生物毒素

小龙虾究竟是不是造成横纹肌溶解症的罪魁祸首?食用小龙虾到底安不安全呢?央视《每周质量报告》栏目记者展开了深入的调查。 　　未知毒素五大特征 　　第一：毒性强 　　假设龙虾里面含有某种危害因素，含量应该是微小的。而如此微小的量进入人体里面，能够引起横纹肌溶解症，说明它的毒性应该很强。 　　第二：水溶性差 　　吃龙虾导致发病的这些人群，大部分都是自己买回来，经过清洗才烹饪的。然而清洗后仍然危害人体，由此推测，其水溶性较低。 　　第三：耐热 　　烹制小龙虾时能达100℃高温，但是这种物质仍有危害，说明它耐热。 　　第四：靶向性强 　　很多毒物到人体里面，会导致一些共有症状：腹痛、腹泻、恶心、呕吐等。而收治的这么多病人里面，这种消化症状都不明显，而是直奔横纹肌。 　　第五：小龙虾对毒素有免疫力 　　小龙虾究竟是不是造成横纹肌溶解症的罪魁祸首?食用小龙虾到底安不安全呢?央视《每周质量报告》栏目记者展开了深入的调查。 　　专家综合分析认为，导致小龙虾食用者患病的元凶，有毒性强、水溶性差、耐热、靶向性强、小龙虾自体免疫等五大明显特征。 　　中华急诊医学会中毒学组委员吴建中说，这种物质可能是某种生物毒素，也可能是其他的外源性化学物质。比如，在东南沿海，很多人都吃珊瑚鱼，像虎头斑啊，它的体内会含有一种血卡毒素。不是每个种类的鱼都有，同一种类，也不是每一条鱼都有。毒素通过各种各样的渠道，吸附到鱼体内，最后使饮食者遭殃。 　　如果真像专家推断的这样，那这种生物毒素是小龙虾体内本来就有的，还是小龙虾的生存环境或者养殖、加工环节出了问题? 　　有可能是野生虾闯祸 　　小龙虾学名叫克氏原鳌虾，原产于美国南部路易斯安那州，腐食性动物，属于外来物种。据专家介绍，这种虾适应性和抗病能力都很强。能在水质发黑发愁的阴沟、水塘中生活。 　　尽管小龙虾这种外来生物在养殖过程中很少发生病害，但并不意味着它不会感染和携带病毒，像同为外来生物的福寿螺，在它的老家南美洲并没有发现携带广州管圆线虫，而传入中国生长数年后，竟然发展成为了广州管圆线虫的中间宿主，成为了传播广州管圆线虫病的主要载体之一。 　　专家介绍，小龙虾是杂食性的动物，而野生的小龙虾主要以腐败物为食物，这些腐败物本身就是有毒物质，经过小龙虾的代谢后，主要合成物质偏向什么性质，现在还没有相关定论。特别是在污染极为严重的河道，龙虾身体会带有各种外源性毒性物质，这些残留的毒素究竟会对人的健康造成什么样的影响，目前也不得而知。在小龙虾消费的旺季，不排除有人将这类野生虾捕捞进入市场。 　　毒素或来自养殖水体 　　龚世圆，华中农业大学博士生导师、教授，我国小龙虾养殖权威专家。龚教授表示，小龙虾如果长期生活在恶劣的环境里，比如水体含有重金属离子或兽用的聚醚酯类的抗生素，小龙虾体内肯定会附吸毒素。 　　聚醚酯类的抗生素，主要用于鸡球虫病的防治，有严格使用限量要求。在安徽、江苏、湖北、湖南等小龙虾的养殖大省，养殖小龙虾的水域里面是否有农药、兽药甚至是化工原料的残留，更是一个未知数，而这些未知因素，是否也有可能导致某种生物毒素积存在小龙虾身上呢? 　　不仅在养殖环节存在诸多疑问，记者还发现，在小龙虾的加工环节更是存在诸多隐患。 　　在北京、长沙、南京等地的一些餐馆，小龙虾的加工和烹调都是露天当街作业。在一家店铺的后厨，记者目击了工人洗虾的全过程。 　　只见工人把乘小龙虾的水盆放满水以后，就将一个沥水的工具使劲在水里搅和，整个洗虾过程不到一分钟，虾就被捞了出来，随后倒进油锅炸。由于小龙虾的头部、腮部和腹部是主要藏污纳垢的地方，虾不洗干净，很可能给食用它的消费者带来身体健康上的隐患。 　　滥用增香剂有致癌风险 　　除了清洗环节不卫生，记者在调查中还发现，一些餐馆、大排档在烹调小龙虾过程中还会添加一些神秘的东西。在一家龙虾十三香调料的专卖店，老板就给我们透露了业内的一些秘密。老板说，配方里就是十三种药材，不是越多越好，因为药跟药有的会相克，混在一块是不可以吃的。 　　北京的一些餐饮店老板透露，有的餐馆在烹饪小龙虾过程中为了增加汤汁的鲜味和香味，随意添加人工合成香精，这些成分不详的化工合成添加剂，长期食用可能损伤肝脏甚至有致癌风险。 　　一滴香就是目前一些餐馆普遍使用的一种增香剂。餐饮加工环节的不卫生、不规范，进一步增加了食用小龙虾致病的隐患和风险。

仪器信息网讯 2012年3月27-28日，由北京食品学会及北京食品协会联合主办，太平洋国际展览有限公司承办的“第五届中国北京国际食品安全高峰论坛(CBIFS)”在中国国家会议中心召开 。本次高峰论坛旨在为食品行业及食品安全检测部门提供更加广泛的学习和交流机会，针对当前重要的食品安全热点难点问题展开深入探讨，发布最新的食品安全前端技术和应用解决方案。论坛吸引了800余名业内人士参加、60余家企业参展，仪器信息网作为合作媒体亦参加了本次会议。 　　在“微生物、毒素及致病菌检测”专题研讨会上，农业部生物毒素检测重点实验室李培武研究员作了主题为“食品安全与生物毒素检测”的报告，现对该报告作简要报道： 报告人：农业部生物毒素检测重点实验室李培武研究员 报告题目：食品安全与生物毒素检测 　　目前，我们现已发现生物毒素约2000多种，可分为动物毒素、高等生物毒素、真菌毒素、细菌毒素及海洋毒素五大类。其中，高等生物毒素、真菌毒素及海洋毒素与食品安全关系密切。 　　目前，真菌毒素对食品的污染较为密集，在农产品及药材中都发现过如黄曲霉毒素(真菌毒素的一种)的存在，黄曲霉毒素在食品中出现的几率及转化率是目前的研究热点之一。 　　生物毒素在食品中的含量通常较低，含量水平在ppm-ppb级别，但其毒性强、危害大、管控难，对检测技术提出了更高的要求。 　　李培武研究员进一步介绍了高等生物毒素、真菌毒素及海洋毒素的检测技术概况，并详细介绍了其课题组为检测某些生物毒素而研发的仪器及其实验结果。 　　李培武研究员介绍说，生物毒素的检测技术大致可以分为确证类检测技术和以免疫学为基础的快速检测技术等。前者准确度高，但耗时长、仪器昂贵，需要专业技术人员操作，而后者能克服前者的一些不足，具有快速、操作简单等优点。 　　近年来，李培武研究员等在生物毒素快速检测技术的研究上取得了不少新的进展，包括： 　　(1) 在超灵敏高特异单抗研制上的突破； 　　(2) 研制成功免疫亲和微柱； 　　(3) 研制成功黄曲霉毒素速测仪，其检测结果一致性好； 　　(4) 近期还成功研制出了数码免疫试纸条与传感试纸条，对H5N1病毒的检测效果很好，能有效对慢性疾病进行前期诊断，相应的检测仪器预计于今年5月上市； 　　(5) 研制成功NYDL-2000/3000速测仪，它以硫苷检测为技术原理，用于鉴别双底菜籽油，得到了国家大面积的推广。 　　这些科研成果也获得了不少国家科技奖项及发明专利。

欧盟已确认，从2010年夏季开始，目前的海洋生物毒素生物检测法将被一套更为可靠的化学方法取代，即使用化学检测法取代小鼠生物检测法(MBA)来检测双壳贝类(如蚌类、海扇、牡蛎或扇贝)是否存在腹泻性贝类海洋毒素。 　　新检测机制预计于2011年7月实施。该提案已得到了欧盟食品链和动物卫生常设委员会(SCoFCAH)成员国的认可。该检测方法已由欧盟参考实验室认定对海洋生物毒素测定有效，其保证了对消费者健康的充分保护，而没有生物测定的缺点。 　　欧委会去年对MBA检测法的有效性提出了担忧。欧洲食品安全局的一项调查结论认为，MBA无法检测出大大低于EU限值浓度的毒素，因此不能用以监测亲脂性生物毒素的商业加工效果。 　　作为新检测方法的一部分，欧盟已提出了一项标准操作程序(SOP)。其目的是详细制定通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定贝类毒素软海绵酸(OA)、蛤(扇贝)毒素(PTX)、氨代螺旋酸贝类毒(AZA)和虾夷扇贝毒素(YTX)族毒素的方法。 　　该方法可用于测定活体、冷冻和经处理的“被感染(spiked)和/或天然污染”软体贝类中的亲脂性海洋生物毒素。

新鲜的海产品对人类而言，是一种美味口福，也是具有较高营养价值的基本食物。但受到海藻毒素污染的海产品对人类健康又极具威胁，严重影响人体的神经和肠胃系统，往往造成激烈的过敏反应。类似的海产品中毒事件就经常发生在海藻花期茂盛、海洋生物毒素较高的全球沿海地区。欧盟第六研发框架计划(FP6)资助，由德国约翰内斯.古登堡(Johannes-Gutenberg)大学施洛德(SCHRODER)教授领导的欧洲Biotoxmarin研发团队，成功开发出一种快速、简便和价廉的海产品生物毒素检测技术，应用于海产品和病患血清的实测检验，效果良好。 　　该检测技术基于最新的聚合物指令技术(Polymer Instruction Technology)、高灵敏度生物感应器和新型的生物测定方法。利用先进的液体色谱-质谱技术(Chromatography-Mass Spectrometry),对即将商业化的检测仪器，主要包括化验、生物感应器和测量组件，进行了计量标准设置和检测检验。研发团队还在海洋生物毒素的生物测定(Bioassays)中，采用欧盟推荐的新型无实验动物标准方法，抗体和合成聚合物受体的实验也完全符合欧盟规定的标准。 　　该技术产品目前正在数家中小企业进行生产，中上企业的积极参与有利于产品的加速开发、技术扩散和升级换代。研发团队的负责人相信，该技术产品具有很高的商业化应用潜力，不仅可以降低海产品相关的食物中毒事件，保证食品安全，还可以减少因海藻生物毒素造成的水产养殖业的经济损失。

在过去的30年中，由于毒素造成的食品污染已经越来越受到人们的重视。农作物（大多数谷物）非常容易遭受真菌毒素的污染，严重影响着食品安全。如果食用被污染的食品，则会产生极大的毒副作用。部分真菌毒素已被证实具有致癌、致畸、致细胞突变的“三致”作用。因此对于生物毒素检测受到了如商检、农检、疾控中心等检验检疫机构的高度重视。目前至少有100个国家已经对粮食/饲料中真菌毒素的限量进行了规定。随着人们对生物毒素危害的认识，相关的限量标准在不断地更新。欧盟于2006年颁布了《Regulation (EC) No 1881/2006》，对食品中污染物的限量进行规定，规定花生、谷类、坚果等人类直接食用的食品中，黄曲霉毒素含量（指G2+G1+B2+B1的总量）不能超过4 μg/kg。2010年，颁布《Regulation (EC) No 165/2010》，规定婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素-M1（AFT-M1）的限量为0.025 μg/kg；鲜乳中AFT-M1含量不能超过0.05 μg/kg。2012年又颁布了《Rregulation (EC) No 594/2012》，对《Regulation (EC) No 1881/2006》进行了修订，对干果等食品中的赭曲霉毒素A（OTA）的最高限量作了规定。美国FDA对黄曲霉毒素的限量作出规定：食品中黄曲霉毒素（指G2+G1+B2+B1的总量）的最大残留限量为20 μg/kg，牛奶中AFT-M1的最大残留限量为0.5 μg/kg。日本检验检疫措施规定，黄曲霉毒素B1（AFT-B1）在进口食品中的残留限量为“不得检出”；生乳及乳制品中AFT-M1含量不得超过0.5 μg/kg；日本在肯定列表制度中规定：食品中黄曲霉毒素的限量是10 μg/kg。我国在2005年公布了强制性粮食卫生标准（GB 2715-2005），首次增加了真菌毒素限量的标准，其中包括了四种真菌毒素（黄曲霉毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）、玉米赤霉烯酮（ZON）和赭曲霉毒素A（OTA））。2011年，我国又颁布了最新的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》（GB/T 2761-2011），相比GB/T 2761-2005增加了赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮的指标；修改了黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及展青霉素限量指标及检测方法。可见我国对真菌毒素在食品中的限量要求越来越高，限制的食品种类也越来越细。岛津公司将涉及到生物毒素检测的应用数据进行了整理汇编，推出了《LC-MS/MS生物毒素分析方法包》，并将其制作成为光盘。方法包中包含了7类58种生物毒素的检测参数。旨在帮助使用岛津液相色谱串联三重四极杆质谱进行生物毒素检测的用户能够省时省力的进行方法开发和数据分析。本方法包包含以下文件：1、生物毒素化合物清单及参数 （含有58种生物毒素（包含内标物）的中英文名称、分子式、质量数、CAS编号、MRM分析参数等化合物信息。）2、MS 方法汇总 （含有58种生物毒素（包括内标物）的独立方法以及分类汇总方法）3、LC-MS/MS食品中生物毒素检测整体解决方案 （整体解决方案在已建立的LC-MS/MS生物毒素数据质谱库基础上，对食品中各不同基质中的生物毒素进行了分析，考察了相关的LC分析条件、校准曲线、检出限、精密度等。）4、LC-MS/MS生物毒素方法包操作指南 （通过本操作指南指导用户完成方法包的使用。）关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。

