宫颈癌疫苗

摘要自然杀伤(NK)细胞是一种先天免疫细胞，通过发挥细胞毒性作用，在清除转化或癌变细胞方面发挥着重要作用。近年来，一些免疫刺激分子和生物制剂被用来提高NK细胞的溶瘤作用。三维(3D)细胞培养技术已经发展到更好地概括体内结构和生理相关性，以评价这些药物和生物制剂的体外。在这个概念验证研究中， 我们开发了一个三维生物打印的子宫颈癌肿瘤模型，以证明NK细胞的细胞毒活性。用Ⅰ型胶原3D生物打印GFP标记的人宫颈癌细胞SiHa和CaSki，并与人外周血源性NK细胞共培养96h。NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒性作用通过荧光显像进行评估，显示在NK细胞浓度增加的情况下，肿瘤杀伤程度更高。本文描述的方法是可缩放的，与高含量成像兼容，并且容易翻译到其他肿瘤模型。

每一年死于宫颈癌的女性达27万，让许许多多家庭失去母亲，女儿，妻子。宫颈癌的病因，多是来自生殖器hpv（人乳头瘤病毒）感染。在大多数情况下，hpv会自行消失，不会造成任何健康问题。但若hpv持续存在，则会引起生殖器疣和癌症等健康问题。pv阳性的恶性肿瘤中，hpv会整合到宿主的染色体上，引起基因突变。基因突变引起抑癌基因失活，使细胞无限生长并癌变。现时最有效的宫颈癌预防手段是注射hpv疫苗。市面上的疫苗有2价，4价，9价之分。其中九价重组人乳头状瘤病毒疫苗已经可以覆盖6、11、16、18、31、33、45、52和58型几种亚型，为女性健康带来保障。赛默飞携手疫苗行业，为疫苗行业提供整体解决方案。

使用岛津LC-20Ai+ICPMS-2030测定了疫苗、滴眼液等医用制品中硫柳汞含量。该方法使用5%乙腈水溶液（含0.462%乙酸铵+0.12% L-半胱氨酸）为流动相，C18反向色谱柱分离。操作简便快捷，无须使用高浓度有机相及有机进样系统即可实现硫柳汞的快速分离测定。

使用岛津公司ICPE-9820电感耦合等离子体发射光谱仪开发了某疫苗中铝佐剂和硫柳汞同时测定方法，该方法Al和Hg元素方法检出限为0.42 mg/L和1.40 mg/L，测定灵敏度高。该方法能识别疫苗中微量添加的硫柳汞，比较不同厂家不同批次某疫苗中铝佐剂和硫柳汞含量细微差异，从而评价工艺的差异及稳定性。样品测定结果显示，5个厂家共计15批次疫苗中铝佐剂和硫柳汞均符合2020版《中国药典》要求，各厂家不同批次铝佐剂含量一致性良好，但硫柳汞含量呈现明显差异。该方法灵敏高，稳定性好，检测效率高，适用于疫苗中铝佐剂和硫柳汞的同时测定。

硫柳汞又名乙基汞硫代水杨酸钠，是一种含汞有机化合物，以重量计含汞49.6%。是一种在疫苗中广泛使用的防腐剂。由于是汞制剂，硫柳汞的加入量必须严格控制，以防止对人体造成毒害，所以我国药典规定对生物制品（疫苗）中硫柳汞含量要进行测定，以确保生物制品质量符合国家标准。本文参考《中国药典》2020版3115硫柳汞测定法，通过DMA80快速测定生物制品中的硫柳汞含量。相对标准偏差RSD为0.68~0.91%，加标回收率为98.6~98.8%。结果表明，该方法具有操作简单、快速高效等优点，可用于生物制品中硫柳汞含量的快速测定。

猪瘟活疫苗供预防猪瘟。发生猪瘟的猪群，可单独使用，也可与抗猪瘟血清联合使用，作紧急预防。本疫苗系用猪瘟病毒兔化弱毒株接种健康家兔或乳兔，收获感染兔的脾脏及淋巴结，或乳兔的肌肉及实质脏器，磨碎制成匀浆后，加适当稳定剂，经冷冻真空干燥制成。

为了缩短疫苗开发过程，科学家需要可靠的鉴定方法来快速优化灭活减毒病毒或新一代疫苗(DNA、mRNA̷)的配方稳定性。疫苗的有效性在很大程度上取决于使用时产品的分散状态，因此疫苗在使用前往往要进行摇匀。疫苗的物理特性可以通过测量颗粒迁移和絮凝速率来实现，从而评估分散状态随时间的变化。Turbiscan多重光散射仪方法是非常可靠和高度精确的，可用于优化疫苗配方，包括增强剂量均匀性、优化疫苗效率、易于再分散等。

