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碱性磷酸酶

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碱性磷酸酶相关的资讯

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  • Megazyme生物酶促销
    产品货号:CFGK-IC-6-1 产品名称:6种阳离子混标,Li/Na/K/Ca/Mg/NH4,溶于1%稀硝酸 规格:125ml 品牌:NSI 报价:1860.00元/瓶 促销价:1300.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-BGLAN 产品名称:&beta -半乳糖苷酶 酶号:3.2.1.23 品牌:Megazyme 规格:8000Units(~40.9 U/mg) 报价:2840.00元/瓶 促销价:1700.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-BSPRPD 产品名称:蛋白酶 酶号:3.4.21.14 品牌:Megazyme 规格:1g (10 U/mg of protein) 报价:3160.00元/瓶 促销价:1900.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-AMGDF 产品名称:淀粉转葡萄糖苷酶 酶号:3.2.1.3 品牌:Megazyme 规格:40 mL(3260 Units/mL) 报价:2400.00元/瓶 促销价:1440.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-ACPEC 产品名称:酸性磷酸酶 酶号:3.1.3.2 品牌:Megazyme 规格:400 Units(~17 U/mg) 报价:2420.00元/瓶 促销价:1450.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-ALPEC 产品名称:碱性磷酸酶 酶号:3.1.3.1 品牌:Megazyme 规格:400 Units(~10 U/mg) 报价:2625.00元/瓶 促销价:1580.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-ISAMY 产品名称:异淀粉酶 酶号:3.2.1.68 品牌:Megazyme 规格:1000 Units(~280 U/mg) 报价:3060.00元/瓶 促销价:1830.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-BLAAM 产品名称:&alpha -淀粉酶 酶号:EC:3.2.1.1 品牌:Megazyme 规格:40mL - 3000 Units/mL 报价:2360.00元/瓶 促销价:1420.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-GLUKEC 产品名称:葡糖酸激酶,己糖激酶 酶号:EC:2.7.1.12 品牌:Megazyme 规格:1500 Units 报价:2740.00元/瓶 促销价:1640.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-GPDHEC 产品名称:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 酶号:EC:1.1.1.49 品牌:Megazyme 规格:1500 Units 报价:5000.00元/瓶 促销价:3000.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-PGIEC 产品名称:磷酸葡萄糖异构酶 酶号:EC:5.3.1.9 品牌:Megazyme 规格:10000 Units 报价:2260.00元/瓶 促销价:1350.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 产品货号:CFHN-E-PGDHEC 产品名称:6-磷酸葡萄糖脱氢酶 酶号:EC:1.1.1.44 品牌:Megazyme 规格:150 Units 报价:3160.00元/瓶 促销价:1900.00元/瓶 促销日期截止2013.12.31日 关键词:Magazyme 生物酶 促销 化学 上海安谱科学仪器有限公司 地址:上海市斜土路2897弄50号海文商务楼5层 [200030] 电话:86-21-54890099 传真:86-21-54248311 网址:www.anpel.com.cn 技术支持:techservice@anpel.com.cn
  • 成果:肿瘤光声成像研究取得新进展
    p style=" text-align: justify "   近日,国际学术期刊Nano Letters 在线发表了中国科学技术大学化学与材料科学学院教授梁高林课题组的研究成果,文章标题为Alkaline Phosphatase-Triggered Self-Assembly of Near-Infrared Nanoparticles for the Enhanced Photoacoustic Imaging of Tumors。该文章报道了一种碱性磷酸酶控制的近红外纳米粒子的自组装用于光声成像信号放大的策略,并在动物肿瘤模型上显示了光声成像信号明显放大的效果 /p p style=" text-align: justify " (Nano Lett. 2018, DOI: 10.1021/acs.nanolett.8b03482)。 /p p style=" text-align: justify " 原文链接: a href=" https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.8b03482" target=" _blank" https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.8b03482 /a /p p style=" text-align: justify "   光声技术对浅表肿瘤的成像具有很高的空间分辨率。然而,利用肿瘤高表达的碱性磷酸酶来激活探针用于肿瘤的光声成像并没有文献报道。梁高林课题组合理设计了一种化学结构式为1P的近红外探针,同时提出了一种碱性磷酸酶控制的、肿瘤细胞内自组装近红外纳米粒子用于肿瘤的增强光声成像策略(见下图)。研究发现1P在碱性磷酸酶的作用下生成去磷酸化的产物1,1被肿瘤细胞摄取后自组装形成纳米粒子从而增强肿瘤的光声成像信号。他们与苏州大学合作,发现纳米粒子的形成在体外会使光声成像信号增大6.4倍。体内肿瘤光声成像结果表明,与碱性磷酸酶抑制剂处理的对照组相比,实验组的肿瘤光声成像信号增强了2.3倍。需要指出的是,如果把1P中的Phe-Phe-Tyr(H2PO3)-OH片段换成其他酶切序列,采用这个策略可以发展出更多的“智能”光声成像探针用于精准诊断他们相对应的癌症。 /p p style=" text-align: justify "   文章的共同第一作者为中国科大化学与材料科学学院博士生吴澄帆和苏州大学纳米学院硕士生张瑞,梁高林为最后通讯作者。 /p p style=" text-align: justify "   该研究得到国家重点研发计划、国家杰出青年科学基金以及基金委创新研究群体项目的资助。 /p p style=" text-align: center " img title=" 640.webp.jpg" alt=" 640.webp.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/c88d2cec-2912-4e58-a05f-35df3c0f531f.jpg" / /p p style=" text-align: center " 中国科大等在肿瘤光声成像研究中取得新进展 /p
  • “渝”见中检葆泰|相约中国奶业展览会:助力行业创新发展
    “渝”见中检葆泰|相约中国奶业展览会:助力行业创新发展第十四届中国奶业大会、2023中国奶业D20峰会暨2023中国奶业展览会7月19—21日在重庆市隆重召开。作为奶业界一年一度最大的盛会,本届会展以“启航现代化建设新征程 点亮高质量发展新赛道”为主题,旨在充分展示奶业发展成就,深度挖掘奶业发展优势,创新谋划奶业发展战略,推进中国奶业现代化水平的提升和高质量发展的进程,推动中国奶业加速动力变革、质量变革和效率变革,实现高质量发展和全面振兴。中检葆泰受邀出席此次盛会。第十四届中国奶业大会暨2023中国奶业20强峰会中检葆泰是一家集食品安全快速检测试剂和仪器的研发、生产、销售及服务为一体的高新技术企业。公司自成立以来,一直致力于食品安全先进检测技术的研发和推广,公司拥有中检葆泰维生素公司拥有中检葆泰维生素、胆碱肉碱、乳果糖、非法添加物检测试剂盒等多个项目的主研发产品,同时与国际知名品牌美国Charm、Evergreen和agdia等有战略合作。在展会中产品也受到了众多同行和客户的认可。展会上,葆泰Charm EPIC商业无菌检测系统、葆泰Charm真菌毒素5分钟定量检测系统、葆泰Charm生物荧光农残检测系统和葆泰Charm碱性磷酸酶检测系统等吸引了众多行业观摩者的关注。 Charm EPIC-Plus 商业无菌检测系统葆泰Charm碱性磷酸酶检测系统中检葆泰维生素检测试剂盒葆泰Charm EZ抗生素检测系统葆泰Charm ROSA真菌毒素检测系统公司产品包括胶体金检测条、酶联免疫试剂盒、快速检测仪等多种形式,涉及兽药残留、真菌毒素、农药残留、食品成分、非法添加物、转基因、植物病毒病害、微生物检测等多个领域,公司拥有经验丰富的研发团队、服务团队和销售团队,可为政府监管部门、食品企业提供快速、准确、可靠的检测方案和服务。
  • 卫生部发布13项推荐性卫生行业标准
    关于发布《血红蛋白测定参考方法》等13项推荐性卫生行业标准的通告(卫通〔2011〕16号)   现发布《血红蛋白测定参考方法》等13项推荐性卫生行业标准,其编号和名称如下:   WS/T 341-2011 血红蛋白测定参考方法   WS/T 342-2011 红细胞比容测定参考方法   WS/T 343-2011 红细胞沉降率测定参考方法   WS/T 344-2011 出血时间测定要求   WS/T 345-2011 血清尿素测定参考方法   WS/T 346-2011 网织红细胞计数的参考方法   WS/T 347-2011 血细胞分析的校准指南   WS/T 348-2011 尿液标本的收集及处理指南   WS/T 349-2011 α-淀粉酶催化活性浓度测定参考方法   WS/T 350-2011 血清葡萄糖测定参考方法   WS/T 351-2011 碱性磷酸酶(ALP)催化活性浓度测定参考方法   WS/T 352-2011 丙氨酸氨基转移酶催化活性浓度测定(无磷酸吡哆醛)参考方法   WS/T 353-2011 天门冬氨酸氨基转移酶催化活性浓度测定(无磷酸吡哆醛)参考方法   以上标准自2012年4月1日起施行。   特此通告。 二〇一一年九月三十日
  • 上海市分析测试协会立项《三氟化硼-11B同位素丰度比的测定 电感耦合等离子体质谱法》等4项团体标准
    各会员单位及有关单位:根据《中华人民共和国标准化法》、《团体标准管理规定》和《上海市分析测试协会团体标准管理办法》规定,在相关部门指导下,结合行业发展需要,上海市分析测试协会对《三氟化硼-11B同位素丰度比的测定 电感耦合等离子体质谱法》、《胎牛血清中碱性磷酸酶的测定 荧光分光光度法》、《核酸提取用磁珠检测通则》、《甲基化分析中的DNA样品制备方法 沉淀法》4项团体标准进行了立项审查,经相关专家审议,上述所申报的4项团体标准符合立项条件,批准立项,现予以公告(详见附件)。请各制标单位严格按照相关要求抓紧组织实施,严把标准质量关,切实提高标准制定的质量和水平,增强标准的适用性和有效性。同时,欢迎有关企业和机构加入团体标准的起草编制工作。联系人:钱相如电话:15751007487邮箱:1318155546@qq.com上海市分析测试协会2024年5月8日上海市分析测试协会关于《三氟化硼-11B同位素丰度比的测定 电感耦合等离子体质谱法》等 4 项团体标准立项的公告.pdf
  • 亚微米红外拉曼同步测量技术助力生物材料对骨组织矿化的研究取得重要进展!
    由于红外光谱技术对于分子结构的敏感性,能够在无任何标记的情况下实现对生物样品成分的鉴定和分布解析,对于不便于荧光标记的生物组分鉴别十分有利,使得其在生命科学领域的应用越来越广泛。 近期Maryam Rahmati等人使用亚微米红外拉曼同步测量技术在Materials Today上报道骨生物材料对骨骼再生的研究中成功揭示了红外显微镜在组织样品分析中的潜力。众所周知,生物骨骼有机材料能够模仿天然组织功能,是作为受损骨骼良好的替代物。Maryam等通过设计两个富含脯氨酸的无序肽(IDP2和IDP6)并将它们添加到SmartBone(SBN)生物杂交替代物中,成功合成了具备改善由于植入物导致的组织矿化问题的新型材料。通过对家猪开颅损伤后8周和16周愈合情况的研究,作者团队发现这种材料能够很好的帮助颅骨愈合,如下图所示。研究富含脯氨酸的无序肽的成骨和生物矿化作用。(a)四组监测骨愈合情况的代表图包括假手术、SmartBone(SBN)、SBN + P2和sbn+P6(n = 8)。(b,c) mCT分析骨容积比的代表图像和统计数据(Obj. V/TV)、骨表面/体积比(Obj.S/Obj.v)和骨表面密度(Obj.S/TV),比例尺: 4 mm,(N = 8)。(d–g)研究钙化样品的矿化/非矿化的代表图像和统计数据。(h)碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法研究脱钙骨中成骨细胞和破骨细胞的活性。 本文中作者认为通过亚微米红外拉曼同步测量技术检测,能够很好的评估IDP的结构变化,因为该技术能够很好的对组织进行高精度成像,并且不受组织粗糙度的影响。通过1037 cm-1的红外图分析,能够很好区别不同区域的磷酸酯和磷酸铵的分布。并通过数据对比实验组与对照组的分布来看,能够看到实验组的骨骼具有良好的矿化。对比1660 cm-1 和1546 cm-1的红外吸收峰可以证明肽发生了构象转变,而且这种转变是与磷酸盐的分布呈现明显相关的。说明了该材料具备良好的医疗价值,同时也说明了亚微米红外拉曼同步测量技术在评估植入生物材料和构象的影响中具备高的潜力。用亚微米红外拉曼同步测量技术研究IDP对的成骨和生物矿化效应的影响及其构象变化。红外40X光学图像和其上标记点的红外光谱(下)。两个单波长图像(1037/1660 cm-1)的比例图,突出显示了在光谱中观察到的富含矿物质和胺的区域。 美国Photothermal Spectroscopy Corp公司经多年潜心攻关,研发出的非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统—mIRage凭借其有的亚微米红外拉曼同步测量技术能够直接对样品表面进行红外光谱测试,并且不受到水的干扰,该设备成功将红外光谱的空间分辨率提升至亚微米(~500 nm);得益于其非接触式测量特性,该系统无需制备薄片,直接测试较厚样品,大地简化了制样过程、提高测试效率;同时可实现无接触式地快速简易测量,有效避免了传统ATR模式下的散射像差和交叉污染。且该设备在反射模式下所得谱图与透射模式下FTIR完全一致,还可以选配透射模式,十分适用于液体样品和一些特殊混合样品,大的扩展了光热红外在生命科学领域的应用范围(如图1所示)。亚微米红外拉曼同步测量系统,工作原理及钙化乳腺组织的红外成像图 这项先进技术让mIRage有别于传统的红外测试设备,能够对生命科学领域的常用样本,诸如细胞爬片,病理组织切片,单细胞细菌等有良好的兼容性,并让活细胞观测成为可能。除此之外,mIRage还可与拉曼光谱进行联用,实现同时同地相同分辨率的IR和Raman测试,且无荧光风险,能够帮助研究者更快速全面的确定所分析生物样品的化学组成信息。 亚微米红外拉曼同步测量技术在生命科学领域应用的显著优势:☛ 亚微米的空间分辨率;☛ 可直接获取液体中活细胞的红外成像;☛ 灵敏度高,可直接观测单细胞 (如细菌、哺乳动物细胞等);☛ 无米氏散射干扰,即使在细胞边缘也不受影响;☛ 高的光谱分辨率;☛ 无需直接接触即可测量软组织的红外光谱;☛ 可实现红外和拉曼同步测量;☛ 可实现超过10 μm厚的样品测试,直接置于载玻片上观察分析;☛ 可配置化的红外光源;
  • 免疫组化(IHC)的 "疑难杂症" 再也不愁
