活细胞成像

• 什么是活细胞成像？ 活细胞成像(live cell imaging)统称为捕捉活的、活动状态的细胞图像的技术，这些细胞图像可以是单个静态图像，也可以是延时系列图像。相应地，活细胞成像的应用可以分为两大类：❶ 细胞在自然状态下的图像记录。❷ 实时观察和记录细胞、组织或整个生物体的动态过程。• 观察分析活细胞时面临的挑战 ▷ 在相对较短的时间内采集大量信息。▷ 要保持细胞保存在可调节培养环境气体浓度和温度（在很多情况下）的培养室中。▷ 激发光源会损害活细胞。▷ 细胞焦面漂移，无法聚焦。▷ 需要使用配备有软件或硬件控制自动对焦的成像仪器来避免这种情况。Revolution全自动显微镜成像系统Revolution全自动显微镜成像系统部件高度集成内置，节省空间，避免繁琐调试及维护；触屏式操控观察工作站，界面直观简洁，易于学习，方便使用。Revolution全自动显微镜成像系统的光源采用高能LED光源，自动荧光切换把光毒降到最低。▌智能化全自动多功能系统：▶ TimeLapse延时摄影：可以根据设定在特定时间内完成特定间隔时间和特定的拍照张数。▶ 独有的Hyperscan快速成像：30帧高速成像，可以在几秒钟内完成上百张照片的采集。▶ Multi-well Point孔板导航成像：不限定孔位大小，只需输入参数就可以自动完成多孔或单孔采集。▶ Focus Map自定义多点聚焦：可以自动完成不同层面的自动聚焦。▶ Z-Stacking多层扫描大景深成像：完成多层面大景深成像。▶ DHR智能实时数字化降噪：实时完成反卷积计算，得到清晰图像。▌ECHO INCUBATOR为活细胞观察提供一个稳定而灵活的培养环境ECHO INCUBATOR采用紧凑的一体式设计，方便用户快速安装和拆卸。箱体结构透明和大型前置开门设计，可为用户提供清晰的观察视野并方便操作样本。采用无风扇对流加热和循环热空气方案，在消除振动的同时并可防止外部灰尘进入您的样品和仪器光学元件。提供稳定的细胞生长环境，确保适合的细胞培养条件，使细胞处于最佳生长状态。

近日，华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室及光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心教授杨弋团队和浙江大学研究员任艾明团队合作，在活细胞RNA成像技术研究中取得突破性进展，相关研究在线发表于《自然-方法》。RNA是活细胞中最重要的生物大分子之一，它不仅能将遗传信息从DNA传递到蛋白质，还在各种细胞生命活动功能调控方面发挥重要作用。活细胞中的RNA是高度时空动态变化的，它们往往需要在特定时间、空间和丰度下才能执行正确的生物学功能。因此，发展活细胞RNA成像技术对于探究RNA的复杂时空动态变化规律和生物学功能至关重要。荧光RNA是近年新兴发展的RNA荧光标记与成像技术，其原理是利用RNA适配体作为标签，特异性结合小分子染料并激活其荧光。相较于其他RNA标记与成像技术，荧光RNA具有操作简单直接、对靶标RNA干扰小、信噪比高等优点。研究人员只需要将靶标RNA序列与荧光RNA适配体序列融合，加入染料配体即可实现靶标RNA的低背景原位实时标记与成像。杨弋与朱麟勇组成的交叉学科联合攻关团队此前发展系列高性能荧光RNA，在国际上首次实现高等生物细胞内不同种类RNA的原位标记与高信噪比成像，成功解决了活细胞RNA实时标记与成像的难题。然而，许多细胞生命过程需要多种RNA分子同时参与。因此，亟需发展具有生物正交的高性能荧光RNA来实现活细胞内多种RNA分子的同时标记与成像，进而解析它们的功能与调控机制。针对这一挑战，联合团队基于全新的分子设计理念与分子共同定向进化策略，发展了国际上首个可用于细胞成像的大斯托克斯位移荧光RNA，实现了活细胞RNA与基因位点的单激光双发射多色实时成像，并进一步在活细胞与活体动物上完成了RNA-蛋白质相互作用的实时监测。研究人员发展出一种Clivia荧光RNA适配体，它由30个核苷酸构成，同时结合不发光的染料分子，进而激活高亮度荧光。通过对染料分子进行修饰改造，该团队成功获得了光谱涵盖黄色到红色系列高亮度荧光RNA，再结合两种荧光RNA光谱特性，利用单色激光实现了两种活细胞RNA或基因位点的荧光成像。受益于Clivia小巧的结构，这种成像方式可被插入到多种小核RNA序列中，在不影响这些RNA本身定位与功能的情况下，实现高信噪比原位实时RNA标记与动态成像。研究人员随后发展了RNA-蛋白质相互作用检测技术，首次实现了活体动物中RNA-蛋白质相互作用的原位实时检测。Clivia具有高稳定性、高信噪比、高亮度，是目前唯一可用于活细胞分析的大斯托克斯位移荧光RNA，也是唯一可在活体上对RNA动态进行测量的荧光RNA。Clivia将为活细胞与活体RNA的多色成像以及RNA功能与调控机制研究提供极具价值的实用工具，也有望为活细胞与活体生物传感、即时诊断甚至实时诊断技术的发展提供新的机遇。

近日，华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展，相关研究在《细胞发现》发表。 人造荧光蛋白及荧光探针。华东理工供图生物过程可视化一直吸引着科学家的好奇心。不同类型的荧光成像工具可以帮助科学家观察生命体中多种生物事件的发生过程，其中最著名的是荧光蛋白标记技术。荧光蛋白及其衍生技术经历了近30年的飞速发展，为生物学各个领域的研究作出了极大贡献，但伴随着显微镜技术的飞速发展，现有荧光蛋白的性质已经难以适应新型仪器的成像要求。相比之下，基于蛋白质标签和激活型荧光团的荧光标记工具凭借其理化性质成为新的研究热点。该团队针对自催化蛋白质标签SNAP-tag，设计开发了高信噪比的青色人造荧光蛋白SmFP485。SmFP485的荧光产生十分迅速，避免了荧光蛋白生色团成熟导致的延迟，因此可以用于实时监测蛋白质的合成过程。研究团队随后对SmFP485的结构进行了解析，探究了人造荧光蛋白的荧光激活原理。在此基础上，研究团队通过化学进化方法设计出一系列光谱覆盖绿色到近红外波段的人造荧光蛋白，它们均具有高亮度和高信噪比特点，特别是其在近红外波段的亮度已远超现有成像工具，能够对活细胞以及活体动物中的蛋白质表达、蛋白质降解、蛋白质组装、蛋白质相互作用以及蛋白质运输进行原位实时标记与成像。最后，研究团队在多色人造荧光蛋白的基础上，采用蛋白质与荧光团共进化的方法设计开发出一系列光谱涵盖青色到近红外波段的钙离子遗传编码荧光探针，实现了对哺乳动物细胞中钙离子震荡的实时监测，为荧光探针的构建提供了新的荧光载体。综上，研究团队开发了一系列高性能人造荧光蛋白，它们具有荧光产生迅速、亮度高、信噪比高、光谱范围广等优点，为活细胞以及活体动物中蛋白质的可视化提供了有力工具，同时也为荧光探针的构建提供了新的思路和策略。

预计到2019年，全球活细胞成像市场将达54.5亿美元, 2014年该市场规模为35.7亿美元, 2014年到2019年之间的复合年增长率为8.8%。 　　市场的主要贡献来自于北美,其次为欧洲、亚洲和世界其他地区。在此期间预计亚洲增长速度最快。 　　活细胞成像包括利用显微镜和高内涵筛选系统获得的活细胞图像的研究。它已经成为单细胞生物机制和动态功能研究的受欢迎的分析工具。 　　全球市场可以按照产品、技术、应用和地区进行划分。基于产品，市场可以划分为设备、耗材、软件。2014年,设备部分占的市场份额最大。设备可以进一步划分为显微镜、独立的系统、细胞分析仪、影像捕获设备。2014年活细胞成像设备市场中,显微镜占比最大。耗材进一步划分为检测试剂盒、试剂、培养基等。其中，检测试剂盒占了耗材市场最大的份额。 　　在技术方面, 活细胞成像市场可以划分为荧光共振能量转移(FRET)，荧光原位杂交(FISH)，高内涵分析(HCA)，荧光光漂白恢复(FRAP)，比率成像、全内反射荧光显微术(TRIF)，多光子激发显微镜(MPE)以及其他技术。荧光共振能量转移(FRET)技术占最大的市场份额。 　　根据应用,活细胞成像市场可以划分为细胞生物学、干细胞、发育生物学和药物发现。2014年，细胞生物学市场份额最大。 　　有望刺激这个市场的关键因素包括：全球单克隆抗体需求的增加、制药和生物技术公司研发支出的上升。此外，新兴的亚洲市场,高内涵筛选逐渐成为主要的筛选手段，个性化医疗中活细胞成像技术应用的增加等可能会给市场带来巨大的机遇。然而，高内涵筛选系统的成本和知识渊博的专业技能人员的缺乏等可能会阻碍这个市场的增长。 　　全球市场中主要的厂商包括Carl Zeiss AG (Germany)、Leica Microsystems (Germany)、 Nikon (Japan)、 Molecular Devices (U.S.)、 PerkinElmer.(U.S.)、 GE Healthcare (U.K.)、 Becton, Dickinson and Company (U.S.)、Olympus Corporation (Japan)、 Sigma-Aldrich (U.S.)、Thermo Fisher(U.S.).

