当前位置: 仪器信息网 > 行业主题 > >

超分辨

仪器信息网超分辨专题为您整合超分辨相关的最新文章,在超分辨专题,您不仅可以免费浏览超分辨的资讯, 同时您还可以浏览超分辨的相关资料、解决方案,参与社区超分辨话题讨论。

超分辨相关的论坛

  • 亚细胞结构的STED超分辨成像技巧

    STED超分辨成像具有制样便捷、成像快速、能够同时多色观察、可实现Z轴高分辨并进行三维重建等特点,在超分辨成像领域应用广泛。本次微课从样品制备、超分辨成像图像采集的过程以及图像后处理三个方面,详细介绍STED

  • 实时超分辨率显微成像系统特点介绍

    [url=http://www.f-lab.cn/microscopes-system/storm.html][b]实时超分辨率显微成像系统[/b][/url]突破了光学显微镜的半波长分辨率极限,提供了比宽视场,共聚焦显微镜更好分辨率。实时超分辨率显微成像系统采用尼康或奥林巴斯显微镜,Chroma 滤波片,Andor公司EMCCD相机以及独特的照明系统,为客户提供全球同步的超分辨率成像系统。[img=实时超分辨率显微成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/storm-2.JPG[/img][b]实时超分辨率显微成像系统特点[/b]横向分辨率可达20nm,轴向分辨率可达40nm实时和线下图像重建GPU加速处理图像先进的自动聚焦硬件高分辨率X-Y-Z工作台灵活的配置[img=实时超分辨率显微成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/storm-1.JPG[/img]实时超分辨率显微成像系统:[url]http://www.f-lab.cn/microscopes-system/storm.html[/url]

  • 光镊结合STED超分辨技术揭示DNA与蛋白相互作用

    光镊结合STED超分辨技术揭示DNA与蛋白相互作用

    [img=,500,95]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021007141220_851_981_3.jpg!w690x132.jpg[/img]1 普通共聚焦(左半部分)和STED超分辨(右半部分)检测DNA蛋白互作效果对比。(5nM TFAM 647N,恒力4pN)[b]STED 超分辨[/b]单分子水平定量分析DNA与蛋白的相互作用要求技术水平达到在复杂的生物微环境中保证超高的时间分辨率。这种体内复杂的生物学反应尤其常见于在体外模拟体内实验,比如高浓度的蛋白与不断变化的DNA相互作用。采用受激发射损耗显微技术(STED)能够实现快速对复杂的DNA进行高分辨的扫描。LUMICKS公司研发的SuperC-Trap™ 技术结合STED,能够实现高分辨率可视化的研究多蛋白结合的DNA反应动力学。Figure 1 显示实时观测荧光标记的高浓度(大约 5nM)TFAM转录因子与λ-DNA的相互作用。SuperC-Trap™ 采用光镊技术原位拉直DNA,然后结合STED技术高分辨率(≥50 nm)高频率(≤200 Hz)线性追踪TASM的动态变化。STED 能够实现对单个结合或非结合、寡聚化蛋白基团的实时追踪(Figure 1, 右半部份)。然而利用共聚焦显微镜却分辨不出来 (Figure 1,左半部分)。共聚焦的点状激发原理决定了其只能追踪分布密度比较高的蛋白分子的动态变化,却不能进行广角扫描。而且采用共聚焦技术位置比较相近的两种蛋白也很难被分辨。但是利用STED的受激发射损耗技术可突破衍射极限,可以轻易分辨两种相邻蛋白。[img=,500,111]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021023463820_3909_981_3.png!w690x154.jpg[/img]2 光镊技术(红色部分)结合共聚焦技术(绿色部分)模式图,多激发模式。[img=,500,103]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021024169794_3597_981_3.png!w690x143.jpg[/img]3 光镊技术(红色部分)结合STED超分辨技术(黄色部分)模式图,单激发模式。[img=,500,198]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021025123269_5345_981_3.png!w535x212.jpg[/img]4 共聚焦 (左) 和超分辨率显微镜STED (右)分辨率对比。647N-标记的结合DNA的限制性内切酶。5 共聚焦(蓝色)和超分辨率显微镜STED(红色)对两个相邻蛋白的分辨率对比。[b]SuperC-Trap[/b]共聚焦显微镜和超分辨显微镜的区别很明显。从Figure 4中可以看出超分辨显微镜能够清晰的将两种相邻蛋白分辨出来,而共聚焦的分辨率并不能达到。这种对比明显的说明了超分辨在精确定位上的优势。LUMICKS公司的SuperC-Trap不仅能够实现实时超分辨可视化的观察,而且还可以在亚pN水平、亚nm分辨率监测分子间的相互作用。结合我们的超稳定液流系统和独立的整合软件,使得整个实验在数分钟之内就能完成。

