二代测序系列

紫外检测器毛细管电泳做二代测序建库质控可行吗？

第三张“基因变异图谱”与第二代基因组测序技术——评“千人基因组计划”首期研究成果的医学意义世界上任意两个人的基因99%都是相同的，而恰是那1%不同，负责着个体间的表型差异。《自然》杂志近期披露，当人体内携带有250到300基因变异位点的时候，相关基因就就会“沉默”。甚至，一个人只携带了 50到100基因变异位点，就可能患上某种疾病。10年前，“人类基因组计划”这一耗资30亿美元、历时10余年的伟大科学工程完成之际，人们以为得到了揭开自身生命奥秘的天书，生命科学也划时代地进入了“后基因组时代”。如今看来，当时得到的仅仅是人类基因组的“参考图谱”，对于人群里个体间的基因差异，或是更具医学意义的“基因变异图谱”来说，人们知之甚少。第三张“基因变异图谱”为了探寻个体间的基因差异，科学界在2002年启动了HapMap（人类基因组单体型图谱）计划。Hapmap在2005年完成的“第一张基因变异图谱”含有一百万个“单核苷酸多态性”（SNPs）位点；HapMap在2008年完成的“第二张基因变异图谱”含有三百一十万个SNPs位点。而此次“千人基因组”所公布的一期结果——“第三张基因变异图谱”，已经包含了一千五百万个SNPs位点。今年10月28日，《自然》杂志为此刊出的文章题目为“基于群体规模的基因变异图谱”，鲜明的指出，“千人基因组计划”首期研究成果，其最大优势在于：“第三张基因变异图谱”所采用的样本，针对了“大规模人群”。 远超过此前两张“基因变异图谱”所测定的样本数。绘制“第三张基因变异图谱”的所有数据，是基于两个核心家庭，6个个体的精确基因组测序，179个个体的低覆盖率基因组测序，以及七百多人的蛋白编码区的基因测序。检测人群数目庞大，人种涉及中国人、日本人、西欧人等。因此，第三张“人类基因变异图谱”的问世，可以从更深的层次上了解，种族之间、个体之间的基因差异。更具医学意义的是，对于人群中发生频率在１％以上的基因变异，本次研究的覆盖率达到９５％以上。这就意味着：此前Hapmap计划所绘制的两张“基因变异图谱”中，没能涉及的“罕见病”致病基因，可能在“第三张基因变异图谱”中已经被标出。“基因变异图谱”的医学应用随着，“人类基因变异图谱”绘制的日臻完善，和商业化全基因组SNP 分型芯片成本的不断降低，以及新的统计方法和软件的出现, “全基因组关联分析”( Genome-Wide Associat ion Study , GWAS) 越来越多的应用于复杂疾病“易感基因”的确定。今年6月6日，安徽医科大学的张学军教授领衔的团队，通过对中国汉族和维吾尔族人群近2万份样本进行分析，在人类基因组的3个区域内发现与白癜风发病密切相关的4个易感基因。今年8月2日，中***事医学院贺福初院士领衔的蛋白质组学国家重点实验室，通过对大陆5个肝癌高发区的4500多名肝癌病例和对照的研究，发现了肝癌易感基因新区域（1p36.22）今年8月23日，新乡医学院的王立东教授联合国内18家医院，建立了数十万份的食管癌标本资料库，并首次在人类第10号和20号染色体上，发现两个食管癌易感基因(PLCE1和C20orf54)。基因变异有着很强的人种差异，相比国外此领域的研究成果，以上研究成果的临床意义，在于其是针对我国的特有人群。也就是说，以上研究成果在我国的临床上更具医学价值。更为可喜的是，以上研究成果均发表在此领域最为权威的《自然 遗传学》杂志上。我国在利用GWAS需找复杂疾病易感基因领域的研究，已经得到了世界的公认。

