光散射

最近一直在看动态光散射的资料，就有两个疑问。第一，许多动态光散射仪都将角度设为90度，或其他的多角度，这样的设定根据是什么。第二，动态光散射是由于粒子的布朗运动使得散射光强度上下波动，然后有数字相关器处理得到时间自相关函数，再根据Stocks-Einstein公式得到粒子的大小，但是，这不是只能得到粒子的大小吗？那么，粒子的质量分布或是体积分布是根据什么得到的呢？ 我困惑好久了，也不知道自己想歪了没有，哪位高人知道，还请指点小妹一二。在此谢过！

[font=&]【题名】： 光散射技术[/font][font=&]【全文链接】: [/font]

一、动态光散射仪的工作原理 动态光散射技术（dynamiclightscattering,DLS）是指通过测量样品散射光强度起伏的变化来得出样品颗粒大小信息的一种技术。之所以称为“动态”是因为样品中的分子不停地做布朗运动，正是这种运动使散射光产生多普勒频移。动态光散射技术的工作原理可以简述为以下几个步骤：首先根据散射光的变化，即多普勒频移测得溶液中分子的扩散系数D，再由D=KT/6πηr可求出分子的流体动力学半径r，(式中K为玻尔兹曼常数，T为绝对温度，η为溶液的粘滞系数),根据已有的分子半径-分子量模型，就可以算出分子量的大小。 光在传播时若碰到颗粒，一部分光会被吸收，一部分会被散射掉。如果分子静止不动，散射光发生弹性散射时，能量频率均不变。但由于分子不停地在做杂乱无章的布朗运动，所以，当产生散射光的分子朝向监测器运动时，相当于把散射的光子往监测器送了一段距离，使光子较分子静止时产生的散射光要早到达监测器，也就是在监测器看来散射光的频率增高了；如果产生散射的分子逆向监测器运动，相当于把散射光子往远离监测器的方向拉了一把，结果使散射光的频率降低。日常生活中，但我们听到救护车由远而近时，声音的频率越来越高，也是同样的道理。实际上我们可以根据声音频率变化的快慢来判断救护车运动的速度。 光散射技术就是根据这种微小的频率变化来测量溶液中分子的扩散速度。由D=KT/6πηr可知，当扩散速度一定时，由于实验时溶剂一定，温度是确定的，所以扩散的快慢只与流体动力学半径有关。蛋白质多方面的性质都直接和它的大小相关。因此，光散射广泛应用与蛋白质及其它大分子的理化性质研究。

各位大虾 动态光散射仪测定粒径分布和zeta的相关仪器推荐下

小角X光散射[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=179802]小角X光散射.rar[/url]

[B]size=4]大家有谁做过共振光散射吗，普通的荧光光谱仪是否可以实现？[/size][/font][/font][/B]

