固氮功能菌

有机肥中固氮菌如何测定,谢谢

【序号】：1【作者】：严玉洲；黄有馨【题名】：乙炔还原法测定蓝藻固氮酶活性的技术条件 【期刊】：江苏农业科学【年、卷、期、起止页码】：1982年08期 【全文链接】：http://epub.cnki.net/grid2008/detail.aspx?filename=JSNY198208007&dbname=CJFD1982

实验室风险评估单指的是质量方面吗？

http://sfi.caas.ac.cn/biotestlab/serv03.htm微生物肥料行业标准NY227-1994《微生物肥料》NY410-2000《根瘤菌肥料》NY411-2000《固氮菌肥料》NY412-2000《磷细菌肥料》NY413-2000《硅酸盐细菌肥料》NY527-2002《光合细菌菌剂》NY609-2002《有机物料腐熟剂》NY/T798-2004《复合微生物肥料》NY882-2004《硅酸盐细菌菌种》NY/T883-2004《农用微生物菌剂生产技术规程》NY884-2004《生物有机肥》NY885-2004《农用微生物产品标识要求》GB/T19524.1-2004《肥料中粪大肠菌群的测定》GB/T19524.2-2004《肥料中蛔虫卵死亡率的测定》 [ 主页 ] [ 生物有机肥 ] [ 复合微生物肥料 ] [ 硅酸盐细菌菌种 ] [ 农用微生物菌剂生产技术规程 ] [ 农用微生物产品标识要求 ] [ 肥料中粪大肠菌群的测定 ] [ 肥料中蛔虫卵死亡率的测定 ] [ 根瘤菌肥料 ] [ 固氮菌肥料 ] [ 磷细菌肥料 ] [ 硅酸盐细菌肥料 ] [ 光合细菌菌剂 ] [ 有机物料腐熟剂 ]

Precellys 24是一台集研磨、裂解、均质为一体的多功能、高通量样品均质器。它通过三维高速振动（最高6800rpm），辅助研磨珠（玻璃珠、陶瓷珠、钢珠等）的敲打，达到对样品进行研磨、裂解、均质的目的。主要特点：1. 可同时处理24个样品，普通样品10-40s即可完全均质2. 均质时间短（60s以内），样品升温小3. 单样品单管操作，不会出现交叉污染4. 不仅省时省力，而且批间、批内差异更小5. 抽提的蛋白比活更高，核酸片断更长6. 可有效均质动植物组织、细菌、真菌，以及孢子、毛发、骨骼、粪便、土壤等一般仪器无法对付的样品7. 在L3实验室一天可以运行50-100次http://www.instrument.com.cn/netshow/SH101005/C17669.htm

功能性蛋白及一例分析自19世纪中叶荷兰化学家Gerardus Mul-der从动物组织和植物体中提取出蛋白质以来，人们发现了越来越多的蛋白质，据估计生物界中蛋白质的种类可达1010～1012之多;在这如此众多的蛋白质中，功能性蛋白发挥着极其重要的生理功能 。功能性蛋白也有人称其为活性蛋白。它们的特点是都有识别功能，能与其他分子特异性结合.完成各种复杂的生命活动:在结构上主要是一些球状蛋白质。1 功能性蛋白的种类按其作用方式不同可分为酶蛋白、运输蛋白、运动蛋白、免疫球蛋白、毒蛋白、激素蛋白（1）酶蛋白： 细胞的生长和繁殖、代谢物的合成和分解、能量的产生和利用，这些过程所需要的物质都是通过无数的生物化学反应来提供的.而这些反应又都是在一类特殊蛋白质—酶蛋白的催化下完成的。酶的催化效率极高，且具有高度的专一性，也正是这种高度的专一性使一种特定的酶只能作用于一种或少数几种结构相似的化合物，这就要求有各种不同的酶去作用于不同的化合物。在酶的作用下，生物细胞才得以合成各种复杂的化合物，也才能使各种大分子物质被分解、吸收和利用.且这些反应都要在适合于生物体本身的温度、压力和pH值等非常温和的条件下进行，能使生物细胞按照这种方式进行化学变化是蛋白质最重要的功能之一。常见的酶蛋白如淀粉酶使淀粉分解形成葡萄糖，蛋白酶、肽酶使蛋白质分解为氨基酸;溶菌酶使细菌细胞壁中的肤聚糖被破坏;凝血系统酶的有序作用使凝血过程得以有条不紊地进行.合成酶能合成多种体内所需要的大分子物质。应用举例：由于近年来鱼粉资源价格上涨，冷向军等人通过向鱼粉含量较低(10﹪)的饲料个添加蛋白酶AG使鱼的前肠蛋白酶有显著提高。同样有实验证明在玉米-豆粕型粮食中添加蛋白酶可以改善肉鸡的生长性能，提高蛋白质的消化率。（2）运输蛋白：有些蛋白质起载体的作用可以运输特定的物质到达必须的部位，使其完成特定的功能，这种蛋白质称为运输蛋白。如哺乳动物的血红蛋白能将氧从氧气充裕的肺内运送到各个组织中去:血清蛋白能与游离脂肪酶等多种物质结合，并将这些物质在脂肪组织与身体的其他部位间运送（最典型的β1-脂蛋白可随血流运输脂肪)，铁传递蛋白能传递血液中的铁。无脊椎动物体内的血蓝蛋白，大豆根瘤中的豆血红蛋白也起着输送氧气的作用。另外还有一些能携带物质通过细胞膜进出细胞的蛋白质，如细菌过膜运输中的载体蛋白等，它们都属于运输蛋白。（3）运动蛋白：参与运动功能的蛋白质种类较多如脊椎动物中骨骼肌的主要成分就是肌动蛋白和肌球蛋白，肌肉的收缩就是靠着这两种互相联系的平行丝状蛋白相对滑动来完成的；细菌的运动器官——鞭毛也是由鞭毛蛋白组成的；绿藻的运动也离不开蛋白质；有丝分裂的完成，精子的运动等都与运动蛋白有关，所以绝大多数生物的运动和收缩过程都是运动蛋白参与的结果。应用举例：邱永忠等人在研究烟草花叶病毒（TMV）在植物细胞间的运动时发现用体外定位突变引起L株上，被点突变的DNA体外转录成RNA后感染感病烟草，结果定位突变的L株表型30kD蛋白基因四种位点不同的移码突变和一种基因中间大部分缺失的突变体均使病毒不能感染植株。这证明TMV 30kD蛋白与病毒运动有关，而与病毒复制无关。同时因为胞间连丝一般只能让小于1kD的分子通过，其通透范围远小于病毒颗粒，也小于折叠的病毒核酸分子，Wolf等实验证明正时因为30kD蛋白才使得植株分子半径扩散了三倍多。（4）免疫球蛋白：指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。脊椎动物的免疫系统能抵抗外来的入侵物质，如病毒、细菌以及其他机体的细胞，当外来的这些入侵物质(抗原)进入机体后就会激发机体的免疫系统而产生特异性的免疫球蛋白(抗体)，通常每一种抗体对于相应的某一特定抗原具有高度的专一性，抗原与抗体结合形成抗原-抗体复合物．使入侵物质——抗原失活而排出体外，从而消除外来物质对机体的干扰。由此看来蛋白质不仅参与了高等动物的免疫反应，而且起着重要的作用，由于抗原和抗体结合的高度专一性，必然有数量众多的抗体作用于不同的抗原物质，据估计抗体的类型可能有10O万种，即免疫球蛋白可能有100万种之多。（5）毒蛋白：动物、植物和微生物都可以产生某些特殊的物质来防御敌害，这些物质中绝大多数是蛋白质类物质，由于它们对高等动物具有毒性，故称为毒蛋白。蝎类能产生毒性很强的蝎毒蛋白．用来攻击敌害，保护自己；蛇类产生的神经毒素和心赃毒素其主要成分也是小分子量的蛋白质；毒蘑菇中的相当一部分蘑菇毒素也是蛋白质；细菌产生的毒素，毒性极强的肉毒梭菌毒素(人的致死量小于19m)和破伤风痉挛毒素、白喉杆菌毒素等外毒素均是蛋白质。应用举例：王峰等人研究核糖体失活蛋白（RIPS)是一类能够抑制细胞核糖体合成蛋白质，从而导致宿主死亡的毒蛋白，广泛存在于植物、细菌中。发现其在在细胞内的转运途径研究很多，目前较为清楚的是逆向转运途径，其中以蓖麻毒素、志贺菌毒素、霍乱毒素为代表，大体过程为：内吞一内吞小体一高尔基体一内质网一胞液。（6）激素蛋白：是由特殊细胞所产生的一类物质，它们通过与靶细胞或系统内其它器官的相互作用来发挥其代谢上的功能，其实许多激素本身就是蛋白质，这样的蛋白质称为激素蛋白，它们在生物合成上具有重要的功能。如胰高血糖素、胰岛素、胃泌素、生长激素、促甲状腺激素、促肾上腺皮质激素和促脂解激素等均是蛋白

常用的有琼脂斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、沙土管保藏法、甘油冷冻管保藏法、低温冷冻保藏法等，方法很多。 我选用液体石蜡保存方法，该方法适用于不能分解液体石蜡的酵母菌、某些细菌（如芽孢杆菌属、乙酸杆菌属等）和某些丝状真菌（如：青霉属、曲霉属等），而某些细菌（如：固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌等）和一些真菌（如：卷霉菌、小克银汉霉、毛霉等）不宜采用此法进行保存。微生物检验常用以下菌种：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌药典也没有要求怎样保存，只说选用适宜的保存方法需要验证。但是肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌这些菌种用液体石蜡保存方法适合不？

【序号】： 1【作者】： R.W.F. Hardy, R.C. Burns, R.D. Holsten【题名】： Applications of the acetylene-ethylene assay for measurement of nitrogen fixation【期刊】：Soil Biology and Biochemistry 【年、卷、期、起止页码】： 1973，5,1，47–81【全文链接】：http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/003807177390093X

我们有个蛋白质含量约45%-60%的蛋白型固体饮料，公司制定菌落总数的检测标准依据GB/T 4789.21进行检验，可是在我们公司检验菌落总数是合格的但送我们省质检院检验就会检测出十几万的菌落总数？GB/T 4789.21这检验方法我们公司很多产品都在用都没有出现问题，就是蛋白型固体饮料与质检院检测结果相差太大。请教各位高手是不是蛋白型固体饮料做微检时有特殊的处理方法？或者需要注意什么？谢谢

【序号】： 1【作者】： WOLFE, M 【题名】： THE EFFECT OF MOLYBDENUM UPON THE NITROGEN METABOLISM OF ANABAENA-CYLINDRICA .1. A STUDY OF THE MOLYBDENUM REQUIREMENT FOR NITROGEN FIXATION AND FOR NITRATE AND AMMONIA ASSIMILATION【期刊】： ANNALS OF BOTANY【年、卷、期、起止页码】：1954, 18 , 71, 299-308 【全文链接】： 【序号】： 2【作者】： : FUJITA, Y，OHAMA, H，HATTORI, A【题名】：HYDROGENASE ACTIVITY OF CELL-FREE PREPARATION OBTAINED FROM THE BLUE-GREEN ALGA, ANABAENA-CYLINDRICA【期刊】： PLANT AND CELL PHYSIOLOGY【年、卷、期、起止页码】： 1964,5,3，305-314 【全文链接】： 【序号】： 3【作者】： RUETER, JG 【题名】：IRON STIMULATION OF PHOTOSYNTHESIS AND NITROGEN-FIXATION IN ANABAENA-7120 AND TRICHODESMIUM (CYANOPHYCEAE) 【期刊】： JOURNAL OF PHYCOLOGY【年、卷、期、起止页码】：[font=Times

