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隐身多能干细胞

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  • 解秘男女有别的人类诱导多能干细胞

    7月6日,Cell Stem Cell杂志报道,来源于男性和女性的人类诱导多能干细胞,在表观遗传稳定性和癌基因的表达方面均有较大的差异。  虽然人类诱导多能干细胞(hiPSCs)在再生医学中具有巨大潜力,他们的表观遗传变异性表明,有些hiPSCs细胞系可能不适合人类治疗。目前对hiPSCs进行质量评估的基准很有限。  本研究表明,X染色体失活标记可以用来将表观遗传学上独特的hiPSCs和表型上独特的hiPSCs区分开来。XIST(X-inactive specific transcript)是一个X染色体上的胎盘哺乳动物的X染色体失活过程中发挥主要效应的RNA基因。Xist表达的缺失与X-连锁癌基因的表达上调、细胞在体外加速增长,在体内较差的分化密切相关。  在X染色体失活潜力的差异可导致女性hiPSC细胞系在表观遗传学上的差异,而男性hiPSC细胞系一般彼此相似,并且不过度表达癌基因。  生理水平的氧气含量和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂均不能促进女性hiPSC细胞系的培养。  在X染色体失活潜力的差异可导致女性hiPSC细胞系在表观遗传学上的差异,而男性hiPSC细胞系一般彼此相似,并且不过度表达癌基因。推荐关注:磷酸化特异性ELISA试剂盒 反义寡核苷酸类  生理水平的氧气含量和组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂均不能促进女性hiPSC细胞系的培养。  据此,研究者得出这样的结论:在培养条件下,女性hiPSCs的表观遗传稳定性比男性的较差;Xist的丢失可能导致质量不理想的干细胞系。

  • 广州科学家破解细胞“返老还童”障碍 维生素C打开多能干细胞治病之门

    近70年来,服用维生素C成为人们补充营养最普遍的做法。这种吃上去酸酸的药片似乎是万能的:女士用它美容养颜,男士用它保持精力,医生们用它来帮助患者缓解感冒症状、增强抵抗力,国外研究甚至发现它还可以改善心情。然而,维生素C的作用还远不止于此,日前,它的又一项功效被揭示。 12月2日,中国科学院广州生物医药与健康研究院院长裴端卿等科学家的一篇论文,以封面文章形式发表在国际权威学术期刊《细胞·干细胞》上。研究发现维生素C能够促进体细胞"变身"为诱导多能干细胞(IPS),从而扫除体细胞"变身"为诱导多能干细胞的分子障碍。 维生素C成为诱导多能干细胞这门最新科研领域的一把新钥匙。 ◎多能干细胞技术能够将任何一个阶段的细胞,恢复到只有受精卵胞才具备的多潜能阶段。这就好比让已经成熟的体细胞"变身",让衰老的细胞重新活一次 ◎在适当的诱导条件下,体细胞能变成具有胚胎干细胞一样分化潜能的多能干细胞,可以神奇地分化成特定组织的细胞,具有再生各种组织器官的潜在功能 ◎诱导多能干细胞技术这扇门并不是一推就开,原来其诱导有效率仅有万分之一,维生素C通过一种特殊酶降低分子障碍影响,提升细胞"变身"效率100倍

  • 三维培养人多能干细胞的研究与进展

    【序号】:1【作者】:秦丽颖1张瑞1任晓琳【题名】:三维培养人多能干细胞的研究与进展【期刊】:中国组织工程研究. 【年、卷、期、起止页码】:2019,23(17)【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=-93ivAxQXRqW5VWnhmO0D6oeMnd87lquAv56bm_P7lPF82pRmaZ9nZqFmqH5dwnjPR1aqQoUlyDadIsFeJjZhSmtsSfvjIiT5p4AfIaM33OONTztfCgvQ6m_uJvINP07Jez8bU8P-1bvWdtKN7jZUA==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

  • Nat Commun:新方法更高效地制造诱导性多能干细胞

    研究人员用来产生诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)的方法既花时间而且效率又低。按照当前的方法,当把四种转录因子导入成体细胞如皮肤细胞中时,利用上千个皮肤细胞最终只能获得几个iPSCs。为此,在这项新的研究中,来自美国桑福德-伯纳姆医学研究所(Sanford-Burnham Medical Research Institute)的研究人员寻求激酶抑制剂的帮助,其中这些抑制剂阻断激酶---一类在细胞通信、存活和生长等方面发挥着重要作用的酶---的活性。他们发现几个激酶抑制剂当加入到起始细胞(如皮肤细胞)时,有助于产生比标准方法还要多的iPSCs。这些发现将可能加快很多领域的研究,和更好地能够让全世界的科学家们研究人类疾病和开发出新的治疗方法。相关研究结果于9月25日刊登在Nature Communications期刊上。论文通信作者Tariq Rana博士解释道,“获得iPSCs依赖于调节细胞内的通信网络。因此,当开始操作细胞中哪些基因开启或关闭来产生多能性干细胞时,人们很可能激活了许多激酶。因为许多活性的激酶可能抑制iPSCs产生,所以对我们而言,加入激酶抑制剂来降低这种障碍可能就有意义。”

  • 【分享】周琪发JBC封面文章 提出干细胞多能性判断标准

    [size=3][font=宋体]来自中国科学院院动物研究所,遗传与发育生物学研究所的研究人员首次发现了可以用来判断小鼠干细胞多能性水平的关键基因决定簇,对于干细胞多能性水平决定机理的研究和干细胞的临床应用具有重要的促进作用。这一研究成果公布在[/font][font=Times New Roman]6[/font][font=宋体]月[/font][font=Times New Roman]18[/font][font=宋体]日出版的科学杂志[/font][font=Times New Roman]Journal of Biological Chemistry[/font][font=宋体]([/font][font=Times New Roman]JBC[/font][font=宋体])的封面上。[/font][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]领导这一研究的是动物研究所周琪研究员和遗传与发育生物学研究所王秀杰研究员,前者长期从事克隆技术的研究工作,有多项成果分别发表在[/font][font=Times New Roman]Science[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]Development[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]Stem- cells[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]Developmental Biology[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]Biology of Reproduction[/font][font=宋体]、[/font][font=Times New Roman]Human Reproduction[/font][font=宋体]等世界著名学术刊物上,并成为获得国际转基因研究[/font][font=Times New Roman]genOway[/font][font=宋体]奖的首位华裔科学家,为我国在动物克隆和胚胎干细胞研究领域取得了突破性进展。[/font][/size][size=3][font=宋体]胚胎干细胞([/font][font=Times New Roman]ES[/font][font=宋体])及诱导性多能干细胞([/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体])技术是近年来生命科学研究领域的持续热点,对揭示细胞重编程机制、研究个体发育以及再生医学的临床应用等都具有重要价值。[/font][font=Times New Roman]2009[/font][font=宋体]年动物所周琪研究组率先证实了[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞具有与胚胎干细胞相似的全能性,但同时亦发现获得具有完全多能性水平的[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞的效率极低,多数[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞由于重编程不完全而导致无法获得后代或后代具有生理缺陷等问题,成为其在再生医学中应用的一个巨大障碍。[/font][/size][font=宋体][size=3]尤其是人类干细胞系由于伦理学的限制,不能通过发育能力进行鉴定,更加难以确定其多能性水平。因此,如何准确地判断干细胞的多能性状态并对其进行精确分型是干细胞的基础研究和转化应用过程中一个急需解决的问题。[/size][/font][size=3][font=宋体]在这篇文章中,研究人员利用长期积累的大量具有不同发育潜能的小鼠[/font][font=Times New Roman]ES[/font][font=宋体]和[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞系,系统地分析了这些细胞的编码基因、小分子[/font][font=Times New Roman]RNA [/font][font=宋体]和蛋白质表达谱,发现了一组在胚胎干细胞和具有完全多能性的[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞中高表达,在仅具有部分多能性的[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞中不表达或表达水平极低的一个关键基因组区域。通过多种细胞系证明,位于这个区域内基因与[/font][font=Times New Roman]microRNA [/font][font=宋体]簇的表达与细胞多能性状态和发育潜能呈正相关,因此可以用来作为判断干细胞和[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞多能性水平的分子标记。[/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]此发现于[/font][font=Times New Roman]4[/font][font=宋体]月[/font][font=Times New Roman]9[/font][font=宋体]日在[/font][font=Times New Roman]JBC[/font][font=宋体]在线发表后,即受到国际同行的普遍关注。美国生物化学与分子生物学协会对此成果发表了专题报道,并被[/font][font=Times New Roman]ScienceDaily[/font][font=宋体]等数十家国外媒体转载。由于在小鼠基因组中没有筛选出其他具有类似特性的基因簇,并且这一区域中的基因和[/font][font=Times New Roman]microRNA[/font][font=宋体]簇在哺乳动物中高度保守,因此,若此区域在人类干细胞中具有同样的功能,则可作为判断人的[/font][font=Times New Roman]ES[/font][font=宋体]与[/font][font=Times New Roman]iPS[/font][font=宋体]细胞系多能性水平的标准,将大大推动人类干细胞的机理及临床应用的研究进程。[/font][/size][size=3][font=Times New Roman] [/font][/size][size=3][font=宋体]此工作在[/font][font=Times New Roman]JBC[/font][font=宋体]在线发表后不久,[/font][font=Times New Roman]Nature[/font][font=宋体]杂志也在线刊发了美国科学家[/font][font=Times New Roman]Konrad Hochedlinger[/font][font=宋体]研究组的研究工作,他们在小鼠基因组的同一区域获得了与此成果一致的结论,进一步证明了此成果的正确性和科学意义。[/font][/size]

