高难靶点

刚才在一个网站看到的游戏，觉得还不错，欢迎大家来踊跃参与。各位GGJJDDMM，大家可挑战更高难度，呵呵。做个示范：万马奔腾第一楼造句：当你银行存款千万,马上要升任公司总裁,出入N辆大奔,腾出时间陪老婆可别忘了哦!出题：恭喜发财第二楼：造句：为人处世要谦恭,喜从天降别激动,学学人家周润发,财源滚滚自亨通!出题：刻骨铭心楼下的就以“刻骨铭心”来造句。充分发挥大家的想象力哦！（咱们论坛的能人们快来啊）

问题一：如果你家附近有一家餐厅，东西又贵又难吃，桌上还爬着蟑螂，你会因为它很近很方便，就一而再、再而三地光临吗？　　回答：你一定会说，这是什么烂问题，谁那么笨，花钱买罪受？　　可同样的情况换个场合，自己或许就做类似的蠢事。　　不少男女都曾经抱怨过他们的情人或配偶品性不端，三心二意，不负责任。明知在一起没什么好的结果，怨恨已经比爱还多，但却“不知道为什么”还是要和他搅和下去，分不了手。说穿了，只是为了不甘，为了习惯，这不也和光临餐厅一样？　　——做人，为什么要过于执著？！　　问题二：如果你不小心丢掉100块钱，只知道它好像丢在某个你走过的地方，你会花200块钱的车费去把那100块找回来吗？　　回答：一个超级愚蠢的问题。　　可是，相似的事情却在人生中不断发生。做错了一件事，明知自己有问题，却怎么也不肯认错，反而花加倍的时间来找藉口，让别人对自己的印象大打折扣。被人骂了一句话，却花了无数时间难过，道理相同。为一件事情发火，不惜损人不利已，不惜血本，不惜时间，只为报复，不也一样无聊？　　失去一个人的感情，明知一切已无法挽回，却还是那么伤心，而且一伤心就是好几年，还要借酒浇愁，形销骨立。其实这样一点用也没有，只是损失更多。　　——做人，干吗为难自己？！　　问题三：你会因为打开报纸发现每天都有车祸，就不敢出门吗？　　回答：这是个什么烂问题？当然不会，那叫因噎废食。　　然而，有不少人却曾说：现在的离婚率那么高，让我都不敢谈恋爱了。说得还挺理所当然。也有不少女人看到有关的诸多报道，就对自己的另一半忧心忡忡，这不也是类似的反应？所谓乐观，就是得相信：虽然道路多艰险，我还是那个会平安过马路的人，只要我小心一点，不必害怕过马路。　　——做人，先要相信自己。　　问题四：你相信每个人随便都可以成功立业吗？　　回答：当然不会相信。　　但据观察，有人总是在听完成功人士绞尽脑汁的建议，比如说，多读书，多练习之后，问了另一个问题？那不是很难？　　我们都想在3分钟内学好英文，在5分钟内解决所有难题，难道成功是那么容易的吗？改变当然是难的。成功只因不怕困难，所以才能出类拔萃。　　有一次坐在出租车上，听见司机看到自己前后都是高档车，兀自感叹：“唉，为什么别人那么有钱，我的钱这么难赚？”　　我心血来潮，问他：“你认为世上有什么钱是好赚的？”他答不出来，过了半晌才说：好像都是别人的钱比较好赚。　　其实任何一个成功者都是艰辛取得。我们实在不该抱怨命运。　　——做人，依靠自己！　　问题五：你认为完全没有打过篮球的人，可以当很好的篮球教练吗？　　回答：当然不可能，外行不可能领导内行。　　可是，有许多人，对某个行业完全不了解，只听到那个行业好赚钱，就马上开起业来了。　　我看过对穿着没有任何口味、或根本不在乎穿着的人，梦想却是开间服装店；不知道电脑怎么开机的人，却想在网上聊天，结果道听途说，却不反省自己是否专业能力不足，只抱怨时不我与。　　——做人，量力而行。　　问题六：相似但不相同的问题：你是否认为，篮球教练不上篮球场，闭着眼睛也可以主导一场完美的胜利？　　回答：有病啊，当然是不可能的。　　可是却有不少朋友，自己没有时间打理，却拼命投资去开咖啡馆，开餐厅，开自己根本不懂的公司，火烧屁股一样急着把辛苦积攒的积蓄花掉，去当一个稀里糊涂的投资人。亏的总是比赚的多，却觉得自己是因为运气不好，而不是想法出了问题。　　——做人，记得反省自己。　　问题七：你宁可永远后悔，也不愿意试一试自己能否转败为胜？　　解答：恐怕没有人会说：“对，我就是这样的孬种”吧。　　然而，我们却常常在不该打退堂鼓时拼命打退堂鼓，为了恐惧失败而不敢尝试成功。　　以关颖珊赢得2000年世界花样滑冰冠军时的精彩表现为例：她一心想赢得第一名，然而在最后一场比赛前，她的总积分只排名第三位，在最后的自选曲项目上，她选择了突破，而不是少出错。在4分钟的长曲中，结合了最高难度的三周跳，并且还大胆地连跳了两次。她也可能会败得很难看，但是她毕竟成功了。　　她说：“因为我不想等到失败，才后悔自己还有潜力没发挥。”　　一个中国伟人曾说；胜利的希望和有利情况的恢复，往往产生于再坚持一下的努力之中。　　——做人，何妨放手一搏。　　问题八：你的时间无限，长生不老，所以最想做的事，应该无限延期？　　回答：不，傻瓜才会这样认为。　　然而我们却常说，等我老了，要去环游世界；等我退休，就要去做想做的事情；等孩子长大了，我就可以……　　我们都以为自己有无限的时间与精力。其实我们可以一步一步实现理想，不必在等待中徒耗生命。如果现在就能一步一步努力接近，我们就不会活了半生，却出现自己最不想看到的结局。　　——做人，要活在当下