    免疫组化简介免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应 和组织化学的呈色反应,对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。免疫组化基本原理免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到组织病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。 免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗体可以是用免疫动物制备的多克隆抗体或特异性单克隆抗体,最好是特异性强的高效价的单克隆抗体。直接法是将酶直接标记在第一抗体上,间接法是将酶标记在第二抗体上,检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用免疫酶组化间接染色法。那么,显色常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP),常用的显色底物为DAB(3,3’-二氨基联苯胺),偶尔用AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。碱性磷酸酶(AP或AKP)也是目前免疫诊断试剂最常用的标记酶之一,稳定性好、灵敏度高。表1. 免疫组化(IHC)显色系统的选择免疫组化注意事项1. 组织取材为避免蛋白丢失及组织受损引起的非特异试剂吸附,取材须快速(组织块也不宜太大)且要尽量避免人为损伤。2. 固定固定要及时、彻底,但也不能固定过久。实验证明甲醛固定时间越久的组织越容易出现自发荧光及非特异性染色。一般以 12~36 小时最好。3. 石蜡片与冰冻片的选择石蜡片制作对设备要求较冰冻片低,组织结构更好,保存条件简单时间也久。但对部分蛋白有较强烈的破坏作用,对蛋白保护较冰冻片差。冰冻片对蛋白的保护较石蜡片好,制作起来也较快。4. 灭活过氧化物酶(HRP)系统的一定要做内源性过氧化物酶的灭活,而对于碱性磷酸酶(AP)系统和免疫荧光这个步骤不需要做。5. 抗原修复不同的样本、不同的蛋白其最佳的抗原修复方式会有所区别,热修复(酸性修复液(柠檬酸盐修复液)、碱性修复液(EDTA 修复液)及酶修复(蛋白酶)都可做尝试。对于陈旧的样本要增加修复强度,比如延长修复时间。6. 封闭常用的封闭液有 5% BSA 和血清。BSA 是通用型的封闭液。血清应选择与二抗同源的血清。7. 抗体孵育一抗一定要与实验及样本匹配的,孵育条件以 4 ℃ 过夜最佳。二抗应匹配一抗,37 ℃ 孵育半小时即可。8. 显色DAB 显色建议在镜下控制反应时间,在阳性及背景之间选择平衡点。免疫组化常见问题分析1.脱片产生的原因有哪些 1、烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度; 2、多聚赖氨酸玻片质量的问题。 3、组织切的不好,切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀,或者切片者手法不好等。 4、修复的问题:抗原修复的时候高压时间过长了,或者放进100度的修复液时手法不好,咚的一声就丢进去了,这样超容易脱片。此外,用EDTA修复比柠檬酸容易脱片,但是你要用到EDTA的时候也没办法,只有从另外的问题上着手。 5、操作的时候甩的太猛了,有脱片嫌疑的片子最好不甩或轻轻甩,用卫生纸从边缘上慢慢吸水。 6.组织的问题,我用的组织癌症的很多,越是癌症组织有坏死之类越容易脱。2.边缘效应1、组织边缘与玻片粘贴不牢,边缘组织松脱漂浮在液体中,每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致. 解决办法:制备优质的胶片(APES或多聚赖氨酸),切出尽量薄的组织切片,不厚于4微米,组织的前期处理应规范,尽量避免选用坏死较多的组织;2、切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。解决办法:试剂要充分覆盖组织,应超出组织边缘2mm。用组化笔画圈时,为了避免油剂的影响,画圈应距组织边缘3-4mm。3.切片染色后背景太深,如何区分特异性sing与非特异性着色全片着色是指整个切片全都染上了颜色,着色的强度可深可浅,总之,分不清那些组织是阳性那些组织是阴性。出现这种现象的原因有:(1)抗体浓度过高:一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是,每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试,使每一抗体个体化,找到适合自己实验室的理想工作浓度,既使是即用型的抗体也应如此,不能只简单的按说明书进行染色。(2)抗体孵育时间过长或温度较高:解决办法是,严格执行操作规程,最好随身佩带报时表或报时钟,及时提醒,避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的时间不是传统的1小时,而是30分钟,因此,要根据染色结果进行调整。(3)DAB变质和显色时间太长:DAB最好现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长,因为在没有酶的情况下,过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控,达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时,这样做似乎不现实,但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。(4)组织变干:修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细,采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈,可以有效的避免液体流失,也能提高操作速度。(5)切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于24小时):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行免疫组化染色,如果将装有切片和修复液的容器放在4º C冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太长。(6)一抗变质、质量差的多克隆抗体:注意抗体的有效期,过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。4.免疫组化染色呈阴性结果1、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误;2、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是最佳的时间和次数。若不行,还可高压修复;3、组织切片本身这种抗原含量低;4、血清封闭时间过长;5、DAB孵育时间过短;6、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应;7、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。5.背景1、考虑一抗浓度高;2、然后调整DAB孵育时间;3、也要考虑血清封闭时间是否过短;4、适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间等。
  • 合成生物学领域的重大进步:人造细胞可在内部产生多种蛋白质
    据发表在最新一期《自然化学》杂志上的论文,德国达姆施塔特工业大学和瑞士弗里堡大学领导的国际研究团队在使用合成材料合成人造细胞方面实现突破。这些细胞通过一种被称为生物催化聚合诱导自组装(BioPISA)的过程制造,代表了合成生物学领域的重大进步。论文插图图片来源:《自然化学》(2023)人造细胞是模仿活细胞特性的微观结构。它们是促进化学反应和分子系统工程的重要微反应器,是合成生物学途径的宿主,也是研究生命起源的重要工具。该团队开发了一种酶促合成的聚合物微胶囊,并使用它们来包裹细菌细胞的可溶性内容物(即胞质溶胶),从而创造出能够在内部产生一系列蛋白质的人造细胞,包括荧光蛋白、制造细胞骨架样结构的肌动蛋白,以及人类骨骼中发现的生物矿化过程的碱性磷酸酶。蛋白质的表达不仅模仿了活细胞的基本特性,而且展示了这些人造细胞在从药物输送到组织工程等多种应用中的潜力。新研究弥补了合成生物学中的一个重要空白,即能够将合成材料与酶过程结合起来,创造出复杂的人造细胞,就像真正的细胞一样,这为创造结构和功能上与生物细胞相似的模拟物开辟了新途径。研究人员指出,酶促自由基聚合是制造这些人造细胞的关键。酶会将聚合过程中自组装的聚合物合成纳米和微米尺寸的聚合物胶囊。这是一种非常简单但有效的人造细胞制备方法。在未来的工作中,研究团队的目标是利用人造细胞中表达的蛋白质来催化进一步的聚合,从而模仿自然细胞的生长和复制。
  • DNA制成迄今最小天线可监测蛋白质运动
    纳米天线工作示意图 图片来源:物理学家组织网  据物理学家组织网2022年1月10日报道,加拿大蒙特利尔大学科学家在最新一期《自然方法》杂志上撰文称,他们利用DNA,制造出了一种5纳米长的天线,这种天线可用于监测蛋白质结构随时间如何变化(当蛋白质发挥生物功能时会产生独特的信号),有望在生物医药等多领域“大显身手”。  该研究资深作者、加拿大生物工程和生物纳米技术研究主席亚历克西斯瓦雷-贝利斯勒说:“近年来,化学家们意识到,DNA可以用于构建各种纳米结构和纳米机器。DNA可以像乐高一样组装,受此启发,我们制造出了这种基于DNA的荧光纳米天线,它可以帮助我们描述蛋白质的功能。”  他解释道:“就像双向无线电既能接收也能发射无线电波一样,我们制造出的荧光纳米天线可以接收一种颜色(波长)的光,并根据它感应到的蛋白质运动,以另一种颜色将光发射回来,通过检测反射光,我们可以了解蛋白质的运动情况。”  研究第一作者、蒙特利尔大学化学博士生斯科特哈伦解释道,使用DNA设计纳米天线的主要优势之一是,DNA相对简单且可编程,可用其制造出不同长度的天线,而且,研究人员很容易让荧光分子与DNA相连,然后将这种荧光纳米天线与生物纳米机器(如酶)相连。  研究人员表示,这种天线有望在生物化学和纳米技术等诸多领域“大显身手”。哈伦说:“我们能在它的帮助下,首次实时检测到碱性磷酸酶的功能,这种酶与癌症和肠道炎症等许多疾病有关。此外,还可以帮助化学家识别有前途的新药,并指导纳米工程师开发更好的纳米机器。”  瓦雷-贝利斯勒强调:“这种纳米天线很容易使用,世界各地的许多实验室可以很方便地利用它们来研究蛋白质,识别新药或开发新的纳米技术。我们计划成立一家初创公司,将这种纳米天线商业化,并将其提供给研究人员和制药行业。”
  • 新品上市,DLM-10-10/氘代二甲亚砜/2206-27-1!
    新品上市,DLM-10-10/氘代二甲亚砜/2206-27-1!关于产品 DLM-10-10/氘代二甲亚砜/2206-27-1 的具体详情:CAS号:2206-27-1编号:DLM-10-10包装:10g纯度/规格:D, 99.9%品牌:美国CILDLM-10-10/氘代二甲亚砜/2206-27-1 公司为答谢新老客户对我们长期以来的支持,现有大量新品上市,低价优惠促销活动,欢迎新老客户前来咨询选购!企业其他相关产品推荐:bs-9642R,17号染色体开放阅读框57抗体|C17orf57抗体价格姜酮对照品/标准品CAS:2212-67-1,禾草知标准品/对照品价格CAS:53411-70-4,D-葡萄糖-6-磷酸三钠盐,6-磷酸葡萄糖三钠盐,6-磷酸葡萄糖酸三钠盐,G-6-P-Na32,4,5-三氯联苯标准品|对照品,cas:15862-07-42,6-(盐酸尼卡地平杂质)对照品/标准品次野鸢尾黄素标准品,cas:41743-73-1对照品CAS:9028-48-2,异柠檬酸脱氢酶,ICDH,Isocitrate dehydrogenasebs-2713R,肾损伤分子1抗体(甲型肝炎细胞受体1)|HAVCR1抗体价格CAS:10031-30-8,过磷酸钙价格重组人 HSPD1/HSP60 蛋白(His & GST 标签)/11322-H20E小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA检测试剂盒说明书铑标准溶液,cas:7440-16-6乌药醚内脂标准品,cas:13476-25-0对照品猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒,96T/48T兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA检测试剂盒说明书CAS:61438-64-0,氯碘柳胺钠现货供应CAS:51503-28-7,固红片剂,固红-萘磺酸TR片剂,快红片剂,快红TR片剂,Fast red TR Tablets常山碱乙标准品,cas:24159-07-7对照品bs-15575R,kappa轻链可变区抗体|IGKV A18抗体价格人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA检测试剂盒说明书1,2-|CAS号306-37-6|1,2-Dimethylhydrazine dihydrochlorideCAS:41532-84-7,1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚H-苯并[e]吲哚价格bs-13014R,DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗体|DNA polymerase delta p50抗体价格丙硫氧嘧啶对照品/标准品CAS:327-97-9,绿原酸价格CAS:18686-82-3,2-巯基-1,3,4-噻二唑价格沙苑子苷标准品,cas:116183-66-5对照品bs-2679R,细胞粘附分子CD112抗体|CD112抗体价格bs-2978R,硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ/巯基抗氧化蛋白抗体|Peroxiredoxin 2抗体价格朝藿定A标准品,cas:110623-72-8对照品bs-11975R,周期蛋白结合蛋白抗体|CACYBP抗体价格CAS:1072-98-6,2-氨基-5-氯吡啶价格212304/琼脂,A级培养基厂家
  • 人类全基因组同步分析方法诞生
    德国马普分子遗传学研究所和柏林夏洛蒂医科大学医学遗传学研究所的科学家们成功发明了一种新分析方法&mdash &mdash &ldquo 外显子组序列世系过滤法&rdquo (descent filtering of exome sequence),该方法可以同时分析人类基因组的所有基因。   该方法首次应用于柏林一个家庭的三个孩子身上,他们患有罕见的智力缺陷遗传病&mdash &mdash 马布里综合症(Mabry Syndrome)。研究利用高通量测序方法从整个基因组找出了22000个基因,解码它们的序列并检查突变位点。最终,运用新的生物信息学分析方法,科学家将突变的数量限制到2个,而其中一个突变(PIGV突变)是最终导致马布里综合症发生的原因。马普分子遗传学研究所的Michal Ruth Schweiger形容这项工作就像&ldquo 大海捞针&rdquo 。PIGV基因发生了突变,导致某些蛋白质功能丧失,比如,使得碱性磷酸酶不能够与细胞膜表面结合。   相关论文发表在8月29日出版的《自然&mdash 遗传学》杂志上。这种新的基因组分析方法使得对极其罕见疾病中基因突变的鉴定成为可能,并向个性化的分子药物研发迈出了重要的一步。   相关方法:外显子组序列世系过滤法   完成人:斯蒂芬· 蒙德洛斯课题组 彼得· 罗宾逊课题组   实验室:德国马普分子遗传学研究所 柏林夏瑞蒂医科大学医学遗传学研究所 柏林-勃兰登堡再生疗法中心 荷兰圣&bull 瑞德邦德大学医学中心人类遗传学系 柏林夏瑞蒂医科大学医学免疫学研究所 日本大阪大学微生物疾病研究所免疫控制系 加拿大多伦多大学实验室医学与病理学系 澳大利亚悉尼大学分子与临床遗传学系
  • 上新福利!爱必信新品活性&含量检测试剂盒
