纯化工艺

【序号】：2【作者】：宋磊孟国庆郭燕风【题名】：发酵液中透明质酸提取纯化工艺的研究【期刊】：山东农业科学. 【年、卷、期、起止页码】：2017,49(03)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RuvaCO5y_ujfIj_U2lrF2sJMqLLz4KNFK027DeDBjoPN&uniplatform=NZKPT

[color=#dc143c]最近版里原创热风呼呼的刮~~于是我也特来跟风积极参与！近来一直在做包涵体的复性与纯化，就特来与大家分享，希望大家多多支持、指点[em09511][/color][b]1.包涵体的分离纯化[/b] 蛋白质的纯化是基因工程下游的关键内容，以包涵体形式表达的重组蛋白质的纯化研究一直是重组基因工程药物研究中的热点和难点。重组蛋白在宿主系统中高水平表达时，无论是用原核表达体系或酵母表达体系甚至高等真核表达体系，都可形成包涵体。蛋白表达后的分离纯化对蛋白的规模化生产也是至关重要的，所以本实验通过采用稀释复性、透析复性、离子交换层析、凝胶过滤层析等实验方法，研究探讨对分离纯化以及蛋白复性的最佳方法和条件。[b]1.2.1包涵体的复性[/b] 重组蛋白质在分离纯化的过程中, 必须维持一定的浓度和生物活性形式, 以及防止被降解。从包涵体中获得有生物活性的蛋白，需要寻找一种简单而有效的复性方法。在小规模的蛋白复性研究及其进一步的纯化中，稀释复性是最常用的方法。但是稀释复性在商业规模生产中具有一定的缺陷，如需要较大体积的复性液，以及需要附加的浓缩步骤。许多其他方法也已发展起来，例如：透析、渗透、低分子量辅助物添加复性、离子和无离子表面活性剂辅助复性、聚乙烯乙二醇辅助复性等方法。 在折叠反应中，从伸展态到中间体的速度是非常快的，只需要几毫秒，但从中间体转变为天然态的过程比较缓慢，是一个限速过程。聚集过程与复性过程相互竞争，故而应尽量避免聚集体的产生。一般认为，蛋白质在复性过程中涉及两种疏水作用，一是分子内的疏水相互作用，可促进蛋白质正确折叠 一是部分折叠的肽链分子间的疏水相互作用，在复性过程中，部分折叠的中间体的疏水簇外露，分子间的疏水相互作用会导致蛋白质聚集。蛋白质的立体结构虽然由其氨基酸的顺序决定，然而伸展肤链折叠为天然活性结构的过程还受到周围环境的影响，如温度、pH值、离子强度、复性时间等因素的影响。[b]1.2.2包涵体离子交换层析纯化[/b] 为了获得高纯度的活性蛋白, 需要对复性的蛋白质进行进一步纯化。根据分离目标蛋白的特点(如P I、疏水性、氨基酸组成, 分子量大小、表面电荷的分布状况) , 然后确定分离方法, 从而正确选择最有效的分离介质,本实验采用SP Sepharose F.F 阳离子交换层析分离纯化重组蛋白 离子交换层析是以蛋白质分子净电荷和表面电荷分布为分离基础的。具体说就是利用蛋白质带电性的差异,在离子吸附剂上静电吸附能力不同,用不同的pH 离子强度洗脱液洗脱,从而使蛋白质分离的柱层析方法。离子交换又分为阴离子交换和阳离子交换。离子交换剂又有强弱之分,强的离子交换剂在整个pH 范围内都是离子化的,而弱的离子交换剂通常仅在pH6～9 之间是离子化状态,因而后者对所适用的pH 范围又有了进一步的限制。 在洗脱方式上,阳离子交换主要是改变pH ,它主要应用于等电点大于5 的蛋白质。20 种氨基酸中,大部分带正电或负电,这是IEC 应用范围广的原因。离子交换层析处理量大,附载系数高,一步缩小样品体积很多。离子交换层析去除杂质能力强,如对热原质,核酸、及电荷性有差别的蛋白均可去除。它还有一个特点,利用蛋白质在不同pH 和盐浓度下带电性的不同,通过不同条件下应用同种类型或不同类型介质,分步使目标蛋白质达到提纯目的,这是除亲和柱层析外,别的柱层析达不到的分离能力。离子交换层析原则上可放在纯化工艺的任何一步,它属吸附型层析,单步损失也较大。

条条大路通罗马，纯化之路千万条。本篇是写给蛋白质纯化新手的，就一些最常用的纯化工艺、概念方法作一些列举。以起始原料的不同来进行分类，分为：大肠杆菌、酵母、细胞培养、腹水、血清、生物组织六个板块。板块一、大肠杆菌（这里讨论的大肠杆菌为非分泌到培养基中的重组蛋白，是否有重组蛋白分泌到培养基中的工程菌我没有见过。）一、关于菌体的量大肠杆菌表达的基因工程蛋白是纯化人员最方便获得的原料，对纯化工艺开发来说几乎没有原料方面的限制。常看到有战友用个几毫升的菌液去做纯化，对此我十分不解，同样要做，为什么不多做点呢？很少的菌体会给纯化带来一些难以估计的问题，工艺的重复性和放大往往出现问题。因此，要做个好工艺就多发酵表达一些菌体吧。我做纯化时，初始工艺摸索用的菌体量一般为10g左右。二、关于是否包涵体表达包涵体的定义我就不讲了。我要讲的是，一个基因工程蛋白是否是包涵体表达的说法本身就不完全准确。至于包涵体在电镜下的晶体颗粒表现等等对我们纯化来说毫无意义，我相信做纯化工艺的人没有谁去看这个电镜，也不关心。我们判断的依据只是SDS-PAGE，目的蛋白在破菌沉淀中，我们就认为是包涵体表达，但这是一个似是而非的结论。看着没问题，实际上是有毛病的。关键在于你用的是什么破菌缓冲液！有些蛋白在用缓冲液A破菌时是在破菌沉淀中，而用缓冲液B破菌时却在破菌上清中。缓冲液A和B的差别可能只是pH上相差1-2个单位。那么它是包涵体表达还是可溶上清表达呢？说这个问题主要在于有些战友往往非常在意他的目标蛋白是否包涵体表达。甚至还有包涵体表达就用专门的包涵体蛋白纯化方法等等。我们应该关心的是目标蛋白在什么缓冲体系下是可溶的，在什么缓冲体系下是不溶的！不要让包涵体这个概念给你误导。三、关于表达量我们常常在发表的文章上看到，我这个工程菌的目标蛋白的表达量达到菌体总蛋白的30%、50%等等。我要说都是文章的作者在忽悠。不知道他们是如何定量的，用的最多的大概就是SDS-PAGE的扫描分析吧。且不说一个SDS-PAGE不能表现出所有的菌体蛋白，电泳的染色方法、染色脱色强度、照片的曝光强度、扫描分析时的条带选择等等无不对这个百分比影响巨大。在公司的QC部门做的对此应该最有体验，20%的条带要它变成30%又有何难？我的观点是对待表达量的描述不可定量，只能定性。如用：很低、较低、中等、较高、很高等来描述。有一个指标与表达量密切相关，那就是单位体积的菌体量。两者的乘积才是单位体积发酵液的目标蛋白产率。与表达量相关的指标还有纯化倍数、纯化收率等，这些指标我们也常常在发表的文章中看到。同样，我也认为都是不准确的。除非你用的是活性测定的方法，用蛋白活性收率来表征。纯化工艺的难易有时候也与表达量相关，表达量高时往往纯化也方便的多。所以，尽量提高你的目标蛋白表达量不只是基因工程上游和产量的问题，还是纯化工艺开发的问题。四、菌体破碎（1）破菌前处理诱导表达的菌体在发酵离心后，最好先用PBS缓冲液或其它缓冲液立即洗涤一次。菌体洗涤可以去除一些培养基中的杂质，及代谢产物，减少对后续纯化的影响。如果菌体已经冻存过，冻融的菌体可能有部分破碎，就不要洗涤菌体了。小量菌体的悬浮可以用5ml的枪头吹打，再磁力搅拌。大量菌体的悬浮可以用分散乳化机。破菌缓冲液的用量一般为1∶10—1∶20，即1g湿菌体用10—20ml的破菌缓冲液。（2）破菌缓冲液的选择选择何种破菌缓冲液，应该与后续的纯化方法密切相关，不能一刀切。而且，破菌缓冲液还与是否可溶表达相关。对于可溶表达的重组蛋白，一般就选用第一步层析纯化的平衡缓冲液为破菌缓冲液。对于不可溶表达的重组蛋白，最简单的就是选用PBS为破菌缓冲液。在选用破菌缓冲液时，有个小小的trick，加EDTA。有个别重组蛋白很脆弱，在超声破菌时就有大量的降解。注意，不是表达降解，而是超声过程中降解。特别是用pET32表达的his-tag融合蛋白容易降解，我运气好，遇到过2次这种超声降解。第一次碰到时，害得我好苦。反复找原因，是诱导表达温度？是超声温度过高？超声功率？外源蛋白酶污染？……最后用EDTA解决了。在破菌缓冲液中加0.5mM的EDTA就不会降解了。推测原因，可能是大肠杆菌自身有那么一种蛋白酶，破菌释放后就正好会攻击我的宝贝蛋白。而这种蛋白酶是金属蛋白酶，加EDTA后把它的枪栓（金属离子）给卸了，我的蛋白小命也就保全了，哈哈。第二次在SDS-PAGE上看到降解时，心里就不慌了。可能有战友会问，his-tag的蛋白加了EDTA后还怎么过Ni柱啊，恭喜你，问对了。我的解决方案是先过离子交换柱。EDTA带负电荷，用Q/DEAE吸附EDTA，或用SP柱吸附目标蛋白后，再透析一下，过Ni柱纯化。爱探险的dora跳着舞，成功啦，you did it！。（3）破菌方法大肠杆菌的破碎方法常用的大概有：反复冻融加溶菌酶法、超声法和压力匀浆法。一般来说处理菌体的量也是这个顺序。冻融方法我不喜欢，处理量太少且费时，要买溶菌酶，还是个外源蛋白。我喜欢强力型的超声和压力匀浆。超声法是小规模和中等规模破碎菌体的首选，选择好相应的超声探头，一次处理菌体量为0.1g-100g。压力匀浆为中到大规模破菌的首选，处理量大、快，破菌效果好，但发热量大，对温度非常敏感的蛋白慎用。超声破菌：以10g湿菌体为例，加入破菌缓冲液100ml，玻璃烧杯中磁力搅拌悬浮充分。冰水浴超声。设置超声时间4s，间隙时间4s，超声功率400-600W，超声次数100-200次。压力匀浆：以200g湿菌体为例，加入4℃预冷的破菌缓冲液3000ml，用分散乳化机充分混匀。匀浆压力800bar左右，压力匀浆发热非常大，流出液要冰水浴加磁力搅拌。一次匀浆完毕后，让菌液充分冷却后再进行二次匀浆。匀浆完毕的菌液如果粘度比较大，可用超声破碎仪超声40次，打碎核酸减小粘度，以方便离心和纯化。（4）破菌后离心高速冷冻离心机离心，50ml的小管18000rpm，20min，4℃；500ml的瓶用10000rpm，30min，4℃。50ml小管的离心效果比500ml的瓶好，如果你的溶液量在300ml以下，还是勤快点，多装几根50ml的小管吧。（5）过滤对上清可溶表达的蛋白在收集破菌离心上清后，必须过滤后才能上柱纯化。在园子里常看到有战友说我的柱流速很慢，层析柱压缩等很厉害，柱头有杂质堵了等等，这多数是因为没有进行过滤操作。过滤一般采用真空负压抽滤，可以选择0.8um的膜或双层滤纸过滤。多数层析的要求都是过柱溶液需经过0.45um的膜过滤，但实际上对破菌后的上清液或包涵体的溶解上清样，0.45um膜太难过滤了，mission impossible，无法完成操作。所以在实际工作中，我们都是采用双层滤纸或0.8um的膜过滤。在此推荐我用的一套设备组合：millipore wp6122050型台式真空压力两用泵和Sartorius 16201不锈钢过滤器，非广告，好用哦。五、包涵体处理前面说过对纯化来说，我不赞成包涵体的提法，但为了表述方便还是不妨借用一下，谁…谁在拍砖头啊。（1）包涵体洗涤我的蛋白是包涵体表达，用什么来洗涤啊？此类问题战友常问。其实还真不好回答。用什么溶液来洗涤包涵体也是与后续纯化方法相关的。例如，后面接离子交换层析，洗涤液不能加盐；后面接Ni柱，洗涤液不能加EDTA等等。罗列了一些可用的洗涤液成分如下，根据自己的需求来增减。pH6.0-pH9.0：高pH使得包涵体倾向于溶解，杂蛋白也去除的好些，但高pH有可能使目的蛋白降解。10-50mM PB，10-50mM Tris：维持缓冲环境，后接离子交换时选低一点的浓度。0-0.5N NaCl：盐洗涤有助于核酸的去除，多年前有位做干扰素的可爱老太太教我，盐洗涤后包涵体的OD280/260的比值（溶解后）会升高很多，也就是核酸去除很多，有利于后续纯化。0.5-5mM DTT：提供还原环境，打开蛋白中的二硫键，使得包涵体倾向于溶解，有利于杂蛋白的去除。但浓度太高了使得包涵体真的溶解就不是洗涤了。后续用Ni-IDA柱不可以加，用Ni-NTA柱少加。0-1%beta-ME：同DTT，还原能力稍弱。气味那个香啊……0-2N Urea：变性剂，有利于包涵体中氢键、疏水键、范德华力……的打开，有利于洗涤去除杂蛋白。同样高浓度会使包涵体溶解。类似的是盐酸胍，更强的变性剂，更高的价格，我等不穷的人也消费不起。当然，你很富就用吧，有时候更有利于包涵体蛋白的线性化。0.05-1%Triton X100：非离子型表面活性剂，像洗衣粉一样用了。同样的还有zwittergent，一种我一直想找机会试试的东东，当年为了溶解beta干扰素包涵体搞得我好苦。0-2mM EDTA：螯合剂，去除金属离子，有利于蛋白的稳定和溶解。Ni柱禁用。其它：期待各路英豪奉献。（2）包涵体溶解看了包涵体洗涤部分，怎么溶解包涵体应该心中有数了。无非就是pH，变性剂，还原剂，表面活性剂等等的组合。经典的包涵体溶解液的配方为：pH8.0，20mM Tris，8M Urea。说它经典，是因为我用的最多，嘻嘻。再根据个性蛋白纯化的需要往这个配方里面加调料，如Ni柱纯化的咪唑、氯化钠；溶解或吸附不好时再加点DTT、Triton。包涵体的溶解也有两个小Trick，独门秘籍哦。第一，包涵体沉淀在溶解时往往会有一些像硬胶状的块块，有弹