  • 【转帖】【Cell】超分辨率细胞成像研究获新进展

    作为第一位获美国麦克阿瑟基金会“天才奖”的华人女科学家,庄晓薇教授获得了许多重要成果,尤其是在生物物理显微成像领域,近期庄晓薇教授在《细胞》发表了题为“Breaking the Diffraction Barrier: Super-Resolution Imaging of Cells”,描述了超分辨率细胞成像的最新进展。传统光学显微镜受限于光的波长,对于200nm以下的小东西只能摇头兴叹。虽然电子显微镜可以达到纳米级的分辨率,但通电的结果容易造成样品的破坏,因此能观测的样本也相当有限。分子生物学家虽然可以做到把若干想观察的蛋白质贴上荧光卷标,但这些蛋白质还是经常挤在一块,在显微镜下分不出谁是谁。这几年高分辨率荧光显微镜跨越了一大步,使得研究者可以从纳米级观测细胞突起的伸展,从而宣告200—750纳米大小范围的模糊团块的时代结束了。比如利用光敏定位显微镜:PALM可以用来观察纳米级生物,相较于电子显微镜有更清晰的对比度,如果给不同蛋白接上不同的荧光标记,就能用来进一步研究蛋白质间的相互作用。庄晓薇研究组一直在研究如何用光敏开关探针来实现单分子发光技术。他们希望能用光敏开关将原本重叠在一起的几个分子图像暂时分开,这样就能获得单分子图像,从而提高分辨率。2004年庄晓薇研究组偶然发现某种花青染料具有光控开关,也就是说,通过使用不同颜色的光,可以随意地把它们激活成荧光状态和失活成黑暗状态。自此庄晓薇生开始研究这些光控探针,用它们来短暂地分离个体分子在空间上的重叠影像从而提高分辨率。之后这一研究组在Nature Methods杂志上发表文章,命名了一种随机光学重建显微镜(stochastic optical reconstruction microscopy, STORM)。使用STORM可以以20nm的分辨率看到DNA分子和DNA-蛋白质复合体分子。这一方法基于光子可控开关的荧光探针和质心定位原理,在双激光激发下荧光探针随机发光,通过分子定位和分子位置重叠重构形成超高分辨率的图像,其空间分辨率目前可达20nm。STORM虽然可以提供更高的空间分辨率,但成像时间往往需要几分钟,同时还不能满足活体实时可视的成像的需要,发展空间很大。近期庄晓薇研究组也在Science杂志上发表了他们的3D STORM成像成果,该技术的空间分辨率比以往所有光学3D成像技术的分辨率都要高出10倍。研究人员展示了用3D STORM成像技术拍摄的肾细胞内微管结构图和其它的分子结构图。随后,他们又进一步将该技术发展成了多色3D成像技术(multicolor 3D imaging)。除了庄晓薇研究组之外,另外一个华人研究团队在这方面也获得了杰出成果,来自哈佛大学的谢晓亮教授在单分子光谱检测及其在生命科学中的应用方面也作出了许多贡献,十年前,谢晓亮教授因为发布了CARS显微技术而引发了巨大轰动。这种技术通过一种叫做自发拉曼散射的现象来增强信号。在自发拉曼散射中,样品内的化学键能够改变通过其中的光的波长。更早使用的拉曼散射显微术要求的激光功率很高,而且有时候需要曝光时间长达一天。近期谢晓亮教授研究组将SRS显微技术与核磁共振成像(MRI)技术联合起来,从而能快速灵敏的捕捉活体组织中分子运动,比如血细胞挤压通过血管的过程。这项技术镜头分辨程度达到亚细胞水平,可记录下蛋白、脂肪及细胞内液的情况。由于SRS显微镜可以探测到原子间化学键的共振,因此无需荧光标记。研究人员认为SRS显微镜可以在肿瘤摘除手术方面有所帮助,加快手术进程。传统的样本分析需要花费约20分钟,SRS 显微镜几乎可以做到实时扫描。同多种常用的观察生物分子的技术相比,新型SRS显微技术优势明显:它能采集分析照射生物样本的近30%激光,比传统SRS显微镜高出30倍;并且不需要插入荧光标记,避免了绿色荧光标记蛋白质扰乱生物路径或压住较小生物分子的问题。此外,传统的红外显微镜空间分辨率太低,并需要给样本脱水;自然的拉曼显微镜需要很高的激光能量,整体耗时很长,在活样本中的应用受到限制;相干反斯托克拉曼散射显微镜在拍摄除了脂质以外的大多数分子时对比度不够,而新型SRS显微技术都能突破这些局限。(来源:生物通 万纹)

  • 【网络讲座】快速原子力显微镜和超分辨光学系统联用技术 (2016-11-11 10:00 )

    【网络讲座】快速原子力显微镜和超分辨光学系统联用技术 (2016-11-11 10:00 )