p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 活细胞成像技术已成为全球生命科学研究技术中必不可少的组成部分。经过多年发展，活细胞成像技术让科研人员的研究更加容易，如药物发现。此外，由于生物成像相关产品在各个研究领域中的广泛应用（如用于创建3D细胞建模、实时监测细胞的健康状况等），相应消耗品和售后服务产品的市场需求有所增长。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 432px height: 216px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/647ed1ca-de53-4a16-8c39-5103af00845a.jpg" title=" cells-1872666_640.jpg" alt=" cells-1872666_640.jpg" width=" 432" height=" 216" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 图片来源于网络 br/ /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 2019年11月，IBO的出版商国际战略方向（Strategic Directions International）发布了《2019年活细胞成像市场报告》，该报告研究了活细胞成像市场趋势、区域分布和行业需求。该报告将活细胞成像仪器分为五个技术领域： strong 光学显微镜，共聚焦显微镜，高级显微镜，高内涵分析 /strong 以及 strong 分析与标记 /strong 。报告还概述了提供这些技术的领先公司，其中包括徕卡显微系统公司（丹纳赫旗下）、蔡司、尼康、赛默飞和奥林巴斯等。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 435px height: 289px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202001/uepic/f8f2dfc7-c0b7-4ea3-a576-cdb87d8f1bd4.jpg" title=" 徕卡TCS SP8.png" alt=" 徕卡TCS SP8.png" width=" 435" height=" 289" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em text-align: center " 徕卡 TCS SP8激光扫描共聚焦显微镜 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 根据该报告， strong 2018年活细胞成像市场估计超过13亿美元，预计到2023年将实现高个位数销售额增长，达到19亿美元 /strong 。高级显微镜，高内涵分析系统和光学显微镜将占比最多。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 高级显微镜、分析与标记技术预计将成为增长最快的两个领域，到2023年，两者的销售额都将以高个位数增长。徕卡显微系统公司，蔡司和LaVision BioTec是提供高级显微镜产品的领先公司，而Bachem，Essen和赛默飞是分析与标记业务的领导者。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 在高级显微镜技术领域，由于供应商引入了改进的商业系统， strong 多光子和光片显微镜技术是主要的收入驱动力 /strong 。此外，服务和售后产品也为该技术行业的市场收入做出了贡献。成像分析和标记试剂技术领域涵盖了活细胞成像消耗品的最高百分比，成像分析占消耗品子市场的五分之一。标记试剂的需求源于不断的创新。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 从地域上看，2018年， strong 美国和加拿大、欧洲是活细胞成像技术的两个最大区域市场，中国是增长最快的区域 /strong 。这些地区的科研市场、制药和生命科学等终端市场对活细胞成像产品均具有高需求。该报告预测，到2023年，上述三个地区的销售增长将以高个位数增长。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " 在终端市场方面， strong 制药/生物技术、科研市场以及政府终端市场在2018年的活细胞成像销售额中占最大份额 /strong 。科研市场和政府终端市场利用活细胞成像工具来研究细胞过程并记录定性数据。除了制药/生物技术领域使用该技术进行生物药物、治疗药物的开发，该报告还指出，由于个性化用药和癌症治疗的应用需求增加，医院和诊所对活细胞成像工具的需求将增加。 /p p style=" text-indent: 2em margin-top: 10px margin-bottom: 10px line-height: 1.5em " strong 2017年-2019年，并购也是活细胞成像市场销售额增长的组成部分 /strong 。布鲁克于2017年以未公开的价格收购了光片显微镜制造商LUXENDO，以使其高级显微镜产品组合多样化。明年，布鲁克通过收购生物分子和细胞成像显微镜的供应商JPK Instruments来扩大其原子力显微镜的技术能力。今年，细胞成像板读取器制造商BioTek被安捷伦科技公司以12亿美元的价格收购。 /p

活细胞荧光成像是生命科学中不可或缺的研究工具。在荧光成像实验中，研究人员通常需将一个荧光团连接于细胞中的目标生物分子上。常用的荧光团包括荧光蛋白、量子点和小分子荧光染料等。其中，尺寸最小的小分子染料约为几个纳米，而多数生物分子本身的尺寸即在纳米级别。因此，如何进一步减小荧光团的尺寸，从而降低荧光标记对目标分子生物学功能的干扰是活细胞成像技术发展的一大挑战。 　　最近，生命科学联合中心陈兴研究组与北京大学生物动态光学成像中心黄岩谊研究组合作，开发了一种全新的活细胞成像技术，突破了成像标记基团的尺寸极限。为了实现这一目标，他们转向探索另外一种成像模式，即受激拉曼散射显微成像(Stimulated Raman Scattering Microscopy, SRS)。拉曼散射技术检测入射光与分子运动相互作用而引起的频率变化。一个化学键的振动即可产生特定的拉曼散射信号。基于这一特点，拉曼标记基团理论上可以小到一个化学键。 　　为了实现这一设想，两个研究组合作，发展了一种命名为&ldquo 生物正交受激拉曼散射成像&rdquo 的技术。自发拉曼由于散射截面小、灵敏度低，在生物成像的应用上受到很大的限制。近年来出现的受激拉曼散射成像技术极大地提高了成像的灵敏度和速度。在这项工作中，他们正是采用了这一前沿拉曼成像技术。同时，他们采用炔基作为拉曼报告基团。炔基的碳碳三键长0.12纳米，并具有较大的拉曼散射截面。更为重要的是，炔基的拉曼信号落在了细胞的&ldquo 拉曼静默区&rdquo (细胞中天然生物分子在1800 cm-1至2800 cm-1区间没有拉曼信号)。因此，炔基报告基团几乎没有背景干扰，即在拉曼光谱上&ldquo 生物正交&rdquo 。结合炔基代谢标记生物分子技术和受激拉曼显微成像技术，他们成功实现分子特异地标记成像活细胞的脂类、核酸、蛋白质和糖类。这一研究成果于近期发表于Angew. Chem. Int. Ed. (DOI: 10.1002/anie.201400328)。这项工作为活细胞成像提供了一种全新的技术，有望开启一系列荧光成像难以实现的研究。 　　北京大学博士研究生洪森炼和陈涛为该论文共同第一作者。该工作得到了国家自然科学基金委员会和科技部的资助。

2023年8月12日，由清华大学蛋白质研究技术中心、生物医学测试中心和中国细胞生物学学会细胞器生物学分会共同举办的为期6天的【第四届活细胞与超高分辨成像高级研讨会】在清华大学生物医学馆圆满结束。参会人员合影8月7-9日的理论研讨部分，来自清华大学、北京大学、中国科学院、中国科学技术大学、北京脑科学与类脑研究中心、西湖大学的十位专家就他们在活细胞、超分辨、单分子成像、透明化、光片成像和图像处理领域的研究和应用做了深入详尽的报告，为参会者带来一场视听盛宴。报告嘉宾及主题除此之外，清华大学也邀请了当前热门技术如空间组学、全息断层、高内涵、荧光寿命等厂家代表进行了成像技术原理和应用的介绍，并围绕超分辨成像、高内涵与活细胞、光片与光声、扫描与转盘共聚焦、图像处理等模块开展了上机操作培训，让参会人员可以实现活细胞与超分辨成像领域的跨越式成长。安捷伦作为清华大学的设备供应商和中国细胞学学会企业会员，深度参与了本届高级研讨会。安捷伦细胞分析事业部产品应用经理王慧，以【活细胞与高内涵成像领域的闪耀新星——CytationC10Technology】为主题介绍了集成化活细胞转盘共聚焦成像系统的原理与应用，通过1活细胞成像过程中如何降低光猝灭/光毒性？2样本量大，筛选速度慢怎么办？3动力学实验，是不是需要熬夜做实验？三个问题，将CytationC10+BioSpa8自动化共聚焦活细胞成像系统的特点、应用和给用户带来的便利性娓娓道来。安捷伦细胞分析产品应用经理王慧做会议报告CytationC10的技术特点吸引了众多参会者到蛋白质研究技术中心影像平台观摩仪器，其中不乏带着样本的老师来体验CytationC10的灵活应用。CytationC10+BioSpa8智能化共聚焦活细胞成像分析系统CytationC10+BioSpa8，能够在一个实验周期内对8块孔板样本相同或者不同实验条件的动力学成像与分析。CytationC10上机实操培训王慧带领上机操作培训的老师们体验了明场观察，Beacon定位，激光聚焦以及共聚焦多色荧光多视野图像拍摄，老师对图像质量和多视野图像拼接结果非常满意，随后，王慧又向老师们演示了图像分析功能，老师们对Gen5软件的直观性、易用性和灵活性给与很高的评价。上机操作的过程中，王慧与老师们还深入探讨了关于活细胞成像标记方法、荧光探针设计和药物筛选等话题。如果您对CytationC10共聚焦细胞成像分析系统和BioSpa自动化孵育器感兴趣，请您扫描下方二维码留下您的联系方式。

2018年10月23日，美国Etaluma CEO Chris Shumate, PHD来访锘海生命科学。Etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope可广泛应用于各类活细胞，细胞球体，组织，切片，微流控，细菌，活体成像。Dr. Shumate 给大家进行了专业的显微成像原理，Etaluma对比传统显微镜的优势，以及应用方向等的培训。大家就建立市场合作、了解中国客户需求、在各地高校进行巡回演讲等进行了深入的探讨和学习交流。关于Etaluma全自动活细胞成像系统 Lumascope美国的etaluma公司的全自动活细胞成像系统Lumascope，还可以放入培养箱内进行长时间的活细胞成像观察，保证细胞稳定的生长环境。同时也适用于观察动物、植物组织以及活体。形态小巧可便携式携带，可放入超净台中，自由组合度高。它光路设计简单，灵敏度高，成像质量好，媲美传统共聚焦显微镜。同时该显微镜可以做三色荧光（红、绿、蓝），物镜选择范围1.25X-100X，支持Z轴成像。支持培养皿，培养瓶，载玻片以及微孔板，并且通可以做1536板。其配套显微成像分析软件Lumaquant操作简单，功能强大。Lumaquant可以帮您实现在荧光，在相差和明场成像中2D以及长时间2D图像的分析，可实现检测和跟踪物体（细胞，细胞核，颗粒等）。欢迎参加慕尼黑生化展，现场测样！案例分享BPAE细胞里的DNA，alpha微管蛋白，以及F-肌动蛋白使用LS620拍摄的BPAE细胞里的DNA（蓝），alpha微管蛋白（绿），以及F-肌动蛋白（红）。使用奥林巴斯40x镜头，LifeTech FluoCell slide #2。 小鼠肾脏组织切片细胞球体形成心肌细胞钙流信号检测相差成像关于锘海：锘海生物科学仪器（上海）股份有限公司（Nuohai Life Science）成立于2004年，总部设在上海，并陆续在北京，广州，成都等地设立了8个办事处。锘海致力于提供先进的实验/研究与生产仪器、相关试剂耗材, 并提供专业的应用和技术服务支持。不断促进生命科学领域新技术发展，及时引进国外最新的技术和产品。同时，锘海生命科学为科研及企业客户提供全方位的CRO/CMO 服务，满足产业中的研发和生产需求。

