想分离500-3000的多肽混合物，不需要知道具体成分，只想知道分子量分布，选择凝胶排阻色谱，因分离分子量小，不知道选择哪家的色谱柱，有没有做过类似实验的推荐一下，多谢！
请问凝胶色谱与排阻色谱是什么关系？请赐教，谢谢！现在凝胶色谱主要应用于哪些行业呀？有些什么具体要求？请指教！谭怡光tanyiguang@126.com
我想把地下水和沉积物中有机物按分子量大小分开，可以选用高效液相色谱制备柱的哪一种呢？另外，排阻色谱柱可以与HPLC制备柱相连吗？他们的具体功能都是什么啊？因为我是初学者，对色谱不太了解，有人能帮帮忙吗？谢谢啦~
柱温会影响体积排阻色谱分离吗？一般的文献是25℃或室温
先一起回顾一下什么是体积排阻色谱。原理： 以多孔凝胶（如葡萄糖，琼脂糖，硅胶，聚丙烯酰胺等）作固定相，依据样品分子量大小达到分离目的。大分子不进入凝胶孔洞，沿多孔凝胶胶粒间隙流出，先被洗脱；小分子进入大部分凝胶孔洞，在柱中被强滞留，后被洗脱。根据样品性质分类：凝胶过滤（GFC）—用于分析水溶性样品，如多肽、蛋白、生物酶、寡聚核苷酸、多聚核 苷酸、多糖。 凝胶渗透（GPC）—用于分析脂溶性样品，如测定高聚物的分子量。不知各位专家能否讲解一些WELCH MATERIALS 柱子在这方面的应用。给大家一个学习的机会。
我现在要做单硬脂酸甘油酯的含量测定，欧洲药典要求用分子排租色谱法来做。以下为柱子要求：柱长:0.6m，直径7mm，固定相：苯乙烯-二乙烯基苯共聚物（5微米），孔径10nm。流动相：四氢呋喃流速：1ml/min检测：示差折射仪进样量：40微升打算送检，但安徽药检所做不了，请问江苏药检所/上海药检所能做吗？谢谢
体积排阻色谱分离蛋白质，分子量范围100万~1万，其中有分子量47000的组份，要分析分子量68000的杂蛋白含量，采用TSK4000SW,长度为60厘米的色谱柱，分离分子量68000与47000的2个组份，分离度在0.9~1.0左右，分离度达不到1.5，有什么方法解决？
[color=#444444][/color][table=100%][tr][td]我用安捷伦体积排阻色谱GF450和GF250联用柱子，最近发现样品进样后不出峰，条件都未变过（流动相、柱温、流速、检测波长都不变）。然后用BSA进样，发现出峰都很正常，我的样品分子量大概是BSA的两倍。不接柱子，直接进样，发现出峰，峰面积如10000，但是接柱子后出峰只有100（原本的出峰位置没有峰，这个100的是原来的杂质峰），两根柱子分开进样，情况同联用。急求大神解析这是什么情况！谢谢！[/td][/tr][/table][color=#444444][/color][color=#444444][/color]
专家好！请问离子排阻色谱柱用什么溶剂填充好？
[color=#444444]本人使用的是TSK PWxL 2500和TSK PW xL5000串联的尺寸排阻色谱柱，聚丙乙烯磺酸钠（PSS，西格玛）作为分子量标准样品，发现分子量为210 Da的峰出峰时间是101min（流速=0.3，磷酸盐缓冲流动相，离子强度0.1 M），邻苯二甲酸氢钾（PHP，阿拉丁，分子量204.22）出峰时间在60min，硝酸根（Nitrate，西格玛，分子量62）出峰时间65min，尿素（Urea，西格玛，分子量60）出峰时间75min。[/color][color=#444444]这些信息困扰我很久，让我觉得是不是柱子填料和各个物质除了排阻还有有其余的作用。有大神遇到过这种情况吗？或者说，各位在使用凝胶色谱分析天然有机质这一类物质的时候，都用的什么柱子？谢谢啦！[/color]
国内哪里有做体积排阻凝胶色谱的？要多少钱一个样品？偶刚涉足此领域，非常感谢各位帮忙。谢谢了
【网络会议】：安捷伦科技体积排阻色谱柱在生物制药分析中的应用【讲座时间】：2015年05月07日 10:00【主讲人】：米建秋 博士（安捷伦消耗品及色谱柱资深应用工程师，毕业于北京大学化学系，在安捷伦科技工作多年，有着丰富的色谱、质谱经验。）【会议介绍】 近年来随着生物制药行业在国内蓬勃发展，对相应的产品表征方法成为行业热点。 安捷伦科技也在生物制药行业不断开发新的产品及应用，为客户提供完备的解决方案。本次网络讲堂将会介绍安捷伦科技体积排阻色谱在生物制药分析中的应用。 本讲介绍：SEC的一般性原则、色谱柱选择要点、决定最佳的流动相条件、色谱柱的保存及清洗、做抗体分析、PBS等药物分析时疑点难点解决方法。 -------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2015年05月07日 09:004、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/14355、报名及参会咨询：QQ群—379196738
利用专利的表面化学修饰技术，Sepax Nanofilm SEC固定相由均一的、亲水的、中性的聚合物薄膜化学键合在高纯度、高强度、稳定性能好的硅胶上而构成。Sepax Nanofilm SEC体积排阻色谱柱具有创新的和独特的设计，从而保证对生物分子分离具有最高的分离度和最大的回收率，如蛋白、核苷、多肽及其它。这些聚合物薄膜的厚度仅为几个纳米。Sepax专利表面技术使化学键合的薄膜完全可控，从而保证柱与柱之间的重现性非常可靠。化学键合和高密度填充的聚合物薄膜的特性使Sepax NanofilmSEC固定相异常稳定。均一的聚合物薄膜能提高分离效率。Sepax Nanofilm SEC填料窄粒径分布的球形硅胶颗粒具有150Å 、250Å 、500Å 的标准孔径，比表面积分别为100 m2/g，45 m2/g和 23m2/g。Sepax Nanofilm SEC柱用独特的填装技术，以达到均匀、稳定的填充密度，从而获得最高的柱效。Sepax Nanofilm SEC柱特别适用于缓冲溶液条件下分离生物分子。更多产品信息请与我们联系，深圳赛分销售与技术中************************谭先生[email=sepax@126.com]***********************[/email]。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=9172]体积排阻/凝胶柱[/url]
