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  • 【分享】上药系三股发力狂奔 重组方案半年内揭盅

    [center]上药系三股发力狂奔 重组方案半年内揭盅[/center]“这又是一波恶炒,无理由的乱涨。”医药研究员王睿(化名)看着上海医药几日来盘面表现摇头感慨道,“集团实际上把时间表已经给出来了。”     不仅上海医药,同属上药集团旗下的上实医药和中西药业也在10月末展开了上扬攻势:数据显示,10月31日上海医药收盘价4.75元,上实医药7.37元,中西药业4.49元,至截稿的12月25日收盘价为7.4元、11.28元和7.35元,涨幅分别高达55.6%、53%和63%。     事实上,自年中上实集团入主上药开始,关于整合旗下医药资产的种种猜测就充斥市面。12月13日上药集团宣布董事长钱琎卸任的消息更是将猜想燃至沸点。12月16日三只股票全线冲至涨停。     但根据收购报告书显示,公司将在2009年6月30日前消除目前的同业竞争。“所以目前的都只是推测,有故事有重组,的确是个资金炒作的好题材,但跟进的话成本就太贵了,远远超过基本面实际价值。”王睿坦承。     高层人事频变动     12月12日,上海医药召开上海市医药股份有限公司三届二次董事会会议,宣布钱琎不再担任公司董事、董事长职务。     自上实入主上药开始,九十月份间已变动频繁:10月7日,上海医药公告称将进行第三届董事会换届选举,除原董事长钱琎仍为董事候选人外,其他7名董事会成员减少为4名,新进一名董事,原来的4人没有进入本届董事会名单之列。     同属上药旗下的中西药业也在9月份更换了总经理和副总, 10月份董事会换届选举,更换了2名董事、3名独立董事和一名监事成员;但董事长这样级别的更换在上药系确属首次。“这至少释放着一种信号,很可能标志着上药集团整合进入一个新的阶段。”据某业内人士透露。     当记者致电至上海医药董秘曹伟荣处时,他出言颇显谨慎:“我们只是董事长卸任了,还没换。集团重组的事真的不清楚。”     某熟悉上海国资重组的人士对记者表示:“上海医药这次换董事长前期保密措施做得很好,事先大家都没想到。但也不算很意外,上实既然进来了,自然要起用他们信得过的人,并且毕竟此前董事长在任的时候,集团业绩并不好。”     而传说将接替钱琎的是现任上药集团副总裁的吴建文,现任上药集团副总裁,曾任抗生素事业部总裁,上海新先锋药业有限公司总经理和上海新亚药业有限公司董事长、董事等职务。   “上药系”三驾马车     “上海国资重组这块,信息太不透明了。”东兴证券李秋实感慨道,“其实目前并没有实质性的利好出来,现在一切推测也都只是猜想。”     申银万国一份报告指出:因授权管理上药的上实集团旗下已有上实医药,因此收购完成后旗下的上海医药和中西药业将构成同业竞争。如果将上药集团工业资产装入上实医药,上海医药定位于医药商业,中西药业卖壳或整合上实其他资产将是最可行和便捷的做法。 恰在9月6日,上实医药宣布自动终止非公开发行不超过10722 万股股票,募集资金15.15 亿元用于购买正大青春宝等资产。虽然公司方面表示是因为环保核查未能完成,但市场人士仍将其解读为“暂时让位于集团层面的整合”。     上海医药是我国第二大医药商业企业,主要从事药品分销、流通和制造业务。有国资人士指出,上海医药旗下具有特殊资产比如注射液麻醉牌照等,属稀缺资源,是无法从财务数字上体现出来的;并且有些特殊的药品只有制定渠道才可以经营,因此上海医药的实际价值要比账面上高,并且与集团间存在一定关联交易使得业绩具有稳健性。     上实医药被认为是可能的工业资产整合平台,目前主营医药的开发、制造、销售、咨询和医疗器械及投资业务等。“游资和QFII比较喜欢这只股票。”一位不愿意具名的医药分析人士表示。     中西药业被普遍看做是一个净壳,目前从事医药制剂和药机等业务:三季度净利润数字为448.4万元,同比减少68.68%,经营性现金流为-2189.95万元,基本每股收益0.02元。     一位上海本地券商分析师表示:“目前只是做完了尽职调查,进行的已经算比较快了。审计工作应该已接近尾声,下一步应该是评估这几个公司的市值。如果中西药业壳卖掉,那么上实医药和上海医药获利;如果不卖而确定注资,中西药业自己受益,但现在老总天天忙着开会,究竟选哪个方案仍是未知数。”   华源进退     除上实上药内部整合外,上药集团剩余40%的股权进退亦被视为未来重组的一大难点。     2002年8月,华源集团耗资11亿收购了上海工投和上海华谊的各20%股权。然而连年疯狂扩张的华源集团高度依赖银行贷款,对银行负债超过250亿而被起诉。在2006年2月被华润集团全面接管。“华润当时看中的是北药和上药的资源,当时华源集团对上药集团的控股权为40%,对北药集团的控股权为50%。”知情人士说。     2007年1月初,华润集团从华源生命手中,以20亿元的高溢价受让了北药集团50%的股权。但彼时,上海方面已经产生了把上药集团拿回来的想法,医药产业规划为支柱产业之一。     2008年6月,整合终于迈出关键一步:上海国资委批复同意华谊集团和上海工投将手中持有30%股权无偿划转给上实集团,划转金额分别为人民币11.4亿元。划转后上海上实将合计持有上药集团60%的股权。上药集团在上海医药中拥有权益的股份为2.26亿股,占上海医药已发行股份的比例为39.69%。     “这证明当初设计的4∶3∶3股权结构比较成功,”一位券商人士评论道,“当时政府就考虑到可能将来会把上药拿回来,这样的股权结构现在看来是很有效的,控股权现在是拿到了,但当时整合这块资产华润花了差不多20亿,所以如果说转让或者卖,都需要双方协商,这都是短期没办法做出来的。” 但另有市场人士指出,华源方面已经初步达成意向,不一定说很快,但肯定要买回来。主要还是看双方协商的价格,而经过一波炒作,几个上市公司的价格都起来了,对估值可能是个不利的因素。信息来源:华夏时报

  • 【业界资讯】液晶三巨头重组总体方案达成 国开行资本推动

    http://www.sina.com.cn 2007年09月29日 11:36 财经杂志网络版  上广电、京东方、昆山龙腾光电液晶产业“三合一”总体方案达成  【网络版专稿/《财经》杂志记者 张浩】 被喻为“中国液晶托拉斯工程”的上广电、京东方、昆山龙腾光电三大液晶巨头重组计划,终于开花结果。  9月28日晚,上海广电电子股份有限公司(上海交易所代码:600602)发布公告称,就国内薄膜晶体管显示器(TFT-LCD)整合事宜,目前各方已就整合总体方案达成一致意见。目前,正在就相关事项进行完善和申报工作。  但广电电子并未在公告中透露三方最终协议的合作细则,仅表示该公司将及时披露TFT-LCD业务整合事项的进展情况。  去年12月,在国家开发银行和信产部等推动下,陷入经营困境的京东方、上广电和龙腾光电三家宣布,将各自旗下的5代线剥离出来,合并成立合资公司统一运营。据称,重组的新公司名称暂定为中国光电显示总公司,三方拟以各方拥有的TFT-LCD业务(包括TFT-LCD大尺寸面板及上下游的资产和现金),共同组建新的或选择目前已存在的公司为专业化公司,并成为各方之TFT-LCD业务的统一平台,以争取国家政策的支持,继续扩大产能,增强在全球市场的竞争力。  然而,合作谈判从一开始就“杂音不断”,先是传出上广电与京东方在争夺新公司话语权方面互不相让;随后又有消息称,中国电子信息产业集团有意介入三大液晶显示器面板厂商的重组方案。由此,相关的合并谈判进程也是一再推迟,从原计划的6月底推迟至今。   在最后期限即将截止之际,9月28日晚,上广电和京东方正式宣布整合总体方案达成一致。  当晚,公司董事兼总经理陈炎顺在接受《财经》杂志采访时表示,整合是大趋势,三家公司的整合是国家发展TFT-LCD产业的大计,但是具体事项还是需要一定的流程和审批,一切以公司披露的信息公告为准。  据了解,9月21日在上海,由信息产业部经济运行司牵头,上广电、京东方及龙腾光电三方相关负责人围绕着“三合一”重组事宜,再次进行了研究,三方在会上的态度都相当积极,并达成这最终的协议。  不可否认,此次上广电、京东方与龙腾光电最终的整合协议达成,以国家开发银行为代表的“资本推动”功不可没。  公开资料显示,为建设这三条5代生产线,三家公司都面临巨大的资本压力。京东方截止2006年三季度债务总额高达126.27亿元;龙腾光电在投入约6.99亿美金之后,也还面临着近5亿美元的资金缺口;而上广电更是因为资金紧缺,在去年11月将其所掌控上海嘉汇达房地产开发经营有限公司30%的股权,作价5亿元左右出让,以集中资源发展液晶面板业务。  对此,龙腾方面人士曾透露,“国开行是促成三方联手的功臣。”据称,为了此次液晶产业重组整合,国开行行长陈元曾分别亲赴京东方和上广电,实地了解情况,劝说三家企业联手经营。  不过,也有分析认为,目前各方达成的一致意见还应该仅处于框架阶段,具体整合重组细则或许还存有不少未知的变数。  值得注意的是,年初由于担心再度亏损而被深交所退市,京东方集团的上市公司*ST东方A(深圳交易所代码:000725)曾忍痛宣布将液晶项目从上市公司中剥离。但如今,全球液晶面板价格回升,整个行业情况向好,液晶项目再无剥离的必要。为此,*ST东方A近期又召开临时股东大会宣布收回液晶项目。不仅如此,*ST东方A还公布了增资扩产计划,计划非公开发行3亿至8.5亿A股,每股不低于5.47元,募集资金将投入第4.5代液晶面板生产线项目。  据了解,上广电也计划将于今年12月独资开工建设一条第6代大尺寸TFT-LCD生产线,继续巩固企业自身的行业地位。  不过,9月25日,京东方董事长王东升在投资者沟通会上,则表达了将积极推进其与上广电、龙腾整合的愿望。  王东升说,“*ST东方A与上广电、龙腾的同仁们携手合作,积极推进三家整合,是京东方近年来的一贯立场。尽管现在市场有所好转,但这只是暂时的,未来的竞争仍然激烈,中国企业只有联合起来,才能有所作为”。

