泛素化反应

[font=宋体][font=宋体]泛素化是一种细胞内的蛋白质标记系统，蛋白质泛素化是指将小的蛋白质泛素共价地连接到其他蛋白质分子上的过程。泛素（[/font][font=Calibri]ubiquitin[/font][font=宋体]）是一种高度保守的蛋白质，其结构由[/font][font=Calibri]76[/font][font=宋体]个氨基酸残基组成。泛素连接到目标蛋白质上的过程，经历了泛素激活、泛素转移和靶蛋白接受三个主要步骤。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质泛素化具有多种特点，例如它是高度选择性的，不同蛋白质泛素化的位置和数量可以影响其功能；它是可逆的，通过去泛素化反应可以调控蛋白质的泛素化状态；它还是动态调控的，受到多种因素的调控，如细胞信号通路和环境刺激。[/font][b][font=宋体]泛素化蛋白大小：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白泛素化是指将小蛋白颗粒泛素（[/font][font=Calibri]Ubiquitin[/font][font=宋体]）与其他蛋白质共价结合的修饰过程。 泛素化修饰通常会导致泛素共价连接在蛋白质的赖氨酸残基上形成多重泛素链。 这种蛋白质泛素化增加了蛋白质的分子量，因为每个泛素分子的质量大约为[/font][b][font=Calibri]8.5[/font][font=宋体]千达尔顿（[/font][font=Calibri]kDa[/font][/b][font=宋体][b]）[/b]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]泛素化蛋白质组学在许多领域有重要的应用，主要包括：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①疾病机制研究：泛素化是一种广泛存在于细胞中的蛋白质修饰方式，参与了细胞的生长、分化、修复和调控等多个生命活动。泛素化蛋白质组学的研究可以帮助我们了解泛素化修饰的生物学功能和调控机制，为疾病发生机制和治疗策略的研究提供重要线索。例如，在癌症、代谢综合征、神经退行性疾病等疾病中，则会出现异常泛素化。[/font][font=宋体]②药物研发：通过分析药物对泛素化蛋白质的影响，可以评估药物的效力和选择性，为药物研发提供指导。[/font][font=宋体]③临床诊断：泛素化蛋白质组学鉴定与定量分析技术可以揭示细胞调控的机制，通过分析泛素化蛋白质的组学数据，可以确定泛素化修饰在细胞信号转导、蛋白质降解和细胞周期调控等过程中的重要作用。此外，通过比较病态和正常样品中泛素化蛋白质的差异，可以鉴定与疾病发生发展相关的泛素化修饰靶点，并进一步理解疾病的分子机制。因此，这些技术也可用于临床诊断。[/font][font=宋体]④蛋白质降解调控：在癌症、神经退行性疾病和免疫相关疾病等病症中，蛋白质降解调控出现异常。而泛素化蛋白组在调控蛋白质降解中发挥重要作用。通过与泛素连接，目标蛋白质被送入蛋白酶体或蛋白酶体样体中进行降解。这个过程是细胞清除异常、老化或受损蛋白质的重要途径。[/font][font=宋体]⑤高通量技术应用：高通量泛素化蛋白质组学鉴定与定量分析技术的发展包括质谱鉴定和抗体鉴定两种方法。质谱鉴定技术利用质谱仪的高灵敏度和分辨率，能够鉴定泛素化修饰的蛋白质及其泛素化位点。抗体鉴定技术则通过特异性抗体的使用，可以富集和鉴定泛素化修饰的蛋白质。这些技术为全面了解泛素化在细胞中的作用机制和调控网络提供了可能。[/font][font=宋体]总的来说，泛素化蛋白质组学在多个领域都有重要的应用价值，推动了我们对生命过程的深入理解以及疾病治疗的创新发展。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]更多详情关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白资源[/b][/url]详情可以参看：[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][u][font=宋体][color=#0000ff][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/color][/font][/u][/url][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]GA[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]诱导[/color][/font][font=&][color=#0070c0]KRAS[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]降解[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][size=15px][font=宋体]作者首先通过筛选了一个自制的化合物库，用含有[/font][font=&] KRAS[sup]G12A[/sup][/font][font=宋体]突变的[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞系[/font][font=&]MM.1S[/font][font=宋体]和[/font][font=&]RPMI 8226[/font][font=宋体]鉴定可以降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]水平的化合物，发现藤黄酸（[/font][font=&]Gambogic acid[/font][font=宋体]，[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]，）处理可降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平，而其他化合物没有表现出相似或较弱的效果。进一步实验表明，[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以以浓度和时间依赖性方式降低两种细胞系中[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的水平，以及[/font][font=&] KRAS[/font][font=宋体]的下游[/font][font=&]p-ERK[/font][font=宋体]（[/font][font=&]MAPK[/font][font=宋体]通路）和[/font][font=&]p-AKT[/font][font=宋体]（[/font][font=&]PI3K[/font][font=宋体]通路）。此外，[/font][font=&]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]不会改变[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的转录水平，表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可能在转录后水平降低[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size][size=15px][font=宋体]进一步使用蛋白酶体抑制剂[/font][font=&]MG132[/font][font=宋体]发现[/font][font=&]MG132 [/font][font=宋体]部分挽救了[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]诱导的[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]蛋白下调，表明[/font][font=&] KRAS [/font][font=宋体]蛋白降解与泛素[/font][font=&]-[/font][font=宋体]蛋白酶体途径有关，此外，我们采用放线菌酮（[/font][font=&]CHX[/font][font=宋体]）测定评估显示[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]处理后，[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的半衰期显著缩短。这些数据表明[/font][font=&]GA[/font][font=宋体]可以诱导[/font][font=&]KRAS[/font][font=宋体]的蛋白酶体降解，进而损害[/font][font=&]MM[/font][font=宋体]细胞中的下游信号转导[/font][font=宋体] [size=15px][b]2、鉴定USP2作为GA的新靶标[/b][/size][size=15px]为了确定GA诱导KRAS降解的靶标，作者合成了生物素标记的GA，发现它保留了在MM细胞中诱导KRAS降解的能力，进一步利用该探针开展Pulldown+MS，鉴定到的互作蛋白中，HSP90和USP2这两种与蛋白质降解相关。HSP90是一个已知的GA靶点，作为伴侣蛋白，它可以调节各种蛋白的稳定性，然而HSP90抑制剂STA9090处理不能降低MM.1S细胞中KRAS的蛋白水平，表明KRAS不是 HSP90的底物。因此，作者更加关注USP2，一种新型的GA互作蛋白。通过Pulldown+WB、免疫荧光共定位、竞争实验、CETSA、DARTS实验共同证实了USP2是GA的直接相互作用蛋白。此外，GA在体外相对特异性地抑制USP2的去泛素化活性（ [/size][size=15px][b]3、半胱氨酸284对于GA与USP2的共价结合至关重要[/b][/size][size=15px]然后，作者研究了GA和USP2之间的相互作用模式，发现碘乙酸（IAA，一种半胱氨酸烷化剂）与USP2的预孵育完全抑制了GA与USP2的结合，表明GA可能与USP2的半胱氨酸共价结合，这与之前的报道一致，即GA可以通过半胱氨酸残基与其靶标共价结合。接着，通过USP2蛋白与GA一起孵育后质谱鉴定，发现Cys284残基被GA共价修饰。此外，通过构建USP2的两个突变体（C276S、C284S），发现GA 与 USP2（C276S）结合，而不是USP2（C284S），表明GA可以与USP2的Cys284残基特异性形成共价键。结合动力学显示GA 以剂量和时间依赖性方式与 USP2 共价结合，分子对接显示P565和 R289对于形成GA与USP2结合的口袋至关重要。同样通过蛋白点突变实验发现P565 和 R289对GA-USP2相互作用至关重要 [/size][size=15px][b]4、USP2调节KRAS的稳定性[/b][/size][size=15px]前面发现GA降低MM细胞中KRAS蛋白水平并抑制USP2活性，表明USP2可能调节KRAS的稳定性。作者利用CRISPR/Cas9敲除MM.1S和RPMI 8226细胞系中的USP2，发现敲除USP2导致KRAS蛋白水平降低，mRNA水平不变， KRAS的下游效应子p-ERK水平也显著降低。此外，敲除诱导的KRAS下调可被两种细胞系中的蛋白酶体抑制剂MG132挽救。结果表明USP2可以增强KRAS的蛋白质稳定性。进一步研究发现USP2与KRAS互作并使KRAS去泛素化，表明KRAS是USP2的底物 [/size][size=15px][b]5、USP2敲除抑制MM细胞的增殖[/b][/size][size=15px]鉴于KRAS在MM细胞增殖和存活中的关键作用，作者假设USP2敲除可能会使KRAS不稳定，从而导致MM细胞增殖抑制。结果显示USP2敲除显著抑制MM.1S和RPMI 8226细胞系的增殖，诱导这两种MM细胞系凋亡。此外，MM.1S 细胞的异种移植 MM 模型发现，USP2敲除显著抑制肿瘤生长，免疫组化染色也显示USP2敲除组的KRAS水平降低，这些数据共同表明USP2在MM细胞的增殖和存活中起着关键作用 [/size][size=15px][b]6、GA通过靶向USP2和破坏KRAS的稳定性来诱导MM细胞凋亡[/b][/size][size=15px]据报道，GA通过抑制PI3K/Akt/mTOR、[i]NF-κ[/i]B 和其他信号通路诱导MM细胞凋亡。作者发现GA处理可以以剂量依赖性方式降低MM.1S和RPMI 8226细胞的活力并促进细胞凋亡。此外，过表达USP2的细胞对GA诱导的活力降低和KRAS降解表现出部分抗性，且GA处理可以提高 KRAS的泛素化水平。KRAS[sup]G12C[/sup]的过表达可以部分消除USP2敲除诱导的细胞生长抑制。这些数据表明，GA在 MM 细胞中诱导的细胞毒性至少部分归因于其靶向USP2，这降低了KRAS的稳定性。[/size][size=15px]最后，作者探讨了USP2在MM中的临床意义。通过GSE13591数据集发现MM患者骨髓样本中的USP2 mRNA水平明显更高。此外，作者发现原发性骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞系中USP2的蛋白水平高于正常外周血单核细胞（PBMC）和正常骨髓活检，且高USP2水平的MM患者的总生存期降低，这些结果共同表明USP2表达增加与MM中较差的结局之间存在很强的相关性，表明USP2可能是MM治疗的有前途的靶点。[/size][/font][font=&][/font][/size]

