功能和行为。例如，利用荧光标记抗体对细胞膜抗原进行标记，可以观察细胞迁移、侵袭等行为。[/font][font=宋体]组织切片染色：荧光标记抗体也可用于组织切片染色，对病理组织中的特定抗原进行标记，有助于病理诊断和组织学研究。例如，利用荧光标记抗体对肿瘤组织进行染色，有助于肿瘤类型的鉴别和恶性程度的评估。[/font][font=宋体]药物筛选：荧光标记抗体在药物筛选中具有重要应用，可以用于药物作用靶点的检测和药物作用机制的研究。例如，利用荧光标记抗体对药物作用靶点进行标记，可以观察药物对靶点的影响，评估药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、展望[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着荧光标记技术的不断发展，荧光标记抗体在灵敏度、特异性和可视化效果等方面得到了显著提升。同时，新型荧光物质的开发和制备也为荧光标记抗体的应用提供了更多选择。未来，随着荧光标记技术的进一步优化和多色荧光标记技术的发展，荧光标记抗体将在更多领域发挥重要作用，为生物学、医学和其他相关领域的研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白，具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同，可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]）[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术，其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中，需要注意两蛋白间的接头序列的长度，以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景，为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体，具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段，可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术，将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合，然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段，将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂，将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是，融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例，因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分，以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用，包括但不限于以下方面：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断：抗体融合蛋白可以用于检测抗原，如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合，可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗：抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合，可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化：抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合，可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析：抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合，可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备：抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物，即将药物与抗体片段结合，利用抗体的特异性结合能力，将药物定向引导至病变部位，提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[align=left][font='calibri'][size=13px]抗体的类型有哪些？不同类型的抗体结构和功能介绍[/size][/font][/align]抗体的类型有哪些？不同类型的抗体结构和功能有什么不同，[url=https://cn.sinobiological.com/]义翘神州[/url]为您细细讲解：五种不同类型的抗体分别是什么？血清中发现的抗体分子存在五种免疫球蛋白：IgG、IgM、IgA、IgE和IgD，通过重链类型进行区分。IgG抗体结构和功能免疫球蛋白G（IgG）抗体是一种大分子球蛋白，分子量约为150kDa，由四条肽链组成。它包含两条相同的γ（伽马）重链，约50kDa，以及两条相同的轻链，约25kDa，因此属于四聚体结构。IgG提供长效的保护作用，持续存在数月或数年。IgG可阻止细菌、病毒的侵害，中和细菌毒素，触发补体蛋白系统，结合抗原提高吞噬作用的效果。IgM抗体结构和功能免疫球蛋白M（IgM）由五个或六个单体构成（即大多数为五聚体，但也有六聚体），由两条重链（μ-链）和两条轻链构成，通过二硫键和J链结合在一起。IgM与红细胞（RBC）表面的ABO血型抗原有关。IgM通过吞噬作用增强细胞的摄取。IgA抗体结构和功能免疫球蛋白A（IgA）抗体由重链（H）和轻链（L）构成。