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高危病毒研究

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  • 1047万!云南省妇幼保健院2024年高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒采购项目

    [b]一、项目基本情况[/b] 项目编号:YNZC2024-G1-04226-YCZB-0111 项目名称:云南省妇幼保健院2024年高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒(第二批) 预算金额(万元):1047.618 最高限价(万元):1047.618 采购需求:1标段:高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒,数量:317,553人份,采购预算及最高限价为:3,493,083.00元;2标段:高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒,数量:317,553人份,采购预算及最高限价为:3,493,083.00元;3标段:高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒,数量:317,274人份,采购预算及最高限价为:3,490,014.00元; 合同履行期限:标段1:合同签订后按甲方实际要求完成配送,接到采购人供货通知后7日历天内全程按食品药品监督管理局要求将检测试剂盒、样本保存液及采样刷配送至云南省16州市妇幼保健院或采购人指定地点(样本保存液及采样刷需配送至县级)。 标段2:合同签订后按甲方实际要求完成配送,接到采购人供货通知后7日历天内全程按食品药品监督管理局要求将检测试剂盒、样本保存液及采样刷配送至云南省16州市妇幼保健院或采购人指定地点(样本保存液及采样刷需配送至县级)。 标段3:合同签订后按甲方实际要求完成配送,接到采购人供货通知后7日历天内全程按食品药品监督管理局要求将检测试剂盒、样本保存液及采样刷配送至云南省16州市妇幼保健院或采购人指定地点(样本保存液及采样刷需配送至县级)。 本项目(否)接受联合体投标。 [b]二、申请人的资格要求:[/b] 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:包1、2、3:(1)本项目不属于专门面向中小企业采购的项目。(2)本项目需要落实的政府采购政策:《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号)、《关于进一步加大政府采购支持中小企业力度的通知》(财库〔2022〕19号)、《财政部民政部中国残疾人联合会关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号)、《关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》(财库〔2014〕68号)、《关于印发环境标志产品政府采购品目清单的通知》(财库〔2019〕18号)、《关于印发节能产品政府采购品目清单的通知》(财库〔2019〕19号)、《财政部发展改革委生态环境部市场监管总局关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》(财库〔2019〕9号)等。(3)小微企业价格扣除优惠比例:10%。;(1)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒:小微企业价格扣除优惠比例:10% (2)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒:小微企业价格扣除优惠比例:10% (3)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒:小微企业价格扣除优惠比例:10% 3.本项目的特定资格要求:【包1、2、3】 (1)投标人如果是代理商或经销商且所投产品为医疗器械,须提供医疗器械经营许可/备案证,所投产品制造商医疗器械生产许可证(制造商工商注册地在中华人民共和国境外的,不做此要求)、所投产品的医疗器械注册证及附件;投标人如果是制造商且所投产品为医疗器械,须提供医疗器械生产许可证(制造商工商注册地在中华人民共和国境外的,不做此要求)、所投产品的医疗器械注册证及附件。医疗器械生产或经营许可证生产或经营范围须覆盖所投第二、三类医疗器械(根据中华人民共和国国务院令第739号《医疗器械监督管理条例》和国家药品监督管理局《医疗器械分类目录》的规定,在《医疗器械分类目录》内的产品必须按照《医疗器械监督管理条例》 的要求提供,其他不在《医疗器械分类目录》内的不作强行要求);(2)投标人在本项目投标截止时间前未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单、国家企业信用信息公示系统和云南省政府购买服务信息平台/中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录名单”; (3)投标人应遵守国家有关的法律、法令和条例,以及符合并承认和履行招标文件中的各项规定;(4)单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人,不得参加同一合同项下的政府采购活动;(5)本次招标不接受联合体投标。 [b]三、获取招标文件[/b] 时间:2024-08-23 00:00至2024-08-30 23:59,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59(北京时间,法定节假日除外) 地点:政采云平台线上获取 方式:①凡有意参加投标者,须在政采云平台办理数字证书(CA),并在政采云绑定数字证书(CA)后线上获取采购文件及其它采购资料。CA申领链接:http://yzt.ynsmartcert.cn/cms/yztynyc.html 或https://middle.zcygov.cn/ca/apply/list?_app_=zcy.sys,CA申领后需登陆政采云平台完成数字证书(CA)绑定才可以使用,数字证书(CA)详见其办理流程。②按上述要求获取文件的供应商视为合法获取了本项目采购文件,具备本项目的投标资格。 售价(元):0 [b]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/b] 2024-09-13 09:30(北京时间) 地点:云南省昆明市五华区云南省昆明市高新区海源中路1666号汇金大厦A座19楼开评标室1 [b]五、公告期限[/b] 自本公告发布之日起5个工作日。 [b]六、其他补充事宜[/b] 开标方式:网上开标 是否需要缴纳投标保证金:是 (1)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒: 保证金金额:30000(元) 保证金缴纳方式:支票、汇票、本票、保函、转账、电汇、网银等方式不限 保证金缴纳截止时间:2024-09-13 09:30 (2)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒: 保证金金额:30000(元) 保证金缴纳方式:支票、汇票、本票、保函、转账、电汇、网银等方式不限 保证金缴纳截止时间:2024-09-13 09:30 (3)高危型人乳头瘤病毒(16、18型及其它不细分亚型)核酸检测试剂盒: 保证金金额:30000(元) 保证金缴纳方式:支票、汇票、本票、保函、转账、电汇、网银等方式不限 保证金缴纳截止时间:2024-09-13 09:30 其他:2. 投标文件的递交网上递交:网上递交网址为政采云平台(https://www.zcygov.cn/),各供应商应在开标前应确保成为政采云平台供应商,并完成CA数字证书申领。因未注册入库、未办理CA数字证书等原因造成无法投标或投标失败等后果由供应商自行承担。投标人须在投标截止时间前完成所有投标文件的上传,投标截止时间前未完成投标文件上传的,视为撤回投标文件。若投标人未在规定时间完成解密的(如:无法解密、网络故障、未安装相关驱动、浏览器故障、加密CA与解密CA不一致等),则视为撤销其投标文件,不再进入评标阶段。开标过程中如有问题,可以发起在线异议,由代理机构给予对应的回复,在规定的异议询问时间内未提出异议的,则视为对开标结果无异议。注:任何因忽视或误解而导致投标文件未上传或已上传但未按规定的操作流程及时间要求进行解密的,由投标人自行负责。3. 发布公告的媒介:本次招标公告同时在《中国政府采购网》、《云南省政府采购网》上公开发布,我公司对其他网站转载本公告的内容不负任何责任。4.开户信息开户名:云南云创招标有限公司开户银行:招商银行昆明滇池路支行账号:8719 0345 1810 1020 0700 229 [b]七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/b] 1.采购人信息 名 称:云南省妇幼保健院 地址:昆明市鼓楼路200号 联系方式:0871-65810533 2.采购代理机构信息 名 称:云南云创招标有限公司 地址:昆明市高新区海源中路1666号汇金大厦A座19楼 联系方式:0871-64103756 3.项目联系方式 项目联系人:罗靖恒、王思霖、后俊、张韵、樊艳瑾 电 话:0871-64103756