[align=center][font='times new roman'][size=20px]藤青泡[/size][/font][font='times new roman'][size=20px]腾片[/size][/font][font='times new roman'][size=20px]纯化[/size][/font][font='times new roman'][size=20px]工艺研究[/size][/font][/align][size=16px]由于提取工艺中采用水为溶剂，其极性大，浸出范围广，选择性较差，药材中的有机酸盐、多糖、蛋白质、[/size][size=16px]苷[/size][size=16px]类、黄酮等均能被浸出，所含与疗效无关的成份较多，使浸膏得率偏高，患者每天所需服用量大，顺应性差，因此采用适当的方法进行纯化。[/size][size=16px]本实验采用醇沉的方法对药液进行[/size][size=16px]纯化，沉淀除去[/size][size=16px]药[/size][size=16px]液中的[/size][size=16px]多糖、蛋白质[/size][size=16px]等杂质，[/size][size=16px]以提高有效成分纯度[/size][size=16px]。[/size][size=16px]采[/size][size=16px]用正交试验的方法考察各因素对醇[/size][size=16px]沉结果[/size][size=16px]的影响，筛选最佳醇沉条件。[/size][font='times new roman'][size=20px]仪器与试药[/size][/font][size=16px]（[/size][size=16px]1[/size][size=16px]）[/size][size=16px]实验仪器[/size][table][tr][td][size=16px]低温冷却液循环泵[/size][size=16px]DLSB-5/20[/size][/td][td][size=16px]郑州长城科技工贸有限公司[/size][/td][/tr][tr][td][size=16px]循环水式多用真空泵[/size][size=16px]SHB -[/size][size=16px]Ⅲ[/size][/td][td][size=16px]郑州长城科技工贸有限公司[/size][/td][/tr][tr][td][size=16px]旋转蒸发仪[/size][size=16px]RE-2000[/size][/td][td][size=16px]上海亚荣生化[/size][size=16px]仪器厂[/size][/td][/tr][tr][td][size=16px]低速多管离心机[/size][size=16px]LXJ-[/size][size=16px]Ⅱ[/size][size=16px]B[/size][/td][td][size=16px]上海飞鸽电器厂[/size][/td][/tr][/table][size=16px]（[/size][size=16px]2[/size][size=16px]）[/size][size=16px]实验试药[/size][table][tr][td][size=16px]无水乙醇[/size][size=16px] (AR)[/size][/td][td][size=16px]国药集团化学试剂有限公司[/size][/td][/tr][/table][font='times new roman'][size=20px]泡腾片醇沉工艺条件的研究[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]醇沉正交试验筛选[/size][/font][size=16px]称取药材藤茶、葛花、青果、甘草各[/size][size=16px]0.5[/size][size=16px]倍处方量，共[/size][size=16px]1[/size][size=16px]份，按[/size][size=16px]“[/size][size=16px]1.2.1[/size][size=16px]”[/size][size=16px]项所筛选的最佳提取工艺[/size][size=16px]A3B1C3[/size][size=16px]，即[/size][size=16px]20[/size][size=16px]倍量水、提取[/size][size=16px]0.5h[/size][size=16px]、提取[/size][size=16px]3[/size][size=16px]次，合并[/size][size=16px]3[/size][size=16px]次提取液，分成[/size][size=16px]9[/size][size=16px]份，每份[/size][size=16px]350 ml[/size][size=16px]，以提取液浓度（[/size][size=16px]A[/size][size=16px]），含醇量（[/size][size=16px]B[/size][size=16px]），醇沉时间（[/size][size=16px]C[/size][size=16px]）为考察因素，按表[/size][size=16px]5[/size][size=16px]的因素水平进行[/size][size=16px]L9[/size][size=21px]([/size][size=16px]3[/size][font='times new roman'][size=16px]4[/size][/font][size=21px])[/size][size=16px]正交试验，并以总黄酮提取量、干浸膏得率为评价指标，考察最佳醇沉工艺条件。[/size][size=16px]醇沉浸膏得率的测定[/size][size=16px]精密量取上述醇沉后药液[/size][size=16px]5 ml[/size][size=16px]，参照[/size][size=16px]“[/size][size=16px]1.2.1[/size][size=16px].1”[/size][size=16px]项下的方法测定浸膏得率，结果见表[/size][size=16px]6[/size][size=16px]。[/size][size=16px]醇沉后总黄酮的含量测定[/size][size=16px]对照品溶液的制备：对照品溶液的制备：[/size][size=16px]称[/size][size=16px]芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇溶解[/size][size=16px]并定量稀释至每[/size][size=16px]1 ml[/size][size=16px]含[/size][size=16px]0.2 mg[/size][size=16px]的[/size][size=16px]芦丁溶液，[/size][size=16px]制得对照品溶液[/size][size=16px]。[/size][size=16px]供试品溶液[/size][size=16px]的制备：取上述[/size][size=16px]9[/size][size=16px]份醇沉后药液各[/size][size=16px]1 ml[/size][size=16px]，置[/size][size=16px]50 ml[/size][size=16px]容量瓶中，并用水稀释至刻度。[/size][size=16px]芦丁对照品标准曲线制备：芦丁对照品标准曲线制备：精密吸取芦丁对照品溶液[/size][size=16px]0.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]1.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]2.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]3.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]4.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]5.0[/size][size=16px]，[/size][size=16px]6.0[/size][size=16px] [/size][size=16px]ml[/size][size=16px]，分别置[/size][size=16px]25 ml[/size][size=16px]（[/size][size=16px]V[/size][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][size=16px]）量瓶中，加水至[/size][size=16px]6 ml[/size][size=16px]，[/size][size=16px]加入[/size][size=16px]1 ml[/size][size=16px]的[/size][size=16px]5%[/size][size=16px][back=#ffffff] NaNO[/back][/size][font='times new roman'][size=16px][back=#ffffff]2[/back][/size][/font][size=16px]，[/size][size=16px]混匀，放置[/size][size=16px]6min[/size][size=16px]，[/size][size=16px]往容量瓶里加入[/size][size=16px]1 ml[/size][size=16px]的[/size][size=16px]10%A[/size][size=16px]l[/size][size=16px](NO[/size][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][size=16px])[/size][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][size=16px]，[/size][size=16px]混匀后静置[/size][size=16px]6min[/size][size=16px]，加[/size][size=16px]入[/size][size=16px]10[/size][size=16px] ml [/size][size=16px]NaOH[/size][size=16px]试液，[/size][size=16px]混匀，[/size][size=16px]加[/size][size=16px]蒸馏[/size][size=16px]水至刻度，[/size][size=16px]混匀[/size][size=16px]，[/size][size=16px]静置[/size][size=16px]15[/size][size=16px]分钟，以[/size][size=16px]0.0 ml[/size][size=16px]对照品溶液制[/size][size=16px]备[/size][size=16px]的溶剂为空白[/size][size=16px]对照[/size][size=16px]，[/size][size=16px]在[/size][size=16px]510nm[/size][size=16px]波长下[/size][size=16px]测定[/size][size=16px]各组的[/size][size=16px]吸[/size][size=16px]光[/size][size=16px]度值。[/size][size=16px]以吸光度为纵坐标[/size][size=16px]([/size][size=16px]A[/size][size=16px])[/size][size=16px]，浓度为横坐标（[/size][size=16px]mg/ml[/size][size=16px]），绘制标准曲线[/size][size=16px], [/size][size=16px]结果见图[/size][size=16px]2.[/size][size=16px]样品测定：[/size][size=16px]精密吸取精密吸取[/size][size=16px]供试溶液[/size][size=16px]8 ml[/size][size=16px]（[/size][size=16px]V[/size][font='times new roman'][size=16px]2[/size][/font][size=16px]），至[/size][size=16px]25 ml[/size][size=16px]量瓶中，照[/size][size=16px]“[/size][size=16px]1.2.1[/size][size=16px].2”[/size][size=16px]自[/size][size=16px]“[/size][size=16px]加入[/size][size=16px]5%[/size][size=16px]亚硝酸钠溶液[/size][size=16px]1 ml”[/size][size=16px]起，在波长[/size][size=16px]510nm[/size][size=16px]处分别测定吸收度值，[/size][size=16px][color=#000000]从标准曲线上读出[/color][/size][size=16px][color=#000000]供试品溶液中含总黄酮[/color][/size][size=16px][color=#000000]的浓度[/color][/size][size=16px][color=#000000]([/color][/size][size=16px][color=#000000]C[/color][/size][size=16px][color=#000000])[/color][/size][size=16px][color=#000000]，计算样品中总黄酮的含量（[/color][/size][size=16px][color=#000000]X[/color][/size][size=16px][color=#000000]）。[/color][/size][size=16px]计算方法：[/size][size=16px]参照[/size][size=16px]“[/size][size=16px]1.2.1[/size][size=16px].2”[/size][size=16px]项下的[/size][size=16px]计算方法进行计算。结果见表[/size][size=16px]6[/size][size=16px]，表[/size][size=16px]7.[/size][size=16px][color=#000000]图[/color][/size][size=16px][color=#000000]2 [/color][/size][size=16px][color=#000000]芦丁标准品标准曲线[/color][/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009241153149717_1330_2166779_3.jpeg[/img][/align][align=center][size=16px]表[/size][size=16px]5[/size][size=16px]醇沉正交试验因素水平表[/size][/align][table][tr][td=1,2][align=center][size=16px]水平[/size][/align][/td][td=3,1][align=center][size=16px]因素[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]A[/size][size=16px]药液相对密度[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]B[/size][size=16px]含醇量[/size][size=16px](%)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]C[/size][size=16px]醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px](h)[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]1[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.0035-1.0039[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]60[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]16[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.0009-1.0016[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]70[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]20[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]3[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.9959-0.9965[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]80[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]24[/size][/align][/td][/tr][/table][size=16px]注：以[/size][size=16px]D[/size][size=16px]因素为误差项[/size][size=16px]采用[/size][size=16px][back=#ffffff]加权平均法对浸膏得率、总黄酮含量进行综合评分，由于[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]含量对泡腾[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]片疗效的影响较大，因此，分别给予浸膏得率、总黄酮含量[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]40%[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]、[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]60%[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]的权重进行分配。浸膏的率越高，患者最终单次的给[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]药量越[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]多，宜越低越好，故以最低得率[/back][/size][size=16px]18.68[/size][size=16px][back=#ffffff]%[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]为最高得分，而总黄酮为主要有效成份，宜越高越好，故以[/back][/size][size=16px]1.625[/size][size=16px][back=#ffffff]为最高得分。以序号[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]1[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]为例计算综合评分：[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]([/back][/size][size=16px]18.680[/size][size=16px][back=#ffffff]/[/back][/size][size=16px]28.002[/size][size=16px][back=#ffffff])*0.4+(1.190/1.625)*0.6=0.706[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]，同理，可求得其余各综合评分，结果见表[/back][/size][size=16px][back=#ffffff]6[/back][/size][size=16px][back=#ffffff].[/back][/size][align=center][size=16px]表[/size][size=16px]6[/size][size=16px]醇沉正交试验结果（[/size][size=16px]n[/size][size=16px]=9[/size][size=16px]）[/size][/align][table][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]序号[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]A[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]B[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]C[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]D[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]浸膏得率[/size][/font][size=16px](%)[/size][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]总黄酮含量[/size][/font][size=16px](g)[/size][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]综合评分[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]28.002 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.190 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.706 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]18.680 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.863 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.719 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]27.900 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.143 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.690 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]4[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]30.799 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.405 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.761 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]30.447 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.370 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.751 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]6[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]28.441 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.313 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.747 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]7[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]32.887 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.592 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.815 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]8[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]31.601 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.582 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.820 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='宋体'][size=16px]9[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][size=16px]31.258 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.625 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.839 [/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]K1[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.11 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.28 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.27 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.30 [/size][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]K2[/size][size=16px] [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.26 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.29 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.32 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.28 [/size][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]K3[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.47 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.28 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.26 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2.27 [/size][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]R[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.12 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.00 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.02 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.01 [/size][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]　[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]　[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='宋体'][size=16px]　[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][align=center][size=16px]表[/size][size=16px]7 [/size][size=16px]醇沉正交试验方差分析[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=16px]方差来源[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]离差平方和[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]自由度[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]F[/size][size=16px]值[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]均方[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]显著性[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]相对密度[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.02185[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]205.2415[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.01093[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]**[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]含醇量[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.00003302[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.3101[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.00001651[/size][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px] [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.0007093[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]6.6615[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.0003547[/size][/align][/td][td][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]误差[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.0001065[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.0000 [/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.00005324[/size][/align][/td][td][/td][/tr][/table][size=16px]由表[/size][size=16px]7[/size][size=16px]可知，以总黄酮含量与水提取液浸膏得率为[/size][size=16px]评价[/size][size=16px]指标，[/size][size=16px]各因素对结果的影响大小为：[/size][size=16px]药液相对密度[/size][size=16px][/size][size=16px]醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px][/size][size=16px]含醇量，即主要影响因素是药液相对密度，其次是醇沉时间，[/size][size=16px]含醇量[/size][size=16px]影响[/size][size=16px]最小[/size][size=16px]。[/size][size=16px]以实验[/size][size=16px]结果[/size][size=16px]为参考[/size][size=16px]，结合实际[/size][size=16px]生产情况，最终[/size][size=16px]确定[/size][size=16px]醇沉[/size][size=16px]工艺为[/size][size=16px]：药液[/size][size=16px]相对密度为[/size][size=16px]0.9959-0.9965[/size][size=16px]，[/size][size=16px]含醇量[/size][size=16px]70%[/size][size=16px]，醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px]20h[/size][size=16px]。[/size][font='times new roman'][size=18px]醇沉正交验证实验[/size][/font][size=16px]根据以上所选最佳醇沉工艺条件，相对密度为[/size][size=16px]0.9959-0.9965[/size][size=16px]，[/size][size=16px]含醇量[/size][size=16px]70%[/size][size=16px]，醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px]20h[/size][size=16px]，平行[/size][size=16px]3[/size][size=16px]份，对醇沉后药液的浸膏得率与总黄酮含量进行测定，按[/size][size=16px]2.2.1[/size][size=16px].2[/size][size=16px]项下的方法计算综合评分后，[/size][size=16px]求平均[/size][size=16px]得分，结果见表[/size][size=16px]8.[/size][align=center][size=16px]表[/size][size=16px]8[/size][size=16px]醇沉正交实验验证结果（[/size][size=16px]n[/size][size=16px]=3[/size][size=16px]）[/size][/align][table][tr][td][align=center][size=16px]编号[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]浸膏得率[/size][size=16px](%)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]总黄酮含量[/size][size=16px](g)[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]综合评分[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]平均得分[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]1[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]27.9[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.780[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.925[/size][/align][/td][td=1,3][align=center][size=16px]0.918[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]28.4[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.757[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.911[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=16px]3[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]28.4[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]1.776[/size][/align][/td][td][align=center][size=16px]0.918[/size][/align][/td][/tr][/table][size=16px]由表[/size][size=16px]8[/size][size=16px]可知，最佳醇沉工艺的平均得分[/size][size=16px]0.918[/size][size=16px]，大于正交设计中的各项综合评分，且评分最高，有较高的准确率，所筛选的醇沉工艺条件基本稳定，可作为[/size][size=16px]藤青泡[/size][size=16px]腾片的醇沉方法。[/size][font='times new roman'][size=20px]小结与讨论[/size][/font][size=16px]通过正交实验，确定最佳醇沉工艺为：将药液浓缩至相对密度为[/size][size=16px]0.9959-0.9965[/size][size=16px]，[/size][size=16px]含醇量[/size][size=16px]70%[/size][size=16px]，醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px]20h[/size][size=16px]。醇沉正交试验过程中，各实验组尽可能采用同一批次的提取液，以排除提取因素对结果的影响，且提取液放置过程会有少许沉淀，取样时应先混匀；测定相对密度时，要待浓缩的药液冷却至室温后再测，因高温会是玻璃比重瓶体积变大，导致结果不准确；加入乙醇的过程中，乙醇的滴加速度以及搅拌速度应当一致，到醇[/size][size=16px]沉时间[/size][size=16px]后，及时分离出沉淀物并用旋转蒸发仪回收乙醇。[/size]

