蛋白质含量

蛋白质含量的测定[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=54096]蛋白质含量的测定[/url]

风味发酵乳的蛋白质指标偏低，如何增加蛋白质含量？望老师不吝赐教

[i]最近我们公司开发了一种产品,里面有大米膨化粉,玉米膨化粉,小米膨化粉,大豆膨化粉等,还有各种氨基酸,要我测蛋白质含量,我不知道该用哪个换算系数,高手指点一下啊!:) [/i]

食品中蛋白质含量测定仪是用于快速、准确地测量食品中蛋白质含量的专业仪器。这种仪器基于各种化学或物理方法，如凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法(Bradford法)或紫外分光光度法等，来测定食品中蛋白质的含量。　　以下是关于食品中蛋白质含量测定仪的一些详细信息：　　工作原理　　凯氏定氮法：这是一种经典的蛋白质测定方法。样品中的蛋白质在催化剂的作用下与硫酸共热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即可计算出样品的蛋白质含量。　　双缩脲法：在碱性溶液中，双缩脲(尿素加热至180℃左右生成的二聚体)与铜离子形成紫色络合物，该络合物的颜色深浅与蛋白质含量成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。　　考马斯亮蓝法(Bradford法)：考马斯亮蓝G-250染料在酸性溶液中与蛋白质结合后，在595nm处有最大光吸收，其光吸收值与蛋白质含量成正比。因此，可用于蛋白质的定量测定。　　紫外分光光度法：蛋白质中常含有酪氨酸、色氨酸等苯环结构，在280nm的紫外波段有较强的吸收峰，其吸光度与蛋白质含量成正比。这种方法操作简单、快速，但灵敏度较低，只适合测定蛋白质含量较高的样品。　　应用领域　　食品质量检测：蛋白质是食品中的重要营养成分，其含量是评价食品质量的重要指标之一。食品中蛋白质含量测定仪可用于检测各类食品(如肉类、奶类、蛋类、豆类、谷物等)中的蛋白质含量，为食品质量检测提供数据支持。　　食品科学研究：在食品科学研究中，蛋白质含量测定仪可用于分析不同食品原料、加工工艺对蛋白质含量的影响，以及蛋白质在食品加工过程中的变化等。　　注意事项　　在使用蛋白质含量测定仪进行测试之前，需要仔细阅读产品说明书，了解仪器的使用方法、操作步骤及注意事项。　　确保样品准备过程符合标准要求，避免样品污染或损坏导致检测结果不准确。　　定期对仪器进行维护和校准，确保检测结果的准确性和可靠性。　　在使用过程中注意安全防护措施，避免对人体造成伤害或对环境造成污染。　　总之，食品中蛋白质含量测定仪是食品检测领域的重要工具之一，能够快速、准确地测定食品中的蛋白质含量，为食品质量控制和科学研究提供有力支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151126410832_3840_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

大家好，请问近红外是否可以测定蛋白质亚基含量，就是想建立ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定的蛋白质亚基的快速检测方法，请各位指点，谢谢！

请教一个问题:考马斯亮蓝法测总蛋白质含量，目标物中总蛋白含量大概在0.0001-0.06mg/g范围内，有合适的仪器推荐吗？ 目前有一台普通的721型可见分光光度计，试测效果不佳。

