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提取相关的资讯

  • DNA提取仪新突破:三分钟快速提取DNA
    用棉签从口中取出唾液后,新研发的设备可在几分钟内从中提取DNA,以供染色体分型分析和基因组测序。   华盛顿大学的工程师联合NanoFacture公司研发出新的DNA提取设备,相比于传统方法,它能以更高效、环境更友好的简单方式从流体样本中提取人体DNA。   领导这项研究的华盛顿大学机械工程副教授JaeHyun Chung 称,提取DNA是非常复杂的一件事,当了解到目前可供使用的DNA提取设备时,您会感觉DNA提取如同是用建筑起重机收集人体头发那般复杂。而具有灵活特性的新设备从技术水平上克服了上述障碍,有望为医院和实验室提供更加轻松的方法从人体流体样本中提取DNA,以备基因组测序、疾病诊断和法医调查之需。   该设备的供应商NanoFacture公司(华盛顿大学经营的)与韩国制造商KNR Systems上月签署合同,旨在推进这一盒状的小设备进入大批生产阶段,并最终将提供给医院和诊所。在DNA提取设备研发领域内,华盛顿大学Chung教授领导的研究小组发挥了领军角色,研发了目前还处于知识产权申请阶段的、DNA提取设备应用的新技术。   从体液分离DNA是一个繁琐过程,已成为制约科学家推进基因组测序(尤其在疾病预防和治疗领域)的瓶颈,而从市场前景上看,仅DNA制备这一领域就能创下每年约30亿美元的营销额。   传统方法利用离心机旋转和分离DNA分子,或者利用微型过滤器从流体样本中抽提,不过这些方法要需要20〜 30分钟才能完成,并在提取过程中使用过多的有毒化合物。   威斯康星大学的工程师研制出能侵入流体样本(唾液、痰液或血液)的显微探针,通过在液体中施加电场,该微型探针在表面上吸附着DNA体积大小的颗粒,而那些体积较大的颗粒因击中探针尖端而被弹开。采用这一技术,需要两、三分钟就可分离和提纯DNA分子。正如Chung所说,这一简单的流程避开了传统方法的所有步骤。   这一手持设备能快速清理4个不同的人体流体样本,不过该技术能扩展到单次处理96个样本这一大规模处理的标准。该微型探针称为微探针或纳米探针,在华盛顿大学微型制造工厂中被设计和制造。Chung称,技术员每年能生产多达100万个探针,这是决定DNA新设备大规模供应可行性的关键点。   Chung实验室的工程师利用相同的探针技术还设计出一个铅笔大小的设备,它可以被病人带回家或者分发给海外执行军事任务的人员。病人可以擦拭自己的脸颊,收集唾液样本,然后当场处理自己的DNA,并送回医院和实验室以供分析。Chung称,这些都是朝着基因组测序用于疾病预防和治疗的方向进行的积极努力。   华盛顿大学获得5万美元的商业资助后于2008年启动了这项研究,并在随后的时期内,研究人员收到了来自美国国家科学基金会(National Science Foundation)和美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)的总额约200万美元的资金。
  • 与DNA提取有关的那些事
    也许你很难想象一片叶子、一块肌肉、一管血液都经历了什么,最后以核酸的形式呈现。核酸的提取是所有分子生物学研究的基础,核酸提取的质量、浓度的多少对于下游分子生物学实验的成败起着关键的作用,今天我们就说一说关于DNA提取的那些事儿。一. DNA提取原则1、保证DNA分子的完整性2、排除有机溶剂与金属离子的干扰3、排除蛋白质、多糖、多酚、脂类的污染4、获得高纯度的核酸5、方法操作简便,稳定性强二. DNA有哪些染色体DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、质粒DNA、病毒/噬菌体DNA等。三. 样本的收集保存注:详细操作可参见《派森诺样品制备及质量要求》文件,可向当地销售或技术-支持索取。四. DNA提取原理及方法目前提取DNA的方法繁多,如CTAB法、SDS法、各种试剂盒等,但原理大致相同,主要是裂解和纯化两大步骤。首先对样品破壁裂解,采用机械力、化学试剂、酶等方法将DNA释放出来,随后去除蛋白质、糖、酚、金属离子等杂质,再用无水乙醇、异丙醇沉淀或载体吸附DNA,之后洗涤溶解即可得到核酸。虽然原理相似,但不同提取方法使用的试剂有很大差别,下面列举出在提取过程中,常用试剂的作用及原理:1、裂解相关试剂 (1)CTAB(十六烷基三甲基溴化铵):一种阳离子表面活性剂,在高盐溶液中,CTAB可与蛋白质和中性多糖形成复合物而沉淀,但不能沉淀核酸和酸性多糖,另外它还能保护DNA不受内源核酸酶的降解。(2)SDS(十二烷基硫酸钠):一种阴离子去污剂,可使细胞膜崩解,与膜蛋白疏水部分结合并使其与膜分离,使蛋白变性。(3)PVP(聚乙烯吡咯烷酮):是酚类化合物的螯合剂,可与多酚化合物形成复合体,使其不被氧化成醌类。(4)β-巯基乙醇:抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除。(5)蛋白酶K:用于生物样品中蛋白质的一般降解,将蛋白质降解成小分子肽或氨基酸,使DNA分子分离出来。2.纯化相关试剂耗材(1)苯酚:使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。(2)氯-仿:克服酚的缺点,加速有机相与液相分层,去除核酸溶液中的迹量酚(酚易溶于氯-仿中)。(3)异戊醇:少许异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡,有助于分相,保持体系的稳定。(4)无水乙醇:沉淀DNA,不易沉淀盐类等物质;异丙醇也可沉淀DNA,体积小时间短,但易沉淀盐类物质。(5)核酸纯化柱:采用硅胶膜作为核酸的特异性吸附材料(高盐低pH值结合核酸),同时去除其他杂质,可以最-大程度地回收样品中的DNA(低盐高pH值洗脱),可以用于各物种的DNA提取。操作简单、用时短、纯度高。(6)DNA提取磁珠:是一种核心为四氧化三铁、表面修饰大量硅羟基的磁性微球,能在高盐、低pH条件下和溶液中的核酸通过疏水作用、氢键作用和静电作用等发生特异性结合,而不与其它杂质(如蛋白)结合,可迅速从生物样品中分离核酸,操作安全简单,非常有利于核酸的自动化和高通量提取。五. 核酸的保存短时间(24h内)可放置4℃保存,长期(24h以上)放置于-20℃进行保存,期间避免反复冻融。对于纯度不高、总量较少、完整度不好的非高质量核酸,还需尽早进行后续实验,以防保存时间过长,DNA质量更受影响,进而影响建库和测序质量。以上为大家列举了在提取过程中经常用到的试剂及原理,给出了核酸保存的建议。要强调的是相同的原理下,不是试剂的去污、裂解效果越好就用的越多,还是要在实际提取过程中,根据提取材料的不同、提取结果的差异,灵活调整实验方案。
  • 打破传统 SmartExtraction让核酸提取更快速、高效、简单——德国耶拿全球发布核酸提取新技术
    仪器信息网讯 在今年的慕尼黑展会中,德国耶拿发布了一项全球创新的核酸提取新技术 —— SmartExtraction,该技术不需要使用核酸提取通常所需的苯酚/氯仿、离子交换剂、过滤柱或过滤板,也不需要采用磁性或顺磁性粒子的悬浮液来结合核酸。SmartExtraction  “SmartExtraction”技术利用独创的改性表面(Smart Modified Surfaces)来结合核酸,这一技术由德国耶拿公司开发,目前已经申请了多项专利来保护这一创新技术。  SmartExtraction可以实现手动、自动或在现场条件下使用,所有必要的提取步骤大大简化,而且速度明显加快。  除了提取过程简单,SmartExtraction技术在核酸分离的产量和质量方面也有不俗的表现。因为使用改性表面,结合能力极高,与使用磁珠提取时的情况相比,核酸的产率几乎没有限制。此外,新技术还可以实现非常低浓度生物样品中核酸的分离。发布会现场  除此之外,德国耶拿也展示了许多使用SmartExtraction技术的硬件解决方案,包括InnuPure® C16、InnuPure® C96、CyBio® SELMA、CyBio® FeliX和GeneTheatre自动化平台,涵盖了半自动提取 (CyBio® SELMA)到全自动提取,还可以与进一步的步骤相结合,如PCR(CyBio® FeliX, GeneTheatre)。
  • 小编精选|核酸提取仪导购篇
    新型冠状病毒(2019-nCoV)全球范围内大规模爆发,使“核酸检测”进入了公共视野。在全球新冠诊断标准中,基于荧光定量PCR的核酸检测是 “金标准”。伴随PCR一同火出圈的还有另一关键设备--核酸提取仪,它是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。在核酸检测过程中,核酸提取作为前处理,对最终分析结果的准确性起到重要作用。自动化的核酸提取仪是针对大规模人群进行快速核酸检测的重要技术支撑。核酸提取仪在环境微生物检测、食品安全检测、法医学鉴定、疾控医疗、生物学研究以及畜牧业等多种领域均得到广泛地应用。核酸提取技术的“前世今生”新型冠状病毒的检测需要经过取样、留样、保存、核酸提取、上机检测五个步骤,大多数临床样本中的核酸浓度相对较低,从复杂的生物样品中提取高纯度的核酸对保证高灵敏度和高准确性的核酸检测起着关键性作用。核酸提取是指从复杂体系中实现核酸的分离和纯化,核酸分子一级结构的完整性、纯度、样品溶解率与核酸吸附率等均可作为核酸提取效率的指标。1869年,瑞士医生Friedrich Miescher首例成功的进行了核酸提取。19世纪80年代初,德国生物化学学家Aibrecht Kossel进一步纯化获得核酸。此后,研究者在提取材料和方法上不断进行改进,发展出一系列核酸提取技术。根据工作方式,核酸提取技术分为手动提取和自动提取两大类。手动核酸提取技术存在操作步骤复杂、效率低,核酸纯度低等问题,而全自动核酸提取技术是应用配套的核酸提取试剂来自动化完成样本核酸的快速提取,具有操作简单、精确性高和稳定性强等优势。在本次新冠疫情中,高通量全自动核酸提取仪在大规模人群核酸检测中发挥了重要作用。核酸提取仪的工作原理目前,核酸提取仪的工作原理主要分为磁珠法和柱提法,其中磁珠法在当前市场占主流地位。 磁珠法的工作原理主要利用磁珠对核酸的特异性识别和高效结合性,通过磁珠吸附核酸达到分离效果,常见的磁珠种类包括氧化锆磁珠和二氧化硅磁珠等。根据磁珠与液体的分离方式又细化分磁棒法和抽吸法,二者原理和过程相同。磁珠法提取过程示意图(图源网络)磁珠法核酸提取仪器的特点◆高效简捷,能够实现高通量操作,操作简单,用时短 ◆灵活稳定,能够实现自动化操作,重复性高 ◆安全环保,减少对操作员身体的危害 ◆价格低廉,可满足数据库建设 ◆质量稳定,核酸纯度高柱提法的工作原理主要利用二氧化硅对核酸特异吸附性,在高盐,低pH的环境下将核酸吸附在硅胶膜上,后经离心或洗脱(洗脱液为低盐高pH溶液)等方法将其剥离,达到分离的目的。