[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79375.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]工艺设备工程师（细胞/纯化方向）[b]职位描述/要求：[/b]职责描述：1. 参与细胞培养及纯化设备设施调研，协调供应商进行技术交流，配合设备使用部门完成URS编写及审核工作；2. 负责公司工艺设备固定资产管理、做好设备开箱验收、调拨、盘点和报废及建立、整理和更新设备档案工作；3. 负责联系协调供应商工程师进行设备安装、运行、调试，和供应商建立良好的沟通关系4. 全面负责细胞培养及纯化工艺设备维护维修工作，制定行之有效的维护保养计划，起草设备维护维护保养SOP等5. 配合设备使用部门完成设备偏差调查及维护SOP变更升级6. 编制年度备品备件计划，统计、分析和评价备品备件消耗和使用情况，编制部门设备预算，合理控制设备维修费用7. 与设备使用部门保持密切合作，提供设备的日常运行与故障解决方面的信息与技术支持，提供灵活、安全、快速响应的服务；任职要求：1. 本科及以上学历，机械/电气/自动化相关专业教育背景 ，生物药背景优先考虑，具有低压电工上岗证优先2. 熟悉GMP和FDA法规、政策和质量管理体系相关知识3. 具有生物制药行业 3 年以上工作经验，精通细胞培养设备、纯化设备等工作原理，熟悉洁净车间的生产设备工艺流程。4. 具备良好的团队协作能力、跨部门沟通协调能力5. 具备正直、诚实、守信、主动积极的工作态度6. 具备良好的工作计划和跟踪、反馈、总结、分析、创新能力7. 抗压能力强，具备应急问题处理能力、良好的设备及系统故障判断、分析与处理能力 8. 具备良好的设备维护、安全、质量意识9. 熟悉 Microsoft Office，具有数据分析、总结、报告能力10. 熟悉 Auto CAD 11. 具备良好的英文听说读写能力 ，英文要求四级，能够基本读懂英文版电路图及说明书[b]公司介绍：[/b] 楷拓生物科技(苏州)有限公司位于中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区裕新路108号A栋3楼312室，注册资本为1668万人民币，成立于2021-06-17，目前公司的主要经营范围是一般项目：技术服务、技术开发、技术咨询、技术交流、技术转让、技术推广；技术进出口；货物进出口；科技推广和应用服务；医学研究和试验发展（除人体干细胞、基因诊断与治疗技术开发和应用）；企业管理；信息咨询服务（不含许...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79375.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

