基因静默

RNA干扰1. 病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应。其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约21-23 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC）。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA，而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完全降解。

膜曝气-生物膜反应器（MABR）是一种新型的膜-生物废水处理工艺，在MABR中采用基因工程菌生物膜可以强化难降解污染物的生物去除. 本研究在SPG膜表面形成基因工程菌生物膜，运行SPG膜曝气-生物膜反应器（SPG-MABR）处理阿特拉津废水，考察了气压、 挂膜生物量和液体流速对SPG-MABR运行性能的影响，以及基因工程菌生物膜的变化. 结果表明，提高气压可以增大透氧系数，从而提高阿特拉津和COD的去除速率以及复氧速率. 提高挂膜生物量能够加快阿特拉津和COD的生物去除，但生物膜厚度增加使得氧传质阻力增大，复氧速率降低. 层流状态下减小SPG-MABR中的液体流速，有利于污染物向生物膜扩散传质，从而提高污染物去除速率. 气压为300 kPa、 生物量为25 g· m-2、 液体流速为0.05 m· s-1时，SPG-MABR反应器对阿特拉津5 d的去除率可以达到98.6%. 在SPG-MABR运行过程中，基因工程菌生物膜呈现微生物多态化趋势. 生物膜表面逐渐被其他微生物细胞覆盖，基因工程菌分布减少，生物膜内部仍以基因工程菌细胞为主.

本实验采用赛默飞世尔科技Triplus 300 顶空自动进样器结合1300GC 配ISQ 质谱检测器分析药品中的3 种基因毒性物质——甲基磺酸酯，样品通过衍生法采用顶空进样方式，方法准确，灵敏度高，满足检测要求。

在液氮条件下，通过物理研磨方法破碎多酚类植物叶片的细胞，利用抗氧化剂防止多酚类化合物氧气褐变。适用于茶树、马铃薯、樱桃、葡萄以及其他富含多酚类的植物的植物基因组DNA提取及纯化。

本实验样品来自于人、狗、猫、老鼠、牛、马，还有鱼和蛤等新鲜动物组织样品，使用高通量组织研磨法处理，经Real-Time Taqman PCR方法，提取并检测RNA/cDNA和基因组DNA的提取质量，最终得出结论：使用SPEX高通量组织研磨仪研磨动物组织，可以快速高通量的完成样品制备，且核酸提取量高、提取的核酸质量好。

试验方法原理:本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术，结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。

本实验采用赛默飞世尔科技Trace1300GC 配ISQ 质谱检测器分析药品中的8 种基因毒性物质——磺酸酯，样品通过乙酸乙酯超声提取可以完成药品中磺酸酯的萃取。同时对于EP 方法中提出的顶空衍生化方法，其本身存在一定的局性限，本方法通过直接进样分析目标物，可以去除假阳性的影响，满足检测要求，本方法准确，灵敏度高。

裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体经2.5 L气升式光生物反应器快速营养增殖，通过基因枪法将携带草丁膦抗性基因(bar)的载体转入扩增后的配子体，经草丁膦筛选，获得抗性克隆。提取抗性克隆配子体基因组总DNA，经PCR和PCR Southern检测，结果显示60%抗性克隆可检出bar基因，表明bar基因是裙带菜配子体基因工程有效的筛选标记。

烷基磺酸，尤其是甲磺酸、苯磺酸和对甲苯磺酸，作为一类常用的烷化剂，在制药行业中常被用作烷基化试剂和催化剂，并在API的化学合成中用于纯化步骤。合成反应或再结晶步骤中任何残留醇的存在都可能导致形成磺酸的烷基酯。许多此类甲磺酸酯、苯磺酸酯或甲苯磺酸酯都被认为具有基因毒性，而其它酯类也可能存在基因毒性，因此需要在药物和药品中进行监测。本研究展示了通过简便的仪器设置及方法开发的工具，在快速正负切换的模式下，提高Xevo TQD的灵敏度，来加快基因毒性杂质的分析。

本实验采用赛默飞世尔科技Trace1300GC 配ISQ 质谱检测器分析药品中的8 种基因毒性物质——磺酸酯，样品通过乙酸乙酯超声提取可以完成药品中磺酸酯的萃取。同时对于EP 方法中提出的顶空衍生化方法，其本身存在一定的局性限，本方法通过直接进样分析目标物，可以去除假阳性的影响，满足检测要求，本方法准确，灵敏度高。