  • 最新研究确认中华菊头蝠是SARS病毒的天然宿主

    中国科学院武汉病毒研究所石正丽研究员带领的国际研究团队近期分离到一株与SARS(Severeacuterespiratorysyndromecoronavirus)病毒高度同源的SARS样冠状病毒(SARS-likeCoV),对该病毒的功能受体及感染研究显示:中华菊头蝠是SARS病毒的天然宿主。SARS冠状病毒是造成2002-2003年SARS暴发的病原,造成全球8094人感染和774人死亡的重大疫情。已有的流行病学证据和生物信息学分析显示,野生动物市场上的果子狸是SARS冠状病毒的直接来源。虽然在世界各地包括非洲、欧洲和中国的蝙蝠体内均发现与SARS病毒相似的SARS样冠状病毒,但这些病毒均不能利用人和果子狸的ACE2(即人SARS病毒受体)作为受体,不是SARS病毒的近亲。石正丽研究员团队最新从中华菊头蝠分离的SARS样冠状病毒,与SARS病毒基因序列高度同源,而且可以利用人、果子狸和中华菊头蝠ACE2作为其功能受体,并且能感染人、猪、猴以及蝙蝠的多种细胞。这些实验结果为中华菊头蝠是SARS冠状病毒的自然宿主提供了更为直接的证据。该研究结果将于近期在Nature(doi:10.1038/nature12711)上发表。这也是该团队继2005年在Science上发表“蝙蝠是SARS样冠状病毒自然宿主”之后在此领域的又一项重大发现。研究人员同时认为:尽管蝙蝠携带多种病毒,但这些蝙蝠病毒传播到人的机会并不多。蝙蝠在自然生态中有很重要的作用,它们传播花粉,是害虫的天敌,从不主动攻击人类。保护蝙蝠等野生动物的生存环境是远离野生动物病原感染的最好方式。该研究得到基金重大项目“动物源病原体的发现及其对人类致病性研究”(项目批准号:81290050)和“973”等项目资助。

  • 【分享】研究称甲型流感病毒可由人传猪

    【分享】研究称甲型流感病毒可由人传猪

    据香港大公网报道,德国科学家发现甲型流感病毒不但可以由猪传人和人传人,也可以由人传猪。换言之,可能导致甲流全球大流行的因素又多了一个。弗里德里希勒夫勒动物卫生研究所的病毒学家在《普通病毒学杂志》(Journal of General Virology)上报告,他们在实验中使5只十星期大的幼猪感染人类品种的甲流病毒,并把它们与3只未受感染的猪放在同一个房间饲养。4天后,3只无毒猪全都染上了甲流。研究员指出,它们这样快受感染,反映人类有可能导致甲流在猪之间大爆发。 另外一个好消息是,5只与上述8只猪被放在同一个房间的鸡并没有染上甲流,可见暂时这种病毒不能传给禽鸟,也未与禽鸟身上微生物的基因混合。猪可以同时感染人类流感、禽流感和甲流(猪流感),科学界恐怕它们会成为流感变种的媒介。 H1N1仍是新病毒,人类对它尚未产生免疫力。目前它的致病性不算高,科学家最担心的是它将来变成厉害的品种。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/07/200907131708_159798_1613111_3.jpg[/img]

