标记免疫分析技术

免疫胶体金技术是继三大标记技术后对免疫标记技术的又一大贡献 ,近年来发展迅速 ,应用范围较广 。 胶体金免疫电镜技术是研究细菌 、 病毒 、 肿瘤和自身免疫疾病的主要方法之一 。本文综述了胶体金免疫电镜技术的原理 、 特点 、 应用及研究进展 。

本文将比较使用无标记细胞分析技术进行细胞计数与使用传统的荧光染料标记细胞核和整个细胞进行计数的区别。同样展示出如何通过无标记细胞分析技术来替代荧光染料标记的方法来获得化合物处理细胞后的IC50曲线。

实验方法原理:取一定量的细胞悬液，先加入特异的第1抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。

近年来，实时活细胞分析已成为免疫学研究重要的研究方法，突破了传统方法的诸多限制。在这里，我们总结了10 个活细胞分析技术在免疫学中的重要应用，阐述这种方法的广度、深度和价值。

细胞的激活，扩增以及效应功能是免疫细胞生命周期的关键方面。研究人员正利用XF技术来检测免疫细胞与其代谢特征之间的联系，从而深入了解疾病的病理，病因，以及可能的治疗方案。XF细胞线粒体压力测试检测线粒体功能的关键参数：呼吸水平基础值、ATP合成相关的呼吸值、质子渗漏水平、呼吸能力最大值和呼吸能力储备值。XF糖酵解压力测试则检测糖酵解功能的三个关键参数：糖酵解水平、糖酵解能力最大值和糖酵解能力储备值。

该研究是介绍了一套分析系统用于快速鉴定呼吸气中挥发性有机物（VOCs），用于一些疾病的标记物快速筛查。该系统是基于热脱附吸附管采集呼吸气，经热脱附全自动预浓缩进样，最后经气相色谱 -飞行时间质谱（GC–TOF MS）分析目标物。该系统具有无创易操作的采样过程，经冷阱浓缩和飞行时间质谱分析，具有灵敏度高，软件操作流程清晰明了，可自动对样品进行差异度比较。

免疫学技术：是指在免疫学长期发展过程中形成的一套独特的研究手段和计数，包括人工免疫防治技术（疫苗和血清）和免疫检测技术（抗原抗体检测和机体免疫功能检测）免疫学研究涉及到的重要技术包括：单克隆抗体技术、T细胞克隆技术、转基因及基因编辑技术、分子杂交技术、聚合酶链反应技术等。

免疫沉淀是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术。本文描述了使用水浴恒温振荡器进行免疫沉淀实验的过程、方法和结果分析。实验旨在从细胞裂解物中分离特定的蛋白质复合体。

本篇文章主要介绍如何用免疫荧光技术和间接免疫荧光技术标记大肠杆菌，以及具体的实验方法和需要用到的仪器。

如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

下载中文白皮书《活细胞分析在免疫学中的十大应用》了解Incucyte® 在免疫学及癌症分析中的应用亮点

下载《实时活细胞分析开启免疫细胞杀伤实验新格局》，了解更多免疫细胞杀伤的实时动态分析策略。Incucyte® 位于细胞培养箱内，可以长时程自动采集相差和荧光图片，实时观察并全自动分析肿瘤细胞杀伤和免疫细胞与肿瘤细胞之间的相互作用，配合Cell-By-Cell软件模块可以自动地完成图片的定量分析，直接测定肿瘤细胞的死亡及活力。

如何使用酶联免疫分析仪检测生物学

管道系统中的死水是军团菌和其他细菌繁殖和扩散的理想场所。使用军团菌快速检测套装可在25-35分钟之内检测出系统中是否存在军团菌SG1， 无需制样步骤。军团菌现场测试套装™ 使用侧向免疫层析法（LFICA）技术来检测军团菌细菌表面抗原。测试纸带有红色纳米粒子标记的军团菌抗体，该抗体与样品中发现的任何细菌结合，可在设备上显示一条线。该测试的工作方式类似于怀孕测试——一条线表示阴性结果，而两条线表示阳性结果。

使用酶联免疫分析仪如何检测食品行业什么项目

使用琼脂糖包埋胚胎脑组织, 振动切片机切片,免疫荧光组织化学技术漂染, 激光扫描共聚焦显微镜下观察, 这种技术比一般免疫组织化学技术在研究脑发育方面有更多的优越性。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