通量一般在1-12个样本,操作时间与人工提取相比较,没有显著优势,因此目前主要应用于实验室的研究。柱提法提取过程示意图(图源网络)新冠疫情引爆核酸提取仪市场新冠疫情的爆发导致对核酸提取仪的需求暴增。根据2020年全国公开招中标信息调查,当年核酸提取仪中标总计7011台/套,出现国内外品牌共计77个。在纷繁复杂的品牌型号中,如何挑选到自己满意的核酸提取仪呢?接下来,小编将遴选推荐一些靠谱品牌型号。(按品牌简称首字母排序)A奥美泰克推荐型号:AMTK全自动核酸提取纯化仪 CL-ME96/192推荐理由:★移液头采用高硬度、轻质合金材料,保障移液精密度和准确度 ★图形化软件界面、简单易懂易操作,客户能自行进行编程并运行★整合扩展能力强,客户自由选择各功能模块或适配器▲ AMTK全自动核酸提取纯化仪 CL-ME96/192(点击查看)奥盛推荐型号:Auto-Pure 96 全自动核酸提取仪推荐理由:★高通量快速提取,每次可同时提取1-96个样本 ★转盘式设计,仪器占用面积小,运行稳定,安全可靠★7英寸彩色触摸屏显示,参数、程序可自由编辑,自由匹配试剂盒▲ Auto-Pure 96全自动核酸提取仪(点击查看)Aurora推荐型号:Aurora VERSA 1100 全自动核酸提取工作站推荐理由:★高通量快速提取,每次可同时提取1-96个样本;兼容市场多种常规耗材和试剂 ★PCR/RT-PCR反应体系构建,系列稀释、母液配置等液体自动处理★配备封闭式高效过滤安全外罩,避免污染▲Aurora VERSA 1100 全自动核酸提取工作站(点击查看)B博日推荐型号:博日GenePure Pro全自动核酸提取纯化仪 NPA-32P推荐理由:★可轻松应对各类微小磁珠,轻松达到提取核酸无挂壁为残留 ★精准控温,采用包裹性更全面的深孔加热 ★核酸提取自动化,一次性可处理样品32份▲ 博日GenePure Pro全自动核酸提取纯化仪 NPA-32P(点击查看)D帝肯推荐型号:Tecan Freedom EVO核酸提取工作站推荐理由:★可以实现不同样品RNA、mRNA、基因组DNA以及质粒的自动化提取操作 ★可以使用不同的分离技术(固相提取、磁珠分离等)来进行提取操作▲ Tecan Freedom EVO核酸提取工作站(点击查看)EEppendorf推荐型号:Eppendorf epMotion 5073t 核酸提取工作站推荐理由:★精确移液体积精确度范围为 0.2-1000μL ★触屏或鼠标进行操作,USB接口可以用于数据存储与备份★自动检测液体体积、耗材和吸头,自动切换分液工具及机械手▲ Eppendorf epMotion 5073t 核酸提取工作站(点击查看)H华大智造推荐型号:MGISP-100B全自动核酸提取纯化仪推荐理由:★单轮可运行8/16/24/32样本,运行时间40-80分钟★整合多种功能,占地面积小于0.5m3★配置封闭式安全防护门及自动清洁功能▲ MGISP-100B全自动核酸提取纯化仪(点击查看)MMP推荐型号:MPure-12自动化核酸提取仪推荐理由:★享受单次实验处理1~12个样品的灵活性和简便性 ★操作平台独特设计,降低样品间的交叉污染★实验结果可重复性,处理体积可扩展性,使用方便▲ MPure-12自动化核酸提取仪(点击查看)P珀金埃尔默推荐型号:Pre-NAT II全自动核酸提取纯化仪推荐理由:★24和96两种提取模式,提供从10uL微量样本到4mL自动化核酸提取解决方案,满足多种客户需求;程序可编辑,提供定制化程序 ★90min完成96个样本的核酸提取及PCR前处理过程 ★1.5米长,折叠式显示系统,节省更多实验室宝贵空间▲ Pre-NAT II全自动核酸提取纯化仪(点击查看)QQIAGEN推荐型号:EZ1 Advanced XL全自动核酸纯化仪推荐理由:★过程快速,每轮纯化20–45 分钟 ★通量灵活,每轮可纯化多达14 个样品 ★多达4台EZ1 Advanced XL可同时与一台外接电脑相连,扩大通量至每轮56 个样品▲ EZ1 Advanced XL全自动核酸纯化仪(点击查看)S赛默飞推荐型号:ThermoScientific KingFisher Flex全自动核酸提取仪推荐理由:★采用KingFisher样品提取方式,全程无需离心或抽真空。 ★快速高通量,15-40min内完成96份样品的提取纯化 ★配置兼容不同板型的多种磁头以满足各种提取需求▲ ThermoScientific KingFisher Flex全自动核酸提取仪(点击查看)TThmorgan推荐型号:全自动核酸提取仪 MM24推荐理由:★通量高,一次可完成24个样品的提取 ★平行性好,提纯孔间差CV小于1% ★核酸纯度高,磁珠回收率大于99%▲ 全自动核酸提取仪 MM24(点击查看)TIANGEN推荐型号:TGuide S96全自动核酸提取纯化仪(TGuide S96 Automate)推荐理由:★四维一体运动模式,振荡频率高,多档可调 ★循环吸附模式,多次循环,即使小粒径磁珠也可确保无漏网之鱼 ★污染控制,安全防护▲ TGuide S96全自动核酸提取纯化仪(TGuide S96 Automate)(点击查看)天隆科技推荐型号:核酸提取仪 NP968-C推荐理由:★高通量,一次实现1-32个样品的快速高效制备 ★安全可靠,空气过滤模块、紫外消毒模块 ★可外接扫码枪,扫描后自动识别程序信息,一键运行▲ 核酸提取仪 NP968-C(点击查看)X新芝推荐型号:新芝全自动核酸提取仪NP-2032推荐理由:★多速度多模块供选择,且可储存100个程序,满足不同客户要求 ★核酸回收率95%,磁珠回收率95% ★合计约20-40min可完成32个样本提取(依试剂而定)▲ 新芝全自动核酸提取仪NP-2032(点击查看)Y耶拿推荐型号:InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪推荐理由:★新一代核酸提取技术Smart Extraction:核酸得率高、纯度好 ★预装封膜试剂条/板,一次可同时提取1-16个样品,★CyBio移液技术保证核酸提取过程移液的高精确度和可重复性▲ InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪(点击查看)
  • 梳理 | 国内外核酸提取仪大全
    核酸提取作为作为核酸检测的“第一步”,也是最关键的一步,其获得的核酸质量的优劣直接影响到下游分子生物学试验的成败。在疫情期间,自动化的核酸提取仪在加速新冠病毒检测中起了举足轻重的作用。由于疫情原因,核酸提取仪需求会在相当时间内保持旺盛状态。所以,今天我们为大家整理市场上的核酸提取系统品牌信息,以供大家了解。目前市场上的核酸提取仪的提取原理主要分为两种:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市场主流地位。磁珠法具体又包括磁棒法和抽吸法。国外核酸提取仪品牌QIAGENQIAcube Connect正在重新定义自动化样品处理的优势。凭借先进的数字功能和连通性,QIAcube Connect及其附件和耗材使研究实验室只需按一下按钮,即可完全自动化和跟踪其著名的QIAGEN离心柱萃取和纯化方案。研究人员可以通过内置屏幕与平板电脑保持远程连接,该平板电脑包含预装的QIAcube Connect应用程序,从而可以快速响应,并可以在远离QIAcube Connect的情况下监控运行情况。使用最常用的140多种标准协议自动化80多种QIAGEN试剂盒可选的协议定制功能可将其扩展到几乎所有应用程序允许自进行DNA,RNA和蛋白质样品处理,消除手工处理步骤产生标准化结果,通过随附的平板电脑实现快速响应时间和远程运行监控。 RocheMagNA Pure LC 2.0 System可从各种生物样本(全血、白细胞、外周血、单核细胞、培养细胞、组织、石蜡切片)中分离纯化DNA、RNA和mRNA(PCR级纯度)。富士QuickGene-610L是在QuickGene 810型自动核酸提取仪的基础上开发出来的一款新型半自动的基因组提取系统,并专门优化以用于全血的遗传分析。其能在12分钟内从6份全血样品中提取DNA,适用于高通量的常规分析工作。Thermo fisherKingFisher™ Presto 磁珠纯化仪,专为自动化系统设计,可与封膜仪、PCR仪、离心机等其他仪器进行整合。为高通量实验室提供全天候的稳定、高性能纯化服务。ABIExpress核酸提取仪结合磁珠检测技术,操作简便灵活,能在短时间内处理大量样本,是一款实用性非常强的自动核酸提取系统。特点:1.专为疑难检材设计提高DNA得率;2.不含PCR抑制剂,提取到的DNA质量高;3.封闭性系统,最大程度的降低污染。TecanFreedom EVO工作站是一种高度灵活且可拓展的系统,可以实现不同样品RNA、mRNA、基因组DNA的自动化提取。可以使用不同的分离技术—如固相提取、磁珠分离以及离心分离法来进行提取操作。珀金埃尔默Chemagic 360 自动核酸提取仪是基于电磁原理进行磁珠分离的高通量自动化核酸提取仪,可从各种类型样本中提取核酸,通过金属棒自我旋转混匀而不是上下震荡方式进行反应体系的混匀,可以有效降低样本间交叉污染的风险。内置自动分液器,除样本和部分小体积试剂需要手工加入提取体系之外,其余核酸提取试剂均自动加入。耶拿德国耶拿成立于1990年,前身为久负盛名的卡尔蔡司公司分析仪器部,已发展成为德国最大的分析仪器公司之一。1.耶拿新核酸提取技术Smart Extraction2.InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪3.高通量自动核酸纯化系统4.小型自动核酸纯化系统梅里埃NucliSENS® easyMAG是梅里埃运用其独特专利技术研发的一套全自动核酸提纯仪系统,这套突破性的平台,通过极其简单的操作提高了生产力。贝克曼库尔特Biomek NXP工作站配置了96通道加样器、震荡混匀模块和温控模块,能自动化地完成核酸提取过程中的样品裂解、磁珠混匀、磁珠洗涤及核酸高温洗脱等核酸提取流程,在70分钟内完成96个检材样品的自动化提取实验,自动化集成化程度很高。ioneerExiPrep™ 16 全自动核酸提取仪是 Bioneer 核心产品之一,该仪器极大地提高了核酸提取操作的智能化,使用非常简洁。只需加入样本,选择对应提取程序,按下 “Start” 即收获核酸。一次可提取 1-16 个样本,时间不超过 30 分钟,还可联网,1 台电脑同时操作多台机器,并且有着极佳的性价比和经济的配套试剂盒。欧罗拉创建于1990年的欧罗拉是北美著名的生化仪器设备公司。VERSA Gene 1100高通量测序文库制备工作站,通过在短时间内获得全基因组序列,对基因组学研究工作产生了革新性影响。针对NGS工作流程选择合适的自动化设备是一个复杂的过程,首要满足NGS流程的高通量要求,以及自动化解决方案的稳定性以及扩展性能,才能更好发挥NGS技术的优势。KURABOQuickGene-Mini80 是迷你型核酸纯化仪,无需额外的离心操作,避免对样品的损伤,回收率高,操作方便,快速。可对各种样品,包括血液,组织、细胞、植物、病毒等进行DNA/RNA的提取。结合特定的试剂盒进行核酸提取,性价比极高,让实验室人手一台的核酸提取成为可能,更快,更方便,更准确,片段更长,回收效率更高。国产常见核酸提取仪品牌仪器信息网统计了2020年下半年核酸提取仪中标情情况,发现中标信息覆盖50家核酸提取仪研发制造企业,其中外资企业仅占6席。从核酸提取仪中标数量来看,81.3%为国产品牌,进口品牌仅占18.7%。在核酸提取仪市场,国内品牌已经占据显著优势。核酸提取仪进口/国产比例(数量)核酸提取仪中标品牌占比下面列出部分国产核酸提取仪介绍及产品特点附:核酸提取专场