    【网络讲座】:快速原子力显微镜和超分辨光学系统联用技术【讲座时间】:2016-11-11 10:00【主讲人】:樊友杰先生,JPK Instruments AG,中国区技术负责人。樊先生长期从事原子力显微镜在生物学领域的成像与力学表征以及高速原子力显微镜与先进光学系统(如Raman/STED)的联用工作。【会议简介】原子力显微镜由于其对样品的是否导电或是否处于液体环境没有要求被广泛应用于科学研究的各个领域。原子力显微镜可以获得样品役区域的表面形貌和力学性质(如粘性和硬度等)。随着应用领域的不断扩展和对仪器性能越来越高的要求,尤其是生物研究者希望能实时监测细胞和蛋白分子的反应过程,对原子力的扫描速度提出了越来越高的要求。传统的原子力的扫描速度已经无法满足需要了。同时因为原子力只能得到形貌和力学性质而无法获得样品的化学信息和样品内部结构,研究者希望能将原子力与光学仪器联用起来,这样,就能同时获得同区域的原子力信息和光学信息。本次的webinar,将会为大家带来JPK公司的最新快速原子力显微镜与超分辨光学系统联用的最新进展。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件:只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名截止时间:2016-11-11 10:003、报名参会:http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/2174http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609271102_612272_2507958_3.jpg扫描二维码,报名参会4、报名及参会咨询:QQ群—290101720,扫码入群“大讲堂”http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191701_669141_2507958_3.gif

  • 【网络讲堂】快速原子力显微镜和超分辨光学系统联用技术

    http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/2174原子力显微镜由于其对样品的是否导电或是否处于液体环境没有要求被广泛应用于科学研究的各个领域。原子力显微镜可以获得样品役区域的表面形貌和力学性质(如粘性和硬度等)。随着应用领域的不断扩展和对仪器性能越来越高的要求,尤其是生物研究者希望能实时监测细胞和蛋白分子的反应过程,对原子力的扫描速度提出了越来越高的要求。传统的原子力的扫描速度已经无法满足需要了。同时因为原子力只能得到形貌和力学性质而无法获得样品的化学信息和样品内部结构,研究者希望能将原子力与光学仪器联用起来,这样,就能同时获得同区域的原子力信息和光学信息。 本次的webinar,将会为大家带来JPK公司的最新快速原子力显微镜与超分辨光学系统联用的最新进展。

  • 美德科学家因超分辨率荧光显微镜获诺贝尔化学奖(转载)

    瑞典皇家科学院8日宣布,将2014年诺贝尔化学奖授予美国科学家埃里克·贝齐格、威廉·莫纳和德国科学家斯特凡·黑尔,以表彰他们为发展超分辨率荧光显微镜所作的贡献。 诺贝尔化学奖评选委员会当天声明说,长期以来,光学显微镜的分辨率被认为不会超过光波波长的一半,这被称为“阿贝分辨率”。借助荧光分子的帮助,今年获奖者们的研究成果巧妙地绕过了经典光学的这一“束缚”,他们开创性的成就使光学显微镜能够窥探纳米世界。如今,纳米级分辨率的显微镜在世界范围内广泛运用,人类每天都能从其带来的新知识中获益。 声明还说,黑尔于2000年开发出受激发射损耗(STED)显微镜,他用一束激光激发荧光分子发光,再用另一束激光消除掉纳米尺寸以外的所有荧光,通过两束激光交替扫描样本,呈现出突破“阿贝分辨率”的图像。贝齐格和莫纳通过各自的独立研究,为另一种显微镜技术——单分子显微镜的发展奠定了基础,这一方法主要是依靠开关单个荧光分子来实现更清晰的成像。2006年,贝齐格第一次应用了这种方法。因此,这两项成果同获今年诺贝尔化学奖。 今年诺贝尔化学奖奖金共800万瑞典克朗(约合111万美元),将由三位获奖者平分。