每条H链由恒定区（Cα1、Cα2、Cα3）、铰链区和可变区（V）构成。轻链由CL和Vκ或Vλ构成。IgA的主要功能是在微生物入侵组织之前将抗原与微生物相结合。它聚集抗原并将其保存在分泌物中，因此当分泌物被排出时，抗原也会被排出。IgA也是黏膜表面（例如肠、鼻和肺）的第一道屏障。IgE抗体结构和功能免疫球蛋白E（IgE）抗体仅存在于哺乳动物体内。IgE由浆细胞合成。IgE单体由两条重链（ε链）和两条轻链构成，ε链包含4种类Ig恒定区（Cε1-Cε4）。IgE与参与免疫应答的肥大细胞和嗜碱性粒细胞相结合。一些科学家认为IgE能够阻止寄生虫的侵入。IgD抗体结构和功能免疫球蛋白D（IgD）抗体可在未成熟的B淋巴细胞的质膜上表达。IgD同样以分泌体形式产生，少量存在于血清中。IgD在诱导抗体产生中起重要作用。更多抗体定制服务尽在：https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services

[font=宋体]抗体标记是一种生物技术，通过将标记物（如酶、荧光素、生物素等）共价连接到抗体上，使其与待检测物（如特定抗原）特异性反应，形成多元复合物。随后，借助相关仪器，可以直接观察试验结果或进行自动化测定，从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究，或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合，将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物，用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物，因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高！这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合，生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种，比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物，这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素，具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况，如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等，可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中，[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达，如细胞因子、转录因子等，可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗，通常是在单抗上进行标记，具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合，用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]（异硫氰酸荧光素）与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料，能够与各种抗体蛋白结合，并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记，特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发，还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url]，可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

单克隆抗体药物治疗肿瘤的研究现状与展望[关键词] 单克隆抗体 免疫偶联物 抗肿瘤药物 单克隆抗体 (简称单抗)药物用于治疗肿瘤的研究已获得重要进展。抗肿瘤单抗药物一般包括 单抗治疗剂与单抗偶联物。研究表明，单抗药物对肿瘤相关靶点显示特异性结合，对肿瘤细 胞有选择性杀伤作用并在动物实验有显著的疗效。单抗药物已开始应用于临床肿瘤治疗。抗 肿瘤单抗药物研究的发展趋势是继续寻求新的分子靶点、抗体人源化以及偶联物分子的小型 化。由于单抗有高度特异性，研制单抗药物有巨大的潜力，单抗药物将在肿瘤治疗中发挥重 要作用。　　生物技术药物(biotechnology medicines)近年来获得迅速发展。通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备的单克隆抗体(单抗)药物是生物技术药物领域的重要方面。单抗作为诊断剂或检测剂，近20年来已在医学和生物学领域得到广泛应用；单抗作为治疗剂的研究也已获得重要进展。单抗药物(monoclonal antibody agents)可能用于治疗肿瘤、病毒性感染、心血管病以及其它疾患，尤其是用于治疗肿瘤，已显示出良好的前景。抗肿瘤单抗药物一般包括两类，一是抗肿瘤单抗；二是抗肿瘤单抗偶联物，或称免疫偶联物(immunoconjugate)。免疫偶联物分子由单抗与“弹头”药物两部分构成。单抗所针对的靶标通常为肿瘤细胞表面的肿瘤相关抗原或特定的受体。用作“弹头”的物质主要有三类，即放射性核素、药物和毒素；其与单抗连接分别构成放射免疫偶联物、化学免疫偶联物和免疫毒素。自80年代以已对抗肿瘤单抗药物进行了大量研究，特别是自1997年以来，Ritux an、Herceptin在美国相继获批准用于临床肿瘤治疗，单抗药物的研究与开发有了新的发展势头，成为生物技术药物的新热点［1，2］。 单抗药物的研究进展　　抗肿瘤单抗药物研究已取得多方面进展，研究结果为应用于肿瘤治疗的可行性提供了重要依据［3，4］。　　单抗药物对肿瘤细胞的选择性杀伤作用　研究结果表明，单抗与药物偶联物或与毒素偶联物对肿瘤靶细胞显示选择性杀伤作用，对表达有关抗原的肿瘤细胞作用强，对抗原性无关细胞的作用弱或无作用。