[size=15px][font=宋体][color=black]冬凌草乙素[i][/i]（[/color][/font][font=&][color=black]Ponicidin[/color][/font][font=宋体][color=black]）是从中药冬凌草（[/color][/font][i][font=&][color=black]Rabdosia rubescens[/color][/font][/i][font=宋体][color=black]）中提取的二萜类化合物，具有免疫调节、抗炎、抗病毒和抗癌等多种活性。尽管冬凌草乙素对多种恶性肿瘤有疗效，但其与肝细胞癌（[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]）相关的确切功能和作用机制仍然未知。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]冬凌草乙素体外显著抑制肝癌细胞增殖和迁移，体内抑制肿瘤生长并促进肿瘤细胞凋亡。[/color][/font][font=宋体][color=red]机制上，冬凌草乙素靶向[/color][/font][font=&][color=red]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=red]（[/color][/font][font=&][color=red]E3[/color][/font][font=宋体][color=red]泛素连接酶）并促进[/color][/font][font=&][color=red]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]复合物形成，介导[/color][/font][font=&][color=red]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]的泛素化降解。此外，冬凌草乙素通过[/color][/font][font=&][color=red]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=red]激活半胱氨酸依赖性线粒体通路，导致线粒体损伤和[/color][/font][font=&][color=red]ROS[/color][/font][font=宋体][color=red]产生，从而促进肝癌细胞线粒体凋亡。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、冬凌草乙素抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]HCC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]细胞的增殖和迁移[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [align=center] [/align] [size=15px][font=宋体][color=black]作者首先通过体外实验发现能以剂量依赖性方式有效抑制[/color][/font][font=&][color=black]HepG2[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞[i][/i]的增殖和迁移。为了确定冬凌草乙素的靶标，作者合成生物素标记的冬凌草乙素（[/color][/font][font=&][color=black]Bio-Ponicidin[/color][/font][/size][font=宋体]）开展[/font][font=宋体]Pulldown[/font][font=宋体]实验，通过质谱鉴定[/font][font=宋体]Keap1[/font][font=宋体]蛋白（[/font][font=宋体]Kelch-like ECH-associated protein 1[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]Keap1[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]E3[/font][font=宋体]泛素连接酶的底物识别亚单位）为冬凌草乙素的可能靶标。[/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]在[/color][/font][font=&][color=#0070c0]HCC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]组织样本中上调[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]接着，作者利用[/color][/font][font=&][color=black]TCGA[/color][/font][font=宋体][color=black]数据库发现[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]高表达与[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]患者较低的生存率有关，并利用[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织芯片发现肝癌组织中[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的表达高于癌旁组织，结果表明[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]发病机制中具有潜在作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白是一种重要的调节蛋白，可以通过与其他蛋白质相互作用来调节细胞内信号通路，于是作者通过文献检索发现[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]是一种与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]互作的重要蛋白质，且前面的[/color][/font][font=&][color=black]Pulldown[/color][/font][font=宋体][color=black]实验也显示[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]被拉下。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=&][color=black]TCGA[/color][/font][font=宋体][color=black]数据库分析显示[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]高表达与[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]存活率较低相关，组织芯片显示[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织中的[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]表达高于癌旁组织，且与较高的病理分级相关，结果表明[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]同样在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]发病机制中具有潜在作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步作者通过人类蛋白质组微阵列[i][/i]检测冬凌草乙素的直接靶蛋白，发现冬凌草乙素与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]直接结合而不与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白结合，结果表明冬凌草乙素可能直接与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]结合并影响[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]，从而在[/color][/font][font=&][color=black]HCC[/color][/font][font=宋体][color=black]中发挥药理作用。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]和[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]相互作用的结构基础[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]可以与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合，然而，它们结合的结构基础尚不清楚。为了观察[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合过程的动态变化，作者通过分子动力学模拟发现[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]复合物的结构总体上保持稳定，且[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]上的[/color][/font][font=&][color=black]Val78[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Glu79[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Ser80[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]Glu83[/color][/font][font=宋体][color=black]氨基酸与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]结构域相互作用。采用[/color][/font][font=&][color=black]AlphaFold3[/color][/font][font=宋体][color=black]算法来预测[/color][/font][font=&][color=black] Keap1-PGAM5 [/color][/font][font=宋体][color=black]的相互作用，发现复合物的总体预测折叠与真实结构相似。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]配合物中晶体整体结构及相互作用的洞察分析[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了更好地理解[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]相互作用的分子机制，作者进行了结构生物学实验。通过晶体学实验获得了[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]配合物的结构，分析得到两者的结合模式和结合位点，并通过蛋白点突变后的[/color][/font][font=&][color=black]ITC[/color][/font][font=宋体][color=black]实验发现[/color][/font][font=&][color=black]Glu79[/color][/font][font=宋体][color=black]是[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]结合的关键残基。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步作者通过[/color][/font][font=&][color=black]SPR[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]CETSA[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]EMSA[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black]等实验验证冬凌草乙素和[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=black]结构域结合，而不能和[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]?54-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font=&][color=black]54-289[/color][/font][font=宋体][color=black]号氨基酸）突变蛋白结合。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]考虑到[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]是一种[/color][/font][font=&][color=black]E3[/color][/font][font=宋体][color=black]连接酶，促进蛋白质的泛素化和降解。作者发现冬凌草乙素可以增加[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的泛素化，增加[/color][/font][font=&][color=black]Keap1-PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白共定位，表明冬凌草乙素可以与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]结合，从而促进[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的互作，促进[/color][/font][font=&][color=black]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=black]的泛素化。 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]冬凌草乙素影响[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Kelch[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]结构域的变构来稳定[/color][/font][font=&][color=#0070c0]Keap1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]与[/color][/font][font=&][color=#0070c0]PGAM5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]结合[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]进一步通过分子对接模拟发现冬凌草乙素可以与[/color][/font][font=&][color=black]Keap1[/color][/font]

