法舒克

文献综述抽取某一个学科领域中的现有文献，总结这个领域研究的现状，从现有文献及过去的工作中，发现需要进一步研究的问题和角度。 文献综述是对某一领域某一方面的课题、问题或研究专题搜集大量情报资料，分析综合当前该课题、问题或研究专题的最新进展、学术见解和建议，从而揭示有关问题的新动态、新趋势、新水平、新原理和新技术等等，为后续研究寻找出发点、立足点和突破口。 文献综述看似简单．其实是一项高难度的工作。在国外，宏观的或者是比较系统的文献综述通常都是由一个领域里的顶级“大牛”来做的。在现有研究方法的著作中，都有有关文献综述的指导，然而无论是教授文献综述课的教师还是学习该课程的学生，大多实际上没有对其给予足够的重视。而到了真正自己来做研究，便发现综述实在是困难。 约翰 W.克雷斯威尔（John W. Creswell）曾提出过一个文献综述必须具备的因素的模型。他的这个五步文献综述法倒还真的值得学习和借鉴。 克雷斯威尔认为，文献综述应由五部分组成：即序言、主题1（关于自变量的）、主题2（关于因变量的）、主题3（关于自变量和因变量两方面阐述的研究）、总结。 1. 序言告诉读者文献综述所涉及的几个部分，这一段是关于章节构成的陈述。在我看也就相当于文献综述的总述。 2. 综述主题1提出关于“自变量或多个自变量”的学术文献。在几个自变量中，只考虑几个小部分或只关注几个重要的单一变量。记住仅论述关于自变量的文献。这种模式可以使关于自便量的文献和因变量的文献分开分别综述，读者读起来清晰分明。 3. 综述主题2融合了与“因变量或多个因变量”的学术文献，虽然有多种因变量，但是只写每一个变量的小部分或仅关注单一的、重要的因变量。 4. 综述主题3包含了自变量与因变量的关系的学术文献。这是我们研究方案中最棘手的部分。这部分应该相当短小，并且包括了与计划研究的主题最为接近的研究。或许没有关于研究主题的文献，那就要尽可能找到与主题相近的部分，或者综述在更广泛的层面上提及的与主题相关的研究。 5. 在综述的最后提出一个总结，强调最重要的研究，抓住综述中重要的主题，指出为什么我们要对这个主题做更多的研究。其实这里不仅是要对文献综述进行总结，更重要的是找到你要从事的这个研究的基石（前人的肩膀），也就是你的研究的出发点。 在我看来，约翰 W.克雷斯威尔所提的五步文献综述法，第1、2、3步其实在研究实践中都不难，因为这些主题的研究综述毕竟与你的研究的核心问题有距离。难的是第4步，主题3的综述。难在哪里呢？一是阅读量不够，找不到最相关的文献；二是分析不深入，找不到自己研究的“前人的肩膀”、出发点、研究的立足点、自己可能的突破等等。这才是真正的难点。所以，对于第4步主题3的综述，我个人的看法是“不能短”，而应当长。因为这个才是你需要精心分析综合比较的东西。 不管怎么说，约翰 W.克雷斯威尔所提的五步文献综述法，在没有更好的方法之前，这也算是一种相对可以仿效的文献综述方法。土豆：你的ID，你的帖子里对你要宣传的网站的广告，已经很多个类似这样的帖子了。版主没注意到这点还给你加分，下次我不再删除广告部分了，直接删帖封人。！！！！！

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哪位达人有布鲁克公司的红外发射率测试仪的原理说明书和中文操作手册阿，谢谢了阿。[em58] [em58] [em58]

第一课 色谱法概述 色谱法是一种重要的分离分析方法，它是利用不同物质在两相中具有不同的分 配系数(或吸附系数、渗透性)，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。在色谱技术中，流动相为气体的叫[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，流动相为液体的叫液相色谱。固定相可以装在柱内，也可以做成薄层。前者叫柱色谱，后者叫薄层色谱。根据色谱法原理制成的仪器叫色谱仪，目前，主要有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]和液相色谱仪。色谱法的创始人是俄国的植物学家茨维特。1905年，他将从植物色素提取的石油 醚提取液倒人一根装有碳酸钙的玻璃管顶端，然后用石油醚淋洗，结果使不同色素得到分离，在管内显示出不同的色带，色谱一词也由此得名。这就是最初的色谱法。后来，用色谱法分析的物质已极少为有色物质，但色谱一词仍沿用至今，在50年代，色谱法有了很大的发展。1952年，詹姆斯和马丁以气体作为流动相分析了脂肪酸同系物并提出了塔板理论。1956年范第姆特总结了前人的经验，提出了反映载气流速和柱效关系的范笨姆特方程，建立了初步的色谱理论。同年，高莱(Golay)发明了毛细管拄，以后又相继发明了各种检测器，使色谱技术更加完善。50年代末期，出现了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和质谱联用的仪器，克服了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]不适于定性的缺点。则年代，由于检测技术的提高和高压泵的出现，高效液相色谱迅远发展，使得色谱法的应用范围大大扩展。目前，由于高效能的色谱往、高灵敏的检测器及微处理机的使用，使得色谱法已成为一种分析速度快、灵敏度高、应用范围广的分析仪器。 在这里主要介绍[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析法。同时也适当介绍液相色谱法。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的 基本理论和定性定量方法也适用于液相色谱法。其不同之处在液相色谱法中介绍。