    好消息!好消息! 爱必信活性&含量检测试剂盒上新啦! 本次上新包含200余个酶活性及小分子含量检测试剂盒,覆盖常见酶类如蛋白酶、激酶、连接酶、代谢酶类、凋亡相关酶类等100余种,以及金属离子、糖类、脂类、酸类、酮类、氨类、维生素类等100余种常见生物相关小分子,总有一款适合您! 我们的试剂盒支持多种样本类型,含血清, 血浆, 尿液, 唾液, 乳汁, 细胞培养上清, 组织提取物, 细胞裂解液, 其他生物液体样本等,或者食品, 果汁, 饮料, 其他农产品,动物饲料, 酶制剂, 面包改良剂混合物, 其他材料等。 本次上新福利,限时支持8折优惠,截止2021年5月31日,机会不容错过。产品信息:更多请点击》》货号英文名称中文名称abs580001Acid Phosphatase Microplate Assay Kit酸性磷酸酶 (ACP)abs580002Alanine Transaminase Microplate Assay Kit谷丙转氨酶 (ALT)abs580003Alkaline Phosphatase Microplate Assay Kit碱性磷酸酶 (ALP)abs580004Aspartate Transaminase Microplate Assay Kit谷草转氨酶 (AST)abs580005Glutamate Microplate Assay Kit谷氨酸abs580006Glutathione Microplate Assay Kit谷胱甘肽abs580007Lactate Dehydrogenase Microplate Assay Kit乳酸脱氢酶abs580008NAD/NADH Microplate Assay Kit辅酶ⅠNAD(H)abs580009NADP/NADPH Microplate Assay Kit辅酶ⅡNADP(H)abs580010Superoxide Dismutase Microplate Assay Kit超氧化物歧化酶 (SOD)abs580011Malondialdehyde Microplate Assay Kit丙二醛 (MDA)abs580012Hydrogen Peroxide Microplate Assay Kit过氧化氢 (H2O2)abs580013Polyphenol Oxidase Microplate Assay Kit多酚氧化酶abs580014Nitrate Reductase Microplate Assay Kit硝酸还原酶abs580015Trehalase Microplate Assay Kit海藻糖酶abs580016Pyruvate Microplate Assay Kit丙酮酸abs580017NADPase Microplate Assay KitNADP磷酸酶abs580018Phenylalanine ammonia-lyase Microplate Assay Kit苯丙氨酸解氨酶abs580019Na+/K+ ATPase Microplate Assay KitNa+K+-ATP酶abs580020Ca2+/Mg2+ ATPase Microplate Assay KitCa2+Mg2+-ATP酶abs580021Glutamine Synthetase Microplate Assay Kit谷氨酰胺合成酶 (GS)abs580022Starch Microplate Assay Kit淀粉abs580023Alpha-Amylase Microplate Assay Kitα-淀粉酶abs580024Beta-Amylase Microplate Assay Kitβ-淀粉酶abs580025Glucose Microplate Assay Kit葡萄糖abs580026Acid Invertase Microplate Assay Kit酸性转化酶abs580027Neutral Invertase Microplate Assay Kit中性转化酶abs580028Beta-1,3-Glucanase Microplate Assay Kitβ-1,3葡聚糖酶abs580029Trehalose Microplate Assay Kit海藻糖abs580030NADPH-Cytochrome c Reductase Microplate Assay KitNADPH-细胞色素C还原酶 Absin特色产品线(全部现货):WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)... 爱必信(上海)生物科技有限公司联系邮箱:info@absin.cn公众平台:爱必信生物
  • 从2D到3D---在线水质分析仪器对水质指标的多维度监测
    p    span style=" color: rgb(84, 141, 212) " 生物指标在线水质分析仪器的出现,改变了传统在线水质分析仪器只能对水的物理和化学两种指标进行实时监测的情况,使得更全面的水质安全快速综合评价和水处理工艺过程的物理、化学、生物指标三维控制逐渐成为现实。 /span     /p p    strong 01 /strong /p p strong   有关名词 /strong /p p   在线水质分析仪器是一类专门用于水质分析的自动化分析仪表,仪器可在无需人工介入的情况下实现从水样采集到水质指标数据实时输出的连续运行。在线水质分析仪器具有实时、原位、自动分析的特点,在水污染实时报警、水质安全快速评估及预警特别是水处理工艺过程控制方面都有着重要的应用价值。 /p p   水质指标是表征水的各种不同物理、化学、生物特性以及放射性的参数,具体是指水中除水分子之外的其他物质(杂质)的浓度或者由杂质所引起的水的物理、化学、生物特性以及放射性的变化结果。以饮用水为例,世界各国,包括世界卫生组织(WHO)的生活饮用水标准,其检测指标都包含了这四类指标的内容,希望通过对水的物理、化学和生物及放射性指标的全面获取和分析,对水质进行全面评估,达到保证饮用水安全的目的。 /p p   在实际应用中,由于固定水源的水放射性指标一般情况下变化不大,除了天然矿泉水和生活饮用水、海水,以及核电厂用水及排水外,在总体水质评估以及水处理工艺过程控制方面,被广泛关注和研究更多的物理、化学和生物三类水质指标及其分析技术。以美国清洁水法(Clean Water Act)为例,其第101部分第1条(SECTION 101.(a)就明确表示: The objective of this Act is to restore and maintain the chemical,physical, and biological integrity of The Nation’s water(中文:本法规的目的是恢复和保持国家水体的化学、物理和生物完整性) 还有,中国的GB/T 33087-2016《仪器分析用高纯水规格及试验方法》中,对高纯水的要求才只有区区6项指标,也是涵盖了物理(电阻率)、化学(氯离子、钠离子、硅酸根、总有机碳或COD)以及生物指标(细菌总数)。 /p p   水质的生物指标是指水中的生物,主要是微生物、藻类以及原生动物及其组成成分(如酶、叶绿素、内毒素、抗性基因等)等存在的数量、活性、以及微生物群落的情况。广义的生物指标还包括生物毒性指标,具体指以生物作为检测手段,通过试验生物面对特定水样时某些特性的变化情况来评价水质。 /p p    strong 02 /strong /p p strong   物理、化学指标监测,在线水质分析仪器的“2D时代” /strong /p p   在线水质分析仪器技术发展的初期,在线水质分析仪器可以测量的水质指标主要只是一些相对简单的物理指标和化学成分指标,如水温、电导率、pH、ORP、溶解氧、浊度、悬浮物浓度等。虽然,随着分析化学、材料科学、电子科学以及计算机技术和通讯技术的发展,在线水质分析仪器技术也得到了快速的发展,可以在线监测的水质指标不断增多,出现了COD、SDI(污染指数)、SiO2、总磷(TP)、总氮(TN)等一大批结构复杂的在线水质分析仪器。但是,受制于生物技术的发展水平,生物指标的数据还只能通过实验室分析方法取得,存在很大的时间滞后性。由于缺失了生物指标的实时变化数据,不能从水的物理、化学、生物学指标这三个维度来全面了解水质数据的实时变化,在实现对水质变化的预测预警或者对水处理工艺过程进行优化和自动控制还是受到了许多的制约。有人把在线水质分析仪器只能测量水的物理和化学指标的这个阶段称为在线水质分析技术的“2D时代”。 /p p   在这个时期,为应对生物指标不能直接实时在线监测的局限性,水质科学家和水处理工艺专家们提出了许多间接测量的方法,具体主要有两类:一类是采用水质替代指标,水质替代指标是指一类特定的水质参数,可以综合反映水体的某一类别的水污染情况或水处理过程中某些不能实现在线监测而且实验室分析也非常繁琐水质指标的变化。浊度是其中最具有代表的一个水质替代参数,浊度本来是一个湖沼学的概念,原本是指天然水体中的各种浮游生物和悬浮物所造成的浑浊程度,采用肉眼观察或者光学测量方式来进行测量。由于浊度可以反映水中泥沙、粘土以及藻类、微生物等有机物质的含量,迅速成为了水质净化处理最重要的关键性工艺参数,同时由于浊度还能反映人的感官对水质最直接的评价,全球各国包括世界卫生组织的饮用水标准都把浊度作为了一个必测的指标,美国饮用水水质标准中,还把浊度和异养菌总数、大肠杆菌、军团菌、病毒等微生物指标一并归属于微生物指标系列中,理由是:浊度对消毒有影响、为细菌生长提供场所。在饮用水标准和水净化工艺过程中,浊度成为了“两虫”(隐孢子虫和贾第鞭毛虫)、耐热大肠杆菌和病毒等致病微生物的替代指标,一方面是由于引起浊度的颗粒物在一定程度能表征水中微生物数量的多少。另外,由于浊度还能影响水的消毒效果:在其他水质条件相同的情况下,浊度越低,消毒效果越好。更为重要的是,由于微生物(尤其是“两虫”)检测十分复杂,误差大、时效性差,难以及时准确地表征净水工艺对微生物的去除效果。以浊度作为微生物替代指标,具有检测方法简单、快速、准确等优点,可方便监测水质净化工艺对微生物的去除效果、对工艺运行状况进行评估并对工艺运行参数进行及时优化和调整。 /p p    span style=" font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai " PS:在线浊度分析仪的测量原理是利用光的散射原理,当光束接触到水中的悬浮物颗粒表面时,将会散射和吸收通过水样的光线,散射光与入射光成90度直角时,散射光强度与浊度的大小成线性关系,通过检测器测量散射光强度,同标准比较,就能获得水样的浊度值。现在的在线浊度分析仪,由于其结构简单、响应速度快、可靠性高,已经成为了饮用水、工业过程用水等水质净化工艺过程控制最重要的监测设备之一,目前市场上已经有了数十种不同结构、不同量程、不同测试精度、不同安装方式的在线浊度分析仪器产品,可以满足从洁净度极高的膜过滤水到高污染、高悬浮物水样浊度的实时监测。(目前市场上主流的在线悬浮物分析仪也普遍采用基于浊度的散射光测量原理,其方法是:利用水中悬浮物含量和散射光强度变化的相关性,通过取一定体积水样,经实验室过滤、烘干后称重的方法获得的悬浮物浓度对仪器进行比对校正,可以获得相对准确的悬浮物监测数据。由于悬浮物浓度是指一定体积的水溶液中所含悬浮物的量,单位是mg/L 需要注意的是,浊度单位NTU(散射光浊度单位)和作为悬浮物浓度单位的mg/L是两个不同的概念,前者是光学单位,后者是质量浓度单位,两者之间不存在数值上的相应或等同关系。悬浮物浓度是污水生物处理法的重要工艺参数,在线悬浮物分析仪在污水处理、工业水处理过程控制方面都有着非常广泛的应用) /span /p p   第二类方法是测量由生物特别是微生物作用引起的水的物理或者化学指标的改变,以此来推断生物指标的变化,从而对水处理工艺进行控制。以污水处理为例,目前全世界污水处理的主流工艺大都是采用生物处理,众所周知,污水生物处理作为一个生物反应过程,其核心是水中的微生物活性。准确了解污水中的微生物活性是非常重要的,但是在以前通过在线水质分析仪器实时检测微生物活性几乎是不可能完成的任务。水处理专家们围绕污水的生物处理工艺开发了以溶解氧(DO)、氧化还原电位(ORP)、好氧率(OUR)、污泥体积指数(SVI)、MLSS(混合液悬浮固体(活性污泥)浓度)、生物需氧量(BOD)等等一大批和污水中微生物活动相关的物理、化学指标,或者环境条件参数 当然,还有针对厌氧工艺的挥发性脂肪酸(VFA)、碱度等物理、化学指标,这些指标都成为了非常重要、在污水生物处理工艺过程控制中起到重要作用的工艺参数,针对这些指标的在线水质分析仪器也都在实际污水处理工艺中得到了广泛应用。尽管这样,由于不能直接获得微生物活性的数据,造成了整个污水处理过程还是处于黑箱运行状态,在实际运行中常常还需要依靠运行人员的经验来应对异常水质情况的发生。 /p p   饮用水中的消毒剂残留量,是另外一个有价值的实例。饮用水中加入消毒剂的目的是为了杀灭水中的致病性微生物和原虫,同时,为了保证在饮用水输配过程中持续保持消毒能力,需要保证水中有一定的消毒剂残留量。目前全球最广泛应用的饮用水消毒剂是氯制剂(包括氯气、次氯酸钠等),其残余量简称余氯浓度。按照世界卫生组织(WHO)在“饮用水水质准则”(第四版)中的说法:“监测余氯可快速指示原来由直接测量微生物参数所反映的问题。。。。当发现输配水系统中某处很难保持余氯,或者余氯逐渐消失,可能指示水或管道已经因细菌生长而对氧化剂的需求增加。”另外,还建议:“大肠菌群可以用作评价输配系统清洁度、完整性和生物膜存在与否,然而检测太慢且不太可靠,不如直接检测消毒剂残留量。”目前,全球饮用水行业中采用氯消毒的水厂都把余氯浓度作为控制饮用水微生物安全的一个最重要指标,在中国的“生活饮用水卫生标准”中,也规定了自来水出厂时余氯浓度需不低于0.3mg/L 管网末梢的自来水中的余氯浓度也不能低于0.05mg/L。尽管如此,在实际情况中,由于水中除细菌外,还有其他会消耗余氯的物质,以及大量耐氯微生物的存在,饮用水中还是会出现虽然余氯浓度合格,但是微生物指标超标的情况,给饮用水安全带来风险。同时,由于不能及时得到水中微生物污染的直接信息,在水质有可能出现风险时,为了充分保证水质安全,有时还会采用过量投加消毒剂的做法,既浪费消毒剂,又增加了消毒副产物生成的风险。 /p p    strong 03 /strong /p p strong   在线监测生物指标,在线水质分析仪器迎来3D时代 /strong /p p   随着生物科学技术的快速发展,加上水行业对水中以致病细菌、病毒及抗性基因等为代表的生物污染物的日益重视,新兴的生物科学技术和传统在线水质分析仪器技术在水质分析领域得以结合,在线水质分析仪器技术取得了突破,对生物指标进行实时在线监测得以实现,通过在线分析技术实时从物理、化学、生物3个维度检测水质指标,全面描述水质状况,对水质安全进行快速综合评估,也使得水处理工艺过程多维度自动控制成为可能,在线水质分析仪器技术开始步入了“3D时代”。 /p p   生物技术的采用可以直接测量待测水样中的生物组成成分和数量,如藻类浓度或者微生物含量等,也可以通过测量水中微生物的代谢产物等来获得微生物活性的信息。到目前为止,前一种方式中比较重要的新产品有藻类在线分析仪、在线流式细胞仪等 后一种方式中有在线大肠杆菌分析仪、碱性磷酸酶(ALP)法细菌总数分析仪、三磷酸腺苷(ATP)在线分析仪等。 /p p   藻类在线分析仪是利用以叶绿素为代表的光合色素,在激发光下会发出荧光,荧光的强度和藻类中叶绿素的含量相关,进而和水中藻类总量相关 而且同一门类的藻类中的光合色素对特定波长的激发光具有相近的相应荧光光谱,因为这种特征色素的存在,不同门类藻类的荧光光谱之间具有较显著的差异,根据藻类各自的特征光谱及其强度,可以对藻类进行分类及对不同门类藻的浓度进行定量检测。在线流式细胞仪(FCM)是将实验室流式细胞仪应用于水质在线分析的一种技术,仪器通过检测多种散射光和荧光信号,实现在细胞分子水平上对待测对象(细胞、RNA\DNA、蛋白质等)的物理和生物学特征的快速检测,在先进算法和运算能力的支持下,对这些复杂和数量众多的信号加以定量处理 流式细胞仪测量总细胞数(TCC),已经被瑞士列入饮用水标准分析方法。目前流式细胞术在线细菌分析仪,可以快速测量水中细菌总数、藻类等指标,并能通过不同的荧光染色材料对活细菌和死细菌进行区分,获得大量有价值的水中微生物信息。 /p p   目前,采用水下3D显微成像镜头,在人工智能、图像识别技术的支持下,实时连续获得水体中的藻类数量、分类情况等信息 或者对污水生物处理过程中的原虫以及微生物种群、活动进行连续监测,帮助运行人员实时控制和优化污水处理工艺也开始得到应用。 /p p   通过测量水中微生物代谢产物的方式来及时获得微生物活性的信息,也是目前发展很快的在线分析仪器技术。新陈代谢是活生物体最基本的标志,它反映了细胞从环境中获取能量的能力,生物体新陈代谢都会通过酶来进行。某些生物体或生物群落会产生特异性的酶,测量这种特异性酶进行测量,就可以得到目标生物体代谢活性的信息,并计算出活的目标生物体的浓度。由于实验室微生物分析方法需要人工培养,耗时长,在涉及水处理工艺过程控制,以及水质超标报警、水质安全预警的需求时,在线水质分析仪器快速、自动的优势就得到了充分的体现。以大肠杆菌分析为例,目前有两种方式的在线大肠杆菌分析仪,一种是酶底物法,酶底物法基于标准的实验室方法,其原理是利用水中大肠杆菌经过培养在代谢过程中产生的β-葡糖醛酸酶,分解培养基中的特定底物,产生荧光,荧光强度与水中大肠杆菌的含量有数学相关性,通过测量荧光强度就能够计算出大肠杆菌浓度。