微流电色谱

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱法（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的微分离色谱技术，具有柱效高，分析时间短，样品和溶剂消耗低等优点。高效微流电动液相色谱法可根据样品在电场中的分离系数和电泳迁移率的不同，对样品进行分离。 这种微分离技术作为传统HPLC技术的替代品迅速发展，将亚微米材料和eHPLC技术相结合，可通过低压实现线性流速。存在对映异构体的药物，在生物体中的药效、毒性和反应不同。目前，大多数工业液相色谱手性填料柱的直径为3、5和10μ m，也有人对1-2μ m直径的色谱填料的应用进行了大量的研究。但亚微米手性色谱的应用不常见。本公司基于亚微米填料，对手性药物进行分离与检测，为手性药物的拆分和分离提供一个新的思路和方法。

本公司以高效微流电动液相色谱（eHPLC），结合毛细管整体柱富集后，原样品中被分析物的浓度显著提高，达到了预期的效果。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

因为不同的药物对映体经常表现出明显不同的生物活性，因此对映体分离是药物分析中的一个重要目标。目前用于外消旋混合物手性分离的方法主要基于手性固定相（CSPs）。现在有几种CSPs可直接用于分离和测定药物对映体和外消旋体。特别是β -环糊精（β -CD）及其衍生物，因其具有特殊的分子结构，可增加额外的识别位点，最常用于不同色谱模式的对映体分离。β -CD作为手性固定相，已成功用于毛细管电色谱中对映体的分离检测。β -CD分离对映体主要有三种模式：开管柱毛细管电色谱、填充柱毛细管电色谱和整体柱毛细管电色谱。但是，到目前为止，尽管β -CD在反相和正相高效液相色谱系统下，已成功地引入手性分离领域，但其作为手性固定相用于高效微流电动液相色谱系统的研究却未见报道。因此，研究这种手性固定相的高效微流电动液相色谱技术是值得的。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

采用TriSep ® -3000高效微流电动液相色谱系统，配备ESI-MS检测器，通微 EP-100-20/30-3- C18色谱柱，通过在线富集，可以实现对低浓度蛋白质的检测。蛋白质标准品的检出限可提高20-100倍，此方法已成功应用于浓度为20 mg / mL的蛋白质的分析。结果表明我们提出的方法可能在蛋白质组学研究中发挥重要作用。

采用TriSep ® -3000高效微流电动液相色谱系统与ESI离子源质谱联用，系统的研究了电解质浓度和pH对ESI-MS信号强度的影响，施加电压和有机改性剂对肽分离的影响。比较了cHPLC 和eHPLC分离肽混合物的能力。为了评价本系统的可行性和可靠性，采用eHPLC-ESI-MS对细胞色素C胰蛋白酶酶解液和修饰蛋白的进行了分析。实验结果表明，基于eHPLC-ESI-MS系统，在梯度条件下实现肽的基线分离。并可完成修饰蛋白和细胞色素c胰蛋白酶解液的检测。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

为在分子水平上理解各种生化现象及严格监控此过程中所产生环境污染的必要性，需要对这类分析方法具有严格的要求。由于样品的复杂性以及样品中化合物含量低，因此分析技术必须具有良好的分离能力(高效率和高选择性)和良好的检测灵敏度。高效微流电动液相色谱法（eHPLC） 是毛细管微分离体系的一种典型代表，采用压力流和电渗流双重驱动力，具有高柱效、高选择性、高分辨度、快速分离( 三高一快) 以及试剂消耗量少等优点。eHPLC联合激光诱导荧光(LIF)检测技术，可对美国分类的16种多环芳烃进行高效、高灵敏度的分析。

利用通微自主研发的激光诱导荧光检测器(Laser Induced Fluorescence Detector, LIF)和高效微流电动液相色谱系统(eHPLC)，建立的eHPLC -LIF 微分离平台，建立了一种新的黄曲霉毒素检测方法。本方法较传统方法具有更高灵敏度、更快速、样品消耗小等优势。