人生致命的八个经典问题　　在生活每个人都会碰到很多的问题，根据这个问题你能联想到什么？一个简单的问题也许就能讲出一番人生大道理呢，不信你看看! 　　问题一：如果你家附近有一家餐厅，东西又贵又难吃，桌上还爬着蟑螂，你会因为它很近很方便，就一而再、再而三地光临吗？ 　　回答：你一定会说，这是什么烂问题，谁那么笨，花钱买罪受？ 　　 　　可同样的情况换个场合，自己或许就做类似的蠢事。 　　 不少男女都曾经抱怨过他们的情人或配偶品性不端，三心二意，不负责任。明知在一起没什么好的结果，怨恨已经比爱还多，但却“不知道为什么”还是要和他搅和下去，分不了手。 说穿了，只是为了不甘，为了习惯，这不也和光临餐厅一样？-做人，为什么要过于执著？！ 　　问题二：如果你不小心丢掉100块钱，只知道它好像丢在某个你走过的地方，你会花200块钱的车费去把那100块找回来吗？ 　回答：一个超级愚蠢的问题。 　　 可是，相似的事情却在人生中不断发生。做错了一件事，明知自己有问题，却怎么也不肯认错，反而花加倍的时间来找藉口，让别人对自己的印象大打折扣。被人骂了一句话，却花了无数时间难过，道理相同。为一件事情发火，不惜损人不利已，不惜血本，不惜时间，只为报复，不也一样无聊？ 　　 失去一个人的感情，明知一切已无法挽回，却还是那么伤心，而且一伤心就是好几年，还要借酒浇愁，形销骨立。其实这样一点用也没有，只是损失更多--做人，干吗为难自己？！ 　　问题三：你会因为打开报纸发现每天都有车祸，就不敢出门吗？ 　　回答：这是个什么烂问题？当然不会，那叫因噎废食。 　　 然而，有不少人却曾说：现在的离婚率那么高，让我都不敢谈恋爱了。说得还挺理所当然。也有不少女人看到有关的诸多报道，就对自己的另一半忧心忡忡，这不也是类似的反应？所谓乐观，就是得相信：虽然道路多艰险，我还是那个会平安过马路的人，只要我小心一点，不必害怕过马路。 --做人，先要相信自己。 　　问题四：你相信每个人随便都可以成功立业吗？回答：当然不会相信。 　　 但据观察，有人总是在听完成功人士绞尽脑汁的建议，比如说，多读书,多 练习之后，问了另一个问题？那不是很难？ 　　 我们都想在3分钟内学好英文，在5分钟内解决所有难题，难道成功是那么容易的吗？改变当然是难的。成功只因不怕困难，所以才能出类拔萃。 　　 有一次坐在出租车上，听见司机看到自己前后都是高档车，兀自感叹：“唉，为什么别人那么有钱，我的钱这么难赚？” 　　 我心血来潮，问他：“你认为世上有什么钱是好赚的？”他答不出来，过了半晌才说：好像都是别人的钱比较好赚。 　　其实任何一个成功者都是艰辛取得。我们实在不该抱怨命运。--做人，依靠自己！ 问题五：你认为完全没有打过篮球的人，可以当很好的篮球教练吗？回答：当然不可能，外行不可能领导内行。 可是，有许多人，对某个行业完全不了解，只听到那个行业好***，就马上开起业来了。 我看过对穿着没有任何口味、或根本不在乎穿着的人，梦想却是开间服装店；不知道电脑怎么开机的人，却想在网上聊天，结果道听途说，却不反省自己是否专业能力不足，只抱怨时不我与。--做人，量力而行。问题六：相似但不相同的问题：你是否认为，篮球教练不上篮球场，闭着眼睛也可以主导一场完美的胜利？回答：有病啊，当然是不可能的。 可是却有不少朋友，自己没有时间打理，却拼命投资去开咖啡馆，开餐厅，开自己根本不懂的公司，火烧屁股一样急着把辛苦积攒的积蓄花掉，去当一个稀里糊涂的投资人。亏的总是比赚的多，却觉得自己是因为运气不好，而不是想法出了问题。--做人，记得反省自己。问题七：你宁可永远后悔，也不愿意试一试自己能否转败为胜？解答：恐怕没有人会说：“对，我就是这样的孬种”吧。 然而，我们却常常在不该打退堂鼓时拼命打退堂鼓，为了恐惧失败而不敢尝试成功。 以关颖珊赢得2000年世界花样滑冰冠军时的精彩表现为例：她一心想赢得第一名，然而在最后一场比赛前，她的总积分只排名第三位，在最后的自选曲项目上，她选择了突破，而不是少出错。在4分钟的长曲中，结合了最高难度的三周跳，并且还大胆地连跳了两次。她也可能会败得很难看，但是她毕竟成功了。她说：“因为我不想等到失败，才后悔自己还有潜力没发挥。”一个中国伟人曾说；胜利的希望和有利情况的恢复，往往产生于再坚持一下的努力之中。--做人，何妨放手一搏。问题八：你的时间无限，长生不老，所以最想做的事，应该无限延期？回答：不，傻瓜才会这样认为。 然而我们却常说，等我老了，要去环游世界；等我退休，就要去做想做的事情；等孩子长大了，我就可以…… 我们都以为自己有无限的时间与精力。其实我们可以一步一步实现理想，不必在等待中徒耗生命。如果现在就能一步一步努力接近，我们就不会活了半生，却出现自己最不想看到的结局。--做人，要活在当下。

信号转导通路仍然是肿瘤研究、心脑血管疾病研究和免疫系统疾病研究的主要方向之一。该文章描绘了八个经常研究到的信号转导通路，并标出相关靶点的经典抑制剂，以便研究人员能更容易地判断自己所需的抑制剂。导读： 第一页 细胞凋亡信号转导通路第二页 DNA损伤信号转导通路第三页 JAK-STAT信号转导通路第四页 MAPK信号转导通路第五页 PI3K信号转导通路第六页 受体酪氨酸激酶信号转导通路第七页 TGF-beta/SMAD信号转导通路第八页 其他信号转导通路和因子对Wnt通路的影响

细胞治疗与靶向治疗的优缺点？

[size=14px] [/size] [size=14px]葫芦素B ( cucurbitacin B，CuB ) 是瓜蒂等葫芦科清热解毒中药的主要药效成分, 是葫芦素家族中含量最丰富的成员，具有保肝、消炎和抗肿瘤等广泛的药理活性。虽然已经有很多学者研究了CuB的不同抗癌机制，但大多数都是下游途径和疗效表型，CuB在多种肿瘤中的直接作用靶点至今尚未明确。[/size] [size=14px]今天为大家分享2篇关于葫芦素B在抗肿瘤应用中的高水平文章，分别发表在Acta Pharm Sin B（IF=14.5）和ACS Central Science（IF=18.2），思路经典，以供学习参考。[/size] [size=14px]文献1：葫芦素B抑制结膜黑色素瘤的直接靶点[/size] [size=14px]2022年5月23日，华东理工大学药学院李剑、上海九院眼科徐晓芳/贾仁兵团队合作在Acta Pharm Sin B（IF=14.5）上发表了题为“Cucurbitacin B-induced G2-M cell cycle arrest of conjunctival melanoma cells mediated by GRP78–FOXM1–KIF20A pathway”的文章，揭示了葫芦素B抑制结膜黑色素瘤直接靶点及相关机制。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]研究首先利用结膜黑色素瘤（Conjunctival melanoma，CM）细胞株筛选自建的上市老药库（含1400个化药和天然药），发现葫芦素B对NRAS和BRAF突变的CM细胞均表现出突出的抗增殖活性。接着作者利用细胞实验发现CuB抑制CM细胞增殖并导致G2/M细胞周期停滞，并通过RNA-Seq、q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和Western blot发现CuB抑制CM细胞FOXM1/PLK1 -KIF20A通路。进一步作者采用ABPP识别CuB的直接靶蛋白，在9种候选蛋白中，GRP78已被报道为多种癌症的潜在生物标志物和治疗靶点，可抑制癌细胞的进展、增殖、侵袭和转移。作者通过Pulldown+WB、MST、TSA等验证了两者直接结合，并通过质谱鉴定发现CuB通过α-β-不饱和酮部分与GRP78的Lys326位点互作。最后Rescue实验发现GRP78敲低削弱CuB抑制细胞增殖的作用，而GRP78过表达强化CuB抑制细胞增殖的作用，表明葫芦素B通过GRP78发挥功能。总之，CuB通过结合GRP78抑制GRP78-FOXM1-KIF20A通路进而抑制CM细胞周期发挥功能。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]文献2：中药瓜蒂活性成分葫芦素B抗肿瘤作用分子靶点及作用机制[/size] [size=14px]2022年5月17日，北京大学药学院屠鹏飞/曾克武团队在ACS Cent Sci（IF=18.2）上发表了题为“Allosteric regulation of IGF2BP1 as a novel strategy for the activation of tumor immune microenvironment”的文章，揭示了葫芦素B发挥抗肿瘤作用的直接靶点及相关机制。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]研究首先通过体内外实验发现IGF2BP1（m6A reader protein）敲低能够募集肿瘤浸润性免疫细胞，阻断PD-L1表达，增强抗肿瘤免疫抑制HCC进展。进一步采用高通量筛选系统（基于IGF2BP1可识别并结合m6A探针，小分子抑制IGF2BP1与m6A探针结合，SPR检测结合能力）从先前建立的天然产物小分子库（889种）中筛选能够抑制IGF2BP1的小分子，发现6种候选化合物对m6A的抑制率达70%，进一步发现其中的葫芦素B对肝癌细胞增殖展现最佳抑制效果。随后SPR、ITC、CETSA、DARTS、Pulldown、分子对接证实IGF2BP1与葫芦素B的直接结合。机制上，葫芦素B通过共价修饰IGF2BP1的253位半胱氨酸，诱导IGF2BP1蛋白变构，抑制IGF2BP1对下游m6A的识别，并且影响多个肿瘤相关靶基因的表达，发挥诱导肿瘤细胞凋亡和改善肿瘤免疫微环境的作用。[/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]越来越多的中药活性成分被发现在多种疾病中发挥药理活性，发现其在不同疾病中的不同的直接作用靶点将有助于深入挖掘其作用机制。近年来筛选并验证中药活性成分的直接靶点的技术手段越来越多，且各具特色，这将极大的推动中药现代化研究进程。[/size]

