体细胞突变

单核细胞（monocytes）是体积最大的白细胞，直径14~20μm，呈圆球形，约占血液中单个核细胞数的10~30%。单核细胞是重要的天然免疫效应细胞，在感染过程中能快速从外周血迁移到组织中，参与病原体的识别和清除。同时，单核细胞还是巨噬细胞和树突状细胞的前体细胞。

不需显微操作体细胞核移植的利益和前景远大。当前的成果包括降低装备费用，简化预备工作及实验技术要求低。任何做过胚胎方面试验和口吸管方面工作的人都能很快掌握。尽管用卵母细胞试验的直接工作没有显著减少，但降低了这些工作的技术难度。此外，与早期的技术相比，预备工作如制作工具可以省略。然而，应该注意到产生三倍体需要较多的卵母细胞。无透明带的胚胎可能有利于嵌合体的制作，克隆方法的简化也将有利于核移植的自动化。在卵母细胞成熟期间，用于建立该方法的供体细胞是贴壁的原代培养的颗粒细胞，这些细胞并不是都很适合做供体。随着方法的进一步改进，可能能用不同器官组织的传代细胞和血清饥饿培养的细胞。

将测试的生鲜牛乳涂抹在载玻片上成样膜，干燥、染色，显微镜下对细胞核可被亚甲基蓝清晰染色的细胞计数,用恒温培养箱进行生鲜牛乳中体细胞的载玻片进行培养。

FOSS新一代的体细胞分析方案包括 FossomaticTM 7和FossomaticTM 7 DC，二者均拥有新的由激光驱动的测量模块。且Fossomatic 7 DC具有多个传感器检测牛奶细胞中的荧光信号，同时拥有新的化学反应和孵育单元，可以使仪器能够检测特异性体细胞和体细胞。

省时，准确，安全NucleoCounting节省微载体细胞计数的时间，计数精确可靠与传统的胰蛋白酶消化方法相比，NucleoCounting工作流程的去除了几个离心，移液和孵育步骤。 整个细胞计数过程在不到5分钟内完成。ReagengA100 可以完全将细胞从微载体上消化下来，消除细胞结团的影响。此外，微载体不含细胞核，不会被DAPI染料计数，不干扰细胞的计数结果。此外，NuclecounterNC200产品符合GMP 要求，能够进行21CFRpart11 电子签名，提供3Q 认证，且该产品无需清洗和无需校正，享受零成本售后服务。

使用新型的Fossomatic 7 DC,引入了一种新型牛奶检测参数，体细胞分型计数（DSCC），用于加大乳腺炎筛查和管理力度。除了确定体细胞总数之外，细胞分型为乳牛的实际乳房炎健康状况提供了更准确的描述和更有价值的附加信息。

IPHASE技术人员以PAH为底物验证重组OAT1转运体细胞的代谢能力。结果发现，IPHASE重组OAT1转运体细胞转运PAH的能力是指导原则的9倍，表明IPHASE瞬时转染重组OAT1转运体细胞满足药物研发要求。

内皮细胞，内皮祖细胞，基质细胞的信号联系在血管形成的时候是至关重要的。其中，外分泌体就是其中一种通信方式。有研究发现，外分泌体在免疫应答，肿瘤存活，应激反应和血管生成上的细胞间通信有着非常重要的作用。在外分泌体中有mRNA和miRNA往往会对受体细胞产生影响。荷兰的研究人员对外分泌体内的microRNA miR-214的研究发现，含有miR-214的外分泌体能够抑制受体细胞的内皮细胞的衰老，并且促进血管生成的发生。与此同时，其还会抑制毛细血管失调症突变体 ataxia telangiectasia mutated (ATM)的表达。

试剂盒适用于体外定性定量检测人脑胶质瘤样本的IDH1基因突变 （R132H）和IDH2基因突变（R172K），数字PCR可以直观的反映患者IDH位点的突变频率，辅助临床诊断，对脑胶质瘤的个体化治疗及临床预后判断具有重要意义

体细胞计数(SCC)表示牛奶中的细胞总数量，是全世界范围内用来检测和管理奶牛群乳腺炎的重要指标。尽管奶牛的乳房健康情况在过去 40 年里已经有了显著改善（例如 Sampimon et al., 2005），但乳腺炎仍然给乳品业造成巨大经济损失（例如 Seegers et al., 2003）。困难在于乳腺炎是一种非常复杂的疾病，受多种因素的影响，例如环境和奶牛饲养。另外，乳腺炎的病原体不断进化，这就需要改变乳腺炎管理方案。此外，奶牛也在发生变化，产奶量明显增多，这就需要采取不同类型的奶牛管理方法。