10月15日至18日，由中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会主办、延安大学生命科学学院承办的2010年中国生物毒素学术研讨会在延安大学举行，来自全国各高校和研究院所的30余位专家学者参加了会议。会议围绕生物毒素的基因组学和蛋白组学、生物毒素的结构与功能、生物毒素与膜通道或受体的相互作用、生物毒素的药理和毒理机制、生物毒素的创新药物研发等主题展开研讨。 　　16日上午，2010年中国生物毒素学术研讨会开幕式在延安大学图书馆学术报告厅举行，陈冀胜院士、戚正武院士，中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会的全体委员和延安大学生命科学学院的部分师生参加了会议。延安大学校长廉振民和中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会主任、中国科技大学教授滕脉坤先后在开幕式上致辞。 　　研讨会上，湖南师范大学梁宋平教授、中国科学院昆明动物所张云研究员、华中科技大学教授丁久平、军事医学科学院微生物流行病研究所王景林研究员、武汉大学吴英亮教授、军事医学科学院生物工程研究所戴秋云研究员和上海大学教授吉永华先后就蜘蛛毒、蛇毒、蝎毒、芋螺毒等的基础与临床研究进展作了专题学术演讲，并同与会代表进行了广泛交流。在随后举行的委员会委员会议上，延安大学生命科学学院白占涛博士和湖南师范大学曾雄智博士被推选为中国毒理学会生物毒素毒理专业委员会副秘书长。

AB Sciex 赵贵平工程师 海洋毒素的起源：海上漂浮的藻类曾经被诗人称为“自由自在美丽漂荡的精灵”，但近几年却成了可怕的“海怪” 它会因环境的影响而高速繁殖，浓度达到一定值时，水面因之变色，形成赤潮。赤潮所含藻类几乎都有毒性，这类毒素是目前已知的最毒的有机化合物，人食用了含有贝类毒素的贝类后可能引起中毒死亡。 　　海藻毒素按作用可分为:麻痹性海藻毒素(PSP)、腹泻性海藻毒素(DSP)、神经毒性海藻毒素(NSP)、失忆性海藻毒素(ASP)。 　　分析检测这类物质的挑战：需要建立通用的、综合的、灵敏的和准确的方法来分析各种毒素，同时分析宽范围的、类型繁多的各种毒素，每一类中还存在多种结构变化，在问题出现之前，就能够检测到和确定新毒素。 　　检测技术的演变：许多年来，用活体小鼠做生物实验是检测贝毒素的主要方法，现在有时还是“黄金”方法 用化学方法检测毒素变得日趋重要 希望有可检测多种(类)毒素的方法 现在LC/MS/MS方法已成为主要技术分析手段，主要困难是定量内标和参考物，大部分生物毒素可以由NRC来提供认证的参考物质(CRMs，Certified Reference Materials) NRC-National Research Council, Canada。

背景本文概述了有关生物制剂许可申请（BLA，Biologics License Applications）的可用指南，以及由于内毒素测试方法修改或鲎试剂（LAL，Limulus Amoebocyte Lysate）供应商变化，如何实行变更。生物制剂许可申请针对药品，因此适用于成品药测试，而非制程中的样品或水样。本文还探讨了质量控制（QC）部门内的工作流程变更。完成了内毒素测试验证的成品药只有在向监管部门申报之后方可出厂，因而必须向监管部门申报测试方法或鲎试剂供应商的详细变更内容。请注意，在重新验证药品时，在申报中标注通用试剂或方法的公司，比标注特定试剂或方法的公司（例如标注“FDA许可供应商”或“药典光度法”）通常会有更大的灵活性，有更多的可用方法和试剂选项。在进行变更时，还须考虑公司内部的需求。大多数质量控制实验室和质量保证部门在进行变更时都会遵守特定的标准操作规程（SOP）和公司的质量管理体系（QMS）。在变更之前，通常先建立变更控制（Change Control）程序，并由跨职能部门出具详细的变更和评估文档。一旦决定变更，就启动变更程序，质量控制实验室启动重新验证程序以更改内毒素测试方法或鲎试剂。美国药典（USP）第章和欧洲药典（EP）第2.6.14节规定，“当发生任何可能影响测试结果的条件变化时，都必须重新测试干扰因素”1,2。在更改测试方法或鲎试剂供应商时，必须进行干扰因素测试或“产品筛选/验证”1。通常以不同的稀释度来筛选产品，以确定适用于新的测试方法或鲎试剂供应商的最佳稀释度。一旦确定了最佳稀释度，应测试三个离散批次的产品，以在新的条件下完成验证。如果实验室要从96孔板显色测试过渡到同样使用显色法的其它平台，由于测试的生物化学特性没有变化，建议对先前验证的稀释度进行单批次验证。法规和指南监管部门和行业指导文件都未对重新验证产品给出明确建议。本文将找出可用的建议，并指出建议的出处。鲎试剂有不同的配方，配方因供应商而异。当公司打算更换鲎试剂供应商，并想知道更换供应商后是否需要重新验证产品时，却从通用的USP、EP、JP章节中找不到明确答案。由美国国家标准学会（ANSI，American National Standards Institute）认证的医疗仪器促进协会（AAMI，Association for the Advancement of Medical Instrumentation）在其文档的第ST72:2019章节中提供了一些有关更改鲎试剂供应商的指南。该章明确指出，如果更改细菌内毒素测试（BET，Bacterial Endotoxins Testing）试剂的来源，或更改细菌内毒素测试技术（例如从凝胶法改为动态显色法），就须重新进行评估或适用性研究3。此章虽然适用于医疗器械，但FDA 表示，如果公司决定进行上述更改，可以遵照此章的指南。如果打算更改鲎试剂供应商或内毒素测试方法，必须申报该变更，或将变更包含在年度报告中。应采用哪种方式，取决于变更类型（例如变更鲎试剂供应商或变更测试方法等）。鲎试剂测试是药品出厂的关键性测试，因此申请生物制剂许可的公司必须在文档材料中包含鲎试剂测试。在重新验证产品时，由于需要采用不同的测试方法或内毒素试剂，因而申报工作可能很麻烦。FDA在行业指导文件“已批准的新药或简略新药的变更（Changes to An Approved NDA or ANDA）”的“规范（Specifications）”一章提供了有关申报变更的信息。该文件说明了以下两种与鲎试剂测试相关的变更申报：较小变更的申报（Minor Filing Change）和中度变更的申报（Moderate Filing Change）。有关内毒素测试方法或鲎试剂供应商的变更申报示例，请参见图1。图 1：生物制剂许可申请变更示例 较小变更的申报 可以在提交给FDA的年度报告中说明较小变更的内容。较小变更（例如在保持动态显色法的情况下变更鲎试剂供应商）对药品的影响不大。对于较小变更，公司只需提交“可比拟任务（Comparability Protocol）”来说明测试、研究、结果，以显示新的鲎试剂供应商的合格性。新药、简略新药、生物制剂的许可申请都需要提交年度报告，因此公司无需花时间来另行申报较小变更。 中度变更的申报 中度变更的申报有以下两种：1变更生效期（CBE，Changes Being Effective）在30天内：要求公司在分销涉及变更的药品之前的30天内向FDA提交补充材料。此补充材料应明确标注“补充材料 - 变更生效期在30 天内（Supplement-Changes Being Effective in 30 Days）”。如果FDA在收到补充材料后30天内告知申请人缺失部分信息，则申请人必须推迟分销药品，直到在补充材料中提供缺失的信息。2变更生效期在0天内（即立即生效）：变更生效期在0天内的补充材料包括某些中度变更，允许公司在FDA收到补充材料后立即分销药品。如果变更了鲎试剂供应商或测试方法，FDA 会在新方法符合USP要求的情况下批准鲎试剂供应商的变更申请。从一种鲎试剂测试方法更改为另一种鲎试剂测试方法（例如从凝胶法改为动态显色法）通常被作为生效期在0天内（CBE-0）的变更来提交申报。对于此类变更，公司只需提交“可比拟任务”来说明测试、研究、结果，以显示新的测试方法的有效性。而生效期在30天内（CBE-30）的变更申报则较为保守，因为这会给FDA充足的时间来审查变更。总结本文概述了关于细菌内毒素测试的FDA文件和药典章节中的建议和指南。但请注意，这些文件都未给出明确的变更申报方式。质量控制实验室应咨询本公司的规则监管部门和质量保证部门，并根据公司的质量管理体系来确定最适合的变更。图1是关于内毒素测试方法的变更示例，以及最适合的申报方式。可以在公司的年度报告中包括变更申报，也可以直接向FDA提交变更通知。重新验证产品以确认内毒素测试系统是创新性的和完全符合监管要求的，这项工作并非想象中的那样麻烦。Sievers® Eclipse细菌内毒素测试平台具有简化工艺流程的任务功能，大大提高了质量控制实验室在变更测试平台时的工作效率。变更管理的前期投入，很快就会在自动化的测试工作中得到回报。Eclipse提高了实验室的工作效率，减少了培训工作量，简化了验证工作，从而大大降低了生产成本、节省了时间。参考文献USP Bacterial Endotoxins Test EP 2.6.14 Bacterial EndotoxinsANSI/AAMI ST72: Bacterial endotoxins - Test Methods, routine, monitoring, and alternatives to batchtesting。章节/步骤 9.6.1.2，第 10 页.◆ ◆ ◆联系我们，了解更多！

近日，江西省质量技术监督局发布并实施了三项食品安全快速检测地方标准，勤邦生物做为主要起草单位之一，为标准的制定和顺利颁布做出了多项技术支撑，体现了勤邦生物在真菌毒素免疫快速检测领域的技术实力和影响力。本次发布的三项地方标准为：DB 36/T 1024-2018《饲料中黄曲霉毒素的快速筛查 胶体金快速定量法》DB 36/T 1025-2018《饲料中呕吐毒素的快速筛查 胶体金快速定量法》DB 36/T 1026-2018《饲料中玉米赤霉烯酮的快速筛查 胶体金快速定量法》胶体金法检测快速，操作简单，成本低廉，可用于各类型农产品食品生产经营企业的内部品控，也可用于各级政府监管部门的现场检测，通过大样本、大范围的筛查，发现疑似阳性样本，使用法定的仪器分析法进行确认检验，在不增加检测成本的情况下，扩大了抽样范围和抽样量，使得检测具有针对性和代表性，真正做到有效品控和监管。勤邦生物一直将自主创新做为企业发展的核心动力，不断加强核心技术专利转化为标准的能力，截至目前，勤邦团队已经参与制定22项标准，其中国家标准1项、行业标准17项，地方标准3项，团体标准1项。勤邦生物将继续发挥行业领军作用，以更先进的技术、方法，更严谨的态度，推动免疫检测行业发展进步。

今天介绍一篇于2023年8月发表在Trends in Analytical Chemistry（IF=13.1）上的一篇综述性文章。该综述简要介绍了生物毒素（真菌毒素、海洋毒素和细菌性食物毒素）的流行、毒理学特征和分类。同时，总结了近年来针对生物毒素的高灵敏度生物传感器的重要技术进展并介绍了这些方法不同的传感模式。最后，基于生物传感器面临的各种挑战，为改进食品安全技术提供了重要见解。中国农科院油料所唐晓倩副研究员为第一作者，硕士研究生左家思为共同一作。中国农科院李培武院士和张奇研究员以及浙江大学平建峰教授为通讯作者。成果简介生物毒素，特别是真菌毒素、海洋毒素和细菌性食物毒素，已成为食品、饲料、海鲜和医学领域的主要威胁。它们对人类具有潜在的致癌、致畸和致突变作用，偶尔会导致高死亡率和高发病率。其中一个明显的问题与快餐的使用越来越多以及对预制食品的需求有关，而没有适当认识到相关毒素。因此，开发更好的生物毒素监测方法具有重要意义。近年来，生物传感器因其检测过程简单快速、样品体积小、成本低等优点而得到越来越多的应用。本研究旨在总结近年来生物传感器在生物毒素检测中的应用，特别是其在光学、电化学、压电和光热方面的应用。此外，不同的检测平台被集成为生物毒素的多模式组合生物传感器，以满足高精度技术的要求。这项研究考察了生物传感器面临的主要挑战，并为改进食品安全技术提供了新的见解。研究亮点1.总结了生物毒素的流行、病理学和分类。2.介绍了生物传感器在光学、电化学和光热等方面的生物毒素检测的应用。3.针对生物传感器所面临的挑战，对食品安全技术的改进提供了新见解。图1.常见生物传感器的示意图。图2.(A) M13噬菌体作为纳米酶容器的化学修饰，增强比色免疫分析。(B)智能手机-ICA检测ZEN的原理图。(C)基于智能手机与PCFNs-FICA集成的AFB1检测的读取系统方案和图像。(D)水分散铅笔合成原理图图3.（A） 基于表面等离子体偶联CL（SPCC）策略的三种真菌毒素多重免疫测定的示意图。SPCC免疫传感器阵列包含3*12个传感位点，主要分两步可同时检测36个样本。（B） 用于MC-RR检测的CL适体传感器示意图。（C） 用于谷物OTA检测的BPE-ECL生物传感器的示意图。（D） 用于OTA检测的基于CdSe/CdS量子点的ECL适体传感器的制备。图4.（A） 核壳合成采用的策略Au@AgNPs和Ag@AuNPs以及抗SEA抗体的共价生物偶联和SEA的检测。（B） AFM1的基于SERS的侧流免疫传感测定的图解。图5.（A） DON适体传感器的制造过程示意图和PtPd NPs/PEI-rGO制备步骤的简化图。（B） 基于适体的传感器和QCM检测系统的检测原理。（C） 多信号读出系统的构建过程。（D） 掺入Ru（bpy）32þ（SAQDsRu）的金黄色葡萄球菌生物合成量子点的制备工艺示意图和SAQDsRu双模ICA的检测原理。研究结论 考虑到生物毒素对人体健康和食品安全的有害影响，迫切需要研究探索生物毒素生物传感器的开发。在本研究中，我们简要介绍了生物毒素的流行、毒理学特征和分类。此外，我们总结了用于生物毒素的高灵敏度生物传感器的最新重要技术发展，并强调了它们与常见传感器类别相关的传感模式，如荧光、比色、化学发光、ECL、SERS、SPR、LSPR、电化学和PZ传感器。尽管目前可用的生物传感器在生物毒素分析方面有着广阔的前景，但仍有一些挑战有待解决。因此，今后的研究应侧重于以下问题。（1） 应为快速生物毒素分析过程制定更简单的提取和清理程序，以省略精密仪器的使用。（2） 应使用公差特异性识别材料进行单组分特异性检测，或应使用公差通用识别材料检测一类物质，以克服食品样品基质的影响。应提高生物材料和靶标的识别效率，包括界面材料的生物相容性、生物材料的改性等。（3） 由于信号分量的大批量变化，现有的信号放大策略往往导致检测结果不准确。重点应该是开发一种合成过程简单、稳定性好、信号放大率高的黄金策略。应开发近红外区域的纳米材料以避免自发荧光。（4） 利用光谱等方法建立样品中生物毒素的实时检测，无需样品预处理。（5） 开发便携式、小型化的现场检测仪器。随着检测技术、便携设备和大数据的发展，智能生物传感器可能会继续在生物毒素检测中发挥关键作用，以满足市场应用和政府监管的需求。原文链接：https://doi.org/10.1016/j.trac.2023.117144