由于酶底物法方法仍然需要培养,测量时间会受待测水样大肠杆菌浓度的影响,通常需要从4-18小时,目前这种方法的在线分析仪器还只能用于水质自动分析,不能满足过程控制的需求 另一种是酶活力直接测量法,通过建立酶活力的标准曲线,直接测量水中β-葡糖醛酸酶的活力,酶活力的大小与大肠杆菌的含量高度相关,进而得到水中大肠杆菌的浓度 由于酶活力直接测量法不需要对水样进行培养,可以在15分钟内完成一次测量。 /p p   碱性磷酸酶(ALP)法细菌总数分析仪是利用细菌碱性磷酸酶活力与细菌总数的相关性,通过直接测量待测水样中的碱性磷酸酶活力,获得水中细菌总数的相对数据,并通过和实验室传统培养方法的测量结果进行比对校准,进而实现针对特定水样的细菌总数的在线实时监测,这种原理的在线水质分析仪器,其测量周期也只需要15分钟,可以满足实时监测和水处理工艺过程自动控制的需求。 /p p   三磷酸腺苷(ATP)在线分析仪是测量三磷酸腺苷 (ATP)这种存在于所有活细胞内的能量物质,研究表明,水中ATP含量与活细胞数量呈正相关关系,通过测定 ATP含量就能间接反映水中的活性生物量。其测量方法是:基于生物发光技术,细胞在裂解后释放出ATP,在荧光素酶的作用下,试剂中的荧光素与ATP发生反应,最终释放出固定波长的荧光,荧光强度与ATP浓度呈一定比例关系,利用荧光检测计检测得到荧光信号,和已知的ATP校准曲线对比,就可得到ATP浓度,进而得到水中活性生物量的数据。这种方法试剂中的荧光素酶,需要在低温下保存,否则酶活力会受到影响,进而影响测量结果的准确性,要求在线分析仪器内置制冷设备,仪器结构稍显复杂。 /p p   在线水质分析仪器的“3D时代”,通过生物指标的在线监测,解决了以往只能通过物理、化学指标间接反应水中微生物活动的局限性,为更全面的水质安全评估和水处理过程真正受控提供了更多有价值的数据 随着更多生物指标实现在线监测,和在线监测的物理、化学指标协同作用,水处理过程的微生物污染控制和生物法水处理工艺都将不再是黑箱控制,水处理的效率和安全性将会得到进一步的提高。 /p p    strong 番外: /strong /p p   关于在线生物毒性仪,前面提到过,广义的生物指标还包括水的生物毒性,具体是以某种生物作为实验手段,测试其对特定水体的反应来衡量水的综合毒性。由于水中的有毒物质种类繁多,数量巨大,几乎不可能通过物理或者化学手段分析穷尽这些物质 而且,即使知道了这些物质分别在水中的含量和毒性,也会由于这些物质在水中还存在着诸如协同、拮抗、相加、独立等多种不同的相互作用方式,对水的毒性产生影响,导致无法通过物理、化学的方法来确定最终水的毒性。这时就需要采用生物体来直接评价水的综合毒性。 /p p   被用作毒性试验的生物主要有:发光细菌、鱼、大型蚤、藻类、硝化细菌等,微生物燃料电池(MFC)在毒性测试的应用也有报道。目前,采用上述这些生物的在线毒性分析仪器都有了成熟的产品和市场应用。 /p p   其中,发光细菌法测量生物毒性分析是一种十分成熟的方法,在国际标准化组织(ISO)和中国都有实验室测量的标准方法,标准代号和名称分别是:ISO11348-3:2007 《Water quality — Determination of the inhibitory effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test) — Part 3: Method using freeze-dried bacteria》 以及GB/T15441-1995 《水质急性毒性的测试 发光细菌法》,具体方法是 利用某些自体发光的细菌,如明亮发光杆菌、青海弧菌、费氏弧菌等,在遇到毒性物质时,细菌会死亡造成发光强度减弱,其相对发光度与水样毒性组分浓度呈显著负相关(P≤0.05),因此可以通过以一定量的发光细菌作为测试试剂,测量其在特定水体的相对发光度,以此表征水样的毒性水平。现有的发光细菌法在线生物毒性分析仪,就是把上述实验室分析方法及步骤通过自动控制完成从水样采集、输送、试剂添加到结果计算的全过程自动分析,从而实现对待测水样综合生物毒性的实时在线监测。目前主要有两种进样方式的发光细菌法在线生物毒性分析仪,一种是采用实验室分析仪常用的批次进样方式,一次进样,完成一个分析流程后再进下一个水样,由于这种仪器分析的是非连续的水样,有可能在水体发生突然变化时,丢失部分水样的真实数据。另一种是连续进样方式,水样连续的进入反应器和发光细菌试剂混合,仪器连续检测发光强度变化,这种进样方式可以保证在线生物毒性仪分析的是连续水样,相比批次进样能够更加及时连续地反映水体毒性的变化。 /p p style=" text-align: right " strong (供稿:重庆昕晟环保科技有限公司& nbsp 总经理程立) /strong /p p style=" text-align: left " strong br/ /strong /p p style=" text-align: left " strong   本网按: /strong /p p   正如文中所提,水中生物指标的实时变化数据,在实现对水质变化的预测预警或者对水处理工艺过程进行优化和自动控制方面是至关重要的。在“2D时代”,受制于生物技术的发展水平,人们大多采用水质替代指标或是测量由生物特别是微生物作用引起的水的物理或者化学指标的改变等间接测量手段来推断生物指标的变化,从而对水处理工艺进行控制。 /p p   近年来,对生物指标进行实时在线监测得以实现,水质在线监测进入“3D时代”,一方面是得益于生物科学技术的快速发展 另一方面则是因为水行业对水中以致病细菌、病毒及抗性基因等为代表的生物污染物的日益重视,这一点在我国新冠肺炎防疫工作中得到了体现。 /p p   本网关注发现,在2019年年底爆发的新冠肺炎疫情重大公共卫生事件中,水中微生物的检测/监测为阻断疫情传播入口发挥了重要的作用,同时,这次疫情暴露出我国在城市公共环境治理方面还存在短板死角,亟待补齐。中共中央总书记、国家主席、中央军委主席、中央全面深化改革委员会主任习近平在2020年2月14日下午主持召开了中央全面深化改革委员会第十二次会议并发表重要讲话。他指出,要改革完善疾病预防控制体系,坚决贯彻预防为主的卫生与健康工作方针,坚持常备不懈,将预防关口前移,避免小病酿成大疫。技术的发展加上市场的需求,水中微生物的检测/监测或将迎来良好的发展机遇。 /p p   为此,仪器信息网特于2020年3月17日组织召开了“水中微生物检测技术及热点应用”专题网络研讨会,邀请多位专家作精彩主题报告,为相关技术人员提供线上互动交流平台,加强学术交流。 /p p   会议链接如下,点击链接可查看报告回放视频: /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/weishengwu/" target=" _self" style=" color: rgb(192, 0, 0) text-decoration: underline " strong span style=" color: rgb(192, 0, 0) " “水中微生物检测技术及热点应用” /span /strong /a /p
  • 疫情常态化,冷链食品生产卫生要求越来越高,如何解决?推荐使用ATP荧光检测仪
    申贝科学仪器去年入冬以来,我国多地在进口冷链食品外包装检出新冠病毒核酸阳性,有关专家提出,尽管阳性率很低且主要集中在产品外包装,但在疫情防控常态化下,全产业链对食品安全提出了更高的卫生要求,食品企业应该采取更严格的卫生管控措施。做好定期的清洁消毒工作,保证接触面、人员等卫生以避免出现交叉污染是很关键的。清洁消毒效果如何验证?国内外多项标准推荐使用ATP来验证洁净度!为什么ATP可作为洁净度指标?ATP与荧光素的反应发出的荧光强度(RLU),与活细胞数量基本呈正比例关系。荧光值越高,表明ATP的量越多,也就意味着表面的残留物越多,清洁状态较差。因此,ATP检测法就被用来快速检验物品表面是否洁净。什么是ATP荧光检测仪?申贝科学仪器推荐相关产品:ATP荧光检测仪systemsure plus仪器原理:ATP 荧光检测法是根据大自然中萤火虫发光原理,进行一系列数据对比,而研发的快速检测ATP技术。也就说在普通的环境里检测液中的虫荧光素酶催化虫荧光素和 ATP 之间发生氧化反应形成氧化荧光素并发出荧光,其光的强度与微生物数量呈比例关系,这就是ATP荧光检测仪原理。应用于:  1.食品加工器具、工作台面、餐饮器具等消毒结果快速检测  2.饮用水中微生物快速检测  3.检测有机物残留,阻断微生物生长环境  4.迅速检测出卫生环境是否清洁,可及时二次清洁处理  5.医疗环境工作平台(器械表面、内窥镜、空气)即时评估  6.可检测多种项目:表面、液体(总数ATP和游离ATP)、管道;也可检测水和食品中的大肠菌群、大肠杆菌、菌落总数、碱性磷酯酶、蛋白酶等技术参数:  1、轻便小巧,单手可持(重260g,72*191*32mm)大屏幕清晰液晶显示器(48*18mm)  2、检测限:2*10 -16 mol/ATP(检测下限为0.1 fetomole ATP),  3、检测范围:0- 9999 RLUs,  检测精度:精确至1个RLU,等于1*10 -16 mol/ATP  ATP回收率:90-110%  4、检测时间:15秒  5、阴性对照或空白本底值:0-1个RLU  6、相对标准偏差小于10%  7、结果可储存5000个记录  8、内置功能菜单(配合电脑可设定:200个用户ID、100个检测方案、251检测程序组、临界值、快速查看统计结果等),可设定省电模式自动关机时间,可设定不保存数据的快速检测  9、开机15秒自动校准;检测舱可移动、可清洗、可更换  *10、可检测多种项目:表面、液体(总ATP和游离 ATP)、管道;也可检测食品中大肠菌群、大肠杆菌、碱性磷酸酶,蛋白酶、过敏源等。  11、配套一体化液态稳定检测拭子,采样头和球阀型拭子头一体化设计,兼具取样检测和巴斯德吸管的三重功能,方便检测后做进一步检测时精确移液。  12、一体化液态稳定检测拭子出厂保质期长达12个月,可室温保存6周  13、有可选配的标准品(校准棒,阳性控制试剂)。  14、使用2节5AA碱性电池或可充电锂电池  15、ATP荧光检测仪具备中国科学研究院出具的测试证书。  16、可选配的标准品(校准棒、阳性控制试剂)。  17、配套SureTrend独立数据处理软件,连续数据库系统防止意外或欺诈性数据,提供多种数据趋势分析模式,数据可导出至Excel表格。  试剂:  ATP表面检测试剂棒Ultrasnap和ATP水质检测试剂棒Aquasnap使用简单方便,非专业人士无需培训一看即可上手操作,预先湿润的采集拭子,大程度上减少了操作环节的污染。  优点表现在:  ①免除了干燥拭子在使用前需前润湿的程序,避免了润湿过度中的污染。  ②减少试测时其它污染。  ③高科技产品的体现,预制好的一体化试剂无需现场配制,大大提高工作效率.采用速流阀技术,大大简化了现场工作程序,长达一年的试剂保质期(25℃以下为6周 2℃—8℃为一年)。最简单的储存方式。 2℃—8℃ 无需冷冻,具有ISO 9001/9002国际认证。
  • 蛋白质印迹实验具体操作步骤
    蛋白质印迹实验具体操作步骤 蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体 作为探针与之结合,经洗涤后,再将滤膜与二级试剂-放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 偶联抗免疫球蛋白抗体 结合,进一步洗涤后,通过放射自显影或原位酶反应来确定抗原-抗体-抗抗体复合物在滤膜上的位置和丰度。 【蛋白质印迹实验所需试剂】 1.IgG 标准品 2.羊抗人辣根过氧化物酶(HRP)标记的IgG 抗体 3.转移buffer:Tris 3.03g,Gly14.4g,甲醇200ml,加三蒸水至 1000ml充分溶解,4℃冰箱贮存。 4.Tris buffer(TBS):Tris 2.42g,NaCl 29.2g,溶于600ml三蒸水,再用1N HCl调至pH7.5,然后补加三蒸水至1000ml. 5.漂洗液(TTBS):TBS液500ml,加 Tween20 250ul. 6.封闭液:5%脱脂奶粉。 7.抗体buffer:1.5g BSA溶于50ml TTBS. 8.显色液DAB(3.3-diaminobenzidine,3.3-二氨基联苯胺)配制:5mg DAB溶于10ml 柠檬酸buffer(0.01mol/L 柠檬酸2.6ml,0.02 mol/L Na2HPO4 17.39ml),加30% H2O2 10 &mu l(临用时现配)。 9.脱色液:甲醇250ml,冰醋酸100ml,加蒸馏 水至1000ml. 10.氨基黑染色液(0.1%氨基黑 -10B):0.2g 氨基黑-10B 溶于200ml 脱色液中,充分搅拌溶解,滤纸 过滤。 【蛋白质印迹实验操作步骤】 一、样品的SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳 按实验四操作步骤进行。加样时,注意在同一块胶上按顺序做一份重复点样,以备电泳结束时,一份用于免疫鉴定,一份用于蛋白染色显带,以利相互对比,分析实验结果。 二、转移印迹 1.转移前准备:将滤纸,硝酸纤维素膜(NC)剪成与胶同样大小,NC膜浸入蒸馏 水中 10-20min 后浸入转移buffer中平衡30min . 2.凝胶平衡:将电泳后的SDS -PAGE胶板置于转移buffer 中平衡 30-60min. 3.按图操作:逐层铺平,各层之间勿留有气泡和皱折。 4.开始转移,连接正负极,盖好盖子,接上电源,恒流 0.8mA/cm,室温下转移1h,转移后的凝胶再用氨基黑10B染色液染色20min ,然后脱色检测转移效果。 三、免疫染色 1.转移后的NC膜于5%脱脂奶粉中封闭,4℃过夜。 2.TBS洗膜1-2次,10min/次。 3.加HRP标记的抗体,室温1h . 4.TBS 洗3次,10min/次。 5.NC膜再转入DAB显色液中,置暗处反应,待显色反应达到最佳程度时,立即用三蒸水洗涤终止反应。
  • 苏泊尔“锰超标”事件启示录
    浙江苏泊尔股份有限公司是中国最大、全球第三的炊具研发制造商,也是国内炊具行业首家上市公司。多年来的不断努力,造就了不仅是国内炊具行业第一的行业地位,更是值得信赖的品质、智巧的设计与技术的创新,帮助全球十万消费者走上了健康、舒适、充满新意的现代化家居生活。   但是,2012年2月16日中央电视台《焦点访谈》栏目中爆出的苏泊尔不锈钢产品锰析出量超标的事件,令消费者对于这个最大、最值得信赖的厂家的信任度瞬间滑坡。对于消费者而言:你的名气再大,你公司成立的时间再久,一旦你的产品质量有了问题,我们所有的好感都在瞬间崩盘。   那么,所谓的“苏泊尔”不锈钢产品锰析出量超标究竟是怎么一回事呢?针对此问题,记者首先走访了苏泊尔品牌相关负责人,该负责人回应说:“锰超标问题,没有标准,何谓超标,另外,锰含量并不意味着锰析出量。在国际上一般也不检测锰的含量和析出量。”   记者查阅到,此前该负责人也曾对媒体如此解释过,但针对这一说法,有专家提出了疑问,“既然其他金属能够析出,锰也同样可以析出。”该专家表示,由于此前的标准规定锰含量很少,所以对锰也没有要求检测,只对铅、铬、镍、镉、砷含量进行了规定。   虽然苏泊尔和该专家说法不一,但是记者还是从中获得了少许信息,也就是说,中国目前的相关标准对于锰析出量的确是没有具体规定的。就此问题,记者查阅了《食品安全国家标准不锈钢制品》,关于锰析出量,卫生部在《食品安全国家标准 不锈钢制品》知识问答中明确指出:“国外关于不锈钢食具容器有关锰的限定规定,除个别国家外,其他国际组织和相关国家未对锰的析出量做出规定”。   那究竟是国家的相关标准不够完善,还是对于锰这一元素我们真的不用过分在意呢?就此,记者查阅了关于锰的相关信息。   锰,是几种酶系统包括锰特异性的糖基转移酶和磷酸烯醇丙酮酸激酶的一个成分并为正常骨结构所必须。其摄入量差别很大,主要取决于是否食入含量丰富的食品如非精制的谷类食物,绿叶蔬菜和茶。此微量元素的通常摄入量为每天2-5mg,吸收率为5%-10%。另悉,锰缺乏会使人出现短暂性皮炎,低胆固醇血症以及碱性磷酸酶水平增加,并且锰缺乏在临床文献中已有记载 锰中毒通常只限于采矿和精炼矿石的人。   另外,有些饮用水和天然矿泉水中也含有锰这种微量元素:   查出锰这种元素并非有害物质之后,记者又打开苏泊尔官网,发现一篇名为《至苏泊尔消费者》的文章被放在其官网首页上。记者在此文中发现,苏泊尔厂家就不锈钢产品锰析出量给出了一个明确的答复:我国目前尚未制定关于锰析出量的相关标准。本着对消费者认真负责的态度,我司于2011年10月24日委托德国检测机构TUV SUD PSB上海实验室,参照意大利标准对采用相同材质的产品进行了检测,检测结果显示,被检产品锰析出量低于0.05mg/kg,符合意大利标准中关于锰析出量的要求。由此看来,“苏泊尔”不锈钢产品中锰的含量只相当于成人摄取量的1/70或1/80。   当然,对于“苏泊尔”不锈钢产品中锰超标的问题,真相还是有待我们进一步的去寻求的,但是“苏泊尔”厂家在新年伊始就给了我们这一“当头棒喝”,又让消费者作何感想呢?