  • 【转帖】日本利用诱导多功能干细胞让瘫痪绒猴重新蹦跳

    TAG: ips 冈野荣之 干细胞 绒猴 http://img.antpedia.com/attachments/2010/12/27501_201012101146281.jpg  据物理学家组织网12月8日报道,日本研究人员称,他们利用诱导多功能干细胞(iPS)使一只瘫痪小猴的运动能力恢复到接近正常水平,这只小猴因为脖子以下脊椎受伤而不能正常运动。  日本东京庆应义塾大学冈野荣之教授称,这是世界上第一个在小型灵长类动物身上用干细胞修复脊椎损伤的例子。此前,他和研究小组曾用相似方法,帮一只小鼠恢复了运动能力。  研究人员移植了四种基因到人体皮肤细胞,生成诱导多功能干细胞,然后再把诱导多功能干细胞注射到一只瘫痪的绒猴(美洲产小型长尾猴)体内。冈野荣之说,考虑到治疗最佳时机,研究人员在绒猴受伤后第九天进行了注射,这是最有效的时机。在随后的两到三周内,绒猴开始活动它的四肢。“6周以后,它恢复到了又能到处蹦跳的水平,这已经非常接近于正常水平。它用前肢抓住物体的力量也恢复到了80%。”  但冈野荣之说,虽然用人类胚胎干细胞作为治疗癌症和其他疾病具有很大潜力,但要取得能发育成几乎所有组织的细胞,就要破坏人类胚胎,因此胚胎干细胞研究面临诸多争议,并受到宗教保守人士的反对。而日本研究人员的新研究为在人类身上使用类似医疗技术开拓了道路。

  • 胎盘干细胞

    胎盘亚全能干细胞定义:   亚全能干细胞自胚胎形成的第5到7天开始出现,能分化形成200 多种人体组织器官细胞,但不能形成一个完整的人体。胎盘亚全能干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族亚全能干细胞,其在发育阶段与胚胎干细胞接近,具备分化形成三个胚层的组织细胞的能力,但不会形成畸胎瘤。   胎盘亚全能干细胞的主要特性与功能:   胎盘亚全能干细胞是取自胎盘组织的一类亚全能干细胞,胎盘亚全能干细胞具有以下特性:   1. 具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为间充质干细胞,上皮干细胞、神经干细胞、肝干细胞,肌细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。   2.具有免疫调节作用,通过负性免疫调节功能,抑制机体亢进的免疫反应,使机体免疫功能恢复平衡,从而可以用来治疗造血干细胞移植之后的免疫排斥反应以及克隆氏病、红斑狼疮,硬皮病等自身免疫系统疾病。   3.胎盘亚全能干细胞定向培养的间充质干细胞是人体微环境的重要组成部分,移植间充质干细胞可以改变造血微环境,重建免疫系统,促进造血功能恢复,与造血干细胞共移植能显著提高白血病和难治性贫血等的治疗效果。   4.具有来源方便,细胞数量充足,易于分离、培养、扩增和纯化,传代扩增30多代后仍具有干细胞特性。   胎盘亚全能干细胞的用途:   胎盘作为理想的亚全能干细胞来源,在抗衰老及疾病治疗领域显示了其独特的功能,治疗疾病种类如下:   心脑血管系统疾病   糖尿病   肝肾损伤   脑及脊髓神经损伤   自身免疫性疾病   移植物抗宿主病   与造血干细胞共移植治疗血液病   缺血性血管病   肺及其它组织器官纤维化   抗衰老,恢复健康体态   胎盘亚全能干细胞的储存流程:   在新生儿娩出、胎盘剥离子宫排出后,由接生的医生尽快按照干细胞库胎盘标准采集规程进行胎盘的采集,然后放置在干细胞库特定的装置工具中,在限定时限内运送到干细胞库,由专业的技术人员进行亚全能干细胞的分离、提取、培养、检测等技术流程,直到根据最终检测结果来确认所获得的干细胞是否具有长期保存的价值。   保存和期限   目前国际上通用的干细胞保存技术是将获得的干细胞储存在-196℃深低温状态,医学研究与临床实践证明保存一百多年的细胞仍然具有活性。干细胞保存已有几十年的历史,胎盘干细胞库在与客户签订的合同期限内对干细胞库中所保管的胎盘亚全能干细胞活性负责。   安全性   胎盘的采集简便易行,不会引起母亲和新生儿任何不适的感觉或产生任何不良的影响。过去胎盘通常作为废物丢弃,而从胎盘中提取亚全能干细胞进行保存,是宝贵的生命资源再生。   而干细胞行业数据显示,胎盘亚全能干细胞基因稳定、不易突变,动物实验证明无致瘤性,使用安全可靠,对适应症范围疾病治疗效果好,优于传统医疗手段。   胎盘亚全能干细胞的优势   1.取材方便,原料来源充足,是生命资源的再生。   2.分化能力强可以定向诱导分化为间充质干细胞、血管干细胞、上皮干细胞、神经干细胞和肝干细胞等多种干细胞。   3.数量充足,使用方便,增殖能力强,培养后数目可达10亿,可以供多人多次使用。   4.在人群中使用不需要配型,不会产生免疫排斥反应,同时,血缘关系越亲近,生物利用度会越高,使用的效果越好。   5.治疗疾病范围广,抗衰老,恢复健康体态,心脑血管系统疾病,糖尿病,肝肾损伤,脑及脊髓神经损伤,自身免疫性疾病,移植物抗宿主病等多种疾病。

  • BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷与诱导多能干细胞来源MSCs的体外研究

    【序号】:1【作者】:柴乐1全仁夫2胡劲涛【题名】:BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷与诱导多能干细胞来源MSCs的体外研究【期刊】:中国修复重建外科杂志. 【年、卷、期、起止页码】:2019,33(02)【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=6xaVI2TORM2uNdRUR_KmtXfvRjeKRd0fsmWG6SnEe7rhByeFCQh13HqfTdoI2T5sxWmoXOgHLGO_TLXhXUO5F7-2qXimdSvKoUe4thnnExQWozeYRVkf6P2S3MjMRUaJSz8d9jVNFnuBqJVQXLvypg==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

  • 干细胞研究或迎来“黄金时代”

    10多年来,干细胞疗法一直被认为能够给那些遭受遗传和退行性疾病折磨的人带来希望。而就在几天前,随着两个研究团队在于日本横滨召开的国际干细胞研究学会(ISSCR)年会上宣告了他们在人类临床研究中取得的成果——一项聚焦于罕见的遗传神经病,另一项则着眼于老年人的视力丧失,这一希望又朝着现实迈出了一步。  美国加利福尼亚州纽瓦克市干细胞公司报告了用人体神经干细胞治疗梅氏病(PMD)所取得的鼓舞人心的研究成果。PMD是一种渐进式的致命疾病,该病通过基因突变抑制了髓鞘的正常生长,后者是大脑中包裹神经纤维的一种保护物质。缺乏髓鞘,神经信号便会流失;病人,通常是婴儿,便会经历运动协调能力退化以及其他神经病症状。据干细胞公司负责研究的副总裁Ann Tsukamoto介绍,该公司之所以选择PMD来测试其神经干细胞技术,缘于目前尚没有这种疾病的治疗方法,且通过基因检测和磁共振成像能够确诊这种疾病。她说:“这便为最有效的早期介入创造了一个机会。”  该公司建立了一个从成熟神经组织中分离出的高度纯化的神经干细胞库。研究人员将这些神经干细胞注入啮齿动物体内后,它们并没有形成肿瘤,事实上,这些细胞在小鼠的大脑中游走,并分化成不同类型的神经细胞,其中就包括分泌能够保护神经纤维的髓鞘的细胞。Tsukamoto介绍说,当神经干细胞被注入小鼠后,它们表现出了“强大的移植和迁移能力,并形成新的髓鞘”。  该公司如今正赞助对4名PMD婴幼儿患者进行该技术的初期安全试验。加利福尼亚大学旧金山分校的研究人员,向每位患者大脑中的4个区域中的每一个区域移植了7500万个神经干细胞,并随之进行了免疫抑制治疗,这样受体才不会排斥外来的细胞。Tsukamoto报告说,在试验过程中并没有出现安全隐患。此外,在18个月后进行的磁共振成像显示,在轴突周围形成了新的髓鞘,并且对患者进行的临床观察表明,他们的运动机能保持稳定或出现了小幅提升。干细胞公司如今正计划进行更大规模的试验。Tsukamoto表示,一旦这种疗法被证明是有效的,它将带来多发性硬化、大脑性麻痹和阿尔茨海默氏症的神经干细胞新疗法。  在这次会议上,神户市日本理化研究所(RIKEN)发育生物学中心的干细胞研究人员Masayo Takahashi,报告了她的研究小组在针对与年龄相关的黄斑变性(AMD)的临床前研究所取得的进展。在AMD中,视网膜色素上皮(RPE)细胞的生长出现了问题,并且位于视网膜下部的血管出现了渗漏。这些情况导致眼睛中心部位的视力下降。Takahashi的研究小组研制出一种方法,即用外科手术摘除有问题的血管,同时用源自病人自身细胞的新RPE细胞替代受损的RPE细胞。利用被称为细胞再编程的一项技术,研究人员采集了病人的皮肤细胞,并将其转化为所谓的诱导多能干(iPS)细胞,这种细胞能够分化成人体中的所有细胞。研究人员随后将iPS细胞转化为RPE细胞。由于iPS方法使用的是病人自身的细胞,因此避免了对免疫抑制药物的需求。  由Takahashi小组生成的RPE细胞表现出了真正人体RPE细胞的特征结构和基因表达模式。她报告说,将它们注入小鼠并没有引发肿瘤,并且这些细胞在移植到猴子体内后存活了6个多月。Takahashi希望在得到必要的批准后,能够在1年内开展人体试验。  英国剑桥研究学院癌症中心的干细胞研究人员Fiona Watt指出,在ISSCR上发表的这些研究结果将帮助该领域“积攒力量”。而美国哈佛医学院的干细胞科学家George Daley则更为乐观。他说,记住这次年会上报告的这些进展;并表示对明年在波士顿召开的2013年ISSCR年会充满期待。