样品有疵点能测试吧？

序号：1题目：Study of the Absorbable Bone Wax in Biological Safety and the Effect Observation of Composite from Absorbable Bone Wax Mixed with Yunnan Baiyao作者：期刊：Economic Paper日期：April 6, 2015链接：http://www.economicpaper.com/economic-paper/201865.html

昨天在报纸上看到一篇文章，里面提到有为美国人曾经说过，一个人将来是否有成就，就看看他现在每天晚上八点到十点在干什么？ 仔细想想，颇有些道理，特录于此，与海友们共勉。 在上学的时候，如果你每天八点到十点都在用心学习，那如果不是比较笨，成绩应该都可以。 。。。。。。。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09503.gif[/img]

早起习惯了，改到八点半，有点不适应

晚上八点十分直播----------------------国足背水一战。我不是标题党，刚刚卡住了，就写了一半。

北京时间8月12日中午，北京奥运会男子体操团体决赛拉开战幕，最终中国男团以总分286.125分勇夺冠军，日本队278.875分获得银牌，美国队275.850分位列第三。　　中国队的第一项是自由操，陈一冰率先出场，他开场“团身720旋”落地很稳，随后几个体操动作都很到位，几乎没有多余扣分点，但是在结束空翻“团身360”时向后退了一大步，单足跨出场地，被扣除了0.3的完成分。难度价值是5.6分，得到14.575分。杨威随后出场，他没有受倒队友失误影响，开场几个技巧空翻都稳稳落地，动作规格无懈可击，结束动作团身旋只是向前跳了一小步，难度价值是，得到15.425分。邹凯上场，他表情相当轻松，开场招牌连接“后直900＋前直720”非常流畅，第二串团身720旋完成也是稳稳落地，最高难度动作一过，剩余动作小菜一碟，结束动作团身旋钉子一样站住，难度价值6.7，得到15.927分。 　　日本队在中国队比赛完之后出场， 他们派出中濑卓也、冲口诚、内村航平三人应战。冲口诚一上场就完成以中国选手楼云名字命名的“分腿侧空翻两周加转体270”接“前团”的精彩连接，随后几个动作完成一般，结束动作旋空翻向后退了一大步并跨出界。得到15.275分。内村航平上场，他开场连接非常稳，但第二串技巧连接最后一个动作落地向前跳了一大步，但结束动作“后直1080”出现钉子效果，得到15.70分。 　　韩国比赛鞍马。梁泰荣率先出场，他马上动作一开始就有一个小分腿，在随后的吴国年爬马这个动作更是掉下器械，直接被扣除0.5分，随后他的动作勉强拿下来，但是心已死得到13.525分。罗马尼亚队比赛跳马。德拉古列斯库在跳马比赛中以完成以“前手翻-团身前空翻两周加转180”，落地向后动了一步，得到16.55分。德国汉布钦吊环发挥一般，得到15.175。 　　美国队比赛吊环。预赛发挥不是很好的谭凯文在上场前表情似乎有点紧张，几乎是一口气憋下来完成全部动作，好在不愧为吊环高手，结束动作稳稳落地，得到15.425分。第一轮比赛结束后，罗马尼亚队排第一，成绩为49.40分。法国队第二，成绩为48.40分。美国队46.375，排在第三，日本队得到45.975分。排在第四。中国队以45.925暂列第五。 　　第二项是鞍马，中国队和日本队在这个项目上都很有实力。日本队率先出场，上场的三位队员显得不够兴奋，15.150、15.480、15.575三个不高的分数让他们处于被动，然而中国队第一个出场的黄旭也在下法出现了问题，只获得了14.750分，后面出场的杨威虽然稳定下来还是受到了影响，得分不理想，只获得了15.175的分数，但是最后出场的肖钦及时的扭转了颓势，以16.100分把团体的分数提高了一大截，两轮过后，中国队以0.18分稍稍落后于日本队。　　第三轮比赛是吊环，中国队派出黄旭、杨威、陈一冰。从吊环开始，连续三项都将是中国队强项。黄旭、杨威、陈一冰都是吊环个中高手，后两人不但是闯入吊环单项决赛，随便发挥也能得到16分以上的高分。 　　黄旭出场，他环上动作一气呵成，静止动作很到位，成套中的“李宁正吊”很出彩，下法直体360旋稳稳落地，得到16.00分。杨威出场，一连串力量动作渐迷住观众眼，成套非常娴熟，完成高难度动作非常自信，高难度F组下法“直体720旋”稍微动了一点点，得到16.30的高分，给陈一冰吃了一颗定心丸。 　　陈一冰出场，难以言喻的震撼，吊环带几乎纹丝不动，直角十字脚尖绷的笔直，其余所有动作身体细节用放大镜找都找不出问题，裁判毫不犹豫的给出了16.575分。 　　韩国比赛跳马。金洙冕完成一个难度价值为6.6的动作，空中姿态中有分腿，落地前跨一步，得到15.925分。金大恩完成了难度价值为6.6，空中同样出现分腿，落地前出现屈膝，还有勾脚尖，不过落地效果好，得到15.95分梁泰荣完成难度价值为7.0的“前手翻-直体前空翻转体900”，空中姿态比队友好，但是没有完全准备好就落地，向后退一步并手撑地，被扣除了0.8，只得到15.35分。 　　汉布钦双杠节奏有点紧张，但还是顺利完成，15.95的得分也不错。德拉古列斯库在单杠出现小失误，一个转体动作倒立时出现分腿和小调整，随后的“团身360旋越杠抓杠”空中姿态出现分腿，下法动作难度不大，但还是向前跨了一步14.425分。 　　第三轮比赛结束后，美国队排第一，成绩为141.65分。中国队第二，成绩为140.825分。法国队第三，140.025分。日本队以138.45分排名第四。德国队138.075位列第五。 　　第四项是跳马，日本队率先开始比赛，由于日本队的跳马实力不强，出场的三名队员只获得了15.200、15.400、16.150的得分，总分46.750分。中国队陈一冰继续在跳马中打头炮，他完成了A分为6.6的动作，只是落地时最后一只脚出界，获得了15.950分，杨威接下来完成了侧手翻直体转体990度，A分高达7.0，落地稳稳站住，得到了16.600的高分，最后上场的李小鹏完成了以自己名字命名的“李小鹏跳”,A分高达7.2，而他完成的非常不错，最后获得了16.775分。中国队在跳马项目上一压倒性的优势在这一轮完胜日本队。　　第五项中国队要率先开始比双杠，黄旭六个空翻动作的高难度双杠，完成异常的精准，是近年来最完美的一套，他获得了16.475的高分，第二个出场的杨威虽然出了一点小差错，但是他依旧获得了16.100的高分，没有对团体得分产生太大影响，最后出场的李小鹏虽然降低了难度，但是并没有减低动作质量，最后获得了16.450的高分。日本队出场的第一位选手只得到了15.000分，随后出场的两位选手的得分分别是15.950和16.150，在这一轮中国队把自己的领先优势进一步扩大。　　最后一项单杠中国队最后一个出场，日本队率先出场，尽管我们的优势很大，但是我们任然需要在最后一个项目上的稳定发挥确保胜利的果实。日本队的三名运动员基本上顺利完成了自己的动作，中国队的三名选手由肖钦第一个出场，他在头炮中表现的非常优秀，落地稳稳站住，第二个上场的李小鹏和最后上场的邹凯完美的完成了自己的动作，获得了最后的冠军。　　六轮比赛结束，我们以总成绩286.125分，以巨大的优势领先第二名重新获得了奥运会男子团体的冠军。