1、我单位需要采购一台大容量高速冷冻离心机，能支持50mL以上离心管高速冷冻离心，据我考查好像主要有“西格玛”和“贝克曼”，哪个品牌好用？或者有没有推荐型号？2、我单位因为要处理肉制品或油脂类等含大分子杂质的样品，需采购一台GPC凝胶净化排阻色谱仪，现咨询有莱伯泰科，瑞科，LC-tech，J2等品牌，请问用哪个品牌的仪器好用，或有没有推荐型号？感谢回复！
分子排阻高效液相色谱法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白纯度_王婉如
【网络会议】：安捷伦科技体积排阻色谱柱在生物制药分析中的应用【讲座时间】：2015年05月07日 10:00【主讲人】：米建秋 博士（安捷伦消耗品及色谱柱资深应用工程师，毕业于北京大学化学系，在安捷伦科技工作多年，有着丰富的色谱、质谱经验。）【会议介绍】 近年来随着生物制药行业在国内蓬勃发展，对相应的产品表征方法成为行业热点。 安捷伦科技也在生物制药行业不断开发新的产品及应用，为客户提供完备的解决方案。本次网络讲堂将会介绍安捷伦科技体积排阻色谱在生物制药分析中的应用。 本讲介绍：SEC的一般性原则、色谱柱选择要点、决定最佳的流动相条件、色谱柱的保存及清洗、做抗体分析、PBS等药物分析时疑点难点解决方法。 -------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2015年05月07日 09:004、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/14355、报名及参会咨询：QQ群—379196738
[b][font='Times New Roman'][font=宋体]问题描述：利血平分子量[/font]608[font=宋体]，为什么在排阻色谱实验过程中，实验校正曲线上相对应的[/font][/font][font=宋体]是[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]分子量[/font]400[font=宋体]多的洗脱体积？[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]解答：[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]排阻色谱不仅跟目标物的分子量大小有关，跟目标物的空间结构也有很大的关系，空间结构越紧密，相比之下洗脱顺序就越靠后[/font][/font][font=宋体]。[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）虽然[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]利血平的分子量有[/font]608[font=宋体]，[/font][/font][font=宋体]但是由于[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]空间结构紧密，[/font][/font][font=宋体]因此[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在校正曲线上其对应的是分子量[/font]400[font=宋体]多的洗脱体积。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img=,256,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103172135399756_5075_3389662_3.png!w256x256.jpg[/img][/font][/font]
【网络会议】：安捷伦科技体积排阻色谱柱在生物制药分析中的应用【讲座时间】：2015年05月07日 10:00【主讲人】：米建秋 博士（安捷伦消耗品及色谱柱资深应用工程师，毕业于北京大学化学系，在安捷伦科技工作多年，有着丰富的色谱、质谱经验。）【会议介绍】 近年来随着生物制药行业在国内蓬勃发展，对相应的产品表征方法成为行业热点。 安捷伦科技也在生物制药行业不断开发新的产品及应用，为客户提供完备的解决方案。本次网络讲堂将会介绍安捷伦科技体积排阻色谱在生物制药分析中的应用。 本讲介绍：SEC的一般性原则、色谱柱选择要点、决定最佳的流动相条件、色谱柱的保存及清洗、做抗体分析、PBS等药物分析时疑点难点解决方法。 -------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2015年05月07日 09:004、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/14355、报名及参会咨询：QQ群—379196738
