细菌总数检测

水质细菌总数检测的方法验证相对标准偏差多大合适，感觉偶然性很大，做出来相对标准偏差大怎么办

在BCEIA展会上，看到大的仪器厂家开始向小型化仪器方面发展，其中有一款便携式ATP,主要检测细菌总数，非常快速，我联想到我们水质菌落总数是需要培养的，时间很长。那我们是不是菌落总数也可以采用这样的方法？？ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少。

生态环境部更新发布了[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》（HJ 1000-2018[/url]），我们实验室的资质认定项目上细菌总数检测方法还是《水和废水监测分析方法》(第四版)的，请问这种资质认定方法的改变，是申请变更还是扩项呢？

有哪位知道食品中细菌总数的快速检测方法（24小时以内可以出检测结果的），将非常感谢～～～[em61]

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细菌总数在二次供水检测中准确度的控制 徐霞君 (深圳市水质检测中心) 摘 要：二次供水水样中细菌总数检测结果的准确度往往受多方面因素的影响，具体表现在取样、培养基的配备、培养条件、无菌室实验操作、计数及后处理等。本文对各影响因素中的各个细节提出规范对策，从而使二次供水细菌总数在检测中的准确度得以控制。 关键词：细菌总数、二次供水、检测、准确度、控制 　 二次供水是生活饮用水二次供水的简称，是指通过二次供水设施间接向用户供给生活饮用水的行为，二次供水设施主要为地下水池与天面水池，按《深圳经济特区生活饮用水二次供水管理》规定，每年至少清洗消毒二次，消毒方式有氯消毒、二氧化氯消毒、臭氧消毒、紫外线消毒等，消毒完成后，由专业清洗机构及时通知市水质检测中心进行取样检测。我水质检测中心在对二次供水8项指标(色度、浑浊度、肉眼可见物、PH、细菌总数、总大肠菌群、余氯)的检测中，在统计其月检不合格率时，其中因细菌总数超标引起二次供水水质不合格的占绝大多数。我们在不排斥原水样的超标外（市政水在经过不合格的二次供水水箱设施时受到一次污染），但也存在二次供水水样的细菌总数在检测中受到二次污染，即在检测中受到各种因素的影响，具体表现在取样、培养基的配备、培养条件、无菌室实验操作、计数及后处理等。因此，要提高二次供水水样细菌总数的准确度，必须对各影响因素进行规范控制。 1 取样中的规范 取样中存在的规范控制主要表现在取样瓶灭菌和水样的采集与保存两方面。 1.1 取样瓶的灭菌 取样瓶必须是清洁无菌的，一般用磨砂口带塞瓶，瓶的颈部和上部必须用锡泊纸覆盖，在160~170℃的烘箱内经干热灭菌2h方能达到灭菌目的。有的技术人员把取样瓶的消毒时间控制为1h，灭菌不彻底。因各种微生物对热的抵抗力不同，芽孢需要160℃、2h才能杀死。 灭菌后的采样瓶，两周内未使用，需重新灭菌。已灭菌和封包好的采样瓶，不论在什么条件下采样时，均要小心开启包装纸和瓶盖，应避免瓶盖和瓶子颈部受杂菌污染。 1.2 水样的采集与保存 采样时,不要用水样冲洗采样瓶，因余氯的存在会影响待测水样在采集时所指示的真正细菌含量，为去除余氯，于灭菌前按500ml采样瓶内加0.3ml10%Na2S2O3溶液，瓶内须留足够空间，一般采样量为瓶容量的80％左右，以便操作时摇匀，以获得具有代表性的样品。

谈谈检测水细菌总数的操作注意事项?

因为公司以后添置一个生物实验室，仅仅检测细菌总数一个项目，现在要做一个资金计划，哪位高人能指点一下，完成这个检测项目需要哪些仪器、设备以及大概需要多少资金，尽快！急！

求助海水弧菌,细菌总数的监测方法

问一弱知问题，水产品检测细菌总数，培养温度是多少度啊，是不是30度吗？急！

有人说，生活饮用水检测中，出厂水的细菌总数一定要低于末梢水的细菌总数 吗，这样的说法正确吗？？[B][color=#DC143C][size=4]大家能不能引用一个权威的说法或专家的说法说明这个问题[/size][/color][/B]

有人说，生活饮用水检测中，出厂水的细菌总数一定要低于末梢水的细菌总数 吗，这样的说法正确吗？？[color=#DC143C][size=4]大家能不能引用一个权威的说法或专家的说法说明这个问题[/size][/color]