采用TriSep ® -3000高效微流电动液相色谱系统与ESI离子源质谱联用，系统的研究了电解质浓度和pH对ESI-MS信号强度的影响，施加电压和有机改性剂对肽分离的影响。比较了cHPLC 和eHPLC分离肽混合物的能力。为了评价本系统的可行性和可靠性，采用eHPLC-ESI-MS对细胞色素C胰蛋白酶酶解液和修饰蛋白的进行了分析。实验结果表明，基于eHPLC-ESI-MS系统，在梯度条件下实现肽的基线分离。并可完成修饰蛋白和细胞色素c胰蛋白酶解液的检测。

目前，常规抗氧化剂的分析方法有分离时间较长，试剂样品耗费多等缺陷。因此，有必要发展一种更为简便、快速、经济的抗氧化剂检测方法。高效微流电动液相色谱法(eHPLC) 是近年发展起来的一种新兴微分离技术，具有高柱效、高选择性、高分辨度、快速分离的特点，且其样品和试剂消耗少。因此，eHPLC可有效避免上述缺陷，可以很好的实现4种抗氧化剂含量的检测。

毛细管电色谱（CEC）结合了毛细管电泳（CE）和高效液相色谱（HPLC）的最佳特点：CE的分离效率高，高效液相色谱的多选择性和大样本容量。近年来，对映体的分离受到了广泛关注，许多HPLC中常见的手性固定相被用在CEC中，例如环糊精、纤维素、大环内酯类抗生素、阴离子交换型固定相和分子印迹聚合物等。然而，当在没有压力的情况下使用CEC时，特别是对于填充柱，仍然存在与气泡形成和柱干涸相关的问题和困难，在开管和整体柱中不会出现这个问题。熔融玻璃管壁似乎是形成气泡的重要因素。对于填充柱中出现的气泡和柱干涸的问题，可以通过高效微流电动液相色谱（eHPLC）系统解决，其流动相由压力流和电渗流（EOF）共同驱动。在eHPLC系统中，可以在毛细管色谱柱的出口端和进口端施加一个大于1000 psi的压力，这样就可以避免在使用CEC模式时出现气泡和柱干涸等问题。同时，eHPLC系统中样品可通过旋转式注射器实现定量引入。另外，EOF可以与整个流动相的方向相同或相反，因此可以影响样品洗脱顺序。更重要的是EOF适用于梯度洗脱模式。因此，通过eHPLC系统，CEC的优势可以充分的实现。我们选取一种大环内酯类抗生素-万古霉素作为手性固定相，建立了eHPLC系统分离检测手性药物的方法。

本文采用TELEDYNE LEEMAN LABS Prodigy直流电弧光谱仪作为实验设备；仪器具有800mm 焦距光学系统和百万像素大面积程序化固态检测器（L-PAD），该检测器有效面积为28×28 mm；波长范围达到175—1100nm的连续覆盖，仪器在一次激发过程中可同时进行信号采集和背景校正，从而极大地减少了电极的消耗和样品分析时间。除此之外，检测器还具有防溢出功能并且可以进行随机读取和非破坏性数据读取，具有10个数量级以上的动态范围。电弧激发台所带的斯托勒-沃德气室可采用各种质子流量计控制的气体来降低CN键所造成的干扰，并且提高样品激发速率。斯托伍德气室的气体流量同样通过微处理器来控制，在单次激发过程中可采用多种不同气体，并且每种气体单独控制。在进行高纯氧化钨样品中Al、As、Bi、Ca、Cd、Co、Cr、Cu、Fe、Mg、Mn、Mo、Ni、Pb、Sb、Si、Sn、Ti、V等元素分析时，基于样品组成的特殊性和复杂性，给样品前处理环节带来一定的困难，由于直流电弧光谱仪无需样品制备、直接固体分析、灵敏度、分析速度快、准确度高等优势而成为难溶粉末、高纯金属等材料分析的首选仪器。