东西分析经过多年的开发，基于飞行时间质谱技术平台成功开发出40多种HPV分型的应用方案---能够同时快速检测出超过20种高危和低危致癌及常见致疣HPV型以及超过20种可能致癌和低危致疣HPV型。能够有效避免恶变样本漏检和假阳性，从而为临床提供早期宫颈癌的精准诊断，并为治疗提供准确的参考建议。

现代疫苗通常含有佐剂，用来提高其效率。例如，铝佐剂被广泛用于控制免疫应答。默克研究实验室的Chris Farrel发表了一篇关于铝佐剂分析控制策略的演讲，其中他先对早期疫苗研究做了简要概述，同时分享了他关于不同氧化铝变体（包括氢氧化铝、磷酸铝和明矾）疫苗分散体样品的特性、强度、质量和纯度的研究发现。通过对分散体表征对铝佐剂进行分析，包括粒径、表面电荷、吸附容量和流体动力学特性。

疫苗根据工艺分为减毒疫苗，灭活疫苗，亚单位疫苗，基因工程疫苗，涉及一系方法进行质量控制，其中等电点及电荷变异体对于鉴别和工艺稳定性至关重要。本文涉及病毒，重组疫苗，mRNA疫苗，病毒样颗粒（VLP)等不同类别疫苗的等电点及电荷异质性检测。

包装中氧气含量是影响疫苗使用效果的重要因素。本文以疫苗包装中残留氧气含量的测试过程为例，通过对该测试原理、设备参数及适用范围、试验过程等内容的描述，介绍了一种疫苗包装中气体成分含量的测试方法。

2021年，国内已启动新冠疫苗大规模生产，卫健委要求要落实主体责任，承担预防接种人员应当具备执业资格，并经过卫生健康主管部门组织的预防接种专业培训和合格考核，当前，我国新冠疫苗接种工作实施三步走战略，第一步针对高风险人群，重点人群。第二步为高危人群，第三部为全人群为实现全人群安全有效接种新冠疫苗，中科都菱为新冠疫苗的安全存储提供不同规格的医用药品箱，以满足卫健委，疾控中心，社区接种服务中心的安全存储需要

致病性大肠杆菌是人和多种动物（猪、鸡等）的致病菌之一。疫苗免疫是控制大肠杆菌病的主要方法。从动物体分离或实验室保存鉴定的大肠杆菌菌株，经扩增培养，配制成适当浓度，用甲醛灭活，使大肠杆菌失去毒力但又保持免疫原性，制成灭活疫苗。在疫苗中添加白油佐剂，有利于增强疫苗的免疫效果。本实验参照《中国药典 2020年版 第四部 0731 蛋白质含量测定 第一法 凯氏定氮法》对大肠杆菌粉疫苗中的蛋白质含量进行测定。

随着畜牧业发展，动物疫苗行业逐渐兴起并成为国家产业政策大力支持的行业，是国家重点鼓励发展的方向。2010 年3 月，国家发展和改革委员会办公厅发布《关于2010 年继续组织实施微生物制造、绿色农用生物产品高技术产业化专项的补充通知》，其支持快速、高效、安全、廉价的新型畜禽疫苗、疫病诊断试剂盒的产业化。那么如何快速、高效提高动物疫苗地研发，成为行业发展的关键问题。本文应用LUMiSizer® 651分散体系分析仪，探讨动物疫苗在研发过程中，经过配方微调后的稳定性。

佐剂是疫苗的一种添加剂，是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。近年来为适应新型疫苗的需求，佐剂已经从传统、单一的形式向新型、多元化形式发展，理想的佐剂不仅能够增强免疫反应，而且能使机体获得最佳的保护性免疫。为保证佐剂的品质，需要检测其想用的指标，本实验参照《T/CVDA 复合矿物油动物疫苗佐剂》使用T960全自动滴定仪对佐剂中皂化值含量进行测定。

佐剂是疫苗的一种添加剂，是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作用的一类物质。近年来为适应新型疫苗的需求，佐剂已经从传统、单一的形式向新型、多元化形式发展，理想的佐剂不仅能够增强免疫反应，而且能使机体获得最佳的保护性免疫。为保证佐剂的品质，需要检测其想用的指标，本实验参照《T/CVDA 复合矿物油动物疫苗佐剂》使用T960全自动滴定仪对佐剂中酸值含量进行测定。

GE在疫苗领域有丰富的解决方案，从细胞培养到前处理，从层析分离到除菌过滤，以及质量控制方面。从设备到耗材，从产品到服务。

本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪检测疫苗中卡那霉素抗生素残留的方法。样品经乙腈沉淀蛋白，离心滤过后上机分析。采用外标法定量，在0.5~100 ng/mL范围内，相关系数大于0.997。LOQ基质标液0.5 ng/mL连续6次进样保留时间RSD%小于0.4%，峰面积的RSD为5.06%，仪器精密度良好。三个浓度样品加标回收率在90.10~101.50%之间，每个浓度平行处理三次，测试结果的RSD在0.65~2.38%之间；该方法稳定可靠，可为疫苗及生物制品中卡那霉素抗生素残留测定提供参考。