  • 乳业兼并重组细则有望8月公布

    促进乳业兼并重组方案细则7月6日就已上报国务院,原定于7月20日对外公布,但可能因为文件制定过程中和财政部、国家发改委等有关部门出现分歧,需要进一步协调,导致出台时间暂时推迟到8月。而在已经递交的细则中,明确将会运用经济杠杆,通过财政、金融、税收政策来推动,而乳企GMP技术改造也会获得财政支持。另外,扶持建设大型乳企的政策在细则中会体现,并将是文件的一个重要部分。而在6月消费品工业司副巡视员高伏就曾表示,工信部将在两年时间培育形成10家年销售收入超过20亿元、具有自主知识产权的知名品牌和国际竞争力的大型乳制品企业集团。 与过往行业政策不同,本次乳业兼并重组细则可谓极具实操性,上述知情人士透露,工信部甚至在细则征求意见过程中,直接表达了希望蒙牛、伊利、完达山和高原之宝四家乳企分别推出一款高端奶粉品牌,与外资乳企相博弈,并承诺将给予一定的鼓励政策,这也得到了上述企业的认可。 "国家此轮兼并重组方案的目的在于提升国产品牌竞争力,所以积极给予支持。资金方面的优惠政策不可避免,因为收购案均涉及巨额资金,部分企业或遇资金难题,所以国家定会在融资方面予以支持。税收方面的政策也将推出,如此便可减轻国产品牌的成本压力,使其更加专注于质量安全。"中投顾问食品行业研究员简爱华表示,寻找优质收购标的和资金问题都是乳制品行业兼并重组过程中的重点。但寻找优质收购标的需要企业自行解决。此外,国内优质标的数量有限,未来大型乳企间势必会相互竞争,不排除推高收购成本的可能性。

  • 【转帖】五谷道场破产重组案尘埃落定。。。。

    五谷道场破产重组案尘埃落定 中粮集团入主五谷道场 2月12日上午9时许,主审五谷道场破产重整一案的北京房山区法院民二庭庭长纪红勇宣布法院最终裁定,批准五谷道场破产重整方案。该方案规定,五谷道场原股东将其所持有的五谷道场公司的股份全部无偿让渡给重组方,重组投资方承诺出资1.09亿元专门用于五谷道场清偿债务及支付破产费用,重组后在同等条件下,优先与原债权人进行合作,在首次招工时优先录用公司原职工。作为重组方代表的中粮集团总裁助理曲喆当庭便向五谷道场破产重整案件管理人支付了1.09亿元的支票。 据资料显示,中旺集团创始人王中旺1999年在河北省邢台隆尧县乡下出资170万元成立了一家小型方便面企业,并且迅速发展。为加速发展,王中旺上马五谷道场“非油炸”方便面项目。2004年10月10日,北京五谷道场食品技术开发有限公司正式成立,注册资本为5100万元,该公司月产值曾高达6000万元。 但由于企业扩张和广告支出及研发新品等各种费用的集中使用,五谷道场出现了供应商货款给付不及时,以及无法给经销商正常发货、拖欠广告费和员工工资等问题,并且引发诸多官司。 五谷道场的迅速崛起和衰败引起了社会各界的密切关注,并引发各种猜测。2008年10月16日,五谷道场向房山法院正式提交了一份破产重整申请书,这份申请书几乎回答了大家对五谷的疑问,也道出了五谷走向衰败的真正原因。 申请书中称,因原材料大幅涨价,方便面行业整体效益下滑;加之公司创立之初,前期费用和广告宣传投入过大等因素,造成公司全面亏损。随之而来的负面报道,导致五谷道场在2007年10月、11月全面爆发财务危机。此后公司经营状况持续恶化,劳动争议、法律诉讼不断增加。 经过会计师事务所审计,截止到2008年10月,五谷道场负债总额为6.2亿元,严重资不抵债。然而,五谷道场认为公司仍有继续发展的价值和必要性。所以,向房山法院提出重整申请。 房山区法院受理此案后,于2008年12月26日依法召开第一次债权人会议,向债权人通报了五谷道场的财产、财务情况,审核了相关债权。最终确认五谷道场债权人人数为629人,债权总金额为5.29亿元。2009年1月16日,房山区法院召开第二次债权人会议,宣布了重整计划方案,并就该计划草案进行投票。最终,五谷道场破产重整计划草案得到了全体出资人和债权人的通过。2月12日,房山区法院依法裁定批准了重整计划草案。至此,五谷道场破产重组迈出了决定性的一步。 房山区法院副院长张仲侠表示,五谷道场重组成功将盘活该公司存量资产,解决数千人就业;同时其300多家供应商和销售商可以继续与之合作。而对所有债权人来说,破产重组成功将实现清偿比例高、实际清偿率大、清偿期限短的效果,有利于维护经济秩序和金融安全。 中粮集团总裁助理曲喆在庭审后接受记者采访时表示,五谷道场的健康理念与中粮集团的理念向吻合,中粮集团一直希望能够重组成功,今天得到这个结果非常满意。重组五谷道场后,将把方便食品业务纳入到中粮集团食品管理架构中,并且希望能够尽快将方便食品业务注入到中粮集团在香港上市公司的业务中。

  • 什么是重组抗体?重组抗体的优势介绍

    什么是重组抗体?重组抗体的优势介绍

    [font='calibri'][size=13px]什么是重组抗体?重组抗体的优势介绍[/size][/font]与传统抗体相比,重组抗体具有几个关键优势。这些包括良好的批次间一致性,持续供应以及对抗体工程的适应性. 因此,重组抗体在科学研究中的应用日益广泛,特别是作为解决持续存在的可重复性难题的一种手段。什么是重组抗体?传统的多克隆和单克隆抗体是正常 B 细胞发育和基因重组的产物。它们是通过用抗原免疫动物以引发免疫应答而产生的。多克隆抗体由许多不同的 B 细胞克隆分泌并识别多个抗原表位,而单克隆抗体则来自单个 B 细胞克隆,并且仅对单个表位具有特异性。重组抗体是单克隆抗体,但是其生产涉及体外遗传操纵。将抗体基因克隆到表达载体中后,将其转染到合适的宿主细胞系中进行抗体表达。哺乳动物细胞系最常用于重组抗体的生产,然而细菌、酵母或昆虫来源的细胞系也适用。①良好的批次间一致性由于重组抗体的生产涉及对抗体轻链和重链进行测序,因此这是一个高度可控且可靠的过程。相反,用于生产单克隆抗体的基于杂交瘤的系统容易发生遗传漂移和不稳定,从而增加了批次间变异或抗体表达缺失的可能性。重组抗体在批次之间高度一致,从而确保了可重复的实验结果。②可规模化体外生产抗体的方法适合大规模生产,这意味着抗体的可获得性不太可能成为限制因素。此外,由于重组抗体序列是已知的,因此确保了供应的连续性;如需将抗体用于大规模长期研究,这可能就是一个至关重要的因素。③顺应工程化了解抗体的肽序列为工程化提供了许多机会。这些包括同种型转换(也称为类转换)和种属转换,这两种方法都可以通过允许在实验中利用那个同种型或种属特定的二抗来增加多重实验的范围。工程学的进一步应用是使用体外抗体选择系统(例如抗体噬菌体展示)来改善抗体特异性。④无动物源性生产与传统的抗体生产方法不同,重组方法避免了使用动物的需要。多克隆抗体直接从免疫宿主血清中纯化,单克隆抗体从杂交瘤来源的组织培养上清液 (TCS) 或腹水中纯化,而重组抗体是从转染宿主细胞系的 TCS 中纯化。无论抗体是多克隆抗体、单克隆抗体还是重组抗体,在实验使用前都必须在预期应用中对其进行适当验证。在CST,我们遵守抗体验证标志,即在任何特定实验方法中的确定抗体特异性、敏感性和功能性的六个互补策略通过针对每种抗体产品精心定制这些策略,我们保证 CST 抗体适合用于帮助您获得可信赖的结果。[align=center][img=大规模重组抗体生产服务,690,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305241528536465_2058_5907840_3.png!w690x191.jpg[/img][/align]义翘神州已通过ISO9001认证,在规模化生产重组单克隆抗体方面积累了丰富的经验。我们拥有完善的大规模重组抗体表达生产平台,可提供从毫克级到公斤级重组抗体生产服务,满足客户高通量、大规模的生产要求。更多[url=https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service][b]大规模重组抗体生产服务[/b][/url]详情尽在:https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service