  • qPCR实验——核酸提取那些事
    前言MIQE是描述评估qPCR实验所需的最小信息,该指南是稿件投稿时需要同时提交的一个清单。通过作者提供相关的实验条件和实验特点,审稿人可以评价实验所用方法的可靠性。另外提供详细的实验所用试剂、序列和分析方法,其他研究人员可以利用这些信息进行重复实验。对于核酸提取MIQE有明确要求两点——实验组与对照组的定义及每一组的样本数量。无论采用手工法还是试剂盒,只要符合MIQE的要求并实现良好的可操作性和重现性,就是合理客观的技术方法。MIQE在该部分操作中的要求又分为两大块——样本描述和核酸提取方法。样本描述▶ 样本采集和处理的方法描述▶ 样本的来源描述(宏观解剖还是激光显微切割)▶ 样本是如何即时处理(保存条件及时间)▶ 冷冻样本的冷冻方法和时间核酸提取采取的提取方法:1)手工法:小批量经济型2)自动化仪器:大批量高效型按获取的物质可分为DNA和RNA:◆ DNA:适合拷贝数变异、SNP分析等实验◆ RNA:适合基因表达、长非编码RNA等实验图源:网络,侵删按提取方法分为化学法和机械破碎法:◆ 化学法:适合采用碱裂解法的样本,质粒提取、菌类的提取◆ 机械破碎法:比较坚硬有一定韧性的物质,动植物组织更推荐使用合适的商品化的核酸提取试剂盒,流程标准化程度更高,质量更容易得到保证,这样在方法描述时可以更简单一些,直接引用试剂盒的生产厂家、货号和名称即可。DNA酶或RNA酶的处理细节:基因表达实验中,RNA模板如果存在DNA污染,会严重干扰最后的结果。因此提取RNA时要加入DNA酶将DNA消化掉,工作浓度、处理温度和时间要加以说明,同时也要加入RNase抑制剂提供保护。使用柱纯化试剂盒提取RNA时也可以在柱上进行DNA消化。同样的,提取DNA时也要将RNA消化掉,尽管残留RNA对DNA为模板的qPCR实验影响小得多。 Cielo™ 实时荧光定量PCR系统☑ 数据可靠性:连续1000次实验后,结果高度一致。☑ 应用灵活性:提供多种qPCR应用分析。☑ 流程智能化:中英文用户界面,触控操作,可多机联用。☑ 在线便捷性:主机可独立运行qPCR程序,数据可USB、Wi-Fi等网络传输。
  • 高质量核酸提取,用TA就对了!
    核酸提取和纯化,对检测结果的影响早在公元前2-3世纪,中国和印度就有了关于病毒所导致的疾病---天花的记录,直到19世纪末,病毒才开始逐渐被发现和鉴定。目前,对于新冠疫情的检测,使用体外诊断核酸检测方法仍是不可或缺的手段。 核酸是分子生物学的基础,而核酸提取是核酸检测,乃至于整个分子行业绕不过去的门槛,很多时候一份样本的核酸提取的好坏直接决定了检测结果的有效性。 核酸提取的主要步骤:01裂解细胞去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子,去除其他不需要的核酸分子,如提取DNA分子时,应去除RNA,反之亦然。 02沉淀核酸纯化核酸,去除盐类,有机剂等杂质,一般可以把核酸提取方式主要分为三类:溶液型抽提,柱式抽提,磁珠纯化法。 随着基因检测、个性化给药等普及,生物行业各个领域都追求高通量、高纯度的今天,磁珠法纯化提取核酸的优势更加明显 磁珠技术作为是运用较为广泛的核酸提取方式。磁珠法与PCR法联合使用,在高效提取核酸的同时,使气溶胶污染概率大大降低,能有效防止实验容易出现假阳性的问题。 说到磁珠法,那我们首先当然必须得了解磁珠,什么是磁珠呢?磁珠是利用一定的组织包被四氧化三铁核心而形成的可以被磁铁吸附的同时有能通过表面包被物吸附(结合)核酸的神奇的小珠子。 ▲ 磁珠法核酸提取原理示意图 磁珠法是通过裂解液裂解细胞组织样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内,通过反复快速搅拌、混匀液体,经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤,*得到纯净的核酸。核酸纯化的方法是影响所提取核酸质量的重要因素,只有高质量的核酸才能满足下游的各种应用。 如何获得更*的核酸提取结果?除了选择合适的提取方式,严谨的实验操作之外,无菌、高品质的实验室小耗材也值得精心挑选!SP Bel-Art为DNA/RNA浓缩纯化过程提供必要的工具,保证提取核酸的质量。 01研磨组织相关产品ProCulture微量均质器-手持式快速处理一对多样品的理想选择,配套的塑料研棒无DNase,RNase。 液氮冷却微型研钵和研杵套件通过在微型离心管中均匀化来保护样品质量,减少样品损耗和采集时间。 02核酸提取相关产品磁珠分离架可拆卸套管,更有效地传输液体;50ml和15/5ml型号的独立管套使液体的添加和去除更容易;不同规格可供选择:1.5ml至50ml型号的管套上的弹簧柱塞允许珠子沿管壁以不同高度分离;目前该款明星产品正在申请*。 Flowmi™ 细胞过滤器过滤原代培养物时尽量减少样品损失,使用方便防止污染。 ProCulture® 轨道振动平台把你的搅拌器变成轨道摇床。 ProCulture® 37°C恒温板在培养箱外保持理想的细胞温度。培养皿在培养箱外放置更长时间;保护细胞活力;减少细胞压力,使胰蛋白酶等酶有效地发挥作用。 ProCulture® -1°C冷冻控制器易于使用,可控制冷冻速度,大约每分钟-1°C;适用于1.0/1.8ml的试管,18位。 03核酸纯化相关产品PrepSafe微型离心管微型浮动架在工作台上工作,在水浴中漂浮;离心管被紧密地固定,确保不会弹出;将支架的支腿压在工作台上,可松开管子,便于拆卸;开放式支架使试管与水接触*,以便更好地控制样品的温度。 关于SP Bel-ArtSP Bel-Art隶属于SP Scientific集团,公司坐落于美国新泽西州,自1946年创立以来,开发,开创了实验室使用塑料设备的先河,生产制造的实验室设备和耗材广泛应用于制药、生命科学、生物技术、教育、食品、医疗保健和石化等行业,现有产品超过10,000种,为客户提供全面的选择,产品广泛销往美洲、欧洲、亚洲、非洲、澳洲等多个国家和地区。Bel-Art产品经过反复的实践检验,以高质量的标准为全球广大用户提供全方位的产品和技术服务。作为SP旗下的一个成员,Bel-Art致力于为客户提供更多创新性、更有价值的产品。SP Bel-Art主打产品细胞过滤器保存小体积样品,避免流式细胞仪堵塞安瓿瓶开瓶器杜绝试剂污染,安全方便开启安瓿瓶无菌取样工具FDA级别适用于生物制药行业,伽马射线灭菌,无需进行昂贵的清洁验证生物危害处理高压灭菌处理生物危害垃圾干燥器款式丰富,*化实验室空间磁力搅拌子种类繁多,适用于各种搅拌实验常用管架试管架、离心管架等温度计涵盖各种玻璃液体、电子和双金属温度计比重计波美计、密度比重计、酒精比重计等试剂瓶带GHS标签的安全洗瓶、试剂瓶等移液器和附件各种款式移液产品生命科学相关产品磁珠分离架、96孔PCR板、研磨器、克隆环等
  • 助力烟草提取效率:快速溶剂萃取-重量法测定烟草中石油醚提取物
    前言研究表明,石油醚提取物的含量与烟草的香气量有关,烟草石油醚提取物随成熟度增加而增加。随着人们对烟叶香气质量的关注程度的增加,一般把石油醚提取物含量的高低作为评价烟叶内在品质优劣的重要指标之一。用石油醚浸提烟草样品,可将烟草中的芳香油、树脂、色素、醛、蜡、脂肪酸等物质提取出来,通过烘干、称取质量,即得到烟草中石油醚提取物的质量分数。对于烟草中石油醚提取物的测定,传统的索式提取法耗时耗力,很难满足大量样品的检测需求,现使用莱伯泰科全自动高效快速溶剂萃取仪(Flex-HPSE)提取烟草中的石油醚提取物,MultiVap-10定量平行浓缩仪浓缩后用天平精准称重,从而测定烟草中石油醚提取物的含量,方法快速、高效、稳定。1、仪器设备1.1 Flex-HPSE全自动高效快速溶剂萃取仪(莱伯泰科公司);1.2 MultiVap-10定量平行浓缩仪(莱伯泰科公司);1.3 恒温干燥箱;1.4 干燥器:变色硅胶为干燥剂;1.5 分析天平:感量为0.001g。2、试剂石油醚,分析纯,沸程:30℃~60℃,重蒸。3、分析步骤3.1 式样的制备按YC/T31-1996制备试样。3.2 水分含量的测定按YC/T31-1996测定试样的水分的含量。3.3 石油醚提取物的提取3.3.1 准确称量接收瓶的重量。3.3.2 称取约2g试样置于萃取池中,将萃取池放入烘箱(80℃±1℃)中干燥2小时。取出后,立刻放入干燥器,冷却30分钟。3.3.3 将萃取罐放入Flex-HPSE萃取仪中,按照如下条件萃取(萃取液收集到50mL浓缩杯中):萃取压力:10.34Mpa;萃取温度:80 ℃;加热平衡时间:5 min;静态萃取时间:5 min;冲洗体积:20 %;氮吹时间:60 s;循环:1 次;溶剂:石油醚(30-60°)。3.3.4 萃取结束后,将50mL浓缩杯取出,放入MultiVap-10中60℃浓缩至近干。3.3.5 把50mL浓缩杯置于烘箱(80℃±1℃)中干燥2小时。取出后,立刻放入干燥器,冷却30分钟,准确称重。4、结果的表述4.1 计算方法样品的石油醚提取物总量以干燥样品的百分比表述,计算公式如下:式中:PE: 石油醚提取物总量;M1: 提取前浓缩杯质量,单位g;M2: 提取后浓缩杯质量,单位g;M0: 样品质量,单位g;W: 含水率,%。5、实验结果 6、讨论在本次实验中,使用Flex-HPSE全自动高效快速溶剂萃取仪和MultiVap-10定量平行浓缩仪对烟草中的待测物进行提取、浓缩,整个实验过程用时短、节省人力,并且在后续浓缩步骤中,无需转移样品提取液,减少了目标物损失并减少了实验的系统误差和时间,具有快速、高效、自动化程度高等优势。
  • 上海比朗最新研发 多频恒温超声波提取机功能升级