[align=center][b][font=Arial][font=宋体]天然多糖研究体积排阻色谱柱选择初探[/font][/font][/b][/align][font=Arial][font=宋体]多糖是最丰富的生物聚合物，已被发现参与许多生物过程，例如细胞间通讯、胚胎发育、细菌和[/font]/[font=宋体]或病毒感染以及体液和细胞免疫。因此，多糖与核苷酸、蛋白质、脂质一起构成了生命科学中最重要的四大生物大分子。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]尽管多糖已在各种工业应用中使用了几十年，例如[/font] [font=宋体]药物、生物材料、食品和营养以及生物燃料，对多糖在生命科学中的重要性的日益了解和深入研究正在推动多糖用于新型（生物分子）应用的开发。不断有来自植物（膳食纤维、草药和木本植物）、藻类和地衣的生物活性多糖，以及来自动物的其他生物活性多糖（例如肝素、硫酸软骨素和透明质酸）被报道。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]天然多糖发现的主要方法为提取纯化得到相对较纯的多糖组分，从而进行结构表征和活性评价。具体而言，通过水提醇沉得到粗多糖，再通过弱阴离子交换色谱法（[/font]DEAE[font=宋体]）进行纯化，得到不同盐梯度洗脱的组分。对于这些组分，需要通过体积排阻色谱法（[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]）分析判定，是否需要进一步纯化；得到纯品之后，需要测定多糖组分的分子量；研究多糖在体内的降解规律，也需要[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]判定多糖分子量的变化。因此，多糖研究实验室往往需要多支[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]色谱柱，以适应不同的用途。研究人员热切期望有一只首选[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]色谱柱，可以快速开展研究。本文以小秦艽多糖的研究为例，说明[/font][font=Arial]BioCore SEC-1000[/font][font=宋体]作为多糖研究的首选色谱柱，在多个用途中的效果。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]小秦艽，学名为达乌里秦艽[/font]([/font][i][font=Arial]Gentiana dahurica Fisch[/font][/i][font=Arial])[font=宋体]，为龙胆科植物龙胆属多年生草本植物，始载于《神农本草经》，列为中品，具有祛风湿、清湿热、止痹痛、退虚热的功效。小秦艽多糖经过提取和除杂后，通过中压制备[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]（[/font][font=Arial]DEAE[/font][font=宋体]填料）填料纯化，得到四个组份。在后续多糖组份纯度判定和降解规律研究中，使用了[/font][font=Arial]BioCore SEC-1000[/font][font=宋体]色谱柱。[/font][/font][b][font=Arial][font=宋体]一、实验条件与方法[/font][/font][font=Arial]1.1. [font=宋体]仪器及色谱条件[/font][/font][/b][font=Arial][font=宋体]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]：安捷伦[/font] 1260 infinity II[font=宋体]，配有[/font][font=Arial]Wyatt[/font][font=宋体]，[/font][font=Arial]Optilab T-REX[/font][font=宋体]示差折光检测器（[/font][font=Arial]RI[/font][font=宋体]）[/font][font=Arial] [/font][font=宋体]岛津[/font][font=Arial]LC-2030C[/font][font=宋体]，配有岛津[/font][font=Arial]RID-20A1.2[/font][font=宋体]示差折光检测器（[/font][font=Arial]RI[/font][font=宋体]）；大连依利特有限公司 [/font][font=Arial]Elite 1100 [/font][font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]，配有岛津[/font][font=Arial]RF-20AXS[/font][font=宋体]荧光检测器（[/font][font=Arial]FLD[/font][font=宋体]）。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]色谱柱：[/font]T (13μm[font=宋体]，[/font][font=Arial]7.8×300mm)[/font][font=宋体]或[/font][font=Arial]Biocore SEC-1000[/font][font=宋体]（[/font][font=Arial]5μm, 7.8×300mm[/font][font=宋体]）；[/font][/font][font=Arial][font=宋体]流动相：[/font]50 mM NH[/font][sub][font=Arial]4[/font][/sub][font=Arial]OAc (80%)+Methanol (20%)[font=宋体]；[/font][/font][font=Arial][font=宋体]流速：[/font]0.5 mL/min[font=宋体]；[/font][/font][font=Arial][font=宋体]柱温：[/font]25[/font][font=宋体]℃[/font][font=Arial][font=宋体]；[/font][/font][font=Arial][font=宋体]进样量：[/font]20 μL[font=宋体]；[/font][/font][font=Arial][font=宋体]采集时间：[/font]30 min[font=宋体]。