总大肠菌群

水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业(如餐饮业、食品加工等)排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。1．方法原理应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的甲臜(Formazane)产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。2．水样采集用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加1．5％硫代硫酸钠5ml除去余氯。3．方法和步骤 每份预监测水样，接种水样总量为55．5ml，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每张大纸片接种10ml水样，五张小纸片每张接种1ml，另五张小纸片接种1：10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18～24h观察结果，测粪大肠菌群44．5℃±l℃培养18～24h，观察结果。4．判定标准①纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。③纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。④酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。5．报告结果根据阳性纸片张数，查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种，查表5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数，报出结果)，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。

做海水大肠杆菌的检测，可是只找到了粪大肠菌群的检测。三种检测方法有什么不一样的？好多文献大肠杆菌用的就是总大肠菌群的检测方法，不知对结果会有多少影响

环境监测行业里，测水样的粪大肠菌群，是用HJ347.2-2018标准，测总大肠菌群，是用GB/T 5750.12-2006。 那假如同一个水样，测粪大肠菌群，也要测总大肠菌群。那是不是总大肠菌群的结果一定大于粪大肠的结果呢？是否像总氮氨氮一样有必然的从属关系呢？一直很困惑。

做水质检测时,用滤膜法同时检测总大肠菌群及耐热大肠菌群时,为什么总大肠菌群没有生长,而耐热大肠菌群却生长很多,这是什么原因

总大肠菌群是否都需要镜检啊？

环境标准《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》已编制完成，目前开始征求意见，附件是该标准的征求意见稿。

做同一个水原水的总大肠菌群和耐热大肠菌群，总大肠菌群用多管发酵法，耐热大肠菌群用滤膜法，两指标同时操作培养，最终总会偶尔出现，总大肠菌群未检出而耐热大肠菌群检出，这样的结果的可能原因是啥？理论肯定是总大肠菌群未检出，耐热大肠菌群不该检出。可实验事实就是我的大肠菌群未检出，耐热大肠菌群检出！难道是水样未混匀导致的概率问题？这样的实验事实结果该怎么处理呢？

大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的从属关系及介绍大肠菌群介绍总大肠菌群耐热大肠菌群粪大肠菌群大肠杆菌致病性大肠菌O517相互关系大肠菌群（总大肠菌群） 粪大肠菌群&耐热大肠菌群 大肠杆菌

发帖人：[font=&][size=12px][color=#333333]啊恘[/color][/size][/font][font=宋体][color=black]链接：[/color][/font][url=https://bbs.instrument.com.cn/topic/6469521][color=black]https://bbs.instrument.com.cn/topic/6469521[/color][/url][b][font=宋体][color=black]问题描述：[/color][/font][/b][color=black] [/color][font=宋体][color=black]做海水大肠杆菌的检测，可是只找到了粪大肠菌群的检测。三种检测方法有什么不一样的？好多文献大肠杆菌用的就是总大肠菌群的检测方法，不知对结果会有多少影响？[/color][/font]

图中所示，用滤膜法做的总大肠菌群。100ml水样。国标规定的辨析特征描述为：1、紫红色、具有金属光泽的菌落。 2、深红色、不带或略带金属光泽。 3、淡红色、中心色较深的菌落。我的疑问是：图中1 所示，依据国标所述，紫红色具有金属光泽的容易看出，直径也较大。但是，除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？图1 除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？[img=690,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051124_01_3295384_3.jpg[/img]下图2，另一个水样，没有明显的紫红色金属光泽，图2中所示，是不是都应该计数为总大肠菌群呢？[img=690,587]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051134_01_3295384_3.jpg[/img]刚学微生物检测，请教各位帮忙辨认一下，在此感谢。

总大肠菌群是指受人、畜粪污染程度，那检测自来水时会因为自身操作导致最后结果出现总大肠菌群吗？

因为已经新的标准06的强制推行，每日必检项目中有细菌总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群等项目，因为我们实验室比较小，建立超净实验室要单独隔出超净实验室、缓冲间和准备室比较困难，那么应对标准我们能不能用超净工作台来代替超净实验室呢？怎么样才能满足检测标准？因为我们建立的仅仅是日检9项的实验室，所以地方不大，条件有限。

大家好，请教你一个问题：就是水和废水第四版中，总大肠菌群滤膜法后面有说：滤膜上菌落总数以20-60个/片较为适宜。同事做出来的实验为10ml体积的是85个,1ml体积的是12个，像这样的，是否合理，如何报结果，谢谢了

做废水中粪大肠的检测，初发酵用10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)的取样量，可以用总大肠菌群测试盒来做初发酵吗？