请问利用DAPI及萤光显微镜做细菌总数检测的侦测下限为何

请问利用DAPI及萤光显微镜做海水细菌总数检测的侦测下限为何

因为已经新的标准06的强制推行，每日必检项目中有细菌总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群等项目，因为我们实验室比较小，建立超净实验室要单独隔出超净实验室、缓冲间和准备室比较困难，那么应对标准我们能不能用超净工作台来代替超净实验室呢？怎么样才能满足检测标准？因为我们建立的仅仅是日检9项的实验室，所以地方不大，条件有限。

请问海洋监测规范中细菌总数检测中平板计数法和萤光显微镜直接计数法其检测下限为何

细菌总数和霉菌，酵母菌有什么关系？最近我们检测了一个巧克力样品，检测结果细菌总数15cfu/g,霉菌和酵母据150个/g，这样的检测结果有问题吗？有人提出疑问，细菌总数那么小，为什么霉菌和酵母菌那么大？

请问海水中细菌总数检测利用DAPI和萤光显微镜直接计数法其检测下限为何

请问各位老师：检测土壤中的芽孢杆菌数和细菌总数需选择什么型号的显微镜，价格

为确保春节期间市民酒店住宿的卫生安全，近日，瓯海区卫生监督所对辖区内10家旅店的公共用品用具开展卫生监测。检验结果显示，所送的样品中三成脸（脚）盆细菌总数超标。 此次行动，瓯海区卫生监督所卫生执法人员对10家住宿旅店的毛巾、茶具、床上卧具（床单）、脸（脚）盆、马桶坐垫、拖鞋做了随机采样，共采集120份样品。经过瓯海区疾病预防控制中心检验，毛巾、茶具、床上卧具（床单）的细菌总数、大肠菌群指标均合格。有4家旅店脸（脚）盆细菌总数超标，3家旅店马桶坐垫细菌总数超标， 2家旅店拖鞋霉菌超标。其中，景山锐思特汽车店的马桶细菌总数超出8倍；温州铜锣湾假日酒店有限公司脸盆细菌总数超标，拖鞋霉菌数超出正常值的56倍。 从监测类别看，脸（脚）盆合格率最低，为70%。其他公共用品用具合格率均在85%以上。合格率从高到低分别为毛巾、茶具、床上卧具、拖鞋、马桶坐垫、脸（脚）盆。

如题，求[b][url=http://www.baidu.com/link?url=UJg2-pa-7CorxAZtK3rCFtzlVb1XDHpVVAkmcFOEkzBCdJeL95wM6VoF3gwwco92vtoiSETCOefvqD6pr1540K&wd=&eqid=e0f52228000071b6000000065b762d0c][i]SN/T 3378-2012[/i] 玩具细菌总数检测方法[/url][url=http://www.baidu.com/link?url=UJg2-pa-7CorxAZtK3rCFtzlVb1XDHpVVAkmcFOEkzBCdJeL95wM6VoF3gwwco92vtoiSETCOefvqD6pr1540K&wd=&eqid=e0f52228000071b6000000065b762d0c]谢谢[/url][/b]

[align=center][font='calibri light'][size=21px]浅谈水中菌落总数的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之前在研究奶中菌落总数的检测方法的时候，偶然看到了水中菌落总数的方法，就想到既然都是液体，那是不是可以尝试用检测水中菌落总数的方法去检测牛奶中的菌落总数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]我们先来看看水中菌落总数检测的方法。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第一种：平皿计数法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]这个计数法是通过数菌落，一个单菌落就代表原样品中的一个单细胞。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：样品10倍稀释→1ml稀释样品+15ml营养琼脂（45℃）混合→冷却凝固→37℃，48h培养。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之后根据稀释倍数和取样接种量换算样品含菌数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第二种：酶底物法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]原理：不同细菌分泌的不同产物可分解不同底物产生同一种信号——荧光，此信号可以在366nm的紫外灯下显示，数对应荧光孔数查MPN表得结果，稀释水样范围＜738MPN/mL。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：1mL待测水样+9mL无菌水摇匀（培养基）→倒入定量盘，水平摇晃将液体充满孔槽→竖盘，棉条吸取多余水分→反向放置→37℃，48h培养→用366nm紫光灯照射，数带有荧光孔的数量。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]当时看到这个方法之后，就想到是不是能用这个方法检测牛奶的细菌总数，然后询问了一下师傅，才知道平皿计数法可以用于牛奶细菌总数的检测，但是酶底物法不太合适。因为水中除了细菌分泌产生的东西外，没有其他的物质。但是牛奶不一样，牛奶中含有脂肪，蛋白质，乳糖，矿物质等其他的物质，如果使用酶底物法会产生较大的误差，不适合牛奶的细菌总数的检测。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]虽然没有发现新的检测牛奶中细菌总数的方法，但是也学会了水中菌落总数的方法，希望能够对各位朋友提供帮助。[/size][/font][/align]

