乳酸菌饮料

GB 11673- 2003含乳饮料卫生标准中规定：本标准适用于以鲜乳或乳粉为原料，加人适量辅料配制而成的具有相应风味的含乳饮料。其理化指标有两项很重要：脂肪大于等于1.0g/100ml蛋白质大于等于1.0g/100ml其他的微生物指标和元素指标就不多说了．GB 16321- 2003乳酸菌饮料卫生标准本 标 准 适用于以鲜奶、奶粉或辅以植物蛋白粉等为原料，经乳酸菌发酵加工制成的具有产品相应风味的未杀菌或杀菌饮料。未杀菌型乳酸菌饮料产品经乳酸菌发酵、调配后不经杀菌制成的产品。杀菌型乳酸菌饮料产品经乳酸菌发酵、调配后再经杀菌制成的产品。蛋白质大于等于0.7g/100ml这里要说说微生物指标：杀菌的出厂后检测菌落总数，而未杀菌的检测乳酸菌数，请注意区别．附件是两个卫生标准，请注意查看．[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=92528]１[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=92529]２[/url]

活性乳酸菌饮料的酸度用滴定法怎么滴定啊?它用的NaOH是0.1MOL/L的,但0.1000MOL/L和0.1010MOL/L测出来的酸度都是不一样的,到底该怎么做比较好?

有哪位朋友知道乳酸菌饮料理化指标？请告诉一下谢谢！！！！！！！！！

据台湾媒体报道，昌乳食品公司委托苗栗县农会乳品加工厂生产的“优安蜜”乳酸菌饮料，含有致癌的防腐剂“去水醋酸”，由于产品主要批发给北部的便当业者做附赠饮品，消费者早已喝下肚，消息传出引发恐慌；台北县政府昨立即前往三峡镇民生街一处经销商稽查采样，若被验出不合格，将依食品卫生管理法开罚三万至十五万元(新台币，下同)，经销商则已紧急回收产品。 曾两度被验出 业者称现已合乎标准 壹周刊爆料，坊间有多达十一个品牌的乳酸菌饮料，乳酸菌数量偏低，不符合国家标准，昌乳食品公司的“优安蜜”更被验出有致癌之虞的防腐剂“去水醋酸”。 去水醋酸是一种广效的防腐剂，按照台湾法令，乳酸饮料中根本不能添加，喝太多会急性中毒，如果长期食用，会伤肝伤肾，导致孕妇畸胎，甚至致癌。

经常会看到一些乳酸菌饮品上写着有益菌几百万几百万来着，不知道到底是个什么概念http://www.foodmate.net/file/upload/201108/17/08-43-29-86-410687.jpg对于乳酸菌饮品中的活菌数量和对人体有益的数值，目前尚无相关标准可以检测。 乳酸菌饮品因为宣传的"能加速肠道蠕动"、"促进肠道排毒"而备受女性消费者喜爱，事实上，乳酸菌饮料分为活性乳酸菌饮料和非活性乳酸菌饮料的，区分这两者的关键是---看里面有没有大量的活菌。然而事实上，活性益生菌可能因加工、发酵、运输、储存过程中种种因素就被杀死了，我们喝进腹中的活菌到底有多少，至少目前尚未可知。 夏季也是很多爱美女士的减肥季，市场上不少宣传"能加速肠道蠕动"、"促进肠道排毒"的乳酸菌、益生菌饮品成为不少女士的心头好，到底乳酸菌和益生菌是什么东西？这类饮品真的能促进肠道排毒，对肠道真的能起到所谓的保护作用？人体内究竟需要多少个乳酸菌才最恰如其分？

乳酸(菌)饮料是饮料，酸奶是天然食品，乳酸(菌)饮料与酸奶是完全不同的两种食物。凡是有“饮料”二字的食品，医生或是营养专家都不会建议长期饮用。　　具体来说，酸奶是由优质的牛奶经过乳酸菌发酵而成的，本质上属于牛奶的范畴，保存了鲜奶中所有的营养素，含有丰富的蛋白质、脂肪、矿物质。　　而乳酸(菌)饮料，大部分是以鲜奶或奶粉为原料，经乳酸菌培养发酵制得，再在制得的乳液中加入糖、各种香料以及其他添加物质而最终制成。在稀释了酸奶的同时，根据各厂家的产品不同，还添加了复杂多样的成分。　　区分是酸奶还是饮料，主要要看蛋白质含量。　　根据国家标准，酸奶和含乳饮料的包装上都应标明产品成分和配料。酸奶的配料表中，蛋白质含量标示不应低于2.3%，牛奶3.0%，乳酸(菌)饮料蛋白质含量一般只有1%。　　酸奶以及乳酸(菌)饮料对人体肠道的健康作用，主要区别于真正作用于人体肠道内的益生菌数量。　　就其本身含有的益生菌数量来说，从高到低含量排序为酸奶、乳酸菌饮料、乳酸饮料。乳酸菌和乳酸饮料的区别就在于是否含有益生菌。　　有些益生菌饮料广告，宣传语建议，每天饭后来一瓶，可帮助消化促进肠道蠕动。对此，专家指出，不建议依靠益生菌饮料来补充人体肠道益生菌数量，因为它的效果微乎其微。　　益生菌饮料，根据各产品制作工艺和保存方式的不同，本身含有一定量的活性益生菌，在运输、保存过程中，会有一部分益生菌死亡，失去活性。　　喝到人体内，进入胃部，由于胃酸的刺激，又有绝大部分活性益生菌死亡，变成死菌。　　但是，也不排除有能“快速通过”胃部，逃脱胃酸的杀害到达人体肠道的少量益生菌确实能发挥对人体的健康作用。