研究还表明，单抗药物偶联物对肿瘤细胞的杀伤活性比无关抗体偶联物的活性强；药物与单抗偶联后对肿瘤靶细胞的活性比游离药物强。这种选择性杀伤作用是单抗药物用于肿瘤治疗的重要基础。免疫电镜观察可见单抗或单抗偶联物能结合到细胞表面，经过受体介导的内化过程进入细胞。结合到肿瘤靶细胞表面的数量多，到非靶细胞的数量少；进入靶细胞内的数量多，进入非靶细胞内的数量少。这种特异性结合和内化进一步阐明了单抗或单抗偶联物对靶细胞选择性杀伤作用的机制。　　单抗药物具有更高的疗效　由抗人体肿瘤的单抗与药物构成的偶联物对移植于裸鼠的相应人体肿瘤生长有抑制作用。偶联物与相应的游离药物比较，一般具有更高的疗效或显示较低的毒性。曾与单抗进行偶联并在裸鼠进行疗效观察的抗癌药物有阿霉素、柔红霉素、平阳霉素、博安霉素、丝裂霉素、新制癌菌素、氨甲蝶呤、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、顺铂以及长春碱类衍生物等。使用的肿瘤模型包括肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、乳癌、卵巢癌、脑胶质瘤、黑色素瘤、淋巴瘤和白血病等。来源于植物或细菌的毒素，由于有强烈毒性，很难作为治疗剂使用；但毒素( 或单链毒素)与单抗的偶联物可在动物模型显示疗效。研究表明，单抗药物在动物体内呈特异性分布。静脉内注射抗肿瘤单抗，在肿瘤部位的浓度较高，显示特异性定位。单抗与药物的偶联物通常仍保留原来单抗的分布特征，在靶肿瘤的浓度较高。确定单抗或单抗偶联物在体内具有靶向性，为进一步阐明其疗效提供了依据。 　　单抗药物对肿瘤相关靶点的特异性作用　特定受体或特定的基因表达蛋白可能作为单抗药物的靶点。Rituxan是以B细胞的CD20 分子为靶点的人鼠嵌合抗体，对非霍奇金B细胞淋巴瘤有疗效，是第一个获美国FD A批准用于治疗恶性肿瘤的单抗［5］。Herceptin 是抗HER-2/neu 癌基因编码蛋白的单抗，临床研究对乳腺癌有效，与化疗药物联合有更显著的疗效 ［6］，亦已获批准用于治疗肿瘤。表皮细胞生长因子受体(EGFr)在人鳞癌、乳腺癌和脑胶质瘤等均有较高的表达。有报道，抗 EGFr 单抗与长春碱衍生物的偶联物在裸鼠体内试验显示良好的抗癌效果。抗 EGFr 的人鼠嵌合抗体已进入临床研究［7］。转铁蛋白受体在某些肿瘤有较高的表达。抗转铁蛋白受体单抗构成的免疫毒素对脑瘤细胞有高度细胞毒性；高度恶性的肿瘤对免疫毒素的敏感性更高［8］。在人体乳腺癌和卵巢癌常见HER-2 基因扩增而且相应的HER-2 蛋白含量增高。抗HER-2 蛋白单抗与抗 EGFr 单抗联合使用对卵巢癌细胞的作用增强，显示相加的抗增殖作用。CD30 受体在霍奇金淋巴瘤的肿瘤细胞高度表达，可以作为免疫毒素攻击的靶点。近年来，以血管内皮细胞为靶点的单抗药物受到广泛关注。实体瘤的生长与血管密切相关，肿瘤细胞增殖如果缺乏相应的血管新生成将不能发展为肿瘤。以内皮细胞为靶点的单抗药物，抑制血管新生成，可能达到抑制肿瘤生长的目的；而且静脉注射的单抗药物也易于到达靶部位(内皮细胞)，不需要穿越细胞外间隙到达实体瘤深部的肿瘤细胞。血管内皮生长因子(VEGF)在血管生成中有重要作用。据报道，抗VEGF 的中和性单抗具有广谱的抗肿瘤作用，对移植于裸鼠的人体癌瘤有显著疗效 ［9］。　　单抗药物对抗药性肿瘤细胞的杀伤作用　单抗偶联物对于抗药性肿瘤细胞仍显示较强的杀伤活性。对于长期使用氨甲蝶呤而出现抗药性的成骨肉瘤细胞，单抗氨甲蝶呤偶联物仍显示较强的杀伤作用。对于具有多药抗性(MDR)的肿瘤细胞，抗 P-170 糖蛋白单抗构成的免疫毒素可显示选择性杀伤作用。说明单抗药物有可能用于克服肿瘤细胞抗药性。 存在的问题与解决途径 　　单抗药物的临床研究结果已为其应用于治疗肿瘤展示出良好的前景，但仍有些问题需要进一步研究解决［3］。单抗药物存在的问题主要涉及免疫学和药理学两方面。免疫学方面问题主要是人抗鼠抗体(HAMA)反应。因为多年来用于临床研究的单抗药物多数使用小鼠单抗制备，往往导致HAMA反应。此外，肿瘤细胞群体在抗原性方面的异质性，肿瘤细胞的抗原性调变等也可能影响单抗药物的疗效。药理学方面的问题主要是到达肿瘤的药量不足。单抗药物在体内运送过程受多种因素影响。由于它是异体蛋白，会被网状内皮系统摄取，有相当数量将积聚于肝、脾和骨髓。单抗药物是大分子物质，通过毛细血管内皮层以及穿透肿瘤细胞外间隙均受到限制。解决问题的主要途径包括：　　降低单抗药物的免疫原性　目前多数单抗药物使用鼠源性抗体制备，在临床使用可导致HAMA 反应。据报告，在黑色素瘤、结肠癌、乳癌和卵巢癌患者，HAMA发生率高达100%。 HAMA 对注入的单抗药物起中和作用，从而抵消其疗效。避免或减少 HAMA 反应的主要途径是使鼠源性单抗人源化或研制完全的人源抗体。单抗人源化主要通过基因工程技术制备嵌合抗体(chimeric antibody)或改形抗体(reshaping antibody)。嵌合抗体是将 Fc 段置换为人源性，其它部分仍为鼠源性。改形抗体是指除互补决定区(CDR)为鼠源性外，其它部分均为人源性。临床研究表明，嵌合抗体的副反应轻，HAMA 反应率较鼠源性单抗低，在血中半衰期也较长。已获准在临床应用的抗肿瘤单抗药物 Rituxan 和 Herceptin 均属嵌合抗体。　　植物或细菌来源的毒素为大分子肽类物质，具有较强的免疫原性。在人体使用免疫毒素，不仅鼠源性单抗部分可引起 HAMA 反应，而且毒素部分亦可导致产生抗毒素的抗体。使用人源化单抗仍不能解决“弹头”(毒素)的免疫原性问题。使用化疗药物为“弹头”则可避免此部分的抗体反应。　　提高单抗药物在肿瘤组织的浓度　单抗药物具有体内分布特异性，但有研究表明，能到达肿瘤细胞的药物量仍属有限。据推算，肿瘤组织的单抗摄取量约为 0.005% (注入剂量/克组织)，说明可到达靶部位的药物量甚少。单抗药物在体内的运送过程受多种因素影响。首先与肿瘤局部的血供状况有关，动物实验表明，血管丰富、血流量较大的肿瘤，用单抗药物治疗的效果也较好。　　单抗及其偶联物均为大分子物质。以IgG型单抗为导向载体、以蓖麻毒素 A 链为“弹头”制成的免疫毒素，其相对分子质量约为 180 000；用 IgM 型单抗为导向载体，偶联物的相对分子质量更大。庞大的药物分子难于透过毛细管内皮层和穿过肿瘤细胞外间隙到达实体瘤的深部。用体外培养的多细胞球体观察表明，免疫毒素对多细胞球体的穿透性很差，培养1 h 仅到达球体外周的 2 至 3 层细胞。对在裸鼠移植的肿瘤进行观察，发现静脉注射免疫毒素 1 天后，瘤结外围部分与中心部分的浓度比为 2∶1；在注射后 5 天才达到 1∶1［ 10］。使用抗体片段，如 Fab、Fab′ 制备分子量较小的偶联物，可能提高对细胞外间隙的穿透性，增加到达深部肿瘤细胞的药物量。为提高药物在肿瘤的浓度，单抗药物分子的小型化是研制的重要途径。　　提高单抗药物在肿瘤浓度的另一种办法是局部注射。据报告，在移植人

