人类胚胎编辑

胚胎显微操作-胚胎分割 (一)概况 胚胎分割是通过对胚胎进行显微操作，人工制造同卵双生或同卵多生的技术，它是扩大胚胎来源的一条重要途径，其理论依据是早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性。 本世纪三十年代，Pinrus等首次证明兔2细胞胚的单个卵裂球在体内可发育成体积较小的胚泡。之后，Tarkowski等人的实验胚胎学研究成果进一步证明了哺乳动物2细胞胚的每一个卵裂球都具有发育成正常胎儿的全能性。七十年代以来，随着胚胎培养和移植技术的发展和完善，哺乳动物胚胎分割取得了突破性进展。Mullen等于1970年二分2细胞期鼠胚，通过体外培养及移植等程序，获得了小鼠同卵双生后代。Willadsen于1979年通过分离早期胚胎的卵裂球，成功地获得了绵羊的同卵双生后代。国内张涌等通过分割小鼠、山羊早期胚胎，均获得了同卵双生后代。进一步研究表明，四分胚，八分胚也可以发育成新个体。窦忠英等将7日龄的牛胚胎一分为四，实现了同卵三生。值得说明的是，随着胚胎分割次数的增多，分割胚的发育能力明显降低，这可能与胞质的不断减少有关。 (二)分割方法 胚胎分割方法主要有显微操作仪分割和徒手分割两种。

如何运用BLS细胞融合仪及胚胎聚集针创建胚胎 注射器内吸入培养基，在35mm组织培养板上微滴（大致直径3mm）点样成若干行（列）。向培养板内小心注入石蜡油使其覆盖整板，注意不要使石蜡油直接倾倒在微滴上。石蜡油很容易越过这些微滴。石蜡油的量要完全覆盖这些微滴。使用配件按照说明操作，制作凹陷。37度，5%CO2条件下孵育培养板几小时，目的是让培养基在液滴内达到平衡。这一步可以在形成凹陷的步骤之前进行。实验前准备好待聚集的细胞，组织或胚胎，不要将它们长时间暴露在室温下或脱离最适培养条件时间过长。通过在组织培养板盖上加入几滴M2培养基和Tyrode’s酸溶液来去除卵透明带。将组织培养板的培养区域表面如此处理后，胚胎将本能的黏附在表面—因此我们需要使用盖。确认所有培养基溶液和酸液都接近室温。将胚胎放置在一滴M2培养基上。取尽可能少的内含10-20个胚胎的培养基，并移到一滴酸液上。重复这个步骤并将胚胎移到新的一滴酸液上。让胚胎在吸头内保持上下移动，观察卵透明带是如何溶解的。迅速将胚胎移入M2培养基。用几滴培养基溶液洗涤并移入刚才制成的凹陷中。胚胎培养条件是聚集产量的一个重要因素，因为胚胎要培养过夜，如果是四倍体胚胎在移入母体前需要培养48小时。在培养的每个细节都必须小心操作控制。这包括温度，大气，培养基，室温操作时间及矿物油质量。

设备和试剂--6厘米细菌培养皿--M2培养基+1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --M16培养基+ 1毫克/毫升牛血清白蛋白（sigma） --BLS胚胎聚集针（DN-10 或DN-09）--ES细胞单细胞悬液--窄口移液管（处理细胞和胚胎）来自Pasteur移液管或其他合适的玻璃毛细管（移液管内径的应? 100μm ）--来自雌性促排卵的八细胞胚胎-- Tyrode’s液，酸性（ sigma） --CO2孵化器

人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)检测试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)抗原、生物素化的人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

目的:小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于：（1）细胞保种；（2）分子生物学研究；（3）基因治疗相关研究。实验原理:将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF生长培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。

目的介绍四倍体胚胎补偿法制备ES小鼠技术的操作环节,加快该技术的推广应用。方法综合分析近几年来国内外在小鼠四倍体胚胎与ES细胞嵌合的研究成果,

使用琼脂糖包埋胚胎脑组织, 振动切片机切片,免疫荧光组织化学技术漂染, 激光扫描共聚焦显微镜下观察, 这种技术比一般免疫组织化学技术在研究脑发育方面有更多的优越性。