补充笔记上的题：20、影响微生物的生长和代谢的环境因子有哪些？（1）温度（2）水分及可给性（3）氢离子浓度（pH）（4）氧气和氧化还原电位（5）辐射（6）化学杀菌剂和抑制剂21、微生物间的相互关系有哪些类型？（1）互生关系（偏利关系、协同关系）（2）共生关系（3）对抗关系（竞争、拮抗、寄生、捕食）22、固氮根瘤的结构及形成过程：（1）结构：a、无限型根瘤：根瘤表皮和皮层，分生组织，含菌组织，微管束，细胞间隙b、有限型根瘤：与无限型根瘤相比，不含分生组织（2）形成过程：a、感染和侵入线的形成b、根瘤原基的形成c、原基发育成根瘤23、外生菌根、内生菌根的结构与功能（1）外生菌根：a、结构：菌根真菌的菌丝在寄主植物的营养根表面形成一个紧密交织的菌套，在根的皮层细胞间形成哈蒂氏网，但菌丝一般不伸进细胞的内部。b、功能：扩大寄主根系的吸收面积；增加对磷元素和其他元素的吸收利用；能产生生长激素和抗生素；增强寄主植物的抗逆性（极端温度、湿度、[siz

霉菌毒素是由霉菌或真菌产生的有毒有害物质。在土壤中，在植物上，包括谷物、饲草和青贮饲料均可发现霉菌毒素。霉菌毒素对粮食、饲料的污染已是一个全球性热点问题。目前已知的霉菌毒素高达几百种，而食品、饲料、饮料、药材行业中危害较大的主要是以黄曲霉毒素（Aflatoxin），赭曲霉毒素A（Ochratoxin A），单端孢菌毒素（Trichothecenes），玉米赤霉烯酮（Zearalenone），烟曲霉毒素（Fumonisin）和串珠镰刀菌素（Moniliformin）发生较多，由于霉菌毒素种类繁多、结构复杂多样，这就造成实际生产中，真菌毒素的定量检测成为困扰我们的重要难题之一，对于这些毒素的检测样品的净化处理显得尤为重要。目前霉菌毒素的检测方法包括薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。但薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长；而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高，但特异性差，假阳性高；免疫亲和柱高效液相色谱法成本太高, 对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大。迫切需要一种样品处理简便易行、快速准确、灵敏度高、检测限低，检测成本低廉的检测方法和技术。尤其液相色谱分离技术具有分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分离和测定一次完成，得到越来越多行业和单位的应用，然而整个过程样品前处理的好坏将直接导致测量结果的准确与否，对样品净化的方法要求更高。Pribolab推出的新一代霉菌毒素净化柱产品，在创新发展了霉菌毒素检测的样品处理技术基础上，可以保证整个检测一开始就具有较高的重现性和可靠性。现代前处理技术在要求净化效果的同时，越来越追求方法的快速及易操作性，PriboFastR系列多功能净化柱采取的方法就是多重机制吸附杂质并快速萃取净化的方法，，它将极性、非极性及离子交换等多类官能基团作为复合吸附填料作为填充剂填充到柱体中，这些填料可以选择性的吸附样品中的如脂类、蛋白类和色素等主要杂质吸附，同时将待测目标物（如中黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮等各种霉菌毒素）留在样液中，从而达到净化和富集的目的。使用PriboFastR 系列多功能净化柱，能够及时快速地对从食品、饲料、饮料、药材中提取的待检液进行净化，过柱净化后的样品可以用于检测黄曲霉毒素、 玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇等多种霉菌毒素。与一般的固相萃取柱（SPE）和亲和柱相比，多功能净化柱无需活化、上样、洗脱等步骤，能够将食品或饲料提取液中的杂质与真菌毒素进行一步分离，使用快捷、方便，减少萃取步骤，有效保证分析的更加准确可靠，降低检测成本，有效提高检测效率。广告嫌疑的内容部分已经过编辑（弗雷德）