求胶体钯的鉴定，要具体一点 ，请各位大侠帮忙 谢谢！

小弟最近做血浆中左旋多巴和卡比多巴的定量，样品预处理时参考文献有用高氯酸沉淀蛋白的，有用高浓度甲酸乙腈沉淀的，我都试了试，但检测不到，感觉是没有沉淀出来，请问大家有没有做过的，有什么建议和窍门吗?

[size=14px] [/size] [size=14px]中药解表散寒治疗感冒发热已有数千年的历史，虽然药效明确，但其作用机制尚不清楚。前列腺素E2（PGE2）是炎症因子诱导发热的最终介质，在机体炎症和发热的病理进程中发挥了重要作用。在PGE2代谢合成过程中，游离的花生四烯酸（AA）被环氧合酶（COX1/2）催化生成前列腺素G2（PGG2），随后被还原为前列腺素H2（PGH2），将PGH2催化生成PGE2的前列腺素合酶分为诱导型合酶（mPGES1）与非诱导型合酶（PGES2、cPGES）。目前临床常用的解热镇痛抗炎药均为针对COX1/2的非甾体类抗炎药，虽然作用明显但其不良反应也较多，而中药，特别是退热草药，在有效控制发烧方面拥有完善的临床历史，在解热抗炎方面有独特的理论，且毒副作用较小。然而，其功效背后的具体机制仍不清楚。[/size] [size=14px]对24种常用解热中药进行了系统筛选，发现发挥解热作用的关键药效成分，并采用化学生物学方法对其靶点机制进行了探究，研究发现含有α,β-不饱和醛药效团的挥发油成分，如肉桂中的桂皮醛、柴胡中的2,4-癸二烯醛、紫苏中的紫苏醛等通过与mPGES1-TM4螺旋（mPGES1-TM4）中的Ser139残基发生不可逆结合，共价调节mPGES1活性，有效抑制花生四烯酸代谢途径中前列腺素E2（PGE2，炎症因子引起发热的最终介质）的产生，从而发挥解热作用，为诠释辛温解表的科学内涵提供了一种新的见解，具有广阔的应用前景。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1. 对常用解热中药进行筛选，发现挥发油成分中含有α,β-不饱和醛酮的桂皮醛（CA）、紫苏醛（PA）、6-姜烯酚（SOL）和2，4-癸二烯醛（DAL）是发挥解热作用的关键药效成分。[/size] [size=14px]2. 含有α,β-不饱和醛药效团的化合物可共价结合mPGES1-TM4的 Ser139残基，抑制脑血管内皮细胞中PGE2的合成，从而发挥解热作用。[/size] [size=14px]3. 在AA-PGE2脂质代谢通路中，选择性抑制下游的mPGES1活性，有效减缓PGE2的过表达，可避免PGH2下游PGF2和PGD2，以及LOX下游12-HETE等炎性物质引发的毒副作用。[/size] [size=14px]二、研究结果[/size] [size=14px]1、含有α,β-不饱和基团的单体化合物抑制PGE2的产生[/size] [size=14px]鉴于PGE2是发热的主要介质，作者在RAW 264.7细胞中研究了24种常用解热草药提取物对 PGE2 表达的抑制作用，进行PGE2拮抗活性筛选，发现桂枝、紫苏叶、生姜和柴胡对LPS诱导的PGE2 产生具有显著的抑制作用。为了进一步研究其功效，评估了上述提取物的不同极性层对PGE2表达的影响，发现挥发油的成分可显著减弱LPS诱导的PGE2表达。此外，四种主要成分（均有的α,β-不饱和醛结构为关键药效团），肉桂醛（CA）、紫苏醛（PA）、6-姜烯酚（SOL）和2,4-癸二烯醛（DAL），均源自这些草药来源的相应挥发油，可有效缓解LPS 热成像证实了体内诱导的高热。然而，缺乏α，β-不饱和基团的相应成分PPA、PAR、POL和DL并不影响PGE2表达。结果表明，α,β-不饱和基团可能在对抗 LPS 引起的发热方面发挥着至关重要的作用（图1）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图1 含有α,β-不饱和基团的单体化合物抑制PGE2的产生[/size] [size=14px]2、mPGES1 被确定为CA的潜在靶点[/size] [size=14px]肉桂醛（CA）作为肉桂挥发油的主要成分，因其优异的解热作用而被选择进行进一步研究，比较分析涉及肉桂酸（CAC）、肉桂醇（CALC）和苯甲基丙酮（BA）作为对照，其中α,β-不饱和醛基被修饰为羧基、羟基和酮基。只有CA和标记炔基的CA探针具有抑制PGE2表达的能力，表明α,β-不饱和醛基在发挥其解热活性方面发挥着关键作用。然后利用CA探针开展pulldown进行靶点筛选，将来自人类基因数据库的所有与退热过程相关的蛋白质以及捕获鉴定的蛋白质取交集得到四个潜在靶点（mPGES1、ANXA5、C1qBP和TRIM28），其中只有mPGES1与AA-PGE2途径相关。随后，mPGES1 被假设为潜在靶点，并通过蛋白质印迹得到证实。此外，CA探针捕获表明CA与PTGS2和COX2均没有相互作用，而这两种酶是 AA-PGE2 途径中的关键酶。共定位测试结果表明CA探针在RAW 264.7细胞中与mPGES1强烈融合，而敲除mPGES1会导致在mPGES1沉默的细胞中观察到减弱的合并黄色，表明mPGES1是CA解热的靶蛋白之一（图2）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图2 mPGES1 被确定为CA的潜在靶点[/size] [size=14px]3、α,β-不饱和醛作为关键药效基团[/size] [size=14px]为了证实α,β-不饱和醛作为抑制PGE2活性的关键药效团的重要性，选择另一种解热化合物2,4-癸二烯醛（DAL）来验证其构效关系。研究设计了α,β-不饱和双键还原类似物（DL）和DAL探针，DAL和DAL探针都通过抑制LPS诱导的 PGE2 表达表现出生物等效性，而DL则没有表现出这种抑制作用，同样使用SDS-PAGE和蛋白质印迹验证了DAL探针在AA-PGE2途径中捕获的蛋白质，这表明mPGES1可能是DAL的目标。与DAL探针预孵育后，凝胶成像分析显示DAL探针明显与mPGES1形成共价键。此外，共定位测试表明DAL探针与mPGES1在 RAW 264.7 细胞的细胞质中成功共定位。最后，CETSA证实CA或DAL与mPGES1的共价结合显著增强了其热稳定性。这些发现共同表明α,β-不饱和醛基在特异性靶向 mPGES1 发挥解热作用方面发挥着至关重要的作用（图3）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图3 α,β-不饱和醛作为关键药效基团[/size] [size=14px]4、CA和DAL 与mPGES 1-TM4 Ser139处共价键合[/size] [size=14px]mPGES1的亚基形成同源三聚体结构，由三个跨膜螺旋（TM1：Pro11–Lys41、TM2：Ser61–Ser90 和 TM3：Pro96–Gly119）组成，并具有额外的TM4螺旋跨残基（Pro124–His151）以完成四个跨膜螺旋结构。分子对接表明 CA 或 DAL 的 α, β-不饱和醛基与TM4中 Ser139 的羟基形成不可逆的结合。为了验证分子对接的预测，将CA或DAL与mPGES1蛋白的TM4 螺旋跨越残基一起孵育，并使用蛋白质谱解析鉴定结合产物，发现mPGES1中Ser139被CA标记，也能被也被 DAL 标记。此外，mPGES1-TM4 与其他解热分子PA和 SOL之间也存在不可逆键合。总之，只有α,β-不饱和醛基具有与mPGES1-TM4中的Ser139共价结合的能力（图4）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图4 CA和DAL与 mPGES 1-TM4 Ser139 处共价键合[/size] [size=14px]5、CA特异性结合mPGES1的Ser139以抑制PGE2的产生[/size] [size=14px]接着作者在HEK 293T细胞中进行mPGES1的敲低/回补。野生型mPGES1表达后，凝胶成像测定显示CA探针具有清晰的标记。然而，在回补 mPGES1-S139G 突变细胞时没有观察到该结果。通过在共定位测定过程中沉默RAW 264.7细胞中的 mPGES1，也证实了一致的发现。此外，观察结果与 mPGES1 抑制测试中 CA 对 PGE2 产生的影响一致。这些发现强烈表明残基 Ser139 是 mPGES1 上 CA 的唯一结合位点。先前的一项研究表明，敲低脑内皮血管系统中的COX2或mPGES1可显著改善LPS引起的小鼠发热，而沉默神经元或骨髓细胞中的COX2不会对小鼠体温产生显著影响。这些发现表明，脑血管内皮细胞合成的PGE2在介导体内发热反应中发挥着关键作用（图5）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图5 CA特异性结合mPGES1的Ser139以抑制PGE2的产生[/size] [size=14px]6、CA和DAL与脑血管系统中的mPGES1结合[/size] [size=14px]为了准确确定CA在脑内皮血管中的定位，将CA探针与分离的大鼠脑血管预孵育，从而实现mPGES1和CA探针之间共定位的可视化。凝胶内成像和蛋白质印迹进一步揭示，与未标记的CA相比，mPGES1与脑血管系统中的CA探针形成共价键。 DAL 探针预孵育组也获得了类似的结果。研究结果表明，α,β-不饱和醛化合物通过与 mPGES1 相互作用，与脑内皮血管系统表现出不可逆的结合（图6）。[/size] [size=14px]7、CA抑制AA-PGE2途径关键代谢物的表达并发挥解热作用[/size] [size=14px]为探讨含α,β-不饱和醛基化合物的体内解热机制，作者建立LPS诱导的SD大鼠发热模型。选择CA作为代表药物，而CAC和CALC作为对照组。使用肛门温度测量来评估对体温的解热作用。值得注意的是，与Mod组相比，CA 显著减弱了体温的变化。然而，CAC 和 CALC 均未表现出对大鼠体温升高有任何明显的抑制作用。随后，利用UPLC-Q-TOF/MS氧化脂质组学对大鼠脑组织中AA 代谢途径的变化进行定量分析，发现LPS刺激后，Mod 组中各种氧化脂质（包括 AA、PGG2、PGH2、PGE2 和 PGD2）的表达水平显著升高，而CA治疗通过调节AA-PGE2途径逆转了大鼠脑组织中AA、PGG2、PGH2和PGE2的上调，但对参与其他代谢途径的氧化脂质的表达没有产生显著影响。结果表明α,β-不饱和醛基靶向mPGES1调节AA-PGE2途径发挥其解热作用（图7）。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]本研究阐明了CA和DAL与脑血管中的mPGES1共价结合的机制，通过抑制AA-PGE2通路并下调脑组织中PGE2的表达发挥解热作用。通过 α,β-不饱和醛靶向 mPGES1-TM4 代表了一种新颖的退热机制，为 mPGES1 抑制剂的开发提供了新的视角（图8）。[/size]