世界最先进的水处理技术，并有专业从事各类水处理项目设计与相关设备的制造、安装、调试的高素质工程人员。水处理工程涉及饮水、制药、化工、食品、饮料、电力、环保等领域。公司产品包括：中空纤维超滤装置、反渗透系统、机械过滤器、活性炭过滤器、精密过滤器、微孔 膜过滤器、阴阳离子交换设备、紫外线杀菌器、臭氧杀菌器及纯水机组整体配件。　　实验室超纯水设备概述：　　产品描述：去离子水设备是通过反渗透、电渗析器、离子交换器、EDI等方法去除水中阴阳离子的水处理装置。　　实验室超纯水设备性能稳定,大量应用于医药,电子,化工,玻璃,渡涂,锅炉,化验室等行业。小型去离子水设备可用自来水直接制取高纯水，且运行周期长，不必频繁维护及更换各种备件，运行极其安静。一些企业用水量不大的情况,我公司专门为这些客户定制了一系列小型去离子水设备,出水量较小,可满足于化验用水,小计量清洗用水的要求,出水水质可根据客户的要求,进行设备的工艺配置!　　一、实验室超纯水设备简介 生产半导体、集成电路芯片及封装、液晶显示、高精度线路板、光电器件、各种电子器件等电子工业用超纯水系统。水质可达最高可达18.3兆欧，符合电子行业生产所需超纯水水质要求。我公司曾为国外很多知名电子工业厂家制作工业超纯水设备。　　二、实验室超纯水设备工艺　　1、预处理-反渗透-水箱-阳床-阴床-混合床-纯化水箱-纯水泵-紫外线杀菌器-精制混床-精密过滤器-用水对象　　2、预处理-一级反渗透-加药机(PH调节)-中间水箱-第二级反渗透-纯化水箱-纯水泵-紫外线杀菌器-0.2或0.5μm精密过滤器-用水对象　　3、预处理-反渗透-中间水箱-水泵-EDI装置-纯化水箱-纯水泵-紫外线杀菌器-0.2或0.5μm精密过滤器-用水对象　　4、预处理-反渗透-中间水箱-水泵-EDI装置-纯化水箱-纯水泵-紫外线杀菌器-精制混床-0.2或0.5μm精密过滤器-用水对象为满足用户需要，达到符合标准的水质，尽可能地减少各级的污染，在工艺设计上，取达国家自来水标准的水为源水，再设有介质过滤器，活性碳过滤器，精密过滤器等预处理系统、RO反渗透主机系统、离子交换混床系统等。

[b][color=#333333]一、[/color]机械工程师[/b]职位要求(Job Requirements):1、机械类相关专业毕业，大学本科及以上学历，2年以上工作经验； 2、能够熟练运用PRO/E、Solid Works、AutoCAD等相关绘图软件，进行三维建模及绘制零部件的工程图、装配图；掌握行业设计规范，能独立进行机械相关设计（包括结构设计）； 3、能够熟悉机械材料性能、加工工艺、组装调试过程； 4、有仪器外壳设计加工、仪器生产过程中组装、调试经验者优先； 5、工作态度认真积极，主动性强，具备技术专业人员严谨的科学态度； 6、较强的团队合作精神，善于沟通，强烈的责任感。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、负责仪器机械结构的设计、加工、组装调试和改进； 2、根据仪器需求设计工装夹具； 3、负责指导仪器生产过程中组装、调试，解决产品生产组装过程中的技术问题，生产中的技术支持； 4、编写相关技术文档，协助领导完成仪器开发与生产的其他工作。[b]二、软件工程师[/b]职位要求(Job Requirements):1、计算机、软件、电子信息或自动化控制等相关专业毕业，大学本科及以上学历； 2、熟悉软件开发流程及模块化设计，能够熟练独立使用C、C++、C﹟、Labview等编程工具中的一种或以上进行仪器控制软件开发、调试和代码优化升级； 3、熟悉仪器控制的各种上、下位机的接口通讯技术、数据采集和传输； 4、需有2年以上液相色谱控制软件开发相关工作经验； 5、工作态度认真积极，主动性强，具备技术专业人员严谨的科学态度； 6、较强的团队合作精神，善于沟通，强烈的责任感。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、负责液相色谱仪器控制软件设计开发、测试、优化、升级及维护； 2、负责与仪器工程师共同进行需求调研、业务流程分析，参与仪器控制软件的整体规划与实施，独立完成软件代码撰写； 3、负责软件开发设计文档撰写、源代码等开发资料的整理； 4、完成领导分配的其他相关工作；[b]三、技术工程师[/b]职位要求(Job Requirements):1、分析化学、药学、生物相关专业本科及研究生以上学历； 2、具备HPLC较好的理论基础，有1-2年HPLC实验室相关经验者优先； 3、工作态度认真积极，主动性强，具备技术专业人员严谨的科学态度； 4、较强的团队合作精神，善于沟通，强烈的责任感。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、负责医疗诊断产品线QC内控标准的建立； 2、负责编写相关SOP操作文件； 3、协助领导进行实验室试剂及耗材的管理和请购工作，规范实验室的管理； 4、负责本部门色谱柱入库、出库、使用、测试和报废的管理工作；5、协助领导建立相关质量管理体系。[b]四、纯化实验员[/b]职位要求(Job Requirements):1、生物、化学、发酵工程等相关专业，本科及以上学历； 2、具有相关研发经验，有相关工作经验佳； 3、熟悉多种纯化方法，能够制定简单的纯化策略，配合生产部门或客户的放大生产； 4、了解生产规程以及质量标准，提供符合法规的记录文件； 5、了解技术转移的法规要求； 6、能承受较大的工作压力，有较强的团队合作精神。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、按照要求进行项目纯化实验，并分析实验数据； 2、及时撰写实验记录并完成工作总结； 3、和客户一起开发纯化工艺； 4、遵守公司保密制度，不泄露公司研发和技术秘密。[b]五、工业纯化技术工程师[/b]职位要求(Job Requirements):1、生物、化学、制药相关专业，硕士学历（大分子方向）； 2、植物、分析化学、生物化工、化学、药学相关专业，硕士学历（小分子方向）； 3、熟悉多种纯化方法，能够制定纯化策略； 4、熟悉生产规程以及质量标准； 5、能承受较大的工作压力，有较强的团队合作精神。职责描述(Essential Duties & Responsibilities):1、完成公司下达的研发任务，能独立查阅文献资料，进行纯化路线设计； 2、负责新的纯化工艺的研发； 3、针对项目要求进行项目纯化实验，并分析实验数据； 4、及时撰写实验记录并完成工作总结；5、协调研发部门和技术部门所需的产品生产和工作；6、为工业纯化客户提供技术支持、服务；7、遵守公司保密制度，不泄露公司研发和技术秘密。[b]六、工业纯化业务开发部项目经理[/b]职位要求(Job Requirements):1、制药、生物医药、生物工程及相关专业，硕士及以上学历；2、具有至少3年销售经验，有纯化相关技术经验优先；3、了解常规色谱模式，能够就简单的纯化策略与客户进行沟通；4、能承受较大的工作压力，有较强的团队合作精神。职责描述(Essential Duties &Responsibilities):1、系统开发整合客户资源，全面负责特定领域内工艺及产品的推广与销售，完成销售目标；2、快速明确客户需求，准确把握业务机会，推动项目开展；3、建立和维护良好的客户关系；4、积极掌握市场动态，总结市场发展趋势，为公司投入方向提供信息支持；5、能够适应经常出差。[b]有兴趣的版友请私信联系，或者直接发简历到[color=#333333]hr@sepax-tech.com.cn[/color]，注明是仪器信息网的版友或版友推荐人员可优先安排面试。[/b]

