蛋白药物

弱弱的问一个问题，为什么蛋白药物的有关物质检测一般都是用面积归一化法，而不是自身对照法呢？蛋白药物在低浓度线性应该很不好，用面积归一化不合理啊，这种情况下难道不应该采用自身对照法更好吗

新技术有助于开发更好的药物2013年07月06日 来源： 中国科技网 作者： 陈丹 科技日报讯 据物理学家组织网7月5日（北京时间）报道，瑞典卡罗林斯卡医学院的研究人员开发出一种方法，首次能够直接测量药物抵达其位于细胞中的目标蛋白的效果。《科学》杂志上描述的这项新技术，对于开发新的、改良型的原料药将是一个重大贡献。 大多数药物都是通过与一种或多种蛋白质结合并影响其功能来发挥效力的，但药物开发也因此面临两个常见问题：认定正确的目标蛋白，并设计能够有效地找出和绑定它们的药物分子。此前没有任何一种手段可用于直接测量药物分子定位和绑定其靶蛋白的效率，这使得药物开发过程的很多阶段都存在一定程度的不确定性。在某些情况下，候选药物在人体临床试验中没有达到预期效果，经证实正是由于药物分子没有与正确的蛋白质结合造成的。 而卡罗林斯卡医学院研究人员利用靶蛋白与药物分子结合时通常会变得稳定的观念，开发出了这个被称为CETSA（细胞热转移分析）的新技术。他们认为，这项技术可作为药物开发过程中一个重要的控制阶段，也可作为对其他方法的一个补充。“我们已经证明，该方法适用于多种靶蛋白，使我们能够直接测量药物分子是否抵达了其位于细胞或动物模型中的目标。”该医学院医学生物化学与生物物理学系首席研究员帕尔·诺德隆德说，“我们相信，CETSA技术最终将帮助提高许多药物的效率，并有助于开发更好的药物分子和更有效的治疗方案。” 研究人员还对可能导致细胞耐药性的工序进行了仔细检查，并表示，这一技术能够确定现有药物是否适合个别患者，因此其具有应用于个性化治疗的潜在价值。 “我们认为，该方法可以为癌症治疗提供一个重要的诊断工具，比如，从原则上来说，CETSA技术让我们能够确定哪种药物针对肿瘤中的蛋白质最有效，临床医生也可以在早期治疗阶段确定肿瘤是否已经具备了某种抵抗力、哪种治疗方案对病人更合适。”诺德隆德的同事丹尼尔·马丁内兹·莫利纳说，他带领的团队正在开展一个旨在将CETSA技术用于病患研究的项目。（记者陈丹） 总编辑圈点 体温可以测量，骨密度可以测量，就连药物绑定靶蛋白的效果也可以直接测量，让人不得不慨叹医学技术发展的速度之快。文中提到的细胞热转移分析技术，就好比狙击手的瞄准镜，能帮助狙击手调整位置以便更准确地击中目标。这样一来，不仅可以更好地提高药效，还尽可能地减少副作用，其实际应用价值非同一般。那种“杀敌一千，自损八百”的诊疗方法或将成为过去，那些原本被认为的绝症或将“绝”处逢生。 《科技日报》（2013-07-06 一版）

