方法验证

寻求改进质量和提高效率的药品生产商对使用Sievers® 总有机碳（TOC）分析仪进行清洁验证的兴趣越来越浓。大多数制药或生物科技厂家目前都配有TOC分析仪以符合美国药典USP、中国药典ChP的水检测要求，以放行纯化水或注射用水用于清洁或生产过程。因此，大多数厂家已经拥有用于清洁验证的TOC测定方法。TOC是FDA认可的一种方法①，用于评估所给样品中所有含碳的化合物，以确保所有设备的清洁都符合所建立的清洁标准。TOC分析允许开发一种方法，用于检测由化合物、分析物或残留物通过直接（擦拭）或间接（冲洗）取样而形成的碳浓度。潜在目标残留物包括药物活性成分（API）、药品赋形剂、蛋白质、蛋白质副产品和清洁剂或成分。1996年，国际协调会议（ICH）在FDA（CDER & CBER②）的协助下，创建了指导文件《Q2B：分析步骤的验证》。该文档的目的是为制药公司如何考虑清洁验证分析程序的各种验证特征提供参考。本文提供了与下列参数相关的多个实例，这些实例均与TOC方法验证有关，因而此应用说明呼应了Q2B指导文件：检出限和定量限确定分析物的准确度和精确度线性和回收百分比分析方法的稳固性③检出限和定量限检出限（LOD）用于评估何时信号是仪器噪音的结果还是化合物的反应。LOD被视为样本中分析物的最低检测量，但没有必要的足够的统计确定性来定量。定量限（LOQ）是对数据有意义还是无意义提供指导而建立的值。低于LOQ的仪器反应表示存在有机物，但无法定量实际浓度。分析仪中的读数高于已建立的LOQ则被视为可定量或有意义的数据。为了确定背景TOC的浓度并推导出用于清洁验证方案的LOD和LOQ，必须准备低TOC的水空白或棉签空白（如果适用）来计算实验中水和小瓶的碳成分。一旦已经从这些样本中确定了标准偏差，则通常是将标准偏差分别乘以3和10来获得LOD和LOQ④。确定分析物的准确度和精确度了解TOC分析方法验证中准确度和精确度的区别非常重要。准确度与测得值和分析物的真实值的接近程度相关。通常，准确度是计算仪器验证时测得的标准品的TOC浓度与预期的标准品TOC浓度的差值百分比（即+7%）所得。精确度通过标准偏差或RSD（相对标准偏差）度量。精确度与所给样本的多个分析结果相互之间的接近程度相关。在TOC方法验证期间，通过分析加了（添加）已知浓度的目标残留物的样品可以测定准确度和精确度，并可以评定差值百分比和RSD。ICH文件推荐至少在三个浓度级别上至少进行九次测定来评估准确度和精确度，这三个浓度级别涵盖了仪器的指定范围⑤。线性和回收百分比验证通常，线性测试校验仪器反应值是否与所研究分析物的浓度具有线性关系。图1演示了TOC浓度范围从1.00 ppm到7.50 ppm，牛血清白蛋白（BSA）的线性关系，其中含低TOC水的小瓶中加了已知浓度的BSA。这个例子演示了理论浓度（x轴）对所测得的浓度（y轴）作图所得到的两者之间的线性关系，y=(m)x+b。分析仪的反应值与所研究化合物的相关系数（R² ）应大于0.97。图1. 数据使用Sievers实验室TOC分析仪获得为了确定TOC方法用于分析目标残留物的适用性，有必要确定分析方法可达到的回收率。以下例子使用CIP-100制备已知TOC度的溶液，并将已知量的样本放到不锈钢片上，演示了直接取样方法。在BSA的例子中，在不锈钢片上添加三个递增浓度的CIP-100清洁液，擦拭不锈钢片，然后将此棉签放到已知量的低TOC水中。表1提供了从不锈钢片表面获得的回收百分比结果。分析方法的稳固性与实际回收率同样重要的是，用于确定所研究化合物回收百分比的TOC分析方法的重现性或稳健性。在清洁验证方法开发中稳固性是指结果不受方法中参数、或样本之间的小而微妙的变化的影响的能力。还提供了正常使用期间的可靠性指示（例如各个分析员的取样方法）。若希望得到高回收率，回收率一直保持可重复性也同等重要或更为重要，并在整个方法开发期间一直需要对回收率进行检测。表1和表2提供了CIP-100棉签回收率分析信息，由两个不同的分析员测试样本间的变化。要考虑的最后几点评估制药产品质量水平的测试步骤要遵从各项要求。具体到清洁验证来说，当前的药品生产质量管理规范［21 CFR 211.194(a)] 要求，用于评估药品是否符合已建立规范的测试方法必须满足准确度和可靠性的合适标准⑦。同时考虑到分析方法的验证是通过实验室研究建立的过程，本应用说明中说明的（TOC）方法的性能特征满足计划进行的分析应用的某些要求，例如符合药典的水排放和清洁验证。参考文献FDA网站：www.fda.gov/cder/guidance/cGMPs/equipmenthtm。药品评估与研究中心（CDER）和生物制品评估和研究中心（CBER)。Guidance for industry Q2B: Validation of Analytical Procedures. Methodology. November 1996. ICH, FDA, CDER, CBER.Taylor, John K. Quality Assurance of Chemical Measurements. Lewis Publishers imprint of CRC Press 1987.USP Validation of Compendial Methods.The Swab Recovery Determination of CIP-100 in Solutions by TOC Analysis Using a Sievers TOC Analyzer, Steris Corporation Analytical Method 1993. 7. 21 CFR 211.194(a) Laboratory Records.21 CFR 211.194(a) Laboratory Records.◆ ◆ ◆联系我们，了解更多！

美国食品药品管理局（FDA）及相关的国际组织，致力于制定长期法规，服务大众，确保药品的效力、一致性和纯度。《当前优良操作规范（current Good Manufacturing Practices，cGMPs）》中的法规条例要求生产商按照详细的过程和规范，来确保产品质量和安全¹。长久以来，制药行业设计清洁验证程序时，都围绕来源于HPLC数据的主观的限值和不切实际的回收率测试。实际上，很多淋洗样品都只是达到药典对于产品放行的规定，而非设备放行规定。本文旨在启发读者，重新思考目前清洁验证中使用的分析方法，并质疑是否在合适的应用中使用了合适的方法。01当前阶段过去几十年，其他行业已开始陆续使用因技术发展而产生的过程质控战略，事实证明其更高效、更有效。但制药行业却因为各种原因对于这一改进战略的采纳十分缓慢，其中，过程分析技术（PAT）的监管不确定性就是原因之一。另外，之前对于清洁过程验证的检查指南（1993）被USFDA以外的监察机构，指导性机构（ICH，PIC/s）所广泛采用，用于指导客户使用一个简单框架或生命周期法来进行清洁过程的验证。然而，最近业内和监管者同时注意到，使用TOC方法能实现质量的提升和成本的控制，很多制药企业开始采用非专属性方法进行实时放行，以及清洁过程控制和生产设备放行。指导文件，如FDA PAT文档所描述的，及FDA 2011年《过程验证指南》，提供了如何使用非专属性方法，以符合cGMP关键的中清洁应用的框架。02期望阶段总有机碳（TOC）是一种关键质量属性（CQA，Critical Quality Attribute），是检测清洁的关键过程参数（CPP，Critical Process Parameters）的众多手段之一。依靠定期实验室淋洗或棉签取样的专属性方法（例如HPLC），与使用已确认、经方法验证并在清洁验证生命周期的各关键步骤使用TOC仪相比较，前者相对效率低且不可靠。但是，这种TOC的应用只能与清洁相关的过程验证生命周期方法配合使用。在这一应用中每个阶段都可能影响TOC值。例如，用户需要了解潜在的使用TOC时所需的各种因素，及其对分析方法产生的影响。03未来阶段要注意到，大部分的药典方法都不是专门为确认持续过程的分析仪，而预定或设计的。法规的指南建议用户可考虑将TOC方法作为清洁验证或确认的测试方法的一种“可替代的分析方法”。¹简单来说，用户有责任通过规定的方法与工艺验证过程，对其预定的用途，建立分析仪的适用性。除了为清洁过程验证所使用的方法建立系统适用性，在清洁验证生命周期中还有其他重要步骤需要考虑，以确保TOC符合cGMP、质量专章与行业指导文件。步骤如下：设计▲生产设备的目标用途▲清洁剂和最差情况的化合物▲对生产设备的TOC取样（棉签或淋洗法）▲回收率百分比研究▲验收限值或标准（风险评估和工艺产能）▲其他验证方法（ICH Q2 R1）确认（生产设备）▲生产设备的TOC取样（棉签或淋洗法）持续确效▲生产设备的TOC取样（棉签或淋洗法）04采取行动如之前所述，越来越多公司正在使用TOC分析进行清洁验证，因为它更快、更简便，而且比其他分析方法更经济。TOC方法的样品检测量大，并减少了清洁验证协议实施的时间。即便在生物制药行业经常遇到的化合物难溶于水，或者含大量蛋白质情况下，也依旧有效，尽管如果清洁过程的设计是有效的话，这些化合物不应该存在。另外，FDA在检测污染物残留的规章指南中，已经接受了TOC方法。很简单地就可以断定，在清洁验证的生命周期中，多种化合物必然需要多种分析测试。在多种测试中，某些意料之外的杂质或清洁剂可能会被忽略，又或者在色谱法分析中出现未知峰。TOC能测出多种目标化合物，因为它是一种非专属性方法。然而，遵循以下步骤，以确保成功的转换及正确应用的实施还是非常重要的：分析仪器的确认分析仪器确认是一个过程，确保对特定测试使用分析方法是能符合目标用途的。根据cGMP规定，“企业所使用的检测方法的准确度，灵敏度（检测限），专属性和重现性（精确度）必须确立并有文件证明。”²在这种情况下用TOC法进行清洁过程验证的测试之前，对分析仪器进行严格的确认就尤为重要。此方法包括由USP所建议的安装确认、运行确认和性能确认（IQ/OQ/PQ）。方法和过程验证清洁验证的TOC实施方案通常由四个关键部分组成，以确保有效、高效地转换为用TOC分析进行清洁过程验证。回收率（可行性）测试回收率测试或者可行性测试常被作为建议方法，以确定分析物是否适用TOC方法。通常，这种研究只要确定在工艺物料流中，哪种化合物是最难从设备表面清除的。这一研究的目的是为了论证，设备表面或水溶液中，目标化合物的回收率。研究应该在可控条件下的实验室进行，但应尽可能反映制药生产中清洁过程的真实情况。方法验证和取样灵敏度测定模板规定指出，制药或生物制药企业必须有文件记录的程序，包含一系列额外进行的对清洁过程方法验证的测试。这些协议用于证明一个系统或过程（常见或特殊的），能在可靠的方式及控制中实现其目标用途，生产出的产品能持续满足之前确定的规格。这些规范采用了ICH Q2（R1）中提及的验证特性，包括线性、准确度和精确度。此外，基于直接与间接取样技术确定灵敏度，是最好的操作。³设备性能确认通常，所有制药处理设备、管路、连接器、玻璃器皿和备件的自动或手动清洗顺序，都按照同样的工艺流程，即在最后的淋洗步骤时采样，并使用经验证的分析方法进行分析。这个步骤通常会包括TOC、电导率、内毒素、微生物限度和pH。其他用于设备性能确认的分析包括产品专属性试验。然而，TOC仅仅是确认生产设备的众多工具之一。⁴.⁵持续确效（日常监控或产品切换）TOC仅仅是清洁过程的验证状态或产品切换时的日常监控的多种手段之一。也有其他独特的方法，在实验室以外，收集样品，分析TOC，并报告结果或通过/失败标准。若把TOC方法从实验室转换至生产区域，能实时“在使用点”检测，这将是一个有效果且有效率的途径。但是在转换前，必须建立并执行比较性协议。¹参考文献1.FDA网站:www.fda.gov/cder/guidance/cGMPs/equipment.htm#TOC2.“黄金表格(The Gold Sheet).” FDC 报告，March 2005 ◆ ◆联系我们，了解更多！

p 　　长久以来，医药行业设计清洁验证程序时，都围绕来源于HPLC数据的主观的限值和不切实际的回收率测试。实际上，很多淋洗样品都只是达到药典对于产品放行的规定，而非设备放行规定。 /p p 　　这篇应用文章旨在启发读者，重新思考目前清洁验证中使用的分析方法，并质疑是否在合适的应用中使用了合适的方法。 /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201809/uepic/5c696520-9ef4-499d-b55e-f1b513163d9a.jpg" title=" 图1.webp.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　当前阶段 /p p 　　过去的几十年，其他行业已开始陆续使用因技术发展而产生的过程质控战略，事实证明其更高效，更有效。但是医药行业却因为各种原因对于这一改进战略的采纳过于缓慢，其中，过程分析技术(PAT)的监管不确定性就是原因之一。另外，之前对于清洁过程验证的检查指南(1993)被USFDA以外的监察机构，指导性机构(ICH，PIC/s)所广泛采用，用于指导客户使用一个简单框架或生命周期法来进行清洁过程的验证。 /p p 　　然而，最近业内和监管者同时注意到，使用TOC方法能实现质量的提升和成本的控制，很多制药企业开始采用非专属性方法进行实时放行，以及清洁过程控制和生产设备放行。指导文件，如FDA PAT文档所描述的，及FDA 2011年《过程验证指南》，提供了如何使用非专属性方法，以符合cGMP关键的中清洁应用的框架。过程验证指南文档对过程验证生命周期方法的定义如下: /p p style=" text-align: center " 　　期望阶段 /p p 　　总有机碳(TOC)是一种关键质量属性(CQA，Critical Quality Attribute)，是检测清洁的关键过程参数(CPP，Critical Process Parameters)的众多手段之一。依靠定期实验室淋洗或棉签取样的专属性方法(例如HPLC)，与使用已确认、经方法验证并在清洁验证生命周期的各关键步骤使用TOC仪相比较，前者相对效率低且不可靠。 /p p 　　但是，这种TOC的应用只能与清洁相关的过程验证生命周期方法配合使用。在这一应用中每个阶段都可能影响TOC值。例如，用户需要了解潜在的使用TOC时所需的各种因素，及其对分析方法产生的影响。 /p p style=" text-align: center " 　　未来阶段 /p p 　　要注意到，大部分的药典方法都不是专门为确认持续过程的分析仪，而预定或设计的。法规的指南建议用户可考虑将TOC方法作为清洁验证或确认的测试方法的一种“可替代的分析方法”。简单来说，用户有责任通过规定的方法与工艺验证过程，对其预定的用途，建立分析仪的适用性。 /p p 　　除了为清洁过程验证所使用的方法建立系统适用性，在清洁验证生命周期中还有其他重要步骤需要考虑，以确保TOC符合cGMP、质量专章与行业指导文件。步骤如下: /p p style=" text-align: center " 　　 img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201809/uepic/33bfb3cd-aa69-41c1-82db-09fa0ce2a53a.jpg" title=" 图2.webp.jpg" alt=" 图2.webp.jpg" / /p p 　　设计 /p p 　　· 生产设备的目标用途 /p p 　　· 清洁剂和最差情况的化合物 /p p 　　· 对生产设备的 TOC 取样(棉签或淋洗法) /p p 　　· 回收率百分比研究 /p p 　　· 验收限值或标准(风险评估和工艺产能) /p p 　　· 其他验证方法(ICH Q2r1) /p p 　　确认(生产设备) /p p 　　· 生产设备的TOC取样(棉签或淋洗法)持续确效 /p p 　　· 生产设备的TOC取样(棉签或淋洗法) /p p 　　采取行动 /p p 　　如之前所述，越来越多的公司正在使用TOC分析进行清洁验证，因为它更快、更简便，而且比其他分析方法更经济。TOC方法的样品检测量大，并减少了清洁验证协议实施的时间。即便在生物制药行业经常遇到的化合物难溶于水，或者含大量蛋白质情况下，也依旧有效，尽管如果清洁过程的设计是有效的话，这些化合物不应该存在。另外，FDA在检测污染物残留的规章指南中，已经接受了TOC方法。 /p p 　　很简单地就可以断定，在清洁验证的生命周期中，多种化合物必然需要多种分析测试。在多种测试中，某些意料之外的杂质或清洁剂可能会被忽略，又或者在色谱法分析中出现未知峰。TOC能测出多种目标化合物，因为它是一种非专属性方法。然而，遵循以下步骤，以确保成功的转换及正确应用的实施还是非常重要的: /p p 　　分析仪器的确认 /p p 　　分析仪器确认是一个过程，确保对特定测试使用分析方法是能符合目标用途的。根据cGMP规定，“企业所使用的检测方法的准确度，灵敏度(检测限)，专属性和重现性(精确度)必须确立并有文件证明。”² 在这种情况下用TOC法进行清洁过程验证的测试之前，对分析仪器进行严格的确认就尤为重要。此方法包括由USP& lt 1058& gt 所建议的安装确认、运行确认和性能确认(IQ/OQ/PQ)。 !--1058-- /p p 　　方法和过程验证 /p p 　　清洁验证的TOC实施方案通常由四个关键部分组成，以确保有效、高效地转换为用TOC分析进行清洁过程验证。 /p p 　　回收率(可行性)测试 /p p 　　回收率测试或者可行性测试常被作为建议方法，以确定分析物是否适用TOC方法。通常，这种研究只要确定在工艺物料流中，哪种化合物是最难从设备表面清除的。这一研究的目的是为了论证，设备表面或水溶液中，目标化合物的回收率。研究应该在可控条件下的实验室进行，但应尽可能反映制药生产中清洁过程的真实情况。 /p p 　　方法验证和取样灵敏度测定模板 /p p 　　规定指出，制药或生物制药企业必须有文件记录的程序，包含一系列额外进行的对清洁过程方法验证的测试。这些协议用于证明一个系统或过程(常见或特殊的)，能在可靠的方式及控制中实现其目标用途，生产出的产品能持续满足之前确定的规格。这些规范采用了ICH Q2r1中提及的验证特性，包括线性、准确度和精确度。此外，基于直接与间接取样技术确定灵敏度，是最好的操作。 /p p 　　设备性能确认 /p p 　　通常，所有制药处理设备、管路、连接器、玻璃器皿和备件的自动或手动清洗顺序，都按照同样的工艺流程，即在最后的淋洗步骤时采样，并使用经验证的分析方法进行分析。这个步骤通常会包括TOC、电导率、内毒素、微生物限度和pH。其他用于设备性能确认的分析包括产品专属性试验。然而，TOC仅仅是确认生产设备的众多工具之一。 /p p 　　持续确效(日常监控或产品切换) /p p 　　TOC仅仅是清洁过程的验证状态或产品切换时的日常监控的多种手段之一。也有其他独特的方法，在实验室以外，收集样品，分析TOC，并报告结果或通过/失败标准。若把TOC方法从实验室转换至生产区域，能实时“在使用点”检测，这将是一个有效果且有效率的途径。但是在转换前，必须建立并执行比较性协议。 /p

