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荧光免疫

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荧光免疫相关的资讯

  • 免疫荧光显微成像详解(上)——免疫荧光原理、步骤
    前言免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,它是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。直接法将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。间接法如检查未知抗原,先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗体—抗原—抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体,则表明抗原标本是已知的,待检血清为第一抗体,其它步骤的抗原检查相同。标记的抗抗体是抗球蛋白抗体,同于血清球蛋白有种的特异性,如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应,因此,制备标记抗体适用于任何抗原的诊断。一、实验步骤免疫荧光实验的主要步骤包括 样片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育、封片及荧光检测等。1、 样品准备对于单层生长细胞,在传代培养时,将细胞接种到预先放置有处理过(70%乙醇中浸泡)的盖玻片的培养皿中,待细胞接近长成单层后取出盖玻片即可,操作过程要小心,防止细胞脱片。对于悬浮生长细胞,有两种方式,一种是取对数生长细胞,制备细胞片或直接制备细胞涂片,把细胞片浸入封闭液中固定,封闭后滴加一抗和二抗孵育;另一种是先在悬浮液中进行固定和染色,离心洗脱后,用移液管移至盒式玻片进行后续抗体孵育。对于冰冻切片制备,建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散。组织一定要冷冻适度,切片时选用干净锋利的刀片,防止裂片和脱片。对于石蜡切片的制备,要先进行脱蜡和抗原修复的处理。2、固定做好切片并风干后立即用合适的固定液(固定液包括有机溶剂和交联剂,其选择取决于抗原的性质及所用抗体的特性)进行固定,尤其要较长时间保存的白片,一定要及时固定和适当保存。固定时间则取决于固定组织切片的大小和类型,对大多数组织,18-24h即可,而细胞的固定时间较短。3、通透针对胞内抗原,使用0.5% Triton X-100或丙酮等通透剂进行通透,这一步的目的是使抗体进入胞内。 4、封闭为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合,需要在一抗孵育前先用封闭液(一般包括与二抗同一来源的血清、BSA或者羊血清)封闭,减弱背景着色。封闭开始后,要注意样品的保湿,避免样品干燥,否则极易产生较高的背景。5、一抗孵育一抗孵育温度一般分为:4℃、室温、37℃,其中4℃效果更佳;孵育时间与温度、抗体浓度有关,一般37℃孵育1-2h,4℃过夜(从冰箱拿出后37℃复温45min)。具体条件还要根据样品、稀释液等条件进行摸索尝试。6、荧光二抗孵育荧光二抗孵育一般在室温或37℃孵育30min-1h,该过程必须在避光环境下进行,防止荧光淬灭。荧光素标记的二抗随着保存时间的延长,可能会有大量的游离荧光素残留,需要注意配制时采用小包装并进行适当的离心。7、复染一般采用DAPI进行复染,目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位。8、封片为了长期保存,我们需要对样本进行封片,用吸水纸吸干爬片上的液体,一般用缓冲甘油等或专门的抗荧光淬灭的封片液。9、 荧光观察有条件的话最好立即用荧光显微镜观察拍照,若不能及时拍照,也要做好封片和封固,保持避光和湿度。荧光显微镜的成像能力对最终的结果也会造成很大的影响,好的荧光显微镜能够最大限度地收集荧光信号,并呈现高分辨率的图片,使细节更清楚,更易得到一张效果极佳的结果图。注意:切片清洗:为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,一般在一抗孵育前的清洗是3min*3次,而一抗孵育后的清洗均为5次*5min。(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染;(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。可使用浸洗方式;(3)冲洗的时间要足够,才能彻底洗去结合的物质;(4)PBS的PH和离子强度的使用和要求(建议PH在7.4-7.6,浓度是0.01M;中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解)。根据上述步骤完成免疫荧光实验后,就需要进行荧光显微成像,得到我们想要的结果。选择一款操作简单、成像清晰、效果卓越的荧光显微镜进行观察拍照,才能轻松得到更为理想的结果图,达到事半功倍的效果。Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜Echo Revolve正倒置一体荧光显微镜作为一款电动化、智能化的显微镜,具有以下优势:☑ 正倒置一体快速切换:切片、细胞观察随心切换,无惧任何耗材;☑ DHR数字降噪功能:极大地降低了背景噪音和荧光干扰,提高图像锐度,加深细节,得到分辨率更高的图片;☑ 强大的Z-Stacking功能:通过高精度电动化Z轴层扫来扩大景深,解决厚样本观察问题,提高图像分辨率;☑ 500MP单色相机:能够采集更多荧光信号,助力低荧光强度样本观察;☑ 多通道荧光自动拍摄叠加功能:可自动进行多通道成像的叠加,个性化选择查看/保存各通道的组合图像。
  • 一文知晓|流式、免疫组化、免疫荧光的抗体区别
    大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。——流式荧光崔工上期回顾:《流式荧光技术检测与化学发光技术检测那些事儿》— 1 —前两天有位老师问崔工,流式抗体与免疫组化抗体有什么区别?崔工收集了网络上的一些回答,供参考:崔工收集了网络上的一些回答,供参考:回答1:两种抗体不一定通用,流式是用直接标记还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用其它的标记的话,或者是间接标记的话,就有麻烦,因为荧光素的标记很可能会影响二抗和一抗的结合。回答2:流式抗体是用于流式细胞仪检测的抗体,与之相对应的有免疫组化抗体,免疫荧光抗体等等。回答3:免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都含有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和WB,而如果抗体识别构象形表位,则只能用于免疫组化。崔工还请教了一位做抗体的朋友,他的回答是这样的:表位抗原有差异,免疫组化抗体要实现不同组织的定位,半定量特异性检测,流式是定量表达。— 2 —不同的实验对抗体有不同的要求崔工觉得首先可以从抗体的应用原理及特点从侧面来了解会更加清楚。抗体的应用一般来说除了做流式和免疫组化外,还可以做免疫荧光等其他实验。免疫组化是利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的标记技术,通过化学的方法使标记抗体显色,对组织胞内的特异性抗原进行定位、定性、定量检测。免疫荧光是利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的荧光标记技术,通过激光激发使荧光素发出荧光。在荧光显微镜下观察荧光的变化从而对细胞内的抗原进行分析的技术。流式荧光一样是利用抗原与抗体的特异性结合原理和特殊的荧光标记技术,过激光激发使荧光素发出荧光。不过检测是通过流式细胞仪来检测的。— 3 —再从WB,IP,IHC,IF,ChIP,FC对抗体需求有什么区别来看WB的蛋白经过加热变性之后都变成线性的结构。因此最好的抗体是采用非常特异序列的人工合成多肽的方法来做实验,结果也非常特异。IP/CHIP. 我们用抗体去结合生理状态下的蛋白质,因此IP的抗体最好使用纯化的天然蛋白制作的抗体来做,也可以用纯化的重组蛋白的抗体。最好不要用人工合成多肽制作的抗体,因为这种抗体识别的位点可能被深深地藏在了蛋白的内心深处。CHIP和IP没有太大的区别,唯一的问题在于,如果抗体识别的表位和该蛋白质与DNA结合的部位一致,则会导致CHIP实验的失败。 IF/IHC. 免疫荧光和免疫组化中需要进行固定一步,固定是为了尽量让细胞的形态结构维持和原有的一致。这种化学物质的固定使蛋白质变性凝固,与天然状态下的蛋白质有了一定的区别,但是又不同WB中加热变性变成了线性的结构。因此在做IF/IHC实验中,最合适的抗体可以是纯化的重组蛋白得到的抗体,也可以是人工合成多肽得到的抗体(多肽是在蛋白质的表面)。FC. 流式细胞中分为两种,一种是活细胞的流式,这种流式最好采用是天然蛋白或者重组蛋白的抗体来做,另外一种是经过固定之后的流式,和IF/IHC 所用抗体一致。在做流式细胞中,我们有直接标记和间接标记,间接标记不如直接标记真实准确。因此我们选择流式抗体要采用带有荧光标记的抗体;如果研究的蛋白没有直接标记的抗体,那么就采用间接标记抗体,需要添加荧光二抗。—————————————————————【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式共享,欢迎自荐或引荐投稿联系人:刘编辑(点击查看KOL主页)word图文投稿邮箱:liuld @instrument.com.cn微信:JaysonXY(备注来意:投稿)
  • 免疫荧光实验方法中需要注意的环节
    免疫荧光方法中的重要环节1、冰冻切片制备:建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重。2、组织切片固定:切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min,尤其要较长时间保存的白片,一定要及时固定和适当保存。3、血清封闭:为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合,需要在一抗孵育前先用血清(与二抗来源一致)封闭,减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调整的,一般10-30min。4、一抗孵育条件:在免疫组化反应中最重要,包括孵育时间和抗体浓度。一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果蕞佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,而4度过夜和从冰箱拿出后37度复温45min。具体条件还要摸索。5、二抗孵育条件:二抗一般室温或37度30min-1h,具体时间需要摸索,而浓度一般有工作液,若是浓缩液还要摸索浓度,切记要避光反应。但在免疫荧光中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下,然后去摸索一抗浓度和孵育时间。最后,荧光素标记的二抗随着保存时间的延长,可能后有大量的游离荧光素残留,需要注意配制时小包装和并进行适当的离心。6、复染:目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位。一般常用DAPI复染。7、封片:为了长期保存,我们一般用缓冲甘油等封片,此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。避免产生气泡,方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液,然后一手拿住盖片某一拐角,而另一手拿对面的那个拐角,接近封片液近端的拐角先降低,直至接触到液体时为止;当发现液体接触面在不断弥散时,则可以缓慢降低另一拐角,这样一般不会产生气泡。8、切片清洗:为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色,所以适当地加强清洗(延长时间和增多次数)尤为重要,我一般在一抗孵育前的清洗是3min*3次,而一抗孵育后的清洗均为5次*5min。注意:(1)单独冲洗,防止交叉反应造成污染。(2)温柔冲洗,防止切片的脱落。我喜欢用浸洗方式;(3)冲洗的时间要足够,才能彻底洗去结合的物质。(4)PBS的PH和离子强度的使用和要求。这方面我有惨痛教训,当时我买的抗体稀释液偏酸,结果背景一片黄(未见特异性染色),建议PH在7.4-7.6浓度是0.01M。(中性及弱硷性条件(PH7-8)有利于免疫复合物的形成,而酸性条件则有利于分解;低离子强度有利于免疫复合物的形成,而高离子强度则有利于分解)9、拍照:有条件的话最好立即拍照,若不能及时拍照,也要封好片和用指甲油封固,保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作,不要随意改变程序;应在暗室中进行检查;防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜;检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱或褪色;激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象;所以最多不得超过2~3h;荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时,须待灯光充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启15-30分钟后;标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发;使用的玻片等载体,都必须厚度均匀,无明显的自发荧光,如果使用油镜,还必须保证镜油为无荧光镜油;电源最好装稳压器,否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命,也会影响镜检的效果。
  • 流式荧光技术动态|唯公全自动流式荧光发光免疫分析仪获证上市!
    流式免疫荧光技术简介流式免疫荧光技术,又称悬浮阵列、液相芯片等,是美国Luminex公司于上世纪末开发的新一代高通量发光检测技术。该技术有机整合了荧光编码微球、激光分析、流式液流系统及高速数据处理等多项最新科技,可以在临床诊断及生命科学研究领域得到广泛应用。它是最早被FDA认证的临床应用型高通量诊断技术,并于2005年被Frost&Sullivan授予“临床诊断技术革新大奖”。与化学发光等传统免疫技术相比,它最大的优势是可以在一个试管中实现几个、几十个甚至上百个项目的同时检测。流式免疫荧光技术的低谷在21世纪初,当Luminex推出具有专利保护的磁性荧光编码微球和Luminex 200分析仪的高通量检测整体解决方案时被众多专业人士广泛看好,相对于化学发光的技术,其优势可谓“风光无限”。然而,在接下来临床免疫领域迅速发展的20年中,以Luminex为代表的高通量检测技术产品被化学发光产品远远甩在身后,令人扼腕叹息。在与传统的化学发光技术的竞争中无法充分发挥其多联检的优势,一个很重要的原因就是Luminex垄断了磁性编码微球技术,但没能为高通量流式荧光免疫检测推出一个全自动化检测平台,无法提供一个类似化学发光分析仪的自动化解决方案,也因此没有跟上临床医学实验室自动化发展的前进步伐。全自动流式荧光免疫分析仪的尝试2010年后,国内外有多个生产商曾推出几款全自动荧光免疫分析仪,如美国Bio-Rad公司的Bioplex 2200,国内上海透景公司的TESMI。但由于没有掌握流式免疫荧光中的光学检测和编码微球等核心技术,在购买Luminex 磁性编码微球开发相关试剂的同时,往往还需要购买Luminex的专有仪器或光学检测模块,不仅导致仪器、试剂的成本和价格居高不下,而且也限制了配套试剂使用的平台,在与化学发光的竞争中始终处于不利地位。唯公科技的技术发展之路“关键核心技术是要不来、买不来的,不能被别人卡脖子!”实践反复告诉我们,关键核心技术是要不来、买不来的,没有核心技术就会被别人卡脖子!图 1 唯公科技开发的EasyPlex 2200流式荧光发光免疫分析仪唯公科技经过多年的技术攻关,在取得多重磁性荧光编码微球技术重大突破后,再次打赢核心技术攻坚战,其依靠扎实强大的研发功底,设计开发出中国第一台基于自主磁性编码微球的全自动流式荧光发光免疫分析仪(EasyPlex 2200),并在近期获得了药监部门颁发的医疗器械II类注册证,批准上市销售!图 2 唯公科技开发的EasyMagPlex有磁荧光编码微球唯公科技在2017年成立之初,就把“掌握核心科技,展现中国创新实力”作为自己发展的基础和目标,把创新主动权、发展主动权牢牢掌握在自己手中,以全自动流式荧光技术中最核心的多色荧光检测、有磁荧光编码微球、自动样本前处理等作为突破点,进行重点攻坚,并取得一系列的突破,其中包括:2019年——突破了有磁荧光编码微球核心技术,展示了具有开发多维磁性编码微球的能力,实现了12重编码微球(EasyMagPlex)的量产,而且编码微球兼容主流的流式细胞分析仪。随后陆续推出了6、7、12联检细胞因子检测试剂以及多联检肿瘤标志物检测试剂;2019年——突破了多色荧光检测技术,并陆续推出了一系列多光多色色的EasyCellTM流式细胞仪,实现了多重细胞因子联检自动分析;2020年——进一步提升其磁性编码微球的能力,达到108重编码。开始30重编码微球的量产和50重编码微球的试产,为合作伙伴提供了更多联检的可能,后续又完成了具有自动分析能力的多重编码微球分析软件(WellCKAS)的II类注册证;2021年——突破了全自动样本前处理技术,并陆续推出了EasySamplerTM和EasySampler CTM全自动流式样本制备系统,实现了基于磁性编码微球的多重联检试剂制备自动化;2022年——完成了可自动分析的50重磁性编码微球,满足了多重自身免疫抗体、过敏原等多重检测的需求;2022年——整合多色荧光检测、磁性荧光编码微球和全自动样本制备技术,推出了国内第一台完全基于自身技术的全自动流式荧光发光免疫分析仪(EasyPlex2200),实现了“样本进,结果出”的全程自动化。未来,唯公科技将在全自动流式荧光发光免疫分析仪的设计和开发上不断推陈出新,以EasyPlex 2200为基础,继续打造通用、开放的全自动流式荧光发光免疫检测平台,推出细胞因子、肿瘤标志物、自身免疫抗体等多联检试剂,并以开放的心态,积极与国际、国内合作伙伴在全自动检测设备、磁性荧光编码微球和更多的多重联检试剂开发等方面展开全方位合作,共同开拓全球的高通量流式荧光发光免疫检测市场。
  • 实验室技能小课堂——如何得到一张好的免疫荧光图片
    什么是免疫荧光技术?免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。免疫荧光方法中主要步骤:1)冰冻切片制备 2)组织切片固定3)血清封闭 4)一抗孵育条件5)二抗孵育条件 6)复染 7)封片 8)切片清洗荧光显微镜标本制作要求:1、载玻片:载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光,有时需用石英玻璃载玻片。2、盖玻片:盖玻片厚度在0.17mm左右,光洁。3、标本:组织切片或其他标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部。另外,细胞重迭或杂质掩盖,影响判断。4、封裱剂:封裱剂必须无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在pH8.5~9.5时较亮,不易很快褪去。5、镜油:必须使用无荧光镜油。荧光玻片如何来检测呢?荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源,经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光365nm或紫蓝光420nm)作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后,再通过荧光显微镜来观察。Revolve Gen 2正倒置一体电动荧光显微镜★ 高分辨率3D成像,获得最佳成像效果★ 正倒置一体,一机两用★ 智能化操作,高效便捷
  • 又一家全自动流式荧光免疫分析仪正式获批上市!