  • 中国科大实现世界最高分辨率单分子拉曼成像

    《自然》审稿人:“该领域迄今质量最高的顶级工作”2013年06月06日 来源: 科技日报 作者: 吴长锋 最新发现与创新 http://www.stdaily.com/stdaily/pic/attachement/jpg/site2/20130606/011370453619890_change_hzp3622_b.jpg 在绿色入射激光的激发下,处于STM纳腔中的卟啉分子受到高度局域且增强的等离激元光的强烈影响,使得分子的振动指纹信息可以通过拉曼散射光进行高分辨成像。 科技日报合肥6月5日电 (记者吴长锋)记者从中国科学技术大学了解到,该校的科学家们在国际上首次实现亚纳米分辨的单分子光学拉曼成像,将具有化学识别能力的空间成像分辨率提高到前所未有的0.5纳米。国际权威学术期刊《自然》杂志于6月6日在线发表了这项成果。世界著名纳米光子学专家Atkin教授和Raschke教授在同期杂志的《新闻与观点》栏目以《光学光谱探测挺进分子内部》为题撰文评述了这一研究成果。《自然》三位审稿人盛赞这项工作“打破了所有的纪录,是该领域创建以来的最大进展”,“是该领域迄今质量最高的顶级工作,开辟了该领域的一片新天地”,“是一项设计精妙的实验观测与理论模拟相结合的意义重大的工作”。 这一成果是由该校微尺度物质科学国家实验室侯建国院士领衔的单分子科学团队董振超研究小组完成的,博士生张瑞、张尧为论文共同第一作者。 光的频率在散射后会发生变化,而频率的变化情况取决于散射物质的特性,这是物理学上获得诺贝尔奖的著名的“拉曼散射”。“拉曼散射光中包含了丰富的分子振动结构的信息,不同分子的拉曼光谱的谱形特征各不相同,因此,正如通过人的指纹可以识别人的身份一样,拉曼光谱的谱形也就成为科技工作者识别不同分子的‘指纹’光谱。”论文通讯作者之一的董振超教授介绍说,拉曼光谱已经成为物理、化学、材料、生物等领域研究分子结构的重要手段。 上世纪70年代以来,随着表面增强拉曼散射技术,特别是针尖增强拉曼散射(TERS)技术的发展,光谱探测的灵敏度以及拉曼成像的分辨率都有了极大提高。“迄今,科学家们已将TERS测量的最佳空间成像分辨率发展到几个纳米的水平,但这显然还不适合于对单个分子进行化学识别成像。”董振超说。 微尺度实验室单分子科学团队多年来一直致力于自主研制科研装备,发展了将高分辨扫描隧道显微技术与高灵敏光学检测技术融为一体的联用系统。他们利用针尖与衬底之间形成的纳腔等离激元“天线”的宽频、局域与增强特性,通过与入射光激发和分子拉曼光子发射发生双重共振的频谱匹配调控,实现了亚纳米分辨的单个卟啉分子的拉曼光谱成像,使化学识别的分辨率达到前所未有的0.5纳米,可识别分子内部的结构和分子在表面上的吸附构型。 “可以说,在任何需要在分子尺度上对材料的成分和结构进行识别的领域,该项研究成果都有很大的用途。”董振超说,这项研究对了解微观世界,特别是微观催化反应机制、分子纳米器件的微观构造和包括DNA测序在内的高分辨生物分子成像,具有极其重要的科学意义和实用价值,也为研究单分子非线性光学和光化学过程开辟了新的途径。 《科技日报》(2013-06-06 二版)

  • 低分辨质谱与高分辨质谱

    杂质分子量为300.1,用低分辨全扫描的分子离子301.1,二级碎片为212.2和86.2,用高分辨定性时分子离子为301.1353,但二级碎片却与低分辨质谱不太一致,分别为198.0354和86.0902,这是因为仪器不一样导致的吗?低分辨是安捷伦三重四级,高分辨质谱为waters飞行时间质谱,同一物质二级碎片不一致是可以接受的吗?

  • 求助ESI低分辨和ESI高分辨质谱的差别原理?

    求助各位老师专家,低分辨质谱分辨率低,但灵敏度为什么会高?高分辨质谱是什么原理可以让分辨率提高?为什么灵敏度会较低?最近学习高分辨,产生了很多疑问,谢谢指导!

  • 【原创大赛】高分辨质谱数据系统源程序的设计

    响应斑竹的号召,现献上一篇"高分辨质谱数据系统源程序的设计".参加五届原创大赛.谢谢朋友们的青睐,邀请我参加团队.因此这篇文章是以"平凡的独特"团队名义出马的.希望大家喜欢. 高分辨质谱数据系统源程序的设计Daichaozheng 2004年在全国有机质谱会议上与两位同事共同发表了题为“高分辨质谱数据系统的研制”一文。由于篇幅的限制,文章仅对系统的功能作了大致的描述,没有具体解释编写程序的内容。今天在此,借质谱版块宝地将高分辨质谱数据系统的源程序公布出来,希望能与有兴趣的朋友们切磋。高分辨采集采用较慢的磁场扫描速度。首先按常规进行质量校正,为了避免仪器不稳定带来的系统误差,样品与标样同时进入,数据采集前要确认“高分采集” 钮。采集完成后进入“高分数据”处理。从文件目录中选择要处理的高分数据文件。从总离子流图上选择任一次扫描。屏幕上方出现高分连续谱图,中间是中分辨棒图。用鼠标右键在中分辨谱图点击可在连续谱图上标明相应的峰。采用这种方法把高分连续谱图上标样的两个峰识别出来。用鼠标左键划取高分连续谱图局部以放大。在屏幕上方填入标样峰的精确质量,用鼠标右键在高分连续谱图点击两个标样峰。两个标样峰之间各峰的精确质量即可得到。对此工作希望进一步了解的朋友可想法与武汉大学或河北大学联系交流。因为近10年了他们的VG质谱仪一直采用的这套数据系统。VB源程序如下:

  • 【质谱比较】高分辨质谱与低分辨质谱的区别?