随着质谱技术的发展，质谱技术在应用领域越来越广，由于质谱分析具有灵敏度高、样品用量少，分析速度快，分离和鉴定同时进行等优点，因此，质谱技术广泛的应用于食品安全、环境、医药、刑事科学技术、生命科学、材料科学等各个领域。为进一步开拓质谱技术新思路，提升质谱技术发展，广西分析测试协会特举办“广西质谱技术及生物毒素检测高峰论坛"，本次论坛邀请各个领域的应用专家，从质谱应用技术、生物毒素检测技术、科技项目申报和管理等相关内容展开技术交流和讨论。施启乐作为实验室常用仪器制造商，受邀携带公司产品和解决方案参加此次会议交流。现诚邀新老朋友届时拨冗参会，共话实验室工作新发展。会议时间：2022年7月21日8：30会议地点：南宁红林大酒店（广西南宁市民族大道129号）

2012年6月6日，2012中国食品与农产品质量安全检测技术应用国际论坛暨展览会(CFAS 2012)同期召开了五场专题报告，报告之一“致病菌及生物毒素和非法添加物检测”在农业仪器学会常务副理事长蒋士强研究员的主持下准时召开。6位来自科研院校和仪器厂家的报告人作了关于食品安全检测方面的最新仪器、方法开发、研究进展以及实验成果的报告。 　　专家报告方面：中国科学院大连化学物理研究所的关亚风研究员作了“食品、农产品复杂机制中萃取痕量有毒有害化学残留物技术的进展”的报告。关亚风研究员就检测前处理中微萃取的最新技术和方法做了详细介绍，包括固相微萃取中的搅拌棒固相萃取、薄膜微萃取和集束毛细管微萃取以及液相微萃取中的分散液液微萃取和膜辅助溶剂萃取等，这些都是目前世界上的领先技术。关亚风研究员所在的团队在引入国外这些微萃取最新技术的同时，也自主研发了一些新产品，凭借性能优越得到了相关部门的肯定。可以预期，这些新型微萃取技术及仪器的出现与推广必将会使痕量分析达到前所未有的高度。 关亚风研究员在作报告 　　北京市化学工业研究院的王黎丽作了“色谱分析技术在食品检测中的应用”的报告，介绍了色谱技术在食品安全和环境污染方面的大量的实验方法和检测成果，其中涉及到的仪器有气相色谱、液相色谱、质谱、离子色谱、毛细管电泳、原子荧光、原子吸收、电感耦合等离子体质谱及几种仪器的联合使用。这些方法的开发为其他用户提供了参考和依据。 北京市化学工业研究院王黎丽在作报告 　　西南大学食品科学学院的冉玥做了“超高效液相色普法同时测定柑桔中11种类黄酮物质”的报告。作为一个检测方法的开发，该报告详尽的讲述了实验的设计思路和实验方案以及每一步的实验结果和数据分析，最后运用该方法测定的柠檬、脐橙、南丰蜜桔和砂糖桔四种水果所含的11种物质的含量比较也为这方面的后续研究奠定了基础。 西南大学食品科学学院冉玥在作报告 　　厂商报告方面：北京金诺美生物技术有限公司、天美(中国)科学仪器有限公司和北京创新通恒科技有限公司依次做了自己公司的一些新产品在食品检测方面的应用。北京金诺美生物技术有限公司的报告题目为“C7型实时荧光定量PCR仪在我国食品与农产品致病菌检验的应用”，主要介绍了公司新研制的实时荧光定量PCR—C7，该产品内部整合了多个单元模块，可同时执行多个扩增程序，提高了检测通量。另外，与之配合的操作软件也更加人性化，使得整个实验快速、简单，满足了广大用户的使用需要。 　　天美(中国)科学仪器有限公司的报告是“日立液相色谱仪食品安全典型项目多元解决方案”，结合市场上比较关注的黄曲霉毒素，皮革奶和三聚氰胺的问题，展示了用日立液相进行检测的多种方法，其中检测黄曲霉毒素的柱后光照衍生法较为新颖，样品出色谱柱后经光照装置再进荧光检测器，操作简单灵敏度高，亦可同时检测B1、B2、G1、G2、M1、M2六种成分，值得推广。 　　北京创新通恒科技有限公司的报告以“便携式液相色谱系统的研制及应用”为题，着重介绍了公司新推出的便携式液相色谱系统，他们将液相色谱仪集成一体化，内置标准windows电脑，实现了移动独立操作，并设有网络接口可进行远程操作。目前，该款产品已开发了一些应用，并且公司还在研发配套的固相微萃取设备，以便满足未来一些快速的现场检测的需求。 北京金诺美生物技术有限公司冯江波在作报告 天美(中国)科学仪器有限公司石欲容在作报告 北京创新通恒科技有限公司张浩在作报告

p 　　2016年6月1日，法国生物梅里埃宣布收购德国Hyglos公司，这家位于德国贝尔恩里德专业从事细菌内毒素检测的公司成立于2009年。Hyglos公司在药物制剂细菌内毒素检测用重组蛋白的研发及生产领域具有独特及公认的专业经验。 /p p 　　细菌内毒素是某些革兰氏阴性菌细胞壁中的一种成分，是一种热原性物质，会导致高热。药典标准规定在与血液系统及中枢神经系统有关的药物制剂中不得检出此类物质，例如注射剂及一些医疗器械。而且在生产用水等原材料和中间体中需定量检查细菌内毒素。 /p p 　　目前，细菌内毒素的检查依赖于鲎试剂，鲎在亚洲已濒临灭绝，在美国已受到保护，即使仅有微量细菌内毒素的存在，鲎的血液也会凝固。 /p p 　　Hyglos公司开发出一种利用重组蛋白的创新方法，减少了对鲎血液的需求，因此可以采用一系列完全标准化的反应来检测细菌内毒素。另外，当使用某些处方来生产生物技术药物时，这些处方可能会隐藏或“掩盖”细菌内毒素 Hyglos公司研发出一种独特的原创技术，用来防止细菌内毒素的“掩盖”，使得细菌内毒素可以被检测。 /p p 　　生物梅里埃工业部Nicolas Cartier 强调道：“Hyglos在重组蛋白领域的专业技术为细菌内毒素检测开辟了新领域。忠于我们的创新精神，我们对它的全新技术充满信心。其现有的产品组合丰富了我们在制药工业及医疗器械领域的微生物控制解决方案。” /p p 　　Hyglos公司市场部经理Wolfgang Mutter博士补充说：“我们非常高兴加入生物梅里埃。它在全球工业微生物控制领域的领导地位以及其商业网络覆盖范围为我们带来可靠前景，能够使制药生产商受益于我们所开发的用于细菌内毒素检测的可靠、有效的科学技术成果。” /p p 　　目前，细菌内毒素市场约有2.5亿欧元规模，每年增长12%左右，这些大多得益于生物药物、医疗器械以及疫苗市场容量的增长。 /p p 　　为收购Hyglos公司全部股票，生物梅里埃需支付达2400万欧元，将在接下来3年分阶段完成。 /p p br/ /p

2023年国家食品安全风险监测计划工作手册——划重点规定了食品中黄曲霉毒素等16种真菌毒素的同位素稀释液相色谱-串联质谱测定方法。该方法适用于小麦、大米、玉米及其制品以及膨化食品、婴幼儿辅食中黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、伏马毒素B1/B2/B3、T-2/HT-2毒素、杂色曲霉毒素等16种真菌毒素的测定。规定了小麦粉及其制品（挂面、饼干、面包、馒头等）、番茄及其制品、樱桃、车厘子、葡萄酒和植物油（含橄榄油）中4种交链孢霉毒素的液相色谱串联质谱测定方法。4种交链孢霉毒素包括：细交链孢菌酮酸（Tenuazonic acid，TeA）、交链孢酚（Alternariol，AOH）、腾毒素（Tentoxin，TEN）和交链孢酚单甲醚（Alternariol monomethyl ether，AME）。新增《辣椒酱、火锅底料中黄曲霉毒素（B1、B2、G1、G2）、赭曲霉毒素A测定的标准操作程序》。规定了食品中米酵菌酸的液相色谱-串联质谱测定方法，适用于谷物及其制品、银耳及其制品、木耳及其制品中米酵菌酸的测定。规定了同位素稀释-液相色谱串联质谱法测定黄曲霉毒素B族和G族的测定方法，适用于植物蛋白饮料中黄曲霉毒素B族和G族含量的测定。美正多年来持续专注于生物毒素检测技术与产品服务，公司已通过 ISO9001:2015 质量体系认证，美正检测实验室是CNAS标准物质/标准样品生产者认可实验室（注册号：CNAS RM0035），同时通过了CNAS检测实验室认可及CMA资质认定。针对2023年国家食品安全风险监测计划，美正为您提供完整的生物毒素检测解决方案，助您迅速建立方法，快速完成风险监测项目。2023风险监测计划对应毒素类基体质控样品2023风险监测计划对应毒素类免疫亲和柱2023风险监测计划对应毒素类混标2023风险监测计划对应毒素类单标

内毒素是革兰阴性杆菌生长时释放或死亡时裂解出来的细胞壁脂多糖成分。体内外实验早已证明，内毒素具有耐热，耐酸碱等特性。内毒素进入机体后可引起发热，血管扩张，血管通透性增加、中性粒细胞增多，补体激活、机体血压下降等病理生理反应，严重时可导致弥散性血管内凝血及多器官功能衰竭。由于基础研究和临床研究的深入开展，人们对内毒素的结构、功能、作用机制等有了进一步的了解，临床上也发现许多疾病的发生，发展与内毒素关系密切。内毒素血症在临床上可涉及外科，内科，妇产科、儿科，神经科，急诊科等，但是与之关系较为密切的仍然是败血症，多器官功能衰竭、急性呼吸窘迫综合征、弥散性血管内凝血，肝病等。因此，积极开展内毒素的基础及临床研究，对于阐明这些疾病的发生机制并进而建立相应的治疗措施有着重要的意义。 尽管对内毒素的研究已开展数十年之久，但是，目前国内尚无一部完整的书籍来专门阐述内毒素的基础与临床的关系。近年来，随着人们对内毒素的作用机制及信号转导途径认识的不断深化，建立和发展了抗内毒素血症的多种战略，这为以后治疗内毒素血症提供了新的思路。 内毒素进入机体后，可直接对细胞的生物膜产生毒性，但更为重要的是通过单核-巨噬细胞介导的细胞毒性作用使机体产生多种炎症介质，从而影响细胞的代谢，最后导致细胞死亡，影响脏器功能和屏障功能的完整性。Toll样受体家族的阐明使内毒素的信号转导途径更为完善。一般认为，内毒素进入机体后，与脂多糖结合蛋白结合形成复合物，将脂多糖传递给单核-巨噬细胞膜上的CD14受体，并与Toll样受体4的具有亮氨酸富集重复体的结构域发生物理接触，使Toll样受体4构象发生改变，通过其胞质结构域募集细胞内髓系分化蛋白88（My88）和白细胞介素-1（IL-1）受体相关激酶发生自身磷酸化，引发酶系级联反应，最终激活NF-MκB等多个转录因子，合成和分泌大量细胞因子发挥作用。 许多炎症介质参与内毒素的生物学效应，如TNF-α，白细胞介素类，NO、补体，前列腺素类，血小板激活因子等。肠细菌及内毒素转位是内毒素血症的主要因素之一，也是多器官功能衰竭及肝病内毒素血症致死的重要原因。重视对肠细菌及内毒素转位的处理是减少外科手术及其他危重患者发生多器官功能衰竭，减少肝病患者病死率的重要手段。 至今，对内毒素血症的治疗仍无特效措施，抗生素的应用虽然能够有效地控制细菌感染，但有增加内毒素血症的危险。内毒素抗体曾经被认为对内毒素血症的治疗有效，但是临床研究却证明其无效；其他措施包括抑制脂质A合成，阻断内毒素信号转导以减少细胞因子分泌，可能对内毒素血症的治疗有效，但仍需经过临床实践证实。

多年来，科德角国际生物医学科技（北京）有限公司始终专注于细菌内毒素检测服务，积累了丰富的细菌内毒素检测经验，为了进一步帮助药品检验检测机构和相关制药生产企业提升细菌内毒素检测能力，我司于2023年5月30日-2023年5月31日举办“科德角国际细菌内毒素检测技术应用及PKF型细菌内毒素定量检测系统实操培训”。一、培训组织主办单位：科德角国际生物医学科技（北京）有限公司协办单位：北京阿克庇斯医药有限公司二、培训对象（一）各省 （区、市）药品审评中心、核查中心、药检（院）所相关人员；（二）制药企业、研发公司、CRO 公司、高等院校、科研院所等相关专业人员。三、培训时间报名时间：2023年5月4日-2023年5月29日报到时间：2023年5月29日培训时间：2023年5月30日-2023年5月31日四、培训地点科德角国际生物医学科技（北京）有限公司北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院18幢五、培训内容※本次培训结业学员，将由科德角国际生物医学科技（北京）有限公司颁发培训合格证书。六、培训讲师范玉明科德角国际资深技术总监【专业及专长】药理学、毒理学及药事管理擅长细菌内毒素检测领域的研究医学硕士研究生，执业药师，编辑，GLP 、GMP 、GCP 培训证书七、公司荣誉细菌内毒素检测实验室ILPQ国际能力认证 中国食品药品检定研究院能力验证结果报告通知单 2022年度细菌内毒素LGC能力验证八、实验环境九、报名方式扫描下方二维码进行报名▲扫描二维码进入报名页面十、培训费用2000元/人（包括资料费、培训费、证书费、午餐费，其他费用自理）。地址：北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院18幢科德角国际生物医学科技(北京)有限公司北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院18号楼2层