    12月29日,宜乐芯全自动流式荧光免疫分析仪P16获四川省药品监督管理局医疗器械注册证(注册证编号:川械注准2022220241),批准正式上市销售!这是宜乐芯继全球最小发光后推出的又一款战略级重磅产品,充分体现了宜乐芯在IVD细分领域硬核的创新能力。2021年四川省唯一创新IVD产品全球首创单人份全自动流式荧光多重检流式荧光原理流式荧光又被称为液相芯片,多重荧光免疫,是以流式细胞术为核心,结合荧光编码微球技术,使每一个微球成为一个特定的检测单元,在鞘流的包裹下,逐个通过流动室的激光聚焦区,微球上的荧光物质被激光激发后,编码荧光信号及反应物荧光信号会被分别记录,最终通过软件处理获得待检测物质的浓度。P16特点全自动:样本进、结果出,30个原始管进样位,随到随检;单人份:单人份多指标耗材一体化分装,即开即用,无开瓶有效期;多重检:经典流式荧光方法学,通过编码微球实现精准多联检;速度快:最快760T/H,超越大型发光的检测速度;高灵敏:细胞因子检测下限可达1pg/ml;高精准:CV≤5%;体积小:流式技术与POCT完美结合,xPOCT横空出世,应用场景多元;全原研:自研编码微球、自研流式系统、自研细胞因子试剂盒,无惧封锁,尽在掌控。MaxPlex编码微球近期,新冠导致的重症患者越来越多,细胞因子作为非常重要的重症监测指标,有着非常重要的临床价值,宜乐芯推出了4、7、12联检细胞因子检测试剂,灵敏度最高可达1pg/ml,配合P16全自动流式荧光,实现了真正的全自动细胞因子检测,可以为重症患者监测保驾护航。关于宜乐芯宜乐芯生物成立于2018年8月,致力于通过硬核创新,实现全链可控,为临床提供高性价比的临床免疫及分子诊断系统,力争在未来10年成为全球体外诊断细分领域的创新者。创始团队在IVD行业耕耘多年,具有深厚的研发功底及产业化能力。通过突破上游核心部件、整合前沿科技、跨界组合创新、精准市场定位,实现差异化竞争,为客户提供5A级产品—Anytime,Anyplace,Anyone,Affordable, Accuracy。公司现有POCT全自动化学发光、全自动液相芯片、实验室自动化三大技术平台,在成都国际医学城有近4000平米的产业化基地。我们将持之以恒聚焦临床需求、推动价值创新,为客户提供极具竞争力的产品和服务,同时我们秉持开放合作,可以提供从仪器定制、试剂匹配、授权开放、CDMO委托生产、产品注册等一站式产品和服务。
  • 爱尔兰荧光免疫分析系统寻国内公司合作生产
    仪器信息网讯 近日,爱尔兰Biosensia公司开始在国内寻找企业合作生产其RapiPlex诊断仪。   据介绍,RapiPlex可用于多种用途的护理分析应用,包括感染性疾病,滥用药物(DOA)的测试和心肌标志物测试。其他还可以应用于食品安全和环境监测方面。   与市场上其他同类产品不同的是,该诊断仪能利用一个样品同时执行多达6个独立的分析,并在5分钟内得到结果并将数值结果显示在荧光屏上,不需要用户翻译和解释。RapiPlex结构紧凑,操作方便,非常适合应用于各种应用领域的不同测试点,例如在医院,医生办公室,诊所,或在外地都可方便使用。而且测试成本低。   Biosensia公司拥有的RapiPlex平板仪具有三项技术优势:   1、多通道微流控芯片;   2、强大的,完善的荧光免疫分析系统;   3、一个集成光学阅读器,能提供数值读出,而不需要用户翻译和解释。   据一位华人专家介绍,该诊断仪器属于一种便携式小型免疫发光仪,可以在很短的时间内分析10个样品,可用于传染病,心脏病等等疾病的诊断,也可以用于毒品滥用的检测等。另一位专家表示,目前我国存在样品集中化的特点,而多通道微流控芯片技术可以实现高通量检测,应该很适合我国国情。据了解,目前在这个生物化学检测领域几乎都是非常贵的大型的仪器。   该公司希望通过许可合作等方式开展合作,寻找公司共同生产,目前 已在中国科技交流中心网站登记相关技术信息,该仪器的详细资料可查询:http://www.biosensia.com/rapiplex/ (撰稿:叶建)
  • 打破垄断 中科院企业共制全自动荧光免疫分析仪问世
    p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/noimg/978f6695-5ee9-4c47-a7f8-755a789d2daa.jpg" title=" 0.jpg" / /p p   从2013年8月份开始启动研发计划,到2018年3月正式对外发布产品,在四年多的时间里,这款全自动荧光免疫分析仪见证了科研院所与企业共同合作,进行科技成果转移转化的全过程。 /p p   “5、4、3、2、1”,3月17日,伴随着现场倒计时,中科院苏州医工所与苏州鼎实医疗科技有限公司(以下简称苏州鼎实)共同研发的全自动荧光免疫分析仪在第十五届检验医学暨输血仪器试剂博览会上顺利亮相。 /p p   从2013年8月份开始启动研发计划,到2018年3月正式对外发布产品,在四年多的时间里,这款全自动荧光免疫分析仪见证了科研院所与企业共同合作,进行科技成果转移转化的全过程。 /p p   strong  “市场牵引 双轮驱动”下的合作 /strong /p p   “我们的研发起源于一次巧合”,中科院苏州医工所副研究员程文播告诉《中国科学报》记者:“2012年前后我们针对免疫分析仪申报了一项技术专利,当时也没有更多的后续计划。没想到苏州鼎实通过网络搜索,看到了这项专利,他们主动找到所里,认为可以在科研成果转化方面做文章。” /p p   就是这样一次机缘,让“技术”和“市场”擦出了火花。 /p p   干式免疫分析检测技术作为体外诊断技术之一,在免疫指标检测产品中得到了广泛的应用。“我们希望可以结合干式免疫分析检测技术与自动化技术,研制出一款可单人份检测的、避免交叉污染,并且高度智能化的检测产品。”苏州鼎实总经理席秋子说。 /p p   2013年,所企双方签订合作协议,共同研发全自动荧光免疫分析仪及配套试剂,投入资金900万元。 /p p   程文播表示,双方分工明确、互相配合。在人员团队方面,苏州医工所所领导极其重视,科研管理部门积极参与,为项目的顺利实施提供了政策和机制保障。苏州医工所先后投入了20余位科研人员负责产品的原理验证、关键技术攻关、整机研发,同时,苏州鼎实也投入20余人负责产品的工艺改进、注册检验等。 /p p   程文播说:“项目在2015年就设计完成了第一代样机,可以实现预期功能。但经过自我评估后,我们觉得并未达到理想状态,因此经过艰难的抉择,团队决定对第一代产品进行重新设计,最终在2018年完成了第二代样机的设计。” /p p   对于一项新产品,研发过程既不易又烦琐。程文播掰着指头告诉记者:“我们先后经历了研发、工程化、产品注册、批量生产等多个阶段,最终推出了目前的自动化免疫分析系统。” /p p   strong  自主创新打破欧美市场垄断 /strong /p p   据记者了解,产品的核心技术来源于“CRP侧向流免疫层析试纸条及其配套用全自动荧光免疫检测仪器”项目,由苏州医工所研究员王弼陡、尹焕才和程文播带领三个团队共同合作完成。项目产生了发明专利7件,实用新型专利11件,软件著作权1项。以姑苏科技创业天使计划和苏州高新区领军人才项目为牵引,形成了具有自主知识产权的自动干式荧光免疫分析仪及配套试剂技术。 /p p   席秋子说:“我们将自动化控制、微量液体加样、互联网远程数据分析、无线测量分析控制、免疫荧光侧向层析技术、标准化试剂溯源流程控制等科技手段相融合,研制出可快速定量检测人体内特定蛋白的体外诊断产品,为临床疾病诊断提供准确、有效的判读依据。” /p p   据了解,这台全自动荧光免疫分析仪可以用于感染因子、心脏标志物、肿瘤标志物、传染性疾病、微生物病原体等指标检测,通过自主创新,成功打破了由欧美日等发达国家长期垄断全自动临床检验分析类仪器中高端市场的格局。 /p p   在产品发布现场,记者看到每个仪器都连接了一个平板电脑。程文播说:“我们研制了专门的软件系统。通过PAD与机器无线连接,使检验人员摆脱了物理空间约束,未来还支持结果的远程传输,一台终端同时控制多台机器,可以进一步提高检验效率。”他表示整机体积是同类产品的三分之二,在保持每小时60个通量的同时,集成了多个自动化部件,实现了从样本进样到最终检测的全过程的顺利运行。 /p p   与此同时,全自动荧光免疫分析仪采用了纯干式解决方案,通过一次性吸头,提高了结果的准确性,彻底避免了检测样本交叉污染的困扰 独创的样品自动摇匀系统,可有效避免全血样本凝血的产生。通过国内最小检测卡机弹夹机构的设计,大大缩小了检测卡厚度。 /p p   席秋子告诉记者,全自动荧光免疫分析仪是国内首家实现自动脱帽功能的产品,通过自行设计的小型XYZ机械臂配合自动微量移液器,配合小型耗材、圆盘式的结构以及脱帽结构,实现了移动灵活、精度高、取样加样精准和检测准确的需求。 /p p strong   未来市场大有可为 /strong /p p   现在,通过科研团队的努力,全自动干式荧光免疫分析仪已取得了产品注册证,C反应蛋白和降钙素原定量检测试剂盒已取得临床报告,降钙素原、C反应蛋白联合、血清淀粉样蛋白A以及胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II联合等8种定量检测试剂盒已取得型检报告。 /p p   席秋子告诉记者,随着生活水平的不断提高和人口老龄化的不断加剧,人们对健康问题的关注和需求也发生了根本性的变化,“精准诊断”已成为未来整个健康和检验行业所关注的核心问题。 /p p   体外诊断产品行业不断发展和技术进步给检验行业注入了新的活力,其中现场快速检验设备因为可以在床旁检测、所需样本量少、结果报告时间短以及易于实现智能化等优势,已经成为检验领域的一颗新星。 /p p   面对巨大的市场需求和空白,苏州医工所和苏州鼎实也有了新的合作计划和目标。未来五年,苏州医工所还将努力构建“人才、科技、产业、资本、市场”五位一体的集团式新型研发机构,为“健康中国”战略和中科院“率先行动”计划奋勇拼搏。 /p p   席秋子说:“现在产品已经投入河北、江苏等省市,未来我们将制定目标销售计划,有计划兼并同行细分龙头企业,并参股控股同类有特点的中小型上下游关联企业或区域经销公司,进行生态圈的建设。” /p
  • 120万!福建省立医院全自动时间分辨荧光免疫分析仪采购项目
    项目编号:[3500]FJYS[GK]2022183项目名称:福建省立医院全自动时间分辨荧光免疫分析仪采购项目预算金额:120.0000000 万元(人民币)采购需求:品目号品目编码及品目名称采购标的数量(单位)允许进口简要需求或要求品目预算(元)中小企业划分标准所属行业1-1A02321900-临床检验设备全自动时间分辨荧光免疫分析仪1(套)是本项目为福建省立医院全自动时间分辨荧光免疫分析仪采购项目。具体详见招标文件1,200,000.00工业合同履行期限:自合同生效之日起至合同约定的合同义务履行完毕本项目( 不接受 )联合体投标。
  • “CRP侧向流免疫层析试纸条及其配套用全自动 荧光免疫检测仪器”项目通过验收
    p   7月22日上午,“CRP侧向流免疫层析试纸条及其配套用全自动荧光免疫检测仪器”项目验收会在中国科学院苏州生物医学工程技术研究所召开,项目甲方苏州鼎实医疗科技有限公司代表、苏州医工所项目组和计划与质量处相关人员参加会议。 /p p   苏州医工所计划处副处长郭智慧主持会议,并首先概述了项目情况,该项目合同自2013年8月正式签署,至今已近5年,在鼎实医疗和苏州医工所项目团队的密切合作下,全自动荧光免疫检测仪器在2017年已取得医疗器械注册证,已迭代开发至第二代产品,2018年3月在第十五届检验医学暨输血仪器试剂博览会上该仪器成功亮相,引起市场高度关注;配套试纸条产品也已开发完成,性能稳定,生产场地、工艺均已具备,目前正在注册办证过程中,预计2018年底能够取得注册证。项目已达到预期目标和成果,具备验收条件。 /p p   接下来,项目分系统负责人尹焕才和程文播(钱庆)分别代表试纸条组、仪器组,向参会人员总结汇报了设计开发过程与结果,涵盖了从设计输入(需求分析、法规标准调研等)、方案评审、详细设计、设计验证(性能指标、老化耐久、电气安全、EMC等)直至设计开发输出(设计文件、工艺文件、物料清单、生产仪器清单、注册文件等)的全过程,以及整个项目期间的经验教训和体会感悟。 /p p   经参会鼎实医疗代表审议项目总结报告、技术文件,并与项目组进一步讨论后,认为项目完成了合同规定的全部研究内容,各项指标达到合同要求,验收资料完整,同意项目通过验收。 /p p   苏州鼎实医疗科技有限公司总经理席秋子表示,5年来,此项目得到了苏州医工所的大力支持,配备了大量的高水平研发人员,双方在良好信任和积极沟通的基础上,充分发挥人才互补,鼎实医疗派出的研发人员长期加入苏州医工所项目组共同开展研发工作,不仅将项目设计开发、转产、注册办证过程中遇到的困难纷纷化解,还协助鼎实医疗培养了一支具备接产转产能力的研发生产队伍。希望能将鼎实医疗与苏州医工所的合作转化模式作为样本,持续部署新的合作项目,助力苏州医工所构建“人才、科技、产业、资本、市场”五位一体的集团式新型研发机构。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/79140c79-b2a2-4084-a5ff-f520bc0b3e83.jpg" title=" W020180723530102947416.jpg" / /p p style=" text-align: center " 验收会现场 /p
  • 中科院深圳先进院马英新团队开发新冠S蛋白检测的比率荧光免疫新方法