科技日报讯 （记者王怡）中国科学院北京基因组研究所和吉林中科紫鑫科技有限公司4月18日在长春联合召开国产新一代基因测序仪样机观摩研讨会，向与会的国内基因测序领域专家和应用单位代表展示这一合作成果，同时向社会公开征集部分应用单位进行免费测试使用，测试工作将于今年下半年开展。 据了解，新一代基因测序仪样机是目前唯一技术性可以匹敌国际市场主流产品的国产基因测序系统，与国外第二代高通量测序系统相比，已经成功解决“读长较短”这一关键技术难题。该基因测序仪已经达到和部分超越国际主流设备技术指标，其成本低于进口设备1/3以上，应用成本低于进口设备1/5以上，使新一代测序技术真正达到进入广泛应用市场的经济条件，并将彻底解决我国基因测序仪完全依赖进口的局面。截至目前，该系统已获得7个发明专利和1个实用新型专利授权，还有多项专利正在申报。 中科院北京基因组研究所研究员于军介绍，新一代基因测序仪对传染性疾病的预防控制和诊疗，生物恐怖因子、食源性致病因子和转基因成分鉴定，口岸卫生和有害生物防御性检疫，以及针对人类遗传多样性而产生的疾病早期预警和个体化用药相关基因的检测分析等实践应用，提供强有力的技术支持。 据悉，测序仪今年下半年将在医疗、检验检疫、疾病防控、高校、研究院所等20家应用单位进行免费测试使用。已经确认参加测试应用的单位包括中国检验检疫科学研究院、北京出入境检验检疫局、青岛海洋大学等10余家单位。测试工作主要包括对系统性能的优化和改进，以及根据应用领域的不同进行应用产品的共同开发，即在基础试剂产品的平台上衍生出一系列专用型试剂产品，并开发相应的数据分析算法和数据库，实现测序技术实践应用的全面解决方案。来源：中国科技网-科技日报 2014年04月20日

[quote]项目概况新冠病毒二代基因测序试剂耗材采购项目 采购项目的潜在供应商应在海口市蓝天路名门广场北区B座1-5号3005室获取采购文件，并于2023年04月06日 09点00分（北京时间）前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：HZ2023-126项目名称：新冠病毒二代基因测序试剂耗材采购项目采购方式：竞争性谈判预算金额：74.9107000 万元（人民币）采购需求：详见用户需求书合同履行期限：详见用户需求书本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无3.本项目的特定资格要求：（1）企业需提供营业执照，事业单位需提供事业单位法人证书，其他组织提供法人登记证书等相关证明文件，自然人提供身份证明；（2）需提供2023年以来任意一个月企业纳税证明，或者会计师事务所出具的2021年度或2022年度财务审计报告；（3）需提供2023年以来任意一个月企业社保缴费记录；（4）需提供具备《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定条件的承诺书；（5）需提供本项目谈判保证金的缴纳证明。[font=inherit]三、获取采购文件[/font]时间：2023年03月30日 至 2023年04月04日，每天上午9:00至12:00，下午14:30至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：海口市蓝天路名门广场北区B座1-5号3005室方式：1.直接购买, 报名时需出示加盖公章的公司营业执照副本复印件、介绍信（或委托函）、委托人身份证复印件。 2. 线上购买，将加盖公章的公司营业执照副本复印件、介绍信（或委托函）、委托人身份证复印件发送至hnhzzb@163.com。售价：￥200.0 元（人民币）[font=inherit]四、响应文件提交[/font]截止时间：2023年04月06日 09点00分（北京时间）地点：海口市蓝天路名门广场北区B座1-5号3002室[font=inherit]五、开启[/font]时间：2023年04月06日 09点00分（北京时间）地点：海口市蓝天路名门广场北区B座1-5号3002室[font=inherit]六、公告期限[/font]自本公告发布之日起3个工作日。[font=inherit]七、其他补充事宜[/font]1、递交响应文件时间：2023年 4月 6日08：45～09：00。2、谈判保证金为：￥3500.00元，可通过转账到招标代理机构以下账户并注明汇款单位、项目编号。保证金必须在响应性文件递交截止时间前到账，否则投标无效。保证金也可选择以支票、汇票、本票或者金融机构、担保机构出具的保函等非现金形式提交。 户 名：海南海政招标有限公司开户行：中国建设银行海口国兴大道支行帐 户：460501002537000001843、公告发布媒介： www.ccgp.gov.cn。4、文件售价：￥200元/套（售后不退）,标书费用转入以下账户：户 名：海南海政招标有限公司开户行：中国建设银行海口龙珠支行帐 户：46001003536053003445[font=inherit]八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：海南省疾病预防控制中心地址：海南省海口市美兰区海府路40号联系方式：林先生0898-653157822.采购代理机构信息名 称：海南海政招标有限公司地　址：海口市蓝天路名门广场北区B座1-5号(30楼)3005室联系方式：电话： 0898-68500661（报名电话）、68500660； 财务：0898-68555187；公司邮箱：hnhzzb@163.com3.项目联系方式项目联系人：成小姐电　话：　　0898-68500661（报名电话）、68500660