导读海鲜一向以唇齿留香的滋味被人们视为珍馐。不管是生活在海边的居民，还是内陆的小伙伴们，对于海鲜总是有一番特别深厚的情感。然而，近年来随着海洋环境污染逐渐严重，海洋生物毒素对公共健康和海产品养殖业的影响也越来越严重，尤其在沿海地区城市，如珠海、宁波、厦门、秦皇岛、唐山等，贝类毒素中毒事件屡见报端。贝类毒素按其化合物性质可分为脂溶性和水溶性两大类，其中，脂溶性毒素最为常见。如今，包括脂溶性贝类毒素在内的海洋生物毒素对海产品污染已成为食品安全相关部门急需解决的重要问题之一。那么，脂溶性贝类毒素如何检测呢？一起来看看吧。贝类毒素小知识贝类毒素按照中毒症状主要分为四类，即麻痹性贝毒、腹泻性贝毒、神经性贝毒和记忆缺失性贝毒，按其化合物性质则可分为脂溶性和水溶性两大类，其中，脂溶性贝类毒素指在贝类脂肪组织富集而不易排出体外、具有热稳定性、易溶解于有机溶剂的一大类毒素，属于多环聚醚类的脂溶性化合物，主要包括大田软海绵酸毒素（OA）、鳍藻毒素（DTX）、蛤毒素（PTX）、虾夷扇贝类毒素（YTX）和原多甲藻毒素（AZAs）等。这些毒素通过食物链进入人体后，富集在脂肪组织内不易代谢排出，导致慢性病的发生甚至会诱发肿瘤。下图为AZA的基本结构。美国对OA组和AZA组毒素的安全限量为160 μg/kg，欧盟在此基础上还设置了PTX组和YTX组的安全限量，分别为160 μg/kg（PTX）和3750 μg/kg (YTX)。原多甲藻酸毒素(AZA)结构图岛津解决方案● 分析利器：三重四极杆液质联用仪岛津三重四极杆液质联用仪本方案使用碱性流动相分析扇贝萃取液中的脂溶性贝毒。萃取和分析步骤依据欧盟LC-MS/MS Ver.5测定软体动物中亲脂性海洋生物毒素的统一操作流程。● 方案特色：自动进样器的预处理功能分析时可采用自动进样器的预处理功能，吸出5 μL扇贝基质溶液，之后再吸出等量的各浓度混合标准溶液后进样。对于实际样品分析，吸取甲醇溶液来替代混合标准溶液。使用该功能，在配制基质匹配标准曲线时可大大节省制备空白基质的时间，并且软件的自动化功能使得结果具有更佳的重现性和线性。自动进样器的预处理功能示意图● 方法学结果下图为标准曲线最低点处各化合物的色谱图。水解可将自然界贝类中存在的OA和DTXs的酰化酯基团转化成游离形式，但水解处理后，PTX、AZA的毒素基团将被分解而无法检出，因此，AZA1、PTX2采用未水解的萃取液作为基质溶液，其它物质不论是否水解均可获得95~104%的良好回收率。表1. 定量结果和回收率注：N.D.表示未检出结 语贝类营养价值高，味道鲜美，是大海馈赠给人类的礼物，只是人们在大快朵颐的同时也要小心毒素的残留。通过在方法中设置自动进样器的预处理功能，可自动配制高精度的基质匹配标准曲线，扇贝中5种脂溶性贝类毒素的检测方法灵敏度高、线性良好，加标回收率高。捍卫食品安全，岛津与您共筑食品安全防线！撰稿人：骆丹如需深入了解更多细节，欢迎联系津博士 sshqll@shimadzu.com.cn本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。

各有关单位: 为了进一步帮助药品检验检测机构和相关制药生产企业提升细菌内毒素检测能力，海南省药师协会联合科德角国际生物医学科技（北京）有限公司定于2023年11月14日-15日在海口举办“细菌内毒素检测技术应用及光度法细菌内毒素定量检测实操培训班”。现将有关事项通知如下:一、培训组织主办单位：海南省药师协会协办单位：科德角国际生物医学科技（北京）有限公司二、培训对象药品生产企业、医疗器械生产企业、药检所以及医疗机构从事细菌内毒素检查工作的质检人员。三、培训时间、地点及费用（一）培训时间：11月14日-15日，培训为期1.5天；（二）培训地点:海南省海口市龙华区金盘南侧建设一横路1号吉兴雅苑1栋一楼109会议室。（三）培训费500元/人（含资料费、中餐费、证书费等）。四、培训讲师尹雪雁 科德角国际资深技术主管秦焕甲 科德角国际高级应用工程师五、培训内容（一）细菌内毒素基础知识及2025版中国药典细菌内毒素检查法趋势介绍1、内毒素、鲎试剂和内毒素检测概述2、鲎反应干扰因素及方法选择3、细菌内毒素检查法法规介绍（二）细菌内毒素光度法检测开发实例分享1、细菌内毒素光度检测开发实例2、基因重组鲎试剂方法介绍（三）细菌内毒素定量检测系统的应用指导1、计算机要求2、数据库3、Pyros® eXpress 软件安装和注册4、通用设置的介绍5、库的介绍6、检测模板介绍7、软件扩展（四）细菌内毒素定量检测系统的现场实操培训六、报名（一）参训人员用微信扫以下二维码报名，报名截止时间为：2023年11月10日18:00，有特殊情况请与李老师联系联系方式：400-860-5168转5075 七、其他事项联系电话：400-860-5168转5075办公地址：海口市龙华区金盘建设一横路1号吉兴雅苑西门1栋一楼102室。

本汇总主要是食品及饲料等相关产品中的毒素检测方面标准汇总： 　　国家标准： 　　GB 13078.2-2006 饲料卫生标准 饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量 　　GB/T 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法 　　GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法 　　GB/T 19539-2004 饲料中赭曲霉毒素A的测定 　　GB 21693-2008 配合饲料中T-2毒素的允许量 　　GB/T 23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定 液相色谱-荧光检测法 　　GB/T 23215-2008 贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的测定 液相色谱-荧光检测法 　　GB/T 23217-2008 水产品中河豚毒素的测定 液相色谱-荧光检测法 　　GB/T 23501-2009 食品中T-2毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法 　　GB/T 23502-2009 食品中赭曲霉毒素A的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法 　　GB 2761-2005 食品中真菌毒素限量 　　GB/T 4789.12-2003 食品卫生微生物学检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验 　　GB/T 5009.118-2008 谷物中T-2毒素的测定 　　GB/T 5009.198-2003 贝类 记忆丧失性贝类毒素软骨藻酸的测定 　　GB/T 5009.206-2007 鲜河豚鱼中河豚毒素的测定 　　GB/T 5009.212-2008 贝类中腹泻性贝类毒素的测定 　　GB/T 5009.213-2008 贝类中麻痹性贝类毒素的测定 　　GB/T 5009.22-2003 食品中黄曲霉毒素B1的测定 　　GB/T 5009.23-2006 食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 　　GB 5009.24-2010 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定 　　GB/T 5009.96-2003 谷物和大豆中赭曲霉毒素A的测定 　　GB 5413.37-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定 　　GB/T 8381-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 半定量薄层色谱法 　　GB/T 8381.4-2005 配合饲料中T-2毒素的测定 薄层色谱法 　　农业行业标准： 　　NY/T 1286-2007 花生黄曲霉毒素B1的测定 高效液相色谱法 　　NY/T 1664-2008 牛乳中黄曲霉毒素M1的快速检测 双流向酶联免疫法 　　水产行业标准： 　　SC/T 3023-2004 麻痹性贝类毒素的测定 生物法 　　SC/T 3024-2004 腹泻性贝类毒素的测定 生物法 　　进出口行业标准： 　　SN 0277-1993 出口粮谷中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检验方法液相色谱法 　　SN 0339-1995 出口茶叶中黄曲霉毒素B1检验方法 　　SN 0347-1995 出口饲料中棕曲霉毒素A的检验方法 　　SN 0352-1995 出口贝类麻痹性贝类毒素检验方法 　　SN 0637-1997 出口油籽、坚果及坚果制品中黄曲霉毒素的检验方法液相色谱法 　　SN/T 1040-2002 出口动物毒素(东亚钳蝎毒)检验方法 　　SN/T 1101-2002 进出口油籽及粮谷中黄曲霉毒素的检验方法 　　SN/T 1569-2005 进出口河豚中河豚毒素检验方法 ELISA法 　　SN/T 1571-2005 进出口粮谷中呕吐毒素检验方法 液相色谱法 　　SN/T 1572-2005 进出口粮谷、饲料中伏马毒素检验方法 液相色谱法 　　SN/T 1573-2005 贝类中神经性贝类毒素检验方法 小鼠生物法 　　SN/T 1664-2005 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2含量的测定 　　SN/T 1735-2006 进出口贝类产品中麻痹性贝类毒素检验方法 高效液相色谱法 　　SN/T 1736-2006 进出口蜂蜜中黄曲霉毒素的检验方法 高效液相色谱法 　　SN/T 1763.1-2006 出入境口岸生物毒素检验规程 第1部分：肉毒毒素 　　SN/T 1763.2-2006 出入境口岸生物毒素检验规程 第2部分：金黄色葡萄球菌肠毒素B 　　SN/T 1763.3-2006 出入境口岸生物毒素检验规程 第3部分：蓖麻毒素 　　SN/T 1771-2006 进出口粮谷中T-2毒素的测定 免疫亲和柱-液相色谱法 　　SN/T 1773-2006 进出口贝类中麻痹性贝类毒素检测方法 酶联免疫吸附试验法 　　SN/T 1827-2006 进出口食品中产志贺毒素大肠杆菌检验方法 　　SN/T 1940-2007 进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法 　　SN/T 1958-2007 进出口食品中伏马毒素B1残留量检测方法 酶联免疫吸附法 　　SN/T 1996-2007 贝类中腹泻性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附法 　　SN/T 2008-2007 进出口果汁中棒曲霉毒素的检测方法 高效液相色谱法 　　SN/T 2131.1-2008 进出口贝类腹泻性贝类毒素检测方法 第1部分：荧光磷酸酶抑制法 　　SN/T 2131.2-2010 进出口贝类腹泻性贝类毒素检验方法 第2部分：小鼠生物法 　　SN/T 2357-2009 可疑样品中烟曲霉毒素现场排查检测方法

导读春季是细菌病毒等滋生的活跃期，对于吃河鲜海鲜来说不是好季节，中毒事件往往会在每年的这段时间频发。那么如何避免吃到有毒海鲜？对吃了染毒的海鲜中毒的病人如何快速检测从而采取有效的救治措施呢？让我们从毒素本身说起。 对人类有毒害的鱼、虾及贝类食品一般是因有毒藻类污染产生的，海洋中的有毒藻类通过食物链传递给藻食性的鱼、虾及贝类等生物，并在其体内蓄积形成的有毒高分子化合物。由于这些毒素最早是从摄食有毒微藻的鱼类和贝类体内发现的，往往被大家习惯性地称为鱼类毒素或贝类毒素。对水体或鱼贝类进行有害物质的监测，或者发生群体性中毒事件后能迅速检测并协助临床进行救治是应对的关键。 鱼类毒素质谱分析 世界上可食用的鱼类约有3万种，其中约有600种鱼类体内含有毒素不可食用。鱼体内含有两大天然毒素，即雪卡毒素和河豚毒素。另外还有一种常见的鱼类过敏物质毒素—组胺，当人体摄入较多组胺时会产生组胺中毒。【1】 ①雪卡毒素雪卡毒素（Ciguatoxin，CTX，亦称西加毒素）是目前赤潮生物产生的主要毒素之一。属神经毒素，是已知的对哺乳动物毒性最强的毒素之一，比河豚毒素强100倍。中国南海诸岛、台湾海峡和香港地区常有雪卡毒素中毒事件发生，【1】已成为影响渔业经济发展和公共卫生的一大障碍。由于毒素在鱼体内含量低，而染毒鱼类在感官、嗅觉、味觉上均没有什么异常，用常规化学分析法很难检测出来，需要使用质谱仪器进行高灵敏度的分析。但是，由于对于雪卡毒素的检测尚缺少相应的检测标准，【2】以及很难购买标准品，有关检测还处于研究阶段。岛津使用液相色谱三重四极杆质谱进行了两种雪卡毒素的分析。【3】 仪器：LCMS-8050色谱柱：L-column 2 ODS (100 mmL. x 2.1 mmI.D., 3μm)流动相：A: 2 mmol/L Ammonium formate aqueous solution；B: Methanol containing 2 mmol/L ammonium formate洗脱梯度：B conc. 70%（0 min）→ 95%（10-20 min）→ 70%（20.01 - 25 min）离子源：ESI+接口电压：+1 kV雾化气流速：2.5 L/min加热气流速：15 L/min样品分析结果：CTX1B 43 ng/mL C60H86O19 单同位素质量 1110.57CTX3C 39 ng/mL C57H82O16 单同位素质量 1022.56 ②河豚毒素春季是河豚鱼产卵季节，此时河豚鱼的毒性最强，是河豚鱼中毒的高危险期，因鱼体内毒素含量高且热稳定性好，不能通过加热烧煮解毒，中毒两三小时就会导致死亡，无快速治疗药物。【4】 仪器：LCMS-8050色谱柱：XBridge Amide column (2.1x100 mm, 1.7 μm)流动相：A-acetonitrile B-water containing 10 mM formic acid / 5 mM ammoniumformate in channel B. 0-5min: 85 %-60 % A 5-8 min: 60 % A 8-8.5 min: 60 %-85 % A离子源：ESI+加热气流量：10 L/min干燥气流量：10 L/min 河豚毒素实际样品检测结果鱼干24 μg/kg织纹螺 387μg/kg ③组胺鱼体不新鲜或腐败时，污染鱼体的细菌如组胺无色杆菌，产生脱羧酶，使组氨酸脱羧生成组胺。在某些罐装食品中也会含有少量的组胺。【5】 岛津开发了液质质的方法应对包含组胺在内的多种生物胺的同时分析技术。 仪器：LCMS-8045色谱柱：HILIC 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 1.7 μm流动相：A相：乙酸铵水溶液；B相：乙腈离子源：APCI干燥气流速：5 L/min雾化气流速：3 L/min 实际样品中9个生物胺化合物检测结果，定量限值在2-10 μg/L之间。 贝类毒素质谱分析 每年的4-6月份我国经常发生群体性贝类中毒事件，这类食源性中毒事件大多是由于食用了被污染的贝类食品导致。 贝类毒素按中毒症状分为以下四类：• 麻痹性贝毒（PSP）：石房蛤毒素STX、河豚毒素TTX等• 腹泻性贝毒（DSP）：软海绵酸OA、鳍藻毒素DTXs等• 神经性贝毒（NSP）：Brevetoxin A&B（BTX-A&B）• 失忆性贝毒（ASP）：多莫酸（DA） 已发生了群体中毒事件，如何能快速对样本中的微量或痕量目标物进行检测以协助临床进行救治？ 首先要保存好中毒样品，首选样本如剩余的鱼或者贝类食物、吃剩的残渣、汤汁，中毒后第一次抽的血和留尿等，同时注意保存治疗前后和治疗过程中的血尿样本，样本经前处理后进质谱分析。理化实验室通常使用在线SPE-LCMSMS系统，用于生物样本中微量或痕量目标物的检测。样本经前处理后大体积上样，通过在线固相萃取系统净化以祛除干扰物，从而获得比常规LCMSMS分析灵敏度更高的分析结果。以水溶性麻痹性贝类毒素（PSPs）分析举例。【6】【7】 在线SPE-LCMSMS系统 2mL样品通过样品环实现大体积进样，FCV阀切换使得目标物在SPE柱中捕集，再通过FCV 阀的切换实现SPE柱解析，解析后的样品经色谱柱分离，MS定性定量分析。【8】 仪器：LCMS-8050/60色谱柱：Amide column 2.1 × 100 mm, 1.7 μm或相当色谱柱流动相：A（含6 mmol/L甲酸铵，10 mmol/L甲酸的水溶液）；B：乙腈离子源：ESI正负同时扫描方式 经在线SPE-LCMSMS分析的典型阳性样品结果见下图。阳性的是GTX2&3, GTX1&4, NEO和STX。 使用在线SPE-LCMSMS方法进行食品或者血尿样本检测时灵敏度更高，前处理快速，能迅速协助临床医生判断病因，从而进行有效的救治。 微囊藻毒素 水中的微囊藻毒素是鱼贝类毒素产生的罪魁祸首，如何检测水中的多种微囊藻毒素也非常重要。通常使用LCMSMS进行多种微囊藻毒素的分析，如使用岛津的LCMS-8045/50/60检测水中10种微囊藻毒素举例（参数略）。 更多分析数据请登录岛津官网或与岛津相关工作人员联系获取。 注：以上产品仅供科学研究，不用于临床诊断。 参考文献【1】李春媛，周玉，张磊等。雪卡毒素的研究概况[J].上海海洋大学学报，2009，18【2】吕颂辉，李英。我国雪卡鱼毒流行现状研究进展[J].中国公共卫生，2006，22【3】Analysis of Diarrhetic Shellfish ToxinUsing Triple Quadrupole LC/MS/MS (LCMS-8050). LAAN-A-LM-E075, ShimadzuApplication News.【4】Profile differences in tetrodotoxintransfer to skin and liver in the pufferfish Takifugu rubripes [J]. RyoheiTatsuno, Wei Gao, Kotaro Ibi, Tomoka Mine, Kogen Okita, Gregory Naoki Nishhara,Tomohiro Takatani, Osamu Arakawa. Toxicon. 2017【5】崔成祥，于夕娟，曹珊珊食用变质鲐鱼引起急性组胺中毒87例报告[J]，预防医学论坛，2012, 18(10):781-782. 【6】Xiao-min Xu?, et al. Fast and quantitativedetermination of saxitoxin and neosaxitoxin in urine by ultra performanceliquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry based on the cleanupof solid phase extraction with hydrophilic interaction mechanism.Journalof Chromatography B 1072 (2018) 267–272.【7】岛津脂溶性和水溶性贝类毒素测定标准操作程序【8】Screening of pesticides in water using SPEon line, PO-CON 1360E, Shimadzu Application News.岛津超快速液相质谱联用仪LCMS-8050