蛋白质纯化及复性 重组蛋白在大肠杆菌（E. coli）高效表达时，往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体，即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出包涵体，采用高浓度变性剂（如7.0mol/L盐酸胍、8.0mol/L脲）溶解包涵体，然后除去变性剂或降低变性剂的浓度，使包涵体蛋白得以复性，最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白的复性和纯化是整个过程中的核心。 目前重组蛋白生产中普遍存在的问题是：（1）复性效率低。传统的复性方法稀释法和透析法。稀释复性法对样品几十倍，甚至上百倍的稀释会使样品的体积急剧增大，给后续的分离纯化带来很大的困难，而且复性过程中需要较大的复性容器。透析法耗时较长，而且要多次更换透析溶液。这两种方法的共同缺点是蛋白质在复性过程中会发生聚集而产生大量沉淀，复性效率低，通常蛋白质的活性回收率只有5~20%，而且复性后的蛋白质溶液中含有大量的杂蛋白，需要进行进一步的分离纯化。（2）工艺路线烦琐，生产周期长。在传统的重组蛋白质分离纯化工艺中，大多采用经典的软凝胶分离介质，由于这种介质的颗粒较大，分离效率较差，因此常常需要采用多种不同模式的色谱操作联用对目标蛋白质进行纯化，才能得到纯度符合一定标准的目标蛋白质。另外，这种色谱介质的耐压性很差，只能在流速较低的情况下进行操作，分离纯化时间较长。分离纯化步骤多和分离时间长使得蛋白质的质量回收率和活性回收率很低。而且在传统的重组蛋白质生产工艺中，蛋白质的复性和纯化是生产过程中两个独立的单元操作，也在很大程度上制约着生产效率。（3）生产成本高，设备投资大。由于复性和分离纯化分别单独进行，而且分离纯化步骤多，每一步都需要有与之配套的设备，致使设备投资大，生产成本高。随着生产规模的增加，这种弊端会愈来愈严重。 1991年耿信笃教授首先将高效疏水相互作用色谱(HPHIC)用于变性蛋白的复性，很好的解决了上述问题，现已成功用于重组人干扰素-g(rhIFN-g)、重组人干扰素-a(rhIFN-a)、人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人胰岛素原(proinsulin)、重组牛朊病毒(prion)等重组蛋白以及溶菌酶和核搪核酸酶等标准模型蛋白的复性与同时纯化中。目前，排阻色谱法、离子交换色谱法和亲合色谱法也已用于蛋白质的复性和同时纯化中。与传统的稀释法及透析法比较，用色谱法进行蛋白复性的优点是：①在进样后可很快除去变性剂；②由于色谱固定相对变性蛋白质的吸附，可明显地减少、甚至完全消除复性过程中蛋白质聚集体和沉淀的产生，从而提高蛋白质复性的质量和活性回收率；③在蛋白质复性的同时可使目标蛋白质与杂蛋白分离以达到纯化的目的，使复性和纯化同时进行；④便于回收变性剂，以降低废水处理成本。简言之，色谱法复性可以提高蛋白质的活性和质量回收率，将蛋白复性和纯化集成在一步操作完成，缩短了操作步骤和生产时间，减少了设备投资，使生产成本大大降低，已经引起了全世界范围内许多生化研究者和重组蛋白药物生产厂家的关注。由于高效液相色谱（HPLC）分离效率高，往往在一步操作中便可得到纯度符合要求的蛋白质，而且分离速度快，在应用方面具有更大的优势。

[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79359.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]核算提纯工艺研究员[b]职位描述/要求：[/b]职责描述：1.在技术负责人指导下，参与核酸提纯相关的研发项目；2.在指导下创造新的、高效率的生物大分子的分离及纯化工艺，以达到国家生物医药临床和商业生产的质量和报批标准 3.熟悉生物大分子分离及纯化工艺的相关操作，例如反相色谱，亲和色谱，离子交换等层析纯化策略，具备相关的提纯工艺放大经验者优先；4.能够严格按照标准流程，准确、独立地完成各项相关实验操作，定期汇报实验和工作进程。5.本科学位或以上，硕士优先，化学工程或化学、生物工程、药学或相关的专业背景，具备1-2年工作经验者优先；6.具有团队合作精神，善于沟通，做事踏实认真，责任心强；7.具备良好的英文文献搜索及阅读能力。[b]公司介绍：[/b] 楷拓生物科技(苏州)有限公司位于中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区裕新路108号A栋3楼312室，注册资本为1668万人民币，成立于2021-06-17，目前公司的主要经营范围是一般项目：技术服务、技术开发、技术咨询、技术交流、技术转让、技术推广；技术进出口；货物进出口；科技推广和应用服务；医学研究和试验发展（除人体干细胞、基因诊断与治疗技术开发和应用）；企业管理；信息咨询服务（不含许...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-79359.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

[b]职位名称：[/b]蛋白纯化工程师/经理[b]职位描述/要求：[/b]收藏职位信息液相色谱填料的技术应用，需配合公司销售人员对大区客户提供应用技术方案解决服务。1、根据客户需求，为客户推荐合适的产品，为销售制定和执行销售计划；2、负责公司生物大分子层析填料及层析设备的售后服务；3、帮助销售拓展客户及渠道，给销售培训相关层析技术；4、能够为客户纯化相关蛋白样品，给其制定合理的纯化方案。任职资格：1、生物工程或相关专业本科及以上学历，生物制药、生物化工、药学、免疫学等相关专业；2、两年以上生物制药企业纯化工作经验，熟练使用AKTA等层析系统；’3、具有在相关填料企业应用经验者优先；4、具备良好的沟通能力及自我管理能力；做事细心、认真，责任心强；富有团队合作精神；5、优秀应届生或1年以内工作经验者也可以培养。[b]公司介绍：[/b] 月旭科技（上海）股份有限公司2003年8月在上海张江高科技园区注册成立，2011年在浙江金华成立全资子公司，2014年10月完成股份制改造，2015年5月在全国中小企业股份转让系统（新三板）挂牌上市（股票代码：832463）。月旭科技集研发、生产、销售和服务为一体，致力为客户提供色谱分离分析技术、产品和整体解决方案。色谱技术广泛应用于生物医药、食品安全检测、环境监测、精细化工等关系民生并处于快速发...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/70433]查看全部[/url]