影响氧化还原反应平衡常数的因素有那些？

[size=15px][font=宋体][color=black]蔓荆子[i][/i]（[/color][/font][font=&][color=black]Vitex rotundifolia[/color][/font][font=宋体][color=black]）中提取的黄酮类化合物[i][/i]具有抗炎、抗血管生成和抗肿瘤等活性，已有研究表明从蔓荆子果实中提取的蔓荆子黄素（[/color][/font][font=&][color=black]Vitexicarpin[/color][/font][font=宋体][color=black]）可以阻止肿瘤进展，然而蔓荆子黄素治疗结直肠癌（[/color][/font][font=&][color=black]CRC[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black]）所涉及的分子机制仍未完全确定。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素在体外和体内显著抑制了结肠直肠癌细胞的增殖、侵袭和转移，在体内抑制了结直肠癌的生长和肺转移。机制上，蔓荆子黄素直接靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]，破坏[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]之间的相互作用，促进[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]泛素化降解，进而抑制其下游的上皮[/color][/font][font=&][color=black]-[/color][/font][font=宋体][color=black]间质转化过程。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体外实验揭示蔓荆子黄素对[/color][/font][font=&][color=#0070c0]CRC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的抑制作用[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]作者首先通过[/color][/font][font=&][color=black]MTT[/color][/font][font=宋体][color=black]、克隆形成、[/color][/font][font=&][color=black]EDU[/color][/font][font=宋体][color=black]、细胞周期和细胞凋亡测定等实验发现，牡荆[i][/i]子黄素对[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞系表现出更高的抗增殖潜力，且能够诱导的细胞凋亡和细胞周期阻滞，结果表明蔓荆子黄素表现出良好的抗肿瘤特性 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体内实验揭示蔓荆子黄素抗肿瘤活性[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]随后作者评估了蔓荆子黄素是否具有体内抗肿瘤作用。通过建立[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]移植瘤[/color][/font][font=&][color=black]BALB/c[/color][/font][font=宋体][color=black]裸鼠模型发现，蔓荆子黄素延缓了肿瘤的生长，且对小鼠体重无显著影响，表明蔓荆子黄素具有体内抗肿瘤作用 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素直接靶向[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]CRC[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了探究蔓荆子黄素的抗癌机制，作者采用[/color][/font][font=&][color=black]CETSA[/color][/font][font=宋体][color=black]结合质谱鉴定其直接作用靶点，发现[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]是蔓荆子黄素的潜在作用靶点。随后，通过[/color][/font][font=&][color=black]CETSA+WB[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]SPR[/color][/font][font=宋体][color=black]、证实了蔓荆子黄素与[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]的结合。为了证实[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]介导的蔓荆子黄素诱导的抗肿瘤反应，在[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中敲低和过表达[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]基因，发现蔓荆子黄素对[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]敲低的[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞的抑制作用显著降低 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]通过减少[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的泛素化来稳定[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]有文献报道[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]表达密切相关，且[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]对[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]发展至关重要。作者研究通过[/color][/font][font=&][color=black]FpClass[/color][/font][font=宋体][color=black]网站预测发现。[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]互作，同时[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]在[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织中的表达存在显著相关性，且免疫荧光显示[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]共定位，[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]MST[/color][/font][font=宋体][color=black]实验显示[/color][/font][font=&][color=black]MPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]可以直接互作。进一步实验发现[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]通过减少泛素化降解来增强[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]的稳定性 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素直接结合[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]破坏[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]与[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]互作[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]由于蔓荆子黄素在[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]，而[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]存在相互作用，因此作者推测蔓荆子黄素可能影响[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]的结合。作者通过免疫荧光和[/color][/font][font=&][color=black]Western blot[/color][/font][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素能有效抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白的表达。通过分子对接、[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]MST[/color][/font][font=宋体][color=black]证实了蔓荆子黄素通过直接结合[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]来破坏[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2/c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]复合物，从而降低[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白水平 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]6[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素靶向[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]表达发挥体内抗肿瘤作用[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]蔓荆子黄抑制[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]异种移植小鼠肿瘤生长，敲低[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]也可有效降低肿瘤增殖，而敲低[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]后蔓荆子黄素没有进一步抑制肿瘤生长。免疫组织化学和免疫荧光发现蔓荆子黄素抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]vimentin[/color][/font][font=宋体][color=black]水平，同时增强[/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]表达。[/color][/font][font=&][color=black]shIMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]组和[/color][/font][font=&][color=black]shIMPDH2+[/color][/font][font=宋体][color=black]蔓荆子黄素组细胞中[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Vimentin[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]表达无明显差异，表明蔓荆子黄素靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]表达发挥体内抗肿瘤作用 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]7[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素在体内外均能降低结直肠癌的转移[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&][color=black]Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]过度表达是[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]发生和发展的主要驱动因素之一，此外，[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]作为转录调节因子控制许多基因来增强[/color][/font][font=&][color=black]EMT[/color][/font][font=宋体][color=black]，促进肿瘤转移。作者在体外和体内评估了蔓荆子黄素预防肿瘤转移的能力。通过划痕实验和细胞侵袭实验发现蔓荆子黄素抑制[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞转移和侵袭。[/color][/font][font=&][color=black]Western blot[/color][/font][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素有效降低[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]EMT[/color][/font][font=宋体][color=black]标志物（[/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]N-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]等）水平。体内实验显示[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]敲低阻断了[/color][/font][font=&][colo