原发性肝癌是全球常见的五大恶性肿瘤之一，占肿瘤致死原因的第3位。全世界每年新发肝癌患者约六十多万，其中一半以上在中国，原因在于我国乙肝患病人数多，丙型肝炎的发病率近年亦有明显的上升趋势，肝癌多在乙肝、丙肝等慢性肝炎后肝硬化的基础上形成，是我国发病率高的一个重要原因。由于处于早中期的肝癌患者无明显的临床表现，不易及时发现，已经发现多数属于中晚期，给肝癌治疗带来较大难度。肝癌当今治疗提倡外科切除、介入栓塞、消融、生物治疗（分子靶向治疗）、免疫治疗等多学科应用、综合治疗方式。而生物技术进步，生物靶向药物（单克隆抗体药物）的研究和应用，一直是肝癌治疗和攻克的新亮点，受到高度重视和关注。生物单抗靶向治疗因作用靶点特异性高、毒性小、副作用相对较小等优点，已成为抗癌领域的重要药物类型，其巨大的市场及前景使得国际大制药公司纷纷投入巨资研制和生产，罗氏、诺华、强生、拜耳、默沙东等均有重要抗体药物上榜，罗氏公司的阿瓦斯汀（贝伐珠单抗）、利妥昔单抗（美罗华）、曲妥珠单抗（赫赛汀）是抗癌单抗的“重磅级炸弹”，2011年销售额分别是58亿美元、66亿美元、48.8亿美元。国内上市用于肝癌治疗的靶向药物有华神生物公司生产的利卡汀（碘美妥昔单抗注射液）。利卡汀是全球首个用于原发性肝细胞肝癌的单抗药物，于2007年上市，已在全国许多医院进行临床应用，资料显示，改善肝癌患者生存质量、延长患者生存期能够使患者获益，靶向性和内照射作用机制是利卡汀的突出特点。

今天做液相，Agilent的仪器，Waters的柱子。由于接头不匹配，就选用了peek的接头，用力拧了一下，没想到200bar的压力也没有泄漏，看来用点力peek接头也能承受一定高压呀。

[color=#DC143C][color=#DC143C]我今天接到了一个催化剂样品，测钌和镧，我用了氢氧化钠＋过氧化钠，融解的很好，进到水里变成了橙黄色的澄清溶液，可是icp测需要用酸性介质，我就用酸来中和，可是却出现了黑色沉淀，当溶液成酸性以后就完全变成了黑色的了，测试结果也严重偏低，所以向大家求助，如何让溶液既是酸性又不会出现沉淀而损失，谢谢！[/color][/color]