  • 【分享】流感病毒家族谱系研究获突破

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/05/200905041221_147965_1607864_3.gif[/img] 近来,从墨西哥暴发的人感染新的甲型H1N1流感病毒疫情,已经传播到多个国家,引起国际社会和公众的高度关注。其病原一开始被称为猪流感病毒。很多人对猪流感病毒、人流感病毒和近年来一直没有消停的禽流感病毒感到很困惑,它们之间到底存在哪些关系呢?近日,我国科研人员在这个重要问题上取得了重大突破,在国际上首次绘制了流感病毒两个重要基因的多样性全景图。通过这些全景图,人们可以准确定位任何一个流感病毒的毒株在流感病毒家族中的位置,从而为人类抗击这种病毒引起的人与多种动物疫病,包括当前人感染新的甲型H1N1流感病毒重大疫情,提供重要的技术支持。该项研究发表在国际知名学术刊物《公共科学图书馆综合》(PLoS ONE)上。据了解,流感病毒能够感染人、禽、猪、马以及一些海洋动物。流感病毒非常复杂,按照它表面的两个糖蛋白,流感病毒可以分为16个HA亚型和9个NA亚型,HA亚型和NA亚型的组合又形成数十个亚型,如H1N1、H3N2、H5N1等亚型。各亚型流感病毒因为时间、地理、宿主的不同以及不同毒株之间的基因“杂交”,形成了一个非常庞大而复杂的流感病毒家族。这使得准确界定某个流感病毒在家族中的位置,判定它的来龙去脉,非常困难。为此,迫切需要描述这个家族全貌的全景图,就像首次来北京旅游的人需要一张完整的北京市地图一样。然而,描绘全景图非常困难。2008年,中国动物卫生与流行病学中心研究人员陈继明带领一个团队,用了4个多月的时间,动用6台计算机,分析了GenBank中存在的23000个基因序列,同时参考了400多篇关于流感病毒的研究论文,在国际上首次描绘了流感病毒HA基因的全景图和NA基因的全景图。在技术上,这些全景图经过国际专家的两轮严格审查,新近发表在国际知名学术刊物PLoS ONE上。陈继明说:“作为一个流感病毒研究者,在国际上首次画出这样的全景图,此生已无遗憾,同时也非常高兴这个全景图已经在这次全球抗击人类出现的流感新疫情发挥了重要作用。”美国在公布这次北美毒株的序列后数小时内,陈继明的研究小组就准确地把它所有的基因都界定为猪流感病毒的基因,但是来自不同的猪流感病毒的基因,否定了国外有关方面认为北美毒株是禽流感病毒、猪流感病毒和人流感病毒的“杂合体”之说。陈继明的研究小组结论和美国疾病控制中心最早的学术报告,以及4月30日国际传染病学会公布的专家小组的分析结果是完全一致的。陈继明介绍:“有关方面之所以认为北美毒株是禽流感病毒、猪流感病毒和人流感病毒的‘杂合体’之说,就是因为他们参考的是一些‘局部图’,而不是全景图。借助这些全景图,专家还准确界定了中国近年来各个实验室分离到的猪流感病毒在家族中的位置,肯定了中国猪群中存在的一些猪流感病毒都是普通的猪流感病毒,从未发现北美的新毒株。这些结果为农业部准确研判疫情形势、确定猪群流感的监测重点地区以及研制有关的检测试剂提供了重要的参考依据。”据了解,应墨西哥等有关专家的邀请,陈继明研究组将公布他们在制作全景图过程中产生的一些详细而庞大的数据,以便为有关方面提供更具体的参考信息。(转自生物谷)

  • 美研究发现姜黄素可阻止病毒在细胞中复制

    美国乔治梅森大学研究人员最近发现,最为流行的香料姜黄不只是充满气味,而且它还有望抵抗破坏性的病毒。相关研究论文发表在《生物化学杂志》上。论文第一作者、乔治梅森大学国家生物防御与传染病中心研究助理教授阿瑟·纳拉亚南说,在姜黄中发现的姜黄素阻止潜在致命性的裂谷热病毒(Rift Valley Fever virus, RVFV)在被它感染的细胞中增殖。蚊子传播的裂谷热病毒(RVFV)是一种急性的导致发热的病毒,能够影响诸如牛、绵羊和山羊之类家畜和人。究其本质而言,姜黄素是一种广谱的阻止一系列病毒感染健康细胞的抑制剂。但是在这篇论文中,研究人员证实姜黄素可能干扰RVFV操纵人细胞从而阻止细胞对感染作出反应。他们发现姜黄素不仅在体外细胞培养物中显著性地抑制RVFV复制,而且也在小鼠模式动物中证实它能够有效地对抗RVFV感染。纳拉亚南正在将这种知识运用到对抗布尼亚病毒、委内瑞拉马脑炎病毒和包括HIV在内的逆转录病毒中。

  • 求文献《国外天然药物抗病毒研究简况》

    【序号】:1【作者】:蔡宝昌; 潘扬; 吴皓; 何亚维; 王天山;【题名】:国外天然药物抗病毒研究简况【期刊】:国外医学.中医中药分册【年、卷、期、起止页码】:1997年 03期 【全文链接】:http://cnki.hznet.com.cn/kns50/detail.aspx?QueryID=17&CurRec=1