[b] 食用菌猴头菇的研究概况1.1 食用菌简介[/b][align=left] 食用菌是能够形成大型肉质胶质的子实体或菌核类组织，并能供人们食用或者药用的一类大型真菌[sup][/sup],以其白色或浅色的菌丝体在含有丰富有机质的场所生长，条件适宜时形成子实体，成为人类喜食的佳品，自古素有“山珍”之称。据估计全世界有食药用菌140，000种，目前已知的约14，000种[sup][/sup]。我国气候多样，植被丰富，利于各种菌类繁殖生长，已知的可食用真菌有1500～2000种[sup][/sup]，其中多属担子菌亚门，常见的有在山区森林中生长的木生菌典型品种香菇、木耳、银耳、猴头、松口蘑、红菇和牛肝菌等；少数属于子囊菌亚门，如羊肚菌、马鞍菌、块菌等。我国是世界上最早栽种、利用食用菌的国家之一，可追溯到5000多年前的仰韶文化时期。唐代韩鄂所著的《四时纂要》中“取烂构木及叶，于地埋之。常以泔浇令湿，两三日即生。”一段是古农书中关于种菌法的最早记载。公元前239年的《吕氏春秋.本味篇》中记载着“味之美者，越骆之菌”，越骆即当今的浙江省香菇主产区，菌即香菇，寥寥数字说明菌类入馔的特点。1100多年前唐代苏恭所著《唐本草注》记述：“桑、槐、楮、榆、柳，此为五木耳，…煮浆粥，安诸木上，以草覆之，即生蕈耳。”即为人工栽培木耳的方法。800多年前在浙江西南部就采用“砍花”种香菇，并创造了“惊蕈”等技术，《广东通誌》记载了200多年前草菇的栽培在广东韶关起源，后由我国华侨传入东南亚[sup][/sup] 。[/align][b]1.2食用菌的营养价值和药用价值[/b][align=left] 食用菌不仅质地柔嫩，风味鲜美，而且营养价值高。含有丰富的蛋白质和氨基酸[sup][/sup]，含量占鲜重的3～4%，干重的30～40％，介于肉类与蔬菜之间，其蛋白质为植物蛋白，相比动物蛋白人体更易吸收和利用，是国际上公认的“十分好的蛋白质来源”。还富含有纤维素、多种维生素[sup][/sup]，如维生素B1、维生素B2、维生素B12、烟酸、维生素C 、维生素D 原等。食用菌含有包括硒元素在内的人体必需的几乎所有矿物元素[sup][[/sup][sup]8][/sup]，磷的含量是黄瓜、白菜等蔬菜的5-10倍。香菇、黑木耳中铁含量约为一般蔬菜含量的100倍，还包含了20余种生物酶、多糖体、无机盐以及微量元素等，对维持人体新陈代谢和生理机能的调节具有重要作用，联合国粮农组织倡导的最科学饮食营养中提到每餐应当为一荤+一素+一菇的搭配。[/align][align=left]食用菌含有的活性成分如真菌多糖、β－葡萄糖和RNA 复合体、天然有机锗、核酸降解物、cAMP 和三萜类化合物等对人体健康有重要的药用价值，主要有以下几方面：[/align][align=left]1、抗癌作用：食用菌中的多糖体能刺激癌细胞抗体的形成，提高机体防御能力，并增加多种化疗药物效力。据研究，银耳孢多糖对小鼠H22肝癌和lewis肺癌有明显抑制，可减缓环磷酰胺导致的体重增长减慢现象[sup][/sup]；董海影[sup][/sup]、贾巍[sup][/sup]等证实姬松茸多糖能激活巨噬细胞，增强吞噬能力从而抑制肿瘤生长；赵凯[sup][/sup]等研究表明，竹荪多糖对小鼠S180肉瘤有一定抑制效果。[/align][align=left]2、清除自由基抗氧化作用：自由基会引起细胞结构和功能的改变，导致器官组织的损伤，张俊会[sup][/sup]、盛伟[sup][/sup]等研究发现杏鲍菇胞内多糖和胞外多糖均能清除羟基自由基，有较强的抗氧化活性。[/align][align=left]3、对心血管系统作用：许多食用菌能改善心脏血液流动，增加冠状动脉血流量，降低心肌耗氧量，具有明显的降血脂作用，如银耳、黑木耳、猴头、冬虫夏草等；香菇中的腺嘌呤衍生物和酪氨酸氧化酶都有降血压和降血脂作用。陈伟强[sup][/sup]等研究显示，灵芝可明显降低血液中TC及TG含量，提高HDL-C密度。[/align][align=left]4、免疫调节：人体免疫功能随年龄增长而下降，雷萍[sup][/sup]等人研究发现，灰树花提取物可通过调节Bcl-2与Bax比例增强 NK细胞杀伤活性，从而提高脾虚小鼠的免疫功能。虫草中的虫草多糖、虫草素、虫草酸、SOD等活性物质 具有增强机体免疫力、抗疲劳、延缓衰老等多种生理功能[sup][/sup]。[/align][align=left]此外，食用菌还可起到预防艾滋病、美容减肥、增智益寿的作用，对胆囊炎、急慢性肝炎、呼吸系统疾病也具有一定疗效。[/align][align=left]世界人口的不断增加和耕地面积的减少，造成资源和粮食短缺，据统计，全球约有超过5亿人口蛋白质营养不良，人类急需增加食物供给。而食用菌栽培不占用耕地，可利用农林副产品及废棉、废纸、酿造废渣等工业废物进行生产，其废渣还可进行三次利用，具有良好的环保生态效应，是人类优质高蛋白食物的重要来源，是造福现在功在未来的 “万年青”产业。[/align][b]1.3食用菌产业发展现状[/b][align=left] 中国食用菌协会统计数据显示，1978 年全国食用菌产量不足10 万吨，产值不足1 亿元， 2010年全国食用菌总产量达到2220万吨，占世界总产量的70%以上，而到2014年中国食用菌总产量超过3400万吨，产值超过2300亿元。目前我国已成为全球食用菌产量第一大国，在食用菌国际贸易中，中国的贸易量已占到了亚州的80%、全球的40%[sup][/sup]，成为我国出口创汇的主要农副产品。2012年全国在建和已建成投产的工厂化食用菌企业达到 788家，同比增长了21%[sup] [/sup]，其规模在种植业中仅次于粮、棉、油、菜、果而居第六位。食用菌产业也已成为我国很多地方的“再就业工程”、“奔小康工程”、“富民强县工程”首选项目，被誉为21世纪新型的“白色农业”、“生物农业”[sup][/sup]。营养专家建议人均应日消费250g菌类，而实际消费量约66g，因此未来食用菌行业的发展依然前景广阔，保守估计，到2020 年我国食用菌产量将达到5000多万吨。[/align][align=left] 我国人工栽培的食用菌品种目前约60多种，是世界上食用菌栽培种类最多的国家，主要有香菇、金针菇、平菇、风尾菇、秀珍菇、竹荪、黑木耳、银耳、草菇、猴头菌、姬松茸、杏鲍菇、白灵菇、真姬菇等，其中香菇、双孢菇产量较大，达到上百万吨[sup][/sup]。一些珍稀品种，如蛹虫草、大球盖菇、灰树花也已驯化栽培成功，极大地丰富了国内国际食用菌市场[sup][/sup]。[/align][align=left] 我国食用菌重点产区主要分布在福建、河北、河南、山东、浙江、江苏、广东和四川等省，从业人员约为2000多万人。其中福建和浙江为食用菌出口老产区，主要栽培银耳、木耳、香菇等。河南、河北、山东为出口新区，主要有滑菇和反季节香菇山双孢蘑菇和真姬菇。云南、四川的松茸、牛肝菌、羊肚菌为野生菌出口区。[/align][align=left][color=red] [/color]食用菌产业是我省特色的农业十大支柱产业之一,近20年来，我省食用菌业发展迅速，产量、产值、出口连续12年全国前列。据统计，2012年福建省食用菌总产量达220万吨，鲜种食用菌产量居全国第四，形成了独特的支柱产业和突出的优势。 [/align][b]1.4 食用菌产品的开发现状[/b][align=left] 当前我国大部分食用菌仍以初级的原料性大包装产品为主，精深加工品少[sup][/sup]，主要是采用新鲜的子实体生产食品、饮料和调味食品等[sup][/sup]。[/align][align=left] 1、休闲食品是以食用菌为原料制成的各式小食品。贺荣平[sup][/sup]等人采用现代负压真空渗糖工艺，研制出猴头蛋白糖，是集绿色、天然、营养、保健于一体的特色小食品；采用传统果酪加工工艺制作成的猴头菌丝核桃酪，细腻甘甜、富含菌丝多糖，对人体大有补益。以食用菌子实体中提取多糖制成的食用菌多糖片，能增强淋巴细胞活力，诱发肌体产生干扰素，提高免疫性。类似产品还有盐渍品[sup][/sup]、糖渍品[sup][/sup]、饼干、蜜饯[sup][/sup]等，在市场上有一定的占有率。[/align][align=left] 2、食用菌饮料、罐头：食用菌保鲜较为困难，制成干品后损失了大量的营养及鲜味物质，通过加工成饮料、罐头，既能长期贮存，又能保持食用菌的风味。唐三定[sup][/sup]研究了大球盖菇盐水罐头的生产工艺，张信仁[sup][/sup]研究了杏鲍菇软罐头加工工艺，田龙[sup][/sup]等以长根菇为原料，配制出一种营养、保健、绿色的食用菌饮料。[/align][align=left][color=red] [/color]3、调味食品：食用菌子实体经粉碎、过筛，添加各种食品添加剂混合而成；或将食用菌子实体浸提液经浓缩、干燥后与其他调味料混合而成。常见的产品有香菇、平菇酱油，蘑菇醋，香菇方便面汤料，金针菇、凤尾菇酱菜等。[/align][align=left] 我国利用大型真菌类加工的保健食品已进入商品化生产或尚在试验阶段的产品有500种之多，主要有营养口服液类、保健饮料类、保健茶类、保健滋补酒类、保健胶囊类等5个系列的产品，部分食用菌还可作为农药制品和观赏制品[sup][/sup]。[/align][b]2 猴头菇与猴头菇产品的开发2.1 猴头菇的生物学特性2.1.1 形态结构 [/b][align=left] 猴头菇由菌丝体和子实体两部分组成。菌丝体为白色，培养初期生长较慢，呈散射状，后变浓密，在木屑培养料基质中呈白色或乳白色，其菌丝细胞壁薄，有分枝和横隔，直径10μm～20μm。子实体呈块状，扁半球形或头形，肉质，新鲜时呈白色，干缩后变成淡黄色或黄褐色，直径5～15cm，基部狭窄或略有短柄，上部膨大，表面密布长刺状的菌刺，菌刺下垂，较发达，长1～3厘米，外周生有子实层，整个子实体形似猴头，因而得名。[/align][b]2.1.2 理化环境 [/b][align=left][color=black] [/color] 猴头菇的生长发育与营养、温度、湿度、光照等条件相关，除了碳源和氮源外，还需要一定量的钾、镁、钙、铁、铜、锌等矿质营养。适合在潮湿温和的环境中生长，最适湿度一般为85％～90％，菌丝最适生长温度为20℃～26℃，子实体属低温结实型和恒温结实型，最适温度为16℃～20℃。在酸性条件下菌丝生长良好，最适pH值为4～5，生长不需要直射光，只需要有散射光[sup][/sup]。目前，国内外猴头菇的人工栽培有瓶栽法和袋栽法。[/align][b]2.2 猴头菇的营养价值[/b][align=left][b][color=red] [/color][/b]猴头菇又名猴头、猴头菌、刺猬菌、山伏优菌、花菜菌、对脸蘑、阴阳蘑等，因外形酷似小猴子的头而得名。自古以来就有“山珍猴头，海味燕窝”之称，它与熊掌、海参、鱼翅齐名，被列为中国传统的“四大名菜”之一，明清时期被列为“贡品”。猴头菇含有丰富的蛋白质、氨基酸、多糖、粗纤维、微量元素、酰胺物质等，营养价值与目前人工栽培的其他食用菌相比居第一、二位[sup][/sup]，民间流传：“多食猴头，返老还童”。[/align][align=left]2002版的中国食物成分表中（中国疾病预防控制中心与食品安全所出版），摘录了猴头菇的主要营养数据，详见表1-1。[/align][color=red] [/color] 表1-1猴头菇（罐装）主要成分分析表 Tab．1-1 the main component analysistable of [i] Hericium erinaceus[/i][align=center] [table][tr][td=1,1,121] [align=center]成分[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]含量[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]成分[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]含量[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]成分[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]含量[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]蛋白质（g）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]2.0[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]核黄素（μg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]0.04[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]P（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]37[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]脂肪（g）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]0.2[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]尼克酸（mg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]0.2[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]K（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]8[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]碳水化合物（g）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]4.9[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]VC（mg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]4[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]Na（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]175.2[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]膳食纤维（g）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]4.2[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]VE（mg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]0.46[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]Mg（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]5[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]硫胺素（μg）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]0.01[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]Ca（mg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]19[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]Fe（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]2.8[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]Zn（mg）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]0.40[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center]Se（μg）[/align] [/td][td=1,1,85] [align=center]1.28[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]Cu（mg）[/align] [/td][td=1,1,88] [align=center]0.06[/align] [/td][/tr][tr][td=1,1,121] [align=center]Mn（mg）[/align] [/td][td=1,1,87] [align=center]0.03[/align] [/td][td=1,1,90] [align=center] [/align] [/td][td=1,1,85] [align=center] [/align] [/td][td=1,1,87] [align=center] [/align] [/td][td=1,1,88] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][/align]注：以每100g可食用部分计[b]2.3 猴头菇的药用价值[/b][align=left] 猴头的药用价值极高，据《现代中药学大词典》等文献记载，猴头味甘、性平、无毒、入肝、胃二经。能利五脏，助消化、可提高肌体免疫功能，增强抗病毒能力，能滋补、抗癌、治疗神经衰弱等，尤其对消化系统疾病有较好的疗效[sup][/sup][color=red] [/color]。[color=red] [/color][/align][b]2.3.1 抗肿瘤及提高免疫力[/b][align=left]刘重芳[sup][/sup]等人对猴头菇药效学的初探研究表明猴头多糖能显著增加免疫低下机体的免疫功能，增加胸腺、脾重量，提高白细胞作用。陈国良[sup][/sup]等人对猴头菇药效进行了系统研究，结果表明，猴头菇具有提高机体耐缺氧能力，加速血液微循环，增加冠脉血流量，抑制肿瘤细胞核酸代谢和体外毒杀肿瘤细胞的能力，治疗胃、肠溃疡、各种胃炎有效率达87.7%，胃、食道癌有效率69.3%，治疗冠心病心绞痛的有效率达76.9%，研究成功的猴菇菌片于1977年上市应用。杨焱[sup][/sup]等人对猴头菌子实体中提取的猴头菌多糖进行免疫功能测定，结果表明，猴头菌多糖能提高自然杀伤细胞的活性、促进迟发型超敏反应（DTH）的发生，增强巨噬细胞的吞噬功能，具有非特异性免疫功能又具有特异性细胞免疫功能。夏尔宁[sup][/sup]等从猴头菌丝体干粉中提取猴头多糖，发现可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,与对照组比较,吞噬指数提高4.5倍,吞噬百分率提高0.77倍。彭瀛等观察猴头菌多糖对小鼠移植性实体瘤 H22 的影响，结果表明不同剂量的猴头菌多糖抑瘤率均高于26%,显著提高胸腺指数,提高血中TNF-α和IL-2的水平,降低实体瘤组织VEGF的水平。Yim[sup][/sup]等发现猴头菌主要是通过调节机体免疫力来发挥抗肿瘤活性。实验证明，癌症术后及化疗患者，多吃猴头菇可延长生存期，缩小肿块[sup][/sup]。[/align][b]2.3.2 降“三高”[color=red] [/color][/b][color=black] [/color][color=black]杜志强[/color][sup][/sup][color=black]、张文[/color][sup][/sup][color=black]等实验发现，猴头菇提取物对四氧嘧啶型高血糖有降血糖疗效，且当猴头菇多糖剂量达到100mg/kg时，效果优于格列本脲。Keun[/color][sup][/sup][color=black]等发现猴头菌的液体培养物中有一种胞外聚合物，其分子量小于40kDa，蛋白质8.8%，含糖量91.2%，具有优异的降血脂效果。[/color][b]2.3.3 抗衰老抗疲劳[/b] [color=black]张鑫[/color][sup][/sup][color=black]采用动物负重游泳实验对东北猴头菇多糖缓解体力疲劳功能性进行评价，表明高剂量组小鼠负重游泳时间显著延长，体内肝糖原的贮备量较多，降低机体血尿素氮、血乳酸含量，可以提高机体运动耐力，延缓体力疲劳。研究表明，猴头菇多糖能增加小鼠LDH活力，降低运动后血乳酸水平，增强机体对运动负荷的适应能力，还能明显降低果蝇心肌褐脂质含量，增强飞翔能力，起到抗疲劳的作用[/color][sup][/sup][color=black]。对衰老的痴呆小鼠进行灌胃实验发现，猴头菇可有效改善记忆力障碍和脑部病理改变[/color][sup][/sup][color=black]。[/color][b]2.3.4 抗氧化[/b] [color=black]自由基被证实与衰老有关， 任大明[/color][sup][/sup][color=black]等人对猴头菌丝多糖的抗氧化功能试验研究中发现，高剂量猴头菌丝多糖能够提高小鼠血清中SOD,CAT的含量；高、中、低不同剂量猴头菌丝多糖对小鼠血清中MDA的水平具有一定的降低作用，表明具有一定的抗氧化功能，起到抗衰老的作用。Mau[/color][sup][/sup][color=black]等人的研究发现猴头菇提取液浓度为40mg/ml时，对自由基的清除率为70%；张虎成等[/color][sup][/sup][color=black]采用DPPH法证实猴头菇提取物具有抑菌能力、抗氧化活性和自由基清除能力。[/color][b]2.3.5 其他作用[/b][align=left]猴头菇还能治疗慢性肝功能不全或肝硬化，对食欲不振也有一定的疗效[sup][/sup]，还具有消炎抑菌、抗辐射等作用。[/align][b]2.4 功能性保健饮料概述 [/b] GB10789-2007《饮料通则》中对于功能性饮料的定义是：通过调整饮料中天然营养素的成分和含量比例，以适应某些特殊人群营养需要的饮品，主要包括运动饮料、营养素饮料和其他特殊用途饮料。国际饮料行业中多把具有保健功能作用的饮料作为功能性饮料的定义[sup][/sup]。随着经济的发展和生活水平的提高，单一解渴功能的传统饮料已不能满足人们的需要,具有某种特定功效，如降火解毒、增强免疫力、补充矿物质的功能性饮料应运而生[sup][/sup]。据欧洲Euromonitor International报道，2003年全球功能性饮料销售额达260亿美元[color=black]。[/color]2005年，功能性饮料在日本的销售额达到13000多亿日元，成为日本健康相关产品市场上发展最迅速的一类产品[sup][/sup]。我国功能性饮料发展大致经历了三个时期，最初是80年代健力宝公司的碳酸型运动饮料风靡全国，而后90年代“红牛"首次提出功能饮料的概念，目前已占据了市场上70%以上的份额。第二时期，“脉动"、“尖叫”、“激活”等添加维生素的运动饮料品牌纷纷浮出水面。第三时期是以清凉降火的凉茶饮料为主导，典型代表是“王老吉”，2008年其销售额达140亿元[sup][/sup],[color=black]功能性饮料成为我国饮料行业发展的又一方向，近几年得到了迅猛发展[/color][sup][/sup][color=black]。[/color]目前我国功能性饮料人均年消费量为0.5kg，与全球人均7kg的消费量相距甚远[sup][/sup]，可以预测，未来中国功能性饮料市场的发展潜力巨大[sup][/sup]。[color=red] [/color]市面上的功能性饮料品种繁多，按原料特点大致可分为以下几种： 1、植物性提取饮料:包括水果、蔬菜、谷物、茶叶等。实验证明，竹汁中含有丰富的VC、多糖、氨基酸和锗，能清除羟自由基，具有消炎、抗衰老和抗肿瘤的功效[sup][/sup]。谷类研制的非乙醇性饮料，如麦茶、薏米仁茶等，有利尿、消炎、镇咳等作用[sup][/sup]；[color=black] 2[/color][color=black]、中草药型：以[/color][color=black]中草药的浸提液，如人参、黄氏、何首乌、灵芝等为原料经发酵制得的保健饮料。[/color][color=black] 3[/color][color=black]、维生素、矿物质类：[/color]用于补充人体所需的铁、锌、钙、硒、铬、铜、碘等微量元素，能增强人体免疫功能，改善骨质疏松，有效抗疲劳[sup][/sup]。龚复俊等人[sup][/sup]以富硒玉米须、富硒银杏叶为主要原料制得固体饮料，通过测试小白鼠学习成绩，表明饮用富硒饮料能明显提高电击反应。[color=black] 4[/color][color=black]、真菌类:如虫草、灵芝等适宜体弱人群使用的饮品[/color][color=black]。[/color][color=black]潘继红等[/color][color=black]采用云芝菌深层培养滤液制成云芝酸乳，具有较高的营养和药用价值。此外，还有以灵芝发酵液做基料的“山帝”饮料，[/color][color=black]能防止血栓生成和动脉硬化[/color][color=black].[/color][color=black] 5[/color][color=black]、其他功能性饮料:如益生菌、藻类饮料等也有其相应的消费市场。[/color][b]2.5 猴头菇产品的研究与利用[/b][align=left] [color=black](1)[/color][color=black]临床应用：猴头菇制剂在临床上的应用已有几十年历史[/color][sup][/sup][color=black]，主要产品有猴菇菌片、猴头菌颗粒、[/color]复方猴头冲剂等，用于治疗消化系统疾病，如消化不良、萎缩性胃炎、浅表性胃炎、消化道溃疡、肿瘤等。[/align][align=left] (2)食品加工应用研究： [/align][align=left] 1、猴头菇饮料: 指采用猴头菇子实体、菌丝体或培养液经浸提、发酵或直接加工而成的一类产品[sup][/sup]。王红连等[sup][/sup]以猴头、灵芝、北虫草水提液为主要原料，添加功能性能量因子D- 糖制作新型运动保健饮料，为食用菌的开发利用开辟了一条新途径。魏跃臣[sup][/sup]等人以猴头菇、黑木耳、灵芝和小萝卜为主要原料加工成“复方猴头菇饮料”，并证明该饮料具有明显的抗疲劳作用。黄良水[sup][/sup]等选用猴头菇、绿茶为主要原料制成袋泡茶，保持了猴头菇有效成分的生物活性，具有较好的市场前景。此外，还有猴头菇葡萄汁饮料[sup][/sup]、猴头菇胡萝卜汁保健饮料[sup][/sup]、猴头菇大豆复合饮料[sup][/sup]、猴头菇果醋饮品[sup][/sup]等。 [/align][align=left] 2、休闲食品：陈梅香等[sup][/sup]用传统工艺制得猴头菇蛋糕，达到了“荤素搭配”的效果。[color=black]王卫[/color][sup][/sup][color=black]以西式熟制型色拉迷香肠工艺开发出一种携带方便、常温保存、开袋即食的功能保健食品--猴头菇迷你肠。[/color]王秋萍[sup][/sup]以猴头菇为原料研制的猴头 脯，既营养又有利于健康。此外，还有[color=black]猴头菇牛皮糖[/color][sup][/sup][color=black]、猴头菇面包[/color][sup][/sup][color=black]等产品.[/color][/align][align=left] 3、调味食品：[color=black]沈子林[/color][sup][/sup][color=black]在传统母子酱油生产过程中添加猴头菇和甘草等材料，既保持了其传统特色，又增加了营养保健功能。王广耀[/color][sup][/sup][color=black]、邵伟[/color][sup][/sup][color=black]等人采用发酵工艺都生产出兼具营养价值和独特风味的猴头菇保健醋。韦玉芳[/color][sup][/sup][color=black]采用固态低盐加辣发酵法制成猴头菇香辣酱，所制香辣酱色泽鲜亮，有猴头菇和辣酱独有的风味。[/color]赖建平等[sup][/sup]研制了猴头菇甜罐头的工艺参数，确定了其最佳配方。赵凤臣等[sup][/sup]研制出猴头菇、香菇肉香型调味剂，不添加化学防腐剂，长期食用可以增强体质、益寿延年。[/align][align=left] 4、其他食品：[color=black]张鑫等[/color][sup][/sup]选取猴头菇蛋白多糖为主要原料研制口含片，并检测该产品每片的总抗氧化能力达2733.4个单位。王世强等[sup][/sup]采用普通酸奶的制作工艺生产出凝乳均匀、淡淡菇香的猴头菇酸奶。邹东恢等[sup][/sup]以芦荟、猴头菇为原料生产出风味独特的保健酒，成品酒精度为20度。[/align][b]3 选题的目的及意义[/b][color=red] [/color]现代社会生活节奏不断加快，饮食无节制、营养不合理、环境污染及工作压力等原因，造成亚健康人群不断增多。人们越来越重视具有天然活性成分的、能够健康养生的产品的开发与利用，食用菌饮料就是其中一种，它不仅具有特殊的营养价值，还具备了独特的食用菌风味。在日本已有多种食用菌饮料进入市场，实施了特定的保健食品制度，在日本及欧美的销量均较好[sup][/sup]。 猴头菇是珍稀的药食两用真菌，具有消化道系统保护、调理和修复功能，可助消化、益肝脾，解饥解渴、消除宿毒等；同时还具有增强人体免疫力等功效[sup][/sup]。人们已利用猴头菇菌丝体提取物制成各种剂型的药物，用于医治消化不良、胃溃疡、食道癌、胃癌、十二指肠癌、贲门癌等疾病，取得了较好效果。猴头菇在保肝护肝，抗衰老，降血糖、血脂、血压等方面也有显著疗效[sup][/sup]，但猴头菇带有苦味，要经过洗涤、涨发、漂洗和烹制4个阶段，直至软烂如[url=http://www.xiangha.com/caipu/s-doufu][color=windowtext]豆腐[/color][/url]时苦味才能祛除，营养成分才完全析出，日常家庭食用较为繁琐。且猴头菇的保鲜复杂，鲜货保存期不长，干制品又丧失了其肉嫩、味鲜的风味[sup][/sup]，如开发成猴头菇饮料，不仅能起到提高人体免疫力的作用，还能增加商业价值，提升产品科技含量[sup][/sup]，具有生产成本低、饮用方便等特点，充分满足快节奏的都市生活对养生和“食补”的需求。目前市面上鲜有以猴头菇为主要原料的饮料产品，多出现在文献报道中，可见还处于实验室研发阶段。本文对猴头菇多糖的提取工艺进行了研究，优化了以水为介质，从猴头菇子实体中提取多糖的生产工艺，并配制成饮料，产品进行了微生物检测、糖含量、重金属检测及功能性验证试验，为进一步开发猴头菇饮料奠定了基础，有一定的商业前景市场。