[/font][/font][b][font=Arial]1.2 [font=宋体]样品处理[/font][/font][/b][font=Arial]1[font=宋体]）秦艽多糖组份纯度分析：称取秦艽多糖[/font][font=Arial]GDP-3[/font][font=宋体]（即样品[/font][font=Arial]0.3 M[/font][font=宋体]）约[/font][font=Arial]5 mg[/font][font=宋体]，溶于流动相，配制成[/font][font=Arial]10 mg/mL[/font][font=宋体]溶液。上样前用[/font][font=Arial]0.22 μm[/font][font=宋体]滤膜过滤。[/font][/font][font=Arial]2[font=宋体]）多糖[/font][font=Arial]GDP-2[/font][font=宋体]体外稳定性的考察： [/font][font=Arial]GDP-2[/font][font=宋体]的经 [/font][font=Arial]FITC[/font][font=宋体]荧光标记（产物为[/font][font=Arial]FGDP-2[/font][font=宋体]），进行体外模拟消化。模拟胃液由胃蛋白酶[/font][font=Arial](10 g/L)[/font][font=宋体]和稀[/font][font=Arial]HCl (16.4 mL/L)[/font][font=宋体]组成，调节[/font][font=Arial]pH[/font][font=宋体]至[/font][font=Arial]1.3[/font][font=宋体]。将[/font][font=Arial]FGDP-2 (25 mg/mL)[/font][font=宋体]与各人工胃液和人工肠液[/font][font=Arial]10 mL[/font][font=宋体]混合，[/font][font=Arial]37[/font][/font][font=宋体]℃[/font][font=Arial][font=宋体]孵育。分别于[/font]0 h[font=宋体]、[/font][font=Arial]4 h[/font][font=宋体]、[/font][font=Arial]6 h[/font][font=宋体]、[/font][font=Arial]12 h[/font][font=宋体]取孵育液各[/font][font=Arial]500 μL[/font][font=宋体]作为[/font][font=Arial]HPLC-FLD[/font][font=宋体]测定样品。用[/font][font=Arial]0.2 M NaOH[/font][font=宋体]和[/font][font=Arial]TCA (20 % , w/w)[/font][font=宋体]终止反应。[/font][/font][b][font=Arial][font=宋体]二、结果与讨论[/font][/font][/b][font=Arial][font=宋体]多糖纯度及分子量的测定是多糖结构解析及构效关系研究的关键步骤。小秦艽多糖的纯化色谱洗脱曲线如图[/font]1[font=宋体]所示，一共得到四个组份。[/font][/font][align=center][img=,348,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081451227890_6619_3237657_3.jpg!w436x207.jpg[/img][/align][align=center][font=Arial][font=宋体]图[/font]1 [font=宋体]小秦艽多糖的[/font][font=Arial]DEAE[/font][font=宋体]纯化色谱图（硫酸苯酚法重构）[/font][/font][/align][font=Arial][font=宋体]组份经透析、冻干后，首先需要确定它的纯度。如果组份不纯，则后续的核磁分析将是徒劳无功的。我们实验室前期配备了三支不同孔径的[/font]SEC[font=宋体]色谱柱，经分析组份[/font][font=Arial]1[/font][font=宋体]和[/font][font=Arial]2[/font][font=宋体]较纯，而[/font][font=Arial]3[/font][font=宋体]和[/font][font=Arial]4[/font][font=宋体]不纯。如果不纯，则需要通过凝剂渗透色谱（[/font][font=Arial]GPC[/font][font=宋体]）进一步纯化。[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]分析可以确定组份的数目，以在[/font][font=Arial]GPC[/font][font=宋体]纯化时收集馏分。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]在用实验室已有[/font]SEC[font=宋体]色谱柱分析时（图[/font][font=Arial]2[/font][font=宋体]上），色谱峰数目不明确。该色谱柱孔径为[/font][font=Arial]450?[/font][font=宋体]，粒径为[/font][font=Arial]13 μm[/font][font=宋体]，分离度不理想，可能分子量超出其适用范围。于是改用孔径更大且粒径为[/font][font=Arial]5 μm[/font][font=宋体]的[/font][font=Arial]Biocore SEC-1000[/font][font=宋体]柱进行试验（图[/font][font=Arial]2[/font][font=宋体]下），结果表明分离效果好，明显识别为三个色谱峰。为该组份的后续纯化以及多糖稳定性的考察提供基础。