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微流控细胞生物实验室

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  • 单细胞“纳米生物间谍”技术能进入活细胞取样

    原标题 “纳米生物间谍”技术能进入活细胞取样 可用于深入揭示线粒体基因组变异的重要性 科技日报讯 据物理学家组织网近日报道,美国加利福尼亚大学圣克鲁兹分校(UCSC)研究人员开发出一种机器人式的“纳米生物间谍”系统,能从单个活细胞内提取出微量样本,进行RNA或DNA测序,而不会杀死细胞。研究人员表示,这种单细胞“纳米生物间谍”技术是一种了解活细胞内部动态过程的有力工具。相关论文发表在最近出版的美国化学协会《纳米》杂志上。 “我们能从活细胞中拿走一个‘生物间谍’,再把它送回该细胞,在几天内这样重复多次而不会杀死细胞。如果用其他技术,你不得不牺牲这个细胞才能分析它。”该生物传感与生物电技术小组负责人、UCSC巴斯金工程学院生物分子工程教授内德·波曼德说。 “纳米生物间谍”平台是研究小组用纳米吸液管开发的最新设备。纳米吸液管是一种小玻璃管,取液端越来越细,至尖端直径仅50到100纳米。波曼德说:“我能在实验室造出纳米吸液管,这不需要昂贵的纳米制造设备。但要进入一个细胞,问题是即使在高倍显微镜下,你也看不见吸液管尖端,不知道它偏离了细胞有多远。” 实验室博士后研究员亚当·赛格尔解决了这一问题。他基于在一台改造过的扫描离子电导显微镜(SICM),开发出一种反馈控制系统。该系统能利用通过纳米吸液管尖端的离子流作为反馈信号,在尖端接近细胞表面时探测其中的液滴。在尖端进入细胞之前,一种自动控制系统能定位它在细胞上面的位置,然后尖端很快插入穿透细胞膜,通过操控电压有控制地提取一小点细胞内物质。由于吸液管尖端极精细,对细胞造成的损害极微小。 研究小组用这种系统从活细胞中提取的微量细胞物质,估计只有50毫微微升(千万亿分之一升),约一个人体细胞百分之一的量。他们从单个人体癌细胞中提取物质并进行RNA测序,还从人类成纤维细胞中提取了线粒体并对其进行了DNA测序。“人们已经知道,线粒体和多种神经退化疾病有关。该技术可用于深入揭示线粒体基因组变异的重要性。”波曼德说。 该技术应用前景广阔。波曼德希望能与其他研究人员合作,探索其更多用途。“对于癌症生物学家、干细胞生物学家等想要了解细胞内部情况的科学家来说,这是一种多功能的平台。”(常丽君)来源:中国科技网-科技日报 2014年01月20日

  • 【实战宝典】微流控芯片在细胞分析中有什么应用?

    问题描述:微流控芯片在细胞分析中有什么应用?解答:[font=宋体]微流控芯片的类仿生空间微结构的特性,为细胞培养、单细胞捕捉等提供了良好的平台。使得集成化的细胞研究成为可能,包括细胞进样、培养、分选、裂解和分离检测都有可能在一块生物微流控芯片上完成。[/font][font='Times New Roman','serif'][/font]以上内容来自仪器信息网《样品前处理实战宝典》

  • 生物“电脑”摧毁肿瘤细胞:人类细胞导入诊断网络

    作者:丁香园网友Docofsoul《每日科学》2011年9月1日报道——由瑞士联邦理工学院(ETH)Yaakov Benenson教授与麻省理工Ron Weiss教授率领的研究小组成功地将生物“计算机”诊断网络导入人类细胞。该网络有识别某些肿瘤细胞的能力,利用五种肿瘤特异性分子因子的逻辑组合,进而触发肿瘤细胞毁灭过程。http://img1.jiansuo.net/cms/upload/userfiles/image/2011/09/04/1315042501_small.jpg细胞微机布线图:所有五种因子必须处于相应的正确状态,由此触发细胞死亡(图片来源:y Benenson Y. 教授 R. Weis教授)开发活体细胞内运作的生物电脑,是ETH苏黎世分院合成生物学教授Yaakov (Kobi) Benenson孜孜以求的目标,其职业生涯的大部分时间都倾注于此。他想建立既能侦测细胞生存状况、又能在细胞异常时对相应信息进行处理以提供合适的治疗响应的生物微机。目前,通过与麻省理工教授Ron Weiss以及团队成员(包括博士后学者Zhen Xie 与 Liliana Wroblewska、博士生Laura Prochazka)合作,他向这一目标迈出了重大一步。这一研究成果已发表于《Science》(见本文所附参考文献),论文介绍了一种多基因合成“电路”;此电路负责鉴别正常细胞与肿瘤细胞、继而进一步摧毁肿瘤细胞。其工作方式是:对细胞内五种肿瘤特异性分子因子及其出现频率进行抽样与综合;只有当所有这些因子在细胞内同时出现时,该电路才会作出正识别响应。这种方式使得侦测肿瘤的准确率非常高。研究者希望这一成果能够为高特异性抗癌治疗奠定基础。对肿瘤细胞的选择性破坏本研究对实验室培养的两种类型人类细胞进行了基因网络测试:海拉细胞(子宫颈癌细胞)与正常细胞。当基因生物微机被导入这两种不同的细胞类型时,只有海拉细胞被摧毁,而正常细胞则安然无恙。当然,取得这一结果需要做大量的基础工作。首先必须找出海拉细胞特有的分子组合。Benenson及其他小组成员在属于小RNA分子(MicroRNA或miRNA)这一类化合物的分子中找,终于确认其中一个miRNA组合(或者说“可识别属性”)只有海拉细胞才有,其它健康细胞类型内则不存在。发现这种可识别属性是一项颇具挑战性的任务。人体内既存在250种不同的健康细胞类型,此外也存在为数众多的肿瘤细胞的变异型(其中数百种可作实验室培养)。但miRNA多样性则更是不让须眉花样繁多,人类细胞中已得以描述的即达500到1000不同种类。Benenson指出:“每种健康或病损细胞类型都有其不同的miRNA分子处于开放或关闭状态。”可识别肿瘤属性中的五种因子确立一种miRNA“可识别属性”与发现一组症状以可靠诊断一种疾病有所不同。教授说:“一种症状,比如说发热吧,不可能由此概括出一种疾病。医生获得的信息越多,其诊断才越可靠。” 一年半前他从哈佛大学到ETH后,研究小组找到了几种因子,可由此可靠地将海拉细胞从所有其它健康细胞中鉴别出;结果表明,仅仅五种特定miRNA的组合(其中某些以高水平出现,某些则以极低水平出现)就足以将海拉细胞从其混迹的健康细胞中揪出来。与微机运作相似的网络Benenson介绍说:“这些miRNA因子在细胞内进行逻辑代数运算;该生物微机运用诸如‘与’与‘非’等逻辑操作将这些因子进行组合,并且,当全部因子的整体运算结果为逻辑‘真’值时,只产生所需要的结果——那就是细胞死亡。” 确实,研究者已经能够显示该网络在活体细胞内可以非常稳定地运作,可正确组合所有细胞内因子并给出正确的诊断。Benenson认为,这一成果代表该领域的一项重大成就。动物模型与基因疗法该研究小组想在下一步在合适的动物模型上测试该细胞计算方法,以期在未来创建诊断与治疗工具。这听起来可能象科幻小说,但Benenson相信其可行性;不过,仍有不少棘手的问题需要解决。比如,如何有效、安全地将外源基因导入细胞?这种DNA递送在目前情况下颇具挑战性。尤其是,该方法需要将外源基因暂时而不是永久导入细胞。现有的病毒导入法或化学导入法均未充分开发,需要进一步完善。Benenson说:“为人类提供一种功能完善的治疗方法还非常遥远。不过这一工作是重要的第一步,显示了单一细胞水平上这样一种选择性诊断方法具有可行性。”参考文献:1. Z. Xie, L. Wroblewska, L. Prochazka, R. Weiss, Y. Benenson. Multi-Input RNAi-Based Logic Circuit for Identification of Specific Cancer Cells. Science, 2011; 333 (6047): 1307 DOI: 10.1126/science.1205527

  • 【原创大赛】微流控芯片中的酵母细胞

    【原创大赛】微流控芯片中的酵母细胞

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312345_343455_1705310_3.jpg拍摄时间:2011年8月样品名称:微流控芯片中的酵母细胞所使用的显微镜:倒置显微镜以及数码相机的生产厂家和型号:北京奥特伟业光学仪器有限公司 奥特三目倒置生物显微镜 BDS200物镜及目镜放大倍数:10×10照明方式:明场

  • 细胞培养实验室常用的基本仪器设备-离心机

    [b][font=宋体]细胞培养实验室组建的基本要求[/font]:[/b]1[font=宋体]、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。[/font]2[font=宋体]、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。[/font]3[font=宋体]、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为[/font]10[font=宋体]万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外,避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需要一个空调系统并对外界保持一定的正压。[/font]4[font=宋体]、解剖实验室主要用于对器官组织的分离,需要有无菌操作台、解剖显微镜、各种手术器材等。[/font] [align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/2018-10-12/301.html][img=实验室离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/4b60dacaa256bcc4fe665e2eb3536c0a.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]智能台式高速冷冻实验室离心机 3H24RI[/b][/align][font=宋体]组织细胞培养室除一般实验室的普通常规设备外,尚有一些特殊需要的设备。基本可分为两大类:[/font][font=宋体]第一类为常用的基本设备;[/font][font=宋体]第二类为较高级的特殊设备。[/font][b]1. [font=宋体]细胞培养实验室常用的基本仪器设备[/font]1.[font=宋体]显微镜:[/font][/b][font=宋体]倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。[/font][b]2.[font=宋体]培养箱:[/font][/b][font=宋体]体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是[/font]37[font=宋体]℃,温差变化一般不应超过±[/font]0.5[font=宋体]℃,细胞在温度升高[/font]2[font=宋体]℃[/font] [font=宋体]时,持续数小时即不能耐受,[/font]40[font=宋体]℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及[/font]CO2[font=宋体]培养箱。[/font][b]3.[font=宋体]干燥箱:[/font][/b][font=宋体]用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。[/font][b]4.[font=宋体]水纯化装置:[/font][/b][font=宋体]细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。[/font][b]5.[font=宋体]冰箱:[/font][/b][font=宋体]细胞培养室必须配备。[/font]a[font=宋体]、普通冰箱或冷藏柜——储存培养液、生理盐水等培养用的物品及短期保存组织标本。[/font]b[font=宋体]、低温冰箱([/font]-20[font=宋体]℃)——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。[/font][b]6.[font=宋体]细胞冷冻储存器:[/font][/b][font=宋体]储存器常用的是液氮容器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。[/font][b]7.[/b][font=宋体][url=http://www.hexiyiqi.com/][b]离心机[/b][/url][b]:[/b]进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/]实验室离心机[/url]。一般可常规配置[/font]4000rpm[font=宋体]的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/]低速离心机[/url]即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。[/font][align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/69.html][img=低速离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/0e080cd46b2ee061b55caabaaee8cbf2.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]台式低速离心机TD5A[/b][/align][b]8.[font=宋体]天平:[/font][/b][font=宋体]常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。[/font][b]9.[font=宋体]消毒器:[/font][/b][font=宋体]一般为高压蒸汽灭菌锅,直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。[/font][b]10.[font=宋体]滤器:[/font][/b][font=宋体]目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多采用滤过消毒以除去细菌。目前常使用的滤器有玻璃滤器和微孔滤器,各种滤器有其使用原理和特点。[/font][b][font=宋体]常用的培养器皿:[/font][font=宋体]培养用器皿[/font][/b][font=宋体]是[/font][font=宋体]供细胞接种、生长等用的器皿,可由透明度好、无毒的中性硬质玻璃或无毒而透明光滑的特制塑料制成。[/font][font=宋体]细胞培养中需要的各种耗材[/font],[font=宋体]各类细胞培养板,细胞培养瓶,平皿移液管等。[/font][b][font=宋体]培养瓶[/font][/b][font=宋体]:由玻璃或塑料制成。主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容量([/font]ml[font=宋体])表示,如[/font]250ml[font=宋体]、[/font]100ml[font=宋体]、[/font]25ml[font=宋体]等;进口培养瓶则多以底面积([/font]cm2[font=宋体])表示。[/font][b][font=宋体]培养皿:[/font][/b][font=宋体]由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常用的培养皿规格有[/font] 10cm[font=宋体]、[/font]9cm[font=宋体]、[/font]6cm[font=宋体]、[/font]3.5cm[font=宋体]等。[/font][font=宋体]多孔培养板:为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试大量样本,易于进行无菌操作。培养板分为各种规格,常用的规格有:[/font]96[font=宋体]孔、[/font]24[font=宋体]孔、[/font]12[font=宋体]孔、[/font]6[font=宋体]孔、[/font]4[font=宋体]孔等。[/font][b][font=宋体]培养操作有关的器皿[/font][font=宋体]贮液瓶:[/font][/b][font=宋体]常见的为蓝盖瓶,主要用于存放或配制各种培养用液体如培养液、血清及试剂等。贮液瓶分为各种不同规格,如[/font]1000ml[font=宋体]、[/font]500ml[font=宋体]、[/font]250ml[font=宋体]、[/font] 100ml[font=宋体]、[/font]50ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]等。[/font][b][font=宋体]吸管:[/font][/b][font=宋体]主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有[/font]1ml[font=宋体]、[/font]2ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]、[/font]10ml[font=宋体]等规格。无刻度吸管分为直头吸管及弯头吸管,除可以作吸取、转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。[/font][b][font=宋体]加样器([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url])[/font][/b][font=宋体]:分为微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]电动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。用于吸取、移动液体或滴加样本。可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。可保证实验样品(或试剂)含量精确,重复性良好。[/font][b][font=宋体]其他用品:[/font][/b][font=宋体]尚有收集细胞用的离心管,放置试剂或临时插置吸管用的试管,装放吸管以便消毒的玻璃或不锈钢容器,用于存放小件培养物品便于高压消毒的铝制饭盒或贮槽,套于吸管顶部的橡胶吸头,封闭各种瓶、管的胶塞、盖子、冻存细胞用的安瓿或冻存管、不同规格的注射器、烧杯和量筒以及漏斗,超净工作台使用的酒精灯,供实验人员操作前清洁消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型喷壶等。[/font][b][font=宋体]器械[/font][/b][font=宋体]主要用于解剖、取材、剪切组织及操作时持取物件。常用的有:手术刀或解剖刀、手术剪或解剖剪(弯剪及直剪),用于解剖动物、分离及切剪组织,制备原代培养的材料;眼科虹膜小剪(弯剪或直剪),用于将组织材料剪成小块;血管钳及组织镊、眼科镊(弯、直),用于持取无菌物品(如小盖玻片)夹持组织等;口腔科探针或代用品,用以放置原代培养之组织小块。[/font][b]2[font=宋体]、细胞培养实验室特殊设备[/font][/b][font=宋体]细胞培养实验室除了应配备上述的常用基本设备以外,如有条件,可添置一些特殊或先进的设备仪器,以便更有效、更精确、更深入地进行实验室工作。例如:[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])酶联免疫检测仪——可用于进行免疫学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font] [font=宋体]超低温冰箱([/font]-80[font=宋体]℃)——便于储存某些试剂及标本。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])旋转培养器——用于某些特殊细胞或需要收获大量细胞的培养。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])[/font] [font=宋体]荧光显微镜——进行荧光染色样本的观察。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])[/font] [font=宋体]流式细胞仪——可更精确及快速检测细胞。[/font][font=宋体]([/font]6[font=宋体])用于检测细胞培养条件的各种仪器,例如专门为快速分析细胞培养基中主要或关键营养成分、代谢产物及气体含量设计的多功能细胞培养分析仪、手提式[/font]CO2[font=宋体]浓度测定仪等。[/font][b][font=宋体]其余仪器[/font][/b][font=宋体]对于细胞实验还可能需要振荡器及磁力搅拌器用于混匀液体;还有一些沾满细胞的难清洗的不锈钢类或玻璃类器皿,则需要超声波清洗机的帮助;如果涉及免疫实验,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的话,则需要购买制冰机;另外破碎细胞可能会需要超声波细胞破碎仪;[/font]