公共场所卫生标准GB/T18204.4-2013公共用品检验 细菌总数的结果报告是根据公式计算的，在计算结果的时候N如果是小数应不应该取整呢？如果说检测结果两个平皿都没长菌，那结果应该报告1还是10呢？公式中有个系数k，这个k值应该怎么算呢？

今天出报告时遇到一个这样的问题，我用1000-2018做细菌总数，但地下水的标准钟又叫菌落总数，我想问这个是不是相同的，是不是只是叫法不同而已，我看地下水上的方法也是平皿计数法，那我测出来的是叫细菌总数还是菌落总数呢？我们资质附表中只有细菌总数，客户指明要测菌落总数，那我能不能出这个报告呢？

不知道大家现在测细菌总数平板计数用的稀释液是哪种.是生理盐水还是氯化钠蛋白胨缓冲溶液?

.4 水质的细菌学检测 9.4.1 水中细菌总数的检测 9.4.1.1 目的和原理 水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关，它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。由于重金属及某些其它有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用，因此总细菌数少的水样，并不能排除已被这些物质所污染。本试验采用标准平皿法对水样中细菌作计数，这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度的方法，由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状，成簇或成团的形式存在，此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求，所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。细期总数是指1毫升水样在营养琼脂培养基中，37℃、24小时培养后所生长的菌落数。一般规定，1毫升自来水中总菌数不得超过 100个。 9.4.1.2 材料和器皿 （1）培养基①营养琼脂培养基②2216E培养基：蛋白胨 5.0克 酵母膏 1.0克 FePO4 0.01克 琼脂 18.0克 陈海水 1000毫升 pH 7.6～7.8 （2）无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿，盛有90ml及 9mL灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管。 9.4.1.3 方法和步骤 （1）采集水样。（2）吸取10 ml水样（河水、污水、游泳池水或港湾水等），注入盛有90ml无菌水或无菌海水的三角瓶中，混匀成10-1稀释液，在吸水样前，水样应彻底搅动均匀。（3）按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3、10-4。（4）根据水样的洁净程度，污染严重者选取10-2、10-3、10-4稀释度；中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度，每个稀释液分别注入两个培养皿，每皿 1ml。稀释度的选择是本试验精确度的关键，选择适宜者，平皿上菌落总数介于30—300个之间。（5）注入彻底融化，然后冷却到45℃的营养琼脂培养基（用于河水样）或2216E培养基（用于海水、港湾水样）约15ml，立即旋摇培养血，充分混匀，水平放置至固化。（6）接种河水的培养皿，倒置于37℃培养24小时。接种海水样，港湾水样的培养皿，应倒置后于18—20℃下培养到长出明显菌落（5天左右）止。 9.4.1.4 结果与分析 取同一稀释度的平板培养物，依菌落计算原则进行计算。（1）菌落计算原则平皿菌落的计算，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，防止遗漏，也可借助于菌落计数器计数。对长得相当接近，但不相触的菌落，应予以—一计数。对链状菌落，应当作为一个菌落来计算。平皿中若有较大片状菌落时则不宜采用，若片状菌落少于平皿的一半时，而另一半中菌落分布又均匀，则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。算出同一稀释度的平均菌数，供下一步计算时用。（2）计算方法①首先选择平均菌落数在30～300者进行计算。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即可用它作为平均值乘其稀释倍数（见表5－9的例1）。②若有两个稀释度的平均菌落数都在30—300之间，则应按两者的比值来决定。若其比例小于2，应报告两者的平均数；若大于2，则报告其中较小的数字（见表7-例2和例3）。③如果所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例4）④若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例5）。⑤如果全部稀释度的平均菌落数均不在30—300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表5－9例6）。③菌落计数的报告，菌落在100以内时，按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示（见表5－9的“报告方式”栏）。 表5－9 稀释度选择及菌落报告方式 例次 不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落数之比 菌落总数（个／ml）报告方式（个／ml） 10 -1 10 -2 10-3 1136016420-1640016000或1.6×104 22760295 461.63775038000或3.8×104 3289027160 2.22710027000或7×104 4无法计数4651513-513000510000或5.1×105 527 11 5 -270 270或2.7×102 6无法计数305 12- 30500 31000或3.1×104