  • 干细胞科研领域的牛人们

    榜样的力量是无穷的。每个领域都有取得杰出成就的成功人士,他们也是后生崇拜学习的偶像。科研领域也不例外。作为目前最热门的研究领域--干细胞,该领域的大牛都有谁?他们都在做什么?笔者总结了一下这个领域的牛人,分为国际篇、华人篇和国内篇三部分介绍。本文仅代表笔者的个人观点,欢迎补充。一 、国际篇http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201103/2011030320555014.jpg山中伸弥 (Shinya Yamanaka)http://www.gladstone.ucsf.edu/gladstone/site/yamanaka/5年前,提起Shinya Yamanaka,可能只有做胚胎干细胞的人略有耳闻,而现在他的名字在科研领域可谓是家喻户晓。虽然在iPS之前,他也做出了一些重要的工作,如发现Nanog和Eras在小鼠胚胎干细胞中的作用(2003,Cell;2003,Nature),但这些跟iPS相比,再好的工作光芒都会被掩盖,即使是CNS(Cell,Nature,Science)级别的工作。传统的观点认为核移植是获得个体特异的多能干细胞的主要途径,但该方法技术难度高,成功率低,至今没有获得人的核移植胚胎干细胞。笔者至今仍记得2007年初(刚进实验室)看到Shinya Yamanaka于2006年发表在Cell上关于iPS的论文时的兴奋心情。我立刻意识到这项工作的重要性,虽然他们最初的结果并不完美,当时获得的iPS细胞按现在的标准只能算是半成品,因此部分人对这项工作的看法是半信半疑。直到一年后,Shinya Yamanaka和Rudolf Jaenisch同时在Nature上报道获得可以生殖系传递的iPS细胞,基本上打消了人们对这个发现的质疑,而随后越来越多的工作进一步证实这个发现。虽然这两年内他的产出不多(2010年有分量的工作只有一篇PNAS),但仅凭2006年那篇论文已经使他成为诺贝尔奖最热门的候选人。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201103/2011030320561312.jpgRudolf Jaenischhttp://www.wi.mit.edu/research/faculty/jaenisch.html提到Rudolf Jaenisch,在干细胞领域可谓是人尽皆知。1967年从德国慕尼黑大学获得博士学位,现就职于美国麻省理工学院(MIT)的whitehead 研究所,他是该研究所的创始人之一。Rudolf Jaenisch在一系列领域都做出了有影响的工作,包括基因敲除小鼠、表观遗传学研究、核移植、iPS等,并将这些领域的几乎所有的重要问题都解决,唯一的遗憾是自己开创的领域不多。笔者有幸听过一次他的讲座,也同他有过简短的交谈,给人总体印象是一个典型的德国人,比较严肃。他曾经担任过国际干细胞学会的主席。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201103/2011030320570463.jpg他的许多学生都成为优秀的科学家,如诺华(中国)生物医学研究有限公司的副总裁李恩;近年内的学生有哈佛大学的Konrad Hochedlinger、Alex Meissner 和Kevin Eggan、斯坦福大学的Marius Wernig以及即将去以色列任职的Jacob Hanna等。他的学生无疑是最成功的"牛二代"。http://www.bioon.com/biology/cell/476456.shtml

  • 【资源整理汇总】干细胞原理与技术

    ###一部汇总,大家伙先看着,未完待续###原理与技术干细胞:成体干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞(ips)、肿瘤干细胞、分离、培养、鉴定、建系、分选、信号通路、起源、组织工程干细胞的培养《干细胞原理、技术与临床》核心章节131页/赵春华/ http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358972-1-1.html分享一本最新出版的肿瘤干细胞的书http://bbs.bioon.net/bbs/thread-299056-1-1.html强烈推荐:一个关于干细胞的powerpoint http://bbs.bioon.net/bbs/thread-296701-1-1.html干细胞电子书免费下载http://bbs.bioon.net/bbs/thread-264289-1-1.html干细胞研究进展消息 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-360149-1-1.html干细胞教师用ppt http://bbs.bioon.net/bbs/thread-362296-1-1.html英文版干细胞ppt集锦(很不错的) http://bbs.bioon.net/bbs/thread-272416-1-1.html干细胞从科研走向临床推广http://bbs.bioon.net/bbs/thread-353817-1-1.html干细胞可用于治疗脊髓损伤http://bbs.bioon.net/bbs/thread-353818-1-1.html老外是如何学习做干细胞的--干细胞课程http://bbs.bioon.net/bbs/thread-57973-1-1.html上传几篇大牛写的干细胞综述 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-341447-1-1.html一篇干细胞的NICHE的年度综述!http://bbs.bioon.net/bbs/thread-287579-1-1.html上传几篇大牛写的干细胞综述4 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-341451-1-1.html关于干细胞的PPT http://bbs.bioon.net/bbs/thread-259255-1-1.html【免费下载】肿瘤干细胞起源及其生物学特性/陈晶等/http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358973-1-1.htmlhttp://www.nature.com/sc/journal/v45/n1/full/3101943a.htmlhttp://www.springerprotocols.com/Full/doi/10.1007/978-1-59745-060-7_10?encCode=QkVDOjAxXzctMDYwLTU0Nzk1LTEtODc5&tokenString=lSYIGGltPLruD0lr0AWrWg==&access=deniedhttp://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jnr.20317/fullhttp://www.transplantation-proceedings.org/article/S0041-1345(08)00008-0/abstracthttp://www.nature.com/nprot/journal/v3/n12/full/nprot.2008.194.htmlNature实验方法-大鼠/小鼠少突胶质前体细胞培养 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358977-1-1.html成人胰腺多能干细胞生成与胰腺癌和非胰腺癌后代 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358980-1-1.htmlBMC Neurosci:电针治疗可以促进移植干细胞的存活和分化 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358982-1-1.htmlstem cells:揭示骨髓干细胞和AMSCs相当 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358984-1-1.html【免费下载】Nature Pro:鼠胚胎干细胞的分化 http://bbs.bioon.net/bbs/thread-358985-1-1.htmlStem Cells:Mesenchymal stem cells instruct oligodendrogenic fate decision onhttp://bbs.bioon.net/bbs/thread-358986-1-1.html胚胎干细胞培养标准化操作规程.dochttp://bbs.bioon.net/bbs/thread-311031-1-1.html干细胞的培养方法(图片)http://bbs.bioon.net/bbs/thread-264491-1-1.html人表皮干细胞的培养技术http://bbs.bioon.net/bbs/thread-323841-1-1.html用sphere法培养肿瘤干细胞的protocol http://bbs.bioon.net/bbs/thread-289291-1-1.html日本科学家关于脂肪干细胞的研究http://bbs.bioon.net/bbs/thread-328832-1-1.html

  • 【转帖】史上最大规模干细胞基因研究

    史上最大规模干细胞基因研究来自新加坡基因组研究所(GIS)和细胞和分子生物学研究所(IMCB)的科学家发现了人类干细胞“百变”的秘密,而且只要启动这个被称为PRDM14的基因,任何普通细胞都有可能“变身”为干细胞,成功率比现有技术高三倍。该研究发表于10月17日的Nature杂志上。拥有多能性(pluripotency)的胚胎干细胞(embryonic stem cell),能变成人体里200多种细胞中的任何一种,自我“繁殖”能力也强,因此一直被视为各种绝症的希望。不过,由于牵涉道德问题,胚胎干细胞研究一再受阻,科学家只好另觅良方。科学人员近年就开始钻研“培育”多能性干细胞的可能性,通过重编程(re-programme)改变细胞基因,让普通细胞也具多能性。由19名本地科学家组成的研究小组就花了三年,从2万1000组基因中,找到了干细胞“多能性”的重要钥匙。据称这是有史至今,最大规模的干细胞基因研究。

  • Lab实验课堂:干细胞请回答!直播好礼等你来拿!

    为综合探讨诱导多能干细胞的构建、培养和扩增仪器信息网将携手赛默飞“重返实验室”系列活动之“Lab实验课堂”开展[color=#cc0000][b]【干细胞请回答】- 如何构建、培养和扩增理想的“种子细胞”iPSCs[/b][/color][font=&][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ipscs20220928/]点击打开链接[/url][/font][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em17.gif[/img][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em17.gif[/img]了解更多~我们将邀请北京大学生命科学院 王金琳 博士后 、 赛默飞世尔科技技术支持 唐子华 博士围绕iPSCs的构建、培养和扩增,展开深度讨论观看直播,赢取[b][color=#cc0000]千元红包和直播礼[/color][/b][img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em24.gif[/img]报名链接:[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ipscs20220928/[/url]

  • 【建设新闻】卫生部人类干细胞与生殖工程重点实验室顺利通过验收

    [color=#ff483f] 卫生部人类干细胞与生殖工程重点实验室顺利通过验收[/color] 近日,卫生部组织专家对依托我校组建的人类干细胞与生殖工程重点实验室进行验收。经专家组认真审核,一致同意,该试验室顺利“过关”。 专家组由中国科学院动物研究所刘以训院士、中国医学科学院基础医学研究所王琳芳院士、南方医科大学姚开泰院士、中国医学科学院基础医学研究所章静波教授、华中科技大学朱桂金教授、湖南师范大学生命科学学院张健教授、湖南师范大学生命科学学院梁宋平教授等七人组成,刘以训院士担任验收组组长。 验收会上,实验室主任卢光琇教授就实验室建设情况作了详细的工作汇报。在建设期间,实验室结合人类干细胞与生殖工程的发展需求,建立了“人类胚胎干细胞和诱导性多能干细胞建系与建库及定向诱导分化”、“成体干细胞建系及定向诱导分化”、“人类辅助生殖技术和精子库技术”3个实验平台,并围绕三个方向开展研究工作,全面完成了实验室组建计划书的各项任务,获得国家级科技进步二等奖1项,获教育部科技进步一等奖1项,承担973、863、国家自然科学基金、欧盟及省部级等国际国内科技项目32项,累计科研经费达2800余万元;发表SCI收录期刊论文46篇,其中包括在国际顶尖杂志《CellStem Cell》上发表;培养了博士后、博士及硕士研究生141名;举办了国际学术会议2次,接受和派出访问学者40余名。