1 真菌毒素标准的发展　　真菌毒素是产毒真菌在粮食（或果蔬）的种植、收获、运输、储存过程中侵染粮食（或果蔬），并在适宜的生长条件下产生的次生代谢产物。真菌毒素污染谷物、饲料、果蔬，通过食物链危害人类健康和畜禽生产安全。因此，世界卫生组织（World Health Organization，WHO）和联合国粮农组织（Food and Agriculture Organization，FAO）把真菌毒素列为食源性疾病的三大根源之首。我国是真菌毒素污染最严重的国家之一。　　目前，人们发现的真菌毒素有400多种。我国重点关注黄曲霉毒素（主要是Aflatoxin B1，AFB1和Aflatoxin M1，AFM1）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）、赭曲霉毒素（Ochratoxin A，OTA）、展青毒素（Patulin，Pat）、T-2毒素（T-2 toxin，T2）和伏马毒素（Fumonisins，FBs）等，这些毒素具有强毒性和高污染频率等特点，每种毒素的化学结构、生物毒性及适宜生长的基质不同；有些毒素会在饲用动物体内发生结构转化，以结构类似物存在动物源性食品中，危害人类健康。包括我国在内的许多国家都制定了真菌毒素的限量标准，这些限量标准是非关税壁垒的重要组成部分，也是保障我国食品安全和畜牧业健康发展的需要。黄曲霉毒素M1结构式从“十五”到“十二五”，国家重点关注农、兽药等外源性有毒有害物质污染，对真菌毒素的重视较晚，相关检测技术的研究起步也晚。国家标准委员会曾提出在标准制定中采用国际标准和国外先进技术、积极与国际接轨的要求，促使我国真菌毒素检测标准的制修订得到了充分的发展。一些标准制定借鉴了国外先进的检测技术，这在一定程度上为我国国有品牌树立了标杆和发展方向。　　经过十多年的发展，我国制定了一系列的真菌毒素相关标准，但还需要在检测技术、作用毒理、公共危害等领域得到加强的基础上逐步改进和丰富。研究人员曾对我国真菌毒素的检测标准进行探讨，但那些被讨论过的标准很多已被废止，侧面反映了近些年来我国真菌毒素标准制定的活跃和国家的重视。　　真菌毒素标准包括限量标准和检测标准。按照检测方法，可分为大型仪器方法和快速检测方法；按照适用范围，可分为食品类、原粮类和饲料类。本文对我国现行真菌毒素检测标准进行了梳理、阐述和分析，根据笔者对真菌毒素检测技术的了解，对各类标准涉及的技术进行思考和探讨，并从应用和市场角度提出了一些建议和意见，希望能为我国真菌毒素标准的发展提供有益的参考。2 我国现行的食品中真菌毒素的标准　　现行的食品安全国家限量标准GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》，属国家强制执行的标准。GB 2761包括限定的毒素种类、限量、食品类型及检验方法的标准。最早的GB 2761是1981年颁布实施的，先后经过四次修订。1981年版只规定了AFB1的限量和食品种类；2005年版增加了AFM1、DON、Pat；2011版又增加了OTA、ZEN。2017版没有增加毒素种类，但对食品类型的划分更加细致。该标准没有做出受饲料行业监管、污染原粮的FBs、T-2的限定。GB 2761的修订，反映了国家对食品真菌毒素污染的重视。下边将对每种真菌毒素的现行检测标准逐一阐述和分析：　　2.1 黄曲霉毒素（AF）　　AF是产毒真菌黄曲霉和寄生曲霉产生的次级代谢产物，是毒性最强的化学致癌物质之一。目前分离鉴定出的AF包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2等18种。1993年国际癌症研究所将AF确定为一级人类致癌物。热带和亚热带地区农作物易遭受AF污染，居民肝癌发病率较高。　　GB 276l-2017规定了食品中AFB1/M1的最大限量标准及其存在的食品类别：谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、特殊膳食用食品等6大类18小类，限量范围为0.5~20 μg/kg，其中特殊膳食用食品的限量最低。AFM1限量的食品类别分为乳及乳制品、特殊膳食用食品等2大类8小类，统一限量0.5 μg/kg。GB 276l-2017的限量明显比GB 13078-2017《饲料卫生标准》严格，但低于欧盟食品的限量要求。　　AF的检测标准(见表1)包括国家标准(GB)、粮油行业标准(LS)、农业行业标准(NY)、出入境检验检疫行业标准(SN)、地方标准(DB)及食药局快检标准(KJ)等，涵盖了真菌毒素检测的所有方法。涉及的检测方法有柱后光化学衍生高效液相色谱法、超高效液相色谱法、免疫亲和柱净化-高效液相色谱法、同位素内标-液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱-柱前衍生法等仪器分析方法和胶体金定量/定性检测技术、酶联免疫吸附筛查法、时间分辩荧光定量检测技术、双流向酶联免疫法、薄层色谱法、免疫亲和层析净化荧光光度法等快检方法。　　一种作物可能被多种真菌毒素污染，因此对多种真菌毒素同时检测的技术很有实际应用价值。刚刚实施的LS/T 6133-2018《主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱串联质谱法》采用稳定同位素内标液相色谱-串联质谱法，对谷物中多种毒素同时检测，该技术除了检测我国日常监管的毒素外，还可以检测其衍生物或结构类似物。　　快检方法不仅仅是对实验室方法的有益补充，根据2015年颁布的《食品安全法》，国家认可的快检方法可以作为执法依据。农业部、国家粮食局和国家食药总局先后颁布了8个免疫检测技术的标准。粮食行业标准率先将胶体金定量检测技术纳入标准中，之前胶体金免疫层析技术只是作为定性筛查的手段。2017年国家食药局颁布了三个真菌毒素快检标准，其中两个是AF的标准。这些都为免疫层析技术在农业、粮油、食药行业的应用提供了技术保障和标准支撑，同时也有效保障了这些领域AF的监管和检测。唯一写入GB或GB/T的免疫方法是市场应用剧减的酶联免疫，目前应用广泛的免疫层析技术只出现在行业标准中。　　全球有100多个国家和地区制订了食品和饲料中AF限量标准。我国对食品中AFB1和AFM1的最高允许量有严格规定，而美国、加拿大等国家主要对AF总量（B1+B2+G1+G2）做出限定。为了满足进出口的需求，SN标准是针对黄曲霉毒素总量的检测。　　黄曲霉毒素的检测标准覆盖了AF污染的大多数食品，2020年《中国药典》2351真菌毒素测定法，更是增加了药材、饮片及中药制剂中真菌毒素的检测。但是，一些过时检测技术的行业标准依然有效：如NY/T 1664-2008《牛乳中黄曲霉毒素的快速检测 双流向酶联免疫法》，该技术操作繁琐，专业性要求高，且只能定性检测，市面上已很难买到相应的检测试剂。薄层色谱法是一种前处理复杂、当前应用很少的检测技术，依然作为第五法写入GB 5009.22-2016中。编者建议废止不能适应市场需要的一些标准。表1 我国现行标准中黄曲霉毒素的检测方法标准号标准名称适用样本检测方法检出限/定量限（μg/kg）GB5009.24-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素M 族的测定乳、乳制品和含乳特殊膳食用食品第一法：同位素稀释液相色谱-串联质谱法；第二法：高效液相色谱法；第三法：酶联免疫吸附筛查法。第一法：液态乳、酸奶，取样4g。AFM1：0.005/0.015； AFM2：0.005/0.015。乳粉、特殊膳食用食品、奶油和奶酪，取样1g。AFM1：0.02/0.05 AFM2：0.02/0.05；第二法：液态乳、酸奶 4g，AFM1 ：0.005/0.015；AFTM2 0.0025/0.0075。乳粉、特殊膳食用食品、奶油和奶酪 1g，AFM1：0.02/0.05；AFM2：0.01/0.025 GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G 族的测定谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品第一法：同位素稀释液相色谱-串联质谱法；第二法：高效液相色谱-柱前衍生法；第三法：高效液相色谱-柱后衍生法；第四法：酶联免疫吸附筛查法；第五法：薄层色谱法第一法：B1：0.03/0.1；B2：0.03/0.1；G1：0.03/0.1；G2：0.03/0.1。第二法：B1：0.03/0.1；B2：0.03/0.1；G1：0.03/0.1；G2：0.03/0.1。第三法：B1：0.03/0.1；B2：0.01/0.03；G1：0.03/0.1；G2：0.01/0.03。第四法：B1（谷物、坚果、油脂、调味品样品）： 1/3；B1（特殊膳食用食品）：0.1/0.3第五法：B1：5 GB/T 30955-2014饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法饲料免疫亲和柱净化-高效液相色谱法B1：0.2/1.0；B2：0.2/1.0；G1：0.3/1.0；G2：0.3/1.0。GB/T 17480-2008饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法饲料原料、配合饲料及浓缩饲料酶联免疫0.1LS/T 6111-2015粮食中黄曲霉毒素B1 胶体金快速定量法小麦、玉米、大米等胶体金定量检测2LS/T 6108-2014谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定免疫层析法大米、糙米、玉米等胶体金免疫层析（定性）4~20LS/T 6122-2017粮油及其制品中黄曲霉毒素含量测定 柱后光化学衍生高效液相色谱法粮油及其制品柱后光化学衍生高效液相色谱法B1: 0.5；B2: 0.25；G1: 1.0；G2: 0.5LS/T 6128-2017粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 超高效液相色谱法粮食及其制品超高效液相色谱法B1: 0.2/0.4；B2: 0.1/0.3；G1:0.5/1.5；G2: 0.1/0.3LS/T 6133-2018主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱串联质谱法小麦、玉米、稻谷液相色谱串联质谱法 B1、B2、G1、G2：0.3/1.0NY/T 2547-2014生鲜乳中黄曲霉毒素M1筛查技术规程生鲜乳时间分辩荧光免疫层析法0.45NY/T 2548-2014饲料中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辩荧光免疫层析法饲料及饲料原料时间分辩荧光免疫层析法0.3NY/T 2071-2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T2毒素的测定 液相色谱-串联质谱法单一饲料、配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料液相色谱-串联质谱法1.0/2.0NY/T 2549-2014饲料中黄曲霉毒素B1的测定 免疫亲和荧光光度法饲料及饲料原料免疫亲和荧光光度法0.3NY/T 2550-2014饲料中黄曲霉毒素B1的测定 胶体金法饲料及饲料原料胶体金法1NY/T1664-2008牛乳中黄曲霉毒素的快速检测 双流向酶联免疫法生牛乳、巴氏杀菌乳、UHT灭菌乳、乳粉双流向酶联免疫法0.5DB 34/T 813-2008饲料中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化荧光光度法 配合、浓缩饲料和单一饲料免疫亲和层析净化荧光光度法B1+B2+G1+G2 总量：1 DB37/T 2617-2014饲料中黄曲霉毒素B1 的测定高效液相色谱法饲料高效液相色谱法5SN/T 3136-2012出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的测定花生、谷类及其制品液相色谱-质谱/质谱检测方法AFB1:0.5；AFB2、AFG1、AFG2:1SN/T 3263-2012出口食品中黄曲霉毒素残留的测定玉米、茶叶、花生果、苦杏仁、花生米方法一：高效液相色谱法；方法二：荧光光度法方法一：B1、B2、G1、G2：0.5。方法二：黄曲霉毒素总量：1.0SN/T 3868-2014出口植物油中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测 免疫亲和柱净化高效液相色谱法花生油、芝麻油、橄榄油免疫亲和柱净化高效液相色谱法B1、B2、G1、G2：1.0KJ201708食用油中黄曲霉毒素B1的快速检测胶体金免疫层析法花生油、玉米油、大豆油及其他植物油脂等食用油胶体金免疫层析法B1 玉米油、花生油：20；其他植物油脂：10 KJ201709液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测胶体金免疫层析法生鲜乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳胶体金免疫层析法0.52.2 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）　　脱氧雪腐镰刀菌烯醇又称为呕吐毒素，广泛存在玉米、小麦、大麦等谷物中，是污染食物的主要真菌毒素。DON破坏人和动物免疫系统，具有一定的胚胎毒性和致畸性。世界各国都对食品中DON做出了限量要求。GB 276l-2017规定谷物及其制品中DON的限量是1000 μg/kg，与美国对小麦的限量标准一致。而欧盟标准规定的非常细致：未加工的硬质小麦、谷物和玉米中DON的限量为1750 μg/kg，未加工的谷物（除前述之外的谷物）的DON限量是1250 μg/kg，终端销售的谷物面粉、麸皮和胚芽的DON限量为750 μg/kg，谷物为原料的婴儿食品中DON限量不得超过200 μg/kg；日本规定小麦和小麦制品的DON限定量为1100 μg/kg。　　DON的检测标准有9个(见表2)，包括4个LS，1个KJ，3个GB和1个SN，其中GB 5009.111-2016《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》是GB 2761-2017指定的检验方法，可以检测谷物及其制品、酒类、酱油、醋中的DON及其乙酰化衍生物。与AF相比，DON检测标准的数量和方法明显减少，但DON作为粮食行业重点关注的毒素，LS占比非常大。DON的结构类似物雪腐镰刀菌烯醇(NIV)对我国中东部作物的污染较常见，但目前只有DB32/T 3205-2017《饲料中雪腐镰刀菌烯醇(NIV)的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法》提出了它的检测方法。　　表2 我国现行标准中呕吐毒素检测方法标准号标准名称适用样本检测方法检出限/定量限（μg/kg）GB5009.111-2016食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定食品第一法：同位素稀释液相色谱-串联质谱法；第二法：免疫亲和层析净化高效液相色谱法第三法：薄层色谱测定法第一法：谷物及其制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品取样2g，DON、3-AC-DON、15-AC-DON： 10/20。酒类取样5g，DON、3-AC-DON、15-AC-DON 5/10 第二法：谷物及其制品、酱油、醋、酱及酱制品取样25g ，DON：100/200；酒类取样20g，DON：50/100 第三法：DON:300GB/T 8381.6-2005配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇薄层色谱法饲料薄层色谱法1000GB/T 30956-2014饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料免疫亲和柱净化-高效液相色谱法100LS/T 6110-2014谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定胶体金快速测试卡法小麦、玉米等谷物胶体金快速测试卡法1000LS/T 6113-2015粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇测定胶体金快速定量法小麦、玉米等及其粮食制品胶体金快速定量法120LS/T 6127-2017粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定超高效液相色谱法粮食及其制品超高效液相色谱法50/150LS/T 6133-2018主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱串联质谱法小麦、玉米、稻谷液相色谱串联质谱法DON：45/150DON-3G：7.5/253-AcDON：12/4015-AcDON：6.0/20SN/T 3136-2012出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的测定花生、谷类及其制品液相色谱-质谱/质谱检测方法50KJ201702食品中呕吐毒素的快速检测胶体金免疫层析法谷物加工品及谷物碾磨加工品胶体金免疫层析法10002.3 玉米赤霉烯酮（ZEN）　　玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麦及其制品。动物食用被ZEN污染的饲料会引起中枢神经中毒，妊娠期的动物则可能流产、死胎、畸胎。GB 2761-2017规定小麦(粉)、玉米(粉)中ZEN的限量为60 μg/kg，未规定以小麦、玉米为原料的玉米油、调味品等的ZEN限量。ZEN现行的检测标准有8个（表3），包括4个LS，3个GB， 1个NY，基本覆盖了市场上ZEN的检测技术。GB 2761-2017指定的ZEN的检验方法GB 5009.209-2016《食品中玉米赤霉烯酮的测定》中规定的方法，适用很多检测样本：粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品、玉米油、大豆、牛肉、猪肉、牛肝、牛奶、鸡蛋。ZEN在动物源性食品中常以代谢物玉米赤霉烯醇的形式存在，玉米赤霉烯醇对动物具有类似ZEN生物效应，但目前关于玉米赤霉烯醇的检测标准非常不完善。LS/T 6112-2015的检出限是5 μg/kg，远小于GB 2761确定的限量值，应用上没太大实际意义，但对推动检测技术和国家限量标准的改进具有积极的作用，建议放宽此类标准的检出限，给国内产品更多的市场机会。　　表3 我国现行标准中玉米赤霉烯酮检测方法标准号标准名称适用样本检测方法检出限/定量限（μg/kg）GB/T 5009.209-2016 食品中玉米赤霉烯酮的测定第一法：粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品、大豆、油菜籽、食用植物油；第二法：大豆、油菜籽、食用植物油；第三法：牛肉、猪肉、牛肝、牛奶、鸡蛋 第一法 液相色谱法；第二法：荧光光度法；第三法：液相色谱-质谱法第一法：粮食和粮食制品：5/17；酒类：20/66；酱油、醋、酱及酱制品：50/165；大豆、油菜籽、食用植物油：10/33。第二法：10/33。第三法：1/4。GB/T 28716-2012饲料中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法饲料免疫亲和柱净化-高效液相色谱法2/10GB/T 19540-2004饲料中玉米赤霉烯酮的测定于配合饲料和饲用谷物原料第一法：薄层色谱法第二法：酶联免疫吸附测定法第一法：500第二法：500LS/T 6112-2015粮食中玉米赤霉烯酮胶体金快速定量法小麦、玉米、大米胶体金快速定量法5LS/T 6109-2014谷物中玉米赤霉烯酮测定的胶体金快速测试卡法小麦、玉米胶体金快速测试卡法60LS/T 6129-2017粮食中玉米赤霉烯酮超高效液相色谱法粮食及其制品超高效液相色谱5/10LS/T 6133-2018主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱串联质谱法小麦、玉米、稻谷液相色谱串联质谱法ZEN：6/20NY/T 2071-2011饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T2毒素的测定 液相色谱-串联质谱法单一饲料、配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料液相色谱-串联质谱法5/10　　2.4 伏马毒素（FB）　　伏马毒素是串珠镰刀菌产生的毒素，包括FB1、FB2和FB3。我国主要检测FB1和FB2总量，但目前尚无食品中的FB限量标准。GB 13078-2017规定了不同饲料及原料中FB的限量，范围是5~60 mg/kg。随着检测技术的改进和国家对检测标准统一的要求，近年来FB标准废止力度较大。我国现行的伏马毒素的检测标准(表4)有6个，包括1个GB和5个行业标准，适用样本包括粮食及其制品、玉米及其制品、花生、谷物、饲料（配合饲料、浓缩饲料、精料补充料）等。今年刚颁布实施的DB 36/T 1023-2018规定了饲料及其原料中FB的胶体金快速定量法，是FB唯一的现行有效的快检标准。GB(GB/T)或行标缺乏FB的快检方法，限制了FB快检技术及产品在相关行业领域的应用。　　表4 我国现行标准中伏马毒素检测方法标准号标准名称适用样本检测方法检出限/定量限（μg/kg）