有奖问答’对错题：纤维素纤维的酯化反应：纤维素硝酸酯、纤维素醋酸酯； 纤维素纤维的醚化：纤维素乙基醚、纤维素羧甲基醚。（ ）

[size=15px][font=宋体][color=black]传统化疗药物[/color][/font][font=&][color=black]5-[/color][/font][font=宋体][color=black]氟尿嘧啶（[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]）一直是临床上最常用的化疗药物之一。由于其细胞杀伤特异性较低，给药后常出现明显的不良反应，其中骨髓毒性最为显著。前期研究表明，中草药来源的天然化合物地黄苷（[/color][/font][font=&][color=black]Martynoside[/color][/font][font=宋体][color=black]，[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]）具有造血活性，可在体内外减轻[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]对的细胞毒性，且不会干扰[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]体内抗肿瘤活性。然而，[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]的直接分子靶点尚未见报道，[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]的作用机制也知之甚少。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size][size=15px][font=&][color=black]2023[/color][/font][font=宋体][color=black]年[/color][/font][font=&][color=black]8[/color][/font][font=宋体][color=black]月[/color][/font][font=&][color=black]15[/color][/font][font=宋体][color=black]日，西湖大学孙仁教授及浙江大学医学院附属第二医院肿瘤研究所杜雨棽研究员团队在[/color][/font][font=&][color=black]Science Bulletin[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font=&][color=black]IF=18.8[/color][/font][font=宋体][color=black]）发表题为[/color][/font][font=&][color=black]“Martynoside rescues 5-fluorouracil-impaired ribosome biogenesis by stabilizing RPL27A”[/color][/font][font=宋体][color=black]的文章，确定了[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]是[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]的功能性细胞靶标。机制上，[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]通过直接结合[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]，增加其蛋白稳定性来减弱[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]诱导的[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白水平降低，缓解[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]抑制的核糖体生物合成，从而促造血功能。 [img=,690,392]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/09/202409101445247404_7631_6561489_3.png!w690x392.jpg[/img] [/color][/font][/size][size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、地黄苷的靶蛋白[/color][/font][font=&][color=#0070c0]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的确定[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][size=15px][font=宋体][color=black]为了鉴定[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]在细胞内的蛋白靶点[i][/i]，研究人员应用了最近开发的[/color][/font][font=&][color=black]md-LED[/color][/font][font=宋体][color=black]技术（该技术整合人类外显子文库，[/color][/font][font=&][color=black]mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]展示技术和高通量测序技术）。在排除对照组的非特异结合蛋白后，选择了[/color][/font][font=&][color=black]5[/color][/font][font=宋体][color=black]个蛋白（[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]POM121L12[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]CTSG[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]CARD6[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]MMAA[/color][/font][font=宋体][color=black]）进一步[/color][/font][font=&][color=black]Pulldown[/color][/font][font=宋体][color=black]验证，发现[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]存在互作，并通过[/color][/font][font=&][color=black]ITC[/color][/font][font=宋体][color=black]实验证实了[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]特异性结合，分子对接以及蛋白点突变后的[/color][/font][font=&][color=black]Pulldown[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]ITC[/color][/font][font=宋体][color=black]实验确定了结合能力及关键结合位点，结果表明[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]R87[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]K116[/color][/font][font=宋体][color=black]关键残基直接结合 [/color][/font][/size][size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]MAR[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]阻断[/color][/font][font=&][color=#0070c0]K92[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]和[/color][/font][font=&][color=#0070c0]K94[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的泛素化逆转[/color][/font][font=&][color=#0070c0]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]诱导的[/color][/font][font=&][color=#0070c0]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]蛋白降低[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size][size=15px][font=宋体][color=black]之前的研究发现[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][/size][font=宋体][color=black][back=url(&]治疗严重损害造血功能，减少骨髓健康指标[/back][/color][/font][font=&][color=black][font=宋体]BMNCs[/font][/color][/font][font=宋体][color=black][back=url(&]（骨髓有核细胞）数量，而[/back][/color][/font][font=&][color=black][font=宋体]MAR[/font][/color][/font][font=宋体][color=black][back=url(&]增加了[/back][/color][/font][font=&][color=black][font=宋体]5-FU[/font][/color][/font][font=宋体][color=black][back=url(&]处理的小鼠的[/back][/color][/font][font=&][color=black][font=宋体]BMNCs[/font][/color][/font][font=宋体][color=black][back=url(&]数量。[/back][/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][size=15px][font=宋体][color=black]在本研究中，作者进一步检测了[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]在体内对[/color][/font][font=&][color=black]BMNCs[/color][/font][font=宋体][color=black]中[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白和[/color][/font][font=&][color=black]mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]表达的影响，发现[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]引起[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白丰度的急剧降低，而[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]的联合给药部分恢复了[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白水平，但不上调其[/color][/font][font=&][color=black]mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]表达。此外，前期[/color][/font][font=&][color=black]BMNCs[/color][/font][font=宋体][color=black]的[/color][/font][font=&][color=black]RNA-Seq[/color][/font][font=宋体][color=black]数据验证了[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]处理后[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]表达没有变化。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size][size=15px][font=宋体][color=black]接着，在体外细胞模型中测试[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]的药效之前，作者通过质谱评估了[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]穿透细胞的能力，发现[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]可以穿透细胞，特别是细胞核，与[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]互作。[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]诱导的[/color][/font][font=&][color=black]BMNC[/color][/font][font=宋体][color=black]损伤的体外模型显示，与体内数据一致，[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]减弱了[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]引起的[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白丰度的降低，但不上调其[/color][/font][font=&][color=black]mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]表达（图[/color][/font][font=&][color=black]2[/color][/font][font=宋体][color=black]）。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size][img=图片,1,]data:image/svg+xml,%3C%3Fxml version='1.0' encoding='UTF-8'%3F%3E%3Csvg width='1px' height='1px' viewBox='0 0 1 1' version='1.1' xmlns='http://www.w3.org/2000/svg' xmlns:xlink='http://www.w3.org/1999/xlink'%3E%3Ctitle%3E%3C/title%3E%3Cg stroke='none' stroke-width='1' fill='none' fill-rule='evenodd' fill-opacity='0'%3E%3Cg transform='translate(-249.000000, -126.000000)' fill='%23FFFFFF'%3E%3Crect x='249' y='126' width='1' height='1'%3E%3C/rect%3E%3C/g%3E%3C/g%3E%3C/svg%3E[/img][size=15px][font=宋体][color=black]图[/color][/font][font=&][color=black]2 MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]逆转[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]诱导的[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白降低，但不影响[/color][/font][font=&][color=black]mRNA[/color][/font][font=宋体][color=black]表达[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size][size=15px][font=宋体][color=black]为了确定[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]逆转[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]诱导的[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白降低是通过特定相互作用发生的，作者突变了[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]，发现[/color][/font][font=&][color=black]MAR[/color][/font][font=宋体][color=black]部分逆转了[/color][/font][font=&][color=black]5-FU[/color][/font][font=宋体][color=black]诱导的野生型细胞的蛋白减少，而不能逆转[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]突变体细胞（[/color][/font][font=&][color=black]K116Y-RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=black]）。总之，体内和体外的数据都表明[/color][/font][font=&][color=black]RPL27A[/color][/font][font=宋体][color=bla