  • 新研究找到艾滋病病毒易被攻破的弱点

    成功研发出有效疫苗完全可能,人类击败“世纪瘟疫”大有希望2012年09月12日 来源: 中国科技网 作者: 黄堃 李雯 综合新华社消息 美国和泰国研究人员10日在英国《自然》杂志网站上报告说,他们发现了艾滋病病毒外壳上一个易被攻破的弱点,这能够解释之前相关试验中一种艾滋病疫苗的有效性问题。这一发现有望大幅提升疫苗效果,给人类抗击艾滋病这一“世纪瘟疫”带来新希望。 几年前美国和泰国研究人员曾联手进行一个代号为RV144的艾滋病疫苗试验,结果显示这种疫苗能够帮助部分人避免感染艾滋病病毒,但它的有效性只有31%,这一问题让研究人员百思不得其解。 在本次研究中,研究人员对前述试验中一些参与者感染艾滋病病毒的情况进行了仔细分析,结果发现,艾滋病病毒的蛋白质外壳上一个名为V1/V2的地方是疫苗有效与否的关键。在那些注射疫苗且起到保护效果的人群中,疫苗会引起人体免疫系统对艾滋病病毒的这个部位进行攻击;而在那些注射疫苗但仍然感染了艾滋病病毒的人群中,他们感染的病毒多是在V2这个部位发生了变异。 研究人员因此认为,这个部位是艾滋病病毒易被攻破的弱点。据估计,只要艾滋病病毒的这个部位没有变异,注射疫苗可以使感染艾滋病病毒的风险降低80%。而对于那些这个部位产生了变异以掩盖自身弱点的艾滋病病毒,现在也可以更有针对性地研发新疫苗,针对这个弱点穷追猛打,帮助实现通过注射疫苗来有效控制艾滋病的梦想。 科学界早已认识到,研制疫苗是抗击艾滋病病毒最为有效的良方。但在人类发现艾滋病病毒后的30多年里,科学界进行了数十种疫苗的临床试验,数万名志愿者参与了试验,但大部分研究都以失败告终。而此次研究成果给了研究人员重新乐观的理由。 客观而言,一种疫苗具有降低不足三分之一感染风险的免疫效果,远未达到可以大规模进入临床应用的标准,有效疫苗应该至少能将感染风险降低50%。而本次发现有望将预防效果大幅提升,利用疫苗预防艾滋病将不再是梦想。这一成果表明,成功研发出有效的艾滋病疫苗完全可能,人类击败“世纪瘟疫”大有希望。 毫无疑问,艾滋病病毒复杂的变异性预示着人类对抗艾滋病的长期性、艰巨性和复杂性。尽管身体试图自我防御,但无法跟上病毒变异的速度。因此,美国杜克大学医学中心人类疫苗研究所所长巴特·海恩斯认为,有效的艾滋病疫苗必须能激发人体产生广谱中和抗体,这样病毒无论如何变异都将被抑制。(记者 黄堃 李雯) 《科技日报》(2012-9-12 二版)

  • 颠覆!将病毒直接转化为疫苗!Science报道北大最新研究成果,您怎么看?!

    北大药学院周德敏/张礼和研究团队在国家创新药物专项、基金委和国家973计划的支持下,以流感病毒为模型,发明了人工控制病毒复制从而将病毒直接转化为疫苗的技术,即在保留病毒完整结构和感染力的情况下,仅突变病毒基因组的一个三联码,使流感病毒由致命性传染源变为了预防性疫苗,再突变三个以上三联码,病毒由预防性疫苗变为治疗病毒感染的药物,并且随着三联码数目的增加而药效增强。这一“四两拨千斤”技术不仅使疫苗研发不再复杂,而且摆脱了对病毒生物学知识获得的依赖,并适用于几乎所有病毒。这一发现颠覆了病毒疫苗研发的理念,成就了活病毒疫苗的重大突破。这是一项不能太逆天的技术!在人工控制下,直接将病毒直接转化为疫苗,您怎么看?http://www.instrument.com.cn/webinar/news/d_7293.html

  • 夏天农残高危

    1高危季节一般来说,夏季是蔬菜农药残留量超标的高危季节。这是因为气温高,蔬菜中虫害增多,菜农不得不打农药。而且夏季蔬菜生长快,往往农药还没降解,菜就采收上市了。2.夏季叶菜类是农药残留量超标的高危品种,以韭菜,青菜,鸡毛菜,芹菜,小白菜,油菜为主。还包括卷心菜,芥菜。以上来源于网络。其实瓜类是不是农残一般比较少?还有番茄?还有农残残留跟天气关系如何?例如温度湿度,雨天晴天?