    上海比朗最新研发了新一代多频恒温超声波提取机,功能全新升级,可快速提取测定。  BILON品牌多频恒温超声波提取机是针对实验室小批量制备研究设计生产,具有体积小、重量轻、提取温度可控、使用方便等优点。针对超声用于小批量提取时存在的热效应影响过于明显,提取温度升温过高现象,BILON系列多频恒温超声波提取机成功解决了这一问题,实现了超声提取过程恒温化,从而杜绝了因提取温度升高对热敏性提取物活性的破坏,保证了提取品质。  本系列多频恒温超声波提取机可同时适用于挥发性或非挥发性提取介质,适用范围广,使用安全方便,性价比高,是实验室小批量制备及天然产物含量测定提取设备的极佳替代产品。  主要特征:1.BILON专用微电脑控制器,可储存50组工作数据。2.可选用聚能式超声也可选用分散式超声。3.一体化设计,全密封噪音小,使用方便。4.三频或多频段可选,便于对比提取效果。5.设有升降装置,方便调节提取杯的高度。6.专用锥形夹套不锈钢提取杯,可通入循环水对样品温度进行控制。技术参数:1.超声频率:20KHz,40KHz,59KHz(可选四频)2.单次处理量:100~1000ml3.超声波功率:900W4.温度控制范围:5~99℃5.超温报警装置:有6.温控方式:压缩机制冷,电加热7.提取杯:锥形夹套不锈钢提取杯8.内部照明:有9.紫外消毒:有10.适用介质:挥发性或非挥发性11.电源要求:220V 50HZ  标准配置  多频恒温超声波提取机BILON-S650CT 1台,锥形夹套不锈钢提取杯1个,升降装置1个,温度控制器1台。  详情以官网为主:http://www.bilon.cc/category-727-b0.html  上海比朗仪器制造有限公司是专业从事低温恒温、冷冻干燥、光催化、超声波等实验设备的研发、生产、销售于一体的公司。公司拥有专业的温控技术人员和先进的生产设备 完善的生产工艺 建立了一套完整的质量管理体系 保证产品质量。
  • 一文读懂磁珠法核酸提取仪
    核酸提取仪是一种应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸快速提取工作的仪器。核酸提取作为分子生物学的基本方法,能否快速提取出高质量的核酸是分子生物学实验中的关键。随着核酸提取仪在分子诊断、法医侦测、临床检查、科研实验等诸多方面的广泛应用,对核酸提取技术也提出了新的要求。01磁珠法有什么特别之处?磁珠法核酸自动提取仪是以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低pH值下吸附核酸,在低盐高pH值下与核酸分离的特性,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。根据移液特点的不同,磁珠法核酸自动提取仪可分为抽吸式(也叫移液式)和磁棒式两种类型。前者因提取时间较长,且机械臂移液的设计造成设备体积较大、成本较高等因素,无法在商业上迅速推广。目前市场上使用较多的大部分是基于磁棒式的磁珠法核酸提取仪,也是本文介绍的重点。02磁珠法核酸提取仪的原理是什么?03如何选择一款好用的核酸提取仪?操作简单、上手好用整个提取流程只有裂解-洗涤-洗脱三个步骤,中文交互式操作界面符合大多数人的使用习惯,无需专业培训技术人员,即可快速提取出样本核酸。高通量、快速便捷能够一次性实现对96个样本的快速处理,可在30~45 min内完成提取工作,确保传染性疾病爆发时进行快速及时的应对。安全环保、稳定无污染过程无需用到有毒的有机试剂,绿色安全,封闭式空间设计最大程度保证实验操作人员的安全,减少人工操作引起的误差和污染,实验结果稳定。成本低、平台开放价格成本符合不同地区的经济现状,耗材供货周期短,不依赖进口试剂,设备适配不同规格耗材和不同厂家提取试剂,兼容性高。迪澳生物专注于为用户提供全自动核酸提取解决方案,推出的Deaou-AP32和Deaou-AP96两大型号全自动核酸提取仪,可满足不同通量的核酸提取需求。
  • 天然提取物:现代化妆品的健康新趋势
    在当前消费者越来越注重产品成分天然健康的市场环境下,植物提取物因其独特的功效和相对较低的副作用风险,成为化妆品研发的重要方向。化妆品中的天然提取物以其绿色、自然和健康的特性,在现代化妆品行业中的应用日益广泛,据不完全统计,天然化妆品在整个化妆品中的比例已经达到40%。本文汇总了天然提取物在美白祛斑、防晒、抗衰老、保湿、乳化、防腐、透皮吸收促进、香料等8个方面的应用情况,供大家阅读参考。1、天然提取物-美白剂传统美白剂有稳定性不佳,刺激,功效显现缓慢等劣势。而天然来源的美白剂可结合多成分、多靶点与多功效的优势,同时还兼具温和、安全、持久的特点,已成为美白化妆品行业的一个趋势。常见的天然美白成分有金银花、茶多酚、石榴、花青素、珍珠等。化妆品常见天然美白提取物汇总2、天然提取物-抗衰剂以天然提取物为原料的抗衰老化妆品同样越来越多的被应用于化妆品中。根据衰老学说,天然提取物的抗衰机制主要有以下几点:①通过提取物中的抗氧化组分,减少皮肤的自由基损伤,来调节皮肤免疫和提高自我保护作用。②通过抑制MMP表达,或促进组织型抑制剂(TIMP)表达来维持真皮层的结构。此外,防晒组分可有效防止紫外线对皮肤的伤害。而由于天然物种中组分较为复杂,往往能够多靶点协同作用起到抗衰老的效果,因此备受市场欢迎。常见天然抗衰剂有番红花素、人参皂苷、姜黄提取物、丹参酮、牡丹花等。化妆品常见天然抗衰提取物汇总3、天然提取物-保湿剂天然提取物在保湿方面的机制一般为:1、天然多酚羟基与水以氢键形式结合,形成锁水膜。2、其中的神经酰胺成分可以修护皮肤屏障,从而提高锁水能力。3、抑制透明质酸酶活性,减少皮肤保湿剂-HA的降解。常见的天然保湿成分有白及成分、竹叶黄酮、甘草提取物、芦荟有机酸、百合提取物等。化妆品常见天然保湿提取物汇总4、天然提取物-防晒剂目前市面上的防晒产品多为物理紫外屏蔽剂、化学紫外吸收剂,这两种类型的防晒剂均会给皮肤造成不同程度的负担,同时对水体生态环境也是造成了不小的压力。天然来源的防晒剂则具有广谱防晒、副作用小等特点。我国目前已将芦荟、黄岑、甘草、桂皮、沙棘等用于防晒产品中。化妆品常见天然防晒剂汇总5、天然提取物-毛发用剂发用化妆品中添加一些中药提取物已经比较常见,主要是可以使头发柔软、促进头发生长等。如何首乌、五味子、黑芝麻、人参、侧柏叶等都具有不错的养发护发的功效。此外,有一部分的收涩药含有的有机酸和鞣质能与美发剂中的铁、铜结合,用于染发剂的制备。化妆品常见天然护发剂汇总6、天然提取物-防腐剂化妆品中常用的防腐剂有尼泊金酯类、咪唑烷基脲、苯甲酸及其衍生物、醇类及其衍生物类等。安全的天然防腐剂一直成为化妆品研究的热点。常用的天然防腐剂有芦荟、益母草、黄岑、月见草、金缕梅等。化妆品常见天然防腐剂汇总7、天然提取物-香精天然香料是指以自然界存在的动植物的芳香部位为原料提取加工而成的原态香材天然香料。动物香料常用的有香、龙涎香、灵猫香、海狸香和香鼠香等,一般作定香剂使用,价格比较昂贵。植物性香料由植物的花、果、叶、茎、根、皮或者树木的木质茎、叶、树根和树皮中提取的易挥发芳香组分的混合物。常见的天然香精有玫瑰、薰衣草、苦橙叶、迷迭香、茉莉等。化妆品常见天然香精汇总8、天然提取物-其他功能① 乳化乳化剂是化妆品的重要辅助原料,具有乳化作用的天然提取物一般含有皂苷、树胶、蛋白质、胆固卵磷脂、明胶等。② 头皮吸收促进剂如月桂氮卓酮之类的化学合成促进剂,毒性大,长时间会对皮肤造成伤害。对比之下,天然的促进剂如薄荷油、桉油、丁香油、蛇床子油、当归挥发油、川芎挥发油等则有促渗作用强,不良反应小等特点。9、品牌天然提取物及功效举例
  • 新品上市 | “提取&均质类”前处理产品新物种
    样品前处理一直是小伙伴们在分析检测中耗时最多,误差来源较大的过程,比如在样品提取或者均质的处理过程中,小伙伴们需要考虑如何提高提取率和提取稳定性,减少样品基质影响和交叉污染,提取时间尽量短,人工操作少,整体处理效率高等等方面。结合大量用户对于提取均质类仪器的使用调研结果,月旭科技研发团队设计了一款高通量的提取均质仪——Watbule E9,平均提取时间2~3分钟,可进行9个样品的同时提取工作,大大提高了提取和均质的效率。Watbule E9 提取均质仪Watbule E9可用于食品、药品、饲料、土壤等等行业中实验室样品的提取和均质处理,适用于绝大部分样品,比如中药、生物制品、谷物、饲料、食用油、肉类、蔬菜、水果、蛋类、水产品、土壤等。Watbule E9利用刀片高速旋转,使样品杯中的待测样品与提取液高速混匀,快速提取出样品中的待测物,用于后续检测。可同时处理最多9个20-150mL样品,容量大,效率高 批间、批内差异小 操作简单,可部分均质及全部均质;均质时间、延时时间可在1-15分钟任意选择,均质次数1-15之间任意选取 提取速度快,提取效率高,回收率高且稳定。
  • 会议通知:中草药提取关键技术会议将召开
    关于举办“第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用”研讨会的通知   各有关单位:   中华中医药学会定于2009年9月25-27日在福建省厦门市举办“第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用” 研讨会,届时将邀请各大院校和行业专家就中草药提取关键技术的最新进展、研究重点及热点问题做精彩演讲,欢迎从事中草药生物技术研发、生产和应用的科研人员、医务人员和相关企业踊跃参会投稿。现将有关事项通知如下:   一、会议内容:   1、中草药提取关键技术在中药研究中的应用   2、中药材的质量控制与评价技术体系研究   3、中草药提取关键技术与化学成分研究的相关性   4、中草药的药效评价及质量标准研究   5、超临界流体色谱技术在中草药和天然产物领域的应用   6、中草药提取新技术的开发与应用   7、药用植物的生物学研究   8、国内外中草药提取物的市场分析研究   9、植物提取工艺及设备的国际发展现状研究及趋势   10、中药提取分离工艺在中药新药研发中的应用   11、微波技术在中草药提取中的应用   12、中草药提取分离高新技术在现代中药提取中的联合运用   13、中药药效物质基础及作用机理的研究   14、中草药提取在各领域中的有效应用及成功案例(项目)   二、会议时间、地点:   时 间:2009年9月25日-27日(25日全天报到)   地 点:福建省*厦门市   三、会务费用:   会务费:1160元/人(含会务费、论文集、通讯录),食宿会务组统一安排,费用自理。   四、论文征集:   1.本次会议会前将印刷会刊(论文集)作为会议资料,统一为word文档(A4纸),并将论文全文发至zyyfz2008@126.com信箱。   2.要求论文观点明确、论证充分、文字简练、符合医学论文写作格式,具有先进性、科学新、实用性。文章简明扼要、语言通顺、层次清晰、文字规范、标点计量准确。综述一般不超过4000字,研究生论文一般不超过3000字,另附500字左右摘要。   3. 请作者确保论文内容的真实性和客观性,文责自负。无意参会,请不要邮寄论文。   4. 为扩大交流会学术成果影响,拟将论文集向有关论文收藏机构和检索机构推荐。凡向会议投稿未作特殊声明者,视为已同意授权推荐。   5.截稿日期: 2009年9月15日。   五、联系方式:   (一)第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用研讨会会务组   电 话:010-51118178   传 真:010-51118178   联系 人:李 冰   电子邮箱:zyyfz2008@126.com   (二)中华中医药学会   联 系 人:赵婷婷 王琳琳   电话/传真:010- 64 202516 64215576   电子邮箱:fztcm@126.com   附件:第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用研讨会(2).doc   中华中医药学会   2009年5月25日