请问化妆品里的塑化剂可能是哪些化合物发生反应转化成的？

[B]石墨炉升温过程：[/B]实际分析的试样，为复杂体系，从进样到形成自由原子，经历溶剂蒸发、基体挥发或热解破坏、留下被测元素的盐或其它的形态，再在高温下解离，还原实现原子化。[B]原子化过程主要发生的化学反应[/B]1.金属盐的分解反应硝酸盐受热分解，产生氧化物。若被测元素卤化物的蒸发热小于卤化物和碳化物的解离能，在发生其它反应前，先以卤化物的形式蒸发，导致被测元素挥发损失。2.氧化物和金属的热蒸发2.1氧化物蒸汽压高，蒸发热小鱼氧化物和碳化物的解离能，则以氧化物分子蒸发进入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]温度不足以分解氧化物，产生分子吸收，导致被测元素挥发损失。2.2氧化物解离能低，先于氧化物蒸发而发生氧化物分解，由金属汽化形成自由原子。3.氧化物的热分解是被测元素化合物实现原子化的基本方式之一。石墨炉内的环境有利于MO,MOH的分解。4.金属氧化物还原易形成难解离氧化物的元素B、Ti、V、Mo等，还原反应是主要原子化反应。5.碳化物的生成碳化物生成是造成某些元素（B、Si、V、Nb、Ta、W等）原子化效率很低的重要原因。碳化物的形成引起分析信号峰变宽和拖尾。[B]个人查阅资料后的一点总结，欢迎大家就具体实例进行讨论。[/B]

原子化过程中的化学反应 试液在火焰原子化过程中，伴随着一系列反应，在这些反应中较为重要的是离解、电离、化合和还原等反应，它们不仅决定了火焰中试样的原子化效率，而且决定了火焰原子化过程中化学干扰的程度。 1﹑原子化过程中的化学反应 ⑴离解反应 火焰中存在的金属化合物，通常以双原子分子或三原子分子存在，多原子或有机金属化合物通常在火焰中不稳定的，在雾珠脱剂过程中即被分解成简单分子化合物，在火焰中，当火焰温度达到化合物的离解能时，大多数双原子或三原子分子也不稳定，它们反生离解，形成自由原子。 MX←→M+X 此时，火焰中自由原子浓度取决于该金属化合物在火焰中的离解度α。 α=[M]/（[M]+[MX]） 式中[M]表示火焰中已离解成金属原子的浓度；[MX]表示还未离解的分子浓度。 在稳定的火焰温度下，金属原子与MX分子间达到平衡，根据质量作用定律，可得： α=1/[1+[X]/Kd] 式中[X]是火焰中非金属原子的浓度，Kd是离解平衡常数。由此可见，Kd越大，[X]越小，则离解度*越大，火焰中存在的自由金属原子浓度就越高。若[X]＜ Kd则α≈1，即被测元素几乎全部离解为基态原子；若[X]＞Kd，则*≈0，化合物几乎不离解，一般情况*介于这两种极限情况之间，即0＜α＜1。 对于给定[X]和火焰温度，Kd的值主要取决于化合物MV的离解能，一般情况下；当离解能小于3.5evMX，火焰中不稳定，易发生离解，而离解能大于5?ev时,在火焰中较稳定,难以离解。

试液在火焰原子化过程中，伴随着一系列反应，在这些反应中较为重要的是离解、电离、化合和还原等反应，它们不仅决定了火焰中试样的原子化效率，而且决定了火焰原子化过程中化学干扰的程度。 1﹑原子化过程中的化学反应 ⑴离解反应 火焰中存在的金属化合物，通常以双原子分子或三原子分子存在，多原子或有机金属化合物通常在火焰中不稳定的，在雾珠脱剂过程中即被分解成简单分子化合物，在火焰中，当火焰温度达到化合物的离解能时，大多数双原子或三原子分子也不稳定，它们反生离解，形成自由原子。MX←→M+X此时，火焰中自由原子浓度取决于该金属化合物在火焰中的离解度?。?=[M]/（[M]+[MX]）式中[M]表示火焰中已离解成金属原子的浓度；[MX]表示还未离解的分子浓度。 在稳定的火焰温度下，金属原子与MX分子间达到平衡，根据质量作用定律，可得：?=1/[1+[X]/Kd] 式中[X]是火焰中非金属原子的浓度，Kd是离解平衡常数。由此可见，Kd越大，[X]越小，则离解度*越大，火焰中存在的自由金属原子浓度就越高。若[X]＜ Kd则?≈1，即被测元素几乎全部离解为基态原子；若[X]＞Kd，则*≈0，化合物几乎不离解，一般情况*介于这两种极限情况之间，即0＜?＜1。 对于给定[X]和火焰温度，Kd的值主要取决于化合物MV的离解能，一般情况下；当离解能小于3.5evMX，火焰中不稳定，易发生离解，而离解能大于5?ev时,在火焰中较稳定,难以离解。