固体饮料里面有添加了乳酸菌，在检测固体饮料的菌落总数的时候，按照菌落总数的检测方法会把乳酸菌也给检测出来了吗？ 这样的话其菌落总数一定会超标 ，没有可以执行的标准

乳酸菌广告效果乃商家随意而为 专家:酸奶更为有益中广网北京11月22日消息（记者吴善阳 实习记者陈彬）据中国之声《央广新闻》报道，近年来，乳酸菌饮品花样百出，商家打出的"乳酸菌"概念广告也是五花八门。但乳酸菌饮品真的"能够帮助肠胃做运动",其功能真如商家宣传的那么玄乎吗？专家指出，乳酸菌广告往往是商家随意而为，并没有统一的规范标准。要使行业健康有序发展，就必须尽早出台行业标准。 每天中午，记者发现多数在写字楼上班的白领都会饭后买一瓶乳酸菌饮品，仿佛真能让它"帮助肠胃做运动".食用乳酸菌饮品实质上是为我们补充乳酸菌，使人体菌群达到平衡，从而有益健康。上海交通大学病原生物学教研室主任、上海市食品学会乳酸菌专业委员会副主任委员郭晓奎表示广告效果都是厂家随意而为，没有机构认证。 郭晓奎：那些厂家在做广告上都是自己随意而为的，并没有哪个权威机关或者学术机构来验定，咱们国家从来就没有一个机构出这个认证。 继味全、达能之后，光明、伊利、蒙牛先后推出了自己的乳酸菌产品。商家各出奇招，时而请美女明星代言，时而请某医学博士，貌似权威。此外，商家总喜欢用一些不为人知的专业菌名做噱头，A+B益生菌、B益畅TM菌等。有的商家还推出"植物乳杆菌",用"自然"的名义抬高价格。其实，"植物乳杆菌"只是因为最初是在植物上发现的而得名，并不是在植物上独有的。 专家建议，传统固性酸奶更为有益。乳酸菌饮品主要配料为水，脱脂奶粉和食用香料，其含奶量甚少，千万不能将乳酸菌与酸奶等同看待。同济大学医学院营养与保健食品专家张欣文教授表示还是酸奶营养价值高。 张欣文：乳酸菌饮料里面放了比较多样的食品添加剂，所以它的营养价值来说就没有酸奶那么高。 记者发现，在国家食品药品监督管理局的数据中，只有6种乳酸菌饮品获得了国家批准文号。其中，杭州顶津食品有限公司是用"味全R活性乳酸菌饮品"的名字申请批准文号，并属于国产保健食品类，而市场上销售的"味全活性乳酸菌饮品"中，却将R去掉，以普通食品出售。其他诸如光明、伊利、蒙牛等品牌虽大推活性乳酸菌的保健功能，但并不属于国家批准的保健食品行列。郭晓奎表示大多企业所用菌种都是未经严格实验的。 郭晓奎：咱们国内大多数企业用的菌种都是没有经过严格的随机、对照、多中心等多种测试的。它可能委托两家企业做一下或者两家医院做一下实验，但是这个实验从严格意义上来说恐怕都存在一些问题。这是一个很乱的，但有前景的，管理上跟不上或者说学术支持也跟不上的一个行业。