[/font][/font][align=center][img=,264,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081451353696_6101_3237657_3.jpg!w331x346.jpg[/img][/align][align=center][font=Arial][font=宋体]图[/font]2 [font=宋体]秦艽多糖分子量的分析色谱图[/font][/font][/align][align=center][font=Arial][font=宋体]（上图，实验室已有色谱柱[/font]T[font=宋体]；下图，纳谱[/font][font=Arial]Biocore SEC-1000[/font][font=宋体]）[/font][/font][/align][font=Arial][font=宋体]此外，该色谱柱，分离中等分子量多糖标准品（[/font]36 kDa ~ 131 kDa[font=宋体]）时，也呈现了较好的线性关系。因此，我们认为该色谱柱具有分子量适用范围宽的优点，可以作为多糖分析中的通用[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]色谱柱。[/font][/font][font=Arial][font=宋体]为了确定秦艽多糖的体外消化模式，选取了经测量相对较纯的秦艽多糖[/font]GDP-2[font=宋体]组分进行荧光标记，建立了[/font][font=Arial]HPLC - FLD[/font][font=宋体]分析方法，进行体外稳定性考察。通过上述实验对[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]柱的比较分析，选取了分离效果较好的[/font][font=Arial]Biocore SEC-1000[/font][font=宋体]进行该实验。[/font][font=Arial]FGDP-2[/font][font=宋体]在模拟胃液中的分子量随时间变化色谱图如图[/font][font=Arial]3[/font][font=宋体]所示，发现色谱峰的相对峰高向小分子偏移，说明[/font][font=Arial]FGDP-2[/font][font=宋体]在消化[/font][font=Arial]4 h[/font][font=宋体]后发生部分降解。可能是由于多糖对酶和强酸敏感，导致多糖的糖苷键断裂。然而，观察到整个消化系统中没有单糖出现，胃和肠道不会造成多糖结构的过度损失。[/font][/font][align=center][img=,288,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081451479308_4610_3237657_3.jpg!w361x212.jpg[/img][/align][align=center][font=Arial][font=宋体]图[/font]3[font=宋体]模拟胃液消化过程中[/font][font=Arial]FGDP-2[/font][font=宋体]的[/font][font=Arial]HPLC - FLD[/font][font=宋体]表征[/font][/font][/align][font=Arial][font=宋体]三、小结[/font][/font][font=Arial][font=宋体]多糖研究人员往往面对不同来源的多糖分子，分子量差异较大，从几万到上百万的多糖分子量。在多糖的研究过程中，需要一支通用的[/font]SEC[font=宋体]色谱柱，进行快速分子量判断，以确定后续研究操作。[/font][font=Arial]BioCore SEC-1000[/font][font=宋体]在我们对小秦艽多糖的分子量纯度分析、分子量测定和体外消化稳定性等研究中，均获得了良好的效果。我们认为，[/font][font=Arial]BioCore SEC-1000[/font][font=宋体]可以作为多糖研究实验室的首选[/font][font=Arial]SEC[/font][font=宋体]色谱柱。[/font][/font][font=Arial] [/font][font=Arial][font=等线]公司：[/font][/font][font=等线][font=等线]苏州大学药学院[/font][/font][font=等线][font=等线]色谱柱信息：[/font][/font][font=Arial]BioCore SEC-1000 5μm, 7.8×300mm[/font][font=宋体] [/font]
高效分子排阻色谱法测定注射用盐酸头孢替安高分子杂质头孢替安是杀菌性头孢菌素类广谱抗生素，头孢替安不但对革兰氏阳性菌有效，而且对革兰氏阴性菌。如流感嗜血杆菌，大肠杆菌、克雷白氏菌、奇异变形杆菌等的作用更强。对肠杆菌，枸橼酸杆菌、吲哚阳性变形杆菌等，也有抗菌作用头孢替安在肺中药物浓度较高，其它脏器和肌肉也有一定的浓度。临床应用于敏感菌所导致的感染，如肺炎、支气管炎、胆道感染、腹膜炎、尿路感染以及手术后或外伤引起的感染和败血症等。其基本结构同已上市的的头孢菌素类抗生素一样，头孢替安也会形成高分子聚合物，也会在临床使用中引发速发型过敏反应。对患者危害极大。已有的注射用盐酸头孢替安国家药品标准未将盐酸头孢替安高分子聚合物列为检定项目，国内的药学研究也未见头孢替安高分子聚合物的研究和报道。从临床用药安全性考虑，根据中国药典2010年版二部附录凝胶色谱原理。采用常用的葡聚糖凝胶G-10检测聚合物时由于头孢替安分子结构自身的原因，头孢替安不能完全缔合，因些我们采用高效分子排阻色谱法，以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填充剂 TOSOH TSKgelG2000SW（7.5*300mm），测定注射用盐酸头孢替安高分子杂质1．仪器与试剂（1）仪器：岛津LC-10ATvp泵 岛津SPD-10AVP紫外可见光多波长检测器 浙大2010色谱数据工作站 色谱柱：TOSOH TSKgelG2000SW（7.5*300mm） （2）试剂： 乙腈 （色谱纯，天津市四友生物医学技术有限公司） 磷酸氢二钠（分析纯，北京化学试剂公司） 磷酸二氢钠（分析纯，北京化学试剂公司）双蒸水 （自制）2 色谱条件色谱柱：TOSOH TSKgelG2000SW（7.5*300mm）流动相：磷酸盐缓冲液（p H:6.8[/color