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克罗地亚政府27日通过了《京都议定书》,承诺在2012年以前温室气体排放量减少5%。 　　《京都协议书》1997年12月在日本京都举行的《联合国气候变化框架公约》第3次缔约方大会上通过,旨在限制发达国家温室气体排放,抑制全球变暖,规定从2008年到2012年期间,主要工业发达国家的温室气体排放量要在1990年的基础上平均减少5.2%,其中欧盟6种温室气体排放量削减8%,美国削减7%,日本削减6%。克罗地亚1999年已签署《京都议定书》,但当时政府表示正处于市场经济过渡时期,需要时间研究如何履行协议书。经8年讨论,昨天议会终于通过了议定书。目前,巴尔干地区只有克罗地亚和斯洛文尼亚批准了该议定书。

我们实验室以前开发的方法是用HPLC来检测的，但是灵敏度不够，不能满足检测要求，现在准备用GC-MS方法测定，灵敏度很高完全能满足要求，但是在开发过程中发现蔬菜样品溶液甚至试剂空白在克菌丹出峰位置都出现了较高的峰。现在还没有弄清怎么回事，求助大虾们能提供蔬菜中克菌丹的检测方法，在此谢过了。

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曾经几次上黑榜的美国宝洁公司的进口“品客”薯片，再次被检出使用了国内禁用的可致癌添加剂溴酸钾。记者昨（13）日走访广州市场发现，进口品客薯片在广州个别超市和便利店仍然有售。　　记者注意到，曾经几次上黑榜的美国宝洁公司的“品客”薯片，这次又有酸奶油洋葱味和比萨味两种不合格，不合格原因是添加剂溴酸钾超标。据了解，国际癌症研究机构已将溴酸钾的化合物列为致癌物质，我国在2005年已经禁止在面包中使用溴酸钾。　　记者昨天走访了华润万家、百佳等超市,发现各种口味的“品客”薯片摆满货架，不过这些“品客”薯片多为国产。在一些中小型超市和便利店,记者发现仍有美国进口的薯片在销售。记者在上下九步行街一进口食品专卖档口看到，三四种产自美国的“品客”薯片摆在货架上。档口老板称，这些薯片是从美国原装进口的,不少年轻人专门前来购买，销售状况一直不错。他表示，没有听说品客薯片查出问题，也未收到相关部门要求撤柜的通知。

曾经几次上黑榜的美国宝洁公司的品客薯片此次又有酸奶油洋葱味和比萨味两款再次被检出违禁致癌物质溴酸钾。前两次宝洁公司对此的解释一直是“[color=#DC143C]中国标准与欧美市场标准存在差异[/color]”。但昨天（14日），宝洁公司的品客薯片品牌在其公司官方网站上发表声明称，在全球范围内，不在任何品客薯片产品中添加溴酸钾，消费者完全可以放心。　　声明称，所有在中国生产和销售的品客薯片符合中国的有关法规要求，是安全的。[color=#DC143C]此次珠海出入境检验检疫局所检测的进口品客薯片属于未通过该公司正式授权进口的平行进口产品。公司正向有关部门详细了解此次产品检测及检测结果的详情，并就所涉及产品的真伪进行进一步的鉴定。[/color]　　宝洁方面表示，在全球范围内，不在任何品客薯片产品中添加溴酸钾。原料供应商也向宝洁证实，它们在生产过程中也未使用溴酸钾。另外，来自美国、韩国、新加坡以及我国香港地区等地的多个独立的及政府的检验结果也确认品客薯片中不含溴酸钾。