美国加利福尼亚大学伯克利分校的科学家，利用单细胞Western技术在期刊SCIENCE ADVANCES（IF：12.804）发表文章：Assessing heterogeneity among single embryos and single blastomeres using open microfluidic design, Sci. Adv. 2020 6: eaay1751 22 April 2020. 本文利用单细胞Western技术与现有的工作流程整合在一起，为评估植入前胚胎发育固有的细胞间分子异质性开辟了新途径。

☆双向各三束光片照明，360° 全方位成像；☆光片参数可变，适用于各种样品；☆简单易用的样品腔，可对活体动物和透明组织进行成像；☆可在水溶性缓冲液和透明溶剂中成像，并对不用溶剂进行折射率修正；☆水平方向光路的动态聚焦，带来佳的分辨率；☆超大工作距离，支持大样品体积10 x 10 x 10mm；☆放大倍率可在1.26x至12.6x调整。

这里介绍的LATE检测结合GEF-dPCR技术可以填补基因编辑中的部分空白，作为一种简单，快速和高性价比的方法，用于测试给定基因组编辑策略对细胞生长调节的不良影响，评估不同的Cas9核酸酶在基因组编辑时的特异性。

在实验动物个体数量多的情况下，判定是否存在基因组编辑需要花费更多的时间和成本。使用MCE-202 MultiNA进行自动分析可以大幅减轻作业负担。

目标：本研究的目的是测量人类颌骨中钛的含量，并证明钛是从植入颌骨的牙齿中释放出来的。方法：以4例种植体患者7例为试验组，6例未种植体患者6例相似地形区骨标本为对照。采用电感耦合等离子体发射光谱法测定了人颌骨中各种元素的含量。用激光烧蚀-电感耦合等离子体质谱法(LA-ICP-MS)测定了人下颌骨不同同位素的分布。应用光镜对未脱钙、Giemsa-Eosin染色的下颌骨切片进行组织学分析，扫描电镜-能量色散x线对人骨髓颗粒进行鉴别。结果:在测试组相比,钛含量明显高于对照组。试验组Ti平均含量为400μ g/kg，对照组为634μ g/kg。人体下颌骨Ti含量*，为37,700μ g/kg。在样本4-7(人体受试者II-IV)中，在距种植体556-1587μ m的下颌组织中，LA-ICP-MS检测到Ti强度增加，且强度随着距种植体距离的减小而增大。在4-7个样本中，距种植体60-700μ m距离的人类颌骨骨髓组织中发现了0.5-40μ m大小的颗粒。

人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)检测试剂盒人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)抗原、生物素化的人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

尿总氮是血液除去蛋白的其他含氮物质，主要是蛋白的代谢产物，包括尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨基酸和氨等，另外还有含量很少的所谓未鉴定氮，如谷光甘肽和核甘酸的氮等，它们的分子量小，很易从肾脏排出，尿排泄氮类又受饮食中蛋白质量的影响，也与身体的蛋白质分解和合成代谢平衡有关。本实验使用凯氏定氮法对人类尿液中的总氮含量进行测定。

人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)检测试剂盒人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)抗原、生物素化的人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

斑马鱼作为一种模式动物，与人类共享高达 70% 的基因组，保留了多达 80% 的人类疾病相关蛋白。同样作为一种脊椎动物，斑马鱼与人类的组织和发育生物学过程相似，故而针对各种癌症、肝病、血液疾病、心脏病和行为障碍的斑马鱼模型被建立起来，斑马鱼进而成为了基因表达调控、发病机理、药物筛选领域的主要模式动物，在生物医学研究的地位越来越重要(Patton et al., 2021)。北京易科泰提供生物医学领域斑马鱼呼吸代谢及行为分析的全套技术方案，包括斑马鱼成鱼和鱼卵、胚胎、幼鱼的呼吸代谢测量、斑马鱼视频跟踪和行为分析及游泳能力评估。

胎盘是后兽类和真兽类哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官。产妇分娩后的胎盘还是一味中药，称之为人胎衣、紫河车。本实验使用凯氏定氮法对干胎盘粉中的蛋白质含量进行测定。