传统上，HPLC一直是药品生产设备残留活性药物成分（API）清洁验证（Cleaning Validation）最常用的定量分析方法。近年来，制药生产商、监管机构和行业偏爱的清洁验证分析方法已经从HPLC改为总有机碳TOC分析方法。这种改变的原因包括但不限于更好地表达了设备生命周期的清洁工艺、降低成本、提高生产力，从而提高利润。对那些采用HPLC方法进行清洁验证的制药生产商而言，接下来的问题是：从HPLC方法改为TOC方法进行清洁验证的最佳实践做法是什么？考虑采用TOC方法开展清洁验证的第一步是研究TOC代替HPLC的可行性。下面是研究采用TOC分析进行清洁验证的可行性时需要考虑的三个主要因素：➤清洁工艺/样品相容性➤清洁限值可接受标准➤产品回收率/溶解性清洁工艺/样品相容性在清洁工艺/样品相容性方面，TOC分析要求采用样品水溶液对TOC进行定量。有机溶剂，如甲醇、乙醇和异丙醇不适合测定TOC。如果现有清洁周期最后清洗时采用水溶液，不含任何有机溶剂，则TOC分析可能是可行的方法。如果现有清洁工艺确实使用有机溶剂，则该工艺在最后是否可以改用水进行清洗？清洁限值可接受标准当制订清洁验证TOC限值可接受标准时，假设的是最糟糕的情况。这意味着假设毒性最大的物质/API，它从前批次产品的最大允许残留（MAC）限值最低，假设清洁样品测定的全部TOC都来自于它。本质上，要适合TOC分析，这种物质的化学式中必须包含一些碳。根据API的MAC限值，可以根据化学式的碳含量，将产品限值转化为TOC限值。TOC方法要成为一种可行的清洁验证方法，这种新确定的TOC MAC限值必须在TOC分析仪的线性动态范围之内。产品回收率/溶解性采用TOC分析开展清洁验证时，关于溶解性的一个常见错误概念是溶解性是限制因素。传统上，不溶或难溶的化合物可以氧化，在低浓度时溶解，或者，必要时，利用温度、搅拌、化学和时间（TACT，temperature, agitation, chemistry, and time）方法对溶液进行预处理。例如，研究已经证明，传统上不溶或难溶的化合物，如布洛芬、阿奇霉素、淀粉和利多卡因几乎不需要对样品进行预处理或不需要进行预处理，就可以采用TOC分析回收，且具有非常出色的线性。一旦确定了可行性，必须开展回收率研究，从而证明HPLC和TOC分析的回收率和线性相当。该工作需要配制最低MAC限值API储备溶液，浓度在前面测定的API TOC限值附近。例如，如果最低MAC限值的API是苯醌（C6H4O2 – 108.09 g/mol），产品限值是10 ppm，考虑根据分子量计算的苯醌碳含量是66.7%，则TOC限值计算值是6.67 ppm。知道这个限值后，回收率研究将挑战6.67 ppm限值以上和以下时HPLC和TOC的回收率和线性。在此实例中，挑战了TOC MAC限值以上和以下HPLC和TOC分析仪的回收率和线性。HPLC和TOC样品的结果如图1所示。从图中可以看出，同一样品TOC分析仪不仅线性优于HPLC分析，而且其回收率更符合要求。根据分析的回收率和线性数据，可以明确判断该API两种分析方法的等效性。如果回收率或线性未通过验收标准，可能必须采用TACT方法对样品进行预处理。图1继回收率研究之后，下一步骤是在HPLC和TOC上同时开展实际清洁样品的桥接研究。无论是淋洗样品还是擦拭样品，都需要在HPLC和TOC仪器上平行运行。由于清洁剂、赋形剂、填料等对TOC的贡献，预期TOC值等于或大于HPLC值。如果清洁样品HPLC和TOC方法都通过验证，则不需要开展其它工作。如果清洁样品HPLC和TOC方法都未通过验证，则必须对清洁工艺进行评估。但是，如果清洁样品通过了HPLC验证但未通过TOC验证怎么办呢？这种情况下最好的做法指南是什么？在HPLC结果通过而TOC结果未通过验收标准的情况下，使用TOC方法对工艺的理解更具有价值。采用HPLC对API定量，将设备放行用于生产，可能遗漏其它来源的残留污染。作为一种产品专属性方法，HPLC可能并不测定这些残留污染。这些残留污染对产品带来不良影响，影响产量、疗效或甚至消费者安全。TOC分析的数据可以表明该设备仍然不干净，从而触发对清洁过程的修改，再次使用TACT方法作为指南来降低残留污染。启动制定现有HPLC仪器和方法的MAC验收标准限值步骤1开展取样、限值和溶解性的可行性研究开展TOC仪器的IQ/OQ/PQ步骤2制定储备水溶液的API TOC MAC限值开展表明HPLC和TOC回收率的桥接研究步骤3准确度、精确度和线性对比确认结果满足验收标准完成实施TOC，更改SOP从HPLC改为TOC方法进行清洁验证时的步骤和最佳做法一旦可行性、回收率和桥接研究都表明使用TOC分析进行清洁验证的效果良好，则可以更改内部标准操作程序，从而反映新的工作流程，将设备放行用于生产。上图总结了从HPLC改为TOC方法进行清洁验证时的步骤和最佳做法。这种新的分析方法的优点包括缩短样品分析时间、降低易耗品成本和提高生产力。原文英文版刊登于《美国实验室》杂志2018年1/2月刊◆ ◆ ◆

5月已到中旬，各位实验室的小伙伴，大家扩项都做到哪一步了呢？今天小编来探讨一个大家都很关心的话题——方法验证，我们以今年刚刚纳入《国抽细则》的GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》为例，梳理验证这个标准的一些关键点。 Q1 什么是方法验证？方法验证一定要制订作业指导书（SOP）吗？方法验证——实验室通过核查，提供客观有效证据证明满足某个方法的要求。 GB 23200.121-2021经过验证后可直接使用，SOP不是必须的。但如果需对标准内给出的参考条件（如仪器参数、色谱柱等，这里不是偏离）稍加修改的话，则可将修改内容制定成SOP，再进行验证。 岛津针对GB 23200.121-2021，已经贴心地为用户整理出SOP，供用户参考。 Q2 GB 23200.121-2021验证可以偏离吗？哪些参数是可以修改的？不可以，国家强制标准的验证是不允许有偏离的。但GB 23200.121-2021中写明是参考条件的可以进行适当优化，如液相色谱参考条件、质谱参考条件。 液相色谱条件的优化准则可参考GB/T 32465-2015中的附录A，如HPLC柱长最大调整值为±70%；色谱柱内径最大可调整值为±25%；pH值可调整范围为±0.2。但需要注意的是，色谱柱填料类型不可变，如反相柱不可改为正相柱。 质谱参考条件的优化可根据各自实验室的仪器型号进行调整，如参考仪器厂家提供的。岛津针对该标准为用户提供全套方法包。 岛津GB 23200.121-2021方法包 Q3 GB 23200.121-2021需要验证哪些参数？一般情况下，应包含（不限于）空白试验、方法定量限（MQL）、线性、准确度（正确度和精密度）、基质效应等。 Q4 GB 23200.121-2021需要验证几种基质？至少4种，GB 23200.121-2021中7.1-7.4将基质分为了4大类，至少需要从这4类各挑选1种作为代表基质进行验证。 Q5 线性范围如何验证？GB 23200.121-2021采用的是基质匹配标准曲线，验证几种基质，就需要几条空白基质标准曲线，按照标准要求选择不少于5个浓度校准点。每个校准点至少以随机顺序重复2次，线性回归方程的相关系数不低于0.99。 Q6 GB 23200.121-2021只有MQL，实验室还需给出方法检出限（MDL）吗？MQL如何验证？新版的GB 23200系列均只给出了MQL，实验室只需按照标准给出的定量限值进行验证即可，MDL不是必需的。 MQL的验证方法有标准偏差法、3倍检出限法等，对于标准已给出MQL的，小编更推荐用回收率法来验证，在空白基质中添加MQL对应的浓度，经前处理后，通过回收率验证，分析结果应在MQL的±20%内。 Q7 准确度如何验证？准确度包含正确度和精密度。 农残项目正确度的验证通常用回收率表征，选择至少2个浓度进行3平行回收率试验。一般推荐——有最大限量（MRL）的农药，可选择MQL浓度和MRL浓度；不得检出的农药，可选择检出限浓度和合适浓度。回收率要求可参考GB/T 27404-2008。 精密度可直接按GB 23200.121-2021中重复性限（r）和再现性限（R）的要求来验证，即两次平行测定的绝对差值，不超过对应的r或R。 梳理完了以上内容，相信大家对GB 23200.121-2021的验证都有了更深理解，配合岛津提供的全方位整体解决方案，相信大家扩项会更加方便快速哦。 【参考标准】GB/T 27417-2017 合格评定化学分析方法确认和验证指南GB/T 32465-2015 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 食品理化检测 内容原创，侵权必究 本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。

各有关单位： 　　随着我国新药研发和生产水平的不断提高，人们对药品质量的日益重视，药物分析也正发挥着越来越重要的作用，它是药品质量保证体系的关键，而药物分析方法的建立和验证是对药品安全、有效、质量可控的充分保证 科学合理地进行论证方案的设计以保证分析方法的科学性、准确性和可行性，从而通过方法验证更加有效的控制药品的内在质量。为进一步提高医药从业人员业务水平，专业技术人才队伍建设，更好地服务于本职工作，促进医药研发机构、生产企业、监督检验、医院、医药院校等单位交流与沟通，全国医药技术市场协会定于2011年11月22日-25日在北京市举办“药物分析方法的建立和验证研讨会”。请各有关单位积极选派人员参加。现将有关事项通知如下： 　　一、会议主要内容 　　1.当代国际化药业药品开发和生产中药物分析的作用和应用 　　2.制药企业分析方法建立的成功或失败的案例和解决方案 　　3.新药开发对分析方法的要求 API生产对分析方法的要求 　　药物制剂生产对分析方法的要求 　　4.药品分析方法验证 　　5.现代色谱技术在药物分析中的应用 　　6.高效液相色谱(HPLC)分析方法验证(包括超高效液相色谱技术) 　　7.稳定性实验设计方法及其分析方法验证 　　8.分析方法对药物稳定性的表征能力 　　9.分析方法的相关性 　　10.分析方法对杂质和颗粒度的监控 　　11.药物中的残留溶剂测定及其分析方法与验证 　　12.生物制品分析方法的验证 　　13.无菌实验方法验证 　　14.药企分析方法验证实例 　　15.药企分析方法验证计划书(protocol)范本 　　16.药企分析方法验证/转移/分析实验室GMP操作SOP实例分析质量控制实验室管理 　　二、参会对象 　　制药企业和新药研究机构的研发人员，各级药品检验所(院)和口岸药品检验所人员，药品生产企业高层技术与质量管理负责人，新药研发CRO实验室人员及高管。各药品安全检测仪器设备研发生产、代理商 各高等院校、科研院所、医疗机构等相关专业人员 　　三、会议说明 　　1、理论讲解,实例分析,模拟审计,互动答疑. 　　2、主讲嘉宾均为药典委委员和行业内资深专家、欢迎来电咨询 　　3、学习结束后由全国医药技术市场协会颁发培训合格证书,可作为医药专业技术人员聘用,晋升,职称评定,继续教育或申报评定资格的重要依据和职业能力考核的重要证明 　　4、本次会议将征集与会议主题和研讨内容有关的论文。来稿应具有科学性、实用性，且论点鲜明、数据可靠、文字精练通顺，文稿请用word文档(A4纸)电子邮件投递至专用信箱，一般文章以3000～5000字为宜。来稿须列出题目、作者姓名、工作单位(全称)、地名(城市)及邮政编码、论文摘要、关键词、正文、主要参考文献。多位作者的署名之间，应用空格隔开。不同工作单位的作者，应在姓名之后标注作者工作单位，并列出工作单位、地名、邮政编码。截稿日期：2011年11月16日 　　四、会议费用 　　非会员单位：1980元/人 会员单位1480元/人(需出示相关证明) 　　(费用含专家费：会务费、资料费、证书等)。食宿统一安排，费用自理。 　　五、联系方式 　　电 话：13121666780 传 真：010-52226422 　　联 系 人：陈海涛 邮 箱:yyxhpx2011@126.com 　　二○一一年十月十日 　　附件一 日 程 安 排 表 11月23日 （星期三） 08:30-11:30 一、高效液相色谱（HPLC）分析方法开发与验证 二、高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）在药物分析中的应用 三．超高效液相色谱技术在药物分析中的应用 主讲人： 中国食品药品检定研究院 相关专家 11月23日 （星期三） 14:00-17:00 现代色谱分析技术在药物分析中的应用 1. 现代色谱分析技术的发展趋势 2. 常用的色谱方法 3．液相色谱溶剂系统优化方法 4. 微流控芯片分析系统 5．样品预处理方法等新方法 6. 色谱技术在各类药物分析中的应用 主讲人： 田颂九 中国药学会药物分析专业委员会名誉主任委员、研究员 11月24日 （星期四） 08:30-11:30 稳定性实验设计方法及其分析方法验证 1.分析方法对药物稳定性的表征能力 2. 分析方法的相关性 3.影响因素试验 4.加速稳定性试验 5.长期稳定性试验 6.对稳定性试验资料的评价 主讲人：杨仲元 广州市药品检验所原所长、广州市药学会副理事长 11月24 （星期四） 14:00-17:00 药物中的残留溶剂测定及其分析方法与验证 1.分析方法对药物稳定性的表征能力 2. 分析方法的相关性3.影响因素试验 4.加速稳定性试验 5.长期稳定性试验 6.对稳定性试验资料的评价 主讲人：周立春 北京市药检所 11月25日 （星期五） 08:30-11:30 一、制药企业分析方法建立的成功或失败的案例和解决方案 二、药企分析方法验证实例 三、药企分析方法验证计划书(protocol)范本 四、药企分析方法验证/转移/分析实验室GMP操作SOP实例分析质量控制实验室管理 主讲人：章新 博士：美国ChamQuest /上海浦融生物科技有限公司总裁；前强生集团全球化药分析部美西总监及美国ALZA公司分析科学总监；上海交通大学兼职教授 11月25日 （星期五） 14:00-17:00 一、当代国际化药业药品开发和生产中药物分析的作用和应用 二、制药企业分析方法建立的成功或失败的案例和解决方案 三、新药开发对分析方法的要求；API生产对分析方法的要求 药物制剂生产对分析方法的要求 主讲人：章新 博士：美国ChamQuest /上海浦融生物科技有限公司总裁；前强生集团全球化药分析部美西总监及美国ALZA公司分析科学总监；上海交通大学兼职教授 备注 1、欢迎来电咨询专家名单； 2、每天除专家报告外，还安排了约1小时的代表发言和提问时间。 3、日程如有变动，以报到时的会议日程为准 　　附件二 　　药物分析方法的建立和验证研讨会回执表 　　因参会名额有限请尽快传真至010-52226422或 yyxhpx2011@126.com陈海涛 单位名称 联系人 地 址 邮 编 姓 名 性别 职务 电 话 传真/E-mail 手 机 住宿是否需要单间：是○ 否○ 是否参加形象展示: 是否参加会议发言：是○ 否○ 是否提交论文： 其它要求： 论文题目： 发言题目: 联系人：陈海涛 电 话：13121666780 邮 箱：yyxhpx2011@126.com 传 真：010-52226422

药物的质量研究与质量标准的制定是药物研发过程的重要研究内容之一，贯穿于研发的整个生命周期。在药物质量研究工作中，分析方法学的开发及验证是其重要的组成部分之一。分析方法开发验证的目的是判断所采用的分析研究方法是否科学、合理，能否有效控制药品的内在质量特性，做到质量可控。本文旨在和大家一起交流溶出度方法学验证内容的一般研究思路，如有存在表述不当之处还请各位批评指正。溶出度方法学验证的步骤主要有：1）初步确定分析方法，UV法或HPLC法；2）制定验证的方案，包括前期文献材料调研、验证目的、验证项目及不同项目验证的可接受标准；3）开始验证工作，积累收集数据及相应图谱；4）对验证的结果进行判断，评价分析方法是否通过验证。溶出度方法学验证的项目与其他分析方法基本一致，常规验证项目包括：专属性、线性及范围、准确度、精密度和耐用性等，方法验证的指导原则可参考中国药典、ICH Q2（A/B）、USP通则、、等。1. 专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、空白辅料等）存在时，采用的分析方法能正确测定出被测物的能力。专属性测定环节，应分别分析加有杂质、降解产物等控制成分的样品和实际样品，比较两组测试结果，结果合格的标准应该为：空白溶剂对主峰的检测无干扰，不超过1%；主成分与有关物质完全分离，分离度r≥1.5；峰纯度符合相应规定。辅料对专属性的干扰：空白辅料是指除了活性成分以外的所有辅料和包衣材料，还包括油墨和胶囊壳。具体操作方法可按处方比例配制空白辅料（含油墨或胶囊壳）的混合样品，将该混合样品溶解或分散在溶出介质中，然后向溶液中加入一定量药物，作为供试品溶液，可接受标准为：辅料（包括胶囊壳等基质）对主峰的检测无干扰，不能超过2.0%。对于溶出实验方法而言，还需要特别注意的一点是：取样时所采用的过滤装置，如滤膜、滤头等，必须要经过药物的吸附验证，防止对测定结果产生一定干扰，这一部分应在溶出方法开发阶段做充分论证研究。2. 线性和范围可取对照品适量，按照标准方法配置一系列浓度的溶液。一般操作是在容量瓶中配成一定浓度的储备液，分别精密移取储备液适量，稀释成系列浓度的溶液，通常至少使用5个浓度点（参见），1225中说明：对原料或成品药（制剂）的含量测定：一般应在测试浓度的80-120%，该范围是应考虑的最小规定范围，若超出此范围，应有正当理由，主要是根据剂型的特点；对于溶出度试验，应为规定范围的±20%，例如如果是控释制剂，规定1h后达到20%，24h达到90%，它的验证范围应为标示量的0-110%。另外，若线性贮备溶液制备过程中为了增加药物的溶解度，可能会用到有机溶剂，除非经过验证外，有机溶剂的量均不得超过总体积的5%（v/v）。例如取头孢克肟对照品55.37mg，置100ml容量瓶中配置为储备液，然后就依次精密移取稀释成一系列梯度浓度，以浓度为纵坐标，相应峰面积为横坐标进行线性回归，结果表明头孢克肟浓度在0.48-477.84μg/ml范围内，进样量在9.34-9337.66ng范围内，进样量与峰面积呈良好线性关系。3. 准确度准确度即回收率实验。回收率试验目的是考察采用拟定方法测定结果与真实值或参考值接近的程度，且应应在规定的线性范围内进行试验。在回收率实验进行之前，USP1092建议：在回收率实验之前，过滤器、滤膜等对药物的吸附要进行全面评估，同时要设法排除由于仪器的玻璃材质部分对样品吸附而对测定结果造成的干扰影响。具体的实验方法包括：在规定范围内，取同一浓度（相当于100%浓度水平）的供试品，用至少6份样品的测定结果进行评价；或考虑设计至少三种不同浓度，每种浓度至少平行配制3份，用至少9份样品的测定结果进行评价，回收率验证的浓度范围一般要求为限度的±20%。两种分析方法的选定应考虑分析的目的和样品的浓度范围。回收率供试样品溶液配制：按处方比例混合的空白辅料+不同浓度的主成分对照品或原料，再按照拟定的质量标准配制溶液，必要时可超声使主成分溶解。配制溶剂尽量与溶出介质体系一致。如果药物溶解性较差，可以将药物溶解在少量有机溶剂（一般不超过5%）中制备储备液，并用溶出介质稀释到最终浓度。可接受标准一般为：各浓度下的平均回收率应在98%-102%之间，相对标准偏差RSD应不大于2.0%。例如取头孢克肟对照品适量各三份，按照100%比例加入空白辅料，加溶出介质振摇溶解，作为50%、75%和100%供试溶液，回收率结果表明其方法回收率良好。4.重复性重复性即在同样的操作条件下，在较短时间间隔内，由同一分析人员测定所得结果的精密度。可在规定浓度范围内，取同一浓度（分析方法拟定的样品测定浓度，相当于100%浓度水平）的供试品，用至少6份样品溶液的测定结果进行评价；或设计至少三种不同浓度，每种浓度分别制备至少三份供试品溶液进行测定，用至少9份样品的测定结果进行评价（浓度设定应考虑样品的浓度范围）。实际实验操作中，可能有几种方法，方法一：取6个单独制剂分别测定溶出度，计算RSD，但该方法测定时受制剂个体差异影响比较大，如果测定结果重复性不好，可能是因为制剂含量差异所导致，用该方法时最好是挑选质量较好，例如含量均匀度较好的片剂进行实验；方法二即取供试品1片（粒），置于一个溶出杯中，按照溶出度方法测定，至规定取样点时去处六份供试液分别测定溶出度计算RSD值。结果接受标准为RSD不超过2.0%。例如取头孢克肟颗粒6袋，按照溶出度方法进行溶出，30min取溶出液滤过，进样计算溶出度，结果表明该溶出测定方法重复性良好。5. 中间精密度中间精密度即在同一实验室内的条件改变，如不同时间、不同分析人员、不同设备等测定结果之间的精密度。研究过程中的典型的变化，包括不同天、不同操作人员和设备。USP1092中建议：可选用同一批次质量特征较好的制剂（如较好的含量均匀度）的溶出试验可以由同一实验室至少两个不同的分析人员进行，每个分析人员制备标准溶液和溶出介质和依据明确的提取和定量步骤进行。通常情况下，分析人员用不同的溶出液、分光光度计或HPLC（包括色谱柱）和自动进样器，在不同天进行试验。可接受标准：USP 1092建议：当该时间点的溶出量小于85%时，两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过10%；当该时间点的溶出量大于85%时，两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过5%。当然，具体的可接受标准可根据特定产品做具体规定。6. 溶液稳定性溶液稳定性考察的具体时间区间可根据不同的项目需求去做不同的考察。稳定性包括对照品溶液稳定性和供试品溶液稳定性。对照品溶液稳定性：取对照品溶液适量，在室温下放置，分别于不同时间点测定吸光度值，计算其RSD值；供试液稳定性：取自制样品适量，用相应介质制备成供试液，在室温下放置，分别于不同设置时间点测定吸光度值，计算其RSD值。对于UV法测定的供试液，一般稳定性做到24小时即可，缓控释制剂可相对延长时间；对于HPLC法测定的供试液，一般需满足一条溶出曲线所有样品测定完全的时间。如果溶液不稳定，还需要考虑温度（需要冷藏）、避光（透明容量瓶+棕色容量瓶）、以及容器材料（塑料或玻璃）等对稳定性结果的影响。可接受标准一般为：取每时间点的吸光度值，计算其RSD，应不大于2%，则说明该溶液在此时间段内的稳定性良好。7. 耐用性耐用性主要评估溶出条件故意做微小改变时对溶出方法耐用性的影响。对于该实验，最好选用具有较好质量特征（如具有较好含量均匀度）的制剂批次进行，排除制剂个体差异对该结果造成的干扰。HPLC法可根据具体情况考虑流动相组分差异、流速、PH值、色谱柱类型、分离温度、波长等变化对测定结果耐用性的影响；UV测定方法可结合不同项目溶出度方法的具体情况对表面活性剂浓度、pH值、溶出介质是否脱气处理、转速、温度、体积、取样时间、不同型号品牌的溶出仪等进行方法的耐用性研究，对比溶出条件的微小变化对产品测定结果的影响。例如若选择的溶出介质是缓冲液介质体系或是含有表面活性剂的介质体系，需要做pH值变化、表面活性剂浓度变化对溶出速度的影响，以确定溶出介质的耐用性。根据品种特点考察耐用性，推荐但不仅限于上述变动条件。8. 溶出均一性溶出均一性试验包括批内均一性和批间均一性。这两项指标既能检验药品本身质量特性是否符合规定，同时也可以检验溶出方法是否满足准确性、精确性良好的要求。批内均一性可取同一批次产品的6或12个剂量单位测定溶出曲线，计算各取样时间点的RSD值。其中，早期的一些取样时间点（如5min），要求RSD≤20%；其他时间点，要求RSD≤10%。批间均一性：取不同批次产品的6或12个剂量单位测定溶出曲线，比较各批次的溶出曲线是否相似。综上，溶出方法验证的一般项目基本如上几项，当然并不局限于该些项目，具体的验证项目及可接受标准可根据产品自身特点所设定。参考文献：[1]. 《中国药典》2020年版四部：分析方法验证指导原则[2]. USP通则、 [3]. 山广志，药物制剂质量研究——方法选择与验证[4]. 胡利敏，杨丽，头孢克肟颗粒溶出曲线方法学验证[J]. 中国抗生素杂志,2017,5(42):373-376.