突变K-Ras是癌症中最为常见基因突变之一，它存在于约25%的肿瘤中，是热门的肿瘤靶点。2021年，针对K-Ras（G12C）的小分子药物Sotorasib获得FDA批准上市，用于治疗该基因突变的晚期非小细胞肺癌患者。

繁殖不息，突变不止，进化不断——这个是所有物种的共性，尤其是已经肆虐了一年多的新冠病毒。病毒的突变不一定会使得病毒自身毒性更强，但往往会导致传染能力更强。新冠病毒S蛋白与人受体ACE2的分子结合能力是决定病毒传染能力强弱重要的因素之一。一个新冠病毒突变株的氨基酸突变点非常多，但是最值得关注就是那些位于S蛋白与人受体ACE2的结合部分（RBD结构域）的突变，可以直接影响其与受体的结合亲和力，从而改变其感染能力。

近期，约翰霍普金斯大学医学院的研究人员在Science期刊发表研究成果[1]。他们发现了靶向TP53突变的新抗原，筛选出一种抗体片段（H2-scFv）特异性识别灭活的肿瘤抑制基因的蛋白质产物，通过实时监测T细胞杀伤效应，证实了该抗体片段的有效性，开创了靶向疗法的新领域。此研究中，Incucyte® 被选择并应用于免疫细胞肿瘤杀伤活性的实时动态分析。

提取单一的癌症组织进行突变分析

细胞外囊泡（EVs）或外泌体在传染病和癌症的病理生理学研究中有重要意义。猿类免疫缺陷病毒（SIV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）编码的负调节因子（Nef）在获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的致病过程中起非常重要的作用，严重损害胞内运输体系。HIV-1的负调节因子Nef是否会被分泌到细胞外囊泡中，这个问题一直存在争议。人们对SIV负调节因子Nef与细胞外囊泡之间的联系，也一无所知。但是在来源于所培养细胞、经亲和层析纯化所得到的细胞外囊泡和来源于已感染SIV的猕猴的细胞外囊泡中，研究者都发现了SIV和HIV-1负调节因子蛋白。而且，含有Nef的细胞外囊泡是有生物学功能的，也就是说，这类细胞外囊泡能参与膜融合过程，将它们的内含物释放到受体细胞中。所以，这些细胞外囊泡能将负调节因子Nef传递到受体细胞，这意味着负调节因子Nef很容易进入外泌体的生物发生途径，HIV病毒体可以细胞质膜处完成组装。这揭示了慢病毒影响未感染细胞和不可感染细胞（即不含CD4的细胞）的一个新机制。

法国雷恩第一大学尤金马奎斯癌症中心在《Scientific Reports》上发表了一篇文章，该文章采用naica® 微滴芯片数字PCR系统开发了多重PIK3CA突变检测技术。该技术可同时检测21种PIK3CA突变，并进行绝对定量，解决了当前对乳腺癌患者的21种PIK3CA致病突变进行快速、高灵敏、有效检测的难题。

非小细胞肺癌患者血浆中EGFR含量及突变量分析是一种较好的判断肿瘤分子特征及预后评判的工具，治疗前EGFR总拷贝数及突变的EGFR拷贝数具有指示临床预后的作用。

7月初，明慧MHIL150 倒置显微镜和MHD1200显微镜摄像头走进南方医科大学南方医院实验室，用于观察活体细胞在培养皿中的生长、分裂、迁移等动态变化。经过仪器测试，实验老师们表示，明慧MHIL150倒置显微镜与MHD1200显微镜摄像头的组合成像效果优秀，细胞损伤低，稳定成像的同时操作简便，大大提高了实验效率和准确性，为他们的研究工作带来了极大的便利和助力。

在肿瘤免疫微环境中，细胞组分极为复杂，除了肿瘤细胞外，还有各类由多能造血干细胞分化而来的淋系和髓系前体细胞；髓系前体细胞可分化为单核细胞、巨噬细胞、粒细胞等；淋系前体细胞可分化为T，B，Nk细胞，T细胞在一定条件下可转化为激活T细胞，记忆T细胞和抑制性T细胞等；B细胞又可分化为浆细胞分泌产生抗体。

下述方法是对Graham与VanderEb(1973)建立的磷酸转方法的改进，用高分子量基因组DNA代替了质粒DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用（Segeetal.1984,Kingsleyetal.1986)。