    近日,中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所马英新课题组在国际学术期刊 Sensors and Actuators B: Chemical 上发表了题为:Construction of ratiometric Si-Mn:ZnSe nanoparticles for the immunoassay of SARS-CoV-2 spike protein 的研究论文。 该研究开发了一种比率型荧光探针(Si-Mn:ZnSe NPs),通过结合酶联免疫反应(ELISA)模型,建立了一种新冠病毒(SARS-CoV-2)刺突蛋白(S蛋白)的免疫荧光检测方法。 以SARS-CoV-2假病毒和VSV-G假病毒作为实际样本考察该方法的传感性能,结果显示该方法对SARS-CoV-2假病毒响应特异性良好,具有与商品化试剂盒相当的检测灵敏度,为诊断SARS-CoV-2感染提供了一种可靠的潜在思路。 S蛋白是新冠病毒侵染过程中的关键成分,具有识别目标细胞和促进膜融合的作用。因此,快速检测S蛋白对新冠疫情的防控至关重要。 目前,新冠感染早期诊断的主流方法有三种,包括分子检测(检测病毒RNA)、抗体检测(检测IgG和IgM抗体)和抗原检测(检测病毒蛋白)。相比其他两种方法,抗原检测特异性好且反应时间短,在大批量SARS-CoV-2阳性筛查中,已得到广泛应用。当下市场上的抗原自测试剂盒多数依托胶体金免疫测流层析技术,灵敏度低限制了其应用场景。 量子点(QDs)具有吸收光谱宽、斯托克斯位移大、荧光强度高和生物毒性低的优势,是一类理想的荧光探针,在生化分析领域得到广泛应用。据研究,荧光法的灵敏度是比色法的10~100倍,荧光免疫分析有望提升病毒抗原检测的灵敏度。本研究构建的比率荧光法采用Si-Mn:ZnSe NPs双发射探针,相当于在检测系统中添加了一项内标校准,解决了单发射探针强度受环境变化、探针浓度变化和仪器波动的影响较大的局限性,具有灵敏度高、稳定性好的优点。图2:(A)Si-Mn:ZnSe NPs探针构建;(B)比率荧光ELISA法检测SARS-CoV-2 S蛋白原理。通过形成固定化CAT的免疫复合物,可将检测S蛋白含量转化为检测体系内H2O2含量。 根据上述原理图,该团队通过Si dots和Mn:ZnSe QDs的自组装作用制备了Si-Mn:ZnSe NPs探针。首先考察了Si-Mn:ZnSe NPs的荧光强度对H2O2浓度的响应。随着H2O2浓度从0μmol/L增加到50μmol/L, Si-Mn:ZnSe NPs在610nm处的荧光被明显猝灭,而440nm处的荧光没有明显变化。这证明通过比率荧光的方法检测体系中的H2O2浓度是可行的(图3)。过氧化氢酶(CAT)可以催化H2O2分解,因此,CAT介导的ELISA可以用于S蛋白的免疫分析。图3:Si-Mn:ZnSe NPs对H2O2响应的荧光光谱 在最优反应条件下,S蛋白浓度与Si-Mn:ZnSe NPs的荧光强度比呈线性关系。如图4A和4B所示,随着S蛋白浓度从0.05ng/mL增加到300ng/mL, Si-Mn:ZnSe NPs在610nm处的荧光发射强度逐渐增强。如图4C所示,lg(S)与荧光信号比(F610/F440)在0.05~10ng/mL范围内呈良好线性关系(y = 0.2318x + 0.3378, R2 = 0.9904)。图4D显示,S蛋白浓度与荧光信号比(F610/F440)在5~50ng/mL范围内呈良好线性关系(y = 0.0116x + 0.4479, R2 = 0.9987)。本方法对S蛋白检出限为0.032ng/mL。图4:不同浓度SARS-CoV-2 S蛋白存在下Si-Mn:ZnSe NPs的荧光光谱(A)与信号比(B);SARS-CoV-2 S蛋白浓度与荧光信号比的线性拟合(C-D) 前期工作中,该团队将SARS-CoV-2 S蛋白整合到HIV假病毒合成系统中,构建SARS-CoV-2 S蛋白假病毒(ACS Appl. Mater. Interfaces, 2021, 13, 21, 24477-24486.)。 本研究以上述SARS-CoV-2 S蛋白假病毒作为实际样本模型考察了本方法的准确性与重现性,并与商品化试剂盒检测结果进行对比(图5)。结果显示,所建比率荧光ELISA法测定的S蛋白浓度与商品化试剂盒相似,表明该方法具有较高准确性。构建VSV-G假病毒作为阴性对照,采用比率荧光ELISA法检测SARS-CoV-2假病毒和VSV-G假病毒中的S蛋白,结果如图6所示,10组SARS-CoV-2假病毒均有检出,而10组VSV-G假病毒均无检出,表明该方法对SARS-CoV-2 S蛋白检测具有较高的特异性。图5:商品化试剂盒和本方法测定SARS-CoV-2假病毒S蛋白的结果。n.s.表示不显著,*表示p<0.05。图6:比率荧光ELISA法检测SARS-CoV-2假病毒和VSV-G假病毒S蛋白的结果 本研究以水热法制备了Si dots,水浴法制备了Mn:ZnSe QDs,通过二者静电相互作用自组装合成具有良好pH稳定性和光稳定性的Si-Mn:ZnSe NPs。H2O2可以特异性猝灭探针位于610nm处的荧光而对440 nm处的荧光无影响。在ELISA体系中,通过固定化CAT免疫复合物巧妙地将检测S蛋白浓度转化为检测体系内H2O2浓度。结果显示,在0.05~10ng/mL和5~50ng/mL浓度范围内,S蛋白浓度与荧光信号比(F610/F440)呈良好线性关系,检出限为0.032ng/mL。构建SARS-CoV-2假病毒作为实际样本模型,所构建方法的检测结果与商品化试剂盒相当。综上,所构建的比率荧光ELISA方法对SARS-CoV-2 S蛋白具有较高准确性和特异性,可作为一种新型诊断方法协助病毒感染筛查。
  • 福建物构所稀土纳米探针荧光免疫分析研究获进展
    镧系解离增强荧光免疫分析技术(DELFIA)作为目前最灵敏的荧光生物检测方法,在科学研究和医疗领域已获得广泛的商业应用。商用的DELFIA试剂盒采用传统的分子探针如稀土螯合物作为标记物,存在着稀土离子标记比率低(最高10~30个稀土离子)、光化学稳定性差和价格昂贵等缺点。与稀土螯合物相比,稀土纳米发光材料具有化学稳定性高、可修饰性好、潜在生物毒性低等优点,是目前普遍看好的新一代荧光生物标记材料。然而,由于稀土离子4fN电子组态间的禁戒跃迁特性,直接利用稀土离子自身的敏化发光无法达到高灵敏检测的需求。因此,科学家设想能否结合DELFIA技术,将稀土纳米晶作为纳米探针替代分子探针稀土螯合物,利用纳米晶高度浓缩的稀土离子(每个纳米晶含成千上万个稀土离子)来提高其标记比率,并借助DELFIA增强液将纳米晶溶解生成大量强发光的稀土胶束,从而达到提高发光与检测灵敏度的目的。   在国家自然科学基金杰出青年科学基金、科技部&ldquo 973&rdquo 计划和重大科学仪器开发项目、中科院战略性先导科技专项和创新国际团队项目等支持下,中国科学院福建物质结构研究所中科院光电材料化学与物理重点实验室陈学元研究小组和结构化学国家重点实验室黄明东研究小组合作,发展了一种基于稀土纳米晶溶解增强的荧光免疫分析技术(DELBA)。该技术沿用了商用DELFIA的操作流程,简单地以稀土纳米探针替代分子探针稀土螯合物,利用稀土纳米晶高度浓缩的稀土离子提高其标记比率,极大地增强了体系的发光与检测灵敏度。项目组通过高分辨荧光光谱、元素分析等手段,以~9 nm NaEuF4为纳米荧光探针和&beta -萘甲酰三氟丙酮(&beta -NTA)为增强剂,揭示了稀土纳米晶溶解增强的发光机理,并实现了对人体广谱肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)的高灵敏DELBA检测,检测极限达0.1 pg/mL,比商用DELFIA试剂盒降低了近3个数量级,为迄今CEA检测最优值。进一步地,该团队利用发展的DELBA技术测试了肿瘤医院20例血清CEA值,结果与商用DELFIA试剂盒基本一致,并通过测定变异系数、回收率等验证了该方法的准确度和可靠性。上述工作以通讯形式于8月11日在线发表在《德国应用化学》杂志上(Angew. Chem. Int. Ed. 2014, 53, DOI: 10.1002/anie.201405937),并申请了中国和PCT国际发明专利。   此前,该团队在基于稀土纳米荧光探针的肿瘤标志物检测方面已取得系列研究进展。例如,利用LiLuF4:Yb3+,Er3+上转换纳米荧光探针实现了对疾病标志物人绒毛膜促性腺激素&beta 亚单位(&beta -hCG)的上转换荧光(UCL)检测(Angew. Chem. Int. Ed. 2014, 53, 1252 Frontispiece) 利用超小CaF2: Ce3+/Tb3+纳米荧光探针实现对人体肿瘤标志物可溶性尿激酶受体(suPAR)的时间分辨荧光共振能量传递(TR-FRET)检测(Angew. Chem. Int. Ed. 2013, 52, 6671)。   基于稀土纳米探针的溶解增强荧光免疫分析原理示意图:a-传统DELFIA b-新技术DELBA
  • 获批二类医疗器械|宇测生物单分子全自动荧光免疫分析仪
    2022年06月20日,苏州宇测生物科技有限公司旗下核心技术产品基于单分子分析策略的全自动荧光免疫分析仪Dx-90获得由江苏省药品监督管理局许可的二类医疗器械注册证批文(苏械注准20222221358)。Dx-90的获批预示着宇测生物在超敏免疫检测领域充分的领先优势,也预示着宇测生物在新型生物标志物超敏检测领域“产学研医”转换上将实现商业模式的完整闭环。单分子免疫检测技术开创新型生物标志物大航海时代苏州宇测生物科技有限公司是为数不多实现单分子免疫诊断技术产业化的高新科技型公司,核心技术具备完全自主知识产权。与传统免疫技术相比,宇测生物单分子免疫检测技术凭借超高分子信号识别分辨率,通过数字化单分子定量策略,打破了传统免疫检测技术瓶颈,实现近1000倍灵敏度的提升,其高通量、全自动、高灵敏度的单分子免疫技术平台使得逾千种低丰度生物标志物的临床应用成为可能。宇测生物单分子转化平台促进新型生物标志物临床转化迄今为止,宇测生物已打造“产学研医”新型生物标志物转化平台,结合开放式半自动单分子免疫检测系统和全自动单分子免疫诊断系统,提供生物标志物初筛——核心生物标志物试剂盒开发——临床单分子免疫检测产品转化的完整解决方案。以完全开放的心态寻求新型生物标志物的研发和临床转化,彻底解决新型生物标志物临床转化“卡脖子”问题。公司坚持“以精准检测成就人类健康,以科技创新创造无限未来”的创新理念,凭借扎实的科研能力和创新技术,不断研发有竞争力的产品,紧抓客户需求,引领国内单分子免疫诊断领域前行。关于苏州宇测生物苏州宇测生物科技有限公司成立于2019年04月02日,是实现单分子免疫诊断技术产业化的高新科技型公司,核心技术具备完全自主知识产权。公司坐落于苏州工业园区纳米城,拥有近6000平方米研发生产中心,已获得包括“金鸡湖领军人才”、“姑苏领军”、“省双创”等多项荣誉,获得国内顶级资本和国际生物医药产业巨头投资。公司坚持“始于精准,致于无限”的创新理念,致力于新一代单分子免疫诊断技术的研发与产业化。公司产品技术有效解决了国内单分子免疫诊断市场上“卡脖子”的问题,成功填补了这一领域发展前沿的空白,并有希望推进下一代免疫诊断技术的变革。
  • 梅里埃对528台全自动荧光免疫分析仪主动召回
    p   梅里埃诊断产品(上海)有限公司报告,涉及产品因移液泵的堵塞和固相管顶端小贴纸的异位造成仪器光路检查液报警问题,梅里埃诊断产品(上海)有限公司对全自动荧光免疫分析仪(注册证号:国械注进20163404729)主动召回。召回级别为三级。涉及产品的型号、规格及批次等详细信息见《医疗器械召回事件报告表》。 /p p   附件:医疗器械召回事件报告表 /p p style=" text-align: center " img title=" gov_1526072996292.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/9d34e410-5007-41ce-b590-300876777c94.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" gov_1526072997367.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201805/insimg/108c1d76-99cc-40c0-9fd2-1e2d2446412d.jpg" / /p p br/ /p
  • NirVivo系统应用分享|Au44团簇配体功能化用于NIR-II荧光成像引导的光激活肿瘤免疫治疗
    免疫疗法(immunotherapy)是在机体免疫功能低下或亢进时,利用生物学、化学、物理学手段人为地增强或抑制机体的免疫功能来对抗癌细胞的一种方法,但存在靶向不良反应、缺乏实时监测技术和反应不可持续等问题。 近期,青岛科技大学袁勋教授课题组设计了一种基于超小金纳米团簇(NC)的诊疗探针,并将其用于近红外二区窗口(NIR-II)荧光成像指导的光学治疗和光激活癌症免疫治疗。 该设计的关键是采用具有单线氧(1O2)可切割功能的连接分子将原子精确且具有近红外二区荧光(NIR-II PL)特性的Au44MBA26 NCs与小分子免疫抑制剂NLG919偶联,获得肿瘤诊疗探针Au44MBA26-NLG NCs(图1)。 图1 Au44MBA26 NCs的结构及近红外光激活机制。 该探针(Au44MBA26-NLG)由具有精确的原子结构和NIR-II发射性能的Au44MBA26 NCs(MBA表示水溶性4-巯基苯甲酸)通过单线态氧(1O2)切割的连接子与免疫检查点抑制剂NLG919偶联而成。 在近红外光照射下,Au44MBA26-NLG不仅可以对肿瘤进行NIR-II PL成像以指导肿瘤治疗,还可以利用光热特性进行癌症光热治疗(PTT)以及利用光生成的1O2进行光动力治疗(PDT),并释放NLG919以用于癌症免疫治疗。 图2瘤内注射AU、MBA、-NLG后不同时间点的4T1荷瘤小鼠NIR-11PL图像。(左)图3 Au44MBA26-NLG在肿瘤部位的荧光强度(右)图4 局部开窗区域的荧光强度分布(Rois)。 实验结果表明,由Au44MBA26-NLG调节的多重效应可促进效应T细胞的增殖和活化,提高全身抗肿瘤T淋巴细胞(T细胞)的免疫力,显著抑制活体小鼠的原发和远端肿瘤的生长。 综上所述,该研究能够为NIRII PL成像指导的光学治疗和光激活癌症免疫治疗提供一个新型高效的纳米诊疗平台。 图4 Au44MBA26-NLG NCs探针用于NIR-II荧光成像引导的肿瘤光疗(PTT/PDT)和光激活免疫治疗示意图。目前,这篇论文已经被《ACS Nano》期刊正式接收,想要查看完整英文版全文的读者,可以复制下方链接获取。https://doi.org/10.1021/acsnano.3c02370 值得一提的是,在上述研究中,研究团队选择了由北京睿光科技有限责任公司与医学影像的专业团队联合开发的国产活体荧光成像系统——NirVivo系列小动物活体荧光成像系统,并将此作为实验的核心仪器之一。NirVivo系列小动物活体荧光成像系统目前,该系统拥有三个型号可供选择,分别是NirVivo-lite、NirVivo-Pro和NirVivo-MIX,可以对可见光、近红外一区及近红外二区谱段开展生物自发光和荧光成像实验,拥有完整的自主知识产权,配置灵活,操作简洁,成像效果好。 可覆盖400-1700nm全谱段成像; 采用-80℃深度制冷科学级成像器件,可实现5分钟以上曝光; 高度集成的软硬件系统,可实现一键自动采集,提高实验效率; 宽视场和显微视野可选,可实现局部区域显微荧光成像;
  • 获证上市|指真生物流式荧光发光免疫分析仪可实现多种分泌性蛋白多联检