  • 一种膜渗透的、固定化金属亲和色谱富集的交联试剂用于推进体内交联质谱分析
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Angew. Chem. Int. Ed.上的文章,A Membrane-Permeable and Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) - Enrichable Cross-Linking Reagent to Advance In Vivo Cross-Linking Mass Spectrometry,该文章的通讯作者是德国莱布尼茨分子药理学研究所的Fan Liu教授。交联质谱 (XL-MS) 已被用于在全蛋白质组范围内表征蛋白质的结构和蛋白间相互作用。目前,由于能够穿透完整细胞的交联试剂和富集交联肽的策略的缺乏,体内交联质谱研究的深度远远落后于细胞裂解液的现有应用。为了解决以上限制,本文开发了一种含膦酸盐的交联剂-tBu PhoX,它能够有效地渗透各种生物膜,并且可以通过常规的固定化金属离子亲和色谱 (IMAC) 进行稳定富集。 文章建立了一个基于 tBu-PhoX 的体内 XL-MS 分析流程,在完整的人类细胞中实现了较高的交联识别数目,并大大缩短了分析时间。总的来说,本文开发的交联剂和 XL-MS 分析流程为生命系统的全面交联质谱表征铺平了道路。细胞蛋白质组通过广泛的非共价相互作用网络进行组织,表征蛋白质-蛋白质相互作用 (PPIs) 对于了解细胞的调节机制至关重要。交联质谱 (XL-MS) 是系统研究细胞 PPIs 的一种强有力的方法,在 XL-MS 中,天然蛋白质接触通过交联剂共价捕获,交联剂是一种由间隔臂和两个对特定氨基酸侧链具有反应性的官能团组成的有机小分子,交联样品经过蛋白酶水解后,可以通过基于质谱的肽测序来定位氨基酸之间的交联。由于交联剂具有确定的最大长度,检测到的交联揭示了蛋白质内部或蛋白质之间的氨基酸的最大距离。以上这些信息提供了对蛋白质构象、结构和相互作用网络的见解。虽然最初仅限于纯化的蛋白质组装,但如今 XL-MS 已经可以应用于复杂的生物系统——这是通过开发先进的交联搜索引擎、样品制备策略和交联剂设计而实现的。特别是,已进行的几项全蛋白质组范围的 XL-MS 研究表明,可以通过使用可富集的交联剂来改进交联产物的鉴定,例如,通过添加生物素或叠氮化物/炔烃标记,使得消化混合物中的交联肽段能够基于亲和纯化或点击化学富集。最近,一种基于膦酸的交联剂 PhoX 被引入作为现有生物素或叠氮化物/炔烃标记试剂的高效和特异性替代品。PhoX 可通过固定化金属离子亲和色谱 (IMAC) 实现交联富集,这是一种非常快速和稳健的富集策略。 然而,尽管 PhoX 已被证明可用于从细胞裂解液中进行交联鉴定,但它无法渗透细胞膜,因此不适合体内的 XL-MS检测。基于以上讨论,本文开发了交联剂 tBu-PhoX ,其中,膦酸羟基被叔丁基保护以掩盖负电荷(图 1)。为了检测 tBu-PhoX 的膜通透性,文章交联了各种膜封闭的生物系统,包括人 HEK293T 细胞、从小鼠心脏分离的线粒体和革兰氏阳性枯草芽孢杆菌,并在 SDS-PAGE 上监测了蛋白质条带的变化(图 2)。在SDS-PAGE中,观察到在交联剂浓度为0.5和1.0mM时,蛋白质向更高分子量的浓度依赖性迁移,这表明了有效的膜渗透和交联。相比之下,将 PhoX 应用于完整的 HEK293T 细胞将产生与非交联对照相同的条带模式。图1 tBu-PhoX交联剂图2 PhoX或tBu-PhoX交联HEK293T细胞的SDS-PAGE在证明了 tBu-PhoX 可渗透各种生物膜系统后,文章接下来开发了一种基于 tBu-PhoX 的体内 XL-MS 工作流程,相比于之前的全蛋白质组 XL-MS 策略,该工作流程提高了样品处理和交联富集的速度和效率(图 3)。首先,按照标准蛋白质消化方案将交联蛋白质消化成肽;其次,使用 IMAC 珠对消化混合物进行预清除步骤以去除内源性修饰(特别是磷酸化);第三,预清除的消化混合物(从 IMAC 流出)在稀释三氟乙酸 (TFA) 溶液中孵育以去除叔丁基并暴露膦酸基团以进行二次 IMAC 富集。第四,使用标准 IMAC 程序丰富交联产物,最后通过 LC-MS 分析以进行交联产物鉴定。图3 与tBu-PhoX进行体内交联和后续样品处理的工作流程接下来,文章优化了体内 XL-MS 工作流程的几个分析参数,以最大限度地提高交联检测的效率。首先,通过使用 IMAC 珠预清除评估了去除磷酸肽的效率;之后,使用 tBu-PhoX 交联完整的 HEK293T 细胞,经酶切成肽后,并应用预清除 IMAC 步骤去除内源性磷酸肽。在去保护步骤之后,利用 IMAC 富集交联,并通过单次 120 min LC-MS 运行测量富集的样品。通过测量 IMAC 洗脱液中磷酸肽和交联产物的数量,发现第二个 IMAC 中只有数百条磷酸肽,而预清除 IMAC 中有 4,128 条磷酸肽,这突出了通过预清除 IMAC 步骤去除磷酸肽的效率。此外,与单阶段 IMAC 结果相比,使用预清除 IMAC 的工作流程鉴定了 22% 以上的交联(1165 对 952 交联),证明了该两阶段工作流程去除干扰修饰肽的好处(图 4A)。其次,文章在肽水平上研究了膦酸盐去保护的功效。使用 tBu-PhoX 制备了体内交联的 HEK293T 样品,并分析了在不同的酸度(TFA 浓度)和孵育时间下,去保护后交联的数量如何变化。结果显示,不同浓度的 TFA 下获得了相似数量的交联。为简化处理(即在接下来的IMAC富集步骤中保持相对较低的样品体积),选择 0.5% TFA 的去保护条件,持续两个小时(图 4B,C)。第三,文章测试了 Orbitrap Tribrid 质谱仪的不同采集参数如何影响交联识别,即在高场非对称波形离子迁移率质谱法 (FAIMS) 中应用的电荷态选择和补偿电压 (CVs)。当考虑电荷状态 +3 和更高时,确定了最多数量的 tBu-PhoX 交联肽(图 4D)。图4 样品处理和LC-MS参数的优化文章将优化参数后的体内 XL-MS 工作流程应用于完整的 HEK293T 细胞。使用 180 min的 LC 梯度和优化后的分析参数,文章从体内 tBu-PhoX 交联的 HEK293T 细胞中获得了 9,547 个交联(图 5A)。基因本体分析表明,交联蛋白参与了广泛的分子功能、生物过程和细胞成分,表明 tBu-PhoX 可以揭示所有细胞区域的 PPIs(图 5A)。另外,文章还考察了完整细胞的体内 XL-MS 是否捕获了与细胞裂解液的 XL-MS 不同的 PPIs。为了验证这一点,从 HEK293T 细胞中制备 tBu-PhoX 交联裂解液,并使用与体内 XL-MS 实验相同的工作流程处理样品。 结果显示,从五个 SEC 部分中确定了 9,393 个交联。这表明 tBu-PhoX 允许以类似的效率进行裂解和体内 XL-MS。比较本文的体内和裂解数据表明,在体内 XL-MS 实验中,蛋白质间交联的数量更高,从而产生了更加相互关联的 PPI 网络(图 5B,C)。这种效应可以通过细胞环境的拥挤来解释,其中蛋白质紧密堆积并参与多种相互作用,这些相互作用被细胞裂解和稀释部分破坏。文章在 8 种选定蛋白质复合物的已知 3D 结构上可视化了 145 个体内检测到的交联(图 5C),另外,还观察到 96.6% 的交联在 35 Å 的最大距离限制内(图 5D),表明此 XL-MS 工作流程对内源性蛋白质复合物的体内结构分析的适用性。最后,文章比较了 tBu-PhoX 与 PhoX 在表征细胞裂解液的 PPI 网络方面的性能。使用与上述 tBu-PhoX 裂解液交联实验相同的交联条件从 HEK293T 细胞制备 PhoX 交联裂解液。为了去除内源性磷酸肽,在单阶段 IMAC 富集之前,用碱性磷酸酶处理消化的肽两小时。使用与 tBu-PhoX 相同的 LC-MS 方法进行 LC-MS 分析。该实验产生了 2,117 个交联,与使用 tBu-PhoX 识别的交联数量(1,942 个交联)相比略高。然而,基于 PhoX 的 XL-MS 流程需要更长的样品制备时间,因为需要进行碱性磷酸酶再处理和之后的额外脱盐步骤。行体内交联综上所述,本文开发并应用了一种新型的、可富集的、用于体内 XL-MS 的膜渗透交联剂 tBu-PhoX。在广泛使用的交联条件下(交联剂浓度为 1-5 mM),tBu-PhoX能够有效地穿透各种生物膜,为完整的细胞器和活细胞提供交联的机会。tBu-PhoX上的叔丁基基团使得高效的两阶段IMAC样品制备方案成为可能;首先,使交联剂对 IMAC 呈惰性,以促进基于 IMAC 快速而彻底地提取不需要的磷酸化肽,然后,通过去除叔丁基暴露膦酸基团,从而有效地二次 IMAC 富集交联剂修饰的肽。通过随后的 SEC 分馏,可以进一步富集交联肽段以进行 LC-MS 分析。XL-MS 在表征生命系统中的蛋白质结构和相互作用方面发挥着越来越重要的作用。为了促进这一发展,迫切需要有效的体内 XL-MS 方法。文章报告的体内 XL-MS 工作流程满足了这一需求,提供了与之前基于裂解液的 XL-MS 研究类似的交联识别能力,但需要的测量时间不到之前报告的十分之一。这一结果突出表明,本文开发并应用的 tBu-PhoX 交联剂和集成样品制备流程为推进体内相互作用组学和结构生物学提供了一种非常有前景的化学方法。
  • 食品中的砷污染有什么危害?
    砷,俗称砒,是一种非金属元素,在化学元素周期表中位于第4周期、第VA族,原子序数33,元素符号As,单质以灰砷、黑砷和黄砷这三种同素异形体的形式存在。砷元素广泛的存在于自然界,共有数百种的砷矿物是已被发现。砷与其化合物被运用在农药、除草剂、杀虫剂,与许多种的合金中。 在古代,三*化*砷被称为*霜,但是少量的砷对身体有益。其实,我们身边就有砷的存在类金属砷,虽然出身非金属一族,但却有很多与重金属类似的特性,所以食品的重金属污染也不能忽视。地壳的风化把我吹进了大自然的土壤、空气和水中,通过动植物的吸收,食品中也随处可见我的身影,不过食品砷污染与天然来源的砷关系不大,都是工业污染、含砷农药及添加剂的使用惹的祸。人们在吃海产品、大米、水等食物时最容易吃到砷。1,砷对人体健康的作用主要有以下几个方面:2,参与蛋白质的代谢3,影响血清碱性磷酸酶、γ-谷氨酸转移肽酶的活性4,刺激造血器官5,抑制皮肤老化6,提高人体免疫力砷中毒:砷及其化合物具有毒性,所以当人体砷摄入量过多时,就会造成砷中毒。一般来说,无机砷比有机砷的毒性大,三价砷比五价砷的毒性大。砷的氧化物(如三*化*砷)和盐类绝大部分属高毒,而砷化氢则属剧毒物质,是目前已知的砷化合物中毒性最大的一个。过量的砷会干扰细胞的正常代谢,影响呼吸和氧化过程,使细胞发生病变。砷还可直接损伤小动脉和毛细血管壁,并作用于血管舒缩中枢,导致血管渗透性增加,引起血容量降低,加重脏器损害。三*化*砷和三氧化砷对眼、上呼吸道和皮肤均有刺激作用。同时在食品里以无机和有机两种形态存在,有机形态的毒性较弱,三价的无机砷毒性很大。急性砷中毒会让你呕吐、腹痛、腹泻甚至像武大郎一样七窍流血而亡,而长期接触我可能导致黑脚病,甚至引发皮肤癌、膀胱癌等。所以食品中的砷污染是不得不防的。深圳市芬析仪器制造有限公司生产的重金属多功能检测仪能够快速检测重金属砷,重金属镉,重金属铬,重金属汞,重金属铅等。可以简单快速检测砷的含量,用来杜绝砷中毒的隐患。维护食品安全。深圳市芬析仪器制造有限公司愿为食药监系统、农业系统、畜牧系统、渔业系统、食品企业等提供专业的检测产品、先进的技术支持和高效的整体解决方案。
  • 《食品加工过程中微生物监控》直播预约火热进行中
    微生物污染是影响食品安全的最重要因素之一,食品加工工程中的微生物控制成为保证食品安全的重要一环。有限而全面的环境监控计划才能有效防止食品污染的发生。 山东沃高生物主要致力于食品安全快速检测产品的研发和生产,产品涵盖食品企业从环境监控到成品检测的各个流程。现特邀请业内微生物知名专家马群飞老师,线上交流探讨“食品加工过程微生物监控”。诚挚邀请大家免费报名参加。讲师简介马群飞原福建省疾病预防控制中心主任技师1985年厦门大学生物系微生物学专业毕业,一直在福建省疾病预防控制中心(原福建省卫生防疫站)从事微生物学检验工作。第一作者发表学术论文60多篇。主持修订了GB 4789.26-2013《商业无菌检验》、GB/T 4789.27-2008《鲜乳中抗生素残留检验》等食品安全国家标准。主持申报并承担完成了多个科研项目,分别获得福建省科技进步奖、福建省标准贡献奖。食品安全国家标准审评委员会微生物分委会委员、福建省食品安全风险监测与评估专家委员会委员。公司简介山东沃高 为您提供食品加工环境监控整体解决方案山东沃高生物工程有限公司成立于2013年,公司总部位于泉城济南,是一家集研发、生产和技术服务为一体的技术企业,主要致力于食品安全快速检测产品的研发和生产,目前已建成十万级及百级净化车间用于微生物环境采样类产品生产,并且多方位执行ISO9001国际质量管理体系认证标准,WOGAO产品已广泛应用于食品安全、环境保护、工业品检测和生命科学等领域,我们已服务于数千个客户,并提供OEM和定制服务。 同时,我们还与诸多国际品牌达成战略合作协议,我们将不断投身于市场调研与新品开发,力争成为全球食品安全快速检测产品的制造商和供应商。为您提供食品加工环境整体解决方案手持式微生物及生物膜检测系统可进行清洗验证大面积筛查,无耗材、实用性最高的环境监控系统管道式微生物及生物膜检测系统食品加工罐体裂纹检测系统ATP荧光检测仪(多功能)可进行清洗验证快速检测、菌落总数,大肠菌群等快速检测、碱性磷酸酶检测涂抹类新品可满足您的任何涂抹类需求,经济款涂抹棒、移液式涂抹棒、涂抹海绵,为您提供性价比更高的环境监控产品
  • 前沿合作 | 基于岛津MALDI-TOF技术平台检测7种人冠状病毒及新型冠状病毒分型与重要突变位点的方法研究
    SARS-CoV-2变异株的出现,使全球面临第二波冠状病毒疾病大流行的危机 目前,已知可以感染人的冠状病毒共有7种,分别为20世纪60年代发现的人冠状病毒HCoV-229E和HCoV-OC43,2003年新出现的SARS冠状病毒SARS-CoV,2004年发现的人冠状病毒HCoV-NL63,2005年新发现的人冠状病毒HCoV-HKU1,2012年7月在中东地区出现的MERS冠状病毒MERS-CoV以及2019年12月下旬爆发的严重性呼吸系统综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。其中,2019冠状病毒病(Coronavirus disease 2019,COVID-19)引起了全球持续地大流行。尽管全球采取了许多干预和控制措施,截至2022年1月4日,已有200多个国家受到该病毒的影响,实验室确诊的COVID-19病例人数已超过2.9亿,死亡人数超过540万。 本次研究基于岛津AXIMA Performance MALDI-TOF质谱检测平台,旨在提供一种特异性强、灵敏度高的用于检测7种人冠状病毒(人冠状病毒229E、NL63、HKU1、OC43、SARS-CoV、MERS-CoV、SARS-CoV-2),及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)分子分型与重要变异株的检测方法。 岛津应对策略及解决方案通过合理选择设计位点、适当添加修饰碱基,可以将延伸探针的质量加以区分,均匀分布于检测范围之内,从而达到多重检测的目的。整个检测反应流程分为五步(图1):图1 岛津AXIMA Performance MALDI-TOF用于7种人冠状病毒及新型冠状病毒分型与重要突变位点的检测流程示意图 第一步是一步法多重PCR反应,根据待检测位点两端的侧翼序列来设计引物与探针,在一个反应体系中实现逆转录PCR与多重PCR扩增反应,从而达到扩增待测位点的目的。第二步应用虾碱性磷酸酶(Shrimp alkaline phosphatase,SAP)对上一步PCR的反应产物进行处理,消化掉剩余的脱氧核酸核苷三磷酸(Deoxy-ribonucleoside triphosphate,dNTP)。第三步是单碱基延伸反应。事先针对每个检测位点设计一条短探针,探针可以结合到第一步PCR的扩增子上,同时令探针结合之后,延伸的第一个碱基就是要检测的多态性位点。向第二步的产物中加入这些探针,使用经修饰的双脱氧三磷酸核苷(ddNTP)作为反应底物,再配合专用的扩增酶进行反应。第四步是树脂纯化。第五步是质谱检测。将第四步的反应产物转移到包被基质的点样靶板上,待样本结晶之后,使用飞行时间质谱仪检测延伸的单碱基质量大小,来判定检测靶基因的有无,从而进一步判定样本中目标病原体的有无。 本方法经特异度评估、灵敏度评估以及稳定性评估,结果如下:l 使用28种常见呼吸道病原进行本方法特异度检测,测试结果显示,该方法与常见呼吸道病原均无交叉反应,说明该方法具有良好的特异度;l 梯度稀释核酸样本,测试本方法的灵敏度,测试结果显示本方法检出限为250copies/mL;l 使用多个样本检测本方法的稳定性,检测结果显示,不同检测样本的检测结果一致,该方法表现出良好的稳定性。 方法 特点创新性地使用一步法多重PCR技术与核酸质谱检测分析方法联用,实现从临床样本核酸提取后直接进行检测和分型,不需要额外进行RNA的逆转录,很大程度上缩短检测时间和减小试剂的消耗; 与高通量测序技术相比,该方法一次性可处理和分析96或384份样本,且可在一天内获得7种人冠状病毒的检测结果,及SARS-CoV-2基因组中重要的突变信息,并对其进行分型,特别适用于大规模的流行病学研究和重要型别的监测; 该方法具有灵活易用的特点,随着SARS-CoV-2病毒的不断地进化和基因组新突变的产生,新出现的重要突变位点可以被纳入用来设计更全面的检测方法。 结论岛津中国创新中心与中国医学科学院病原生物学研究所合作开发了一种基于MALDI—TOF平台检测7种人冠状病毒及新型冠状病毒分型与重要突变位点的检测方法。利用一步法多重PCR与MOLDI-TOF质谱技术联用来鉴定7种人冠状病毒与新型冠状病毒的重要突变位点。我们通过对包含新型冠状病毒在内的7种人冠状病毒的每一种目标病原体,选择种间特异且种内保守的基因作为检测靶基因,同时根据GISAID公布的用于新型冠状病毒分型与重要突变位点检测的重要突变位点作为靶点。针对上述检测靶点,设计相应检测试剂,旨在开发和评估一种可直接用于7种人冠状病毒检测和新型冠状病毒分型的快速、简便、无须测序的方法。该方法的建立为动态监测SARS-CoV-2病毒的感染和主要型别的全球流行情况提供强有力的手段。 *文中推荐技术方法方案仅用于医学及科研人员技术交流,不作为临床诊断依据。*本研究的相关成果已申请国家专利(申请号:202111084113.0)。
