分子生物检测

奶粉中病源微生物的分子生物学检测

谁能帮我提供各种仪器的维修培训信息,我想参加培训,最好是生命科学,分子生物和分析检测方面的仪器,谢谢

本书广泛汇集了生物化学与分子生物学的一些重要技术和方法中常用的试剂、反应条件等方面的资料，主要以表或图的形式表达，便于读者在进行研究或实验时参考使用。一些原需繁琐计算的数据，从表格或图中随手可以查到。由于本书主要采用图和表的方式，因此与同样篇幅的图书相比，信息量大。为了便于非生物化学与分子生物学工作领域的读者理解，书中对一些基本概念也作了简单的介绍。这类书国外也不多见、90年代出版的手册，仅有LABF八X系列。其中已出版的有分子生物学、细胞生物学、细胞培养、生物化学、酶学及全白质等，在国内图书馆还很少见到。链接：：：http://www.instrument.com.cn/download/Paper_detail.asp?id=30917

检验大纲目录《分子生物学检验技术》教学大纲1第一章 绪论（1学时）1第二章 原核生物基因组与病毒基因组(3学时)1第三章 真核生物基因组（2学时）2第四章 癌基因与抑癌基因（2学时）2第五章 蛋白组与蛋白组学（2学时）2第六章 核酸的分离与纯化（4学时）3第七章 DNA重组技术（6学时）3第八章 聚合酶链式反应及其在基因诊断中的应用（6学时）4第九章 核酸分子杂交技术与应用（6学时）5第十章 蛋白质分析技术（3学时）6第十一章 生物芯片技术与应用（3学时）6第十二章 细胞凋亡与检测技术（4学时）7人体寄生虫学及检验8临床免疫学及免疫学检验10教学内容11《临床微生物学和微生物检验》教学大纲19绪 论21第一篇 临床微生物学导论21第一章 微生物与感染21第二章 细菌感染的实验诊断22第三章 真菌感染的实验诊断23第四章 病毒感染的实验诊断24第二篇 临床细菌学25第五章 细菌的分类与命名25第六章 球菌25第七章 肠杆菌科26第八章 弧菌科29第九章 非发酵革兰阴性杆菌29第十章 苛养菌及人兽共患病原菌30第十一章 革兰阳性需养杆菌30第十二章 棒状杆菌属31第十三章 分枝杆菌属32第十四章 放线菌属与诺卡菌属33第十五章 厌氧菌33第十六章 弯曲菌属与螺杆菌属35第十七章 螺旋体35第十八章 支原体、衣原体、立克次体36第三篇 临床真菌学37第十九章 真菌的分类与命名37第二十章 病原性真菌37第四篇 临床病毒学38第二十一章 病毒的分类与命名38第二十二章 呼吸道病毒38第二十三章 肝炎病毒39第二十四章 逆转录病毒40第二十五章 肠道病毒41第二十六章 急性胃肠炎病毒42第二十七章 黄病毒42第二十八章 出血热病毒43第二十九章 疱疹病毒44第三十章 其他病毒45第三十一章 朊粒45第五篇 微生物检验46第三十二章 临床感染症病原体的检验46第三十三章 医院感染的实验诊断48第三十四章 抗微生物药物和敏感性试验48第三十五章 微生物商品化、自动化检验50第三十六章 微生物检验的质量控制50《临床生物化学和生物化学检验》教学大纲52第一章 绪论（1学时）52第二章 临床生物化学实验室基本技术要求与管理（７学时）52第三章 血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱（5学时）52第四章 糖代谢紊乱（5学时）53第五章 血浆脂蛋白及其代谢紊乱（5学时）54第六章 诊断酶学（5学时）54第七章 微量元素与维生素的代谢紊乱（3学时）55第八章 体液平衡紊乱（10学时）57第九章 肝胆疾病的生物化学与实验室诊断（５学时）58第十章 肾脏疾病的生物化学诊断（6学时）59第十一章 心脏疾病的生物化学标志物(5学时)59第十二章 胃肠胰疾病的临床生物化学(2学时)60第十三章 骨代谢异常的生物化学诊断（3学时）61第十四章 红细胞代谢紊乱（3学时）61第十五章 内分泌疾病的生物化学诊断（5学时）62第十六章 神经、持神疾病的生物化学（2学时）63第十七章 妊娠的临床生物化学（2学时）64第十八章 体液肿瘤标志物（３学时）64第十九章 治疗药物浓度监测（2学时）65第二十章 自动生物化学分析仪的应用与原理（3学时）66第二十一章 临床生征化学方法的选择、建立和评价（５学时）66第二十二章 遗传性疾病的生物化学与分子生物学诊断（５学时）67第二十三章 实验室信息系统（２学时）68第二十四章 临床生物化学技验质量控制（５学时）68第二十五章 临床生物化学实验室数据的作用和有效使用(２学时)69《临床血液学和血液学检验》教学大纲70第一、二章 血液学概述和发展史与临床的关系70第三章 造血检验的基础理论70第四、五章 造血检验的基本方法及临床应用70第六、七章 红细胞检验的基础理论和基本方法71第八章 红细胞检验的临床应用71第九、十章 白细胞检验的基础理论及基本方法73第十一章 白细胞疾病检验74第十二、十三章 慢性白血病和少见类型白血病75第十四章 血栓与止血检验的基础理论77第十五、十六章 出血性疾病及其检验77第十七、十八章 血栓性疾病及其检验78《临床检验基础》教学大纲79绪 论79血液标本采集和抗凝剂选择80血液一般检验80血栓和止血一般检验80尿液生成和标本采集及处理80尿液理学和化学检验81尿液沉渣显微镜检查81尿液分析仪及其临床应用81脑脊液检验81浆膜腔积液检验82胃液和十二直肠引流液检验82粪便检验82生殖系统分泌物检验82痰液和支气管肺泡灌洗液检验83羊水检验83脱落细胞检查基本知识83脱落细胞检查技术和临床应用评价83各系统脱落细胞检查84细针吸取细胞学检查84