1 目的要求（1）初步掌握乳酸菌活力测定的一般方法。（2）了解乳酸菌在乳发酵过程中所起的作用。2 基本原理乳酸菌的细胞形态为杆状或球状，一般没有运动性，革兰氏染色阳性，微需氧、厌氧或兼性厌氧，具有独特的营养需求和代谢方式，都能发酵糖类产酸，一般在固体培养基上与氧接触也能生长。酸乳风味的形成与乳酸菌发酵过程代谢的多种物质有关，而这些物质的产生与发酵速度等活力指标有密切关系。乳酸菌的活力可由多种参数确定，如细胞生长情况，细胞干重和光密度（OD值）等。由于乳液不透明，不能直接测OD值，可用NaOH和EDTA处理使其澄清后再测。较简便的活力测定包括凝乳时间，产酸和活菌数量等指标的检测。3 实验材料3．1样品 市售酸奶或乳酸菌饮料。3．2 培养基 MRS固体和液体培养基，复原脱脂乳培养基。3．3 实验用仪器设备 超净工作、恒温培养箱、鼓风干燥箱、高压蒸汽灭菌锅、冰箱、油镜显微镜、碱式滴定仪、天平、培养皿、移液管、试管、烧杯、量筒、温度计、酒精灯、接种针、载玻片等。4 实验方法与步骤4．1 菌种的分离（1）编号 取五支无菌水试管，分别用记号笔标明10-1、10-2～10-5。（2）稀释 将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25mL，移入含有225mL无菌水的三角瓶中，在漩涡混合器上充分振摇，使样品分散均匀，获得10-1的样品稀释液，然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当稀释度。（3）倒平板 选用2～3个适宜浓度的稀释液，分别吸取1mL注入平皿内，然后倒入事先溶化并冷却至45℃左右的MRS固体培养基，迅速转动平皿使之混合均匀，待冷却凝固后倒置，于40℃培养48h。（4）分离 无菌操作，从培养好的固体平皿中分别挑取5个单菌落接种于液体MRS培养基中，置40℃培养箱中培养。（5）镜检 通过镜检，确定所分离的乳酸菌是乳杆菌还是链球菌。保加利亚乳杆菌呈杆状，单杆、双杆或长丝状；嗜热链球菌呈球状，成对、短链或长链状。4．2 接种按1%的接种量，将MRS液体培养物接种于已灭菌的复原脱脂乳中，另分别接种具有较高活力的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌作为对照。培养温度为保加利亚乳杆菌40℃， 嗜热链球菌45℃。4．3 观察与测定（1）观察： 观察并记录各试管的凝乳时间。（2）酸度测定：用NaOH滴定法，测定发酵乳液的滴定酸度。（3）计数：采用倾注平板法，测定活菌数量。

[size=4]含乳饮料：以鲜乳或乳制品为原料，经发酵或未经发酵，经加工制成的制品。A：配制型含乳饮料（formulated milk）:以鲜乳或乳制品为原料，加入水，糖液、酸味剂等调制而成的制品。成品中蛋白质含量不低于1.0%（m\v）称乳饮料，蛋白质含量不低于0.7%称乳酸饮料。B：发酵型含乳饮料（fermented milk）:以鲜乳或乳制品为原料，经乳酸菌类培养发酵制得的乳液中加入水，糖液等调制而制得的制品。成品中蛋白质含量不低于1.0%（m\v）称乳酸菌乳饮料，蛋白质含量不低于0.7%称乳酸菌饮料。[/size]

应如何理解乳饮料？含乳饮料分为中性型乳饮料和酸性乳饮料，又按照蛋白质及调配方式分为配制型含乳饮料和发酵型含乳饮料。配制型含乳饮料：蛋白质含量不低于1.0%的称为乳饮料。发酵型含乳饮料：发酵型含乳饮料中蛋白质含量不低于1.0%的称为乳酸菌乳饮料，蛋白质含量不低于0.7%的称为乳酸菌饮料。

会不会对乳酸菌有影响？

梅基尼可夫又称「乳酸菌之父」，他到保加利亚旅游时，发现当地有许多超过百岁的人瑞，于是便开始探讨当地人长寿的原因。他从当地人的饮食习惯中，发现他们有每日饮用「酸乳」的习惯，并经研究证实，饮用酸乳有助延年益寿，长保青春，其关键便在于酸乳中所含的乳酸菌。 人体的肠道每天必须消化吸收我们吃进去的食物，当肠道内的有益菌多于有害菌时，可确保肠道发挥正常的消化与吸收作用，维持正常的免疫功能。但是，当有害菌多于有益菌时，便造成肠道功能下降，使食物无法排出体外而留存在肠道中与有害菌交互作用，逐渐在肠道内产生致病毒素，引发各种疾病及老化现象；这就是一九○八年获得诺贝尔医学奖的梅基尼可夫所提出的「自身中毒」学说。保加利亚人因每天饮用的酸乳中含有多量有益菌，即乳酸菌，可有效抑制肠道中有害菌增生，并促使有益菌大量繁殖，使肠道功能维持在健康正常的状态，让体内毒素可顺利排出体外，避免产生其它致病原因，自然能常保健康与青春。

[size=4]含乳饮料种类可分为配制型含乳饮料和发酵型含乳饮料两种。配制型含乳饮料是以鲜乳或乳粉为原料，加入水、糖液、酸味剂等调制而成的产品，其中蛋白质含量不低于1.0%的称为乳饮料，蛋白质含量不低于0.7%的称为乳酸饮料；发酵型含乳饮料是以鲜乳或乳粉为原料，经嗜热链球菌或保加利亚乳酸杆菌等发酵制得的乳液中加入水、糖液等调制而成的具有相应风味的活性或非活性产品。其中蛋白含量不低于1.0%的称为乳酸菌乳饮料，蛋白质含量不低于0.7%的称为乳酸菌饮料。[/size]