自从Cellera公司通过人类染色体组方法解码人类DNA后，人们开始广泛的从事基因方面的研究。 德国Fritsch公司也为这项新颖而有意义的课题提供了更多的广泛性参考价值。本文着重介绍了德国Fritsch公司与位于德国海德尔堡的Cellzome AG公司开展的协作实验。使用德国Fritsch公司的 ”pulverisette 5” 四罐行星式高能球磨机和 ”pulverisette 6” 单罐行星式高能球磨机，通过释放基因改良的酵母细胞来获得蛋白质。 德国Fritsch公司的行星式高能球磨仅仅运行了3-4分钟，通过显微镜的观测，就可以获得酵母细胞已经充分破碎的结论。 具体的研磨粉碎实验方法及相关实验数据，欢迎您来电话与北京飞驰科学仪器有限公司取得联系。

The measurement of blood-plasma velocity distributions with spatial and temporal resolution in vivo is inevitable for thedetermination of shear stress distributions in complex geometries at unsteady flow conditions like in the beating heart. A nonintrusive,whole-field velocity measurement technique is required that is capable of measuring instantaneous flow fields at submillimeterscales in highly unsteady flows. Micro particle image velocimetry ð mPIVÞ meets these demands, but requires specialconsideration and methodologies in order to be utilized for in vivo studies in medical and biological research.We adapt mPIV to measure the blood-plasma velocity in the beating heart of a chicken embryo. In the current work, bio-inert,fluorescent liposomes with a nominal diameter of 400nm are added to the flow as a tracer. Because of their small dimension andneutral buoyancy the liposomes closely follow the movement of the blood-plasma and allow the determination of the velocitygradient close to the wall. The measurements quantitatively resolve the velocity distribution in the developing ventricle and atriumof the embryo at nine different stages within the cardiac cycle. Up to 400 velocity vectors per measurement give detailed insight intothe fluid dynamics of the primitive beating heart. A rapid peristaltic contraction accelerates the flow to peak velocities of 26 mm/s,with the velocity distribution showing a distinct asymmetrical profile in the highly curved section of the outflow tract.In relation to earlier published gene-expression experiments, the results underline the significance of fluid forces for embryoniccardiogenesis. In general, the measurements demonstrate that mPIV has the potential to develop into a general tool for instationaryflow conditions in complex flow geometries encountered in cardiovascular research.

基因突变的出现使身体持续产生乳糖酶直至到成年，这似乎是一个明显的进化优势，尽管科学家不清楚具体原因。它很可能与动物驯化有关，人类开始吃发酵乳制品，或者是应为生牛奶营养丰富、热量密集的原因，不管怎样，自那以后牛奶和奶制品一直是人类饮食的核心部分，牛奶能提供蛋白质和大量必需的氨基酸，这是必不可少的身体细胞结构（如肌肉，器官，皮肤，激素，酶）。

在这部分工作中，我们采用了高 pH 反相色谱结合二氧化钛富集以及二氧化钛富集结合强阳离子交换分级两条技术路线来对实现对 Hela 细胞的磷酸化蛋白质组的深度覆盖。最终我们的实验一共鉴定到了 8,696 个蛋白质上的近 40,000 个磷酸化位点。 在二氧化钛富集结合强阳离子交换分级的技术路线中，SCX 分级的梯度还值得进一步优化，对于这种组分较少的预分级方法，阶梯洗脱会是一个更好的选择。这种大规模的磷酸化肽段富集方法对样品的起始量要求比较高，如果样品较少的话，建议采用二氧化钛富集结合强阳离子交换的策略，一般 2 mg 起始蛋白就能得到较多的磷酸化位点鉴定。ThermoFisher也提供了商业化的 IMAC 试剂盒（Cat # 88300），鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性，这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。

在二氧化钛富集结合强阳离子交换分级的技术路线中，SCX 分级的梯度还值得进一步优化，对于这种组分较少的预分级方法，阶梯洗脱会是一个更好的选择。这种大规模的磷酸化肽段富集方法对样品的起始量要求比较高，如果样品较少的话，建议采用二氧化钛富集结合强阳离子交换的策略，一般 2 mg 起始蛋白就能得到较多的磷酸化位点鉴定。ThermoFisher 也提供了商业化的 IMAC 试剂盒（Cat # 88300），鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性，这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。

一般来说，在进行所需培养程序时，通过最小化配子和胚胎在孵化箱外的时间长度和孵化箱开口数量来优化培养环境。然而，即使是短暂的外部环境暴露也可能导致诸如细菌、霉菌和毒素等危害，从而影响配子生物学、胚胎发育或两者兼而有之。可以通过过滤培养基或空气、在培养基中使用抗生素以及在空气净化系统中进行紫外线光氧化来避免细菌和霉菌。然而，在实验室中暴露于毒素，尤其是VOCs的情况相当普遍，并且被怀疑最早在实验室开始培养时被污染，有可能直到将胚胎植入子宫后才影响胚胎发育。对于其他哺乳动物来说，培养环境可以影响胚胎在培养期间的外观，以及胚胎在培养期之后的表现。