请问，蛋白药物的TCEP残留怎么检测？

[font='times new roman'][size=14px]药物靶蛋白鉴定方法[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]非蛋白质组学鉴定方法[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]非蛋白质组学的传统药物靶蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的迁徙分析等方法，通常耗时、耗力且不适合进行高流通量的筛选。目前，所使用的技术包括：第一，蛋白鉴定的图象分析，利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量，未被修饰的小蛋白错误率大约[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]30%[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]，而翻译后修饰蛋白错误率更高，故需联合其他技术完成鉴定；第二，微量测序，首先使经凝胶分离的蛋白直接印迹在[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]PVDF [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]膜，经过一系列操作后将其置于测序仪中进行蛋白质鉴定，但该方法仍然存在一些缺点，如由于酸性水解或者部分降解而产生氨基酸的变异，故应联合其他的蛋白质属性进行鉴定。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]化学蛋白质组学方法[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]化学蛋白质组学方法一般先将小分子化合物通过与蛋白质溶液反应，使化学探针或小分子化合物与固相联接，得到被修饰的固相微球，然后利用合适的分离技术将这些蛋白质纯化，结合[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]分析，得到靶蛋白的信息。[/size][/font][font='宋体']亲和色谱法[/font][font='times new roman'][size=14px]亲和色谱法是化学蛋白质组学策略中较为经典的方法之一，它主要应用于研究蛋[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]白质与生物活性小分子或蛋白质与蛋白质的相互作用[/size][/font][font='times new roman'][sup][size=14px][17][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=14px]。该方法通过官能团将配体结合在固相基质中，然后与蛋白质孵育，此时与配体结合的蛋白会留在基质上，最后通[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]过变性或与自由配体竞争将结合蛋白洗脱下来，再通过凝胶电泳或者[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url][/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]进行分[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]析。该方法的缺陷在于所研究分子衍生物活性不确定、材料配体结合力差异性以及非特异性吸附都将会干扰研究结果。[/size][/font][font='宋体']基于活性的化学蛋白质组学技术[/font][font='times new roman'][size=14px]基于活性的化学蛋白质组学技术（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）是广泛使用的技术之一。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]是由美国的[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]Cravatt[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]课题组在[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]2002 [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]年首次提出，最早用于酶谱分析，之后被应用于药物靶蛋白筛选。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]技术的关键是合成同时带有反应基团和标记物的[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]探针，可进一步与待测的蛋白质发生相互反应。药物靶点筛选领域设计的[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]探针通常包括三[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=14px]3[/size][/font][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=14px]个功能部分：反应基团、连接基团和报告基团。与二维凝胶电泳法（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]2-DE[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）、同位素编码亲和标签（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ICAT[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）等技术相比，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]技术着重研究蛋白质的表达和功能，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]可从天然蛋白质组样品中直接筛选出与小分子特异性结合的蛋白质，从而能更直接快速地明确小分子和蛋白质之间的相互作用，确定小分子的作用靶点，这对于筛选具有低亲和力的靶蛋白极为有利。另外，根据富集和鉴定策略的不同，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ABPP [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]技术可分为竞争性标记方法和生物正交的探针模拟物标记方法。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]1.%2.%3 [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]非化学修饰的蛋白质组学方法[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]1.1.%3.%4 [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]细胞热位移测定[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]在过去[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]20 [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]年中，热位移分析（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]TSA[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）已成为最广泛使用的无修饰药物靶点发现方法之一。这种方法简单直接，但探针无法区分不同的蛋白质，因此[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]TSA [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]仅适用于纯化蛋白质的实验。为了规避这个问题，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]Molina [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]等人开发了一种概念上相似的技术，称为[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]细胞热位移测定[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]C[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ETSA[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]，用于直接研究细胞环境中的药物[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]-[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]靶标相互作用。如图[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]A[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）所示，细胞裂解物或完整细胞的多个等分试样首先用药物或载体处理，加热到不同的温度并冷却，然后通过离心分离出可溶性部分。随着温度的升高，蛋白质逐渐展开以暴露疏水核，导致蛋白质在高温下沉淀。蛋白质越稳定，蛋白质对热诱导沉淀的抵抗力越高，因此，可以测定可溶性蛋白质随温度变化的稳定性曲线。例如，该[/size][/font][url=https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/antifolate][font='times new roman'][size=14px]方法通过叶酸[/size][/font][/url][font='times new roman'][size=14px]抗癌药物[/size][/font][url=https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/methotrexate][font='times new roman'][size=14px]甲氨蝶呤[/size][/font][/url][font='times new roman'][size=14px]与[/size][/font][url=https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/dihydrofolates][font='times new roman'][size=14px]二氢叶酸[/size][/font][/url][font='times new roman'][size=14px]还原酶的结合、雷替曲塞与胸苷酸合成酶的结合进行了药物靶标的验证。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]CETSA[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]是一种允许研究活细胞中药物靶点的方法。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]CETSA[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]结合小分子库可用于筛选潜在抑制剂、评估靶标参与效率和监测靶标特异性。此外，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]CETSA[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]还可用于筛选[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]新药和表型化合物的靶点，解决脱靶蛋白、结合机制、药物疗效和完整细胞耐药性等[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]问题。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]1.2.%3.%4 [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]热蛋白组学分析[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]热蛋白组学分析（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]TPP[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）首先将蛋白在有或无活性小分子情况下孵育，并加热到不同的温度以诱导蛋白变性，剩余的可溶性蛋白用缓冲液提取。如图所示，在每个温度下，可溶性蛋白通过高分辨质谱进行量化，画出变性曲线，进一步测[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=14px]4[/size][/font][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=14px]定热稳定性和识别配体引起的变化。其中，[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]50% [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]蛋白发生聚沉时的温度为[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]Tm[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]melting temp[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]e[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]r[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]a[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]tur[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]e[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]，通过对比加药前后[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]T[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]m[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]的变化，确定活性分子的靶蛋白。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]TPP[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]可以[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]通过定量[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]MS [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]分析，在蛋白质组水平评估活细胞中活性分子与蛋白结合的情况。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]图[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]A[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]细胞热位移测定和[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]B[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]热蛋白组学分析简要工作流程[/size][/font][font='times new roman'][size=14px][14][/size][/font][font='times new roman'][size=14px]药物亲和反应的靶点稳定性技术[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]药物亲和反应的靶点稳定性技术（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]DARTS[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）是一种鉴定药物靶标的新方法。药物[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]与靶蛋白结合后，靶蛋白对蛋白酶的敏感性降低，与对照组相比，药物结合蛋白更不[/size][/font][url=https://www.sciencedirect.com/topics/chemistry/protein-hydrolysis][font='times new roman'][size=14px]易水解[/size][/font][/url][font='times new roman'][size=14px]。这种差异可通过蛋白凝胶电泳和质谱等技术对差异蛋白进行鉴定，可以确定[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]药物直接作用的靶点蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]，最大优势是不需要对药物进行任何化学修饰，即可以确定药物的直接结合蛋白。[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]DARTS[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]在天然小分子靶点的鉴定中发挥了重要的作用，例如[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]对[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]ecumicin[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]、白藜芦醇[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]resveratrol [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]等多种天然产物蛋白靶点的鉴定[/size][/font][font='times new roman'][sup][size=14px]。但[/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=14px]DARTS[/size][/font][font='times new roman'][size=14px] [/size][/font][font='times new roman'][size=14px]也存在局限性，例如细胞裂解液中的低丰度蛋白的鉴定和非特异性结合会导致[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]蛋白对蛋白酶的敏感性升高增加。利用这一特性，研究者还开发了药物亲和力响应靶稳定性的方法用于药物靶点筛选。[/size][/font]