佐剂是疫苗的一种添加剂，当它先于抗原或与抗原混合注入机体后，能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型，属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展，针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制，佐剂尤其是新型免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。

佐剂是疫苗的一种添加剂，当它先于抗原或与抗原混合注入机体后，能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型，属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展，针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制，佐剂尤其是新型免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。

《2005年版中国药典》中关于疫苗冻干粉中水分的测定内容中，包括卡尔费休容量法和库仑法两种方法，使用者可以选择其一。但是，因为疫苗冻干粉的装量小（大约每支0.03~0.05g），为了减少取样时间长而导致引入环境水分所造成的误差，同时也为了节约样品使用量，所以，使用测量精度较高的卡尔费休库仑法（检测限可以低至ppm级的水分）进行其水分测定，是一个理想的选择。

赛多利斯与Wiley杂志联合编辑出版《疫苗发现与开发：COVID-19的启示》，汇总了各类疫苗开发及生产的流程及面临的关键挑战，以及赛多利斯解决方案如何为疫苗发现、表征和开发提供创新的高通量和自动化解决方案。

《2005年版中国药典》中关于疫苗冻干粉中水分的测定内容中，包括卡尔费休容量法和库仑法两种方法，使用者可以选择其一。但是，因为疫苗冻干粉的装量小（大约每支0.03~0.05g），为了减少取样时间长而导致引入环境水分所造成的误差，同时也为了节约样品使用量，所以，使用测量精度较高的卡尔费休库仑法（检测限可以低至ppm级的水分）进行其水分测定，是一个理想的选择。

中国药典通则3106测定过程较繁琐、效率低，本方法采用硝酸溶解试样，电感耦合等离子体发射光谱仪分析疫苗铝佐剂中铝含量，方法简便快捷，可用于疫苗铝佐剂中铝含量快速检测。

中国药典通则3106测定过程较繁琐、效率低，本方法采用硝酸溶解试样，电感耦合等离子体质谱仪分析疫苗铝佐剂中铝含量，方法简便快捷，可用于疫苗铝佐剂中铝含量快速检测。

有效的包衣涂层可以防止疫苗的活性成分受到环境因素影响，同时实现缓释功能，延长疫苗 的有效时间。制备涂层的方法有很多，但粉末原子层沉积技术(简称 PALD)作为一种精准 可控的纳米包覆技术，近年来被广泛用于新能源，催化，金属粉末的界面改性应用中，但鲜 有应用于药物粉末的研究。

岛津基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测疫苗各亚基存在分布与比例，直接得到了样品单电荷离子、二电荷离子的分子量信息，结果与理论一致。分析速度快、仪器维护方便、性能卓越，是蛋白类疫苗亚基分析的有力工具。

新冠疫情爆发以来，多种不同的疫苗(mRNA疫苗、慢病毒疫苗、灭活病毒等)在全的抗疫中发挥了重大作用。然而现有的疫苗也有一些局限性，如储存运输条件苛刻、需要接种加强针、对突变病毒不敏感等等。近，bioRxiv发表了一篇基于细菌外泌体的新型新冠疫苗对疾病保护作用的文章，或许可以为新冠疫苗的研发提供新的思路。Jiang和Driedonks等[1]通过对细菌来源的外囊泡表面修饰病毒S蛋白的受体结合结构域（RBD）制成了新型新冠疫苗。革兰氏阴性菌能够产生外膜囊泡（OMV），在哺乳动物体内具有免疫刺激作用，可诱导免疫应答发生并激活树突细胞、T细胞、B细胞等免疫细胞，而经过改造的工程菌产生的OMV内毒性非常低，避免了不良反应的发生。作者使用了一种鼠伤寒沙门氏菌株，通过Spycatcher/Spytag体系使该菌株分泌的OMV通过共价键稳定结合了病毒的RBD。

全世界数以百万计的人们一直在热切地关注着对抗新冠病毒的疫苗研发进展。截至2020年12月初，由于各大制药公司急于满足全球对快速有效的COVID - 19疫苗的需求，已有230多个项目正在开发中。在疫苗研发过程的早期，人们提出的一个大问题是，“COVID-19疫苗中含有什么，它将如何发挥作用?”

据某CDMO公司统计，有约60%的公司遭遇过制剂开发问题导致的项目延迟甚至失败，尽早启动制剂开发能够帮助企业降低药物研发风险。2bind公司借助NanoTemper的PR Panta完成了HIV-1疫苗BG505-SOSIP的制剂开发。