医药行业用超纯水设备的出水质量是十分严格的，要求出水的电阻值应高于15兆。为了达到绝对安全卫生的目的，超纯水设备整体结构由不锈钢材质制成，而且在出水点之前装备杀菌装置。从整个医药行业用超纯水的特点出发，针对不同用户对高纯水的不同要求，采用反渗透，EDI等最新工艺，比较有针对性地设计出成套高纯水处理工艺，以满足药厂、医院的纯化水制取、大输液制取的用水要求。　　医用超纯水的水质标准　　2000版药典标准。　　GMP标准。　　电阻率：≥15MΩ.CM。　　电导率：≤0.5μS。　　氨≤0.3μg/ml。　　硝酸盐≤0.06μg/ml。　　重金属≤0.5μg/ml。　　制备医药行业用超纯水的工艺流程　　医药行业制备超水的工艺大致分成以下几种：　　1、原水→原水加压泵→多介质过滤器→活性炭过滤器→软水器→精密过滤器→一级反渗透 设备→中间水箱→中间水泵→离子交换器→纯化水箱→纯水泵→紫外线杀菌器→微孔过滤器→用水点　　2、原水→原水加压泵→多介质过滤器→活性炭过滤器→软水器→精密过滤器→第一级反渗透 →PH调节→中间水箱→第二级反渗透(反渗透膜表面带正电荷)→纯化水箱→纯水泵→紫外线杀菌器→ 微孔过滤器→用水点　　3、原水→原水加压泵→多介质过滤器→活性炭过滤器→软水器→精密过滤器→一级反渗透机→中间水箱→中间水泵→EDI系统→纯化水箱→纯水泵→紫外线杀菌器→微孔过滤器→用水点　　三种制备医药行业用超纯水的工艺比较　　目前制备电子工业用超纯水的工艺基本上是以上三种，其余的工艺流程大都是在以上三种基本工艺流程的基础上进行不同组合搭配衍生而来。现将他们的优缺点分别列于下面：　　1、第一种采用离子交换树脂其优点在于初投资少，占用的地方少，但缺点就是需要经常进行离子再生，耗费大量酸碱，而且对环境有一定的破坏。　　2、第二种采用反渗透作为预处理再配上离子交换设备，其特点为初投次比采用离子交换树脂方式要高，但离子设备再生周期相对要长，耗费的酸碱比单纯采用离子树脂的方式要少很多。但对环境还是有一定的破坏性。　　3、第三种采用反渗透作预处理再配上电去离子(EDI)装置，这是目前制取超纯水最经济，最环保用来制取超纯水的工艺，不需要用酸碱进行再生便可连续制取超纯水，对环境没什么破坏性。其缺点在于初投资相对以上两种方式过于昂贵。　　我们公司生产的医用超纯水设备特点　　·产水符合2000版药典纯化水标准，可符合GMP标准。　　·直接用自来水制成土无菌超纯水，能完全替代蒸馏水及双蒸水。　　·采用进口泵、反渗膜等优质部件。　　·全自动操作系统，高效自动冲洗　　·采用进口仪表，能对水质准确、连续分析、显示。　　·应用于制药工业用纯水，医用大输液制剂及医用无菌水纯化。　　应用提示：　　1、 医药业无菌、无热源纯化水制取。　　2、 生物医药用水。　　3、 医疗血液透析用水。　　4、 饮用纯净水、饮料用水的制取。　　5、 电子工业用高纯水的前处理系统。　　6、 锅炉补给水的制取。　　7、 化装品配料用水。　　8、 白酒勾兑用纯水、啤酒制取用纯水。

我是做蛋白质纯化的，大肠杆菌表达的包涵体，变性后，用稀释复性法进行复性，用离子交换剂进行第一步纯化，填料是sepherose BigBead 工艺已经非常的成熟，用同样的工艺连续生产5年了，我们上样一次，就可以达到我们的预定的纯度，现在上样一次已经达不到预定纯度，需要上样两次，才能达到。实在找不到原因了，各位大侠帮忙解决一下，非常感谢！

药品生产企业所用到的工艺用水（纯化水），如果不连续生产，其储存周期是多长？还是必须连续运行不得停止呢？

湖南中医药大学药学院和中南大学化学化工学院的研究人员研究了改进的盐酸舍曲林的合成工艺。他们以α-萘酚为起始原料，经烷基化、甲胺胺化、Pd/C催化氢化、D-(-)扁桃酸拆分，成盐而合成盐酸舍曲林。结果发现：以α-萘酚计，总收率由文献的16.2%提高到31.5%；盐酸舍曲林的结构经红外、差热分析、核磁、质谱确证。该方法工艺简单，适合工业化生产。 蚓激酶提取纯化武汉市畜禽饲料工程技术研究中心武汉工业学院的研究人员建立了高效的蚓激酶纯化工艺，并研究其酶学性质。他们以赤子爱胜蚓(Eiseniafoelide)为原料，经过匀浆抽提、硫酸铵分段盐析、色谱分离、电泳等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并研究pH、温度、金属离子与抑制剂对蚓激酶活性的影响以及蚓激酶的作用机理。结果发现，纯化蚓激酶比活达5100U/mg，经SDS-PAGE电泳分析得2条带，相对分子质量为32000和33500；体外溶栓实验表明，蚓激酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用。在中性和略偏碱性环境中稳定且活性高；温度适应范围广；不同种类及浓度的金属离子对蚓激酶活性的影响不尽相同；抑制因子及底物特异性研究发现，蚓激酶属于丝氨酸蛋白酶，不属于金属蛋白酶，同时含有二硫键。该分离方法可以得到较纯的蚓激酶。超声提取法优选枳实中橙皮苷提取辽宁医学院药学院和中国医科大学的研究人员研究了优选枳实中的橙皮苷的最佳提取工艺。他们采用L9(34)正交实验，以橙皮苷的含量为标准筛选最佳提取工艺。结果发现：枳实中橙皮苷的最佳提取工艺为采用8倍量的95%甲醇，超声提取3次，每次20min。优选的提取工艺稳定，提取率高。酒石酸拉索昔芬合成中国医药工业研究总院和上海医药工业研究院的研究人员研究了酒石酸拉索昔芬的合成。他们将6-甲氧基-1-四氢萘酮与1-吡咯烷缩合后，经三溴化吡啶鎓溴代，与苯硼酸进行Suzuki偶合、钯炭催化加氢、48%氢溴酸脱甲基后，经D-酒石酸拆分成盐得酒石酸拉索昔芬，以1-吡咯烷计，总收率约为15%。氯维地平合成南京大学化学化工学院的研究人员研究了氯维地平的合成。他们将3-羟基丙腈和双乙烯酮在三乙胺作用下制得乙酰乙酸(2-氰基乙基)酯(2),再与2,3-二氯苯甲醛和3-氨基巴豆酸甲酯经Hantzsch缩合闭环,接着用硫化钠在常温下选择性水解得4-(2,3-二氯苯基)-1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二羧酸单甲酯,最后与正丁酸氯甲酯反应即得抗高血压药氯维地平,总收率约为59%。头孢克肟合成浙江普洛得邦制药有限公司和浙江大学化学系的研究人员研究了用7-氨基-3-乙烯基-3-头孢烯-4-羧酸和(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲氧羰基甲氧亚氨基硫代乙酸(S)-2-苯并噻唑酯在三乙胺催化下经酰化、水解反应，“一锅法”制得头孢克肟，收率约为92%。 2票投票

一、我检测纯化水中硝酸盐的指标时，经常发生加上5ml硫酸，50摄氏度保温后，标准管和样品管的颜色都非常深，而有时候，这几管的颜色却又挺淡的。每次把试剂等重新配过后，问题也没有解决。不知道这是什么原因？望有经验的老手指教。二、纯化水检测里要用到碱性碘化汞钾试液，配制这个溶液要用到二氯化汞饱和溶液。我想知道配制200ml的碱性碘化汞钾试液，需要多少量的二氯化汞饱和溶液，这饱和溶液大约要多少二氯化汞呢？ GMP认证的时候碰到这个问题，结果搞得我郁闷了一个月。三、下面的问题比较杂了：纯化水取样时，放水放多少时间比较合适（既不浪费太多水也不会引起取样污染）？纯化水中氨的检测项目，要使用碱性碘化汞钾试液2ml/样品，这个检测过后可以用大量水冲洗不？是否非要去毒处理？最前面的两个问题比较急于知道。谢谢各位指教。在得到了结果后我会结帖的，希望版主在我没有得到结果前千万不要以为我忘记结贴了。谢谢！！

新版GMP认证出台后，许多制药企业在纯化水设备系统的GMP认证会遇到一些问题，以下是整理收集的20个常见的制药纯化水设备系统GMP认证问题。1.纯化水设备没有安装PID图；2.纯水设备没有贴取样点编号；3.纯化水系统中需要加上用水点编号；纯化水储罐上面管道无流向标识；4.纯化水理化检测记录中：不挥发物检测称重无原始打印记录；电导率的检测应加入单位；其整张记录太粗，可操作性不强；5.纯化水系统从EDI出来就是纯化水，但现场的管路及阀门、送水泵、压力表都没安照纯化水的标准做，存在污染风险；6.纯化水系统验证时没有验证自动电磁阀的动作是否准确无误；7.安装纯化水在线电导率监测时没有图纸；8.纯化水无管理设计图，管路非卫生连接，无日常监控，管路设计不利于取样；9.纯化水灌及焊接不符合要求，应该采用一面焊两面的成型工艺，并提供纯化水管道的内窥镜照片；10.纯化水设备系统无取样记录；纯化水回水处应安装流量计；11.纯化水系统需要对总送、总回、储罐、最远用水点进行每周全检，其余用水点每月全检；12.纯化水系统的验证，对纯化水设备系统的IQ\OQ\PQ等性能进行验证；13.纯化水的设计、安装、臭氧消毒依据、焊接、验证确认等部分不符合要求；14.纯化水设备的图纸与实际设计不相符，各控制阀应在图纸上注明；15.管道、储水罐、电焊问题；16.储备出水口，回水口应有温度计，以便对其温度变化进行控制，应有流量监控计；17.纯化水管道接口连接方式应该采用卫生级卡箍连接方式，并且杜绝使用丝牙连接方式；18.纯化水区段管线为应采用自动焊接工艺以及专业的切管工具；19.循环管线安装没有坡度，未设计最低点为排放点；20.纯化水系统管道存在死角，容易滋生微生物及细菌。

[color=#231815]双水相萃取技术在分离、纯化中的应用[/color][color=#231815][color=#333333]双水相技术是一种新型的液-液萃取技术,由于其条件温和、易操作等特点,目前已广泛应用于物质的分离、纯化。本文综述了双水相形成原理、工艺流程和特点、体系类别、影响双水相分配的因素及其在分离纯化中的应用,并针对其未来发展趋势进行了展望。[/color][/color]

最近在做氨基酸的提取，得到的溶液中有混合氨基酸、寡糖、寡肽等小分子极性成分，现在想纯化氨基酸，不知道该怎么办，求助各位高手，谢谢！ PS：以后打算上工艺的，希望大虾们提供些工业上能用的，多谢！拜托！