由于场流分离仪FFF可以分析的样品种类繁多，既有溶解型的高分子材料，又有分散型的纳米-微米材料，因此，很难找到合适的标准物质来做标准曲线，特别是纳米-微米材料的标样，目前基本都是进口的，价格昂贵，限制了其使用，就不如采购动、静态激光散射检测器来的划算了。因此，激光散射仪器，几乎成了FFF的标准配置了。实际使用中，还是动态激光散射粒度仪/粒度检测器DLS应用更加广泛一些，而且，多数进口品牌的DLS仪器都可以估算分子量的，也是有参考意义的数据，因此更合算了。关于激光散射检测器MALS/DLS的原理，此处不再赘述，感兴趣的朋友可以参看我们相关的帖子，以及动、静态激光散射的相关资料、教材课本等。我们主要讨论的是，MALS/DLS在FFF上的应用，特别是与FFF仪器的在线直接联用的配置问题。为了是更广大的用户能够买得起、用得起FFF仪器，德国postnova公司不仅仅在其软件NovaFFF上下了很大功夫，使该软件在不带静态多角激光散射检测器MALS的情况下，就具有dn/dc值的输入与输出功能，从而方便了那些已经有了HPLC/GPC上的RI检测器的用户，使其无需再配置购买专用的、带dn/dc值输入输出功能及软件的RI检测器了，从而可以方便准确地测试和计算绝对分子量了。需要指出的是，虽然绝大多数HPLC仪器上的RI检测器使用的是红外波长的光源，在dn/dc值的测试的时候，是会产生一些误差的——MALS均使用可见光区的波长的光源，但是，针对不同的应用，这一误差也是不同的，大部分情况下，误差是可以接受的、可以容忍的，不是很大，呵呵。对于动态光散射DLS，postnova公司则专门开发了一款设备：PN9020型多功能标准化接口扩展板，用于将马尔文公司、美国布鲁克海文公司（brookheaven）的台式机的、在线的动态激光散射粒度仪/粒度检测器DLS，接入到我们postnova的各型场流仪当中，从而实现台式机的在线直接联用。其电路部分的信号传输路径是：从（手动或自动）进样器传输出来一路电信号给PN9020接口板，再通过这个接口板传输给Malvern的各型DLS台式机，或者是传输给布鲁克海文的在线DLS检测器，从而给其一个启动信号，使其纵坐标开始计时（保留时间）。目前，Malvern的多数激光粒度仪DLS都有了流动模式的软件了，因此使用较为方便；而brookheaven的在线DLS检测器，就更方便了，本身就有软件的，只是需要另开一个软件窗口。PN9020型接口板，极大地拓展了场流仪的应用客户群，使得许多已经有了台式DLS的客户，都可以再采购postnova的FFF仪器，而不必再另购一台在线的DLS了。不仅如此，在FFF上使用知名大厂家的DLS仪器，也保证了分析效果：由于我们主要的竞争对手，实际上是代理德国superon公司的AF4，因此才把他们自己的静态激光散射检测器接入到AF4中，并且采用了在90度角加一个动态发生器之类的机器就算是DLS的配置方案，表面上看似高大上，其实这个90度另加的动态DLS，肯定是远远赶不上Malvern和Brookheaven公司的专门的动态粒度仪/粒度检测器DLS的，这俩厂家的DLS，早就采用了先进的光纤技术了，而光纤技术在动态激光散射领域的应用效果，也即：灵敏度、稳定性，要远远好于竞争对手使用的光电二极管式取光。此外，专用的DLS，也具有更加强大的测试功能、计算功能。最后，Malvern和Brookheaven的DLS，是一台独立的仪器，跟静态光散射MALS无关的，既可以与MALS一起使用，也可以单独使用；反观竞争对手那边，在90度角上加动态，不仅仅性能大打折扣，而且使用也不方便、不灵活，静态MALS不开机，动态DLS使不了啊，呵呵。我们的主要竞争对手，总是“忽悠”客户采购他们的多角激光散射检测器外加90度角的动态，这样的配置，实际上对于许多搞纳米材料表征的用户来说，就是浪费钱了，因为基本用不上静态光散射MALS，但是又不得不买，因为没有静态MALS的主机，90度加动态的也就不可能有了。原本花较少钱就能解决的分析功能，不得不花很多钱来解决。[b]这背后的根本原因，就是竞争对手他们没有类似我们的PN9020型接口板的设备、无法接入别的厂家的或者是他们自己的DLS台式机！所以，归纳总结一下，竞争对手这种配置，不仅仅使得已经有了台式DLS仪器的用户无法发挥已有设备的用途以节省采购费用，还使得那些无需测试分析绝对分子量的用户也不得不购买静态光散射MALS !也就是说，甭管你测不测绝对分子量，只要你测纳米尺寸，你就得买在纳米尺寸测试方面基本用不上的静态光散射MALS，否则动态DLS也使不了。这等于是绑架了用户啊！[/b]