    日程&报名:https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/icfcm2023/指真生物经过多年流式细胞仪研发生产积累,以及自主研发、自主生产的多重磁性荧光编码微球技术积累,突破掌握了全自动流式荧光发光免疫分析技术,并设计开发了领先的重磅新品:HighFlux系列全自动流式荧光发光免疫分析仪。此系列仪器近期在北京市药品监督管理局获批上市。该技术平台融合流式检测技术、激光分析技术、荧光编码微球技术、生物标记技术及数字信号转换技术为一体,在同一反应体系中可对多种指标进行快速、定量检测,从而实现多种分泌性蛋白多联检,满足临床诊断或基础科学研究需求。HighFlux系列全自动流式荧光发光免疫分析仪技术原理基于指真生物自主研发的荧光编码微球系统,通过微球内部两种不同浓度荧光染料的排列组合,形成数十种不同荧光编码微球。将不同种类单克隆抗体偶联至荧光编码微球表面,形成“抗体-荧光编码微球”复合物,再利用“夹心法”或“竞争法”检测样本中对应待测物的浓度,实现多联检。解决的问题与痛点在医院检验科,目前最常用免疫检验技术---化学发光法,但化学发光法也有技术瓶颈---单指标检测。在二甲以上医院,它的检测效率往往无法满足高速增长的临床检测量,让院方非常头疼。要想解决这个矛盾,常规方法一是增加检测仪器,但这对医院场地和科室成本提出了较高的要求;二是增加单机检测效率,如使用联检技术等。指真生物HighFlux系列产品同时解决了这两个问题:1、解决单指标检测,HighFlux实现多联检、高通量HighFlux产品最大检测通量为120样本/h,每管内可实现多指标联检。举例来说,12因子检测可以实现1440测试/h,单位时间大幅度提高了检测通量。2、HighFlux体积小巧,节省实验室空间,提高空间利用率HighFlux产品为桌面机,产品尺寸:70cm(W)×90cm(D)×65cm(H)。1台化学发光仪器空间可以摆放3台HighFlux仪器,极大节省实验室空间。配套检测菜单细胞因子系列产品包含临床上常用的细胞因子检测试剂,主要有IL-1β/IL-2/IL-4/IL-5/IL-6/IL-8/IL-10/IL-12p/IL-17/TNFα等。主要临床应用:辅助疾病诊断、感染早期诊断;评估感染严重程度、细胞因子风暴监测;免疫状态评估、用药检测及预后等。肿瘤标志物覆盖常见的肿瘤标志物检测试剂,包括肺癌测定试剂盒、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)。感染评价指标涵盖临床常用的四种感染评价指标,实现一机检测感染。主要检测试剂有SAA/CRP联检试剂(1:200)、C-反应蛋白(CRP)(1:200)、PCT/IL-6联检试剂、降钙素原(PCT)、白介素6(IL-6)。性激素检测八种性激素检测试剂,主要有促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、抗缪勒管激素(AMH)、泌乳素(PRL)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)。持续开发中......
  • Science子刊| 多色免疫荧光标记联合转录组测序助力解析宫颈癌的单细胞分子特征
    宫颈癌是全世界女性第四大常见恶性肿瘤,每年可造成30多万人死亡。宫颈鳞癌(CESC)作为宫颈癌主要病理类型约占75%,通常经历由正常宫颈到宫颈上皮内瘤变再到CESC的发生和进展过程。然而,CESC进展过程中上皮和微环境细胞相互作用关系及其关键分子途径的发展尚不清楚。2023年1月27日,山东省肿瘤医院于金明院士、岳金波教授团队与解放军总医院第五医学中心刘兵研究员团队合作在Science Advances杂志上发表了题为Single-cell dissection of cellular and molecular features underlying human cervical squamous cell carcinoma initiation and progression的研究论文。为宫颈癌的诊疗提供了疾病诊断与预后的生物标志物和潜在的治疗靶点。为了阐明了宫颈上皮细胞的转录致瘤轨迹并揭示了 CESC 启动和进展中涉及的关键因素,文章作者对来自对四组13例不同病变阶段的宫颈组织(包括NC、CIN、早期CESC和晚期CESC)的起始和进展过程中,上皮细胞、巨噬细胞、NK和T细胞、内皮细胞、成纤维细胞的转录组变化及亚群特征进行了深入探索。该研究通过单细胞转录组测序,进行了单细胞RNA测序(scRNA-seq)构建了宫颈鳞癌发生和进展过程中的细胞和分子特征图谱,发现了大量肿瘤发生和进展相关的新的细胞亚群和分子。在此基础上,提出了针对“CESC生态系统“进行分析的必要性,尤其是考虑到免疫系统是作为一个动态的整体,简单对于单个细胞亚型的描述不足以展现更大的”全景“。围绕这个目标,在文章中通过大量的转录组数据,研究者发现几个细胞簇的相对丰度显示与较短的存活期显着相关:CCL20 +Mac、APOE+Mac、epi7、CD56+NK、TH17、耗尽的CD8 +T、PODXL+EC、TNFRSF9高Treg和 mCAF。相反,其他细胞簇的丰度与更长的存活率显着相关:pDC、CD16+NK、GZMK+CD8+T、ZNF683+CD8+T、CLEC9A+DC、epi8和肥大细胞。 实验部分除了转录组测序相关之外,作者使用TissueGnostics公司TissueFAXS Plus全景组织细胞定量分析系统获取图像。在长存活率相关的因素中,作者重点提出了CESC中的epi8的高相对丰度可以促进我们观察到的高水平T细胞浸润从而增强与肿瘤细胞的串扰。文中作者表示,尽管对 CESC 进行了大量的转录组分析,但这些方法无法提供对主要细胞参与者、它们的相互作用伙伴以及驱动疾病发生和发展的关键分子途径的高分辨率洞察,尤其是CAF,作为肿瘤微环境中的关键组成部分,其通过多种机制促进恶性生长和侵袭 ,而且空间 CESC 信息对于理解细胞簇的位置及其相互作用很重要,但在 scRNA-seq 分析的解离过程中存在丢失。多重免疫荧光标记与转录组测序为了揭示了 mCAF 和 vCAF 的两个主要亚群,作者选择使用TissueFAXS Cytometry技术了,通过多重免疫荧光标记验证了它们在人类 CESC 中的存在,发现 mCAF 表达高水平的与促肿瘤途径相关的基因(主要位于富含胶原蛋白的基质条纹内),以及细胞间相互作用分析表明,mCAF 可主要通过 NRG1/ERBB3途径促进 CESC 进展,该途径参与抗雄激素对前列腺癌的抗性,在之前的研究中尚未报道。这部分内容也是TissueGnostics公司的TissueFAXS Cytometry技术在关键领域取得的最新科研进展之一。Fig 1 CESC样本组织切片中的T细胞(PAN-CK(红色)、HLA-DR(蓝色)、IDO1(绿色)和CD3(灰色))的多重免疫荧光标记图像。在较短存活期显著相关的因素中,作者研究了CESC进展过程中基质癌相关的呈现为细胞(mCAF)的亚群特征,发现mCAF可能促进CESC的进展,并进一步发现其作用机制是通过NRG1/ERBB3 通路来实现的。Fig 2 多重免疫荧光CESC组织样本中mCAF和vCAF上的特异性标记物。Fig 3 mCAF肿瘤特异性配体-受体对的多重免疫荧光标记,包括NRG1-ERBB3和Wnt5A-FZD6。&bull 单细胞测序技术完成了细胞水平的组学研究,但是获取的信息内缺失了细胞的空间分布信息。如果想要补充细胞的空间位置表型,就需要引入多重免疫荧光技术。多色免疫荧光技术通过单细胞分辨率的组织成像,能够多靶点、可视化地描绘细胞的复杂空间位置信息,从而揭示细胞间的相互作用关系,细化微环境的空间结构。&bull 单细胞测序技术与多重免疫荧光技术的结合能够多层次、多角度、多组学地研究肿瘤微环境及免疫微环境,同时获悉胞间联系、基因空间变化等信息,并赋予关键基因的细胞分布信息和组织分布信息,从而更加精准地研究疾病相关分子机制并探索潜在的治疗靶点。同时作者也在讨论部分,使用TissueFAXS Cytometry技术生成的数据,可以针对人体组织进行更详细的研究,以回答 scRNA-seq 无法解决特定问题。
  • 400万!福建医科大学孟超肝胆医院计划采购多色免疫荧光成像系统
    一、项目基本情况项目编号:[350101]FJKT[GK]2023003项目名称:金山院区多色免疫荧光成像系统采购方式:公开招标预算金额:4,000,000.00元采购包1(金山院区多色免疫荧光成像系统):采购包预算金额:4,000,000.00元采购包最高限价: 4,000,000.00元投标保证金: 40,000.00元采购需求:(包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等)品目号品目编码及品目名称采购标的数量(单位)允许进口简要需求或要求品目预算(元)1-1A02100404-光学式分析仪器光学式分析仪1(项)是光学式分析仪4,000,000.00本采购包不接受联合体投标合同履行期限:自合同签订之日起90日二、申请人的资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:采购包1:无3.本项目的特定资格要求:采购包1:(1)根据《福州市财政局关于进一步推进政府采购领域优化营商环境工作的通知?》(榕财采[2021]52号)规定,投标人在投标(响应)时,按照规定提供相关承诺函(详见附件“资格承诺函”)的,无需再提交财务状况、缴纳税收和社保资金缴纳等证明材料。【注意事项:采购人有权在签订合同前要求中标人提供相关证明材料以核实中标人承诺事项的真实性。投标人应当遵循诚实守信的原则,不得作出虚假承诺,承诺不实的,属于提供虚假材料谋取中标、成交,依法追究相关的法律责任。】?投标人可自行选择是否提供本承诺函,若不提供本承诺函的,应按招标文件要求提供响应的证明材料。供应商可删减承诺事项(例:如删去承诺第1项的,则应按招标文件要求提供财务状况报告。)招标文件其他地方要求与本条款要求不一致的,以本条款要求为准。;(2)招标文件规定的其他资格证明文件?所投货物若属于医疗器械管理范畴,按照国家《医疗器械监督管理条例》,应符合以下标准,1、投标人为制造商的,须提供《医疗器械生产许可证》;投标人为经销商的,投标货物若属于三类医疗器械,须提供《医疗器械经营许可证》,投标货物若属于二类医疗器械,也可提供《第二类医疗器械经营备案凭证》,投标货物若属于一类医疗器械,则须提供《第一类医疗器械备案凭证》或医疗器械经营许可证;2、投标货物属于《医疗器械监督管理条例》规定的第一类医疗器械产品应提供《第一类医疗器械备案凭证》,属于第二类、第三类医疗器械产品应取得《医疗器械注册证》(如有注册登记表应提供)。所有证件必须在有效期内。;(3)投标人针对“财务状况报告(财务报告、或资信证明)”①投标人?提供的财务报告复印件(成立年限按照投标截止时间推算)应符合?下列规定:?a.成立年限满1年及以上的投标人,提供经审计的2021?年或2022年的年度财务报告。本招标文件中若有与此处不一致的,?以此处补充说明为准。。三、采购项目需要落实的政府采购政策进口产品:进口产品,适用于本项目。本项目“品目号1-1光学式分析仪”属于清单内允许采购进口产品的情形,同时满足需求的国内产品亦可参加投标(进口产品是指通过中国海关报关验放进入中国境内且产自关境外的产品)。节能产品:节能产品按本招标文件规定执行。环境标志产品:环境标志产品按本招标文件规定执行。信息安全产品:信息安全产品按本招标文件规定执行。信用记录:(1)(根据财库〔2016〕125号文件规定,供应商不得被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单,投标人针对“信用记录查询结果”可自主提供证明材料,未提供该证明材料的不视为投标文件无效。(2)查询结果的审查:①由资格审查小组通过上述网站查询并打印投标人信用记录(以下简称:“资格审查小组的查询结果”)。②投标人提供的查询结果与资格审查小组的查询结果不一致的,以资格审查小组的查询结果为准。③因上述网站原因导致资格审查小组无法查询投标人信用记录的(资格审查小组应将通过上述网站查询投标人信用记录时的原始页面打印后随招标文件一并存档),视为查询结果未存在投标人应被拒绝参与政府采购活动相关的信息。④查询结果存在投标人应被拒绝参与政府采购活动相关信息的,其资格审查不合格。(3)若此项规定与招标文件其他部分有矛盾的,以此项规定为准。四、获取招标文件时间: 2023-03-02 至 2023-03-09 ,(提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日),每天上午00:00:00至12:00:00,下午12:00:00至23:59:59(北京时间,法定节假日除外)地点:招标文件随同本项目招标公告一并发布;投标人应先在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目下载招标文件(请根据项目所在地,登录对应的(省本级/市级/区县))福建省政府采购网上公开信息系统操作),否则投标将被拒绝。方式:在线获取售价:免费五、提交投标文件截止时间、开标时间和地点2023-03-23 09:15:00(北京时间)(自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止,不得少于20日)地点:福建省福州市鼓楼区温泉公园路69号福州市行政服务中心三楼-六、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。七、其他补充事宜无。八、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名称:福建医科大学孟超肝胆医院地址:福建省福州市鼓楼区西洪路312号联系方式:0591881162002.采购代理机构信息(如有)名称:福建康泰招标有限公司地址:福建省福州市鼓楼区湖东路169号中闽天骜大厦第十三层02A单元联系方式:0591-878035053.项目联系方式项目联系人:陈东英、原梁杰电话:0591-87803505网址: zfcg.czt.fujian.gov.cn开户名:福建康泰招标有限公司福建康泰招标有限公司2023年03月02日
  • 98万!深圳市第三人民医院荧光酶联免疫斑点分析仪采购项目
    项目编号:1243-456OTC2202502项目名称:深圳市第三人民医院荧光酶联免疫斑点分析仪采购项目预算金额:98.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):97.0000000 万元(人民币)采购需求:标的内容数量简要技术需求评标方法荧光酶联免疫斑点分析仪1台详见深圳市东方招标有限公司官网(http://www.sz-otc.com/)本项目招标公告附件内容综合评分法 合同履行期限:详见附件内容本项目( 不接受 )联合体投标。
  • NMPA最新批准3款新冠病毒检测试剂盒,分别基于CRISPR免疫层析法、胶体金法、荧光免疫层析法
    2020年12月,国家药品监督管理局批准了3款新型冠病毒检测试剂盒,基于CRISPR免疫层析法、胶体金法、荧光免疫层析法3种不同的方法分别对新冠病毒进行核酸、抗体、抗原检测。1、新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒(CRISPR免疫层析法)杭州众测生物科技有限公司研发的核酸检测试剂盒(国械注准20203400919)采用 RAA 技术扩增后,再使用 CRISPR 酶进行检测。仅需纯化的核酸分子样本,通过简单三步即可在1个小时的时间里完成检测,是国内首次批准利用 CRISPR 技术的新冠病毒检测试剂盒。其中,RAA 技术具有能在常温反应、检测快速、操作简单、灵敏度高、特异性强、结果准确等优点,是众测生物的核心技术。核酸作为病毒的遗传物质,任何物种都有独一无二的核酸序列,对样本中核酸特征序列进行检测便可确定病原体。核酸法检测优点明显,缺点也明显,优点直接检测有无病毒核酸片段,特异性强,敏感度相对高;缺点是耗时较长,平均检测时间需要2-3个小时,另外需要特定场所,过程繁琐、样品前处理较麻烦,且还存在标本采样位置选择带来的假阴性。2、新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM/IgG抗体检测试剂盒(胶体金法)这款检测试剂盒(国械注准20203400921)由浙江东方基因生物制品股份有限公司研发。采用胶体金法,对病毒在人全血、血清或血浆中的IgG和IgM抗体进行快速检测。胶体金检测法具有简单、快速、方便等特点,15分钟左右出结果,且可用肉眼观察结果,较适合快速现场筛查。但时间窗口期的存在决定它不能完全替代核酸法,是核酸检验法的有益补充。3、新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原检测试剂盒(荧光免疫层析法)深圳华大因源医药科技有限公司(华大基因子公司)研发的抗原检测试剂盒(国械注准20203400940)与核酸诊断相比,是直接针对病毒中的特有蛋白质(即抗原)进行检测,能够在急性感染期快速检测出人体内是否含有病毒,提供病毒感染的直接证据,操作简便快速,可用于对疑似人群进行早期分流和快速管理。用于机场、车站、码头等大流量公共场所的分布式筛查,为疫情的全面防控提和摸底调查提供技术支持。此外,抗原快速检测的操作十分简单,非专业医技人员之外的其他医护人员也可以轻松掌握,并用以提供快速的新冠检测服务,可以大大改善医疗系统由于新冠检测所带来的超负荷状况。上述3个试剂盒所涉及的检测原理和特点有所不同。其中,核酸检测是现行金标准。因为,它是对病原体的遗传物质进行检测,如果检测结果为阳性,说明病原体的遗传物质存在于患者体内,患者正处于感染期,可直接确诊为感染病例。抗体检测是对病毒进入人体后,产生的特异性抗体进行检测。如果检测结果为阳性,说明患者体内存在针对新冠病毒的抗体,患者正处于感染期或已经康复,可作为辅助手段帮助确诊新冠感染。抗原检测是对病原体的组成蛋白进行检测。如果检测结果为阳性,说明患者体内含有病原体的组成成分,患者正处于感染期,可直接确认为感染病例。2020年12月国家药品监督管理局批准医疗器械名单