用荧光做有关药物与蛋白质相互作用，对药物有什么限制，比如光谱性质，药物发挥作用的机制，对于做这方面研究的意义我其实也不太明白，有大侠给点指导[em06]

药物和蛋白的结合过程是可逆的还是不可逆的呢？

生物药物有望价廉物美南京大学解决蛋白质药物生产中“沉淀物”难题2013年01月28日 来源： 中国科技网 中国科技网讯（记者张晔 通讯员张文江）在1月18日揭晓的2012年度国家科技奖获奖项目中，南京大学生命科学学院教授华子春课题组以《微生物基因工程可溶性表达及产物后加工新技术》荣获2012年度国家技术发明二等奖。这一成果较好解决了用细菌生产蛋白质药物时的包涵体难题，从而让生物药物的生产能够价廉物美。 华子春教授告诉记者，药物一般分三种：生物药物、化学药物和天然或传统药物。化学药物主要是靠人工合成，天然或传统药物靠自然生长和提取，而生物药物主要利用生物细胞、采用基因工程技术生产。出现于上世纪70年代的基因工程技术就是用别的生物的细胞生产人的蛋白质药物，但蛋白质药物最大的特点就是严格依赖于空间结构，例如，一般应在冰箱储存的胰岛素如果被长时间在室温放置后，尽管其组成无改变，但是分子空间结构（即折叠状态）会发生改变，从而直接导致胰岛素失去活性、使药物失效。 用细菌生产蛋白质药物是生物技术对人类的一大贡献。但是长期以来，在细菌生产蛋白质药物的过程中常常会产生“沉淀物”，这在学术上被称作“包涵体”。包涵体的产生，严重影响了蛋白质药物的活性。面对这一世界性难题，国内外同行一般采用两种方法：一种是采用将包涵体复性的技术路线，即在生产过程中让没有活性的蛋白质恢复活性，这种方法使得生产时间增加、工艺复杂、同时增加生产成本；另一种是选用高等生物细胞进行生产的替代 办法，绕开包涵体的难题，这样做的结果是导致药物的生产时间和生产成本大幅增加。 华子春课题组历时19年，较好解决了细菌生产蛋白质药物时易形成“包涵体”难题，利用这一技术方法可以显著减少包涵体的产生，使得原先在细菌里不能溶解的蛋白质变成可溶解的蛋白质药物。这一方法不仅工艺简便，而且让蛋白质药物成本大幅下降。 在研究中，华子春课题组从理论着手，首先深入研究蛋白质在细菌中合成时折叠过程及规律。在此基础上，华子春课题组通过在多个环节、利用多种手段调控蛋白质折叠，有效解决了包涵体难题。在研究过程中，华子春课题组把握了两个关键环节：一是在生产环节，既要让药物产量高，又不形成包涵体，同时还兼顾后续的分离纯化工艺；二是在制备环节，优化了纯化工艺，研制出成本低、效率高的纯化工具。 立足基础研究、注重实际应用，这是华子春课题组一贯坚持的研究理念。正是因为如此，他们的成果广受企业欢迎。例如，从2006年开始，常州千红药业通过与华子春团队合作，实现了两个创新药物的顺利转化，因此先后获得了3项国家新药创制重大专项，“常州千红国际生物医药创新药物孵化基地” 获得国家科技部立项，该企业已从传统生化制药企业成功转型为现代生物制药企业，并于2011年上市。 《科技日报》（2013-01-28 七版）

大家好，我的课题是做药物与蛋白的相互作用，诚恳的希望各位做相互作用的战友们能够相互交流，我得邮箱是：dickwang2008@163.com，我的QQ号：121893929，欢迎大家踊跃交流！！可以e-mail交流，也可以通过QQ交流！

最近做血浆样品遇到了这样的情况：做方法学的时候，空白血浆添加药物出的峰形很好，与杂质峰的分离度等都很好，所有方法学考察的数据都很好。到做实际样品的时候问题出现了，在进样后1min的时候以及目标峰刚结束的时候出了两个很大的杂峰（不成峰形，就是一大坨），后面那个杂峰干扰目标峰。刚开始以为是进样时间长了导致柱子脏（实际上柱压没变化），就用常规冲洗方法反复冲洗色谱柱，再进样还是这个情况，而且很有规律：每次序列进样前5个样品没问题，从第6个样品开始那两个大杂峰就出现了。百思不得其解，后来查药物手册才知道这个药物与血浆蛋白的结合率达99%。 我的前处理方法是：200uL血浆+2mL正己烷/异丙醇（95：5，V/V）涡旋2min后10000r/min离心10min,取上层40度N2吹干，流动相复溶，12000r/min离心10min,取上清HPLC检测。 尝试过加酸（1mol/L盐酸）或者乙腈等沉淀蛋白方法，杂峰多、干扰严重且回收率低。用我上述方法回收率等方法学数据很好，峰形也很好，就是做实际样品时出现了那样的情况。 想请群里的朋友帮忙想想办法，解决这个问题！谢谢！

蛋白和药物之间的相互作用，都可以用什么方法来研究呢？

药物（蛋白）的结构表征、理化、纯度及杂质分析都用哪些仪器和方法呀?