华中科技大学光电国家实验室生物医学光子学功能实验室张玉慧教授研究团队通过对细胞穿膜肽的研究，利用其运载能力将不能透膜的荧光染料及特异性识别基团携带进入活细胞，突破以往光激活荧光化学探针中荧光染料及识别基团本身需要透膜的限制，为活细胞超分辨成像化学探针的构建提供了一种新策略。 　　2014年11月20日，张玉慧教授和黄振立教授的合作研究成果&mdash &mdash 论文&ldquo 用于活细胞超分辨成像的透膜光激活有机荧光探针构建新策略&rdquo (A general strategy for developing cell-permeable photo-modulatable organic ?uorescent probes for live-cell super-resolution imaging)在《自然&bull 通讯》(Nature Communications)发表。 　　张玉慧教授研究小组在国际上首次将细胞穿膜肽引入光激活荧光探针的构建中，得到了一系列新型透膜靶向光激活荧光化学探针，实现了在活细胞内对内源蛋白的直接特异性标记。与黄振立教授研究小组合作，利用其建立的TIRF超分辨成像系统及PALMER高密度定位算法，对活细胞内的溶酶体及肌动蛋白进行了超分辨成像，并在活细胞内首次记录了肌动蛋白重新排列的动态过程。该研究中的透膜靶向光激活探针是国际上首类能实现对活细胞内的内源蛋白直接进行标记的光激活荧光探针，在活细胞超分辨成像领域有着广阔的应用前景。 　　超分辨光学成像技术主要包括受激发射损耗显微术(Stimulated emission depletion microscopy，简称STED)和基于单分子定位的超分辨成像技术(Single-molecule localization microscopy，包括PALM，STORM等)。两种技术均突破了光的阿贝/瑞利极限，实现了在细胞内进行纳米尺度的光学检测。PALM与STED技术共同获得2014年诺贝尔化学奖。而PALM，STORM等的单分子定位超分辨成像技术的应用极大地依赖于光激活荧光探针。 　　此项工作由武汉光电国家实验室生物医学光子学功能实验室潘登、胡哲、仇丰武、黄振立、马意龙、王伊娜、秦岭松、张智红、曾绍群、张玉慧(通讯作者)共同完成。 　　该研究得到了国家&ldquo 973&rdquo 计划、国家自然科学基金创新群体、国家自然科学基金面上项目的支持。

记者从中国科学技术大学了解到，该校工程科学学院Zachary J. Smith教授团队与合作者一起，提出了一种基于线扫描拉曼成像系统和偶氮增强拉曼探针相结合的快速生物成像方法，实现了对细胞器动态过程的高分辨率、低功耗的影像。相关研究成果日前在线发表于学术期刊《美国化学学会杂志》。拉曼成像是一种无标记的单细胞分析技术，能够从分子水平获得细胞的结构和组成信息，广泛应用于生物医药研究领域。然而，拉曼散射截面十分微小，通常需要在高激光照度下历经数小时才能获得一帧细胞拉曼图像，无法捕捉到细胞器的时空演变信息。拉曼探针作为另一种拉曼信号增强方法，具有细胞可透过性、靶向性、低毒性等特点，但是常见的炔烃标记的拉曼探针还无法满足高分辨率的快速细胞动态成像。为此，研究人员设计了一种动态偶氮增强拉曼成像系统，能够实现对细胞器动态过程的高分辨低功耗快速拉曼成像。研究人员采用了一种新型的超灵敏共振拉曼探针，即偶氮增强拉曼散射探针，在极大提高拉曼信号的同时，能够抑制荧光背景，相对拉曼强度提高了3-4个数量级。结合自主设计的线扫描自发拉曼成像系统，实现对偶氮增强拉曼探针标记后的活细胞中多种细胞器的快速拉曼成像，并且能够获得全拉曼光谱信息。

p 　　近日，中国科学院上海应用物理研究所物理生物学研究室与加州大学圣地亚哥分校合作，发展了一种基于金纳米粒子的荧光-纳米等离子体双模态成像fPlas探针，并对其在胞内运输中的聚集过程及聚集态对其传输动力学的影响开展研究。相关结果发表于《自然-通讯》(Nature Communications, 2017, 5, 15646)。 /p p 　　胞吞及囊泡运输是细胞信号传导和能量交流的重要生理过程。其中，纳米粒子的胞吞和胞内运输过程研究是设计新型纳米药物载体和纳米诊疗方法的基础。物理生物学研究室的博士研究生刘蒙蒙和副研究员李茜等在研究员樊春海和加州大学教授Lal的指导下，通过发展fPlas探针实现了在单细胞水平半定量研究纳米粒子聚集状态的方法，可以清晰区分活细胞中呈单分散、小聚集体和大聚集体的金纳米粒子，并与暗场显微镜下的绿色、黄色以及亮黄色颗粒信号分别对应。他们进一步通过纳米等离子体成像与荧光成像的联用，实现了活细胞内纳米粒子聚集状态与定位信息同时获取。对金纳米粒子在细胞内通过微管进行运输，并且对在运输过程中发生逐步聚集的过程进行了实时成像，发现其聚集状态对相关囊泡的运动状态有重要影响。这一研究结果揭示了纳米粒子在细胞内的运输与其聚集状态直接相关，为设计新型纳米药物提供了新的思路和靶点。 /p p 　　 center img width=" 500" height=" 279" alt=" " src=" http://www.cas.cn/syky/201706/W020170614416182049650.jpg" / /center p /p p style=" text-align: center " & nbsp 上海应物所在金纳米粒子活细胞成像和胞内运输方面取得进展 /p /p

明美活细胞成像仪荣获红点奖，创新实力再获国际认可！备受瞩目2024年度“红点奖”奖项名单已于近日揭晓，Mshot明美自主研发的活细胞成像仪在众多设计中脱颖而出，荣获这一国际性设计大奖。这不仅是明美在科技创新方面取得的又一重要成果，更是国际设计界对中国制造的高度认可。红点奖作为全球工业设计领域的顶级奖项之一，素有“设计界奥斯卡”之称。其评选标准非常严苛，注重产品的创新性、实用性以及设计美感。明美活细胞成像仪能够获此殊荣，充分展现了其在显微镜设计领域的实力和地位。明美活细胞成像仪是一款集高科技与人性化设计于一身的先进科学仪器。它采用了优异的显微技术，能够实时观察和记录活细胞的行为和特征，为科研人员提供高清晰度、高稳定性的细胞图像和视频。同时，其人性化的操作界面和强大的软件功能，使得科研人员能够轻松地进行细胞筛选和操作，提高了工作效率。此次荣获红点奖，不仅是对明美活细胞成像仪设计理念的肯定，更是对明美在显微镜制造领域多年努力的认可。明美一直致力于为全球科研工作者提供高质量、高性能的显微观察解决方案，推动科学技术的发展。未来，明美将继续坚持以创新为核心，不断提升产品的科技含量和设计品质，为用户带来更加优越的使用体验。让我们共同期待，明美在未来能够创造更多辉煌的科技成果，为推动人类社会的进步贡献更多的力量！免责声明本站无法鉴别所上传图片、字体或文字内容的版权，如无意中侵犯了哪个权利人的知识产权，请来信或来电告之，本站将立即予以删除，谢谢。

多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT，是将原子力系统、微流控系统、细胞培养系统合为一体的单细胞操作系统，采用不同孔径的微型纳米注射器，可实现单细胞注射（Injection）、活细胞内物质提取（Extraction）、单细胞分离（Isolation）、粘附力测定（Adhesion）、纳米打印(Nano-printing)等多种功能，更多功能及应用请参考如下文章。点击了解更多详情：多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT的原理与应用介绍本次讲座与培训将介绍FluidFM技术的原理及应用，着重讲解在活细胞单细胞组学领域的进展，Live-Seq技术可直接在活细胞无损提取细胞内容物进行测序工作，能够提供更加原生和真实的测序信息，让单细胞的基因表达动力学研究成为可能。报告信息：应用讲座：5月25日北京大学金光楼311上午09:30—10:30上机培训（扫码报名，名额有限）：5月25日北京大学金光楼126下午13:00—17:30报告人: 胡西 博士报名注册：点击此处或扫描下方二维码即可报名扫码即刻报名报告人简介：胡西，Application Scientist of Quantum Design China，加州大学洛杉矶分校博士后。主要负责单细胞显微操作设备的技术支持和市场推广活动，并具有丰富的流体力显微镜（FluidFM）的操作经验。主办单位：凤凰工程北大基地光学成像平台协办单位：Quantum Design 中国科研进展文章导读：单细胞测序在疾病诊断和细胞异质性研究中发挥着重要作用。然而目前的单细胞测序手段需要将细胞消化并裂解才能够进行，而细胞状态在这一操作中不可避免的会发生改变，因此很难掌握细胞真实的基因表达情况， 尤其对于基因通路上表达变化的检测为不利。近期苏黎世联邦理工学院使用FluidFM创建了一种原位活细胞基因测序方法，这种方法能够在不杀死细胞的情况下完成对细胞的测序工作。通过这种技术该团队成功完成单细胞RNA基因测序，并通过这种方法检测到了细胞的基因表达和细胞周期状态变化。下面本文就这项工作的具体内容进行阐述。1. Live-Seq测序技术简述由于单个细胞的RNA总量仅有10 pg。为了实现无损的单细胞测序，该团队先使用FluidFM对现有的scRNA-Seq单细胞测序的方法进行了优化。为了尽可能的接近Smart-Seq的测试条件，该团队采用了先将缓冲液吸入探针，然后再进行细胞提取的操作。这样可以确保所提取的RNA能够先与缓冲液混合，从而避免RNA的降解。通过这一方法，该团队成功实现了IBA细胞的测序，证明了这种方法的可行性（图1）。图1. Live-Seq技术a. Live-Seq技术的示意图和代表图片，黑色箭头指代液面；b. IBA细胞测序的质量控制图（n=10）。2. Live-Seq技术分析细胞系和细胞状态为了证实Live-Seq的有效性，该团队对多种细胞系进行了测序，这其中包括IBA细胞、小鼠脂肪干细胞和祖细胞（ASPCs）以及脂多糖处理的RAW264.7细胞和Mock处理的RAW264.7细胞。通过对这些细胞系进行测序发现，该方法能够区分上述细胞系，并且在特征基因检测中能够找到每种细胞所对应的特征基因，证明了Live-Seq方法的有效性（图2）。图2. Live-Seq单细胞测序区分细胞型及细胞状态a. 实验方法示意图，使用LPS和PBS对RAW细胞进行处理；b. 前500个高度易变基因的tSNE图；c. 前十的细胞型、细胞状态差别基因的热图；d. 小鼠基因图谱预测，使用前100个标记基因的团簇；e. Live-Seq对比scRNA-Seq的锚点分析，显示两者没有显著差异。3. Live-Seq技术对细胞的活力基本没有影响Live-Seq技术的优势在于提取过程中不会破坏细胞。通过对提取前后的测序对比可以发现，提取组与空白组之间的团簇没有显著性差异。并且通过对细胞形态的观察中，发现细胞的形态基本没有改变，并且多数细胞仍然能够正常分裂（图3）。图3. Live-Seq对细胞活力的影响a. 细胞实验的示意图；b. Live-Seq测序后不同时间点（1h,4h）的scRNA-Seq的tSNE图；c.不同时间点scRNA-Seq所有能够发现差异的基因（共12个）；d.不同时间点的细胞形态图片。4. Live-Seq技术能够记录细胞下游分子表型事件由于Live-Seq对细胞生理状态影响小，因此能够监测在细胞代谢过程中的基因变化。通过对比LPS处理的巨噬细胞周期实验中发现，Live-seq技术与对照组的细胞代谢水平相比没有明显变化，因此这种方法测量的数据十分接近细胞代谢中基因表达的真实水平。通过测序对比LPS处理与空白的测序结果发现Nfkbia与Tnf的表达为相关。这一结果也验证这种测序方法在检测细胞下游表型时的优势。图4. Live-Seq技术的单细胞纵向分析a. 实验示意图；b. 不同处理细胞的mCherry强度变化；c. 3~7.5h之间mCherry强度变化；d. Tnf-mCherry强度变化的线性回归模型；e. Nfkbia与Tnf在Live-Seq测序中的表达关系；f. Nfkbia与Tnf在scRNA-Seq测序中的表达关系；g. Live-Seq测序中细胞处于S期的评分；h. Live-Seq测序中细胞周期的mTnf-mCherry强度变化；i.Tnf-mCherry的荧光强度增量（3~7.5h）。5. Live-Seq技术对同一细胞多次测序Live-Seq技术的无损性甚至能够实现对单个细胞的多次测序。通过对单个细胞两次提取后细胞活力变化的观察中发现，细胞的活力即使在2次提取后仍没有发生明显的变化，基因型分析也没有发现明显的基因表型改变。图5. Live-Seq对细胞的多次提取j.连续测序的示意图和代表图像；k.Live-Seq的tSNE图；l.整合Live-Seq和scRNA-Seq的tSNE图。6. 总结Live-Seq是一种十分具有前景的单细胞测序的新方法，得益于FluidFM技术的无损提取的优势，Live-Seq技术除了能够实现传统测序的功能外，还降低了细胞的损伤，能够提供更加原生和真实的测序信息。这种特点甚至让单细胞的基因表达动力学研究成为可能。相信随着这种技术自动化的提高，将为单细胞测序技术带来更多可能。参考文献：[1]. Genome-wide molecular recording using Live-seq, Wanze Chen, Orane Guillaume-Gentil, Riccardo Dainese, Pernille Yde Rainer, Magda Zachara, Christoph G. Gäbelein, Julia A. Vorholt, Bart Deplancke, bioRxiv 2021.03.24.436752；doi: https://doi.org/10.1101/2021.03.24.436752