我希望能找到一些与生产中纯化、发酵设备、工艺相关的资料，不知道应该到哪个论坛里看，看了看色谱、生化仪器及设备等一些论坛，觉得没有太多的关系，还是我没有找到？我觉得这部分东西也应该有很多人在做吧，能不能有新的论坛出现，专门讨论生化技术与生产的结合应用呢？

我公司主要是球铁零件检验的，现在化学成分直接用只读光谱无法分析，要进行白口化，请问白口化工艺是？材料主要是QT400-18

磷化（Ⅲ）——磷化工艺（1）1 防锈磷化工艺磷化工艺的早期应用是防锈，钢铁件经磷化处理形成一层磷化膜，起到防锈作用。经过磷化防锈处理的工件防锈期可达几个月甚至几年（对涂油工件而言），广泛用于工序间、运输、包装贮存及使用过程中的防锈，防锈磷化主要有铁系磷化、锌系磷化、锰系磷化三大品种。铁系磷化的主体槽液成分是磷酸亚铁溶液，不含氧化类促进剂，并且有高游离酸度。这种铁系磷化处理温度高于95℃，处理时间长达30min以上，磷化膜重大于10g/m2,并且有除锈和磷化双重功能。这种高温铁系磷化由于磷化速度太慢，现在应用很少。锰系磷化用作防锈磷化具有最佳性能，磷化膜微观结构呈颗粒密堆集状，是应用最为广泛的防锈磷化。加与不加促进剂均可，如果加入硝酸盐或硝基胍促进剂可加快磷化成膜速度。通常处理温度80～100℃，处理时间10～20min，膜重在7.5克/m2以上。锌系磷化也是广泛应用的一种防锈磷化，通常采用硝酸盐作为促进剂，处理温度80～90℃，处理时间10～15min，磷化膜重大于7.5g/m2,磷化膜微观结构一般是针片紧密堆集型。防锈磷化一般工艺流程：除油除锈——水清洗——表面调整活化——磷化——水清洗——铬酸盐处理——烘干——涂油脂或染色处理通过强碱强酸处理过的工件会导致磷化膜粗化现象，采用表面调整活化可细化晶粒。锌系磷化可采用草酸、胶体钛表调。锰系磷化可采用不溶性磷酸锰悬浮液活化。铁系磷化一般不需要调整活化处理。磷化后的工件经铬酸盐封闭可大幅度提高防锈性，如再经过涂油或染色处理可将防锈性提高几位甚至几十倍，见表1。表1 磷化膜与涂油复合对耐蚀性的影响材料 出现锈蚀时间（h）（盐雾ASTM B117-64） 裸钢 0.5 钢+涂油 15.0 钢+16g/m2锌磷化 4.0 钢+锌磷化+涂油 550.0 摘自 Freeman D B.Phosphating and Metal Pretreatment Woodhead-Faukner,1986.

首先肯定一个：纯化水的制备与注射用水的制备工艺是不一样的。其次：纯化水的质量标准与注射用水的质量标准是不一样的，制备设备也是不一样的。再次：纯化水的制备方法有很多，使用的技术设备有电渗析、混合树脂床、反渗透、EDI等，往往有几个设备的组合使用，因此，如果使用的几个组合设备性能较好，是有可能制出的纯化水达到注射用水的质量标准的。实际上，对于药厂，如果需要使用纯化水，在选择设备的时候只要能制出的水符合纯化水的质量标准就行了，谁会提高设备要求，以注射用水的要求选配纯化水设备？纯化水质量标准(依据2005版药典)本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得供药用的水，不含任何附加剂。4.1 性状：本品为无色的澄清液体；无臭，无味。4.2 检查：4.2.1 酸碱度检查：取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。4.2.2 氯化物、硫酸盐与钙盐检查： 取本品，分置三支试管中，每管各50ml。第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml，第二管中加氯化钡试液2ml，第三管中加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。4.2.3 硝酸盐检查： 取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液〔取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精共3页 第2页密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μgNO3）〕0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（≤0.000006%）。4.2.4 亚硝酸盐检查： 取本品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）1ml与盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算)，加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得(每1ml相当于1μgNO2)〕0.2ml，加入无亚硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(≤0.000002%)。4.2.5 氨检查： 取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解，并稀释成1000ml）1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深（≤0.00003%）。4.2.6 二氧化碳检查： 取纯化水25ml，置50ml具塞量筒中，加氢氧化钙试液25ml，密塞振摇，放置，1小时内不得发生浑浊。4.2.7 易氧化物检查： 取纯化水100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后加高锰酸钾滴定液(0.02ml/l)0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。4.2.8 不挥发物的检查： 取纯化水100ml，置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得超过1mg。4.2.9 重金属检查：取纯化水50ml，加水18.5ml,蒸发至20ml,放冷,加醋酸盐缓冲液(PH3.5)2ml与水适量使成25ml,加硫代乙酰胺试液2ml,摇匀,放置2分钟, 共3页 第3页与标准铅溶液1.5ml加水18.5ml用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(≤0.00003%)。4.3 微生物限度检查： 取纯化水，采用薄膜过滤法处理后，依照《中国药典》2005版附录ⅪJ检测，细菌、霉菌和酵母菌总数应≤100个∕ml。① 欧洲药典中总有机碳（ TOC ）和易氧化物项目，可任选一项监控。②美国药典中规定：a. 企业自用的纯化水监测 TOC 和颠倒率，商业用的纯化水应符合无菌纯水的试验要求。表中所列为企业自用纯化水的监测项目。b. 纯化水不得用于制备肠外制剂。③微生物超标纠正标准是指微生物污染达到某一数值，表明纯化水系统已经偏离了正常运行的条件，应采取纠偏措施，使系统回到正常的运行状态。

我是学分析的，但是在实际工作工程中很多时候还是用到了 工艺方面的很多知识，正因为是学分析的，对很多工艺不清楚，所以，觉得学分析的更应该多补充点工艺的知识，毕竟化工不是一个局限的范围啊。要相辅相成这样才能更好的应用啊。。。上网去找工艺的资料的时候发现很多论坛都没有我们 仪器信息网办的好。不如，开设一个小版块供大家交流啊。比如我就收集了很多《化工原理》的资料（因为现在教这个）。可以放上来大家共享啊。。。。。希望采纳啊[em0801]