任何分析检测的目的都是为了获得稳定、可靠和准确的数据，方法验证在其中起着极为重要的作用。方法验证的结果可以用于判断分析结果的质量、可靠性和一致性，这是所有质量管理体系不可分割的一部分。 无论什么方法，在使用之初，一般要求对分析方法进行验证、确认（或称证实）或重新验证，如果是两个实验室之间还涉及到分析方法转移。那么，方法验证、确认和转移究竟有什么区别及联系呢？相信很多小伙伴都是不了解的，即使了解也不能准确的给出具体的答案。不知道的小伙伴有福了，今天咱们就来具体的说说。 （1）法规要求：新版GMP 第二百二十三条 物料和不同生产阶段产品的检验应当至少符合以下要求：（一）企业应当确保药品按照注册批准的方法进行全项检验：（二）符合下列情形之一的，应当对检验方法进行验证：采用新的检验方法；检验方法需要变更；采用《中华人民共和国药典》及其他法定标准未收载的检验方法；法规规定的其他需要验证的检验方法；（三）对不需要进行验证的检验方法，企业应当对检验方法进行确认，以确保检验数据准确、可靠。 （1）法规要求：中国药典（2020年版）凡例检验方法和限度；本版药典正文收载的所有品种，均应按规定的方法进行检验。如采用其他方法，应将该方法与规定的方法做比较试验，根据试验结果掌握使用，但在仲裁时仍以本版药典规定的方法为准。 （1）法规要求：分析方法确定、转移、验证相关指南（2）验证的定义USP：分析方法验证是一个按照已建立的实验室研究来证明方法的性能参数符合期望的分析应用要求的过程；ICH Q2（R1）：分析方法验证的目标是阐明分析方法适用于它所期望的应用目的；FDA工业指南：方法验证是一个阐述分析方法适合于其使用目的的过程；SFDA（验证）：证明任何操作规程（或方法），生产工艺或系统能够达到预期结果的一系列活动；ChP（9109）：证明采用的方法适合于相应检测要求。 （2）确认的定义定义：指评估检验时所依据的药典标准和其他法定标准在各实验室实际使用情况下是否能达到其检验要求的过程。USP/:出现在USP中的方法被认为已验证，如果作为已批准的ANDA（简略新药申请）的一部分，它们也被认为是验证过的。确认不是重复验证过程，不需要验证其准确性和可靠性，但需要确认其在实际使用条件下的适应性。确认包括所设计方法的性能参数，如那些在通则中描述的性能参数。ChP:是指首次使用法定分析方法时，由现有的分析人员对分析方法中关键的验证指标进行有选择性的考察，以证明方法对所分析样品的适用性，同时证明分析人员有能力使用该法定分析方法，分析方法的确认并不是重复验证过程，本指导原则不涉及微生物分析方法的确认。 （2）转移的定义USP：是将非法定方法从一个实验室转移至另一个实验室，即为分析方法转移。是一个按照已建立的实验室研究来证明方法的性能参数符合期望的分析应用的过程。国内ChP:是一个文件记录和试验确认的过程，目的是证明一个实验室（方法接受实验室）在采用另一个实验室（方法建立实验室）建立并经过验证的非法定分析方法检测样品时，该实验室有能力成功操作该方法，检测结果与方法建立实验室检测结果一致。分析方法转移是保证不同实验室之间获得一致，可靠和准确检测结果的一个重要环节，同时也是对实验室检测能力的一个重要评估。应用：通常不适用于法定方法，但可以参考。同时，由于方法的检测目的不同，各方指导原则对于不同检测目的的方法所要求的验证的参数也有所不同，表2中列出了ICH指导原则中规定的不同检验目的需要验证的参数。① 如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。② 视具体情况予以验证。③ 已有重现性验证，不需验证中间精密度。药品分析方法验证、 转移和确认的目的是证明所采用的分析方法适合于相应检测要求和目的，被测样品质量可控，保证得到一致的、可靠的和准确的测定结果，同时也证明检验人员有能力成功地操作分析方法。一个好的分析方法，对于获得准确可靠的检验结果至关重要。

p 　　本文来自书籍Analytical Method Validation and Instrument Performance Verification，作者为Chung Chow Chan, Herman Lam, Y. C. Lee, Xue-Ming Zhang。 /p p 　　本文翻译自： /p p 　　Chaper 4 DISSOLUTION METHOD VALIDATION /p p 　　本文作者： /p p 　　CHUNG CHOW CHAN, PH.D., NEIL PEARSON, AND ANNA REBELO-CAMEIRAO /p p 　　Eli Lilly Canada, Inc. /p p 　　Y. C. LEE, PH.D. /p p 　　Patheon YM, Inc. /p p 　　4.1简介 /p p 　　在药物分析实验室中，溶出测试方法是一种最常见的分析技术，主要应用于口服固体制剂的体外溶出测定。溶出测试可以作为描述制剂特性的方法(如含量、有关物质)的补充。 /p p 　　一个好的溶出测试方法应能提供三个关键方面的信息。 /p p 　　首先，溶出方法应能够检测产品由于理化性质变化引起的药物释放速率或量的变化。这些信息有助于建立批与批(batch-to-batch)生产一致性的质控。 /p p 　　其次，溶出方法应能区分在开发阶段使用不同工艺和/或处方制备的产品。 /p p 　　最后，建立体内-体外相关性后，溶出应能反应人体内药物的释放和吸收速率。 /p p 　　然而，并不是所有药物的溶出方法都能满足以上三个方面的功能。 /p p 　　译者注解：我们假设一种极端情况，如果片剂不能崩解，其中的活性成分不能溶出，即使含量与有关物质均符合规定，那也不会产生应有的药效。因此可以看出溶出度是口服固体制剂的一项关键质量属性，评价它的就是溶出度检测方法。 /p p 　　溶出度检测方法需要能区分影响溶出度的关键工艺参数的变化，例如难溶性API的粒径(或粒径分布)、制粒参数、处方比例等。这些一般在不同批次间都可能存在差异，溶出度方法应能区分这些差异。这就是溶出度方法强调区分力的原因。需要注意的是，这和溶出速度快慢并不是必然的关系。同时溶出度方法也需要对贮存期间样品物理化学性质的变化具有一定的敏感性，例如晶型转变、自身聚集、脱水、吸湿等，如果这种变化可能影响药物释放的话。 /p p 　　质量标准收载的溶出度方法应当满足上述两个要求，不强求需要有体内外相关性，这就是译文中“不是所有药物的溶出方法都能满足以上三个方面的功能”的情况。在研究阶段，会寻找具有体内外相关的溶出条件，但不一定能找到。因为药物在体内产生药效有四个过程，即“溶出、吸收、分布、代谢”，溶出仅仅是其中一个环节，后面的三个环节并不一定与其有良好的对应关系。因此质量标准中制定溶出度方法，更重要的是评价自身批内与批间的质量一致性，不要迷恋体内外相关。 /p p 　　对于一个非药典的产品(如新产品)，尽可能开发一个标准药典溶出方法。在方法开发与验证中，应考虑EP、JP和USP的法规要求。尽管USP通常要求速释制剂(IR)测试单点的溶出度，但对于中等溶解和略溶的药物，在方法开发过程中仍需测定多时间点的溶出数据以更好研究产品的特性。 /p p 　　4.2 章节介绍 /p p 　　本章概述了药物溶出方法验证的一般要求。溶出方法的开发和验证阶段与其他测试方法一样，都不是很明确的。因此，本章有时会论述一些关于开展调查的补充意见。这个讨论是基于小分子药物的方法验证，重点关注制药行业的现行法规要求。因为方法验证贯穿于产品开发过程中的不同阶段，因此本章提供的信息主要适用于根据ICH指导原则准备提交注册申请(如NDA)时进行的最终溶出方法的验证。 /p p 　　溶出方法包括两个步骤：样品制备和样品分析。本章“样品制备”是指样品溶出的过程，包括样品液的收集。从溶出装置收集的样品液可能直接进行分析或需要进一步处理(如稀释)获得最终的样品液。 /p p 　　译者注解：溶出包括两个过程：溶出取样与分析。在做溶出方法验证的时候应对这两个过程都进行相应的验证。目前我们大多将方法验证的重点放在分析这块，忽略了溶出取样过程的验证。 /p p 　　含有新化学实体(NCEs)的固体口服制剂通常制成片剂或胶囊。NCEs后续开发可能会研究其更特殊的药物递送系统。标准的口服片剂或胶囊的溶出方法通常使用桨法或篮法装置。在这章中我们主要关注使用这两种装置进行方法开发和后续的方法验证。 /p p 　　4.3 策略、验证试验和参数 /p p 　　验证要求包括溶出样品制备和样品分析。本章重点讨论溶出方法验证的注意事项。验证是为了评估拟定测试方法的性能。任何成功的验证结果都是一组全面数据，能够支持方法的预期目的。因此，执行一个没有明确计划的验证会遇到许多困难，包括产生不完整的或有缺陷的验证数据。有计划的验证必须包括以下内容：确定需要评估的项目(strategy)、如何评估每个项目(experimental)和预期最低标准(criteria)。强烈推荐准备一个清楚规定实验操作和相应接受标准的验证方案。方法验证必须包括样品制备和样品分析的评估。ICH Q2A(1)提供了溶出方法验证的指导原则，见表4.1。 /p p 　　溶出方法验证要求与含量方法验证是相似的，虽然没有在表4.1中列出，但应该评估方法中不同参数的耐用性(如样品溶液的稳定性)，这些要求详见2.4章节。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/fa4147ef-5d36-4a8c-98d0-87fb334396a6.jpg" title=" 1_副本.jpg" / /p p 　　4.3.1样品制备 /p p 　　通常，溶出介质的体积为500-1000mL，温度保持在37.5± 0.5℃，测试装置(如篮或桨)固定到轴上后，调节至规定的转速。按照药典要求将装置固定到轴上的相对位置上。在溶出过程中，应盖住溶出杯防止溶出介质的蒸发。 /p p 　　当使用篮法装置时，应将样品放在干燥的篮里，篮固定在连接的圆盘上，然后降低至规定的位置，立即开始转动。当使用桨法时，样品应在溶出杯的底部，立即按规定转速开启桨。如果要求使用沉降装置(Sinker)，样品应放在沉降装置中，使其沉于溶出杯底部。在合适的时间点取样，用合适的方法滤过，滤液作为样品溶液。分析样品溶液中的药物，以相对标示量的百分含量表示规定时间的溶出量。 /p p 　　三大药典中关于篮法和桨法装置的要求是相似的，但也有一些不同。这些常见的要求汇总见表4.2。在方法开发时，知道这些差异是很重要的。在溶出装置定期校验时，其中的一些特征指标(如杆的位置，杆的转速变化和桨到溶出杯底部的距离)会作为系统检查。 /p p style=" text-align: center " 　　 strong 表4.2 篮法和桨法溶出装置药典规定 /strong /p table border=" 0" cellpadding=" 0" cellspacing=" 0" width=" 648" align=" center" colgroup col width=" 72" span=" 4" style=" width:54pt" / /colgroup tbody tr height=" 37" style=" height:27.75pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" class=" firstRow" td height=" 27" class=" xl63" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 允许杆转速的变化 /span /td td class=" xl67" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ± 4% /span /td td class=" xl67" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ± 4% /span /td td class=" xl67" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ± 4% /span /td /tr tr height=" 73" style=" height:54.75pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 54" class=" xl65" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 装置底部与溶出杯底部内壁的距离 /span /td td class=" xl68" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 25± 2mm /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 25± 2mm /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 25± 2mm /span /td /tr tr height=" 73" style=" height:54.75pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 54" class=" xl63" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 装置系统测试 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 溶出校正片，崩解型和非崩解型 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 无规定 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 无规定 /span /td /tr tr height=" 42" style=" height:31.5pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 31" class=" xl65" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 溶出介质的温度 /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 37 & nbsp ± 0 span style=" " . /span span style=" " 5 /span span style=" " sup style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ? /sup /span span style=" " C /span /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 37 & nbsp ± 0 span style=" " . /span span style=" " 5 /span span style=" " sup style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ? /sup /span span style=" " C /span /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 37 & nbsp ± 0 span style=" " . /span span style=" " 5 /span span style=" " sup style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" ? /sup /span span style=" " C /span /span /td /tr tr height=" 167" style=" height:125.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 125" class=" xl63" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 加入的溶出介质 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 胃蛋白酶最大 span style=" " 750000 /span span style=" " 单位 /span span style=" " /1000mL /span span style=" " 或胰酶最大 /span span style=" " 10USP /span span style=" " 单位 /span span style=" " /1000mL /span /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 无规定 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 吐温 span style=" " 80 /span span style=" " 最大 /span span style=" " 1% & nbsp w/v /span /span /span /td /tr tr height=" 146" style=" height:109.5pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 109" class=" xl65" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 取样 /span /td td class=" xl66" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 篮或桨叶的上边缘到溶出介质液面的中间位置；离杯壁不小于 span style=" " 1cm /span /span /td td class=" xl66" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 篮或桨叶的上边缘到溶出介质液面的中间位置；离杯壁不小于 span style=" " 1cm /span /span /td td class=" xl66" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 篮或桨叶的上边缘到溶出介质液面的中间位置；离杯壁不小于 span style=" " 1cm /span /span /td /tr tr height=" 91" style=" height:68.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 68" class=" xl63" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 允许沉降装置 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 螺旋金属丝或其他验证过的沉降装置 /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 合适的沉降装置（如螺旋金属丝或玻璃丝） /span /td td class=" xl64" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 固定形状的沉降装置 /span /td /tr tr height=" 19" style=" height:14.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td rowspan=" 4" height=" 296" class=" xl75" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important " width=" 90" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 数据解释 /span /td td class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 6+6+12 /span /td td class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 6 /span /td td class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 6+6 /span /td /tr tr height=" 93" style=" height:69.75pt" td height=" 69" class=" xl70" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" S1& nbsp span style=" " 每片不少于 /span span style=" " Q+5% /span /span /td td class=" xl70" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 6 span style=" " 片都不小于 /span span style=" " Q /span /span /td td class=" xl73" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 前 span style=" " 6 /span span style=" " 片或 /span span style=" " 12 /span span style=" " 片中的 /span span style=" " 10 /span span style=" " 片满足规定的标准 /span /span /td /tr tr height=" 112" style=" height:84.0pt" td height=" 84" class=" xl70" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" S2 & nbsp 12 span style=" " 片（ /span span style=" " S1+S2 /span span style=" " ）的平均值 /span span style=" " ≥Q /span span style=" " ，没有一片小于 /span span style=" " Q-15% /span /span /td td class=" xl71" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" br/ /td td class=" xl71" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" br/ /td /tr tr height=" 171" style=" height:128.25pt" td height=" 128" class=" xl69" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 235" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" S3 & nbsp 24 span style=" " 片（ /span span style=" " S1+S2+S3 /span span style=" " ）的平均 /span span style=" " ≥Q /span span style=" " ，不超过 /span span style=" " 2 /span span style=" " 片小于 /span span style=" " Q-15% /span span style=" " ，没有一片小于 /span span style=" " Q-25% /span /span /td td class=" xl72" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" br/ /td td class=" xl72" style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 161" br/ /td /tr /tbody /table p 　　4.3.2定性溶出方法 /p p 　　通过观察制剂的溶出现象，可以在不进行样品分析时就能很快的发现处方或溶出方法的问题。这在处方开发和方法开发前期是特别有用的，当筛选多个处方或多种溶出介质时应进行考虑。 /p p 　　在方法最初开发阶段，溶出方法的定性评估可以节约大量的时间，某一测试的要求没有满足，可以不进行样品分析。一些可能观察到的剂型性能和相关问题如下： /p p 　　胶囊壳或片剂的包衣开始破裂需要的时间，这提示胶囊壳或包衣可能引起药物延迟释放的问题(如明胶的交联作用) /p p 　　完全崩解需要的时间，暗示剂量单位可能影响活性成分的释放(如过度压制的胶囊粉末或片芯)。 /p p 　　胶囊在特定沉降装置内的行为(如胶囊粘在篮网上)。 /p p 　　在溶出杯内混合的效果。堆积(在溶出杯底部形成一堆不溶性的辅料颗粒)可能需要更高的转速或用不同的装置(用篮法代替桨法)。 /p p 　　介质脱气方法的适用性。溶出过程中的气泡可影响活性成分的释放速度。 /p p 　　表4.3显示胶囊剂的溶出结果。通过一系列实验研究两种沉降装置。当使用不同沉降装置时，通过溶出试验的定性评价比较胶囊的溶出行为。沉降装置B是这个处方的最适宜装置。一旦使用这个最适宜沉降装置重复试验，溶出试验就会显示出良好的低变异性结果。 /p p style=" text-align: center " 　　 strong 表 4.3 溶出15分钟时的观察与分析 /strong /p p /p table border=" 0" cellpadding=" 0" cellspacing=" 0" width=" 648" align=" center" colgroup col width=" 72" span=" 5" style=" width:72px" / /colgroup tbody tr height=" 37" style=" height:37px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" class=" firstRow" td colspan=" 2" height=" 37" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important " span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 胶囊沉降装置（类型 span style=" " A /span span style=" " ） /span /span /td td colspan=" 2" style=" border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important " span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 胶囊沉降装置（类型 span style=" " B /span span style=" " ） /span /span /td td style=" border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 106" br/ /td /tr tr height=" 40" style=" height:40px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 40" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 168" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 序号 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 观察 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 169" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 释放量的 span style=" " RSD% /span /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 观察 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 106" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 释放量的 span style=" " RSD% /span /span /td /tr tr height=" 21" style=" height:21px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 21" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 168" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 169" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1.6 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 106" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 3 /span /td /tr tr height=" 21" style=" height:21px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 21" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 168" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 2 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 169" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1.7 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 106" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1.7 /span /td /tr tr height=" 55" style=" height:55px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 55" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 168" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 3 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 一些明胶交联作用（成膜） /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 169" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 13.9 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 106" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1.3 /span /td /tr tr height=" 55" style=" height:55px max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 55" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 168" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 4 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 102" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 一些明胶交联作用（成膜） /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 169" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 32.1 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" undefined" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 正常崩解 /span /td td style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" undefined" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 1.7 /span /td /tr /tbody /table p /p p 　　4.3.3样品制备过程的验证 /p p 　　应采用不同的方法来验证溶出测试中的样品制备过程。验证的目的是为了证明这个方法是符合其预期目的的。例如，一个策略是，在方法开发时(方法正式验证前)证明不同样品制备方法的有效性。最后的验证将会确认方法开发时所作的工作。方法开发和验证过程遵循的策略取决于分析实验室的文化、专业化程度和策略。 /p p 　　译者注解：方法验证的结果如何，在方法开发阶段已经决定了。方法验证时只是将开发好的方法以数据证明其合理性。这是QbD理念在方法开发验证中的体现，在方法开发阶段对方法进行适当的风险评估，可以大大减少方法验证出问题的可能性。比如溶出取样常见的风险包括：滤膜吸附、API在介质中的稳定性、仪器参数如温度的偏离等。在方法开发阶段进行了相应的验证，就保证了方法验证的顺利完成。当然还有一些未描述的基于对样品了解可能存在的其他风险也需要进行评估。这些理念并不只是用于溶出取样阶段，其他检测方法的开发验证的理念也是相通的。 /p p 　　(1)装置 /p p 　　剂型的性质将决定方法开发和验证时使用的溶出装置的类型。当选择溶出装置时必须了解下面的问题： /p p 　　这是一个胶囊吗? /p p 　　需要使用沉降装置吗? /p p 　　药物在介质中溶出后的稳定性怎么样? /p p 　　是速释还是缓释制剂? /p p 　　这是皮肤贴剂吗? /p p 　　USP溶出装置1(篮法)和2(桨法)通常用于速释制剂。USP装置3(往复筒法)是测试缓释制剂或要求多个pH的溶出曲线和时间点剂型的选择。小剂量的产品可能要求使用流池法分析或小体积测试技术(非药典规定的100、200mL溶出杯)。在方法开发时，一旦装置被选择且证明是合适的，那么在方法验证时就不需要再评估其他的装置。 /p p 　　(2)溶出介质 /p p 　　水、盐酸(0.1N)和不同pH缓冲盐是常用的溶出介质。尽管水是常用的溶出介质，但因为水没有控制pH，应避免使用。水的pH受处方组成(包括活性成分)的影响很大。缺少pH的控制可能导致溶出曲线发生改变。辅料发生变化或因制剂降解而发生的变化可能会导致pH的改变。盐酸(0.1N)常作为溶出介质使用，因为其可以模拟胃的酸性环境。其他溶出介质(如pH4.5或6.8缓冲液)可以用来模拟患者的胃的状态(如空腹或进食)或改善释放曲线特征和/或区分力。对于低溶解性药物，可使用表面活性剂(如吐温80)来改善溶出曲线。 /p p 　　在方法开发和验证时，溶出介质的选择取决于以下因素： /p p 　　药物的溶解性 /p p 　　剂型的性质 /p p 　　药物的化学结构 /p p 　　脱气在溶出方法开发和验证中是很重要的因素，因为它可以影响药物的释放速度。理想情况下，一个方法不应该受脱气方法的影响。至少应证明脱气程度不会显著改变溶出试验的结果。需要注意的是，含有表面活性剂的介质不应被脱气，因为这可能导致过多的气泡产生。 /p p 　　常用的溶出介质脱气方法有三种： /p p 　　(1)真空过滤法 /p p 　　(2)氦气脱气法 /p p 　　(3)加热法 /p p 　　真空通常应用在溶解介质过滤后，滤液持续暴露于真空泵所产生的低真空中(加热或不加热)。真空泵的水压力(例如真空度)可能会影响这种脱气的方法。应该确保有足够的吸力。应该注意暴露的时间。 /p p 　　氦气脱气法常用于去除HPLC流动相中溶解的气体。同样的原理可以用于介质的脱气。应该注意吹氦气的时间，因为它是溶出试验的一个关键参数。 /p p 　　加热是这三种方法中最不常用的溶出介质脱气方式。这种技术中，过滤的介质要加热到37℃以上(达到约90℃)，并不断搅拌使溶解的气体消失。温度和时间间隔是确定脱气程度的重要因素。 /p p 　　通过测定介质中最终的含氧量，可以确定脱气技术是否有效。应在使用介质前进行脱气，以免再溶解气体。然而在使用前脱气，并不是可行的。因此，应该有数据支持使用某种程度上在空气中再暴露介质的结果及可以接受溶解氧的水平。 /p p 　　译者注解：溶出度方法验证很少验证溶出介质的脱气，比如验证脱气的方式和程度。但这并不说明该项一定可以不用研究，如果脱气程度对溶出结果有非常大的影响，则应对脱气进行相应的验证。检测方法涉及的某项操作是否需要验证，取决于该项操作对结果可能产生影响的程度，即风险的高低。方法验证中需要验证的内容，应该是基于我们对方法的了解，基于风险的判断。 /p p 　　(3)转速 /p p 　　在溶出方法的开发和验证中，篮法或桨法的转速是一个重要因素。篮法常用100rpm，桨法常用50rpm。方法验证中，需要确保转速的微小变化不会影响溶出试验结果。药典规定的转速在± 4%内变化，但是方法耐用性应考虑更大的变化(如± 10%) /p p 　　译者注解：耐用性验证的区间应该考虑较大的范围，使方法在不同仪器上都有良好的重现性。不要说仪器已经做了机械性能的验证，就可以不用做相关耐用性验证了。仪器机械性能验证只是说明仪器的机械性能的偏差在允许的范围内，而耐用性是证明这种偏差不会对检测结果产生影响。 /p p 　　(4)样品收集 /p p 　　在方法开发和验证过程中，样品制备需要考虑样品收集的两个方面： /p p 　　(1)从溶出杯中取出样品溶液 /p p 　　(2)样品溶液的澄清度(过滤)。 /p p 　　在方法开发和验证时，需要考虑在质控实验室建立自动或手动取样的可行性。如果选择自动取样，必须证明等同于手动取样。 /p p 　　在自动取样系统中，管路中有残留可能会引起正偏差。对于这一点必须进行调查确认是否发生残留，并在可接受范围内。根据残留量的大小，可能需要为系统制定一个特定的清洗程序，确保残留量降低至最小。 /p p 　　另一方面，管路的吸附作用将会引起负偏差。如果这个偏差太高，可能有必要规定样品取样只能为手动方法。 /p p 　　最后，比较自动和手动取样时，应该考虑取样探头可能会改变杯内的流体动力学。理论上，取样探头只有在取样时才可以浸在溶出杯中。 /p p 　　溶出样品收集时需要过滤。过滤掉可能干扰样品分析的辅料是很有必要的。进行适当的回收率研究和记录是必要的。任何观察到的偏差都应该进行说明。过滤必须在取样时进行，而不是在过一段时间以后。 /p p 　　译者注解：手动取样和自动取样应评估结果的一致性。自动取样存在管路吸附和残留的风险，需要评估可能产生的影响，并制定相应的处理措施。 /p p 　　(5)非USP方法 /p p 　　新处方研究的溶出方法的开发和验证通常会使用到非药典方法(如peak杯、特殊沉降装置)。在方法开发和验证过程中，应评估这些方法的适应性。 /p p 　　(6)清洁验证 /p p 　　一旦清洗干净溶出杯后，需要进行“空白”的溶出测试，以确保溶出杯的清洁方法是适当的，不会引起污染。 /p p 　　在方法开发或验证时，或在测定方法中，任何的清洁方法都必须确认。在实验设计中，可研究样品取样过程的耐用性，研究所有或部分之前讨论的参数。表4.4显示了44次影响因素试验设计统计分析的数据。设计试验研究脱气、介质浓度、桨高度、桨转速和取样时间的影响。在此方法中，模拟了方法操作条件的正常变化。 /p p 　　介质浓度、桨叶高度和沉降装置因素的p值表示无显著影响(p值& gt 0.05)。然而，即使观察到在介质脱气、桨转速和取样时间方面的统计意义，但这些影响是微不足道的。 /p p style=" text-align: center " 　　 strong 表4.4 JMP耐用性分析汇总 /strong /p table border=" 0" cellpadding=" 0" cellspacing=" 0" width=" 648" align=" center" colgroup col width=" 72" span=" 4" style=" width:54pt" / /colgroup tbody tr height=" 50" style=" height:37.5pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" class=" firstRow" td height=" 37" class=" xl65" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 因素 /span /td td class=" xl66" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 因素范围 /span /td td class=" xl67" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" p- span style=" " 值 /span /span /td td class=" xl66" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 影响评估（ span style=" " % /span span style=" " 溶出度） /span /span /td /tr tr height=" 20" style=" height:15.0pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 15" class=" xl68" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 脱气 /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" Yes/no /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.0059 /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.5 /span /td /tr tr height=" 19" style=" height:14.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 14" class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 介质浓度 /span /td td class=" xl71" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.08-0.12N /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" & gt 0.05 /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.1 /span /td /tr tr height=" 19" style=" height:14.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 14" class=" xl68" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 桨转速 /span /td td class=" xl73" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 45-55rpm /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.0002 /span /td td class=" xl73" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.9 /span /td /tr tr height=" 19" style=" height:14.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 14" class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 桨高度 /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 15-35mm /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" & gt 0.05 /span /td td class=" xl71" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.1 /span /td /tr tr height=" 33" style=" height:24.75pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 24" class=" xl68" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 沉降装置类型 /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 3 span style=" " 个螺旋 /span /span /td td class=" xl69" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" & gt 0.05 /span /td td class=" xl73" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.3 /span /td /tr tr height=" 19" style=" height:14.25pt max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" td height=" 14" class=" xl70" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 124" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 取样时间 /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 182" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 13-17min /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 175" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.0014 /span /td td class=" xl72" style=" max-width: 100% word-wrap: break-word !important box-sizing: border-box !important border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width=" 166" span style=" max-width: 100% box-sizing: border-box !important word-wrap: break-word !important" 0.7 /span /td /tr /tbody /table p /p p 　　译者注解：可以参考这个表做相应的取样参数耐用性验证，但不必完全一致。比如介质浓度，如果介质浓度产生偏离的风险很小，就不必验证。 /p p 　　4.3.4分析方法验证 /p p 　　如前文所述，溶出分析方法的验证将根据指导原则进行，类似于第2章节的描述，验证参数已进行了详细的讨论。本章着重强调溶出方法的验证要求。 /p p 　　线性 /p p 　　制备覆盖样品浓度的系列标准溶液。ICH Q2B建议± 20%范围。通常从25%-125%的正常浓度范围进行线性测试，这个范围覆盖了早期的溶出时间点。目测响应相对于浓度应是一条直线。应报告相关系数(r)、残差和y轴截距。对于缓释产品的溶出曲线，配制规定范围的± 20%浓度。例如，对于溶出度为20-90%的释放曲线，范围应是0-110%。 /p p 　　准确度 /p p 　　准确度是对已知浓度的样品溶液(如加标样品)进行测定。在进行实验时，线性和准确度溶液可能使用相同的储备溶液。准确度溶液必须在正常试验条件下进行(如在加热的溶出杯内混合)。测定取样和分析样品溶液引起的偏差。如果产品需要测定溶出曲线，需在不同浓度下进行准确度的测试(如在理论溶出量的40%，75%和110%)，结果以百分比的形式表示。 /p p 　　精密度 /p p 　　重复性试验是指使用同一台溶出仪制备6份溶出样品进行测定。 /p p 　　中间精密度是指不同的分析者及不同的仪器设备制备6份溶出样品进行中间精密度测定。然而，这个过程无法区分方法变化和片与片的变化。它将预测最坏情况下的精密度，包括片与片之间、取样和分析的变化。 /p p 　　测定缓释处方多个取样点的溶出曲线的精密度，通常最后一个取样点可以消除片与片之间和批次之间的差异。图4.1阐明了扣除片与片之间的差异的标准溶出曲线，然而标准的技术仅作为研究手段用于方法开发。最后处方应该在最后时间点完全释放。可以使用该方法进行标准化，以消除批与批之间的变化，公式如下： /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/c286147f-3c8e-4278-af2e-9dcd71ef7cee.jpg" title=" 2_副本.jpg" / /p p 　　%t：表示t时间的溶出度% /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/8abd7e53-5a86-4e9e-90ec-221963c85054.jpg" title=" 3_副本.jpg" / /p p 　　范围 /p p 　　溶出度测试的线性、准确度和精密度结果有助于范围的确定(单点理论溶出的25%-125%，缓释产品溶出曲线规定值的± 20%) /p p 　　HPLC分析的耐用性 /p p 　　与HPLC含量和有关物质方法相似，应研究色谱柱、流动相、HPLC溶液稳定性和波长的影响。对于溶液稳定性，应在不同天分析之前的样品溶液或在同一天分析新配制的溶液。 /p p 　　UV-Vis分析的耐用性 /p p 　　在分析方法验证时，应研究波长准确性、波长重复性，稀释溶剂(如pH、浓度)、溶液稳定性和脱气情况。 /p p 　　专属性 /p p 　　对于HPLC分析，应该证明原料与辅料、系统干扰峰是可以分离的。对于UV-Vis分析，空白辅料的吸收不应太大。需要注意的是，溶出方法不需要具有稳定性指示能力、不必将降解物峰与被分析物分离。 /p p 　　译者注解：溶出度结果允许较大的误差，我们应该注意到溶出度的可接受标准都是整数，不同于含量测定的小数点后一位的可接受标准。因此较小量的杂质对溶出结果的影响可以忽略，比如质量标准中总杂不得过1.0%之类，在进行专属性验证时可不验证已知杂质的分离情况。个人认为含量测定方法验证也是同理，之前含量测定很多用紫外进行检测，这种方法并不能排除杂质的干扰，应当是忽略掉了。 /p p 　　4.4 溶出方法的再验证 /p p 　　在溶出方法的生命周期中，很多情况要求进行方法的再验证。这些与第2章节中的含量测定是相似的。 /p p 　　4.5 常见问题与解决方案 /p p 　　以下我们总结了溶出方法中常见的缺陷，在方法验证中可能会导致一些问题。关于分析部分的常见问题与第2章节中含量测定是相似的。 /p p 　　4.5.1.溶出试验的负偏差 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/2b677259-4210-4137-bb34-5d83b1d76a94.jpg" title=" 4_副本.jpg" / /p p 　　图4.2列出了3个分析结果，与分析1相比，分析2和3均较低。分析1代表100%药物释放的正常溶出曲线。 /p p 　　验证过程中可能引起的一些负偏差的原因包括： /p p 　　?标准曲线和分析物线性响应的影响 /p p 　　由于样品浓度较低引起的较大的负偏差，这可能是由于被分析物与各种材料，如辅料、装置表面和/或滤器等吸附造成负干扰。 /p p 　　由于较高的样品浓度引起的较大的负偏差，这可能是由于溶解性较差，取样后温度由37℃到室温(或冷藏)进行分析，导致样品析出(沉淀)。 /p p 　　与样品浓度无关的负偏差： /p p 　　?样品溶液的组成与对照品溶液不匹配，导致样品出现较低的响应。这可能是由于对照品溶液和样品溶液制备方法不同或溶出介质中的负基质效应引起的(如pH改变)。 /p p 　　溶出过程中或溶出后阶段发生了样品降解，与对照品溶液相比，改变了样品溶液的响应。 /p p 　　?计算多点(曲线)的样品分析，前面取样点没有校正样品和介质体积的变化引起的偏差。这种偏差随着取样体积和取样时间的增加而增加。 /p p 　　4.5.2.溶出试验的正偏差 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/afc2ed21-9c6a-4b71-9d8e-d8aebb31be85.jpg" title=" 5_副本.jpg" / /p p 　　图4.3显示一个高于正常曲线(100%释放)的正偏差。 /p p 　　产生正偏差的可能原因包括： /p p 　　标准曲线和分析物线性响应的影响 /p p 　　由于样品浓度较低引起的较大的正偏差，这可能是由于被分析物与各种材料，如辅料、溶出杯残留、取样装置和滤器等造成的正干扰。 /p p 　　与样品浓度无关的正偏差： /p p 　　?如果使用UV-Vis直接测定，相比依赖降解物吸收的对照品，样品溶出过程中或溶出后阶段发生了降解，改变了样品溶液的响应。 /p p 　　?样品溶液的组成与对照品溶液不匹配，导致样品溶液有高的响应偏差。这可能是由于对照品溶液和样品溶液制备方法不同或溶出介质中的正基质效应引起的(如pH改变)。 /p p 　　?蒸发损失会导致偏差结果，特别是对于延长溶出周期的情况(如从几小时至几天) /p p 　　4.5.3.溶出仪的校验 /p p 　　溶出仪应定期进行校验。每次进行溶出试验时，应该检查校验状态和校验的有效期。 /p p 　　4.6溶出方法验证总结 /p p 　　应采用表格的方式对溶出方法验证进行总结，这可以快速浏览验证数据。表格中应列出ICH规定的详细验证要求和验证结果。总之，支持方法验证的必要数据都应包括。表4.5是一个例子： /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/a806e1f7-6d27-47d6-831f-483b5af2d5f0.jpg" title=" 7_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/3d3f8f56-0fd1-4ac5-b40c-128e8c8b7076.jpg" title=" 7_副本.jpg" / /p p 　　译者总结性的注解：溶出方法的验证应包括两大块：一是溶出取样过程的验证，包括溶出介质处理(脱气、不同成分的加入顺序等)、供试品在溶出介质中的稳定性、不同类型仪器(如自动取样与手动取样)、不同品牌仪器的结果一致性验证、仪器参数的耐用性验证(温度、转速等)、过滤操作的验证(滤膜和注射器吸附)、取样时间(自动取样可省略)等。另一块是分析方法的验证，这块内容著述非常多，就不再赘述。 /p p 　　参考文献 /p p 　　ICH Harmonized Tripartite Guidelines, ICH Q2A, Text on Validation of Analytical Procedures, Mar. 1995 ICH Q2B, Validation of Analytical Procedures: Methodology, May 1997. /p p 　　European Pharmacopoeia, 4th ed., Section 2.93, Dissolution Test for Solid Dosage Forms, 2002. /p p 　　United States Pharmacopeia, USP 26 Chapter & lt 711& gt , Dissolution, 2003. /p p 　　Japanese Pharmacopoeia, 14th ed., Chapter 15, Dissolution Test, pp. 33–36, 2001. /p p 　　Japan Ministry of Health & amp Labour Guidelines, PAB/PCD No. 487, Dec. 1997. /p p br/ /p