近年来，红外光谱和显微成像技术有了突飞猛进的发展,尤其是在生命科学领域，得益于红外光谱技术对于分子结构的敏感性，其能够在无任何标记的情况下实现对生物样品成分的鉴定和分布解析，这对于不便于荧光标记的一些生物样品鉴别十分有利。然而目前大多数的红外光谱空间分辨率受限于红外光的衍射限，只有10-20 μm，且依赖于红外光波波长。另外多数红外检测设备对于生物样品制样过程也有着严格要求，如样品切片厚度，细胞和组织尺寸，含水量，需要荧光染色等，这对于生命科学研究非常不利。 针对上述问题，美国photothermal spectroscopy corp公司经多年潜心攻关，研发出非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统—mirage，该设备凭借其有的光学光热红外（o-ptir, optical photothermal infrared）技术克服了上述问题，将红外光谱的空间分辨率提升至亚微米（~500 nm）；无需制备薄片，直接测试较厚样品，大地简化了制样过程、提高测试效率；同时可实现无接触式地快速简易测量，有效避免了传统atr模式下的散射像差和交叉污染。且该设备在反射模式下所得谱图与透射模式下ftir完全一致，还可以选配透射模式，十分适用于液体样品和一些特殊混合样品，大的扩展了光热红外在生命科学领域的应用范围(如图1所示)。这项先进技术让mirage有别于传统的红外测试设备，能够对生命科学领域的常用样本，诸如细胞爬片，病理组织切片，单细胞细菌等有良好的兼容性，并让活细胞观测成为可能。除此之外，mirage还可与拉曼光谱进行联用，实现同时同地相同分辨率的ir和raman测试，且无荧光风险，能够帮助研究者更快速全面的确定所分析生物样品的化学组成信息。图1. o-ptir光学光热红外显微镜，工作原理及钙化乳腺组织的o-ptir红外成像图 光学光热红外o-ptir在生命科学领域应用的显著优势：1.亚微米的空间分辨率；2.可直接获取液体中活细胞的红外成像；3.灵敏度高，可直接观测单细胞 (如细菌、哺乳动物细胞等)；4.无米氏散射干扰，即使在细胞边缘也不受影响；5.高的光谱分辨率；6.无需直接接触即可测量软组织的红外光谱；7.可实现红外和拉曼同步测量；8.可实现超过10 μm厚的样品测试，直接置于载玻片上观察分析；9.可配置化的红外光源；典型案例分析：1.感染疟原虫的红细胞表征 疟原虫属寄生虫引起的疟疾是威胁生命的主要疾病之一，而疟原虫引发的感染周期十分复杂，因此在细胞和分子水平观察疟原虫的变化对于研究疟原虫的致病有着重要意义。agnieszka m. banas等人通过使用o-ptir对疟原虫感染的红细胞在亚微米尺度的分子特征变化进行了表征，结果显示正常红细胞的蛋白呈现环状分布，而感染后的红细胞蛋白质则呈现无规则分布。通过对比传统ftir与基于o-ptir技术能够发现，o-ptir能够提供更为详细的图像分辨率并且能够测量红细胞不同位置的光谱信息。而传统ftir受制于米氏散射限制，效果较差。图2. 对比ftir与o-ptir对红细胞成像的结果：(a)红细胞的白光图；(b)图a中红色方块放大的区域；(c,e)ftir的蛋白/脂质空间分布的红外成像；(d,f)o-ptir的蛋白/脂质空间分布的红外成像；(g)红细胞的ftir红外光谱；(h)红细胞的o-ptir红外光谱 (g,i)疟原虫感染红细胞和正常红细胞的pca（pc1&pc2，pc1&pc3）得分；(h,j)疟原虫感染红细胞和正常红细胞的pca（pc1&pc2，pc1&pc3）得分 参考文献：b. [malaria] “comparing infrared spectroscopic methods for the characterization of plasmodium falciparum-infected human erythrocytes” (nature communication chemistry, https://doi.org/10.1038/s42004-021-00567-2). advantages: 1, 3, 4, 5, 6 2.单个病毒的红外成像 受制于红外限分辨率的限制，单个病毒的红外光谱成像一直以来都是十分困难的，对于只有100 nm左右的病毒进行红外光谱成像显得十分无力。yi zhang等人使用o-ptir技术成功实现对单个痘病毒进行了检测，并成功观测到了病毒的外形，并对病毒表面的蛋白的光谱进行了表征。图3.单个痘病毒的光谱和成像表征。(a)痘病毒的干涉散射图像 (b)痘病毒1550cm-1波束下的mip图像 (c)痘病毒1650cm-1波束下的mip图像 (d)随机选取病毒上4个点的光谱 参考文献：“vibrational spectroscopic detection of a single virus by mid-infrared photothermal microscopy” (analytical chemistry, https://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.0c05333). advantages: 1, 3, 4, 5, 6 3. 光学光热红外o-ptir与raman光谱协同分析固定或活的单细胞 英国曼彻斯特大学的peter gardner教授近期发表了他们关于活(和固定)细胞振动光谱分析的新研究结果。作者使用光学光热红外o-ptir与raman光谱，并借助于两个激发源（qcl和opo激光器），对细胞进行了宽光谱范围的覆盖，从而使所有与生物学相关的分子振动都能被检测到，且保持一致的亚微米的空间分辨率。此外，红外光谱采集与拉曼光谱有效的结合起来，在相同的激发位置，形成振动互补，得到一套完整的振动光谱信息。如下图所示，该红外和拉曼的组合方式可以用来分析液体环境中固定或活细胞的亚细胞结构，其中的蛋白质二次结构及富脂体均可以在亚微米尺度上被有效地识别出来。 图4. o-ptir观测固定未染色mia paca-2细胞成像。(a)固定的未染色的mia paca-2细胞的光学图像；(b)红色方块区域的放大图像；(c)opo波束段的o-ptir红外光谱；(d)qcl波束段o-ptir的红外光谱；(e)黑色区域的拉曼和红外光谱 参考文献d. [mammalian cancer cell] “analysis of fixed and live single cells using optical photothermal infrared with concomitant raman spectroscopy” (analytical chemistry, https://dx.doi.org/10.1021/acs.analchem.0c04846). advantages: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 74. o-ptir与s-xrf联用探究阿尔兹海默症阿尔兹海默症是老年痴呆症常见的病因之一，而淀粉样β蛋白沉淀是引发ad的重要病因之一，因此对于淀粉样β蛋白分布的研究就显得十分重要。nadja gustavsson等人通过o-ptir成功观测到了神经中的淀粉样β蛋白分布，并且结合s-xrf分析发现铁簇与淀粉样β-折叠结构和氧化的脂质存在共定位关系。这项研究充分预示了o-ptir/s-xrf联合技术可在ad疾病的研究中发挥重要作用。图5.单个神经元的o-ptir与x光荧光成像。（a）单个神经元的光学（左）与o-ptir图像（中和右）（b）神经元上铜、铁的分布（c）铁与蛋白叠合图（d）铁与脂质的叠合图参考文献[neuron] “correlative optical photothermal infrared and x-ray fluorescence for chemical imaging of trace elements and relevant molecular structures directly in neurons” (“light: science & applications” https://doi.org/10.1038/s41377-021-00590-x) advantages: 1, 3, 4, 5, 6 用户单位： 用户评价：