关键词:微生物肥料；增产效果；绿色食品 摘要:为了农业的可持续发展，提高人民的生活品质，满足人们的需要，新方式，新研究成果应用到了农业生产中，微生物肥料从中起到的重要作用受到了人们的广泛肯定。本文通过介绍微生物肥料的个别种类与生产作用效果的分析，讨论了微生物肥料的发展前景。微生物肥料是指含有活性微生物的特定制品。微生物肥料的主要优点是能改良土壤,不污染环境,无毒副作用,是生产“绿色食品”的理想肥料。将微生物肥料应用在种子和土壤上，可增进土壤肥力，协助植物吸收营养，增强植物抗病及抗旱能力，节约能源，降低生产成本，减少环境污染。 一、 微生物肥料的分类与应用 按微生物肥料制品中特定的微生物种类分为细菌肥料（根瘤菌肥料，固氮菌肥料），放线菌肥料（如抗生菌类），真菌类肥料（如菌根真菌）等；按其作用机理分为根瘤菌肥料，固氮菌肥料，磷细菌肥料，硅酸盐细菌肥料；按其制品内含有的微生物种类分为单纯微生物肥料，复混微生物肥料。 （一）根瘤菌肥料 　　根瘤菌肥料是用于豆科作物接种，使豆科作物结瘤、固氮的接种剂。复合根瘤菌肥料以根瘤菌为主，加入少量能促进结瘤、固氮作用的芽胞杆菌、假单胞细菌或其他有益的促生微生物的根瘤菌肥料，称为复合根瘤菌肥料。加入的促生微生物必须是对人畜及植物无害的菌种。 　　（二）固氮菌肥料 　　固氮菌肥料是以能够自由生活的固氮的微生物为菌种生产出来的固氮菌肥料。按菌种及特性分为自生固氮菌肥料，根际联合固氮菌肥料，复合固氮菌肥料。固氮菌肥料适用于各种作物，特别是禾本科作物和蔬菜中的叶菜类作物，可作基肥，追肥，和种肥。 　　（三）磷细菌肥料 　　磷细菌肥料是能把土壤中难溶性的磷转化为作物能利用的有效磷素营养，又能分泌激素刺激作物生长的活体微生物制品。 　　解磷菌的种类很多，按菌种及肥料的作用特性分为，有机磷细菌肥料，无机磷细菌肥料。有机磷细菌肥料是指在土壤中能分解有机态磷化物（卵磷脂，核酸，植素等）的有益微生物发酵制成的微生物肥料。无机磷细菌肥料是指能把土壤中惰性的不能被作物直接吸收利用的无机态磷化物，溶解转化为作物可以吸收利用的有效态磷化物。 　　（四）硅酸盐细菌肥料 　　硅酸盐细菌肥料是指在土壤中通过硅酸盐细菌的生命活动，增加植物营养元素的供应量，刺激作物的生长，抑制有害微生物的活动，对作物有一定的增产效果的微生物制品。 二、微生物肥料的肥效 　　微生物肥料和化肥，有机肥等混合施用，比传统施肥增产的报道占98%，其中增产幅度超过5%的报道占87.4%，超过10%的占56.6%。微生物肥料种类以固氮菌类，解磷细菌类，解钾细菌类和复合微生物肥料为主。菌根菌类，复合微生物肥料，PGPR类，固氮菌类，光合细菌类和解钾菌微生物肥料的平均增产率依次为22.3%，21.2%，16.5%，14.7%,13.6%和12.2%。1989年以来非根瘤菌类微生物肥料的文献以应用效果试验的报道为主，其中增产的占绝大多数，约98%，所以微生物肥料的增产作用是应给予肯定。 　　（一）不同微生物肥料增产效果 　　据文献综合分析，各类微生物肥料的平均增产效果不同，范围在12.0%-22.3%，菌根菌类微生物肥料主要应用于林业生产，增产约22.3%；解钾菌肥料的增产效果最低，但在甘薯上用作基肥效果较好，增产率23.2%；复合微生物肥料的增产效果约为21.2%。 　　（二）微生物肥料在不同地区的应用与增产效果 　　目前，我国约20多个省（市，区）都有微生物肥料的应用，其中华中地区最多，报道的试验次数为44次；华北和西北次之，分别为43和34次，华南和东北较少，前者为9次，后者为8次。微生物肥料在我国应用于30多种作物上，其中，禾谷类作物应用最多，其次是油料和纤维类，应用较少的是烟草，糖，茶，药，牧草等，但不同作物因不同的生理特点，环境，接种物的种类和农业措施，应用效果不同，糖料作物的增产效果最好，其次为茶叶，蔬果增产25.4%，牧草类增产26.1%纤维，薯类，油料的增产效果分别为17.1%，17.8%和15.0%，微生物肥料对禾本科作物的增幅最低。 　　（三）近年微生物肥料田间试验应用效果 　　2003-2006年，在小麦，玉米，番茄，马铃薯四种作物上进行微生物肥料应用的田间试验，结果表明：可使小麦，玉米化学肥料基肥用量降低25%-30%，并使小麦，玉米的产量比常规施肥量高4.7%和18.1%；使番茄，马铃薯化学肥料基肥用量降低30%-45%，并使番茄，马铃薯的产量比常规施肥量提高11.5%和36.2%。 三、微生物肥料的良好作用 　　（一）提高土壤肥力，减少化肥用量，改善作物品质 　　这是微生物肥料的主要功效，各种自生、联合或共生的固氮微生物肥料，可以增加土壤中的氮素来源。多种分解磷、钾矿物的微生物，如一些芽孢杆菌、假单胞菌的应用，可以将土壤中难溶的磷、钾溶解出来，转变为作物能吸收利用的磷、钾离子，使作物生活环境中的营养充足。由于微生物肥料可以提高土壤的养分含量，因此在相同地力水平的土壤上可以减少化肥的用量，并且获得等效的增产效果。使用微生物肥料可以提高农产品品质，如蛋白质、糖、维生素等含量的提高。（二）分泌生长激素 　　许多微生物种类在生长繁殖过程中产生对植物有益的代谢产物，如生长素，吲哚乙酸，赤霉素，多种维生素，氨基酸等等，能够刺激和调节作物生长，使植物生长健壮，营养良好，进而达到增产的效果。 　　（三）增强植物抗病虫和抗旱能力 　　多种微生物可以诱导植物的过氧化物酶，多酚氧化酶，苯甲氨酸解氨酶，脂氧合酶，几丁质酶等参与植物防御放应，利于防病抗病，有的微生物种类还能产生抗菌素类物质，有的则是形成了优势种群，降低了作物病虫害的发生。菌根真菌由于在植物根部的大量生长，其菌丝除可为植物提供营养元素外，还可增加水分吸收，有利于提高植物的抗旱能力。 四、微生物肥料的应用前景 　　（一）适用品种多，市场需量大 　　适宜施用微生物肥料的作物种类繁多，各种豆科作物、粮食作物、经济作物、蔬菜瓜果等都可以应用微生物肥料提高产量、改善品质。据不完全统计，我国目前微生物肥料年产量在10万吨到40万吨，与同期化肥（约12000万吨）相比，微不足道，微生物肥料市场容量是相当大的。 　　（二）生产成本低，应用效果好 　　1997年4月，在意大利召开的“生物固氮、全球挑战和未来需求”会议指出，生物固氮比工业氮肥更能满足植物对氮肥的需要。因为生物固氮可以持续不断供应氮素营养，并且能够减少环境污染和温室效应，投资少，成本低。化肥生产成本的提高，价格上涨幅度过快，已令广大农民难以接受。 　　（三）生产无公害绿色食品，减少环境污染的需要 　　无公害的绿色食品对当今的农业提出了更高的要求。随着绿色农业（生态农业）的发展，生产安全、无公害的绿色食品已成为一个发展趋势；并且由于大量使用化肥，土壤物理性质恶化，土壤质量下降，地下水污染等问题日益突出；消纳城市、农村废弃物的压力愈来愈大，因此，无污染的微生物肥料的综合利用和开发显示出它的应用优势和良好发展前景。 　　（四）微生物肥料本身的发展为其扩大应用奠定了基础 　　通过筛选优良菌种、改进生产工艺和生产设备，为生产优质的微生物肥料创造了条件，而且基因工程新菌株的出现使微生物肥料的广泛应用成为可能。近年来兴起的植物根际促生细菌（PGPR）的研究和开发，更为微生物肥料的应用开辟了广阔前景。 参考文献： 葛诚主编。微生物肥料生产应用基础。北京：中国农业科技出版社，2000 李明。微生物肥料研究。生物学通报2001，36（7）：5-7 郭春景。微生物肥料及其微生态效应研究东北林业大学，2004 沈德龙，曹凤明，李力。我国生物有机肥的发展现状及展望中国土壤与肥料，2007，（06） 张敏，王兆玉。微生物肥料的发展前景。北方艺园，2004，（05）