介绍清洁验证对于cGMP生产至关重要，用以确保产品质量和患者安全。总有机碳（TOC）检测是一种证明设备清洁度的合规方法。与专属性方法不同，TOC可以在提高工艺效率的同时提供对清洁度的全面了解。无论您是清洁验证的新手还是经验丰富的TOC分析仪用户，本文将为所有级别的人员介绍什么是清洁验证、如何以及为何要使用TOC方法进行清洁验证。清洁验证中的分析方法挑战典型的清洁验证（CV）计划包括三个阶段：01设计02验证03持续确认一个关键的行业挑战是如何选择最合适的分析方法来评估清洁验证（CV）不同阶段的已知和潜在残留物。例如，在早期设计阶段的工作中，关于最恶劣情况下化合物或其降解物清洁性的充分信息可能是未知的。这可能会给开发产品专属性的分析方法带来挑战，因为这些测试假定所有潜在干扰物都是已知的。同样，在验证阶段，产品专属性的分析方法可能不太有用，因为常见的残留物可能包括未表征的降解物或更难清洁的化合物，而不是目标活性药物成分（API，Active Pharmaceutical Ingredient）。最后，在持续确认阶段，包括产品切换、设备停机检修、成本在内的生产问题以及对持续或自动监测的需求可能会影响所使用的方法。清洁过程方法选择在许多情况下，清洁过程专属性方法，如总有机碳（TOC）分析（与产品专属性方法相比），可以在清洁验证程序的每个阶段非常准确地描述清洁工艺的总体有效性。关键的一点是，选择一种或多种方法取决于清洁过程后残留物的性质。如果在经过验证的清洁过程中，活性成分没有降解或溶解，并且充分了解所有干扰物，那么产品专属性方法（包括HPLC、UV/Vis或ELISA）可能是合适的。1，2常见的产品专属性分析方法以下产品专属性分析方法传统上一直用于清洁应用。所有这些都旨在确定特定化合物是否以其原始形式存在。高效液相色谱（HPLC）HPLC通过色谱法从基质中分离出独特的化合物，然后使用紫外线或其他检测器测量该化合物。优点：能够确定所含的特定残留化合物、可以提供有关清洁失败性质的数据挑战：假设化合物在清洁过程中没有降解、所有潜在的干扰物或残留化合物已充分了解、可能需要进行更多的方法开发酶联免疫吸附测定（ELISA）ELISA是使用特定化学品和标准品进行的抗原或抗体类反应。如果特定蛋白质是完整的并且存在于测试溶液中，它将与酶结合。然后这种结合会被检测到。然而，如果蛋白质已变性但仍存在于溶液中，则ELISA测试无法检测到变性的蛋白质含量。ELISA具有许多与HPLC相同的优势和挑战，但多用于生物制药生产。紫外/可见分光光度法（UV/Vis）UV/Vis是残留物溶剂溶液对特定波长光的检测或吸光度。优点：简单、不需要从基质中分离残留物挑战：不适用于所有化合物、来自其他吸光化合物的潜在干扰常见的过程专属性分析方法以下过程专属性（或非产品专属性）方法也普遍用于清洁应用。总有机碳（TOC）TOC方法氧化所有有机残留物并检测氧化产生的二氧化碳。优点：对包括降解物或非预期的化合物在内的所有水性有机化合物敏感、方法开发简单（单一方法）、适用于清洁验证的所有阶段挑战：非常适合于识别清洁验证过程的失败，但调查可能需要补充方法、化合物必须是水性的电导率电导率用于检测清洁淋洗水样品中的离子物质，最常用于检测最终冲洗过程中的微量酸性或碱性清洁剂。优点：易于自动化（在线）、对离子残留物极其敏感、方法开发简单（单一方法）挑战：仅适用于一部分化合物（清洁剂或离子 API）、仅适用于淋洗水样品其他分析方法除了清洁验证中常用的产品和过程专属性方法外，其他可供考虑的分析方法可能包括：目视检查用于检测生物残留物的生物负荷或内毒素用于快速分析特定目标化合物的离子迁移光谱检测酸性或碱性清洁剂的pH值使用红外方法（NIR/FTIR）原位识别表面残留物讨论对于清洁验证程序来说，选择合适的分析方法非常重要。分析方法应该能够充分确定一个经过验证的清洁过程是按照设计完成的，从而最大限度地降低产品污染的风险。在理想情况下，可以选择给定阶段（设计、验证、确认）的最佳分析方法。然而，在清洁验证的现实世界中，分析方法的选择可能会受到基于清洁过程和方法预期用途的实际考虑的限制。因此，更重要的是分析方法是否足够或合适，而不是为了达到预期目的而“认为”的最佳方法。2专属性和非专属性分析方法的比较清洁验证的专属性方法旨在检测相关的单一化合物，例如原料药（API）。这使得对设备清洁度的理解非常有限。可能存在降解产物、清洁剂、赋形剂或其他污染源，无法通过专属方法检测到。通过总有机碳（TOC）和电导率检测，可以对清洁度进行综合评估，从而自信地放行设备。从HPLC转变为TOC的清洁验证需要考虑的三个因素◆ ◆ ◆

