拉曼成像

本节微课的目标主要是使大家了解什么是拉曼成像以及拉曼成像可以做什么。具体的课程内容是通过通俗易懂，生动形象的方式向大家介绍拉曼成像的原理，成像方法以及应用示例。观看了本节微课后，希望大家能明白什么情况

拉曼成像问题，样品表面不平整，Z方向波动范围在2um以内，请问做mapping得出的XY方向的成像可靠不？

本人用JY公司的Horiba Aramis做显微拉曼成像分析，期间遇到了一些问题，在此向各位专家和高手请教：我的样品是用粘结剂将颗粒粘结并压缩制得的，因此表面不平整，在做共焦显微拉曼光谱成像时，先聚集到某一颗粒上，然后进行Mapping，请问这种情况下是否检测不到焦平面外样品的信号？但在我的检测中焦平面外的样品也出现了信号，只是强度和频移有变化，请问这种焦平面外样品的拉曼信号频移是否可信？此外，做Mapping时需要的时间比较长，样品经长时间激光照射后其峰位会出现偏移，但现在采用的激光功率已经是能得到拉曼信号的最小功率了（300mW)，这个问题如何解决？谢谢各位！

《自然》审稿人：“该领域迄今质量最高的顶级工作”2013年06月06日 来源： 科技日报 作者： 吴长锋 最新发现与创新 http://www.stdaily.com/stdaily/pic/attachement/jpg/site2/20130606/011370453619890_change_hzp3622_b.jpg 在绿色入射激光的激发下，处于STM纳腔中的卟啉分子受到高度局域且增强的等离激元光的强烈影响，使得分子的振动指纹信息可以通过拉曼散射光进行高分辨成像。 科技日报合肥6月5日电 （记者吴长锋）记者从中国科学技术大学了解到，该校的科学家们在国际上首次实现亚纳米分辨的单分子光学拉曼成像，将具有化学识别能力的空间成像分辨率提高到前所未有的0.5纳米。国际权威学术期刊《自然》杂志于6月6日在线发表了这项成果。世界著名纳米光子学专家Atkin教授和Raschke教授在同期杂志的《新闻与观点》栏目以《光学光谱探测挺进分子内部》为题撰文评述了这一研究成果。《自然》三位审稿人盛赞这项工作“打破了所有的纪录，是该领域创建以来的最大进展”，“是该领域迄今质量最高的顶级工作，开辟了该领域的一片新天地”，“是一项设计精妙的实验观测与理论模拟相结合的意义重大的工作”。 这一成果是由该校微尺度物质科学国家实验室侯建国院士领衔的单分子科学团队董振超研究小组完成的，博士生张瑞、张尧为论文共同第一作者。 光的频率在散射后会发生变化，而频率的变化情况取决于散射物质的特性，这是物理学上获得诺贝尔奖的著名的“拉曼散射”。“拉曼散射光中包含了丰富的分子振动结构的信息，不同分子的拉曼光谱的谱形特征各不相同，因此，正如通过人的指纹可以识别人的身份一样，拉曼光谱的谱形也就成为科技工作者识别不同分子的‘指纹’光谱。”论文通讯作者之一的董振超教授介绍说，拉曼光谱已经成为物理、化学、材料、生物等领域研究分子结构的重要手段。 上世纪70年代以来，随着表面增强拉曼散射技术，特别是针尖增强拉曼散射（TERS）技术的发展，光谱探测的灵敏度以及拉曼成像的分辨率都有了极大提高。“迄今，科学家们已将TERS测量的最佳空间成像分辨率发展到几个纳米的水平，但这显然还不适合于对单个分子进行化学识别成像。”董振超说。 微尺度实验室单分子科学团队多年来一直致力于自主研制科研装备，发展了将高分辨扫描隧道显微技术与高灵敏光学检测技术融为一体的联用系统。他们利用针尖与衬底之间形成的纳腔等离激元“天线”的宽频、局域与增强特性，通过与入射光激发和分子拉曼光子发射发生双重共振的频谱匹配调控，实现了亚纳米分辨的单个卟啉分子的拉曼光谱成像，使化学识别的分辨率达到前所未有的0.5纳米，可识别分子内部的结构和分子在表面上的吸附构型。 “可以说，在任何需要在分子尺度上对材料的成分和结构进行识别的领域，该项研究成果都有很大的用途。”董振超说，这项研究对了解微观世界，特别是微观催化反应机制、分子纳米器件的微观构造和包括DNA测序在内的高分辨生物分子成像，具有极其重要的科学意义和实用价值，也为研究单分子非线性光学和光化学过程开辟了新的途径。 《科技日报》（2013-06-06 二版）

拉曼成像 数据用Oringe怎么处理？使得作出来的图和Renishaw系统作出来的一样？我想做X-Y-拉曼强度 这个三维色彩填充图。

德国WITec公司网络报告：生物细胞组织和医药学的3D共聚焦拉曼成像检测报告内容：着重介绍高分辨3D共聚焦拉曼成像在生物细胞组织和医药学的重要应用，例如生物细胞组织的表征，癌化细胞的鉴定，细胞对药物吞噬过程及药物反应过程的监测。。。报告时间：2014 年3月 26日晚上11:00（北京时间）具体内容请查看以下网址：http://www.witec.de/events/onlineseminars请登录以下网页注册：http://www.microscopy-analysis.com/witecwebinars期待与大家见面！