来源：中国科技网-科技日报 作者：王怡 2013年10月31日 原标题：我自主研发基因测序技术将实现产业化 科技日报讯（记者王怡）2013年国际基因组学大会10月29日在青岛举行。在开幕现场，中国科学院北京基因组研究所与吉林紫鑫药业股份有限公司就合作开发第二代高通量测序系统项目签订投资意向协议，这标志着由中科院自主研发的第二代测序仪项目即将进入市场转化和产业转化阶段。 基因测序技术，自人类基因组计划实施以来长期占据着国际生命科学技术研究的制高点，随着第二代基因测序技术的发展日趋成熟和成本急剧降低，该项技术被越来越多的科研和实践领域所应用，形成庞大市场。目前我国市场上所有高通量测序设备和试剂均来源于进口，据估计仅2013年我国在仪器和试剂上的投入就超过20亿元。 “我们的基因组学研究一直处于世界前列，源于我们最早参与人类基因组测序的工程，但是我们使用的设备一直都依靠国外的进口设备，中国科学院作为国立科研机构，我们有义务自主研制开发基因测序仪打破国外垄断。”中科院北京基因组研究所党委书记杨卫平说。 在中科院资助下，历时两年半时间完成第二代测序仪研发项目，于2011年实现原理样机和性能验收，部分性能指标超越同类进口产品。其后中科院北京基因组研究所自主投入完成该项目的工程化和产品化开发，并形成其自主知识产权群，目前已有9个专利获得授权。 “第二代高通量测序仪的产业化发展是我们的第一步，后面我们希望能有更多的进展，比如在试剂、数据库和后台都能实现国产化。”杨卫平说。

[b]职位名称：[/b]CSD Sales Rep-二代测序[b]职位描述/要求：[/b]Responsibilities:• Plan, organize and manage a sales
 territory. Actively develop and target new business/sales opportunities
 within the marketplace. Manage the sales cycle.• Effectively communicate and
 negotiate sales contracts with customers. Educate customers on new products and
 product enhancements. Accurately articulate and present product features and
 benefits.• Work closely with sales manager on
 territory business planning and implementation. Actively communicate customer
 issues, current prospects and marketing events to management team.• Interpret and manage key
 financial result areas, i.e. revenues, volume, days outstanding and
 forecasting.Requirements:• Bachelor or Master majoring in industry-specific experience, preferably in the experience from Clinical, Diagnosis, NGS or related Life Science industries• At least 5 years selling
 experience working experience in biotech, Pharm or kits companies is highly
 preferred.• Good presentation, interpersonal
 and negotiation skills.• Excellent communication skills to
 deal with scientific discussion with customers.• Good English communications in
 both oral and written.• Good data analysis and biz
 planning skills.• High energy, team player and
 capability of working under pressure.[b]公司介绍：[/b] 赛默飞世尔科技简介赛默飞世尔科技（纽约证交所代码：TMO）是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额超过240亿美元，在全球拥有约70000名员工。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战，促进医疗诊断发展、加速药物上市进程、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/69754]查看全部[/url]

最近在检测一个产品的相关物质时发现一个问题，安捷伦1260一代检测的结果比二代检测的结果偏大，所有条件都是从一代平移到二代上，期间试过两台一代和三台二代，都是一代偏大，二代偏小。包括杂质前后的基线，两代仪器表现的也不大一致，有没有大神遇到过类似情况？