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我想建一个分子生物学实验室需要那些设备？

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结构分子生物的发展梁栋材 (中科院生物物理所，生物大分子国家实验室，北京，100101) 伦琴发现X射线后的一百年间，X射线在物质结构研究上立下了永不磨灭的伟大功绩。1912年劳埃发现晶体的X射线衍射，开创了晶态物质结构的新纪元。仅隔了22年Bernal和Crowfoot在1934年就成功地拍摄到第一张蛋白质 (胃蛋白酶) 单晶体的X射线衍射照片。事隔21年后的1953年Perutz发现了同晶置换法可以解决生物大分子晶体结构测定中的相位问题，从而蛋白质晶体学开始踏上自己发展的伟大历程。在1957年和1959年Kendrew和Perutz分别获得了肌红蛋白和血红蛋白的低分辨率 (6?和5?) 结构，在此期间Watson和Criek共同建立了DNA双螺旋的结构模型。他们的伟大成就为分子生物学奠定了基础。从1957年到1967年的十年里，随着溶菌酶结构之后，胰凝乳蛋白酶A、核糖核酸酶、核糖核酸酶S和羧肽酶也分别获得了高分辨率的结果，表明蛋白质晶体学已经成为一门成熟的学科。从六十年代末进入七十年代，蛋白质晶体学从对生物大分子三维结构测定迈入生物大分子三维结构与其生物学功能之间的关系研究，从而它既是分子生物学研究的有力的重要手段，同时也开始为结构分子生物学的建立和发展历程创造着条件。生物大分子发挥其生物学功能必需具备：(1) 稳定的特征的三维结构，(2) 其三维结构在各个水平上的运动。 随着学科的交叉渗透和迅速发展，一个极其重要的分支学科--结构分子生物学正在高速发展，并已成为当前生物学中的一个重要前沿学科。结构分子生物学是结构生物学中的一个最重要、最活跃的研究层次，它是在分子层次上从结构角度特别是从三维结构的角度研究和阐明当前生物学中各个前沿领域的重要学科问题。结构分子生物学是一个包括生物、物理、化学和计算数学等多学科交叉的前沿，其中心任务就是生物大分子的结构与其生物功能关系的研究。 结构分子生物学对生物大分子 (包括多亚基、多分子的复合物及复杂的复合体) 三维结构及其运动的研究手段主要有：X射线晶体衍射--蛋白质晶体学，二维及多维核磁共振谱，电子晶体学及电镜三维重组，中子衍射，其他包括应用傅里叶变换技术的各种谱学方法。他们都各有自身特有的优越性和不足。然而，无论从已测定生物大分子三维结构的数量上、精确度上或其发展潜力上，X射线单晶衍射方法--蛋白质晶体学--至今及可见的将来仍将占统治地位，都是其他手段不可相比的和不可代替的生物大分子三维结构研究手段。八十年代迅速崛起的蛋白质工程及药物设计已充分显示蛋白质晶体学方法是处于不可取代的重要地位，也表明结构分子生物学是生物高技术应用研究的重要前提和保证。 在结构分子生物学领域中由于学科上的重大突破和杰出成变而荣获诺贝尔奖金的科学家，前后有：F. H. C. Crick和J. D. Watson (1962年生理与医学奖)，M. F. Perutz和J. C. Kendrew (1962年化学奖)，D. C. Hodgkin (1964年化学奖)，A. Klug (1982年化学奖)和R. Huber (1988年化学奖) 等，他们都是蛋白质晶体学家。 当前结构分子生物学在国际上的发展趋势有如下几个方面的特点： 以蛋白质为主要手段的生物大分子三维结构测定在高速度发展。 