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646385_2361242_3.gif【在线讲座156期】发展中的拉曼成像技术主讲人：杨军涛 英国雷尼绍公司 技术经理 活动时间：2012年4月12日 下午 14:30http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646385_2361242_3.gif1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、参加及审核人数限制：限制报名人数为120人，审核人数100人。3、报名截止时间：2012年4月12日下午14:304、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg5、参与互动：本次讲座采取网络讲堂直播模式，欢迎大家积极发言提问。 *参会期间您还可以将有疑问的数据通过上传的形式给老师予以展示，并寻求解答*6、环境配置：只要您有电脑、外加一个耳麦就能参加。建议使用IE浏览器进入会场。7、提问时间：现在就可以在此帖提问啦，截至2012年4月11日8、会议进入：2012年4月12日14:00点就可以进入会议室9、开课时间：2012年4月12日14:3010、特别说明：报名并通过审核将会收到1 封电子邮件通知函(您已注册培训课程)，请注意查收，并按提示进入会议室!为了使您的报名申请顺利通过，请填写完整而正确的信息哦~http://simg.instrument.com.cn/webinar/20110223/images/zb_11.gif注意：由于参会名额有限，如您通过审核，请您珍惜宝贵的学习交流机会，按时参加会议。如您临时有事无法参会，请您进入报名页面请假。无故不参会将会影响您下一次的参会报名。快来参加吧：我要报名》》》快来提问吧：我要提问》》》

http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gifHORIBA拉曼－AFM技术最新进展讲座时间：2014年9月22日 10：00 主讲人：刘仕锋物理学硕士，2005年加入HORIBA Scientific，多年从事拉曼光谱仪应用支持工作，为用户提供应用实现、功能开拓、及仪器培训等应用支持。http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】 随着扫描探针隧道显微镜（SPM）在上世纪80年代的出现，纳米尺度成像成为了可能。该技术使材料表面各种物理特性的表征方法得以快速持续发展，然而如何实现无标记的化学组分表征仍是一项挑战。 在过去的几十年里，光学光谱已经成为纳米材料分析的有力工具，它为分子结构和化学组分分析提供了独特的方法。不过，这种方法的空间分辨率在很大程度上受限于光学衍射极限。于是，将两种技术联用成为一种极富吸引力的独特方法。本报告将会为大家介绍为什么要用AFM-Raman、同区域成像和TERS以及HORIBA提供的解决方案等内容。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元京东卡一张哦~3、报名截止时间：2014年9月22 日 9:30 4、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg

在生命科学当中，显微技术已经深入到微观世界研究的各个方面，通过识别特定分子在样品中的分布，即化学特异性，我们可以清楚地了解到微观的生物过程，通过动态模拟，我们还能够跟踪研究细胞在整个生理过程之中的变化。然而普通的明场显微镜和相差显微镜并没有提供对于这样具有化学特异性的成像方式，而荧光方法虽然具有相应的功能，却由于需要对所要成像的系统引进标记荧光物质，因而具有一定的干扰性，而利用固有的荧光物质进行成像虽然不对系统造成干扰，但由于固有的荧光物质数目有限，因而成像的选择范围比较小。自1965年兴起的相干反斯托克斯拉曼散射显微术（Coherent Anti-Stokes Raman Scattering, CARS），在1999年之后由于引入了近红外光源使其得到了发展，而成为现在具有强大优势的显微方法。近年来，CARS显微术的发展已经使得它被广泛应用于化学、材料、生物、医学等各个领域。其中，化学方面有关于脂囊泡、油脂层以及含脂区域的有序化研究；材料方面，CARS被用于检测在有机环境中水的动态过程并已经实现了光阻过程的应用；而最为激动人心的就是近期发展起来的生物和医学上的成像。为了降低背景噪声对CARS信号的影响，除了FM-CARS之外，哈佛大学的谢晓亮实验室还研究和发展了另一种方法——受激拉曼散射（Stimulated Raman Scattering, SRS）。SRS在探测非标记的活体细胞时，具有极大的优势。为促进该领域的发展和进一步交叉合作，北京大学生物动态光学成像中心将于8月10日至12日举办第八届相干拉曼散射（CRS）显微学研讨会。该研讨会已由哈佛大学谢晓亮研究组创办，并已经成功举办过七届，在国际上享有盛誉，来自全世界各大高校和研究机构的数百名学员接受了严格的培训，初步了解了相干拉曼散射光谱学的有关知识，并获得面对面的试验培训，掌握了宝贵了实验技巧。同时该研讨会促进了最先进的相干反斯托克斯拉曼散射（CARS）和受激拉曼散射（SRS）技术在生命科学、医学及其它相关学科中的应用，促进了各学科的交叉合作。本届研讨会将借鉴前七届的成功经验，继续采用讲座与实验技能培训相结合的模式。除了学习CARS和SRS技术的基本原理外，学员们还将与学术界和工业界的专家一起探讨该领域的最新进展。此外，学员们将按照各自的研究兴趣和背景分成小组，进入实验室，利用世界一流的实验设备，接受该领域顶尖专家手把手的培训，并有机会将各自实验室的样品进行现场测试。主办单位简介 生物动态光学成像中心（Biodynamics Optical Imaging Center, BIOPIC）是北京大学重点建设的一个跨学科合作实体研究中心。中心的目标是发展和利用最先进的生物成像与基因测序手段，在分子和细胞水平上进行生命科学与医学基础研究。中心配备世界一流的研究设备和条件，有重点地发展最新的生物成像和测序技术。BIOPIC致力于利用新兴手段从事生物化学、生物物理学、分子生物学和细胞生物学的基础研究，以及致力于解决与重大医学问题。中心希望通过跨学科、新手段的研究及校内外、国内外的合作来促进生命科学的发展。有关该研讨会的更多情况请见http://biopic.pku.edu.cn/crsworkshop . 该网站同时提供在线报名服务。