  • 样本分组方法

    [font=宋体][font=宋体]相较于传统分析化学方法,结合化学计量学的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]分析更容易出现过拟合现象。因此对化学计量模型的验证尤为重要。在建模之前通常需要将采集的样本光谱和参考值分为校正集([/font][font=Times New Roman]calibrationset[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体])[/font][/font][font=宋体][font=宋体]和验证集([/font][font=Times New Roman]validationset[/font][font=宋体])。前者主要用于建立多元校正或化学模式识别模型,后者用来验证所建立模型的预测性能。通常校正集和验证集中样本个数的划分比例介于[/font][font=Times New Roman]0[/font][/font][font='Times New Roman'].5~0.8[/font][font=宋体]之间(两者的样本数量具体根据样本、模型的复杂程度来定)。常见的样本分组方法包括:随机算法、[/font][font='Times New Roman']Kennard-Stone [font=宋体]([/font][/font][font=宋体][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体])算法、光谱[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]理化值共生距离算法([/font][font=Times New Roman]S[/font][/font][font='Times New Roman']ample set [/font][font=宋体][font=Times New Roman]p[/font][/font][font='Times New Roman']artitioning based on joint x[/font][font=宋体][font=Times New Roman]-[/font][/font][font='Times New Roman']y distances[/font][font=宋体][font=Times New Roman], SPXY[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体])[/font][/font][font=宋体]等。[/font][b][b][font=宋体]一、[/font][font=宋体]随机分组方法[/font][/b][/b][font=宋体]随机分组方法是从数据集中随机选择一部分样本作为校正集,其余样本作为预测集。[/font][font=宋体]其中,随机分组算法的选择过程具有不确定性,在样品量较少或者建模效果波动较大时难以建立高效的模型。[/font][font=宋体]随机分组不能保证每次选择的校正集样本都具有代表性,因而在验证新提出方法的性能时,为了保证模型性能不受分组方法的干扰,常采用多次随机分组方法进行综合评价。即将数据多次采用随机分组的方法进行分组,对校正集多次建模,计算模型预测结果的平均值。该预测结果不受数据分组的影响,能较好体现模型的性能。[/font][b][b][font=宋体]二、[/font][font=宋体]KS分组方法[/font][/b][/b][font=宋体][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体]算法由[/font][/font][font='Times New Roman']Kennard[font=宋体]和[/font][font=Times New Roman]Stone[/font][font=宋体]提出[/font][/font][sup][font=宋体][font=Times New Roman][[/font][/font][/sup][sup][font='Times New Roman']2[/font][/sup][sup][font=宋体][font=Times New Roman]][/font][/font][/sup][font=宋体],是一种基于光谱距离迭代选择样本的方法,旨在选择出覆盖范围广,且均匀分布的样本集。首先,选择一个初始样本,之后每一步都选择与已选样本光谱距离(通常为欧氏距离或者马氏距离)最远的一个样本,直到选择出的样本达到预设的数量为止。[/font][b][b][font=宋体]三、[/font][font=宋体]SPXY分组方法[/font][/b][/b][font=宋体][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体]算法仅考虑了光谱的信息,没有考虑参考值的影响。当待测组分含量较低时,若光谱特征不显著,采用[/font][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体]方法可能不会得到满意的校正集样本。[/font][font=Times New Roman]Galvao[/font][font=宋体]等[/font][/font][sup][font='Times New Roman'][3][/font][/sup][font=宋体][font=宋体]在[/font][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体]方法的基础上提出了光谱[/font][font=Times New Roman]-[/font][font=宋体]理化值共生距离算法([/font][font=Times New Roman]SPXY[/font][font=宋体])。该方法兼顾参考值和光谱距离,从而保证选择的样本的光谱和参考值都覆盖较大的范围并且均匀分布。[/font][font=Times New Roman]SPXY[/font][font=宋体]方法的逐步选择过程与[/font][font=Times New Roman]KS[/font][font=宋体]方法相同,只是在计算样本[/font][/font][i][font=宋体][font=Times New Roman]i[/font][/font][/i][font=宋体]和样品[/font][i][font=宋体][font=Times New Roman]j[/font][/font][/i][font=宋体][font=宋体]之间的距离时,采用了同时考虑光谱[/font][font=Times New Roman]x[/font][font=宋体]和目标参考值[/font][font=Times New Roman]y[/font][font=宋体]的新的距离定义[/font][font=Times New Roman]d[/font][/font][sub][font='Times New Roman']xy[/font][/sub][font=宋体][font=Times New Roman]([/font][/font][i][font='Times New Roman']i[/font][/i][font=宋体][font=Times New Roman],[/font][/font][i][font='Times New Roman']j[/font][/i][font=宋体][font=Times New Roman])[/font][font=宋体]。[/font][/font][align=center][i][font='Times New Roman']d[/font][sub][font='Times New Roman']xy[/font][/sub][/i][font='Times New Roman']([/font][i][font='Times New Roman']i[/font][/i][font='Times New Roman'],[/font][i][font='Times New Roman']j[/font][/i][font='Times New Roman'])[font=宋体]=[/font][/font][img=,262,49]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406281001238984_1952_4070220_3.png!w262x49.jpg[/img][font='Times New Roman'][font=宋体],[/font][/font][i][font='Times New Roman']i[/font][/i][font='Times New 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Roman'])[font=宋体]除以它们在数据集中的最大值[/font][/font][font=宋体]进行标准化处理。[/font][b][b][font=宋体]四、最优[/font][font=宋体]K[/font][font=宋体]相异性方法[/font][/b][/b][font=宋体][font=宋体]在选择校正样本时,需要同时考虑样本的代表性和多样化,所谓的代表性是所选样本要尽可能反映整个数据集中所有样本的属性,而多样化是指所选样本之间的差异应尽可能大,彼此容易区分。最优[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]相异性方法([/font][font=Times New Roman]Optimizable K-[/font][/font][font='Times New Roman']d[/font][font=宋体][font=Times New Roman]issimilarity [/font][/font][font='Times New Roman']s[/font][font=宋体][font=Times New Roman]election[/font][font=宋体],[/font][font=Times New Roman]OptiSim[/font][font=宋体])是一种能选择既有代表性又兼顾多样化样本的方法[/font][/font][sup][font='Times New Roman'][4][/font][/sup][font=宋体][font=宋体]。最优[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]相异性算法涉及三个参数:[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]定义为每一次迭代中子样本集的大小;[/font][font=Times New Roman]R[/font][font=宋体]定义为一个有效的候选样本与任何一个已经选定的样本之间所允许的最小相似性;[/font][font=Times New Roman]M[/font][font=宋体]为所选的代表性子集样本的总数目。通过[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]值可控制所选样本代表性和多样性之间的平衡,低的[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]值能选出更具代表性的样本,较大[/font][font=Times New Roman]K[/font][font=宋体]值能选出更多样化的样本。[/font][/font]

  • 重组蛋白是什么?重组蛋白的生产、应用及选择

    [font=宋体][font=宋体]重组蛋白([/font][font=Calibri]recombinant protein[/font][font=宋体])是指应用重组 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]或重组 [/font][font=Calibri]RNA [/font][font=宋体]技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因([/font][font=Calibri]gene of interest[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]GOI[/font][font=宋体]),连接到适合的表达载体,导入到特定的宿主细胞,利用宿主细胞的遗传系统,表达出有功能的蛋白质分子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]当前重组蛋白的生产主要有四大系统[/b]:原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体])及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用转基因动物的乳腺或者植物产生,产生的重组蛋白作为生物制药的产物,在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例:其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品,因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。科学家已在牛和山羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗胰蛋白酶等重要的医药产品。[/font][/font][font=宋体]重组蛋白在制药工业上主要是指表达获得的细胞因子、凝血因子或者人工设计的蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前,重组蛋白试剂已被广泛应用于生物药、细胞免疫治疗及诊断试剂的研发和生产中。其中重组蛋白药物是生物药物的重要组成成分,常被被广泛应用于医疗领域[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]包括肿瘤治疗、免疫调节、神经保护、结缔组织疾病、肾病治疗等。包括细胞因子类、抗体治疗性疫苗、激素及酶等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州致力于提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白生产[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-expression][b]重组蛋白表达[/b][/url]及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production-systems][b]重组蛋白系统[/b][/url]详情的咨询与解决方案。为实验中特定的应用选择正确的表达系统是成功的关键所在。在选择表达系统时,蛋白溶解度、功能、纯化速度和产量通常是必须考虑的重要因素。此外,每个表达系统都有其独特的优势和挑战,这一点在选择时也需着重考虑。我们的专业团队将为您提供个性化的建议,以帮助您根据实验需求选择最合适的表达系统。[/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 你们裁员了吗?---续集(全国127家乳粉企业 拟将重组为50家 )