[color=#DC143C]我是复旦分析测试中心的，今天接到了一个催化剂样品，测镧和钌，我采用了氢氧化钠＋过氧化钠的碱熔方法，结果溶解的很澄清（橘黄色），可是上icp需要酸性的介质，我就加入了酸来中和，结果就出现了黑色的沉淀，而且当溶液为酸性的时候已经完全变成了不透明的黑色了，过滤后测试，结果严重偏低，我想一定是沉淀惹的祸，可是我又不知道如何来让溶液既变得澄清又是酸性，所以向大家求助，谢谢！[/color]

我是复旦分析测试中心的，今天接到了一个催化剂样品，测镧和钌，我采用了氢氧化钠＋过氧化钠的碱熔方法，结果溶解的的很澄清（橘黄色），可是上icp需要碱性的介质，我就加入了酸来中和，结果就出现了黑色的沉淀，而且当溶液为酸性的时候已经完全变成了不透明的黑色了，过滤后测试，结果严重偏低，我想一定是沉淀惹的祸，可是我又不知道如何来让溶液既变得澄清又是酸性，所以向大家求助，谢谢！

请问：钯、镧的磷酸盐是沉淀吗？我将磷酸二氢胺、钯标准、六水硝酸镧三样改进剂等量混合，结果溶液变浑浊。[em03]

如题:基体改进剂:氯化钯和磷酸二氢铵哪个比较好一点?磷酸二氢铵是生成铵盐,氯化钯基改原理是什么呢?有哪位高人知道能告知一下?

我本人参加工作也有几年了，对于行业内比较著名的扫描电镜也基本上都接触过了，从一开始上研究生开始，就接触FEI也就是现在的赛默飞世尔的扫描电镜，随后学校还有的日立的电镜，马上毕业时候学校又买了蔡司的电镜，（日本电子的电镜倒是没用过，）等到了工作的时候，也操作过一年左右泰斯肯也就是以前捷克的电镜，对于现在比较贵的双束电镜也玩过整整一年多的时间，从一开始刚做科研的样品到现在学生各种各样、千奇百怪的样品都有接触，也分享下我的一些经验，虽然我也知道咱们板块就那么几个人，新的版友确实有限，不过写出来，要是有人能看得到，对别人可能有那么一点点帮助也就够了。 [color=#FF0000]首先，对于一个刚刚接触扫描电镜的人来说，你最应该知道的是你想用这个电镜到底做什么，也就是你的目的。[/color]不论你是本科、硕博士、还是相关的工作人员，当你刚接触一个陌生的仪器，你都应该明白这一点。当你也不知道自己的目的的时候，我们这些帮你操作电镜也就开始背负骂名了。举个栗子：不论你是一个学生，你导师、同学说让你照下电镜，还是你是一个材料研发人员，你对我们说照下电镜，你不说/说不明白目的，我们也真没辙，测试结果给你，你给你领导/导师的回复就是，[color=#330099]这个老师狗屁不是，根本就不会照电镜，balabala。[/color] [color=#FF0000]其次，当你知道你自己的目的的时候，我们这些人期望你能够了解电镜的一些基本常识，也就是电镜能用来做什么。[color=#000000]这一点主要是对于没有接触过电镜的人员，以及部分没学过电镜方面应用的学生来说的，直白的说，也就是你没有电镜方面的基础，我建议这样的人去看看相关的书籍（材料分析方法，扫描电子显微学）等等，了解二次电子像、背散射电子像相关术语等等，论坛里有相关资料。咱们的电镜不能测你的样品好不好，这是个材料结构分析的设备，没那么牛，别一上来就问这种问题，让测试的人为难（看不起你）。90%电镜做不论非固态的样品。磨刀不误砍柴工，这真的很有必要。[color=#330099]千万别和你的导师/导师说：那个XXX不给我做，他怎么怎么的态度不好，balabala。[/color][/color][/color] [color=#FF0000]第三，你要知道你做的材料是什么，当你不知道的时候，把材料的工艺做好吧，剩下的事情交给操作电镜的人。[/color]这种人以刚上研究生的人居多，或者说刚刚开始做科研项目的人居多。当你知道你的材料是什么时候，你也就知道要做什么了，形貌、分布、形态你都知道，用电镜找找就行了。千万别说[color=#330099][color=#FF0000][color=#000000]这样的话[/color][/color][/color]：这不是我的样品。让人家笑话。不是你的还是我的？？？？当你拿到一篇文献的时候，你应该和操作人员说，我这里有没有这样的结构，它是怎么操作完成相应的图像的？而不是说，我按照文献去做的，咋能这样，你给我找！[color=#FF0000][color=#000000]你想成什么就是什么，那你应该去国务院领导全国人民追求幸福去了，就不会做研究了。你没那么牛！直白的说，你科研技术不行！[color=#330099]也别向你的导师/领导说，我按照XX文献做出来了，性能很好，那个谁谁谁根本没拍出来，技术不行balabala。[/color][/color][/color][color=#FF0000][color=#000000] [color=#FF0000]第四，如果可以，请你来亲自操作电镜，好好去学，哪怕只是应付自己毕业。[/color]这一点主要是对研究生来说，工作的研发人员没这个时间来作者事情。花上4-6个小时让专业老师/工程师培训下，再花2-3倍时间来自己练习，先用标样，再到你自己的样品，先基本操作，再进阶操作。可以看看你这个帖子[url=http://bbs.instrument.com.cn/topic/5384696]【第七届原创】扫描电镜操作培训材料系列。[/url]4个小时的学习是最基本的，还有，现在的电镜自动化程度很高，别稍微学会一点就沾沾自喜，之后就不怎么练习了。其实你在培训人员的眼里，根本就啥也不会。。。。[color=#330099]等遇到问题，回去和老师/领导说：我会扫描电镜了，这个老师没好好教balabala。[/color][/color][/color][color=#FF0000][color=#000000] [color=#FF0000]第五，你了解前面四点，你一定要好好准备自己的材料。[/color]这一点主要对于能够较为容易约得到扫描电镜的人来说，部分材料就是因为没好好制备导致没法拍摄的。扫描电镜的样品没那么好制备，你自己糊弄自己，那么结果也就糊弄你！液体等非干燥的东西就别拿出来了，磁性样品问问老师能不能做，粉末样品怎么样才不会损坏电镜，不导电样品是喷金，喷碳，喷pt，怎样分散的好一点，等等。当你约一次样品需要1-2weeks的时候，你就会好好准备自己的样品了。[color=#330099]求求你别和老板说，他没拍好，我们再接着拍几次balabala。[/color][/color][/color] [color=#FF0000] [/color][color=#FF0000]第六，你要知道你所用的电镜的配置，它和文献中/别的单位的电镜的区别。[/color]这个你可以问问操作人员，或者相应工程师。我们的电镜最广泛的用途就是拍照，那么它的放大倍率就是你得知道的，对了解电镜的人来说，应该说出分辨率这个名词，那么电子源的种类你最起码要知道。随着现在电镜越来越智能化，人们往往期待某个电镜在某个领域能够发挥专长。当你想要极限分辨率不用能谱，你最好选择冷场电镜，[color=#330099][color=#FF0000][color=#000000]能谱不准那就用波普，[/color][/color][/color]高分子等不导电样品最好用低真空电镜，特殊环境用环境电镜，EBSD需要较大的束流，低电压被散射电子像成什么像，减速模式会对你材料有什么帮助等等。[color=#330099]你也别说，这个老师/设备技术不行呀，你看同样的东西，那个地方的怎么怎么牛，这个老师多么的low，balabala。[/color][color=#330099][color=#FF0000][color=#000000][/color][/color][/color] [color=#FF0000]最后，每一份付出肯定是有用的，当你能了解上面六点，你也就算是入门了。[/color]