对于用于蛋白质分析的体积排阻HPLC柱的常用流动相清洗程序：对于弱保留的蛋白质，用0.1 M 磷酸盐缓冲液，pH为3；对于强保留的蛋白质，用100%水至100%乙腈的梯度，运行时间为60分钟。
[font=黑体][size=10.5000pt][font=黑体]我司产品目前对[/font]β[font=Arial]-[/font][font=黑体]内酰胺类抗生素聚合物检测均采用中国药典[/font][/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt]Sephadex G-10[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]的方法，该法分离机理为：由于[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] Sephadex G-10 [/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]的排阻分子量仅为[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] 700d[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]，因此，除部分寡聚物外，内酰胺类抗生素中的高分子杂质在色谱过程中均不保留，即所有的高分子杂质表现为单一的色谱峰。在特定条件下，内酰胺类抗生素由于分子间的氢键、静电相互作用，可以形成缔合物，导致其表观分子量增大，此时在[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] Sephadex G-10 [/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]凝胶色谱系统中和高分子杂质具有相似的色谱行为。利用此原理，在[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] Sephadex G-10 [/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]凝胶色谱系统中，以药物自身为对照品，测定其在特定条件下缔合时的峰响应[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] [/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]再改变色谱条件，测定样品中高分子杂质和药物分离后的峰响应[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] [/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]按外标法计算，即得药品中的高分子杂质相当于药品本身的相对含量。我司在多批样品的测定实践中，遇到了很多问题，比较头疼的是系统适用性经常达不到要求，导致偏差产生，而经根本原因分析为方法本身问题，因此，选用专属性更好，灵敏度更高的方法具有非常大的现实意义。[/size][/font][b][font=黑体][size=10.5pt]【凝胶色谱原理】[/size][/font][/b][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5pt][font=黑体]【体积排阻色谱（[/font]SEC[font=黑体]）分离原理】[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]分子的体积排阻，样品组分和固定相之间原则上不存在相互作用，色谱柱的固定相是具有不同孔径的多孔凝胶，只让临界直径小于凝胶孔开度的分子进入（保留），其孔径大于溶剂分子，所以溶剂分子可以自由地出入。高聚物分子在溶液中呈无规则线团，线团的体积和分子量有一定的线性关系，对不同大小的溶质分子可以渗透到不同大小的凝胶孔内不同的深度，小的溶质分子，大孔小孔都可以进去，甚至可以渗透到很深的孔中。因此小的溶质分子保留时间长，洗脱体积大，而大的溶质分子保留时间短，洗脱体积小。[/size][/font][img=,454,385]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006231213444153_3585_3527267_3.png!w454x385.jpg[/img][font=Arial][size=12pt][color=#ff0000]Sephadex G-10[/color][/size][/font][font=宋体][size=12pt][color=#ff0000]与[/color][/size][/font][font=黑体][size=10.5pt][color=#ff0000]BioCore