拉曼光谱（Raman spectroscopy）是一种分子光谱，能够反映分子结构及其变化，因为其具有很高的特异性，每种分子都有其独特的拉曼光谱仪，拉曼光谱又被称为分子指纹术。拉曼光谱具有分析速度快，不受水的干扰，能够穿透透明的包装进行检测等优点，因此在药物研发、质检、流通领域都有应用。主要应用1药物研发领域1.1 晶型筛选1.2 低浓度药物检测， 表面增强拉曼光谱技术可以进行低浓度药物测量 10-6-10-10.1.3 药物的化学反应变化，可以与微流控技术结合起来进行分析1.4 药物与细胞的作用，通过拉曼成像技术可以分析药物在细胞内的分布1.5 原料药在药片中的分布情况2 过程分析，质量监控PAT2.1 成分分析2.2 浓度判定3流通领域1 原料药进厂检测2 市场上真假药判定有在这方面开展工作的朋友，可以站短联系1，Raman and SERS Investigations of Pharmaceuticals, Springer 20082，PHARMACEUTICAL APPLICATIONS OF RAMAN SPECTROSCOPY，Wiley 2008希望感兴趣的朋友，多交流这方面的应用以及所遇到的问题！

[align=center][b][size=14pt]WITec共聚焦拉曼快检技术在单细胞表型及生物医学领域的前沿应用[/size][/b][/align][align=center][size=11pt]会议时间[/size][size=11pt]：[/size][size=11pt]2020年[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]月[/size][size=11pt]2[/size][size=11pt][font=等线]日[/font]1[/size][size=11pt]0[/size][size=11pt]:00[/size][/align][b][size=12pt]内容[/size][size=12pt]介绍：[/size][/b][size=10.5pt]德国[/size][size=10.5pt]WITec的高分辨率、高灵敏度、共聚焦快速拉曼成像系统能够实现多种成像技术联用以满足客户的多样化、个性化需求，广泛应用于材料、地质及生命科学等领域。[/size][size=10.5pt]本次会议将带来上海氘峰医疗科技有限公司针对单细胞表型的拉曼数据分享以及德国[/size][size=10.5pt]WITec公司共聚焦拉曼快速成像在生物医学领域的前沿应用，欢迎关注！[/size][b][size=12pt]讲师[/size][size=12pt]介绍：[/size][size=11pt]罗艳君[/size][size=11pt]:[/size][/b][size=11pt][font=等线]上海氘峰医疗科技有限公司总经理，负责公司曰常运营及市场销售。硕士期间师从于单细胞拉曼技术的前沿研究者黄巍教授（现为牛津大学工程系教授，主要研究方向：合成生物学、单细胞拉[/font][font=等线]曼）。氘峰致力于单细胞拉曼技术在生物医学领域的推广和应用，提供专业的第三方单细胞拉曼表型数据解决方案，服务于生医领域科学家。[/font][/size][b][size=11pt]胡海龙[/size][size=11pt]:博士[/size][/b][size=11pt]：[/size][size=11pt][font=等线]毕业于新加坡南洋理工大学物理系。[/font]2005起年在吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室攻读硕士学位，主要研究半导体纳米材料的表面增强拉曼效应。2008起在南洋理工大学攻读博士学位，研究方向涉及近场拉曼光谱，针尖增强拉曼光谱及金属表面等离子体光学等多领域，工作先后在Nano Letter, ACS Nano与Nanoscale等杂志发表。同时与高校及科研机构展开广泛合作，共同发表文章超过15篇。2013年度荣获中国自费留学生优秀奖(新加坡区) ，同年加入德国WITec公司，现负责中国区应用技术支持[/size][size=11pt]。[/size][size=10.5pt]报名地址[/size][size=10.5pt]：[/size][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_12843.html][u][color=#0000ff]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_12843.html[/color][/u][/url]