  • BCEIA 2015学术论坛之“仪器分析在生物医药中的应用”
    p    strong 仪器信息网讯 /strong 2015年10月29日,BCEIA 2015学术论坛之“仪器分析在生物医药中的应用”在国家会议中心举行,本次论坛由中国分析测试协会汪正范研究员主持。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/ce5bea71-b626-43bb-9aa9-19d70710e940.jpg" title=" IMG_47321.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 现场 /strong /p p   随着仪器分析技术的不断发展,越来越多的新技术、新方法被应用在生物医药分析中。其实,从另一方面来说,仪器技术的提高反过来也促进了生物医药技术的进步,当然同时也对仪器及分析方法提出了更高的要求。而在这个过程当中,科研工作者和仪器厂商们正在不断的研发新的技术和产品,以满足不断提升的技术要求。 /p p   在今天的论坛中,主办方特别邀请到了北京理工大学的邓玉林教授分享其最新的研究成果。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/97cf020f-af5a-46b3-9e60-c379265d9ec1.jpg" title=" IMG_47231.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 北京理工大学 邓玉林教授 /strong /p p style=" text-align: center " strong 基于医工融合的转化生物医学研究 /strong /p p   邓玉林教授在报告中主要介绍了其课题组在糖尿病和帕金森病的早期诊断及方法研究等方面所开展的工作。大家都知道,现在糖尿病的临床诊断已经不是问题,有很多指标可以判断一个人是否患上了该疾病,但是其早期诊断还是一个大问题。邓玉林教授课题组针对这个问题开展了相关的研究,他们深度剖析了糖尿病的发病机理,寻找合适的生物标志物,致力于开发能应用到临床上的小型检测仪器。邓玉林教授说,也许以后糖尿病的早期检测也可以拥有像血糖仪一样的小型仪器。 /p p   生物医药技术的发展与仪器技术的发展、分析方法的开发密不可分,本次论坛中主办方还请到了多家公司的技术人员给大家分享仪器技术方面的最新进展。 /p p   化学发光免疫分析兴起于上世纪70年代中期,发展至今已经成为一种成熟先进的超微量活性物质检测技术,应用范围十分广泛。传统的免疫学检测多以酶标板为固相载体,而悬浮性磁微粒作为载体具有较高的比表面积,能够更为充分地与样品反应,加之外加磁场的灵活应用,较之酶标板载体具有更高的灵敏度、更快的检测速度和更好的重复性等优点。本次论坛中,北京利德曼生化股份有限公司陈立杰介绍了磁微粒分离碱性磷酸酶免疫化学发光检测平台技术和应用,特别详细介绍了利德曼自研底物及自主研发的CI1000型全自动化学发光免疫分析仪的技术特点。 /p p   岛津公司的刘麟介绍了最新的nSMOL技术,nSMOL技术是一种通过纳米表面限制性和导向性酶解抗体药物实现Fab区域的选择性酶解技术。nSMOL技术结合LCMS-8060对抗体药物的定量方法能完全满足FDA关于生物样品分析法规要求,并且适合推广至多种抗体药物定量方法开发,灵敏度与ELISA方法相当,方法特异性、选择性都优于已有方法,在抗体药代动力学研究 、临床研究方面有着广泛的应用前景。据介绍,对岛津来说,nSMOL技术相关产品已经成熟,将择期发布。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/a1a60c5a-332a-4a50-88a7-01f86ca61a71.jpg" title=" IMG_46761.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 利德曼 陈立杰 /strong /p p style=" text-align: center " strong 磁微粒分离碱性磷酸酶免疫化学发光检测平台技术和应用 /strong /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/ec193a52-5b24-43af-8722-ef2148db5653.jpg" title=" IMG_47481.jpg" / /strong /p p style=" text-align: center " strong 岛津 刘麟 /strong /p p style=" text-align: center " strong 超越期待的创新:岛津超快速串联质谱LCMS-8060结合nSMOL技术快速分析抗体类药物 /strong /p p   此外,安捷伦的左帅介绍了安捷伦在生物制药及生物类似药研发/质控阶段的整体解决方案,包括样品前处理、液相、质谱等仪器设备及相应的配套软件 赛默飞的郭丽萍详细介绍了Ultimate 3000 双三元流份收集Bio-LC色谱系统等仪器设备的特点及其在生物医药领域中的应用。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/9f2ff4fe-48c8-46a7-bf52-1908bbf9f4b3.jpg" title=" IMG_47061.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 安捷伦 左帅 /strong /p p style=" text-align: center " strong 安捷伦在生物制药及生物类似药研发/质控阶段的整体解决方案 /strong /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201510/insimg/50d06c71-2b32-47e2-83b1-3fc06fe51633.jpg" title=" IMG_47741.jpg" / /strong /p p style=" text-align: center " strong 赛默飞 郭丽萍 /strong /p p style=" text-align: center " strong 色谱仪在生物医药分析中的应用 /strong /p
  • 化学发光探针检测技术速查病原菌
    吉林检验检疫局建立的金标法检测单核细胞增生性李斯特氏菌技术作为当今检测病原体和诊断疾病方面最为敏感的免疫学技术之一,不仅操作简便、快速、特异,更为重要的是适用于广大基层食品监管部门的现场检测和诊断,这些特点都是其他免疫学方法所无法比拟的。   该技术不仅具有巨大的发展潜力,而且还具有广阔的市场和应用前景,如可适用于医疗卫生行业,出入境食品口岸抽查和鉴定、流通领域卫生监督和工商行政部门和质监部门的食品企业监管等,甚至可以走进餐馆、家庭进行简易的食品自控和检测等。   由吉林出入境检验检疫局承担的国家质检总局科研课题《应用化学发光探针及免疫金标法检测食品中多种致病菌的研究》在2011年获得了国家质检总局“科技兴检”三等奖。该课题建立的化学发光探针检测技术能够快速检测食品中常见的四种病原菌:空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌。其中对单核细胞增生性李斯特氏菌还建立了应用免疫胶体金试纸条的快速检测方法。   急需速测技术   我国的食品生产加工企业数量多,规模小,较分散,而且为数较多企业过分追求利润法律意识淡薄,社会责任心不强导致其产品质量良莠不齐。   据报道,我国45万个食品生产企业中,员工人数10人以下的食品生产加工小作坊就有35万家,约占80%,因而导致食品安全事故时有发生,给社会和消费者的健康造成了巨大危害。   而目前的食品卫生监管的检测手段主要依据国家标准或行业标准规定方法进行,虽然这些方法准确可靠,但这些方法一般都需要建设专门的微生物检测实验室,配备专业的检测技术人员,需要较长的检测周期,由此造成的检测成本过高,缺乏时效性等问题,使一些突发的食品安全事件不能迅速得以解决。因此发展和建立一种快速、简便、灵敏准确的检测技术,作为标准检测方法的初筛技术,是解决上述问题的有效手段之一。   食品检验新兵   化学发光探针技术的原理是互补的核酸单链会特异性识别并结合成稳定的双链复合物。这一检测系统利用一个标记有化学发光物的单链DNA探针,可以特异性的识别和结合目标微生物的核糖体RNA。微生物中的核糖体RNA释放出来后,化学发光标记的DNA探针就与之结合形成稳定的DNA-RNA杂合体。标记的DNA-RNA杂合体会与非杂交探针分离,并在化学发光检测仪中进行测量。样本的检测结果通过计算与阴性对照进行比较得出结果。利用化学发光剂标记和检测核酸使得许多非放射性标记检测的灵敏度达到甚至超过了同位素标记测定。   在众多的化学发光体系中,应用最多的化学发光体主要有三类:增强鲁米诺发光体系、吖啶类化合物发光体系和碱性磷酸酶催化的1,2-二氧环己烷发光体系。吉林检验检疫局建立的化学发光技术使用吖啶酯标记核酸探针。   利用化学发光杂交保护分析的原理检测空肠弯曲菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、大肠杆菌O157和金黄色葡萄球菌4种致病菌特异性RNA序列,这种方法无需物理分离,利用吖啶酯标记DNA探针,通过核酸杂交保护分析法,即应用人工合成的靶DNA保守区的寡核苷酸,在合成时引入一个烷氨基的手臂,经活化后接上吖啶酯,制成化学发光探针。   杂交后无需分离步骤,而是利用差分水解来鉴别,即加入碱性溶液,游离的发光探针遇碱水解失去发光特性,而与特异性目的片段结合的探针形成DNA-RNA杂交体,由于吖啶酯是平面结构很容易进入双螺旋的内部而获得杂交保护,水解速度缓慢(半衰期达10分钟以上),仍有发光性能,可以在发光仪上显示化学发光信号,从而实现对病原菌的检测。   应用前景广阔   该项目利用胶体金技术研制了胶体金检测试纸条,用于单核细胞增生性李斯特氏菌的快速检测,该检测试纸条的灵敏度高,具有很强的特异性,不同批次生产的免疫胶体金具有良好的检测重现性,稳定性好,操作简单,检测时间只需10至20min即可报告结果,胶体金法无污染,不会危害操作者以及环境。胶体金抗体复合物在冻干状态下室温储存相当稳定,有效期长 此外胶体金技术还具有检测迅速、灵敏、不需要复杂仪器设备、产品永不褪色等优点,适合于食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的初筛检验。   吉林检验检疫局建立的基因探针化学发光检测方法可在30分钟内快速确定病原体,并可直接于固体或液体培养基上鉴定目标微生物。该方法可直接应用于国外生产的LEADER 50i检测仪上,仪器自动注入检测试剂,立刻测量标记物所产生化学反应的化学发光强度,并自动计算结果及打印报告,该检测方法敏感性高,特异性强,检测成本低,操作简便、快速,对我国食品安全快速检测和监控工作具有重要意义,具有广泛的推广前景。 胶体金快速检测试纸
  • 疾病标记物的化学发光免疫分析试剂盒的研制 荣获2013年度北京市科学技术奖
    清华大学和北京科美生物技术有限公司(原北京科美东雅生物技术有限公司)合作完成的&ldquo 疾病标记物的化学发光免疫分析试剂盒&rdquo 项目,荣获2013年北京市科学技术奖二等奖,主要完成人林金明、应希堂、李海芳、李振甲等。   体外免疫诊断技术,是利用免疫试剂对血液或体液中疾病相关标志物的特异性识别和反应,评价疾病标志物的异常表达含量水平,准确判断疾病的发生和 发展程度。体外免疫诊断在临床检测中被越来越广泛的使用。继荧光、放射性同位素和酶免疫技术之后,化学发光免疫(Chemiluminescent immunoassay,CLIA) 作为新的免疫分析技术,不仅较放射性免疫无毒无污染,且具有更高的灵敏度和准确性,近年来成为国际争相发展的高端临床疾病诊断试剂。国际市场上的主流 CLIA试剂都由国外企业所垄断。国内体外诊断起步较晚,较欧美有十年以上的差距,市场对诊断试剂的巨大需求长期依赖进口。发展国产化的高端免疫诊断试 剂,对发展我国医药卫生产业和提高社会医疗保障有重要意义。   面向国家需求,立足技术创新。肿瘤和传染病是我国的高发性、高危性疾病。近年来环境污染造成内分泌类疾病患者人数迅速攀升。林金明教授领导的项 目团队与北京科美生物技术有限公司合作,通过10多年的努力,针对肿瘤、传染病和内分泌等高发性疾病诊断的需求,自主技术创新了系列化学发光免疫检测体 系,成功研制了具有自主产权的化学发光免疫诊断试剂和仪器,填补我国化学发光免疫试剂产品空白。项目获得国家授权发明专利15项,国家医疗器械注册证49 项,16项北京市自主创新产品证书,其中关于&ldquo 人类缺陷免疫病毒抗体化学发光诊断试剂盒&rdquo 获科技部&ldquo 国家重点新产品&rdquo 证书。   团队以酶催化化学发光为技术核心,在酶标记技术、抗体包被技术、磁颗粒分离技术和化学发光体系等方面取得多项技术创新:(1)研发了酶标记技术 与抗体包被技术,掌握了辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶标记抗体或抗原核心技术;(2)发明了高灵敏度、高稳定性、宽检测窗口期的化学发光底物液;(3)发明 微孔板磁颗粒化学发光免疫分析新技术,使分析时间缩短20倍的同时灵敏度提高近百倍,达到国际领先 (4)发明了人类免疫缺陷病毒(HIV)病毒抗体的&ldquo 双抗原夹心CLIA&rdquo 新技术,指标达到国内外同类产品的领先水平。建立高灵敏度、高通量、快速高效的 化学发光免疫检测体系,开发新一代化学发光免疫分析试剂盒,填补我国化学发光免疫试剂产品空白。   产学研相结合,实现技术快速转化。项目通过产学研相结合的方式,将创新技术快速转化为产品,推向市场并获得广泛应用。基于创新技术研发的 CLIA试剂,通过企业的小批量中试和大量的临床样品检验比对,再进行技术的微调与改进,最终形成适合市场需求和经受实际应用考验的高灵敏度、高特异性、 高稳定性的CLIA系列产品。研发的肿瘤系列磁颗粒CLIA诊断试剂盒,已在肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌等临床诊断上获 得广泛应用。研发的内分泌甲亢和性腺两大系列CLIA诊断试剂盒,可进行血清中促甲状腺素TSH、三碘甲腺原氨酸FT3、游离甲状腺素,性腺类包括前列腺 特异性抗原PSA、人血清中促黄体生成激素、类固醇性激素、促黄体生成素、孕酮、雌二醇等激素标志物的临床检测。在传染病系列CLIA试剂盒方面,研发了 国际上第一个艾滋病抗体微孔板CLIA试剂盒。继后还开发了乙型肝炎、丙型肝炎病毒表面抗原和梅毒螺旋体抗体诊断的CLIA试剂盒产品。这些CLIA试剂 已成为国内最具竞争力和市场占有率最高的诊断产品,在行业内起到引领和示范作用。   该项目成果于2009年获得中国分析测试协会科学技术奖一等奖,2011年获得中国产学研创新成果奖,2013年获得北京市科学技术奖二等奖。 项目成果为国内艾滋病防治、肿瘤体检筛查和传染病控制提供了便捷、低价、可靠的产品。项目推动了我国高端临床免疫检测试剂的发展,逼迫进口试剂降价,取得 了很好的社会和经济效益。   链接:项目负责人林金明 清华大学化学系教授,博士生导师,清华大学分析中心主任,化学系副系主任和分析化学研究所所长。1992&mdash 2002年在日本昭和大学药学院及东京都立大学 学习和工作。2001年入选中国科学院&ldquo 百人计划&rdquo ,同年获得国家杰出青年科学基金,受聘中国科学院生态环境研究中心研究员,博士生导师;2004年入选清华大学&ldquo 百名人才引进计划&rdquo ,2008年受聘教育部长江学者特聘教授。长期从事化学发光机理和化学发光免疫分析研究,近年来在微流控芯片细胞药物代谢及 循环癌肿瘤细胞检测方面的研究处于国际领先水平,CTC诊断技术已部分产业化,并在推广中。在国际刊物上发表研究论文300余篇,编著出版《化学发光基础 理论》、《化学发光免疫分析》和《环境、健康与负氧离子》专著3部。
  • Biotechniques:2014最受欢迎的显微镜论文