  • 【金秋计划】病毒性肺炎中医病证结合动物模型研究进展

    病毒性肺炎(viral pneumonia,VP)是由病毒入侵呼吸道上皮和肺泡上皮所致的肺间质和实质性急性炎症病变。全年都可发生,冬春季高发。易感人群多为2岁以下婴幼儿、65岁以上老人及孕产妇等。临床常见的VP病原体包括流感性病毒、冠状病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒及鼻病毒等[1-2]。腺病毒肺炎是常见的小儿VP之一[3],主要表现为局灶或融合性肺坏死性浸润及支气管炎;呼吸道合胞病毒肺炎以肺间质及毛细支气管病变为主[4],胸片上可见斑点状影,常伴有不同程度的肺气肿;流感病毒肺炎常可侵犯中枢神经系统或循环系统,以肺间质病变为主;甲型流感病毒肺炎较乙型流感病毒肺炎症状更严重,胸部X光片显示片状高密度影,扩散迅速,常有肺间质受累,多伴有胸腔少量积液,病灶吸收后可残留纤维灶[5];冠状病毒肺炎以发热、干咳、乏力为主,可伴有消化道等症状或无症状[6];麻疹病毒肺炎多表现为呼吸道卡他、持续发热等,并出现不同程度的疹退后脱屑、特征性皮疹、色素沉着、口腔科氏斑等临床表现[7];鼻病毒主要感染气道上皮细胞,可引起普通感冒、肺炎、支气管炎和慢性呼吸道等多种疾病,是临床常见的呼吸道感染病原体[8]。然而,VP作为当前临床常见的一种社区获得性肺炎,在西医治疗方面一直缺乏特异性药物。相反,我国传统中医药在治疗VP过程中则拥有悠久的历史和成功经验。从中医角度看,VP属“风温”和“温病”。根据临床资料发现,清肺排毒汤、麻杏石甘汤、化湿解毒方等是临床上最常用于治疗VP的中药汤剂,且疗效显著[9]。其作用机制可能与其调控机体免疫平衡、调控体内微生态、抑制炎症反应、抑制肺纤维化、保护组织及直接抗病毒活性有关。 病证结合动物模型是一种重要的中医药疾病动物模型[10-12],通过对证候发生发展的机制研究,可很好地展现中医“证”的不同发展阶段特征,体现疾病发展的中医病因病机,已成为中医证候研究动物模型的必然趋势,为中医基础向临床治疗的转变提供了理论依据,有利于中药筛选及方剂作用机制的深入研究,是中医药新药研发的重要途径。目前,病证结合动物模型在建模理念上已逐渐成熟,主要可划分为以下3种:(1)以中医理论为依据,中医病因病机为“证”,西医病因为“病”,构建同时具有“病”“证”2个特征的模型动物,这是一种中西医结合多因素造模理念;(2)在西医病态模式基础上观察中医病证,分别归纳疾病初期的证候发展特征及后期出现的典型中医证候,以此判断该疾病是否属于某种中医证型;(3)运用传统中医病因学方法对模式动物进行干预,通过一般状况观察、客观指标检测、常用方药反证等方法,初步建立动物证候模型,并寻找与之匹配的临床病证来进行验证,即在证候模型基础上探察西医疾病类型[13]。 目前现有的VP动物模型多为西医模型,对中医证候模型的研究还较为薄弱,不能反映中医辨证论治的特色。因此,本文对现阶段中医疾病动物模型及相关VP病证模型的建模方法、证型分类、证候研究和评价指标的研究现状进行了梳理,为建立符合中医辨证论治特点的VP动物模型提供参考。 1 VP病证结合动物模型的相关建模研究 1.1 实验动物选择 在选取实验动物时,要尽可能具有与人的相似性,并对各种治疗因子有较高的敏感性,以便能较好地模拟人类疾病症状。目前报道的VP造模动物包括Balb/c小鼠[14]、昆明小鼠[15]、美国癌症研究所ICR小鼠[16]、豚鼠[17]、叙利亚仓鼠[18]、人类血管紧张素转换酶II小鼠[19]、Wistar大鼠[20]、恒河猴[21]、雪貂[22]、树鼩[23]等。虽然部分动物如恒河猴、雪貂、树鼩的病情与人类极为类似,但造模成本高、技术难度大,尚未得到推广应用。目前临床上最常使用的中医证候造模动物仍为小鼠和大鼠,主要是由于其成本低,并且人们对其生活习性和制作方式也较熟悉。 1.2 证候的造模方法 目前公认的中医证候建模方法主要有3种,分别为西医病因病机法、中医病因病机法和病证结合法[24]。其中,病证结合法因稳定性、可操作性高、相对容易评价,且能够体现中医临床辨病与辨证相结合的特点,被认为是比较理想的造模方法[25-26]。表1归纳了3种造模方法各自的应用现状(文献研究举例)、造模依据、干预方法及优缺点。 1.3 VP中医证候学 中医大师根据中医辨证论治体系对VP的证候进行了论述,常见症状包括:发热、咳嗽、咳痰、精神乏力、鼻塞、头痛、流鼻涕、舌色红、苔黄、苔腻、脉滑、脉浮,这些是VP主要的舌象和脉象,可体现VP的中医证候特点,并且与《中医内科学》《温病学》中的相关描述基本相符。依据《中药新药临床研究指导原则(试行)》(2002年)[37]、《小儿病毒性肺炎中医诊疗指南》(2019)[38]及相关文献[39-40],VP的中医辨证分型主要包括风寒郁肺、风热郁肺、痰热郁肺、毒热闭肺、阴虚肺热、肺脾气虚、心阳虚衰和邪陷厥阴等,对不同证型的造模方法归纳见表2。 2 VP病证结合动物模型相关评价指标的研究 病证结合动物模型研究近年来得到广泛关注和应用,针对模型建模的系统评价指标是现在研究的主要方向。目前倾向于从2个层面展开研究:(1)将宏观表象和微观指标相结合,建立人与动物四诊转换模式;(2)强调结合有效经典方药进行反证。 2.1 宏观表征评价 中医辨证以望、闻、问、切为主要手段,以患者临床症状、体征为主要依据进行综合评价,而动物模型则需在动物宏观表象上寻找可供量化、判定的依据,如以模型动物体温上升为发热表现,耸毛或蜷卧为恶寒表现[57]。在脾虚为主的湿热证动物模型研究中,周祎青等[58]发现模型组小鼠表现出精神倦怠、不思饮食、反应迟钝、毛发黯淡等脾虚为主的湿热证症状,证实造模成功。此外,在情志研究中,动物的行为变化是重要评估指标。王枭宇等[59]通过评估多种经典的模型,如旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验等,发现行为学指标能够反映实验动物整体变化的特征,特别是能够反映动物心理情感变化。 需要注意的是,目前对动物模型的宏观判断标准多以人的证候为依据,人与动物在某些方面存在明显差异,同时某些主观因素如动物心理和情绪等变化,都会影响宏观表征结果的可靠性。 2.2 微观指标评价 微观指标能更直观、准确地反映动物机体状态,是判断VP病证结合是否成功的重要依据。 2.2.1 一般情况观察 观察动物情绪、活动、体毛、排泄、饮食、呼吸、体质量、肛温及死亡情况等。如将大鼠置于寒冷条件下连续6 d造模,表现出恶风寒、弓背毛松、打喷嚏、流鼻涕、食欲下降、饮水增加、体温升高、体质量下降及血压升高等明显风寒感冒症状。该症状符合中医的风寒表证[41]。 2.2.2 肺脏指数的测定与肺脏损伤程度的判定 吴莎[60]提出用肺指标、肺损伤程度来评价造模疗效,结果证实病毒感染后小鼠肺部炎症反应加剧且肺指数升高。刘珊宏等[61]采用风扇吹风联合体表降温7 d的方法构建风寒犯表的太阳病小鼠动物模型,发现小鼠造模后体质量显著下降,肺指数显著升高,脾指数显著下降。同时肺部出现明显病变,表现为局部有代偿性空泡、局部出血、肺间质增生、血管壁增厚,嗜中性粒细胞浸润等。杨进等[57]给小鼠滴鼻感染仙台病毒构建风热模型,发现感染病毒8 h内小鼠肺部指标无显著变化,8 h后肺内可见轻度病灶,12 h后肺泡壁厚度显著增加,大量单核细胞和淋巴细胞浸润,说明病证已经从表到里,证实仙台病毒在小鼠滴鼻后的4~12 h可视为类表热证阶段。 2.2.3 炎症因子 近年来关于病毒诱发细胞因子释放及对病毒感染的影响研究结果表明肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是介导炎症反应的重要介质,可促进TNF-α分泌,加剧炎症发生[62-63]。