  • 国内首个《核酸提取仪》行业标准出台!
    随着自动化仪器设备在临床检测中的推广普及,众多的机构都在进行自动化样本处理设备的研发和应用。目前国内外对于核酸提取仪产品的研究日益广泛,目前市场上已经有诸如高通量自动化样本制备系统、自动化分杯处理系统、自动化核酸提取仪等一系列的自动化样本处理设备,核酸提取仪的应用场景也越来越多。但一直缺乏尚无相关应的国家标准或行业标准对核酸提取仪的要求、试验方法等进行规范,导致对核酸提取仪的质量和安全风险等不易缺乏把控。全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会组织专家起草了核酸提取仪行业标准,各相关单位对标准中涉及的各项指标进行全面的验证,经过反复斟酌考量设定了该标准的具体评价指标,YY/T 1908-2023 《核酸提取仪》于2023年9月7日发布,2024年9月15日实施。YY/T 1908-2023 《核酸提取仪》规定了核酸提取仪的要求、试验方法、标签、标识和使用说明、包装、运输和贮存,适用于对临床样本中核酸的提取、纯化等自动化前处理相关仪器。该文件作为核酸提取仪的行业标准,提供了统一要求。对于提高核酸提取仪产品的质量和安全、提升医学实验室质量管理水平、促进国际贸易大有益处,同时,也为政府部门监管核酸提取仪厂商的产品提供了参考依据,有效地提高了政府监管的有效性。
  • 推荐旋转蒸发仪在天然产物提取分离中的应用
    一、背景介绍  随着科学技术的不断进步,天然产物的提取与分离技术在医药、化妆品、食品等领域的应用越来越广泛。旋转蒸发仪作为一种高效的蒸发浓缩设备,被广泛应用于天然产物的提取与分离过程中。本案例将介绍旋转蒸发仪在某种天然植物精油提取过程中的应用。  二、实验材料与方法  1.材料:某种具有药用价值的天然植物。  2.设备:旋转蒸发仪、圆底烧瓶、冷凝器、真空泵等。  3.方法:   将天然植物进行粉碎,用有机溶剂浸泡提取。   过滤得到提取液,将提取液置于圆底烧瓶中。   将圆底烧瓶安装在旋转蒸发仪上,连接冷凝器和真空泵。   设定旋转蒸发仪的旋转速度、加热温度和真空度。   启动旋转蒸发仪,进行蒸发浓缩。  三、实验过程与结果  1.在实验过程中,我们观察到旋转蒸发仪的旋转功能使得提取液在烧瓶内形成薄膜,增大了蒸发面积,从而提高了蒸发效率。  2.通过加热和真空泵的作用,溶剂快速蒸发,提取液逐渐浓缩。  3.经过一定时间的蒸发浓缩,我们得到了富含天然植物精油的浓缩物。  4.对浓缩物进行进一步分离纯化,最终得到高品质的天然植物精油。  四、讨论与分析  1.旋转蒸发仪在天然产物提取分离过程中具有优势,其旋转功能增大了蒸发面积,提高了蒸发效率,从而缩短了实验周期。  2.通过真空泵创造负压环境,降低了溶剂的沸点,进一步提高了蒸发速度,同时避免了高温对天然产物活性的影响。  3.旋转蒸发仪操作简便,可实现自动化控制,降低了实验人员的劳动强度。  五、结论  本案例通过旋转蒸发仪在某种天然植物精油提取过程中的应用,展示了旋转蒸发仪在天然产物提取分离领域。旋转蒸发仪以其高效、快速、简便的特点,为天然产物的提取与分离提供了一种有力的技术手段,有望在医药、化妆品、食品等领域发挥大的作用。  通过本次实验,我们深刻认识到旋转蒸发仪在天然产物提取分离中的重要性,未来我们将进一步探索旋转蒸发仪在其他类型天然产物提取分离过程中的应用,以期为其在相关领域的应用提供更多有价值的实践经验。
  • 荧光定量PCR之RNA提取及质量评估
    分子生物学研究对提取RNA要求较高,纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法:常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法(Trizol法)、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强,尤其适合小样本及特别难提取的组织,如皮肤,动物结缔组织等总RNA的提取;另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂,还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法,电泳条带较为均一,但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合,在磁场作用下,磁珠-核酸复合物与液体分离,再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解,保证RNA质量?如何避免RNA降解?1.避免RNA酶的产生:A 、避免内源性RNAase:内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时,内源性RNA酶释放,降解RNA,降解速度与酶含量和温度有关,所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法:①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存;②立即切成小块投入液氮中保存;③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase:使用无RNase的塑料制品和枪头,玻璃器皿要消毒避免交叉污染,注意:戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率:A 、组织RNA提取:选用新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好;如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,待组织解冻后,用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,进行匀浆处理。注意:速度不要太快,要有间隙,否则由于摩擦产热,RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取,也要这样做,更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取:贴壁细胞,需要先用胰酶消化后,然后收集到离心管中,离心,去上清然后用PBS多洗2-3次,以去除多余的胰酶。悬浮细胞,直接用吸管或者加样枪吹打,以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清,不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测:RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度:OD260/280的值在1.9-2.1之间,认为RNA纯度较好;OD260/280的值小于1.8时,表明蛋白质杂质较多;OD260/280的值大于2.2时,表明RNA已经降解;注意:如果用TE溶液洗脱RNA,会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测:1)通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带,28s条带宽度为18s条带的两倍;2)通过色谱方法检测,RIN值:28s/18s为1.8-2.0,表明RNA完整性较好,基本无降解发生。RNA电泳带型的特征:☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍,其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现,出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失,没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染,而且是很大量的 DNA污染。参考文献:[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统
  • 全自动COVID-19 RNA 提取
    VERSA 10结合HALO™ Mag核酸提取试剂盒进行的自动化COVID-19 RNA提取在COVID-19疫情期间,Aurora迅速扩大VERSA Gene自动液体处理工作站的生产能力,帮助实验室扩大其COVID-19检测能力。VERSA 10 NAP是一个紧凑的台式核酸提取工作站,在大流行期间受到许多实验室的信任。白俄罗斯明斯克共和国科学与实践体育中心自2019年以来一直在使用VERSA 10 NAP工作站,该系统被编程为自动化HALO™ Mag核酸提取试剂盒用于COVID-19病毒RNA的分离。VERSA 10 NAP被认为是一种高效的机器,它可以帮助Minsk的实验室技术人员从患者样本中提取纯净和高质量的病毒RNA,同时让实验室人员远离潜在的病毒接触。此外,该仪器将手动错误和交叉污染的风险降至zui低。Validation验证HALOTMMag 100核酸提取试剂盒用于纯化病毒RNA,包括SARS CoV-2,其设计与手动和自动实验室工作流程兼容。为了验证VERSA 10上HALOTM Mag 100核酸提取试剂盒的自动化程度,从48个可能感染SARS-Cov2的患者样本中分离出病毒RNA。从48例患者样本中分离出病毒RNA,然后使用基于qPCR的COVID-19检测试剂盒进行分析。对48个提取的样本进行反应1的qPCR测试结果导致7个阳性患者样本的鉴定。图中显示了(a)内部对照的扩增曲线,(b)ORF 1ab基因的扩增曲线,(c)N基因的扩增曲线。结合HALOTMMag 100核酸提取试剂盒的强大功能的Aurora Biomed VERSA 10自动液体处理平台的精确性,为从患者样本中分离出纯净、高质量的病毒RNA以进行下游分析提供了一个紧凑的解决方案。扩增曲线获取更多VERSA 10 RNA 提取工作站的信息:欢迎联系Aurora