由电话发明家A.G.Bell于1880年提出。经调制的断续光照射于物质时，物质发射与断续光频率相等的声波，这种现象称为光声效应。利用物质微粒（包括分子）对光的散射作用进行分析的检测器。当某一波长的光照射在物质微粒上时，除一部分通过物质微粒或被微粒吸收外，大部分的光将以同样的波长向各个方向散射（瑞利散射），散射光的强度是微粒数量和微粒大小的函数。光散射检测器是凝胶色谱中常用的检测器之一。

大家好：请问静态和动态光散射原理上有什么区别啊？我用的是马尔文激光粒度仪2000mu，它是静态光散射还是动态光散射啊？

请问激光光散射仪的基本原理及操作流程？最好是以马尔文公司的光散射仪为例

各位大虾，请帮帮忙。现在要在安捷伦1200上加一个检测器，主要是测定分子量分布，用示差折光检测器好还是蒸发光散射检测器好，蒸发光散射检测器和激光散射检测器有什么区别?蒸发光散射检测器是否可用来测定分子量分布，在网上找不到介绍。

最近在做三维荧光扫描，得到的光谱中拉曼散射和瑞利散射特别强，不知采用什么方式可以消除这两种光谱的干扰，我查文献得知可以用滤光片或软件中的数据处理等手段消除这两种光谱，但是不知道具体的操作方法，希望大家能帮忙提供详细的解决方案。

有没有人知道哪家仪器可以帮忙做蒸发光散射的啊？最近碰到一有机化合物，想用蒸发光散射检测器分析一下（GC、HPLC紫外检测器都不行）但没有配这个检测器不知道有没有人知道有哪家仪器公司可以提供仪器做这样的分析要是可以用该检测器的话，就直接购买了就怕买回来用不上，浪费钱所以想问问有没有可以做售前技术支持的

版内有用动态光散射的用户，能不能把自家的仪器拍几张图片传上来，最好是能拍一下它的结构图，主要是样品检测系统、样品池、激光散射系统这一块，以便于直观地了解一下动态光散射的结构原理。发帖重重有奖！

我想做一个有关共振光散射方面的实验可是现在遇到一些问题.就是实验过程的设计问题还有就是我不太明白共振光散射跟共振瑞利光散射有什么关系?

请问 有做过光散射的吗 那个样品槽是一次性的吗 好像比较贵啊

看到论坛很多人希望了解动态光散射粒度仪，且有专版征图，再此希望开一个贴写写关于动态光散射粒度仪的一些东西。实验室有台Horiba公司的动态光散射激光粒度仪LB-550，先上图，然后再慢慢介绍参加培训时知道的一些关于动态光散射的知识。只是怎么直接发图呢（非附件下载方式）？？[em09512]

激光粒度仪测量是接收和识别颗粒对激光造成的散射光来实现的，复散射现象是散射光在传播过程中又遇到其他颗粒并二次或多次散射的现象。 根据米氏散射理论，一定粒径的颗粒产生固定角度的散射光，直接接收和识别这些散射光将得到与之对应的、准确的颗粒直径。如果接收和识别的是复散射光信号，将得到错误的结果，同时降低系数的分辨力。将悬浮颗粒的浓度控制在系统允许的最佳范围内，复散射现象可以将至最低。一般的，粒度分布测量是通过系统识别和接收光信号来实现的。而光型号的强弱又是悬浮液中的颗粒个数决定的。激光粒度仪测试中，悬浮液中颗粒浓度越高，散射光信号越强，但随之而来的复散射现象同时加剧，影响测量结果；反之悬浮液中的颗粒浓度越低，虽然复现象得到缓解，但信噪比下降，所以粒度分布测量过程中合适的颗粒浓度很重要。合理控制浓度，也会会控制复散射现象。在激光粒度的测试中，软件的修正也是非常重要。微纳独创的无约束自由拟合技术，不受任何函数限制，可真实反映颗粒的分布状态。针对激光粒度仪测量中的复散射，软件也可以根据测试样品的浓度对复散射现象进行修正，以达到最准确的测试结果。