各位前辈，晚生最近查阅关于颗粒计数测试的一些资料，发现在光学方面主要有：光阻法、激光法。理论上讲光阻法测量下限不如激光法，不过光阻法也有不少仪器。那么光阻法优势在哪里和激光法测微粒有什么区别，两者在价位上是否有很大差异？另外光阻法原理测量时根据遮光区大小来测量粒径的，那么对于不同透明度的待测液体怎么处理？比如测水和油的颗粒数，透明度不同，即使颗粒相同，测量结果也会不同吧。 本人新手，希望各位大侠不吝赐教，欢迎各位讨论。

发现VIP中心的积分加油站可答题数目显示总是比实际数多一个 当问题答完后显示还有一个积分加油站可答题：1个

1、绵疫病 绵疫病危害下部老果较多。初期出现水浸状小斑，逐渐扩大产生白色棉絮状菌丝，果实内变黑，极易脱落。病果落地后，遇潮湿全果腐烂产生白霉，最后干缩，成为黑褐色僵果。发病初期，根据病情7~10天喷1次25%百菌清可湿性粉剂500倍液，或65%代森锌可湿性粉剂500倍液，连喷2~3次。 2、软腐病 软腐病主要危害果实。受害果最初病斑呈水浸状暗绿色，后变暗褐色，不久内部果肉腐烂发臭。果皮变白，失水后干缩，遇外力脱落。发病初期喷1：0.5：200的波尔多液，或新植霉素400倍液防治。 3、灰霉病 灰霉病以青果染病较重。病部呈水浸状，病斑圆形或近半圆形，暗绿色至灰白色，变软腐烂后，其上密生绿色霉层，病斑扩展到果实的1/3~1/2时脱落，全果腐烂干缩成僵果。可用75%百菌清可湿性粉剂500倍液或50%甲基硫菌灵（甲基托布津）150克对水75公斤喷雾。 4、炭疽病 炭疽病多发生在成熟的果实上，初期果实表皮上出现褐色或黑色病斑，并呈同心轮纹状凹陷，严重时整个病果烂掉脱落。发病初期及时喷洒80%代森锌可湿性粉剂500倍液，或50%福镁锌300~400倍液防治。 5、褐纹病 褐纹病初期为褐色近圆形病斑，稍凹陷，边缘明显，病果后期落地软腐，或留在枝上呈干腐状僵果。药剂防治可用65%福美锌500倍液喷雾，7~10天喷1次。

证书编号格式，之前听说国防科工局有发文，对证书编号格式进行了规范，请问大家有相关的文件吗？

请问高手们是否有斯派克M8型软件中文说明书？有能否发到我的邮箱中，谢谢！使用过程中感到需要学习的东西太多，可惜本人在英语水平有限，能够掌握的太少！感谢！！

我所购买了一台美国福禄克公司无创动态血压模拟仪，型号：BP pump2/（0~400）mmHg，出厂编号：2322050。昨天已开箱发现没有中文说明书，所以向版友求该仪器的中文说明书。恳请支援，谢谢！该仪供货者已委托国家院校准，校准依据是压力控制器的规程还是规范，记不太清了。但校准证书只给出上升和下降时，静压的校准结果。让我有些担心，动态的参数指标，岂不是没有得到保证吗？

求 斯派克Spectro midex 操作说明书 最好中文 英文也可以。有的话发到 satmxf@shimadzu-sat.com.cn 非常感谢

做指纹图谱，已经选定了参照物峰，各共有峰面积与参照物峰面积的比值与配制中药制剂样品时所称的克数无关吗？也就是说只要所称量的样品的克数不管多少，相对峰面积比值是不会变的，是吗？还是只要在一定的范围内（比如规定0.5g，称量范围为0.46g~0.54g），相对峰面积比值是不会随所称量样品的克数改变的？期待解答中……谢谢啦！！！

每天食用500克左右蔬菜，其中深色（深绿色、红色、橘红色和紫红色等）蔬菜至少占一半。血糖平稳时，每天可摄入200克水果，选低升糖指数的水果，比如苹果、梨、柚子、草莓等。