激光拉曼光谱，化学通用分析仪器，由激光光源、样品室、单色仪和光电检测器四部分组成，在地学领域主要用于鉴定矿物和测定流体包裹体的化学成分。其空间分辨率达1微米，并可作原位测定。学科：岩矿分析与鉴定　　词目：激光拉曼光谱　　英文：laserRamanspectroscopy　　介绍：拉曼光谱是激发光子与物质分子发生非弹性碰撞后，频率发生改变的散射光谱，光子频率的改变称为拉曼位移，它是对物质进行定性分析的依据。拉曼光谱是拉曼（C.V.Raman）于1928年发现的。早期的拉曼光谱采用汞弧灯作光源激发样品分子，自20世纪60年代起，采用亮度高、单色性好、定向性高的激光作激发光源，称为激光拉曼光谱。拉曼光谱仪由激光光源、样品室、单色仪和光电检测器四部分组成，在地学领域主要用于鉴定矿物和测定流体包裹体的化学成分，如H2、O2、N2、CO2、CO、H2S、SO2、CH4、C2H6等，其空间分辨率达1微米，并可作原位测定。雷尼绍公司在1992年推出的RM系列激光拉曼光谱仪，在拉曼光谱领域开拓了一个新纪元。因此，于1993年获得查尔斯王子科学发明奖，1995年获得英国女皇技术奖和最佳科学仪器制造商奖。雷尼绍公司是通过了ISO9001质量认证的单位。雷尼绍激光拉曼光谱仪以其配置灵活性，高灵敏度及可靠性，成为用户的首选设备。　　2003年，雷尼绍公司推出了配置更加灵活，使用更加简单，自动化程度更高的InVia系列拉曼光谱仪。用户可根据自己的需求选择不同的功能模块，及相应的自动化程度。inVia系列显微激光拉曼光谱仪的最高配置-inViaReflex提供上述包括全自动化的所有功能；其它的inVia系统随时可以逐步升级至inViaReflex。所有的inVia拉曼系统把具有极高的灵敏度作为标准，将配置灵活和高灵敏度集中于同一套拉曼谱仪上。　　有多种附件：高精度三维自动平台，逐点扫描成像。大样品附件、高灵敏度光纤探头、变温及高压等附件。　　有多种探测器：可选紫外或红外增强CCD，电子冷却，具有最佳分辨本领和最佳图像质量。可选第二探测器，PL测量扩展到1.7微米。　　与其它仪器连用：可扩展为最新的拉曼和红外一体化的原位检测Raman/IR系统，与扫描电镜连用的SEM/Raman，与原子力/近场连用的AFM/NSOM/Raman。

[b][url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/rp2.html]激光荧光成像仪[/url][/b][url=http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/rp2.html]Lab-FLARE[/url]是采用激光发射激发荧光技术的实验室近红外荧光成像系统和多功能光子荧光成像控制器，与各种手持式荧光成像仪一起,提供近红外荧光高清成像，同时提供700 nm近红外荧光图像，800nm近红外荧光成像和彩色视频。[b]激光荧光成像仪特点[/b]控制使用2个4K高清监测器与所有我公司荧光成像头一起工作，获得高清荧光图像满FLARE容量的四个独立的视频流高功率665nm 和760nm激光激发,提供几乎没有近红外光的白光同时700 nm近红外荧光，800纳米近红外荧光成像，彩色视频输出，几何/数学融合。综合GPIO的大功率继电器统一的FLARE软件与脚本笔记本电脑集成锁存器及一套RC系列成像头带关节臂定位RC系列成像头的可选推车可选的VESA安装做它自己的RC系列成像安装头激光荧光成像仪Lab-FLARE：[url]http://www.f-lab.cn/vivo-imaging/rp2.html[/url]

HORIBA Scientific重磅推出新一代长焦长拉曼光谱仪LabRAM HR Evolution ，LabRAM家族又添新成员。全波长范围（200 nm – 2000 nm），并实现了全波长自动切换；超低波数模块使得其低波数测量可低至10 cm -1；LabRAM HR Evolution具有先进的2D和3D共焦成像性能；双光路设计方便用户实现UV和VIS/NIR波段的快速切换而无需任何校准和调试......HORIBA 自称LabRAM HR Evolution的高性能、高灵敏度，简单便捷等特色，使其成为拉曼光谱的顶级产品。各位大侠，事实是否如此呢？

[url=https://www.instrument.com.cn/zt/DJSPZJ][img=,610,90]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/06/202206171750180931_1042_5531796_3.gif!w610x90.jpg[/img][/url]【电镜视频大赛】扫描电镜+拉曼光谱一体化系统 TESCAN RISE在二维材料的应用——TESCAN中国[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#18191c]TESCAN RISE 电镜-拉曼一体化系统是一款革命性的产品，是世界上第一台真正实用化的扫描电镜-拉曼光谱仪联用系统。扫描电子显微镜能表征微观样品表面形貌、成分、结构信息，并能快速成像，是一个很好的微观分析平台，而拉曼成像是用于获得样品化学成分和分子空间分布的一种广为人知的光谱技术。以往两者联用的共轴方案不能保证分析位置的重合，并且存在相互干扰。而 TESCAN 推出的平行轴联用方案避免了这些问题，充分发挥两者的分析优势，实现了真正的联用。[/color][/size][/font]