  • 沃特世推出新型正压固相提取装置
    沃特世推出新型正压固相提取装置,简化了样品前处理过程,突破了药物开发过程的瓶颈 盐湖城, 犹他州 - 2010年5月24日 沃特世公司(WAT:NYSE)今天推出了一款新产品,它可帮助您进行新药开发的科学工作者提高样品提取效率。新型的沃特世正压96孔固相提取装置设计用于进行生物样本的平行固相提取(SPE)操作,专门配合沃特世96-孔Oasis® 微提取板(μElution plate)或常规96-孔板使用。此产品利用正压进行固相提取各步骤的操作,保证了孔与孔之间流速一致且均匀,因此待分析物的回收率重现性好,即使是黏度高的样品。自6月7日起,用户既可以在全球范围内购买该产品。 传统的固相提取(SPE)操作是利用真空装置,对96孔板施加一定的真空度进行,由于96孔板下面的空间是负压,样品会从每个孔中被抽下来。然而,当某个孔发生堵塞,或者由于样品黏度不同造成一个或多个孔流速不均匀时会使得整块板的真空度突然下降而产生问题:黏度低的样品从某些孔内流干后,整体真空度将下降,造成板上黏度大的样品孔流速减慢。这样会造成待分析物的SPE回收率重现性差,并影响分析验证的结果,造成效率下降以及时间和金钱的浪费。 沃特世正压96孔固相提取装置以包含96个孔的排气歧管衬垫为特色:96孔板上的每个孔各自独立操作。利用惰性气体,它将一高达80psi的"动"力施加于每个孔,促使样品中的分析组分通过孔内的填料后进入收集板,以便进行后续分析。无论每个柱子中的样品黏度如何,沃特世正压96孔固相提取装置使用正好合适的压力,使最难处理的样品都能通过每个孔,从而使SPE提取物更加均匀并提高了分析物SPE回收率的重现性。使用沃特世正压96孔固相提取装置时,高黏度或高脂生物样本将可非常容易且均匀地通过96-孔板的每个孔。 有关沃特世正压96孔固相提取装置更多详情,请登录: http://www.waters.com/waters/nav.htm?cid=10161512 如需下载产品说明书,请登录: http://www.waters.com/webassets/cms/library/docs/720003453en.pdf 关于沃特世公司(www.waters.com) 50年来,沃特世公司(NYSE:WAT)通过提供实用且可持续的创新,实现了全球医疗保健、环境管控、食品安全、水质监测等领域的显著进步,为基于实验室的许多机构创造了商业价值。 沃特世的技术突破和实验室解决方案开创了分离科学、实验室信息管理、质谱技术和热分析的相互组合,为客户提供了一个持久成功的平台。 沃特世公司2009年的总收入达15亿美元拥有5,200名员工;公司正在帮助全球客户推进科研进程,并为其提供绝佳的操作体验 ### Waters and Synapt是沃特世公司的商标
  • 达微发布NEX100核酸提取仪新品
    p style=" text-align:center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/pic/48eb2896-adf1-4e83-adae-01b6cce1c50f.jpg!w400x400.jpg" alt=" 达微NEX100核酸提取仪" / /p h1 style=" margin: 0px 0px 20px padding: 0px 4px 0px 0px text-align: center font-size: 32px font-weight: bold border-bottom-color: rgb(204, 204, 204) border-bottom-width: 2px border-bottom-style: solid " label=" 标题居中" NEX100核酸提取仪 /h1 p style=" line-height: 1.5em " & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 本设备采用磁珠提取纯化核酸的方式,具有主动升降温功能,可同时提取1—32个样本,真正实现了核酸的快速化、自动化及高通量提取纯化。搭配不同种类的核酸提取试剂盒,可从血 液、血浆、唾页、口腔拭子、病毒、动植物组织、 细菌、微生物等生物样本中提取纯化核酸。 /p p style=" line-height: 1.5em " img title=" 4.png" style=" max-height: 100% max-width: 100% " alt=" 4.png" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/955b3658-2984-4a86-8c12-676f3143acb3.jpg" / /p p 创新点: /p p 该仪器采用了全充磁的磁棒技术,对磁珠的吸引力更强,磁珠的回收率更高,核酸提取率更高;独立加热系统,使核酸的杂质洗涤更完全,核酸纯度更高;五档智能混匀模式,可以根据提取样本量的多少自动匹配档位,从而保证核酸的完整性。 /p p a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C415955.htm" style=" font-size:22px text-decoration: underline " target=" _blank" strong 达微NEX100核酸提取仪 /strong /a /p
  • 2020年中国核酸提取仪市场研究报告出炉!
    2020年Q1-Q4,作为新冠病毒核酸检测主要设备的核酸提取仪环比都以翻倍数量持续快速增长,在中央2020年底前所有二级综合医院具备核酸检测能力的硬性要求下,第四季度销量更达到4055台/套,全年核酸提取仪总计采购7011台/套。参与者众 国产品牌占绝对优势2020年全年中标数据中出现国内外品牌近70个,其中国产品牌占比78%,国外品牌仅占22%。仅一家国外品牌险进TOP10,国内品牌在核酸提取仪市场中市场占有率达94.4%,占据绝对优势。国外品牌仅在疾控中心和市级医院市场中占有小幅市场份额。TOP10领衔 多强并存 2020年核酸提取仪各品牌市场占有率采购的前五家核酸提取仪占市场六成,品牌间市场占有率差距不大,难以形成垄断格局,呈现以TOP10领衔的多强并存格局。接下来,市场机会在哪里?各品牌市场份额如何?竞争对手在不同省份、机构里表现如何?各地区采购情况如何?哪些省市、机构采购需求旺盛?采购机构怎样分布?2021年市场机会主要在哪里?… … … … 仪器信息网(www.instrument.com.cn) 基于自身平台优势,对2020年国内公开采购数据进行分析,撰写了《中国中国核酸提取仪市场研究报告(2021版)》,旨在为相关从业者进行市场分析和业务决策提供参考。本报告包含核酸提取仪市场相关最新政策追踪、市场概况、采购机构画像、竞争情况、2021市场研判等内容。》》》欲购买完整报告,请联系李先生(17600374905,微信同号)表1 中央财政支持应急物资保障体系建设补助资金分省预算指标图1 2020年核酸提取仪分季度市场变化图2 2020年Q1~Q4分省采购量图3 各类机构核酸提取仪总市场量对比图4 主要机构Q1~Q4采购量变化图5 区县级医院采购量与机构数量比图6 各品牌进入省份数量图7 国内品牌与国外品牌在不同机构市场份额图8 2020年核酸提取仪各品牌市场占有率图9 2020年Top10品牌在不同机构市场份额图10 2020年Top10品牌分别在核心市场的结构组成图11 2020年Top10品牌在各省销量比较
  • 碱溶液提取-火焰法测定土壤中的六价铬
    土壤中铬通常以三价铬和六价铬的形式存在,六价铬有剧毒,是一种被公认的致癌物。因此,掌握土壤中的六价铬污染状况势在必行。为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国土壤污染防治法》,规范土壤和沉积物中六价铬的测定方法,中华人民共和国生态环境部于19年12月发布了HJ 1082-2019.土壤和沉积物六价铬的测定碱溶液提取-火焰原子吸收分光光度法。 本文参考HJ 1082-2019.的方法,使用日立原子吸收分光光度计ZA3000,测定土壤中的六价铬。土壤的碱溶液提取法碱性提取液 :分别称取30 g碳酸钠和20 g氢氧化钠,溶解于纯水中,并定容至1 L。(pH>11.5)磷酸氢二钾?磷酸二氢钾缓冲液 : 分别称取87.1 g磷酸氢二钾和68.0 g磷酸二氢钾,溶解于纯水中,并定容至1 L。■ 操作步骤 通过碱溶液提取法,可以仅提取土壤中的六价铬。土壤碱提取液中的六价铬分析(火焰法)通过碱溶液提取法提取5.00 g样品,定容至100mL,测定出的检出限为0.5mg/kg。使用高盐燃烧头。■测定条件 ■测定结果 对土壤1和土壤2样品进行了测定,测得土壤1中含六价铬的量微1.80±0.04,土壤2并未检测到六价铬。分别对两个样品进行1mg/LCr加标实验,土壤1和土壤2回收率分别为99%和101%,证明实验结果准确可靠。 综上所述,日立原子吸收分光光度计ZA3000采用偏振塞曼校正法,即使对含盐分高的土壤分解液样品,也可以不受共存物质的背景吸收干扰,高精度分析土壤中的六价铬。
  • 病毒核酸提取试剂盒—给您更好的实验结果
    病毒DNA&RNA共提取试剂盒是新芝生物为配合NP-2032全自动核酸提取仪实现更好的纯化效果而推出的试剂产品。这款试剂盒配套全自动核酸提取仪,可以实现高度自动化,在保证实验结果的前提下,减轻实验人员操作负担,有效保障实验人员操作安全并提高样品处理效率。试剂 产品备案号:浙杭械备20200879号生产备案号:浙杭食药监械生产备20200114号 仪器 产品备案号:浙甬械备20200139号生产备案号:浙宁食药监械生产备20150052号 特点一 适用样本范围广 特点二:DNA和RNA病毒核酸通用型试剂盒,无需另外采购 特点三:操作便捷样本直接上样,调用内置程序,直接运行即可获得高质量核酸溶液 特点四:核酸高质量,实验结果优异2019-nCOV参考品经不同品牌试剂盒提取纯化后,产物扩增结果 特点五:结果稳定且重复性好HBV参考品(200 IU/ml)经NP-2032提取后的产物扩增曲线,重复提取32个样本,检测率32/32 详询各地办事处。更多新品即将发布,尽情期待! ▼End