我想问一下，蛋白沉淀剂如何选择。我现在在做蛋白药物的质控，很多测定需要先沉淀蛋白，其中有的用高氯酸，有的用磺基水杨酸，还有的用三氯醋酸，请问这几种酸对蛋白沉淀的效果有何区别么？以及作为蛋白沉淀剂来说合适的浓度是多少？谢谢各位~~

我在做药物与白蛋白相互作用的实验时，出现负峰，令人费解！敬请达人给予解答！谢谢！！

提起云南白药，首先想到的就是一种神秘色彩，一个连牙膏都标注着“国家保密配方”的大品牌，难免不让人联想到传说中的灵丹妙药。 但是，最近却有媒体爆出云南白药在美国的成分是完全公开的：田七、冰片、散瘀草、白牛胆等药物一一列出，使得云南白药不再神秘。这种行为引起了普遍的质疑：为什么云南白药对内对外的标准有这么大的差异？保密配方对云南白药的业绩有多大的促进作用？ 大家来讨论讨论，你认为云南白药在国内是否也应该公开配方？ 参考：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101216/3004490/

http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif多肽蛋白等生物大分子药物分析色谱柱的选择讲座时间：2014年12月19日 10:00主讲人：金琦芸赛默飞世尔公司专业色谱耗材部产品市场经理，在赛默飞一直致力于色谱耗材方面的产品应用支持，在固相萃取，液相，气相色谱柱在制药、食品和环境中的应用，积累有丰富的经验。http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】1、多肽蛋白等生物大分子药物分析色谱柱的选择2、生物大分子药物质量控制要求3、增强核技术色谱柱在多肽分离中的应用4、聚合物技术色谱柱在多肽蛋白分析中的应用 * 我们会在线上的听众中随机抽取5名幸运观众，赠送USB mini 办公/车载加湿器，报名后请记住讲座时间，别错过我们可爱的小礼品~！-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2014年12月19日 09:304、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/12625、报名及参会咨询：QQ群—231246773

看到这么一句话：酸性药物多与清蛋白结合，为什么呢？

做药物与蛋白相互作用时，用到 forster 能量转移理论，用J=ΣF(λ)ε(λ)λ4 △λ ／ΣF(λ )△λ ,请教一下J怎么计算的？

麻烦斑竹能不能传点药物与蛋白作用出现负峰的资料上来啊当然哪位兄弟姐妹有，就传上来分享一下在次表示真挚的感谢！[em01]