  • 如何做好细胞培养?—实验室细胞培养技术面面观

    [align=center][b][size=14pt][font=等线]如何做好细胞培养?[/font]—实验室细胞培养技术面面观[/size][/b][/align][align=center][size=11pt]会议时间[/size][size=11pt]:[/size][size=11pt]2020年[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]月[/size][size=11pt]17[/size][size=11pt][font=等线]日[/font]1[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]:00[/size][/align][b][size=12pt]内容[/size][size=12pt]介绍:[/size][/b][size=10.5pt]1. 细胞培养简介[/size][size=10.5pt];[/size][size=10.5pt]2. 细胞培养实验室[/size][size=10.5pt]:实验室安全等级、培养设备[/size][size=10.5pt]/耗材[/size][size=10.5pt]、无菌技术;[/size][size=10.5pt]3. 细胞培养基础[/size][size=10.5pt]:细胞系、细胞培养环境([/size][size=10.5pt]PH,CO2浓度,温度,湿度)[/size][size=10.5pt];[/size][size=10.5pt]4. 细胞培养方案[/size][size=10.5pt]:贴壁细胞传代、悬浮细胞传代、细胞冻存、细胞复苏、细胞计数;[/size][size=10.5pt]5. 细胞培养常见问题[/size][size=10.5pt]:细胞污染、细胞太稀、细胞消化过度、细胞复苏状态不佳。[/size][b][size=12pt]讲师[/size][size=12pt]介绍:[/size][size=11pt]雷俊[/size][size=11pt]:[/size][/b][size=11pt]北京大学细胞生物学博士博士研究生期间,主要从事细胞周期事件与肿瘤发生关系的研究,具有细胞生物学、蛋白质组学等学科背景,精通分子细胞生物技术、成像技术等研究手段。现任瑞沃德生命科技有限公司细胞产线产品经理。[/size][b]报名地址:[/b][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html][u][font='Times New Roman'][color=#0000ff]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html[/color][/font][/u][/url]

  • 2017第七届国际分子与细胞生物学大会通知

    第七届国际分子与细胞生物学大会将于2017年4月25-27日在西安举行。大会活动主要包括主题报告、科技论坛、专题讨论会、展览展示、海报展示高端人才招募洽谈会等。会议议题包含干细胞、分子与细胞生物学的最新技术、分子细胞生物学、生物医药等。此外本届会议将邀请到国内外著名院士、以及来自世界50多个国家和地区的相关领域学者、企业高管、科研院所的科研专家等领衔主讲高端论坛近40个。为广大的国内外分子与细胞生物学领域嘉宾提供了相互交流的平台。同期将召开第二届遗传学大会和生物技术产业大会。三会联动,一次注册均可参加!大会网站:http://www.bitcongress.com/cmcb2017/cn/default.asp大会主席:尹玉新博士,北京大学基础医学院院长、北京大学系统生物医学研究所所长大会主题论坛演讲人:Martin Banwell 博士,澳大利亚国立大学教授 Christian Patermann 博士,德国欧洲委员会前主任 Robert S. Plumb 博士,英国帝国理工学院教授Dongping Zhong博士,美国俄亥俄州立大学教授Xiang Zhang博士,英国剑桥大学首席顾问,皇家学会会员 著名演讲人(国内)卢灿忠,中国科学院福建物质结构研究所教授罗顺,中国健顺生物科技有限公司总裁许胜勇,北京大学教授范兴明,云南省农业科学院研究员孙凌云,南京大学医学院教授、主任谭砚文,复旦大学教授陈建海,南方医科大学教授谢志红, 安徽医科大学教授华益民,苏州大学教授沈赞明,南京农业大学教授胡颖,哈尔滨工业大学教授刘磊, 北京大学教授郑彩霞,北京林业大学教授邓文生,武汉科技大学教授邓文礼, 华南理工大学教授王雯,首都医科大学教授陈兵, 第三军医大学教授张小莺,西北农林科技大大学杨铁林,西安交通大学教授秦 鸿雁,第四军医大学教授刘毅, 遵义医学院附属医院教授许乃寒,清华大学深圳研究生院教授茅卫锋,大连医科大学副教授张志远,中国国家生物科学研究所研究员蒋晓江,第三军医大学教授,主任医师刘书逊,第二军医大学副教授吴玉梅,第四军医大学副教授著名演讲人(国外):Ying-Jan Wang,台湾国立成功大学教授Julie Kazimiroff,美国艾伯特爱因斯坦医学院主任Samir Ounzain,瑞士洛桑大学博士后科学家Yitzhak Rabin,以色列巴伊兰大学教授Franz E. Weber, 瑞士苏黎世大学教授Christina L. Chang,台湾国立成功大学教授Ivan Robert Nabi,加拿大英属哥伦比亚大学教授Brajendra K. Tripathi,美国国立卫生研究院科学家Stefano Zanasi,意大利佛罗伦萨大学教授Vadim Davydov,俄罗斯国立医科大学教授So Yoon Kim,韩国延世大学教授Kari Keinanen,芬兰赫尔辛基大学教授Yi Wang,加拿大阿尔伯塔大学Yeu-Ching Shi,台湾Indigena Botanica公司Ruben G. Contreras,墨西哥高级研究中心首席研究员Yong Jia,美国诺华研究基金会基因组学研究所高级研究员Dongxia Xing,美国MD安德森癌症中心高级研究科学家Mark A. Birch-Machin,英国纽卡斯尔大学教授 Zvi Naor,以色列特拉维夫大学教授Jia-Ching Shieh,台湾中山医科大学副教授Emmanuel M. Drakakis,英国帝国理工大学教授Kiwon Song,韩国延世大学教授Gregory Lee,加拿大不列颠哥伦比亚大学教授Michael Uhlin,瑞典卡罗林斯卡学院研究员Makoto Fukuda,日本东京医科齿科大学Kwan-Kyu Park,韩国大邱大学教授Yonggui Gao,新加坡南洋理工大学副教授Edith Aberdam, 巴黎第七大学研究工程师Alex Kharazi ,美国Stemedica副总裁Jukka Tuomi,芬兰阿尔托大学研究室主任Charles H. Sherwood,美国阿尼卡疗法有限公司总裁、首席执行官David Trudil,美国NHDetect公司执行总裁Alain Verreault,加拿大蒙特利尔大学教授、首席研究员Susanne Staehlke, 德国罗斯托克大学医学中心研究员 会议议题专题一:细胞生物学的研究前沿论坛1:细胞核结构和功能 论坛2:染色质和表观遗传 论坛3:基因组不稳定性和DNA损伤 论坛4:细胞骨架、粘附和迁移 论坛5:中心粒、中心体和纤毛 论坛6:蛋白质结构和功能 论坛7:膜结构、动态、运输和调控 论坛8:线粒体功能和细胞能量代谢 论坛9:信号转导和信号网络 论坛10:细胞分裂和细胞周期 论坛11:蛋白质稳态、细胞应激 论坛12:细胞坏死与存活 论坛13:叶绿体和光合作用 论坛14:细胞壁生物学 论坛15:发育和形态发生 论坛16:免疫细胞生物学 论坛17:微生物和寄生虫生物学 论坛18:基因表达和转录调控专题二: 干细胞论坛1:胚胎干细胞和成体干细胞 论坛2:间充质干细胞 论坛3:造血干细胞 论坛4:神经干细胞 论坛5:细胞可塑性和重编程 论坛6:干细胞治疗专题三: 分子与细胞生物学的最新技术论坛1:基因组编辑技术 论坛2:高通量/高含量技术 论坛3:分子和细胞成像技术 论坛4:单分子和单细胞分析技术 论坛5:实验室芯片、微流体和微阵列 论坛6:流式细胞术 论坛7:新型细胞分离,分离和培养技术 论坛8:光遗传学专题四: 分子细胞生物学与生物医药论坛1:分子与细胞生物学和转化医学 论坛2:分子药物靶标研究 论坛3:癌细胞生物学 论坛4:细胞神经生物学 论坛5:神经退行性疾病 论坛6:生殖细胞和生殖疾病 论坛7:肌肉细胞和肌肉疾病 论坛8:RNA与疾病和治疗 论坛9:端粒、端粒酶与衰老 论坛10:模式生物和疾病模型 论坛11:组织修复与再生 论坛12:心血管生物学 论坛13:红细胞疾病 论坛14:时间生物学★ 企业展位展览范围 一、科学仪器区 分析测试仪器:光谱仪器、色谱仪器、质谱仪器、频谱仪器、波谱仪器、光学分析仪器、热分析仪器、表面分析仪器、元素分析仪器、成份分析仪器、过程分析仪器、图像分析仪器、射线分析仪器、气相色谱、液相色谱、显微镜、光学影像处理和其他通用分析仪器等。 通用实验室仪器:热量装置、反应装置、剂量称重系统、自动化装置、独立技术、实验室家具、实验室用品、实验室医疗设备、实验室数据系统、实验室图像分析及处理、实验室工艺及设备、输送设备与连接装置、清洁、烘干设备、超洁净环境工程设备等。 生化仪器、生命科学及微生物检测仪器、实验动物设施:多肽合成仪、氨基酸测试仪、DNA合成仪、诊断仪器、生物生化技术设备、生物培养箱、发酵罐、酶标仪、生物传感器、生物工程过程控制与生产工艺装备。行业专用分析仪器与设备:电子光学仪器、生化仪器、生命科学及微生物检测仪器、生物反应器、实验动物设施。二、试剂/消耗品区 通用试剂、仪器专用化学试剂、标准物质、实验室用化学品、电子试剂 、光化学试剂、生化和分子生物学试剂、医学/诊断/检验试剂、细胞/血清/培养基抗体、实验室消耗品。 三、生物医药区

  • 【新书推荐】《微流控芯片实验室》

    本书为大连化物所林炳承老师最新力作。分上下两篇,上篇以技术为主,分别阐述芯片、芯片上各种单元操作和不同的检测技术;下篇则着重应用,重点介绍微流控芯片实验室在核酸、蛋白质、小分子和细胞等方面已有的工作,并尽可能充分地提供来自一线实验室的成功案例。另有一章绪论,概括微流控芯片研究的基本历程,浓缩作者对这一新兴技术平台的理解、体会和积累。全书从思想、内容到逻辑、文字,都经过反复的讨论、充实、推敲和斟酌,力求引证梳理兼有,综合分析并重,特别值得一提的是,全书以林炳承老师实验室的工作贯穿始终,更具有实际指导价值。   本书已由科学出版社出版,仪器信息网有售,需要购买本书或欲了解本书详情的朋友,请访问[url]http://www.instrument.com.cn/book/shtml/20060807/1009090.shtml[/url]  另外,本网最近开展[url=http://www.instrument.com.cn/service/action.htm]“购书送积分”活动[/url],请关注!