    全国127家乳粉企业 拟将重组为50家 工信部编制完成《推动婴幼儿配方乳粉行业企业兼并重组工作方案》并上报国务院等待批复。方案提出,力争五年后,婴幼儿配方乳粉行业企业总数整合到50家左右,前十家国内品牌企业行业集中度超过80%。 目前全国有127家生产婴幼儿配方乳粉的企业,前十家的企业所占比重只有42%左右。工信部发言人朱宏任表示,企业兼并重组势在必行。 朱宏任说,显然过多过散的行业状况与提高质量达到一个比较高的生产标准要求是不相适应的,这样的兼并重组的力度和方向是要形成一批具有品牌质量、能让群众放心的生产企业。 在等待批复的方案中,力争到2018年底,培育形成3-5家年婴幼儿配方乳粉销售收入超过50亿元的大型企业集团,婴幼儿配方乳粉行业企业总数整合到50家左右,前十家国内品牌企业行业集中度超过80%。朱宏任表示,兼并重组是为了乳粉行业有更好的发展,不会导致垄断。相关链接:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130726/4873104/

  • [转帖]:租房结婚行不行?

    经常听到有人这样说:没有房子怎么结婚啊!虽然房子与婚姻没有必然联系,但显然大多数人还是把买房作为结婚的先决条件。因此,如果说结婚是人生的头等大事,那么买房安家可能就是头等大事之中的大事了。近年来城市房价一路飙升,加薪却是小步慢走,出道不久的年轻人囊中羞涩,婚房成了老大难问题。“婚房焦虑”正在困扰着众多的年轻人,而寻觅婚房的队伍也正在逐年壮大。  一个朋友最近比较烦:他和经过10年情感马拉松的女朋友开始考虑结婚了,但是婚房还没有着落。两个人加起来每月4000元左右的收入,没有考虑结婚的时候,确实过得不错,可是要结婚买房就不大可能了。他请教过一些朋友,难道真的只有买房结婚一条路吗?为什么不能考虑租房结婚。男方:买放不如租房划算  男方今年29岁,在某杂志社任职。他说在报纸上看到一篇“租售比:租房有优势”文章后大为激动,文章引用国外数据,认为房屋售价和月租金之比在120倍左右才合理现在买房不如租房。他细算了一笔账,现时地段较好的建筑面积100平米左右的商品房价格都超过了40万,外加10万的用于装修和购置家电后即可出租,而租金回报大致在每月800月至1500元之间,售租比达333倍至625倍,显然高得离谱。据此,他认为现时结婚还是先祖房而不该买房。女方:没有房子缺少安全感  她,某机关公务员。她承认目前房价确实太高,但如果租房结婚总觉得不是滋味。其一,没有家的感觉,租约到期就得搬迁重新找房,租约不到期房东毁约自己最终也得搬走,这样怎么能定下心来布置自己的爱巢呢?其二,如果婚后仍借房居住,那么与现在的居住状况有何区别?(多了一个人也说没区别?)没有自己的房子总觉得缺少安全感,安全感如果缺失还要婚姻干嘛?租房结婚又何妨  但是为了爱情,年轻人是可以从租房开始的,先租房,再买小房,最后买大房,鸩绞迪址棵危谧庥肼虻墓讨刑逖榘榈恼孚校馐亲夥拷峄榈淖畲罂炖帧6幼夥康铰蚍空庖彩鞘澜缟洗蟛糠执蟪鞘心昵崛嗽沧》棵蔚谋鼐贰?目前,大城市的房价居高不下,大部分购房者持币待购,许多家庭将租房作为临时过渡的手段进军租赁市场。作为经济基础薄弱的年轻人,尤其是通常只能“两个人买房”,甚至“一个人买房”,而且首付资金困难的外来年轻人,租间房屋先结婚,婚后夫妻共同置业是个不错的选择。  拥有一套产权婚房固然是令人羡慕的,但出租房里的婚姻和爱情也可以同样甜蜜。当然,最好的结果是,普天下有情人都能有自己的婚房,每一套婚房都能被爱情照亮。结婚不应该被房子困住  在一般城市的普通工作状况,工薪阶层靠工资买房几乎是不可能的,所以只能选择贷款买房。  你一旦贷款买房,立刻就把自己限定住了:你每天醒来第一件事就是意识到自己还欠着几十万贷款呢!每月拿到工资后第一件事就是还本月的银行贷款!每年过年时第一件事就是祈祷今年央行不要升息……  确实,父母总会老,难免会生病,后辈也可能跳槽甚至失业,孩子总是要生,生出来就要吃要喝,对于未来这些可能需要的花费,房子卸去了许多年轻家庭最后的一点支付能力。于是,生活的开支被尽可能地压缩,生育的计划被一再搁置,所有的业余爱好都变成了一种奢侈,不敢跳槽,不敢创业,甚至不敢和老板提起加薪的事。为了一套房子,除了这些付出的代价外,我们还要面对加息的风险、持有成本的提高和楼市本身的风险。生活质量大幅度下降了。  而相比起来,租房可以在很大程度上缓解这些矛盾、规避这些风险,在相同情况下,至少每月的房租就比还贷的金额要低,还不必付出巨额首付。而且,从经济学角度来说,租房的成本更加可控,机会成本也更少一些。哪怕每天上下班节约下来的两个小时,用来读书充电、休闲娱乐,甚至只是睡觉,也会使生活更美好。  从另一个角度看, 租房生活并不意味着不稳定,租房更充满了对生活新希望的信心和向往,也是一种基于现有条件保持和提升生活品质的现实选择。租房结婚需要过心理坎  尽管许多年轻人被婚房闹得焦头烂额,但是依然不愿意租房结婚。年轻人不喜欢租房当新房,首先是传统观念在作崇,许多人认为新婚一定要“新”,在结婚这个人生头等大事上,婚房绝对不能马虎将就,不管多难也要买到新房;其次,拥有一套属于个人的住房对年轻人而言具有极大的诱惑力,它不仅是个人财富的象征,更是事业有成的标志。拥有一套独立的住房,也契合当代青年要求独立的时代特征。  另外,一些本地的年轻人有依赖父母的心理。因为不少人在买房时能得到父母的资助,有人形象地称为“傍老族”,但是他们往往不会去考虑父母的感受和能力,也是时代的悲哀。租房结婚 五年置业  两个人为营造自己的安乐小窝,总会比一个人为婚房奋斗要容易一些。我们不妨为租房结婚的年轻人设计一个五年置业计划。  一般人大学毕业多在二十一二岁,如果有一个稳定的工作,一年各种合法收入大约3万元左右。买房计划时间为26到27岁,有5年时间做准备。但是这样的年轻人工作开始就必须下定决心,每年挤出1万元作为购房储备基金。5年时间考虑到利息和收入增加就有6万元积储。再找一个收入差不多的伴侣,这样两人5年就可攒12万元。  房子目标:70-100平米。取中间值85平米,两个人住够了。小孩大了可以换,那是10年后的事。房子单价:3500-5000元/平米,取中间值4250元/平米,房子总价在361250元。按房屋首付30%计算,首付款10.8万元(其余可贷款)。两个人的存款还有剩余,可作简单装修和家居布置之用。租房五年就可以购置下自己温馨的小家,年轻人不妨付诸行动吧。你言我语租房结婚:幸福在哪,家就在哪A、我就是租房结婚的一个有现身说法的人如是说:我是2002年结婚的,当时也想买房,但总看不好,就先租房。然后房价飞涨,我们俩又没有父母资助,于是,一直没有买房。到现在,我们也是租房。顺便说一说,我觉得虽然我们没房,但我依然很幸福。B、心在哪,家在哪  我以前也一直认为总应该有个属于自己的房子,就有了稳定的感觉。不过有一天,看到有个同事,和女朋友因为买房的问题最终分手,我忽然想通了。  有许多女孩子过不去这一关,其实是受不了和别人相互攀比,受不了周围的所谓姐妹的众口一词,但现在我觉得,这样很容易忘了自己为什么结婚了,是为了房子,还是为了和他在一起?  稳定,是一种心理诉求,房子可以有稳定感,但是没房也可以让你们能够有一个共同目标。生活总不可能是十全十美的,有房子固然幸福,但没房子也同样可以创造幸福。C、有什么能力住什么样的房,这样心态就会平和一些  谁不想有个自己的小家?爱情成熟了,没房也是没办法的。我觉得只要两个人过得幸福,也就行了。我相信有一天会有的。我们现在就是租房住。  他的爱人说:没有房子,总是觉得自己是一个流浪者,没有家的感觉。不过,如果实在买不起房子的话我也会选择跟老公租房结婚的,现在就这样。毕竟,买房是两个人的事,并不只是男人的事情。我跟老公结婚半年了照样没房子,我相信有好多的女孩子都愿意这样,一起努力创造未来。不愿意租房结婚的理由1、传统观念作崇,认为新婚就应该要“新”,当然房子也不例外。2、拥有一套自己的房产是成功的象征之一3、可以获得生活上的安全感(独生子女渴望离开父母的自由感)4、一种心理上的安全感(倦鸟归巢,有了自己固定的窝了,就可以更放心地在外面闯荡)5、贷款容易(同样每月花上千元,交给银行,我几十年后就能拥有一套房子,交给房东几十年后我什么都没有)6、认为明天会更好,收入会更高,贷款不会有任何风险。本文链接http://bbs.lady.tom.com/bbs.php?forumid=80&threadid=22351&page=1