  • 新药开发有了得力助手 干细胞技术将成为药物开发行业重要工具

    新药开发有了得力助手 干细胞技术将成为药物开发行业重要工具

    2012年05月31日 来源: 中国科技网 作者: 常丽君http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205311347_369507_1644522_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205311347_369508_1644522_3.jpg 今日视点 在很多人想象中,干细胞几乎能治愈太阳底下的所有疾病。人们的注意力几乎都放在了它们神话般的再生医学功能上,热切期望着它们尽快从天落地。而与此同时,干细胞却在药物开发领域不声不响地站稳了脚跟。作为研究工具,干细胞技术在行业里变得越来越多元化。 “在该领域,目前的发展态势很像DNA重组技术早期。上世纪70年代中期,人们并没有意识到DNA重组会有现在这么广泛的用途,而且人们也低估了其用于治疗手段的困难程度。”威斯康辛州麦迪逊莫格里奇研究院再生生物学研究所主任詹姆斯·汤姆森说,“而现在,干细胞也处在相似位置。尽管直接用于治疗最终可能带来丰硕成果,但作为一种研究工具,人们也低估了它的使用范围。” 从毒性测试到新药开发 大约两年前,一些药物公司开始尝试性地涉入干细胞领域。现在,制药行业越来越多地用干细胞来测试药物毒性,以发现潜在的新疗法。 比如Cellular Dynamics公司出售人类心肌细胞,生产脑细胞和血管上皮细胞,还将推出一系列人类肝脏细胞。心肌细胞来自诱导多能干细胞(iPS细胞)。汤姆森说,“基本上所有的大型制药公司”都买过一些。 此外还有总部在英国的医疗技术公司通用电气医疗集团(GE Healthcare)。3年前,英国干细胞生物学家斯蒂芬·明格辞去学术工作,带领通用电气医疗集团进入干细胞领域。他们出售人类心脏细胞已经一年有余,这些细胞来自胚胎干细胞,他们很快也会卖肝脏细胞。 最关键的问题是,在许多药物问题的案例中,只有那些药得到了美国食品和药物管理局(FDA)等机构的许可并进入市场后才能发现其中的问题。明格说:“这些药只是通过了各种动物实验,然后通过了制药工业的I期、Ⅱ期、Ⅲ期临床阶段,获得了FDA许可。” “在这方面,许多动物模型并不得力。小鼠实验虽然效率很高,但在临床实验后期却不能在人类身上重复。因此多年前人们就开始使用试管模型,以此来代表人类疾病,这是一个巨大的进步。”位于加利福尼亚旧金山的生物制药公司iPierian战略与合作开发高级主管亚当·罗森塔尔说。 明格及其研究小组曾对心脏细胞进行盲评实验,以检验这些细胞对各种不知名的药物化合物的反应,看它们是否具有毒性。明格说,当药物被打开时,他们发现细胞对那些已知有毒的化合物立刻起了反应。 使用干细胞测试能带来明显的健康利益,可以在药物上市之前消除其危险的副作用,同时也能避免继续投入开发成本,节约了数百万资金。 除了测试药物毒性,干细胞还是一种开发新药的重要工具。Cellular Dynamics和通用电气医疗集团两家公司销售的干细胞,都有这方面的功用。 iPierian公司并不向其他药物公司出售其产品,而是用于内部开发。他们正在研究治疗老年痴呆症等神经退行性疾病的药物。该公司不久前曾宣布,他们正在开发一种瞄准tau蛋白的单克隆抗体,这种蛋白在老年痴呆症中起重要作用,此外还有其他与神经退行性疾病有关的蛋白质。公司表示,这些决策都是建立在干细胞研究的成果之上的。 未来之路影响深远 这一新生领域也有着许多未知数。iPierian共同创始人、哈佛干细胞研究院转化医学部主任李·鲁宾说,比如能够将干细胞用于研究某种特殊类型的疾病还存在很多争议,尤其是那些非遗传性的或晚发型的紊乱,以及与多组织间相互作用有关的疾病等。 目前,鲁宾在用干细胞作为一种脊椎肌肉萎缩疾病的模型,这是一类早发型遗传紊乱。他指出,将干细胞用于药物开发,有望成为发现特效药物的更好途径,但只有真正经过证明的技术,才称得上是更好的方法体系。 “目前,人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞所做的,只是提供一种途径,让人们能利用人体最基本的物质材料进行基础研究。”汤姆森指出,干细胞还可能有更广阔的用途,不止于药物开发研究。有了这些细胞,我们能从更多细节层面理解人体。究竟要怎样使用它们,还不能定论,但其必将对人类医学产生深远影响。(记者 常丽君 综合外电) 《科技日报》(2012-5-31 二版)

  • Lab实验课堂:干细胞请回答!直播好礼等你来拿!

    [font=&]为综合探讨诱导多能干细胞的构建、培养和扩增[/font][font=&]仪器信息网将携手赛默飞“重返实验室”系列活动之“Lab实验课堂”[/font][font=&]开展[/font][font=&][color=#cc0000][b]【干细胞请回答】- 如何构建、培养和扩增理想的“种子细胞”iPSCs[/b][/color][/font][font=&][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ipscs20220928/]点击打开链接[/url][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181709463899_6624_5696463_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181709463899_6624_5696463_3.png[/img][font=&]了解更多~[/font][font=&]我们将邀请北京大学生命科学院 王金琳 博士后 、 赛默飞世尔科技技术支持 唐子华 博士[/font][font=&]围绕iPSCs的构建、培养和扩增,展开深度讨论[/font][font=&]观看直播,赢取[/font][b][color=#cc0000]千元红包和直播礼[/color][/b][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403181709463899_6624_5696463_3.png[/img][font=&]报名链接:[/font][url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/ipscs20220928/[/url]

  • 抽丝剥茧,解析干细胞的命运

    在分子水平上到底发生了什么才会使得干细胞成为一种细胞类型而非另一种?在什么时间点它被注定了细胞命运?而它又是如何被注定命运的呢?直到现在这些问题仍是待解之谜。近日来自加州理工学院的一个研究团队在新研究追踪了确保干细胞分化成为免疫系统重要细胞T细胞的逐步发育过程,这一成果标志着我们在理解干细胞命运方面又向前迈出了重要的一步。相关研究论文在线发布在4月13日的《细胞》杂志上。该研究的首席研究员、加工理工学院生物学教授Ellen Rothenberg说:“这是第一次这样详细地,一步一步地解析自然发育的过程,检测了基因组中所有基因的活性。这意味着就基因而言,该系统中的所有的东西都无所遁形。“文章的第一作者是Rothenberg实验室的研究生Jingli A. Zhang,他现在是加州理工学院的博士后学者。在这篇文章中,研究人员针对多能造血前体细胞展开了研究。多能造血前体细胞是一类干细胞样细胞,表达各种各样的基因,并能够分化形成多种不同的血液细胞类型,包括免疫系统细胞。从整个小鼠基因组着手,实验室试剂研究人员精确筛查了这一前体细胞转变为命中注定的T细胞过程中所有发挥了作用的基因,并鉴别了在发育过程中这些基因各自开启的时间点。同时,研究人员还追踪了可引导前体细胞通往各种替代信号通路的基因。研究结果还揭示了T细胞发育过程促进其他命运的基因关闭的时间和方式。Rothenberg 解释说:“T细胞基因是否是在促进一些特异性替代的基因关闭之前开启的?或是以其他的顺序?哪些基因首先开启?哪些基因首先关闭?这些一直是我们过去想了解的问题。在大多数全基因组研究中,你很难有培养基能力了解发育进程中第一、第二、第三等等逐步发生的事件。而如果你想了解这样一个复杂的过程建立这些前后关系是绝对至关重要的。”在新研究中,研究人员对生成T细胞的一系列分子事件中的五个阶段进行了解析,包括细胞定型前两个阶段、定型阶段以及定型之后的两个阶段。他们鉴别了在所有这些阶段表达的基因,包括大量编码转录因子的基因,这些转录因子在开启或关闭特定基因中起重要作用。他们发现大部分调控转换发生在第二阶段和第三阶段之间,此时T细胞定型开启。大量激活未定型干细胞相关基因的转录因子基因关闭,而其他一些激活T细胞发育下一阶段所需基因的转录因子基因开启。研究人员不仅检测了在不同的阶段哪些基因获得了表达,还鉴别了有可能导致这些基因在特定时间表达的因素。转录因子自身的表达就是一个关键的调控元素。除此之外,研究人员还颇有兴趣地鉴别了基因的调控序列,基因上的这部分序列主要是充当转录因子的停泊位点。采用常规的分子生物学技术通常很难鉴别在小鼠和人类中的这些序列,研究人员耗费了10年的时间致力于构建出实验室仪器单个基因调控序列的综合图谱。为了构建出可能的调控序列图谱,Jingli A. Zhang对表观遗传学标记进行了研究。通过鉴别表观遗传学标记添加或清除的DNA区域,Rothenberg研究小组为研究人员鉴别T细胞发育过程中大量开启或关闭基因的调控序列铺平了道路。Rothenberg说从某种意义上说,她的团队采用的是一种反向的方法来解析这些对照序列的定位问题。“我们要说的是,如果我们能够根据生成的RNA推断出在某个时间点开启的基因,我们就应该能够观测这一基因周围的这些DNA序列,解析是否同时还有DNA序列添加或丢失了表观遗传学标记。如果我们能找到它,那将成为用于开启这一基因的真正的热点候选调控序列,”Rothenberg说。

  • 胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP)