有毒，没毒？对云南白药（000538.SZ）来说，如何回答现在都是个棘手的问题。　　日前，云南白药正式承认，其产品配方中含有毒性中药材草乌（断肠草）。此前，已有111年历史的云南白药配方享受国家保密待遇，这也成为云南白药在国内拒绝公开配方的“挡箭牌”。　　而与之形成鲜明对比的是，2002年，云南白药在向美国食品和药物管理局（FDA）递交申请时曾披露了其配方，包括田七、冰片、散瘀草、白牛胆、穿山龙、淮山药、苦良姜、老鹳草等八味药，但同样未公开草乌成分。　　虽然即将在6月前在全国范围内替换新版说明，但云南白药对这一首次在国内公开的配方仍旧保持神秘状态——“本品含草乌（制），其余成分略”。　　被公开的“含毒”配方　　“云南白药中所含的草乌（制）为炮制后的乌头属类药材，通过独特的炮制、生产工艺，其毒性成分可基本消除，在安全范围内。”云南白药董秘吴伟昨日回应《第一财经日报》采访时强调。　　4月8日，云南白药公告称，修改云南白药系列说明书是国家食药监总局的统一要求，并非针对云南白药一家公司，公司药品的安全性和有效性经过长期验证。　　“国家规定含有28种有毒中药材的中成药都需要修改说明书，云南白药只是牵涉其中的一种药品。”吴伟强调。　　2013年11月，国家食品药品监督管理总局（CFDA，下称“国家食药监总局”）发布通知规定，产品中含有毒性药材的中药饮片企业，必须在说明书中写明毒性成分并添加警示语。按该通知要求，包括砒霜、水银、生川乌、生草乌、雄黄在内的28种毒性中药品种需要特别注明。云南白药成为被质疑最多的公司。　　但这并不是云南白药遭受含毒质疑的开始和全部。　　公开资料显示，草乌又名断肠草，其含有的生物碱对肾脏有一定毒性，超量使用会引起口唇和四肢麻痹、恶心、呕吐等中毒症状，严重者可危及生命。　　2013年2月5日，香港特区卫生署发现云南白药在香港出售的中成药样本中，共有五款含有未标示的乌头类生物碱，包括“云南白药胶囊”、“云南白药散剂”、“云南白药膏”、“云南白药气雾剂”及“云南白药酊”，香港特区卫生署、澳门特区卫生局因此发出停用回收通知。　　随后，国家食药监局约谈了云南白药，要求其及时修改说明书，并增加药品安全风险提示。　　而更早些时候，也有报道指出，2003年，广州某医院曾发生一起云南白药中毒抢救无效死亡的案子。　　事实上，国务院早在1988年颁布的《医疗用毒性药品管理办法》中便规定，包括砒霜、水银、生川乌、生草乌、雄黄在内的28种毒性中药品种需要特别注明。　　“其实国家2013年的新通知里特别强调，涉及国家秘密技术的中成药品种也不能例外，这基本就是专门对云南白药说的。”昨日，有接近国家监管部门权威人士向《第一财经日报》记者透露。　　上述权威人士进一步表示：“之前因为保密配方的身份在，一般也不太会碰它，但是这两年关于它的毒性和安全性的质疑多了，舆论压力也开始增大。”　　而本报注意到，即便是在新版说明书中，云南白药也仅标注了草乌毒性说明，对于配方中的其他组分配伍（根据病情需要和药性特点，有选择地将两种或两种以上药物配合在一起应用）仍然保密。　　也正是因为其境内外有别的配方公开程度，云南白药屡遭质疑，甚至被告上法庭，但公司方面强调，各地区对药品信息披露的要求略有不同，在中国该药是国家保密品种，因此不披露配方符合我国法律。　　除了云南白药，本报记者查询发现，通化金马药业的药品三七伤药片中也含有草乌，属于28种含毒中药材之一；同仁堂的六灵丸以及广州白云山制药总厂的活心丸所列的产品成分中则含有蟾酥成分。　　而在通知发布后不久，国家食药监总局官网特别挂出了《消炎利胆片说明书修订要求》，指出“本品中苦木有小毒，不宜久服；使用过程中应密切观察病情变化，如发热、黄疸、上腹痛等症加重时应及时请外科诊治”。　　消炎利胆片为一种清热、祛湿、利胆药物，国家食药监总局的数据显示，有多达120条产品注册信息，其主要成分为穿心莲、溪黄草、苦木，生产厂家包括修正药业、白云山等。　　《第一财经日报》昨日在中国最大的医学药学专业网站丁香园查询后发现，目前国内生产的含生川乌成分的药品13个、含草乌成分的药品11个、含附子和含白附子的药品各1个、含半夏的药品19个、含蟾酥的药品25个，涉及同仁堂、上海和黄、广州白云山、太极集团、漳州片仔癀、江西济民可信、杭州天目山等多家知名药企。　　毒性中药材和有毒药物　　“毒性中药材一直都是中医药重要的组成部分，毒性中药材和药物有毒，完全是两个概念，这是中医药的一个基本常识。”昨日，国家资深药典委员、北京中医药大学高学敏教授接受《第一财经日报》采访时表示。　　“如果单看毒性中药材的品种，砒霜、水银、生半夏、蟾酥，哪一个不是剧毒，但中药首先讲究君臣佐使的配伍，让它们各自发挥应该有的作用；其次，药材还都要经过严格复杂的炮制过程，降毒性、取药性——从某种程度上，这一点也正是5000年中医药的科学和特色所在。”高学敏认为。　　而高学敏担心的问题恰恰是，由于近年来社会对中医药的基本知识缺乏认识，以及中药材的发展困境，毒性中药材的品质下降和用量减少，对中医药长久发展带来负面影响。　　2010年开始，鉴于毒性中药材的发展状况，国家食药监总局陆续在北京、天津、河北、上海、杭州、安徽、河南、江西、广东、四川等地进行了为期一年的调研，希望在摸清行业现状的基础上，推进相关部门对毒性饮片实行批准文号管理。　　“毒性中药饮片的使用大幅减少，正制约着中药事业的发展。上海曙光医院、上海中医院等各大医院含毒性中药的处方每年均不足5张，毒性中药饮片使用量减少已经成为影响中药发展的一大隐患。”北京康派特医药经济技术研究中心主任、中国医保商会中药饮片分会执行副理事长李磊指出。　　在那次调研中，李磊很快发现，对毒性中药饮片而言，保存成本偏高，也影响了其使用——毒性中药饮片因其毒性巨大，在管理上各个部门的要求都很严格。　　有资料显示，以砒霜为例，砒霜的价格大致为2.6元/公斤，存放砒霜需要监控设备，专用保险柜以及专人专管，每年接受公安局监督检查，但是砒霜在药品中的使用量很少，甚至几年不会有一张处方，因此很多企业选择销毁砒霜，放弃存放。　　与此同时，由于土地和水源被污染导致的中药材农药残留超标等现实问题，也同时提出了中药材“被毒害”的问题。　　2013年，有国际环保组织发布调查报告称，其购自同仁堂、云南白药、天士力、九芝堂等9家品牌药店的多种常用中药材，超过七成被检测出含有多种农药残留。　　第三方机构的检测结果显示，共计65个样本中，有48个发现农药残留，占样本比率为74%——甲拌磷、克百威、甲胺磷、氟虫腈、涕灭威、灭线磷等六种农药为禁止在中药材上使用的品种，但是在当归、枸杞、金银花等共计26个样品中检出含一种以上。除氟虫腈为2009年被禁止使用外，其余农药已被禁止生产、销售和使用长达十年以上。　　公开数据显示，全球中医药市场现在年销售额已近300亿美元，但70%以上市场被日韩企业占据，中国仅占比5%，农药残留、重金属超标以及对药品成分、作用机理、副作用等标识不明等问题，是造成目前中药产品出口落后局面的主要原因。　　●TIPS：　　据国家食药监总局官方网站上发布的《医疗用毒性药品管理办法》（国务院令第23号），28种毒性中药品种包括砒石（红砒、白砒）、砒霜、水银、生马前子、生川乌、生草乌、生白附子、生附子、生半夏、生南星、生巴豆、斑蝥、青娘虫、红娘虫、生甘遂、生狼毒、生藤黄、生千金子、生天仙子、闹阳花、雪上一枝蒿、红升丹、白降丹、蟾酥、洋金花、红粉、轻粉和雄黄。

