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培养做贡献

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  • 谈工业发酵各阶段培养基的要求

    引用氮氮的欢乐 的 谈工业发酵各阶段培养基的要求工业发酵中利用生产菌发酵得出最终产物是一个逐级放大的过程,各个不同的阶段对于营养成分的要求也各有特点,根据发酵不同阶段的要求,培养基可分为孢子培养基、种子培养基和发酵培养基三种。 孢子培养基孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基,对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长,产生较多优质的孢子,并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是:第一,营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子,但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后,就只长菌丝而不长孢子。第二,所用无机盐的浓度要适量,不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三,要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有:麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基,因为它们含氮量少,疏松、表面积大,所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%-50%,而曲房空气湿度需控制在90%-100%。 种子培养基种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体,并使菌体长得粗壮,成为活力强的“种子”。所以种子培养基的营养成分要求比较丰富和完全,氮源和维生素的含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这样可达到较高的溶解氧,供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH,其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源,因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用,有利于菌体迅速生长,所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。最后一级的种子培养基的成分最好能较接近发酵培养基,这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应,快速生长。 发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长,达到一定的菌丝浓度,又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此,发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外,还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高,或生长和合成两阶段各需的最佳条件要求不同时,则可考虑培养基用分批补料来加以满足。 根据发酵生产各阶段菌体对营养的需求可以大概看出,孢子阶段培养基要求营养简单少量;种子阶段培养基要求丰富完全,特别是氮与维生素含量要高;发酵阶段培养基要求在足够维持适当生长之余与产物相关联,能提供部分前体、特定成分。安琪酵母公司生产的安琪酵母浸出物采用纯化培养的高蛋白面包酵母,经过自溶酶解、分离、真空浓缩、喷雾干燥等工序精制而成。有安全性好,适用面广;稳定性高,重复性好;营养全面,量化控制;澄清度高,利于提取;颜色浅,营养损失少等诸多优点。富含蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、维生素、微量元素等营养成分,比例协调,同时采用生物酶解技术,使营养物质高效定向降解,可为菌体生长培养提供全面均衡的营养。除了作为优质的种子阶段培养基氮源外,在发酵阶段同样能为维持菌体茁壮稳定提供充足的营养,尤其是以初体产谢产物为终产物的发酵,安琪酵母浸出物所含的种类齐全的氨基酸,核苷酸,各种维生素与矿质元素更是作为前体、促进剂发挥着重要的作用;而且其澄清度高,发酵残留少的特点,又大大减少了产品的提取纯化的难度与消耗,协助企业向清洁化,高效化,环保化生产发展。 安琪酵母浸出物以其优异的品质,在发酵工业飞速发展的今天,定会得到更广泛的应用,为生物产业的腾飞作出更大的贡献[/

  • R. Graham Cooks为中国质谱发展做出巨大贡献

    美国分析化学专家罗伯特格雷厄姆库克斯教授荣获2019年度中华人民共和国国际科学技术合作奖,这是对他多年努力与贡献的最好认可。[align=center][img=,400,529]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/1db088cb-2a1e-4378-a4ea-d79d2d880fe5.jpg[/img][/align]  库克斯于1941年生于南非,目前是美国普渡大学教授、美国国家科学院院士、美国艺术与科学院院士及美国国家发明家学院院士。库克斯教授在质谱的基础研究、仪器开发及应用方面取得了丰硕的成果,如亚稳态离子裂解现象的发现,推动了串联质谱技术的开发,为当今新药研发及生物分析提供了必不可少的分析手段。  早在中国改革开放初期,库克斯教授就接纳了多位来自北京工业学院(现北京理工大学)、中国医学科学院药物研究和中国科技大学的访问学者,帮助中国培养了第一代有机质谱人才。同时,库克斯还积极参与推动中国质谱学科的发展。1985年,他第一次来到中国,帮助北京工业学院建设了质谱实验室,担任名誉主任。从1986年起,库克斯教授成为中国质谱学会的名誉会员。过去的30多年里,库克斯教授曾任清华大学、中国科学院长春应用化学所、吉林大学、东华理工大学等多个高校院所的客座教授,为质谱在中国的推广与发展作出了贡献。  库克斯教授从多方面帮助中国在分析化学领域的发展。1985年,他参加了第一届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA),此后又多次参会做报告,积极引荐海外学者参会。30年后,BCEIA已成为国际分析化学领域最具规模的会议之一。2010年及2012年,受中国自然科学基金委员会委托,库克斯教授两次组织中美分析化学双边论坛,增强了双方学者的相互了解,提高了中国学者在国际分析化学界的参与度。  库克斯与清华大学和中国计量科学研究院有着十几年的深度合作。他与计量院的质谱团队合作期间,为研究方向提供建议、帮助设计研发平台、培养研究人员。该团队成长迅速,成为国内首个具有质谱仪器研发能力的研究团队,承担国家仪器研发重大项目,为质谱仪研发及产业化培养众多人才。  2003年,当中国学术和产业界就“十五”二期科技攻关计划是否应重启质谱仪器研发项目进行探讨时,库克斯教授提出,“中国应关注小型质谱技术发展”,并表示“将把支持中国发展小型质谱仪作为今后工作中重要的一部分”。时至今日,小型质谱在食品安全及未来生物医疗领域的重要地位已经凸显。在过去十几年里,库克斯教授积极与清华大学、中国计量科学研究院等研究团队合作,极大地推动了质谱小型化在中国的基础研究以及技术发展过程中的中美合作。  自库克斯教授44岁时第一次访问中国以来,时间已过去30多年,通过为中国培养人才和广泛建立并深度参与交流合作,他为质谱在中国的发展以及国际合作促进技术发展做出了有目共睹的巨大贡献。我还记得,2011年7月,库克斯在中国与多年合作过的同事一起,度过了他的70岁生日,生日会上回顾了他30年来和中国学者合作的历程,场面颇为感人。中国的同行都说,虽然岁月已留下深深的印记,但库克斯教授的微笑从来没变过。时至今日,他仍然活跃在技术研究、技术创新、国际合作的大舞台。[align=right]  (作者系清华大学精密仪器系主任)[/align][来源:仪器信息网译] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • 【求助】接触氧化生物膜如何培养!