结构分子生物学的迅速兴起和发展，它在近些年来的生物物理学研究中已经毫无疑问地占据了主流的位。 结构分子生物学的研究成果越来越受到生命科学各个领域的重视和引用。 国际上很多难度高、意义重大的三维结构均是以蛋白质晶体学手段在近几年突破的。 结构研究已由单一分子进入研究分子之间相互作用的复合物和分子体系的结构。 蛋白质晶体学研究从生物大分子静态 (时间统计) 的结构分析开始进入了动态 (时间分辨) 的结构研究及力学分析。 技术和方法高速发展。 基础研究不断深入与扩展的同时，应用研究在迅速发展。 激烈的竞争机制已打破了传统的学院工的研究体制和格局。

[font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：ZJ2024-QBJ03016项目名称：分子生物检测试剂采购项目采购方式：竞争性谈判预算金额：24.900000 万元（人民币）最高限价（如有）：24.900000 万元（人民币）采购需求：采购分子生物检测试剂一批，具体详见采购文件。合同履行期限：18个月。本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无3.本项目的特定资格要求：供应商具有国家行政主管部门颁发且在有效期内的《药品经营许可证》。[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间：2024年03月06日 至 2024年03月07日，每天上午9:30至12:00，下午14:00至16:30。（北京时间，法定节假日除外）地点：成都市高新区盛安街401号凯旋中心B座19楼1909号或邮箱方式：①现场获取：经办人员当场提交以下资料：供应商为法人或者其他组织的，只需提供单位介绍信、经办人身份证复印件加盖公司鲜章；供应商为自然人的，只需提供本人身份证明。 ②邮箱获取：供应商将第①条所述报名资料的扫描件、文件获取登记表+介绍信扫描件（请自行网上下载打印表格并手填）、微信付款截图（微信收款码请自行网上下载，付款时请备注单位名称）发送至邮箱zhongjiuzb@163.com，邮件名称为单位名称+项目名称，邮件收到时间须在报名期间每天下午16：30点之前，资料不全或错误或下午16:30点之后收到的邮件将不予接收。开标当天请将相应材料原件交招标代理机构留存。 注：以上如未上传附件请将第①条所述报名资料发送邮箱后获取格式。售价：￥300.0 元（人民币）[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间：2024年03月11日 10点30分（北京时间）地点：成都市高新区盛安街401号凯旋中心B座1909号[font=inherit]五、开启[/font]时间：2024年03月11日 10点30分（北京时间）地点：成都市高新区盛安街401号凯旋中心B座1909号[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font]无[font=inherit]八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：成都市青白江区疾病预防控制中心地址：四川省成都市青白江区政府南路65号联系方式：丁老师、028-833068602.采购代理机构信息名 称：四川中久招标代理有限公司地　址：成都市高新区盛安街401号凯旋中心B座1909号联系方式：梁女士、028-613839893.项目联系方式项目联系人：梁女士电　话：　　028-61383989