    高分辨质谱与低分辨质谱不管在仪器上还是应用上都不一样,那我们就一起来谈谈这个问题吧本期主题:高分辨质谱与低分辨质谱讨论内容:1、高分辨质谱与低分辨质谱的分子量范围2、高分辨质谱与低分辨质谱的灵敏度差异3、高分辨质谱与低分辨质谱的定性定量...................等等相关的讨论筒子们,赶快参与吧,让新手也好对质谱有个全面了解~~~==========质=谱=比=较=帖=子=汇=总==========1、无机质谱与有机质谱的离子体形成区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120503/4012287/2、气质与液质的离子源区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120505/4016562/3、ICPMS、GCMS、LCMS气体的选择与使用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120507/4019049/4、质谱的进样方式与进样接口的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120510/4025193/5、质谱质量分析器的类型、区别及特点http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120519/4042099/6、高分辨质谱与低分辨质谱的区别http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120525/4053208/

  • 【求助】求助到底是高分辨还是低分辨

    拿到一个谱图,除了问测试者,怎样知道是高分辨还是低分辨质谱,谱图有4位数字,但是通过计算,与精确计算分子量差0.2255,高手指点一下,急。软件是masslynx,如果是高分辨,怎么校正,有没有用这个软件的高手啊!还有UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS测得的是高分辨还是低分辨数据啊。

  • 【求助】求助:高分辨解析氧化铁晶格

    求助各位大虾,我刚做了一个高分辨(图片,锐化及傅立叶变换见附件),但不知道怎么去解析,希望各位高人指点.  样品为超顺磁性纳米材料(四氧化三铁或gama-氧化铁中的一种,自己合成的,现在就是不知道到底是哪一种),做了XRD,但是二者的衍射图谱太接近了,基本无法区分,于是做了高分辨,但是除了能从图上量出晶面距d和晶面夹角外,我不知道还能得到哪些有用的信息,不知道该从何分析,希望高手指点.  我将量出来的晶面距与四氧化三铁和gama-氧化铁的标准PDF卡片对比,又有以下困难:1没有与我量出来的d值对应的(但从XRD可以断定就是二者之一) 2四氧化三铁和gama-氧化铁的标准PDF卡片上看到它们相近的d值所对应的hkl值是一样的,不同的是,四氧化三铁是面心结构,gama-氧化铁是cubic(不知道是不是指简单立方,是否能从这点下手?)[em49]