乳酸菌计数，用的MRS培养基，我想知道培养时用不用加抗真菌的抗生素，不加的话影响大不大，加的话具体加哪种？

文/李莎（华测检测） 鲜乳能够由液态转化为凝固态的发酵乳，并产生令人心怡的风味和丝滑的口感，这华丽的转变和其中的奥秘离不开微小的生命——乳酸菌。传统的酸奶就是由嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌混合发酵而成的。[b]乳酸菌简介[/b] 乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。除极少数外，绝大部分都是人体内不可缺少的且具有重要生理功能的菌群，广泛存在于人体的肠道中。乳酸菌具有调节肠道微生态、促进营养成分在肠道的消化吸收、降低血清中的胆固醇含量、缓解高血压以及抗肿瘤作用等诸多益生功能，其分泌的物质如细菌素、胞外多糖、胞外糖苷酶等更是对机体健康有益的。 乳酸菌已经在食品发酵、医药、饲料等领域中长期应用。特别是在食品发酵领域，乳酸菌的品质和性能直接决定发酵乳品质的好坏。不同性能的乳酸菌能够产生不同黏度、风味和生理功能的发酵乳。乳酸菌能够利用鲜乳中的蛋白质进行生产繁殖，并产酸、酯、游离脂肪酸、游离氨基酸，当鲜乳的pH降低至酪蛋白的等电点时，酪蛋白变性凝固。乳酸菌分泌出的胞外多糖，还能将乳酸菌细胞和酪蛋白链接在一起形成网络结构，使得发酵乳的凝胶结构更加稳定。 经研究发现，将优良乳酸菌菌株进行组合有利于提升发酵乳的整体性能，将一种保加利亚乳杆菌与两种以上嗜热链球菌进行组合可以使混合乳酸菌同时具备发酵速率快、产品黏度好、特征风味浓郁等优良性能。 目前，主要通过收集天然乳酸菌来获得性能优良的新型乳酸菌。天然乳酸菌经过筛选、培育和研究，确定其种属，以及产酸、产香、益生功能等特性。由于越来越多功能性乳酸菌的发现，酸奶中除了添加嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌外，还会添加一些功能性乳酸菌，增加发酵乳的益生功能，例如降低胆固醇、降血糖、抗菌消炎、提高人体免疫力。一方面，这些功能性乳酸菌能够在生长过程中会分泌出一些胞外多糖、细菌素、胞外糖苷酶等物质。另一方面，嗜热链球菌菌株和保加利亚乳杆菌菌株存在局限性，它们不耐胃酸和胆汁，在经过人体消化道时，这些常规的乳酸菌会失活，而发酵乳中添加的功能性乳酸菌能够在肠道内大量存活，发挥调节肠道菌群平衡，促进人体消化吸收等作用，被人们认为是新一代的益生菌。[b]可用于食品的乳酸菌菌种名单[/b] 2010年卫生部办公厅发布了《可用于食品的菌种名单》（卫办监督发〔2010〕65号），其中包含乳制品中常用的两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、乳双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种（保加利亚乳杆菌）、嗜热链球菌等。该公告还规定，对于新菌种需要按照《新资源食品管理办法》执行。2011年卫生部又发布了《关于批准翅果油等2中新资源食品的公告（2011年 第1号）》，其中将乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种和乳酸乳球菌双乙酰亚种列入《可用于食品的菌种名单》，增加了可用于食品的乳酸菌种类。 此外，这几年我国卫生计生委也陆续发布了一些公告，增加了可用于食品的菌种名单，其中也包含有乳酸菌。[b]乳酸菌与人体的肠道健康[/b] 在人体肠道中，双歧杆菌和乳杆菌在肠道中普遍存在。婴儿时期，母乳喂养的婴儿肠道中双歧杆菌的数量占绝对优势，而人工牛乳喂养的婴儿肠道中最初普遍没有双歧杆菌，或者个别的双歧杆菌数量处于波动之中，而且常定植某些其它厌氧菌如拟杆菌和梭状芽孢打菌等。婴儿停止母乳或人工喂养后，由于食物的摄取，其肠道转变为类似成年人肠道。健康成年人肠道微生物可大致分为三类：第一类乳酸菌，包括双歧奸菌、乳杆菌和链球菌等，与宿主共生；第二类腐败菌，如拟杆菌、梭菌、消化球菌、大肠杆菌和葡萄球菌等；第三类包括真细菌、瘤胃球菌和巨型球菌等。该时期，双歧杆菌和乳杆菌数量较儿童期显著减少，有害菌滋生。老年人肠道中双歧杆菌和乳杆菌数量减少，拟杆菌、梭菌、肠杆菌和链球菌数量显著增加。 乳酸菌与人体的健康息息相关，特别是人体的胃肠道，其中最主要的两种乳酸菌是双歧杆菌和乳杆菌。双歧杆菌参与宿主的消化代谢、免疫及抗感染过程，它能通过细胞上的磷酸与肠黏膜上皮细胞特异性结合构成生物学屏障，也可产生具有分解肠黏膜上皮细胞内复杂多糖的细胞外糖苷酶，刺激肠道产生免疫抗体和病毒抗体，降低肠道pH及氧化还原电位，从而拮抗肠道需氧菌和条件致病菌的入侵，维持肠道微生态平衡。对于某些腐败菌和低温细菌，双歧杆菌通过产生有机酸对其产生抑制作用从而起到抗菌作用；由于机体吞唾细胞的吞噬活性可以在双歧杆菌的存在下激活，从而提高了机体的抗感染能力及免疫功能；双歧杆菌可以降低机体胆固醇水平，因其在发酵过程中产生一种影响胆固醇合成的物质；双歧杆菌还可以调节肠道正常细菌菌群平衡，起到防止便秘的作用；双歧杆菌的代谢活动还可以明显增加血液中超氧化物歧化酶的含量，从而起到抗衰老的作用。 乳杆菌对人体健康同样十分重要。由于其发酵碳水化合物的终产物是乳酸，可以帮助机体消化吸收；乳杆菌可以通过酸化肠内环境来阻止某些有害菌与肠上皮细胞的黏附，从而阻碍有害菌在肠道内的定植，进而优化胃肠功能，减少了疾病的发生率；乳杆菌还可以刺激免疫球蛋白的产生，从而增强机体的免疫力。 乳酸菌无处不在，与人类和动物的健康息息相关。随着人们对乳酸菌进一步深入地研究，相信越来越多的新型乳酸菌和其益生功能及机理会被人类发现，并造福于人类。