    求教 我在作一个项目 用的是生活污水一体化设备 有两路进水 一路生活污水水量很小两三天进一次水 每次2、3个立方 另一路是工业废水 18立方一天 这样的进水生物膜可以培养出来么 如果将工业废水停掉 进行生物膜培养 要多久可以培养好 具体如何培养比较好请高人执教 非常感谢 给大家鞠个躬了先!

  • 【转帖】了解数显生化培养箱的维护和培养

    数显生化培养箱是生物、遗传工程、医学、卫生防疫、环境保护、农林畜牧等行业的科研机构、大专院校、生产单位或部门实验室的重要试验设备 数显生化培养箱维护和培养: 1、数显生化培养箱外壳应可靠接地。 2、培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。放置平稳,以防震动发生噪音。 3、为保证冷凝器有效地散热,冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。箱体侧面应有50mm间隙,箱体顶部至少应有300mm空间。 4、培养箱在搬运、维修、保养时,应避免碰撞,摇晃震动;最大倾斜度小于45度。 5、仪器突然不工作,请检查熔丝管(箱后)是否烧坏,检查供电情况。 6、数显生化培养箱制冷工作时,不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。

  • 培养基的性能测试

    1 外观控制制备好的培养基应有相应的颜色,一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。2 污染控制 从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验),确定无微生物生长方可使用。3 性能测试3.1 测试菌株选择测试菌株是具有其代表种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株,应来自国际/国家标准菌种保藏中心ATCC标准菌株,菌株的选择参考卫生行业标准WS/T232-2002《商业性微生物培养基质量检验规程》。3.2 定量测试方法改良Miles-Misra法测试菌株过夜培养物10倍递增稀释;测试平板和参照平板划分为4个区域并标记;从最高稀释度开始,分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域;将稀释液涂满整个1/4区域,37℃培养18小时;对易计数的区域计数,按公式计算生长率(生长率=待测培养基平板上得到的菌落总数/参考培养基平板上获得的菌落总数)。非选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.7,该类培养基应易于目标菌生长;选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.1。3.3 半定量测试方法 改进的划线法接种法平板分ABCD四区,共划16条线,平行线大概相隔0.5cm,每条有菌落生长的划线记作1分,每个仅一半的线有菌落生长记作0.5分,没有菌落生长或生长量少于划线的一半记作0分,分数加起来得到生长指数G。目标菌在培养基上应呈现典型的生长,而非目标菌的生长应部分或完全被抑制, 目标菌的生长指数G大于6时,培养基可接受。3.4 定性测试方法平板接种观察法用接种环取测试菌培养物,在测试培养基表面划平行直线。按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养, 目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。

  • 蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基Bacillus cereus Chromogenic Medium用途:用于蜡样芽孢杆菌的显色培养,蜡样芽孢杆菌显蓝绿色蜡样芽孢杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落比较大,苏云金芽孢杆菌显蓝绿色,李斯特氏菌显深蓝色,菌落比较小,其它菌显黄色或无色,革兰氏阴性菌被抑制。 成份 (g/L) 特殊营养物质41.9 显色剂 0.5 抑菌成份 0.6琼脂 15.0 pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 11.6g 加入200ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,备用。 贮存 制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 2、样品液在30±1℃增菌培养18-24小时; 3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上,30±1℃培养18~24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落比较大。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。 4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装SHBG09 7种x2套/盒*5盒)

  • 【原创大赛】检验检测行业人才培养模式

    [align=center]检验检测行业人才培养模式[/align][color=#333333]检测行业是社会发展催生的新兴服务业。随着社会发展进步,基于全社会对使用产品的质量、对生活健康水平、对生产生活的安全性、对社会环境保护等方面要求的不断提高,检验检测行业随着兴起,并呈现巨大商机。[/color][color=#333333][/color][color=#333333] [/color][color=#333333]目前我国的检验检测行业[/color][color=#333333]体量增长迅速、近5年,我国检验检测机构数、营业收入、就业人口、出具报告、仪器设备、实验室面积等综合指标持续提升,年均增幅近10%。但是我国检验检测行业“小、散、弱”的基本面貌没有改变,96.1%的机构为小微机构,年均营业收入中位值仅137万元,人均年产值仅21万元。而作为我们事业单位制检验检测机构,在我国检验检测行业所占比重已不足31%,民营检验检测机构比例增加到46%。结构较10年前发生根本性变化。[/color][color=#333333]所以在当年大环境下,企业对于检验检测人才呈现出几大趋势:[/color][color=#333333]1、[/color][color=#333333]企业对专业人才的需求度和迫切度整体上升;[/color][color=#333333]2、[/color][color=#333333]企业更加重视核心专业人才;[/color][color=#333333]这就需要我们居安思危,通过健全薪酬激励体系,建立现代企业制度,规范人力资源管理,加大人力资本投入,建立人才培训体系等方面培养加强自我内功修炼,建立自己的人才培养模式与人才队伍建设体系。[/color][color=#333333]首先,在培训方面不遗余力,从员工入职培训开始搭建完整的培训体系。除了对不同岗位基层的员工进行专业技能与通用技能培训外,针对新毕业员工了解单位及所在岗位、管理培训,针对初级管理、中层管理人员等,努力为不同特点员工的发展打造量身定制的培训项目。[/color][color=#333333]其次,“双通道”的管理模式和人才选拔、培养体系。通过建设管理、技术双通道的人才选拔、培养体系,打造“专业人才发展通道”和“复合型管理人才发展通道”前者为在专业技能能力水平、知识层级较高、业务能力较强、在学科发展、专业建设等层面有突出贡献的人设置的发展通道,后者为那些在管理岗位上思想素质水平较高、管理能力较强、沟通协作与团队精神较好的复合型管理人才设置的职业通道。[/color][color=#333333]再次,人员轮岗。人员轮岗制度能够有效开发员工潜能,扩大员工知识领域,拓展职业生涯空间,进行全面锻炼提升并做好公司人才培养、储备拟提拔对象。有利于复合型人才的培养。[/color][color=#333333]最后,人才的重要性主要体现在两个方面。一是检验检测认证行业是服务性行业,需要具备新型专业背景的人才去提升服务技能,最终带动整个行业服务质量增长。二是对于企业自身来讲,有了高级的专业人员,才可能涉猎到更多的新兴领域并进行拓展,新兴领域将是行业未来抢占的重点,谁能拥有专业人才,谁将能获得占领市场的先机,获得参与检验检测认证市场快速发展的机会。[/color][color=#333333]可以预见,未来第三方检测检测认证行业的竞争,将是人才的竞争。为此,第三方检验检测机构要做好充足的人才储备。一个合格的检测管理人才至少需要3-5年的时间培养,检验检测机构应该在现金流比较充沛的时候未雨绸缪、储备人才,应该从粗放型的管理转入精细化的管理。在消费品检测领域向制造业学习,推进工厂化管理模式,提倡“管理出利润”;在工业品检测领域中加强垂直的技术贯穿能力,倡导一站式解决方案,只有这样才能应对未来激烈的市场竞争、产品竞争以及人才竞争,最终赢得市场。[/color][color=#333333] [/color]