    关键词(必填项目):胚胎干细胞培养目的(必填项目):正确规范胚胎干细胞培养背景知识(选填项目):无。原理(选填项目):无主体内容:目录一、细胞二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代三、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法四、移植细胞的准备细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2.D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3.J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7-9代。4.J1rtTA-rtTA表达J1细胞,由Dr. Jaenish的实验室友情提供。5.表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞,由Dr. Nagy的实验室提供。一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(该溶液也能用于EB培养基--见下文)。分装在50ml FALCON管中,(稀释为2×,每管42ml),贮存在-20℃。通过将21ml该溶液,HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基,0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注:一瓶DMEM是500ml。贮存液 DMEM(高糖) [/s

  • 《细胞》:2011年度五大研究发现

    1. 利用诱导性多功能干细胞构建出小鼠精子祖细胞日本京都大学研究人员通过体外诱导胚胎干细胞(ESCs)和诱导性多功能干细胞(iPSCs),形成原始生殖细胞样细胞(primordial germ cell-like cells, PGCLCs),最后进一步分化,通过体内植入不能生育的小鼠睾丸中,产生了外观正常的精子。将这些精子注射到雌性小鼠的卵细胞中,不久雌性小鼠生出了健康的小鼠后代。2. 鉴定出阿尔茨海默病Alzheimer's disease的生物标记美国研究人员利用一种一般性和无偏差的方法---组合文库筛选(Combinatorial Library Screening)来鉴定出诊断上有用的抗体,而避免进行抗原鉴定。该方法涉及利用非自然的合成分子组合文库对病人血清样品和对照样品进行比较性筛选,这样就可鉴定出病人血清样品中要比和对照样品中保留极其多IgG抗体的分子,随后利用这些分子作为捕获试剂来捕获诊断上有用的抗体。研究人员利用多发性硬化症(multiple sclerosis)小鼠模式动物和证实这种方法的实用性,并利用该方法在阿尔茨海默病小鼠模式动物中鉴定出两种候选的IgG抗体生物标记。3. 发现干细胞多能性的选择性剪接开关加拿大多伦多大学研究人员发现了进化上保守的特异的FOXP1选择性剪接开关,可调控干细胞的多能性。研究人员发现这种剪接开关产生的FOXP1胚胎干细胞特异性异构体,与典型的FOXP1异构体相比,着不同的DNA结合性质。选择性剪接事件改变了FOXP1胚胎干细胞特异性异构体的DNA结合性质,促进维持多能性所需的转录因子基因的表达,包括OCT4、NANOG、NR5A2和GDF3,同时抑制胚胎干细胞分化所需的基因。同时,研究小组还发现FOXP1胚胎干细胞特异性异构体促进体细胞高效重编程为诱导性多功能干细胞(iPSC)。4. 追踪神经胶质瘤的起源美国研究人员利用双标记嵌合分析(Mosaic Analysis with Double Markers,MADM)---该技术的精髓在于用绿色荧光蛋白明确标示突变细胞,还有一个关键特色就是无论一个突变的绿色细胞何时产生,总是同时产生一个正常的红色细胞---来分析神经胶质瘤(glioma)的起源。他们将胶质瘤病人体内发现的两种流行突变p53与NF1导入神经干细胞(neural stem cells, NSCs)中,对源自神经干细胞的所有细胞系所作的进一步分析清楚地显示了少突胶质前体细胞(Oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是该肿瘤的来源细胞,因为任何可见的肿瘤标志可被检出之前,变异的绿色少突胶质前体细胞的数量大大超过了其正常的红色对应物数量,足足超了130倍。为了进一步证实这点,研究人员也将p53与NF1突变直接导入小鼠少突胶质前体细胞,结果发现这些小鼠产生神经胶质瘤,从而再次证实少突胶质前体细胞是神经胶质瘤的来源。5. 发现新的组蛋白修饰方式美国芝加哥大学Ben Mary癌症研究所研究人员在细胞中筛查出了67个新组蛋白修饰标记,并从中发现了一种新型组蛋白翻译后修饰方式---赖氨酸巴豆酰化(lysine crotonylation)修饰。通过进一步的结构及基因组定位分析,研究人员证实氨酸巴豆酰化修饰是一种进化高度保守,且在生物学功能上完全不同于组蛋白赖氨酸乙酰化的蛋白质修饰方式。研究人员还发现在人类体细胞和小鼠精子细胞基因组中,组蛋白赖氨酸巴豆酰化分布于基因活性转录启动区域或增强子上。在减数分裂后的精子细胞中,赖氨酸巴豆酰化高丰度集中在性染色体上,被用来标记睾丸特异性基因。

  • 骨髓间充质干细胞分离培养经验

    骨髓间充质干细胞总结 2003年8月,为给大家提供一个网上交流干细胞研究经验的平台,我们干细胞版设立了骨髓间充质干细胞培养讨论区,经过近三个月的讨论学习,我们既学习丰富了自己的知识体系,也对间充质干细胞尤其是分离培养方面有了更为详实的认识,为了大家阅读的方便,我们决定把本版中的相关内容,同时参考部分书目和文献,做一总结。一、骨髓间充质干细胞的分离 目前常用的分离MSC的方法有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞贴壁特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中细胞成分比重的不同,提取单核细胞进行贴壁培养。随着对MSC表面抗原认识的深入,有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化,但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题,加之耗费较大和技术的难度,在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。1. 直接培养法(全骨髓培养法) 1987年,Friedenstein等发现在塑料培养皿中培养的贴壁的骨髓单个核细胞在一定条件下可分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞,而且这些细胞扩增20-30代后仍能保持其多向分化潜能,这类细胞即为骨髓间充质干细胞(BMSC),其工作对今后MSC的研究具有重要意义,不仅证实了骨髓MSC的存在,而且创建了一种体外分离和培养MSC的简便可行的方法,得到了广泛的应用。culture-spirit采用直接贴壁法,24-36小时首次换液,换液时用PBS洗两次,7-10天传第一代,以后2-3天传代。培养基采用Hyclone的DMEM/F-12(1:1),血清是天津TBD的FBS(顶级),得到了较好的培养结果。布兰卡根据自己培养大鼠MSC的经验,详细介绍了实验步骤:(1)接种后60-80分钟,换液去除悬浮细胞(2)原代培养24 h,48 h各换液一次(3)观察细胞情况,在原代培养7天左右时,如观察到成片的典型形态的细胞,在瓶底用Marker笔标记,0.25%胰酶消化,镜下观察控制,约5-10分钟(室温太低时应放置到孵箱中),加入全培养基终止消化,瓶体朝上,吸管轻轻吹打4-8分钟,尤其是标记部位。不要用力吹打,以免把贴壁较牢的成纤维细胞,上皮样细胞吹打下来。(4)传代到新瓶中,加入少量培养基,孵箱静置20-30分钟后,MSC大多牢固贴壁。瓶底朝上,轻轻吹打,丢弃悬浮以及贴壁不牢的细胞(大多是上皮样细胞),加入全培养基开始传代培养,如观察仍有较多杂细胞,可重复上述步骤。(5)经上述处理后,原代的那瓶细胞仍有一些MSC生长,可继续按原代培养,如观察到MSC的克隆,仍可按上述步骤纯化处理。(6)原代或传代的细胞如观察的少量成片的杂细胞,可直接镜下瓶底标记后,超净台里用长吸管尖端机械刮除,吸出去掉。菊花与刀用的是全骨髓培养法,直接用含10%的FBS培养基冲洗大鼠的股骨和胫骨,为了避免冲起许多气泡应缓慢冲,冲的次数不应太多。冲洗后不用离心直接接种在培养瓶里,48 h~72 h后首次换液,一般7~10天可传代。天之饺子介绍的小鼠MSC的分离方法:取6 w小鼠的股骨和胫骨,直接用含培养基冲出骨髓,一定要尽量把干垢端的骨髓冲干净。冲洗后不离心直接接种在培养瓶里,24-48 h后去悬浮,再接下来的每3-4天换液一次,直到需要传代。2. 密度梯度离心法 裴雪涛等用比重为1.073 g/ml的percoll分离(400 g×20 min)人骨髓MSCs,取界面处细胞层,离心后洗涤以2×105/cm2的密度接种,72 h后更换培养液,弃掉未贴壁细胞,以后每3 d换液一次。细胞长到80%汇合时1:1传代。菊花与刀利用PERCOLL密度1.073分离大鼠MSC 时,用2400 rpm×20 mins后可见中间有一层约1~2 mm厚的白色层,仔细用吸管吸取这一层再用PBS离心2遍即可加培养基和胎牛血清培养即rMSCs。周进明等利用密度为1.082的percoll分离小鼠MSCs,500g×30min离心后,取中间的单个核细胞层,PBS洗两次,接种于IMDM培养基,1 d后换液,去掉非贴壁细胞,以后每3-4天换液。jetter用过FICOLL,FERCOLL,上海二分厂的淋巴细胞分离液分离MSC细胞效果都不错,当然所获细胞群的纯度不一,Percoll最纯,而上海二分厂的淋巴细胞分离液所获细胞群的传代能力优秀(35 PASSAGE)。本版的部分园友认为MSC贴壁培养得到的细胞不均一,但是多能分化能力和增殖力好,percoll分离得到的细胞较为均一,多能分化性和增殖力不如贴壁培养的,尤其是增殖力相差很远,有人添加bFGF或/和表皮生长因子发现可以增强增殖能力。二、骨髓间充质干细胞的培养 天之饺子认为,间质干细胞的培养一定要用塑料培养瓶,不能用玻璃的。因为象间质干这类的基质细胞不易贴玻璃,而且现在买的进口好品牌的培养瓶都涂有一层促细胞贴壁的物质,多数园友培养时都添加10-15%胎牛血清。分离培养结果的差异可能是由于各个研究小组标本来源、采用的分离方法不同从而所获得的细胞不同,或者用来检测的细胞代数不同,或者培养过程中用的胎牛血清不同,导致MSCs获得或失去这些表面标记物的表达。三、骨髓间充质干细胞的特性 体外培养的MSC体积小,成梭形,核浆比大。不表达分化相关的细胞标志,如I、II、III型胶原、碱性磷酸酶或Osteopontin;也不表达SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124、CD166和多种表面蛋白,这群细胞特性稳定,扩增一代和两代后的细胞同质性分别达到95%和98%。MSC联系传代培养和冷冻保存后仍能具有多向分化潜能,而且保持正常的核型核端粒酶活性,但不易自发分化,在体外特定的诱导条件下,MSC可以分化为骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、神经等多种细胞。四、其他相关内容 Jiang将从成人以及成年大鼠和小鼠骨髓分离的间充质干细胞(CD45-TER119-)命名为多潜能成年祖细胞,他们证明,MAPC高表达端粒酶,而且随着细胞的扩增,端粒的长度不变,单个MAPC来源的细胞群不仅能在体外向3个胚层的细胞分化,而且能在体内能够向各种组织细胞分化,相比较而言,形态与MSC相似的体外培养的皮肤成纤维细胞则不具有类似的分化潜能。参考文献 生理学报2003.55(2):153-159 人骨髓间充质干细胞在成年大鼠脑内的迁移及分化中华放射医学与防护杂志.2002,22(3).-167-169 培养小鼠骨髓间充质干细胞及其移植后在体内的定位分布Exp Biol Med Vol. 226:507 520, 2001 Mesenchymal Stem CellsNATURE |VOL 418 | 4 JULY 2002 Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow干细胞生物学 裴雪涛 主编