分子生物学技术在水产动物中的研究与应用注：全文见附件。有用到的鼓掌不要都做伸手党

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。 1.冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2.培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。 3.恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。 4.水浴锅：用于保温并进行各类实验。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。 5.烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。 6.超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。 7.蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。 8.滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。 9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。 10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器？ 1. 冰箱： 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱。 最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

我们实验室要购买一批分子生物学实验的仪器，如PCR仪,冷冻高速离心机，电泳系统，凝胶成像系统，超纯水仪，高压灭菌锅等仪器，请大家给点意见，我的邮箱是icecream198108@163.com [em52]

生物化学与分子生物学专业词汇18000个（很给力），下载请回帖哦^_^

[font=宋体]随着生物技术的飞速发展，生物安全问题日益凸显。为了确保人类健康与环境安全，生物安全检测服务应运而生，成为一道重要的防线。本文将介绍生物安全检测服务的背景、意义、技术方法和应用领域，并探讨其发展趋势和前景。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]一、背景与意义[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]生物安全检测服务旨在预防、检测和监控生物危害，保护人类健康和环境安全。随着生物技术的广泛应用，新型病原菌、转基因生物等不断涌现，给人类带来潜在风险。因此，生物安全检测服务对于防范和控制生物风险具有重要意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、技术方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]分子生物学技术：利用分子生物学技术对病原菌进行基因水平检测，包括基因芯片、[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]等。这些技术可快速、准确地检测出病原菌，为防控措施提供科学依据。[/font][/font][font=宋体]免疫学技术：通过抗体检测和抗原检测，对病原菌进行特异性识别，具有灵敏度高、操作简便等优点。[/font][font=宋体]生物传感器技术：利用生物传感器对生物危害进行实时监测，具有快速、便捷的优点，可实现连续监测和自动化分析。[/font][font=宋体]数据分析技术：通过对大量数据的收集和分析，发现病原菌的传播规律和预测未来趋势，为防控决策提供数据支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、应用领域[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]食品工业：在食品生产过程中，对病原菌进行严格检测，确保食品安全。[/font][font=宋体]医学领域：在医疗过程中，对病原菌进行监测和防控，保障医护人员和患者的健康。[/font][font=宋体]环境监测：对自然环境和养殖场等重点区域进行病原菌监测，防止病原菌扩散。[/font][font=宋体]进出口检验检疫：对进出口货物进行病原菌检测，防止外来病原菌入侵。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、发展趋势和前景[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着科技的不断进步，生物安全检测服务将朝着更加快速、准确、自动化的方向发展。未来，人工智能和大数据技术的应用将进一步优化生物安全检测服务体系，提高监测预警能力。同时，随着全球气候变化和生态系统的改变，新型病原菌的出现和传播将更加频繁，因此生物安全检测服务还需不断加强和完善，以应对未来挑战。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了经[/font][font=Calibri]CNAS[/font][font=宋体]认证的实验室，并且拥有生物安全二级实验室，已在北京市备案，该实验室严格按照[/font][font=Calibri]CNAS[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]GLP[/font][font=宋体]规范进行设计及管理。团队成员具备扎实的生物医学、药学等相关专业背景，对中国[/font][font=Calibri]NMPA[/font][font=宋体]、美国[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ICH[/font][font=宋体]等的当今要求和未来趋势具有深刻的理解，可根据客户产品提供最佳的病毒清除验证和细胞库检测的方案。详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/biosafety-testing-services[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之，[url=https://cn.sinobiological.com/services/biosafety-testing-services][b]生物安全检测服务[/b][/url]是保障人类健康与环境安全的重要防线。通过采用先进的科学技术和方法，我们能够更加有效地预防、检测和监控生物危害。随着科技的进步和社会的发展，我们相信生物安全检测服务将会在保障人类健康和环境安全方面发挥更加重要的作用。[/font]