[font=宋体][font=宋体]纳米抗体（[/font][font=Calibri]Nanobody, Nb[/font][font=宋体]），又称为单域抗体（[/font][font=Calibri]Single-domain antibodies, sdAbs[/font][font=宋体]），是来源于骆驼科动物和鲨鱼的一种独特的抗体，最初由比利时免疫学家[/font][font=Calibri]Hamers-Casterman[/font][font=宋体]于[/font][font=Calibri]1989[/font][font=宋体]年在分离骆驼血清中的抗体时偶然发现。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]传统抗体的结构类似于[/font][font=宋体]“[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]”形，是由两条重链和两条轻链构成的对称结构。一些骆驼科动物等在其生长进化的过程中，自身的免疫系统中出现了缺失轻链及重链[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构但完全保留抗原结合活性的重链抗体（[/font][font=Calibri]HCAb[/font][font=宋体]）。[/font][font=Calibri]HCAb[/font][font=宋体]特异性结合抗原的区域为其重链的可变区，即[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody[/font][font=宋体]）。[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]经重组表达后，可获得只含有单个结构域的最小单元抗原结合片段，即纳米抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体仅有[/font][font=Calibri]12~14 kDa[/font][font=宋体]，其晶体直径为[/font][font=Calibri]2.5 nm[/font][font=宋体]，长[/font][font=Calibri]4 nm[/font][font=宋体]，因此被认为是已知的可以与抗原结合的最小单位。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体（[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]）与普通抗体[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]具有相同的结构域，即[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]个保守框架区（[/font][font=Calibri]FR1/2/3/4[/font][font=宋体]）和[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个互补决定区（[/font][font=Calibri]CDR1/2/3[/font][font=宋体]）。普通抗体的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]中[/font][font=Calibri]FR2[/font][font=宋体]内有四个高度保守的疏水性氨基酸残基（[/font][font=Calibri]V42[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]G49[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]L50[/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]W52[/font][font=宋体]），而在[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体中，这四个氨基酸被替换成亲水性的氨基酸残基（[/font][font=Calibri]F42[/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]Y42[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]E49[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]R50[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]G52[/font][font=宋体]），因此增加了纳米抗体的水溶性。