[font=宋体]深圳市是华南地区新兴的大都市，人口稠密，工商业、电子制造业发达，交通繁忙，从近年气象要素和污染指数的变化情况看，空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量总体有呈下降的趋势；深圳处于亚热带海洋季风气候带内，空气温湿，有利于空气微生物的生长繁殖，地面上人群呼吸带的微生物已经直接影响到人体健康。因此，监测深圳市区的空气微生物含量，对于提高深圳市区的大气环境质量和保障人体健康是十分必要的。[/font][font=宋体]随着深圳市经济的发展和车辆的增多，城市空气污染也越来越严重。通过对空气微生物含量指标进行监测可以反映出空气的污染程度以及对人群健康造成的威胁。深圳市生态监测中，关于空气微生物的常规监测主要采用传统的平皿沉降法，此方法存在较多误差；我们将先进的荧光显微镜法和变性梯度凝胶电泳法（[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]）引入监测工作中，作为深圳市生态监测体系中空气微生物监测方法的改进和补充。[/font][font=宋体][/font][size=3][b][font=宋体]变性梯度凝胶电泳法[/font][font=宋体][/font][/b][/size][font=宋体]分子生物技术克服了传统微生物培养技术的限制[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]可以更精确地揭示环境中微生物种群结构及其遗传的多样性，从而可以更加清楚的了解环境的变化及其与微生物的关系。其中，[/font][font=Times New Roman]PCR-DGGE[/font][font=宋体]技术在遗传多样性等研究方面的应用较为广泛。[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]技术是[/font][font=Times New Roman]rRNA[/font][font=宋体]基因测序中经常用到的一项[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]分离技术。由于不同种个体的[/font][font=Times New Roman]rRNA[/font][font=宋体]基因的长度较稳定，[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]能够将大小相似的不同序列[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]区分开，得到纯化的单一[/font][font=Times New Roman] rDNA[/font][font=宋体]，以便进行测序，从而可以获得更多有关微生物群落遗传学上的信息，即群落遗传多样性等信息。应用变性梯度凝胶电泳技术，对不同环境样品中的细菌微生物群落的遗传信息进行对比分析，结合环境的理化等指标，可以得到受不同程度污染的环境样品中的微生物遗传多样性的异同、微生物种类的变化等方面的信息，从而通过微生物指标来反映环境受污染的程度。[/font][size=3][b][font=宋体]荧光显微镜法[/font][/b][/size][font=宋体]利用微生物指标监测环境污染与清洁度是一种快速灵敏的生物学检测方法，通过对微生物[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]的染色所采用的荧光显微镜方法，能够检测到环境中绝大部分不能够被培养微生物类群，可以较好的降低常规培养皿培养所造成的微生物总量的损失或者过低估计等误差。此外，荧光显微镜检测方法还具有直观，快捷等特点。[/font][font=宋体]目前，国内外将荧光显微镜方法应用于空气和海水中微生物的研究较为成熟可靠，并且得到了很好的研究结果；在土壤和沉积物中的微生物总数的研究上多采用培养皿的方法，我们希望通过前期的实验探索，可以将荧光显微镜的方法应用到土壤微生物总数监测工作中，并且与常规方法进行对比，检测该方法的可行性。[font=Arial]深圳空气环境微生物监测研究的区域为整个深圳市，测点集中在东部和西部区域，有杨梅坑、田心山、莲花山、羊台山和南山生态测站5个站点。[/font][/font][size=3][font=宋体][b]荧光显微镜分析[/b][/font][/size]使用Syber Green I 染色剂染色土壤环境的细菌DNA，蓝光激发后，发亮绿色荧光； 使用Olympus BX41显微镜，在油镜条件下随机选择10-20个视野计数被染色的细菌个体（细菌个数=平均视野中的细菌数量×滤膜的有效过滤面积/视野面积）,进行荧光显微镜计数（10×目镜，100×物镜，1000×倍数）亮绿色荧光的细菌细胞。[b][font=宋体][size=3]分子生物学分析[/size][/font][/b][font=宋体]采用常规[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]提取方法对深圳空气环境细菌样品总[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]进行提取，得到的总[/font][font=''''Times New Roman'''']DNA[/font][font=宋体]电泳结果图谱；[/font][font=宋体]对测站的空气环境细菌样品[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=宋体]进行降落[/font][font=Times New Roman]PCR[/font][font=宋体]扩增，得到[/font][font=Times New Roman]PCR[/font][font=宋体]产物，作为[/font][font=Times New Roman]DGGE[/font][font=宋体]的上样样品。[font=宋体]对降落[/font][font=''''Times New Roman'''']PCR[/font][font=宋体]扩增获得的产物进行琼脂糖电泳，[font=宋体]进行[/font][font=''''Times New Roman'''']DGGE[/font][font=宋体]实验（[/font][font=''''Times New Roman'''']Touch Down [/font][font=''''Times New Roman'''']PCR[/font][font=宋体]产物）。[/font][/font][/font]

现在我们用去离子水处理金属表面，如果水中细菌数较多将对后续工作造成不利影响。我们没有微生物检测方面的经验，请教一般去离子水中的细菌总数大概有多少，有没有快速测定方法？谢谢各位了！