高氯酸盐作为添加剂、推进剂等被广泛的应用于各个领域，如航空航天、烟火制造、军火工业、橡胶制品、染料涂料等[1]。由于高氯酸盐与碘离子具有相似的电荷和离子半径，能够与碘离子竞争而进入人体甲状腺，引起甲状腺荷尔蒙生成量的减少，从而影响大脑组织的发育，危害人类的健康，尤其是孕妇、胚胎、婴儿最容易受到危害[2,3]。高氯酸盐具有高水溶性，低吸附性，高流动扩散和稳定性，在环境中能够持久存在，是一种新的持久性污染物。目前是环境科学领域研究高氯酸盐的热点。我国最新的饮用水规范《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》[4]中规定生活饮用水中高氯酸盐的最高允许含量为70 μg/L，碘离子最高允许含量为 0.1mg/L。

本文采用Thermo Scientific ISQ 单四极杆GC-MS 系统，以正己烷溶剂进行提取，选择离子方式对烟用白乳胶中邻苯二甲酸二丁基苄基酯进行检测。该方法的操作步骤简单，邻苯二甲酸二丁基苄基酯的检出限在3.4—63.4 ng/g 范围，定量限在13.4—216.7 ng/g 范围，体现了其较高的检测灵敏度；同时以3 种不同浓度水平对烟用白乳胶样品进行加标回收试验，其回收率均在77.4%-130% 之间，能够很好地符合日常分析检测的要求。

高氯酸盐作为添加剂、推进剂等被广泛的应用于各个领域，如航空航天、烟火制造、军火工业、橡胶制品、染料涂料等[1]。由于高氯酸盐与碘离子具有相似的电荷和离子半径，能够与碘离子竞争而进入人体甲状腺，引起甲状腺荷尔蒙生成量的减少，从而影响大脑组织的发育，危害人类的健康，尤其是孕妇、胚胎、婴儿最容易受到危害[2,3]。高氯酸盐具有高水溶性，低吸附性，高流动扩散和稳定性，在环境中能够持久存在，是一种新的持久性污染物。目前是环境科学领域研究高氯酸盐的热点。我国最新的饮用水规范《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》[4]中规定生活饮用水中高氯酸盐的最高允许含量为70μg/L。

传统的脱苄基反应是在釜式反应器中进行的，用于反应的多为NaBH4和AlCl3或三氟甲磺酸这种路易斯酸催化剂，增添了分离和纯化的步骤，还产生了大量的还原性废水。并且釜式反应器的传质效率较低，往往需要反应十几个小时，长时间的高温高压条件还容易引发安全事故。因此我们急需开发出一种绿色环保，安全高效的新工艺。H-FLOW全自动加氢反应仪就是为了解决加氢反应过程遇到的难题而开发的智能化设备。它的原子利用率较高，反应器内的物质混合充分，需要长达十几个小时的脱苄基反应过程仅需几分钟即可反应完成。催化剂可固定在反应床内，长时间保持活性，不会产生还原性废弃物。H-FLOW是实现脱苄基反应工艺绿色安全的创新型设备。

Intranasal levels of lead as an exacerbation factor for allergic rhinitis in humans and mice. JALLERGY CLIN IMMUNOL VOLUME 148, NUMBER 1 (2021 影响因子: 5.764)鼻内铅水平是人类和小鼠过敏性鼻炎的恶化因素

利用分析得到的母子离子的通道检测目标肽段，通常会针对每种肽段进行优化。本技术简报将介绍使用Skyline为Waters Xevo TQ-S质谱仪选择肽段和通道并进行方法开发的过程，同时包括分析复杂合成基质中的致敏肽段标准品的结果。Skyline是一款开源文档编辑器，可用于创建和分析靶向蛋白质组学实验。

A&D艾安得MS-70/MX-50/MF-50快速水份测定仪采用卤素灯加热，操作简单，易于观察，是最好的含水率测定工具。本文主要介绍A&D卤素水份测定仪分析人类排泄物（浆状）样品中的水份含量。