王晓萍[64]采用人工气候箱、高脂饮食、甲型H1N1流感病毒滴鼻法等复制蒿芩清胆汤动物模型,发现病毒感染后TNF-α和IL-6均异常增高,同时死亡率、肺组织病理改变等结果提示模型组气道炎症反应处于持续状态,经蒿芩清胆汤治疗后小鼠肺组织中炎症因子水平显著下降,且可显著降低肺炎的发生,提示蒿芩清胆汤可能通过多靶点调控机体促炎和抑炎平衡;刘珊宏等[61]发现风寒犯表太阳病小鼠模型肺部炎性因子TNF-α、IL-6及IL-1β的表达显著增加;Wan等[65]发现寒冷造模后大鼠血清炎症因子TNF-α、L-1β、IL-6水平显著增加。 2.2.4 免疫功能 呼吸道病毒感染及其发病机制与机体的免疫状态密切相关[66]。白细胞分化抗原4阳性(cluster of differentiation 4+,CD4+)/CD8+、辅助性T细胞1(T helper cell 1,Th1)/Th2是人体内重要的免疫细胞[67],而在动物模型中存在细胞免疫水平显著降低、免疫失衡现象。CD4+/CD8+ T细胞失衡反映了病毒感染导致的机体免疫损伤,Th1/Th2(γ干扰素/IL-4)失衡反映了内、外环境因素和病毒感染综合因素共同作用下的机体应激状态。从微观上看,CD4+/CD8+的值倒置,Th1/Th2细胞因子偏向Th1,使细胞免疫成为优势而导致肺脏损伤,加重疾病,会对证候的发展方向产生影响。通过湿热环境+流感病毒构建流感病毒湿热证模型,采用蒿芩清胆汤能逆转湿热环境和病毒感染综合作用引起的CD4+/CD8+的值下降。蒿芩清胆汤治疗6 d后湿热证模型大鼠外周血γ干扰素/IL-4水平显著高于对照组,表明蒿芩清胆汤具有调节大鼠T淋巴细胞亚群、Th1/Th2平衡、提高抗病毒能力的作用[68]。综上,蒿芩清胆汤抗病毒免疫损伤的机制可能是通过上调细胞免疫功能,使CD4+/CD8+和Th1/Th2重新平衡从而减轻应激状态[69]。 2.2.5 水液代谢 水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一种能特异性转运水分的蛋白。是人体对水液代谢调节的关键因素[70]。迄今共发现13种AQPs蛋白,其中主要体现在肺部的以AQP1、AQP5为主。肺脏中AQP1表达下降可引起气道上皮细胞分泌增多,促进黏蛋白5ac在肺脏中的表达,从而导致气道炎症的加重,而炎性介质分泌增多,纤毛和杯状细胞比率失衡、肺部水分代谢失衡等进一步加重炎症性水肿[71]。AQP5在肺组织水代谢稳态中发挥重要作用,AQP5功能失调是导致肺损伤的重要原因[72-74]。AQP1、AQP5的表达在造模后免疫组化数值和光密度均有明显提高。如在采用环境+膳食+诱发因素+生物感染因素复制湿热证病毒肺炎动物模型中,模型组大鼠AQP1、AQP5免疫组化数值较对照组显著增高,光密度增加。与模型组对比,甘露消毒丹组AQP1蛋白表达显著降低,说明甘露消毒丹治疗湿热证型病毒性肺炎的作用途径之一是通过影响炎性相关的AQP1,加快肺泡内液体的清除、减轻肺组织的水肿程度,抑制湿热证病毒性肺炎模型的炎性反应来实现的[75]。 2.2.6 血脂代谢 VP发病的内因与患者的饮食习惯密切相关,嗜食肥甘厚味,酿生痰浊从而造成了脾胃的运化功能失调,临床上血脂异常通常与其饮食密切相关,因此,湿邪与血脂异常间的关系亦受到广泛关注。有研究采用环境+膳食(喂饲高脂肪食物)+诱发因素+生物感染性因素的方法建立湿热证病毒肺炎动物模型,发现模型小鼠血清中的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇显著增高,高密度脂蛋白胆固醇显著下降,且存在脂代谢异常,证实了饮食失调是引起内湿的重要因素[69,76]。 2.2.7 Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)介导的信号通路 TLR家族在细胞表面或细胞内表达,以模式识别形式与多种病原分子结合激活固有免疫应答,是连接天然免疫与获得性免疫的桥梁,在抵御病原体感染方面具有关键作用[77-82]。 潘沅[69]采用环境+高脂膳食+生物感染性因素的方法复制湿热证动物模型,研究发现,TLR2可以促进下游核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的过度活化,导致大量炎症因子和细胞因子的产生,造成机体自身免疫损伤。而ig蒿芩清胆汤后,小鼠腹腔巨噬细胞中的TLR2受体及其下游NF-κB分子的表达显著降低,表明蒿芩清胆汤可能通过干预TLR2/NF-κB信号转导通路调控细胞因子的产生,从而减少机体自身炎症因子造成的免疫损伤。 2.3经典方药反向验证 中药配伍要遵循“方从法出、法随证立”的原则,所选用的药和方药应与所用的证候密切相关。即在方剂学理论体系下,所选药物或方剂与其主治的证要有较强的相关性。这样可以判断证候是否复制成功。当前,VP病证结合动物模型反证方剂主要集中在中医经典名方和经验方,有麻杏石膏汤、参附龙牡救逆汤、宣白承气汤、三仁汤、蒿芩清胆汤、甘露消毒丹、茵陈蒿汤和龙胆泻肝汤等加减方剂。这些反证方剂在治疗的原则上包含了疏风解表、清热解毒、清化痰热、宣肺开闭、补气养阴、清肺扶正等配伍特点。用一些代表方剂对动物模型进行干预后,动物的临床症状和各项客观指标均得到了显著的改善。汤朝晖等[43]以清热化湿(蒿芩清胆汤)、辛凉透表(银翘散)、益气固表(玉屏风散)为代表的3个治法对风热型流感VP小鼠模型进行干预,均取得较好疗效,提示造模成功。 3 结语与展望 病证结合动物模型是联系中医基础研究与临床应用的重要纽带。中医药基础理论是中华民族几千年同疾病抗争的结晶,在防疫治疫方面积累了丰富的经验[83],近年来,病毒性新发呼吸道传染病全球频发,而中医药在治疗VP等疫情防控中发挥了显著优势和关键作用,VP病证结合动物模型也开始受到越来越多的研究和探索,近年来发展较快。但另一方面,尽管VP动物模型研究在证候模型建模方法等方面已有很多创新,但仍然存在一些难点问题需要和重点关注。 首先,目前VP证候模型的造模方法还很不完善。如风寒郁肺[41]、肺脾气虚模型[52-53]中常使用病因建模,但却在造模时未与病毒相结合,如何使用病毒来复制风寒郁肺、肺脾气虚模型可能是未来的研究方向;目前诸如痰热郁肺模型在细菌性肺炎中有较成熟的造模方法,心阳虚衰模型则多用于冠心病[55]、心衰[84]等,而尚未有关于痰热郁肺模型[45]、毒热闭肺模型、心阳虚模型、邪陷厥阴模型在VP中的造模方法和应用报道,如何借鉴其他病证构建VP病证结合模型也是后续需要重点关注的难题;VP阴虚肺热模型[39]目前还常用单因素造模方式,而单因素的改变难以复制理想的病证结合模型,存在齐同性差的弊端;在西医造模基础上施加中医证候干预因素的造模方法,亦无法很好地反映病证间的因果关系,无法准确识别疾病主证类型,未来基于证候建模的疾病诱发因子的引入有望成为解决这一难题的重要思路。 其次,实验动物的选择和模型评估技术也是目前制约VP病证结合模型研究的主要难点。目前常用的大鼠、小鼠在某些结构、功能、代谢和疾病表征方面尚不能很好地模拟人类病证特点,同时模型评估指标尚无统一规范,且因动物和人类疾病的差异性,很多动物模型无法直接应用于人类证候表征,而微观指标由于存在“一证多方”及多个证候叠加等现象,均给评估带来了巨大困难。 中医证候研究是一个复杂的过程,建立病证结合动物模型要以中医药理论为指导,与现代医学的理论方法相结合,融合多学科知识,从基因组、蛋白质组学、代谢组学、生物信息学等多层次进行深入研究[85-86]。虽然VP病证结合动物模型尚处于不断探索阶段,但随着新知识、新技术的不断融入和创新,相信不久的将来能够得到迅速发展和完善,更好地反映中医“证”的本质,为推动中医药现代化与国际化做出重要贡献。