  • 实验室菜鸟的细胞培养心得

    作为一只刚进实验室的菜鸟把自己遇到的东东总结一点发出来,抛砖引玉吧,为即将进实验室的朋友些资料,同时欢迎老鸟们指正。1、在实验室登记领试剂和药品pbs 1640 Gbico的FBS 台盼蓝 计数板 酒精灯 胶塞 封口胶 消毒的喷剂 记号笔 镊子 标签 饭盒 消毒时包饭盒的布 冻存管 冻存剂 离心管 培养瓶 6孔板 96空板 吸管 吸球。pbs 1640 Gbico的FBS 我都是买的现成的,就是那些实验室老师用原料配好了来卖的那种,我是害怕自己本来就是一个新手,为省那钱自己配,别污染了多的事情都来了,当然很多老鸟都自己配,别鄙视我哈。2、换液a 开瓶盖的时候,网上的视频里是用镊子开的,但是现在用的瓶塞多是新的,稍微一使劲,胶塞就会被扯破(我这周换了好多塞子了),扯破了的塞子把瓶子包不住,有污染的危险,特别是冰箱里试剂装得很拥挤的时候。方法:切忌男生像我一样用力过猛,如果实在要扯烂,干脆就用手去扯塞子,不过严格按照翻起塞子-烧-扯-再烧就是了,完全没有污染的顾虑b 加液体的时候很很容易就吸到赛棉花那一截去了(很多熟练的都不塞棉花了,他们力度控制得好,只要不吸过头,完全ok的),这时候,就不要再吝惜你的培养基了,全部甩到废液缸里去吧,毕竟吸球没有消毒(我们这里是这样的哈),浸湿过了棉花就可能沾到吸球。c 往培养瓶里加pbs、FBS等液体时候,手抖得厉害。不是滴在瓶口,瓶壁上,就是滴在超净台上。方法:滴在瓶口的一定要烧干,不然小心污染,瓶壁和台子上的可以用消毒后的干净纱布擦拭;另外就是自己找个空瓶子,自己练习加液体,熟能生巧。3、传代a 消化细胞的时间真的是不同细胞就不同,我的细胞是消化5分钟,还是在孵箱里放着的,拿出来以后还要又拍又晃的,朋友的一分钟就全飘起来了,如果你是第一次做,或者你们实验室没有做过这个细胞,您就最好一直在镜下看着细胞,摸一下时间(用表记录时间,不光是“摸”哈),消化过头的细胞,长得不好,如果你是外面买的细胞,就又可能浪费经费了。另外,认真分析了一下,我的癌细胞稍微比朋友的正常组织的细胞消化得慢,他的细胞长得慢,细胞少(毕竟正常细胞不能和癌细胞比),3天才传第一代,我的都2代的瓶子了都铺满60%,他的贴的也不怎么紧。b 离心离心的时候,因为忙着把刚终止了消化的细胞拿去离心,很容易忘记在您的离心管上标记,配平完了,机子都转到1000转了,才想起来,也没法子了。方法:实在是忘记了标记,用于配平的管子里的液体没有你刚做完消化的液体清亮,你反正选最清亮的那个就是了。c 分装的时候,我一传3,加上离心管的盖子,满桌子都是瓶盖,很容易搞错,尤其是在和别个拼台子做实验的时候,更是拥挤,千万要放好,不然空间一拥挤,你取东西的时候很容易从这些面朝上的盖子塞子上面经过,就有可能污染了,虽然盖盖子的时候还要过火烧,但是说实话,烧那几下,连手指都烧不烫,咱还是从不污染的角度做起吧。4、我犯其他的傻a 进细胞间去照台子(说实话,是去抢台子,别人要是紫外照起了,就只能等他们做完再照,就又要等半小时),结果口罩帽子都忘记了带,挨了顿批评。b 吸管在酒精灯上过火烧几次的时候,吸管尖碰在了灯芯旁的酒精瓶铜的那部分。c 倒老的培养液的时候才发觉,废液缸没拿进细胞间。跑出去再拿。记得重新消毒手,而且我离开台子的时候,很怕其他人经过污染我已经打开了的各个试剂的瓶子。不放心的只有盖好再走,再进来时再从头弄,浪费时间。5、其他要注意的问题a 我看见也是个新进实验室的女生,双手悬在空中费劲的塞胶塞(估计也是新胶塞,太紧了,塞不大进去),结果手一滑,整瓶胰酶倒在超净台上。(还好不是加GbicoFBS的1640,呵呵),倒了记得把台子擦干净,上次不知道是谁把什么有机溶剂都倒在台子上了,我一去,还沾手,郁闷,自己做好自己分内的,别让实验室里其他的人说你是个污染源或者细胞杀手。b 某天朋友准备换液,结果就把培养基pbs胰酶全都放在37摄氏度水浴里,结果后来有事走了,只把照台子时候放那的东西收拾了,5个小时后才突然想起,只好暂时不用那个培养基了,重新再用新的。养到后面细胞多了,不怕细胞死的时候,还是可以试验着用用那瓶培养基的。

  • 实验室(研究所)空间消毒灭菌方式探讨及根除实验室空间微生物的新途径

    简介实验室即进行试验的场所,是科技的产出地,是科学的摇篮,是科学研究的基地,科技发展的源泉,对科技发展起着非常重要的作用。进入二十世纪,各类实验室如雨后春笋,研究工作广泛开展。在科技发达的今天,对于实验室微生物的控制却是束手难测,实验室对洁净度要求比较高,必需严格控制空间微生物数量,防止杂菌污染目标菌种及器皿,且实验完毕后要对样本进行销毁、空间及器材进行消毒防止微生物对外环境污染。实验室的消毒,一直都是工作人员很头疼的问题。但是又必须做好,否则工作就没法很好的开展。即要达到灭菌消毒效果同时又不能使人员和设备受到危害。所以一般考虑用杀菌效果好的灭菌消毒剂,还要安全无毒副作用的。一般情况下,实验所用的物质都带有毒性,经常会产生各种难闻的,有腐蚀性的、有毒的或易爆的气体。这些有害气体如不及时排除室外,会造成室内空气污染,影响实验人员的健康与安全;影响仪器设备的精度和使用寿命。实验室空间污染源 (1)在实验室当中的大部分实验员来自不同的生活环境,可能有一部分实验员缺少很好的自我卫生习惯,因此进入房间当中,所需要标本、模型让其操作道具,每一种模型会有很多人进行接触,标本在我们不知不觉当中已经变成了无形病毒的传播能够存在的介质,再加上某些实验员的不良习惯,尤其是部分实验员有吃食物的爱好,就能够使得病从口腔进入身体的情况出现。 (2) 实验室当中标本、物品很多,在实验员运用后,对于标本、模型采用置之不理得态度,能够使得标本以及道具沾染细菌。 (3) 实验室的消毒产品并不能进行全面杀毒灭菌,甚至一部分的实验室没有进行消毒杀菌。 (4) 实验室人员没有完全使用实验室制度来进行操作或者没有依照实验室的相关要求学生进行试验。 (5) 有些试验要求使用“菌罗”以及储存“菌落”的实验室不可以完全按照要求,在实验室操作实验员决定没有必要完全按照操作进行,因此对自我造成伤害。实验室空间污染分类实验室生物源危害主要是由微生物。尤其是病源微生物引起的。包括细菌。病毒。寄生虫等。在实验室内做试验、研究等操作时。实验人员需要处理大量的病源微生物,很容易引起污染。根据生物污染的对象,为空气污染、水污染、人体污染、物体表面污染等种类。1.对空气的污染:根据污染空间,可分为实验室内环境空气污染、实验室外环境空气污染。许多操作可产生气溶胶。气溶胶(aerosol),是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,又称气体分散体系。其分散相为固体或液体小质点,其大小为10﹣3cm~10﹣7cm,分散介质为气体。当气溶胶不能安全有效地限定在一定范围内,便导致实验室内空气污染。2.对水的污染:实验中会产生大量污水,医院污水尤其是传染病医院,综合医院传染病房的污水,有大量的有机悬浮物和固体残渣,还不同程度的含有多种细菌、病毒和寄生虫虫卵。这种污水不经处理直接排入江河、池塘或直接灌溉,可污染环境和水源。当人们接触成食用污染水时,可能使人致病或引起传染病的流行。3.对人体的感染:人是实验室污染最容易侵袭的对象。其污染途径包括接触污染物或吸入病源微生物气溶胶。原因有几下几种:(1)实验室事故引起的污染,通过器械、破碎且污染的玻璃器皿、针头刺破伤而发生。(2)实验室动物引起的感染。(3)气溶胶引起的感染,通过呼入被污染的气溶胶而感染。(4)其他:工作区与生活区相混,下班或餐前不洗手而感染。4.对物体表面的污染:实验人员的皮肤、鞋底、感染性物溢出或溅出后处理不当可造成墙壁、地面、台面、仪器和其他等物体表面的污染。实验室常用消毒剂1、紫外线灭菌 在接种室、超净台上或接种箱里用紫外灯灭菌。紫外线灭菌是利用辐射因子灭菌,细菌吸收紫外线后,蛋白质和核酸发生结构变化,引起细菌的染色体变异,造成死亡。紫外线的波长为200-300nm,其中以260nm的杀菌能力最强,但是由于紫外线的穿透物质的能力很弱,所以只适于空气和物体表面的灭菌,而且要求距照射物以不超过1.2m为宜。2、熏蒸灭菌 用加热焚烧、氧化等方法,使化学药剂变为气体状态扩散到空气中,以杀死空气和物体表面的微生物。这种方法简便,只需要把消毒的空间关闭紧密即可。 它们使微生物的蛋白质变性,或竞争其酶系统,或降低其表面张力,增加菌体细胞浆膜的通透性,使细胞破裂或溶解。一般说来,温度越高,作用时间越长,杀菌效果越好。另外,由于消毒剂必须溶解于水才能发挥作用,所以要制成水溶状态,如升汞与高锰酸钾。还有消毒剂的浓度一般是浓度越大,杀菌能力越强,但石炭酸和酒精例外。 常用熏蒸剂是甲醛,熏蒸时,房间关闭紧密,按5-8ml/m3用量,将甲醛置于广口容器中,加5g/m3高锰酸钾氧化挥发。熏蒸时,房间可预先喷湿以加强效果。冰醋酸也可进行加热熏蒸,但效果不如甲醛。3、臭氧灭菌 臭氧极不稳定,分解时释放出自由基态氧,自由基态氧具有强氧化能力,可以穿透细胞壁,氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶;也可以直接与细菌、病毒发生作用,破坏其细胞器和核糖核酸,分解DNA、RNA、蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物,使细菌的物质代谢生长和繁殖过程遭到破坏;还可以渗透细胞膜组织,侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部的脂多糖,促进细胞的溶解死亡,并且将死亡菌体内的遗传基因、寄生菌种、寄生病毒粒子、噬菌体、支原体及热原(细菌病毒代谢产物、内毒素)等溶解变性灭亡。实验室空间灭菌,消毒,是实验室的一个重点,也是难点,就算在严格的生物安全柜里操作也难以避免病毒气溶胶以气体扩散的形式逸散在空气中, 还有阳性动物的呼吸等途径都会有机会给空气传上病毒分子。 目前普遍采用的是臭氧或者甲醛熏蒸配合杀孢子剂,但是臭氧的杀菌能力有限,甲醛熏蒸对人体的危害性大,且消毒后必须空置2-3天,人员才能进入洁净区,影响效率不说,还不易验证。极大的造成了实验室的生产效率降低, 而且也不易验证。 那么有没有一种全新的灭菌消毒产品,在既能达到快速、方便灵活对微生物室空间进行杀菌消毒效果同时,又不会让人员和设备受到危害材料兼容性好的空间灭菌产品,还没有残留呢?奥克泰士实验室空间灭菌剂的出现,彻底解决以上难题!奥克泰士应用于涉及实验室空间污染的洁净室,无菌区等。 其目的是消灭各种对人或动物有致病生命危险的病源微生物的同时,保护工作者、合作者和实验室支持人员不受传染,同时保护产品和环境不受污染。成功的破除了杀孢子剂有刺激性,有害的传统消毒概念,破除了空气熏蒸需要静置很长一段时间的固有概念。主要成分过氧化氢 银离子。德国原装进口,食品级无色无味无毒无残留型,是目前国际上最为先进的一款实验室环境微生物杀菌消毒剂,由于其独特的作用原理,能够杀灭包括芽孢、细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌、病毒在内的所有类型的微生物具有杀菌彻底,不产生微生物耐药性,无任何毒性残留,不造成重复污染等特点。采用的氧化剂为过氧化氢,它与稳定剂结合形成复合溶液。作为催化剂添加的痕量银离子可以保持长久的效用。银离子的杀菌作用是基于单价银离子通过共价键和配位键来与细菌蛋白质牢固结合,从而使细菌钝化或沉淀。能在实验室空间消毒中迅速杀灭各种微生物(包括芽孢)或者抑制微生物繁殖的高效广谱的食品级进口高效杀菌剂。现已十分广泛的应用于各种实验室空间消毒中。实验室空间杀菌灭菌剂基于过氧化氢和银离子,是全球最高效的杀菌消毒剂,可以在3-5分钟内对芽孢杆菌的杀灭率达到6-8个log。可以作为固定的实验仪器杀菌消毒产品。