多数删帖理由可以用两个字概括，但是有时候也需要解释得详细一点，及维护论坛 秩序，也能保护版友热情，避免误会。但是20个字的删帖理由实在不够用，我也不会写文言。求求你们把这个限制放宽点儿吧，40个字行不行？不用担心浪费空间，如果能用两个字解决问题，没有版主会费力气啰嗦一大串的。

请问，在使用梅特勒-托立多全自动滴定分析仪中，如何让仪器更好地识别等当点，例如在用盐酸滴定含有BaCO3的Ba(OH)2中，如果让盐酸滴定完Ba(OH)2后即终止，该如何设定参数。

科技日报讯 据物理学家组织网8月13日（北京时间）报道，澳大利亚的研究人员确定一种名为白细胞介素-11的分子，在癌细胞的生长扩散中发挥着重要作用，能够成为抗癌疗法的新靶点。此前研究中，该分子的作用一直被忽视，而今这匹“黑马”极有可能为包括肠癌和胃癌在内的多种癌症带来全新的治疗途径。相关论文在线发表在《癌细胞》杂志网站上。 在肿瘤处于发展过程中时，病灶周围的正常组织会出现发炎状况，并产生许多不同的分子，其中就包括两种相关的蛋白质白细胞介素-11和白细胞介素-6。这些激素样信号分子被统称为细胞因子，被认为是促进癌细胞生长和扩散的重要物质。但前者一直被认为在其中仅起到很小的作用。 然而，澳大利亚沃尔特伊丽莎医学研究所的研究人员特蕾西·帕博斯凯和马提亚斯·恩斯特发现，白细胞介素-11是促进癌细胞生长与扩散最重要的一个细胞因子。通过与澳大利亚墨尔本CSL制药公司的合作，他们发现阻断白细胞介素-11的信号能在胃癌和肠癌模型中使肿瘤停止生长，并使肿瘤收缩。这有望为肠癌和胃癌的治疗带来一种新途径，而这两种癌症也是全球最常见的两种癌症。 帕博斯凯表示：“在考虑促进癌细胞生长发育的细胞因子时，人们往往首先想到白细胞介素-6，而与它非常相似的白细胞介素-11却被人忽视。此次新研究发现，后者实际上才是最主要的致癌因素。” 恩斯特副教授指出，通过阻断细胞因子信号来治疗癌症是一个令人兴奋的新疗法，与现有疗法相比具有许多潜在优势。而CSL制药公司同样看好白细胞介素-11相关药物的前景，其高级副总裁宣称，他们已经开发出一些针对白细胞介素-11受体的候选药物，将有望在胃癌和肠癌的治疗中发挥作用。（记者王小龙） 总编辑圈点 上世纪七十年代，人们曾经乐观地认为，二十年内就能发现癌症的疗法。大家后来才明白，癌细胞的复杂超出了当时的想象。多年研究后，的确也发现不少抑制肿瘤的办法。比如被寄予厚望的新招，就是阻断细胞因子作用，相当于逮捕肿瘤的信号兵。相关药物这几年用于治疗炎症和癌症，无明显副作用，比那些玉石俱焚的猛药更令人放心。目前对肿瘤尚无一针见效的绝招，但“零敲碎打”的效果也很显著了。 《科技日报》（2013-08-14 一版）