1 真菌毒素标准的发展　　真菌毒素是产毒真菌在粮食（或果蔬）的种植、收获、运输、储存过程中侵染粮食（或果蔬），并在适宜的生长条件下产生的次生代谢产物。真菌毒素污染谷物、饲料、果蔬，通过食物链危害人类健康和畜禽生产安全。因此，世界卫生组织（World Health Organization，WHO）和联合国粮农组织（Food and Agriculture Organization，FAO）把真菌毒素列为食源性疾病的三大根源之首。我国是真菌毒素污染最严重的国家之一。　　目前，人们发现的真菌毒素有400多种。我国重点关注黄曲霉毒素（主要是Aflatoxin B1，AFB1和Aflatoxin M1，AFM1）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）、赭曲霉毒素（Ochratoxin A，OTA）、展青毒素（Patulin，Pat）、T-2毒素（T-2 toxin，T2）和伏马毒素（Fumonisins，FBs）等，这些毒素具有强毒性和高污染频率等特点，每种毒素的化学结构、生物毒性及适宜生长的基质不同；有些毒素会在饲用动物体内发生结构转化，以结构类似物存在动物源性食品中，危害人类健康。包括我国在内的许多国家都制定了真菌毒素的限量标准，这些限量标准是非关税壁垒的重要组成部分，也是保障我国食品安全和畜牧业健康发展的需要。　　黄曲霉毒素M1结构式　　从“十五”到“十二五”，国家重点关注农、兽药等外源性有毒有害物质污染，对真菌毒素的重视较晚，相关检测技术的研究起步也晚。国家标准委员会曾提出在标准制定中采用国际标准和国外先进技术、积极与国际接轨的要求，促使我国真菌毒素检测标准的制修订得到了充分的发展。一些标准制定借鉴了国外先进的检测技术，这在一定程度上为我国国有品牌树立了标杆和发展方向。　　经过十多年的发展，我国制定了一系列的真菌毒素相关标准，但还需要在检测技术、作用毒理、公共危害等领域得到加强的基础上逐步改进和丰富。研究人员曾对我国真菌毒素的检测标准进行探讨，但那些被讨论过的标准很多已被废止，侧面反映了近些年来我国真菌毒素标准制定的活跃和国家的重视。　　真菌毒素标准包括限量标准和检测标准。按照检测方法，可分为大型仪器方法和快速检测方法；按照适用范围，可分为食品类、原粮类和饲料类。本文对我国现行真菌毒素检测标准进行了梳理、阐述和分析，根据笔者对真菌毒素检测技术的了解，对各类标准涉及的技术进行思考和探讨，并从应用和市场角度提出了一些建议和意见，希望能为我国真菌毒素标准的发展提供有益的参考。　　2 我国现行的食品中真菌毒素的标准　　现行的食品安全国家限量标准GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》，属国家强制执行的标准。GB 2761包括限定的毒素种类、限量、食品类型及检验方法的标准。最早的GB 2761是1981年颁布实施的，先后经过四次修订。1981年版只规定了AFB1的限量和食品种类；2005年版增加了AFM1、DON、Pat；2011版又增加了OTA、ZEN。2017版没有增加毒素种类，但对食品类型的划分更加细致。该标准没有做出受饲料行业监管、污染原粮的FBs、T-2的限定。GB 2761的修订，反映了国家对食品真菌毒素污染的重视。下边将对每种真菌毒素的现行检测标准逐一阐述和分析：　　2.1 黄曲霉毒素（AF）　　AF是产毒真菌黄曲霉和寄生曲霉产生的次级代谢产物，是毒性最强的化学致癌物质之一。目前分离鉴定出的AF包括AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2等18种。1993年国际癌症研究所将AF确定为一级人类致癌物。热带和亚热带地区农作物易遭受AF污染，居民肝癌发病率较高。　　GB 276l-2017规定了食品中AFB1/M1的最大限量标准及其存在的食品类别：谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、特殊膳食用食品等6大类18小类，限量范围为0.5~20 μg/kg，其中特殊膳食用食品的限量最低。AFM1限量的食品类别分为乳及乳制品、特殊膳食用食品等2大类8小类，统一限量0.5 μg/kg。GB 276l-2017的限量明显比GB 13078-2017《饲料卫生标准》严格，但低于欧盟食品的限量要求。　　AF的检测标准(见表1)包括国家标准(GB)、粮油行业标准(LS)、农业行业标准(NY)、出入境检验检疫行业标准(SN)、地方标准(DB)及食药局快检标准(KJ)等，涵盖了真菌毒素检测的所有方法。涉及的检测方法有柱后光化学衍生高效液相色谱法、超高效液相色谱法、免疫亲和柱净化-高效液相色谱法、同位素内标-液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱-柱前衍生法等仪器分析方法和胶体金定量/定性检测技术、酶联免疫吸附筛查法、时间分辩荧光定量检测技术、双流向酶联免疫法、薄层色谱法、免疫亲和层析净化荧光光度法等快检方法。　　一种作物可能被多种真菌毒素污染，因此对多种真菌毒素同时检测的技术很有实际应用价值。刚刚实施的LS/T 6133-2018《主要谷物中16种真菌毒素的测定 液相色谱串联质谱法》采用稳定同位素内标液相色谱-串联质谱法，对谷物中多种毒素同时检测，该技术除了检测我国日常监管的毒素外，还可以检测其衍生物或结构类似物。　　快检方法不仅仅是对实验室方法的有益补充，根据2015年颁布的《食品安全法》，国家认可的快检方法可以作为执法依据。农业部、国家粮食局和国家食药总局先后颁布了8个免疫检测技术的标准。粮食行业标准率先将胶体金定量检测技术纳入标准中，之前胶体金免疫层析技术只是作为定性筛查的手段。2017年国家食药局颁布了三个真菌毒素快检标准，其中两个是AF的标准。这些都为免疫层析技术在农业、粮油、食药行业的应用提供了技术保障和标准支撑，同时也有效保障了这些领域AF的监管和检测。唯1写入GB或GB/T的免疫方法是市场应用剧减的酶联免疫，目前应用广泛的免疫层析技术只出现在行业标准中。　　全球有100多个国家和地区制订了食品和饲料中AF限量标准。我国对食品中AFB1和AFM1的最高允许量有严格规定，而美国、加拿大等国家主要对AF总量（B1+B2+G1+G2）做出限定。为了满足进出口的需求，SN标准是针对黄曲霉毒素总量的检测。　　黄曲霉毒素的检测标准覆盖了AF污染的大多数食品，2020年《中国药典》2351真菌毒素测定法，更是增加了药材、饮片及中药制剂中真菌毒素的检测。但是，一些过时检测技术的行业标准依然有效：如NY/T 1664-2008《牛乳中黄曲霉毒素的快速检测 双流向酶联免疫法》，该技术操作繁琐，专业性要求高，且只能定性检测，市面上已很难买到相应的检测试剂。薄层色谱法是一种前处理复杂、当前应用很少的检测技术，依然作为第五法写入GB 5009.22-2016中。编者建议废止不能适应市场需要的一些标准。　　2.2 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）　　脱氧雪腐镰刀菌烯醇又称为呕吐毒素，广泛存在玉米、小麦、大麦等谷物中，是污染食物的主要真菌毒素。DON破坏人和动物免疫系统，具有一定的胚胎毒性和致畸性。世界各国都对食品中DON做出了限量要求。GB 276l-2017规定谷物及其制品中DON的限量是1000 μg/kg，与美国对小麦的限量标准一致。而欧盟标准规定的非常细致：未加工的硬质小麦、谷物和玉米中DON的限量为1750 μg/kg，未加工的谷物（除前述之外的谷物）的DON限量是1250 μg/kg，终端销售的谷物面粉、麸皮和胚芽的DON限量为750 μg/kg，谷物为原料的婴儿食品中DON限量不得超过200 μg/kg；日本规定小麦和小麦制品的DON限定量为1100 μg/kg。　　DON的检测标准有9个(见表2)，包括4个LS，1个KJ，3个GB和1个SN，其中GB 5009.111-2016《食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》是GB 2761-2017指定的检验方法，可以检测谷物及其制品、酒类、酱油、醋中的DON及其乙酰化衍生物。与AF相比，DON检测标准的数量和方法明显减少，但DON作为粮食行业重点关注的毒素，LS占比非常大。DON的结构类似物雪腐镰刀菌烯醇(NIV)对我国中东部作物的污染较常见，但目前只有DB32/T 3205-2017《饲料中雪腐镰刀菌烯醇(NIV)的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法》提出了它的检测方法。