Embed™ 通用 CPG Frits 合成柱http://www.biocomma.cn/email/email-images/universal%20CPG%20Frits%20Column.jpgEmbed™ 通用 CPG Frits 合成柱 是DNA合成的换代技术。逗点生物是中国Embed™ 技术的持有人和唯一供应商。 Embed™ 通用 CPG Frits 合成柱适合长链引物合成（40-150bp），引物纯度高，无杂带。筛板(Frits)和滤芯(Filter)专家逗点生物是全球的生物用筛板(Frits)和滤芯(Filter)专家，每年销售数亿筛板/滤芯。我们把最好的原料和技术用于Embed™ 技术产品，为合成生命贡献自己的智慧。全球代工(OEM)模式逗点生物Embed™ 技术采用全球代工(OEM)模式,极大地降低了您的成本，您可以用自己的品牌销售Embed™ 产品。普通CPG和Embed™ 通用 CPG Frits 合成柱的对比项目合成介质性能优点缺点应用范围普通CPGCPG粉末适合短链引物合成（30bp）性价比高，通用性高，稳定杂带多，合成引物纯度低短链引物合成Embed™ 通用 CPG Frits 合成柱CPG Frits适合长链引物合成（40-150bp）引物纯度高，无杂带合成产率比CPG略低长链引物合成，全基因合成，siRNA合成，高纯度引物合成通用 CPG Frits 合成柱规格列表货号规格筛板尺寸柱子规格CPG 规格Loading 值孔径DS3005-U5nmolΦ 3.0mmH 2.0mm3mm30-401000ÅDS3010-U10nmolΦ 3.0mmH 2.0mm3mm30-401000ÅDS3025-U25nmolΦ 3.0mmH 4.0mm3mm30-401000ÅDS3050-U50nmolΦ 3.0mmH 4.0mm3mm30-401000ÅDS3050-U50nmolΦ 3.0mmH 4.0mm3mm80-90500ÅDS3100-U100nmolΦ 3.0mmH 4.0mm3mm80-90500ÅDS3100-U100nmolΦ 4.0mmH 4.0mm4mm80-90500ÅDS3200-U200nmolΦ 4.0mmH 4.0mm4mm80-90500Å Customer made Embed™ 通用CPG Frits合成柱的特点和第一代的DNA合成柱比较，Embed™ CPG Frits合成柱是一个进步，主要表现在以下几个方面：1、高效率，纯度更高，突变率更低第一代的合成过程，试剂进入CPG孔隙主要靠渗透作用，效率很低，时间较长。每个步骤加试剂的动作，会使CPG不断旋转，降低了合成试剂在孔隙中流动的效率。我们的嵌合技术使合成溶剂流道固定，试剂和linker接触更稳固，反应更充分，清洗更彻底，每个合成步骤更高效，提高了合成产物的纯度，突变率更低。在大多数情况下，合成的引物不经过纯化就能直接用于后续实验。2、节省合成试剂，更环保。经典的第一代DNA合成柱容纳试剂的空间较大，而第二代Embed™ CPGFrits只有孔隙的体积是容纳试剂的体积。当试剂流过时，第一代是通过渗透作用到达CPG孔的内部与外部，试剂耗损率大，第二代是固定通道，大大节省了试剂，保护了环境。Embed CPGFrits优化了设计，体积进一步减小。3、合成总体成本低Embed™ CPG frits要节省30%-50%的成本。在试剂（尤其是单体）耗损上，第二代CPGFrits比第一代产品要少；进一步降低试剂损耗需要降低CPG的使用 量。我们发现在微克的水平要把CPG分配均匀非常困难，批内和批间差异很大，低规格LOADING值很难通过减少CPG用量来实现。第二代 CPGFrits很好解决了这个问题。4、提高可靠性，减少出错概率第一代产品分为A\T\C\G四种，第二代为通用合成柱，用Universallinker，只有一种，库存上，第二代减少4倍，且操作上，不会因区分颜色而产生出错率。5、提高合成速度，节省了总体时间Embed™CPG frits， 在第一个循环去掉了DMT的保护，从而减少了这一步骤的反应时间，提高了合成速度。且Embed™CPGfrits，由于体积小，能够将CPG含量降到最 低，仅为0.5-1mg，偶合时，单体用量仅为15-20μL，耦合时间在30秒内完成，从而缩短了整个合成的时间。合成的引物不经过纯化就能直接用于后 续实验，也大大节约了总体时间