食品中蛋白质含量测定仪的优点主要体现在以下几个方面：　　检测速度快：能够在短时间内完成大量样品的检测，大大提高了检测效率，使食品生产厂家能够快速获取检测结果，及时调整生产策略。　　操作简单：仪器操作简单易用，用户只需按照说明书进行操作即可完成检测，无需复杂的操作步骤和专业技能，降低了操作难度。　　准确度高：采用先进的检测技术，如光谱技术、化学分析方法等，能够确保测量结果的准确性和可靠性，为食品生产厂家提供准确的数据支持。　　应用广泛：适用于各类食品中蛋白质含量的检测，如乳制品、肉制品、豆制品等，满足了不同食品生产厂家的检测需求。　　安全性高：使用食品中蛋白质含量测定仪可以避免直接接触样品，降低了交叉感染的风险，保障了检测人员的安全。　　智能化程度高：一些先进的食品中蛋白质含量测定仪还采用了安卓智能操作系统，具有网线连接、Wi-Fi联网上传、GPRS无线远传等功能，可以快速上传数据，实现远程监控和管理。　　稳定性强：仪器具有稳定的工作性能和较长的使用寿命，保证了长期使用的可靠性。　　综上所述，食品中蛋白质含量测定仪具有检测速度快、操作简单、准确度高、应用广泛、安全性高、智能化程度高和稳定性强等优点，为食品生产和质量控制提供了有力的支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405151149314403_9648_4214615_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量，发现蛋白质与染色液混合后吸光度值很不稳定，在1h内时间越长，吸光度越来越低，与文献上的越来越高并趋于稳定有所差异，不知道是不是这个原因，做加标回收率很低，求大神指教到底是什么原因会导致这样的情况。

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

鸡蛋中的蛋白质含量高，是食物中的营养冠军，能提供人体必需氨基酸，合成肌肉原料，是瘦身的最佳食材之一。

蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏10～20倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。 值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。

[size=4]蛋白质含量测定的方法[/size][color=#DC143C]一、微量凯氏（Kjeldahl）定氮法[/color] 含氮有机物与浓硫酸共热,即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下： H2NCH2COOH+ 3H2SO4 2CO2 + 3SO2 +4H2O +NH3 (1) 2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4 (2) (NH4)2SO4 + 2NaOH 2H2O +Na2SO4 + 2NH3 (3) 为了加速消化，可以加入CuSO4作催化剂，K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。 计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。[color=#DC143C][size=4]论文：14楼 杜马斯燃烧法与凯氏法测定饲料含氮量的比较研究15楼 用凯氏法和杜马斯法测定植物样品中的全氮16楼 乳及乳制品中蛋白质测定应注意的事项探讨17楼 杜马斯燃烧定氮法在农产品品质检测中的应用18楼 凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质的不确定度分析19楼 消化时间对总氮测定结果的影响20楼 奶粉中蛋白质样品消化方法的改进21楼 凯氏定氮法测定食品中蛋白质的不确定度分析22楼 催化剂与浓硫酸组成比例对凯氏定氮消化时间的影响23楼 饲料酵母蛋白含量测定结果的分析24楼 微波消解—凯氏定氮法测定食品中蛋白质的方法研究25楼 Loery法和Bradford法测定玻璃酸钠中蛋白质含量的比较26楼 应用 Primacs SN总氮 蛋白质分析仪测定食品中的蛋白质[/size][/color]

用 5009.5-2010 第二法 分光光度法 测定奶粉中蛋白质含量消化3天还没完成，怎么办？

一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、蛋白质含量测定方法 1. 凯氏定氮法2. 双缩脲法3. Folin-酚试剂法4. 紫外吸收法5. 考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 （一）试剂： 1. 考马斯亮蓝试剂：考马斯亮蓝G—250 100 mg溶于50 ml 95%乙醇，加入100 ml 85% H3 PO4 ，雍蒸馏水稀释至1000 ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3 PO4 。2. 标准蛋白质溶液：纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15 mol/LNaCl配制成100 ug/ml蛋白溶液。（二）器材： 1. 722S型分光光度计使用及原理。2. 移液管使用。（三）标准曲线制作： 1. 试管编号0123456100ug/ml标准蛋白（ml）0.00.10.20.30.40.50.60.15mol/L NaCl （ml）10.90.80.70.60.50.4考马斯亮蓝试剂 （ml）5555555摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色A595nm2. 以A595nm 为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。（1）利用标准曲线查出回归方程。（2）用公式计算回归方程。（3）或用origin作图 ，测出回归线性方程。即A595nm =a×X( )+6；一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。（4）绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。（四）蛋白质含量的测定： 样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm ，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。一般被测样品的A595nm 值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm 值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。（五）注意事项： 1. 玻璃仪器要洗涤干净。2. 取量要准确。3. 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。4. 对照：用被测物质以外的物质作空白对照。蛋白质含量测定实验难度系数 0共 0 人点评打分实验材料结晶牛血清清蛋白 g—球蛋白试剂（盒）Na2CO3酒石酸钾钠蒸馏水硫酸铜钨酸钠钼酸钠磷酸硫酸锂液体溴NaOH酚酞仪器耗材可见光分光光度计旋涡混合器秒表[url=http://www.biomart.cn/equipm