  • 核酸提取纯化和浓缩方法应该选_____
    自20世纪诞生以来,分子生物学迅速发展并在整个生命科学领域广泛渗透和应用,推动了传统医学进入基于分子层面实验科学的现代生物医学时代。核酸提取和纯化是分子生物学试验的基础,在以下应用实验中都需要进行核酸提取: ● 分析基础研究和疾病研究中的基因表达;● 跟踪对药物治疗的反应(例如,在抗病毒治疗期间和之后监测病毒滴度);● 识别新物种并深入了解进化过程 (例如,Ancient DNA分析);● 对人类、动物和植物中引起传染病暴发的病原体进行监测和分类;● 通过微生物检测和量化监测食品和水安全;● 诊断疾病 (如基因疾病,癌症,免疫学缺陷)。核酸提取纯化基本步骤 核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素之一,也是下游分子生物学试验成败的关键,遵循提取纯化原则以及选择合适的纯化、浓缩方法,可以使核酸的质量及回收率达到最大化。 核酸提取纯化原则和要求 ● 需要保证核酸一级结构的完整性,为下游实验做准备;● 排除其它核酸分子的污染(提取DNA时排除RNA的干扰,反之亦然);● 核酸样品中没有对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子;● 将核酸样品中其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染降到最低程度。 核酸提取纯化的常见方法溶液抽提法经典的DNA提取方法:酚氯仿抽法,主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。通过苯酚氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解的是以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是多糖和脂类物质,蛋白质则沉淀于两相之间。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含核酸的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀核酸,之后再离心分离和溶解洗脱,最后通过将洗涤后的核酸沉淀进行浓缩干燥即可得到高纯度核酸。 离心柱法(柱膜法)通过特殊硅基质吸附材料,能够特定吸附DNA,而RNA和蛋白质顺利通过。硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性,其水化后带负电。当溶液中存在一定浓度的阳离子后,形成的阳离子桥能够中和DNA和硅醇基团之间的表面负电荷,从而使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面。反之,处于低盐水溶液状态下时,由于硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间的静电排斥,硅胶膜释放DNA。 利用高盐低PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。离心柱纯化也是试剂盒提取中广泛的使用方法。磁珠法运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。磁珠法利用了磁性颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,先使用细胞裂解液裂解细胞,带有活性基团的磁性颗粒可特异性吸附从细胞中游离出来的核酸分子,而样品中的其他干扰物则很好的移除了,在磁场作用下,磁性颗粒与液体分开完成,最后回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱,纯化浓缩后即可得到纯净的DNA,获得质量较高的核酸模板。 提取纯化方法的选择一般地,分离纯化步骤越多,核酸的纯度也越高,但得率会逐渐下降,完整性也愈难以保证。相反,通过分离纯化步骤少的实验方案,我们可以得到比较多的完整性较好的核酸分子,但纯度不一定很高。这需要结合核酸的用途而加以选择。如果对核酸提取的质量要求不高,可以选择经济实惠的溶液法,选择柱膜法还是磁珠法自动化提取,基本上取决于样本数量,针对大批量的样本,优选磁珠法自动化提取。如果对样本数量较少,则可以选择柱膜法,既快速又经济实用。对于Oligo寡核苷酸的纯化,实验要求更高。(可参考往期推文) 不管采用哪一种核酸提取纯化方法最后都离不开浓缩干燥! ● 再浓缩核酸样品,随着核酸提取试剂的逐步加入,以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失,样品中核酸的浓度会逐渐下降,甚至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时,需要对核酸进行浓缩,可将150uL DNA水溶液浓缩至10uL再进行测序;● 去除DNA样品中醇的残留,当DNA样品中有乙醇的残留会影响测序反应;● 干燥DNA样品。DNA沉淀后可能会含水或水/乙醇混合液,浓缩去除后可以得到干燥的DNA样品。常用的干燥方法:风干VS真空离心浓缩仪应用案例分享WTCHG(牛津大学人类遗传学威康信托中心) 使用Sequenom MassARRAY® SNP 基因分型系统用于SNP分析,样品前制备过程分别使用风干(左)和Genevac EZ-2真空离心浓缩仪(右)干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。下图结果表明,使用EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品,可以大大降低样品降解率,保证样品不会被污染,消除了样品损坏的潜在来源。深绿色-高样本数据质量浅绿色-中等样本数据质量红色-样品质量差或无数据使用真空离心浓缩仪,可以避免核酸浓缩干燥遇到的过度加热、绝对干燥、交叉污染及紫外损害保证核酸样品的完整性。Genevac真空离心浓缩仪浓缩干燥DNA样本,Genevac真空离心浓缩仪是合适的选择,Genevac系统广泛应用于DNA样品制备与纯化处理,不论是处理PCR前的简单的小体积浓度DNA pellets,还是高通量处理许多纯化DNA或寡核苷酸的样品,都有不同的机型可供选择。如果你对上述产品或方案感兴趣,欢迎随时联系德祥科技,可拨打热线400-006-9696。 Genevac英国Genevac是德祥集团资深合作伙伴之一。英国Genevac公司成立于1990年,隶属SP Scientific旗下,一直专注于研究和生产各种离心蒸发浓缩设备,其产品广泛应用于生命科学、制药、化学、分析等领域。德祥科技德祥科技有限公司成立于1992年,总部位于中国香港特别行政区,分别在越南、广州、上海、北京设立分公司。主要服务于大中华区和亚太地区——在亚太地区有27个办事处和销售网点,5个维修中心和2个样机实验室。30多年来,德祥一直深耕于科学仪器行业,主营产品有实验室分析仪器、工业检测仪器及过程控制设备,致力于为新老客户提供更完善的解决方案。公司业务包含仪器代理,维修售后,实验室咨询与规划,CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研发、生产、销售、售后。与高校、科研院所、政府机构、检验机构及知名企业保持密切合作,服务客户覆盖制药、医疗、商业实验室、工业、环保、石化、食品饮料和电子等各个行业及领域。2009至2021年间,德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度最佳代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念,致力于成为优秀的科学仪器供应商,为此我们从未停止前进的脚步。我们始终相信,每一天都在使这个世界变得更美好!
  • 看完这篇,检测机构的高效核酸提取你也会!
    核酸在这几年似乎变成了热点词汇,随着疫情相关信息的传播,许多先前不为大众所知的诊断行业专业名词逐渐变得家喻户晓,如核酸检测、试剂盒、咽拭子、假阴性等等。但实际上,核酸并不是疫情下产生的新名词。 图1:大众认知的核酸检测 核酸提取通常是开启生物学研究的首步,而且提取的核酸质量高低也是决定下游实验成败的关键因素之一。无论后续的检测、克隆、PCR、QPCR、建库测序等等都需要核酸才能顺利进行。今天我们就来简单了解核酸提取的基本原理和方法。 1、核酸提取法种类有哪些?现在常用的核酸提取法为离心柱纯法和磁珠法等,但离心柱纯化法效率低,步骤繁琐。而由于检测机构每天需要处理大量样本,大都是采用自动化核酸提取仪配套磁珠法核酸提取试剂盒的方式进行核酸提取步骤。 2、更效率的核酸检测法——磁珠法磁珠法——通过裂解液裂解细胞组织样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内,通过反复快速搅拌、混匀液体,经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤,*得到纯净的核酸。 图2:磁珠法步骤 核酸纯化的方法是影响所提取核酸质量的重要因素,只有高质量的核酸才能满足下游的各种应用。 3、磁珠法的有利工具——磁珠分离架Bel-Art 磁珠分离架具备更卓越的质量对于所有磁分离实验,强大的分离架可以固定磁珠,以便亲和配体(抗体,链霉亲和素或核酸偶联专用试剂)或在分析中添加或倾倒冲洗溶液。 图3:磁珠分离架 Bel-Art 磁珠分离架具备可拆卸套筒,可提高液体传输效率!与竞争品牌相比,它们提供了更加卓越的质量和价值。 4、磁珠分离架 型号与特点 1、 50ml和15/5ml型号的独立套筒使液体添加和移除更容易,液体意外损失更少; 2、 强大的磁铁可快速固定磁珠; 3、 50ml和15/5ml这两种型号的套筒上有弹簧柱塞允许磁珠在管壁的不同高度被收集; 4、 只需转动管即可实现高效的珠粒混合; 5、 96孔PCR板型号有24个磁铁,在管壁上吸住磁珠的同时紧紧地固定PCR板; 6、 标准尺寸平板型号全部覆盖上了磁铁,以接受所有标准尺寸的微板,不管它有多少孔;比如6孔,12孔,24孔,48孔,96孔的平板等; 7、 磁力架适合符合ANSI标准*的微孔板; 8、 透明的亚克力材质便于观察试管的内容物。 *ANSI标准:ANSI SLAS 4-2004(R2012)5、磁珠分离架使用注意事项1、该产品具有强大的磁性,使用时不要接近电子器材或者信用卡等磁记录物品; 2、 清洁时避免使用酒精等溶剂,以防止亚克力塑料开裂。
  • 如何更加安全可靠的提取新型冠状病毒核酸?