  • 【分享】厌氧培养方法介绍

    1.厌氧缸法。接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。3.厌氧手套箱(Anaerobie glovebox)是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。4.厌氧盒:原理同厌氧袋,有成品销售。5.生物耗氧法:在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同时产生二氧化碳,供细菌生长用。6.焦性末食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的白蜡封边,造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,简单。如有梭状芽孢杆菌。7.疱肉培养基:本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面封凡士林,造成无氧环境。

  • 培养基出现沉淀

    昨天准备了个培养基,等达到适意温度时,发现瓶子底部出现沉淀,这是什么原因呢??

  • 干粉培养基

    如何有效管理微生物实验室干粉培养基在微生物检验中,培养基的质量关乎微生物的检验结果。加强对培养基的质量管理,能够有效提升微生物检验结果的准确性和科学性,因此需要注重培养基的质量管理工作。?本文从培养基的采购验收、质量控制、培养基制备后的质量控制以及培养基的灭菌和储存等环节简要分析了培养基的质量控制工作。1、培养基供应商选择培养基应当从可靠的供应商处采购,必要时应当对供应商进行评估。评估应确定其生产工艺,运输条件是否符合规定,资质是否齐全,质量保证能力和生产能力是否符合需求。如果新增培养基供应商,应对该厂家所生产的不同批次的培养基理化及微生物指标进行检测,并进行审计评估,评估合格后才可以将该品牌纳入合格供应商名录。2、培养基初步验收在培养基到达实验室后,应安排专业的人员对培养基进行验收,首先查看培养基的名称是否正确、配方是否符合药典或国标等相应的法规文件的要求、是否临近有效期、生产批号是否清晰、能否提供商品质检报告、检查包装是否完整,规格、数量是否与采购申请一致。在接收完毕后安排管理人员进行入库保存,并尽快安排对培养基进行入厂检测。3、培养基理化及微生物检测培养基的理化指标主要包括pH值、澄明度以及凝胶强度(琼脂类),培养基的微生物指标一般包括:灵敏度、促生长能力、抑制能力以及指示特性,即培养基适用性检查。这些指标供应商在培养基出厂前就已经进行了检测,合格后放行。使用单位验收时仍需进行培养基适用性检查,并与厂家提供的质检报告进行对比,看与报告内容是否一致。使用单位也可采用有资质的第三方检测报告。4、干粉培养基储存对入库保存的培养基应张贴标签,以区分验收与未验收的培养基,避免混淆与差错。在此为大家提供一个简单的标签,仅供参考:?点击重新加载使用单位存储培养基时标签也可以做编号处理,例如购进100瓶TSB,产品号为11104,其编号为11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水号领用培养基,可减少对培养基的盘点,方便管理。培养基的储存条件一般为常温、干燥、密闭,当然不同供应商的存储条件稍有差别,按照标识执行即可。称量后应及时旋紧瓶盖,避免后期存储因空气湿度较大受潮或结块,如出现结块现象,该瓶培养基不可继续使用。培养基开瓶后在称量和存储的过程中会不可避免的吸收空气中的水分,而水分含量的增加,培养基的微生物负载可能亦随之增大,进而影响到干粉培养基的质量。所以干粉培养基在开瓶后,应定期进行复检,并对复检结果进行统计分析,确定开瓶有效期。如果实验室所在地区湿度较大(相对湿度高于75%),开瓶后的培养基应采取适宜的保护措施,如果数量较少,可放置于干燥器内,如果数量较多,可使用封口膜瓶口位置缠绕数匝。5、培养基配制--称量培养基的制备环节,应当严格按照培养基配方制备,在培养基的称量过程中,建议在干爽、无风的区域或者通风柜中进行,这样能够避免培养基吸潮使称量结果不准。应当选择灵敏度较高的称重天平,这样能够保证称量的准确性,同时称量过程中要选择专用的称量匙,避免其他杂质混入培养基中。操作人员应当对称量过程进行详细的记录,记录中应该体现培养基名称、批号、称量数量、具体配制方法、制备人姓名日期、复核人姓名日期等信息,方便后期的溯源调查。6、培养基配制--容器和水配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质残留。在大体积配制培养基时,企业也可根据自己的情况采用不锈钢容器,建议专锅专用,且容器应洁净。不建议使用陶瓷或搪瓷容器。培养基用水是培养基制备过程中非常重要的一个物质。不可以使用自来水,自来水中的杂质可能会对检验结果有一定的影响。许多法规在培养基配方中采用蒸馏水作为配制用水,实际上纯化水的洁净程度不差于蒸馏水,甚至更优,所以不必单独制备蒸馏水,直接使用纯化水即可,配制用纯化水应按药典的要求定期进行检测。在制备过程中,可先加入培养基,再将纯化水倒入容器内,同时需要将器具内壁上的培养基粉末一同带到容器中,然后根据说明书的要求进行操作。涉及到大体积配制后要分装的培养基(例如TSA、TSB、FTM等),分装前一定要将培养基加热至完全溶解,避免后续可能会出现的瓶间差异。7、培养基的灭菌培养基的灭菌过程是影响培养基质量的关键环节。大部分培养基需要高温高压湿热灭菌,但部分选择性培养基由于一些组分不可高温高压灭菌,所以会采用煮沸灭菌,因此灭菌前应阅读培养基使用说明。?点击重新加载培养基灭菌应采用验证过的灭菌程序,灭菌参数应通过无菌性试验和促生长试验的验证。此外,对高温高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证,以保证其在一定装载方式下的正常热分布。温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基过度加热,过度灭菌会影响绝大多数的细菌和真菌培养基的促生长质量。灭菌器中培养基的容积和装载方式也会影响加热的速度。因此应根据灭菌培养基的特性,进行全面的灭菌程序验证。煮沸灭菌的培养基建议现配现用,高温高压湿热灭菌的培养基可以大量配制,在适宜的条件下储存,固体培养基灭菌后只允许一次再融化。灭菌后培养基的储存效期应进行验证。制备好的培养基,使用前需进行pH的监测。对于固体培养基pH监测,可使用平头电极或固液两用电极。