【序号】：1【作者】：Taha, E E; el Monem, A; el Refai, H【题名】：On the nitrogen fixation by Egyptian blue green algae【期刊】：Z Allg Mikrobiol 【年、卷、期、起止页码】：1963，3，4 ，282-8【全文链接】：http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jobm.19630030406/abstract【序号】：2【作者】：De PK【题名】：The role of blue-green algae in nitrogen fixation in rice-fields【期刊】：PROCEEDINGS OF THE ROYAL SOCIETY OF LONDON SERIES B-BIOLOGICAL SCIENCES 【年、卷、期、起止页码】：1939 ，127 ，846，121-139【全文链接】：【序号】：3【作者】：WIEBE WJ, JOHANNES RE, WEBB KL【题名】：NITROGEN-FIXATION IN A CORAL-REEF COMMUNITY【期刊】：SCIENCE 【年、卷、期、起止页码】：1975，188 ，4185，257-259【全文链接】：http://www.sciencemag.org/content/188/4185/257.abstract

生活在土壤中的细菌、真菌、放线菌、藻类的总称。其个体微小，一般以微米或毫微米来计算，通常1克土壤中有106～109个，其种类和数量随成土环境及其土层深度的不同而变化。它们在土壤中进行氧化、硝化、氨化、固氮、硫化等过程，促进土壤有机质的分解和养分的转化。土壤微生物一般以细菌数量最多，有益的细菌有固氮菌、硝化细菌和腐生细菌；有害的细菌有反硝化细菌等。施用有机肥有益于微生物的生长和繁殖。

[size=16px]首先，固氮是自然界中氮循环的关键环节。固氮微生物，如根瘤菌[i][/i]和蓝藻，通过氮酶将大气中的氮气转化为植物可利用的氮源。这种转化过程在豆科植物与根瘤菌的共生关系中尤为显著，它们相互依赖，共同促进生长。在农业实践中，固氮技术的应用有助于减少化肥的使用，降低成本，同时减轻环境压力。科学家们正通过基因工程和生物技术研究，如改造根瘤菌以在非豆科植物上形成固氮根瘤，以拓宽固氮技术的应用范围。[/size][size=16px]其次，溶磷技术通过生物或化学过程将土壤中的不溶性磷酸盐转化为植物可吸收的形式。溶磷微生物如细菌和真菌，通过分解有机物质产生有机酸，促进磷酸盐的溶解。农业实践中，合理施用磷肥、种植绿肥作物、使用有机肥料和微生物制剂等策略，可以提高土壤磷的有效性。Ostara公司的CrystalGreen技术就是一个例子，它将废水中的磷转化为植物肥料，既促进植物生长又减少环境污染。[/size][size=16px]解钾技术则关注提高土壤中钾的可利用性。钾是植物生长必需的营养元素，对光合作用和抗逆性至关重要。微生物解钾通过分泌有机酸降低土壤pH值，溶解钾矿物；化学解钾使用化学试剂与钾矿物反应；物理解钾则通过物理手段破坏矿物结构。在实际应用中，解钾方法的选择需结合土壤条件和作物需求。[/size]