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codmax二代 测20的标样准 30的标样不准只有25左右会是什么原因导致

哈希氨氮二代设备质控标定不稳，是怎么回事。多数情况需要分析三次以上才能达到误差范围。会不会设备记忆方面处理的不好导致的分析数据过于稳定，数据偏低。

新买一个月左右的一根迪马二代钻石柱在分析几种成品时（应该不是样品问题，因为这几种样品一直是这么做的），突然感觉柱效下降的厉害（原来五千多的理论塔板数现在降到不足两千，直观就是谱图比较胖），没做任何处理，只是换了一根旧的彩虹色谱柱，理论塔板数三千多（对我们已经够了），图形也较正常。再换上迪马柱，又比较正常了，不知道是怎么回事？不知道有没在用迪马二代钻石柱的朋友，感觉这种柱子如何呀！我们的一种样品在中控的时候迪马柱分离效果就不如彩虹柱，所以每次做的时候还得换彩虹柱。

上海交通大学23日宣布，物理系李贻杰教授领导的科研团队历时3年，采用独特的技术路线，成功研发一整套具有我国自主知识产权的百米级第二代高温超导带材，实现了国内超导带材领域的新突破。　　国产百米级第二代高温超导带材像一层薄膜，金属基带的宽度为1厘米、厚度为80微米，而用于传输超导电流的稀土氧化物超导层的厚度还不到1微米。与传统的铜导线相比，相同横截面积超导带材的载流能力是铜导线的几百倍。

如题：Diamonsil(钻石二代）的特点？正确答案：Diamonsil(钻石二代）的特点1.超高的柱效2.超长的使用寿命3.适用于更宽的pH范围（1.5-9.0）3.适用于快速方法开发4.优异的选择性和分离度5.优异的批次重现性获得3钻石币的是：dahua1981（注册ID：dahua1981）获得2钻石币的是：mingming（注册ID：cuidahua）获得1钻石币的是：吕梁山（注册ID：shih20j07）

1260 第二代 详细操作步骤

新买一个月左右的一根迪马二代钻石柱在分析几种成品时（应该不是样品问题，因为这几种样品一直是这么做的），突然感觉柱效下降的厉害（原来五千多的理论塔板数现在降到不足两千，直观就是谱图比较胖），没做任何处理，只是换了一根旧的彩虹色谱柱，理论塔板数三千多（对我们已经够了），图形也较正常了。再换上迪马柱，又比较正常了，只是柱压变高了，以前用纯甲醇平衡能达到58kg的样子，现在只能降到70kg。不知道是怎么回事？不知道有没在用迪马二代钻石柱的朋友，感觉这种柱子如何呀！我们的一种样品在中控的时候迪马柱分离效果就不如彩虹柱，所以每次做的时候还得换彩虹柱。

迪马C18钻石二代，做血样分析，用了2个多月，柱效降低到只有2000-3000，峰变宽，但对称性依然良好，请问怎样处理才能使柱效恢复。

钻石二代色谱柱寿命测试化合物：纳多洛尔；吲哚洛尔；醋丁洛尔；美托洛尔；拉贝洛尔；普萘洛尔；阿普洛尔色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18(2) 5u 150 x 4.6mm商品编号：99601色谱条件：流动相：乙腈：缓冲溶液流速：1.0 mL/min温度：室温检测器UV 220 nmhttp://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/D1101%20copy.png