我有一个问题，乳酸菌在脱脂乳中可以保存吗？我是一个月传代一次，有人说，好像乳酸菌在脱脂乳中，七八代就没有活性了，是这样吗？请教大家。

有没有什么办法可以抵消了酸性带来的影响？从而乳酸菌总数检出正常？

食品工业上谈论的益生菌被定义为：益生菌是活的微生物，当摄入足够量时，对宿主起有益健康的作用。在谈论益生菌时必须满足三个条件：1） 活的微生物；2） 摄入足够的量；3） 对宿主健康有益。益生菌是从有益宿主健康出发给出的定义，目前研究较热的益生菌有：双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌、丁酸梭菌等，其中双歧杆菌、乳杆菌和芽孢杆菌都属于乳酸菌类，因此益生菌包括了部分乳酸菌，而乳酸菌不全是益生菌。 乳酸菌并不是一个严格的微生物分类规范，定义并不严谨，但目前已经得到大众的公认。因此食品工业上对乳酸菌的定义为：乳酸菌一般是指能发酵糖，主要生成乳酸的细菌的总称。在谈论乳酸菌时应该注意二个方面：1） 乳酸菌是一种细菌；2） 能发酵糖类生成乳酸。乳酸菌是从发酵糖产生乳酸的机理方面考虑给出的概念，对人类生活有益的乳酸菌有：双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、明串珠菌等。并不是所有的乳酸菌都有益于人类健康，也有一些乳酸菌对人体是有害的，如有害的利斯特氏菌。目前市场上发酵奶制品中提到的乳酸菌传统意义上是指：1）保加利亚乳杆菌（Lactobacillus Bulgaricus）2）嗜热链球菌（Streptococcus Thermophilus）这两支菌是酸奶发酵过程中传统混合使用的乳酸菌。市场上发酵奶制品中提到的益生菌一般为：1）长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)2）青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)3）动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)4）干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)5）嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)6）鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)等等。它们也都是乳酸菌类，由于它们有的耐酸能经受住人体胃酸的考验，有的能在人体肠道中定植一段时间，总之能为人体肠道提供活的益生菌，因此现代微生态学研究中把它们定义为益生菌类。

做益生菌的乳酸菌时，稀释度高的比稀释度低的菌还多，已经排除了低稀释度上菌长不开的问题，也不是抑菌剂的问题，生理盐水也是标准9毫升，枪头也没有过多的挂壁，环境也没有问题，想不出问题出在哪里，求大佬解答？

乳酸菌Berry?Direct?与南特IFV合作筛选的Oenococcus oeni乳酸菌种，拥有强大的发酵能力，提升葡萄酒的芳香浓郁度和清爽度。特别适用于酿造果香浓郁的清爽型葡萄酒。