关于AFM 的应用范围:可不可以用在药物与蛋白作用的检测上,看他们的作用力敬请斑竹跟高手来回答谢谢!

蛋白类药物质量分析方面主要有如下： BINDING:结构上的研究：主要包含，常规的质量控制，如纯度，身份鉴定，含量测定，杂质残留等；纯度可以通过，常规的SE-HPLC,RP-HPLC等测定，身份鉴定可以通过肽图-质谱，糖图等完成，也会涉及到。含量通常浓度，蛋白量等，杂质包含HCP,LPA,RDNA等等。 AFINITY：主要包含药理活性，毒性，代谢等研究，

http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gifiCMS2014 质谱网络会议——药物分析会议时间：2014年11月19日 9:30-17:00【简介】 仪器信息网将于2014年11月18-21日举办"第五届质谱网络会议（iConference on Mass Spectrometry，iCMS2014）"，本届会议将与中国化学会质谱分析专业委员会合作举办，旨在通过网络会议平台给国内质谱科学家提供一个全新的沟通交流平台，提高质谱科学研究和应用水平。 本届网络会议为期四天，将开设质谱新技术专场、地质能源专场、药物分析专场(上)、药物分析专场(下)、蛋白质组学/代谢组学专场(上)、蛋白质组学/代谢组学专场(下)、环境专场、食品专场共8个主题，每个主题为1个分会场，时长为半天或一天，大会将提醒近30名著名质谱专家就不同的主题做精彩的报告并同期与大家进行交流。 iCMS2014—药物分析专场(上)1）吐温-80的成分分析和安全性初探——孙会敏 研究员 中国药品食品检定研究院2）基于脂质组学雷公藤肝肾毒性作用机制的研究——张金兰 研究员 中国医学科学院药物研究所报名地址：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1082iCMS2014—药物分析专场(下)1）仿制药品的质量研究及标准建立——宁保明研究员 中国药品食品检定研究院2）PEG修饰蛋白药物质量研究及进展——梁成罡研究员 中国药品食品检定研究院3）替代对照品法在中药整体质量控制中的应用——孙磊副研究员 中国药品食品检定研究院报名地址：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1251-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名及参会咨询：QQ群—231246773

[size=4]我正在做一种生物碱与[/size][size=3][font=宋体]牛血清白蛋白（BSA）结合作用的荧光光谱研究，需要求算[/font][/size][size=3][font=宋体]生物碱分子的紫外光谱与牛血清白蛋白（BSA）[/font][/size][size=3][font=宋体]荧光发射光谱的重叠积分，以便求算药物分子与BSA结合的距离，文献上说明可以采用矩形分割法求出两光谱重叠区域的积分值，但用何软件如何求算我还不会。肯请此间高人出手指点，不胜感激！最好能将方法发到我的邮箱[email]zhongming2613@163.com[/email] 谢谢！[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/03/201003121811_205351_1889038_3.gif[/img][/font][/size]