[font=宋体][size=15px]发热是多种疾病急性期的主要病理生理反应之一，体温过高可导致脑组织损伤、免疫反应异常等多种不良后果。连翘为连翘科植物连翘的干燥果实，临床上长期用于治疗感冒或流感引起的发热。连翘是双黄连口服液、清热解毒口服液、连翘口服液、银翘解毒颗粒等中药制剂的主要原料。连翘苷（Phllyrin，Phr）是连翘中的主要有效成分,在体内可代谢为连翘皂苷（Phg）、Phg-磺酸盐（Phg-S）和Phg-葡萄糖醛酸（Phg-G）等,具有解热作用，但Phr及其代谢物的解热作用机制尚不明确。[/size][/font] [size=15px][font=宋体]2024年8月22日，南开大学药学院白钢/姜民团队在Phytomedicine上发表了题为“Phillyrin and its metabolites exert antipyretic effects bytargeting the NAD+ binding domain of GAPDH, MDH2 and IDH2”的文章，[/font][/size][font=宋体][size=15px]发现连翘主要药效学成分Phr有显著的解热作用，且Phr的解热作用与其代谢物Phg靶向甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、苹果酸脱氢酶2（MDH2）和异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）结合域，抑制其酶活性。 [size=15px][b]1、Phr对肺炎发热小鼠模型具有抗炎、解热作用[/b][/size][size=15px][b][/b][/size] [font=宋体]作者首先通过鼻内滴注LPS诱导的小鼠肺炎发热模型中验证了Phr的解热作用。结果显示，LPS诱导的小鼠体温明显升高，而阿司匹林和Phr有效地抑制LPS诱导的体温升高。此外，阿司匹林和Phr显著增强了发热小鼠肝脏温敏探针的荧光强度（荧光强度与温度成反比），表明阿司匹林和Phr减少了发热状态下的肝脏产热。作者还发现Phr和阿司匹林在LPS诱导的肺炎发热模型中显示出较强的抗炎作用，表现为炎症细胞浸润减少，肺损伤评分降低，肺系数和肺W/D重量比增加。这些结果表明Phr在体内具有显著的解热和抗炎作用。[/font] [/size][/font][align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]2[/font][font=宋体]、Phr的解热作用可能与其主要代谢产物Phg作用于GAPDH、IDH2和MDH2有关[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者发现Phr在体内主要代谢为Phg、Phg-s和Phg-g。通过使用线粒体温敏探针分析了Phr及其代谢物对细胞线粒体温度的影响，证实Phr及其代谢产物在一定浓度下有效地抑制了线粒体温度，但是0.1μM Phg仍对线粒体温度有显著的抑制作用，而相同浓度的Phg-s和Phg-g均无抑制作用，提示Phg可能是Phr发挥解热作用的主要活性形式。[/size][/font] [font=宋体][size=15px]为了鉴定Phr体内解热作用的靶蛋白，作者合成了Phr的主要活性解热代谢产物Phg的炔基探针，通过Pulldown+MS初步鉴定出47个蛋白质为Phg的潜在靶点，鉴于能量代谢是体内产热的主要途径之一，进一步对捕获的蛋白质和能量代谢相关基因进行交集，发现其中GAPDH、MDH2、IDH2蛋白与能量代谢相关。通过WB、细胞共定位分析、竞争分析验证了Phg与三个靶蛋白的结合。综上所述，Phg是Phr发挥解热作用的主要活性形式，其解热作用可能与Phg靶向GAPDH、MDH2和IDH2蛋白，进一步调节能量代谢，影响产热有关。[/size][/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]3[/font][font=宋体]、Rossmann折叠被确定为Phg靶向GAPDH, IDH2和MDH2的结合口袋[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]为了确定Phg与GAPDH, IDH2和MDH2的结合机制，作者从蛋白质的结构-功能分析开始，并使用目标蛋白的天然底物和配体干扰目标蛋白被Phg捕获。结果显示，NAD+依赖的GAPDH、MDH2、IDH2酶活性测定表明，Phg竞争性抑制了参与NAD+的GAPDH、MDH2、IDH2酶活性，并通过分子对接分析了结合模式。GAPDH, MDH2和IDH2是核苷酸结合酶，它们的蛋白质结构包含辅酶NAD+结合口袋，称为Rossmann折叠。因此，作者推测Phg可能与NAD+竞争，与这些靶蛋白的Rossmann折叠结合，从而抑制其活性。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]4[/font][font=宋体]、Phg非共价结合于GAPDH的Asp35和Asn316残基，并竞争性占据NAD+的Rosmann折叠结构域[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]Rossmann折叠由两个重复的β-α-β-α-β拓扑结构组成，NAD+和Rossmann折叠中的氨基酸残基之间的氢键相互作用诱导GAPDH的构象变化。为了进一步验证Phg与NAD+竞争结合靶蛋白的Rossmann折叠的假设，作者以GAPDH蛋白为例，对比分析了NAD+和Phg与GAPDH蛋白的相互作用。通过圆二色谱实验、FQ实验、SPR分析、分子对接分析、fit实验、蛋白点突变实验证实Phg通过结合GAPDH的rosman折叠中的Asp35和Asn316残基，竞争性地抑制了NAD+与GAPDH的结合，从而抑制了目标蛋白的酶活性。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]5[/font][font=宋体]、Phg通过靶向GAPDH、MDH2和IDH2影响细胞能量代谢[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者进一步研究了Phg对GAPDH, MDH2和IDH2酶活性的影响，发现Phg抑制了细胞中三种酶的活性。GAPDH、MDH2和IDH2参与了能量代谢途径中TCA过程。因此，作者通过代谢组学检测了phg对TCA代谢的影响，发现相关代谢物显著变化，进一步结合线粒体应激实验证实Phg靶向GAPDH、MDH2和IDH2来抑制TCA和OXPHOS过程，从而减少线粒体的能量和产热。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]6[/font][font=宋体]、Phr通过作用于GAPDH、MDH2和IDH2发挥体内解热和抗炎作用[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者进一步验证Phr的体内解热抗炎作用是否与GAPDH、MDH2、IDH2的靶向作用有关。酶活性检测显示，肺炎发热模型小鼠血清中GAPDH、MDH2和IDH2的酶活性显著升高，而Phr显著抑制了这三种蛋白酶活性的升高。此外，模型小鼠血清中由这三种蛋白调节的NAD+/NADH比值显著降低，ATP含量显著升高，而Phr有效地逆转了这两项指标的变化。这些结果表明，Phr对肺炎发热模型小鼠的体内解热作用与其主要代谢产物Phg密切相关，Phg靶向作用于GAPDH、MDH2和IDH2，影响能量代谢通路。[/size][/font] [font=宋体][size=15px]作者进一步阐明了Phr在肺炎发热小鼠模型中的抗炎机制。免疫荧光定位分析显示，Phg特异性靶向肺炎热小鼠肺组织中的肺巨噬细胞，提示巨噬细胞可能是其在体内发挥抗炎作用的靶细胞。。除参与能量代谢途径外，作者发现GAPDH还可通过多种途径直接或间接影响TNF-α、il-1β、IL-6等炎症因子的产生，并与其酶活性呈正相关。提示Phr在肺炎小鼠体内的抗炎作用可能与其代谢产物Phg特异性靶向肺巨噬细胞中GAPDH，抑制其酶活性，从而抑制相关炎症因子的产生有关。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]7[/font][font=宋体]、Phg和Phg-s是Phr在体内作用于GAPDH、MDH2和IDH2的主要活性形式[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]由于Phg-S和Phg-G也是Phr在体内的主要代谢产物，作者进一步通过体外蛋白-分子相互作用实验验证它们是否也能靶向GAPDH、MDH2和IDH2。通过SPR证实Phr及其代谢产物与3种蛋白的结合顺序为PhgPhg-sPhr,Phg-g未与3种蛋白中的任何一种结合。FTS检测结果显示Phr及其代谢产物提高了GAPDH、MDH2和IDH2的热稳定性，Phg和Phg-s的作用比Phr和Phg更强。体外酶活性检测显示，Phg和Phg-s对GAPDH、MDH2和IDH2的酶活性有明显的抑制作用，而Phr和Phg-g对这3种蛋白的酶活性没有抑制作用。结果表明Phg和Phg-s可能是Phr在体内靶向GAPDH, MDH2和IDH2的主要活性形式。[/size][/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]总结[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]研究阐明了调节能量代谢可通过减少能量供应和调节发热相关炎症因子发挥解热作用，发现连翘主要药效学成分Phr的解热作用与其代谢产物Phg和Phg-s有关，Phg和Phg-s作用于GAPDH、IDH2和MDH2的NAD+结合域，从而抑制酶活性和能量代谢。本研究为改善发热的治疗提供了新的视角。主要内容如下：[/size][/font] [font=宋体][size=15px]Phr在脂多糖诱发的发热小鼠模型中表现出明显的解热和抗炎作用。Phg可逆性靶向甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH)、苹果酸脱氢酶 2 (MDH2) 和异柠檬酸脱氢酶 2 (IDH2) 的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+)结合域，抑制其酶活性。对细胞代谢组学和线粒体应激测试的深入分析表明，Phg抑制 GAPDH、MDH2 和 IDH2 酶活性导致糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化信号通路调节的细胞能量供应和产热减少。此外，Phg特异性靶向巨噬细胞，通过下调GAPDH酶活性抑制 LPS 诱导的巨噬细胞活化，从而发挥抗炎作用。体内实验也证实，Phr在LPS诱导的发热模型小鼠中的解热作用与其主要代谢产物Phg和Phg-磺酸盐（Phg-S）有关，它们直接靶向作用于GAPDH、IDH2、MDH2的NAD +结合域，抑制这些酶的活性，从而减少能量供应，调节发热相关的炎症因子。[/size][/font][font=宋体][size=15px]连翘苷(Phr)的解热机制与其主要代谢产物连翘苷(Phlygenin)靶向作用于GAPDH、MDH2和IDH2的NAD+结合域，减少能量供应，调节发热相关炎症因子有关。[/size][/font]

序号：1.作者：Haywood, J., N. Pham, etal. (2012). 文章名：Retrospectivecase-controlled analysis to determine the risk factors associated with thedevelopment of catheter-associated urinary tract infections (CA-UTI) in criticallyill children.期刊：Critical CareMedicine 40(12): 215.全文链接：http://journals.lww.com/ccmjournal/Abstract/2012/12001/856___RETROSPECTIVE_CASE_CONTROLLED_ANALYSIS_TO.818.aspx序号：2.作者：Heidari Bateni, Z., I.Khosropanah, et al. (2012). 文章名：Evaluation of the riskfactors of the catheter associated lower urinary tract infection in neurologicpatients.期刊：European Urology, Supplements 11(4):169-170.全文链接：序号：3.作者：Hrubinova, J., M.Hrubina, et al. (2012). 文章名：Urethral catheter as arisk factor of urologic complications after total knee arthoplasty--theretrospective analysis期刊：Rozhl Chir 91(1): 12-17.全文链接：http://europepmc.org/abstract/MED/22746073序号：4.作者：Lanzafame, P., P.Dallape, et al. (2009). 文章名：Catheter-associatedurinary tract infections in a geriatric ward.期刊：ClinicalMicrobiology and Infection 15((LanzafameP.; Dallape P.; Scartezzini L.; Monterosso M.; Caola I.; Baldantoni E.) Trento,Italy): S162.全文链接：序号：5. 作者：Liu, D., P. Chen, et al.(2007). 文章名：Prospective cohort studyof catheter-associated urinary tract infections.期刊：Chinese Journal of Infection and Chemotherapy7(6): 432-434.全文链接：