直接在五水硫酸铜的水溶液中加入VC会反生反应吗，如果会，反应的结果和方程式是什么，还是只有在碱性下才会反应生成氧化亚铜？

查了下同位素交换的情况，网上有人是这么说的，不过比较理论，有没有哪位老师举几个具体的例子？尤其是这点“同位素交换反应的速率与分子的结构有关，有的可以在瞬间完成，有的则需要在催化剂的作用下（或高温下）才能缓慢地进行。例如,甲酸中羧基上的氢与D2O在瞬间就交换了;而甲基上的氢在100℃时要经过几天才能交换10％。”那么如果选同位素标准品做内标的话，溶剂怎么选？怎么看待同位素交换反应对分析实验的影响呢?对存放有特别的要求吗？

氧化还原反应规律、非氧化还原反应规律各有哪几种？

自身氧化还原反应中，即同一种物质中的同一种元素即被氧化又被还原时，电子转移表示法该怎样表示？

请问反应体系是这样：一种反应物1是液体，另一种反应物2（室温时是固体，加热到50度成液体），在室温下将2加入到1中，液体混浊，如将2加热到60度以液体形式加入到1中，观察到透明，请问2溶于1吗？反应温度调在65度以上，是不是可以认为2溶于1中，如果不加催化剂它们之间的反应是属于均相反应吗？如果在此反应温度下，催化剂加入后溶液呈混浊状或者催化剂明显不溶，那么此情况下反应是否属于非均相反应？还是非均相反应必须是两反应物分别处于两相中，采用一种相转移催化剂的反应才是真正意义的非均相反应？请各位做过催化研究的大侠帮我分析一下，在此表示十分感谢。

[font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（1）磷酸化修饰。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质磷酸化是由蛋白激酶催化的磷酸基转移反应，是最常见、最重要的蛋白质修饰方式之一。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质磷酸化修饰的具体生物效应包括：改变被修饰蛋白质的活性、改变蛋白的亚细胞内定位、改变蛋白与其他蛋白或其他生物分子的相互作用。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①催化蛋白质磷酸化的蛋白激酶，根据底物的磷酸化位点可分为三大类，蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶、蛋白质酪氨酸激酶、双专一性蛋白激酶。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②催化蛋白质去磷酸化的蛋白磷酸酶，根据磷酸化的氨基酸残基不同可分为两类，蛋白质丝氨酸/苏氨酸磷酸酶和蛋白质酪氨酸磷酸酶。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（2）甲基化修饰。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质甲基化是指在甲基转移酶催化下，甲基基团由S-腺苷甲硫氨酸转移至相应蛋白质的过程。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质甲基化修饰可产生多种不同的生物效应，包括影响蛋白质间的相互作用、蛋白质和RNA间的相互作用、蛋白质的定位、RNA加工、细胞信号转导等。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]催化蛋白质甲基化的酶：甲基转移酶。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（3）乙酰化修饰。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质乙酰化是指在乙酰基转移酶的催化下，在蛋白质特定的位置添加乙酰基的过程。蛋白质乙酰化修饰所产生的生物效应，主要包括促进基因转录、诱导细胞自噬、调节代谢酶的活性及代谢通路。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]催化蛋白质乙酰化的酶：组蛋白乙酰基转移酶。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（4）类泛素化修饰。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]小泛素相关修饰物（SUMO）是类泛素蛋白家族的重要成员之一，可与多种蛋白结合发挥相应的功能。SUMO化修饰可参与转录调节、核转运、维持基因组完整性及信号转导等多种细胞内活动。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①SUMO的分类：SUMO蛋白分布广泛，人类基因组编码了4种不同SUMO蛋白，分别为：SUMO1、SUMO2、SUMO3和SUMO4。其中，SUMO1-3在各种组织中均有表达，而SUMO4则主要在肾脏、淋巴结和脾脏中表达。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②催化蛋白质SUMO化修饰的酶。SUMO化修饰需要一系列酶的参与，包括E1活化酶，E2结合酶以及E3连接酶。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（5）巴豆酰化修饰。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]作为一种新型组蛋白翻译后修饰方式，蛋白质巴豆酰化是一种进化上高度保守，且在细胞生物学功能上完全不同于组蛋白赖氨酸乙酰化的蛋白质修饰方式。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]蛋白质巴豆酰化是指在巴豆酰基转移酶的催化下，在蛋白质特定的位置添加巴豆酰基的过程。组蛋白赖氨酸巴豆酰化修饰与基因的活化密切相关。此外，催化蛋白质巴豆酰化的酶是巴豆酰基转移酶。[/color][/size][/font]

我用GC-MS做尿液硅烷化衍生反应时，用十七烷酸作内标。对同一个样品连续进样，内标的RSD很高，且各组分经过内标归一化后的RSD，比直接用原始峰面积的RSD还大。我猜想是不是在室温下衍生反应还在继续导致的？看到有文献用正庚烷终止衍生反应，是什么原理呢？需不需要把衍生试剂吹干后，再用溶剂定容会比较好？

如题有人知道酯化反应条件么？如果强酸例如浓硫酸能直接和醇类反应么？

甲醇钠溶解在甲醇溶液中我们知道能发生甲酯化反应。氢氧化钾的甲醇溶液也能发生甲酯化反应，但是氢氧化钠的甲醇溶液会生成部分水，或者说如果氢氧化钾的甲醇溶液中有水的话，那还是单纯的甲酯化反应吗，会不会有水参与的水解反应?还有我看有的标准甲醇钠是用去离子水配置的，这里面和单纯的用甲醇溶解是不是会多一个H2O的水解反应?

香精样品中的反应物(第四部分） 醛的氧化反应附前面三期的目录：香精样品中的反应物(第三部分） 缩酮反应http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130430/4705126/香精样品中的反应物（续1）-酸和醇的酯化反应http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121230/4476168/香精样品中的反应物1 缩醛反应http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120617/4099628/香精样品中的反应物 香精是由多种香原料成分组成的复杂混合物，可能包含溶剂。既然是多种化合物在一起，在存放老化过程，不可避免的会产生某些反应，生产新的物质。这些新物质和原来香精的成分是有关联的，对这些新物质的测定，利用这些信息，就能对原香精的组分更好的还原，使香精剖析更全面准确。下面对一些常见反应做简单介绍。（注：前面GCMS线下活动和后来的帖子或短信中，有网友问我这个问题并希望有讲座或文章介绍，一直没时间做。）先粗略的介绍一下，给一个思考方向。香精一般有下列几种反应：1 缩醛反应2 缩酮反应3 酸和醇的酯化反应4 醛的氧化反应5 氧化反应6 酯交换反应7 皂化酯化反应8 聚合反应9 分解反应10 希夫（Schiff）反应缩醛（1），缩酮反应（2)和酸和醇的酯化（3）反应已经讨论过了，本篇简单讨论（4）醛的氧化反应。 醛的氧化反应由于氧的作用，醛可以氧化成相应的酸。所以醛或含醛的产品有时候需要充氮低温保存。例如乙醛生成乙酸，辛醛生成辛酸，苯甲醛生成苯甲酸，铃兰醛生成铃兰酸，兔耳草醛生成兔耳草酸，桂醛生成桂酸等。一般醛先出峰，酸后出峰（极性柱子的保留时间相差较大，非极性弱极性柱子的保留时间相差较少）。注意醛形成的酸也会和样品里面的醇发生反应生成酯。醛也有还原加氢形成醇的。醛类产品或样品放置时间越久，如果无保护措施的话，里面出现的酸越多。香精的保存时间越长，里面的醛氧化产物就越多。醛的通式为RCHO，醛类容易被氧化成为相应的酸，在醛基C-H处断开，形成C-OH。2R-CHO+O2→2R-COOH 一般情况下，需要催化条件，但脂肪醛、芳香醛、萜烯醛自身存储时候也会生成一定量的酸，在香精中也会有酸的。