一朵花有一朵花盛开的时间，一棵树有一棵树成材的年限。不要着急，只要让每个今天都优于昨天，改变就会在你意想不到的时候发生。

基因技术让树木发光 阿凡达中发光树或成真(图) http://news.xinhuanet.com/tech/2010-11/29/12826658_11n.jpg科学家们希望未来用树木作为街灯照明(科学网-kexue.com配图)　　北京时间11月29日消息，科学家们正在试图通过改造树木基因令其能够发出光亮，如果能够成功，这些树木就能作为不需要电源的自然街灯。　　据国外媒体报道，一组研究人员希望借助基因的研究，将诸如萤火虫发出的生物荧光(Bioluminescence)移植到各种不同的生物中去，以使得这些生物能够产生光亮。生物发光植物将有助于作为传统街灯取代品，即便需要更多的光亮，也可以通过这些植物的生长而实现。http://news.xinhuanet.com/tech/2010-11/29/12826658_21n.jpg这种技术甚至可以应用到各种指示牌上(科学网-kexue.com配图)　　剑桥大学的科学家尝试将萤火虫基因与一种发光海洋细菌创造出一个“生物积木(Biobricks 也称生物砖块、生物零件)”来插入至目标的基因组，从而产生名为氧化荧光素(oxyluciferin)的物质，产生发光效果。届时，科学家们可以通过插入改良后的基因来控制诸如发光的颜色等特征。　　“生物积木”的概念最早由美国麻省理工学院人工智能实验室汤姆·奈特教授提出。据科学网(kexue.com)了解，所谓的“标准生物积木”，是一些简单拼装好了的，具有特定功能的DNA小片段——也可以看成具备某种性状的积木单元。　　研究队伍成员之一的遗传学家西奥-桑德森(Theo Sanderson)表示，这是个绝妙的设想，目前并没有做出最终的“发光树”，但会做出一套“零件”，来让未来研究者更方便的进行研发。研究团队表示这个项目未来有着巨大的商业潜力，可以用于取代目前传统的街道照明系统，并且这种方式不需用电，非常环保。http://news.xinhuanet.com/tech/2010-11/29/12826658_31n.jpg阿凡达中那些著名的发光树有望成真(科学网-kexue.com配图)　　之前有科学家们尝试过利用人类的废弃物来作为燃料，此外还有研究团队发现，利用金纳米粒子可以诱导植物叶子发光，使树叶发出红色的光芒。也许就在不远的将来，电影《阿凡达》中那些给人留下印象深刻的发光树木，即将在人们的生活中实现。