在西方国家，顺铂，卡铂和奥沙利铂是使用最广泛的铂类癌症化疗药物。卡铂的有效性是由于其可以与DNA结合从而导致DNA- 铂（Pt）加合物的形成，但这也会造成DNA 的弯曲。因此在化疗后细胞必须修复DNA损伤，否则DNA复制受阻会导致细胞死亡。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对顺铂治疗表现出耐药性，导致了癌症的复发。顺铂耐药性归因于三种主要的分子机制：DNA 修复的加速，胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低或者顺铂转运的加速。细胞内顺铂的摄入与肿瘤负荷相关，也就是说肿瘤对顺铂反应降低会导致细胞内顺铂的含量降低。所以，分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。过多顺铂进入细胞内会增加DNA 损伤和细胞死亡的频率。了解细胞对顺铂的摄入将能为新疗法的开发提供参考，以提高肿瘤对顺铂的敏感性。传统方法的缺陷在于铂的浓度只反映整体细胞群内的浓度而不是个体细胞内的浓度。因此，顺铂摄入在个体细胞之间的分布和差异无法通过传统方法体现。实际上，细胞对顺铂的摄入最有可能根据个体有很大差异，但至今还没有有效的方法来评估。本文介绍了一种全新的技术，可对金属在单一细胞水平上进行定量：单细胞电感耦合等离子体质谱 (SCICP-MS)。SC-ICP-MS 是以单颗粒电感耦合等离子体质谱（SP-ICP-MS）技术为基础，后者能够在溶液中对纳米粒子进行评估与定量。两种技术都基于测量单个细胞（或单个纳米颗粒）在进入等离子体时产生的离散信号的原理。每个细胞中的金属成分离子化，产生离子流，检测器以每秒100000 数据点的速度快速对信号采集测量，从而使得单个细胞中的金属含量能被定量到阿克（ag）/ 每细胞的水平。相比测量细胞内顺铂摄入的传统方法，SC-ICP-MS 所得结果的信息量更加全面。

在悬浮细胞的培养过程中，根据整体细胞生长分裂的状况可以将整个细胞培养周期分为四个时期：潜伏期、对数生长期、稳定期、衰亡期。进入对数生长期的时候是细胞分裂最旺盛的时候，细胞活性也是最高，随着分裂次数的增加，细胞代谢产物增加，细胞密度增大，到了对数生长期后期有一小部分细胞会出现凋亡的迹象。

臻准生物采用微腔芯片数字PCR技术，对L858R突变、外显子19 del、20 insert、T790突变进行准确灵敏的检测，在疾病进展前尽早发现耐药突变，识别EGFR靶向治疗敏感的NSCLC患者，为患者争取治疗时机，辅助临床制订个体化靶向治疗方案。

叶色突变能够降低光合效率，对作物生长和经济产量造成严重的负面影响。已有拟南芥和作物的不同叶绿素突变体被应用于叶绿素生物合成、叶绿体发育和光合效率的遗传控制和分子机制的研究。油菜的叶绿素突变体也常被用于遗传作图和定位，但很少用于生理研究(Lin et al., 2022)。为此，西南大学农学与生物科技学院的研究人员对油菜叶绿素缺失突变体同步进行了遗传定位及生理分析，研究成果发表在今年的《BMC Plant Biology》杂志上。其中生理分析采用了由国际知名植物表型仪器制造商Photons Systems Instruments（PSI）研发、北京易科泰生态技术有限公司提供全程技术支持的PlantScreen植物表型系统。

相对原来的方法有如下改进：（1）IBIDI有2孔共培养载玻片，细胞互不接触，但共享同一个液体环境，可以实时观察细胞，不像transwell做共培养，需要取出细胞才能观察；（2）IBIDI共培养载玻片在孔里加液换液，培养和观察等操作方便，比transwell的操作要简单；（3）此产品能按实验需要调节供体细胞和受体细胞的比例；（4）产品用法简介：在浅的孔中种细胞，细胞贴壁后，加入培养基浸过所有的浅孔，共培养实验开始；－（如果实验是做少量细胞的共培养，或多细胞对少细胞的共培养）IBIDI这些2孔插件，还有4孔插件都可以做，把少细胞种在插件的孔里就可以了；

细胞融合也称细胞杂交 , 是指细胞通过介导和培养, 在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合( 合并) 成一个核或多核的杂合细胞的过程。体细胞融合后可形成四倍体或多倍体细胞，由此形成的杂交细胞，其特性会有很大的变化。

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验常见问题与解答—热点问题—

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验常见问题与解答—热点问题—

本规程适用于动物种质资源体细胞采集、培养、保存及其相关操作。由于细胞培养技术内容非常丰富，本规程仅对其中最主要的部分做了基本的规范。在实际操作过程中，在此规程的基础上，一些实验技术的细节，还需参照相关的权威性的参考书，并根据本实验室的具体情况加以灵活运用。

流式细胞计数具有高度的敏感性，可同时对目的菌进行定量和定性的检测。目前，流式细胞术以其高速、高灵敏度已经广泛应用于食品中各种病原性致病菌的快速检测，尤其是食品中的大肠杆菌的检测已经被FDA 列为食品安全的常规检测。