  • DNA重组技术大全

    (一)外源DNA片段未的性质带有各种未的外源DNA的克隆方法见下表:────────────────────────────────────────────外源DNA片段所带未端   克隆的要求  说明───────────────────────────────────────────平端    要求高浓度的DNA和连接酶1)非重组体克隆的背景可能较高                                 2)质粒和外源DNA拼命处的限制酶切位点消失                           3)重组质粒会带人外源DNA的串联拷贝用两种限制酶消化后  需纯化  1)质粒与外源DNA拼命处的限制酶切位点常可保留不同的突出端2)非重组体克隆的背景较低质粒体以尽量提高连接效率3)外源DNA只以一个方向插入到重组质粒中相同的突出端 线状质粒DNA常用磷酸酶处理1)质粒与外源DNA接合处的限制酶切位点常可保留2)外源DNA会以两个方向插入3)重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝──────────────────────────────────────────── 1.带有非互补突出端的片段  用两种不同的限制酶进行消化可以产生带有非互补突出端的片段,刀就是最容蜴 克隆的片段。常用的大多数质粒载体均带有由几个不同限制酶的识别序列组成的多克隆位点。由于现有的多克隆位点如此多样,因而几乎总是能找到一种带有与外DNA片段未匹配的限制切位点的载体。于是,采用所谓的定向克隆即可将外源DNA片段插入到载体当中。例如:载体pUC19用BamHl和Hind-Ⅲ进行消化,然后,通过凝胶电泳或大小排阻凝胶层析纯化载体大片段,以使同芤下来的多克隆位点 缺小片段分开。于是,这一载体就可以同有与BamHl和HindⅢ所切出未端相匹配的粘端的外源DNA区段相连接。用得到的环状重级体化大肠杆菌,检查氨苄青霉素抗性。由于HindⅢ和BomHI的突出端不互补,载体片段不能有效地环化,所以转化大肠杆菌的效率也极低。因此,大多数具有氨苄表霉素抗性的细菌都含有带外源DNA区段的质业,外源DNA区段成为连接HindⅢ和BamHI位点的桥梁。当然,可以根据特定的外源DNA区段来改变限制酶的组合方式。  如要制备定向克隆载体,它尽量避免使用大多克隆位点上彼此直接相邻的限制酶切位点。这些位点中的一个被切开以后,第二个位点应位于线状DNA分子一端的几个碱基对之内,这样过于靠近末端,不利于多种限制酶的有效切割。正因为如此,所以务必检查两种限制酶对载体的消化是否完全。可采用以下两种检查方法: 1)用两种限制酶中的一种对载体进行消化,当所用限制酶的最挞缓冲液对离子强度的要求有不同时,应使用所要求的盐浓度较低的酶。消化完后,应通过凝胶电泳对一小份DNA进行检查。如所有质粒DNA均从环状转变为线状分子时,适当调整盐浓度,并加入第二种酶。同时,另行设立一个预实验,其中含有环状质粒DNA,并只加两种限制酶中的第二种。当预实验中的所有DNA都转变为线状(由凝胶电泳确定)时,通过凝胶电泳或尺坟排阻凝胶层析纯化质粒DNA大片段。\par 2)图1.7所示的是检查消化反应完全程度的一种更为严格的方法。对用第一个限制酶切割的一小份DNA进行末端标记,经离尽柱层析法纯化后,与未标记的线状DNA混合。然后用第二个酶消化,完全消化可使DNA小片段释放,它应带有50%的放射性活度,这可通过层析或通过凝胶电泳和放射自显影加以检测。2。带有相同末端(平端或粘端)的片段   带有相同末端(平端或粘端)的外源DNA片段必须克隆到具有匹配末端的线状质粒载体中。在连接反应中,外源DNA和质粒都可能发生环化,也有可能形成串联寡聚物。因此,必须仔细调整连接反应中两个DNA的浓度,以便使“正确”连接产物的数量达到最佳水平(见本节三).此外,常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制质粒DNA的自身连接和环化。在体外连接反应中,仅当一个核苷酸含5’磷酸基团而另一个含3’羟基时,T4噬菌体DNA连接酶可催化相邻核苷间形成磷酸二酯健。用细菌碱性磷酸酶(BAP)或牛小肠碱性磷酸酶(CIP)去除线状DNA两端的5’磷酸可以最大限度的地减少质粒DNA区段可有效地与去磷酸化质粒DNA相连接,产生一个含有两个切口的开环分子(图1.8)。因为环状DNA(即使是带切口的环状DNA)的转化效率比线状DNA高得多,所以大多数转化体都含有重组质粒。3.带有平端的片段  外源DNA片段带平端时,还有一桩切外生枝的麻烦事,这就是蛱端的连接效率比起带有突出互袜末端的DNA要低得多。因此,涉及平端分子的连接反应所要求的T4噬菌体DNA连接酶的浓度和外源及质粒DNA的浓度都要高得多。还要说明的是,加入低浓度的如聚乙二醇一类的物质,常可提高这类反应的效率。 (二) 质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质  如今,质粒载体中限制酶切位点的种类极为繁多,因而通常都有可能找到某种带限制酶切位点恰恰与外源DNA片段本身毫无二致的载体。这就具备一个不可比拟的优点,也应是可以用相应的限制酶消化重组质粒崦回收外源DNA。另一种方案,则是把片段插入到载体中能产生匹配末端的任何位点中。例如,识别不同的六核苷酸的限制酶BamHl和BglⅡ产生具有相同突出末端的限制酶切片段,这样用BglⅡ消化而制备的外源DNA片段可以克隆到用BanHl消化的质粒中。这通常会使接合序列不能被曾用于外源DNA或制备载体的任何一种酶所切开。然而很多清况下,用切点位于多克隆序列侧翼的限制酶进行消化,可将片段从重组质粒中摘出。偶尔在质粒的以及外源DNA两端的限制酶切位点之间,不可能找到“门当户对”的搭配关系。这时可用下面两种方案加以解决:1)在线状质粒末端和(或)外源DNA片段的末端接上合成在接头或衔接头。2)在得到控制的反应条件下,用大肠杆菌DNA聚合酶I Klenow片段部分补平带3’凹端的DNA片段。如第九章所讨论,这样常可以使那些不相匹配的限制酶切位点转变为互补末端,从而促进载体和外源DNA的连接。因为部分补平反应消除了同一分子两端彼此配对的能力,故连接反应过程中环化和自身寡聚化的机会也会有所降低(Hung和Wensink''1984;Zabarovsky和Allikmets''1986)。

  • 有租房经历的版友请进~

    有一套房子想出租,可是,一点经验都没有~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09506.gif能不能提供一点帮助啊?比如,租客租房后需要缴的费用有哪些?房租怎么给啊等等?双方该签订的租房合同的具体文本能不能借我复制一下啊?还有啊,房屋出租有哪些注意点没?