分子细胞生物学\细胞分子生物技术方法与步骤详解－中文

细胞分子生物技术方法与步骤详解[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=39452]细胞分子生物技术方法与步骤详解[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=117706]分子生物学实验技术[/url]

分子生物实验室常用的较贵的实验耗材和试剂有哪些？

目前,“食品安全”已经成为一个全球性关注的问题,世界上许多发达国家在加强食品安全管理的同时，通过提高标准,增加检验检疫项目，不断修订新的技术法规等手段。而食品微生物检测又是食品安全中最重要的环节，据WHO统计，发达国家每年约有三分之一的人感染食源性疾病，在一些发展中国家情况就更加严重，食源性疾病往往是致人非正常死亡的主要原因。随着人们生活水平的提高，卫生条件也不断的改善和一些抗生素的滥用，人类对疾病的抵抗能力也在下降。食源性疾病一直呈上升的趋势，食源性疾病不仅会严重损害人体的健康，而且很容易引起食品贸易纠纷（杨建秀, 2004） 食源性疾病主要是由微生物和化学药物所引起的，其中微生物引起的食源性疾病占具一半以上的比例。食品中的微生物污染成为食品安全的首要问题。微生物污染存在在食品生产、加工、储存、运输、销售、到食用的整个过程的每个环节中，对人体产生严重的危害。因此，对食品中致病菌的检测变的非常的重要。而常规的检验技术大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，包括增菌、分离培养、形态观察、生化鉴定等步骤，这些方法准确性、灵敏性均很高，但涉及的实验较多，操作烦琐，需要时间长（需要一定的培养时间，少则2到3天，多则数周才能确定），准备和收尾工作繁重，而且一般是一个检验程序只是一种菌的确认程序，不适于批量、大范围检测（唐漪灵,等, 2000; 吴清平, 等, 2005）。为此，食品微生物快速检测得到了很快的发展。各种基于不同原理的新型快速检测技术相继出现。有基于免疫学方法、仪器分析学方法、分子生物学方法、微量生化法还有电化学法。这些快速检测的方法不但可以对菌种进行鉴别，计数。而且跟传统的方法相比大大缩短了时间，节省了人力，甚至物力的投入。即做到了快速、简便、准确。