  • 第六届分子与细胞生物学大会

    第六届国际分子与细胞生物学大会将于2016年4月25-28日在大连国际会议中心举行。组委会已邀请到诺贝尔奖大师、著名院士、500强企业高管、海外华人科学家、国内外学术专家和企业家出席会议并做主题报告,将有来自近60个国家和地区的2000位专业人士参会,其中外宾1000人以上。本届活动周将举办“生物制造2025”主题论坛、诺贝尔奖大师论坛、中日韩生物技术论坛、大师校园行、企业卫星会议、大型晚宴及文艺演出、海外高层次人才和项目对接会、科技考察等活动。此外还有蛋白质、抗体、疫苗、基因、遗传学5大分会和“第七届国际生物展”同期召开,将举办200多场专题报告,将有400个项目参与对接,参展商150家。六会联动,一次注册均可参加!我们期待和欢迎您莅临第六届国际分子与细胞生物学大会。在这里分享最新科研成果,获取最前沿的科技资讯,找到最合适的合作伙伴,结识最专业的客户群体,走近诺奖大师,聆听巨匠声音,推动我国在分子与细胞生物学领域的发展。网址链接: http://www.bitcongress.com/cmcb2016/cn/default.asp 演讲人介绍—基因及遗传领域 讲题:如何在分子水平上模拟复杂生物系统Arieh Warshel博士,2013年诺贝尔化学奖得主;美国南加州大学特聘化学教授、美国国家科学院院士 讲题: 神经元中的线粒体转运Zu-Hang Sheng博士, 美国国立卫生研究院高级首席研究员 讲题: 炎症与肿瘤发生的天然防御分子——5-methoxytryptophanKenneth K. Wu博士, 美国德克萨斯大学休斯顿健康科学中心名誉教授 讲题:在个性化肺癌免疫疗法中使用外显子测序和突变抗原筛查用于新抗原鉴定 Caifu Chen博士, 美国Integrated DNA Technologies公司高级研发副总裁 讲题:RNA药物的创新技术Xianbin Yang博士, 美国AM Biotechnologies公司主任 讲题:测序技术的现在和未来Barry Merriman 博士,美国人类长寿公司副总裁 讲题:两栖弹涂鱼基因组研究的最新进展石琼博士,中国深圳华大水产科技有限公司科技副总裁 讲题:新测序平台的发展J O. Adams博士,中国北京龙基高科生物科技有限公司总裁 讲题:肿瘤释放蛋白基因分析的最新研究及全蛋白序列的表达Giulio Filippo Tarro博士,意大利T. & L.博德博蒙特癌症研究基金会总裁 讲题:从大数据到临床:大数据时代癌症的精准医疗鲁兴华博士,美国匹兹堡大学生物信息转化中心副主任 讲题:植物的RNA甲基化压力响应Iain Searle博士,澳大利亚阿德莱德大学实验室负责人 讲题:弗立特里希氏共济失调中表观基因启动子沉默Sanjay I. Bidichandani博士,美国俄克拉荷马大学教授 讲题:植物内生菌和微生物的生物组学发现、特性和发展German C Spangenberg博士,澳大利亚拉籌伯大学教授 讲题:利用免疫转录调控网络治疗多发性硬化症Margaret Jordan博士,澳大利亚詹姆斯库克大学分子和细胞生物学部门研究主任 讲题:基因治疗和基因递送载体Guang Qu博士,美国Spark基因治疗公司主管 讲题:癌症治疗药物协同作用的发展Janak Padia博士,美国黄金时段生命科学公司总裁兼首席执行官 讲题:小鼠和大鼠基因质量:决定正确遗传背景的转基因模型Ana V. Perez博士,美国塔康生物科学公司基因科学与合规性全球总监演讲人介绍—蛋白质与多肽领域 讲题:仿生肽研究的最新进展和挑战Vadim T. Ivanov博士,俄罗斯科学院多肽研究所主任 讲题:缓解医疗需求的多肽药物Jose de Chastonay博士,瑞士Bachem控股集团首席商务官 Michael Shapiro博士,美国辉瑞公司高级总监 讲题:人类全基因组全长蛋白在人源细胞中的表达Guangli Wang博士,美国OriGene技术公司副总裁 讲题:可用于超高速肽合成的单分散微粒Wolfgang Rapp博士,德国Rapp Polymere 公司首席执行官 讲题:DNA结构和纽结理论何希盛博士,美国诺瓦东南大学助理院长 讲题:生物制药发展与多糖分析Zoran Sosic博士,美国Biogen Idec公司高级研究员 讲题:肺炎髓过氧化物酶和血管生成素样蛋白4的临床应用Vincent T. K. Chow博士,新加坡国立大学教授 讲题:过人源单克隆抗体对艾滋病毒蛋

  • 如何从源头彻底解决实验室仪器设备的微生物污染

    [align=center][/align][b]简介[/b]随着我国经济的快速发展,国家大力推进质量提升行动。为了满足市场经济发展的需求,各类实验室基础设施设备不断增加。这些实验室仪器设备为专业技术人员进行创新实验提供了软硬件条件环境,提高了技术人员工作的积极性和有效性,也培养出一批高质量的科研队伍。然而,随着实验室仪器设备的增加,也暴露出一些在使用过程中对仪器设备管理方面的问题。[b]保证实验质量的关键因素[/b]实验仪器的清洗、消毒和灭菌是预防和控制实验室内感染,保证实验室质量的关键手段之一。目前多数实验室,分子实验每天都在大规模进行,污染源已经无处不在,特异性的,非特异性的,同源的,非同源的,广泛分布在实验室台面,试剂溶液中、特别是在一些仪器设备的表面附着等等,你以为普通的清洗消毒就能解决这些污染源吗?答案是不行的,实验室大拿们都为了清除这些污染源研究出好多种方法,但效果甚微。每类实验仪器的处理及消毒措施都有不同。严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。因此保证实验室的实验仪器卫生安全问题一直以来受到广泛的关注。[b]实验室仪器污染来源 [/b](1)在实验室当中的大部分实验员来自不同的生活环境,可能有一部分实验员缺少很好的自我卫生习惯,因此进入房间当中,所需要标本、模型让其操作道具,每一种模型会有很多人进行接触,标本在我们不知不觉当中已经变成了无形病毒的传播能够存在的介质,再加上某些实验员的不良习惯,尤其是部分实验员有吃食物的爱好,就能够使得病从口腔进入身体的情况出现。 (2) 实验室当中标本、物品很多,在实验员运用后,对于标本、模型采用置之不理得态度,能够使得标本以及仪器沾染细菌。 (3) 实验室的消毒仪器并不能进行全面杀毒灭菌,甚至一部分的实验室没有进行消毒杀菌仪器,如紫外线消毒灯、消毒柜、消毒室等专业消毒场所以及仪器。 (4) 实验室人员没有完全使用实验室制度来进行操作或者没有依照实验室的相关要求学生进行试验。 (5) 有些试验要求使用“菌罗”以及储存“菌落”的实验室不可以完全按照要求,在实验室操作实验员决定没有必要完全按照操作进行,因此对自我造成伤害。[b]如何保证实验仪器不受污染[/b]各种灭菌技术的灭菌效果都会受到灭菌物理化性质的影响。比如加热或者高压灭菌,温度、酸碱度和压力都会有很大影响。而在过氧化氢银离子复合型实验室仪器设备消毒灭菌中,这些因素就不那么重要了。过氧化氢和银离子这两种成份都能穿透和破坏微生物的细胞壁和细胞膜,进入细胞内部使其关键性功能成分(例如:DNA 和酶)坏死,从而导致细胞死亡。过氧化氢作为强氧化剂,释放的氢氧分子(初生态氧)将微生物的酶系统氧化。同时加入银离子来保证消毒、除菌效果的持久性。银离子妨碍细菌(酶)的基本的新陈代谢功能或影响他的隔膜结构(微量活动)。银离子是一种催化剂,以离子形式存在,银离子通过与等价离子的交换,可以稳定的吸附到细胞内壁上。这样银离子将和食品级过氧化氢同时发挥作用,这两种成份都针对同一个目标,共同提高其性能(潜在的共同协作)。氧化杀灭一切有害微生物,细菌,病毒、包括其外保护层,同时摧毁细胞壁内部使其关键性功能成份坏死,从而导致细胞死亡,因此这些微生物就再也无法繁殖了。[b]奥克泰士[/b]奥克泰士--德国原装进口,食品级过氧化氢 银离子复合型实验室仪器设备清洗消毒剂。产品经过ISO9001\ISO14001管理体系认证、欧盟EMAS检测认证、IFS国际食品检测认证、德国莱茵TUV认证等。应用了最新的科技成果,完全可以替代实验室传统消毒清洗剂,消毒效果更好,有效期更长,环保性能更卓越,并且无色、无味、无毒,无害、无腐蚀、无残留。在杀灭病原体细菌,生物膜,藻类,酵母,真菌和病毒等物质时效果显著,奥克泰士的功效是经过近200种细菌学,生物学,病毒学和毒物学的测试和验证过的。作为德国原装进口的消毒产品,奥克泰士是全球首款真正意义上的无残留高效的环保消毒产品。[b]奥克泰士产品特点[/b]1、具备高效的杀菌能力: 奥克泰士能够杀灭包括大肠杆菌,霉菌,沙门氏菌在内的200多种有害微生物。2、具备高适用性:奥克泰士不受温度,光照,PH值影响,这点几乎克服了其他所有消毒产品的缺点,我们知道目前的消毒产品,无一例外的会受到PH值,温度的影响,从而失效或者需要增加用量(用量的增加,意味着腐蚀性,浓度的增加,意味着实验室的易清洗程度增加)3、不会产生耐药性:不同于二氧化氯和抗生素类产品,奥克泰士独特的杀菌原理,不会产生抗药性,其它消毒产品使用量会递增,使用奥克泰士是不会出现使用量递增的情况。奥克泰士是目前唯一一款不产生耐药性的产品,因此可以长期,稳定的适用于实验室各种环节消毒灭菌。4、全球首款真正意义上的环保杀菌产品:奥克泰士在作用后,分解为水和氧气,不会对环境产生任何有害残留,且过氧化物不超标,按照一定比例稀释奥克泰士后使用,甚至可以直接饮用。这点对于实验室尤其重要,实验室对清洁的要求是非常严格的,其中必须要清洁的一项就是消毒剂的残留,而作为纯生态消毒产品,奥克泰士的残留只有水和氧气,是实验室的最佳选择5、通过国家和欧盟权威认证检测:奥克泰士拥有卫生部进口产品批件,欧盟食品安全认证,欧盟生态杀菌认证,多个国家级试验室检测报告,是目前拥有资质最全,最权威的实验室清洗消毒产品6、使用时,无色,无味,无腐蚀性,无刺激性,操作员工与所接触的设备均无任何伤害。