利用ImageXpress Micro进行长时间活细胞成像和心肌细胞功能评价 活细胞成像技术是最近几年兴起的一项技术，能够在细胞接近生理的状态下观察细胞形态改变和蛋白的表达，该技术能够避免传统采用固定细胞或组织的研究方法中，固定细胞过程中造成的细胞形态的改变和结构改变，能够更加真实的反映出细胞的特性，因而广受推崇。MD ImageXpress Micro高内涵系统具有多种特性能够进行长达数天的活细胞的观察，同时，由于采用著名的MD软件产品MetaMorph为基础的MetaXpress高内涵分析软件，具有极高的灵活性和扩展能力，除活细胞成像之外还能够能够对某些细胞（如心肌细胞）的生理药理特性进行评价。 神经细胞长时间成像 神经细胞是公认的较为敏感和脆弱的细胞，对于外界环境较为敏感。对于活的神经细胞的长时间培养和观察具有较大困难。采用ImageXpress Micro系统能够实现神经细胞的长时间观察培养。方法：从新生大鼠大脑海马获得约1立方毫米大小组织块。移入含有0.25%胰酶的离心管中37℃，5%CO2 孵育箱内消化20～30 min。加入含胎牛血清的培养液终止消化，离心重悬细胞，按0.6× 105/ml 铺于96 孔板中。24 h 后换为NeurolbasalMedium/B27 无血清培养液，以后每2~3 d 半量换液1 次。7 d 后获得原代神经细胞。 图像获取： 将样品放入有环境控制功能的MD ImageXpress Micro高内涵系统内，采用激光自动聚焦进行样品聚焦，在10X物镜下每隔5分钟进行一次相差图像拍摄，结果如下： 小结： ImageXpress Micro采用的环境控制系统能够维持细胞所需的温度、湿度和CO2条件，其中温度为细胞的酶活性提供了温度保障，确保细胞的生理机能，湿度维持能够保证细胞外液不会蒸发，避免了胞外渗透压的升高造成的细胞脱水，CO2能够维持细胞外液的pH值。 除了维持细胞的生存环境外，在进行敏感、脆弱细胞（如神经细胞）的长时间观察过程中，最为重要的是减小对细胞的刺激，尽可能的保持细胞的活性。ImageXpress Micro采用激光自动聚焦技术，在聚焦的过程中，细胞无需受到光照，这样就避免了细胞内的光化学反应和光照升温，能够很好的维持细胞的活性状态。因此，在长时间活细胞的观察过程中，以上两点不可或缺。心肌干细胞细胞的功能评价 ImageXpress Micro采用的软件系统功能强大，具有无限的扩展功能。因此，除了能够实现活细胞的长时间观察和细胞的形态、蛋白表达等分析，ImageXpress Micro还能够实现细胞功能学的评价。 干细胞研究是目前生物学研究的热点，采用人类的干细胞（如心肌干细胞）能够加快研究的速度，同时还能够真实反映人体细胞的功能，还能加快药物进入临床的速度。iPS来源的心肌细胞因其表达的离子通道、自发节律特性、与原代心肌细胞特性相似的特性尤其引人注目，通过该细胞可以进行心肌细胞特性的研究，并能缩短药物筛选的时间与临床前实验的周期。 方法： 采用Cellular Dynamics公司的iPS来源的心肌细胞，将其铺于96孔板，并在培养液中孵育2-7天，以Calcein AM孵育10分钟，将培养液弃去后，加入不同浓度的激动剂和抑制剂。 图像获取和结果： 心肌细胞的成熟状况要通过细胞自发的节律性收缩来进行判定。细胞的节律性收缩可以通过电生理的方法进行检测。但是电生理的方法相对较复杂，因此我们采用荧光图像的自动分析来取代。 首先采用延时拍摄或实时拍摄的方法我们可以获得细胞节律性收缩的一组图像，MetaXpress对心肌细胞跳动进行自动分析 图3. 将获得的心肌细胞跳动的一组图像生成图像堆栈，采用Journal扩展获得的功能模块自动分析相邻两个时间点图像的差别，一次来判定心肌细胞的跳动频率和幅度，采用功能模块中的计数器自动计算心肌跳动的频率和幅度。在Journal扩展的功能模块中以上功能自动完成，并直接报告心肌细胞跳动频率和幅度信息。 心肌跳动模式检测 我们采用经典阳性药物异丙肾上腺素、肾上腺素、咖啡因作为刺激剂，用已知的心肌细胞抑制剂乙酰胆碱来进行心肌跳动模式的检测和心肌跳动分析模块的功能。 图4：肾上腺素作用10分钟后，用ImageXpress Micro酶300ms拍摄一次，共拍摄15秒获得的一组图像分析获得的心肌细胞跳动的频率和幅度。 四种药物不同浓度作用下心肌细胞跳动频率的变化。细胞自发跳动节律各有不同，通常为20-40次/分钟。给药后的5-60分钟内，心肌跳动频率稳定，因此以上均为给药后10分钟检测结果。 小结：ImageXpress Micro采用的高度灵活的系统能够对心肌细胞进行自动成像，其采用的MetaXpress软件具有极高的灵活性，其具有的Journal功能能够根据图像和实验要求进行随意的扩展，除了进行心肌细胞生理学评价之外，还能进行超过1000个功能的扩展。

我们知道以往的固定组织或固定细胞成像揭示了非常多的自然秘密，给了我们很大的启示，但现在的科学研究则希望在最真实的条件下观察细胞。纵观显微镜的发展历史，直到15年前，科学家主要还是处理死细胞。现在，活细胞研究的重要性已经越来越被意识到。 东胜创新（DeltaVision Elite活细胞成像系统） 加拿大McGill大学成像实验室主任Claire M. Brown表示：“要达到这个研究目的，我们非常需要一个不损坏细胞的封闭环境、且具有比较理想的成像条件。这一条件尤其对于进行动态、三维成像的多标记样品来说尤其重要。”让人高兴的是，近年来在光学设计、高灵敏检测器、优选探针和先进软件方面的改善，使得这一切成为可能。今天的活细胞工作站，不仅仅限于观察，目前的趋势已经从结构或细胞器的分析，转向了功能的相互影响观察研究。现在，科学家可以便利的购买到活组织应用的整合新设备，而不用将系统简单的拼凑在一起。如GE公司的活细胞工作站DeltaVision Elite提供适用于活细胞成像的高分辨率、高灵敏度、全自动化设备。通过对活细胞进行实时、长时间的成像，观察细胞内的动态变化过程，如细胞的有丝分裂、钙火花传导、细胞运动和迁移等。同时，搭载全内发射荧光模块（TIRF）对分子和膜运输之间的囊泡转运、相互作用成像尤其有用；搭载单分子成像技术，如PALM，STORM等，可实现超高分辨率成像，分辨率可达20nm。在照明波动中，DeltaVision Elite通过TruLight均一照明光学系统，控制光照的强度和均一性。计算机对这些变量的完全控制，确保了精确的、可重复的成像效果。 DeltaVision Elite通过专利的InsightSSI光源，大幅度的降低光毒性和光损伤，实现对活细胞长达500小时的连续成像；同时，专利的还原型迭代去卷积技术保证高分辨率、高灵敏度的图像获取。这一系列的专利设计在保证高质量图像的同时，实现了对活细胞的长时间连续成像，“鱼”与“熊掌”兼而得之。 正在分裂的Hela细胞，其中绿色标记微管蛋白，红色标记染色体。 另外，专利的UltimateFocus自动对焦系统通过远红外激光实时监测盖玻片和物镜镜头之间的距离，保持成像焦平面的稳定，防止长时间time-lapse成像过程中跑焦现象的发生。活细胞培养环境控制系统能够实时控制细胞培养的温度、湿度和CO2浓度，以及整个成像系统的温度稳定性，保证成像的精确和可重复性。功能强大的SoftWoRx图像处理软件能够实现XYZ-λ（波长）-T（时间）-P（位置）六维活细胞成像、Time-Lapse成像、去卷积、三维重建、视频电影制作、多点观察、细胞跟踪、共定位分析、FRET/FRAP/TIRF成像、荧光强度定量分析等。 目前，活细胞成像方面的进展仍然在不断涌现。快速的、不断改善的动态分析方法，将对活细胞内部的功能蛋白质进行更好的研究。成像专家也在进一步推动原位成像的真实性。人们不仅想去观察一个动物体中的一个细胞，并且用显微镜进行成像，而且也期望看到全貌。你将会看到越来越多的整体动物的成像。对活细胞成像来说，能同时进行多通道成像，并且区别多重荧光信号将变得越来越重要。致力于生命科学最前沿技术—东胜创新分子影像微信服务号：eastwin_mi欢迎您和我们一起见证生命科学的成长

2023年8月6日至12日，由清华大学蛋白质研究技术中心、生物医学测试中心、中国细胞生物学学会细胞器生物学分会联合主办的第四届活细胞与超高分辨成像高级研讨会在北京清华大学成功举办。本次研讨会分为理论研讨和上机实操两个部分，吸引了来自全国各地100余位青年学者、学生和技术人员参会。此次会议在深入了解显微成像前沿进展及其在生物医学中的应用方面发挥了重要的推动作用。第四届活细胞与超高分辨成像高级研讨会参会人员合影本次研讨会邀请清华大学生命科学学院副院长、蛋白质研究技术中心常务副主任王新泉教授发表致辞。王新泉教授强调，每年持续举办此研讨会的意义不凡。随着显微成像技术飞速发展，我们需紧跟前沿技术进展，并着重推动原创性方法与技术研发。这次研讨会为构建科研平台、推动技术进步、促进合作交流以及解决技术选择难题提供了契机。同时，也期盼与会者从中汲取灵感，激发更多独创性的成果，为活细胞与超分辨成像领域贡献智慧和力量。生命科学学院副院长、蛋白质研究技术中心常务副主任王新泉致辞研讨会邀请了北京大学席鹏教授、陈良怡教授、孙育杰教授、中科院生物物理所李栋研究员、中国科技大学唐爱辉教授、西湖大学高亮研究员、章永登研究员、清华大学陈春来副教授、王文娟高级工程师和北京脑科学与类脑研究中心赵瑚研究员共十位在活细胞、超分辨、单分子成像、透明化、光片成像和图像处理等领域的知名专家进行报告。专家报告另外，来自Nanostring Technologies、LiT、锘海、英诺激光、安捷伦、Zeiss、Leica、Evident、Andor等显微成像公司的技术专家就当前热门技术如空间组学、光片、高内涵、光声、全息断层、X射线成像、荧光寿命、超分辨成像、一体化活细胞成像等技术原理、应用及其功能进行专业介绍。 研讨会现场在上机实操培训中，清华大学蛋白质研究技术中心细胞影像平台张彦丽、刘冰钰、李静、生物医学测试中心尼康生物影像中心王瑾瑜、曹慧珍等平台工程师，以及多位厂商技术专家就显微成像及图像处理技术开展仪器实操演示，使参会人员身临其境，更加透彻地理解显微成像及后期图像处理技术原理及操作流程，深刻体会不同技术之间的应用差异。将理论与实践融合共进，给参会人员带来这场显微成像的技术盛宴，实现活细胞与超分辨成像领域的跨越式成长。上机实操本届研讨会由清华大学蛋白质研究技术中心细胞影像平台主管、生物医学测试中心尼康生物影像中心主管王文娟高级工程师统筹并全程主持会议。参加上机实操学员领取结业证书并合影留念