  • 【转帖】美科学家利用干细胞技术培育出有两个父亲的老鼠后代

    美科学家利用干细胞技术培育出有两个父亲的老鼠后代 据外媒报道,美国科学家利用生物干细胞技术,利用两只公鼠培养出“后代”。这一实验的成功将有助于保护濒危物种,甚至可以帮助同性伴侣拥有属于双方的孩子。Biology of Reproduction 在12月8日刊发的文章称,美国德得克萨斯州安德森癌症中心的科学家从一个公鼠(XY)胎儿的干细胞中,制造出一个诱导多功能干细胞系(IPS)。这些诱导多功能干细胞是由成熟的干细胞经历基因重组,形成类似胚胎干细胞的状态。这些诱导多功能干细胞中的一些在成长过程中,自行失去了Y染色体,转变成XO细胞。这些XO细胞之后被注入老鼠胚胎内,再移植到代孕母鼠体内,生产出携带原来公鼠身上的X染色体子鼠。之后,这些新生的小老鼠中的母鼠跟正常的公鼠交配,它们的孩子、无论公鼠还是母鼠,都会同时携带两个“父亲”的基因。研究者们还称,通过这一技术,也可以生产出含有两个母鼠基因的子鼠。然而,这项研究中还介绍,这一技术用在人身上还需要很长的时间。目前,对于人类的诱导突变干细胞的利用还受到严格限制。

  • 【转帖】iPS细胞:人造肿瘤细胞?

    各国争相发展的重点项目  iPS技术,即诱导性多能干细胞技术,是一种将成体成熟、分化的体细胞重编程获得类似胚胎干细胞的新兴技术。2007年11月美国和日本科学家分别独立宣布可将人类皮肤细胞转化为iPS细胞。这一发现被《自然》和《科学》杂志分别评为2007年第一和第二大科学进展。之后,iPS细胞研究迅猛发展,不同的国家和实验室纷纷报道了多种方法建立的iPS细胞系。就连世界第一只体细胞克隆动物多利羊的培育者伊恩·威尔莫特也宣布放弃人类胚胎干细胞克隆研究,转而进行 iPS 细胞研究,因为他认为这种细胞比胚胎干细胞更具潜在优势。  我国连续多年将干细胞研究列入“863”、“973”、国家自然基金重点项目。国务院2006年发布的《国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006-2020年)》中,干细胞作为五项生物技术之一成为未来15年我国前沿技术的重点研究领域。  致瘤风险浮出水面  Yamanaka研究组在《自然·生物技术》上发表的文章显示,用iPS细胞诱导的神经干细胞,即使不含c-Myc(曾被认为是导致肿瘤的主要原因),在植入NOD/SCID免疫缺陷小鼠后仍有很强的致瘤性,甚至高于胚胎干细胞。   他们共研究了36个iPS细胞克隆,在诱导方式上,有些诱导剂配方中含有c-Myc基因,有些没有,因此具有较好的代表性。同时他们选择了3株胚胎干细胞作为对照。在45周的观察中,移植胚胎干细胞来源神经干细胞的34只小鼠有4只长出肿瘤。在100只移植胚胎成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中34只发现肿瘤,概率和胚胎干细胞相当。在55只移植成人成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中46只发现肿瘤,概率远高于胚胎干细胞。在36只移植肝细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中10只发现肿瘤,概率高于胚胎干细胞。8只移植胃上皮细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中未发现肿瘤。病理学检查证实肿瘤均为畸胎瘤,部分为恶性畸胎瘤。  研究还发现,以前认为致瘤性很强的c-Myc在去掉后并没有减少iPS神经干细胞的致瘤性,相反以前认为没有致瘤性的Nanog基因却可以明显增强iPS神经干细胞的致瘤性。  这次试验的另一个意外结果是并未发现在生成的肿瘤细胞中有c-Myc或其他基因的激活。以前的观点认为,转入的癌基因是iPS致瘤性的基础,只要在iPS细胞诱导成功后通过各种方法去除已完成使命的癌基因即可使iPS细胞免于致瘤性。这次试验的结果无疑给这些想法留下了阴影,而且使iPS致瘤的机制更加扑朔迷离。