  • 高分辨率激光共焦显微成像技术新进展

    共焦显微镜因其高分辨率和能三维立体成像的优点被广泛应用在生物、医疗、半导体等方面。文章首先分析了影响共焦显微镜分辨率的因素,主要有光源、探测器孔径和杂散光等;并结合这些因素介绍了双光子共焦碌微镜、彩色共焦显微镜、荧光共焦显微镜、光纤共焦显微镜;然后从提高系统成像速度的方面介绍了波分复用共焦显微镜和频分复用共焦显微镜;最后分析了共焦显微镜的发展趋势。一、引言随着人们对于生物医学的研究,传统的光学显微镜已经无法满足研究的需要,人们需要可以实现三维成像的显微镜。1957年Marvin Minsky提出了共焦扫描显微镜的原理。1969年,耶鲁大学的Paul Davidovits和M.David Egger设计了第一台共焦显微镜,1987年第一台商业化共焦显微镜的问世,真正实现了三维立体成像。与普通光学显微镜相比,共焦显微镜具有极其明显的优点:能对物体的不同层面进行逐层扫描,从而获得大量的物体断层图像;可以利用计算机进行图像处理;具有较高的横向分辨率和纵向分辨率;对于透明和半透明物体,可以得到其内部的结构图像;还可以对活体细胞进行观察,获取活细胞内的信息,并对获得的信息进行定量分析。自共焦显微原理被提出以来,引起了研究者的广泛关注,提高显微系统的分辨率和改善系统的性能是研究者开发新型显微镜时考虑的主要因素。近几十年,国内外学者通过对共焦显微成像系统的三维点扩散函数、光学传递函数等方面的分析,得出影响显微系统分辨率的因素,主要包括系统的激励光源、探测器孔径、杂散光等。此外,共焦显微镜的成像速度也是决定系统性能的一个重要因素,专家们也一直在进行提高系统成像速度的研究。本文主要从提高显微系统分辨率和系统成像速度这两个方面来介绍共焦显微镜的发展情况。二、共焦扫描显微镜分辨率的提高光源、探测器孔径和杂散光等是影响共焦显微镜分辨率的几个主要因素,因此可以通过改善这些方面来提高显微系统的分辨率。1.光源显微镜的成像性质在很大程度上取决于所采用光源的相干性,有关研究表明,光源相干性好的系统其分辨率要比相干性差的系统要好,并且照明光源对分辨率的改变范围达到了26.4%。因此,选取适合的照明光源对提高显微系统的分辨率有很大帮助。常规的共焦扫描显微镜主要使用普通单色激光作为光源,随着技术的进步,目前已经出现了使用飞秒激光、超白激光、高斯光束作为光源的共焦显微镜,以提高系统性能,获得更高的分辨率。①飞秒激光为光源的双先子扫描共焦显微镜双光子扫描共焦显微镜通常使用近红外的飞秒激光作为激发光源,由于红外光具有较强的穿透性,它能探测到生物样品表面下更深层的荧光图像,并且生物组织对红外光吸收少,随着探测深度的增加衰减会变小,另一方面红外光的衍射低,光束的形状保持性好。2005年,Wild等人利用双光子扫描共焦显微技术实时观察和定量分析了PAHs在植物叶片表面和内部的光降解过程。后来又进一步研究了菲从空气到叶片的迁移过程、菲在叶片内部的运动及其分布情况等,该技术可观测PAHs在叶片内部的最大深度约为200μm。②白激光( supercontinuum laser)为光源的彩色共焦显微镜彩色共焦显微镜是利用光学系统的彩色像差,光源的不同光谱成分会聚焦到样品的不同深度,通过分析由样品反射的光谱能有效地获得样品的扫描深度。2004年,美国宾夕法尼亚州立大学的Zhiwen Liu课题小组使用光子晶体光纤产生的超连续谱白光作为彩色共焦显微镜的光源,这种超连续谱白光具有大的带宽,能够提高系统的扫描范围,能达到7μm扫描深度。另外超白激光有较高的空间相干性,无斑点噪声,能提高系统的信噪比和扫描速度。③使用高斯光束的荧光共焦显微镜荧光共焦显微镜是通过激光照射样品激发样品发出荧光,再通过探测器接受荧光对样品进行观察的共焦显微镜。华南农业大学的杨初平等人研究了不同光源孔径和束斑尺寸的高斯光束对荧光共焦显微镜分辨率的影响表明:与一定孔径尺寸的平行光束相比,采用高斯光束系统可以获得更好的分辨率。 2. 探测器孔径和杂散光共焦显微镜中探测器孔径能滤除部分杂散光,提高系统的分辨率和信噪比。根据相关文献对共焦扫描显微镜的三维光学传递函数与探测器孔径之间的依赖关系的研究,可以得到探测小孔直径为:d=β*1.22λ/NA,式中,β为物镜的放大率,λ为光的波长,NA为物镜的数值孔径。由该公式确定探测器小孔的直径,一方面满足了共焦扫描系统对探测器小孔直径的要求,从而保证高的横向和纵向分辨率,另一方面,又最大限度地使由试样中发射的荧光能量被探测器接收。为了更进一步提高系统分辨率,许多研究者对共焦显微镜中探测孔径进行了改进,例如使用单模光纤代替普通针孔孔径,还有双D型孔径等。① 使用单模光纤的光纤共焦显微镜在光纤共焦显微镜中用光纤分路器代替传统共焦显微镜中的光束分路器,并以单模光纤来代替光源和探测器的微米尺寸针孔孔径。使用单模光纤的优点在于:首先,在采用寻常针孔制作的共焦显微镜中,光源、针孔、探测器等有可能不在一条直线上从而会引起像差;但是在光纤作为针孔的共焦显微镜中,即使有的部件偏离直线时也不会引入像差。其次,使用单模光纤代替微型针孔,容易清除针孔的污染,而且不易受污染。第三,在使用光纤的系统中,可以自由移动显微镜部分而不必挪动探测器。2006年德克萨斯大学使用光纤共焦显微镜进行口腔病变检测,测得的系统横向和轴向分辨率分别为2. 1µm和10µm,成像速度为15帧/s,可观测范围为200µm×200µm。② 具有D型孔径的共焦显微镜近几年,具有对称D型光瞳的共焦显微成像技术引起广泛的关注,图1所示是该系统示意图。2006年美国东北大学的Peter J.Dwyer等人使用这种共焦显微镜进行了人体皮肤内部成像的实验,测得横向分辨率为1.7士0.1µm。2009年新加坡国立大学的Wei Gong等人采用傍轴近似方法理论分析了在共焦显微镜中使用双D型孔径对轴向分辨率的影响。分析表明在图1中的d值给定时,进入瞳孔的光信号强度l会随着探测器尺寸的增加而增加;但是在探测器尺寸给定时,光信号强度I会随着d的增加而单调递减。在使用有限大小的探测器时,改变d的大小,轴向分辨率可以得到改善。 http://www.biomart.cn//upload/userfiles/image/2011/11/1321512815.png 图1 双D型孔径共焦成像系统示意图在共焦成像光学系统中,到达像面的杂散光会在像面上产生附加的强度分布,从而进一步降低了像面的对比度,限制了系统分辨率的提高,因此在显微系统设计时,杂散光的影响也是不容忽视的。一般除了使用探测小孔来抑制杂散光,其他的一些设备例如可变瞳滤波器等对杂散光也有很好的过滤作用。最近以色列魏茨曼科学研究所的O.sipSchwartz and Dan Oron等人提出在系统中使用可变瞳滤波器,这个滤波器能够使多光子荧光共焦显微镜达到分辨率阿贝极限的非线性模拟,从而改善系统的分辨率。三、共焦扫描显微成像速度的提高共焦显微镜快速的成像速度为研究者观察生物细胞中快速动态反应提供了良好的条件。在共焦扫描显微成像系统中,传统的方法是通过改善扫描探测技术来提高成像速度。现有的扫描探测技术主要有Nipkow转盘法、狭缝共焦检测法、多光束的微光学器件检测法。这些方法可以改善扫描速度,但是与系统分辨率,视场之间都存在矛盾,因此又诞生了两种提高成像速度的新型显微镜:波分复用共焦显微镜和频分复用共焦显微镜。

  • 大幅度提高扫描电镜图像分辨率软件,你怎么看?要不要?