项目编号：GZZJ-ZFG-2023080项目名称：华南理工大学全时程动态活细胞成像及功能分析系统项目预算金额：220.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：220.0000000 万元（人民币）采购需求：序号标的名称数量（单位）简要技术需求或服务要求（具体详见采购需求）最高限价万元（人民币）1全时程动态活细胞成像及功能分析系统1套功能：全时程动态活细胞成像及功能分析系统可放置于培养箱中，兼容多种规格尺寸的孔板、培养皿、培养瓶，可在明场及红色、绿色双色荧光通道条件下，对培养的细胞进行实时长时间的自动成像。一次可同时进行多块多孔板的实验，每块多孔板可独立运行，使用不同的物镜和荧光通道，采用不同的时间间隔拍照，用户可通过联网的电脑自定义实验流程和进行远程控制，获取各种格式的图像或动态视频，自动依据相位图、荧光信号分析生成的基于图像应用的图表，以显示细胞的变化及趋势。用途：全时程动态活细胞成像及功能分析系统主要应用于基础研究领域，结合其实时、长时间观察、自动分析的特点，可实时观测多组细胞生长过程，可获得每个时间点的照片、数值、曲线、影像等资料，为细胞生长发育、肿瘤研究、免疫研究、干细胞研究、药物评价、基因编辑与转染效率分析等多种应用提供丰富可靠的数据支持。人民币220万元经政府采购管理部门同意，本项目（全时程动态活细胞成像及功能分析系统）允许采购本国产品或不属于国家法律法规政策明确规定限制的进口产品，具体详见采购需求。本项目采购标的所属行业为：工业合同履行期限：国内供货：在合同签订后（30）天内完成供货、安装和调试并交付用户单位使用；境外供货（可办理免税）：办理免税证明后（90）天内。本项目( 不接受 )联合体投标。对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名称：华南理工大学地址：广州市天河区五山路381号联系方式：文老师020-871129622.采购代理机构信息名称：广州中经招标有限公司地址：广州市越秀区寺右一马路18号泰恒大厦14楼1409室联系方式：陈小姐、庄小姐 020-87385151、020-37639369、020-87371812、020-873722963.项目联系方式项目联系人：陈小姐、庄小姐电话：020-87385151

项目编号：GZZJ-ZFG-2023072项目名称：华南理工大学实时活细胞成像分析仪项目预算金额：150.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：150.0000000 万元（人民币）采购需求：序号标的名称数量（单位）简要技术需求或服务要求（具体详见采购需求）最高限价万元（人民币）1实时活细胞成像分析仪1套功能：实时活细胞成像分析仪全程放置于培养箱中，兼容多种规格尺寸的孔板、培养皿、培养瓶，可在明场及红色、绿色双色荧光通道条件下，对培养的细胞进行实时长时间的自动成像。一次可同时进行多块多孔板的实验，每块多孔板可独立运行，采用不同的时间间隔拍照，用户可通过联网的电脑自定义实验流程和进行远程控制，获取各种格式的图像或动态视频，自动依据相位图、荧光信号分析生成的基于图像应用的图表，以显示细胞的变化及趋势。用途：实时活细胞成像分析仪主要应用于基础研究领域，结合其实时、长时间观察、自动分析的特点，可实时观测多组细胞生长过程，可获得每个时间点的照片、数值、曲线、影像等资料，为细胞生长发育、肿瘤研究、免疫研究、干细胞研究、药物评价、基因编辑与转染效率分析等多种应用提供丰富可靠的数据支持。人民币150万元 经政府采购管理部门同意，本项目（ 实时活细胞成像分析仪）允许采购本国产品或不属于国家法律法规政策明确规定限制的进口产品，具体详见采购需求。本项目采购标的所属行业为：工业合同履行期限：国内供货：在合同签订后（30）天内完成供货、安装和调试并交付用户单位使用；境外供货（可办理免税）：办理免税证明后（90）天内。本项目( 不接受 )联合体投标。对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名称：华南理工大学地址：广州市天河区五山路381号联系方式：文老师020-87112962　　2.采购代理机构信息名称：广州中经招标有限公司地址：广州市越秀区寺右一马路18号泰恒大厦14楼1409室联系方式：陈小姐、庄小姐 020-87385151、020-37639369、020-87371812、020-873722963.项目联系方式项目联系人：陈小姐、庄小姐电话：020-87385151

设备优点：体积小尺寸（WxHxD)18cmx10.5cmx18cm ,可置于细胞培养箱任何隔层兼容各种进口、 国产细胞培养箱兼容各种品牌的培养皿、 培养瓶、 培养板通量高内置24个显微镜头 ， 等于24个显微镜同时成像 ，效率快 ， 拍照30秒（ 24孔板 ）每个显微镜头可独立设置、 观测和记录明场相差成像 ， 自动保存图像并生成相关曲线及视频拍照间隔5min-24h , 总拍照时长无限制单台PC可控多台zenCELL , 更高通量品质优耐湿 ： 工作相对湿度20 - 95%耐温 ： 工作温度20 - 45°C 一体式设计 ： 通过一根USB3.0提供电源、 实时传输数据封闭式设计 ： 无机械移动、 无清洁死角 主要功能：细胞迁移检测：划痕、侵袭、趋药性等实验细胞培养监测：胚胎干细胞或间充质干细胞重编程如iPSC，细胞追踪形态记录细胞培养记录：可实时监测各种条件（低氧条件/GMP等）下细胞培养情况细胞培养标准化：记录细胞生长曲线 、增殖曲线、汇合度等zenCELL owl活细胞动态成像及分析系统可置于细胞培养箱中， 具备24个基于CMOS的成像模块， 可同时对24个视野进行快速成像， 实现对细胞连续长时间的观察和监测， 并通过联网的电脑进行远程控制、 数据读取与分析。 软件界面提前看：图示：24个孔独立选择观察并记录相关图片和数据创新点：可以实时的动态的观察细胞的生长变化，电脑软件自动分析生长曲线，体积小巧可以放在任何尺寸的培养箱中观测，内置24个显微镜头，全方位无死角观测细胞。 zenCell owl活细胞成像及分析系统

本次会议既有在活细胞、超分辨、单分子成像、透明化、光片成像和图像处理等领域的知名学者对相关领域做深入详尽的报告，也有当前热门技术如空间组学、光片、全息断层、光声、高内涵、X射线成像、荧光寿命、超分辨转盘共聚焦、一体化活细胞成像等技术原理和应用的介绍。还有围绕超分辨成像、高内涵与活细胞、光片与光声、扫描与转盘共聚焦、图像处理等模块的上机操作培训。参会人员可以实现活细胞与超分辨成像领域的跨越式成长。——01—— 研讨会内容安排（持续更新中）理论研讨时间：2023年8月7日-9日上机实操时间：2023年8月10-12日——02—— 注册与缴费 注册费包含资料费、材料费和仪器使用费、茶歇午餐等，其它交通食宿自理。缴纳当年会费的中国细胞生物学学会会员可以享受会员优惠价。注册费标准如下：说明：1.理论部分报名截止日期：2023年7月31日2.理论+实操报名：为保证上机实操质量，实操报名限40人，额满即止，以实际缴费时间为准。3.付款方式：1）在线支付（推荐）：https://www.cscb.org.cn/payment_conference/109.html2）银行汇款： 户名：中国细胞生物学学会账号：03392400040009251开户行：农行上海市徐汇区枫林支行纳税人识别号：511000 00500 009968A地址：上海市岳阳路319号31A楼212室电话：021-54921634注意事项：1）汇款时，请备注第四届活细胞研讨会+汇款单位名称+参会人员姓名，请及时将汇款凭证扫描件发送treasure@cscb.org.cn2）电子发票：在线付款时可以勾选，交费后15个工作日内电子发票将直接发送邮箱；——03—— 报名方式 报名截止日期2023年7月31日访问链接：http://xjpt-life.mikecrm.com/6piF3j7或扫描二维码：——04——参会须知会议时间2023年8月7日至8月12日（报名截止日期2023年7月31日）会议地点中国北京，清华大学联系方式会议组织/合作王老师 +8610 62781599邮箱地址：wenjuan@tsinghua.edu.cn会务联系人张老师 +8610 62772736邮箱地址：yanlizhang12@tsinghua.edu.cn赵老师 +8610 62799382 邮箱地址：jzhao@tsinghua.edu.cn主办单位清华大学蛋白质研究技术中心中国细胞生物学学会细胞器生物学分会清华大学生物医学测试中心北京清科创信教育科技有限公司中国细胞生物学学会细胞器生物学分会清华大学蛋白质研究技术中心2023年7月26日

瑞士Viventis公司推出的高通量活细胞高分辨光片显微镜LS系列，是一款全新的光片成像平台，该设备适用于活性光敏感样品（如卵子、胚胎、类器官等）的长期成像，具有低光毒性、高分辨率等特点。高通量活细胞高分辨光片显微镜是近些年来研发的创新技术，它的照明光是与一张与成像面平行的薄薄的光片，只有焦平面的样品被照亮，而光片上下的样品不受影响。该成像系统在细胞与组织层面的实时成像对于深入理解生物学行为至关重要。尤其适合于对直径达300 μm的光敏样品（如卵母细胞，胚胎和类器官）进行长期实时高时空分辨率和低光毒性的观察与成像。Viventis提供细胞发育过程的环境并进行实时成像Viventis的主要特点——双侧照明光片显微镜双侧照明均可以通过软件进项控制，仅需要点击鼠标就可以控制光束的平移和旋转。光片厚度仅为1.5~6 μm，且厚度可调、位置可自动校准，以适应更多的样本尺寸。配合上高NA物镜，可以实现更好的穿深，更少的伪影。另外，系统配置可见激发激光器，让用户通过检测物镜，对自定义样品中感兴趣的区域进行快速定位成像操作。高通量，多样品同时成像Viventis光片显微镜可以快速对多个样品进行同时成像而无需更换样品，支持绝大多数胚胎样品并可并排摆放，方便添加培养基、加药等操作。Viventis的样本槽大于50 mm，对于并排的样本系统也可以连续采集成像。对于细胞球、类器官等本身较易漂浮的样本，Viventis也提供了较好的解决方案，采用人工基底膜/水凝胶嵌入式等方案，实现上述样本的稳定成像。软件界面简洁 易于上手Viventis系统对于光片成像的初学者来说操作简单，多种模式一键切换，软件界面简洁，可以帮助您快速的建立自己的光片成像之旅，打开lightsheet大门，助力科研之路。典型文章：[1] Science. Mechanism of spindle pole organization and instability in human oocytes.2022[2] Nature. Left–right symmetry of zebrafish embryos requires somite surface tension.2022[3] Nature cell biology. Cell fate coordinates mechano-osmotic forces in intestinal crypt formation. 2021[4] Cell Stem Cell. Capturing Cardiogenesis in Gastruloids. 2021[5] Science. Hydraulic fracturing and active coarsening position the lumen of the mouse blastocyst. 2019[6] Nature. Self-organization and symmetry breaking in intestinal organoid development. 2019典型国外用户：国内用户：相关产品1、高通量活细胞高分辨光片显微镜