  • 重组子的筛选和鉴定

    重组子可通过酶切进行鉴定,也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定,阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物。1. 用牙签挑取平板上的菌落接种于 2ml 含适当抗生素的 LB 培养基中,37℃摇 床培养过夜。2. 次日取菌液 0.2-0.5ml,13,000rpm×3min 离心,弃上清,加入 20μl ddH2O 和 20μl 酚/ 氯仿,震荡混匀,13,000rpm×5min 离心。3. 取上清进行琼脂糖电泳,加入载体质粒 DNA 作为阴性对照,根据质粒大小 初步筛选重组子,重组子的泳动速度应该慢于载体质粒。4. 用碱法小量制备可能是重组子的质粒 DNA。5. 选取适当的酶,对重组子进行酶切分析,酶切体积均为 10μl 体系。酶切样品 进行琼脂糖电泳鉴定是否有所需片段。6. 酶切分析正确的重组子分成两份,一份进行测序反应,另外一份保种。7. 若用 PCR 法鉴定,则在第 2 步时每个样本取 0.5-1.0μl 菌液为模板进行 PCR 反应,每管反应体系最低可少至 10μl ,PCR 产物电泳,能得到所需条带的样 本进一步提取质粒酶切鉴定或送样品测序。

  • 【求助】要去上海了 需租房

    要到上海工作半年,需要自己租房子,单位在上海市闵行区莘建东路58弄,有没有可以帮忙给个意见?我没在上海呆过。哦,我不用去上海哦谢谢大家

  • 【分享】华润新三九即将完成对三九医药的股权收购

    [center]华润新三九即将完成对三九医药的股权收购[/center]作为三九集团债务重组的一部分,华润集团旗下的新三九控股有限公司(下称新三九)即将完成对三九医药股份有限公司(深圳交易所代码:000999,下称三九医药)的股权收购。 11月14日,三九医药公布收购报告书,三九集团和深圳三九药业有限公司持有三九医药的70.44%股权将变更为新三九持有。  此前,三九集团和三九医药合计持有三九医药的股权为71.35%。但由于其中三九集团持有的0.91%三九医药股权,分别被长城资产管理公司和深圳农村信用社申请司法冻结,目前各方尚未达成和解。公告称,如该笔股权解除司法冻结,新三九将完成相应的收购程序。  新三九于2007年3月成立,是国资委和三九集团债委会确立重组方案而设立的重组整合平台,于2007年9月为华润医药收购其全部股权。  公告表示,本次收购仅是国有股东变更,作为三九集团债务重组的组成部分,不涉及现金支付。目前,华润集团已通过新三九以现金方式偿付各金融债权人,一次性清偿三九集团及其关联企业的重组债务。  2004年,三九集团爆发财务危机,被迫进行收缩和重组。而三九医药也因大股东占用上市公司巨额资金所拖累,导致发展缓慢。  当时华润集团也有意打造央企医药平台,对中国医药产业进行长达10年的跟踪分析。此前,华润已收购了东阿阿胶、中国华源集团有限公司等医药公司,并参股多家医药公司。  2006年12月25日,华润集团作为三九集团潜在战略投资者提交了三九集团重组方案。2007年7月,国务院国资委批复同意三九集团资产债务重组的整体安排,由华润医药收购新三九并向其增资至30亿元,用于新三九收购三九集团的有效资产。 今年1月,国务院国资委下发三九集团并入华润集团,成为其全资子公司的批文。目前尚未办理相关产权变更手续。  新三九对三九医药的收购,已触及要约收购。但三九医药表示,由于实际控制人没有改变,将申请豁免要约收购。  此项收购的完成,意味着三九医药已彻底摆脱历史包袱,有机会就此改善资产结构,降低资产负债率,专注主营业务发展。  但业界对该项收购存在的疑虑是,华润集团目前已拥有或参股多家医药公司,尽管主营业务与三九医药有别,但仍存在潜在的同业竞争。  为解决该问题,华润集团表示,目前已启动对内部医药板块的梳理工作,严格按照中药、化学药、医药分销和保健品四大业务分类,强化业务协同,避免同业竞争提高到公司战略发展高度。  此外,新三九更是高调承诺,公司与其控制的公司将不从事与三九医药之间可能存在同业竞争的业务,如有违反,将赔偿三九医药的相关实际损失。  据了解,华润集团完成收购后,三九医药具有独立的运营体系,在采购、生产、销售和知识产权方面保持独立。此前,三九医药已从三九集团受让“999”以及“三九”系列注册商标。  此外,除董事会成员由原来的9名增至11名外,目前,三九医药的主营业务、资产、现有员工及其分红政策等在未来12个月内将不会有任何重大调整变化。

  • 【讨论】租房子需要注意哪些问题?

    我现在和同学住的两房一厅,四个人住房子很小且环境特不好---楼下就是噪声源[em53] 想换一个大点的房子[em54] 但是租房不是我的专业,老师也没教过请问各位高手,租房需要注意哪些问题呢?[em07] 大家不妨来讨论下[em51]

  • 【转帖】购房成本已超租房成本

    [color=red]【由于该附件或图片违规,已被版主删除】[/color]目前国内购房成本或者月供已超过租房成本,即“买房不如[url=http://zufang.okfang.com/]租房[/url]”。 采集了包括价格、按揭贷款和租金等各类楼盘的商业信息。通过两个指标比较购房成本和[url=http://okfang.com/]租房[/url]成本,为我国[url=http://yahu.okfang.com/]房地产[/url]价格把脉。第一个指标是“购房资金成本/[url=http://okfang.com/]租房[/url]比率”;第二个指标则是“月供/月租金”。(比较网站:[url=http://www.okfang.com/]上海租房网[/url]、[url=http://okfang.com.cn/]上海租房网[/url])我国房地产平均购房资金成本和月供分别是租金的1.1倍和1.3倍。具体说来,样本中近一半城市的购房资金成本大于租金,其中地处长江三角洲的主要城市购房资金成本为租金的1.3-1.5倍。3/4的城市月供大于租金,其中长江三角洲的主要城市月供为租金的1.5-2倍。杭州购房资金成本和月供分别为租房的1.5和2倍,与香港1997年相当接近。而珠三角洲地区和中部地区购房成本仍低于租房成本。我国某些城市购房成本大于租房成本的主因是“租金/房价”比率太低,即强烈的购房需求推高房价。这种需求包括自住和投资(投机)。自住性需求旺盛反映了我国房地产市场快速发展的基本面支持。而投资和投机性需求不仅推高房价,而且压低房租,导致“租金/房价”比率不断下降。相关链接:为了更好的专注免费[url=http://okfang.com.cn/]上海二手房搜索[/url]器发布平台的维护,我们决定将一些实用的频道,与志同道合的朋友合作发展;[url=http://Gg.okfang.com/]网络广告[/url]交流欢迎与我们联系!可供合作的网站有:[url=http://jn.okfang.com/]济南房地产[/url]里的所有城市站点,以及:[url=http://chongqing.okfang.com/]重庆房地产[/url]总站、[url=http://wf.okfang.com/]潍坊房地产[/url]总站、[url=http://jn.okfang.com/]济南商铺信息[/url]总站、[url=http://jn.okfang.com/]济南房产网[/url]、[url=http://office.okfang.com/]上海写字楼[/url]、[url=http://baihuo.okfang.com/]网上购物[/url]总站、[url=http://jn.okfang.com/]济南房产中介[/url]、等,并可根据不同要求:开通任何域名站点。[url=http://Gg.okfang.com/]网络广告[/url]交流欢迎与我们联系,来信必复!

  • 重组蛋白是什么?融合蛋白和重组蛋白的区别

    [font=宋体][b]什么是重组蛋白?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白[/b][/url]的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白和重组蛋白的区别[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、重组蛋白[/font][/font][font=宋体]重组蛋白是指应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。[/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白是指通过重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连,这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念,融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。融合蛋白又称标签([/font][font=Calibri]Tag[/font][font=宋体]),常用的[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总结:在生物制药领域,重组蛋白具有较高的活性和纯度,更易吸收,安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白,基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素:[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易,应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说,重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务,例如义翘神州[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]参考重组蛋白生产的详细服务清单)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]等相关信息,详情可以关注[/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白生产:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

  • DNA重组实验方法

    实验原理DNA重组是将外源DNA与载体分子连接,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。 重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。常用的DNA连接酶是T4噬菌体DNA连接酶,它不但能使粘性末端的DNA分子连在一起,而且能使平末端的双链DNA分子连接起来,但这种连接的效率比粘性末端的连接效率低,一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度来提高平末端的连接效率。如果是单酶切,为了防止载体本身的自身连接,可以用牛小肠碱性磷酸酶(CIP)处理,去掉酶切后5'端的磷酸。这样做能有效防止质粒的自身环化,降低转化的背景,大大提高重组子的筛出效率。连接反应的温度在37℃时有利于连接酶的活性,但是在这样的温度下,粘性末端的氢键结合是不稳定的。一般的连接条件是在12-16℃,反应12-16小时(过夜),这样既可最大限度地发挥连接酶的活性,又兼顾到粘性末端短暂配对结构的稳定。连接产物转化宿主细胞后,还须对转化菌落进行筛选鉴定,挑选出所需的重组质粒。仪器、材料与试剂一、仪器1.恒温摇床2.恒温水浴3.恒温培养箱4.小型高速离心机二、材料1. 氨苄青霉素2. BamHI3. HindIII4. T4 DNA连接酶5. pQE-31 和pUC18-CAT 质粒6. 培养皿7. 接种针8. 金属涂棒9. 1.5mL 离心管10.酒精灯11.镊子、灭菌牙签等三、试剂DNA琼脂糖胶纯化试剂盒实验步骤一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindIII酶的混合液,无菌双蒸水补到30mL,37℃反应过夜。3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:在10mL DNA样品中,加T4 DNA连接酶缓冲液1mL,T4 DNA连接酶1mL,14℃(室温)过夜,然后做大肠杆菌的转化。三、转化感受态细胞1. 制备的感受态细胞(-20℃保存的)。2. 在100mL的融化后处于冰浴的感受态细胞中,加入10mL连接产物,混匀,冰上放置30分钟,以后的操作参照实验一进行。同时做未加CAT片段的空白pQE-31载体质粒连接处理后的感受态细胞转化的对照。实验结果过夜培养后,实验组和对照组的两个培养皿上都可能会出现一些菌落。如果实验组的菌落数明显多于对照组的菌落,则是好征兆,但实验组中出现的菌落是否含有所需的DNA重组子还须进一步鉴定。