  • 江苏省分析测试协会立项《食品中黄曲霉毒素B1的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》等4项团体标准
    各有关单位:为贯彻落实国务院《深化标准化工作改革方案》,加快构建国家新型标准体系,积极有效地推进团体标准的制定工作,增加标准的有效供给。根据《中华人民共和国标准化法》《团体标准管理规定》《江苏省分析测试协会团体标准管理办法 (2022年修订版)》相关要求,经我会研讨、审查、组织专家评审、常务理事会审议通过,现就《食品中黄曲霉毒素B1的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》《挂面和方便面中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》《食品中赭曲霉毒素A的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》《植物油中玉米赤霉烯酮的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》等4项团体标准进行立项公示,我会将牵头开展此团体标准的制订工作,特此公告。如有单位或个人存在异议,请在公告之日起7日内将意见反馈至我会秘书处。 联系人:周 明;13770810997;jsfxcsxh@163.com附件:1.《食品中黄曲霉毒素B1的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表2.《挂面和方便面中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表3.《食品中赭曲霉毒素A的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表 4.《物油中玉米赤霉烯酮的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表江苏省分析测试协会2024年1月17日1.《食品中黄曲霉毒素B1的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表.doc2.《挂面和方便面中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表.doc3.《食品中赭曲霉毒素A的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表.doc4.《植物油中玉米赤霉烯酮的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》团体标准申请表.doc关于《食品中黄曲霉毒素B1的快速测定 时间分辨荧光免疫层析法》等4项团体标准的立项公告.pdf
  • 新品:肯辛顿微流控芯片-时间分辨免疫荧光POCT体外诊断系统
    p style=" text-indent: 2em " 2018年6月29日,在江苏宜兴召开的中国分析测试学会标记免疫分析专业委员会2018学术峰会新品发布会上,南京肯辛顿诊断科技有限公司杨昕博士介绍了该公司微流控芯片-时间分辨免疫荧光POCT体外诊断系统。 /p p style=" text-align: center " img title=" 1.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/3a2b376a-7973-4075-920a-6da7adfef993.jpg" / /p p style=" text-indent: 2em " 传统诊断中,大量时间被浪费在样本运送到中心实验室、组织标本前处理、标记、录入、分发等方面,核心反应及分析时间占比极低。与之相比,POCT诊断进行了步骤精简,依靠其便携及反应快速等优势,集成了“采样-分析-质控-输出”步骤为一体,从而很大程度降低了诊断时间,为患者在最佳时间窗口就诊获得了最大便利。 /p p   早期的POCT发展始于20世纪中期,主要是以干化学试纸检测血糖及尿糖。此后免疫层析和斑点金免疫渗滤等免疫测定技术推动了感染性疾病、心脏标志物等POCT技术发展。基于微流控技术的生物芯片的出现对POCT是一个重大转折,依靠微流控芯片技术,POCT已经逐步能够实现多靶向,高通量,无需样本前处理的功能。并且在通信技术逐步成熟的基础上,POCT正在向远程数据中心等方向发展。未来的POCT产品能够在便捷,可穿戴,快速进行检测分析的同时,整合远程数据终端和医疗资源进行最佳治疗,从而实现构建真正的大健康体系。 /p p   国家十三五规划关于人口健康技术专栏中明确指出:“。。。需要突破微流控芯片、单分子检测、自动化核酸检测等关键技术,开发全自动核酸检测系统、高通量液相悬浮芯片、医用生物质谱仪、快速病理诊断系统等重大产品,研发一批重大疾病早期诊断和精确治疗诊断试剂以及适合基层医疗机构的高精度诊断产品,提升我国体外诊断产业竞争力。” /p p   因此,基于POCT技术的床旁快速诊断成为了IVD行业中蓬勃发展的子行业之一。凭借快速、便捷的优势,加之新兴技术不断涌现,人口老龄化,二胎潮,政策支持,使得POCT成为IVD领域内快速增长的蓝海,即便是在欧美成熟市场中亦保持着稳健的增长。 /p p   现场报告中介绍,利用专利的微流控芯片技术,结合特殊的荧光生物反应定量试剂盒,开发出仅用几滴血就能在床旁实现疾病快速检验的系统POCT 。 /p p   该系统主要由检测器(读数器)、诊断试剂、卡盒芯片三个部分组成,整个系统均为自主研发。该系统可以用于检测心梗、心衰、凝血标志物、细菌和病毒感染标志物的检测。 /p p   目前国内市场大多为国外产品所占据,传统检验科检测需要1至2个小时,而以美艾利尔公司经典微流控POCT产品 Triage为例,检测时需200微升的全血才可在15分钟内完成对心脏标志物的检测。 /p p style=" text-indent: 2em " 肯辛顿项目产品的优势与传统技术产品对比见下表。 /p table border=" 1" cellspacing=" 0" cellpadding=" 0" tbody tr class=" firstRow" td width=" 126" valign=" top" style=" padding: 0px 7px border: 1px solid windowtext border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 性能指标 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 1px 1px 1px 0px border-style: solid solid solid none border-color: windowtext windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 传统技术(国内市场产品) /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 1px 1px 1px 0px border-style: solid solid solid none border-color: windowtext windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 本项目创新技术 /span /strong /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 检测样本要求 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 手臂静脉血(专业采集) /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 静脉/指尖血(非专业人士) /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 检测样品量 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 150-200 /span span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 微升全血/血清 /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 5 /span span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 微升血清/30微升全血 /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 检测时间 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 20 /span span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 分钟 /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 5-10 /span span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 分钟 /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 最低检测限 /span /strong strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 和线性范围 /span /strong /p p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " (以PCT为例) /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 0.2 & nbsp ng/ml /span /p p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 1ng/ml– & nbsp 50 ng/ml /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 0.1ng/ml /span /p p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 0.1ng/ml– & nbsp 50 ng/ml /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 检测器大小 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 台式机 /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 便携机 /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 检测器性能 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 变异系数CV值 15-20%% /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 变异系数CV值 5-10% /span /p /td /tr tr td width=" 126" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px border-style: none solid solid border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext padding: 0px 7px border-image: none background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " strong span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 适用单位 /span /strong /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 医院急诊科室 /span /p /td td width=" 208" valign=" top" style=" border-width: 0px 1px 1px 0px border-style: none solid solid none border-color: rgb(0, 0, 0) windowtext windowtext rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px background-color: transparent " p style=" text-align: center -ms-layout-grid-mode: char " span style=" font-family: 宋体 font-size: 16px " 医院急诊科,社区医院,地方诊所,家庭 /span /p /td /tr /tbody /table p   南京肯辛顿诊断科技有限公司是一家由南京321项目获得者,江苏省双创人才, 江苏特聘教授,海归博士,国内外医学专家,联合创立的一家致力于开发国际前沿诊断科技产品的高新科技企业。 /p
  • 国家粮食和物资储备局发布《粮油检测 谷物中赭曲霉毒素A的测定 时间分辨荧光免疫层析快速定量法》等7项行业标准征求意见稿