Innome是一家位于德国慕尼黑的新型高科技公司，创立于2015年，源于全球顶级原材料供应商Erwin Quarder Group。Innome公司专注于高精密仪器的定制和生产，业务涉及生命科学、临床诊断和药物研发，具备8级洁净度的高精密生产工艺车间该公司的zenCell owl活细胞动态成像及分析系统可置于细胞培养箱中，对细胞进行连续长时间的监测，并通过联网的电脑进行远程控制、数据读取与分析。该系统具备24个基于CMOS的成像模块，可同时对24个视野进行快速成像。设备优点：1. 体积小：可置于任何细胞培养箱内工作2. 通量高：内置24个显微镜头独立观测和记录，明场/暗场相差成像3. 成本低：无需额外耗材，兼容各种培养皿/板/瓶主要功能： 细胞迁移检测：划痕、侵袭、趋药性等实验 细胞培养监测：胚胎干细胞或间充质干细胞重编程如iPSC，细胞追踪形态记录 细胞培养记录：可实时监测各种条件（低氧条件/GMP等）下细胞培养情况 细胞培养标准化：记录细胞生长曲线 、增殖曲线、汇合度等 软件界面提前看： 图示：24个孔独立选择观察并记录相关图片和数据 更多功能持续更新中，敬请期待。。。更多信息了解或获取相关资料请联系我们。

蔡司推出全新Lattice Light Sheet晶格层光显微镜 随着蔡司Lattice Lightsheet 7的发布，蔡司在生命科学研究领域提供了一个用户友好、便捷使用的晶格层光显微镜。蔡司Lattice Lightsheet 7是基于Ernst H.K. Stelzer教授在德国海德堡欧洲分子生物学实验室，以及诺贝尔奖获得者Eric Betzig教授在美国霍华德休斯医学研究所Janelia研究园区对于光片技术开创性的研究成果。Eric Betzig教授对光进行结构化调制，使光片更薄，更长。蔡司Lattice Lightsheet 7具有非常低的光毒性，从而能长时间以亚细胞分辨率观察细胞及微小生物体的3D动态过程。配置以环境温控系统以及稳定的光学设计，蔡司Lattice Lightsheet 7能帮助研究人员连续观察活体样本数小时，甚至数天。Lattice light sheet 晶格层光显微镜在各类活细胞成像应用中具有出色的表现，因为它能够提供实时快速的多维度成像，以及具有出色的低光损伤。然而，在这之前，这个系统只能由专家使用。”蔡司产品经理Klaus Weisshart说道。“因为这个技术对于系统校准的要求极高，需要物理学家才能完成。同时，样品装配以及安放也并非易事。蔡司Lattice Lightsheet 7通过巧妙的技术克服了这些障碍。现在，生物学家即使没有深入了解其背后的物理知识，也可以轻松上手使用这个系统。”高度自动化的系统校准和对准蔡司Lattice Lightsheet 7具有特殊结构的光片，即sinc3光束。系统的校准能在几分钟之内自动完成。它还可以灵活、便捷地设置不同规格的光片。因此，能快速、简单地获取最适合样品的光片。蔡司Lattice lightsheet光片是通过空间光调制器（SLM）高效完成；因此，用户只需要设置激光功率即可。蔡司Lattice Lightsheet 7设计紧凑，体积小巧，可以在任何实验室中找到安装空间。该系统的真正核心是其核心光学器件。 “由于我们考虑到需要适配于标准的细胞培养皿和多孔板，因此我们将RIKEN,现为京都大学细胞材料综合研究所的Yuichi Taniguchi教授关于倒置成像的想法付诸实现。”蔡司3D成像解决方案应用工程师Kirsten Elgass解释道。照明和检测光学器件的光路类似于传统的光片成像，并且与样品盖玻片表面成一定的倾斜角。这一切得以实现需要归功于特殊设计的优异光学部件。现在蔡司Lattice Lightsheet 7可以达到每秒3个体积的采集速度，并且可以获得290 nm x 290 nm x 450 nm的分辨率。借助蔡司Lattice Lightsheet 7，生命科学研究人员可以尽享多维度成像的乐趣。 蔡司拥有来自EMBLEM的共享专利权。蔡司还与HHMI Janelia Research Campus，Lattice Light LLC以及RIKEN签订了独家专利许可协议。

目前，制药、生物技术和疾病研究实验室致力于开展细胞功能、行为和通路方面的研究，以求深入了解疾病的机理和对治疗的反应，活细胞成像是从珍贵细胞样本中获取最多信息的关键。不同于传统的终点法检测特定时间点的细胞反应，活细胞成像可以更全面地了解实验处理对细胞的影响，要获取更接近细胞生理反应的数据，需要使细胞持续保持活力。而这正是MuviCyte™ 活细胞成像系统的专长所在。MuviCyte 系统能够在培养箱内工作，因此用户可以将细胞维持在最佳条件下，并使其在连续数周内保持健康状态。由于该系统是由外部工作站控制的，因此用户可以远程观察细胞，从而有助于将培养条件保持在最佳的温度、CO2和湿度条件下。自动化操作使用户可以在无需监管仪器的情况下更专注于科学研究。借助三色荧光成像、z轴层扫和图像拼接功能，用户可以在各种培养器皿中进行多种测定，包括载玻片、培养皿、培养瓶和微孔板。长达数天甚至数周的自动化成像功能，帮助用户获得比传统显微镜方法高得多的实验通量。再结合灵活的视频制作软件，用户可以方便的分享交流实验结果，对细胞的行为、功能和治疗的反馈获得更真实、更深层次的理解。创新点：珀金埃尔默MuviCyte™ 活细胞成像系统是市面上唯一为活细胞成像类仪器配置了灭菌相关设置的仪器； 珀金埃尔默MuviCyte™ 活细胞成像系统是唯一一个同时具有开放式载物台和封闭式载物台两种模式的仪器。 珀金埃尔默MuviCyte™ 活细胞成像系统

2023年8月6日至12日，由清华大学蛋白质研究技术中心、生物医学测试中心、中国细胞生物学学会细胞器生物学分会联合主办的第四届活细胞与超高分辨成像高级研讨会在清华大学成功举办。众多领域专家学者、行业头部翘楚齐聚一堂，和来自全国各地的100余位青年学者一起见证了这场学术盛宴。研讨会邀请了北京大学席鹏教授、陈良怡教授、孙育杰教授，中科院生物物理所李栋研究员，中国科技大学唐爱辉教授，西湖大学章永登研究员、清华大学陈春来副教授等十数位在活细胞、超分辨、单分子成像等领域的知名专家进行报告，还邀请了尼康、徕卡、蔡司等公司就超分辨成像、一体化活细胞成像等仪器进行了专业介绍和体验展示。在本次研讨会上，力显智能科技联合创始人兼COO张猛博士就《单分子定位超高分辨率显微镜iSTORM在生物医学领域的应用》进行了相关报告分享。会议期间，力显智能科技研发的新品活细胞超高分辨率显微成像系统iSTORM VIVO在清华大学正式发布，更是为这场精彩盛宴增添了一抹亮色。现场，清华大学高级工程师王文娟老师与力显智能科技联合创始人兼COO张猛博士共同为活细胞超高分辨率显微成像系统iSTORM VIVO揭幕。揭幕仪式力显智能科技联合创始人兼COO张猛博士表示：非常感谢一路支持力显的各位朋友和老师，是大家的支持和帮助，促成了这次活细胞超分辨新品在清华大学的圆满发布，这是广大用户对力显超分辨的再一次肯定，也是力显智能科技自研国产超分辨之路的又一个重要里程碑。活细胞超高分辨率显微成像系统iSTORM VIVO作为目前国内唯一的商业化单分子超分辨显微系统，iSTORM成功实现了光学显微镜对衍射极限的突破，使得在20纳米的分辨率尺度上从事生物大分子的单分子定位与计数、亚细胞及大分子复合物结构解析、生物大分子生物动力学等的研究成为现实。在原先标准版iSTORM的基础上，经光机系统、染料、算法协同开发，iSTORM VIVO在活细胞超分辨成像领域获得极大技术提高，提升原始图像拍摄速度，搭配高密度快速荧光定位算法，可以在维生条件下进行快速活细胞超高成像，以高精密度的成像能力解析活细胞的各种生命生理过程，极大弥补了传统STORM技术在活细胞超分辨成像领域的短板，给生命科学、医学等领域带来重大突破。

6月28日，苏州大学附属第一医院发布类器官/活细胞共聚焦微孔板成像系统等设备招标公告，预算为485万元人民币。项目概况类器官/活细胞共聚焦微孔板成像系统等设备 JSZC-320000-SZWK-G2024-0186 招标项目的潜在投标人应在苏州市干将西路1296号（深业姑苏中心）1幢17层 获取招标文件，并于2024-07-19 13:30 （北京时间）前递交投标文件。采购需求：采购包名称数量简要说明是否接受进口产品投标预算金额（万元）1类器官/活细胞共聚焦微孔板成像系统1台成像模式：激光共聚焦成像、宽场荧光成像、明场及真彩色明场成像，相差成像。成像方式：单色，多色，图像拼接，时间延迟，Z-轴层切叠加和触发模式等等。是4852中央纯水处理系统1台可应用于生化流水线、免疫流水线、全自动凝血分析仪流水线、血细胞分析仪、化学发光仪等的常规检测用水。是100获取招标文件时间：2024年06月28日至2024年07月05日，每天上午08:30-11:30，下午13:00-17:00（北京时间，法定节假日除外）地点：苏州市干将西路1296号（深业姑苏中心）1幢17层方式：提供以下材料现场获取 （1）营业执照副本复印件； （2）法人授权委托书； 上述材料每页均须加盖单位公章。售价：500.00元提交投标文件截止时间、开标时间和地点2024-07-19 13:30 （北京时间）地点：苏州市干将西路1296号（深业姑苏中心）1幢17层详情点击查看