光谱的多元散射校正是不是只用于气体和浆状物，对气体没有用？对光谱进行正交校正后为什么没有效果？

蒸发光散射检测器在保证样品洗脱条件下，不同流动相下，同一样品，同一进样体积，蒸发光散射检测器的检测结果相差很大？甚至是几倍的关系，这是为什么呀？谢谢！而DAD基本差不多！

我将做一个用光谱仪来测量细胞的散射光谱实验。现在有一台海洋公司的型号是hr4000cg-uv-nir的光谱仪。不知可不可以用来测量细胞的散射光谱。 对你们的提议，我太感谢了

在拉曼光谱的原理解释中,所有的资料和书籍上都说拉曼散射中没在发生频率变化的散射为瑞利散射,但根据所用激光的波长与所测试粒径大小的关系,我认为这一散射称其为米氏散射更为合适,因为其粒径比光源的波长大,已经不能称为瑞利散射了,不知我的理解对不对?请大家指教!

蒸发光散射器目前是已经是通用型检测器，采购的人也越来越多，但是比较的人却不多。[color=#DC143C][B]都来说说，你使用过的蒸发光散射器吧。包括品牌、大约价格、寿命、消耗如何等等。[/B][/color]

有关数据分析 是不是 要用到Scatchard方程，牵扯到散射光强度和动力学半径的关系这是我在看超声诱导蛋白聚合时有关动力学光散射看到的，不太懂，望专业人士指点 [em45]

激光散射检测器测分子量的大师请出来指点最近用安捷伦的的激光散射检测器和RI测绝对分子量，冲了两天，15度的基线波动一直降不下来啊，现在用的屈成氏的水。

设置同步扫描，波长差为0，发射滤光片设置1%衰减片。测得样品的共振散射峰强度和水接近。但是用日立测得样品有很强的散射峰，强度远高于水。请问是PE LS55参数没有设置正确吗？