做水质微生物检测，耐热大肠菌群滤膜法，总大肠菌群15管法，滤膜法需要做空白对照吗？滤膜法的空白怎么做，是直接拿张煮沸过滤膜贴在培养基上放入培养？15管法的空白，是直接同步把未经接种的15管培养基放入培养吗？用的是GB5749的检测方法，看标准里，这两个指标是没要求做空白的。老手们帮忙指导下，谢谢

[table=100%][tr][td]最近实验室要CMA认证，本人负责了总大肠菌群和粪大肠菌群，是根据《水和废水监测分析方法（第四版）》来做的。但现在就只练了一般的水样，并不知道是否正确。平行也是感觉很杂乱。请问各位前辈，你们平时检测时或者之前经历过认证时，是有买标准菌株吗？比如质控菌株（ATCC25922）和产气肠杆菌(ATCC13048)这样的？据说CMA认证必考微生物，还是很忐忑的。很担心现场考察一个手抖就被毙了。如果前辈有什么好的经验，也请多多指教。谢谢！[/td][/tr][/table]

做水原水的微生物检测的总大肠菌群，耐热大肠菌群总是和别人差好几个数量级，可能的原因是啥？耐热大肠用的是滤膜法，别人检出个130cfu/100ml，我只会检出个个位数的出来，总大肠菌群用的是15管发酵法，人家也是检出有100多，我检出的也只有个位数的结果，不知道哪个环节可能出问题？

同一个水样，有没有总大肠菌群测出来大，菌落总数就会大呢？但是这俩项目的检出限不一样啊，总大肠菌群是不得检出，菌落总数是100个，到底该如何比较呢？

各位大神好，最近刚接触大肠菌群和粪大肠菌群实验，遇到了一些问题，请各位指教，谢谢1. 大肠菌群测定中，需要取菌群的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。请问这里的镜检的意义是什么？就是看是阴性还是阳性吗？不需要数镜片上有多少个菌？2. 大肠菌群测定中，进行平板分离后革兰氏染色，阳性就不需要做复发酵了吗？那报告怎么出结果？革兰氏阴性的话，要做复发酵，然后根据检数表来计算每升水样中的大肠菌群群数，再换算成每克污泥的大肠菌群数？3. 称取污泥样品1g，最后是1：:10均匀菌液（100mL），每升水样中总大肠菌群数是170，从每升水样中的大肠菌群群数，换算成每克污泥的大肠菌群数是这样算吗：170*0.1/1=17 个/g

请问由美国Idexx公司提供的，并通过美国EPA认可的“压膜机”法，所测定出来的总大肠菌群再经过紫外灯照射呈蓝色的结果是总粪大肠菌群还是E氏大肠菌群？

请问水质中粪（总）大肠菌群在CMA评审中会被抽到盲样考核吗？网上能买到标准样品吗？是定性还是定量的？求解答啊

请教，制衣厂臭氧处理废水菌落总数和粪大肠菌群有直接关联吗，是不是菌落总数包括总大肠菌群，总大肠菌群包括粪大肠菌群？处理前，粪大肠菌群的数据和菌落总数数据比较，是20%，处理后，占1.7%，数据合理吗谢谢大家

请问大家，我需要检测 粪大肠菌群 大肠菌群 菌落总数 这些微生物指标，作为检测机构的话相应的实验室条件需要哪些呢？比如洁净室的级别，环境温湿度，及其他硬件设施呢？

自来水滤膜法做总大肠菌群，有做的做出来菌长怎么样，我做出来好多红点，但用多管发酵法同时做比对，多管法确显示没有！想问各位有做过的同仁发个照片上来看看，滤膜法若显示有大肠菌群的话，菌在培养出来长啥样？若不是大肠菌群，是不是同时滤膜上也会同时长其他菌出来？