测益生菌粉的乳酸菌数时，用均质器震荡会影响菌的活性吗

随着微生态学研究的不断发展，乳酸菌功能的进一步开发，越来越多的实验证明乳酸菌对人体健康有重要的作用，如改善胃、肠道菌群结构、预防肠道疾病、抑制病原菌生长、降低血清中胆固醇含量、提高机体免疫力、治疗脚气病、消除致癌因子、防衰老及延年益寿等。因此，近年来，乳酸菌被广泛应用于发酵乳制品行业。如在改善酸奶的风味方面，可以在发酵过程中增加一些能够改善酸奶风味的有益菌种：如丁二酮乳链球菌、醋化醋杆菌、肠膜明串珠菌及乳酪链球菌等；在提高酸奶的功能性方面，可以添加生物源功能因子———益生菌群，如保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等。但是，如何鉴定乳制品中是否含有加入的这类乳酸菌，以及含有哪一种或几种乳酸菌，一直是人们关注的问题。目前，已有一些关于嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等分选计数的报道，但大多基于它们纯培养的基础上，没有得到充分研究。本文对酸乳中多肽物质进行测定、分析与比较，找出不同的乳酸菌发酵酸奶时产生的活性多肽的特异性，并对6种市售酸乳中所含乳酸菌进行测定。 1 试验材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 供试材料 酸乳：市售，不同厂家的6 种酸乳分别标号为1＃、2＃、3＃、4＃、5＃、6＃，并且均为原味凝固型，生产日期相同的合格产品，均添加有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌。其中只有1＃ 酸奶中添加了1 种新菌种。 1.1.2 主要试剂与药品超低分子量SDS-PAGE电泳Marker，分子量分别为20100、14400、7823、5856 u 和3313 u；多肽标准品；丙稀酰胺(Acr)；甲叉双丙稀酰胺(Bis)；三羟甲基氨基甲烷(Tris)；十二烷基磺酸钠(SDS)；四甲基乙二胺(TEMED)；过硫酸铵(AP)；三羟甲基甘氨酸(Tricine)；甘油；考马斯亮蓝G-250；巯基乙醇；聚乙二醇6000等。 1.1.3 主要仪器与设备TGL-16M 高速台式冷冻离心机，分子量1000 u 透析袋，Hoefer mini VE电泳槽，电泳仪、显微摄影系统，50 μL 微量进样器，PHS-3C 酸度计，超净工作台，电子天平，电热恒温培养箱，显微镜，电热恒温水浴锅，电热鼓风干燥箱等。 1.2 试验方法及参数确定 1.2.1 市售酸乳中多肽物质的提取离心除杂：分别取刚打开包装的新鲜市售酸乳样品各50 mL，然后于8000 r/min、4 ℃条件下冷冻离心20 min，取上清液。透析：取上清液置分子量1000 u 透析袋中，用蒸馏水于4 ℃冰箱中透析48 h，其间每隔4 h 更换1 次透析液。浓缩：用聚乙二醇6000 浓缩至原体积的1/3，即得到待检测多肽样品。 1.2.2 酸乳中多肽物质的检测Tricine -SDS -PAGE 电泳法。适合小肽分析的方法有很多，例如毛细管电泳、高效液相色谱、质谱、离子交换色谱、SDS-PAGE 电泳等。由于SDS-PAGE 电泳法对样品纯度要求不是很高，以及实验室条件等各因素限制， 最终采用适用于小肽分析的SDS -PAGE-Tricine 系统对水溶性多肽进行种类和分子量分析。通过大量试验，最终确定的电泳参数为：上样量为10 μL；凝胶浓度分别为：浓缩胶浓度4%，分离胶浓度15%；电流选择：浓缩胶时18 mA，分离胶时25 mA。 1.2.3 电泳后多肽的染色考马斯亮蓝G－250 染色液。 2 结果讨论 http://www.hopebiol.com/asphtml/admin/kindeditor/attached/image/20150206/20150206163557695769.png图1 是市售酸乳中多肽的电泳图谱，虽然有一点条带畸形和拖尾现象，但仍然可以较为清晰地数出多肽条带数。从电泳图谱中可以看出，这6 种酸乳都含有分子量低于7823 u 的小分子量物质，并且6 种酸奶的活性多肽在保加利亚乳杆菌和嗜热乳链球菌的特征谱带处都有谱带，其中2＃ 还含有分子量在3313~5856 u 之间的4 种肽类，但条带颜色很浅，可知其含量很低，这很可能是因为其添加了不同菌种的缘故。从迁移率上看，虽然6 种产品所含肽类基本相同，但从颜色深浅来定性的分析，其肽类含量还是有差异的。 3 结论酸乳中肽类物质产生的种类和含量与发酵菌种有着直接的关系。同时由于不同厂家生产条件的差异导致含量上的轻微差别，这主要体现在相同迁移率谱带的颜色深浅上。本文对6 种市售酸乳中多肽物质进行测定、分析与比较，结果表明，6 种酸乳的活性多肽在保加利亚乳杆菌和嗜热乳链球菌的特征谱带处都有谱带，即该6 种市售酸乳中均含有保加利亚乳杆菌和嗜热乳链球菌，与其配料中所添加菌种一致。