从头脂肪生成(DNL)是脂肪和肝脏组织产生脂质代谢的关键过程。该途径的失调与肥胖、非酒精性脂肪性肝病和II型糖尿病密切相关。但是DNL在细胞内的研究非常困难，常规的脂质染料缺乏特异性，抗体和小分子染料很难特异性标记这些脂质体。虽然目前可以使用葡萄糖基代谢探针等同位素来标记这些物质，但是很难具备亚微米级别的空间分辨率，同时无法对细胞内部进行成像，也不能提供脂质的特性和其他环境生物分子的组成信息。这些都极大的限制了脂质体的相关研究，尤其是活细胞内脂质代谢的研究。美国PSC公司研发的全新非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage的出现为上述问题提供了新的解决方案。mIRage采用新型光学光热诱导共振（O-PTIR）技术，不仅具备传统FTIR的特性，可以对物质的分子结构进行解析，还克服了传统红外空间分辨率不足，无法精细表征细胞内部结构的问题，其分辨高达500 nm，可在亚微米尺度上实现对细胞结构的观测，与光学显微镜基本相同，有助于理解亚细胞器结构。设备光热膨胀技术能够在不接触样品的情况下进行检测，大幅度简化了样品制备过程，全程对样品无污染，并且没有米氏散射问题，可在不平整的表面上取得良好的谱线。而其特有的探测机制使得mIRage能够很大限度上避免水的干扰，真正实现活细胞的探测。 近期，耶鲁大学成功安装了非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage，并在活细胞脂肪代谢研究中取得了新的进展！在该研究中，Sydney O. Shuster等人使用非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage观测DNL在活细胞和固定脂肪细胞中的分布。作者认为在DNL、葡萄糖或其他碳水化合物代谢形成游离脂肪酸(FFA) 和甘油三酯的途径中，首先形成糖酵解丙酮酸，后被带进线粒体，通过TCA循环转化为柠檬酸盐。柠檬酸盐再转化为酰基辅酶a和丙二酰辅酶a用于脂肪酸合成并产生甘油三酯，然后储存在脂滴中作为能量储备。通过mIRage对固定的3T3-L1细胞的成像分析，作者通过脂肪代表性的酯羰基振动1747cm-1成功定位到细胞中的大部分脂质、甘油三酯的分布，并通过1655和1541cm-1处的酰胺-I和酰胺-II带定位蛋白质。DNL的代谢途径与固定细胞的明场与红外脂质体与蛋白的热图成像 为了跟踪葡萄糖代谢和DNL，作者给细胞喂入13C葡萄糖来代替12C葡萄糖。因为它的分子振动模式与所涉及的原子质量增加导致红外波数的红移，通过检测发现羰基的拉伸震动红移了44 cm-1。有趣的是1239 cm-1的波段本身不能明确地区分给C-O-C或PO2 ，而未标记细胞中的不对称拉伸在13C标记后时消失，这可能是红移到相邻的峰中导致的。这表明该峰值的主要来源是C-O-C 甘油三酯和/或胆固醇酯的不对称拉伸震动，并且磷脂不会显著地干扰3T3-L1脂肪细胞中的信号。而蛋白信号在这一过程中没有变化，表明蛋白质不会随着13C葡萄糖的供给而偏移。与之相对，CH3和CH2相关的1450cm-1波段蛋白质和脂类的变形和伸展震动的出峰不变。这可能是由于形成的甘油三酯来自游离脂肪酸和甘油的酯化。虽然两者都是 FFA和甘油由葡萄糖通过糖酵解产生，但它们以不同的速度产生和回收，影响着这些波段的移动速率。进一步对加入13C葡萄糖24、48和72小时后的细胞进行检测，结果显示平均单细胞13C/12C比率在测试期间(72小时)持续增加，最终比率为0.54±0.14。其中大部分的13C转化成甘油三酯，并且DNL在空间上也是异质的。对不同时间点固定的细胞进行观测和对比其中的DNL含量 在活细胞实验中，也取得了和固定细胞类似的结果，并且活细胞的光谱图像比固定的更清晰，细胞和与蛋白质酰胺-I信号重叠较少证明了这项技术甚至可以检测到活细胞中甘油三酯到12C甘油三酯13C比率的微小差异。活细胞的DNL含量观测综上所述，非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage在细胞成像中具有优异的潜力，可以提供脂质种类的信息，提供对低浓度物质如游离脂肪酸的定位，并允许对每个样品的脂质和蛋白质光谱特征进行全面位置光谱分析，并且能够应用长时间观测。这项技术未来将可以用于绘制细胞系和细胞内DNL的比率、疾病状态，进一步揭示DNL 导致代谢紊乱的原因。在评估针对调节DNL和治疗疾病的药物方面提供诸多帮助。 参考文献：Spatiotemporal Heterogeneity of De Novo Lipogenesis in Fixed and Living SingleCells. J. Phys. Chem. B 2023, 127, 2918&minus 2926为满足国内日益增长的生物红外表征需求，更好的为国内科研工作者提供专业技术支持和服务，Quantum Design中国北京样机实验室引进了非接触亚微米分辨红外拉曼同步测量系统——mIRage，为您提供样品测试、样机体验等机会，期待与您的合作！

由中国细胞生物学学会细胞器生物学分会和清华大学蛋白质研究技术中心联合主办的第二届活细胞与超高分辨成像高级研讨会将于2021年7月31日至8月6日在北京清华大学举行。本会议邀请了国内在显微成像领域有着深入研究的知名专家进行报告，并针对报告内容设计相应的上机实验。北京深蓝云生物科技有限公司将就宽场荧光光学显微镜的技术创新进展等相关内容做精彩报告，同时还有Echo Revolution全自动荧光显微镜上机实验操作哦，恭候您的咨询。光学显微镜成像是细胞研究的重要技术手段，在揭示细胞形态、动力学、相互作用和定位等方面都起到了重要的作用。Echo Revolution全自动荧光显微镜将XYZ三轴全部实现电动化，从而实现自动完成多图拼接的大视野高分辨率成像，而电动化的Z轴可以帮助用户实现自动聚焦、自动定焦和Z-Stacking多层扫描大景深成像。Echo Revolution全自动荧光显微镜还添加了延时摄影功能，可以帮助用户实现长时间观察和时间回溯，使用户可以进行更全面的观察实验。Echo Revolution全自动荧光显微镜在蛋白互作荧光观察（BIFC）、多蛋白共定位观察、染色材料高分辨成像、细胞长时间形态观察摄影、多位点导航成像，在类器官研究、模式生物成像、药物筛选、神经学研究、癌症研究等方面有广泛的应用。温馨提示：报名方式（名额有限，报名从速哦）：1. 链接：http://xjpt-life.mikecrm.com/8w3Ztbj2. 扫描二维码：

近日，美国爱荷华州立大学的研究人员，用高空间分辨率基质辅助激光解吸电离（MALDI）- 质谱成像（MSI）来绘制和可视化了新受精的斑马鱼胚胎单细胞中磷脂类——磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）以及磷脂酰肌醇（PI）的三维空间分布。这是MALDI-MSI首次应用于单个细胞的三维化学成像。相关研究成果已经发表在Scientific Reports上。斑马鱼（Danio rerio）原产于东南亚，是一种小型热带观赏鱼。由于体外受精和光学透明，受精斑马鱼胚胎可在发育的所有阶段进行观察和操作。此外，斑马鱼很容易获得，价格低廉，健壮，易于护理，并且每周可以产下数百个卵。这些独特的遗传特点与实验胚胎优势相结合，使得斑马鱼成为研究早期发育的理想选择。斑马鱼已被广泛用作脊椎动物系统模型，用于研究脂质代谢、脂质在疾病中的作用以及胚胎发育中的脂质动力学。最近，Fraher等人使用LC-MS法进行脂质组学研究，结果显示胆固醇、磷脂酰胆碱（PC）和甘油三酯是斑马鱼胚胎中最丰富的脂质。他们证明，在调动到胚胎体之前，脂质在蛋黄内被加工。电喷雾电离质谱（DESI-MS）也被用于直接的MS分析和单个斑马鱼胚胎中脂质的成像、跨胚胎发育（受精后0,24,48,72和96小时）。研究人员对斑马鱼中的代谢组学和脂质组学研究非常感兴趣，因为这些化合物具有关键的生物学功能，例如作为能量储存源、参与细胞信号传导、并作为细胞膜的必要成分。探索如何调节代谢物和脂质是理解生物系统中发生的生物途径和发育过程的关键。传统分析方法研究小代谢物和脂质需要大量的样品制备、费力的提取、衍生化以及先期对目标化合物的了解。由于样品制备方案和仪器的发展，质谱成像（MSI）已成为这些研究中广泛使用的分析工具。MSI可实现生物分子空间分布的二维可视化，而无需提取、纯化、分离或标记分析物。此外，单个MSI实验可以同时检测许多不同类别的化合物，包括未知物，这使得其可以高分辨率和高通量方式直接对生物分子进行细胞或亚细胞作图。由于生物学在三维生物体中发生，3D成像对生命科学中的许多挑战产生了值得注意的影响并不奇怪。最近，使用质谱成像对完整生物分子进行成像已扩展到3D分析，以确定组织样本、琼脂平板和3D细胞培养物中的体积分子分布。使用质谱法最常见的3D成像方法包括收集样品的连续部分，使用传统的二维质谱成像分别分析每个部分，然后使用计算方法从多个二维集合堆叠和重建最终的3D成像MS数据集等步骤。美国爱荷华州立大学的研究小组（以下简称“研究小组”）开发了高空间分辨率的基质辅助激光解吸电离（MALDI）-MSI，分辨率低至5μm，并将其用于植物代谢物的细胞或亚细胞水平成像。在这里，研究小组利用这种高空间分辨率呈现了新受精的个体斑马鱼胚胎的3D MALDI-MSI。这是用MALDI获得的单个细胞的3D MSI的首次演示，揭示了各种脂质化合物的亚细胞水平定位。（a）受精斑马鱼胚胎在单细胞阶段的奇数编号光学图像。 （b）PE（22：6-16：0）在m / z 762.509和（c）PI（18：0-20：5）在m / z 883.535处的假彩色二维MALDI-MS图像。 通过覆盖所有2D图像，右侧显示投影图像。 所有物种均被检测为去质子化的[M-H] - 。在此分析中，研究小组通过获取62个连续横截面组织切片交替的正离子和负离子模式的MS成像数据，对单个斑马鱼受精卵进行3D MALDI-MSI。这可以对单个细胞中全面的脂质种类进行3D可视化。研究结果显示，所有三种磷脂类都存在于胚盘内的对称分布，以及蛋黄的边界，但每种都显示出不同的区域；PE显示在胚盘中心高度丰富的异质亚细胞区域，除了胚盘外，PC分子种类存在于蛋黄内部，而蛋黄中的PE和PI种类大多不存在。另外，还比较了四种不同的归一化方法以确定当将2D MSI与3D体积重建进行比较时，这些方法中的哪一种可以提供更具代表性的结果。此外，在不同细胞阶段（1-，2-，4-，8-和16-细胞阶段）获得胚胎的全扫描MSI和MS / MS，以研究斑马鱼成长早期阶段磷脂分布的变化。TOF-SIMS已报道被用于单个细胞的3D MSI，特别是结合深度剖析作为实现z方向信息的方式。然而，由于显著的碎裂，可以通过TOF-SIMS分析的高质量化合物主要限于外源性药物化合物。该研究小组所述的研究工作首次证明高分辨率MALDI-MSI可应用于单个细胞的三维化学成像，他们未来的研究将集中在揭示胚胎发育的细节，具有更高的空间分辨率和小代谢物的可视化，以及荧光显微镜的多模态成像等。在MALDI质谱成像方面，融智生物于2017年推出QuanTOF质谱成像系统，该系统集合了新一代宽谱定量飞行时间质谱平台QuanTOF，拥有5,000-10,000Hz长寿命半导体激光器，自主开发的数据采集软件。2018年7月，融智生物宣布实现可达500像素/秒的成像速率，提升MALDI-TOF MS成像速率达10倍以上，普通样本成像只需几十分钟，使得质谱成像实现了“立等可取”。 经过进一步的研发，目前QuanTOF质谱成像系统已经实现高达1000像素/秒的成像速率，5-10微米的高空间分辨率，且仍然保持了极高的灵敏度，使得质谱成像真正可使用于临床病理分析、术中分析等应用。