    还有什么比显微镜工作者从细胞世界获得的图像更惊人呢?除了美之外,这样的照片还揭示了关于&ldquo 细胞和生物分子运行及互动的方式&rdquo 的新见解。在2014年显微镜技术有哪些研究进展使我们赞叹不已呢?   单凭想象,我们不能看到行动的细胞,不能定位蛋白质或其他生物分子。细胞成像的力量是公认的,在今年秋季早些时候,三位显微镜先驱者,因研制出超分辨率荧光显微镜,获得了今年的诺贝尔化学奖。就像超分辨率显微镜的进展,可以从根本上改变我们看细胞世界的方式。但是,无论它是一个主要的里程碑还是日常进展,都能使我们节约花在板凳上的时间和资源,新的成像技术总是备受研究界的需要和欢迎。为此,BioTechniques的编辑回顾了这一年来的显微镜技术进展,选择了2014年发表的我们最喜爱的论文。我们的选择清楚地显示,成像方法的日益多样性,正被应用于当今的生命科学研究。   1.&ldquo Two-color fluorescent in situ hybridization using chromogenic substrates in zebrafish,&rdquo by Schumacher et al. (November 2014)   当谈到显微镜时,我们被宠坏了。我们看到的大多数共聚焦图像有多种颜色,可提供一系列的数据。然而对一些技术来说,这些颜色付出了代价。对于双色荧光原位杂交(FISH)来说,检测弱表达的转录本和监测实验过程中的信号强度及背景值,成本一直很高。辛辛那提儿童医院Saulius Sumanas的研究小组,深入研究了将显色底物而不是传统标记探针应用于FISH的可能性。结合NBT/BCIP和Vector Red&mdash &mdash 它们具有非重叠的反射波长,作者创建了一种程序,利用碱性磷酸酶的长反应性、显影反应的显色监测和高分辨率的荧光成像,来比较斑马鱼的基因表达模式。[文献]   2. &ldquo Robust and artifact-free mounting of tissue samples for atomic force microscopy,&rdquo by Morgan et al. (September 2014)   原子力显微技术(AFM)是一种用于研究细胞和组织物理特性的技术。AFM的一个缺点是,在成像之前需要固定组织样品。一般通过胶水或干燥样品来完成固定,这两者都可能产生人工误差。为了消除这种可能的错误来源,加州大学戴维斯分校的Paul Russell及其同事,构建了一种设备,他们称之为组织软夹紧固定保持器(SCIRT),用其来固定AFM样品。利用SCIRT,Russell的研究小组能够处理小样本,提供样本的不断水化,消除胶水及其相关的人工误差,甚至在AFM测量之后还能恢复样品。[文献]   3. &ldquo Multi-modality imaging of a murine mammary window chamber for breast cancer research,&rdquo by Schafer et al. (July 2014)   有时候,用一种以上的技术来影像样品或标本比较划算。光学显微镜可以提供细胞水平细节的信息,像磁共振成像(MRI)这样的技术,可以提供更大结构的高分辨率形态学信息,例如肿瘤的尺寸和形状。在今年7月,美国亚利桑那大学的Arthur Gmitro及其同事,详细介绍了他们的新方法,用于小动物肿瘤微环境成像。研究人员利用一种植入的乳房视窗,用光学显微镜以及MRI和核成像,来影像肿瘤环境。通过相同的乳腺视窗,用多种成像技术专注于一个单一解剖区域的能力,可提供乳腺癌细胞和肿瘤生长之间关系的新见解。[文献]   4. &ldquo Investigation of membrane protein&ndash protein interactions using correlative FRET-PLA,&rdquo by Ivanusic et al. (October 2014)   并不是所有的新成像技术都将会产生明亮、高对比度的彩色图片,赢得显微镜图像竞赛,但是即使外形不美观的方法,仍然能够产生美好的信息。德国柏林的Daniel Ivanusic及其同事,在今年10月份发表了一个这样的例子。荧光能量共振转移(FRET)和邻近连接技术(PLA)这样的技术,可以用来监测蛋白质是否和何时相互作用。Ivanusic的研究小组意识到,将相关的FRET和PLA技术组合起来,或许能够检测膜蛋白相互作用,要优于单独使用每项技术。他们发现,在蛋白相互作用研究中,这一系列实验可验证相关FRET-PLA的稳健性和可靠性。[文献]   5. &ldquo Nuclear LC3-positive puncta in stressed cells do not represent autophagosomes,&rdquo by Buckingham et al. (November 2014)   最后,有些时候需要提醒你的是,看得到不一定意味着相信。在11月份,爱荷华大学的Charles Grose及其研究小组,深入研究了两个研究小组的最近观察结果,这两个小组研究细胞中的细胞核LC3-阳性斑点。LC3抗体与自噬体有关,这应该意味着自噬体的核定位&mdash &mdash 以前认为并不存在的东西。Grose及其研究小组发现,观察到的染色并不是LC3特定的,而是由某一通透性和杂交条件引起的非特异性染色。   推荐原文   Microscopy: 2014 Year in Review&mdash Imaging ourNatural World
  • 肿瘤负荷监测|naica® 微滴芯片数字PCR系统定量ctDNA中特异性SV监测肿瘤治疗反应和复发
    荷兰乌得勒支大学,荷兰鹿特丹伊拉斯谟癌症研究院,荷兰癌症研究院等科学家团队在《Genome Medicine》(2021年影响因子11.117)杂志上发表文章“Optimizing Nanopore sequencing-based detection of structural variants enables individualized circulating tumor DNA-based disease monitoring in cancer patients”,提供了一种即时的、高灵敏的个体化疾病监测解决方案,基于癌症基因组三代测序技术实现潜在SV标志物筛选,随后通过naica® 微滴芯片数字PCR系统绝对定量检测转移性前列腺癌患者血浆中ctDNA(循环肿瘤DNA)的SV标志物,并实现持续监测。通过实时监控SV的变化,来评价肿瘤治疗的动态反应。通过四个病例的特异性SV的数字PCR监测,表明SV动态变化与已有的肿瘤治疗反应标志物如PSA具相关性并能更早发现复发。应用亮点1.naica® 微滴芯片数字PCR系统能够用于血浆ctDNA中的特异性SV生物标志物的检测。2. naica® 微滴芯片数字PCR系统三色荧光通道同时检测SV结构变异,上游野生型和下游野生型三个靶标位点。3.naica® 微滴芯片数字PCR绝对定量患者SV标志物,适用于肿瘤治疗反应监测,更早提示复发。三通道数字PCR绝对定量检测血浆cfDNA中肿瘤特异性SV实验设计A、血浆cfDNA中肿瘤特异性SV的数字PCR绝对定量检测路线。B、三通道数字PCR的引物和探针设计检测。野生型上游和野生型下游等位基因与变异等位基因。设计了三个标记不同荧光染料的探针,特异性检测变异等位基因或野生型上游和下游等位基因。循环肿瘤DNA循环肿瘤DNA(ctDNA):肿瘤细胞释放入血的游离DNA(cfDNA),大小约为160-180 bp。与正常的游离DNA(cfDNA)相比,ctDNA的不同之处在于携带肿瘤特异性的遗传学改变(SNV,CNV,Indel,SV),约占0.1-1%,ctDNA已被证明与肿瘤负荷呈正线性相关性。有多例病例报道,ctDNA在临床症状出现前几个月发现癌症复发,通过ctDNA的液体活检,有望监控肿瘤负荷,确定疗效和耐药性,检测微小残留病,并了解肿瘤异质性和克隆进化。结果与结论利用naica® 微滴芯片数字PCR系统进行4例前列腺癌患者两个时间点,即基线期和进展期时,血浆cfDNA中两个肿瘤特异性结构变异位点SV-A和SV-B的检测,VAF变异等位基因频率如图C,每mL血浆中变异等位基因拷贝数如图D。C、显示四例前列腺癌患者血浆ctDNA中SV-A和SV-B的VAF变异等位基因频率。D、显示四例前列腺癌患者每毫升血浆中SV-A和SV-B变异等位基因拷贝数。监测4名前列腺癌患者的血浆ctDNA中特异性SV变异水平,每个患者有两个SV,并与PSA和ALP等临床生物标志物进行比较。患者Pros1和Pros5的SV-A和SV-B的VAF监测结果显示与肿瘤负荷相关,患者Pros1和Pros4比PSA更早地提示疾病的进展。下图为患者Pros1血浆ctDNA中的SV持续监测结果。E、患者Pros1两种SV的VAF、治疗、实验室指标(前列腺特异性膜抗原(PSA)、碱性磷酸酶(ALP))和临床疾病进展(PD)。* Cabazitaxel:卡巴他赛,是一种紫杉烷类化疗药物,主要用于治疗激素难治性转移性前列腺癌。展望作者在文中表明:临床医生非常清楚癌症治疗方案动态监测的重要性,但缺乏即时监测肿瘤治疗反应的有效工具,因此尽管医生能够及时发现了病情变化并做出反应,但却为时已晚。本文提出了一种克服这些限制因素的新方法,并为即时个性化疾病监测提供解决方案。每个患者持续监测了两个SV,结果表明使用SV量化ctDNA以监测治疗反应具备潜在临床效用。这种方法可以提高疾病监测的敏感性,使其满足更智能治疗方法的要求。更多详情查看原文:DOI:10.1186/s13073-021-00899-7法国Stilla Technologies公司naica® 微滴芯片数字PCR系统,六色荧光通道,少量样本中获得更多生物信息,了解详情请点击:https://mp.weixin.qq.com/s/rVt1F50ILi3wFY9FdndyBwGenome Medicine影响因子:影响因子查询网址:https://www.iikx.com/sci/biology/18358.html
  • 2021这些 “美”好事情,我们共同见“正”
    2021年悄然飞逝这一年是平凡的一年又是不平庸的一年“大事”一桩桩、“喜事”一件件见证着美正的飞速发展和美正人的澎湃激情正所谓“美”好事情,“正”在发生👇 👇 👇2021美正大事件 01 美正新形象焕新而来随着国内外业务的不断扩展,美正LOGO进行了整体升级,切换至Meizheng的拼音形式,统一了全球品牌形象,加强了品牌辨识度。02 圆梦“十三五”企业风采录美正入选中国奶业协会组织的中国奶业的传奇与辉煌,圆梦“十三五”企业风采录。美正在乳品行业的努力与成绩,得到中国奶业的认可!03 校企合作 | 打通人才输送通道4月,美正与天津科技大学签订校企合作协议,正式建立人才输送通道,天津科技大学将不断为美正注入新力量。04 美正成为国家动物健康与食品安全创新联盟理事单位2021年7月5日,国家动物健康与食品安全创新联盟第一届理事长办公会三次会议和第一届理事会三次会议在南京召开。会议审议并通过了联盟第一届副理事长增选名单、第一届常务理事增选名单以及第一届理事单位增选名单,山东美正生物科技有限公司作为理事单位,希望联盟继续壮大,共同努力,共谋联盟可持续发展。05 山东美正生物科技有限公司获得履行社会责任示范单位“金帆奖“及优质服务单位荣誉称号06 美正作为技术成员单位加入“一起食安行”在“IFS中国主题日&一起食安行”现场, “一起食安行”新成员单位的授牌仪式上,美正市场总监李苑女士代表公司上台领取证书并就公司业务做了相关介绍。07 美正检测获CNAS标准物质生产者认可北京美正检测技术有限公司顺利通过了中国合格评定国家认可委员会(CNAS)标准物质生产者认可,符合ISO 17034:2016《标准物质/标准样品生产者能力的通用要求》,注册号:CNAS RM0035。08 《低温乳制品中沙门氏菌检验 实时荧光PCR方法》团体标准发布由北京美正生物科技有限公司向上海市食品学会提起申请制定的团体标准《低温乳制品中沙门氏菌检验 实时荧光PCR方法》2021年12月06日发布,于2022年1月1日正式实施。标准起草单位包括:北京美正生物科技有限公司、山东美正生物科技有限公司、光明乳业股份有限公司、光明乳业股份有限公司华东中心工厂、通标标准技术服务有限公司、天津光明梦得乳品有限公司。本文件规定了巴氏杀菌乳、高温杀菌乳(低温保存)、发酵乳、调制乳及奶油等低温乳制品中沙门氏菌的实时荧光 PCR 检测法(商品化试剂盒方法)。09 Together Solving Tomorrow-凝心聚力、共赢未来美正TST精神,已然注入美正企业文化的DNA,成为美正企业文化以及核心价值观耀眼的光芒! 2021 产品大事件 01 盘点一下2021年美正上市的新品!3in1智能荧光检测仪3in1智能荧光检测仪上市,一台仪器满足洁净度、碱性磷酸酶、农药残留等多种检测需求。MZT 5162多功能食品安全检测仪仪器集成分光光度模块、胶体金检测模块、数字化管理模块、无线通讯模块等,一机可实现各种非法添加物、易滥用食品添加剂、兽药残留、农药残留、真菌毒素、有毒有害物质等检测。MZT 5400 全自动食品安全检测仪仪器采用分光光度法原理,结合自动化模块、数字化管理模块、无线通讯模块等,可实现农药残留、非法添加物、易滥用食品添加剂等项目的自动化检测。检测过程封闭式,加液、检测均在封闭空间内进行,不受外部环境干扰。结合智慧快检平台可实现检测数据实时上传至监管平台。两款全自动前处理仪器为了给食品检测分析人员提供更大的样品处理量和更准确的分析结果,美正倾情推出两款全自动前处理仪器:ASPE480免疫亲和固相萃取系统和ASPE720高通量全自动固相萃取仪,给客户提供更全面、更高效、更智能的前处理解决方案,帮客户省时省力,准确快速完成检测任务。新版药典禁用农药混标溶液针对新版《中国药典》中新增中药材中33种禁用农药的品种及定量限,根据药典中第四部通则《2341 农药残留量测定法》第五法“药材及饮片(植物类)中禁用农药多残留测定法”要求采用气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法,对药材及饮片(植物类)中33种禁用农药进行测定。美正检测隆重推出了相应的混标,包含LC-MS/MS组和GC-MS/MS组,不同的浓度供客户选择,为客户进行药材和饮片中检测方法的验证和应用提供标准物质支持。真菌毒素同位素内标及16种真菌毒素混标为满足广大用户标准品需求,美正检测推出了真菌毒素类同位素内标及16种真菌毒素混标溶液。美正检测专注于标准物质的研发和生产,此次真菌毒素检测标准溶液推出,帮您及时应对真菌毒素的分析,迅速建立方法,快速完成检测项目。02 盘点美正产品获得的认证认可!美正检测获得7个国家标准物质定级证书在牛年开年之初,美正检测凭借过硬的技术实力,成功获得7项国家标准物质定级证书,标志着美正检测标准物质研发迈上新台阶。获得的有证标准物质主要应用于环境、食品、农业等领域中磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶、孔雀石绿、隐色孔雀石绿、氧氟沙星、己烯雌酚、三聚氰胺残留检测,以及分析仪器校准,分析方法评价,操作人员水平考核,测量过程质量控制等。美正微生物测试片家族-6成员已获AOAC认证美正坚持产品的改进与优化,提供专业微生物快检方案,为食品健康保驾护航。美正微生物测试片家族6成员:菌落总数(AC)测试片(证书编号:PTM No.032102)、大肠菌群(CC)测试片(证书编号:PTM No.102102)、大肠菌群/大肠埃希氏菌(EC)测试片(证书编号:PTM No.102103)、肠杆菌科(EB)测试片(证书编号:PTM No.112101)、霉菌酵母(YM)测试片(证书编号:PTM No.122101)、金黄色葡萄球菌(SA)测试片(证书编号:PTM No.122102)已获AOAC认证。美正智慧快检平台中标山东日照快检惠民项目日照市 “放心菜篮子,快检惠民生” 工程智慧监管系统,从检测源头到数据汇总、分析、监管,有效帮助区域政府相关职能部门实行食品安全监管,同时建立了全市统一化的食品快检信息综合服务平台,实行常态化的快检信息发布制度,倒逼食用农产品质量安全源头管控,让群众“菜篮子”拎得更放心。美正微生物法维生素检测试剂盒喜获三家验证单位认可美正生物自主研发生产的维生素B7(生物素)、维生素B9(叶酸)和维生素B12(氰钴胺素)检测试剂盒成功通过了中国检验检疫科学研究院、北京市营养源研究所以及通标标准技术服务(青岛)有限公司(SGS)三家单位的验证。验证结果显示美正生物维生素检测试剂盒准确度高、与国标方法对比,符合率高,顺利通过验证。美正“禁用10项组合方案”通过水产药残快检产品评价验证2021年度水产品中药物残留快速筛选验证工作总计开展了10项禁用药物的评价。美正生物凭借良好的性能表现通过了全项产品的验证指标。针对10项评价指标,我公司整合优势资源开发出了3套组合技术方案。展示多元化性能适配,同时彰显了化繁为简的产品方案优势。美正生物也成为首批全项禁用喹诺酮通过验证的快检企业。华安麦科真菌毒素检测系统入围中储粮集团华安麦科HMG001快速检测及监测分析系统6月成功入围中储粮集团,该系统覆盖真菌毒素、重金属、农药残留、转基因四大粮食安全项目,具有便携、快速、准确、适用的特点。该系统整合了便携式胶体金试纸条扫描读数仪及相应的胶体金快速定量检测试纸条、实验过程中所需的前处理设备及实验耗材,可快速准确的对样本中真菌毒素、重金属、农药残留、转基因进行现场检测。同时,该系统可以与搭建的云平台或介入现有的实验室信息化系统,实现“采样-收样-检测”数据实时上传、过程全程监控、风险有效预警等功能。 2021 市场活动2021年,美正参与了60余场市场活动,产品足迹遍布全国20余个城市,让不同领域的客户更加了解美正、信任美正。产品足迹遍布北京、上海、杭州、重庆、青岛、广州、南京等全国20余个城市,涉及乳品、粮油、饲料、畜禽、水产、商超、餐饮、中药材等多个领域客户。新的一年里,美正也将继续奋力迈进,用不断创新的技术、高品质的产品及服务,促进可持续的食品健康产业的发展,致力于成为保障全球食品健康的领航者!