关于氧化还原反应的资料[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=25804]氧化还原反应[/url]

[font=宋体]【金秋计划】[/font]龙胆苦苷（Gentiopicroside，GPS）是条叶龙胆的主要活性物质，具有广泛的药理活性，包括抗炎、抗氧化等。最近发现龙胆苦苷能有效改善糖尿病小鼠的周围神经病变和视网膜病。此外，作者之前的研究发现GPS显著改善血糖水平并有效抑制炎症以减轻肾脏微血管病变。然而，GPS是否以及如何改善高脂饮食（HFD）诱导的糖脂代谢仍然很大程度上是未知的。2022年6月，中山大学药学院黄河清/刘培庆教授联合广州中医药大学药学院刘中秋团队在Acta Pharm Sin B（IF=14.5）发表题为“Gentiopicroside targets PAQR3 to activate the PI3K/AKT signaling pathway and ameliorate disordered glucose and lipid metabolism”的文章，发现龙胆苦苷（GPS）有效改善肝脏胰岛素抵抗，改善糖脂代谢紊乱。从机制上讲，GPS促进PAQR3和DDB2的互作，促进DDB2介导的PAQR3泛素降解。此外，GPS直接与PAQR3的N端结合，并在空间上抑制PAQR3与P110 α的互作，从而维持PI3K/AKT信号通路。 1、GPS激活PI3K/AKT通路减少脂质合成并增加葡萄糖利用率棕榈酸（PA）可用于诱导肝细胞和骨骼细胞中的胰岛素抵抗。作者发现GPS能增加PA处理的HepG2细胞中葡萄糖利用率，起到与二甲双胍相似的效果。此外，GPS显著降低HepG2细胞中的TG和TC含量，减少脂滴沉积并增加了糖原合成。考虑到PI3K/AKT轴激活对调节葡萄糖和脂质代谢很重要，作者检测发现，PA刺激显著抑制PI3K活性并减少了PIP3的产生，而GPS共处理可恢复PI3K活性并促进PIP3的产生。此外，FOXO1和SREBP-1c是调控胰岛素信号通路中GCK、G6Pase、PEPCK和LDLR等的主要转录因子，GPS有效阻断了PA诱导的HepG2细胞中的FOXO1和SREBP-1c核易位。图片图1 GPS激活PI3K/AKT通路减少脂质合成并增加葡萄糖利用率2、GPS体外抑制PAQR3与P110α互作促进PI3K/AKT通路激活作者使用PI3K的特异性抑制剂LY294002进一步研究GPS 在 PI3K/AKT 轴上的作用，发现在PA处理的HepG2细胞中，与LY294002的预孵育显著逆转了GPS共处理诱导的PI3K、AKT和GSK3 β磷酸化增加。有研究报道PAQR3竞争性地拴住了高尔基体中PI3K的催化亚基（p110α），以抑制 p110α–p85α二聚体的形成，从而负向调节胰岛素信号通路。作者发现GPS处理显著降低了PA处理细胞中高尔基体中PAQR3和p110α的分布。co-IP结果证实GPS处理可逆转PA刺激导致的PAQR3和p110α互作的增加。同时，GPS处理显著增加p110α与p85α互作，表明GPS处理促进了PI3K二聚体的形成。此外，PAQR3过表达显著逆转了GPS处理对减少高尔基体中PAQR3和P110α分布的影响，消除了GPS共处理诱导的PI3K二聚体（P110α–P85α）的形成，也逆转了GPS诱导的PI3K/AKT轴的激活，而PAQR3敲低足以恢复PI3K/AKT轴并改善糖脂代谢标志物表达，而与GPS联合处理没有产生额外的效果。图片图2 GPS抑制PAQR3与P110α互作促进PI3K/AKT通路激活3、GPS通过DDB2介导的PAQR3体外泛素化抑制PAQR3蛋白表达作者接着研究了GPS负调控PAQR3蛋白水平的机制，发现GPS不影响PA处理的HepG2细胞中PAQR3的mRNA水平，半衰期分析显示GPS处理组PAQR3周转率快于未处理组，表明GPS在翻译后水平上调控PAQR3的表达。据报道PAQR3可能被泛素-蛋白酶体途径降解。作者发现在蛋白合成抑制剂CHX存在下，用蛋白酶体抑制剂MG132处理可以阻断HepG2细胞中PAQR3蛋白的降解，而溶酶体抑制剂氯喹CQ不能阻止PAQR3降解，结果阐明了PAQR3降解是由蛋白酶体介导的。此外，作者发现PAQR3可以被多泛素化。DDB2是一种底物受体模块，可决定靶向底物对泛素化的特异性，最近的研究表明，DDB2是PAQR3的转录后调节因子，可促进泛素介导的PAQR3降解。作者通过过表达DDB2验证了DDB2在促进PAQR3泛素化以恢复PI3K激活中的作用。PA刺激下DDB2下调，PAQR3上调，GPS协同处理显著增加DDB2表达，PAQR3表达降低。此外，PA处理细胞中DDB2和PAQR3的共定位降低，而GPS共处理显著增加了DDB2和PAQR3的共定位。Co-IP结果验证了GPS可促进PA处理细胞中DDB2和PAQR3的互作。此外，GPS诱导的PAQR3泛素化在很大程度上受到DDB2-siRNA的抑制。同时，DDB2敲低损害了GPS对促进PA处理的HepG2细胞中P110α和P85α的互作，损害了GPS诱导的PI3K磷酸化。这些结果表明，GPS通过DDB2介导的PAQR3泛素降解抑制PAQR3的表达。图片图3 GPS通过DDB2介导的PAQR3体外泛素化抑制PAQR3蛋白表达4、GPS直接靶向结合PAQR3Co-IP结果表明GPS可抑制PAQR3和P110α的互作，与PAQR3表达的抑制无关，而这种作用是否可归因于GPS和PAQR3的直接结合尚不清楚。作者利用重组PAQR3蛋白通过SPR、MST和TSA证实了GPS与PAQR3蛋白直接互作。分子对接确定GPS复合物与PAQR3的Leu40、Asp42、Glu69、Tyr125和Ser129形成7个关键氢键，以稳定结合构象，这对GPS的抑制活性很重要。蛋白质配体相互作用指纹图谱（PLIF）计算表明，GPS和Glu69之间存在两种强氢键相互作用和强表面接触，表明Glu69可能是GPS的重要结合位点。利用定点诱变构建PAQR3的PAQR3-S129T/Y125F/E69D/D42E/L40G和PAQR3-E69Del突变体，并通过CETSA和SPR发现Glu69的缺失影响GPS和PAQR3结合，表明 Glu69 可能是GPS的重要结合位点。图片图4 GPS直接结合PAQR35、GPS激活糖尿病小鼠的PI3K / AKT信号通路改善糖脂代谢紊乱采用链脲佐菌素（STZ）和高脂饮食（HFD）诱导的糖尿病小鼠确认GPS在体内的效果，发现GPS给药降低了空腹血糖（FBG）水平和糖化血清蛋白（GSP），降低了肝脏重量/体重（LW/BW）的比值，增加了肝糖原的含量，降低了肝组织中的总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）含量。重要的是，GPS在改善葡萄糖和脂质代谢方面与二甲双胍相当。作者进一步观察了糖尿病小鼠肝脏的形态，发现GPS或二甲双胍均明显改善糖尿病小鼠肝组织病理性肝损伤和脂质沉积，增加了LDLR和GCK在肝脏中的分布，恢复STZ-HFD诱导的受损AKT和GSK3β信号转导，改善了肝脏中糖脂代谢标志物的表达，有效阻断FOXO1和SREBP-1c在肝细胞核中的积累。图片图5 GPS激活糖尿病小鼠的PI3K / AKT通路改善糖脂代谢紊乱6、GPS抑制PAQR3在体内的表达促进PI3K的激活体外结果表明GPS诱导的PAQR3抑制介导了PAQR3在胰岛素抵抗中的保护作用，作者进一步在糖尿病小鼠中检测发现糖尿病小鼠肝组织中PAQR3表达上调，PI3K磷酸化下调，GPS治疗逆转该现象。此外，提取肝组织的高尔基体，Western blot显示GPS降低了高尔基体中PAQR3和p110α的表达，降低 PAQR3 和p110α的共定位。Co-IP结果进一步证实，在糖尿病小鼠中，GPS处理后PAQR3与p110α之间增加的互作受到强烈抑制，P110α与P85α之间的相互作用增加，这与体外结果一致。图片图6 GPS抑制PAQR3在体内的表达促进PI3K的激活7、GPS 促进体内DDB2和 PAQR3的互作来促进PAQR3泛素化降解与细胞实验一致，GPS显示对糖尿病小鼠Paqr3的mRNA水平没有影响。此外，PCR结果表明GPS显著提高了糖尿病小鼠Ddb2的mRNA水平，这可能有助于DDB2蛋白表达的上调。免疫荧光显示，GPS处理的肝组织中DDB2和PAQR3的共定位显著增强。Co-IP结果进一步证实，DDB2和PAQR3的结合在糖尿病小鼠中减少，而GPS处理促进了DDB2和PAQR3在糖尿病小鼠肝组织中的互作。此外，肝组织中PAQR3的泛素化水平在糖尿病期间下调，伴随着PAQR3 蛋白的上调。结果表明，GPS增加了DDB2的表达，这可能促进了PAQR3的泛素化和降解。综上所述，GPS通过DDB2介导的PAQR3泛素介导的降解抑制糖尿病小鼠PAQR3的表达。图片图7 GPS促进体内DDB2和 PAQR3的互作来促进PAQR3泛素化降解总结该研究发现龙胆苦苷在棕榈酸（PA）处理的HepG2细胞中减少脂质合成并增加葡萄糖利用，此外，龙胆苦苷改善了链脲佐菌素（STZ）治疗的高脂饮食（HFD）诱导的糖尿病小鼠的糖脂代谢。机制上，龙胆苦苷通过促进DDB2介导的PAQR3泛素化降解来促进PI3K/AKT轴的激活。此外， SPR、MST和TSA的结果表明，GPS直接与PAQR3结合。分子对接和CETSA结果显示GPS直接与PAQR3 NH的氨基酸结合，并在空间上抑制PAQR3与PI3K催化亚基（P110α）的互作以恢复PI3K/AKT信号通路。总之，研究确定了抑制PAQR3表达并直接靶向PAQR3以恢复胰岛素信号通路的天然产物龙胆苦苷，作为治疗糖尿病的潜在候选药物。