每年一届的RamanFest旨在为拉曼领域的广大学者与研究者提供一个共同探讨新技术及应用的交流平台。2013年，HORIBA Scientific和法国里尔科技大学合作，在里尔举办了首届RamanFest，主要议题是生命科学、共焦拉曼成像、Raman与SPM/AFM联用技术、TERS研究等；第二届RamanFest于2014年6月在美国哈佛大学举办，围绕着拉曼进行了广泛讨论，会议共邀请到16位著名学者，吸引了来自美国、加拿大、中国及欧洲等10多个国家的120多名专家、学者参与。2015年5月6-8日，第三届国际拉曼前沿技术高端论坛将在厦门大学召开，本届主题为SERS/TERS新技术及拉曼光谱在生命科学、材料科学中的热点应用等，届时将由二十多位来自中国、美国、英国、法国、德国、日本、新加坡、韩国等国家的学者做精彩报告。此外，本届会议还将增设海报专场，以帮助年轻学者展示自己最新的研究成果，并与国际知名学者做深入交流。日程安排· 2015年5月5日：签到、海报张贴· 2015年5月6日：SERS/TERS、海报专场· 2015年5月7日：生命科学、晚宴· 2015年5月8日：材料科学

[url=http://www.f-lab.cn/microarray-manufacturing/ombroscopic-imaging.html]ombroscopic成像系统[/url]是基于测雨成像原理, ombroscopic imaging,而设计的胚胎成像系统,在几平方毫米区域面积提供了高对比度流速图像,广泛用于胚胎成像和细胞生物打印。ombroscopic成像系统采用脉冲在20ns的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]的照明系统,采用高质量图像软件的列车速度运动的液滴的速度计算的方式，能够计算出微小区域的液滴流体速度。ombroscopic成像系统还包括一个微距镜头和一个与我们的EG灯同步照明的相机。ombroscopic成像系统成功用于细胞微流图像的生物打印和胚胎成像技术的细胞打印,人体生物组织使用激光辅助生物打印技术在三维微米精度的细胞位置。这项创新技术基于激光脉冲细胞微流,该过程的精度依赖于流特性的控制。ombroscopic成像系统：[url]http://www.f-lab.cn/microarray-manufacturing/ombroscopic-imaging.html[/url]