SEC-150[/color][/size][/font][font=黑体][size=10.5pt][color=#ff0000]参数比较[/color][/size][/font][font=黑体][size=10.5pt][color=#ff0000][img=,448,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006231215301619_5327_3527267_3.png!w448x333.jpg[/img][/color][/size][/font][b][font=黑体][size=10.5pt]液相色谱仪器条件[/size][/font][/b][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]色谱柱[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt][font=黑体]：[/font]BioCore SEC-150,5um 7.8*300mm[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]流动相[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt][font=黑体]：[/font]150 mM [font=黑体]磷酸盐缓冲液（[/font][font=Arial]pH6.8[/font][font=黑体]）：乙腈[/font][font=Arial]=95:5[/font][/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]流速[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]：[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt]0.[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]6[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] mL/min[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]柱温[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]：[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]25[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] ℃[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]进样量[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]：[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]10[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt] μL[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]检测器[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt][font=黑体]：[/font]268nm[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]样品[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]：[/size][/font][font=Arial][size=10.5000pt][font=黑体]青霉素[/font]V[font=黑体]钾[/font][/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt][font=黑体]，流动相配制，浓度为[/font]5mg/ml[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]峰名称：因无聚合物对照品，根据分子筛分离原理，主峰前色谱峰均认定为不同聚合度的聚合物。[/size][/font][b][font=黑体][size=10.5pt]图谱：[/size][/font][/b][img=,690,341]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006231214046941_8802_3527267_3.png!w690x341.jpg[/img][img=,361,233]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006231214049627_1147_3527267_3.png!w361x233.jpg[/img][b][font=黑体][size=10.5pt]心得体验[/size][/font][/b][font=黑体][size=10.5000pt]此次首次采用纳谱分析开发的[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]SEC[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]色谱柱，流动相在色谱柱说明书推荐流动相基础上，加入[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5%[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]乙腈，即得到较好的分离效果，理论板数由[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]G-10[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]柱的几百提高到现在的两万多，主峰与相邻峰分离度达到[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]1.7[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]，达到基线分离，各聚合物峰峰形较好，且彼此分开，与传统[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]G-10[/size][/font][font=黑体][size=10.5000pt]相比，具有无可比拟的优越专属性。