  • 【转帖】用干细胞在实验室造出小型人类肝脏

    科学家们设法利用干细胞在实验室制造出小型人类肝脏。这一成功增加了制造出可用于移植的新肝脏的希望,尽管专家们说这还需要很多年时间。来自美国韦克福雷斯特大学巴普蒂斯特医疗中心的研究小组在波士顿的一个会议上展示了他们的研究成果。英国专家们说,这是“激动人心的进展”,但目前还不确定是否有可能培养出功能健全的肝脏。对可供移植肝脏的需求远超过所能供应的数量。近年来,研究工作的重点一直放在寻找用细胞技术维持或终有一天替代人体衰退器官的方法上。这些器官的基本构件是干细胞,一种在特定条件下分裂,形成各种人体组织的重要细胞。然而,用干细胞构建一个三维器官是一件困难的工作。韦克福雷斯特大学的研究人员以及世界上其他研究小组所使用的方法是,以现有肝脏结构为平台,生成新的肝脏组织。按照这种方法,研究人员利用一种洗涤剂剥离肝脏细胞,只留下支撑肝脏细胞的胶原框架和毛细血管网络。然后,新的干细胞——发育不完全的肝脏细胞以及用于生成新血管内壁的内皮细胞——被逐渐填入。将这些放入用各种营养物和氧气培养细胞的生物反应器中,一周后,科学家们观察到肝脏结构中出现普遍的细胞发育现象,并且这个小型器官甚至出现一些正常工作的迹象。领导这项研究的谢伊·瑟凯尔教授说:“我们为这项研究展现的可能性感到激动,但必须强调的是,我们还处于初级阶段,还必须克服许多技术障碍才能让病人受益于这项研究。”他说:“我们不仅需要弄清如何一次性培养大量肝细胞,以便为病人制造足够大的肝脏,我们还必须确定使用这些器官是否安全。”英国研究人员认为这项研究成果是可喜的。英国帝国理工学院教授马克·瑟斯说,这些研究成果“鼓舞人心”。他说:“报告显示,这些研究人员攻克了制造人造肝脏的主要障碍之一,即在‘自然生成的’肝脏结构中培养出正常工作的人类肝脏细胞。”他说:“很明显,这些细胞发育良好,但下一步是要证明它们能够像人类正常肝脏组织那样工作。”

  • 【建设新闻】卫生部人类干细胞与生殖工程重点实验室顺利通过验收

    [color=#ff483f] 卫生部人类干细胞与生殖工程重点实验室顺利通过验收[/color] 近日,卫生部组织专家对依托我校组建的人类干细胞与生殖工程重点实验室进行验收。经专家组认真审核,一致同意,该试验室顺利“过关”。 专家组由中国科学院动物研究所刘以训院士、中国医学科学院基础医学研究所王琳芳院士、南方医科大学姚开泰院士、中国医学科学院基础医学研究所章静波教授、华中科技大学朱桂金教授、湖南师范大学生命科学学院张健教授、湖南师范大学生命科学学院梁宋平教授等七人组成,刘以训院士担任验收组组长。 验收会上,实验室主任卢光琇教授就实验室建设情况作了详细的工作汇报。在建设期间,实验室结合人类干细胞与生殖工程的发展需求,建立了“人类胚胎干细胞和诱导性多能干细胞建系与建库及定向诱导分化”、“成体干细胞建系及定向诱导分化”、“人类辅助生殖技术和精子库技术”3个实验平台,并围绕三个方向开展研究工作,全面完成了实验室组建计划书的各项任务,获得国家级科技进步二等奖1项,获教育部科技进步一等奖1项,承担973、863、国家自然科学基金、欧盟及省部级等国际国内科技项目32项,累计科研经费达2800余万元;发表SCI收录期刊论文46篇,其中包括在国际顶尖杂志《CellStem Cell》上发表;培养了博士后、博士及硕士研究生141名;举办了国际学术会议2次,接受和派出访问学者40余名。

  • 微生物和细胞培养中的无菌操作基本技术

    无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用,在许多生物技术中也被广泛应用,例如转基因技术、单克隆抗体技术等。 无菌室,微生物实验室内专辟的一个小房间,室外设一个缓冲间,缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向,以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭,无菌室内的地面、墙壁必须平整,不易藏污纳垢、便于清洗,室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。工作台的台面应该处于水平状态,无菌室和缓冲间都装有紫外线灯(距离工作台面1米),工作人员进入无菌室应穿戴灭过菌的服装、帽子。 超净台,主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃,通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面,使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。在条件较困难的地方,也可以用木制无菌箱代替超净台(正面开有两个洞,不操作时用推拉式小门挡住,操作时可以将双臂伸进去;正面上部装有玻璃,便于在内部操作,箱内部装有紫外线灯,从侧面小门可以放进去器具和菌种、细胞株等)。 微生物的培养 在微生物的培养过程中,要保持培养物纯净性;培养微生物的要领,是为所需要的微生物提供良好的生存环境,同时阻止或抑制其他微生物的生长。 (一)培养基1.认识培养基的基本组成成分,从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。2.培养基的用途和种类:液体和固体两大类。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;尽管培养基的配方各不相同,但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。4.培养基是否合格(无菌试验):培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长(液体不变浑浊),说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 (二)无菌技术 1. 无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。日常的生活环境中,每时每刻每处都存在着微生物,任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后,还要始终保持无菌状态,才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能,否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象,在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术:彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。此外,要有效避免操作者自身被微生物感染,还要防止所研究的微生物,特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去(生物安全)。无菌操作非常重要,无论是倒平板、平板划线操作,还是平板稀释涂布法,其操作中的每一步都需要做到“无菌”,只有熟练、规范地进行无菌操作,才可能成功地培养微生物。 2. 消毒与灭菌的概念(1)培养细菌用的培养基与培养皿(需要灭菌)(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(需要灭菌)(3)实验操作者的双手(需要消毒)(4)接种环、针、涂布棒:灼烧灭菌(外焰)。 3.倒平板(1)灭菌后,培养基冷却到55 [font='宋

  • 实验室安全管理规范之如何控制微生物实验室的质量

    一、质量控制相关定义质量控制:满足质量要求的操作技术和活动。质量保证:为了满足实验室质量要求 ,制定相应的计划,实施证明(记录)所进行的一系列的系统活动。外部质量控制:通过互相校准和/或检验对实验室的操作和结果所进行的控制。内部质量控制:实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法,对实验室工作的连续性控制计划。质量手册:是描述质量系统元素的文件或文件的集合。 二、实验室要求按国家实验室认可的概念,是指一个能够承担法律责任的实体。这里所指的是实验室(微检室)内建立的质量管理的保证体系。人员、房屋、设备满足检测工作需要。1、人员要求实验室人员的分类:管理人员、技术人员、技术支持人员等。相应岗位的人员,应具备相应的技术能力,相应的技术能力证明(证书及证件)。微生物检验室因有相应技术能力的人负责室内的技术工作,并设立质量监督员。2、房屋条件要求房屋要求:具有适宜、足够宽敞、通风有良好的照明。房屋内墙面及地等应采用易于清洁的材料,保持房间清洁。房间的设置,以其开展的工作内容加以分用,设立专用房间。房间的大小还应根据从事实验人员的进入数量上加以考虑。3、环境设施要求专用房间的温湿度控制与记录(样品存放室)。特殊环境的微生物指标控制与记录(无菌室等)。专用工作室的标准操作规程和定期的检测校准程序(洁净室等)。特殊环境中的专用设施质量控制应符合有关要求(净化工作台)。 三、设备控制和程序微生物检验常用需监控的设备和仪器:1)培养箱(生化培养箱或CO2培养箱等)、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、 冰箱,(低温冰箱或冷柜)温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。2)小计量容器。3)微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。1、高压灭菌锅的温度控制高压灭菌锅;生物指示菌法(常用)、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。高压灭菌锅由专人按作业指导书操作,并做好每一次的作业记录。高压灭菌锅使用时,内置物品不能太多,单位体积内的内容物(每瓶内的培养基)不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息:高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化(日常常用无菌培养代替)。高压灭菌锅温度波动范围:110,115和121±2℃。高压灭菌锅校准周期一般在半年。2、干燥灭菌箱温度控制干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息:开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间(或关闭时间)。干燥灭菌箱的温度校准;用参考温度计进行温度测试。干燥灭菌箱温度要求与精确度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h,后者为30min。干燥灭菌箱校准时间一般为一年。3、培养基配制用蒸馏水的控制对于蒸馏水器来说:按设备说明,定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。检测要求:西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率<0.5ms/m;细菌数<50cfu/ml。我们日常用的标准为 <10ms/m,未见有细菌指标。检测频率:1次/每月。蒸馏水定点供应,并做好相应的质量控制,记录检测结果。4、天平的管理天平放置要求:无振动、无气流影响及水平台面上。天平要有使用及运行检查记录。天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围,一般1次/年进行检定。运行检查频率按运行计划或按产品(天平生产厂家)给出的标准重量单位进行对照。5、pH计pH计使用前应用标准液进行校准。缓冲液使用有效期:PH4.00 约1年PH7.00 约6个月pH9.00 约6个月pH计的维护:电极外表的定期清洗;电极敏感性检测及极性恢复。6、净化工作台的控制水平流净化工作台工作区域,要求洁净度为100级。空气沉降30min,细菌数<1个/皿。垂直流净化工作台,细菌数<0.49个/皿。净化工作台运行检查频次:1次/月主要是细菌沉降检测。净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次,并同时进行粒子与细菌沉降检测。7、紫外线灯的控制检测方法:仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射无1米处,要求其强度为90。生物测试法:采用一定的菌培养物,经一定比例稀释,菌量控制在200-250个/0.5ml,涂布平板在紫外灯光下照射,2min,同时设置普通光源的对照组,后置37℃48h,计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。8、显微镜的控制显微镜应制定作业指导书,日常维护记录及自校记录。显微镜应置于无振动,避免灰尘,防潮等要求的环境。9、其它微生物检测专用仪器的控制细菌鉴定仪、酶标仪等设备,工作中常用阳性对照检测其功能正常性。仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格,持证上岗。 四、检测质量保证定期使用有证标准物质和次级标准物质(参考物质)进行内部质量控制。实验室间的比对或能力验证,利用相同或不同方法进行重复检测,对留存的样品进行在检测。

  • 细胞培养实验室环境设计

    1 实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室. 2 常用设施及设备 (1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类. (2)无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等. (3)操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物(4)洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等. (5)分析间:显微镜,计算机及打印机等. 3 培养器皿 常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等.常准备量是使用量的三倍.器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品.常用的器皿有下面几种. (1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml, 100ml等几种. (2)培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种. (3)培养皿:用于开放式培养及其它用途.分直径30mm,60mm,120mm等几种. (4)吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体.常用1ml和10ml两种.短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种. (5)离心管:离心管是细胞培养中使用最广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml,30ml,15ml;后者则多为10ml和5ml. (6)其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,注射器等.4 细胞培养温度 维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度.不同种类的细胞对培养温度要求也不同.人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡.培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡.相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长.细胞代谢随温度降低而减慢.当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡.但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存. 5 合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳.氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分.开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中.二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值.大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响.但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长.但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞最适合pH是7.4-7.6.每种细胞都有其最适pH值.

  • 【转帖】iPS细胞:人造肿瘤细胞?