各位大虾，有谁用过高效液相色谱法测定蛋白质含量的吗？

豆制品中蛋白质含量丰富，发酵类的食物更好，比如豆豉、腐乳、发酵的臭豆腐，纳豆，发酵类的食物富含维生素B12。

有个问题一直想不通，请各位帮帮我啊！就是在连续几天测定胁迫下SOD酶的比活力后，发现比活性一直平稳，但后来急剧上升之后下降。但是下降时测得的蛋白质含量与上升时差不多。 为什么酶的比活性下降了（或者说），但是蛋白质含量还是如此高？SOD比活性上升了，是因为酶量增加了还是酶结构的变化？还是说，SOD比活性降低，只是酶的活性部分被抑制，其酶的蛋白质性质未发生改变？ 向各位高手求救！[em0715]

关于蛋白质含量测定国标GB5009.6-2016中第三法燃烧法的应用1.求该法规定的食品检测的参考文献。2.标准中的蛋白质分析仪是杜马斯定氮仪吗？（来自小白的问号??）3.该法燃烧法与杜马斯燃烧法是不一样的吗？（看到一些文献是另一个标准的杜马斯燃烧法与国标凯氏定氮法的比较）

[size=4]之前好像在哪看到一个贴，说蛋白的蛋白质含量几乎为100%，也就是说鸡蛋的蛋白全是蛋白质。感觉有点可疑，真的有那么高吗？刚刚百度了一下，上面的数据是蛋白的蛋白质为13%。两个数据差好远哦。不知道有没有坛友们做过？[/size]

UV紫外吸收法测protein蛋白质含量 蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（NH4）2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

有谁用凯式定氮法测过蛋白质的含量,有没有要特别注意的问题呀!刚进此领域不久,还望各位多多帮忙!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!![em24] [em25] [em24] [em26]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403130927073834_7048_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　乳品中蛋白质含量检测仪是一种高端的科学仪器，专门用于精确测量乳品中的蛋白质含量。这一设备结合了现代光学、电子技术和生物化学的先进成果，通过特定的检测原理和方法，能够快速、准确地提供乳品中蛋白质含量的数据。　　乳品中蛋白质含量检测仪在乳品生产、质量控制和食品安全等领域具有广泛的应用。在生产过程中，它可以实时监控原料乳和成品乳的蛋白质含量，确保产品质量的稳定。同时，在食品安全监管中，它也能发挥关键作用，通过快速检测蛋白质含量，判断乳品是否合格，保障消费者的健康权益。　　此外，该仪器还具备自动化、智能化等特点，能够减少人工操作误差，提高检测效率。其精准的检测数据，也为乳品企业的产品研发、工艺优化和市场推广提供了有力支持。　　总之，乳品中蛋白质含量检测仪是一种集现代科技之大成的先进仪器，它在乳品产业中的广泛应用，不仅提升了产品质量，也推动了行业的科技进步和可持续发展。

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量加标回收率在80％左右，怎么做都升不上去，请大神指教有可能的原因，样品是β环糊精，蛋白质含量在0.2％左右

请问怎么测试固体物质的蛋白质含量啊？使用凯氏定氮法吗？我想用精细的方法测试其中的含量，用什么方法好一点啊？

目前在做的一个项目中要涉及到测定植物油中蛋白质含量，采用HPLC。可是我现在暂时只能得到粗油。本来蛋白质的LC测定都是需要先分离纯化的，请问有没有不需要纯化步骤的前处理方法？样品只是植物种子的粗油。如果没有，那我应该如何进行分离纯化那？由于时间的原因，可能没有办法将分离纯化作为一个单独的课题来研究。真是伤脑筋啊～。。。请各位大侠不吝赐教～万分感谢。。。