[i][font='Times New Roman'][font=宋体]引言[/font][/font][/i][font='Times New Roman'][font=宋体]在上一期的专栏里[/font][/font][font=宋体]，我们对荧光成像和生物发光的基本原理进行了对比。同时也留下了几个问题：[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]针对我的课题[/font][/font][font=宋体]，生物发光和荧光成像哪个好？什么情况下选择生物发光，什么情况下选择荧光成像。别急，今天将为大家解答关键问题：[/font][b][font=宋体][color=#ff0000]荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么？[/color][/font][/b][align=center][font='Times New Roman']一、 [/font][b][font=宋体]荧光成像技术的优点[/font][/b][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像技术的优势主要表现在[/font][/font][font=宋体]：[/font][font='Times New Roman']1. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光蛋白及荧光染料的标记能力更强[/font][/font][font=宋体]。[/font][/b][font=宋体]荧光标记分子种类繁多，包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等，可以对基因、蛋白、抗体、化合药物等进行标记。[/font][font=宋体][color=#ff0000]应用范围极广[/color][/font][font=宋体]，可以对样本进行[/font][font=宋体][color=#ff0000]多色标记[/color][/font][font=宋体]，一个样本同时获得多种细胞或药物的分布[/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']2. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]信号强度[/font][/font][font=宋体]高[/font][/b][font=宋体]由于荧光成像的[/font][font=宋体][color=#ff0000]光子强度较生物发光更强[/color][/font][font=宋体][font=宋体]，持续时间长，对[/font]C[/font][font='Times New Roman']CD[/font][font=宋体]的灵敏度要求相对较低，不需要必须配备低温冷[/font][font='Times New Roman']CCD[font=宋体]即可获得清晰的成像结果，节省实验成本和购置成本。[/font][/font][font='Times New Roman']3. [/font][b][font='Times New Roman'][font=宋体]实验成本低[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]成像过程简单[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]相比生物发光成像，成像前无需注射荧光素酶底物。有合适的激发光源照射就可以发出特定波长的发射光[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]只要荧光基团稳定，就可实现[/font][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]随时激发随时发光随时检测[/font][/color][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。[/font][/font][font='Times New Roman']4. [/font][b][font=宋体]从活体到离体均可成像[/font][/b][font=宋体][font=宋体]相比生物发光只能在活细胞内才会产生发光。荧光蛋白或荧光染料只需要保持荧光基团稳定即可稳定发光。可以在活体或离体组织器官进行观察，在实验前期荧光材料制备阶段，可以直接在[/font]E[/font][font='Times New Roman']P[font=宋体]管中进行成像观察[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman']5. [/font][b][font=宋体]应用范围广[/font][/b][font=宋体]相比生物发光成像，荧光成像技术应用范围极广。在肿瘤生长与转移、药物的分布与代谢、纳米颗粒的靶向性与代谢、植物基因的表达、生物相容性材料开发、新型标记技术的开发等多个研究中均可用到荧光成像技术。（[/font][font=宋体][color=#ff0000][font=宋体]点击了解[/font]FOBI[font=宋体]整体荧光成像在上述领域的应用[/font][/color][/font][font=宋体]）[/font][align=center][font='Times New Roman']二、 [b][font=宋体]生物发光技术的优点[/font][/b][/font][/align][font='Times New Roman'][font=宋体]相比荧光成像[/font][/font][font=宋体]，生物发光成像的主要优势表现在：[/font][b][font=宋体]1[font=宋体]、特异性强，无自发荧光[/font][/font][/b][font=宋体]以荧光素酶作为体内报告源的生物发光方法，特异性极强。由于动物本身没有任何自发光，使得生物发光具有极低的背景和极高的信噪比。[/font][b][font=宋体]2[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]高灵敏度[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]由于生物体内很多物质在激发光的照射[/font][/font][font=宋体]下[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]也会发出荧光[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]这些非特异性荧光背景会影响检测灵敏度[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]荧光成像的灵敏度最高可在动物体内检测到约[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']4[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]细胞，而生物发光具有在动物体内监测[/font]10[/font][sup][font='Times New Roman']2[/font][/sup][font='Times New Roman'][font=宋体]数量级细胞的灵敏度。[/font][/font][b][font=宋体]3[font=宋体]、检测深度更高[/font][/font][/b][font='Times New Roman'][font=宋体]对于需要在深部[/font][/font][font=宋体]组织[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]下进行的研究（检测的深度在[/font]3~4cm[font=宋体]）[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]应用生物发光是最佳的选择[/font][/font][font=宋体]。[/font][b][font=宋体]4[font=宋体]、[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]精确定量[/font][/font][/b][font=宋体]由于荧光素酶基因是插入细胞染色体中稳定表达的，单位细胞的发光数量、发光条件相对稳定。即使标记细胞在动物体内有复杂的定位，亦可从动物体表的信号水平测量出发光细胞的相对数量。[/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]荧光成像和生物发光技术[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]，[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]是互为补充[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]，[/color][/font][font='Times New Roman'][color=#ff0000][font=宋体]分别满足不同的研究领域[/font][/color][/font][font=宋体][color=#ff0000]。对于不同的研究，可根据两者的特定及实验要求，选择合适的方法。[/color][/font][table][tr][td][font='Times New Roman'] [/font][/td][td][align=center][font='Times New Roman']优点[/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]缺点[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]荧光成像技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]荧光染料、蛋白标记能力强，可用于多重标记[/color][/font][font=宋体][color=#333333],[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号强度大，成像速度快[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]实验成本低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=宋体][color=#333333]体内、体外，器官、活体均可成像。[/color][/font][font=Verdana][color=#333333] [/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]应用范围极广[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]非特异性荧光限制了灵敏度，体内检测最低约[font=Verdana]104[/font][font=宋体]细胞[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]检测深度受限制[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]较难精确体内定量[font=Verdana] [/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]生物发光技术[/font][/align][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]特异性强，无自发荧光[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]背景低[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]高灵敏度，在体内可检测到几百个细胞[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]2 [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]可精确定量[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][/td][td][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]信号较弱，检测时间较长，需要灵敏的[font=Verdana]CCD[/font][font=宋体]镜头，仪器价格贵[/font][/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=Verdana][color=#333333]要求高[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，[/color][/font][font=Verdana][color=#333333]需要注入荧光素，实验成本高[/color][/font][font=宋体][color=#333333]。[/color][/font][font=Wingdings][color=#333333]n [/color][/font][font=宋体][color=#333333]只能用于细胞标记，应用范围窄。[/color][/font][/td][/tr][/table][i][font=宋体]结束语[/font][/i][font=宋体]随着活体成像技术的发展特别是荧光标记技术的发展，越来越多的生物学研究需要用到活体光学成像的方法。无论大家是选择生物发光或者荧光成像技术，苦恼总是随之而来，例如：[/font][font=宋体][color=#ff0000]生物素在体内可以维持多长时间？荧光蛋白和染料种类繁多，我该怎样选择呀？[/color][/font][font=宋体][font=宋体]别急，下期我们继续为大家介绍关于活体成像技术应用与选择的问题与难点。[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=http://dwz.date/cwes]点击了解更多活体成像技术的应用与仪器信息！[/url][/font][/font][align=center][font='Times New Roman'][font=宋体]参考文献[/font][/font][/align][font='Segoe UI'][color=#222222]1. [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]Su, Y., Walker, J.R., Park, Y. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]et al.[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] Novel NanoLuc substrates enable bright two-population bioluminescence imaging in animals. [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#222222]Nat Methods[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][b][font='Segoe UI'][color=#222222]17, [/color][/font][/b][font='Segoe UI'][color=#222222]852–860 (2020). [/color][/font][font='Segoe UI'][color=#222222]2. [/color][/font][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]M.Keyaerts[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]V.Caveliers[/color][/font][/url][url=#!][font='Segoe UI'][color=#222222]T.Lahoutte[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780444536334][font='Segoe UI'][color=#222222]Comprehensive Biomedical Physics[/color][/font][/url][font=等线][color=#222222] [/color][/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/referenceworks/9780128012383][font='Segoe UI'][color=#222222]Volume 4[/color][/font][/url][font='Segoe UI'][color=#222222], 2014, Pages 245-256.[/color][/font]