    各国争相发展的重点项目  iPS技术,即诱导性多能干细胞技术,是一种将成体成熟、分化的体细胞重编程获得类似胚胎干细胞的新兴技术。2007年11月美国和日本科学家分别独立宣布可将人类皮肤细胞转化为iPS细胞。这一发现被《自然》和《科学》杂志分别评为2007年第一和第二大科学进展。之后,iPS细胞研究迅猛发展,不同的国家和实验室纷纷报道了多种方法建立的iPS细胞系。就连世界第一只体细胞克隆动物多利羊的培育者伊恩·威尔莫特也宣布放弃人类胚胎干细胞克隆研究,转而进行 iPS 细胞研究,因为他认为这种细胞比胚胎干细胞更具潜在优势。  我国连续多年将干细胞研究列入“863”、“973”、国家自然基金重点项目。国务院2006年发布的《国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006-2020年)》中,干细胞作为五项生物技术之一成为未来15年我国前沿技术的重点研究领域。  致瘤风险浮出水面  Yamanaka研究组在《自然·生物技术》上发表的文章显示,用iPS细胞诱导的神经干细胞,即使不含c-Myc(曾被认为是导致肿瘤的主要原因),在植入NOD/SCID免疫缺陷小鼠后仍有很强的致瘤性,甚至高于胚胎干细胞。   他们共研究了36个iPS细胞克隆,在诱导方式上,有些诱导剂配方中含有c-Myc基因,有些没有,因此具有较好的代表性。同时他们选择了3株胚胎干细胞作为对照。在45周的观察中,移植胚胎干细胞来源神经干细胞的34只小鼠有4只长出肿瘤。在100只移植胚胎成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中34只发现肿瘤,概率和胚胎干细胞相当。在55只移植成人成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中46只发现肿瘤,概率远高于胚胎干细胞。在36只移植肝细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中10只发现肿瘤,概率高于胚胎干细胞。8只移植胃上皮细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中未发现肿瘤。病理学检查证实肿瘤均为畸胎瘤,部分为恶性畸胎瘤。  研究还发现,以前认为致瘤性很强的c-Myc在去掉后并没有减少iPS神经干细胞的致瘤性,相反以前认为没有致瘤性的Nanog基因却可以明显增强iPS神经干细胞的致瘤性。  这次试验的另一个意外结果是并未发现在生成的肿瘤细胞中有c-Myc或其他基因的激活。以前的观点认为,转入的癌基因是iPS致瘤性的基础,只要在iPS细胞诱导成功后通过各种方法去除已完成使命的癌基因即可使iPS细胞免于致瘤性。这次试验的结果无疑给这些想法留下了阴影,而且使iPS致瘤的机制更加扑朔迷离。

  • 【原创】生物传感器/生物芯片/微流控芯片-不断增加中

    现在做生物传感器的,生物芯片的,微流控芯片的人非常多,有的时候觉得大家对于这些东西的界限似乎不是分得很开,希望自己对于这个领域的小小体会能够给大家帮助!生物传感器:利用生物元件(酶、核酸、细胞、组织等)对特定物质的生物识别功能,通过将这种识别转化成声光电磁信号,对该物质进行分析的器件。个人感觉现在做生物传感器大部分局限在电化学上面,可能是因为电化学的仪器比较容易集成。生物芯片/微流控芯片:似乎现在有的人对于生物芯片与微流控芯片的区别不是很明白,特此将比较一下两者的区别:生物芯片和微阵列芯片的意思应该是一样的,但是生物芯片并不是一个被广大学者认同的名词,主要是一些媒体在报道的时候为了简单和通俗使用了这个词,所以专业上来讲,生物芯片应该叫做微阵列芯片。其发展历史比较悠久,而且现在已经有商品化的产品。微流控芯片是通过微加工的方法制作出微米级别的通道,通过通道的设计将分析的各种基本过程如样品前处理,分离,分析检出集成在一个小小的基片上,她也叫做芯片实验室。这个的发展要晚于微阵列芯片,现在有很多的研究不仅仅局限在分析化学领域。对于微尺度上的流体行为,流体的操作也是物理学研究的热点,是一个交叉了物理、化学、生物、计算机、微加工等领域的学科。国内做的比较好的是浙江大学的方肇伦院士,国外有很多组,以后我会不断增加!

  • 小的不能再小的微型实验室,微流控芯片实验室

    中国在微流控芯片领域的水平和国外相差不大,而且中国已经有微流控芯片研发生产企业,在网上直接搜索“微流控芯片”便可以找到生产企业和微流控芯片相关资料文章。 微流控分析芯片最初在美国被称为“芯片实验室”(lab-on-a-chip),在欧洲被称为“微整合分析芯片”(micrototal analytical systems),它是微流控技术(Microfluidics)实现的主要平台,可以把生物、化学、医学分析过程的样品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一块微米尺度的芯片上,自动完成分析全过程。有着体积轻巧、使用样品及试剂量少,且反应速度快、可大量平行处理及可即用即弃等优点的微流控芯片,在生物、化学、医学等领域有着的巨大潜力,近年来已经发展成为一个生物、化学、医学、流体、电子、材料、机械等学科交叉的崭新研究领域。 微流控芯片采用类似半导体的微机电加工技术在芯片上构建微流路系统,将实验与分析过程转载到由彼此联系的路径和液相小室组成的芯片结构上,加载生物样品和反应液后,采用微机械泵。电水力泵和电渗流等方法驱动芯片中缓冲液的流动,形成微流路,于芯片上进行一种或连续多种的反应。激光诱导荧光、电化学和化学等多种检测系统以及与质谱等分析手段结合的很多检测手段已经被用在微流控芯片中,对样品进行快速、准确和高通量分析。微流控芯片的最大特点是在一个芯片上可以形成多功能集成体系和数目众多的复合体系的微全分析系统?微型反应器是芯片实验室中常用的用于生物化学反应的结构,如毛细管电泳、聚合酶链反应、酶反应和DNA 杂交反应的微型反应器等 。其中电压驱动的毛细管电泳(Capillary Electrophoresis , CE) 比较容易在微流控芯片上实现,因而成为其中发展最快的技术。它是在芯片上蚀刻毛细管通道,在电渗流的作用下样品液在通道中泳动,完成对样品的检测分析,如果在芯片上构建毛细管阵列,可在数分钟内完成对数百种样品的平行分析。自1992 年微流控芯片CE 首次报道以来,进展很快?首台商品仪器是微流控芯片CE ( 生化分析仪,Aglient) ,可提供用于核酸及蛋白质分析的微流控芯片产品。 微流控芯片的特点  芯片集成的单元部件越来越多,且集成的规模也归来越大,使着微流控芯片有着强大的集成性。同时可以 大量平行处理样品,具有高通量的特点,分析速度快、耗低,物耗少,污染小,分析样品所需要的试剂量仅几微升至几十个微升,被分析的物质的体积甚至在纳升级或皮升级。  廉价,安全,因此,微流控分析系统在微型化。集成化合便携化方面的优势为其在生物医学研究、药物合成筛选、环境监测与保护、卫生检疫、司法鉴定、生物试剂的检测等众多领域的应用提供了极为广阔的前景。  我国在微流控分析方面的研究虽然起步较国外晚了四到五年,但在多个相关的学科领域都具有足够的积累与优势,我国具有世界上最大的微流控芯片市场,用中国的芯片产品占领这一市场是我国科学家责无旁贷的使命。3月26日多名微流控领域的专家也将参加在上海举办的2015(第三届)先进体外诊断技术峰会,共同对微流控的先进技术进行总结和分析,对我国的微流控芯片研究领域进行更多的解读。相信经过不懈的努力,微流控芯片蓬勃的发展在我国很快将会到来。

  • 【原创大赛】实验室建设实例分享--微生物实验室

    【原创大赛】实验室建设实例分享--微生物实验室

    [align=center]实验室建设实例分享--微生物实验室[/align][align=left]应集团业务发展需要,作者于2016年6月参与并主要负责了一个第三方食品检测实验室的承建任务,历时一年的时间,顺利完成任务,从市场调研,实验室选址,实验室布局设计,施工,装修,购置仪器试剂耗材,人才招聘培训,到质量体系建立并试运行,实验室检测流程的建立和优化,拟开展项目的CMA资质申请并取得。每个环节都积极参与,亲历亲为,现将承建过程中的经验教训和感悟分享给大家,水平有限,欢迎同行大伽指正交流,新建实验室分为微生物实验室,基因检测实验室,常规理化实验室,金属元素实验室,仪器分析实验室等。限于篇幅,本篇仅分享微生物实验室建设相关。[/align][align=left]1,微生物实验室的布局设计:新建实验室面积为1200平米,微生物实验室面积约200平米左右,布局设计宗旨就是”人流,物流,污流不同通道走,单方向流通”,培养基灭菌和废弃物灭菌空间分开,尽量减少交叉污染,设置样品暂存间,保证样品状态的延续性和稳定性,有利于检测结果的准确性。微生物实验室布局设计如图1所示。[/align][align=center]图1 微生物实验室布局设计草图[/align][align=center][img=,604,670]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708291018_01_3224499_3.png[/img][/align][align=left]人流通过一级缓冲间和耳机缓冲间进出无菌室,无菌室门锁均为互锁结构,保证无菌室的环境和外界环境的隔离效果。[/align][align=left]培养基,操作工具和样品等物流通过缓冲窗进入无菌室,操作完成后通过另一面的缓冲窗到达培养间进行培养和鉴定,缓冲窗为互锁结构。[/align][align=left]培养鉴定后的废弃物即污流直接放入危废灭菌间灭菌后,按照医疗垃圾标准进行无害化处理。[/align][align=left]2,仪器设备,试剂耗材采购[/align][align=left]微生物实验室仪器设备和试剂耗材采购根据实验室拟开展项目来确定,常规的主要设备见表1。需要说明的是,灭菌锅体积不大于100L属于简单压力容器,不需要专业压力容器操作证书,采购仪器时注意这点可以为实验室减少很多事宜。精密恒温水浴锅为必备设备,检测大肠杆菌和粪大肠菌群时,必须水浴培养,培养箱温度控制精度达不到实验要求。[/align][align=center]表1 微生物实验室主要设备清单 [/align][table][tr][td]设备名称[/td][td]数量[/td][td]作用[/td][td]重要性[/td][/tr][tr][td]生物安全柜[/td][td]2台[/td][td]微生物转接鉴定[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]灭菌锅[/td][td]两台100L[/td][td]灭菌[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]生物显微镜[/td][td]一台[/td][td]革染观察及玻片观察[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]超净工作台[/td][td]1台[/td][td]微生物超净环境(百级)[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]电热恒温培养箱[/td][td]5台[/td][td]微生物各温度培养[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]霉菌培养箱[/td][td]1台 可制冷[/td][td]霉菌酵母培养用[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]微波炉[/td][td]一台[/td][td]培养基加热[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td]厌氧罐[/td][td]2—3个[/td][td]厌氧菌培养[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]大容量瓶口[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]分液器[/color][/url][/color][/url][/td][td]10mL 试管配制[/td][td]培养基配置[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td]纯水机[/td][td]一体机[/td][td]微生物检测用水[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]臭氧发生器[/td][td]2台[/td][td]壁挂式 消毒灭菌[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td]拍打式均质器[/td][td]2台[/td][td]制样均质[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td]冰箱冰柜冷藏展示柜[/td][td]3台[/td][td]样品保藏,试剂保藏,菌种保藏[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url][/td][td]10mL,5mL,1mL各3支[/td][td]微生物检测[/td][td]辅助设备[/td][/tr][tr][td]精密恒温水浴锅[/td][td]精密度0.2摄氏度[/td][td]大肠杆菌,粪大肠菌群检测[/td][td]主要设备[/td][/tr][tr][td]天平[/td][td]3台[/td][td]配置培养基及称样用[/td][td]辅助设备[/td][/tr][/table][align=left]3,实验室验收及仪器设备调试[/align][align=left]微生物实验室设计为全封闭空间,空间四周及上层均为彩钢板结构,填充物为阻燃材料,主体颜色为哑白色,门窗玻璃为普通玻璃,为防止沉积灰尘,窗料使用R25MM铝合金圆弧压线;所有二维连接处的内侧均使用R50MM铝合金内圆角,暴露在外的二维连接线的外侧则用R100MM铝合金外角连接;彩钢板的三维连接处使用三维接点过度,而彩钢板与墙角地面则用铝合金槽连接。吊顶材料亦为彩钢板,地面为环氧树脂材料,具有无缝隙、耐腐蚀、平整、容易清洗的特征。地面地脚线用阴角铝材装饰,美观且严密性好。整个实验室内应形成坚固、无缝、平滑、美观、不反光、不积尘、不生锈、防潮、抗菌、性能优良的无菌表面和内壳。微生物实验室入口设置有门禁和实时摄像头,可有效控制非授权人员的进入。验收标准参考GB 50591-2010《洁净室施工及验收规范》, GB 50346-2011 《生物安全实验室建筑技术规范》 现场如图所示。[/align][align=center]图2 配制室及无菌室入口[/align][align=center][img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708291019_01_3224499_3.jpg[/img][/align][align=center]图3 无菌室内部[/align][align=center][img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708291019_02_3224499_3.jpg[/img][/align][align=center]图4 接种室内精密恒温水浴锅及生物安全柜[/align][align=center][img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708291019_03_3224499_3.jpg[/img][/align][align=left]3,微生物人员培训及拟开展项目开发[/align][align=left]微生物实验室拟开展项目如表2所示,按计划招聘微生物专业背景员工,在总部微生物实验室培训学习6个月,考核目标为全面掌握微生物操作技能和标准操作程序,微生物质量体系建立和维护,方法确认等相关内容。[/align][align=center]表2 微生物拟申请CMA资质项目表[/align][table][tr][td]项目名称[/td][td]标准号[/td][td]仪器试剂耗材是否满足要求[/td][/tr][tr][td]阪崎肠杆菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》 GB 4789.40-2016[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]产气荚膜梭菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验》 GB 4789.13-2012 [/td][td]是[/td][/tr][tr][td]大肠埃希氏菌计数[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数》 GB 4789.38-2012[/td][td]是[/td][/tr][tr][td=1,2] 大肠菌群[/td][td]《食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定》 GB/T 4789.3-2003[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》 GB 4789.3-2016[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]单核细胞增生李斯特氏菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》 GB 4789.30-2016[/td][td]是(不测小鼠毒力试验)[/td][/tr][tr][td]粪链球菌[/td][td]《饮用天然矿泉水检验方法》 GB 8538-2016[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]副溶血性弧菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物检验 副溶血性弧菌检验》 GB 4789.7-2013[/td][td]是(不测血清学试验和神奈川实验)[/td][/tr][tr][td]金黄色葡萄球菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》 GB 4789.10-2016[/td][td]是(不测肠毒素试验)[/td][/tr][tr][td]菌落总数[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定》 GB 4789.2-2016[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]抗生素[/td][td]《食品卫生微生物检验鲜乳中抗生素残留量检验》 GB/T 4789.27-2008[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]蜡样芽胞杆菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验》 GB 4789.14-2014[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]霉菌和酵母[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》 GB 4789.15-2016[/td][td]是(不测第二法)[/td][/tr][tr][td]溶血性链球菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 溶血性链球菌检验》 GB 4789.11-2014[/td][td]是(不做链激酶实验)[/td][/tr][tr][td]乳酸菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 乳酸菌检验》 GB 4789.35-2016[/td][td]事(不做乳酸菌的鉴定)[/td][/tr][tr][td]沙门氏菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌检验》 GB 4789.4-2016[/td][td]是(不测5.6血清学分型)[/td][/tr][tr][td]商业无菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 罐头食品商业无菌的检验》 GB 4789.26-2013[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]铜绿假单胞菌[/td][td]《饮用天然矿泉水检验方法》 GB 8538-2016[/td][td]是[/td][/tr][tr][td]志贺氏菌[/td][td]《食品安全国家标准食品微生物学检验 志贺氏菌检验》 GB 4789.5-2012[/td][td]是(不测5.5.3血清学试验)[/td][/tr][/table][align=left]4总结[/align][align=left]微生物实验室建设,主要是无菌室的环境控制即实验室通风系统一定要好好设计,严格把关,不然会严重影响后期检测流程和结果,硬件建好后,关注点主要是微生物质量体系的建立和维护,检测人员的专业素质和专业技能,人员的技术水平决定了微生物的专业水平。[/align]