    2019年12月以来,湖北省武汉市陆续发现多例新型冠状病毒感染的肺炎患者,根据国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行版第五版)》,实验室检查在鼻咽拭子、痰液、下呼吸道分泌物、血液等标本种可检测出病毒核酸,确诊依据之一为呼吸道标本或血液标本实时荧光定量RT-PVR检测SARS-CoV-2核酸阳性,检测流程如下: 由于新冠病毒传染性极强,因此在核酸检测过程中安全性问题尤为重要,已有报道检验人员疑因实验过程中气溶胶感染SARS-CoV-2,海尔生物医疗提供可完全在生物安全柜内使用的核酸提取仪,最大程度保护环境及医技人员,比手工试剂盒更快更便捷。 目前核酸检测一度受到质疑,怀疑其有假阴性出现,假阴性的出现与病毒拷贝数有直接关系,对于同一份样本来说,与试剂及仪器的灵敏度准确度有极大关系,从核酸提取环节来说,就要求可以从样本中提取微量的优质RNA,海尔生物医疗提供得率高、纯度高的低压加压膜法自动核酸提取仪,快速简单易上手。l 仪器设备及试剂盒搭配方案:类型自动化方案手工辅助型方案产品名称QuickGene-AutoS RNA Tissue Kit QuickGene RNA tissue kit S II 型号AS-RTRT-S2规格48prep96prep方法学膜法膜法配套仪器QuickGene-Auto12S/24sQuickGene-Mini80/Mini480仪器性能无需离心,减少气溶胶,样本空气暴漏时间短,膜法提取快速质优无需离心,减少气溶胶,可放安全柜内,更安全,比普通手工试剂盒更快速便捷另有更多32、96通量核酸提取方案、荧光定量(四通道以上)PCR检测方案,以及SARS-CoV-2感染样本运、检、存、生物安全的全场景方案。
  • 紧急驰援阿荣旗—新芝生物核酸提取仪
    10天!紧急建成新冠检测PCR实验室 2020年以来,新型冠状病毒疫情持续发酵,在党和政府的领导以及全国人民的支持努力下,国内疫情基本得到控制,但国际疫情形势依旧复杂严重。目前国内疫情防控的重点由症状检测逐渐过渡到全面排查,任务重,时间紧,全国各地疾控中心和各级医院正加紧建设具备检测条件的PCR实验室。 4月19日,为了尽早独立开展核酸检测工作,内蒙古自治区呼伦贝尔市阿荣旗疾控中心计划用10天时间,紧急筹建新冠病毒核酸检测实验室,包括实验室主体结构和仪器设备、检测人员都要求及时到位,截止4月29日,阿荣旗疾控中心PCR实验室已建设完成。5天!新芝生物全自动核酸提取仪紧急排产 作为疫情防控中必不可少的仪器设备,新芝生物研发生产的NP-2032全自动核酸提取仪面临“一机难求”的现状,在接到阿荣旗疾控中心的订单需求后,公司紧急调拨资源,安排杭州研究院工程师及生产工人连夜加班排产,并组织各项性能指标的严格测试,确保发往阿荣旗的全自动核酸提取仪能圆满完成检测任务。8小时!2578公里,准时送达 为确保全自动核酸提取仪能在规定时间内送达阿荣旗疾控中心,公司紧急联系杭州市萧山国际机场及浙江长龙航空有限公司,由公司产品经理及工程师一同从杭州紧急发往客户所在地。飞机降落内蒙古乌兰浩特机场后,再驱车300多公里,将仪器于27日晚间提前送达。3天!紧急现场培训和指导 本次PCR实验室建设时间紧,难度高,为使得实验人员能尽快学习操作全自动核酸提取仪,公司产品经理及工程师进行现场指导和培训。4月29日,全部实验人员均能熟练掌握仪器使用技巧。阿荣旗疾控中心特致感谢信并追加订单 为表达对公司本次优质产品及服务的感谢,阿荣旗疾控中心特致信感谢,并再次追加新芝生物高速冷冻离心机及其他产品订单。
  • “大转小” 迎来核酸提取仪超高灵敏度
    10copies/mL!EmagPure-96plus“大转小”重新定义核酸提取仪超高灵敏度从2019年底疫情初期到现在,多轮筛查、假阴性、无症状病毒携带者、“14+7”超长隔离期、工作生活各种不便,经常是由于低病毒载量的不可检出性。目前常规新冠病毒核酸检测限为300-500copies/mL,如何更早更筛查出人群中低病毒载量及无症状病毒携带者、让生活尽早恢复常态化?医脉赛科技特别推出专利研发的核酸提取仪EmagPure-96plus,该仪器其独特的“大转小”功能就能完全解决以上“大海捞针”的困惑,让低浓度的核酸病毒无处遁形;EmagPure-96plus仪器可以通过利用大体积15mL深孔板,配以大磁头(强磁吸磁珠)在进行完全裂解洗涤后,转而采用小磁头吸取磁珠转移到小体积50μL或100μL的收集管中进行洗脱,轻松一步“大转小”实现了大体积低浓度样本到小体积高浓度洗脱液的转换,极大解决了灵敏度低、实验假阴性的可能,让我们更早一步发现,更早一步解决,尽早切断病毒传播链!使一切变得更有序!通过系列的实验数据表明:使用医脉赛科技EmagPure-96plus高通量多功能的核酸提取仪、医脉赛病毒保存管、核酸提取试剂盒,配以“大转小”独特专利技术,其荧光定量PCR仪检测结果表明大大提高了检出限,可检测病毒载量低至5-10copies/mL,较目前的常规检测灵敏度提高10-30倍,让病毒无处躲藏。从以上实验数据我们可以发现:搭载“大转小”专利技术的EmagPure-96plus大大提高了检测灵敏度,使我们能够更早一步发现“真相”;EmagPure-96plus不仅在提高灵敏度方面有卓越的表现,对于有高通量检测需求的客户来说EmagPure-96plus其双磁头的超强配置(15分钟完成192个单一样本),更能让我们在有限的时间检测更多的样本,一天上万已经触手可及;实现了真正意义上的高通量!医脉赛科技通过不断的创新和研发,广泛服务于疾病防控、临床诊断、出入境检验检疫、法医、科研等领域,我们力求为核酸检测,蛋白纯化提供更多优质高效的解决方案!“此实验所用到的试剂和仪器关于医脉赛医脉赛科技于2010年在上海张江由海归专家团队创建,并在浙江嘉善建立了2000多平米的标准化研发/生产基地。专注于磁性纳米微球技术在生物医药领域的应用和创新;截止2020年已自主研发并上市6大系列40余种产品,包括全线磁珠法提取试剂盒、蛋白纯化纳米磁珠、各种功能化磁珠、化学发光磁珠、病原体/微生物保存管,32/96/192通量全自动核酸/蛋白提取仪,具备完善的医疗器械生产管理、质量体系;拥有10万级洁净自动化试剂盒生产流水线车间、生物安全室;核心技术已取得10余项国内国际专利证书,20余个中国、欧洲、美国医疗器械注册证。医脉赛科技的产品线已能覆盖所有临床样本的前处理,包括传染病检测、肿瘤筛查、遗传病检测、核酸提取和富集等,医脉赛科技坚持为科研、医院系统,疾控系统,医检所、和动物疾控及养殖等行业提供更为简捷、绿色、环保、安全、样本纯化富集产品及解决方案。
  • 【超临界流体实战】 —— 天然产物中提取多种化合物
    1、背景介绍天然产物种类繁多,广泛存在于自然界中。多数天然产物的提取物都具有特殊的生理效能,可作为药物、香料和染料。天然产物的分离、提纯和鉴定方法一直都是化学分析研究领域关注的重点。随着现代色谱技术的发展,对天然产物的分离和鉴定变得更为便利。 2、超临界流体萃取(SFE) vs 传统萃取方法◆ 操作简单,减少人工操作仅需将样品均质化后导入至密封的SFE萃取容器,其后Nexera UC 即可自动进行样品萃取,无需人工干预。图1 . SFE前处理过程 ◆ 实现自动化多次萃取,大大提升回收效率Nexera UC 采用静态SFE、动态SFE两种提取模式组合,且可对同一个样品重复进行萃取,从而提升萃取效率。图2. SFE提取模式 ◆ 溶剂成本显著减少Nexera UC主要使用成本更低的二氧化碳作为萃取介质替代常规方法中昂贵的有机溶剂,因此可以显著降低萃取阶段的总运行成本。 3、Nexera UC 离线SFE前处理系统超临界流体萃取(SFE)是以超临界流体CO2为萃取介质的萃取方法之一。◆ Nexera UC 离线SFE前处理系统(基于SFE萃取原理,可存储多达48个萃取容器,可实现多个样本的自动、连续萃取。)图3 . Nexera UC 离线SFE前处理系统 ◆ 超临界CO2具有独特的功能,可实现高通量和高回收率萃取。图4 . SFE提取特点 ◆ 气液分离器(GLS)特色技术,可通过抑制样品飞散和残留获得高回收率。图5. 有无气液分离器对比图 4、实验结果采用Nexera UC对茶叶、生姜、肉豆蔻三种植物进行萃取,获得的馏分收集液通过LC-PDA进行成分分析。图6. 样品馏分收集液 SFE萃取条件流速:5mL/min时间程序:静态模式(0-2min)-动态模式(2.01-7min)-洗涤(7.01-10min)萃取温度:50℃压力:15 MPa馏分时间:2 ~ 7min补偿剂:2 mL/min四氢呋喃检测波长:250nm, 280nm, 300nm LC色谱条件色谱柱:Shim-pack™ XR-ODS II (100 mm x 2 mm I.D, 2.2 μm)流动相:A:水,B:乙腈流速:0.5mL/min时间程序:B conc,2%(0分钟)- 98%(7-8分钟)- 2%(8.01-10分钟)柱温:40℃进样体积:1 μL检测波长: 250 nm, 280 nm, 300 nm 图7. 三组提取物分析色谱图 结论本文介绍了Nexera UC 离线SFE前处理系统对天然产物的萃取工艺。与常规的溶剂萃取相比,在工艺时间长度和运行成本方面,Nexera UC体现出了前处理操作简单、回收率高、有机试剂消耗显著减少等显著优势。 本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。
  • 537万元!海关总署集中采购11台核酸提取仪
    p    strong 仪器信息网讯 /strong 2020年海关总署科技司发布核酸提取仪公开招标采购项目,招标项目的潜在投标人应在海关总署官网获取招标文件,并于2020年07月30日09点00分(北京时间)前递交投标文件。项目预算537万元,采购数量11台。 /p p   详情如下: /p p    strong 项目编号:HG20GK-A0000-D031 /strong /p p   项目名称:2020年海关总署科技司核酸提取仪公开招标采购项目 /p p   预算金额:537.0 万元(人民币) /p p   最高限价(如有): 万元(人民币) /p p   采购需求: /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202007/uepic/1b43e8f7-3293-4932-96b1-1fea60936a52.jpg" title=" 核酸提取仪.png" alt=" 核酸提取仪.png" / /p p br/ /p
  • 中药提取过程近红外在线检测项目取得重要进展
    近日,吉林省科技厅主持召开吉林敖东"中药提取过程近红外光谱在线质量监控系统"科技成果鉴定会,与会专家指出,吉林敖东在中药提取技术上获得重大突破,在中药口服液体制剂生产技术上走在了全国、全世界前列。   中药采购受时间和地域差别而难以标准化,中药成份量化和质量综合检测一直是中药走向世界的瓶颈。据了解,敖东制药与清华大学主持的"近红外在线检测项目",经罗国安教授带领的项目组的创新科研,历时五年,最终攻克了从"检测"到"检控"的难关,首次实现将近红外光谱技术应用于中药口服液提取过程的在线质量监控。申请并获得了国家发明专利4项,实用新型专利2项,软件著作权3项。   鉴定专家组在听取项目组汇报和答辩后,进行了现场考察,在鉴定意见中指出"敖东药业对液体制剂品的二次开发,代表了当今中国液体制剂生产技术的最高水平,指纹图谱技术的应用,为口服液产品质量控制提供了国际认可的技术标准。"
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