[color=#333333] 10月10日，由国际计量局、中国计量科学研究院（以下简称“中国计量院”）、中国食品药品检定研究院联合主办的第二届“蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控（PPTD）”国际研讨会在四川成都开幕。市场监管总局副局长秦宜智（正部长级）出席并讲话，成都市副市长刘旭光致辞。开幕式由中国计量院党委书记段宇宁主持。[/color][color=#333333][/color][align=left] 市场监管总局副局长秦宜智讲话，秦宜智在讲话中指出，人民群众对美好生活的向往，最基本的需求是健康。研究掌握人类生命科学和生物医学客观规律，离不开对各种“量”的精准测量、获取和比对。希望研讨会聚焦计量、标准在质量与安全控制中的重要技术基础作用，通过知识共享和技术交流，着力提升生物医药产品研发、质控和科技创新能力。他表示，市场监管总局将牢固树立以人民为中心的发展理念，加强基础前沿和应用型计量测试技术研究，深化计量领域国际交流与合作，努力为服务人民群众生产生活提供有力的计量技术支撑。[/align][color=#333333][/color][align=left] 成都市副市长刘旭光致辞，刘旭光在致辞中介绍了目前成都加快建设生物医药产业功能区，打造国际知名、国内一流的医药健康研发创新中心、产业孵化中心和高端制造中心的情况。[/align][color=#333333][color=#333333]　 蛋白质和肽类药物及诊断试剂的有效性评价和质量的精确控制是目前全球生物医药产业面临的巨大挑战，也是企业研发的重点和标准化工程化开发的前提。此次研讨会为期3天，以“测量与标准，质量与安全”为主题，聚焦计量、标准在质量与安全控制中的重要技术基础作用，旨在深化未来生物医药领域尤其是蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控等细分专业的国际间交流，促进全球生物医药产业健康发展。[/color][/color][color=#333333][color=#333333][/color][/color][align=left] 国际计量局化学部主任Robert Wielgosz作大会报告。除大会报告外，与会代表还围绕药物表征与质量保证、体外诊断试剂研究和质量控制、标准、法规与计量等3个主题进行了分会场交流和讨论，以期进一步促进该领域学术交流和技术发展，提升研发水平和产品质量。[/align][color=#333333][color=#333333][/color][/color][align=left] 中科院大连化物所张玉奎院士作大会报告。国际计量局化学部主任 Robert Wielgosz、北京化工大学校长谭天伟院士、中科院大连化物所张玉奎院士、市场监管总局计量司司长谢军等来自国际计量局（BIPM）、国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）、国际临床化学联合会（IFCC）等国际组织，国内外计量技术机构、药品研发与管理机构、临床医学检验机构，有关科研院所和企业的专家学者，以及市场监管总局、四川省和成都市相关部门领导，共400余人出席研讨会。[/align]

云南白药最近修改了药品说明书，明确配方中含“草乌”成分。草乌又称断肠草，主要作用成分为乌头碱，有剧毒。早在2013年2月，云南白药就在香港被检出含有未标注的毒性成分乌头类生物碱（草乌的主要成分），香港卫生署及澳门卫生局随即对云南白药发出禁售及回收命令。 由于云南白药被列为国家保密品种，根据国家保密法律法规有关规定，凡列入国家保密的品种，其说明书、标签可不列成分项目。因此，对于白药的配方，云南白药一直讳莫如深。而此次是云南白药首次修改药品说明书并承认含草乌的说明。 在市场议论纷纷之时，今日（4月8日）云南白药发布公告表示，根据国家药监局《关于修订含毒性中药饮片中成药品种说明书的通知》的要求，公司相关药品说明书的修改工作于2013年12月底全部完成。 同时，云南白药还出具了两份此前对于云南白药安全性的说明，在2013年2月6日，云南白药就乌头碱类物质进行了说明，并出具数据：“在2010年至2012年间，共生产销售云南白药（4g/瓶）1亿瓶、云南白药胶囊（0.25g/粒）17亿粒，公司通过主动开展不良反应监测工作，三年间共监测到涉及云南白药和云南白药胶囊的各类不良反应共计28例，主要表现为皮肤过敏、发痒等；未监测到严重不良反应，产品的有效性和安全性毋庸置疑。” 另一方面，就公众广泛关注的2013年2月香港卫生署下架部分白药药品事宜，在上市公司配合香港卫生署要求补充完善相关产品注册程序后，香港卫生署已同意恢复上架，并于2013年11月起在香港全面恢复正常销售。云南白药还重申，云南白药产品安全有效。

抗体是一种结构复杂的生物大分子，由多个氨基酸组成。即便是天然的抗体，其结构也是各不相同。抗体药物中使用到的单克隆抗体（IgG）在生产工艺（细胞培养、分离纯化）与保存过程中易发生不均一性的变化，包括抗体蛋白的二聚体、多聚体、脱酰胺化、末端氨基酸突变以及糖链部分的结构差异。这些不均一性会使药物的药效、安全性方面受到影响。 而随着生产工艺及分析手段的进步，单克隆抗体类药物的质量控制将更加严格。高效液相色谱（HPLC）作为一种分离技术，在蛋白质、抗体等生物大分子的分离分析方面已得到越来越广泛的应用。 高效液相色谱法（HPLC）可对抗体药物以及重组蛋白药物中的不均一性进行有效地分析。比如，尺寸排阻色谱法（SEC）利用了分子空间结构的不同，可对抗体多聚体、片段、PEG化蛋白等样品进行有效分析。离子交换色谱（IEC）、疏水色谱（HIC）、反相（RPC）以及亲水色谱法（NPC/HILIC）可对抗体中的带电异构体、结构异构体，或者由于糖基化、脱酰胺化和氧化等作用引起的杂质进行高分辨率分析。 近年来，科学家们一直致力于在生物药分离领域开发具有革新性的色谱分离介质，基于尺寸排阻、离子交换色谱等多种HPLC分离技术实现了对抗体多聚体、各种抗体异构体的高效分离，在抗体药物的质量控制方面提供了有效地监控手段。