[align=center]吸附搅拌磁子SBSE-热脱附[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GCMS[/color][/url]分析活菌型乳酸菌饮品风味成分[/align] 活菌型乳酸菌饮品?[font='simsun']是一种以乳或乳制品为原料，经过乳酸菌发酵后制成的饮料，其中含有大量的活性乳酸菌。这类饮品旨在通过摄入活性乳酸菌，帮助调节肠道菌群平衡，改善肠道健康。此外，对于肠道敏感或易受肠道问题困扰的人群，选择活菌型乳酸菌饮品可以帮助改善肠道环境，缓解肠道不适[/font][font='simsun']（AI）[/font][font='simsun']。[/font] 本文采用吸附搅拌磁子（SBSE）提取活菌型乳酸菌饮品的香气香味风味成分，大体积冷却进样口PTV热脱附TDU[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]质谱法分析鉴定活菌型乳酸菌饮品成分；利用安捷伦未知物分析质谱解卷积软件识别拆分共流出色谱峰或基线附近的小峰，得到更纯净的质谱图，更利于下一步质谱检索的工作；并结合保留指数校正使质谱检索结果更为准确。 1试验部分 1.1 仪器与装置 美国安捷伦7890/5975C[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱联用仪，带有德国Gerstel的MPS Robotic Pro多功能自动进样系统，德国Gerstel的CIS4大体积分流/不分流进样口和TDU2热脱附。 吸附搅拌子(PDMS, 0.10mmX10mm，Gerstel)。 1.2 样品和标样，试剂 样品：某活菌型乳酸菌饮品，市场样品，来自某上海某超市。 氯化钠（优级纯） 香气香味化合物标准品均来自Sigma-Aldrich等主要试剂公司，少数为实验室内部精制标样。C6-C33正构烷混合标准物来自安谱公司。 1.3 GC/MS条件 1.3.1 色谱条件: 色谱柱：安捷伦HP-Innowax (60m×0. 25 mm ( i.d.)×0.25μm)毛细管柱； 升温程序： 40℃保持2 min，以5 ℃/min升至250℃，保持20 min； 载气（He, 纯度99.999%以上）流速1.8mL/min 进样口：PTV大体积冷进样口，温度-20℃-250℃， 15℃/S；分流比：11:1 (MSD和ODP分流比为1：1) TDU：25-230℃, 100℃/min, 不分流，传输线温度：260℃ 1.3.2质谱条件: 电子轰击（EI）离子源；电子能量70eV；传输线温度280℃；离子源温度230℃；四级 杆温度150℃。SCAN扫描范围：29-400。EMV: 1253。 1.4样品的提取处理及分析方法 [font='simsun'][color=#000000]样品的提取[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]处理[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]：[/color][/font] [font='simsun'][color=#000000]样品[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]主要成分配料表[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]有[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]水、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]聚葡萄糖、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]脱脂乳粉、乳酸钙、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]维生素[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]E[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]、维生素[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]D[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]麦芽糖醇液、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]白砂糖、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]葡萄糖、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]可溶性大豆多糖、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]三氯蔗糖、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]食品用香精、[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]干酪乳酪杆菌[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]等原料[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]。[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]样品里面[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]含有[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]乳脂，蛋白[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]，[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]干扰很大[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]，如果使用一般的有机溶剂提取是不可以的。故选用[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]吸附搅拌磁子（SBSE）提取[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]。[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]取[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]8[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]g样品[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]，[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]加入2[/color][/font][font='simsun'][color=#000000].4g[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]氯化钠[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]，[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]放入吸附磁力搅拌子[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]。[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]在磁力搅拌器以[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]900[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]rpm转速下，[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]提取1小时。