开发出SPE-eHPLC方法，为同时分离和测定蔬菜中杀虫剂所含的10种氨基甲酸酯类化合物，提供了一种快速和具有选择性的方法。在较适宜的条件下，10个氨基甲酸酯类化合物可通过等度洗脱，在20分钟内实现基线分离。与反相高效液相色谱法相比，该方法简单、省时、成本低。采用固相萃取法对复杂样品进行净化，10种氨基甲酸酯的检出限为0.05-1.6 mg/kg，8种蔬菜样品在不同浓度氨基甲酸酯下的平均回收率为51.3-109.2%。相对标准偏差小于11.4%。实际样品分析结果表明，该SPE-pCEC方法具有较高的选择性和灵敏度，可用于蔬菜中低浓度氨基甲酸酯类残留的分离和测定，为氨基甲酸酯直接测定提供了一种快速，经济的方法。

开发出SPE-eHPLC方法，为同时分离和测定蔬菜中杀虫剂所含的10种氨基甲酸酯类化合物，提供了一种快速和具有选择性的方法。在较适宜的条件下，10个氨基甲酸酯类化合物可通过等度洗脱，在20分钟内实现基线分离。与反相高效液相色谱法相比，该方法简单、省时、成本低。采用固相萃取法对复杂样品进行净化，10种氨基甲酸酯的检出限为0.05-1.6 mg/kg，8种蔬菜样品在不同浓度氨基甲酸酯下的平均回收率为51.3-109.2%。相对标准偏差小于11.4%。实际样品分析结果表明，该SPE-pCEC方法具有较高的选择性和灵敏度，可用于蔬菜中低浓度氨基甲酸酯类残留的分离和测定，为氨基甲酸酯直接测定提供了一种快速，经济的方法。

开发出SPE-eHPLC方法，为同时分离和测定蔬菜中杀虫剂所含的10种氨基甲酸酯类化合物，提供了一种快速和具有选择性的方法。在较适宜的条件下，10个氨基甲酸酯类化合物可通过等度洗脱，在20分钟内实现基线分离。与反相高效液相色谱法相比，该方法简单、省时、成本低。采用固相萃取法对复杂样品进行净化，10种氨基甲酸酯的检出限为0.05-1.6 mg/kg，8种蔬菜样品在不同浓度氨基甲酸酯下的平均回收率为51.3-109.2%。相对标准偏差小于11.4%。实际样品分析结果表明，该SPE-pCEC方法具有较高的选择性和灵敏度，可用于蔬菜中低浓度氨基甲酸酯类残留的分离和测定，为氨基甲酸酯直接测定提供了一种快速，经济的方法。

开发出SPE-eHPLC方法，为同时分离和测定蔬菜中杀虫剂所含的10种氨基甲酸酯类化合物，提供了一种快速和具有选择性的方法。在较适宜的条件下，10个氨基甲酸酯类化合物可通过等度洗脱，在20分钟内实现基线分离。与反相高效液相色谱法相比，该方法简单、省时、成本低。采用固相萃取法对复杂样品进行净化，10种氨基甲酸酯的检出限为0.05-1.6 mg/kg，8种蔬菜样品在不同浓度氨基甲酸酯下的平均回收率为51.3-109.2%。相对标准偏差小于11.4%。实际样品分析结果表明，该SPE-pCEC方法具有较高的选择性和灵敏度，可用于蔬菜中低浓度氨基甲酸酯类残留的分离和测定，为氨基甲酸酯直接测定提供了一种快速，经济的方法。

本文检测样品中的铝、硼、钙、铬、铜、铁、锰、镍、磷、钛和钒等，证明Teledyne Leeman Labs Prodigy直流电弧光谱仪测定高纯硅中痕量元素的能力。