  • 【原创】数显振荡培养箱

    数显振荡培养箱概述数显振荡培养箱型号分别:BS-1E BS-2F BS-4G振荡培养箱是一种具有加热和制冷双向调温系统,温度可控的培养箱和振荡器相结合的生化仪器,是植物、生物、微生物、遗传、病毒医学、环保、食品、石油、化工等科研、教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。一、数显振荡培养箱主要特点:1. 箱体的隔热材料采用聚胺酯现场发泡的泡沫塑料,对外来冷(热)源有较强的抗干扰能力。2. 工作腔内设有风道,温度分布均匀。 3. 内壁采用不锈钢制作,抗腐蚀性能良好。4. 加热系统在环境为-5℃时能升温至50℃。5. 制冷系统在环境温度为32℃时能降至5℃。6. 万能弹簧试瓶架特别适合作多种对比试验的生物样品的培养制备。7. 无级调速,操作安全。 8. 温控精确,LED数字显示。二、数显振荡培养箱技术指示:指标\型号BS-1EBS-2FBS-4G容 积140L280L420L温控范围5-50℃5-50℃5-50℃温控精度±1℃±1℃±1℃振荡速度起动-300r/min起动-300r/min起动-300r/min振 幅20mm(回旋)20mm(回旋)20mm(回旋)振荡组数124装 瓶 量试管:¢16×200100ml×15 200ml×9试管:¢16×200100ml×15×2 200ml×9×2试管:¢16×200100ml×15×4 200ml×9×4加热功率300W400W600W压缩机功率130W180W240W电 源交流220V50Hz交流220V50Hz交流220V50Hz外形尺寸610×610×1150(mm)1250×610×1460(mm)1440×710×1770(mm)三、数显振荡培养箱使用说明:1. 仪器应放置在平整的地面上,环境应清洁整齐,干燥通风。 2. 仪器使用前,各控制开关均应处于非工作状态,调速旋钮应置于最小位置。 3. 装培养试瓶,为了使仪器在振荡时平衡性能好,避免产生较大的振动,装瓶时应将所有试瓶位布满,各瓶的培养液应大致相等。若培养液不足数,可将试瓶对称放置。 4. 接通外电源,将电源开关置于“开'的位置,指示灯亮。 5. 选择培养温度:请参考使用说明书。 6. 开“振荡开关',指示灯亮,缓慢调节调速旋钮,升至所需转速。 在调速范围内中速使用,可延长仪器的使用寿命。 7. 每次停机前,各控制开关均应处于非工作状态,切断电源。 8. 注意事项: A:两组振荡器的培养箱,其振荡器分别由各自的“振荡开关'和“调速旋钮'操作控制。 B:不适用于含有易挥发性化学溶剂,低浓度爆炸气体和低着火点气体的物品以及有毒物品的培养。1、转速范围内中速使用,可延长仪器的使用寿命。2、仪器应放置在较牢固的工作台上,环境应清洁整齐,通风良好。3、在工作台上放置物品时,各试瓶之间应保持适量的间隔,以利于冷、热空气对流循