    各有关单位:我们组织起草的《全谷物与全谷物食品通则》等7项行业标准已形成征求意见稿,现向社会公开征求意见,截止日期为2023年10月3日。请将意见和建议反馈至全国粮标委原粮及制品分技术委员会(TC270/SC1)秘书处。联系人:陈园 010-58523656电子邮箱:tc270sc1@ags.ac.cn附件:1.全谷物与全谷物食品通则2.糙米米粉、线(干)3.全麦挂面4.易煮全谷物米5.粮油检验 小麦粉曲奇加工品质试验6.粮油检测 谷物中玉米赤霉烯酮的测定 时间分辨荧光免疫层析快速定量法7.粮油检测 谷物中赭曲霉毒素A的测定 时间分辨荧光免疫层析快速定量法8.意见反馈表国家粮食和物资储备局标准质量管理办公室2023年8月2日(此件公开发布)
  • 130万!福建省食品药品质量检验研究院酶联免疫荧光斑点分析仪采购
    项目概况 受福建省食品药品质量检验研究院委托,福建榕卫招标有限公司对[3500]RWZB[GK]2021109、2021年福建省疫苗批签发能力建设仪器设备采购项目(进口部份)组织公开招标,现欢迎国内合格的供应商前来参加。 2021年福建省疫苗批签发能力建设仪器设备采购项目(进口部份)的潜在投标人应在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目获取采购文件,并于2022-01-17 14:30(北京时间)前递交投标文件。一、项目基本情况 项目编号:[3500]RWZB[GK]2021109 项目名称:2021年福建省疫苗批签发能力建设仪器设备采购项目(进口部份) 采购方式:公开招标 预算金额:1300000元 包1: 合同包预算金额:1300000元 投标保证金:13000元 采购需求:(包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等)品目号品目编码及品目名称采购标的数量(单位)允许进口简要需求或要求品目预算(元)1-1A032017-临床检验设备酶联免疫荧光斑点分析仪1(套)是详见招标文件1300000 合同履行期限: 合同签订后 ( 90) 天内交货 本合同包:不接受联合体投标二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.本项目的特定资格要求: 包1 (1)明细:特别提示:单位负责人授权书(若有) 描述:纸质投标文件正本中的本授权书(若有)应为原件。电子投标文件中的本授权书(若有)应为原件的扫描件(即单位负责人签字或盖章和投标人代表签字并加盖投标人公章的原件扫描件)。投标人应按照招标文件第七章规定提供。(如项目接受联合体投标,对联合体应提出相关资格要求;如属于特定行业项目,供应商应当具备特定行业法定准入要求。) 三、采购项目需要落实的政府采购政策 进口产品,适用于(所有合同包或品目号)。节能产品,适用于(所有合同包或品目号),按照《关于印发节能产品政府采购品目清单的通知》财库〔2019〕19号执行。环境标志产品,适用于(所有合同包或品目号),按照《关于印发环境标志产品政府采购品目清单的通知》财库〔2019〕18号执行。信息安全产品,适用于(所有合同包或品目号)。小型、微型企业符合财政部、工信部文件(财库〔2020〕46号),适用于(所有合同包或品目号)。监狱企业,适用于(所有合同包或品目号)。促进残疾人就业 ,适用于(所有合同包或品目号)。信用记录,(所有合同包或品目号),按照下列规定执行:(1)投标人应在(本项目投标截止时间)前分别通过“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)查询并打印相应的信用记录(以下简称:“投标人提供的查询结果”),投标人提供的查询结果应为其通过上述网站获取的信用信息查询结果原始页面的打印件(或截图)。(2)查询结果的审查:①由资格审查小组通过上述网站查询并打印投标人信用记录(以下简称:“资格审查小组的查询结果”)。②投标人提供的查询结果与资格审查小组的查询结果不一致的,以资格审查小组的查询结果为准。③因上述网站原因导致资格审查小组无法查询投标人信用记录的(资格审查小组应将通过上述网站查询投标人信用记录时的原始页面打印后随采购文件一并存档),以投标人提供的查询结果为准。④查询结果存在投标人应被拒绝参与政府采购活动相关信息的,其资格审查不合格。四、获取招标文件 时间:2021-12-24 15:00至2022-01-08 18:00(提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日),每天上午00:00:00至11:59:59,下午12:00:00至23:59:59(北京时间,法定节假日除外) 地点:招标文件随同本项目招标公告一并发布;投标人应先在福建省政府采购网(zfcg.czt.fujian.gov.cn)免费申请账号在福建省政府采购网上公开信息系统按项目下载招标文件(请根据项目所在地,登录对应的(省本级/市级/区县))福建省政府采购网上公开信息系统操作),否则投标将被拒绝。 方式:在线获取 售价:免费五、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2022-01-17 14:30(北京时间)(自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止,不得少于20日) 地点:福建省福州市鼓楼区省府路1号金皇大厦15层 - 1号开标室六、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。七、其他补充事宜 /八、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:福建省食品药品质量检验研究院 地 址:福州市通湖路330号 联系方式:87622559 2.采购代理机构信息(如有) 名 称:福建榕卫招标有限公司 地  址:福州市鼓楼区省府路1号金皇大厦15层 联系方式:0591-87512357 3.项目联系方式 项目联系人:林停、温靖 电   话:0591-87512357 网址:zfcg.czt.fujian.gov.cn 开户名:福建榕卫招标有限公司 福建榕卫招标有限公司 2021-12-24
  • 针对骨肉瘤的Cu和Ce基氧化物纳米平台,用于NIR-II荧光/磁共振双模成像和ros级联扩增以及免疫
    本文要点:骨肉瘤是一种致命的骨肿瘤,多发于儿童和青少年,具有局部破坏性和高转移性。迫切需要针对骨肉瘤具有高治疗效果和精确诊断的独特纳米平台。多模态光学成像和程序化治疗,包括协同光热-化学动力学治疗 (PTT-CDT) 引发免疫遗传性细胞死亡 (ICD) 是一种有前途的策略,它具有高生物成像灵敏度,可准确描绘骨肉瘤,治疗效果显著,副作用可忽略不计。动物活体成像系统方案1. 骨肉瘤靶向mCu&Ce@ICG/RGD的构建过程示意图,用于NIR-II荧光/MR生物成像和PTT-CDT-ICD协同肿瘤抑制本文开发了一种简便的一步法合成具有介孔纳米结构的多功能 Cu&Ce 氧化物纳米球 (mCu&Ce)。据报道,在 ICG 封装和 RGD 肽表面接枝(mCu&Ce@ICG/RGD) 后,该纳米平台可准确识别骨肉瘤并在肿瘤微环境 (pH = 6.5) 下触发 ICG、Cu 和 Ce 离子的剧烈释放(方案1)。进入骨肉瘤肿瘤细胞后,mCu&Ce@ICG/RGD 可在近红外激光照射下有效产生高温并进而促进&bull OH 的生成。PTT/CDT 协同肿瘤消融将在体外和体内实现。同时,热量和扩增的 ROS 都通过激发 ICD 来激活有效的 T 细胞生成,从而产生全身抗骨肉瘤免疫反应,从而显著介导有效的肿瘤免疫治疗。此外,基于Cu&Ce 的纳米平台可以通过 NIR-II 荧光和磁共振双模生物成像对骨肉瘤进行精确的早期诊断。总之,本研究设计了一种具有双模生物成像特性的简便的 Cu&Ce 纳米平台。它可以特异性地识别骨肉瘤,并通过 PTT 增强的 CDT 实现癌细胞抑制,从而进一步显著诱导 ICD 增强。图1. mCu&Ce@ICG/RGD 的表征mCu&Ce@ICG/RGD纳米平台的制备具体流程如图1所示。首先以氯化铜(CuCl 2)和氯化铈(CeCl 3)为前驱体(重量比=7:3)在水相体系中首次制备出亲水性的mCu&Ce纳米粒子,在90°C下搅拌均匀后,加入乌洛托品不同时间后可得到一系列表面粗糙的合金化Cu&Ce纳米球。进一步临床荧光团ICG负载到中孔纳米结构中(mCe&Cu@ICG),负载效率约为12.5 &thinsp %(w/w)。接下来,为了延长血液循环时间并进行随后的靶向修饰,将亲水性PEG 2000 -NH 2包裹在mCe&Cu@ICG的界面上。最后,通过脱水缩合反应将活性骨肉瘤识别配体RGD交联在ICG负载的双金属纳米粒子的外层(mCe&Cu@ICG/RGD)。令人兴奋的是,表面接枝RGD后ζ电位明显降低,这可归因于-NH2基团的消耗。在mCe&Cu@ICG/RGD中发现不明显的形态转变和尺寸变化(图 1L)。同时,与ICG类似,ICG封装纳米平台的发射光谱理想地延伸到NIR-II,并且上述两个样品的非峰值NIR-II发光图像非常强,证明了mCe&Cu@ICG/RGD的成功设计(图 1 P)图2. pH 敏感生物降解、ROS 生成和高温测定由于mCe&Cu@ICG/RGD是为了激活ICG的释放而设计的,因此在细胞外弱酸诱发下,mCe&Cu基框架生物降解发生了类Fenton反应。在pH=6.5条件处理下的生物降解效率在所有时间点都明显高于pH=7.4组,6h时框架初步崩溃,纳米颗粒释放,36h时所有纳米球消失,出现大量Cu&Ce基颗粒。这些纳米颗粒能够传导肿瘤组织浸润。在肿瘤组织中细胞外弱酸性pH值浸泡36小时后,mCe&Cu@ICG/RGD的平均直径从&sim 68nm急剧下降到&thinsp &sim 5nm ,&thinsp 进一步表明结构整体崩解。同时,在不同的孵育期内还测定了pH=6.5生理缓冲液上清液中ICG的释放曲线。我们观察到ICG染料以时间依赖性方式逐渐释放(图2C)。同时,如pH=6.5条件下释放的游离ICG的NIR-II发光图像所示,荧光信号在36小时内显著增强,明显强于pH=7.4组(图 2D)。同时,在肿瘤微环境刺激缓冲液孵育不同时间后,Cu和Ce离子的释放趋势相似,孵育36h后约有90%的Cu/Ce离子被释放。同时,在弱酸性环境下处理36h后,以商业&bull OH指示剂3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)评价Cu&Ce离子的类Fenton催化效果。在&bull OH催化下,产物氧化物TMB具有三个特征峰,显然,与mCe&Cu@ICG/RGD + L基团相比,mCu@ICG/RGD仅表现出边际ROS生成率,正如预期的那样,mCe&Cu@ICG/RGD + H2O2&thinsp + L 的&bull OH 增加量增加了 2 倍。纳米平台在高 H2O2条件下加上 808 nm 光照射时增强的化学动力学能力(图 2E)。随后,由于 ICG 对 808 nm 激光的强吸收赋予 mCe&Cu@ICG/RGD 强大的光热转换性能。如图 2F、G 所示,纳米平台的温度呈现出明显的时间相关上升趋势,在连续 300 秒的 808 nm 激光照射下温度上升到最高水平(79.1 °C),证明了快速的近红外光响应。与此形成鲜明对比的是,在相同处理下,PBS 溶液中的温度略有上升,在激光照射终点仅为 36.3 °C。此外,为了进一步检测激光-热转换效率(η),最近从冷却-加热循环计算了分散在水溶液中的mCe&Cu@ICG/RGD的热量差异(图 2H),具体的η值大约为&sim 55.92 &thinsp %(图2I)同时,在四次808nm激光开关循环后也监测到出色的光热稳定性(图 2J)。总体而言,所有结果证实了负载ICG的肿瘤响应性程序化介孔Cu&Ce纳米载体可进一步应用于通过PTT-CDT抑制恶性肿瘤。图3. PTT -CDT体外细胞杀伤及 ICD 指标的表达如图 3A所示,用RGD修饰的纳米平台处理的ICG的红光明显强于mCe&Cu@ICG和游离ICG。如图 3B 所示 ,与 mCu&Ce@ICG/RGD 组相比,mCu@ICG/RGD 组呈现出暗绿色荧光,这可以归因于前者的生物降解率低。在 pH = 6.5 的缓冲液中孵育 36 小时后,发现从 mCu 纳米叶中释放出的 Cu 离子相对较少,且含有大量 Cu 基碎片。值得注意的是,与本体溶液中的 ROS 生成趋势一致,当使用 808 nm 光照射并伴随 H2O2预处理时,该趋势会显著加强(图3G)。研究结果表明,更高的热量产生可以显著增强类 Fenton 反应,因为 ROS 增强的结果凸显了我们研究的重要性。如图 3D所示,与其他制剂相比,用 mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L处理的 143b 和 b 细胞&thinsp 介导了最高水平的 CRT,这与细胞内 ROS 扩增结果一致。此外,该组中还显示出 HMGB1 信号减弱,CRT 水平的这种相反趋势进一步证明了我们的纳米平台增强的 ICD 效应(图 3D)。随后,为了进一步说明 ICD 相关蛋白的表达,通过蛋白质印迹分析研究了各种处理后 143b 中的 CRT 和 HMGB1 水平。显然,当用 mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2 + L 处理 143b 细胞时,CRT 在细胞膜上显著上调,而 HMGB1 在细胞质中显著下调&thinsp (图 3E 、F)。与mCu&Ce@ICG/RGD 组相比,mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L中上述表达的蛋白质水平分别大约高出 2 倍和降低 5 倍&thinsp (图 3I、J),揭示了该处理强大的 ICD激发能力。最后,分别用CLSM和流式细胞仪获得活死染色图像和细胞凋亡-坏死研究。与细胞内ROS生成和HMGB1的结果类似,143b细胞在mCu&Ce@ICG/RGD + H2O2+ L中经历最有效的细胞死亡&thinsp (图 3K -N)。正如预期的那样,当mCu&Ce@ICG/RGD的浓度增加到300µ g / mL时,H2O2预孵育加激光照射组中143b细胞的细胞活力仅为纯纳米平台处理组的一半。这种最高的肿瘤细胞杀伤力主要由PTT同时扩增的ROS和ICD介导。图4. 通过荧光成像、MRI 和光热评估进行体内肿瘤靶向性评估之后,研究mCu&Ce@ICG/RGD在骨肉瘤荷瘤裸鼠模型中的生物分布和肿瘤富集行为。首先,为了获得准确的肿瘤轮廓辨别,将mCu@ICG/RGD和mCu&Ce@ICG/RGD分别静脉注射到荷瘤小鼠皮下,随后在特定时间拍摄NIR-II荧光生物图像,通过小动物NIR-II荧光成像生物系统监测该纳米平台在体内的肿瘤靶向性和生物分布。显然,在注射mCu&Ce@ICG/RGD后2 h,肿瘤轮廓逐渐清晰,荧光信号(超过1000 nm)最初集中在肿瘤部位,24 h时达最强,肿瘤轮廓与周围外周肌肉组织明显区分开来;随后,它随着时间的推移而缓慢衰减,残留纳米平台保持在48小时(图 4 A)。而mCu@ICG/RGD的荧光信号主要分散在肝脏中,并且在所有时间间隔内都明显高于mCu&Ce@ICG/RGD组。