近日，美国 FDA 审批通过 Illumina 公司的 MiSeqDx 台式新一代测序仪及配套试剂盒，成为全球首个而且是目前唯一一个获得 FDA 临床认证的新一代测序（NGS）平台。通过认证的试剂盒除了针对囊性纤维化的检测之外，还包括通用试剂盒，让临床实验室能够开发他们自己的诊断检测。美国 FDA 医疗器械与辐射健康中心的官员 Alberto Gutierrez 博士认为：“NGS 正在改变我们了解基因组学的方式。在这之前，测序与特定疾病相关的基因是个漫长而昂贵的过程。今天，我们能够在单个检测中非常快速地读取和解释大的 DNA 片段，而这一信息丰富的技术日渐普及，能够被医生用于患者护理。”此次通过 FDA 认证的两项分析分别是 MiSeqDx Cystic Fibrosis 139-Variant Assay 和 MiSeqDx Cystic Fibrosis Clinical Sequencing Assay，它们可用于囊性纤维化的筛查和诊断。囊性纤维化是一种常见且致命的遗传疾病，在欧美人群中较为常见。在美国约有 1000 万名携带者，而患病人数超过 3 万名。此疾病由囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）基因的突变引起，有着广泛的临床表现，这取决于哪些CFTR基因突变存在。大部分CFTR突变是罕见的，其分布和频率随群体而异。MiSeqDx Cystic Fibrosis 139-Variant Assay 旨在同时检测CFTR基因中的 139 个临床相关的致病突变及变异，包括 ACMG 和 ACOG 建议筛查的那些。MiSeqDx Cystic Fibrosis Clinical Sequencing Assay 则凭借 Illumina 的靶向重测序技术，为 CFTR 基因的蛋白编码区域和内含子/外显子边界提供高度准确的数据。美国国立卫生研究院（NIH）的院长 Francis Collins 也是一名囊性纤维化的研究人员。他在一份声明中指出，这一具有里程碑意义的举措，将有助于实现个性化医疗的承诺。他认为，高通量 DNA 测序仪的出现让医生能够全面查看患者的基因组，以便搜索各种变异或突变，它们可能增加疾病风险，推动疾病进程，和/或影响药物反应。这些信息有可能在很多方面让患者受益。不过激动归激动，他认为目前还有很多工作要做。Francis Collins 博士和 FDA 局长 Margaret Hamburg 在《新英格兰医学杂志》上联名发文，称测序平台在临床应用中的批准将为医生在患者护理中更广泛地采用遗传信息铺平道路。不过，他们也指出，尽管目前已取得一些进展，但仍存在政策、法律和监管问题，而新发现也必须得到验证。此外，医生、医疗保健工作人员和患者仍需要支持和帮助，才能了解基因组数据。他们谈道：“新一代测序到达这一监管里程碑仅仅是个开始。我们需要共同努力，以确保研究进展和基因组信息的临床应用是基于严谨的证据。”原文检索：Francis S. Collins, and Margaret A. Hamburg. First FDA Authorization for Next-Generation Sequencer. NEJM, November 19, 2013; DOI: 10.1056/NEJMp1314561

液相色谱柱Diamonsil(钻石二代) 柱压高 1.5的流速柱压在2500左右这个正常吗？ 用钻石一代的柱压才1400左右 高手帮忙解释一下

AB 3500基因测序仪出售，二手测序仪[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103312244553999_9049_3330173_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103312244553230_1599_3330173_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103312244554585_463_3330173_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103312244554995_2406_3330173_3.png[/img]

钻石二代色谱柱目前有适合uplc使用的型号吗

2010年2月，罗森伯格的Ion Torrent公司推出了世界上第一台半导体测序仪——PGM，这也是首台“桌面型”（benchtop）测序仪。PGM的测序原理不同于此前的测序技术。随着2011年三款新的测序平台的发布，此领域的变革步伐不断加快。这三款新平台分别为：Ion Torrent的PGM、Pacific Biosciences的RS和Illumina的MiSeq。研究人员发现，Ion Torrent、MiSeq和PacBio RS技术所产生的数据对富含GC、中性和富含AT的基因组都表现出近乎完美的覆盖，只是在利用PGM对富含AT的恶性疟原虫（Plasmodium falciparum）基因组进行测序时，有大约30%的基因组无覆盖。这三台快速周转的测序仪都能够产生有用的序列。然而，就数据质量和应用而言，还存在很大差异。产量有限且每个碱基的费用高阻碍了大规模测序项目在PacBio仪器上的开展。从实用性和流程方便性来看，PGM和MiSeq相当接近。决定购买哪一台将取决于可利用的资源、现有设施和人员的经验，当然，资金和应用也要考虑.虽然目前个人化基因测序仪更多地还是用于科研，但对它在临床上的应用，是Life公司和IIIumina公司当下都在积极推进的最重要的方向。 Life在2011年7月就PGM的临床应用，向FDA提交了申请。IIIumina公司也紧随其后：“我们正在申请FDA对MiSeq的审批。MiSeq在设计过程中就考虑到了特定的临床应用环境，我们相信这个系统的许多特征会有助于它获得FDA的批准。