7月21日，广西质谱技术及生物毒素检测高峰论坛在南宁举行，本次论坛由广西分析测试协会主办，广西产研院新型功能材料研究所下属检测公司（下称“功能材料所检测公司”）协办，与质谱行业巨头沃特世公司、广州华培实验设备有限公司、广州禾信仪器股份有限公司等区内外优秀企业，共同呈现了一场高规格的交流盛宴。质谱技术与应用方面的专家学者、质谱厂商代表及相关用户共200余人参会。 本次论坛围绕质谱新技术引领、食品中有机污染物检测新方法研究等主题作了十余项精彩报告，针对用户实验中遇到的常见问题展开研讨，以互动式答疑提供解决方案。质谱生产厂商也带来最新的产品与技术，现场展示了先进仪器设备的使用。会议促进了医科大学、检测中心、研究机构、质谱仪器企业和用户之间更好的沟通和交流。 禾信仪器在论坛上展开了关于《复杂体系样品中有机物的非靶向分析》的报告。复杂样品体系涵盖环境、材料、代谢组学、食品与天然产物（中药）、香精香料、石油化工等方面，因其具有化合物众多、共流出严重、基质复杂、干扰严重等特征，所以对检测仪器的定性和定量能力提出了更高的要求。全二维气相色谱GGT 0620禾信仪器自主研发的GGT 0620是一款集合全二维气相色谱仪和飞行时间质谱仪以及全自动智能化前处理平台为一体的可有效应用于复杂样品精准定性定量的分析系统，具有极强的色谱分离能力和极灵敏的质谱分析能力。检测物种更全： 峰容量较一维GC-MS方法提高10倍以上，一次进样可分离并检测出上千种物质；灵敏度提高5-10倍，痕量物质不漏检。定性结果更精准： 飞行时间质谱超快采集速度全谱采集，500谱/s（同类产品最高），确保超窄色谱峰的完整呈现，提高检测准确性；可结合双检测器，实现定性定量同时分析。适用场景更广：使用新型固态热调制器，无需使用制冷剂，体积小巧，即插即用，操作简单，使用场景可从实验室扩展到车载、现场在线监测。数据处理更智能： 海量数据自动处理，分类、对比、鉴定，极大提高效率；集成化的采集操作软件，操作简单；可满足定制化需求，支持在线处理模块定制、电离源定制。2021年4月19日，GGT 0620凭借出色的性能品质、广泛的应用脱颖而出，成功入选《2020年广东省名优高新技术产品名单》。气相色谱质谱联用仪GCMS 2000禾信仪器推出的便携式气相色谱质谱联用仪GCMS 2000在会上也吸引了众多专家的目光。仪器将低热容快速气相色谱技术和先进的线形离子阱质量分析器技术相结合，充分发挥了色谱分离效率高和质谱定性能力强的优势，能够快速地对事故现场的有机污染物进行准确定性和定量检测。精准：内标校正，可实现固液气多种基质、浓度从PPT至PPM的样品检测，准确分析上百种挥发性有机物。快启：冷启动15min进入检测状态，单次分析时间小于4min，现场直接得到定性定量结果。持久：连续监测达2小时以上，待机4小时以上；支持在线更换电池，无需关机。

近期，市场监管总局组织食品安全监督抽检，抽取粮食加工品、食用农产品、食糖、茶叶及相关制品、乳制品、饮料、酒类、糕点、炒货食品及坚果制品、饼干、淀粉及淀粉制品、方便食品、薯类和膨化食品、蛋制品、蜂产品、罐头、蔬菜制品、水果制品、肉制品、水产制品、调味品、速冻食品、糖果制品、婴幼儿配方食品、保健食品、特殊膳食食品和食用油、油脂及其制品等27大类食品307批次样品，检出其中食用农产品、炒货食品及坚果制品、方便食品、蔬菜制品和水果制品等5大类食品7批次样品不合格。发现的主要问题是，生物毒素、农兽药残留超标、重金属污染、食品添加剂超限量使用、质量指标不达标等。产品抽检结果可查询https://spcjsac.gsxt.gov.cn/。 　　对抽检发现的不合格食品，市场监管总局已责成北京、上海、江苏、浙江、江西、山东、广东、海南、重庆、陕西等省级市场监管部门立即组织开展核查处置，查清产品流向，督促企业采取下架召回不合格产品等措施控制风险；对违法违规行为，依法从严处理；及时将企业采取的风险防控措施和核查处置情况向社会公开，并向总局报告。 　　现将具体情况通告如下： 　　一、生物毒素问题 　　重庆市锦江麦德龙现购自运有限公司重庆南岸商场销售的、标称益海嘉里家乐氏食品（上海）有限公司进口的、家乐氏公司泰国瑞阳工厂生产的家乐氏可可球即食谷物（原产国：泰国），其中黄曲霉毒素B1检测值不符合食品安全国家标准规定。检验机构为重庆海关技术中心。上海市浦东新区市场监管局对益海嘉里家乐氏食品（上海）有限公司作出行政处罚，没收违法经营产品27672盒，没收违法所得44.5万元，罚款人民币1837万元。 　　二、农兽药残留超标问题 　　（一）北京诚惠凯旺商贸中心销售的、来自山东省聊城市莘县永旺食品有限公司的乌鸡，其中甲氧苄啶残留量不符合食品安全国家标准规定。检验机构为南京市食品药品监督检验院。 　　（二）海南旺豪阳光实业有限公司销售的、来自海南省海口市琼山区凤翔蔬菜批发市场（供应商：林佳俊）的长豆角（豇豆），其中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、克百威、啶虫脒残留量不符合食品安全国家标准规定。检验机构为江西省食品检验检测研究院。 　　三、重金属污染问题 　　淘宝网庄稼人干货铺（经营者为江苏省泰州市兴化市靖宇食品经营部）在淘宝网（网店）销售的、标称江苏省泰州市兴化市绿宝食品有限公司制造的芹菜粉，其中铅（以Pb计）检测值不符合产品执行标准要求。检验机构为合肥海关技术中心。 　　四、食品添加剂超限量使用问题 　　（一）天猫春江月食品旗舰店（经营者为浙江省杭州春江月食品有限公司）在天猫商城（网店）销售的、标称浙江省杭州春江月食品有限公司销售的、浙江省杭州果乐缘食品有限公司（分装）的乌梅（李子制品），其中亮蓝、苋菜红、相同色泽着色剂混合使用时各自用量占其最大使用量的比例之和检测值不符合食品安全国家标准规定。检验机构为成都市食品检验研究院。 　　（二）天猫向兴旗舰店（经营者为江西省天策教育咨询有限公司）在天猫商城（网店）销售的、标称广东省揭阳市揭西县盛华园食品厂分装的天山乌梅，其中亮蓝、苋菜红检测值不符合食品安全国家标准规定。检验机构为成都市食品检验研究院。 　　五、质量指标不达标问题 　　淘宝网老孙家炒货食品（经营者为陕西省西安市莲湖区老孙家炒货经销部）在淘宝网（网店）销售的、标称陕西省西安市莲湖区佳万食品有限公司委托陕西老孙家炒货食品有限公司生产的兰花豆，其中酸价（以脂肪计）检测值不符合食品安全国家标准规定。检验机构为河北省食品检验研究院。 　　特此通告。 　　附件： 　　市场监管总局 　　 2021年10月8日

仪器信息网讯 2014年5月19-23日，由国际真菌毒素学会(ISM)、中国农业科学院农产品加工研究所主办的&ldquo 2014国际真菌毒素大会&rdquo 在北京友谊宾馆召开，来自全球各地32个国家的科学家约300人参加了此次会议。 会议现场 　　真菌毒素是真菌产生的次生代谢产物，主要包括黄曲霉毒素、镰刀菌毒素等，具有强毒性和致癌性，能够污染几乎所有种类的食用和饲用农产品。联合国粮食与农业组织的数据显示，全球25%的粮油作物受到真菌毒素的污染，为应对真菌毒素的严重危害，100多个国家或地区制定了相应的限量标准和法规。 　　本次会议，各国科学家就真菌毒素检测、监测和预警，真菌毒素合成的分子路径，种植、收货、储藏、运输和加工全产业链真菌毒素防控，食品和饲料中真菌毒素的去除与脱毒以及全球真菌毒素防控策略进行深入研讨，共商真菌毒素防控大计。 合影 　　笔者从会议上了解到，目前真菌毒素检测主要有ELISA和试纸条两种快速检测方法，及液相、液质及荧光光度计等仪器检测的确证方法。就真菌毒素检测的挑战而言，与会专家表示，采样及样品前处理是难点，如何在大宗样品中选取有代表性的样品是关乎整个检测成败的关键。 　　作为真菌毒素研究领域规模最大、影响最广、权威性最高的唯一国际学术论坛，会议吸引了众多相关仪器和耗材供应商参展，展示真菌毒素检测相关产品和技术，以下是相关厂商及产品： 华安麦科 华安麦科相关产品 Romer Labs：有最全的真菌毒素标准品，以及专利技术净化柱 AB SCIEX 博欧实德 沃特世旗下VICAM VICAM的免疫亲和柱及荧光光度计 TECNA 安捷伦 NEOGEN 纽勤 勤邦生物 (撰稿：杨娟)

内毒素亲和填料 内毒素是一种常见的蛋白污染物，它的存在使得蛋白的活性研究变得十分复杂，并且内毒素是一种对人类有害的化学物质，它能引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等一系列不良症状，因此，检测和去除蛋白中的内毒素有着十分重要的意义。 月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 内毒素亲和填料以自制的琼脂糖凝胶为基质、多占菌素B为配基，用于去除生物源蛋白类产品（包括多肽、抗体、多糖等）中的内毒素，但多占菌素B只对部分内毒素有抑制作用，而不能抑制所有内毒素。 技术参数 常见问题解决方案 #01 内毒素去除效率低，应当怎么做？ ①可能原因：样品pH值不在内毒素结合范围。解决方法：用0.1M NaOH或0.1M HCl调节pH至7-8。 ②可能原因：样品与填料接触时间短。解决方法：降低流速，增加样品接触时间。 ③可能原因：检测系统被内毒素污染。解决方法：确保所有试验用品均为无热源产品。 ④可能原因：内毒素与目的蛋白结合较强解决方法：优化样品pH，使样品能够与内毒素分离。 #02 样品被污染，应当怎么做？ ①可能原因：该填料纯化过其他样品。解决方法：增加接触时间；不要用使用过的填料来去除不同样品的内毒素。 #03 样品回收率低，应当怎么做？ ①可能原因：样品非特异性吸附在填料上。解决方法：增加样品和平衡液中的NaCl浓度。 ②可能原因：目的蛋白与内毒素结合一起被去除。解决方法：优化样品pH，使样品与内毒素分离。 订购信息

据中国农业科学院最新消息，该院油料作物所研究员李培武带领农业部生物毒素检测重点实验室科研团队，成功破解了黄曲霉毒素高灵敏快速准确定量检测的技术难题，研制出黄曲霉毒素系列检测仪器和配套产品，如牛奶等单个样品从取样到结果打印最快9分钟即可完成，用时相当于国外同类产品的一半，检测技术达国际领先水平，打破了发达国家在该领域的垄断。 　　黄曲霉毒素是迄今发现的毒性和致癌性最强的真菌毒素。其中，黄曲霉毒素B1的毒性是氰化钾的10倍，是砒霜的68倍，致癌力是标准致癌物二甲基硝胺的75倍。此前，国际通行的黄曲霉毒素检测方法为高效液相色谱法或高效液相色谱质谱联用法，不仅需大型仪器，而且相关设备价格昂贵(每台几十万元甚至几百万元)。由于缺少现场高灵敏准确定量检测技术产品，误食黄曲霉毒素污染超标的农产品或食品时有发生，致使一些地区肝癌发生率偏高。这不仅对百姓健康和生命安全构成威胁，而且严重影响农产品和食品出口贸易。 　　该所研究团队成功选育出具有完全自主知识产权的黄曲霉毒素系列杂交瘤细胞株，研制出多个高亲和力抗体，是目前国内外报道的灵敏度最高、特异性最强的黄曲霉毒素通用抗体和分量抗体。该团队还研制出黄曲霉毒素系列配套试纸条、试剂盒、黄曲霉毒素标准品替代物、免疫亲和微柱，开发出黄曲霉毒素免疫亲和荧光速测仪、黄曲霉毒素单光谱成像速测仪和黄曲霉毒素流动滞后免疫时间分辨荧光速测仪，如牛奶等单个样品从取样到结果打印最快9分钟即可完成，破解了黄曲霉毒素高灵敏快速准确定量检测技术难题。 　　据介绍，这些技术成果和产品已应用于农产品(花生、玉米、稻米等)、食用油(花生油、玉米油等)、调味品(花生酱、酱油、醋等)、乳制品(鲜牛奶、奶粉等)和饲料(饼粕等)等5大类65种农产品和食品检测中，并被德国慕尼黑理工大学等一些国内外权威科研机构应用，为农产品和食品黄曲霉毒素检测、监管、评估与防控提供了有力的技术支撑，取得了显著社会经济效益。