此外，与普通抗体的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]相比，纳米抗体的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]较长一些，可形成凸形结构，从而增强对隐藏的肿瘤抗原表位识别的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体与普通抗体的区别：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]普通抗体：[/b][/font][font=宋体]免疫原性：较高[/font][font=宋体][font=宋体]分子量大小：[/font][font=Calibri]150 kDa[/font][/font][font=宋体]半衰期：较长[/font][font=宋体]组织穿透力：较低[/font][font=宋体][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]长度：平均[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]个氨基酸残基[/font][/font][font=宋体]识别位点：较难识别隐藏位点[/font][font=宋体][font=宋体]稳定性：易失活，在高温或极端[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]下失效或分解[/font][/font][font=宋体]抗体表达：哺乳动物表达[/font][font=宋体]生产费用：较高[/font][font=宋体][font=宋体]工程化改造：[/font][font=宋体]“[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]”字型结构，不易改造[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体：[/b][/font][font=宋体]免疫原性：较低[/font][font=宋体][font=宋体]分子量大小：[/font][font=Calibri]12-14 kDa[/font][/font][font=宋体]半衰期：较短[/font][font=宋体]组织穿透力：较强，可穿过血脑屏障[/font][font=宋体][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体]长度：[/font][font=Calibri]16-24[/font][font=宋体]个氨基酸残基[/font][/font][font=宋体]识别位点：容易识别隐藏位点[/font][font=宋体][font=宋体]稳定性：高稳定性，在高温或极端[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]下保持稳定[/font][/font][font=宋体]抗体表达：哺乳动物或微生物表达[/font][font=宋体]生产费用：较低[/font][font=宋体]工程化改造：结构简单，容易改造[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术，受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现，义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台，已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外，我们的高通量纳米抗体表达平台，已成功表达和生产了多种纳米抗体形式，包括单价、多价或多特异性[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]，满足客户的各种定制需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体开发服务[/b][/font][font=宋体][font=宋体]不同于经典的杂交瘤技术制备单克隆抗体，纳米抗体开发的整个流程主要包括羊驼免疫、噬菌体文库构建、抗体筛选、表达纯化及验证等阶段。羊驼免疫后，从羊驼外周血分离[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞，提取总[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]，反转录为[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体]，以[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体]为模板[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增获得多样化的纳米抗体基因片段，然后将其连接到载体上，从而构建噬菌体文库。随后进行多轮淘洗步骤获得抗原特异性纳米抗体，并对其进行测序、表达和验证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody][b]纳米抗体[/b][/url]开发平台，可提供一站式的纳米抗体定制服务，主要包括抗原设计与制备、羊驼免疫、文库构建、淘洗、单克隆鉴定、测序以及活性分析等实验步骤，已成功交付多个纳米抗体开发项目。获得的纳米抗体需要进行进一步的人源化改造，以降低其免疫原性，实现最佳的治疗效果。义翘神州提供的纳米抗体人源化服务，利用[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对羊驼纳米抗体进行人源化改造，保证人源化程度 [/font][font=Calibri]95%[/font][font=宋体]，成功率[/font][font=Calibri]100%[/font][font=宋体]。我们也提供体外药效评价解决方案，满足纳米抗体成药性评估、生物学活性测定等应用场景。更多详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody[/font][/font]

因实验原因，需要买一对抗原/抗体，什么抗原/抗体都可以，效价要高一些，抗体要纯一些，谁那里有在下面电子邮件发个信息吧happybsky@163.com