益生菌，这一概念最早来源于希腊语，意思是“对生命有益”（for life）。早在远古时代，人类的日常饮食中就已经含有乳酸发酵类的食品了。　　1857年，法国微生物学家巴斯德研究了牛奶的变酸过程。他把鲜牛奶和酸牛奶分别放在显微镜下观察，发现它们都含有同样的一些极小的生物——乳酸菌，而酸牛奶中的乳酸菌的数量远比鲜牛奶中的多。这一发现说明，牛奶变酸与这些乳酸菌的活动密切相关。　　1878年，李斯特(Lister)首次从酸败的牛奶中分离出乳酸乳球菌。　　1892年，德国妇产科医生Doderlein在研究阴道时提出产乳酸的微生物对宿主--人有益。　　1899年，法国巴黎儿童医院的蒂赛(Henry Tissier），蒂赛率先从健康母乳喂养的婴儿粪便中分离了第一株菌种双歧杆菌（当时称为分叉杆菌），他发现双岐杆菌与婴儿患腹泻的频率及营养都有关系。　　1900-1901年，Moro，Beijerinck和Cahn各自研究了肠道中的乳酸菌。丹麦人奥拉一严森(OrIa—JerlSerl)首次对乳酸菌进行了分类。　　1905年，保加利亚科学家斯塔门·戈里戈罗夫第一次发现并从酸奶中分离了“保加利亚乳酸杆菌”，同时向世界宣传保加利亚酸奶。　　1908年，俄国科学家诺贝尔奖获得者伊力亚.梅契尼科夫（Elie Metchnikoff）正式提出了“酸奶长寿”理论。通过对保加利亚人的饮食习惯进行研究、他发现长寿人群有着经常饮用含有益生菌的发酵牛奶的传统。他在其著作「延年益寿」(Prolongation of Life)中系统的阐述了自己的观点和发现。　　1915年，Daviel Newman首次利用乳酸菌临床治疗膀胱感染。　　1917年，德国Alfred Nissle教授从第一次世界大战士兵的粪便中一株大肠杆菌。这名士兵在一次严重的志贺氏菌大爆发中没有发生小肠炎。在抗生素还没有被发现的那个时代，Nissle利用这株菌在治疗肠道感染疾病（由沙门氏菌和志贺氏菌）取得可观成果。这株大肠杆菌现仍然在使用，它是为数不多的非乳酸菌益生菌。　　1919年，怀着对巴尔干半岛有益酸奶和巴斯德研究所微生物研究成果的极大兴趣，伊萨克·卡拉索在西班牙巴塞罗那创立了公司(达能前身)。而且他常常召集许多博士医生到工厂讨论酸奶的益处。　　1920年，Rettger证明梅契尼科夫所说的保加利亚细菌（保加利亚乳杆菌）不能在人体的肠道中存活。发酵食品和梅契尼科夫的学说受到怀疑（在那时）。　　1922年，Rettger和Cheplin报道了嗜酸乳杆菌酸奶所具有的临床功效，特别是对消化的功能性。　　1930年，医学博士代田稔博士在日本京都帝国大学（现在的京都大学）医学部的微生物学研究室首次成功地分离出来自人体肠道的乳酸杆菌，并经过强化培养，使它能活着到达肠内。这种菌后来引用代田博士的名字，取名为Lactobacillus casei strain shirota。这就是后来被称为养乐多菌的益生菌。　　1935年，乳酸菌饮料问世，益生菌开始走向产业化。　　1945年，无菌动物模型和悉生动物模型建立。　　1954年，Vergio引入与抗生素或其它抗菌剂相对的术语“Probiot-ika”，提出抗生素和其它抗菌剂对肠道菌群有害而“Probiotika”对肠道菌群有利。　　1957年，Gordon等人在《柳叶刀(The Lancet)》提出了有效的乳杆菌疗法标准：乳杆菌应该没有致病性，能够在肠道中生长，当活菌数量达到107-109时，明显具有有益菌群的作用。同时德国柏林自由大学的Haenel教授研究了厌氧菌的培养方法，提出“肠道厌氧菌占绝对优势”的理论。日本学者光岗知足(Tomotari Mitsuoka)开始了肠内菌群的研究，最后建立了肠内菌群分析的经典方法和对肠道菌群作出了全面分析。　　1962年，Bogdanov从保加利亚乳杆菌中分离出了3种具有抗癌活性的糖肽，首次报道了乳酸菌的抗肿瘤作用。　　1965年， Lilly D. M.和Stillwell R. H.在《科学》杂志上发表的论文“益生菌—由微生物产生的生长促进因素”中最先使用益生菌Probiotic这个定义来描述一种微生物对其他微生物促进生长的作用。　　20世纪70年代初由沃斯(Woese)、奥森（Olsen）等提出16s rRNA寡核苷酸序列分析法来对菌进行鉴定。构建了现已被确认的全生命系统进化树，越来越多的细菌依据16SrDNA被正确分类或重分类，给乳酸菌的鉴定和肠内菌群分析带来极大方便。　　1971年，Sperti用益生菌（Probiotic）描述刺激微生物生长的组织提取物。　　1974年，Paker将益生菌定义为对肠道微生物平衡有利的菌物。　　1977年，微生态学（Microecology）由德国人Volker Rush首先提出。他在赫尔本建立了微生态学研究所，并从事对双歧杆菌、乳杆菌、大肠杆菌等活菌作生态疗法的研究与应用。Gilliland对肠道乳杆菌的降低胆固醇作用进行了研究，提出了乳酸菌在生长过程中通过降解胆盐促进胆固醇的分解代谢，从而降低胆固醇含量的观点。　　1979年中国的微生态学研究开始。自中国微生物学会人畜共患病病原学专业委员会下属的正常菌群学组的成立。1988年2月15日中华预防医学会微生态学分会的成立有了学术组织。1988年《中国微生态学杂志》创刊。　　80年代初大连医科大学康白教授首先研制成功促菌生（蜡杆芽胞杆菌）。　　1983年，由美国Tufts大学两名美国教授Sherwood Gorbach和Barry Goldin从健康人体分离出了LGG（鼠李糖乳杆菌），并于1985年获得专利。LGG菌种具有活性强、耐胃酸的特点，能够在肠道中定殖长达两周。　　1988年底丹麦的汉森中心实验室生产出超浓缩的直投式酸奶发酵剂。 直投式酸奶发酵剂(Directed Vat Set, DVS)是指一系列高度浓缩和标准化的冷冻干燥发酵剂菌种，可直接加入到热处理的原料乳中进行发酵，而无需对其进行活化、扩培等其它预处理工作。直投式酸奶发酵剂的活菌数一般为1010 - 1012 CFU/g。　　1989年，英国福勒博士(Dr.Roy Fuller)将益生菌定义为：益生菌是额外补充的活性微生物，能改善肠道菌群的平衡而对宿主的健康有益。他所强调的益生菌的功效和益处必须经过临床验证的。　　90年代，中国学者张箎教授对世界第五长寿区——中国广西巴马地区百岁以上老人体内的双歧杆菌进行了系统的研究，也发现长寿老人体内的双歧杆菌比普通老人要多得多。同时中医药微生态学建立。杨景云等学者开始对中国的传统中药与微生态关系进行了系统的研究。　　1992年， Havennar对定义进行了扩展，解释为一种单一的或混合的活的微生物培养物，应用于人或动物，通过改善固有菌群的性质对寄主产生有益的影响。　　1995年，吉布森(Gibson)把能在大肠中调整菌群的食品称为益生元。　　1998年，Guarner & Schaafsma给出了更通俗的定义：益生菌是活的微生物，当摄入足够量时，能给予宿主健康作用。　　1999年，Tannock作了总结：细菌是人体（还有高级动物和昆虫）中正常居住者。其中胃肠道中发现超过400多种细菌。　　2001年，世界粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)也对益生菌做了如下定义：通过摄取适当的量、对食用者的身体健康能发挥有效作用的活菌。联合国粮农组织和世界卫生组织组成的专家联合顾问团强烈建议用分子生物学的手段鉴定益生菌。并推荐益生菌存放于国际性菌物保藏中心。具体的步骤是：先做表型鉴定，再做基因鉴定。基因鉴定的方法有DNA/DNA杂交，16S RNA序列分析或其它国际上认可的方法。然后到RDP上验证鉴定结果。　　2001年，法国完成第一株乳酸菌即乳酸乳球菌IL1403的全基因组测序。　　2002年，微生物学教授Savage宣布：正常菌群是人体的第十大系统——微生态系统。　　2005年，美国北卡罗来纳州立大学Dobrogosz 和Versalovic教授提出了免疫益生菌的概念（Immunoprobiotics）。　　2006年，意大利M. Del Pianoa等认为益生菌应该定义为一定程度上能耐受胃液，胆汁和胰脏分泌物而黏附于肠道上皮细胞并在肠道中定殖的一类活的微生物。提出从粪便中分离的“益生菌”有可能多数是浮游菌，而非黏附菌。　　2007年，美国《科学》杂志预测：人类共生微生物的研究将可能是国际科学研究在2008年取得突破的7个重要领域之一。12月9～10日，英、美、法、中等国科学家在美酝酿成立“人类微生物组国际研究联盟(IHMC)”，计划2008年4月联合启动“人类元基因组计划”，开始对人类元基因组的全面研究。这项被称为“第二人类基因组计划”的项目将对人体内所有共生的微生物群落进行测序和功能分析，其序列测定工作量至少相当于10个人类基因组计划，并有可能发现超过100万个新的基因，最终在新药研发、药物毒性控制和个体化用药等方面实现突破性进展。　　2008年，荷兰乌得勒支大学医学中心研究者在柳叶刀杂志上报道了益生菌可能会引起重症急性胰腺炎患者的肠道致命性局部缺血危险。

【序号】： 1【作者】： Phillips da 【题名】： Extending Symbiotic Nitrogen Fixation to Increase Man's Food Supply【期刊】： science 【年、卷、期、起止页码】：1971, 174 , 4005, 169-& 【全文链接】：http://www.sciencemag.org/content/174/4005/169【序号】： 2【作者】： Hwang JC【题名】：INHIBITION OF NITROGENASE-CATALYZED REDUCTIONS【期刊】：BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA 【年、卷、期、起止页码】：1973,292 ,1 ,256-270 【全文链接】：http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T1S-47RSB2M-SS&_user=1002903&_coverDate=01%2F18%2F1973&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=gateway&_origin=gateway&_sort=d&_docanchor=&view=c&_acct=C000050165&_version=1&_urlVersion=0&_userid=1002903&md5=b819fd39f383d82248a09838f8979e63&searchtype=a【序号】： 3【作者】： Wilson PW【题名】：FIRST STEPS IN BIOLOGICAL NITROGEN FIXATION【期刊】： PROCEEDINGS OF THE ROYAL SOCIETY OF LONDON SERIES B-BIOLOGICAL SCIENCES【年、卷、期、起止页码】：1969,172 ,1029 ,319-& 【全文链接】：http://apps.isiknowledge.com/full_record.do?product=UA&qid=22&SID=Y1A7jd2gJHpEkcGka91&search_mode=GeneralSearch&colname=WOS&viewType=fullRecord&doc=7&page=1&log_event=no

1、传代保存法：有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时，会很快死亡，因此在这种情况下，只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生产菌种的保存。传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。一般地，大多数菌种的保藏温度以5℃为好，像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存，而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。传代培养保存法虽然简便，但其缺点也很明显，如：①菌种管棉塞经常容易发霉；②菌株的遗传性状容易发生变异；③反复传代时，菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低；④需要定期转种，工作量大；⑤杂菌的污染机会较多。 通派（上海）生物科技有限公司是供应国内/外各类细胞（人/大鼠/小鼠细胞 等），菌种，ELISA试剂盒（人/大鼠/猪），PCR试剂盒，免疫组化试剂盒，单克隆抗体，多克隆抗体，移液器，培养皿，BD培养基，实验室耗材，实验室小型耗材等产品的国内一流服务商。公司集生物科技产品生产、销售于一体，公司实验室热门提供：传代细胞，原代细胞，耐药株，细胞染色，免疫组化，ELISA试剂盒 等。2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。此法可防止干燥，并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。其具有方法简便的优点，同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物（如产孢能力低的丝状菌）的保存，而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。