  • 【转帖】涂国士——对传统中药及成方的标准化做出重要贡献

    【转帖】涂国士——对传统中药及成方的标准化做出重要贡献

    涂国士——对传统中药及成方的标准化做出重要贡献[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/07/200707081323_57543_1634962_3.jpg[/img]涂国士,药物分析化学家。他提倡药品检验的“全面质量观点”,致力于适合我国国情的检定方法研究。采用现代科技研究传统中药及成方的标准化,为发扬祖国医药做出了贡献。主编中国药典1988年英文版,为对外交流开拓了道路。 涂国士,1919年6月21日出生于北京。祖籍四川江津。幼年丧父后流离在外,30年代初期,在延吉读书。“九一八”事变后,迁居青岛。1936年,在胶济铁路中学毕业后,无力升学。“七七”事变后,生活更无着落,辗转回川。1938年,考入重庆国立药学专科学校并取得“战区学生贷金”得以完成学业。毕业后有志于教学工作,曾留校任教。工作中深感缺乏实践经验,即去化工厂工作,1945年,考取首届英美奖学金赴英国诺丁汉大学药学系学习。他想到将来从事药物化学工作,应具有坚实的药学和化学基础,因此在药学系毕业后又入化学系化学专业学习。毕业后在著名化学家皇家学会会员斯波林教授指导下,从事甾体化学的合成研究。   中华人民共和国建立后,涂国士怀着爱国之心,决定立即回国参加建设,但屡遭英当局无理阻挠,于1950年底才回到祖国。   回国后,适逢卫生部组建药物食品检验所,应孟目的所长的邀请,于1951年初到该所工作,担任调查研究课课长。涂国土在条件十分困难的情况下积极培训新人,添置仪器设备,建立规章制度和工作方法等,使检验工作逐渐开展起来。1954年,根据业务发展和工作需要,该所进行改组,涂国士任卫生部药品检验所(1962年改名药品生物制品检定所)化学药物室主任,负责西药及其制剂和食品的化学检验,同时,还兼任卫生部药典委员会委员。面对繁重任务,他不断总结经验,把化学药物检验操作归纳为36项基本操作,并多次开办学习班培训人员,组织流水作业的单元操作组合,提高了检验效率。   涂国士还积极推广控制药品质量的新方法,不仅在所内组织大家学习,而且委托有关药学院开办学习班,向全国推广介绍。1980年以来,涂国士还培养了药物分析专业硕士研究生,为提高药检队伍的水平,作出了成绩。   涂国士在总结长期工作经验基础上,提出药品标准化研究和药品检验的“全面质量观点”,并在常用中药及成方研究中探索质量标准的新路,受到了普遍的重视。他热心对外学术交流,先后出国15次,在对外交流中为提高祖国医药科学的声誉和促进先进技术在我国的推广应用做出了贡献。   涂国士是一位德高望重、正直、勤劳的爱国科学家。为了从事研究,他献出了许多业余时间及节假日。他为人朴实,谦虚谨慎,讲求实效,不谋私利。他从不以长者自居,非常平易近人,遇到疑难问题向他请教,他总是诲人不倦,尽心竭力,既放手发挥下级人员的积极性,又勇于为下级承担责任。他勤俭节约,严守纪律,每次出国参加学术活动均将节约的外汇上交国家。   涂国士除承担繁重的药检工作外,还担负大量的社会工作,曾先后任中国药学会常务理事兼药物分析分科学会主任委员,《药学学报》副主编、编委,《药物分析杂志》主编,农业部全国农业分析标准化技术委员会副主任委员。1974年起,担任世界卫生组织药物标准专家委员会委员。

  • 微生物培养方式

    1.分批培养(batchculture)将微生物置于一定容积的培养基中,经培养,最后一次收获,谓分批培养。在分批培养中,培养基一次加入,不予补充,不再更换。由于营养消耗,代谢产物积累,对数生长期不能长期维持。2.连续培养(continuous culture)在培养器中不断补充新鲜营养物质,并不断排出部分培养物(包括菌体和代谢产物),以保持长时间生长状态的一种培养方式。主要有恒浊连续培养和恒化连续培养两类。恒浊连续培养通过不断调节流速,使培养液浊度保持恒定,因而可不断提供具有一定生理状态的细胞,并可得到以最高生长速率进行生长的培养物。恒化连续培养通过控制恒定的流速使营养物浓度基本恒定,从而使微生物保持恒定的生长速率。用不同浓度的限制性营养物进行恒化培养,可得到不同生长速率的培养物。3.半连续培养(semi-continuous culture)在发酵罐中的一部分发酵液保留下来作为菌种液,放出其余部分进入提练加工工序,在剩余的培养液中加满新的未接种的培养液,继续培养,如此反复,谓之半连续培养。4.补料分批培养(fed-batch culture)补料分批培养又称半分批培养,是指在分批培养过程中,间歇或连续地补加新鲜培养液,但不取出培养物。待培养到适当时期,将其从反应器中放出,从中提取目的生成物(菌体或代谢产物)。若放出大部分培养物后,继续进行补料培养,如此反复进行,则称为重复补料分批培养(repeated fed-batch culture)。与传统分批发酵相比,补料分批发酵的优点在于使发酵系统中的基质浓度维持在低水平,这有以下优点:①可除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,以减轻供氧矛盾;②避免有毒代谢物的抑菌作用;③大为减少了无菌操作要求十分严格的接种的次数。与连续发酵相比,补料分批培养不会产生菌种老化和变异等问题。故其应用范围十分广泛。5.同步培养 能使培养的微生物处于较一致的,生长发育在同一阶段上的培养方法叫同步培养法。利用同步培养法控制细胞的生长,使它们处于同一生长阶段,所有细胞都能同时分裂,这种生长方式叫同步生长(图3—4)。用同步培养法得到的培养物叫同步培养物(synchronous culture)。这样,群体和个体行为一致,即可用研究群体的方法来研究个体水平上的问题。由于同步群体的个体差异,同步生长往往最多维持2个~3个世代,然后又逐步变为随机生长。