PCR................................................................................................................................. 2RT-PCR............................................................................................................................ 4琼脂糖核酸电泳............................................................................................................... 6胶回收纯化DNA.............................................................................................................. 6大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）.......................................................................... 7乙醇沉淀DNA.................................................................................................................. 8酶 切............................................................................................................................. 8连 接............................................................................................................................... 8感受态细胞的制备............................................................................................................ 9转 化............................................................................................................................. 10重组子的筛选和鉴定...................................................................................................... 10真核细胞的转染.............................................................................................................. 11转染细胞的稳定筛选....................................................................................................... 11重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量.......................................................................... 12肿瘤细胞体外传代培养及保种........................................................................................ 13肿瘤动物模型的建立...................................................................................................... 14小鼠尾静脉注射方法...................................................................................................... 14肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验........................................................................................ 14人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养................................................................................. 14实验动物免疫方案.......................................................................................................... 15血清制备........................................................................................................................ 16ELISA............................................................................................................................ 16血清学筛选克隆新抗原/新基因....................................................................................... 17ELISPOT........................................................................................................................ 20藻酸盐包裹实验............................................................................................................. 21重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作................................................................... 21（细菌内同源重组AdEasy System）............................................................................... 21组织病理技术................................................................................................................. 26免疫组化染色................................................................................................................. 27流式细胞仪常用的几种检测方法..................................................................................... 29Western Blot(免疫印迹法)................................................................................................ 34PVDF膜上蛋白的可逆染色............................................................................................. 37人肿瘤抗原的识别与鉴定............................................................................................... 39－免疫沉淀实验流程...................................................................................................... 39蛋白质组实验流程.......................................................................................................... 41SDS-PAGE胶染色.......................................................................................................... 44数据库搜索(Databases search)......................................................................................... 45主要的公共数据库及网址............................................................................................... 46蛋白质的序列分析流程................................................................................................... 48聚丙烯酰胺凝胶的配制................................................................................................... 49双向电泳常用溶液配方................................................................................................... 51分子生物学常用溶液配制............................................................................................... 53另外给大家推荐一个资料共享的地方http://www.yiqi120.com/zlzx.asp,好东西大家一同分享.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=128143]国内某重点实验室分子生物学实验方法与总结[/url]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=125698]生物技术译丛+精编分子生物学实验指南[/url]

美国著名分子生物学家M• 霍格兰(Mahlon Hoagland)9月18日在位于美国佛蒙特州Thetford的家中去世，享年87岁。　　霍格兰1921年10月5日出生，成长于美国麻省的Southborough。20世纪50及60年代，他曾与哈佛医学院的Paul Zamecnik以及英国剑桥大学的沃森和克里克一起学习RNA和DNA。其对生物学的最大贡献是发现了转运RNA(tRNA)和氨基酸活化机制，帮助构建了遗传学的基础。　　霍格兰一生共发表62篇文章，被引超过2500次。他曾2次被提名诺贝尔奖，并于1976年获得富兰克林生命科学奖章。他出版了6本面向公众的分子生物学书籍，并于1982年和1996年两次获得美国医学作家书籍奖。此外，他还是一个很有天赋的木头雕刻家。　　霍格兰去世前患有肾衰竭和心脏病，死前在家人的照料下进行了9天的禁食，完成了其自然死亡的愿望。