首先需了解微生物需要的营养物质。 （1）微生物需要的营养物质营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。它们的作用可概括为形成结构（参与细胞组成）、提供能量和调节作用（构成酶的活性和物质运输系统）。微生物的营养物质有六大类要素，即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源。① 水水是微生物的重要组成部分，在代谢中占有重要地位。水在细胞中有两种存在形式：结合水和游离水。结合水与溶质或其他分子结合在一起，很难加以利用。游离水（或称为非结合水）则可以被微生物利用。② 碳源碳在细胞的干物质中约占50%，所以微生物对碳的需求最大。凡是作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质，称为碳源。作为微生物营养的碳源物质种类很多，从简单的无机物（CO2、碳酸盐）到复杂的有机含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等）。但不同微生物利用碳源的能力不同，假单孢菌属可利用90种以上的碳源，甲烷氧化菌仅利用两种有机物：甲烷和甲醇，某些纤维素分解菌只能利用纤维素。大多数微生物是异养型，以有机化合物为碳源。能够利用的碳源种类很多，其中糖类是最好的碳源。异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应，最终用于构成细胞物质，或为机体提供生理活动所需的能量。所以，碳源往往也是能源物质。自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。CO2是被彻底氧化的物质，其转化成细胞成分是一个还原过程。因此，这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。③ 氮源凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质，称为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素，氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用，而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大。固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质，也能利用无机氮和有机氮化物，但在这种情况下，它们便失去了固氮能力。此外，有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮，一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源。硝酸盐必须先还原为NH+4后，才能用于生物合成。以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐，但它们并不都能利用硝酸盐。有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等，工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降解产物。氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料，不作为能源。只有少数细菌，如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源。④ 无机盐无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。其主要功能是：① 构成细胞的组成成分；② 作为酶的组成成分；③ 维持酶的活性；④ 调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位；⑤ 作为某些自氧菌的能源。磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成，并与能量转移、细胞透性调节功能有关。微生物对它们的需求量较大（10-4～10-3 mol/L），称为“宏量元素”。没有它们，微生物就无法生长。铁、锰、铜、钴、锌、钼等盐一般是酶的辅因子，需求量不大（10-8～10-6 mol/L），所以，称为“微量元素”。不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同。铁元素介于宏量和微量元素之间。在配制培养基时，可通过添加有关化学试剂来补充宏量元素，其中首选是K2HPO4和MgSO4，它们可提供需要量很大的元素：K、P、S和Mg。微量元素在一些化学试剂、天然水和天然培养基组分中都以杂质等状态存在，在玻璃器皿等实验用品上也有少量存在，所以，不必另行加入。⑤ 生长因子一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基中培养不能生长或生长较差。当在培养基中加入某些组织（或细胞）提取液时，这些微生物就生长良好，说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养因子，这些因子称为生长因子。生长因子可定义为：某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成，需要额外少量加入才能满足需要的有机物质，包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物，有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分。各种微生物所需的生长因子不同，有的需要多种，有的仅需要一种，有的则不需要。一种微生物所需的生长因子也会随培养条件的变化而变化，如在培养基中是否有前体物质、通气条件、pH和温度等条件，都会影响微生物对生长因子的需求。从自然界直接分离的任何微生物，在其发生营养缺陷突变前的菌株，均称为该微生物的野生型。绝大多数野生型菌株只需简单的碳源和氮源等就能生长，不需要添加生长因子；经人工诱变后，常会丧失合成某种营养物质的能力，在这些菌株生长的培养基中，必须添加某种氨基酸、嘌呤、嘧啶或维生素等生长因子。⑥ 能源能源是指为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。化能异养型微生物的能源即碳源；化能自养型微生物的能源都是还原态的无机物，如NH4+、NO2-、S、H2S、H2、Fe2+等，它们分别属于硝化细菌、亚硝酸细菌、硫化细菌、硫细菌、氢细菌和铁细菌等。一种营养物常有一种以上营养要素的功能，即除单功能营养物外，还有双功能，甚至三功能营养物。辐射能是单功能；还原态无机养分常是双功能的（NH4+既是硝化细菌的能源，又是它的氮源）甚至是三功能的（能源、氮源和碳源）；有机物常有双功能或三功能作用。（2）配制培养基必须遵循的原则微生物的培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖，或积累代谢产物的营养基质。广义上说，凡是支持微生物生长繁殖的介质或材料，均可作为微生物的培养基。一个适当的培养基配方，对发酵产品的产量和质量有着极大的影响。针对不同微生物，不同的营养要求，可以有不同的培养基。但它们的配制必须遵循一定原则。① 营养物质应满足微生物的需要。不同营养类型的微生物对营养的需求差异很大，应根据菌种对各营养要素的不同要求进行配制。② 营养物的浓度及配比应恰当。营养物浓度太低，不能满足微生物生长的需要；浓度太高，又会抑制微生物生长。糖和盐浓度高有抑菌作用。碳氮比（C∶N，以还原糖含量与粗蛋白含量的比值表示）：一般培养基为C∶N=100∶0.5～2。在设计培养基配比时，还应考虑避免培养基中各成分之间的相互作用，如蛋白胨、酵母膏中含有磷酸盐时，会与培养基中钙或镁离子在加热时发生沉淀作用；在高温下，还原糖也会与蛋白质或氨基酸相互作用而产生褐色物质。③ 物理、化学条件适宜。pH：各种微生物均有其生长繁殖的最适pH，细菌为7.0～8.0，放线菌为7.5～8.5，酵母为3.8～6.0，霉菌为4.0～5.8。对于具体的微生物菌种，都有各自的特定的最适pH范围，有时会大大突破上述界限。在微生物生长繁殖过程中，会产生能够引起培养基的pH改变的代谢产物，尤其是不少微生物有很强的产酸能力，如不适当地加以调节，就会抑制甚至于杀死其自身。在设计培养基时，要考虑培养基的pH调节能力。一般应加入缓冲液或CaCO3，使培养基的pH稳定。其他：培养基的其他理化指标，如水活度、渗透压也会影响微生物的培养。在配制培养基时，通常不必测定这些指标，因为培养基中各种成分及其浓度等指标的优化，已间接地确定了培养基的水活度和渗透压。此外，各种微生物培养基的氧化还原电位等也有不同的要求。④ 培养目的：培养基的成分直接影响培养目标。在设计培养基时，必须考虑是要培养菌体，还是要积累菌体代谢产物；是实验室培养，还是大规模发酵等问题。用于培养菌体的种子培养基营养成分应丰富，氮源含量宜高，即碳氮比值应低；相反，用于大量积累代谢产物的发酵培养基，氮源应比种子培养基稍低；当然，若目的产物是含氮化合物时，有时还应该提高培养基的氮源含量。在设计培养基时，还应该特别考虑到代谢产物是初级代谢产物，还是次级代谢产物。如果是次级代谢产物，还要考虑是否需加入特殊元素（如维生素B12中Co）或特殊的前体物质（如生产青霉素G时，应加入苯乙酸）。在设计培养基，尤其是大规模发酵生产用的培养基时，还应该重视培养基组分的来源和价格，应该优先选择来源广、价格低廉的培养基。（3）几种培养基的配制原则① 种子培养基：适用于微生物菌体生长的培养基，目的是为下一步发酵提供数量较多，强壮而整齐的种子细胞。一般要求氮源、维生素丰富，原料要精。② 发酵培养基：用于生产预定发酵产物的培养基，一般的发酵产物以碳源为主要元素。发酵培养基中的碳源含量往往高于种子培养基。如果产物的含氮量高，应增加氮源。在

【序号】： 1【作者】： RL Robson【题名】：Oxygen and Hydrogen in Biological Nitrogen Fixation 【期刊】： annualreviews.org【年、卷、期、起止页码】：1980, Vol. 34: 183-207【全文链接】：http://www.annualreviews.org/action/showCitFormats?doi=10.1146%2Fannurev.mi.34.100180.001151 【序号】： 2【作者】： JR Gallon【题名】： The oxygen sensitivity of nitrogenase: a problem for biochemists and micro-organisms【期刊】： TRENDS IN BIOCHEMICAL SCIENCES 【年、卷、期、起止页码】：1981， 6 , 1 ,19-23 【全文链接】：http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6TCV-4864DSM-N3&_user=10008193&_coverDate=12%2F31%2F1981&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=gateway&_origin=gateway&_sort=d&_docanchor=&view=c&_acct=C000068787&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10008193&md5=806ae4dce8e60c611a16ecb18630d7a7&searchtype=a 【序号】： 3【作者】： J LaRoche【题名】： Importance of the diazotrophs as a source of new nitrogen in the ocean【期刊】： Journal of Sea Research【年、卷、期、起止页码】：2005, 53, 1-2, 67-91【全文链接】：http://apps.isiknowledge.com/full_record.do?product=UA&search_mode=Refine&qid=7&SID=N1JfH@f3l5894nK3ija&page=1&doc=4&colname=WOS

【序号】：1【作者】：DRS Lean, CFH Liao【题名】：The importance of nitrogen fixation in lakes【期刊】：Ecological Bulletins【年、卷、期、起止页码】：1978【全文链接】：【序号】：2【作者】：MA Keirn【题名】：Nitrogen fixation by bacteria in Lake Mize, Florida, and in some lacustrine sediments【期刊】：Limnology and oceanography【年、卷、期、起止页码】：1971【全文链接】：This article is not included in your organization's subscription. However, you may be able to access this article under your organization's agreement with Elsevier. 【序号】：3【作者】：Gary J. Whiting and James T. Morris【题名】：Nitrogen fixation (C2H2 reduction) in a salt marsh: Its relationship to temperature and an evaluation of an in situ chamber technique【期刊】：Soil Biology and Biochemistry【年、卷、期、起止页码】：1986, 18, 5, 515-521【全文链接】：http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6TC7-47DKPNX-PY&_user=5894678&_coverDate=12%2F31%2F1986&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=gateway&_origin=gateway&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=1697826970&_rerunOrigin=scholar.google&_acct=C000068787&_version=1&_urlVersion=0&_userid=5894678&md5=8532019fd281225c94b5538aecc983db&searchtype=a【序号】：4【作者】：HERBERT RA【题名】：HETEROTROPHIC NITROGEN-FIXATION IN SHALLOW ESTUARINE SEDIMENTS【期刊】：JOURNAL OF EXPERIMENTAL MARINE BIOLOGY AND ECOLOGY【年、卷、期、起止页码】：1975 ，18 ，3，215-225【全文链接】：

[color=#333333]如何设备测定参数如何设定，色谱结果如何分析？非常感谢！[/color]

各位老师，我拟用乙炔还原法测定固氮菌的固氮能力，需用气相色谱分析经还原产生的乙烯含量，即分离乙烯和乙炔，现用Porapark Q的填充柱无法分离，拟用TDX-01柱分离，是否可以?条件如何设定？若填充柱无法实现分离，应用何种毛细管柱分离？请不吝赐教，谢谢。