“在未来五年，全球基因组学生命科学研究工具市场预计每年增长6%，而新一代测序仪市场预计每年增长16%，”一家生命科学市场研究公司DeciBio在2012年4月12日发表的一份报告中说。　　在这份报告中，位于洛杉矶基的DeciBio估计生命科学研究工具的市场规模将从2011年的374亿美元增长至到458亿美元，年复合增长率为4%。DeciBio说，在新一代测序仪持续被采用的推动下，2016年基因组学市场规模预计增长到89亿美元，而2011年是68亿美元。　　DeciBio的合作伙伴Stéphane Budel,在一封给GenomeWeb的电子邮件中说，基因组学“有望成为生命科学研究工具市场增长最快的部分，”并且补充说，新一代测序技术“正在真正改变这次比赛。”更多内容：http://www.instrument.com.cn/news/20120413/076792.shtml

基因测序的基本原理是边合成边测序。在Sanger等测序方法的基础上，通过技术创新，用不同颜色的荧光标记四种不同的dNTP，当DNA聚合酶合成互补链时，每添加一种dNTP就会释放出不同的荧光，根据捕捉的荧光信号并经过特定的计算机软件处理，从而获得待测DNA的序列信息。

以下问题是我摘抄的，当时记在我的记录本上，所以没有记下名字，很是抱歉。但是我想拿出来这是对大家的一种共享，所以祈求大家原谅。Q:我将PCR产物纯化后送测，结果说是双模板，测序峰重叠，请问是模板不纯吗？A:应该指的是模板不纯。可能是割胶纯化时，范围偏大，非目的基因片断亦混入其中。该非目的片断的大小与目的片断也类似。如果片断长度大的话，可以先连一下克隆载体，这样测序应该没有问题。 测序峰重叠不知道你讲的时双峰类型的还是指比较杂乱的而且无序的重叠： 如果是双峰（TP）,有可能是标本来源是杂合子的缘故，如果是后者，原因很多，一般看打印出的测许结果大致可以判断。原因：1。有时候PCR产物可能就是失败的产物或者浓度很低。2．提纯不好，非目的片段保留。3．测序时Matrix等条件的错误。Q:测序结果不好，测序峰比较乱，基线不平，测许公司说含有复杂结构，现急需要该序列，请问高手这种情况该怎么办？有什么测许方法？A；我自己曾经亲自做过测序，对于这种情况，一般是有解决的方法的。不过公司不愿意为了你自己的一个样品去专门摸索条件。1． 最大可能是提取的质粒不纯，可以将质粒再次转化后挑单克隆重做（很奏效）。2． 直接在测序前的模板热变性使用86度，5分钟而不是大多数的96度3分钟3． 实在不行切后分别放到T载体上，一般都可以保证顺利读出序列。最后值得一提的是如果能自己根据理论序列给设计几个比较合理的测序引物可能一切就OK了。Q:上星期将我的PCR纯化产物拿到TAKARA测序，结果今天公司打电话来说测了100多个bp就读不下去了，建议我克隆后再测，我的PCR产物纯化只有很亮的一条带，不知道为什么测不出来。答：测不下去的原因主要是序列里面有困难序列，二级结构或短序列重复，比如发卡结构和AT长重复等，甲基化的影响不大清楚，本人认为不会影响测序。所以，PCR产物测不下去的话，克隆后也很难保证测过去。其实就测序来说，PCR产物还是质粒都无所谓，只要样品纯可以了。正向测不通反向再测也可能会测通，因为DNA中正链和反链二级结构不是完全一样的，正链中遇到困难序列在反链中可能相对简单，测序酶可能可以急需合成DNA。另外，还可以改一下测序PCR的反映条件等等，也可以测通。

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