如题,请问flashing前后对样品成像的直观区别是什么

作为第一位获美国麦克阿瑟基金会“天才奖”的华人女科学家，庄晓薇教授获得了许多重要成果，尤其是在生物物理显微成像领域，近期庄晓薇教授在《细胞》发表了题为“Breaking the Diffraction Barrier: Super-Resolution Imaging of Cells”，描述了超分辨率细胞成像的最新进展。传统光学显微镜受限于光的波长，对于200nm以下的小东西只能摇头兴叹。虽然电子显微镜可以达到纳米级的分辨率，但通电的结果容易造成样品的破坏，因此能观测的样本也相当有限。分子生物学家虽然可以做到把若干想观察的蛋白质贴上荧光卷标，但这些蛋白质还是经常挤在一块，在显微镜下分不出谁是谁。这几年高分辨率荧光显微镜跨越了一大步，使得研究者可以从纳米级观测细胞突起的伸展，从而宣告200—750纳米大小范围的模糊团块的时代结束了。比如利用光敏定位显微镜：PALM可以用来观察纳米级生物，相较于电子显微镜有更清晰的对比度，如果给不同蛋白接上不同的荧光标记，就能用来进一步研究蛋白质间的相互作用。庄晓薇研究组一直在研究如何用光敏开关探针来实现单分子发光技术。他们希望能用光敏开关将原本重叠在一起的几个分子图像暂时分开，这样就能获得单分子图像，从而提高分辨率。2004年庄晓薇研究组偶然发现某种花青染料具有光控开关，也就是说，通过使用不同颜色的光，可以随意地把它们激活成荧光状态和失活成黑暗状态。自此庄晓薇生开始研究这些光控探针，用它们来短暂地分离个体分子在空间上的重叠影像从而提高分辨率。之后这一研究组在Nature Methods杂志上发表文章，命名了一种随机光学重建显微镜（stochastic optical reconstruction microscopy, STORM）。使用STORM可以以20nm的分辨率看到DNA分子和DNA-蛋白质复合体分子。这一方法基于光子可控开关的荧光探针和质心定位原理，在双激光激发下荧光探针随机发光，通过分子定位和分子位置重叠重构形成超高分辨率的图像，其空间分辨率目前可达20nm。STORM虽然可以提供更高的空间分辨率，但成像时间往往需要几分钟，同时还不能满足活体实时可视的成像的需要，发展空间很大。近期庄晓薇研究组也在Science杂志上发表了他们的3D STORM成像成果，该技术的空间分辨率比以往所有光学3D成像技术的分辨率都要高出10倍。研究人员展示了用3D STORM成像技术拍摄的肾细胞内微管结构图和其它的分子结构图。随后，他们又进一步将该技术发展成了多色3D成像技术（multicolor 3D imaging）。除了庄晓薇研究组之外，另外一个华人研究团队在这方面也获得了杰出成果，来自哈佛大学的谢晓亮教授在单分子光谱检测及其在生命科学中的应用方面也作出了许多贡献，十年前，谢晓亮教授因为发布了CARS显微技术而引发了巨大轰动。这种技术通过一种叫做自发拉曼散射的现象来增强信号。在自发拉曼散射中，样品内的化学键能够改变通过其中的光的波长。更早使用的拉曼散射显微术要求的激光功率很高，而且有时候需要曝光时间长达一天。近期谢晓亮教授研究组将SRS显微技术与核磁共振成像（MRI）技术联合起来，从而能快速灵敏的捕捉活体组织中分子运动，比如血细胞挤压通过血管的过程。这项技术镜头分辨程度达到亚细胞水平，可记录下蛋白、脂肪及细胞内液的情况。由于SRS显微镜可以探测到原子间化学键的共振，因此无需荧光标记。研究人员认为SRS显微镜可以在肿瘤摘除手术方面有所帮助，加快手术进程。传统的样本分析需要花费约20分钟，SRS 显微镜几乎可以做到实时扫描。同多种常用的观察生物分子的技术相比，新型SRS显微技术优势明显：它能采集分析照射生物样本的近30%激光，比传统SRS显微镜高出30倍；并且不需要插入荧光标记，避免了绿色荧光标记蛋白质扰乱生物路径或压住较小生物分子的问题。此外，传统的红外显微镜空间分辨率太低，并需要给样本脱水；自然的拉曼显微镜需要很高的激光能量，整体耗时很长，在活样本中的应用受到限制；相干反斯托克拉曼散射显微镜在拍摄除了脂质以外的大多数分子时对比度不够，而新型SRS显微技术都能突破这些局限。（来源：生物通 万纹）

当激发光与样品分子作用时，如果光子与分子碰撞后发生了能量交换，光子将一部分能量传递给了样品分子或从样品分子获得一部分能量，从而改变了光的频率。能量变化所引起的散射光频率变化称为拉曼位移。拉曼光谱的横坐标是拉曼位移。光照射于样品时，有一部分光被散射，其频率与入射光不同，频率位移与发生散射的分子结构有关。这种散射称为拉曼散射，频率位移称为拉曼位移。