上海科学家发现三聚氰胺“恶之源”都是菌群惹的祸http://www.foodmate.net/skin/default/image/zoomin.gif http://www.foodmate.net/skin/default/image/zoomout.gif发布日期：2014-03-26 来源：东方网 浏览次数：1383核心提示：2008年的三聚氰胺事件过去多年，然而为什么这一非法添加会导致“三鹿宝宝”发生肾结石乃至肾衰，在科学上却至今是个谜。昨天，上海交通大学附属第六人民医院转化医学中心公布了他们的一项研究成果，终于揭开事件谜底：这些都和人体肠道内一种菌群有关。 据《劳动报》报道，2008年的三聚氰胺事件过去多年，然而为什么这一非法添加会导致“三鹿宝宝”发生肾结石乃至肾衰，在科学上却至今是个谜。昨天，上海交通大学附属第六人民医院转化医学中心公布了他们的一项研究成果，终于揭开事件谜底：这些都和人体肠道内一种菌群有关。据悉，这一研究成果被美国《科学》杂志评为“2013年世界十大科技突破”之一。 发生于2008年的该起奶制品污染事件，共导致逾五万名婴儿因患肾结石而就医，其中部分人出现肾衰，有4人死亡。一种用于制造塑料、涂料、化肥等化工产品的工业原料，本来是不会被人体吸收的，为什么会形成结石并致肾功能衰竭？贾伟、郑晓皎和赵爱华等领衔的课题组经过多年追踪、研究，最后发现这一切和肠道细菌的代谢有着密切关系。 转化医学中心课题组首次发现，某些肠道细菌，尤其是克雷伯氏菌，具有代谢含氮化合物（也称为固氮）的能力，能够在肠道中代谢三聚氰胺，转化为三聚氰酸并逐步将其降解。三聚氰胺和三聚氰酸本身毒性极低，但极易互相结合形成晶体，这两类物质进入血液循环后，在肾小管中与尿酸结合形成大分子复合物类的结石，堵塞肾小管，导致肾毒性。 研究先在大鼠模型上得到了证实，随后经过进一步的体外实验，科研人员发现三聚氰胺可以被实验动物的粪便中培养出的肠道细菌所降解。他们将Klebsiella属细菌定植于大鼠的肠道中，发现三聚氰胺的毒性显着增加，肾脏中的结石数目增多。 据分析，只有约1%的婴儿体内具有克雷伯氏菌，而这个百分率与服用婴儿配方奶后罹患肾毒性的婴儿比例刚好契合。这一结果提示肠道细菌在因服用配方奶导致肾毒性方面发挥着至关重要的作用。研究人员指出，这一部分婴幼儿之所以发生中毒现象，是由于他们的肠道含有较高丰度的能够代谢三聚氰胺的细菌如克雷伯氏菌的缘故。 相关研究成果已发表于《科学》杂志的子刊《科学-转化医学》，引起广泛关注。这是真的么？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif

[size=4][font=[color=#DC143C]黑体]同位素质谱的学科应用与发展[/color][/font][/size]同位素质谱在我国农业、医学、环境 学、海洋学、石油、化工、冶金等方面的应用也日益广泛。近年来，同位素质谱学在高分辨率、高准确度、高灵敏度研究方面上了新的台阶，而且在同位素精确质量测定、化学溯源与世界水平接近。学科应用与发展包括：　　（1）同位素地质学方面　　同位素质谱是同位素地质学发展的重要实验基础。当前我国同位素质谱技术已深入到矿床同位素地球化学、岩石年代学、有机稳定同位素地球化学、无机稳定同位素地球化学等各个方面，并在国家一系列重大攻关和研究课题中发挥重大作用，如金矿和石油天然气研究、水资源开发等。　　（2）核科学与核工业方面　　同位素质谱最初是伴随着核科学与核工业的发展而发展起来的。主要研究领域：　　1）超低丰度同位素杂质的分析：核工业的迅速发展和我国核产品不断进入国际市场，对超低丰度同位素杂质分析提出了很高的要求；　　2）燃耗及核燃料纯度分析：采用同位素稀释质谱法（IDMS）分析核燃料UO2、 UO3、U3O8中的B、Pb、Sm、Y、Eu、Th等；　　3）U、Li等同位素标准参考物质的研制。　　（3）核物理研究方面　　包括原子质量的精确测测定；测定原子核的结合能和敛集曲线；测定放射性同位素的半衰期；同位素丰度和原子量的精确测量；发现天然反应堆；在高能核物理研究中的应用同位素质谱测量在高能核物理研究工作中主要有以下几项应用： 　　研究能量在100兆电子伏以上的个子与靶子作用所发生的核反应机理； 　　研究发生在星球表面和大陆空间及陨石上的宇宙线照射形成的核反应机理； 　　探讨核反生成的短寿命粒子与质量关系； 　　测定高能粒子与靶子作用的核反应截面和碎片粒子产额； 　　高能质谱测定常集中在对稀有氧化和碱金属的分析工作上。　　（4）标准参考物质的研制发明方面　　标准参考物质的研制是衡量一个国家分析工作水平的重要标志。同位素稀释质谱（IDMS）是唯一微量、痕量和超痕量元素权威测量法。因为IDMS可以通过天平称重和同位素丰度比的质谱测量，将化学成分分析转化为同位素丰度的质谱测量。IDMS具有绝对测量性质；灵敏度高；方法准确；测量的动态范围宽；样品制备不需要严格定量分离；测量值能够直接溯源到国际基本单位制的物质量基本单位——摩尔。　　（5）在临床医学方面　　进行营养学、药理学和临床医学方面的研究；利用IDMS法测定人体血、尿、发中的微量元素，进行病情诊断和病理研究工作。如医用同位素质谱分析方法主要有CO2呼气检查、4He和重水示踪原子等方法。利用He示踪原子方法，检验肺功能障碍性病变患者，已获得明显效果。应用重水作示踪剂，检测人体肺水肿患者，给出与正常人不同变化曲线。　　（6）在生物学和化学研究工作中的应用　　稳定性同素示踪原子方法，正在越来越多的领域里代替了放射性示踪原子方法，从而扩大了示踪原子的应用范畴。如应用稳定性同位素示踪原子方法，采用含有18O的重氧水H218O作示踪原子，进行质谱分析，最后证明绿色植物放出的氧气，主要来源于根部吸入的水分，而不是光合作用放出的氧气。　　用18C方法证明了光合作用不仅能在光照条件下进行，耐用也能在黑暗条件下以缓慢的速度进行。 　　用征水和重氧水浇灌植物，然后定时采集植物各部位的水进行分析，发现些树木运送水分的速度高达每小时14 m。 　　用重水作标记，探测人体水的循环，发现吸入少量重水以后，经两个小时即在人体所有各器官达到平衡，即重水成分已均匀分布。两个星期以后完全排出体外。为此，在某些从事放射性物质研究的机构里，给工作人员发放茶叶，以加速体内水分流通，有利于排出少量放射性物质。 　　在化学领域中，早在30年以前，就已经应用D 、18O和18N等同位素作示踪原子，研究有机化合物的结构和成分变化情况。　　（7）环境科学中的应用　　近年来同位素质谱在环境科学的应用日益受到重视，尤其在大气、土壤、水质及生态环境研究均发挥重要作用。 应用稳定性同位素丰度变化，研究和指示环境污染源和污染程度，在环保工作中的重要意义。如利用测定铅同位素比的方法，很容易判明汽油生产厂家及其对大气的污染程度；在环保工作中，还使用同位素稀释方法测定各种水抽中有害的微量元素含量，用以监测水质质量。　　（8）在农业增产方面的应用　　现在，有许多农业研究机构和大学，购买高精度同位素质谱计，以从事合理用肥、果实营养、固氮分析、农药毒性、家畜气候对作物的影响等多方面的研究工作。而且随着世界人口的增加，提高粮食单产的问题越发显得重要，所以农业研究工作有着极为广阔的前途。　　⑴合理使用肥料；　　⑵农药毒性的研究；　　⑶用轻水灌溉；　　⑷研究气候对作物的影响。如用18O作示踪原子，研究温度和农作物生长和成分的影响表明，灌溉水只供给植物组织中15%的氧，其余85%的氧只能从空气中的CO2取得；　　（5）固氮酶的研究。如用15N作示踪原子研究固氮作用，发现各种固氮酶能够将土壤中的氮固定下来，有效地克服了氮的蒸发和流失作用，然后再把它固定下来的氮当中的20%排给水稻利用。还发现了水稻根际粪产碱菌和阴沟肠细菌的固氮作用，并能将氮转移给水稻。这些均为我国农业研究工作者发现的廉价固氮酶，有一定的经济价值。质谱分析为固氮研究提供了可靠的数据。　　与原子能和地质研究工作相比较，农业上应用同位素方法从事科研工作，正处于方兴未艾阶段，随着人类社会发展，对农业的要求越来越高，今后大力开展和普及用现代化方法研究农业增产和改善果实质量的工作前途无限广阔。　　（9）其他应用　　如石油、冶金、电子等方面。

近年来，国内外营养学家和医学家对鸡蛋的营养价值和保健功能有了新的评说。概括起来，主要有五个方面。 一是延缓衰老。鸡蛋含有人体几乎所有需要的营养物质，故被人们称作“理想的营养库”。营养学家称之为“完全蛋白质模式”，不少长寿老人的延年益寿经验之一，就是每天必食一个鸡蛋。我国民间流传的许多养生药膳也都离不开鸡蛋。例如，何首乌煮鸡蛋、鸡蛋煮猪脑、鸡蛋粥等等。 二是健脑益智。鸡蛋黄中的卵磷脂、甘油三脂、胆固醇和卵黄素，对神经系统和身体发育有很大的作用。卵磷脂被人体消化后，可释放出胆碱，胆碱会通过血液到达脑内，从而可避免老年人的智力衰退，并可改善各个年龄组的记忆力，因此，不管是青少年，还是中老年，要保持良好的记忆力，只要每天吃一两个鸡蛋就行了。 三是保护肝脏。鸡蛋中的蛋白质对肝脏组织损伤有修复作用。蛋黄中的卵磷脂可促进肝细胞的再生，还可提高人体血浆蛋白量，增强肌体的代谢功能和免疫功能。 四是防治动脉硬化。美国营养学家和医学工作者用鸡蛋来防治动脉粥样硬化，获得了出人意料的惊人效果，他们从鸡蛋、核桃、猪肝中提取卵磷脂，每天给心血管病人吃4—6汤匙。3个月后，患者的血清胆固醇从百分之一千毫克降到百分之一百八十毫克。这一研究成果，得到世界医学界的关注。 五是预防癌症。鸡蛋中含有较多的维生素B2，维生素B2可以分解和氧化人体内的致癌物质。鸡蛋中的微量元素，如硒、锌等也都具有防癌作用。根据对全世界人类癌症死亡率进行的分析，人们发现癌症的死亡率与硒的摄入量成反比。居民血液中含硒量较高或吃含硒量较丰富的食物的地区，总的癌症死亡率要低于那些居民摄入硒少的地方的死亡率。

钴是中等活泼的金属元素，有二价和三价二种化合价。钴可经消化道和呼吸道进入人体，一般成年人体内含钴量为1.1-1.5mg。在血浆中无机钴附着在白蛋白上，它最初贮存于肝和肾，然后贮存于骨、脾、胰、小肠以及其它组织。体内钴14%分布于骨骼，43%分布于肌肉组织，43%分布于其它软组织中。在所有微量元素(微量元素食品)中，惟有钴是以一种特殊的形式——维生素B12表现出生物活性的。钴的生理功能是以维生素(维生素食品)B12的形式体现出来的。作为机体的必需微量元素，钻具有重要的生理作用。它是维生素B12的组成成分，是某些酶的组分或催化活性的辅助因素，具有刺激造血的作用，并对某些微量元素的代谢有一定影响。食物含钴量以海产品及蜂蜜最多，都超过每克1微克。含钴丰富的食品有：牛肝、蛤肉类、小羊肾、火鸡肝、小牛肾、鸡肝、牛胰、猪肾。另外还有甜菜、卷心菜、洋葱、萝卜、菠菜、西红柿、无花果、荞麦和谷类等，蘑菇含量可达61ug/100g。

[color=#444444]我拟用乙炔还原法测定固氮菌的固氮能力，需用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析经还原产生的乙烯含量，即分离乙烯和乙炔，现用Porapark Q的填充柱无法分离，拟用TDX-01柱分离，是否可以?条件如何设定？若填充柱无法实现分离，应用何种毛细管柱分离？请不吝赐教，谢谢。[/color]