农业部农产品质量安全专家组专家、食品安全国家标准审评委员会农药残留方法组副组长刘肃老师做客阿尔塔大咖直播间，对于农残检测方法的验证提出以下几个注意点：Q1：多残留检测标准验证时所有农药种类都要验证吗？答：不需要。验证农药数量不得低于方法农药总数的1/3, 且不少于30种即可，同时选择验证的农药要考虑到农药种类和结构差异，同一类型和结构类似的农药不必全部验证。还可以根据日常监测需要和日常生产当中农药使用的广泛性去验证。比如最常用的阿维菌素、多菌灵、克百威、氟虫腈及其代谢物、螺虫乙酯及其代谢物等，在我国不用的禁用农药如艾氏剂、狄氏剂等就没有必要验证。还有一种情况是各地的CMA对不同的标准要求也会有差异，差异的部分以当地的CMA要求为准。Q2：除了农药的种类以外还用考虑检测方法吗？答：当然了，在检测中保留时间前、中、后都要有代表性的农药。对于难检测的农药，比如响应值低、回收率低、重复性差、易发生干扰的农药也都是需要进行验证的。Q3：植物源性食品农残检测方法在验证时需要做哪些基质？答：根据国家农药残留标准委员会“检验方法验证工作会议纪要”规定只需要验证11种代表基质即可。分别是：玉米、花生、芹菜、茄子、韭菜、葡萄、柑橘、香菇、大豆油、绿茶和花椒。

#小碳微课堂#又开课了！10月28日（周五）下午我们将举行《清洁检查及验证方法的考虑要素》直播课。此次直播课，我们还将从报名观众中随机抽取10名幸运儿送出一份小礼品，快来报名吧！（礼品随机发送）（报名时，请准确填写您的邮寄地址。获奖名单将于11月初在微信公众号中公布，敬请留意。）时间：2022年10月28日周五14:00-16:00（含问答环节）形式：网络直播课，注册报名后，直播结束可随时回看费用：免费总有机碳（TOC）分析是一种简单而高效的工具，可检测低含量的有机化合物，用于制药、化妆品、食品饮料和医疗设备等行业的清洁验证与确认，以及过程控制。使用TOC进行清洁验证能使用户提高运营效率、降低风险并改善质量控制。与高效液相色谱HPLC等专属性方法相比，TOC提供了更简单的方法，并且可以检测到HPLC无法检测到的降解物和污染物，使您不仅能检测产品的去除，还能检测辅料、降解物和清洁剂的去除。此次直播课程中，我们将与您分享以下议题，欢迎收看：药品GMP要求与清洁验证清洁验证程序的阶段清洁验证的过程品种示例讨论清洁验证全球法规与残留限度计算分析方法的验证讲师介绍谷雪蔷亚太区应用经理应用化学硕士拥有18年分析仪器行业的工作经验。2009年至今，任Sievers分析仪亚太区产品应用经理。报名方式● 扫下列二维码，进行会议注册，注册成功后，我们将于直播当天通过微信公众号给您发送课程直播提醒，直播时登录直播链接，验证注册时的手机号，即可收看课程。● 若您未收到微信提醒，直播时可通过Sievers分析仪微信公众号菜单：最新资讯-小碳微课堂，进入课程直播。● 如您当天无法收看直播，课程结束后您也可以登录直播链接，验证注册时的手机号，收看课程回放。◆ ◆ ◆联系我们，了解更多！

p 　　近日，中国质检总局和中国国家标准委员会发布了推荐性国家标准GB/T《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》，标准号：GB/T 27417-2017，并将于2018年4月1日实施。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/90f06d57-8312-40d8-aaaa-84e086a1fdc6.jpg" title=" 微信图片_20180402161900.jpg" / /p p 　　随着科学技术的进步和国际贸易的发展，国内外对实验室化学分析方法和检测数据的质量提出了更高要求。目前，国外已经发布了一些关于化学分析方法的确认规范，但我国尚未发布关于化学分析实验室方法确认和验证的标准和指南性文件，在实验室的实际检测工作中，经常遇到现行的检测标准无法与快速发展的检测手段相适应的情况。为了提供更准确、高效率的检测服务，实验室往往需要采用自己制定或改进的检测方法，特别在化学分析领域，越来越多的实验室使用标准以外的检测方法，但如何确保这些检测方法的适宜性和可靠性，一直存在争议。为此，我国出台了该标准，是实验室对化学分析方法进行确认和方法验证的指南性文件，旨在提高实验室化学分析方法和检测数据的质量，确保化学分析实验室所提供数据的有效性、公正性和可靠性。 /p p 　　小编对该规范进行了初步总结，以帮助大家快速阅读和了解该《化学分析方法确认和验证指南》，以下是该标准的精简介绍和分析。 /p p 　　该国标共有6个章节，分别是范围、引用文件、定义、方法确认要求、方法特性参数的确认、方法验证要求。另外，该国标还有3个附录，分别是方法回收率偏差范围、实验室内变异系数、重复性和再现性自由度对照表。 /p p 　 strong 　1 范围 /strong /p p 　　本标准给出了实验室对化学分析方法确认和方法验证的一般性原则，并指出适用于实验室对非标准方法、实验室制定的方法、超出预定范围使用的标准方法以及实验室对新引入的分析方法在正式使用前的方法验证。 /p p 　 strong 　2 规范性引用文件 /strong /p p 　　参考了ISO/IEC 指南99:2007国际计量学词汇-基本和通用概念及相关术语等文件。 /p p 　 strong 　3 术语和定义 /strong /p p 　　本部分对常见的术语进行了定义，包括：方法确认、方法验证、实验室内方法确认、实验室间方法确认、定性方法、定量方法、确证方法、筛选方法、容许限、检出限、定量限、精密度、灵敏度、测量区间、自由度、准确度等。 /p p 　　需要注意的是，该部分中“方法确认”对应的英文是“method validation”，而“方法验证”对应的英文是“method verification”，大家在阅读时还应注意这些和行业内的常见定义是否有区别。 /p p 　　 strong 4 方法确认要求 /strong /p p 　　4.1 总则 /p p 　　实验室应对非标准方法、实验室制定方法、超出其预定范围使用的标准方法、扩充和修改过的标准方法的确认制定程序。对于确认过的方法，实验室应制定作业指导书。 /p p 　　4.2 确认方法的特定参数 /p p 　　实验室可在综合考虑成本、风险和技术可行性基础上，并根据预期的用途来进行方法确认。实验室进行方法确认的内容应完整，包括但不限于以下方法特性： /p p 　　a)方法的选择性 /p p 　　b)方法适用范围 /p p 　　c)检出限和/或定量限 /p p 　　d)测量范围和/或线性范围 /p p 　　e)精密度(重复性和/或再现性) /p p 　　f)稳健度 /p p 　　g)正确度 /p p 　　h)准确度 (注：测量结果的准确度由正确度和精密度两个指标进行表征。) /p p 　　i)灵敏度 /p p 　　j)结果的测量不确定度。 /p p 　　4.3 确认方法特性参数的选择 /p p 　　4.3.1 方法确认的典型特性参数 /p p 　　方法确认首先应明确检测对象特定的需求，包括样品的特性、数量等，并应满足客户的特殊需要，同时应根据方法的预定用途，选择需要确认的方法特征参数。 /p p 　 strong 　典型方法确认参数的选择，参见表1： /strong /p p /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201804/insimg/3119a4e9-8c5a-4d05-b53b-20cafe2878bb.jpg" title=" 2018-04-02_162010.jpg" / /p p 　　4.3.2 实验室内方法确认 /p p 　　通常情况下，需要确认的技术参数包括方法的选择性、检出限、定量限、线性范围、正确度、精密度和稳健度等。 /p p 　　4.3.3 实验室间方法确认 /p p 　　通常情况下，对于定性方法，至少应确认方法的检出限和选择性 对于定量方法，至少应确认方法的适用对象、线性范围、定量限和精密度。 /p p 　 strong 　5 方法特性参数的确认 /strong /p p 　　5.1 选择性 /p p 　　分析方法应具有一定的选择性。 /p p 　　5.2 测量范围 /p p 　　方法的测量范围通常应满足以下条件： /p p 　　a)方法的测量范围应覆盖方法的最低浓度水平(定量限)和关注浓度水平。 /p p 　　b)至少需要确认方法测量范围的最低浓度水平(定量限)、关注浓度水平和最高浓度水平的正确度和精密度，必要时可增加确认浓度水平。 /p p 　　c)若方法的测量范围呈线性，还应满足5.3条款的要求。 /p p 　　5.3 线性范围 /p p 　　线性范围应尽量满足如下标准： /p p 　　a)采用校准曲线法定量，并至少具有6个校准点(包括空白)，浓度范围尽可能覆盖一个或多个数量级，每个校准点至少随机顺序重复测量2次，最好是3次或更多 对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不低于0.98 对于准确定量的方法，线性回归方程的相关系数不低于0.99。 /p p 　　b)校准用的标准点应尽可能均匀地分布在关注的浓度范围并能覆盖该范围...... /p p 　　c)浓度范围一般应覆盖关注浓度的50%~150%，如需做空白时，则应覆盖关注浓度的0%~150%。 /p p 　　d)应充分考虑可能的基质效应影响，排除其对校准曲线的干扰。 /p p 　　5.4 检出限和定量限 /p p 　　5.4.1 需要评估检出限(LOD)和定量限(LOQ)的情况 /p p 　　通常情况下，只有当目标分析物的含量接近于“零”的情况下或者检测浓度接近检出限和定量限时，才需要确定方法的LOD或LOQ。 /p p 　　5.4.2 检出限(LOD) /p p 　　对于多数现代分析方法来说，LOD可分为两个部分，即仪器检出限(IDL)和分析方法检出限(MDL)。应注意两者的区别，在该国标中指出：使用信噪比可用来考察仪器性能，但不适用于评估方法的检出限。 /p p 　　确定检出限的方法： /p p 　　在该国标中提到了多种确定检出限的方法，包括： /p p 　　a)目视评价法评估LOD /p p 　　目视评价法是通过在样品空白中添加已知浓度的分析物，然后确定能够可靠检测出分析物最低浓度值的方法。即在样品空白中加入一系列不同浓度的分析物，随机对每一个浓度点进行约7次独立测试，通过绘制阳性(或阴性)结果百分比与浓度相对应的反应曲线确定阈值浓度。该方法也可用于定性方法中检出限的确定。 /p p 　　b)空白标准偏差法评估LOD /p p 　　即通过分析大量的样品空白或加入最低可接受浓度的样品空白来确定LOD。独立测试的次数应不少于10次(n≥10)，计算出检测结果的标准偏差，具体的计算方法可参考该国标。 /p p 　　5.4.3 定量限(LOQ) /p p 　　与检出限相类似，定量限也分为仪器定量限和分析方法定量限。 /p p 　　5.5 正确度 /p p 　　测量结果的正确度用于表述无穷多次重复性测定结果的平均值与参考值之间的接近程度，测量结果的偏倚则通过回收率实验进行评估。 /p p 　　5.6 精密度 /p p 　　该国标中对精密度的描述分别从重复性、再现性两个维度进行描述。 /p p 　　5.7 稳健度 /p p 　　稳健度可通过由实验室引入预先设计好的微小的合理变化因素，并分析其影响而得出。可对样品进行预处理、净化、分析等可能影响检测结果的方面进行预实验，并分析可能影响结果的因素，必要时进行正交试验设计进行稳健度试验。 /p p 　　5.8 测量不确定度 /p p 　　该国标中列举了可能影响不确定度的多方面因素，并对测量不确定度评估时的考虑要点进行了介绍。 /p p 　 strong 　6 方法验证要求 /strong /p p 　　对分析方法的验证提出总体要求，包括定量分析和定性分析。在验证总则中提到，当化学分析实验室引入标准方法时，实验室应根据该国标的相应要求进行验证，即证实该方法能在该实验室现有的设施设备、人员、环境等条件下获得令人满意的结果。 /p p 　　说明：本文仅是对国标《合格评定 分析方法确认和验证指南》GB/T 27417-2017 的部分节选和介绍，仅供参考，若需获得更多准确内容还请查看国标原文。 /p

p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" e18a02a4ee114f8587a06d772e9631e0.jpg" style=" HEIGHT: 233px WIDTH: 600px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/noimg/17b815ba-7f23-4cf0-b8ce-436f507b17c2.jpg" width=" 600" height=" 233" / /p p 　　近日，国标GB/T 27417-2017《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》发布，并将于2018年4月1日实施。 /p p 　　笔者对该规范进行了初步总结，以帮助大家快速阅读和了解该《化学分析方法确认和验证指南》，以下是该标准的精简介绍和分析。 /p p 　　该国标共有6个章节，分别是范围、引用文件、定义、方法确认要求、方法特性参数的确认、方法验证要求。另外，该国标还有3个附录，分别是方法回收率偏差范围、实验室内变异系数、重复性和再现性自由度对照表。 /p p 　　1 范围 /p p 　　本标准给出了实验室对化学分析方法确认和方法验证的一般性原则，并指出适用于实验室对非标准方法、实验室制定的方法、超出预定范围使用的标准方法以及实验室对新引入的分析方法在正式使用前的方法验证。 /p p 　　2 规范性引用文件 /p p 　　参考了ISO/IEC 指南99:2007国际计量学词汇-基本和通用概念及相关术语等文件。 /p p 　　3 术语和定义 /p p 　　本部分对常见的术语进行了定义，包括：方法确认、方法验证、实验室内方法确认、实验室间方法确认、定性方法、定量方法、确证方法、筛选方法、容许限、检出限、定量限、精密度、灵敏度、测量区间、自由度、准确度等。 /p p 　　需要注意的是，该部分中“方法确认”对应的英文是“method validation”，而“方法验证”对应的英文是“method verification”，大家在阅读时还应注意这些和行业内的常见定义是否有区别。 /p p 　　4 方法确认要求 /p p 　　4.1 总则 /p p 　　实验室应对非标准方法、实验室制定方法、超出其预定范围使用的标准方法、扩充和修改过的标准方法的确认制定程序。对于确认过的方法，实验室应制定作业指导书。 /p p 　　4.2 确认方法的特定参数 /p p 　　实验室可在综合考虑成本、风险和技术可行性基础上，并根据预期的用途来进行方法确认。实验室进行方法确认的内容应完整，包括但不限于以下方法特性： /p p 　　a) 方法的选择性 /p p 　　b) 方法适用范围 /p p 　　c) 检出限和/或定量限 /p p 　　d) 测量范围和/或线性范围 /p p 　　e) 精密度(重复性和/或再现性) /p p 　　f) 稳健度 /p p 　　g) 正确度 /p p 　　h) 准确度 (注：测量结果的准确度由正确度和精密度两个指标进行表征。) /p p 　　i) 灵敏度 /p p 　　j) 结果的测量不确定度。 /p p 　　4.3 确认方法特性参数的选择 /p p 　　4.3.1 方法确认的典型特性参数 /p p 　　方法确认首先应明确检测对象特定的需求，包括样品的特性、数量等，并应满足客户的特殊需要，同时应根据方法的预定用途，选择需要确认的方法特征参数。 /p p 　　典型方法确认参数的选择，参见表1： /p p style=" TEXT-ALIGN: center" img title=" 44f8b9ebd5c342089c46239f71844a99.jpg" style=" HEIGHT: 273px WIDTH: 600px" border=" 0" hspace=" 0" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201711/noimg/69b7e8f2-6adc-4800-9c2d-8ec84ea54953.jpg" width=" 600" height=" 273" / /p p 　　4.3.2 实验室内方法确认 /p p 　　通常情况下，需要确认的技术参数包括方法的选择性、检出限、定量限、线性范围、正确度、精密度和稳健度等。 /p p 　　4.3.3 实验室间方法确认 /p p 　　通常情况下，对于定性方法，至少应确认方法的检出限和选择性 对于定量方法，至少应确认方法的适用对象、线性范围、定量限和精密度。 /p p 　　5 方法特性参数的确认 /p p 　　5.1 选择性 /p p 　　分析方法应具有一定的选择性。 /p p 　　5.2 测量范围 /p p 　　方法的测量范围通常应满足以下条件： /p p 　　a) 方法的测量范围应覆盖方法的最低浓度水平(定量限)和关注浓度水平 /p p 　　b) 至少需要确认方法测量范围的最低浓度水平(定量限)、关注浓度水平和最高浓度水平的正确度和精密度，必要时可增加确认浓度水平。 /p p 　　c) 若方法的测量范围呈线性，还应满足5.3条款的要求。 /p p 　　5.3 线性范围 /p p 　　线性范围应尽量满足如下标准： /p p 　　a) 采用校准曲线法定量，并至少具有6个校准点(包括空白)，浓度范围尽可能覆盖一个或多个数量级，每个校准点至少随机顺序重复测量2次，最好是3次或更多 对于筛选方法，线性回归方程的相关系数不低于0.98 对于准确定量的方法，线性回归方程的相关系数不低于0.99. /p p 　　b) 校准用的标准点应尽可能均匀地分布在关注的浓度范围并能覆盖该范围… /p p 　　c) 浓度范围一般应覆盖关注浓度的50%~150%，如需做空白时，则应覆盖关注浓度的0%~150%。 /p p 　　d) 应充分考虑可能的基质效应影响，排除其对校准曲线的干扰。 /p p 　　5.4 检出限和定量限 /p p 　　5.4.1 需要评估检出限(LOD)和定量限(LOQ)的情况 /p p 　　通常情况下，只有当目标分析物的含量接近于“零”的情况下或者检测浓度接近检出限和定量限时，才需要确定方法的LOD或LOQ。 /p p 　　5.4.2 检出限(LOD) /p p 　　对于多数现代分析方法来说，LOD可分为两个部分，即仪器检出限(IDL)和分析方法检出限(MDL)。应注意两者的区别，在该国标中指出：使用信噪比可用来考察仪器性能，但不适用于评估方法的检出限。 /p p 　　确定检出限的方法： /p p 　　在该国标中提到了多种确定检出限的方法，包括： /p p 　　a) 目视评价法评估LOD /p p 　　目视评价法是通过在样品空白中添加已知浓度的分析物，然后确定能够可靠检测出分析物最低浓度值的方法。即在样品空白中加入一系列不同浓度的分析物，随机对每一个浓度点进行约7次独立测试，通过绘制阳性(或阴性)结果百分比与浓度相对应的反应曲线确定阈值浓度。该方法也可用于定性方法中检出限的确定。 /p p 　　b) 空白标准偏差法评估LOD /p p 　　即通过分析大量的样品空白或加入最低可接受浓度的样品空白来确定LOD。独立测试的次数应不少于10次(n≥10)，计算出检测结果的标准偏差，具体的计算方法可参考该国标。 /p p 　　5.4.3 定量限(LOQ) /p p 　　与检出限相类似，定量限也分为仪器定量限和分析方法定量限。 /p p 　　5.5 正确度 /p p 　　测量结果的正确度用于表述无穷多次重复性测定结果的平均值与参考值之间的接近程度，测量结果的偏倚则通过回收率实验进行评估。 /p p 　　5.6 精密度 /p p 　　该国标中对精密度的描述分别从重复性、再现性两个维度进行描述。 /p p 　　5.7 稳健度 /p p 　　稳健度可通过由实验室引入预先设计好的微小的合理变化因素，并分析其影响而得出。可对样品进行预处理、净化、分析等可能影响检测结果的方面进行预实验，并分析可能影响结果的因素，必要时进行正交试验设计进行稳健度试验。 /p p 　　5.8 测量不确定度 /p p 　　该国标中列举了可能影响不确定度的多方面因素，并对测量不确定度评估时的考虑要点进行了介绍。 /p p 　　6 方法验证要求 /p p 　　对分析方法的验证提出总体要求，包括定量分析和定性分析。在验证总则中提到，当化学分析实验室引入标准方法时，实验室应根据该国标的相应要求进行验证，即证实该方法能在该实验室现有的设施设备、人员、环境等条件下获得令人满意的结果。 /p

Sievers分析仪将与仪器信息网合作举办题为“使用总有机碳TOC方法进行制药设备清洁验证，及如何应对FDA最新数据可靠性的要求”的网络研讨会，欢迎免费参加！时间：11月16日周四下午14:00（北京时间）语言：中文◆ ◆ ◆内容议题本次网络研讨会将介绍总有机碳TOC分析在制药行业的应用，包括：使用TOC分析进行清洁验证，以及应对中国FDA的数据完整性要求。 使用TOC分析仪代替HPLC进行清洁验证，TOC方法快速、准确，灵敏度高。是全球制药企业进行清洁验证时的首先分析方法，尤其在高风险及高度清洁要求的生物制药企业，已经蔚然成风。但是使用高灵敏度的TOC方法时，TOC的空白无处不在。我们应该注意些什么？ 中国FDA即将发布《药品数据管理规范》。面对数据可靠性的最新要求，我们应该如何控制和管理数据？研讨会最后将进行现场问答，欢迎制药行业相关人士参加：质量保证QA人员、质量控制QC人员、GMP验证小组成员、管理人员、生产运营人员、设备工程团队。◆ ◆ ◆演讲人谷雪蔷Paulina Gu产品应用经理，亚太区谷雪蔷经理获得化学工程学士和应用化学硕士学位。曾于岛津公司担任应用与市场专员。2009年至今，任Sievers分析仪亚太区产品应用经理。Sievers分析仪原隶属于通用电气（GE）水处理及工艺过程处理业务集团，于2017年10月与GE水处理一起转至苏伊士（SUEZ）集团旗下。◆ ◆ ◆注册方式通过以下链接，即可进行注册http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_3086.html如您有任何相关问题欢迎联系我们咨询，或给我们留言。