  • 培养实验室一般要求~

    欢迎大家一起交流,这是我做实验室行业总结出来的一点东西,呵呵一、实验室 组织培养是在无菌条件下进行,需要一定的实验室条件,应具备: (一)化学试验室 用于存放各类化学药品,配制培养基等。需要的物品有: ⒈药品柜 存放化学药品。 ⒉玻璃器皿柜 存放各类玻璃器皿。 ⒊实验台 最好是采用具有抑菌能力的实芯理化板台面或环氧树脂等,这是分别用来安放天平和配制培养基。 ⒋通风橱 这是用于整体实验室通风和排风的,并且会产生异味的实验最好在通风橱内操作。⒌冰箱 存放配好的母液和一些需低温保存的药品及植物材料等。 6.其它 天平、水浴锅、酸度计、水池等。 (二)洗涤消毒室 用作器皿的洗刷、消毒、干燥等,配有高压灭菌锅、烘箱、铁架、水池等,也可与化学实验室合并。 (三)无菌操作室 用于植物材料的消毒、接种、转移、原生质体制备等。要求室内封闭,保持无菌。并具备以下物品: ⒈超净工作台 用于消毒、接种、转移培养材料。 ⒉紫外灯 用于空气消毒。 ⒊解剖镜 用于胚胎培养、茎尖培养时剥取外植体。 ⒋低速离心机 用于原生质体制备。 (四)培养室 是供培养物生长的场所,主要有培养架、控温、控光设备等。培养架可分4-5层,上面安装30-40W日光灯照明,每天照明10-16小时左右,用自动定时器控制。温度最好保持在15-25℃左右。此外还可根据需要安置液体培养所需的摇床、转床等。附上培养常用药品 培养所需药品主要用于培养基的配制,也有部分用于消毒,主要有以下几类: (一)消毒药品   主要有次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、溴水、硝酸银等。(二)无机盐类    包括大量元素和微量元素两类,主要的盐类有KNO3、MgSO47H2O、NH4NO3、KH2PO4、CaCl22H2O、Fe2(SO4)3、Na2HPO4、CuSO4、NaNO3、Na2SO4、ZnSO4、MnSO44H2O、MnCl22H20、KI、H3BO3等,无机盐是供外植体吸收的基本营养成分,各有不同作用,如N、P影响蛋白质的合成,Ca、K、S、Mg影响酶活性等。 (三)有机化合物  主要有蔗糖、维生素类、氨基酸等。其中蔗糖是不可缺少的碳源,也是渗透压调节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分,也是有机氮源。 (四)植物生长调节剂  用于组织培养的主要有生长素、细胞分裂素及赤霉素三大类: ⒈生长素类 主要有吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-D和吲哚丁酸(IBA)。2,4-D有利愈伤组织生长,NAA、IAA、IBA有利于器官分化。 ⒉细胞分裂素类 主要有激动素(KT)、6-苄基腺嘌呤(BA)、玉米素(ZT)等。其作用是促进细胞分裂与分化,其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形成。 ⒊赤霉素 以GA3运用最广泛,有促进不定芽和幼株伸长的作用。 (五)有机附加物  包括人工合成和天然的有机物,常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂,是外植体的支持体,常用浓度为0.5-1%。 (六)水  培养基用水原则上使用蒸馏水,去离子水等,尤其在对化学成分要求较精确的试验中。但在组培苗的批量生产中,可选用自来水配制,以降低成本。

  • 生化培养箱和一般培养箱有什么不同

    问:生化培养箱和一般培养箱有什么不同?答:1.最简单的说法就是:生化培养箱可以代替普通的恒温培养箱!它可以制冷,也可以制热!而一般的恒温培养箱只可以制热。2.一般的食品企业用不上生化的培养箱对不对? 3.一般做生化的时候就要用到的!具体看你们要检测什么了?如果就做细菌和大肠菌群,一般恒温培养箱就可以了!4.关键要看环境温度是多少,如果培养温度高于环境温度,一般培养箱就可以了,如果培养温度低于环境温度,必须要用生化培养箱,因为它有制冷功能,比如一般霉菌酵母的培养温度是27度左右,我们就可以用生化培养箱。5.我们这一般夏天有30多度,如果你处的地方长年低于25度……那么一般食品企业用普通的培养箱比生化培养箱用起来更不容易坏。6.我用的生化培养箱制冷功能坏了,做霉菌酵母的培养温度是27度左右,温度精度要求不是很高,培养温度低于环境温度我用空调来保证温度。 7.做霉菌酵母培养要求用恒温恒湿培养箱。8.生化培养箱的“恒湿”是如何实现的。我们的生化培养箱没有“恒湿”这功能的。有可以“恒湿”的生化培养箱吗?9.恒温也只是一定范围内的恒温,就是在设定的温度范围处波动(如设定为25度,它会在24.5-25.5之间波动,当然其波动范围也是通过调节设定的,可以设为1度、2度或0.5度等)。以前我用的老式恒温培养箱是用夹层中通入自来水或恒温循环水实现的 。10.恒湿是可以有的,不过那就是不是生化箱了,而是人工气候箱。具体的原理就是:1。湿度高时,需要除湿,是通过压缩机来作用的。2。干燥时,需要加湿,是通过外接的家用加湿机,就可以实现了。11.做霉菌培养时,由于压缩机的作用,培养箱内会比较干燥,这样不利于霉菌的培养。可以在培养箱内放置一只装满水的烧杯就可以了!12.正在郁闷这个问题呢。我们做霉菌和酵母菌数检查也是用的普通的霉菌培养箱,没有湿度控制的,不知道是否符合法规的要求?箱体内部湿度只有20%,但是实际用平皿培养的时候,三天内应该说里面都有冷凝水的,是否说明里面的适度依然保持在90%以上,满足检查需要呢? 13.还有控温精度不一样,生化培养箱精度要求很高,大约正负0.1度,恒温培养箱正负1度!14.霉菌培养时,培养皿内冷凝水比较多,应该不会很干燥的吧。15.学习了,一直在用,但是没想到还有这么多学问的,以后要多多观察了。还以为生化培养箱是要做生化试验的呢,呵呵16.霉菌和菌落总数放在一个培养箱培养行的通吗?我们霉菌培养放在霉菌培养箱里的。