[size=5][b]拉曼光谱与其他仪器联用技术[/b] [/size][size=5]　　近两年，实现拉曼与其它多种微区分析测试仪器的联用，其中有：拉曼与扫描电镜联用(Raman—SEM)；拉曼与原子力显微镜／近场光学显微镜联用(Raman—AFM／NSOM)；拉曼与红外联用(Raman—iR)；拉曼与激光扫描共聚焦显微镜联用(Raman— CLSM)，这些联用的着眼点是微区的原位检测。通过联用可以获得更多的信息，并提高可靠度。[/size]

[size=5][b]固体光声拉曼技术[/b] [/size][size=5]　　光声拉曼技术是通过光声方法来直接探测样品中因相干拉曼过程而存储能量的一种非线性光存储技术。光声拉曼信号正比于固体介质三阶拉曼极化率的虚部,与非共振拉曼极化率无关,因而完全避免了非共振拉曼散射的影响,并且克服了传统的光学法受瑞利散射,布里渊散射干扰的缺点,具有高灵敏度(能探测到10 - 6cm- 1的拉曼系数) 、高分辨率和基本上没有光学背景等优点。在气体、液体样品的检测分析中获得了理想的效果。由于不像相干斯托克斯拉曼过程那样有比较严格的相位匹配角要求,因而它也很适合用于研究固体介质特性。Barrett 等人从理论上分析了气体样品中的光声拉曼光谱技术过程,但与之不同,固体介质的光声拉曼效应是由相干拉曼增益过程产生的局部热能耦合到样品本身的振动模式的热弹过程,对于介质各向异性结构,三阶非线性拉曼极化率张量形式表现出对称性,因而,情况要复杂得多,运用平行模型和热弹性理论,导出固体介质样品中光声拉曼信号的解析式,对固体中光声拉曼效应的一些特性进行分析。 [/size]

[size=5][b]共振拉曼光谱技术[/b] [/size][size=5]　　激光共振拉曼光谱(RRS)产生激光频率与待测分子的某个电子吸收峰接近或重合时，这一分子的某个或几个特征拉曼谱带强度可达到正常拉曼谱带的104～106倍，并观察到正常拉曼效应中难以出现的、其强度可与基频相比拟的泛音及组合振动光谱。与正常拉曼光谱相比，共振拉曼光谱灵敏充高，结合表面增强技术，灵敏度已达到单分子检测 。 [/size]

[size=5][b]高温拉曼光谱技术[/b] [/size][size=5]　　高温激光拉曼技术被用于冶金、玻璃、地质化学、晶体生长等领域，用它来研究固体的高温相变过程，熔体的键合结构等。然而这些测试需在高温下进行，必须对常规拉曼仪进行技术改造。 [/size]

[b]拉曼光谱与原位拉曼光谱有什么区别？~[/b]

[size=5][b]傅立叶变换拉曼光谱技术[/b] [/size][size=5]　　傅立叶变换拉曼光谱是上世纪90年代发展起来的新技术，1987年，Perkin Elmer公司推出第一台近红外激发傅立叶变换拉曼光谱(NIR FT—R)仪，采用傅立叶变换技术对信号进行收集，多次累加来提高信噪比，并用1064mm的近红外激光照射样品，大大减弱了荧光背景。从此，Fr—Raman在化学、生物学和生物医学样品的非破坏性结构分析方面显示出了巨大的生命力。[/size]

[size=5][b]拉曼光谱与光导纤维技术的联用[/b] [/size][size=5]　　光导纤维的引入,使拉曼光谱仪用于工业在线分析以及现场遥测分析成为可能。Huy 等使用两个10m长、100μm 直径的光纤,激光波长为514. 5nm ,对苯/ 庚烷混合物进行分析,获得非常好的结果。Benoit 等将光导纤维传感器用于拉曼光谱仪, 使得液体样品的拉曼信号增强了50 倍。Cooney 等人比较单个光纤与多个光纤应用于拉曼光谱仪的结果,发现多个光纤的应用将改善收集拉曼光的有效性。Cooper 等利用光纤遥控拉曼技术分析了石油染料中的二甲苯异构体。近年来,国外将1550nm 光纤激光器、EDFA 光纤放大器技术应用于拉曼散射型分布光纤温度传感器系统,取得了较好的结果。分布式光纤拉曼光子温度传感器已成为光纤传感技术和检测技术的发展趋势。由于它具有独特的性能,因此已成为工业过程控制中的一种新的检测装置,发展成一个工业自动化测量网络。 [/size]

大家好，我最近在做拉曼这一块。我们学校有台共焦显微拉曼，激光有：533、633、785.我现在想用拉曼做普通食品方面的检测。我的样品是粉末的，样品制备应该如何？是吧样品均匀放到载玻片上，然后在上方再盖个载玻片吗？还有我应该选用那个激光？文献上说应该选用在可见光之外的。那我只能选785的。但是我还是怕可能扯不到信号。所以我想做表面增强拉曼。请问在共焦显微拉曼上能做表面增强拉曼吗？如果可以的话，应该做怎样的溶胶，金、银还是铜呢？希望大家帮帮忙，谢谢了。最后祝大伙国庆快乐！