经由上海交通大学药学院、美国浦融(上海)培训中心、上海医药行业协会共同推出的“上海交通大学药学院浦融国际医药高级讲座”将于十月九日至十一日在上海浦融培训中心举行。 本讲座由中国色譜界领军人物主讲色譜药分技术的最新进展，国际跨国药业药物分析主管讲解国际药分最新实践。 课程的内容包括：当代国际化药业药品开发和生产中药物分析的作用和应用；国际化制药公司在API采购和外包研发中遇到的实际问题；制药企业分析方法建立的成功或失败的案例和解决方案；新药开发对分析方法的要求；API生产对分析方法的要求；药物制剂生产对分析方法的要求；特殊剂型药品及药品与器械复合产品（Drug Device Combo Product)对分析方法的要求；高压液相色譜分析技术的最新进展；高效电动色譜分析技术及最新进展；药物色譜分析科学与方法建立技术；分析方法对药物稳定性的表征能力；分析方法的相关性；分析方法对杂质和颗粒度的监控；分析方法验证的基本要求（ICH guidelines)；跨国药企分析方法验证实例；跨国药企分析方法验证计划书(protocol)范本；跨国药企分析方法验证/转移/分析实验室GMP操作SOP实例分析等。 主要师资介绍： David Nadig博士：美国强生集团全球化药开发部高级总监；强生集团全球分析发展部美东Site Head；美国Temple大学(美国宾州)客席教授 张玉奎 院士：中国科学院大连化物所研究员； 著名色譜分析科学专家；中国科学院院士；中国色譜学会理事长；中国色譜杂志主编 章新 博士：美国ChamQuest /上海浦融生物科技有限公司总裁；前强生集团全球化药分析部美西总监及美国ALZA公司分析科学总监；上海交通大学兼职教授 阎超 博士：上海交通大学药学院特聘教授；中科院百人计划研究员；中国色譜学会副秘书长；中国色譜杂志副主编；美国加里福尼亚分析分离学会（CASSS）理事 课程特色：本培训课程由实践经验丰富的国际药业药物分析专家设计并亲自授课，代表当前药物分析领域的国际水准；课程案例丰富；同时针对中国医药企业的发展现状和特点，提供了最佳的理论和实践指导。 授课时间：2008年10月9－11日 授课地点：美国浦融(上海)培训中心；上海市浦东新区沈家弄路700号 培训证书：上海交通大学药学院/美国浦融培训中心联合证书 我们邀请您的参加指教，并请您转发和邀请其他有兴趣的同仁参加。详情链接: http://www.chamquest.com.cn/

土壤中有机氯检测的方法验证有机氯类农药是含氯元素的有机化合物，曾广泛用于防治植物病、虫害等，主要分为以苯为原料和以环戊二烯为原料的两大类。其化学性质稳定、难分解、易残留，持续破坏着生态环境，且其生物毒性和致癌性，严重影响人类健康，现已逐渐禁止或减少使用。本应用根据环境标准 HJ 783-2016、HJ 921-2017 等，将样品利用步琦一站式土壤分析方案的萃取仪、定量浓缩仪处理后，进行 GC 分析以检测有机氯化合物里 8 组分的回收率，整个流程在 1 小时内完成，同时一次平行萃取 6 个样品，考察更具代表性和严谨性，大大提高了工作效率，也优化了传统费时的样品处理和繁琐的操作流程。1设备快速溶剂萃取 SpeedExtractor E-916定量浓缩仪 Syncore R-12+回流模块GC Agilent 7890A+7693 Autosampler▲ 快速溶剂萃取仪 E-9162药品及耗材有机氯标准品（100 g/mL）质控土（西格玛）硅藻土：粒径 30-40 目石英砂：粒径 25-50 目丙酮：农残级正己烷：农残级3实验方法1、步琦样品管尾管定容准确度考察为了考察样品管定容的准确性，将样品溶液分别用 1mL 尾管和 1mL 容量瓶定容，并进行含量测定。2、快速溶剂萃取仪回收率考察先进行萃取池样品装填：石英砂-硅藻土-样品-石英砂，基质平面与池子顶端预留 1cm 左右的空隙。然后将萃取池立即放入已预热好的仪器中，开始萃取。萃取方法如下：表1：快速溶剂萃取仪 E-916 萃取参数萃取温度100 ℃压力100 bar萃取池40 mL接收瓶150 mL溶剂丙酮/正己烷：50%/50%循环2预热默认保持10/10 min排液2 /2min溶剂冲刷2 min气体冲刷2 min3、定量浓缩仪 Syncore R-12 回收率考察在 60mL 的丙酮-正己烷（1：1）溶液中加入有机氯的标准溶液10μL，用定量浓缩仪 R-12 进行浓缩，并用正己烷置换溶液两次，每次约 2mL。在第 2 次置换后将溶液浓缩至 1mL 左右后，用正己烷定容到 1mL，待上机分析检测。▲ 定量浓缩仪 Syncore R-124、质控土样的实验考察考察两个质控土样的情况，分别将土样装填进萃取池后，用 E-916 进行萃取，带尾管的 150mL 样品管接收好萃取液后，直接转移至 R-12 中进行浓缩，并经两次溶剂置换，浓缩至约 1mL，定容待测。4实验结果1、尾管定容实验结果样品管定容 1mL 和容量定容的结果比较如表 2。表2：尾管定容测试结果_容量瓶定容含量样品管定容含量α-666190.60190.46β-666186.56186.83γ-666192.36192.33δ-666184.80185.67p,p＇-DDE205.90206.14p,p＇-DDD216.10216.39o,p -DDT213.37213.83p,p＇-DDT203.53203.31由上表可知，由步琦样品管定容分析的数据与容量瓶定容基本无差别，说明直接用样品管定容的方法可行，且避免了转移定容时造成的样品损失。2、快速溶剂萃取仪实验结果考察平行萃取的平行性和回收率。结果见下表：表3：土壤中有机氯的测定结果回收率12345α-66696.6%99.0%98.8%99.4%98.6%β-666102.9%105.3%105.2%106.2%105.9%γ-66697.9%100.0%100.0%100.6%99.8%δ-66695.1%96.5%94.6%95.9%90.5%p,p＇-DDE100.9%104.0%103.7%105.3%104.6%p,p＇-DDD105.5%108.8%108.7%110.0%109.0%o,p -DDT94.1%92.7%93.9%92.8% 93.7%p,p＇-DDT95.6%93.6%95.8%94.4%94.3%由表 3 可知，5 个平行样的每个组分回收率均在允许的 RSD 范围内。且回收率均在 90% 以上，说明快速溶剂萃取的精密度符合要求、萃取方法合理。3、定量浓缩仪定量浓缩实验结果平行处理 6 个样品，考察定量浓缩的结果稳定性和准确性，结果如表 4。表4：土壤中有机氯的测定结果回收率123456α-66689.6%94.3%88.4%93.4%98.5%94.5%β-66692.9%97.9%97.0%102.8%97.5%101.4%γ-66688.9%93.5%91.0%96.9%96.2%97.3%δ-66692.1%96.7%96.8%103.0%95.9%100.2%p,p＇-DDE93.6%98.0%97.3%102.9%97.1%101.0%p,p＇-DDD90.5%94.6%95.0%100.4%94.6%97.2%o,p -DDT98.8%104.8%104.7%110.9% 104.0%108.6%p,p＇-DDT101.0%107.7%106.9%114.4%106.2%112.0%有上表可知，低沸点组分的 666 回收率可以达到 90% 及以上，且 6 个数据平行性也在合理范围内，说明步琦定量浓缩仪配上回流模块能提高样品回收率和数据稳定性。4、质控土实验结果选取 2 个批次质控土进行全流程考察验证，得到结果下表：表5：质控土的测定结果_ZK1 测量值范围ZK2 测量值范围α-666170.3398-228196.18120-387β-666186.499-231208.04120-386γ-666182.0699-232200.88120-387δ-666182.1699-231204.44120-387p,p＇-DDE116.5364-149163.9596-310p,p＇-DDD113.8764-149155.3696-309o,p -DDT108.1963-147150.396-310p,p＇-DDT88.0964-149133.0696-309有表 5 可知，两个质控土的含量均在质控范围内，说明整个萃取-浓缩方法可行。可顺利进行后续样品的检测分析。5结论本方法使用快速溶剂萃取仪 E-916，利用高温高压的萃取原理，获得的实验结果符合要求，同时一次平行萃取 6 个，约 30min 完成一批，大大提高了萃取效率，简化了样品前处理的等待时间，增加样品通量。同时萃取液接收瓶可以无缝转移至定量浓缩仪上进行溶剂浓缩定容，减少样品转移造成的损失，确保了有机物的高回收率和结果稳定性。6参考文献HJ 783-2016 土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法。HJ 921-2017 土壤和沉积物有机氯农药的测定气相色谱法。SpeedExtractor E-916 Operation Manual.Syncore Platform Operation Manual.

有机磷农药中毒的死亡率很高,其重要原因之一是诊断不及时。日本学者Inoue等人研究验证了一种简单快速的新方法——液相色谱法-大气压电离子化-质谱测定法(LC-APCI-MS法),结果证实此方法可以有效测定进入人体血清中的10种有机磷酸盐浓度(J Phar Biomedl Anal 2007, 44: 258)。 　　“液液提取”或“固体萃取”方法是目前临床最常用的有机磷酸盐提取方法,但是对某些特殊成分的化合物如乙酰甲胺磷则无效。 　　Inoue等人采用即液相色谱-质谱联用测定法(LC-MS)研究出一种简单快速的方法用来测定急性中毒患者血清中的10种有机磷农药浓度[乙酰甲胺磷、杀扑磷、敌敌畏、倍硫磷、苯硫磷、敌匹硫磷、甲基乙酯磷(稻丰散)、马拉硫磷、杀螟硫磷、杀螟腈]。这10种有机磷农药在日本使用广泛。 　　具体操作程序如下:使用乙腈脱蛋白后,将每种需检测的生物标本注入一个XTerra MS C18不锈钢试剂盒中,采用10 mmol/L的甲酸铵-甲醇组成的溶剂进行梯度洗脱。 　　结果显示,回收提取率令人满意,绝对回收率为血清标本的82.2%~107.2%,相对回收率为60.0%~108.1%。血清的测定范围(LODs)为0.125~1.000　μg/ml,检测上限为0.25~1.25 μg/ml。从这种检测上限浓度逐渐增加到8 μg/ml时,可以观察到很好的直线相关性。在所有实验标本中,均值在期望浓度的20%范围内,而且相关系数(r2)0.9838。 　　大部分有机磷农药的分析结果显示样本内部和批间分析的精确度、准确度都是令人满意的。从对温度的稳定性角度,对所有有机磷酸盐分析可以发现,敌敌畏和马拉硫磷在室温下就可以最快溶解。杀扑磷和敌匹硫磷在整个为期4周的测定期内对所有温度都相对稳定。 　　该研究证实,将沉淀蛋白法作为样本的提纯程序,这种LC-MS方法快速可行,可以测定人体血清中的有机磷农药,并且在测定血清标本中有机磷农药时具备较高的选择性、敏感性、精确度、准确度、直线性、回归性和稳定性。因此这种简单准确的检测方法,可以成功地应用于临床急性有机磷农药中毒事件中。 　　 用于血清有机磷检测的液相色谱-质谱联用设备

为进一步提高医药从业人员业务水平和开展专业技术人才队伍建设，2011年11月22日-25日由全国医药技术市场协会举办的“药物分析方法的建立和验证研讨会”在北京成功召开。来自全国制药企业、新药研究机构等100余名QC和研发人员参加了此次研讨会。 作为全球色谱消耗品领先的制造商，迪马科技积极参与了此次技术研讨会，同时迪马科技全球研发总监李广庆博士也在会上与大家分享了精彩的技术报告《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》。 高效液相色谱技术在药物分析中的应用--李广庆博士 迪马科技全球研发总监 在此次研讨会上，迪马科技李博士为大家详细介绍了迪马科技六大色谱柱产品系列：Diamonsil钻石二代通用型反相色谱柱、1.8μm Endeavorsil UHPLC超高压液相色谱柱、2.7μm Leapsil HPLC/UHPLC兼容色谱柱、Bio-Bond 300 Å 蛋白和多肽专用色谱柱、Inspire高性能宽pH反相色谱柱、Spursil极性改性色谱柱等，并且就迪马科技高效液相色谱柱超高的柱效和分辨率，超长使用寿命等技术特点及在药物分析中的实际应用案例进行了专业深入的讲解。技术报告会之后，参会技术人员对李博士深入浅出的技术报告做出了极高的评价，觉得从中收获很多，对于自己的实际分析工作有很大的帮助，希望下次有机会再聆听其余部分及样品前处理的内容。 技术交流会现场 另外，此次技术研讨会还邀请了李晓东、田颂九、杨仲元、周立春等专家做了关于药物分析方法建立与验证的精彩报告。 高效液相色谱（HPLC）分析方法开发与验证--李晓东 中国食品药品检定研究院现代色谱分析技术在药物分析中的应用--田颂九 中国药学会药物分析专业委员会名誉主任委员、研究员 如果您对李广庆博士《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》的技术报告感兴趣，欢迎来电索取技术报告相关内容（021-60904761）。 关于迪马 迪马科技是一家致力于研发制造科学、高效的化学分析产品，提供完善服务和全面解决方案的知名色谱消耗品制造商，在色谱填料研发，色谱柱制造和相关分离产品等多个技术领域始终保持世界先进水平。核心技术产品包括：液相色谱柱、气相色谱柱、固相萃取柱、色谱溶剂和化学标准品。

一、研究内容及考核指标 　　（一）项目一：污染源监测方法验证和管理办法研编专题一 　　1、《固定污染源废气 流速的测定 三维皮托管法》标准草案编写 　　根据《环境监测 分析方法标准制修订技术导则》 (HJ 168-2010)要求，在充分调研现阶段方法测试技术的基础上，明确测试原理、测试过程和质控要求，组织开展干扰实验、实验室内和实验室间比对，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《固定污染源废气 流速的测定 三维皮托管法》标准草案及编制说明。 　　2、《甲烷泄漏检测技术规范》标准草案编写 　　对国内外相关设备进行充分调研，开展方法干扰及消除等研究试验，开展方法验证等工作，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《甲烷泄漏检测技术规范》标准草案及编制说明。 　　3、执法监测界定及各级生态环境部门执法监测职责分工研究 　　研究执法监测概念界定的合理性，梳理中办、国办文件及法律法规中关于各级生态环境部门执法监测职责定位的规定，调研各地各级生态环境部门执法监测能力状况，提出各级生态环境部门执法监测职责分工思路。 　　考核指标：《执法监测界定及各级生态环境部门执法监测职责分工研究报告》。 　　4、排污单位自行监测综合指数研究 　　开展针对多元信息的综合评价方法调研，对常用的指标体系构建方法和指标赋值与定量化运算方法进行研究，结合排污单位自行监测开展及信息公开情况，建立排污单位自行监测综合指数，并进行典型试算。 　　考核指标：《排污单位自行监测综合指数研究报告》。 　　（二）项目二：污染源监测方法验证和管理办法研编专题二 　　1、《固定污染源废气 流速的测定 超声波时差法》标准草案编写 　　根据《环境监测 分析方法标准制修订技术导则》 (HJ 168-2010)要求，在充分调研现阶段方法测试技术的基础上，明确测试原理、测试过程和质控要求，组织开展干扰实验、实验室内和实验室间比对，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《固定污染源废气 流速的测定 超声波时差法》标准草案及编制说明。 　　2、《煤炭开采业甲烷排放连续监测技术规范》标准草案编写 　　充分调研现阶段连续监测技术现状，结合管理需求，明确性能指标、安装条件、调试验收、运行维护等相关要求，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《煤炭开采业甲烷排放连续监测技术规范》标准草案及编制说明。 　　3、排污单位自行监测监管思路及与相关制度衔接研究 　　研究排污单位自行监测监管系统思路，梳理有关法律法规对排污单位自行监测的要求以及现有的管理制度规定情况，包括与社会化监测机构管理的衔接，分析需要在固定污染源监测管理办法中明确或细化的内容。 　　考核指标：《排污单位自行监测监管思路及与相关制度衔接研究报告》。 　　（三）项目三：污染源监测方法验证和管理办法研编专题三 　　1、《固定污染源废气 甲烷的测定 便携式红外吸收法》标准草案编写 　　根据《环境监测 分析方法标准制修订技术导则》 (HJ 168-2010)要求，在充分调研现阶段方法测试技术的基础上，明确测试原理、测试过程和质控要求，组织开展干扰实验、实验室内和实验室间比对，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《固定污染源废气 甲烷的测定 便携式红外吸收法》标准草案及编制说明。 　　2、《固定源二氧化碳排放连续监测技术规范》标准草案编写 　　充分调研现阶段连续监测技术现状，结合管理需求，明确性能指标、安装条件、调试验收、运行维护等相关要求，协助完成标准草案编写。 　　考核指标：《固定源二氧化碳排放连续监测技术规范》》标准草案及编制说明。 　　3、自动监测管理边界与现有制度衔接研究 　　梳理自动监测现有管理制度，提出固定污染源监测管理办法中的自动监测管理边界，及与现有自动监测管理制度衔接思路。 　　考核指标：《自动监测管理边界与现有制度衔接研究报告》。 　　二、项目预算 　　项目一：污染源监测方法验证和管理办法研编专题一，20万元； 　　项目二：污染源监测方法验证和管理办法研编专题二，15万元； 　　项目三：污染源监测方法验证和管理办法研编专题三，15万元。 　　三、申报条件 　　申报单位具有承接该项委托业务的能力，并能开具税务发票。 　　四、申报材料 　　课题申报书(见附件1)。 　　五、申报受理及评选程序 　　1、申报材料纸质版请于2022年4月24日前快递至北京市朝阳区安外大羊坊8号院(乙)中国环境监测总站污染源室(收件人王伟民，联系电话：010-84943104)电子版材料发送至邮箱wry@cnemc.cn。 　　2、计划于2022年4月25日通过视频会议方式召开专家评审会进行比选。 　　六、征集方式 　　中国环境监测总站将按照公开、公平、公正的原则，通过“自由申报、专家评审、择优委托”等程序确定项目的承接单位，经公示后，与承接单位签订合同。 　　七、其他补充事宜： 　　1、免费提供比选要求文件，不收取费用。 　　2、申报单位自行承担参加比选的全部费用。 　　3、比选结果将在中国环境监测总站公告。 　　4、因疫情原因提供的申报材料无法加盖公章的，需要提供说明，并由项目负责人签字；因疫情原因无法邮寄申报材料的，可先将申报材料扫描件发至规定邮箱，待疫情影响消除后补充邮寄申报材料。 　　中国环境监测总站 　　2022年4月14日

近日，国家药典委员会发布公告，拟修订《中国药典》0431质谱法。为确保标准的科学性、合理性和适用性，现将拟修订的0431质谱法公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期自发布之日起三个月。起草单位为中国食品药品检定研究院、中国医学科学院药物研究所；参与单位有山东省食品药品检验研究院、广州市药品检验所等。主要起草人为宁保明、张金兰。（部分删减内容）本次修订基本保留了《中国药典》通则 0431 质谱法的内容，同时根据质谱技术的应用实践及近年来的发展，并参考了其他药典中的质谱法和质谱法应用通则，增加了目前质谱法已经成熟的离子源、质量分析器、碎裂方式、数据采集模式、仪器确证、方法验证和确认等内容。除进行了多处删除外，本次修订新增了很多内容：（部分新增内容）总体来看，0431 质谱法修订内容如下：1. 概述将原通则中质谱仪的主要组成图进行了更新，增加了真空系统，与通则相关描述内容一致。增加了质谱技术在中药、化学药生物药和微生物鉴定等相关领域应用的简述。 2. 进样系统参考相关标准，将“一、进样系统”分为“直接进样”和“联用进样”两部分。在“直接进样”部分增加了非挥发性固体或液体样品分析的描述，“联用进样” 部分新增了“薄层色谱-质谱联用”、“热重分析-质谱联用”和“微流控芯片-质谱联用”和“质谱成像”的描述。 3. 离子源参考相关标准，删除了已经不适用的部分离子源内容，加了“电感耦合等离子体电离源”的描述。增加了“电子轰击离子源、电喷雾离子源和基质辅助激光解吸离子源等是最常用的离子源”的表述。 4. 质量分析器质量分析器的性能指标增加“质量准确度”的描述。根据质量分析器的应用进展并参考国外药典，增加了“四极杆质量分析器、离子阱质量分析器、飞行时间质量分析器和傅里叶变换质量分析器等是最常用的质量分析器”的表述。参照相关标准修改“3.离子阱质量分析器”的部分表述。参考国外药典，增加了“傅里叶变换静电场轨道阱质量分析器”和“同位素质谱”，并根据相关标准，将原通则中“离子回旋共振质量分析器”和“傅里叶变换静电场轨道阱质量分析器”合并为“傅里叶变换质量分析器”。增加了同位素质谱(Isotope mass spectrometer，IMS)相关表述。在串联质谱项下，将原通则中“产物离子扫描”、“前体离子扫描”、“中性丢 2024 年 2 月红色字体为删除内容，蓝色字体为增订内容 17 / 17 失扫描”、“选择反应监测”、“多反应监测”移至“五、数据采集方式”。增加了“四极杆串联质谱”、“离子阱串联质谱”和“离子淌度串联质谱”的描述。 5. 离子碎裂新增了“四、离子碎裂”项。 6. 数据采集方式新增了“五、数据采集方式”项。将原通则中串联质谱项下“产物离子扫描”、 “前体离子扫描”、“中性丢失扫描”、“选择反应监测”、“多反应监测”移至该项下。增加“全扫描”、“数据非依赖扫描”、“数据依赖扫描”的描述。 “数据依赖扫描”项下分列：“3.1. 产物离子扫描”、“3.2. 前体离子扫描”、“3.3. 中性丢失扫描”、“3.5. 选择反应监测”、“3.6. 多反应监测”，并增加“3.4. 选择离子监测(Selected ion monitoring，SIM)”和“3.7. 平行反应监测(Parallel reaction monitoring，PRM)”。 7. 仪器确证该项为新增内容。根据相关技术规范，增加了质谱仪和色谱-质谱联用仪的安装确证(IQ)，运行确证(OQ)和性能确证(PQ)等内容。 8. 方法验证与确认该项为新增内容。根据相关技术规范，列出了开展质谱方法验证或确认工作中需要关注的实验参数。 9. 测定法根据相关技术规范，新增了定性和定量分析项下的系统适用性要求和应用内容。 10. 名词和术语由于质谱不仅用于小分子化合物的分析，也用于大分子化合物和微生物的鉴定，因此，将待测化合物统一为待测成分，将供试品和样品也统称为样品，将对照品统称为标准样品，以涵盖不同的样品。英文缩写首次出现前给出了全称。参考国标的规定，将原子质量单位统一以 u 表示　　附件：附件 0431质谱法草案公示稿（第一次）.pdf