  • 细胞生物学实验室(本实验室现行)洗消 (SOP)

    关键词:洗消标准操作目的:确保实验用器皿符合细胞生物学实验要求背景知识:选填项目原理:选填项目主体内容:操作步骤,必填项目 主要参考文献:选填项目:清 洗已使用过的器皿请立即浸入清水中,不应留有气泡。1. 玻璃器皿的清洗清水中取出,于5%盐酸中浸泡过夜自来水简单冲洗洗涤液软毛刷刷洗(1.防止损坏器皿表面光洁度2.注意边角)自来水简单冲洗浸于酸液中6h(小心注意安全,有毒强腐蚀)自来水仔细冲洗(每瓶均灌满倒掉,重复20次以上)单蒸水漂洗3次后烘干备用2. 胶塞的清洗清水中取出,于2%NAOH煮沸10-20min自来水简单冲洗1%的稀盐酸浸泡30min自来水冲洗单蒸水漂洗3次后烘干备用3. 塑料制品的清洗清水中取出,于2%NAOH液浸泡过夜自来水简单冲洗5%盐酸溶液浸泡30min自来水冲洗单蒸水漂洗3次后烘干4. 滤器的清洗流水缓慢冲洗洗涤液中浸泡24h流水缓慢冲洗单蒸水缓慢冲洗3次后烘干5. 不锈钢器皿的清洗自来水简单冲洗[font='Helvetica Neue'

  • [实验室建设] 细胞培养室的建立

    前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个细胞培养间。目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功。在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一解决后,觉得大家如果要建立细胞培养间,肯定也会碰到许多相同的问题,所以将我碰到的问题整理出来。首先向大家推荐一本书,个人认为是比较经典的——《动物细胞培养-基本技术指南》科学出版社,英,R.I.弗雷谢尼。内容不多,但以下的资料大部分是书上找不到的。 一、建细胞间的一些细节问题:1、甲醛薰蒸:资料(internet):40%甲醛溶液(药用规格、福建三明化工总厂出品),用量30 ml/m3,室内温度21~24℃,相对湿度75%~85%,加热薰蒸使蒸汽弥漫全室,关闭门窗1 h。甲醛水溶液为无色,具有强烈刺激性气味的液体,可杀灭多数微生物,价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。其主要用法为: 1.熏蒸消毒: 对室内消毒其用量为20-25%毫升/米,在加热该溶液时最好同时煮沸一壶水,使室内相对温度保持在70-90%左右,室内温度最好在20摄氏度以上,作用时间12-24小时。如消毒皮毛服装,甲醛水溶液的用量可加至125毫升/米,挂衣密度为每平方米3套为宜。熏蒸消毒时应密闭门窗。消毒后一般多用自然通风驱散甲醛气体,其需时较长,急于排出气体,可将25%氨水加热蒸发中和。氨水用量为所用甲醛水溶液的一半,中和时间为30分钟。 2.自然挥发: 将较大量的甲醛水溶液放入一敞开容器中,室内温度保持在18摄氏度以上,同时室内喷水以保持相对湿度在70%以上,经16小时可达到室内消毒的目的。关于甲酸、甲醛和甲醇三者的毒性比较:甲酸的毒性比甲醇大6倍,甲醛的毒性比甲醇大30倍。所以吃进4~10克甲醇,就能引起慢性中毒。它的毒性作用主要表现在损伤视力,使视力减退(不能矫正),视野缩小,以致双目失明,直到死亡。实际操作:我的每个房间是7个平方,约20个立方。按书上的算要福尔马林300ml,高锰酸钾100g。高锰酸钾放入甲醛液体中后,在开始的3秒钟内没有反映,3秒钟以后,会产生大量烟气。所以一旦在甲醛中加了高锰酸钾请马上离开灭菌室,并关上门。高锰酸钾放入甲醛液体中会使液体沸腾,所以反应要在比较大的大口径容器进行,本人用的是脸盆。[font='T

  • Science:生物“计算机”能识别并摧毁癌细胞

    近日来自哈佛大学、麻省理工学院以及瑞士苏黎世联邦高等工业学院的研究人员在新研究中成功地将生物“计算机”诊断网络导入到人类细胞中,这种生物网络通过对5种肿瘤特异性分子进行逻辑组合分析识别出了特异的癌细胞,并触发了这些癌细胞的毁灭过程。这一研究成果在线发表在9月2日的《科学》(Science)杂志上。文章的通讯作者是哈佛大学系统生物学中心的生物工程学家Yaakov Benenson及麻省理工大学的Ron Weiss教授。Benenson长期致力于开发在活体细胞内运作的生物计算机。生物计算机是一种完全由DNA、RNA及蛋白质构成的分子自动机(molecular automata),它们的“输入”是细胞质中的RNA、蛋白质以及其他化学物质,“输出”的则是很容易辨别的分子信号。由于生物计算机能够探测和监控基因突变等细胞内一切活动的特征信息,因此它们可以确定癌细胞等病变细胞。此外,它们还能够自动激发微小剂量的治疗行为。利用这些“分子医生”将有望引发人类医学的重大变革——明确地对人体病变细胞或组织进行治疗,而健康的细胞完全不会受到干扰。不过,要最终实现这一目标,还有很长的路要走。科学家近期进行的一些相关研究,大都是尝试以不同方式开发具有多种用途的生物计算机。在这篇文章中,研究人员成功构建了一个多基因合成“电路”,此电路负责鉴别肿瘤细胞与正常细胞,进而靶向性摧毁识别的肿瘤细胞。其具体工作原理是:对细胞内5种肿瘤特异性分子及出现频率进行抽样及综合分析。是由当5种因子同时在细胞内出现时,该电路才做出正识别响应。这使得肿瘤检测的精确性大大增高。研究人员希望这一成果能为开发出特异的抗癌治疗奠定基础。随后科学家们用这一多基因合成网络对实验室中培养的两种人类细胞Hela细胞(一种子宫颈癌细胞)和正常细胞进行了检测。当遗传生物计算机被导入到这两种不同的细胞类型中时,只有Hela细胞被摧毁,而正常细胞则安然无恙。获得这一结果并非易事,研究人员为之投入了大量的基础工作。Benenson及同时首先针对正常健康细胞和Hela细胞中的miRNA分子进行了高通量筛查,最终确定了能将Hela细胞从健康细胞中鉴别出的5种特定的miRNA组合。“这些miRNA分子被导入到细胞中进行检测。新型的生物计算机利用诸如‘是’与‘非’的逻辑运算对这五种miRNA分子进行组合。只有当对所有分子的整体运算结果为逻辑‘真’时才会生成需要的结果——即促使细胞死亡,”Benenson说。目前研究人员已确定这一生物计算机网络在活细胞中能够非常稳定地工作,准确组合所有细胞内因子并生成正确答案,这代表着研究者们在该领域又向前迈进了重要的一步。 http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201109/2011090911135106.jpgdoi:10.1126/science.1205527 PMC:PMID:Multi-Input RNAi-Based Logic Circuit for Identification of Specific Cancer CellsZhen Xie, Liliana Wroblewska, Laura Prochazka, Ron Weiss, Yaakov BenensonEngineered biological systems that integrate multi-input sensing, sophisticated information processing, and precisely regulated actuation in living cells could be useful in a variety of applications. For example, anticancer therapies could be engineered to detect and respond to complex cellular conditions in individual cells with high specificity. Here, we show a scalable transcriptional/posttranscriptional synthetic regulatory circuit—a cell-type “classifier”—that senses expression levels of a customizable set of endogenous microRNAs and triggers a cellular response only if the expression levels match a predetermined profile of interest. We demonstrate that a HeLa cancer cell classifier selectively identifies HeLa cells and triggers apoptosis without affecting non-HeLa cell types. This approach also provides a general platform for programmed responses to other complex cell states.

  • 微流控芯片实验室组建需要哪些设备

    微流控芯片实验室主要是由下列各项所组成:1. 实验室主体结构装修:包括墙体隔断工程、吊顶工程、地面工程等,安全、环保、灵活性强、重组利用率高;2. 通风-净化系统:包括送风系统和排风系统,满足各级洁净室通风净化需求,提供安全、舒适、绿色环保的工作环境;3. 供气系统:包括氧气、氮气、氢气、二氧化碳等,满足实验室各种用气需求的同时保证了安全性和操作管理便捷性;4. 照明-动力系统:提供暗室、黄光灯、紫外灯、日光灯等照明系统设计安装和两相、三相电气系统布线安调等;5. 安全-配套系统:包括紧急冲淋装置、洗眼器、安全防爆柜、原子吸收罩、万向抽气罩等,为实验室安全防护提供多重保障;6. 实验室家具:包括实验台、通风柜、超净工作台、试剂柜、生物安全柜、更衣柜、鞋柜等各种实验室家具。http://www.whchip.com/upload/201611/1480057478108853.jpg微流控芯片实验室配套仪器设备苏州汶颢根据客户具体应用领域,为不同实验室配置相关仪器设备。表1:各加工实验室常用仪器设备列表光刻实验室软注塑实验室机加工实验室封合实验室检测实验室光刻机真空脱泡机数控机床真空热压机光学显微镜匀胶机恒温鼓风干燥箱激光切割机等离子清洗机台阶仪烘胶台批量注塑机超声波打孔机真空气氛电炉膜厚仪摇床台式打孔器精密高速钻床超净工作台接触角测量仪通风橱台式切割机 精密抛光机注射泵、恒压泵 表2:生物、化学和材料三大应用实验室常用仪器设备列表生物实验室化学实验室材料实验室倒置荧光显微镜紫外分光光度计精密抛光机高速离心机原子吸收分光光度计超声波测厚仪生化培养箱超声波清洗机千分尺超低温冰箱微量移液器耐压测试仪生物安全柜分析天平体视显微镜基因扩增(PCR)仪旋转蒸发仪卧式显微镜凝胶电泳仪水浴锅工业CCD