  • 【新闻】“贡献智慧,不辱使命”——胡锦涛同志讲话在两院院士中引起强烈反响

    新华网北京6月23日电(记者吴晶晶、孙闻)“胡锦涛同志在讲话中回顾了我国改革开放三十年来科技事业发展的生动实践,作为1978年全国科学大会的亲历者,我感到非常亲切。”2007年度国家最高科技奖获得者闵恩泽院士在听完胡锦涛同志报告后深有感触地说。 胡锦涛同志23日在中国科学院第十四次院士大会和中国工程院第九次院士大会上的讲话在两院院士中引起了强烈反响。院士们纷纷表示,总书记的讲话强调了院士在培养科技人才中所肩负的使命,并对院士及广大科技人员在防灾、救灾、减灾以及灾后重建中所应发挥的作用和需要开展的工作提出了具体要求,这都极大地增强了我们的责任感和使命感。我们一定要认真学习和深刻理解总书记讲话的精神,不负众望,不辱使命,埋头苦干,做出新的业绩和贡献。 “胡锦涛总书记把1978年以来我国的科技活动定位为‘我国科技事业发展的伟大实践’,这是对全国科技工作者30年来艰辛探索的最大肯定,是对科技工作者的最大鼓舞。”中国工程院院士张伯礼说,作为在科技战线奋斗了一生的院士,我一定要按照总书记的要求,甘为人梯,善于发现人才,努力培养人才,以团队带头人的姿态投入到自主创新伟大工程中去。 中国科学院院士白春礼说:“总书记的讲话丰富了我们对科技发展规律和科技工作战略地位的认识,他强调必须坚持人才资源是第一资源。作为一名院士,我要把发现人才、培养人才、举荐人才作为自己工作的重中之重,甘当人梯、提携后学;作为一名人才工作管理者,要在中科院党组的领导下,继续做好百人计划等一系列人才培养计划,开创中科院人才工作的新局面。” 中国工程院院士潘云鹤说,胡锦涛总书记讲话中明确提出“必须把提高自主创新能力摆在全部科技工作的首位”,这对于广大工程科技工作者来说有着非同一般的指导意义。总书记提出“走中国特色自主创新道路,必须培养造就宏大的创新型人才队伍”,这是时代赋予我们的义不容辞的责任。作为院士,有义务有责任团结身边的科研团队,并从中发现人才,培养人才,为我国的科技队伍不断输送高素质后备人才。 “目前资源、能源和环境问题日益成为制约我国经济高速发展的瓶颈。要破解这些瓶颈,唯有依靠自主创新。可以说自主创新是工程技术领域的科技工作者需要在今后几十年、上百年,甚至更长时间内统领各自科学探索的指导思想。”屠海令院士说。 胡锦涛总书记讲话中指出,中国科学院学部、中国工程院是国家在科学技术和工程方面的最高咨询机构,是国家的科学技术思想库。这一论述得到广大院士的热烈响应。中国工程院院士傅志寰表示,中国工程院对国家许多重大决策提出过咨询建议,受到了国家决策机构的高度重视,许多得到了肯定和采纳。今后院士们要进一步加强跨学科、跨专业合作,对涉及工程和经济领域的国家重大决策提出更有针对性的综合性咨询建议,同时要加强储备性课题的研究,力争多出具有前瞻性、战略性的咨询成果。 今年年初,我国南方遭受冰雪灾害,“512”汶川大地震更是给我国人民生命财产和经济社会发展造成了重大损失。在抗灾减灾的过程中,院士群体发挥了重要作用,胡锦涛同志在报告中专门提出防灾减灾的问题。院士们认为,胡锦涛同志的讲话中包含了很多科学研究问题,应该尽早列为学部咨询研究的重要课题,发挥中科院院士群体国家科学思想库的作用,提出前瞻性、科学性、系统性的意见。[URL=http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20080623/1323211/]【新闻】“两院”院士大会今日召开[/URL]

  • 微生物培养的仪器问题

    微生物培养的仪器问题对于微生物的研究,拥有大量的实验材料是十分必要的,这就需要进行微生物的培养。而且,对于某些微生物病原体的检测,也是需要进行微生物的培养。所以微生物培养用的培养基的制作也就成为了最基本的实验技术。 然而现今培养基已经可以工业化生产,技术也比较成熟,也就对培养基不是那么重视了。常识性的,培养基分为天然的(Defined Media)和合成的(Complex Media) 。天然培养基是提供接近于微生物生长的自然环境的营养物质,然而为此付出的代价是我们并不完全清楚其中的物质的组成或其含量,这种培养基可以用于实验用基本培养基和生产,但在作某些实验时得到的数据会不稳定。合成的培养基是用多种高纯化学试剂配制成的,各种成分和含量都是已知的。虽然制作成本高,也很烦琐,但成分精确,重复性强,用于对于营养、代谢、生理生化特性的研究等要求较高的工作。然而可以在这种微生物培养基上生长的微生物十分有限,原应是许多微生物的生长代谢我们并不完全了解,无法配出微生物满意的营养基质。现在的微生物培养技术已经相当成熟了,然而其中总有令人不满的地方。比如,无论何时空气中总有微生物,无论是制作培养基过程中还是将微生物接种到培养基上时总会和空气接触,很容易想到不久后长出的菌落到底是谁的,样品的?还是空气的?这些也许是无法避免的,但确实会带来很多麻烦。整个过程充满着失败的可能性,没有先进的仪器设备就无法降低这种可能性,对于研究这种时时处处在身边的小东西我们总显得有点力不从心。用铁丝接种环划线就很容易弄坏培养基,更别说分离出单菌落了。这需要经验和技术,对于一个研究微生物的人来说本不该去关心的经验和技术。前人也许是这样的,但我们未必也需要这样。对于无法用肉眼观察的东西,研究和培养是很困难的,尤其是没有先进的仪器设备的时候,那种痛苦是可想而知的。我们现在用的固体培养基大都是用琼脂。在琼脂发现以前,想要做细菌的纯培养是非常困难的,那时候只有液体培养基,根本无法进行纯培养。后来用凝胶培养基,但很多细菌都无法在基质上正常生长,直到琼脂被用来做固体培养基的基质,才解决了这个难题。应为琼脂是多聚糖的硫酸盐,其中主要是D-半乳糖,一般微生物很难分解利用它。这在微生物培养上是一次很大的革新。由于材料容易获得,而且本身的特性又很好,所以至今仍在使用。然而,微生物的培养依旧受到很大限制。我们对微生物的了解还不够多,许多微生物的培养只能用天然培养基,这在要求可重复的实验中会带来很大的麻烦;另外,条件的限制导致很多实验都无法达到无菌环境,实验结果有多少是可靠的,很难说明。微生物的培养只是一种手段,但却是一种很重要的手段。虽然只要能说明研究成果就可以了,但在实际操作中也确实有着非常繁琐,难以操作的地方存在,只要做过微生物培养的实验便可以知道,想要做出漂亮的结果是非常困难的,其中需要改进的地方有很多,比如有没有办法就算再不是无菌的环境下也能尽量减少空气中细菌的干扰,可不可以用更柔软的材料做接种环来划线,有没有其他的方法来给涂布棒灭菌。不然实验失败很难找出其中的原因。虽然实验失败的可能性很多,但我们至少应该减少它发生的可能性。微生物培养基是微生物实验必不可少的组成,它以及与它有关的组成构成了微生物培养的装置,这些仪器和操作中的不确定因素太多,这样做出的实验结果是没有说服力的。这些仪器和操作有待于改进。(因为我的基础太差,所以无法指出其中需要改进的地方到底应该改成怎样,但已经明显体会到了这些仪器以及操作的不足之处。)