本实验采用赛默飞世尔科技Trace1300GC 配ISQ 质谱检测器分析药品中的8 种基因毒性物质——磺酸酯，样品通过乙酸乙酯超声提取可以完成药品中磺酸酯的萃取。同时对于EP 方法中提出的顶空衍生化方法，其本身存在一定的局性限，本方法通过直接进样分析目标物，可以去除假阳性的影响，满足检测要求，本方法准确，灵敏度高。

转基因是一门严肃的科学，民众对于转基因食物的安全性信任度非常低，对于转基因棉花之类的非食用作物则相对较高。现阶段的实验数据都不能证明转基因食物对于食用者的健康造成影响。当然，转基因问世时间也不长，其实验样本的数量还较低，长效结果还无法验证。生命科学是一门非常广阔的科学，可能穷尽一生时间也无法彻底研究完。我们支持转基因实验，这对缓解日益增长的粮食需求有很大帮助；但是，商业化转基因食品需要由民众自由选择，转基因食品必须带有明确的标识，每个人都有权利选择。随着转基因研究的不断深入，终有一日，安全的转基因食物会走入千家万户，为世界的发展做出贡献。

转基因小鼠制备实验可应用于：（1）动物发育研究；（2）研究细胞功能调控机制。实验方法原理:遗传的基本物质是DNA，基因是位于染色体上有遗传效应的DNA片段，对于储存在生物全套染色体中的全部遗传信息，可称其为基因组。不同种类、不同个体的生物基因组成是不同的，对动物个体来说，非自身的基因成分属于外源基因，如果把外源基因整合或导入动物染色体基因中，这个外源基因就被称为转基因(transgene)(即转移来的基因)，这种动物就是转基因动物。

IKA 前处理专家，提供专业的研磨，混匀前处理仪器，有效解决转基因成分检测前处理繁琐的步骤，使用方便，可靠，高质量的DNA模板的获取，是您进行有效检测的前提和关键。

番茄转基因农产品检测仪是一种高科技的检测设备，可以快速准确地检测出番茄是否为转基因产品。以下是使用番茄转基因农产品检测仪检测转基因番茄的步骤：

自从Cellera公司通过人类染色体组方法解码人类DNA后，人们开始广泛的从事基因方面的研究。 德国Fritsch公司也为这项新颖而有意义的课题提供了更多的广泛性参考价值。本文着重介绍了德国Fritsch公司与位于德国海德尔堡的Cellzome AG公司开展的协作实验。使用德国Fritsch公司的 ”pulverisette 5” 四罐行星式高能球磨机和 ”pulverisette 6” 单罐行星式高能球磨机，通过释放基因改良的酵母细胞来获得蛋白质。 德国Fritsch公司的行星式高能球磨仅仅运行了3-4分钟，通过显微镜的观测，就可以获得酵母细胞已经充分破碎的结论。 具体的研磨粉碎实验方法及相关实验数据，欢迎您来电话与北京飞驰科学仪器有限公司取得联系。

转基因技术是利用现代分子生物技术，将某些生物的基因转移到其他物种中去，改造目的生物的遗传物质，使其在形状、营养品质、消费品质等方面向人们所需要的目标转变。转基因食品是以转基因生物为直接食品或为原料加工生产的食品，主要有动物源性和植物源性两大类，其中市面上常见转基因食品大多数为植物源性食品。

?基因毒性杂质检测是一项非常有挑战性的任务，药物中基因毒性杂质检测在灵敏度、选择性、待测物稳定性、基质复杂性等方面具有特殊性，因此在分析方法开发和选择上具有与常规药物杂质检测不同的特点。基于对制药行业杂质及有关物质分析方案长期、专业、深入地探索，安捷伦在第一时间推出了基因毒性杂质检测完整解决方案，开创了基因毒性杂质检测解决方案全面涵盖液相、气相、液质、气质、光谱、样品处理、分析方法选择、法规与CSV计算机系统认证的先河。安捷伦基因毒性杂质检测完整解决方案集成了多种仪器、软件和系统的使用以及大量的检测实例分享，包括磺酸酯类、芳香胺类、氨基甲酸酯类、氮亚硝胺类基因毒性杂质分析以及相关元素杂质分析。基因毒性杂质完整解决方案适用于多种场景与案例，是基因毒性杂质分析领域实用的参考工具，同时为解决行业挑战与热点问题提供了有效、及时的帮助。