[font=宋体][font=宋体]单克隆抗体是由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤[/font][font=Calibri](hybridoma)[/font][font=宋体]抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞杂交瘤。[b]下面为大家讲解[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production]制备单克隆抗体[/url]药物的工艺流程步骤[/b]：[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、抗原提纯与动物免疫[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]107[/font][font=宋体]个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择与所用骨髓瘤细胞同源的[/font][font=Calibri]BALB/c[/font][font=宋体]健康小鼠，鼠龄在[/font][font=Calibri]8[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]12[/font][font=宋体]周，雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡，可同时免疫[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]只小鼠。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫过程和方法与多克隆抗血清制备基本相同，因动物、抗原形式、免疫途径不同而异，以获得高效价抗体为最终目的。免疫间隔一般[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]周。一般被免疫动物的血清抗体效价越高，融合后细胞产生高效价特异抗体的可能性越大，而且单克隆抗体的质量（如抗体的浓度和亲和力）也与免疫过程中小鼠血清抗体的效价和亲和力密切相关。末次免疫后[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]天，分离脾细胞融合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择瘤细胞株的最重要的一点是与待融合的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞同源。如待融合的是脾细胞，各种骨髓瘤细胞株均可应用，但应用最多的是[/font][font=Calibri]Sp2/0[/font][font=宋体]细胞株。该细胞株生长及融合效率均佳，此外，该细胞株本身不分泌任何免疫球蛋白重链或轻链。细胞的最高生长刻度为[/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，倍增时间通常为[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]15h[/font][font=宋体]。融合细胞应选择处于对数生长期、细胞形态和活性佳的细胞（活性应大于[/font][font=Calibri]95[/font][font=宋体]％）。骨髓瘤细胞株在融合前应先用含[/font][font=Calibri]8-[/font][font=宋体]氮鸟嘌呤的培养基作适应培养，在细胞融合的前一天用新鲜培养基调细胞浓度为[/font][font=Calibri]2 [/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，次日一般即为对数生长期细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在体外培养条件下，细胞的生长依赖适当的细胞密度，因而，在培养融合细胞或细胞克隆化培养时，还需加入其他饲养细胞（[/font][font=Calibri]feeder cell[/font][font=宋体]）。常用的饲养细胞为小鼠的腹腔细胞，制备方法为用冷冻果糖液注入小鼠腹腔，轻揉腹部数次，吸出后的液体中即含小鼠腹腔细胞，其中在巨噬细胞和其他细胞。亦有用小鼠的脾细胞、大鼠或豚鼠的腹腔细胞作为饲养细胞的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在制备饲养细胞时，切忌针头刺破动物的消化器官，否则所获细胞会有严重污染。饲养细胞调至[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/ml[/font][font=宋体]，提前一天或当天置板孔中培养。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、细胞融合[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞融合是杂交瘤技术的中心环节，基本步骤是将两种细胞混合后加入[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]使细胞彼此融合。其后吧培养液稀释[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]，消除[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]的作用。将融合后的细胞适当稀释，分置培养板孔中培养。融合过程中有几个问题应特别注意。①细胞比例：骨髓瘤细胞与脾细胞的比值可从[/font][font=Calibri]1:2[/font][font=宋体]到[/font][font=Calibri]1:10[/font][font=宋体]不等，常用[/font][font=Calibri]1:4[/font][font=宋体]的比例。应保证两种细胞在融合前都具有较高活性。②反应时间：在两种细胞的混合细胞悬液中，第[/font][font=Calibri]1min[/font][font=宋体]滴加[/font][font=Calibri]4.5ml[/font][font=宋体]培养液；间隔[/font][font=Calibri]2min[/font][font=宋体]滴加[/font][font=Calibri]5ml[/font][font=宋体]培养液，尔后加培养液[/font][font=Calibri]50ml[/font][font=宋体]。③培养液的成分：对融合细胞，良好的培养液尤其重要，其中的小牛血清、各种离子和营养成分均需严格配制。如融合效率降低，应随时核查培养基情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、有限稀释法[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]筛选阳性株一般选用的骨髓瘤细胞为[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]敏感细胞株，所以只有融合的细胞才能待续存活一周以上。融合细胞呈克隆生长，经有限稀释后（一般稀释至[/font][font=Calibri]0.8[/font][font=宋体]个细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]孔），按[/font][font=Calibri]Poisson[/font][font=宋体]法计算，应有[/font][font=Calibri]36[/font][font=宋体]％的孔为[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]个细胞[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]孔。细胞培养至覆盖[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]％～[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]％孔底时，吸取培养上清用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测抗体含量。首先依抗体的分泌情况筛选出高抗体分泌孔，将孔中细胞再行克隆化，尔后进行抗原特异的[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测定，选高分泌特异性细胞株扩大培养或冻存。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、单克隆抗体的制备和冻存[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]筛选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备，因为融合细胞随培养时间延长，发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用[/font][font=Calibri]BALB/c[/font][font=宋体]小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生，每只小鼠可收集[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]10ml[/font][font=宋体]的腹水，有时甚至超过[/font][font=Calibri]40ml[/font][font=宋体]。该法制备的腹水抗体含量高，每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外，腹水中的杂蛋白也较少，便于抗体的纯化。接种细胞的数量应适当，一般为[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]105/[/font][font=宋体]鼠，可根据腹水生长情况适当增减。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选出的阳性细胞株应及早冻存。冻存的温度越低越好，冻存于液氮的细胞株活性仅有轻微的降低，而冻存在－[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃冰箱则活性改变较快。细胞不同于菌种，冻存过程中需格外小心。二甲亚砜（[/font][font=Calibri]DMSO[/font][font=宋体]）是普遍应用的冻存保护剂。冻存细胞复苏后的活性多在[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]％～[/font][font=Calibri]95[/font][font=宋体]％之间。如果低于[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]％，则说明冻存复苏过程有问题[/font][font=Calibri].[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、单克隆抗体的纯化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体的纯化方法同多克隆抗体的纯化，腹水特异性抗体的浓度较抗血清中的多克隆抗体高，纯化效果好。按所要求的纯度不同采用相应的纯化方法。一般采用盐析、凝胶过滤和离子交换层析等步骤达到纯化目的，也有采用较简单的酸沉淀方法。目前最有效的单克隆抗体纯化方法为亲和纯化法，多用葡萄球菌[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]蛋白或抗小鼠球蛋白抗体与载体（最常用[/font][font=Calibri]Sepharose[/font][font=宋体]）交联，制备亲和层析柱将抗体结合后洗脱，回收率可达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]％以上。蛋白可与[/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG2a[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG2b[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]结合，同时还结合少量的[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]。洗脱液中的抗体浓度可用紫外光吸收法粗测，小鼠[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]单克隆抗体溶液在[/font][font=Calibri]A280nm[/font][font=宋体]时，[/font][font=Calibri]1.44[/font][font=宋体]（吸光单位）相当于[/font][font=Calibri]1mg/ml[/font][font=宋体]。经低[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱后在收集管内预置中和液或速加中和液对保持纯化抗体的活性至关重要。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注：[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-purification][b]单克隆抗体纯化[/b][/url][/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-purification[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font]

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