  • 一种新型的重组蛋白A柱

    一种新型的重组蛋白A柱

    http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif一种新型的重组蛋白A柱 洗脱条件温和,充分防止蛋白变性蛋白A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将蛋白A与琼脂糖凝胶以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。早期的蛋白A柱结合的都是天然蛋白A。天然蛋白A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KD,结构如图一所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然蛋白A的其他非结合域会和非目标蛋白结合,这样被洗脱下来的蛋白质纯度不够,会影响到后续的试验。为了解决这些问题,科学家们运用基因工程技术,克隆出蛋白A的基因,并对其进行改造,除去了一些不重要的非结合域。偶联这种重组蛋白A的琼脂糖凝胶柱在蛋白质纯化中,的确是提高了产物的纯度。目前,市场上绝大部分重组蛋白A柱都是这种产品。但是,纯化时所用的洗脱液一般为pH=2.7的甘氨酸溶液,如果洗脱效果不是很理想,还要降低pH,采用pH=1.9的甘氨酸溶液。由此可见,此法洗脱条件比较剧烈,最后收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的柱子结合的重组蛋白A一般具有5个串联结构域:E、D、A、B、C。虽然每个域均可以和IgG的Fc段结合,但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一,而且经常需要较低的pH值。GE的重组蛋白A柱即为这种类型,如图二所示。考虑到减少串联结构域的个数,并且采取同型结构域串联,就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异从而使洗脱条件温和而均一,Putus研制出了含有三个串联B结合域的重组蛋白A,如图二所示。同时,我们用Putus重组蛋白A柱和GE重组蛋白A柱纯化人血浆,纯化的结果用于比较两种纯化柱的纯化效果,结果如图三所示。GE Putus 图二、重组蛋白A结构示意图待纯化样品:人血浆实验材料:GE公司的重组蛋白A柱(E、D、A、B、C结构域串联,见图二)Putus公司的重组蛋白A柱(3个B结构域串联,见图二)实验方法:分别按照每个公司的说明书来操作,洗脱条件分别为pH值3.0和4.5, SDS-PAGE检测结果如下: 上图从左边起,泳道1为标准蛋白Marker,泳道2为经过GE填料洗脱后抗体,泳道3为经过Putus填料洗脱抗体,泳道4为人血浆。从图中,我们可以看出,与GE 重组蛋白A填料从人血浆纯化抗体纯度比较,拥有3个同型结构域的Putus填料可以获得同样纯度的抗体。但是,后者的洗脱条件仅为4.5,高于前者的洗脱条件3.0。由此可见,使用具备较少B结构域的重组蛋白A柱也能获得高纯度的IgG,并且洗脱条件温和,能防止蛋白质聚集,保护蛋白质活性。http://cp00a3cee71b5f96adf6e669b5d7f56a9f11.jpg/http://C:\Documents and Settings\adim\桌面\001.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191653_632703_1672347_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187444_1672347_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187445_1672347_3.jpg

  • 重组蛋白技术的科学原理与实践应用

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白[/b][/url]([/font][font=Calibri]recombinant protein[/font][font=宋体])技术原理是现代生物技术的核心之一,它通过将目的基因插入到表达载体中,在宿主细胞中进行表达,从而获得所需的重组蛋白。这一技术的关键是选择合适的表达载体和宿主细胞,以确保目的基因的正确表达和蛋白质的正确折叠。重组蛋白技术的应用范围非常广泛,包括药物研发、疫苗生产、诊断试剂、生物治疗等领域。通过重组蛋白技术,我们可以快速、高效地获得具有特定结构和功能的蛋白质,为科学研究、医学和工业应用提供重要的工具和资源。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]构建重组蛋白的技术路线主要包括以下几个步骤:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①目的基因的获取:根据所需蛋白质的氨基酸序列,设计并合成相应的基因片段,或者从基因文库中筛选出相应的基因。[/font][font=宋体]②表达载体的构建:将目的基因插入到表达载体中,常用的表达载体包括质粒、病毒等,它们可以在宿主细胞中进行复制和表达。[/font][font=宋体]③宿主细胞的选择:选择适合的宿主细胞,如细菌、酵母、昆虫、哺乳动物等,以确保目的基因的正确表达和蛋白质的正确折叠。[/font][font=宋体]④重组蛋白的表达:将构建好的表达载体转入宿主细胞,进行培养或诱导,使目的基因在细胞内表达,产生重组蛋白。[/font][font=宋体]⑤重组蛋白的纯化:通过各种分离纯化技术,如离心、过滤、沉淀、色谱等,将重组蛋白从细胞中提取出来,并进行纯化和精制。[/font][font=宋体]⑥重组蛋白的鉴定:通过各种检测技术,如质谱、免疫学检测等,对重组蛋白进行鉴定和质量控制。[/font][font=宋体]通过以上技术路线,可以构建出具有特定结构和功能的重组蛋白,为科学研究、医学和工业应用提供重要的工具和资源。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白技术应用:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]一、药物研发与生产:[/font][font=宋体]靶点验证:在药物研发初期,可以使用重组蛋白来验证药物作用的靶点。[/font][font=宋体]抗体药物:利用重组蛋白技术可以生产人源化抗体,用于癌症治疗、自身免疫性疾病治疗等。[/font][font=宋体]直接药物:某些重组蛋白本身就是药物,如胰岛素、生长激素等。[/font][font=宋体]二、疫苗开发:[/font][font=宋体]基因工程疫苗:使用重组蛋白技术生产疫苗,例如针对乙肝、流感等疾病的疫苗。[/font][font=宋体]三、诊断试剂:[/font][font=宋体][font=宋体]免疫检测:重组蛋白可以用作抗原或抗体,用于各种免疫检测技术,如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、免疫荧光等。[/font][/font][font=宋体]四、生物治疗:[/font][font=宋体]细胞因子:重组蛋白技术可以生产各种细胞因子,用于促进细胞生长、分化、凋亡等。[/font][font=宋体]五、基础研究:[/font][font=宋体]结构生物学:利用重组蛋白研究蛋白质的结构与功能关系。[/font][font=宋体]信号转导研究:通过重组蛋白研究细胞内信号转导过程。[/font][font=宋体]六、其他应用:[/font][font=宋体]酶工程:生产具有特定性质的酶。[/font][font=宋体]七、农业应用:如生产抗虫作物或具有特定性状的动物。[/font][font=宋体]通过以上几个方面,重组蛋白技术在生物医药领域中发挥着越来越重要的作用,为疾病治疗、疫苗开发、基础研究等提供了有力的技术支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白纯化服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多重组蛋白详情可以以关注义翘神州:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 重组分响应歧视求助

    大家有没有人用GCFID做正构烷烃的标准品,例如C10-C50,做下来C40的响应只有前面低碳组分的20-30%,C50更低。不分流比分流歧视现象严重,想咨询大家,这种重组分的响应怎么做才能提高?

  • 我国重组蛋白新冠病毒疫苗I期、II期临床试验结果发布

    我国已批准紧急使用的重组蛋白亚单位新冠病毒疫苗,I期、II期临床试验结果日前在国际医学期刊《柳叶刀传染病》发布。结果表明,疫苗安全性良好,接种3剂次25微克疫苗的97%入组者产生了可以阻断活病毒的中和抗体,中和抗体水平超过康复患者血清。该疫苗由中国科学院微生物研究所联合安徽智飞龙科马生物制药有限公司研发,今年3月10日经有关部门评估论证同意紧急使用。据介绍,疫苗在国内的两期临床试验共招募950名18岁至59岁的健康成年人,采用随机、双盲和安慰剂对照的试验方案。试验对疫苗的安全性和免疫原性进行评估,包括不良事件和严重不良事件、抗体滴度、中和抗体滴度以及血清阳转率。结果表明,没有疫苗相关的严重不良事件发生。接种2剂次疫苗后,76%的人可以产生中和抗体。接种3剂次疫苗后,97%的人可以产生中和抗体。目前,该疫苗正在乌兹别克斯坦、印尼、巴基斯坦和厄瓜多尔开展国际多中心III期临床试验,并于3月1日在乌兹别克斯坦获批注册使用。重组蛋白亚单位疫苗是通过基因工程的方式在工程细胞内表达纯化病原体抗原蛋白,然后制备成疫苗。有别于灭活疫苗和腺病毒载体疫苗,这是一种新技术路线研制的新冠病毒疫苗。截至目前,我国有4个新冠病毒疫苗附条件上市、1个新冠病毒疫苗获批紧急使用。