Agilent xCELLigence RTCA 实时细胞分析技术采用特殊工艺，在细胞培养板的每个细胞生长孔底部整合了金微电极传感器阵列，用以构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感器系统。该方法无需对细胞进行染料标记，操作简便、快速，无需较多的人为干预，具有检测灵敏度和重现性高的特点，广泛适用于新药研发、免疫治疗、疫苗研发、毒理学、安全药理学、质控和基础生命科学研究。xCELLigence RTCA eSight 将显微成像与实时无标记检测进行整合，实现了活细胞成像与高灵敏度生物传感技术的完美结合；并将阻抗生物传感器与明视场和 3 个荧光通道相结合，可满足客户同时对同一细胞群进行实时阻抗和成像检测。另外，xCELLigence RTCA Cardio/CardioECR/ePacer 专注于心肌细胞研究，可以检测心肌细胞的跳动与场电位，并可促进心肌细胞的成熟，广泛用于药物开发中的心脏安全评价。

近期，约翰霍普金斯大学医学院的研究人员在Science期刊发表研究成果[1]。他们发现了靶向TP53突变的新抗原，筛选出一种抗体片段（H2-scFv）特异性识别灭活的肿瘤抑制基因的蛋白质产物，通过实时监测T细胞杀伤效应，证实了该抗体片段的有效性，开创了靶向疗法的新领域。此研究中，Incucyte® 被选择并应用于免疫细胞肿瘤杀伤活性的实时动态分析。

免疫胶体金技术的反应过程是一个由金颗粒 、 抗原与抗体动态结合的反应过程 ,在这个过程中每个环节的好坏都直接影响试验的成败 。 而试验过程中每个环节又受到很多因素的影响和制约 , 下面将影响免疫胶体金技术的因素作一分析 , 为成功制备胶体金检测产品提供参考 。

人免疫反应性生长激素(irGH)检测试剂盒人免疫反应性生长激素(irGH)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人免疫反应性生长激素(irGH)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人免疫反应性生长激素(irGH)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人免疫反应性生长激素(irGH)抗原、生物素化的人免疫反应性生长激素(irGH)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人免疫反应性生长激素(irGH)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)检测试剂盒人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)抗原、生物素化的人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒中文名称 人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒英文名称 Immunoreactive human growth hormone (irGH) ELISA Kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人免疫反应性生长激素(irGH)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人免疫反应性生长激素(irGH)抗原、生物素化的人免疫反应性生长激素(irGH)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人免疫反应性生长激素(irGH)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒人免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人免疫球蛋白G1(IgG1)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人免疫球蛋白G1(IgG1)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人免疫球蛋白G1(IgG1)抗原、生物素化的人免疫球蛋白G1(IgG1)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人免疫球蛋白G1(IgG1)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）水平。用纯化的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE），再与HRP标记的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠卵清蛋白特异性IgE（OVA-sIgE）的浓度。

实验目的:斑点金免疫渗滤测定（DIGFA）可用于临床检验。实验方法原理:斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上，改用胶体金标记物代替酶，省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜（NC膜）为载体，将试剂及标本滴加在膜上，通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成，阳性结果在膜上呈红色斑点。

捷克全球变化研究所与丹麦哥本哈根大学长期合作研究开发一种环境毒性物质如除草剂、重金属等的高通量生物标记筛选方法。他们使用高等植物的光自养细胞悬液，结合FluorCam叶绿素荧光成像系统、FMT150藻类培养与在线监测系统、AlgaeTron AG230藻类培养箱等仪器开展了大量相关研究。实验结果表明光自养细胞悬液结合FluorCam叶绿素荧光成像技术就是一种非常好的环境毒性生物标记。

白皮书《采用先进的细胞分析方案加速病毒生物学和宿主免疫的发现》重点介绍了如何使用Incucyte® 活细胞分析系统和iQue® 3先进的高通量流式细胞术解决这些挑战，从而更加深入地了解病毒感染过程中宿主病原体的相互作用。

组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： （1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 （3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。 （4）从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体，以致容易混淆。 （5）抗体分子上标记的荧光素分子太多，这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子，可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。 （6）荧光素不纯，标本固定不当等。

人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)检测试剂盒人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)抗原、生物素化的人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。