基于在肝脏中的这种高积累,后一组的肿瘤组织几乎无法区分(图 4 A)。同时,收获肿瘤和主要器官进行离体NIR-II荧光生物成像。值得注意的是,即使可以看到上述两组肿瘤中的比较光信号强度,mCu&Ce@ICG/RGD处理的肝脏的强度明显低于mCu@ICG/RGD(图 4 B)。此处,前者相对快速的生物降解行为有利于肝脏清除。因此,肿瘤与周围正常组织的比例通过半定量平均NIR-II信号强度来计算。mCu&Ce@ICG/RGD 在注射后 24 小时的数值比 mCu@ICG/RGD 高 6 倍(图 4D)。此外,本文还通过MRI 验证了Cu 基纳米平台对肿瘤的特异性识别,以临床Gd-DTPA 为对照。根据不同时间间隔的连续 T1WI MRI 生物图像,足底注射 mCu&Ce@ICG/RGD 的淋巴转移性骨肉瘤的 MRI 信号在注射后 24 小时急剧增加至峰值水平,从此时间点开始逐渐衰减至基础强度(图 4C)。然而,由于 Gd-DTPA 的快速排泄,可以在注射后 2 小时发现最高的肿瘤积累。我们的纳米平台在 24 小时的肿瘤与组织比明显高于 Gd-DTPA(图 4E),进一步证明了mCu&Ce@ICG/RGD有效的肿瘤靶向能力,此时最合适进行激光照射进行PTT。最后,研究了皮下骨肉瘤小鼠尾静脉注射PBS、mCu&Ce@ICG和mCu&Ce@ICG/RGD后在体内的光热转换效果。具体而言,纳米制剂处理的肿瘤部位温度急剧变化,升高到峰值(分别为48.9和52.8°C),并且最大光热维持率(图 4F,G)。毫无疑问,这种现象主要归因于RGD修饰的主动靶向能力。对于PBS处理的小鼠,即使经过300秒的照射,温度也仅略有升高(39.8°C)(图 4F,G)。因此,上述体内生物成像结果凸显了多模对比纳米剂在肿瘤诊断方面的潜力和令人满意的肿瘤抑制热疗性能。图5. 体内 PTT CDT 和 ICD 评估基于上述基于Cu&Ce的纳米平台在体外具有良好的细胞杀伤力和出色的肿瘤蓄积效果,我们建立了143b肿瘤异种移植小鼠模型,以进一步研究mCu&Ce@ICG/RGD在体内的PTT/CDT/ICD协同治疗效果。为了验证我们的程序化治疗假设,给皮下患有骨肉瘤的小鼠施用六种不同的配方(PBS、L、mCu@ICG/RGD、mCu&Ce@ICG/RGD、mCu@ICG/RGD +L和mCu&Ce@ICG/RGD + L)。如图 5A -D所示,接受PBS或激光治疗的小鼠的肿瘤组织在整个治疗过程中迅速生长,证实单独使用808nm激光( 5分钟,1.5W/cm2 )对肿瘤生长几乎没有抑制作用。不出所料,与具有部分消融效果的 mCu@ICG/RGD 相比,由于生物降解速度更快,用mCu&Ce@ICG/RGD 处理的肿瘤生长抑制率相对较高,相比之下,纳米粒子加激光照射组的肿瘤体积和肿瘤重量均得到明显控制。有趣的是,与其他组相比,mCu&Ce@ICG/RGD + L 给药的肿瘤基本被抑制,肿瘤抑制率明显较低。显然,这种彻底的根除效率可能归因于协同 PTT 增强的 ROS 扩增。结果显示,激光照射后给予mCu&Ce@ICG/RGD可显著延长小鼠寿命,超过90%的治愈小鼠存活超过100天,而接受PBS治疗的小鼠均在42天内死亡(图 5E),充分表明我们基于Cu&Ce的PTT-CDT协同疗法具有最佳的肿瘤抑制性能。 总之,本文设计并成功制备了一个迷人的纳米平台,该平台由用于 CDT 和 MRI 的介孔Cu&Ce 氧化物纳米球、用于 NIR-II 造影剂和PTT 的负载 ICG 以及用于靶向基序的 RGD 组成。这种有前途的纳米治疗剂具有无与伦比的优势,例如对骨肉瘤组织的精确识别、用于肿瘤轮廓区分的 NIR-II 荧光生物成像和 MRI 以及通过 PTT 评估的 CDT 和激活的ICD 进行的程序化抗癌性能。通过在体外有效诱导癌细胞死亡以及在体内强力根除实体骨肉瘤并显著延长存活率来证实治疗效果。此外,出色的生物安全性能也在体内得到体现。该研究为促进临床恶性肿瘤的靶向诊断和治疗开发了一种独特的范例。参考文献heng, M., Kong, Q., Tian, Q. et al. Osteosarcoma-targeted Cu and Ce based oxide nanoplatform for NIR-II fluorescence/magneticresonance dual-mode imaging and ros cascade amplification along with immunotherapy. J Nanobiotechnol 22, 151 (2024).⭐ ️ ⭐ ️ ⭐ ️ 近红外二区小动物活体荧光成像系统 - MARS NIR-II in vivo imaging system 高灵敏度 - 采用Princeton Instruments深制冷相机,活体穿透深度高于15mm高分辨率 - 定制高分辨大光圈红外镜头,空间分辨率优于3um荧光寿命 - 分辨率优于 5us高速采集 - 速度优于1000fps (帧每秒)多模态系统 - 可扩展X射线辐照、荧光寿命、一区荧光成像、原位成像光谱,CT等显微镜 - 近红外二区高分辨显微系统,兼容成像型光谱仪 有不同型号的样机可以测试,请联系:021-61620699⭐ ️ ⭐ ️ ⭐ ️ 恒光智影上海恒光智影医疗科技有限公司,被评为“国家高新技术企业”,荣获“科技部重大仪器专项立项项目”,上海市“科技创新行动计划”科学仪器领域立项单位。恒光智影,致力于为生物医学、临床前和临床应用等相关领域的研究提供先进的、一体化的成像解决方案。与基于可见光/近红外一区的传统荧光成像技术相比,我们的技术侧重于近红外二区范围并整合CT, X-ray,超声,光声成像技术。可为肿瘤药理、神经药理、心血管药理、大分子药代动力学等一系列学科的科研人员提供清晰的成像效果,为用户提供前沿的生物医药与科学仪器服务。⭐ ️ ⭐ ️ ⭐ ️ 上海恒光智影医疗科技有限公司地址:上海市浦东新区张江高科碧波路456号 B403-3室网址:www.atmsii.com邮箱:liupq@atmsii.com电话:137 6102 1531 (同微信)
  • 免疫组化(IHC)的 "疑难杂症" 再也不愁
    免疫组化简介免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应 和组织化学的呈色反应,对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。免疫组化基本原理免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到组织病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。 免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗体可以是用免疫动物制备的多克隆抗体或特异性单克隆抗体,最好是特异性强的高效价的单克隆抗体。直接法是将酶直接标记在第一抗体上,间接法是将酶标记在第二抗体上,检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用免疫酶组化间接染色法。那么,显色常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP),常用的显色底物为DAB(3,3’-二氨基联苯胺),偶尔用AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。碱性磷酸酶(AP或AKP)也是目前免疫诊断试剂最常用的标记酶之一,稳定性好、灵敏度高。表1. 免疫组化(IHC)显色系统的选择免疫组化注意事项1. 组织取材为避免蛋白丢失及组织受损引起的非特异试剂吸附,取材须快速(组织块也不宜太大)且要尽量避免人为损伤。2. 固定固定要及时、彻底,但也不能固定过久。实验证明甲醛固定时间越久的组织越容易出现自发荧光及非特异性染色。一般以 12~36 小时最好。3. 石蜡片与冰冻片的选择石蜡片制作对设备要求较冰冻片低,组织结构更好,保存条件简单时间也久。但对部分蛋白有较强烈的破坏作用,对蛋白保护较冰冻片差。冰冻片对蛋白的保护较石蜡片好,制作起来也较快。4. 灭活过氧化物酶(HRP)系统的一定要做内源性过氧化物酶的灭活,而对于碱性磷酸酶(AP)系统和免疫荧光这个步骤不需要做。5. 抗原修复不同的样本、不同的蛋白其最佳的抗原修复方式会有所区别,热修复(酸性修复液(柠檬酸盐修复液)、碱性修复液(EDTA 修复液)及酶修复(蛋白酶)都可做尝试。对于陈旧的样本要增加修复强度,比如延长修复时间。6. 封闭常用的封闭液有 5% BSA 和血清。BSA 是通用型的封闭液。血清应选择与二抗同源的血清。7. 抗体孵育一抗一定要与实验及样本匹配的,孵育条件以 4 ℃ 过夜最佳。二抗应匹配一抗,37 ℃ 孵育半小时即可。8. 显色DAB 显色建议在镜下控制反应时间,在阳性及背景之间选择平衡点。免疫组化常见问题分析1.脱片产生的原因有哪些 1、烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度; 2、多聚赖氨酸玻片质量的问题。 3、组织切的不好,切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀,或者切片者手法不好等。 4、修复的问题:抗原修复的时候高压时间过长了,或者放进100度的修复液时手法不好,咚的一声就丢进去了,这样超容易脱片。此外,用EDTA修复比柠檬酸容易脱片,但是你要用到EDTA的时候也没办法,只有从另外的问题上着手。 5、操作的时候甩的太猛了,有脱片嫌疑的片子最好不甩或轻轻甩,用卫生纸从边缘上慢慢吸水。 6.组织的问题,我用的组织癌症的很多,越是癌症组织有坏死之类越容易脱。2.边缘效应1、组织边缘与玻片粘贴不牢,边缘组织松脱漂浮在液体中,每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致. 解决办法:制备优质的胶片(APES或多聚赖氨酸),切出尽量薄的组织切片,不厚于4微米,组织的前期处理应规范,尽量避免选用坏死较多的组织;2、切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。解决办法:试剂要充分覆盖组织,应超出组织边缘2mm。用组化笔画圈时,为了避免油剂的影响,画圈应距组织边缘3-4mm。3.切片染色后背景太深,如何区分特异性sing与非特异性着色全片着色是指整个切片全都染上了颜色,着色的强度可深可浅,总之,分不清那些组织是阳性那些组织是阴性。出现这种现象的原因有:(1)抗体浓度过高:一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是,每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试,使每一抗体个体化,找到适合自己实验室的理想工作浓度,既使是即用型的抗体也应如此,不能只简单的按说明书进行染色。(2)抗体孵育时间过长或温度较高:解决办法是,严格执行操作规程,最好随身佩带报时表或报时钟,及时提醒,避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的时间不是传统的1小时,而是30分钟,因此,要根据染色结果进行调整。(3)DAB变质和显色时间太长:DAB最好现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长,因为在没有酶的情况下,过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控,达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时,这样做似乎不现实,但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。(4)组织变干:修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细,采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈,可以有效的避免液体流失,也能提高操作速度。(5)切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于24小时):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行免疫组化染色,如果将装有切片和修复液的容器放在4º C冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太长。(6)一抗变质、质量差的多克隆抗体:注意抗体的有效期,过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。4.免疫组化染色呈阴性结果1、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误;2、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是最佳的时间和次数。若不行,还可高压修复;3、组织切片本身这种抗原含量低;4、血清封闭时间过长;5、DAB孵育时间过短;6、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应;7、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。5.背景1、考虑一抗浓度高;2、然后调整DAB孵育时间;3、也要考虑血清封闭时间是否过短;4、适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间等。
  • 新品上市|高效样品前处理之法宝-复合型免疫亲和柱