  • 重组蛋白表达:原理、系统、步骤及应用详解

    [font=宋体]在现代生命科学研究中,[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白表达技术[/b][/url]扮演着至关重要的角色。通过将外源基因导入宿主细胞,并使其表达特定蛋白,我们能够获取大量高纯度的重组蛋白,为疾病治疗、药物研发和生物工程等领域提供了强有力的支持。本文将介绍重组蛋白表达的原理、表达系统、生产步骤以及应用前景。[/font][font=宋体][b]一、重组蛋白表达的原理[/b][/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白表达是利用[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术,将目标基因(外源基因)导入宿主细胞中,并通过宿主细胞的生物机制使其表达出特定蛋白。其主要步骤包括:[/font][/font][font=宋体][font=宋体]基因克隆:将目标基因经过[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]扩增后,与表达载体连接,形成重组质粒。[/font][/font][font=宋体]转染或转化:将重组质粒导入宿主细胞中,可以使用化学方法、电穿孔或者嗜热菌等方式进行转染或转化。[/font][font=宋体]表达蛋白:重组质粒进入宿主细胞后,融合到宿主细胞的染色体中,随后遵循细胞的转录和翻译机制,表达出目标蛋白。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、常见的重组蛋白表达系统[/font][/b][font=宋体]大肠杆菌表达系统:大肠杆菌是常用的重组蛋白表达宿主细胞之一。其优点在于生长快速、易于培养,并且能够产生大量的蛋白。此外,大肠杆菌的遗传工具和代谢途径也被广泛研究,提供了便利。[/font][font=宋体]酵母表达系统:酵母表达系统包括酿酒酵母和毕赤酵母。这些酵母细胞具有真核细胞的特点,能够进行正确的蛋白折叠和修饰。同时,酵母细胞也可以进行大规模培养和高表达,适用于一些复杂蛋白的表达。[/font][font=宋体]昆虫细胞表达系统:昆虫细胞表达系统常用于大规模蛋白表达。昆虫细胞具有真核细胞的优势,能够对蛋白进行正确的折叠和修饰,适合于表达大量需求复杂结构的重组蛋白。[/font][font=宋体]哺乳动物细胞表达系统:哺乳动物细胞的表达系统可用于高效表达复杂蛋白和进行蛋白质研究。哺乳动物细胞具有真核细胞特点,能够进行正确的蛋白质修饰和折叠,并且在一些特殊情况下需要考虑到人类蛋白的免疫原性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、重组蛋白生产步骤[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]细胞中有两个蛋白生产阶段:转录和翻译,被称为分子生物学的中心法则。换言之,转录和翻译步骤属于重组蛋白表达步骤。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白,基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素:[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易,应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说,重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][font=宋体],例如义翘神州[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、重组蛋白表达技术的应用前景[/b][/font][font=宋体]药物研发:重组蛋白表达技术被广泛应用于药物研发领域,用于生产重组蛋白药物。这些药物包括多肽类、蛋白类和抗体类药物,如生长因子、抗体药物和血液制剂等。通过重组蛋白表达技术,我们可以获得高效纯度的药物,满足临床上的需求。[/font][font=宋体]生物工程:重组蛋白表达技术被广泛应用于生物工程领域,用于生产特定的蛋白产品。这些产品可以应用于食品、化妆品、工业发酵等领域,如酶制剂、生物染料和生物材料等。[/font][font=宋体]疾病治疗:通过重组蛋白表达技术,我们能够合成特定的蛋白,用于疾病的治疗和诊断。例如,利用重组抗体技术,可以开发出用于癌症治疗和免疫治疗的抗体药物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

  • 珀金埃尔默在重组计划中裁员72人

    据悉,珀金埃尔默公司本周宣布,作为重组计划的一部分,公司裁员72人。裁员计划已在今年第二季度完成。  珀金埃尔默公司表示,在第二季度,公司管理层批准了一项计划,决定将资源转移到高增长地区和终端市场。作为该计划的一部分,公司裁掉了72名劳动力。  重组计划导致削减人类健康和环境健康业务的人员,但公司没有提供进一步的细节。  公司表示,在人类健康业务方面,珀金埃尔默裁员和关闭多余的设施需花费税前重组费用220万美元;在环境健康业务方面,人员减少和设施的关闭造成了340万美元的税前重组费用。  公司还表示,所有被裁员工已经接到通知,珀金埃尔默预计裁员造成的其他遣散费480万美元将在2012年底前完成支付。

  • 光谱分析中的自吸收与重组干扰如何理解?

    大家都知道AGLIENT的ICP是通过冷锥来减少尾焰,主要是这能使自吸收和重组干扰降到最低,提供宽动态线性范围和低背景以获得最佳检出限。那么您是如何理解光谱分析中的自吸收与重组干扰的?

  • 人工脂质膜重组电生理分析系统特点及应用领域

    [url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/scout.html][b]人工脂质膜重组电生理分析系统[/b][/url]Ionovation Scout是专业为[color=#333333]特定环境[b]人工脂质膜[/b]的[b]重组分子电生理学分析[/b]而设计,非常[/color]方便研究动物和植物细胞膜通道,细胞器膜通道,细胞膜转运和细胞器转运项目.[b]人工脂质膜重组电生理分析系统[/b]适合所有的细胞系,具有双分子层技术特点容易从两侧接近细胞膜,是人工脂质膜特定环境进行重组分子电生理分析的理想工具.[b]人工脂质膜重组电生理分析系统[/b]具有自动分子膜产生装置结合预制室保证每个实验室双分子层试验成功,是[color=#333333]人工脂质膜的重组分子电生理学分析高[/color]效率科研仪器.[url=http://www.f-lab.cn/microinjectors/scout.html][b]人工脂质膜重组电生理分析系统[/b][/url]应用领域植物孔道细菌通道和孔道动物通道和毛孔有毒物质,如肉毒杆菌毒素膜的活性剂,如α-突触核蛋白在上述所有的结构功能分析脂质触发器和其他人…对于你的具体问题和项目,请与我们联系或者与我们的专家一同探讨。[img=人工脂质膜重组电生理分析系统]http://www.f-lab.cn/Upload/AUTO%20PHY_.jpg[/img]

  • 【原创】一种新型的重组蛋白A柱

    【原创】一种新型的重组蛋白A柱

    [em09511]一种新型的重组蛋白A柱 洗脱条件温和,充分防止蛋白变性蛋白A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将蛋白A与琼脂糖凝胶以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。早期的蛋白A柱结合的都是天然蛋白A。天然蛋白A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KD,结构如图一所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然蛋白A的其他非结合域会和非目标蛋白结合,这样被洗脱下来的蛋白质纯度不够,会影响到后续的试验。为了解决这些问题,科学家们运用基因工程技术,克隆出蛋白A的基因,并对其进行改造,除去了一些不重要的非结合域。偶联这种重组蛋白A的琼脂糖凝胶柱在蛋白质纯化中,的确是提高了产物的纯度。目前,市场上绝大部分重组蛋白A柱都是这种产品。但是,纯化时所用的洗脱液一般为pH=2.7的甘氨酸溶液,如果洗脱效果不是很理想,还要降低pH,采用pH=1.9的甘氨酸溶液。由此可见,此法洗脱条件比较剧烈,最后收集的蛋白质很有可能变性,或者是复性困难。 这种洗脱条件剧烈的柱子结合的重组蛋白A一般具有5个串联结构域:E、D、A、B、C。虽然每个域均可以和IgG的Fc段结合,但不同的域结合强度略有差异。因此洗脱条件不均一,而且经常需要较低的pH值。GE的重组蛋白A柱即为这种类型,如图二所示。考虑到减少串联结构域的个数,并且采取同型结构域串联,就可以避免不同结构域与抗体Fc 段亲和性的差异从而使洗脱条件温和而均一,Putus研制出了含有三个串联B结合域的重组蛋白A,如图二所示。同时,我们用Putus重组蛋白A柱和GE重组蛋白A柱纯化人血浆,纯化的结果用于比较两种纯化柱的纯化效果,结果如图三所示。GE Putus 图二、重组蛋白A结构示意图待纯化样品:人血浆实验材料:GE公司的重组蛋白A柱(E、D、A、B、C结构域串联,见图二)Putus公司的重组蛋白A柱(3个B结构域串联,见图二)实验方法:分别按照每个公司的说明书来操作,洗脱条件分别为pH值3.0和4.5, SDS-PAGE检测结果如下: 上图从左边起,泳道1为标准蛋白Marker,泳道2为经过GE填料洗脱后抗体,泳道3为经过Putus填料洗脱抗体,泳道4为人血浆。从图中,我们可以看出,与GE 重组蛋白A填料从人血浆纯化抗体纯度比较,拥有3个同型结构域的Putus填料可以获得同样纯度的抗体。但是,后者的洗脱条件仅为4.5,高于前者的洗脱条件3.0。由此可见,使用具备较少B结构域的重组蛋白A柱也能获得高纯度的IgG,并且洗脱条件温和,能防止蛋白质聚集,保护蛋白质活性。[IMG]http://CP00A3CEE71B5F96ADF6E669B5D7F56A9F11.jpg[/IMG][URL=http://C:\Documents and Settings\adim\桌面\001.jpg]http://C:\Documents and Settings\adim\桌面\001.jpg[/URL][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187443_1672347_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187444_1672347_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912021052_187445_1672347_3.jpg[/img]

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