3.1 活性污泥法活性污泥法是以活性污泥为主体的废水生物处理的主要方法。这种技术将废水与活性污泥(微生物)混合搅拌并曝气，使废水中的有机污染物分解，生物固体随后从已处理废水中分离，并可根据需要将部分回流到曝气池中。活性污泥法是由曝气池、沉淀池、污泥回流和剩余污泥排除系统所组成。活性污泥中的细菌是一个混合群体，常以菌胶团的形式存在，游离状态的较少。活性污泥在曝气过程中，对有机物的降解(去除)过程可分为两个阶段，吸附阶段和稳定阶段。3.2 SBR工艺序批式活性污泥法（SBR法）是一种不同于传统活性污泥法的废水处理工艺，是在一个反应器内，按照给定的程序进行充水、反应、沉淀、排水及闲置等。该工艺通过曝气、停气，使系统内的好氧和缺氧状态交替进行。在降解COD的同时，相继进行了氨氮的硝化和反硝化，达到同时脱碳、脱氮的目的。SBR工艺结构形式简单，运行方式灵活多变，有较强的抗冲击负荷能力，具有一系列连续流系统无法比拟的优点。抚顺石油化工研究院通过小试试验，对SBR法处理石油化工废水进行了研究。用压缩空气充氧，污泥浓度保持5000~7000mg/L，反应器温度在28~32℃。结果表明，在CODCr进水容积负荷为0.6kgCOD/（m3d），氨氮容积负荷为0.07kg/（m3d）的条件下，CODCr去除率为94%，氨氮去除率为90%以上，总氮去除率在60%左右，具有良好的去除效果。郭景海运用SBR法处理吉林石化厂废水，控制温度在20℃左右、pH在6~9条件下，氨氮有较好的去除效果，进水氨氮40~50mg/L时，出水氨氮能够达到2~3mg/L，去除率在90％上。3.3 厌氧生物处理厌氧生物处理是高浓度有机废水处理常用的方法，具有能耗低、负荷高，再生沼气能源等优点。但在处理高浓度、难降解石油化工废水时，由于废水中往往含有对产甲烷菌有毒害和抑制作用的高浓度氨氮和硫化物，系统的处理效率会大大下降。凌文华利用UASB反应器对高浓度石油化工废水进行预处理，反应器采用温度范围为30~38℃，在进水COD8000mg/L时，COD去除率能达到85％以上，且该系统设备负荷高，占地面积少，剩余活性污泥产量低，污泥脱水性良好，在厌氧UASB反应器的下部形成了沉淀性能良好的颗粒污泥，对废水中污染物质具有较高的去除效率。耿土锁对普通厌氧反应器进行了改进，采用轻质、多孔的陶粒作为厌氧生物过滤柱的载体，对经过隔油与两级混凝气浮处理的炼油废水进行深度处理试验。试验结果表明，随着陶粒填料上生物膜的逐渐增加，其处理水量与COD负荷也随之增加。当培养驯化两个月后，填料的负荷达到了4.2~6.3m3水/（m3填料d），COD负荷约为0.6~0.8kgCOD/（m3填料d），COD去除率达到70%~80%，油类和挥发酚的去除率均在80％以上。并且系统耐冲击负荷，运行稳定，厌氧出水清澈透明，无色无味，可生化性好，再经过好氧生物处理后，可达到回用水的要求。3.4 好氧生物处理好氧生物处理是目前普遍采用的生物处理方法，因其处理成本低，运行操作简单，在大多数的工业废水处理中被广泛采用。康雪琴等对传统活性污泥法进行改进，采用氧气曝气法处理高COD、含硫、含氨的石油化工废水，试验对氧曝和空曝进行了对比。经过三个月的运行表明，与空气曝气法相比，氧气曝气法净化效果高，出水水质好，COD和BOD5的平均去除率可达到88.6%和97.6%；且操作平稳安全，抗冲击性能强，污泥沉降性能好，相对提高了反应器的容积负荷。但是该方法由于使用纯氧，成本较高，因此很难推广。利用推流式混合曝气池处理高浓度石化废水是活性污泥法的另一个改进，然而该方法同样存在着COD、BOD5、油、酚、硫化物等的去除率高，而氨氮去除率低的问题。唐逸衡将混合推流式曝气池分成六段。前四段作为异氧菌繁殖场所，主要去除有机碳；后两段以进行硝化反应为主，通过改变运行条件来促进硝化细菌的生长。在第五段利用厂区生产装置产生的废碱液来调节pH值和碱度，实现在去除COD、酚、油等物质的同时，提高氨氮的去除效率。3.5 接触氧化法接触氧化法是一种兼有活性污泥法和生物膜法特点的一种新的废水生化处理法。这种方法的主要设备是生物接触氧化滤地。在不透气的曝气地中装有焦炭、砾石、塑料蜂窝等填料，填料被水浸没，用鼓风机在填料底部曝气充氧；空气能自下而上，夹带待处理的废水，自由通过滤料部分到达地面，空气逸走后，废水则在滤料间格自上向下返回池底。活性污泥附在填料表面，不随水流动，因生物膜直接受到上升气流的强烈搅动，不断更新，从而提高了净化效果。生物接触氧化法具有处理时间短、体积小、净化效果好、出水水质好而稳定、污泥不需回流也不膨胀、耗电小等优点。夏四清等采用悬浮填料接触氧化生物反应器对高浓度石油化工废水进行处理。通过6h、8h、10h、12h四个不同水力停留时间的硝化过程，取得了不同运行条件下的氨氮去除效果。结果表明，悬浮填料生物反应器完全可以达到生物硝化的目的。当进水中BOD5和CODCr浓度变化范围在77.4~234mg/L和245.5~695.7mg/L时，其平均去除率分别为90%和80%以上，平均出水浓度分别小于15mg/L和90mg/L。试验期间进水氨氮浓度在8.3~53.2mg/L范围内时，四个工况条件下的平均去除率分别为55.5%、86.7%、91.1%和95.6%，平均出水浓度分别是9.43mg/L、3.10mg/L、1.71mg/L、0.79mg/L。3.6 A/O法李秀怀采用A/O工艺处理广州某重油制气厂废水。结果表明，A/O工艺对氨氮具有很强的去除能力，去除率达到95%以上，出水氨氮稳定达标排放；对COD也有较高的降解能力，正常情况下去除率达到80%以上。从理论上讲，A/O工艺对石油化工废水具有良好的处理效果，但在实际工程中往往会出现以下问题：（1）受到进水水质的影响较大，氨氮去除效果不理想；（2）O段的水力停留时间难以控制。很多采用A/O工艺的石化废水处理厂为了获得较高的有机物去除效率，将O段水力停留时间设置的很长，有时长达30~40h。过长的停留时间会使微生物处于衰减相运行，污泥中的灰分较多，污泥的活性降低，聚凝性能变差。3.7 IMBR-A/O法IMBR-A/O工艺是将MBR与A/O工艺相结合的一种方法。IMBR-A/O工艺流程为：原废水首先经过栅网去除粗大颗粒状悬浮物并静沉，再由泵抽到原水槽，然后经斜板沉淀池到前置反硝化A段(厌氧槽)。再溢流进入好氧反应器O段(好氧槽)，在出水泵的抽吸作用下得到膜过滤出水，好氧槽连续曝气。3.8 生物膜法生物膜处理法是与活性污泥法并列的一种污水好氧生物处理技术。这种处理法的实质是使细菌和真菌类的微生物、原生动物和后生动物一类的微型动物附着在填料或某些载体上生长繁育，并在其上形成膜状生物污泥———生物膜。污水中的有机污染物作为营养物质，被生物膜上的微生物所摄取，污水得到净化，微生物自身也得到增殖。3.9 两段活性污泥法（AB法）AB工艺是吸附-生物降解工艺的简称，是在常规活性污泥法和两段活性污泥法基础上发展起来的一种新型的污水处理技术。王黎等采用两段活性污泥法（AB工艺）处理石油化工废水，在进水COD为1600mg/L，BOD5为800mg/L，总容积负荷为1.2kgCOD/（m3d）的条件下，COD去除率能达到96.5%，BOD5去除率达98%以上，氨氮去除率也达到了较高的水平。但是在利用两段活性污泥法处理高浓度石化废水时，普通活性污泥法的缺点也难以避免，如受废水中有毒物质的影响较大，COD去除效果不稳定，耐冲击能力差等，因此很难满足日益提高的出水水质要求。3.10 厌氧—生物膜法厌氧—生物膜法是厌氧降解和生物接触氧化法处理的组合工艺。张敏等利用厌氧降解和生物接触氧化法处理奥里油化工废水，探索了该工艺对奥里油化工废水的适应能力和处理效果。结果表明，该工艺处理奥里油石油化工废水处理效果较好，厌氧降解处理COD负荷8.7kg/（m3d），平均去除率达35%，好氧处理COD负荷1.87kg/（m3d），平均去除率达69%，生物处理COD总去除率达80%，终出水达到污水综合排放（GB8978-1996）二级标准。杨柳燕等采用水解—好氧生物膜工艺对难降解的石油化工废水处理进行研究。其中水解段HRT12h，一段和二段接触氧化池的HRT各为12h，水温为10℃。研究结果表明，当系统进水COD、氨氮、酚和硫化物的浓度分别为2066.4mg/L、120.74mg/L、283.44mg/L和20.76mg/L时，处理后出水浓度分别为236mg/L、74.33mg/L、0.86mg/L和1.22mg/L，达到国家三级排放标准。运行过程中，将沉淀池的污泥回流至水解酸化池并在其中得到消化，因而本工艺基本无剩余污泥排放。此外，系统还具有运行稳定、耐冲击负荷能力强的特点。3.11 三相生物流化床三相流化床又称气流动力流化床。污水与空气同步进入床体在气流的作用下， 气、液、固（生物膜载体）三相进行搅动接触，并产生升流在床体内循环的处理床。在这一过程中，产生有机污染物的降解反应，由于载体间产生强烈的摩擦，生物膜及时脱落，无需另设脱膜设备。当进水的BOD浓度较大时，可采用处理水回流措施。防止气泡在床内并合是此法的技术关键，为此，可采用减压释放或射流曝气充氧。Koch等利用三相生物流化床工艺处理含酚、杂环化合物和芳香胺的石化废水。以砂、陶粒、活性碳等颗粒状物质作为微生物生长载体，反应器内生物固体浓度可达普通活性污泥法的5~10倍。同时，生物载体被上升的废水和空气流化，生物载体与废水、空气充分接触，传质状况大大改善，COD去除率达到69%。3.12 水解酸化-好氧生物处理工艺水解是指有机物进入微生物细胞前、在胞外进行的生物化学反应。微生物通过释放胞外自由酶或连接在细胞外壁上的固定酶来完成生物催化反应。酸化是一类典型的发酵过程，微生物的代谢产物主要是各种有机酸。水解和酸化是厌氧消化过程的两个阶段，但不同的工艺水解酸化的处理目的不同。水解酸化-好氧生物处理工艺中的水解目的主要是将原有废水中的非溶解性有机物转变为溶解性有机物，特别是工业废水，主要将其中难生物降解的有机物转变为易生物降解的有机物，提高废水的可生化性，以利于后续的好氧处理。国内外学者在处理石化废水方面做了大量的研究工作，在处理工艺、运行条件上得出了一些有重要价值的结论，这对于处理高浓度、难降解废水具有重要的指导意义。通过以上分析也可以发现，采用常规的工艺处理高浓度、难降解的石油化工废水存在着以下问题：（1）污泥培养困难，活性不高甚至大量死亡，系统耐冲击负荷能力差；（2）高浓度进水时有机物的去除效率不高，不能满足出水水质的要求；（3）有些工艺虽然能够实现有机物高的去除率，但是硝化脱氮效果较差，出水氨氮的浓度较高；（4）对废水中有毒物质的适应能力低，有毒物质去除率效果不理想。同时废水中有毒物质的存在往往导致大量微生物死亡，影响有机物、氨氮的去除效率；（5）难以实现自动化控制，操作繁琐，运行成本高。通过有关学者地积极探索，新的、更有效的处理高浓度、难降解的工业废水的工艺是采用两段法的基本思想，即将有机物的降解和硝化脱氮分别置于两个不同的反应器中进行，这不仅避免了常规的一段法产生的葡萄糖效应，而且在第二段发生了硝化反应，提高了系统的脱氮效率。

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摘　　要：水污染恶化已经是不争的事实，为了提高人们饮用水的质量，我国颁布了新的水质标准。更高的标准必须要有更先进的净水工艺支持，本文在水污染恶化的情况下，分析了我国水质标准和国际三大标准的差距，分析了我国饮用水净化工艺与发达国家工艺的差距，提出我国饮用水净化工艺必须进行改进，努力提高人们生活水平。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/08/200808082222_102680_1615922_3.gif[/img]

如题，我们公司是体外诊断试剂的，说白了，做酶免试剂盒的，最近小试中有批产品灵敏性很低，经过分步比对，发现是纯化水的问题，于是联系了QAQC，又看了QC的报告，一切正常，我们公司有两套水系统，用工艺部的做出来正常，用 生产部门的就不行。奇了怪了，还有什么项目这么隐蔽啊？