[align=center][/align][align=center][/align][align=center][b]凝胶渗透色谱中光散射检测器与传统校正仪器的联用[/b][/align][align=center][/align][align=center][/align][u] [/u][align=center][/align]鉴于《中国药典分析检测技术指南》（2017-07-01版）最新版关于体积排阻色谱法即GPC/SEC方法中，添加了“激光光散射检测器为分子量型检测器……在溶液中，散射光的强度及其对散射角和溶液浓度的依赖性与溶质的分子量、分子尺寸、和形态有关。’可不使用分子量对照品，直接测定。 “可见光散射检测器是测量分子量、分子尺寸和形态有力的手段之一，而且其具备天然的优点，推而广之，势在必行。[align=center][/align]但是，对于有些实验室来说，已经具备带有RI检测器等传统校正仪器用户来讲，是否必须重新购买新设备呢？其实不然，我们可以对原有仪器做深入分析，适当的改造，添加一台单独的光散射检测器便可以组成新的联用系统。本文试着以Waters系统加Malvern小角光散射检测器，Agilent系统加MALS检测器为例，来说明怎么样连接升级。[align=center][/align][align=center][/align][b]光散射原理以及检测器的特点：[/b][align=center][/align]光散射一般情况下分三种方式。第一种是Static Light Scattering即静态光散射，也称为弹性，Rayleigh，或者经典的光散射。与入射光的波长相同。通过对散射光强度的角度和浓度依赖性的测量，获得散射分子量的大小和分布等信息。第二种是Dynamic Light Scattering即动态光散射，动态光散射得到散射粒子的扩散系数，进而可以计算粒子的流体力学体积。第三种是Raman Scattering即拉曼散射，散射发生在与入射波不同的波长上，可以提供某些结构信息。在这里，我们主要讨论的是SLS检测器的联用。静态光散射中的最基本公式就是Rayleigh方程：[align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align]对于小分子而言，（即Rg小于入射光波长的1/40，对于大部分激光光源而言小于10nm），形状因子P(θ)≈1.0，高分子的散射光是均匀的。此时各个角度散射光能力相同，这种情形下90度角是检测的最佳检测角度，即使用RALS。对于大分子而言, 高分子的形状因子P(q)不能忽略，且导致散射光的不均匀性，需要利用小角光散射LALS或者多角光散射MALS。[align=center][/align][align=center][/align][b]仪器联用的四个基本点：[/b][align=center][/align]第一，trigger触发信号的发出和接收[align=center][/align][list=1][*]手动进样模式下，直接在进样阀多数为六通阀，也有八通阀的情况的输出端子接到检测器的trigger正、负上；[*]自动进样模式下，多数仪器具备remoter连接，请确认是在泵系统上，还是自动进样系统上。并且注意是否添加外置放大信号器（如果需要添加的，往往需要在发出端的控制软件上，添加第三方事件）；[*]自动进样模式下，有明确的外接触发信号的，直接连接到检测器接收端；[/list][align=center][/align]第二，RI或者UV信号的输出和输入[align=center][/align][list=1][*]主板上带有模拟输出芯片的，标有明确的输出端子，直接接到检测器的输入端，注意正负和接地；[*]需要添加第三方的数模转换器，方可完成输出和输入；具体型号，大多数情况下咨询厂家工程师即可获取；[*]当输出端子和输入端不匹配时，需要验证后，改变端子的接头再进行连接；[/list][align=center][/align]第三，软件的兼容问题：[align=center][/align][list=1][*]购买检测器提供的软件；[*]购买兼容不同仪器的软件，市场上基于Calibraty系统兼容性的软件性能较高；[*]数据导出后，经过计算再导入；[/list][align=center][/align]第四，管路的连接和适用性测试：[align=center][/align][list=1][*]使用外径为1/16’ S,S的连接管路，接头均为标准接头连接；[*]内径选择需要根据泵后进样前，进样阀后色谱柱前，色谱柱后检测器前，检测器与检测器之间的不同连接来选择；[*]检测器器的连接顺序：a,是否破坏样品；b,流通池是否具备耐压性；c，流通池流出端是否有变径，d,是否需要并联[/list][align=center][/align][b]联用系统举例：[/b][align=center][/align][list=1][*]alliance of Waters与 TDA of Malvern联用：[/list][align=center][/align][align=center][/align]Alliance是waters公司经典的一款设备，但是只配有RI检测器。我们按照上述所描述进行了仪器连接。需要说明的是因为配有粘度检测器，可以按照UV-LS-RI-VIS顺序连接，但是由于2414 RI的waste出口变径变大问题，采取了RI与VIS并联的措施，也达到了较好的效果。[align=center][/align][align=center][/align][list=1][*]1290 system of Agilent 与 MALS of Viscotek联用：[/list][align=center][/align] MALS与1290联用也达到了预想的效果，得到了较好的数据。需要说明的是1，RI和UV数据均可以输入到MALS；2，在MALS之前一定要添加一个LS filter防止污染检测器，保证良好的基线水平。 [align=center][/align][align=center][/align] MALS与1290联用也达到了预想的效果，得到了较好的数据。需要说明的是1，RI和UV数据均可以输入到MALS；2，在MALS之前一定要添加一个LS filter防止污染检测器，保证良好的基线水平。

我的一个朋友于2008年5月份购买一台美国 ALLTECH 的蒸发光散射检测器，型号为 2000ELSD。 安装调试时基线比较好，流动相是：乙睛：水：三氟乙酸＝10：90：1，检测器的温度是：50℃。今年7月份时，发现基线不平稳，有杂质峰，之后 ALLTECH 及时上门清洗蒸发光散射检测器，但基线在 50℃ 的检测温度下仍然不平稳，只有把蒸发光散射检测器的检测温度提高到 80℃ 时基线才会平稳；当用纯乙睛做流动相时，检测基线也非常平稳。有一些样品也检测不出。 请问各位大哥、大姐，是否知道基线不平稳的原因？非常感谢！