[b]职位名称：[/b]蛋白纯化应用工程师[b]职位描述/要求：[/b]1、负责客户抗体、疫苗、重组蛋白药物纯化工作，了解客户需求，提供技术解决方案2、负责蛋白类药物小试、中试及放大。3、填料检测性能方面略懂即可。任职资格：1、生物工程或相关专业本科及以上学历，2、具有蛋白类（抗体，疫苗及重组蛋白等领域）工作经验优先；3、具有在相关填料企业应用经验者优先；4、具备良好的沟通能力及自我管理能力。5、优秀应届生或1年以上工作经验者也可以培养。[b]公司介绍：[/b] 月旭科技（上海）股份有限公司2003年8月在上海张江高科技园区注册成立，2011年在浙江金华成立全资子公司，2014年10月完成股份制改造，2015年5月在全国中小企业股份转让系统（新三板）挂牌上市（股票代码：832463）。月旭科技集研发、生产、销售和服务为一体，致力为客户提供色谱分离分析技术、产品和整体解决方案。色谱技术广泛应用于生物医药、食品安全检测、环境监测、精细化工等关系民生并处于快速发...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/53108]查看全部[/url]

了解不同时间药物在血浆或血清中的浓度，对于计算一种药物的代谢动力学很有必要；反之，药物动力学也是药物吸收、分布、代谢和排泄过程的一部分。准确了解药物在体内吸收、分布、代谢和排泄的规律，便于精确地计算所需药物剂量，既能保持有效的药物浓度，同时避免用药过量致毒。预先对多屏深孔Solvinert（MultiScreen Deep Well Solvinert ）和多屏Solvinert滤板进行了验证，进行血浆或血清中蛋白质的板内沉淀，以便展开总药物分析。在滤板上可以快速、细致并完整地转移滤液，这样就可以在进行总药物分析之前为样品制备提供一个自动化兼容的平台。Solvinert滤板过滤的滤液中不含蛋白质，这与质谱分析法和紫外线分析法的结果一致。使用多屏深孔和多屏Solvinert滤板可产生有复验性的结果，它是一个稳定且可靠的平台。血清中的蛋白质被这些滤板过滤并沉淀之后，得到的样本中基本上不含蛋白质，回收率很高，便于萃取。药物动力学特性可以让新药开发商更了解药物的有效性和安全性，而这在新药的注册审批中是必要的。为了更好地了解候选药物的代谢动力，金斯瑞（ GenScript）建议用动物来做药物分布及其代谢的研究，分析在不同时间段、不同组织或血清中，药物及其代谢物的情况。金斯瑞进行精确的药物和药物代谢动力学研究，涉及两个主要方面：药物分布及其代谢动力研究和抗体药物的代谢动力研究。群体药代动力学研究的是个体之间药物浓度变异来源及其相关性，这些个体是指按临床上相关剂量接受候选药物的目标患者人群。患者的某些人口统计学特征、病理生理特征以及治疗方面的特征，比如体重、排泄和代谢功能、以及接受其他治疗，都能够有规律地改变药物剂量-浓度关系。例如，主要由肾脏排除的药物，在接受同样剂量的情况下，在肾功能衰竭患者体内的稳态浓度，通常高于肾功能正常的患者体内的稳态浓度。群体药代动力学的研究目的就是找出那些使剂量-浓度关系发生变化的、可测定的病理生理因素，确定剂量-浓度关系变化的程度，当这些变化与临床上有意义的治疗指数改变相关的情况下，能够恰当地调整剂量。在药品开发中使用群体PK方法，使获得完整的药代动力学资料有了可能，不但能从来自研究受试者的相对稀疏的数据中获取资料，而且还能从相对密集的数据或从稀疏数据和密集数据的组合中获取资料。群体PK方法能够分析来自各种不均衡设计的数据，也能分析因为不能按常用的药代动力学分析方式分析而通常被排除的研究数据，比如从儿科患者和老年患者获取的浓度数据，或在评价剂量或浓度与疗效或安全性之间的关系时所获取的数据。传统药代动力学研究的受试者通常是健康的志愿者或特别挑选的患者，一组成员的平均情况（即平均血浆浓度-时间曲线）一直是关注的主要焦点。许多研究将个体之间药代动力学的变异作为一个需要降到最低的因素进行观察，通常是通过复杂的研究设计和对照方案，或通过有严格限制的入选标准/排除标准，将其降到最低。事实上，这些资料对在临床应用期间可能会出现的变异至关重要，但是却被这些限制所掩盖。而且，传统药代动力学研究只关注单个变量（例如肾功能）的作法，还使其难以研究变量之间的交互作用。

用GB/T 21312-2007方法检测鸡蛋中的氟喹诺酮类药物残留，有两个问题请教各位专家：1、净化后氮吹时是否需要水浴加热，加热温度控制在多少合适2、标准要求氮吹要吹干，但完全按标准操作根本吹不干，最后剩余0.5-1ml黄色粘稠液体（应该是蛋白吧），用什么方式解决好。前处理过程是否需要增加去蛋白环节，各位老师有什么好的经验分享下，谢谢！