  • 挑战人类生殖: 用干细胞制造胚胎

    自去年10月开始,分子生物学家Katsuhiko Hayashi就陆陆续续收到了许多夫妻的邮件,这些夫妻大多人到中年,仍然在为了一件事情焦急:要一个孩子。其中有一位英国的更年期妇女,希望到他位于日本京都大学的实验室,在他的帮助下怀上孩子,她写道:“这是我唯一的愿望。”这些请求开始于Hayashi一篇文章的发表——他原以为只有发育生物学家才会对他的实验结果感兴趣。在体外条件下,利用小鼠的皮肤细胞创造可以发育成精子和卵子的原始生殖细胞(PGCs)。为了证明这些实验室培养的原始生殖细胞与自然发育而成的原始生殖细胞类似,他利用它们生成了卵子,进而创造小鼠生命。他表示,这个创造出来的小鼠生命仅仅是他研究的一个“副产品”,他的研究将意味着更多——利用不孕妇女的皮肤细胞为她们提供可受精的卵细胞。与此同时他还提出,男性的皮肤细胞也可以用来创造卵子,同样,女性的皮肤细胞也可以生成精子。(事实上,研究结果发表后,许多同性恋发邮件给Hayashi ,索要更多的信息。)尽管这是一项创新研究,但是公众的广泛关注还是令Hayashi和他的教授Mitinori Saitou感到非常惊讶。他们花了十多年不断挖掘哺乳动物配子产生的微妙细节,然后在体外条件下重新创建该过程——一切都是为了科研,而非医疗。现在他们的方法使研究人员能够创建无限的原始生殖细胞,这种在以前很难获得的珍贵细胞的正常供应有助于推动哺乳动物生殖研究。但是,当他们将这个科学挑战自小鼠到猴子,再到人类推进时,这一过程被公众定义为治疗不孕不育的过程,于是相关的道德争议随之出现。“毫无疑问,他们在小鼠身上给这一领域带来了重大的改变,” 洛杉矶加州大学的生育专家Amander Clark说,“但是,在这项技术展示它的实用性之前,我们必须讨论一下使用这种方式创造配子的伦理问题。”回到最初在小鼠体内,胚胎发育一周后,便出现约40个左右的原始生殖细胞。这个小小的细胞团进而在雌性小鼠体内形成成千上万的卵细胞,在雄性小鼠体内每天都能生成几百万个精细胞,并能够遗传小鼠的全套遗传信息。Saitou想要了解在这些细胞发育过程中受到了那些信号的控制。在过去的十年中,Saitou已经通过辛苦研究确定了几个基因——包括Stella, Blimp1 和Prdm14 ——这些基因的某种组合在某些时候对于PGCs的发育起到了至关重要的作用。利用这些基因作为标记,可以从其他细胞中筛选原始生殖细胞以观察这些细胞的变化。2009年,在日本神户的RIKEN发育生物学中心,他发现,当培养条件适当时,在精确的时间加入骨形态发生蛋白4(BMP4),可以胚胎干细胞转化为原始生殖细胞的。为了验证这一发现,他向胚胎干细胞提供高浓度的BMP4,结果显示,几乎所有的胚胎干细胞都变成了PGCs。他和科学家们都预计这一过程非常复杂。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201308/25/095620gaqefeejnqejxuu3.jpg人造小鼠生殖细胞产生小鼠胚胎的过程(点击图片查看大图)Saitou的方法严格遵循了自然过程,这与其他从事类似研究的人形成了鲜明的对比,以色列魏茨曼科学研究所的干细胞专家Jacob Hanna说。许多科学家尝试通过信号分子轰击干细胞在体外创造特定类型的细胞,然后筛选细胞混合物得到他们想要的细胞。但是他们忽略了这些细胞的自然形成过程和这些人造细胞与自然形成细胞的相似程度。Saitou找出了形成生殖细胞所需的条件,去除多余的信号干扰并将每个过程的时间精确控制,给他的同事们留下了深刻的印象。英国谢菲尔德大学的干细胞生物学家Harry Moore将这种生殖细胞发育的精确重现视为一场“胜利”。到了2009年, Saitou在小鼠生殖细胞出现之前从外胚层取了一些细胞,这成了研究的起点。但是想要真正掌握这个过程中,Saitou希望从细胞培养开始。当时正值Hayashi从英国剑桥大学回到日本,和Saitou一样,Hayashi在该领域先驱Azim Surani英国的实验室里完成了4年的研究。Surani盛赞这两位科学家说,他们的“气质、风格和解决问题的方法能够相互补充”。 Saitou “处理事情时很有系统性、完成目标一心一意”,而Hayashi“工作时更有直觉、视角更广阔、处理问题方法相对更加宽松”,他说。“他们确实形成了一个非常强大的团队。”Hayashi加入了Saitou京都大学的团队,他很快就发现,那里不同于剑桥。在京都大学,Hayashi用在理论讨论上的时间比曾经少得多,而更多的时间都花在实验上。他说“在日本,我们只管‘做’,这有时是非常低效的,但有时又酝酿着巨大的成功”。Hayashi同样以外胚层细胞作为起点,但与Saitou不同的是,他试图培养一个能够产生原始生殖细胞的稳定细胞系。可惜这种方法没有奏效。Hayashi借鉴其他研究结果——一个关键调控分子(activin A)和生长因子(bFGF)可以将培养的早期胚胎干细胞转化成类似于外胚层细胞的细胞类型。这引发了Hayashi将这两个因素结合起来的想法,诱导胚胎干细胞分化为外胚层,然后采用Saitou之前的方法把这些细胞成为的PGCs。通过这种新的方法,他最终获得了成功。为了证明这些人造的原始生殖细胞是真实的拷贝,他们必须证明这些细胞可以进一步发育成精子和卵子。这一进程是非常复杂和难以理解的。所以研究小组将这一工作留给了自然——Hayashi将PGCs植入无法产生精子的小鼠的睾丸,观察这些细胞是否会发育。Saitou认为,这是可行的,但还是感到有些担忧。当实验进行到第3或4只小鼠时,他们发现小鼠的输精管里充满了精子。“这一切都发生得恰如其分,我知道他们会产生幼仔,”Hayashi说。研究小组将这些精子注入卵细胞中并植入雌性小鼠的胚胎,结果产生了大量的雌性和雄性后代。他们利用诱导多能干细胞(iPS)进行反复的实验,成熟的细胞被重新编程为胚胎状态。此外,精子被用于生产幼仔,证明它们具有基本功能——这是干细胞分化领域的罕见成就。Clark说:“这是整个多能性干细胞研究领域里在培养皿中生成全功能细胞类型少有的成功案例之一。”他们预计形成卵细胞更复杂,但是在去年,Hayashi在体外条件下制作有正常着色的原始生殖细胞并转入白化小鼠的卵巢,将产生的卵细胞体外受精后植入代孕。当透过幼崽半透明的眼睑看到黑色的眼睛时,他知道这一切又成功了。生殖细胞的回馈目前,许多研究人员已经能够复制验室培养原始生殖细胞的过程。人造原始生殖细胞特定用于表观遗传学研究:通过修饰DNA确定哪些基因表达。最常见的修饰就是为DNA碱基加上甲基,这些修饰在有些情况下,能够反映生物所经历的历史过程。与其它类型的细胞类似,表观遗传标记改变了原始生殖细胞在胚胎发育过程中的命运,但原始生殖细胞有个与众不同的特点,就是当它们发育成精子和卵子后,表观遗传标记被擦除。这就允许细胞创建能够形成任何类型细胞的受精卵。表观遗传微妙变化中出现错误将会导致不孕不育并出现器官故障,如如睾丸癌。Surani和Hanna的团队已经利用人造原始生殖细胞研究不同酶在表观遗传调控中的作用,也许有一天,能够解答表观遗传网络如何参与疾病调控。事实上,体外产生的原始生殖细胞可以为研究提供数百万个细胞,而不是供科学家研究了40个左右,这些细胞可以通过解剖早期胚胎获得。Hanna说:“这是一个大问题,因为我们这里有这些稀有的原始生殖细胞正在经历我们尚不了解的全基因组表观遗传变化。”“体外模型为科学家们提供了前所未有的方便,” Clark表示认同。临床意义但是Hayashi和Saitou没有办法向乞求帮助的不孕夫妻提供帮助。在这种方法被运用在临床之前,还有许多问题需要梳理。Saitou和Hayashi发现,虽然运用他们的技术所产生的后代通常似乎是健康和大量的,但这些后代产生的原始生殖细胞并生不完全“正常”。 第二代原始生殖细胞产生的卵细胞往往是脆弱、畸形的,并且从支持它们生长的组织上脱离。当受精时,卵细胞内部会分为三组染色体,而不是正常的两组,体外受精的成功率也只有正常原始生殖细胞的三分之一。哈佛医学院从事表观遗传学研究的Yi Zhang,使用Saitou的方法在研究中发现,体外受精过程中,人造的原始生殖细胞不能像自然状态下产生的原始生殖细胞一样,抹去它们的表观遗传标记。“我们必须要知道,这些都是PGCs的类似细胞,而不是真正的原始生殖细胞,”他说。此外,这项技术还存在两个大的挑战。首先是在不将PGCs放回睾丸或卵巢的前提下买入和使它们变成成熟的精子和卵子,Hayashi目前正在试图破解PGCs生成卵子或精子的生物信号,使人工培育条件下完成这一阶段成为可能。但最可怕的挑战是在人体重复上述所有的工作。该小组已经在利用Saitou找到的关键调控基因来调整人类的iPS细胞,但是Saitou 和Hayashi都知道,人类的信息调控网络不同于小鼠。此外,Saitou有无数的小鼠胚胎进行解剖,但无法在人类胚胎进行

  • 【转帖】新型细胞培养系统研制成功

    新型细胞培养系统研制成功作者:张笑 来源:科学网美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统,有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。领导这项研究的Laura Kiessling教授表示这套系统并不昂贵,可承担多能细胞培养中的大量预估工作。这项技术“很简单”,“任何人都能使用”。目前,大部分人类胚胎干细胞的培养都是作为实验室研究用途的,而通常所采用的培养方法又容易造成各种污染。这套新系统采用一种化学合成制得的可与干细胞相结合的蛋白片段底物,并通过与特定培养基结合,可将细胞培养固定在未分化阶段达三个月或者更长时间。据报告显示,该系统亦可用于诱导多功能干细胞培养。“科学家现在普遍采用的培养系统都有着非特定的缺点,并且缺乏一致性,以致出现质量差异”, 领导这项研究的Laura Kiessling教授解释,“我们研发的这套系统特定性很好,而且并不贵”。(科学网 张笑/编译)相关仪器及方法:新型细胞培养系统 IX81显微镜 7500 Fast实时PCR系统 发光光度计

  • 【资料】解廷《细胞》子刊解析干细胞重要发现

    来自著名的美国密苏里州斯托瓦斯医学研究所(Stowers Institute for Medical Research),中科院生物物理研究所传染病与免疫学中心,堪萨斯大学医学院,中西大学(Midwestern University)的研究人员揭示了干细胞衰老的奥秘,这一发表在昨天刚刚出版的《Cell Stem Cell》杂志上的文章由中科院海外评审专家解廷(斯托瓦斯医学研究所)领导完成,第一作者是斯托瓦斯医学研究所与中科院生物物理研究所联合培养的博士生潘磊(Lei Pan,音译)。目前普遍认为人类组织衰老与干细胞活性下降和数目减少有关,这些变化在许多譬如皮肤皱纹和器官功能下降等的衰老表现中起着重要的作用。至今为止对于干细胞衰老调控的理解还比较少,但是解廷实验室已经证明了干细胞功能中年龄依赖性得下降有关的特殊因素,以及这些因素的微环境:niche。潘表示,“在这项研究中,我们利用果蝇卵巢生殖干细胞(germline stem cells,GSCs)作为研究模型,证明干细胞功能中年龄依赖性的下降和其niche在干细胞整个衰老过程中扮演着十分重要的角色”,“我们检测了干细胞衰老调控的三个因素,发现并证明衰老过程是受到外在和内在因素调控的”。研究小组首先聚焦在一个称为骨形态发生蛋白(bone morphogenic protein, BMP)的蛋白家族——其在许多组织的发育过程中扮演着重要的角色,他们发现当niche微环境的BMP信号活性随着年龄下降的时候,干细胞增值的能力也会随之降低,干细胞数量也减少了。相反当BMP信号增加,干细胞的寿命以及增值能力也都有所提升。其次研究人员也发现干细胞与niche之间的关联也起到一定作用:强的关联可以延长干细胞的寿命,而降低关联则会增加干细胞衰老。这篇研究报告最后强调了GSCs或者niche中的一个酶(减少自由氧)的过量表达如何延长干细胞的寿命,以及增加干细胞增值的能力。解廷认为,“对成人组织中由于干细胞功能下降导致细胞损耗的长期无效替换也许是人类衰老的一个主要原因”,“如果我们能了解如何通过操纵干细胞和/或niche的功能,来减缓干细胞衰老,我们也许就能够减缓人类衰老,治疗年龄相关性的推行性疾病”。