[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]取出[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]吸附磁力搅拌子[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]，[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]用[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]超纯[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]水冲洗干净，用[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]干净的[/color][/font][font='simsun'][color=#000000]餐巾纸吸干，放入热脱附的小管，运行序列。[/color][/font] 在分析样品前，和样品分析完全相同的条件下，用0.02%的C6-C33的正构烷标样注射到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GCMS[/color][/url]，获得正构烷的保留时间，用于计算保留指数。分析样品后，用软件计算样品各个组分的保留指数，并和标样的保留指数对比来，结合质谱来定性。事先也用同样方法测定标样的保留指数备用。 1.5 数据处理软件 安捷伦未知物分析软件10.1 建立好带极性保留指数的质谱数据库 2 数据处理 基本流程：建立新分析，调用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]数据，设置合理的数据分析方法参数（包括解卷积），分析检索结果，参照检索匹配度和保留指数，以及相关基本风味化合物知识，仔细核对检索结果，选择合理的检索结果，删去不必要的峰，导出分析报告。 下面为利用未知物分析处理活菌型乳酸菌饮品样品的示例图： [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139059895_1247_1615838_3.png[/img] [align=center]图1 未知物分析处理活菌型乳酸菌饮品样品的图例[/align][align=center] [/align] 2.1 删掉不需要的非风味物质 例如28.28min吸附搅拌子的流失的硅氧烷峰和12.83的乙基苯，样品基质带来的某些化合物，烷烃化合物，邻苯化合物等。 [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139063962_5752_1615838_3.png[/img] [align=center]图2 删掉不需要的非风味物质峰[/align][align=center] [/align] 2.2核对结果 观察化合物匹配度，对比计算保留指数和数据库保留指数是否一致。如果两者不吻合，可以选择Show Alternate hits...来选择合适的候选化合物来确认。 [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139066619_6593_1615838_3.png[/img] [align=center]图3 19.25min检索结果和替换[/align][align=center] [/align] 例如19.25min的检索匹配度94虽然很好，但保留指数1341（实际计算）和1218（质谱数据库）相差较大，显然不正确。需要替换。替换为正己醇后是正确的而结果。 [font=SimSun][img=,554,311]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032142564039_8020_1615838_3.jpg!w554x311.jpg[/img][/font][font='Times New Roman',serif][/font][font=SimSun][/font][font='Times New Roman',serif][/font][font=SimSun][/font] [align=center]图4 替换为正己醇[/align][align=center] [/align] 同理28.28min的Isoborneol的保留指数1704（实际计算）和1673（质谱数据库检索）相差大一些，用borneol替换就更为合理了。Borneol的保留指数1704（实际计算）和1706（质谱数据库检索）。 [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139069404_6138_1615838_3.png[/img] [align=center]图5 替换Isoborneol为Borneol[/align] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139071204_7262_1615838_3.png[/img] [align=center]图6 替换Isoborneol为Borneol[/align] 同样核对其它保留指数不一致的峰，进行替换。 核对检索结果后，保存结果。导出分析报告如：表 活菌型乳酸菌饮品样品风味成分表 3 结果与讨论 3.1实验结果 下面为活菌型乳酸菌饮品样品风味成分表 [align=center]表 活菌型乳酸菌饮品样品风味成分表[/align] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139072513_5809_1615838_3.png[/img] [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409032139073520_6632_1615838_3.png[/img] 2.4讨论 2.4.1 从上表看出，鉴定出91种香气香味风味化合物。包括各种醛类，醇类，酯类，酸类，呋喃类，硫化物，含氮化合物，萜烯化合物，烃类化合物等。（注：一些烷烃化合物，邻苯化合物，基质带来的双酯化合物已经删掉）。风味化合物种类繁多，还是比较丰富的。 含量较大（占比10%以上）的化合物有芳樟醇，甲位松油醇，辛酸，香兰素。 乙酸，己酸，辛酸等酸类化合物是乳酸菌饮品的酸味体现。 酯类化合物提供香气。 2-酮类化合物，内酯化合物，香兰素有酸酸乳的特征气味。 甲硫醇，二硫醚，三硫醚等硫化物提供特征气味。 吡嗪化合物，甲基邻氨基苯甲酸甲酯等含氮化合物更使香气丰富。 大量的萜烯化合物有植物等气味。 2.4.2此活菌型乳酸菌饮品样品含有水、[font='simsun']聚葡萄糖、[/font][font='simsun']脱脂乳粉、乳酸钙、[/font][font='simsun']维生素[/font]、[font='simsun']麦芽糖醇液、[/font][font='simsun']白砂糖、[/font][font='simsun']葡萄糖、[/font][font='simsun']大豆多糖、[/font][font='simsun']三氯蔗糖、[/font][font='simsun']食品用香精、[/font][font='simsun']干酪乳酪[/font]杆菌等原料。如果用一般的液液萃取, 里面的脂肪会进入有机相，严重干扰[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GCMS[/color][/url]分析，同时一些成分也很容易造成乳化现象，不易提取；如果用固相微萃取（SPME），也需要一定的加热温度，对不同挥发性的化合物的提取比例可能不一致，高沸点化合物提取效果差，难以得到较准确的定量，另外灵敏度比SBSE低，不能更好的反映活菌型乳酸菌饮品样品的风味化合物的全貌；如果用同时蒸馏萃取（SDE），有加热过程，可能在提取过程会带来热分解或反应，产生新物质，基质的影响较大。这些提取方法的不足之处，提取效果差，费事耗时，样品量大，使用大量有机溶剂，灵敏度低等。用磁力吸附搅拌子（SBSE）提取活菌型乳酸菌饮品样品，灵敏度高，需要样品量很少，无溶剂，操作简单方便，可以在不加热情况下提取，减少热分解。非常有利于香气香味风味化合物的提取。 样品中适当加入氯化钠有助于更多极性化合物的提取。

做乳酸菌总数的时候，一般我都做乳杆菌和嗜热，突然要多做双歧，但是我不知道最后的计算结果的时候，双歧要不要一起计算进去？求助各位大佬们了！

有没有针对乳酸菌的抑制剂？像脱氧剂能抑制细菌和霉菌等的生长，乳酸菌有这样的抑制剂吗

乳酸菌发酵（发酵植物）过程中是否可以用OD600来表示发酵进程？我知道可以用pH4.0-4.5来表示

乳酸菌检测中要求从样品稀释到平板倾注要求在15min内完成，但是如果一次需要检测8.9个产品，这个是不能在15分钟内完成的，那有什么解决方法呢，这个从样品稀释到平板倾注的时间长短对实验结果会有很多影响吗？