  • 用固体培养基对微生物进行分离纯培养

    单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体,称为菌落(colony)。当固体培养基表面众多菌落连成一片时,便成为菌苔(lawn)。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征,可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落,采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板,即培养平板(culture plate)的简称,它是指固体培养基倒入无菌平皿,冷却凝固后,盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基,每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落,形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行,100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。   1. 稀释倒平板法(pour plate method)  先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......),然后分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。   2. 涂布平板法(spread plate method)  由于将含菌材料先加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿,制成无菌平板,冷却凝固后,将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面,经培养后挑取单个菌落。  3. 平板划线法(streak plate method)  用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。   4. 稀释摇管法(dilution shake culture method)  用固体培养基分离严格厌氧菌有它特殊的地方。如果该微生物暴露于空气中不立即死亡,可以采用通常的方法制备平板,然后置放在封闭的容器中培养,容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物,纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行,它是稀释倒平板法的一种变通形式* 。先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右,将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释,试管迅速摇动均匀,冷凝后,在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物,将培养基和空气隔开。培养后,菌落形成在琼脂柱的中间。进行单菌落的挑取和移植,需先用一只灭菌针将液体石蜡--石蜡盖取出,再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间,吹入无菌无氧气体,将琼脂柱吸出,置放在培养皿中,用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。

  • 【求助】如何选择微生物培养基

    微生物培养基在资料上有很多类:http://wenku.baidu.com/view/8b6d9262caaedd3383c4d3ee.html 同一类微生物又有不同培养基供选择:http://www.hopebiol.com/medium.asp。那用选择培养在培养分离各种细菌的时候怎么选用培养基配方呢?例如培养高盐浓度下球衣细菌的选择培养基?

  • GMP检查知识交流1:霉菌培养温度28℃——缺陷

    土豆声明:本次知识交流活动欢迎大家针对列举事实积极讨论、分享各自对GMP条款的认识理解、禁止人身攻击!!同时本豆对列举的事例的真实性并不保证(可能是听说的也可能是臆想的哦) 某药厂实验室内发现一台霉菌培养箱显示温度为28℃,检查员认为霉菌培养适宜温度应为25℃,此温度过高,拟判为缺陷项。 请问:此案例是否可以判为缺陷项?是主要缺陷还是一般缺陷或者是重大缺陷?违反了GMP哪一条款?您是怎么看的?或者说:药厂要怎么解释才能说服检查员? 欢迎大家回帖讨论,言之有物的土豆不吝重奖的哦。

  • 培养基结核杆菌的固体培养基

    培养结核杆菌的培养基,从性状上分主要有固体培养基、液体培养基、半流体培养基、固液双相培养基等类型,这些培养基各有特点。  1.1 固体培养基 最常用的是罗氏(Lownstein-Jenson,L-J)培养基,也是最具代表性的一种,其他的还有小川辰次(Tatsujiogawa)鸡蛋培养基和Middle brook 7H10、7H11等琼脂培养基等。在固体培养基中,由于可以直接观察菌落的形态并可做鉴别用,因此常用于临床标本的分离培养、鉴别、保存菌种及对抗结核药物的敏感性测定等方面,缺点是结核菌生长缓慢。  1.2 液体培养基 常用的有苏通(Sauton)培养基、Middle brook 7H9等液体培养基。结核杆菌在液体培养基中能够更广泛的接触营养成分,因此在液体中生长相对较快,主要在液体表面生长,搅动时下沉至管底,可获得大量的结核杆菌。主要缺点是:在对临床标本的收集、采样、运输方面有不利的一面;不能根据肉眼观察菌落形态;培养基污染机会多,影响结核杆菌的生长,污染时不易与结核杆菌鉴别,需涂片染色镜检判断结核杆菌是否生长。  1.3 半流体培养基 改良苏通半流体琼脂培养基是一种人工综合培养基,基质透明,呈半流体状态,生长的结核杆菌形成白色颗粒状菌落悬浮于培养基中段,便于观察。  1.4 固液双向培养基 Septi-Check AFB双相培养基是国外应用较早的一种培养基,采用BD专利式封闭式固液双相一体化培养基设计。液相为Middle brook 7H9分枝杆菌专用增菌培养基,可迅速繁殖分枝杆菌,固相为3种固体培养基平面:Middle brook 7H11和改良的L-J培养基用于及时将增菌肉汤内分枝杆菌进行分离纯化以获得单个菌落,巧克力琼脂用于早期发现污染菌,避免时间浪费。由于有液相作为基础,因此结核杆菌生长较快,也是一种非常有效的培养基。国内有用平菇制备的平菇双相培养基是利用平菇浸出液为基础,加小牛血清、琼脂等成分而配制的一种培养基,根据琼脂的量不同制成液相、固相培养基。在国内应用较少,主要特点是成本低,制备简单,适合于基层使用,有一定的研究价值。

  • 霉菌的培养

    之前也在培养箱做过测试,各倒一组空白套不套保鲜袋培养,发现结果均是不套保鲜袋的长了霉菌,培养箱的话试过了紫外线消毒、75%酒精擦拭、次氯酸钠擦拭、乙酸熏蒸、季铵盐擦拭都没有作用,现在只能套保鲜袋这个方法。这个方法是我之前的一位审厂的老师说这个方法是可以防止培养基里面的霉菌孢子污染培养箱可以使用的,现在就想问一下这样子会不会对实验结果有什么影响?

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