纳谱分析品牌值得信赖，以后会继续支持！[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]本文为【纳谱分析第一有奖征文活动】获奖作品，原作者信息：[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]单位：西南药业股份有限公司[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]姓名：李[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]*[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]色[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]谱柱信息：[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]纳谱分析[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#3333ff]BioCore SEC-150,5um 7.8*300mm[/color][/size][/font]
色谱中的流动相会排干吗？排干后会对色谱柱有损坏？
想购置两台空气驱动六通阀自动进样的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，要求软件能准确控制六通阀自动进样，使用较方便（包括软件），数据可重复性较好，不容易出问题，色谱稳定快，基线稳。请问该选择哪种品牌的哪种型号？资金比较充足，想购买国外的品牌。
最近在使用FID色谱的时候，不知道怎么回事氢气堵了。想尽任何办法气路管也没打通，最后直接把堵住的那一段给锯掉了（那一段厂家给挤得很扁很扁的，几乎不通气）。换上之后再试，结果火苗冲到有10cm高。没办法，只能把氢气压力调的很低很低，只有0.01mpa.但感觉氢气火焰还是比较大。 后来打电话咨询厂家，说是因为氢气气阻没了，所以流量太大了。按照厂家的说法，我把气路管有砸扁了一些，但是感觉气阻还是小，氢火焰还是比较大。有不敢砸的太扁了害怕在堵死。大家有没有好的办法，怎样才能够测一下气阻？有没有专用的工具？先行谢过了
哈哈！让我们来看看，哪个品牌最能引起你的购买欲望吧！目前市场上有N多品牌的气相色谱，产品和价格各有不同，在综合考虑老板预算，和可能允许的价格下，你会买一台什么牌子的气相色谱仪呢？看看希望买国产仪器的人多么？我就不信国产仪器除了价格之外真的一点竞争力也没有http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09502.gif=.-==-==-===-=亲，这是回帖格式=-==-==-==想要购买的气相色谱仪品牌（型号）：该仪器可能的配置：为什么会想要采购这个品牌：你的预算情况：这里补充想说什么：==-==-==-==-==-==-==-==-==-==-==-==-==-凡是回帖的有分分可加哦~回帖理由充足的有很高的分加另外，参与过这个调查之后，别忘了顺便看下同系列的另外几个调查哦~~2011年度气相色谱大调查的第一站——你常用的检测器类型http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110811/3460316/第三站： 我们之中的气相色谱品牌占有率？ http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110822/3478097/
刚刚在一篇资料上看的，贴出来大家讨论下 色谱柱中的流动相会排干吗？ 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂使色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。
不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排 干了？色谱柱还能使用吗？
我们实验室和周围实验室都齐刷刷的用的是Kromasil的色谱柱，感觉很好用，我们样品一般都处理的很好，系统也冲的很干净，用完柱子也平衡比较长时间，所以柱子都用了N年还在用。前两天去看了一下广州国际分析测试仪器/生物技术展览会，几乎各个公司都有自己的色谱柱，品牌如此繁多，SHIMADZU、MERCK、Agilent，还有国产的依利特。。。 不知道大家一般选的原则是什么？便宜，还是？ 都用的是什么牌子的？ 希望可以讨论，交流一下~
气相/液相色谱仪制造过程中，其部分零部件需要直流电阻焊机进行焊接，例如气相色谱仪中的三端子连接件，就是需要直流电阻焊机进行焊接。本人和朋友工作之余专门制造逆变中频直流电阻焊机，价格便宜，质量和功能过硬，产品已销往日本和北京航天九院。各位气相/液相色谱仪生产厂商，如果生产过程中需要用到直流电阻焊机，或者有电阻焊接的工作需要外包，可以找我，站内联系，必有回复！
我要推广仪器
下载APP
第19届全国色谱会
Easy选型GC气相色谱仪
质谱技术在组学研究中的应用
科哲超级品牌日-实验室制备色谱研讨会
走近色谱的“心脏”色谱柱新技术新应用
色谱精英招聘专场
气相色谱仪器导购专刊
国产离子色谱三十周年
SFC超临界流体色谱——再次被关注的分离技术
瑞士万通离子色谱25周年庆典专题