  • 流式荧光技术检测与化学发光技术检测那些事儿
    大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。——流式荧光崔工前段时间,有很多新关注崔工公众号的朋友问崔工一个问题,什么是流式荧光检测技术?它的原理是什么?传统的化学发光检测技术又有什么?问崔工这个问题的朋友应该是刚进入到这个行业,还不是很了解这个行业。今天就跟大家聊聊,供大家参考。— 1 —什么是流式荧光检测技术?从百度百科了解到,流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为核心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,最多可一管同时准确定量检测2-500种不同的生物分子。具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点。可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。流式荧光检测技术的原理是什么?将荧光标记后的单细胞(或颗粒)悬液进入吸样管,进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细,迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室,在外加压力的作用下由下向上(或由上向下)直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟,当二者通过流动室喷嘴流出时,压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区与液滴垂直的位置设置激光,在与激光垂直的位置设置探测器(透镜等),液流、激光、探测器互相垂直并聚焦于一点实现流体动力聚焦。荧光标记的细胞或颗粒在激光激发下发出散射光和荧光的发射波,散射光和发射光被检测器获取,再经一系列滤光片、光栅处理去除干扰并将光信号经光电转换和放大后输入计算机,并由软件分析处理。而细胞分选则是对荧光标记的目的分子分别加载正或负电荷,当其在随液滴滴落的过程中受到外加高压电场的作用发生偏转而落入接收容器,从而获得目的细胞群。流式荧光检测技术有什么技术特点?1、高通量:将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内,一次可同时检测2-500种生理病理指标,这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性:流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml,常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级,比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围宽:检测的线性范围比常规的ELISA方法高10倍以上,可达3-5个数量级。检测浓度范围为pg-μg级。4、反应快速:因流式荧光技术的杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行,反应所需的时间短(从2 h缩短到20—40 min),杂交后常不用清洗,即可直接读数,所以检测效率高于固相杂交。5、重复性好:杂交发生在准均相液体环境中,其结果稳定,重复性非常好。检测时,抽取其中的100颗微球读数,最终的数据取其均值或中位值,这样可将误差减到最小。6、利于探针和被检测物的充分反应:由于液相环境更有利于保持蛋白质的天然构象,所以也更有利于探针和被检测物的反应。7、操作简便:流式荧光技术平台的整个反应过程只涉及加样和孵育,最后上机读数,操作步骤少,简单易用。— 2 —什么是化学发光检测技术?这里既然是跟流式荧光检测相比较的,那这里的化学发光检测技术指的是化学发光免疫分析技术。化学发光免疫分析:是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。化学发光检测技术的类型及原理化学发光检测技术的类型分为直接化学发光免疫分析,化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。直接化学发光免疫分析用吖啶酯直接标记抗体(抗原),与待测标本中相应的抗 原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂(H2O2)和 NaOH使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、 发光 。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生 的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。化学发光酶免疫分析酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成 固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物;经洗涤后,加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析 (electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。化学发光免疫分析技术的优势是什么?1、灵敏度高:灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性。化学发光免疫分析能够检出放射性免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质,对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。2、宽的线性动力学范围:发光强度在4-6个量级之间,与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色酶联免疫分析吸光度(OD 值)2.0 的范围相比,优势明显。虽然同位素放射免疫也有较宽的线性动力学范围,但是放射性限制其应用。3、光信号持续时间长:化学发光免疫分析的光信号持续时间可达数小时甚至一天,简化了实验操作及测量。4、分析方法简便快速:绝大多数分析测定仅需加入一种试剂(或符合制剂)的一步模式。5、结果稳定、误差小:样本本身发光,不需要额外光源,避免了外来因素的干扰(光源稳定性、光散射、光波选择器),分析结果稳定可靠。6、安全性好及使用期长:到目前为止还未发现化学发光免疫分析试剂的危害性;另外这些试剂稳定,保存期可达一年之久。以上是对什么是流式荧光技术检测与化学发光技术检测基本原理做了一个说明,供大家参考。【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式共享,欢迎自荐或引荐投稿联系人:刘编辑word图文投稿邮箱:liuld @instrument.com.cn微信:JaysonXY(备注来意:投稿)(本文编辑:刘立东 点击查看KOL主页)
  • 2129万!首都儿科研究所临床检测用试剂采购项目
    一、项目基本情况项目编号:11000023210200070751-XM001项目名称:临床检测用试剂采购项目预算金额:2129.3466 万元(人民币)采购需求:包号品目号标的名称采购包分品目预算金额(万元)数量单位11-1血小板聚集功能检测试剂盒(光学比浊法)755.978615毫升1-2血小板聚集功能检测试剂盒(光学比浊法)30毫升1-3反应杯200个1-4搅拌珠30个1-5非衍生化多种氨基酸、肉碱和琥珀酰丙酮测定试剂盒(串联质谱法)5760人份1-6样本萃取液及流动相溶剂包(串联质谱法)5760人份1-7琥珀酰丙酮样本前处理液(串联质谱法)5760人份1-8样本释放剂5600人份1-9维生素检测仪用样本处理液VB69000人份1-10维生素检测仪用样本处理液VB1/C9000人份1-11维生素检测仪用样本处理液VB29000人份1-12维生素检测仪用样本处理液VB9/B129000人份1-13维生素检测仪用样本处理液VA/D/E9000人份1-14样本稀释液18000人份44-1巨细胞病毒IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)253.55471200人份4-2单纯疱疹病毒1+2型IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)1200人份4-3弓形虫IgM抗体测定试剂盒(化学发光法)1200人份4-4风疹病毒IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)1200人份4-5EB病毒早期抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光免疫分析法)4000人份4-6EB病毒衣壳抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光法)4000人份4-7EB病毒衣壳抗原IgM抗体检测试剂盒(化学发光法)4000人份4-8EB病毒核抗原IgG抗体测定试剂盒(化学发光免疫分析法)4000人份4-9增强液33.12升4-10清洗液144升4-11反应杯46080个4-12光路检测试剂盒96毫升4-13免疫球蛋白A测定试剂盒(散射比浊法)315毫升4-14免疫球蛋白G测定试剂盒(散射比浊法)315毫升4-15免疫球蛋白M测定试剂盒(散射比浊法)315毫升4-16多项蛋白质控品(高值)30毫升4-17多项蛋白质控品(中值)30毫升4-18多项蛋白质控品(低值)30毫升4-19多项蛋白定标品15毫升4-20SCS清洁液150毫升4-21稀释杯46200个4-22样本密度分离液300毫升4-23样本稀释液300升4-24缓冲液300升4-25反应杯1500个4-26免疫球蛋白G1测定试剂盒(散射比浊法)72毫升4-27免疫球蛋白G2测定试剂盒(散射比浊法)72毫升4-28免疫球蛋白G3测定试剂盒(散射比浊法)96毫升4-29免疫球蛋白G4测定试剂盒(散射比浊法)96毫升4-30α肿瘤坏死因子测定试剂盒(化学发光法)9000人份4-31全自动免疫检验系统用底物液15.75升4-32探针清洗液10升4-33探针清洁试剂盒500毫升4-34一次性样本杯50000个4-35白介素-1β测定试剂盒(化学发光法)9000人份4-36白介素2受体测定试剂盒(化学发光法)9000人份4-37白介素-6测定试剂盒(化学发光法)9000人份4-38白介素-8测定试剂盒(化学发光法)9000人份4-39白介素-10测定试剂盒(化学发光法)9000人份55-1绝对计数管269.93339700人份5-2淋巴细胞亚群检测试剂(流式细胞仪法-6色)9700人份5-3CD45RA检测试剂2300人份5-4CD4检测试剂2300人份5-5白细胞分化抗原CD38检测试剂(流式细胞仪法-APC)2400人份5-6白细胞分化抗原CD3检测试剂(流式细胞仪法-APC)3500人份5-7CD25检测试剂2400人份5-8流式细胞分析用溶血素3600毫升5-9流式细胞分析用鞘液960升66-1七项呼吸道病原体核酸检测试剂盒 (双扩增法)731.487680人份6-2三项呼吸道病毒核酸检测试剂盒 (双扩增法)360人份6-3肺炎支原体/肺炎衣原体核酸检测试剂盒(双扩增法)448人份6-4甲/乙型流感病毒核酸检测试剂盒(RNA恒温扩增-金探针层析法)24000人份6-5肺炎支原体核酸检测试剂盒(RNA恒温扩增-金探针层析法)18000人份99-1人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光法)83.2310000人份9-2EB病毒核酸扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒12000人份9-3肠道病毒EV71/CA16/EV核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)1680人份9-4柯萨奇病毒A6型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)720人份9-5柯萨奇病毒A10型核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)720人份9-6甲型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)96人份9-7乙型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)96人份9-8甲型H1N1流感病毒(2009)RNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48人份9-9人感染H7N9禽流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)96人份1010-1呼吸道病毒核酸六重联检试剂盒(PCR荧光探针法)35.17960人份10-225-羟基维生素D检测试剂盒(酶联免疫法)3840人份10-3骨碱性磷酸酶检测试剂盒(酶联免疫法)960人份10-4神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒(酶联免疫法)1920人份简要技术需求或服务要求:详见第五章《采购需求》中各包技术要求。合同履行期限:详见第五章《采购需求》中各包技术要求本项目不接受联合体投标。二、获取招标文件时间:2024-02-29 至 2024-03-07 ,每天上午09:00至11:30,下午13:30至17:00(北京时间,法定节假日除外)地点:北京市政府采购电子交易平台方式:供应商持CA数字认证证书登录北京市政府采购电子交易平台(http://zbcg-bjzc.zhongcy.com/bjczj-portal-site/index.html#/home)获取电子版招标文件。并在中国通用招标网(http://cgci.china-tender.com.cn/)进行免费注册报名。售价:¥0 元,本公告包含的招标文件售价总和三、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名 称:首都儿科研究所     地址:北京市朝阳区雅宝路2号        联系方式:季老师,010-85695224      2.采购代理机构信息名 称:中技国际招标有限公司            地 址:北京市丰台区西营街1号院通用时代中心C座9层            联系方式:强文晓、孙薇,010-81168541            3.项目联系方式项目联系人:强文晓、孙薇电 话:  010-81168541
  • 专家共议《感染相关生物标志物临床意义解读专家共识》
    p   感染性疾病是严重的公共卫生问题和造成人类死亡的重要因素。大多数感染性疾病只要得到及时、准确的诊断,并给予科学合理的治疗,都有可能在相对较短的时间内彻底治愈。感染相关生物标志物的检测对感染性疾病的辅助诊断、判断预后、确定抗感染疗程与连续监测方面都有较大帮助,甚至能在一定程度上帮助区别引起感染的致病原。 /p p   近日,在南京举办的《感染相关生物标志物临床意义解读专家公识》(以下简称《共识》)媒体专访会上,中国人民解放军总医院呼吸科主任解立新教授、解放军南京总医院呼吸病研究所所长施毅教授以及浙江省人民医院检验中心主任周永列教授从不同角度对《共识》内容进行了全面、深入的解读。 /p p    strong 感染生物标志物PCT与IL-6 辅助感染性疾病诊疗 /strong /p p   “感染性疾病不能仅靠症状、体征、影像学表现作出判断,优选良好的感染相关生物标志物对于帮助临床鉴别感染与非感染、动态评价疾病严重程度和预后、指导抗菌药物的合理使用具有重要意义。”解立新教授指出,“优选感染标志物应具备的特性包括:灵敏度高,可以在感染早期即发生显著变化且不受非感染因素影响 具有高特异性,能够区分病原体类别,鉴别是否为细菌性感染 能够辅助评估感染严重程度和预后,监测治疗应答,并指导抗菌药物的使用等。” /p p   传统的细菌感染生物标志物包括外周血白细胞(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP) 积分、内毒素水平等,其或因影响因素较多、特异性不高,或因操作相对烦琐,目前临床价值有限且已不再广泛应用。C-反应蛋白(CRP)是目前在临床广泛应用的细菌感染生物标志物。作为敏感的炎症指标,CPR检测快速、便捷,其升高幅度与感染或炎症严重程度呈正相关 CRP检测还可辅助区分细菌感染和病毒感染。 /p p   此外更值得关注的是,更多优秀生物标志物如降钙素原(PCT)、白细胞介素6(IL-6)等近年也逐步在临床上开始应用,具有广阔的应用前景。施毅教授指出:“PCT作为目前临床常用的重要细菌感染生物标志物,参考意义较大 IL-6检测的相对优势则在于急性感染的早期发现。” /p p   PCT是一种功能蛋白,是降钙素合成过程中的中间产物,是无激素活性的降钙素前肽物质。《共识》指出,PCT对严重细菌感染的早期诊断、判断病情严重程度、预后、评价抗感染疗效、指导抗菌药物应用等方面都具有较高的临床价值,且对全身与局部感染具有较高诊断价值,是判断脓毒症的重要工具。 /p p   一项包含 30 个临床试验的荟萃分析证实PCT可有效辅助脓毒症的早期诊断。实验数据显示:当PCT截断值定为 1.1μg /L 时,早期识别脓毒症的敏感性为77%,特异性为79%。此外,PCT在局灶性细菌感染中往往正常或轻度升高,可辅助诊断局灶性细菌感染。同时,PCT水平可有效反映患者细菌感染严重程度,其浓度与全身性细菌感染严重程度呈正相关。 /p p   在判断脓毒症患者预后及辅助指导抗生素治疗方面,研究证实,经过有效的抗感染治疗,脓毒症患者24小时后循环中的PCT水平可降低50%,其降低程度和患者存活率升高呈正相关,而PCT水平仍继续增高或居高不下则提示预后不良 PCT检测结合临床信息能够进一步明确抗生素治疗的必要性以及优化抗生素使用流程,动态监测PCT水平可辅助抗生素治疗,检测结果可作为开始抗生素治疗的指征以及抗生素疗效判断的标准,从而显著减少抗生素暴露时间,且安全性良好。 /p p   IL-6是参与脓毒症等感染的重要炎性介质,在感染发生后很快释放入血,可作为感染程度的指标。《共识》指出,在炎症反应中,IL-6的升高早于其他细胞因子,也早于CRP和PCT,2小时即达峰值且持续时间长,因此可用来辅助急性感染的早期诊断。 /p p   《共识》强调,没有任何一个生物标志物是绝对敏感又绝对特异的,不能单凭某个生物标志物的改变来诊断疾病,只有结合、参照患者的临床表现与其他实验室检查结果,才能作出正确的判断。施毅教授指出:“多个指标的联合检测将是未来的发展趋势,可提高对感染性疾病的早期诊断率和预后判断价值。”PCT联合IL-6检测可用于细菌性感染辅助诊断,避免单一指标对感染类别判断的误差,从而帮助临床医师快速确定患者的治疗方案、提高治疗成功率,具有重要的临床应用价值。 /p p    strong 电化学发光分析法,提升生物标志物临床价值 /strong /p p   “好的生物标志物需要有好的检测方法来实现临床价值,PCT与IL-6的临床运用需要以精准的检验结果作为有力支撑。此次《共识》反映了临床需求,为检验科在感染生物标志物的检测和质量控制技术的发展指明了方向。”周永列教授表示,“在选择检测系统时,控制总误差及校准品溯源性是检验结果准确性的关键所在,同时要重视检测系统的性能验证,做好质量控制。” /p p   《共识》指出,罗氏诊断ElecsysR BRAHMS PCT是国内外最常用的PCT检测之一,其使用电化学发光法技术,使检测结果高度一致且具有可溯源性,仅需18μl样本量,就可在18分钟内实现0.02~100ng/ml的检测范围。同时,其拥有优秀的批内和批间精密度,可适用于所有罗氏诊断免疫分析平台,实现高度一致性的检测结果。联合ElecsysR IL-6检测,有助于临床医生早期发现感染,实现鉴别诊断、疗效监测、预后评估,进而改善治疗决策,提高感染性疾病治疗的成功率。 /p
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