使用Q800R型基因剪切超声波破碎仪剪切人全血基因组DNA，以达到150-250bp的片段，用于二代测序

通过数字PCR扩增反应直接得出转基因植物外源基因（品系特异序列）和植物内源基因的拷贝数含量。样品DNA中的外源基因和内源基因的拷贝数比值（百分数）即为样品中相应的转基因植物品系的相对百分含量。

● 全流程应用与整合解决方案● 背景介绍和应用实例集锦● iPSC基因重编程应用解决方案● 细胞克隆筛选应用解决方案● 化繁为简，合而不同

本文分别采用两种电离的 H-SIM 模式对基因毒性杂质盐酸普萘洛尔醚化物建立了快速的高分辨液质检测方法。结果显示在正离子条件下，ESI 和 APCI 均能获得良好的质谱响应，其线性范围达到三个数量级以上，线性关系良好。在该检测方法中，盐酸普萘洛尔醚化物在APCI 中的灵敏度优于 ESI。传统的三重四极杆质谱定量使用 MRM 扫描模式，需要优化碰撞能量等参数。而该实验方法快速简单，利用 Q Exactive Focus 的超高分辨率提高特异性，采用一级离子即可进行定量检测，对此类环氧化基因毒性杂质的检测具有指导意义。

基因治疗药物的基因组拷贝数、宿主细胞基因组DNA残留、其他生产相关DNA残留（质粒DNA或杆状病毒基因组DNA）、复制性病毒残留、支原体等质控指标必须通过严格测试，以保证相关产品的安全和有效性。数字PCR作为当下各类核酸检测技术平台中最为灵敏、精准的直接定量工具，是完成该类检测任务的最佳选择。

本研究展示了通过简便的仪器设置及方法开发的工具，在快速正负切换的模式下，提高Xevo TQD的灵敏度，来加快基因毒性杂质的分析。

以抗蝶目害虫性转基因玉米为研究对象，使用玉米内源性基因SSIIb和转基因M810特异性引物进行PCR扩增，并运用岛津微芯片电泳仪MultiNA进行PCR产物的分析，建立了转基因玉米的鉴定方法。该方法操作简单，灵敏度高，可用于快速、高通量的转基因玉米的定性分析。

烷基磺酸酯和芳基磺酸酯类化合物作为潜在性基因毒性杂质严重威胁人类健康，而其做为药品生产原料使用广泛，因此对于药品中磺酸酯的控制至关重要。本文采用乙酸乙酯提取，通过液体直接进样法分析药品中8 种磺酸酯的分析方法开发。

八月，里约奥运会正在如火如荼的进行。而赛场外，关于反兴奋剂的声音一刻也没有停歇，反兴奋剂工作面临严峻形势。随着科技的发展，一种新的兴奋剂正在悄然兴起，那就是“基因兴奋剂”。目前，科学界对于基因兴奋剂的检测建议是，从基因序列方面进行检测。识别出外来基因是证明运动员使用基因兴奋剂的最直接证据。Kurabo公司的QuickGene-610L核酸提取系统能够快捷高效的提取全血样品DNA，该方法能够为反基因兴奋剂检测工作提供完整解决方案。

人细胞分裂周期基因(CDC) ELISA试剂盒是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA），采用双抗体夹心ELISA法。预先包被的抗体为细胞分裂周期基因(CDC) 单克隆抗体，检测相抗体为多克隆抗体，经生wu素（biotin）标记。样品和生wu素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，经PBS或TBS洗涤，随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。

一般来说，雄性鸽子具有ZZ染色体，而雌性鸽子则具有ZW染色体。鸽子的性别通常无法凭肉眼外观直接确定，因为它们没有明显的性别特征。然而通过基因检测提取鸽子的DNA样本，可以进行基因检测来确定其性别。这种方法利用了鸽子的性染色体差异。通过检测特定基因片段的存在与否，可以确定鸽子的性别。

下述方法是对Graham与VanderEb(1973)建立的磷酸转方法的改进，用高分子量基因组DNA代替了质粒DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用（Segeetal.1984,Kingsleyetal.1986)。