影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面，一是反应物自身的因素；二是反应环境条件。　　　　（一）反应物自身的因素　　　　1.抗体：不同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不适用于沉淀反应。　　　　2.抗原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。　　　　（二）反应环境条件　　　　1.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。　　　　2.酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6～9进行，有补体参与的反应pH为7.2～7.4，pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。　　　　3.温度：在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。一般为15℃～40℃，常用的抗原抗体反应温度为37℃，温度如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。

请教影响脑文格反应的一些外部因素，比如试剂水分、反应温度等等

马兜铃酸和甲醇理论上会发生酯化反应，但是加过浓硫酸，加热至70℃左右和除水剂等都不发生反应，该怎么办

维生素C的不良反应：（1）胃出血：长期大量服用维生素C，会发生恶心、呕吐等现象。同时，由于胃酸分泌增多，能促使胃及十二指肠溃疡疼痛加剧，严重者还可酿成胃黏膜充血、水肿，而导致胃出血。（2）贫血：长期大量服用维生素C，可减少肠对维生素B12的吸收，致使巨幼红细胞性贫血的病情加剧恶化。若病人先天性缺乏6-磷酸葡萄糖脱氢酶，每日使用维生素C超过5g时，就会促使红细胞破裂，发生溶血现象，而产生贫血，严重者可危及生命。（3）痛风：痛风是由于体内嘌呤代谢发生紊乱引起的一种疾病，主要表现为血中尿酸浓度过高，致使关节、结缔组织和肾脏等处发生一系列症状。而大量服用维生素C，可引起尿酸剧增，诱发痛风。（4）婴儿消化不良：哺育期的婴儿大量服用维生素C，可出现不安、不眠、消化不良等症。（5）不孕症：育龄妇女长期大量服用维生素C(如每日服剂量大于2g时)，会使生育能力降低。

[color=#444444]本人在做有关 C4-- C12 烷烃烯烃异构化催化剂的研究，现在准备用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]计算转化率，选择性。不知道用什么物质做内标好，看了好多文献，都没有提到用什么做内标。一个个试的话，工作量会好大。求助有做过或知道异构化反应的内标物质的，希望不吝赐教，感激不尽！！！！[/color]