    大幅度提高扫描电镜图像分辨率软件,你怎么看?要不要?

    隐约记得本论坛里,有个讨论如何提高分辨率的帖子,某人说自己家的扫描电镜分辨率可通过软件改善提高,很多人嗤之以鼻。、今天发现了这个软件,脑补一下某人的话,很合逻辑,原来是真的?看下图示范,通过软件处理后,这个图像分辨率很显然大幅度提高了,提高一倍以上都不为过。要知道,在实际电镜操作过程中,随着分辨率提高,操作难度开始逐渐加大,一般扫描电镜,大家都是用在中等分辨率水平,很少去追求过高的有效放大倍数。现在用了这个软件,分辨率明显提高,无效放大倍数变得看起啦有效了。-----看了一下简单介绍,似乎是一种NB算法,类似诺贝奖那个超分辨显微镜的物理意义这个技术可以推广吗?依照我国当前国情,市场前景应非常好。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif 不知道有没有人试用过啊?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610272243_615274_0_3.png

  • 创新快捷的荧光检测评估方案 —以荧光(共聚焦)显微镜分辨率为例

    创新快捷的荧光检测评估方案 —以荧光(共聚焦)显微镜分辨率为例

    Confocal(激光共聚焦显微镜)现在已经司空见惯,甚至是超分辨(SIM等)也是屡见不鲜,今天我们就定性和定量两个方面分析显微成像系统的性能(以分辨率为例),从而更了解系统性能好坏,才能在选择显微镜时做到有的放矢 。[align=center][img=,445,262]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261504385121_662_3450141_3.png!w445x262.jpg[/img][/align]这次我们主要测试对象为奥林巴斯(Olympus) SpinSR超高转盘共聚焦系统,搭载超分辨模块SpinSR10,配以Photometrics 公司的Prime 95B相机。[b][color=#00af50]一、定性分析[/color][/b]利用共聚焦模块与超分辨模块分别在100倍油镜下扫描,采集成像。样品采用Argolight标准测试片Argo-SIM。此测试片中的图样由激光写入,不仅无光漂白效应,而且常见波段皆可被激发,使用方便。通过标准测试片中的“间距渐变线对”图样可以快速定性评估系统空间分辨率及信噪比。Argolight的Argo-SIM标准片中共有4组间距渐变线对,分别朝向四个方向,用以测试显微镜对不同方向的分辨率。线对间距以0 nm为起点,30 nm为步进递增至390 nm。[align=center] [/align][align=center][img=,390,266]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261505109514_806_3450141_3.png!w390x266.jpg[/img][/align][align=center]图一:用户在观看“间距渐变线对”图样(激发光488nm )[/align]实时预览状态下,我们仅用肉眼就可以看出,线对之间有无明显分开,以此大致判定系统的分辨率。线对从下往上数,如从第n根可以分开,则显微镜的分辨率大致为(n-1)*30nm左右。以下图为例:[align=center][img=,690,657]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261506487351_747_3450141_3.png!w690x657.jpg[/img][/align][align=center]图二 定量分析示意图[/align]但是,人眼判断的精确度有限。对于关注方法学的人,仅仅定性分析已不能满足需求。需要对相关结果定量分析,得出更准确的值。[b][color=#00af50] [/color][color=#00af50]二、定量分析[/color][/b]第二阶段,我们将上述采集到的图像分别送入Argolight测试片配套的图像分析软件Daybook中自动计算出分辨率结果。为了得到更为准确的结果,分析过程中截取图像不同区域,分别计算出其分辨率,平均计算得出最终分辨率数值。[align=center][img=,468,298]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261508270801_1889_3450141_3.png!w468x298.jpg[/img][/align][align=center]图三 Daybook软件对比度测量计算图[/align][align=center] [/align]分析过程中,Daybook软件首先自动识别图像中的线对,将强度曲线中的峰值和谷值分别进行标定,之后计算不同线对之间峰值和谷值得的光强对比度(见图三)。另外,软件允许用户选择对比度阈值,以此作为分辨率的判定标准。[align=center][img=,545,242]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261511582801_395_3450141_3.png!w545x242.jpg[/img][/align] [align=center] confocal成像(左) 右:超分辨模块成像(右)[/align][align=center]图四 Argo-SIM测试片中的“间距渐变线对”图样的成像(激发光488 nm)[/align][align=center] [/align][align=center][img=,523,294]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261513007694_2665_3450141_3.png!w523x294.jpg[/img][/align][align=center]五 Daybook软件测量结果截图[/align][align=center] 通过此次测试,我们清楚了解该显微镜的实际分辨率,验证了与厂家参数的契合度。同时,有赖于Argolight荧光显微镜测试方案的高效和便捷,整个测试过程耗时不超过30分钟。[/align][align=center]Argolight荧光标准评估片除了测试显微镜分辨率外,还可以测试其它性能如照明均匀度、光强光谱响应度、空间共定位、定位误差等等。可关注后续文章或致电了解更多功能。[/align][align=center](注)[/align][align=center]1、图片传送压缩问题,图片可能失真。烦请谅解![/align][align=center]2、测量最终结果涉及其他厂家相关产品,暂决定不公布相关测量准确数值,如需了解结果可咨询相关厂家。我司仅负责提供相关产品测量方案,不负责具体系统的评测。烦请谅解![/align]