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    病毒与宿主免疫系统的关系就像罪犯与警察。病毒必须寄生在宿主细胞中,宿主细胞为了应对病毒的感染,会激活免疫系统来杀伤病毒。病毒为了自己的存活,进化了多种逃逸免疫系统的机制。近年来,免疫细胞代谢的调控成为研究热点,安捷伦Seahorse技术能够实时检测代谢状态,在免疫学研究的各个方面都有着广泛的应用。本次讲座将为大家介绍Seahorse在抗病毒免疫研究中的应用。[size=18px][b]讲师介绍:[/b][/size][b]范家栋[/b]:武汉大学生命科学学院博士,纽约大学、美国国立健康研究所博士后。博士阶段师从吴旻教授,研究方向为表观遗传学与细胞信号转导通路。博士后阶段研究膀胱癌、乳腺癌的分子机制。现任职于安捷伦科技(中国)有限公司,担任Seahorse细胞能量代谢分析系统的技术支持。[size=18px][b]会议时间:[/b][/size]2月26日 10:00[b][size=18px]报名地址[/size][/b]:[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10399.html[/url]

  • 【分享】“病毒电池”

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    [color=#cc0000][b]到目前为止,人来还没真正研究清楚病毒是如何形成的,当前主要有三种学说,解释病毒的进化。[/b][/color][color=#cc0000][b]一、病毒起源于自主复制的RNA分子 [/b][/color][color=#cc0000][b]核糖核酸(RNA)具有自主复制的信息和能力,并研究发现RNA分子具有酶的催化能力,这促使RNA为病毒的起源学说变得更具说服力。RNA分子至少具备下列可以进行复制和进化三种相关功能:1、核糖核酸酶的活性 2、能自我拼接去掉内部的核酸序列(核酸) 3、有实验表明,以RNA作引物可以合成依赖于模板的多聚胞嘧啶核酸。 [/b][/color][color=#cc0000][b]二、病毒起源于宿主细胞中的DNA或RNA成分的学说 这个学说可以解释所有病毒的起源:DNA病毒起源于质粒或转移因子,反转录病毒起源于反转座子,RNA病毒起源于自主复制的mRNA。 该学说的核发心内容是:病毒是正常的细胞成分获得了自主复制的能力,进化而来的。[/b][/color][color=#cc0000][b]三、退化性起源学说 该学说认为病毒是细胞内寄生物的退化形式。在细胞内,这类寄生物可以在不影响其生存的情况下逐渐丢失部分生物学功能。它们所必需保留的功能是具有可进行自主复制的DNA复制原点(顺式元件)、可以对复制进行调控的反式调控蛋白,以及能与宿主生物合成及复制系统相互作用的顺式和反式功能。最终,就可产生一种专性细胞内寄生的DNA分子或质粒。[/b][/color]