QC实验室中的不合格（OOS）调查有多重要？简短的回答是：非常重要。对于内毒素检测，OOS是指超过产品内毒素限值的结果，并可能在两个方面成本很高：进行调查所花费的时间和资源在OOS调查中确定并确认根本原因之前暂停产品生产着手调查OOS结果的根本原因，往往需要实验室利用深入的调查工具来排除其他潜在的原因，并就后续工作做出科学决策。OOS结果的一个例子是，一个产品的鲎试剂细菌内毒素检测限值第1阶段：实验室调查第2阶段：全面的OOS调查调查应从实验室开始，如果没有发现明显的实验室误差，则应对所有其他相关部门进行调查。OOS的第1阶段（实验室调查）应包括对实验室数据准确性的初步评估，包括审查分析人员的培训记录、检测表格、试剂到期、使用的设备和检测控制。如有可能，应在检测溶液制备之前就开始，如样品稀释的误差就被排除了1。这样，关于实验室误差或仪器故障的假设就可以使用相同的检测溶液制备来测试。如果此初步评估表明，在得出数据时所用的分析方法没有因果关系的错误，则应进行全面的OOS调查（第2阶段）1。分析人员确定OOS结果后，应立即记录在案，并应识别任何潜在的分析人员错误。测试分析人员的职责首先是获得准确的内毒素结果。训练有素的分析人员应该意识到检测过程中可能出现的潜在问题。分析人员还应在排除检测溶液制备和通知实验室主管评估OOS结果之前，确保数据完整和准确。一旦确定，主管对OOS的评估必须是客观且及时的。OOS评估应包括：确认分析人员的知识原始数据审查计算过程的确认确认试剂、标准品和仪器的正确使用以上所有内容的正式文件当存在明显的实验室误差证据时，实验室检测结果应无效1。如果不存在明显的实验室误差并且确认了OOS结果，则必须在公司程序中的适当或指定时间范围内向质量保证部门报告。一旦收到通知，应该与不同部门进行跨职能通报，以确定严重程度并进行全面调查。调查描述可以包括假设、要检测的样品、重复次数以及如何记录。区分OOS结果和无效结果至关重要。无效检测是指系统适用性参数未按预期运行，因此可能会影响检测结果的准确性。这样的系统适用性参数可以是：阴性对照（标准曲线范围内的阳性凝胶或反应时间）阳性产品对照PPCs（50%–200% 以外）线性标准曲线的生成%CV（超出设定限值，如适用）不符合上述有效性标准的无效化验，将导致从最初的样品开始，重新检测。已经确认的无效结果仍需要进行调查，但仅仅是实验室调查，不是OOS。如果重新测试，证明与第一次测试结果相同，例如加标回收率在50%–200%范围之外，将需要进一步的调查。第2阶段的目标是在第1阶段的初始评估未确定实验室误差导致OOS的情况下，确定产品不合格的原因。该阶段可能包括生产过程审查和/或额外的实验室工作。此类调查的目标应该是确定OOS结果的根本原因并采取适当的纠正和预防措施（CAPA，Corrective Action & Preventive Action）1。在此阶段重新检测样品很重要，因为这可以确定是否真的存在OOS结果，或者过程中是否发生了某种类型的妥协。重新检测应由未执行初始检测的分析人员对同一样品的相等份量进行。在公司的标准操作程序（SOP）中应规定在调查启动和结束之前的重新检测次数。这将有助于避免检测合规，即对样品进行一定次数的检测，直到收到通过结果并且忽略OOS。如果重新检测确认了OOS结果，则有必要进一步深入生产过程和批次审查，以找到根本原因。这可能包括，例如，检查原材料或记录该特定批次的成分变化。建议使用鱼骨图（Ishikawa）或“5 Why分析法”等根本原因分析工具之一来确定OOS结果的根本原因。QC实验室的控制状态非常重要。可以使用已建立的质量管理系统来控制过程，如培训、SOP和文件、调查、CAPA和过程监控。所有实验室都会生成和收集数据，如内毒素结果，这些数据可用于减少可变性并提高内毒素流程的有效性，例如在生产过程中通过下游和纯化工作来成功去除内毒素。调查对于分析和改进流程非常重要。使用根本原因分析工具（如鱼骨图或“5 Why分析法”）可以帮助实验室明确根本原因并确定OOS结果的严重程度。一旦对真正的OOS进行彻底调查并确认或拒绝，质量控制和质量保证团队就可以决定后续工作——拒绝或接受并放行。总之，关键是要记住QC检测的主要目标是患者的安全。内毒素是一项关键的放行检测，因此所有最终放行的药品都必须通过实验室规定的内毒素限值。如果产品未能通过内毒素限值检测，则必须在产品放行前对结果进行彻底调查，以实现患者安全的目标。Hayden Skalski｜PROFILEHayden是Sievers分析仪生命科学产品应用专家，专门从事细菌内毒素检测。Hayden在制药行业和质量控制微生物学方面拥有超过8年的经验，并就围绕内毒素检测的众多主题发表过演讲。此前，Hayden曾在Charles River Laboratories、Regeneron和Novartis任职，负责验证和执行内毒素检测的方法开发方案，提供客户支持、故障排除和支持大批量产品检测。Hayden拥有纽约州立大学奥尔巴尼分校的生物学学士学位。参考文献U.S. Food and Drug Administration. May 2022. Guidance for Industry: Investigating Out-of-Specification (OOS) Test Results for Pharmaceutical Production. Silver Spring, MD: U.S. Department of Health and Human Services.◆ ◆ ◆联系我们，了解更多！

呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，属于单端孢霉烯族化合物，主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外，头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种，是一类强有力免疫抑制剂，所引起典型症状是采食量降低，所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素是其中最重要一种毒素，主要来自镰刀菌属，尤其是禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌由于它可以引起猪的呕吐，故又名呕吐毒素。呕吐毒素被列为3类致癌物。它们具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质，因此，对人类及动物的健康构成了威胁，特别是对免疫功能具有明显的影响。DON广泛存在于全球，主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物，也污染粮食制品，当人摄入了被DON污染的食物后，会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时损害造血系统造成死亡。由于中国传统饮食习惯中粮谷比例大大高于西方，使得呕吐毒素的危害更为突出。谷物及饲料中DON的含量有严格的限量标准。我国谷物中DON的限量标准为1.0 mg/kg。我国用于检测呕吐毒素的液相色谱法，常常会利用呕吐毒素（脱氧雪腐镰刀菌烯醇）免疫亲和柱，免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇，从而对脱氧雪腐镰刀菌烯醇起到非常针对性的纯化作用。利用抗原抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、过滤后，缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯酵免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质，再用甲醇洗脱，然后用于检测。过净化柱后可直接用于液相脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的检测，可提高检测方法的准确度，达到快速测定的目的。参考标准《GB 5009.111-2016 食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定》 ，月旭呕吐毒素(脱氧雪腐镰刀菌烯醇) DON免疫亲和柱完成符合标准要求。以面粉为样品，采用月旭呕吐毒素(脱氧雪腐镰刀菌烯醇) DON免疫亲和柱净化，然后进行检测。净化步骤回温：将免疫亲和柱从低温条件下取出后，恢复至室温，将柱内液体放出；上样：待净化液全部上样，弃去；淋洗：5mL磷酸盐缓冲液，5mL水，弃去，抽干柱子；洗脱：加入2mL甲醇洗脱，抽干柱子；浓缩：将洗脱液置于 50℃水浴中氮吹至干，用20%甲醇水定容至1mL，用0.22μm滤膜过滤，上机测定。色谱条件色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18 4.6×150mm，5μm；流动相：水：甲醇(80:20)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；波长：218nm 。回收率结果如下图：图一：面粉样品空白图谱

近日，著名打假人士方舟子，质疑普洱茶中含有黄曲霉毒素，呕吐毒素等致癌物质，引起茶界一片哗然，各界人士及网友们众说纷纭，同时方舟子也列举出广州疾控和南昌大学硕士论文对普洱茶相关毒素的检测结果，所采集样品均呈阳性。面对如此情况，聚光科技下属子公司上海安谱实验科技股份有限公司（以下简称“安谱实验”）立即安排实验，采用液相色谱法对普洱茶中的黄曲霉毒素，呕吐毒素进行了检测，用详实的数据、谱图来探究普洱茶中所含毒素的真实情况。 样品1：在茶叶商店里选择了存放长达9年的生茶样品2：经过发酵技术发酵过的熟茶一、普洱茶中黄曲霉毒素的检测（参考GB 5009.22-2016 食品中黄曲霉毒素的检测 第三法 高效液相色谱-柱后衍生法）　　样品前处理　　准确称取2 g 粉碎的茶叶试样，置于50 mL 离心管中，加入10 mL( 乙腈+ 水) 溶液（84+16），涡旋3min，超声15min，4000rpm离心8min。取4mL 上清液，加12mL PBS 缓冲溶液稀释，混匀，待净化　　加标溶液：CDGG-116870-03 (o2si 品牌) 黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 混标 1:0.3:1:0.3ppm 25uL　　小柱操作　　黄曲霉毒素免疫亲和柱(SBHL-20-0383,Beacon 品牌) 恢复室温后，让柱内缓冲液流完。　　上样：控制流速1d/s　　淋洗：5mL PBS 淋洗，5mL 水淋洗，淋洗完后抽干，　　洗脱：用2mL 甲醇洗脱，控制流速1d/s 50℃氮吹到近干，用流动相定容到1mL，过滤，待进样。　　色谱条件　　a) 流动相：A：水,B：甲醇/ 乙腈(16+16)　　b) 色谱柱：CNW Athena C18-WP 液相色谱柱 (4.6*150mm,5um)　　c) 流速：1.0mL/min　　d) 柱温：40℃　　e) 进样体积：20μL　　f) 检测波长：激发波长360nm 发射波长440nm二、普洱茶中呕吐毒素的检测（参考GB 5009.111-2016 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定 第二法 免疫亲和层析净化高效液相色谱法）　　样品前处理　　取2g 茶叶，加入20mL 去离子水，涡旋1min，超声20min，4000rpm 离心8min，取上清液2mL 过柱。　　加标溶液: CDGG-014445-06 (o2si 品牌) 脱氧雪腐镰刀菌烯醇( 呕吐毒素) 标准品 200 ug/mL 于甲醇加标50uL　　小柱操作　　呕吐毒素免疫亲和柱（SBHL-20-0347,Beacon 品牌）恢复室温后，让柱内缓冲液流完　　上样：2mL 上样液加到小柱上面，控制流速1d/s　　淋洗：5mL PBS 溶液 洗涤，5mL 水洗涤　　洗脱：2ml 甲醇洗脱，控制流速1d/s　　甲醇氮吹近干后，加流动相定容到1mL。涡旋, 过滤, 待上机检测。　　色谱条件　　a) 流动相: 甲醇：水（2:8）　　b) 色谱柱: CNW Athena C18-WP 液相色谱柱(4.6*150mm,5um)　　c) 流速:1.0mL/min　　d) 柱温:35℃　　e) 进样体积:20μL　　f) 检测波长:218nm三、实验谱图图1：黄曲霉毒素10ppb 标准品谱图（黄曲霉检测）图2：生茶基质谱图（黄曲霉检测）图3：熟茶基质谱图（黄曲霉检测） 图4：生茶基质加标10ppb 谱图（黄曲霉检测）图5：熟茶基质加标10ppb 谱图（黄曲霉检测） 图6：呕吐毒素1ppm 标准品谱图（呕吐毒素检测）图7：生茶基质谱图（呕吐毒素检测）图8：熟茶基质谱图（呕吐毒素检测）图9：熟茶基质加标1ppm 谱图（呕吐毒素检测）四、实验数据　　黄曲霉毒素目标物生茶基质熟茶基质生茶加标10ppb熟茶加标10ppb生茶加标回收率%熟茶加标回收率%黄曲霉 G2 （ng/mL）003.95.939%59%黄曲霉G1 （ng/mL）0076.970%69%黄曲霉B2 （ng/mL）0088.380%83%黄曲霉B1（ng/mL）008.78.187%81%　　呕吐毒素目标物生茶基质熟茶基质熟茶加标1ppm熟茶加标回收率 %呕吐毒素000.92ppm91.2五、分析讨论　　1、从数据上我们可以看出，市面上购买的普洱茶生茶和熟茶均没有检测到黄曲霉毒素和呕吐毒素。但是限于我们样品来源有限，从我们检测的样品来看，正常渠道购买的普洱茶一般都没有问题，大家可以放心饮用。　　2、黄曲霉毒素B2、B1 的加标回收率可以达到80% 以上，但是G2、G1 平均只有40-70%，不是很稳定，后来经过排查，发现G2、G1极易降解，隔一段时间进样，峰面积就会降低很多，相对来说，B2，B1的回收率比较稳定，另外食品中最容易污染，关注度最高的也是黄曲霉毒素B1，并且是毒性最强，致癌性最强的毒素。呕吐毒素的回收率非常稳定，达到90%以上。　　3、总体来说，免疫亲和层析高效液相色谱-柱后光化学衍生法检测普洱茶中黄曲霉毒素，免疫亲和层析净化高效液相色谱法检测呕吐毒素是非常可靠的方法，目前国家对黄曲霉B1的限值，玉米制品为20ppb，稻谷及其制品10ppb，小麦及其制品5ppb，呕吐毒素在玉米小麦中的限值为1ppm，根据国标方法，黄曲霉毒素的定量限达0.5ppb，呕吐毒素的定量限可以达到0.2ppm，均低于国家的限值。六、黄曲霉毒素和呕吐毒素检测实验耗材包货号名称规格品牌SBHL-20-0383美国Beacon黄曲霉毒素总量免疫亲和柱（B1，B2，G1，G2)3mL，20支/盒BeaconSBHL-20-0347美国Beacon呕吐毒素免疫亲和柱3mL，20支/盒BeaconCDGG-116870-17-1ml黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2混标（GB/T 5009.22-2016）标准品1 mg/L于乙腈， 1 ml于Certan VialO2SICDGG-116870-03黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2混标（GB/T 5009.22-2016）方法2方法3 标准品不同浓度于乙腈， 1 ml于Certan VialO2SICDGG-014445-06脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素) 标准品200 ug/mL于甲醇，1mLO2SILAEQ-461572Athena C18-WP 液相色谱柱4.6*150mm，5umCNWSBHL-YQ-01凯斯科光化学衍生器PCS凯斯科SBEQ-CR0002SPE 小柱连接件【1，3，6mL】，PP 材质12 个/ 包CNWSBEQ-CR1012CNW 12 位固相萃取真空装置12 位CNWSCAA-114 亲水PTFE针式滤器 13mm*0.22um， 100 只/ 罐ANPELSCAA-113亲水PTFE针式滤器 13mm*0.45um， 100 只/ 罐ANPELQBAA-0020122ml 无针注射器100 只/ 包ANPELABEQ-3300002-25CNW 50ml 尖底离心管25/袋CNWADEQ-26001113ml 塑料巴斯德吸管、160mm、未灭菌500/ 箱CNWVAAP-32009E-1232A-100CNW 9mm 透明螺纹口自动进样瓶( 带刻度、书写)2ml，12*32mm， 9mm，100 只/ 盒CNWVEAP-5394-09FRB-100兼容Agilent 的9mm 蓝色开孔拧盖、含PTFE/ 橡胶隔垫，Bond100/ 袋CNWCAEQ-4-003306-4000HPLC 级别通用型乙腈( 也适用于生化，无水分析领域)4LCNWCAEQ-4-003302-4000HPLC级甲醇，梯度级4LCNWEOFO-945605Talboys 基本型旋涡混合器，230V/150W外形尺寸： 20.3×10.2×14.0cm， 包装重量：5.3kgTalboysEDAA-2101TH超声波清洗器，100W ( 带加热功能） 槽内尺寸: 300*150*100mm，4LANPEL