  • 北京基因启明生物3月份招聘实验室产品研发/技术岗位

    北京基因启明生物科技有限公司,由国内数名资深投资人,联合免疫细胞治疗领域的国内顶级专家,于2015年底创立于首都北京,凭借着首都绝佳的资源优势,专注于免疫细胞治疗肿瘤的科研攻关及经营业务,在新型生物产品的研发、生产、运营、销售及相关服务领域成果显著。目前,基因启明处于团队建设期,预期今年内达到20人左右规模。在发展过程中,我们不断引入先进的技术及设备,稳步提升企业的综合实力。与此同时,我们已将构建国际化高端试验室的计划纳入日程,为企业未来的发展打下了坚实的基础。在激烈的市场竞争中,基因启明始终秉持着“以人为本、品质为根”的运营宗旨,我们心怀感恩志存高远,为把企业打造成为“生物科技领域最受青睐的典范品牌”的伟大愿景,为助力中国生物科技产业蓬勃发展,而努力拼搏!工作地点:北京 有意向的可以与我联系,符合条件的志愿帮助内部推荐。shilamei@126.com岗位职责:1. 按照细胞培养标准操作规程完成细胞培养和制剂制备;2. GMP实验室的日常管理、清洁和环境维护;3. 相关文件记录及书写;4. 负责GMP实验室细胞培养相关的设备管理,维护,校验等,维护车间正常运行任职要求:1.大专及以上学历,细胞生物学、分子生物学、免疫学、医学和生物工程/技术等相关专业;2.熟悉细胞培养常规技术,具备较强的细胞生物学实验室培养技术(无菌操作技术、细胞培养、细胞分离、细胞计数、离心、消毒灭菌、流式细胞术、显微镜计数等等);3.有GMP实验室工作经验者优先;4.有NK/DC/CIK等细胞培养经验者优先;5.有免疫细胞提取、培养、扩增和复苏经验者优先;6.工作细心谨慎,责任心强,有团队精神,较好的沟通能力。

  • 揭开美国顶尖生物医学实验室成功的法宝

    揭开美国顶尖生物医学实验室成功的法宝 --- 仅以此文奉献给我的母校哈尔滨医科大学2005年3月我有幸加盟了哈佛医学院布里根妇女医院(Brigham and Women’s Hospital)Stephen Elledge 实验室,在Elledge 教授直接领导下工作了整整六个年头。Stephen Elledge (后文皆称Steve)是美国生物医学界天才级科学家,他博士毕业于麻省理工学院(MIT)生物学系,在斯坦福大学生物化学系做的博士后。1989年成为著名的贝勒医学院(Baylor Medical College )生物化学系的助理教授。短短几年后便于 1993年当选为霍华德休斯医学研究所的研究员(HHMI Investigator)。2003 年他当选为美国科学院院士。2003年初,他被美国哈佛医学院布里根妇女医院特聘为遗传学冠名终身教授。他在多个研究领域,如细胞周期调控、DNA 损伤应答机制、肿瘤细胞生物学、泛素连接酶的组成与调控、新型生物技术的开发与利用以及病毒的感染机制方面均有杰出贡献。他发现肿瘤抑癌基因TP53的直接下游靶点为P21,他发现DNA 损伤后ATM、ATR蛋白激酶激活下游CHK1、CHK2等信号传导通路,他发现抑癌基因REST、PTPN12等,揭示泛素连接酶F-box 家族,优化了酵母双杂交系统(Yeast two hybrid system)、Magic DNA 载体高通量转换系统、全蛋白组水平分析蛋白稳定性的GPS 系统及与Gregory Hannon 首创小发卡核苷酸干扰文库(shRNA library)。50岁出头的他,光在Cell 、Nature 、Science 杂志上就已经发表了二十几篇文章,其数量与质量就是在哈佛医学院这样大师云集的地方也名列前茅。Steve 的科研思维与科研能力当属超一流,他堪称科学家中的科学家。在Steve 手下先后工作的中国同胞为数不少,其中很多人颇有成就,但能够回归祖国并将Steve 实验室成功经验总结出来的人不多。现在我就将我在他实验室工作的感受写出来,呈献给国内广大的生物医学科技工作者,特别是正在成长的、肩负承上启下重任的轻年科学家们。希望我的文章能对他们的成长有所启迪和帮助,这样便达到了我写作此文的初衷。下述内容很多都是我的亲历亲为,所有证据皆出自已经发表的文献,所有的观点仅代表我个人的观点,如有争议,本人因时间和精力有限,恕我不能回应。成功法宝之一,选择最重大的科研方向。第1,研究对人类健康危害最严重的重大疾病,如恶性肿瘤、HIV感染,探索它们发生发展的机制、寻找新的药物治疗靶点。揭示肿瘤细胞周期调控、DNA 损伤与修复、细胞转化因子、影响HIV 、HBV、HCV等病毒感染的宿主因子是Steve实验室正在探索的关键性问题。研究上述课题还有一个比较实际的好处就是,美国的科研经费大部分是投在上述领域,这样就保证了他的实验室在经费资助方面有一个比较持续和稳定的态式。第2,功能筛选是关键。生物学研究有很多方式和方法,Steve 最推崇遗传学功能筛选(Functional Genetic Screen)。为了达到课题的新颖性和原创性,他一般不去做别人已经领跑的项目, 而是通过测定细胞周期检测点、细胞老化、病毒感染率等指标,筛查全基因组中的相关调控因子,然后从待选基因中,选择有价值的进行功能性验证。他所发表的文章多数是此种研究套路的结晶。第3,善于开发并利用新的生物技术。Steve 有一个观点,他认为新生物技术的创立是基础科学研究和应用技术创新的原动力。近几十年来,以获得过诺贝尔奖的生物技术为例,从单克隆抗体杂交瘤技术、PCR技术、核磁共振技术、GFP荧光蛋白示踪技术、蛋白质谱测序技术到RNAi干扰技术均充分证明生物技术的每一次飞跃都会大大推动科学技术的发展,并形成了一系列的相关产业,对人类的经济与社会发展做出重大贡献。他研发的三项标记酵母双杂交系统大大降低了筛选相互作用蛋白质时的假阳性率,他研发的Magic DNA 载体转换系统彻底改变了传统的一对一的、费时费力的限制性内切酶方法,使得DNA载体高通量转换变得轻而易举。GPS 系统使得在全基因组水平筛选泛素连接酶的底物成为现实.。他研发的shRNA 文库已成为功能缺失型筛选的首要工具。最近,他又在开发全蛋白组水平的噬菌体多肽表面展示技术,用它来筛选人体血浆中的肿瘤特异性蛋白,以期发现肿瘤特异性生物标记,为肿瘤的早期发现提供诊断学上的理论依据。成功法宝之二,选用优秀的人才并合理配置。每年都有很多人发电子邮件给Steve, 要求加入他的试验室团队。我发现他在用人方面有三个特点:第1,名门之后一定要录取。如诺贝尔奖的门生、各领域中大师们的学生。这些人一般都出自美国一流学府,受到很好的科学熏陶。一旦加盟,Steve 均给予苗头较好的课题,使他们在较短的时间内可能有高质量的产出。看来我们老祖宗的名师出高徒,强将手下无弱兵的道理在美国的科学界也是行得通的。第2,后起之秀的门徒,这些人一般出自各类青年才俊的实验室,虽然学校牌子可能不太亮,PI名头不太响,但这些青年才俊正在引领各领域研究的新潮流,部分人正在成为领军性科学家。出自这些实验室的学生们还有另外一个特点,就是大多数都发表过很好的文章,而且他们在实验技能方面的训练也比较正规和系统。最后一类人,既没有美国的学校教育背景,也没有经大师或后起之秀的熏陶,但有却几篇像样的文章,并有丰富的实验经验,Steve 也会将他们纳入门下,让他们承担一些周期长、风险大的课题,主要是为实验室的可持续性发展提供潜在性课题,并为苗头好的项目进行技术方面的配合及支持,使该课题得以快速推进。成功法宝之三,严密而科学的管理模式。他的实验室配备有行政秘书(Administrative Assistant)一名,一般仅有高中以上学历,对科学了解甚少,主要负责日常的人事安排、试剂订购、财政预算及与管理部门之间的沟通。还配备有实验室主任一名(Lab Manager)一般是由本土资深博士后担当,此人主要负责特殊试剂的订购,仪器的使用与维护,及与试剂公司、仪器公司进行沟通。这样Steve 本人基本不过问这方面的问题,从而使得他可以全身心地投入到与科研相关的工作中。在科研管理方面,每周二上午9:30-11:00是文献阅读活动时间(Journal Club),每次出两个人各自讲解一篇文章,文章的选择上以跟本人课题相关的,发表在Cell、Nature、Science杂志上的文章为主,也可选择一些非相关性领域但有重要理论指导意义或技术应用价值的文章。每个讲解人均要回答Steve及其他同事的提问。这个文献阅读活动的好处是促使讲解人认真阅读文章内容并整理有关背景知识,是一种很好的科学训练过程,当然Steve本人及实验室的其他同事们也获得一次学习交流的机会。实验室每周四上午12:00-13:00是实验室会议时间(Lab Meeting),每次出一个研究生或博士后报告其课题的最近进展情况,包括基础背景知识、近期数据汇报和下一步发展方向,每个人大约不到半年就要轮上一次。这种实验室会议对课题的进展具有极大的促进作用,每个人都得非常认真的准备,并加班加点以期增加阳性数据,希望能够通过Steve及周围同事的检验。一般在每次实验室会议结束之时会有一个不到五分钟的实验室管理上的讨论,这时多数是实验室主任提几个试验或者仪器方面的注意事项,但一般非常简短,Steve一般不会过多干预,仅问问解决方案是什么。因此Steve实验室会议主要是课题进展汇

  • 激光扫描共聚焦显微镜在细胞生物学中的应用

    激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器,与传统的光学显微镜相比,大大地提高了分辨率,能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品,通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值,Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标,对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本,不会对标本造成物理化学特性的破坏,更接近细胞生活状态参数测定。可见激光扫描共聚焦显微镜是普遍显微镜上的质的飞跃,是电子显微镜的一个补充,现已广泛用于荧光定量测量,共焦图像分析,三维图像重建、活细胞动力学参数分析和胞间通讯研究等方面,在整个细胞生物学研究领域有着广阔的应用前景。1. 定量荧光测量ACAS可进行重复性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体,线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定,还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外,还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定,这种定量可以准确监测抗原表达,细胞结合和杀伤及定量的形态学特性,以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。2. 定量共聚焦图像分析借助于ACAS激光共焦系统,可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列及光切片,从而得到各层面的信息,三维重建后可以揭示亚细胞结构的空间关系。能测定细胞光学切片的物理、生物化学特性的变化,如DNA含量、RNA含量、分子扩散、胞内离子等,亦可以对这些动态变化进行准确的定性、定量、定时及定位分析。3. 三维重组分析生物结构ACAS使用SFP进行三维图像重组,SFP将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。4. 动态荧光测定Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo-3和CNARF进行Ca2+和pH的同时测定。5. 荧光光漂白恢复(FRAP)——活细胞的动力学参数荧光光漂白恢复技术借助高强度脉冲式激光照射细胞某一区域,从而造成该区域荧光分子的光淬灭,该区域周围的非淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散,可通过低强度激光扫描探测此扩散速率。通过ACAS可直接测量分子扩散率、恢复速度,并由此而揭示细胞结构及相关的机制。6. 胞间通讯研究动物细胞中由缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起非常重要的作用。ACAS可用于测定相邻植物和动物细胞之间细胞间通讯,测量由细胞缝隙连接介导的分子转移,研究肿瘤启动因子和生长因子对缝隙连接介导的胞间通讯的抑制作用,以及胞内Ca2+、PH和cAMP水平对缝隙连接的调节作用。7. 细胞膜流动性测定ACAS设计了专用的软件用于对细胞膜流动性进行定量和定性分析。荧光膜探针受到极化光线激发后,其发射光极性依赖于荧光分子的旋转,而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性,因此极性测量间接反映细胞膜流动性。这种膜流动性测定在膜的磷脂酸组成分析、药物效应和作用位点,温度反应测定和物种比较等方面有重要作用。8. 笼锁-解笼锁测定许多重要的生活物质都有其笼锁化合物,在处于笼锁状态时,其功能被封闭,而一旦被特异波长的瞬间光照射后,光活化解笼锁,使其恢复原有活性和功能,在细胞的增值、分化等生物代谢过程中发挥功能。利用ACAS可以人为控制这种瞬间光的照射波长和时间,从而达到人为控制多种生物活性产物和其它化合物在生物代谢中发挥功能的时间和空间作用。9. 粘附细胞分选ACAS是目前唯一能对粘附细胞进行分离筛选的分析细胞学仪器,它对培养皿底的粘附细胞有两种分选方法: ① Coolie-CutterTM法,它是Meidian公司专利技术,首先将细胞贴壁培养在特制培养皿上,然后用高能量激光的欲选细胞四周切割成八角形几何形状,而非选择细胞则因在八角形之外而被去除,该分选方式特别适用于选择数量较少诸如突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞,即使百万分之一机率的也非常理想。 ② 激光消除法,该方法亦基于细胞形态及荧光特性,用高能量激光自动杀灭不需要的细胞,留下完整活细胞亚群继续培养,此方法特别适于对数量较多细胞的选择。10. 细胞激光显微外科及光陷阱技术借助ACAS可将激光当作“光子刀”使用,借此来完成诸如细胞膜瞬间穿孔、切除线粒体、溶酶体等细胞器、染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科手术。通过ACAS光陷阱操作来移动细胞的微小颗粒和结构,该新技术广泛用于染色体、细胞器及细胞骨架的移动。

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