1、 分子生物学：是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。 2、 医学分子生物学：是分子生物学的一个重要分支，又是一门新兴交叉学科。它是从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律，从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。 3、酶工程：过去主要是通过生物化学方法从各种材料中提取、制备酶制剂。现在主要应用基因工程技术制取酶制剂。 4、蛋白质工程：过去主要是采用化学方法对纯化的蛋白质进行结构改造，制备出有特定功能的蛋白质。现在主要应用基因工程技术，从改造目的基因的结构入手，在受体细胞中表达不同结构的蛋白质。 5、微生物工程：又称发酵工程是利用微生物特定性状，使微生物产生有用物质或直接用于工业化生产的技术。 6、DNA的甲基化：DNA的一级结构中，有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰，称为DNA的甲基化。 7、 CG岛：在整个基因组中存在一些成簇、稳定的非甲基化CG，这类CG称为CG岛。 8 、信使RNA：从DNA分子转录的RNA分子中，有一类可作为蛋白质生物合成的模板，称为信使RNA。 9、顺反子：由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子。 10、 帽子结构：5端第1个核苷酸是甲基化鸟嘌呤核苷酸，它以5端三磷酸酯键与第2个核苷酸的5端相连，而不是通常的3、5磷酸二酯键。 11 、核酶：在没有任何蛋白质（酶）存在的条件下，某些RNA分子也能催化其自身或其它RNA分子进行化学反应，即某些RNA具有酶样的催化活性，这类具有催化活力的RNA被命名为核酶。 12、 蛋白质的变性：蛋白质分子爱到物理化学因素（如加热、紫外线、高压、有机溶剂、酸、碱等）的影响时，可使维持空间结构的次级键断裂，性质改变，生物活性丧失，称为蛋白质的变性。 13、蛋白质的复性：导致蛋白质变性的因素除去后，某些蛋白质又可重新回复天然构象，表现出天然蛋白质的生物活性，称为蛋白质的复性。 14、 基因：是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 15、 基因组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。 16、 操纵子：是指数个功能上相关联的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。转录单位：储存RNA和蛋白质肽链序列信息的结构基因与指导转录起始部位的序列（启动子）和转录终止的序列（终止子）共同组成转录单位。 17、 启动子：是RNA聚合酶结合的区域，操纵基因实际上不是一个基因，而是一段能被特异阻遏蛋白识别和结合的DNA序列。 18、 质粒：是细菌细胞内携带的染色体外的DNA分子，是共价闭合的环状DNA分子，能独立进行复制。 19 、质粒的不相容性：具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒不能共存于一个宿主菌，这种现象称为质粒的不相容性。 20、 转位因子：即可移动的基因成分，是指能够在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。 20、自私DNA：核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素，这些DNA顺序并无明显生物学功能，似乎为自己的目的而组织，故有自私DNA之称。 21、 自杀基因：将某些细菌、病毒和真菌中特异性的基因转导入肿瘤细胞，此基因编码的特异性酶类能将原先对细胞无毒或毒性极低的前体物质在肿瘤细胞内代谢成毒性物质，达到杀死肿瘤的目的，这类前体转移酶基因称为自杀基因。 22 、断裂基因：真核生物的结构基因是不连续的，编码氨基酸的序列被非编码序列所打断，因而被称为--在编码序列之间的序列称为内含子，被分隔开的编码序列称为外显子。 23、 顺式调控元件（顺式作用元件）：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列。 24 、反式作用因子：一些蛋白质因子可通过结合顺式作用元件而调节基因转录活性，这些蛋白质因子称为反式作用因子。真核细胞内含有大量的序列特异性的DNA结合蛋白，其中一些蛋白的主要功能是使基因开放或关闭，称为反式作用因子，简称反式因子。 25、 启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。 冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中，都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。 使用方法： 1.离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 2.打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。 3.按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 4.按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 5.待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。 注意事项： 1.机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。 2.开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。 3.样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 4.挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏，以免腐蚀机腔或造成事故。 5.擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。 6.每次操作完毕应作好使用情况记录，并定期对机器各项性能进行检修。 7.离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。 附：相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速，在以前实验资料中一般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数，亦为离心半径的函数，即转速相同时，离心半径越长，产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的，近年来主张用相对离心力（RCF）来表示比较合理。现在国际资料中，已改用相对离心力来表示。 两者的互换公式如下：PCR扩增仪: 目前各公司提供的PCR仪操作方法各有不同，按其操作说明进行操作。 值得提出的是，在使用一定时期后，样品孔的实际温度与仪器显示温度有时会有较大差异，应当请厂商的技术支持人员校对仪器的各项性能。 数字式酸度计： 一、 准备工作 1.仪器应平放在符合使用环境的工作台上，依视觉角度支起支架。 3.pH值的定位测量法： （一）二点定位法（高精度测量方法） (1) 连接好电极线路，将参比电极及活化满24h以上清洁的PH电极移入第一标准缓冲液pH1中（例pH1=4.00），待仪器响应稳定后，调节定位旋钮至仪器显示为“0.00”； (2) 将电级系统从第1种标准液中取出，用去离子水冲洗干净后以滤纸吸干电级表面水份，移入第2种标准液（例pH2=9.18）中，仪器响应稳定后，调节斜率旋钮，使仪器显示为（△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18）此后斜率旋钮不可再动，除非更换电极系统； (3) 斜率调节完成后，重新调节定位旋钮，使仪器显示第2种标准液的实际pH值（9.18），至此[