  • 求助拉曼光谱仪的分辨率和光谱分辨率

    我看有的仪器写光谱仪的分辨率是光谱仪焦长xxx mm(如800mm),这个是指什么?还有一个指标是,光谱分辨率,小于多少个波数。光谱分辨率就比较好理解,请问哪位大神解释一下前面的

  • 求助高分辨标定

    求助高分辨标定

    拍了一些高分辨图,在量高分辨晶面间距时,用DM软件里的profile 可以看到两个高峰间可以看到很多细小的峰。而且高分辨晶格条纹间也可以看到一些细细的条纹,这样的高分辨图能说明什么呢?是长周期结构吗?(看文献感觉跟长周期结构的高分辨很像),求助一下,拜托啦http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506290802_552130_1606080_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506290802_552131_1606080_3.jpg

  • 质谱分辨率的定义

    质谱分辨率是指分开两个峰的能力,刚刚分开时两峰之间的质量距离是DM,分辨率英文的原义是Resolution,常用简写R表示,计算公式:R=M/DM,M可理解为为两个刚刚分开的峰的平均质量。最严格的定义是磁的定义,要求相邻两峰10%峰谷分开才算真正分开,磁质谱的分辨率(即M/DM)不随质量变化,所以磁质谱都用R=M/DM来表示分辨率,磁质谱中,R不变,DM是变化的,质量M越大,DM越大。所以,磁质谱表示分辨率都用R,常常可以见到R=10,000的说法今天我们讨论的(比如质谱),都是要求50%峰谷刚刚分开就算分开,这个定义没有磁质谱严格。同时,这个分辨率R随质量变化,而DM不变,即M越小,R越大。所以有机质谱并不用R来表示分辨率,而用DM表示。最后,因为实际工作中很难找到恰好在50%峰谷分开的峰,所以又简化为用单峰法表示,即测定一个峰半峰高处的全峰宽Full width half Maximum(简写为FWHM),FWHM应近似等于DM。由于采用原始定义,即R=M/DM,DM 不变,M在变,所以R在变,为使得还可以用R表示,所以又简化为用FWHM的倒数表示R,R=1/DM。若采用单峰法,则认为R=1/FWHM。这个值也不变化。我们一般称FWHM=0.5为单位质量分辨率;定义宽松一点时,认为FWHM=0.7称单位分辨率;严格一些时,说FWHM=0.4为单位分辨率。反正,不管是0.7、0.5、0.4,一般都认为是指单位质量分辨率。换算下来,R=2M或R=2.5M也都指单位质量分辨率。这些都是我们常见的分辨率的表示方法。所以,我们又常常看到有机质谱用FWHM来表示,比如FWHM=0.25

  • 【求助】时间分辨荧光

    请教:请问PE的LS可以做时间分辨荧光免疫分析吗?与专用的时间分辨荧光光谱仪有什么区别吗?

  • 关于分辨的问题

    比如GC或者LC分不开的峰,通过串联高分辨率质谱,是不是能够分开?按照GC,LC两个或几个峰是重叠或部分重叠一起的,会一同到达离子源,那么如此是否能够通过高分辨率的质量分析器(如TOF或Orbitarp,FT-ICR-MS)分开这类化合物?

  • 分辨力是什么

    CMA申请表上有个能力分析表,上面要写仪器的分辨力和准确度等级,分辨力的定义是什么,在那里找啊,说明书里也没找到,分辨力和准确度等级怎么填啊?

  • 高分辨质谱

    请问高分辨质谱工作站可以自己算出物质的同位素丰富比,而低分辨质谱不可以?

  • 【讨论】谱仪的分辨率!

    一般来说,仪器的分辨率包括光源,能量分析器等的贡献!在说到能量分析器时,更多说的是相对分辨率.如何把这个相对分辨率转化成绝对分辨率呢?谢谢!

Instrument.com.cn Copyright©1999- 2023 ,All Rights Reserved版权所有,未经书面授权,页面内容不得以任何形式进行复制