  • 武汉病毒研究所在防龋粘膜疫苗研究中取得新进展

    中科院武汉病毒研究所粘膜免疫学科组在防龋疫苗研究中又取得新进展。该学科组继Journal of Dental Research(JDR)2012年91卷第3期正式发表龋齿疫苗粘膜佐剂研究进展后,又一防龋疫苗研究结果即将在最新一期(JDR,2012年91卷第10期)正式发表。 龋齿是人类最常见的细菌性慢性感染疾病之一,主要由变形链球菌附着和定植于牙齿表面,从而导致牙齿局部脱矿和钙化组织的破坏而形成。龋齿的发病率很高,可以发生在人的任何年龄段,给患者带来难以忍受的疼痛并严重影响身体健康。武汉病毒所鄢慧民研究员带领的研究团队致力于细菌鞭毛素蛋白(flagellin)相关的粘膜佐剂研究和应用,通过该蛋白与防龋DNA疫苗联合鼻腔免疫,成功诱导了较高水平的特异性血清抗体应答和唾液分泌型IgA应答,有效抑制了口腔变形链球菌的定植和龋齿的形成,证明了重组鞭毛素蛋白是一种有效的防龋粘膜免疫佐剂(JDR March 2012,vol. 91 no. 3,pp.249-254)。 在此基础上,该学科组采用了融合蛋白表达技术,将鞭毛素蛋白佐剂和龋齿疫苗抗原PAc融合表达为一个既包含粘膜佐剂又包含疫苗目标抗原的单个重组蛋白,并通过鼻腔粘膜免疫诱导产生了高效的特异抗体应答,尤其是口腔特异IgA抗体应答。实验证明,8.5微克剂量的重组蛋白疫苗滴鼻免疫即可让大鼠患龋程度降低64.2%,免疫保护效应比以往各种防龋疫苗大大提高,成为一个具有应用价值的新型防龋粘膜疫苗(JDR October 2012,vol.91 no.10 pp.941-947)。 该研究得到了国家科技支撑计划(No. 2007BAI28B04)的支持。 论文链接http://www.cas.cn/ky/kyjz/201209/W020120919663882902083.jpg图:融合蛋白flagellin-rPAc疫苗滴鼻免疫大鼠后免疫应答效应和抗龋效应

  • 基于阻抗方法实时无标记细胞分析系统--肿瘤免疫治疗以及病毒学研究中的应用

    [font=&][size=16px][color=#343a40] 肿瘤免疫治疗是一种利用人体免疫系统来战胜肿瘤的治疗方案。成功与否的关键就在于免疫系统能否被激活到足够去特异性地杀死肿瘤的程度。在临床实验前,人们需要借助体外实验先行评估治疗方案的效力。 Axion BioSystems公司革命性地推出了使用生物电感应技术的Maestro Z/ZHT平台,完美具备评估体外效力的必要条件。它能在免除标记物影响的同时,在长达几天的时间中,以非侵入的方式对细胞的健康和活动开展监测,并自动且实时地获得多至384个样本的完整实验信息。其秘诀就是通过埋设在微孔板底部的高灵敏度电极来进行生物电阻抗的测试。这种技术能够追踪微小的细胞变化,从而能够揭示出远低于其它技术最低检出限的生物学信息。[/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z/ZHT评估T细胞对胶质母细胞瘤的杀伤效力(car T治疗):[/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]人体免疫系统中的效应T细胞,对肿瘤细胞有着高特异性和与生俱来的细胞毒性,在未来的脑胶质瘤治疗中被人们寄予很高的期望。Maestro Z的阻抗测试有着高灵敏、无标记及无损的特点,能够实时监测肿瘤细胞的增殖和T细胞介导的细胞溶解等过程,在体外评估免疫治疗的效价方面有着突出的优势。美国乔治亚大学的科学家们借助Maestro Z平台,对不同条件活化后的T细胞,开展了恶性胶质母细胞瘤杀伤效力的对比评估。详情点击:[url=http://www.axionbio.cn/page_1.html]CAR-T治疗 (axionbio.cn)[/url][/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z 评估药物对COVID-19病毒感染力的中和作用:[/b][/color][/size][/font][color=#343a40][b][font=&][size=16px]病毒学研究的重点就在于开发抗病毒药物用于预防和治疗病毒感染。其中的挑战在于筛选到能够选择性抑制病原体复制并对宿主没有损害的化合物。病毒导致的细胞病变效应(CPEs)常常和靶细胞在形态、胞间贴合度、附着力及活力等方面的变化相关联。研究者可在体外联合使用宿主细胞、病原体和药物来模拟三者在体内的互作,借助 Maestro Z 定量CPE引起的阻抗变化。轻松实现在筛选药效的同时,完成安全性的初步评沽。[b]详情点击:[/b][url=http://www.axionbio.cn/page_4.html]page_4 - (axionbio.cn)[/url][/size][/font][/b][/color][font=&][color=#343a40][b][font=&][/font][/b][/color][/font]

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