开工第一天，CDE发布关于公开征求ICH《Q2（R2）/Q14:分析方法验证和分析方法开发》实施建议和中文版意见的通知。征求意见时间自2024年2月18日至2024年3月18日止。本指导原则提出了药物在注册申请时，分析方法验证所需考虑的要素，适用于商业化的原料药和制剂放行和稳定性试验所用的分析方法。基于风险评估，该指导原则也适用于控制策略（ICH Q10 药品质量体系）部分使用的其他分析方法。为推动ICH指导原则在国内的平稳落地实施，我中心拟定了《Q2（R2）/Q14指导原则实施建议》，同时组织翻译了Q2（R2）/Q14指导原则的中文版。现对该实施建议和中文版公开征求意见，征求意见时间自2024年2月18日至2024年3月18日止。如有修改意见，请反馈至联系人电子邮箱：gkzhqyj@cde.org.cn。附件：1. Q2（R2）/Q14指导原则实施建议2.《Q2（R2）：分析方法验证》中文版3.《Q2（R2）：分析方法验证》英文版4.《Q14：分析方法开发》中文版5.《Q14：分析方法开发》英文版国家药品监督管理局药品审评中心2024年2月18日

稳定、可靠、准确的实验室数据如何获取？分析检测方法验证和确认在其中起着极为重要的作用。方法验证：通过检查并提供客观证据，以证实给定项目满足规定要求；方法确认：对规定要求满足预期用途的验证。方法验证是对测定方法的评价,是建立新方法的研究内容和依据，是对新建方法与已建方法的修订验证，也是对已建方法的复现，提供了客观证据以证明实验室能够正确运用该方法，确保实现所需的方法性能。凭借多年检测经历与实验室运营管理经验，SGS实验室培训与辅导技术团队特开发《检测方法的验证与确认培训》课程，结合ISO/IEC 17025:2017实验室质量管理体系探讨日常工作中的常见困惑，帮助学员掌握方法验证和确认的方法与步骤，理解方法验证的要求，学会如何进行方法验证，确保实验数据的准确性和可追溯性。👉 点击图片报名，加入课程学习。

日前，国家认监委办公室发布了关于征集2017年检验检疫行业标准方法标准验证实验室的通知。通知指出，为进一步提升检验检疫行业标准(以下简称SN标准)质量，认监委于2017年拟组织SN标准方法验证项目58项，并面向检验检疫系统各单位征集独立验证实验室和协同验证实验室。　　公开的58项方法标准验证项目清单覆盖了化矿金、轻工、卫检、食品、纺织、食检、动检等7个专业，其中电感耦合等离子体发射光谱、气质联用、液质联用、便携式分光光度、多重PCR等仪器方法将唱“主角”。　　通知如下：　　各直属检验检疫局，中国检验检疫科学研究院，各检验检疫标准化专业技术委员会：　　为进一步提升检验检疫行业标准(以下简称SN标准)质量，经研究，我委2017年拟组织SN标准方法验证项目58项。根据《SN标准方法验证管理办法》要求，现面向检验检疫系统各单位征集独立验证实验室和协同验证实验室，并将有关事项通知如下：　　一、方法验证项目　　清单详见附件1。　　二、方法验证技术依据　　各专业方法标准验证分别按照《化矿金专业化学分析方法验证程序(试行)》及实施细则、《食品化妆品专业化学分析方法验证程序(试行)》、《食品化妆品专业生物检测方法确认(验证)程序》、《动物检疫专业方法标准验证程序(试行)》、《核酸扩增检测方法类卫生检疫行业标准验证程序》、《植物检疫专业核酸检测方法验证程序(试行)》、《纺织专业物理检测验证程序及附录》(以下简称《验证程序》)的要求进行(《验证程序》文本可在检验检疫标准管理信息系统SN2“常用信息”内下载)。申报单位应具备执行上述《验证程序》要求的能力。　　三、征集工作要求　　1.每个标准验证项目原则上需1家以上独立验证实验室和8家以上协同验证实验室，独立验证的验证时间不超过45天，协同验证的验证时间不超过30天。　　2.直属局和分支局实验室均可以参加申报。申报单位根据今年的验证项目清单选择有能力承担或者有兴趣的项目进行申报，选择独立验证或协同验证。　　3.申报单位根据所申报项目，填写《检验检疫行业标准验证实验室征集表》(见附件2)，并于2017年3月1日前发送给各专业的验证工作联系人。　　4.方法验证工作组负责收集整理申报信息，所有参与申报的实验室均纳入方法标准验证实验室库，如有验证项目申报数量不足时可协调其他单位参与。方法验证工作组于3月20日前确定验证实验室并报我委联系人。　　5.各验证项目标准起草人于3月10日前与各专业验证工作联系人沟通验证技术路线并提交初稿。　　四、方法验证工作联系人　　(一)科技与标准管理部联系人　　吴彤，电话：010-82262742　　(二)方法验证工作组联系人　　叶曦文，电话：0532-88968060，　　邮箱：ye.xiwen@163.com 　　(三)各标准化专业委联系人　　化矿金：叶曦文，电话：0532-88968060，　　邮箱：ye.xiwen@163.com 　　食 品：蒋沁婷，电话：0571-81100905，　　邮箱：jqt@ziq.gov.cn 　　轻 工：徐嵘，电话：0755-83371446，　　邮箱：xurong@szciq.gov.cn 　　纺 织：吴俭俭，电话：0571-83527169，　　邮箱：wjj@ziq.gov.cn 　　动 检：杨春华，电话：0791-86358797，　　邮箱：ellenyung@foxmail.com 　　卫 检：郑夔，电话： 020-82289306，　　邮箱：sw-zheng@21cn.com 　　植 检：赵文军，电话：010-53897560，　　邮箱：wenjunzhao@188.com，tc271@126.com。　　附件：1.2017拟开展方法标准验证项目清单.docx　　2.检验检疫行业标准验证实验室征集表.docx　　国家认监委办公室　　2017年1月3日2017拟开展方法标准验证项目清单序号 计划编号 项目名称 专业 起草单位 需验证实验室具备条件 12016B049粉末涂料挥发性有机化合物（VOC）的测定化矿金广东检验检疫局仪器：恒温水浴：可控温于23℃± 0.5℃；鼓风恒温烘箱：可控温于200℃± 3.5℃；卡尔?费休水分滴定仪；李氏密度瓶（250mL）22016B050含铁尘泥铁含量的测定重铬酸钾滴定法化矿金山东检验检疫局常规矿产品前处理以及滴定方法32016B057混合铅锌矿中铜、铁、砷、锌、镉、汞和银含量的测定 电感耦合等离子发射光谱法化矿金江苏检验检疫局仪器：微波消解仪，ICP-AES42016B060进口天然胶复合橡胶生橡胶含量的测定 热重分析法化矿金广东检验检疫局仪器：热重分析仪52016B063煤炭中磷含量的测定微波灰化/分光光度法化矿金山西检验检疫局仪器：微波灰化炉、分光光度计62016B064煤炭中磷硫的测定 电感耦合等离子发射光谱化矿金辽宁检验检疫局仪器：电感耦合等离子发射光谱仪（ICP-AES）72016B068铁矿石中氯含量的测定燃烧炉离子色谱法化矿金上海检验检疫局仪器：燃烧炉-离子色谱联用系统82016B069铜精矿中的痕量金的测定 泡塑基颗粒活性炭富集分离-电感耦合等离子体发射光谱法化矿金山东检验检疫局仪器：ICP-AES、马弗炉、振荡器92016B072橡胶和橡胶制品 热重分析法测定硫化和未硫化胶的成分 氟橡胶化矿金宁波检验检疫局仪器：热重分析仪102016B073橡胶和橡胶制品 热重分析法测定硫化和未硫化胶的成分 氯丁橡胶化矿金山东检验检疫局仪器：热重分析仪112016B074橡胶和橡胶制品中2,2-二氯-4,4-二氨基二苯基甲烷的测定 气相色谱质谱联用法化矿金福建检验检疫局仪器：气相色谱质谱仪（EI源）122016B075氧化铁皮中游离α -SiO2含量的测定 X射线衍射K值法化矿金广西检验检疫局仪器：X射线衍射仪132016B245铬矿中铅、锌、磷、钛和镍含量的测定 电感耦合等离子体发射光谱法化矿金新疆检验检疫局仪器：电感耦合等离子发射光谱仪（ICP-AES）142016B250进口铅精矿 铜、锌、镉、锡、铋、铁、铝、锰、钛、镍、铬、钴的测定 ICP-AES化矿金云南检验检疫局仪器：电感耦合等离子发射光谱仪（ICP-AES）152016B091儿童用品中异噻唑啉酮类防腐剂测定 液相色谱-质谱法轻工天津检验检疫局基本技术路线：样品前处理，用液质联用仪检测样品溶液中异噻唑啉酮类化合物含量。 设备：液相色谱-质谱联用仪,电喷雾离子源（ESI源）；超声波清洗机；分析天平。162016B092皮革中多氯联苯的测定 气相色谱质谱联用法轻工福建检验检疫局基本技术路线：样品经有机溶剂提取，SPE柱净化，采用气相色谱-质谱仪测定，外标法定量。设备：1.气相色谱-质谱仪，配备EI源；旋转蒸发装置；氮吹仪；固相萃取装置；固相萃取柱；超声波清洗器；旋涡混匀器；离心机；0.45μ m微孔滤膜。172016B095陶瓷地砖防滑性能测试方法 动摩擦系数法轻工广东检验检疫局实验设备：BOT 3000E 设备参数： 测试速率(DCOF):20cm/s+/-5% 测试范围：0.01-1.00 测试正交力：22.4N+/-2% 接触片区域：3mm*28mm 测试系统公差：2% DCOF测试距离：10-50cm,增量5cm 坡度角：最大9.6度（倾斜）182016B096橡胶及橡胶制品中苯酚含量的测定 气相色谱质谱法轻工广东检验检疫局基本技术路线：取样，试样的制备(冷冻研磨)，过孔径1000μ m的筛网。采用超声波甲醇提取橡胶中苯酚，提取液用0.45μ m过滤膜过滤，取滤液上气相色谱质谱仪进行定性定量分析。设备：冷冻研磨仪，气相色谱质谱仪，超声波提取器。192015B197k沙门菌属stn基因LAMP快速检测方法卫检河南检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。202014B225k交叉引物恒温扩增检测方法 志贺菌卫检天津检验检疫局恒温装置：如水浴锅、金属浴或普通PCR仪均可212016B239j国境口岸寨卡病毒病防控技术规范 第4部分：快速核酸筛查方法卫检中国检科院需要分子生物学实验室及相应设备。需在生物安全二级实验室内进行。222015B196k国境口岸登革病毒分子溯源技术方法卫检深圳检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。需在生物安全二级实验室内进行。232015B247国境口岸中东呼吸综合症口岸疫情防控技术规范 第4部分：实验室检测卫检山东检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。需在生物安全二级实验室内进行。242014B332r国境口岸森林脑炎检验方法卫检吉林检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。需在生物安全二级实验室内进行。252015B195k国境口岸埃立克体PCR检测方法卫检黑龙江检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。需在生物安全二级实验室内进行。262016B241j国境口岸裂谷热病毒检测方法卫检广东检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。如以裂谷热患者临床样本作为阳性对照或样品，部分实验须在生物安全三级实验室内进行。272016B199k出口白酒中甲醇、乙醇、杂醇油的检测 便携式分光光度法食品北京检验检疫局282016B200k出口食品和饲料中鸡源性成分定量测定方法 微滴数字PCR法食品河南检验检疫局292016B201k出口食品中单核细胞增生李斯特菌检验方法—添加扩增内标的荧光PCR方法食品浙江检验检疫局302016B202k出口蜂蜜中蔗糖、果糖、葡萄糖、羟甲基糠醛 便携分光光度法食品北京检验检疫局312016B204k出口瓶装水和饮用水中9种抗真菌和抗蠕虫类PPCPs的测定液相色谱串联质谱法食品北京检验检疫局322016B208k出口牛奶中尿素的检测 便携式分光光度法食品北京检验检疫局332016B209k出口乳制品中过氧化苯甲酰的测定食品内蒙古检验检疫局342016B210k出口食品、农产品中铊的测定食品贵州检验检疫局352016B212k出口食品中吊白块的检测 便携式分光光度法食品北京检验检疫局362016B213k出口食品中甲醛的检测 便携分光光度法食品北京检验检疫局372016B214k出口食品中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌快速检测方法 多重PCR法食品辽宁检验检疫局382016B215k出口食品中亚硝酸盐的检测 便携式分光光度法食品北京检验检疫局392016B256出口咖啡豆及咖啡制品中葡萄糖、果糖、蔗糖的测定 离子色谱法食品云南检验检疫局402016B257出口植物源性食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留量的测定食品新疆检验检疫局412016B259出口调味料中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定 液相色谱法-串联质谱法食品宁夏检验检疫局422015B089出口辐照食品的鉴别方法 第6部分：液相色谱-质谱/质谱法食品中国检科院432016B035进出口纺织品 19种含氯苯酚残留量的测定 液相色谱-质谱法纺织山东检验检疫局仪器：液相色谱-质谱仪(LC-MS)442016B038进出口纺织品 可萃取重金属含量的测定方法 电感耦合等离子体质谱法纺织山东检验检疫局仪器：电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)452016B042进出口纺织品 纤维定量分析 显微投影仪法 木棉/棉混纺产品纺织广东检验检疫局仪器: 显微投影仪462016B046进出口纺织品 有机锡化合物的测定方法 气相色谱－质谱法纺织广东检验检疫局仪器：气相色谱-质谱仪(GC-MS)472015B048进出口纺织品生物安全检验方法 铜绿假单胞菌纺织河南检验检疫局仪器：LAMP浊度仪或恒温水浴锅482016B148蝴蝶兰品种鉴定方法植检海南检验检疫局492016B159水松鉴定方法植检福建检验检疫局502016B165银杉鉴定方法植检重庆检验检疫局512016B269蓝莓焦枯病菌检疫鉴定方法植检福建检验检疫局522016B014穿山甲鉴定方法动检中国检科院需要分子生物学实验室及相应设备。532016B017急性肝胰腺坏死病检疫技术规范动检深圳检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。542016B024林麝鉴定方法动检中国检科院需要分子生物学实验室及相应设备。552016B026梅花鹿鉴定方法动检吉林检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。562016B029饲用动物源性产品中三庚酸甘油酯（GTH）的检疫技术规范动检北京检验检疫局气相色谱串联质谱、加速溶剂萃取仪、涡旋混匀器、旋转蒸发仪等常规理化检测设备572016B031猪轮状病毒感染检疫技术规范动检福建检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。582016B242进境牛肉及牛肉制品中不同牛源性成分定性检测方法 PCR方法动检云南检验检疫局需要分子生物学实验室及相应设备。