第一次买了瓶总大肠菌群冻干粉质控样，有点看不懂质控证书，证书上的特性值和特性值区间，是不是就是真值和真值范围，但特性值那栏又有个对数是什么意思，

[align=center]多管发酵法测水中总大肠菌群的方法[/align][align=center]化工室：周琰[/align]一、方法原理 总大肠菌群是指那些能在37℃48h之内发酵乳糖产酸产气的、需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。主要包括有埃希式菌属、柠檬酸杆菌、肠杆菌属、等菌属的细菌。二、标准溶液配制 此方法无标准溶液三、操作步骤1、样品采集 应采用在160～170℃灭菌2小时的玻璃瓶采样，采好的水样，应迅速送往实验室，进行总大肠菌群数检验。一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。若超过会引起水样污染，从而影响监测结果。 若医院污水经过氯消毒应在采样后立即用5%硫代硫酸钠溶液充分中和余氯。2、样品准备 2.1、污水 污水样品应至少取200mL，使用前应充分混匀。 根据预计的污水样品中总大肠菌群数确定污水样品接种量。总大肠菌群数量相对较少的接种量一般为10mL、1mL、0.1mL。总大肠菌群数较多时接种量为1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。 接种量少于1mL时，水样应制成稀释样品后供发酵试验使用。接种量为0.1mL、0.01mL时，取稀释比分别为1:10、1：100.其它接种量的稀释比依次类推。1：10稀释样品的操作方法为：吸取1mL水样，注入到盛有9mL灭菌水的试管中，混匀，制成1：10稀释样品。因此，取1mL1：10稀释样品，等于取0.1mL污水样品。其它稀释比的稀释样品同法制作。 2.2初发酵试验在5只装有5mL已灭菌的三倍乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管），以无菌操作加入充分混匀的水样10mL；在5只装有10mL已灭菌的单倍乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管），以无菌操作加入充分混匀的水样1mL；在5只装有10mL已灭菌的单倍乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管），以无菌操作加入充分混匀的水样1mL1：10稀释的水样。置于37℃培养箱培养24h。2.3平板分离经初发酵试验培养24h后，发酵管颜色变黄为产酸，小玻璃倒管内有气泡为产气。将产酸产气及只产酸发酵管，分别接种于伊红美蓝培养基上，置于37℃培养箱培养18~24h。2.4鉴定 挑选可疑总大肠菌群菌落，进行革兰氏染色和镜检。可疑菌落有：1）深紫黑色，具有金属光泽的菌落；2）紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；3）深紫红色，中心色较深的菌落。 上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则挑选上述典型菌落1~3个接种于普通乳糖蛋白胨培养液中，置于 37℃恒温培养箱培养24h。2.4计数根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数，查表可得100mL污水中总大肠菌群MPN值，求出1L水中的总大肠菌群数四、实际样品的测定 医院污水中，不同程度的含有多种病毒、病菌、寄生虫卵和一些有毒有害物质，我国水污染防治法第二十条规定“排放含有病原体的污水必须经过消毒处理，符合国家有关标准后，方可排放”。二氧化氯被认为是一种安全高效强力杀菌剂，对水传播的病原微生物，包括病毒芽孢及水路系统中的异氧菌，硫酸盐还原菌和真菌等有很好的消毒效果。 西安高新医院的污水执行《医疗机构水污染排放标准》具体限值见表一 表一综合医疗机构和其它所有医疗机构污水污染物排放限制（日均值）[table][tr][td]控制项目[/td][td]排放标准[/td][/tr][tr][td]总大肠菌群数（个/L）[/td][td]500个/L[/td][/tr][tr][td]pH[/td][td]6-9[/td][/tr][tr][td]总余氯（mg/L）[/td][td]3-10 mg/L 消毒接触池接触时间≥1h[/td][/tr][/table] 2015年4月，对西安高新医院处理后排放污水中的总大肠菌群进行了监测。监测结果如下表： 表二 总大肠菌群数测定[table][tr][td][align=center]采样地点[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院（平行样）[/align][/td][td=3,1][align=center]西安高新医院（平行样）[/align][/td][/tr][tr][td=1,2][align=center]接种量及管数[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0.1[/align][/td][/tr][tr][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][td=3,1][align=center]各5管[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]初发酵[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]平板分离[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]复发酵[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]MPN值[/align][/td][td=3,1][align=center]21[/align][/td][td=3,1][align=center]17[/align][/td][td=3,1][align=center]21[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]总大肠菌群数个/L[/align][/td][td=3,1][align=center]210[/align][/td][td=3,1][align=center]170[/align][/td][td=3,1][align=center]210[/align][/td][/tr][/table]五、结论 西安高新医院的污水总大肠菌群数为210，完全符合《医疗机构水污染排放标准》中的限值。六、注意事项1）采好的水样，应迅速送往实验室，进行总大肠菌群数检验。一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。2）采样瓶必须提前灭菌，所使用的玻璃仪器都应高温灭菌。3）革兰染色时要控制好每一步的时间。

采集测定总余氯和粪大肠菌群的水样如何保存呢？谢谢！！！

在饮用水中，总大肠菌群如果有检出就是超标，但是多管法的结果是用2来表示，而滤膜法则是0，就是没有未检出这个字样。那么原始资料和报告如何能一致呢？另外，多管法既然用2来表示，那么如何来证明是未人出的呢？因为2也可能是1，也就是超标了。怎么能算是没有检出呢？