  • 干细胞药物研发成为我国支持对象

    日前,由天津市申报的《子宫内膜再生细胞治疗卵巢早衰临床前及临床研究》项目成功入选国家重大科技专项2014新药创制项目。这标志着国家重大科技专项首次将干细胞药物研发作为支持对象,也是我国今年正式启动的首个国家级干细胞临床研究课题。  这一项目是由天津滨海新区科技创新型企业顺昊细胞生物技术(天津)有限公司牵头,与天津市药物研究院、北京协和医院、天津医科大学总医院、天津市中心妇产医院共同研发,经市科委筛选申报,经科技部、财政部、国家发改委5轮评审,以其独创性和成果的临床效果,从全国40余个干细胞项目中脱颖而出。  子宫内膜再生细胞作为近年来国际干系细胞领域的最新技术成果之一,对卵巢组织具有重建和修复功能,并可形成局部免疫抑制微环境,是一种无毒、非依赖性的组织修复和免疫调节疗法,实现卵巢早衰病症的缓解,乃至治愈。  目前,天津顺昊细胞已研发出从胎盘组织分离扩增造血干细胞和间充质干细胞的有效方法,全面掌握从胎盘及宫内膜中分离、扩增、冻存各类型干细胞的技术,并针对各类适应者研发出干细胞个性化制剂,为恶性贫血,白血病等危害人类健康的重大疾病的造血干细胞移植治疗带来希望。同时可针对心脑血管疾病,肝硬化、骨和肌肉衰退性疾病、脑和脊髓神经损伤、老年痴呆及红斑狼疮和硬皮病等自身免疫性疾病进行治疗。顺昊细胞的子宫内膜再生细胞项目此次获批不仅是一项干细胞药物治疗重大疾病的临床研究,更重要的是干细胞制药的标准化研究,为今后出台国家级标准提供依据。  顺昊细胞生物技术(天津)有限公司是滨海新区科技创新型企业,成立仅两年,却汇聚了以天津生物医药创业领军人物周泽奇博士和哈佛大学医学院细胞和分子生理学博士后朱彦、瑞士联邦理工学院分子生物学博士张磊等一大批国内外干细胞研究精英人才。目前已通过了国家高新技术企业认定,成为天津国际生物医药联合研究院干细胞研发中心项目承建单位。

  • 【转帖】干细胞研究,没白花钱

    在日前举行的第二次中国科协论坛“2009年中国干细胞研究高层战略研讨会”上,同济大学校长裴刚这样评价近10年来,国家对干细胞投入得到的回报,并没有白花钱。对于关注我国科研成果和科技进步的人来说,这句话对科研投入来说,应该是一个再好不过的答案。  文章、实验室、重大项目、人才队伍,这些往往是衡量某项学科的科研水平在国际上所处位置的重要指标。从1999年12月,干细胞研究被评为世界十大科学研究之首,到今年,我国的干细胞研究已经走过了整整10年的历程。  按照裴刚的统计,生命科学是国家重点支持的领域之一,支持的重大项目比例很高,在国际上发表文章的数量接近10%。我国干细胞领域实验室数量大约是50个,有超过一半的人员和经费用于干细胞研究,这50个实验室均在国际顶级杂志上发表过两篇以上的干细胞研究论文。裴刚说:“中国和美国的实验室数量跟中国和美国发表文章的数量比,还是好一些,我告诉大家我们没白花钱。”  干细胞研究的重要性不言而喻。如果说21世纪是生物学的世纪,那么生物学中最前沿、最热门的一个研究领域应当是干细胞的研究。“干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,包括胚胎干细胞和成体干细胞。”因为干细胞的这种特性,所以对很多疾病,如神经退行性疾病、各种血液干细胞疾病等都有很重要的治疗意义。然而,干细胞的来源却一直是难以解决的问题。  在这个聚集了南开大学校长饶子和,北京大学生命科学学院教授、长江学者特聘教授邓宏魁,中国科学院动物研究所所长孟安明等20多位学者的研讨会上,加快建设大动物实验平台成为多位专家的共识。中国研究干细胞的动物模型,不能仅停留在小鼠等小动物上,今后要举全国之力试验大动物——猪、猴子干细胞。由于大动物在生物学的许多方面和人类更为相近,所以在临床应用上更加关键。从小动物模型到大动物模型,再到临床应用,这是一个发展的过程。中国科学院动物研究所研究员、国家杰出青年科学基金获得者周琪在讨论时说:“无论是技术研究还是产业化应用,建立大动物实验基地、建立中国特色的模式动物都是十分必要的,这是我们进行干细胞研究的基础。”  抓住人才、机制创新,似乎每一个学科在谈到发展战略时,都要说这样的两点,干细胞领域亦不例外。对于国家实验室的模式,专家们也有着更高的期许:开放性的招聘,长期稳定的择优支持,国有评估,开放流动。如何把国家的需求、科研水平的提升、人才的培养和投入经费以及科研机制更好地融合,最终达到发展科技的目的,这并不是一件容易的事情,也是每个科研领域应该深入解决的问题。希望等到下一个十年,回顾干细胞领域的研究成果时,“我们没白花钱”这句话,能以更高的国际地位得到诠释。

  • 重磅!STAP干细胞根本不存在

    日本理化学研究所(REKIN)的小保方晴子等人 2014 年年初在《自然》上发表了两篇干细胞研究领域的重磅论文,但很快被质疑其研究存在学术不端。日本理化学研究所和《自然》(Nature)随后分别展开调查。日本理化学研究所在 4 月 1 日认定小保方晴子篡改及捏造实验数据。但目前对于该研究的争议还有一个关键性的问题尚未解决:小保方晴子等人在研究中观察到的现象究竟存在吗?或者说 STAP 真的存在吗?日本媒体 6 月 3 日发表的报道称,在对 STAP 实验中用到的细胞进行了基因检测后,结果显示,不存在。根据小保方晴子等人的研究结果,对体细胞进行简单的酸浴刺激,或者施加物理应激,就可以得到 STAP 细胞。这些细胞具有和胚胎干细胞相同的特性。对这些细胞进行进一步操作后,它们也可以形成可自我更新的干细胞系,这就是 STAP 干细胞,它们具有和胚胎干细胞系几乎相同的特性。之前《自然》上发表的论文中报告称,小保方晴子所在的实验室共创建了 8 个 STAP 干细胞系。今年3月,论文合作者之一、山梨大学的若山照彦曾要求文章的第一作者向其提供用某一品系的小鼠细胞制备的 STAP 细胞,但当若山照彦对细胞进行了简单的遗传分析后发现,文章的第一作者小保方晴子给他的干细胞,是由其他品系的小鼠细胞制备的。这表明这些细胞可能受到了污染。但是若山照彦并没有发现《自然》发表的论文中提到的 STAP 干细胞系存在问题。为了验证他的结论,若山照彦将 20 个干细胞系(包括论文中提到的 8 个),寄送给了一家匿名的独立遗传分析小组进行检测。根据日媒援引多方信源的报道,这次检测的结果已经送回理研。检测结果显示,所有 STAP 干细胞系都与论文声称的小鼠品系不符,这一结果对 STAP 现象是否存在提出了质疑。若山照彦表示,他将尽快召开媒体发布会公布相关检测细节。另据报道,日本理化所将有可能支持小保方晴子继续研究工作,设法重演STAP结果。

  • 【转帖】综述:国际干细胞研究竞争加剧

    11月下旬,美日两个研究小组几乎同时宣布成功地将人体皮肤细胞改造成了几乎可以和胚胎干细胞相媲美的干细胞——“iPS细胞”,它也被通俗地称为“皮肤干细胞” 。它的诞生仿佛给沉寂一时的国际干细胞研究打入了一剂强心剂。 诞生仅一月有余,“iPS细胞”相关科研成果和技术革新就屡见报端,一些国家及科学界对这种细胞表现出强烈的关注,纷纷制订相关的研究计划。 “iPS细胞”到底有什么神奇之处,使国际干细胞研究出现了如此热闹的景象? 科学家让普通体细胞“初始化”,使其具备干细胞功能,这就是“iPS细胞”。“iPS细胞”具有和胚胎干细胞类似的功能,却绕开了胚胎干细胞研究一直面临的伦理和法律等诸多障碍,因此在医疗领域的应用前景非常广阔。这一新技术也被权威科学杂志《自然》、《科学》分别评为今年第一大和第二大科学进展。

  • 天士力干细胞创新药获批临床!为上海东方医院首个干细胞成药临床试验项目

    [color=#c00000][i]同济大学附属东方医院再生医学研究所何志颖研究员表示:项目研究从2018年开始,2021年4月Pre-IND,2024年1月18日IND获批!历时6年艰辛。[b]这是东方医院首个干细胞成药临床试验项目,希望能造福于心衰患者![/b][/i][/color]据报道1月18日,天士力公告其一款创新干细胞药物获得国家药监局批准进入临床试验,主治慢性心力衰竭。公告称,公司收到国家药监局核准签发关于[b]人脐带间充质干细胞注射液(B2278注射液)[/b]项目的《药物临床试验批准通知书》,同意开展伴冠状动脉旁路移植术指征的慢性缺血性心肌病导致的慢性心力衰竭的临床试验。[b]人脐带间充质干细胞注射液[b](B2278注射液)[/b]由上海市东方医院(同济大学附属东方医院)研发,2022年8月天士力与东方医院签署《技术转让(合作)合同》受让相关技术及成果,并在全球范围内,优先在中国开展药品注册申报及后续临床试验开发。[/b]临床前研究证明,B2278注射液可通过旁分泌作用调控心肌组织微环境,对于缺血性心肌病中的心肌细胞组织损伤有明显抑制作用,增加动物心功能,促进血管再生,减少心肌凋亡。心力衰竭是由于心脏结构和/或功能异常导致心室充盈和/或射血能力受损的一组临床综合征,是大部分心血管疾病发展的最终阶段,随着年龄增长,心衰患病率和发病率均明显增加。目前对于心力衰竭的治疗主要包括药物治疗、血运重建、细胞和基因治疗,其中冠状动脉旁路移植术(CABG)是常用的血运重建治疗方式,《2022年中国心血管外科手术和体外循环数据白皮书》显示,2022年CABG占心外科手术总量21.1%。上述治疗手段可以在一定程度上延缓心力衰竭的进展,但不能使死亡心肌再生。伴随CABG手术的心肌局部注射干细胞有望通过刺激心脏细胞的增殖和分化、抑制心肌细胞损伤及免疫调节等作用,修复心肌细胞使心肌收缩增强从而对心力衰竭发挥治疗作用。目前国际上获批的干细胞品种已达十余种,但是尚无治疗心衰的干细胞产品上市。[来源:仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

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