关于印发化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范的通知 　　国食药监许[2010]455号 　　2010年11月29日 发布 各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局(药品监督管理局)： 　　为规范化妆品检测方法的验证程序，《化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范》已经国家食品药品监督管理局化妆品标准专家委员会审议通过，现予印发。 　　国家食品药品监督管理局 　　二○一○年十一月二十九日 附录：《化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范》 　　化妆品中禁用物质和限用物质检测方法验证技术规范 　　为加强对化妆品中禁用物质和限用物质检测方法研究工作的技术指导，规范化妆品中禁用物质和限用物质检测方法研究和验证工作，明确检测方法验证内容和评价标准，有效保证研究制定的检测方法具备先进性和可行性，特制定本规范。 　　1 适用范围 　　本规范规定了化妆品中禁用物质和限用物质检测方法研究和建立过程中检测方法验证内容、技术要求和评价指标。 　　本规范适用于化妆品中禁用物质和限用物质检测方法的验证与评价。 　　2 依据 　　《化妆品卫生规范》 　　3 释义 　　3.1 本规范中所指化妆品中禁用物质是指《化妆品卫生规范》中规定的化妆品禁用组分。 　　3.2 本规范中所指化妆品中限用物质是指《化妆品卫生规范》中规定的化妆品组分中限用物质、限用防晒剂、限用防腐剂、限用着色剂、暂时允许使用的染发剂等。 　　4 定义与术语 　　4.1 被测物质 　　是指本规范第3项规定的禁用物质和限用物质。 　　4.2特异性 　　在确定的分析条件下，检测方法所具备的检测和区分共存组分中被测物能力的特性。 　　4.3 线性及线性范围 　　4.3.1 线性 　　是指在设计范围内检测响应值与样品中被测物质浓度或量成比例关系的程度。 　　4.3.2 线性范围 　　是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的检测结果，而且呈线性的被测物质浓度或量的变化范围。 　　4.4检出限和定量下限 　　4.4.1 检出限：被测物质能被检测出的最低量。 　　4.4.2 定量下限：能够对被测物质准确定量的最低浓度或质量。 　　4.5 检出浓度和最低定量浓度 　　4.5.1检出浓度：按照检测方法操作，方法检出限对应的被测物质浓度。 　　4.5.2最低定量浓度：按照检测方法操作，定量下限对应的被测物质浓度。 　　4.6 精密度 　　在确定的分析条件下，相同浓度被测物质的一系列独立测量结果的一致程度，包括日内精密度和日间精密度。 　　日内精密度：同一天测定的精密度。 　　日间精密度：不同天测定的精密度。 　　4.7回收率 　　提取回收率：是指在确定的分析条件下，回收到物质的实际浓度的百分比，以样品提取和处理过程前后被测物质含量百分比表示。 　　方法回收率：是指在确定的分析条件下，被测物质测得值与真实值的接近程度，以百分比表示。 　　4.8 实验样品 　　为建立和验证检测方法而使用的化妆品。 　　4.9 空白样品 　　能够以可重复方式获得或制备的，不含被测物质的化妆品。 　　4.10 稳定性 　　在确定的分析条件下，一定时间内被测物质在一定溶剂或空白样品中的化学稳定性，包括日内稳定性和日间稳定性。 　　日内稳定性：在一定溶剂或空白样品中的被测物质在正常实验条件或适宜样品保存的条件下放置一天的稳定性。 　　日间稳定性：在一定溶剂或空白样品中的被测物质在正常实验条件或适宜样品保存的条件下放置多天的稳定性。 　　5 检测方法验证的内容 　　方法验证包括实验室内验证和实验室间验证。 　　实验室内验证的内容一般包括：方法特异性、线性及线性范围、检出限和定量下限、检出浓度和最低定量浓度、精密度、准确度、回收率和实验样品检测。 　　实验室间验证的内容一般包括：方法特异性、线性及线性范围、检出限、最低定量浓度、日内精密度、回收率和实验样品检测。 　　6 检测方法验证的技术要求 　　6.1 实验室内方法验证 　　6.1.1特异性 　　所采用的检测方法需要克服任何可预见的干扰，特别是来自实验样品中除被测物质以外的其他组分的干扰，一般对具有代表性的空白样品和空白样品加被测物质的样品，按照确定的样品前处理方法处理后，进样检测分析，考察实验样品中除被测物质以外的其他组分对被测物质的测定有无干扰。 　　6.1.2 线性及线性范围 　　线性考察：制备至少5个系列浓度(不包括零点)的被测物质标准品溶液，进行检测分析，记录相应的信号响应值，以被测物质标准品溶液的浓度为横坐标(x)、信号响应值为纵坐标(y)建立标准曲线，进行相关性分析，并回归得到线性方程和相关系数(r)。呈线性的被测物质的浓度或量的变化范围确定为线性范围。 　　方法线性考察：在空白样品中加入被测物质标准品，制备成至少5个系列浓度(不包括零点)的样品溶液，进行检测分析，记录相应的信号响应值，以被测物质的浓度为横坐标(x)、信号响应值为纵坐标(y)建立方法标准曲线，进行相关性分析，并回归得到线性方程和相关系数(r)。呈线性的被测物质浓度的变化范围确定为线性范围。 　　必要时，信号响应值可进行数学转换，再进行回归计算。 　　6.1.3 检出限和定量下限 　　检出限和定量下限考察见《化妆品卫生规范》。 　　6.1.4 检出浓度和最低定量浓度 　　按照检测方法操作，能够从实验样品背景中区分出被测物质响应信号的最低浓度为检出浓度，能够对实验样品背景中被测物质进行准确定量的最低浓度或质量为最低定量浓度。 　　6.1.5 精密度 　　6.1.5.1日内精密度 　　通常至少采用高低两种适宜浓度的被测物质或在空白样品中加入被测物质的标准溶液，其中：高浓度的标准溶液应接近标准曲线或方法标准曲线的最高点(下同) 低浓度的标准溶液应接近最低定量浓度(下同)，于同一日内测定至少6次，记录被测物质的信号响应值，考察该组测量值的彼此符合程度，以相对标准偏差(RSD)表示。 　　6.1.5.2日间精密度 　　通常至少采用高低两种适宜浓度的被测物质或在空白样品中加入被测物质的标准溶液，于不同日测定，记录被测物质的信号响应值，考察该组测量值的彼此符合程度，以相对标准偏差(RSD)表示。 　　6.1.5.3相对标准偏差(RSD)的计算， 其中： 　　6.1.6 回收率 　　6.1.6.1提取回收率 　　采用在空白样品或实验样品中添加高低两种浓度被测物质标准品的方法测定，记录被测物质的信号响应值，代入标准曲线计算被测物质的浓度，计算提取回收率。 　　6.1.6.2方法回收率 　　采用在空白样品或实验样品中添加高低两种浓度被测物质标准品的方法测定，记录被测物质的信号响应值，代入方法标准曲线计算被测物质的浓度，计算方法回收率。 　　6.1.6.3回收率的计算公式 　　回收率= (样品中被测物质的测定量-样品中被测物质的原有量)/实际添加量×100% 　　6.1.7 稳定性 　　6.1.7.1日内稳定性 　　通常至少采用高低两种适宜浓度的被测物质或在空白样品中加入被测物质的标准溶液，在正常实验条件或适宜样品保存的条件下，在不同时间点分别测定，代入标准曲线或方法标准曲线计算被测物质的浓度，并计算其准确度和RSD值，考察被测物质在溶液或空白样品中放置一天内的稳定性。 　　6.1.7.2日间稳定性 　　通常至少采用高低两种适宜浓度的被测物质或在空白样品中加入被测物质的标准溶液，在正常实验条件或适宜样品保存的条件下，连续多天测定，代入标准曲线或方法标准曲线计算被测物质的浓度，并计算其准确度和RSD值，考察被测物质在溶液或空白样品中放置多天的稳定性。 　　6.1.8 实验样品检测分析 　　选择具有代表性的实验样品，按照《化妆品卫生规范》规定取样，严格按照检测方法进行检测分析。 　　6.1.9 禁用物质阳性结果判定依据考察 　　化妆品中禁用物质阳性结果必须采用适宜的、可靠的方法进行确证。采用色谱-质谱技术确证化妆品中禁用物质阳性结果时，按照确定的分析条件，考察实验样品与加入被测禁用物质的空白样品的质量色谱峰保留时间以及浓度相当时的定性离子的相对丰度比的一致性。采用其他技术确证化妆品中禁用物质阳性结果时，应建立能够保证确证结果正确性的依据和评价指标。 　　6.2 实验室间方法验证 　　6.2.1 参加检测方法验证的机构或实验室 　　参加检测方法验证的机构或实验室必须是按照国家有关认证认可的规定，取得资质认定，其检测人员、环境条件、设施设备等应满足检测方法验证的要求。每种检测方法参加方法验证的检测机构或实验室应不少于3家。 　　6.2.2 方法验证样品的提供 　　方法建立机构或实验室应向参与方法验证的机构或实验室提供一致的实验样品、空白样品和标准品，并应注意样品的被测物质的本底情况。 　　6.2.3 方法验证技术要求 　　实验室间的具体验证技术要求同6.1实验室内方法验证。 　　6.3方法验证内容的评价指标 　　6.3.1特异性 　　实验样品中共存物质应对被测物质的测定结果无干扰。 　　6.3.2 线性及线性范围 　　线性范围适宜，能够满足化妆品中被测物质测定要求，且线性良好，线性相关系数≥0.99。 　　6.3.3 检出限和定量下限 　　具有足够低的检出限和定量下限，能够满足化妆品中被测物质测定要求。 　　6.3.4 检出浓度和最低定量浓度 　　具有足够低的检出浓度和最低定量浓度，能够满足化妆品中被测物质测定要求。通常要求方法最低定量浓度的精密度的相对标准偏差(RSD)应不超过20%，方法回收率要求在80%-120%之间。 　　6.3.5 精密度 　　根据化妆品中被测物质的含量及确定的分析方法，精密度应能够满足化妆品中被测物质的测定要求，通常日内和日间精密度的相对标准偏差(RSD)应不超过表1所列水平。特殊情况应予以说明。 　　表1：精密度的接受范围 被 测 物 精密度RSD 含量 ≤10 µ g / kg 20% 10 µ g / kg ＜ 含量 ≤ 100 µ g / kg 15% 100 µ g / kg ＜ 含量 ≤ 1000 µ g / kg 10% 含量 ＞1000 µ g / kg 5% 　　6.3.6 回收率 　　根据化妆品中被测物质的含量及确定的分析方法，回收率应能够满足化妆品中被测物质的测定要求。通常提取回收率要求在85%-115%之间，如果提取回收率超出85%-115%的范围，则要求方法回收率在85%-115%之间。特殊情况应予以说明。 　　6.3.7 稳定性 　　要求被测物质的标准溶液或前处理后的样品在稳定时间内使用和测定。 　　6.3.8 实验样品分析结果 　　在重复条件下两次独立测定结果的标准偏差在已确定分析方法的精密度接受范围内。 　　6.3.9 禁用物质阳性结果判定依据 　　采用色谱-质谱技术确证化妆品中禁用物质阳性结果时，实验样品与加入被测禁用物质的空白样品的质量色谱峰保留时间要求一致，至少两组浓度相当时的定性离子的相对丰度比一致，定性离子的相对丰度比的最大偏差应不超过表2的规定。采用其他技术确证化妆品中禁用物质阳性结果时，要求满足阳性结果确证依据和评价指标。 　　表2：禁用物质阳性结果判定时相对离子丰度比的最大允许偏差 相对离子丰度比（k） k ≥50% 50 % k ≥ 20 % 20 % k ≥ 10 % k≤ 10 % 最大允许偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 　　6.3.10 实验室间验证结果的评价 　　实验室间验证结果应相符。

为高质量筛选粮食收储快速检测方法标准应用的测定产品，国家粮食和物资储备局科学研究院粮油质量检验测试中心拟于近期组织开展粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价工作，验证测试评价的项目为粮食中的水分、粗蛋白质和粗脂肪含量。验证评价项目表评价项目验证标准方法基质样品形态编号名称名称标准代号1水分含量粮油检验稻谷水分含量测定近红外法GB/T 24896-2010稻谷颗粒2粉末3粮油检验小麦水分含量测定近红外法GB/T 24898-2010小麦颗粒4粉末5粮油检验玉米水分含量测定近红外法GB/T 24900-2010玉米颗粒6粉末7粗蛋白质含量粮油检验稻谷粗蛋白质含量测定近红外法GB/T 24897-2010稻谷颗粒8粉末9粮油检验小麦粗蛋白质含量测定近红外法GB/T 24899-2010小麦颗粒10粉末11粮油检验玉米粗蛋白质含量测定近红外法GB/T 24901-2010玉米颗粒12粉末13粮油检验大豆粗蛋白质、粗脂肪含量的测定近红外法GB/T 24870-2010大豆颗粒14粉末15粗脂肪含量粮油检验玉米粗脂肪含量测定近红外法GB/T 24902-2010玉米颗粒16粉末17粮油检验大豆粗蛋白质、粗脂肪含量的测定近红外法GB/T 24870-2010大豆颗粒18粉末按照通知要求，生产企业和单位需于2023年12月14日前提交粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价材料的电子版发送至指定邮箱。参与现场验证评价仪器设备的保障工作，提供至少3台（套）仪器参与验证，指派专人做好仪器设备操作、故障排除的培训工作，并协助国粮局科研院检测中心完成现场验证其他工作。详细通知如下：关于组织粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价工作的公告为高质量筛选粮食收储快速检测方法标准应用的测定产品，受中储粮质检中心有限公司委托，国家粮食和物资储备局科学研究院粮油质量检验测试中心拟于近期组织开展粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价工作。现面向社会邀约粮食近红外快检产品生产企业和单位参加，相关事宜公告如下：一、时间2023年12月20日至31日。二、验证评价工作地点北京市西城区百万庄大街11号粮科大厦。三、验证评价内容本次验证测试评价的项目为粮食中的水分、粗蛋白质和粗脂肪含量，具体项目详情见附件1，工作方案见附件3。四、生产企业和单位需提交的材料1.粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价申请表（附件2）；2.企业或单位法人资格证明材料；3.产品合格证书、产品说明书和相关技术证明材料；4.用户使用意见或相关材料；5.有关部门提供的与申请内容密切相关的证明材料（如检验报告、环保许可证、环境评价证明、安全生产许可证、采用国际或国家标准证明等）；生产企业和单位需提供包括上述内容的纸质版和电子版材料各一式三份（加盖公章）；用于验证评价的仪器设备至少三台（套）；生产企业和单位对所提供的材料的合法性、真实性和完整性负责。五、材料提交流程生产企业和单位需于2023年12月14日前提交粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价材料的电子版发送至指定邮箱，待验证评价工作人员确认后，各申请参与本次验证的生产企业和单位指定1名负责人（技术人员）与验证评价工作组联系，沟通验证评价工作的具体事项，签署技术服务合同，并将相关纸质版材料邮寄到指定地址。六、费用本次验证评价采用自愿报名的方式，工作的成本费用由各参加验证评价的企业和单位承担，用于支付验证所需的标准物质、试剂耗材采购等费用，以及承担验证评价工作的技术人员和专家的劳务费、专家费等，按照“一项一申请”原则计算相关费用，每个项目收费标准6000元人民币。请各参与企业和单位签署技术服务合同后，按要求及时将款项汇至指定账户，本次验证评价工作只接受对公银行账户转账汇款。汇款账号信息如下：收款单位名称：国家粮食和物资储备局科学研究院收款账号：110060774012015000329开户银行：交通银行北京百万庄支行七、工作组联系人韩老师：010-58523432 hyt@ags.ac.cn郭老师：010-58523432 gyy@ags.ac.cn纸质材料邮寄地址：北京西城百万庄大街11号1102室 100037附件：附件1 粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价意向表.doc附件2 粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价申请表.doc附件3 粮食近红外快检方法及仪器行业适用性验证评价工作方案.doc国家粮食和物资储备局科学研究院粮油质量检验测试中心2023年12月1日

总有机碳TOC方法应用于清洁验证专题讲座 全新应对《药品生产质量管理规范（2010年修订）》（GMP 2010） 尊敬的先生/女士，您好！ 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》（2010版GMP）已于2011年1月17日以卫生部79号令的形式公开发布，并于2011年3月1日起施行。2010版GMP在全国范围内，促进了制药企业的整改。 新版GMP共分14章，313条。相对于1998版GMP的14章88条而言，内容大幅增加。新版GMP的最后一条，即第313条规定，新版GMP的具体实施办法与实施步骤由国家食品药品监督管理局（SFDA）规定。SFDA于2011年2月25日，对各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局，发出通知&ldquo 关于贯彻实施《药品生产质量管理规范（2010年修订）》的通知&rdquo （国食药监［2011］101号），要求将2010版GMP纳入各级食品药品监督管理部门&ldquo 十二五&rdquo 期间药品监管工作的重点。凡新建药品生产企业，均应符合2010版GMP。现有药品生产企业血液制品、疫苗、注射剂等无菌药品的生产，应该在2013年12月31日前达到2010版GMP的要求。其他类别药品均应在2015年12月31日前达到2010版GMP要求。未达到2010版GMP的企业（车间），在上述规定期限后不得继续生产药品。 在2010版GMP第七章&ldquo 确认与验证&rdquo 的第143条规定了清洁验证：&ldquo 清洁方法应该经过验证，证实其清洁的效果，以有效防止污染和交叉污染。清洁验证应当综合考虑设备使用情况、所使用的清洁剂和消毒剂、取样方法和位置以及相应的取样回收率、残留物的性质和限度、残留物检验方法的灵敏度等因素。&rdquo 本条为新增。新版GMP明确规定清洁方法应当经过验证，并明确了清洁方法验证的目的、内容。将清洁方法纳入验证范围，说明药品监督管理部门更加重视清洁工作的过程、环节和结果。　 欧盟GMP对清洁验证的解释是，有文件和记录证明所批准的清洁规程肯定能使设备符合药品生产要求的试验及相关活动。为确认清洁规程的效力，应进行清洁验证。应根据所涉及的物料，合理地确定产品残留、清洁剂和微生物污染的限度标准。 美国FDA最早于1993年发布《清洁验证的检查指南（ USA FDA Guide For Inspections: Cleaning Validation）》。美国FDA表明，清洁验证的目的是，证明一个特定的清洁程序能一贯地在某个预先确定的限度内清洁设备；取样和分析测试方法必须具有科学性和提供足够的科学基本原理来支持此验证。 从生产线上，对设备清洁后如何取样？目测的方式已经过时了吗？淋洗水取样，还是棉签擦拭取样？ 在实验室，采用什么分析方法检测？是专属性的液相色谱法、离子色谱法？还是非专属性的总有机碳TOC、电导率、pH、热重法？ 我们愿意倾听大家在实际应用中的困惑，并很荣幸与大家分享我们目前已有的技术和经验。 与此同时，我们还将给大家带来贝克曼库尔特毛细管电泳在生物制药领域的关键分析技术以及手持式拉曼光谱仪应用于原辅料入厂检测的技术。 艾威仪器科技有限公司诚挚邀请您参加&ldquo 总有机碳TOC方法应用于清洁验证专题讲座&rdquo ！ 本次讲座的内容安排： 一、 解读中国《药品生产质量管理规范（2010年修订）》对清洁验证的要求 二、 中国及美国FDA对清洁验证规程建立的相关规定 三、 清洁验证的取样方式与分析方法的选择 四、 如何设立清洁验证的合格限值？─ 符合GMP的同时节约设备清洁成本 五、 GE即开即用的TOC标准品、预清洁样瓶与棉签套装 ─ 助您的清洁验证工作省时省力 六、 总有机碳分析仪的现场演示 七、 毛细管电泳&mdash &mdash 生物制药领域的关键分析技术 八、 NanoRam手持拉曼光谱仪快速准确的用于原辅料入厂检测 九、 提问与答疑 十、 现场抽奖（到会者均可参加） 会议时间：2012年4月19日 08:30&mdash 17:00 会议地点：珠海2000年大酒店 3楼玻璃厅（珠海香洲区人民东路121号） 免收听课费用；中午提供免费工作午餐；交通住宿自理。 报名方式： 1、登陆 www.evertechcn.com 点击右上角的&ldquo 在线报名&rdquo ，在线填写报名信息。 2、电话、传真、邮件确认，先确认先确保座位，额满为止。 报名电话：020－87688215-808 报名传真：020－87688280-808 报名信箱: qimin_ye@evertechcn.com 联系人：叶小姐 参加人员报名回执 公司 地址 姓名 职务 手机 电子邮箱 姓名 职务 手机 电子邮箱 姓名 职务 手机 电子邮箱 姓名 职务 手机 电子邮箱 姓名 职务 手机 电子邮箱 姓名 职务 手机 电子邮箱

2011年6月14日，路易公司杭州办事处联合美国通用电气(GE)公司，针对制药企业清洁验证方法（Cleaning Validation，CV），邀请了台州地区制药厂家的客户，在浙江台州市椒江区海洋国际酒店会议厅举办制药分析高级研讨会。 清洁验证（Cleaning Validation）是制药企业药品生产和质量管理不可缺少的重要环节。残留杂质会影响药效和带来毒副作用，因此在更换品种、多批连续生产后、产品出现质量问题、设备维修后以及设备和容器空置一段时间再使用前都要清洁设备。 路易公司联合美国通用电气公司，由GE 谷雪蔷专家主讲，会议围绕TOC应用于制药设备的清洁验证&mdash &mdash 优秀的GMP应对展开，谷老师为大家讲解了CV的国际规范、现行的CV法规、CV验证程序的步骤、CV分析方法的验证以及ICH Q2(R1)中CV分析方法的验证要点。介绍了TOC 应用于CV的考虑重点和总有机碳专属性分析方法验证中的要点，并比较HPLC方法和TOC方法。详细讲解了Maximum Acceptable Carryover（MACO）最高可接受夹带残留，如何使用TOC的方法开展清洁验证程序，包括擦拭方法与技术、回收率研究与计算，最后还介绍了典型的清洁验证文件。 路易公司还邀请了德国BINDER 中国区陈剑英经理为大家介绍了BINDER恒温恒湿箱在稳定性测试及加速实验中的应用、药物光照试验如何满足ICH测试要求以及BINDER光照满足ICH测试要求与三维照度测量技术。同时还邀请了德国VACUUBRAND 付珊珊经理就局域真空网路及耐腐蚀真空技术的应用以及真空泵的日常操作与维护要点进行了介绍。 （德国BINDER公司陈经理介绍产品稳定性测试要求） （VACUUBRAND 付经理介绍中央真空系统） 在技术交流会现场，路易公司展示了GE公司2011年全新发布的Sievers 860膜电导总有机碳分析仪和GE旗舰级产品Sievers 900膜电导便携式总有机碳分析仪，并现场为大家演示仪器操作和维护。同时，在现场也展示并介绍了VACUUBRAND真空泵的操作和注意事项。 （参会者积极咨询） （仪器展示：GE TOC 分析仪） （VACCUBRAND 真空泵） 会议中来宾与讲解专家进行了热烈的交流讨论，大家都觉得这场交流会办的非常有意义，切实体会到了制药厂家的需求，并希望今后要举办更多类似的技术交流会议。 路易企业有限公司杭州办事处 BINDER中国总代理，VACUUBRAND中国区代理，GE 浙江地区总代理 地址：浙江省杭州市潮王路45号东方豪园俊豪阁1007室 邮编：310014 电话：0571-85091986、 85092373、85093261 传真：0571-85093253 邮箱：lwlhz@lwl.com.hk

近日，浙江省生态环境监测中心组织在杭州监测现场开展了《固定污染源废气 氨、氯化氢的测定 傅里叶红外吸收法》方法验证工作。谱育科技EXPEC 1680 便携式傅里叶红外光谱仪 受邀参与了该国家环境标准方法的验证实验。测试期间，谱育科技严格按照《环境监测分析方法标准技术导则》的有关规定，开展方法检出限、精密度、准确度、正确度验证，为进一步完善国家环境保护标准体系提供有力的技术、数据和服务支持。 标准验证过程中测试现场 标准参与单位 本次标准编制受中国环境监测总站委托，由浙江省生态环境监测中心承担主导；谱育科技子公司谱育检测、上海市生态环境监测中心、福建省生态环境监测中心、山东省生态环境监测中心、绍兴市生态环境监测中心、台州市生态环境监测中心6家单位共同完成方法验证工作。 标准定制意义 此标准主要适用于固定污染源废气污染物氨和氯化氢的现场快速测定，有助于提高固定污染源废气污染物氨 和 氯化氢现场测定的准确性和时效性，为环境管理部门监管执法提供及时、有效的技术支撑，增强环境管理部门监管效能。截至今日，EXPEC 1680 凭借其优异的性能已多次参与浙江、上海、重庆等省市国家标准与地方标准的制定与验证工作，为国家标准的制定与验证工作提供了相关的实验数据与参考意见。EXPEC 1680 便携式傅里叶红外光谱仪仪器无需进行样品前处理、不受水汽干扰，可直接进行烟气中SO2、CO、CO2、NO、NO2、HCl等因子的测定，全程高温伴热，尽可能还原烟气中真实的物质浓度。该产品的自主创新和成功研制，有效填补了国内该领域的空白。自仪器投入市场以来，成熟的技术和应用获得业界用户好评，目前已广泛应用于燃煤燃气电厂、垃圾焚烧厂、钢铁厂、快速应急监测等多个领域，为环境管理部门监管执法提供及时、有效的技术支撑。高可靠拥有更宽的温度、湿度的适用范围，IP53的防护等级，保证户外现场的正常使用；高集成➢可配置吹扫气瓶，可自动吹扫，无需人为干预；➢内置采样系统，实现自动控温、远程控制、连锁保护；➢自带北斗+GPS双定位系统，自动记录数据采集点信息，数据可追溯；高交互可视化触摸系统，仪器状态清晰，配有WIFI模块，实现远距离的无线通讯能力；多组分可实现多组分同时分析，快速扫描得到全谱吸收光谱图，同时定性、定量分析无机/有机气体。* 部分内容素材来源于浙江省环境监测中心往期精选谱育科技助力淮安市突发环境事件应急监测演练及培训活动

2012年4月，艾威仪器科技有限公司联合美国通用电气（GE）公司分别在4月17（广州）、18（深圳）、19日（珠海）24（海口）4个城市举办了主题为&ldquo 总有机碳TOC方法应用于清洁验证专题讲座&rdquo 。本次讲座，详细解读中国《药品生产质量管理规范（2010年修订）》对清洁验证的要求，中国及美国FDA对清洁验证规程建立的相关规定，清洁验证的取样方式与分析方法的选择及仪器现场演示；教你如何设立清洁验证的合格限值。 4.17广州讲座现场 4.17广州讲座现场 4.18深圳讲座现场 4.18深圳讲座现场 4.19珠海讲座现场 4.19珠海讲座现场 4.24海口讲座现场 4.24海口讲座现场 这一系列的巡回专题讲座我们总共邀请到了四百多位药检所的技术人员以及药企等相关企业的质检人员参加。讲座结束后参会代表纷纷表示获益良多，特别是有关清洁验证方面的内容。