    据世界粮农组织的调查,世界上每年有25%粮食受到已确认的霉菌毒素的污染。霉菌毒素是霉菌在食品或饲料里生长所生产的代谢产物,对人类和动物都有害。霉菌也称丝状真菌,是菌丝体比较发达但没有较大子实体的小型真菌的统称,是微生物中的高级生物,其形态和构造比细菌复杂。月旭科技现特别推出Welchrom® 新品复合型免疫亲和柱帮助大家轻松应对各种毒素的检测01 产品用途及原理Welchrom® 复合型免疫亲和柱用于从样品中分离、纯化真菌毒素,原理是基于抗原与抗体之间的特异性反应。免疫亲和柱中的抗体通过共价键作用悬浮在凝胶中,特异性吸附样品中的真菌毒素。如果供检测的样品中含有真菌毒素,样品通过免疫亲和柱时,毒素被抗体捕捉结合。所有其他物质,被从免疫亲和柱中清洗出去。甲醇作为洗脱液,将真菌毒素从抗体上洗脱。02 产品优势• 可同时测定多种真菌毒素含量,减少工作量。• 采用高特异性和高亲和力的的单克隆抗体。• 柱容量高,有效提高纯化效率。• 达到真菌毒素检测的国内外限量标准。• 良好的稳定性和可靠性,回收率高。• 纯化后直接用于ELISA法,高效液相色谱法,荧光光度法等。• 稳定性:12个月。• 可以用于复杂样品检测,包括食品、饲料、调味品等多种复杂基质。• 参考国家标准,检测结果准确可靠,满足客户的不同需求。03 样本处理步骤及亲和柱操作步骤(AOZ三合一免疫亲和柱为例)【样本处理步骤】(一)花生、玉米、大米、小麦及其制品、中药和饲料┅┅ 称取5g粉碎的样品,加入1g氯化钠,再加入甲醇-水(8:2)溶液20mL。┅┅ 涡旋或振荡提取20min。┅┅ 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤。┅┅ 取10mL滤液并加入40mLPBS混匀(中药材根据品种,可能需加入PBS-吐温20溶液),用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:2(二)啤酒、黄酒等酒类┅┅ 称取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类样品使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类试样10g,用PBS定容至50mL,混匀。┅┅ 以均质器高速搅拌(10000r/min及以上,均质器速度较慢时,应适当延长提取时间),提取2min;也可采用摇床(200r/min以上)振荡、超声提取和涡旋提取20min的方式进行提取。用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:0.5(三)酱油和醋等液体样品┅┅ 称取25g样品,以甲醇-水(8:2)溶液定容至50mL。┅┅ 以均质器高速搅拌(10000r/min及以上,均质器速度较慢时,应适当延长提取时间),提取2min;也可采用摇床(200r/min以上)振荡20min、超声提取20min和涡旋提取15min的方式进行提取。┅┅ 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤。┅┅ 取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤。┅┅ 取10ml过滤后液体过免疫亲和柱净化。稀释倍数:1【亲和柱操作步骤】┅┅ 将免疫亲和柱连接于10mL注射器下。按照样本处理步骤的上样量进行过柱。┅┅ 将空气压力泵与注射器连接,打开亲和柱下帽,调节压力使溶液以约1-2滴/秒的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至液体排干。┅┅ 以10.0mL的PBS缓冲液淋洗柱子2次,弃去全部流出液,并通过5-10ml空气,吹干亲和柱。┅┅ 准确加入1.0mL洗脱液(甲醇-乙酸(98:2)溶液)洗脱,流速为1 mL/min ~2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。【结果判定】经免疫亲和柱净化后,收集到的洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测,也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。洗脱液中各种毒素的检测结果乘以相应的稀释倍数,即为样品中对应毒素的浓度。04 色谱图经过AOZ三合一免疫亲和柱处理过的样品,在各自液相条件下的图谱:05 适用范围及性能用于检测谷物、酒类、中药等食品和饲料等样本中的真菌毒素。柱容量:AFB≥200ng,OTA≥100ng,DON≥1000ng,ZEN≥1000ng。回收率:≥80%。06 贮藏条件贮藏条件:可于2-8℃储存,不可冻存。保存期:该产品有效期为12个月。07 免疫亲和柱小贴士┅┅ 真菌毒素危害极大,应戴手套操作。┅┅ 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。┅┅ 洗脱液可以直接使用色谱级甲醇洗脱,但可能会降低赭曲霉毒素A回收率。┅┅ 多毒素检测中,呕吐毒素因为是水溶性,过柱操作时免疫亲和柱对有机溶剂耐受性低,所以组合中包含有呕吐毒素的免疫亲和柱前处理方法会相应复杂一些。黄曲霉毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A的组合,前处理方法基本一致。09 订货信息
  • 全新一代10+1肿瘤免疫微环境多色解决方案
    TissueGnostics公司推出的10+1肿瘤免疫微环境多色解决方案,在类流式分析方法的基础上,构建了整套肿瘤免疫微环境大数据深度挖掘体系,拥有1.成熟的多标记染色试剂盒体系 2.大尺寸高倍率全自动连续光谱全景成像 3.可原位追溯的大数据AI深度空间量化分析功能。一体化解决方案优势在于简化了数据的流转环节,允许应用定制APP,全自动的无人值守大大提高了组织原位数据分析操作的效率。a) 基于全新一代TSA染色技术同时标记10种生物标志物后,使用TissueFAXS Spectra系统进行连续全光谱高倍率成像,构建全景(多光谱)虚拟切片。b) Tissue Cytometry技术,能够获取10色独立的真实染色标志物数据,还可以去除背景自发荧光或血细胞/胶原等自发荧光,实现10+1色的独立通道采集。c) 免疫微环境信号量化分析,可提供多种自动化解决方案APP,实现AI大数据深度空间量化分析功能。(APP包括但不限于:核酸分子/亚细胞结构/细胞/组织等目标中的形态学识别、 强度量化统计分析、结构/空间分布关系分析),以及正反向回溯数据(双向)校验机制,对大数据分析结果进行校验。d) 针对创新研发型的肿瘤微环境量化分析需求,可选配量化分析软件StrataQuest,不但可以同时实现所有APP功能,还可以针对稀有样本进行数据获取,其可追溯校验的数据分析模式也获得NCS等期刊的一致认可。
  • 最受欢迎的免疫磁珠试剂盒性能大比拼
    细胞因子是免疫反应中分泌的一类蛋白质,机体的免疫反应通常是由多个细胞因子控制的。许多生物公司都在开发各种用于同时检测几十种细胞因子的试剂盒,目前最受欢迎的试剂盒采用了免疫磁珠技术使实验操作简便、细胞因子识别范围大。文中罗列了几种市面上常见的免疫磁珠检测的产品及其性能比较。   细胞因子是机体免疫反应中不同细胞分泌的一类小蛋白质。例如,当白细胞介素4(IL-4)单独发挥作用时,它使得B细胞增殖,并生产出特定类型的抗体。但干扰素-&gamma (IFN-&gamma )同时存在时,会减少B细胞的数目并改变它们产生抗体的类型。麦吉尔大学蒙特利尔神经学研究所的实验治疗计划主任Amit Bar-Or指出,这表明免疫反应并不是单一的细胞因子指导的。   在过去的10年中,许多大的生物公司生产出来各种用于同时检测几十种细胞因子的试剂盒。许多试剂盒利用一对抗体进行检测,其中一个用来捕获细胞因子,另一个用来检测所捕获的细胞因子。一些试剂盒将捕获的抗体附加到一个平坦的表面,例如传统的酶联免疫吸附。但现在比较流行的试剂盒的做法是,研究人员将他们的样品添加到包含不同类型的混合免疫磁珠的培养板中。每一种类型的磁珠表面都包被着所测量细胞因子对应的抗体类型,并且与不同的荧光染料相结合,以便在混合物中区分不同的磁珠。样品加入后,成功捕获抗体的磁珠的荧光分子标记能够将它们与空磁珠区分开来。基于磁珠的检测方法一般使用由Luminex公司开发的Luminex免疫磁珠,这种微珠需要特殊的仪器进行检测 或者使用与微珠兼容的传统流式细胞仪检测。Luminex的相应仪器设备可以区分100到500种不同比率荧光染料的免疫磁珠,磁珠一般含有两种或三种染料,因而不同的染料比率能够形成多达100到500种荧光而被识别,而传统流式细胞仪只能测量30种染料组合。   研究人员往往会基于特定的细胞因子选择多路复用试剂盒,尽管许多公司出售的试剂盒提供的面板很大。有些公司可以提供小面板试剂盒的定制工作,帮助研究人员缩小他们想了解的免疫反应、疾病或治疗相关的细胞因子范围。无论广告上介绍得有多好,验证试剂盒功效的最好方式就是逐个使用不同的试剂盒来检测同一个样品。Bar-Or建议在实验前可以与试剂公司沟通获得试用折扣。   接下来就介绍市面上最受欢迎的几种基于Luminex免疫磁珠检测的流式细胞仪检测系统。   BIO-RAD   Bio-Plex Pro系统   根据2012年对北美和欧洲学术界研究人员和生物技术/制药公司的调查,Bio-Rad公司是目前北美市场最大的抗体检测试剂盒卖家,他们生产的试剂盒采用Luminex公司的免疫磁珠。Life Technologies公司和EMD Millipore公司分别位居第二和第三。   研究人员可以利用Bio-Rad公司的系统来测量64种不同的人类细胞因子,同时公司也提供可以一次性捕捉21到27种细胞因子的试剂盒。使用该公司的在线工具,研究人员还可以设计细胞因子检测磁珠、定制一个较小的磁珠子集或购买特定类型的磁珠。Bio-Rad公司检测也适用于检测小鼠和大鼠的细胞因子,也可用于为犬和灵长类动物做特定的疾病检测。   优势:该公司提供不包含重复探针的21- and 27-plex试剂盒,因此研究人员可以通过两组平行试验捕捉到48种细胞因子,从而扩大探索免疫反应的范围。   挑战:与大多数多路复用分析一样,Bio-Plex系统检测细胞因子的能力取决于研究人员所用的样本类型。Bio-Rad的17-plex试剂盒擅长探测样本中的IFN-&gamma ,而在Bar-Or的一个研究中,他们发现Bio-Rad的10-plex试剂盒对于低浓度血清样品中的IFN-&gamma 敏感度很差。   价格:试剂盒价格从850美元(3-plex)到的3500美元(27-plex)不等。Single-plex子集每个售价200美元。   EMD MILLIPORE   Milliplex   Millipore的系统能捕获最广泛的细胞因子:108种人类细胞因子以及小鼠、大鼠、猴、狗、猪的细胞因子。Millipore公司最大的试剂盒可以同时检测41种人体细胞因子,其中大部分与Bio-Rad公司的48种重叠。41个细胞因子通常可以在同一样品中被检测到,虽然一些细胞因子在血清和血浆中浓度很高,需要稀释和独立的测量。   优势:除了广泛的细胞因子检测能力,Millipore试剂盒只需要25微升样品量,这是其它试剂盒所需样品的一半。对于西雅图华盛顿大学医学副教授Stephen De Rosa来说,Milliplex比Bio-Rad、 Life Technologies和 BD Biosciences生产的试剂盒的样本重复测量的一致性更高。尽管如此,研究人员还是应该找到针对自己样品最合适的试剂盒。   挑战:公司在试剂盒中应当使用标准细胞因子蛋白制剂,如若不然,不同批次的试剂盒得到的结果很难进行比较。公司正在试图解决这一问题,例如每一批次的试剂盒都提供相应的标准对照。   成本:试剂盒价格范围从500美元(single-plex)到1100美元(5-plex)不等,41-plex试剂盒售价在5300美元。   LIFE TECHNOLOGIES   Novex Multiplex Assays   Life Technologies生产的测定人类细胞因子最大的试剂盒型号是30-plex和25-plex。几乎所测定的所有细胞因子都与Bio-Rad和Millipore试剂盒重叠。试剂盒可用于小鼠、大鼠、猪、猴的细胞因子。   Bio-Rad公司和Millipore公司已逐渐转向使用2007年首次推出的Luminex磁珠,Life Technologies除了磁珠试剂盒外,仍然继续为喜欢他们和有需要的研究人员提供非磁珠试剂盒。使用磁珠检测,可以使抗体与结合因子之间的洗涤更加简单,因为磁珠可被磁铁吸引,研究人员可以简单地反转亲和板倾倒液体。而非磁性珠,研究人员必须使用特殊的方法进行分离,非常复杂。   优势:兹堡大学的癌症研究所免疫学监测和细胞产物实验室的Lisa Butterfield说她选择Life Technologies试剂盒的原因是这家公司是唯一会向她提供定制面板的微珠有轻微的交叉反应说明的Luminex磁珠供应商,这对她的研究非常重要。   挑战:一些研究人员可能回避使用Novex试剂盒,因为细胞因子的面板相对较小。   价格:无论磁珠还是非磁珠,试剂盒价格范围从585美元(2-plex)到3,400美元(30-plex)不等。   BD BIOSCIENCES   Cytometric Bead Array (CBA)   虽然生产的试剂盒没有Luminex公司那么受欢迎,BD Biosciences公司仍然占有最大的市场份额。   目前BD销售6种试剂盒,可以检测7种人类细胞因子,同时他们也提供小鼠和灵长类动物细胞因子的试剂盒。虽然提供的操作板小于Luminex公司,但他们的这种设计的目的是研究特定的生物过程,如过敏性反应或感染的炎症反应。除此之外,如果客户购买了测量单一细胞因子种类的免疫微珠子集,也可以将它们通过不同的组合混合在一起,同时检测多达30种细胞因子。   优势:伊坎医学院儿科助理教授 Madhan Masilamani选择了BD的CBA试剂盒,因为他的实验室里已经有流式细胞仪,使用别的产品必须花时间到别的地方使用仪器。   挑战: BD正在销售下一代流式细胞仪Accuri C6,能够简化使用流程。CBA试剂盒使用非磁珠,即使CBA减少了洗涤和加入试剂的步骤,但是检测步骤依然比较繁琐。   价格:根据操作面板的不同,试剂盒售价在1200美元到1500美元不等。Individual Flex Sets售价为250美元,购买相应的缓冲液需要附加225美元。CBA数据分析的流式细胞仪软件售价为1500美元左右。
  • Life Tech参加第八届全国免疫学学术大会
    Life Technologies作为赞助商,于雾都参加了10月19日在重庆国际会议中心隆重开幕的第八届全国免疫学学术大会。   本次大会由中国免疫学会主办,吸引了包括美国科学院院士Tak W Mak教授、美国科学院院士Mark Davis教授、英国皇家学会院士Eddy F Y Liew教授,以及中国免疫学会副理事长龚非力教授、中国免疫学会副理事长田志刚教授、中国免疫学会副理事长马大龙教授、中国免疫学会常务理事吴玉章教授等来自全球各地的学术权威到会参与。中国免疫学会理事长曹雪涛院士致开幕词。来自各地的与会者济济一堂,大会吸引了上千名海内外免疫学领域的专家。   在大会现场,Life展示了旗下服务于免疫科学的多种仪器设备,包括Molecular Probes® 品牌的生物学荧光检测及标记产品。这些产品带来了免疫学实验室发展的最新动态,另参观的学者耳目一新。   期间,Life的展台始终人头攒动,来访者对Life带来的Attune® 声波聚焦流式细胞仪、FloidTM细胞成像系统以及BoltTM预制胶等一系列实验室设备抱有浓厚的兴趣,驻足垂询,数百名与会者填写了相关问卷。   此外,今年又迎来了Gibco® 品牌50周年生日,现场切开了Gibco生日蛋糕。Gibco® 品牌是目前世界上最受信赖的细胞培养产品。   茶歇期间展开的如飞镖、趣味魔方、Molecular Probes荧光球投篮等新颖有趣的小游戏也聚集了大批来访者积极参与,乐在其中。抽奖环节中,Life向到会的老师送出了移动硬盘、电子称、实验室工具套装等精美奖品。寓教于乐的现场活动让与会者印象深刻。   Life一直在免疫学界的实验室有广泛的应用,深受好评。在未来,Life仍然会以其专业的态度和勤谨的精神,为中国的免疫学家带来简单、方便、实用、准确的产品和方案。 与会学者在Life展台前填写问卷。 Life Technologies的产品引人瞩目 Life Technologies的展台前人头攒动 与会者正饶有兴趣地参加Life Technologies的互动游戏 现场分享Gibco® 品牌50周年生日蛋糕
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