种代谢物

本应用简报介绍了：? 利用 Agilent 1200 快速分离液相色谱（RRLC）系统高分离度分离体外代谢实验中得到的代谢物? 利用 Agilent 6520 QTOF 质谱仪采集用于计算机辅助代谢物鉴定的数据? 利用 Agilent MassHunter 代谢物鉴定软件高效鉴定非预期代谢物? 奈法唑酮药物非预期代谢物的代谢物鉴定数据分析结果

在无标品的情况下，利用GCMSMS的MRM采集模式，可对鼠伤寒沙门菌代谢物进行半定量分析。使用岛津公司三重四极杆气相色谱质谱联用仪GCMS-TQ8050结合代谢物数据库，在无标准品情况下，建立了467种代谢物的MRM筛查方法，利用此筛查方法对鼠伤寒沙门菌标准株ATCC 14028胞内及胞外样本中代谢物进行筛查定性，分别筛查出胞内代谢物77种，胞外代谢物31种，并以2-异丙基苹果酸为内标对筛查出的代谢物进行了半定量。

本文利用GCMS-TQ8050结合岛津代谢物数据库自动创建467种代谢物的MRM分析方法。通过建立的MRM方法对冬虫夏草中的多种代谢物进行筛查，使用核糖醇作为替代物，确认筛查结果的可靠性判断，以2-异丙基苹果酸作为内标，对筛查出的代谢物进行了半定量。在无测定目标组分标准品的情况下，鉴定出代谢物143种。

本文参考GB 31656.13-2021《食品安全国家标准 水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定 液相色谱-串联质谱法》标准，使用液相色谱-串联质谱仪对草鱼中的4种硝基呋喃代谢物进行分析，通过检出限、定量限、精密度、准确度等指标评估质谱仪（禾信LC-TQ 5200）性能，证明禾信LC-TQ 5200满足水产品中4种硝基呋喃代谢物检测的需求。

本应用简报介绍了：? 将 Agilent 1200 系列快速分离 LC 系统与 Agilent 6520 精确质量 Q-TOF 联用进行药物代谢实验中的数据采集? 利用代谢物鉴定软件进行复杂药物分子代谢物的鉴定? 利用代谢物鉴定软件中提供的工具进行复杂代谢物分子的结构解析

适用范围适用于动物源食品中硝基呋喃类药物代谢物的测定（该实验选用基质为鸡肉）参考标准：《GB/T 21311-2007 动物源食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱/串联质谱法》

摘要本应用简报介绍了：? 利用 Agilent 1200 快速分离液相色谱（RRLC）系统高分离度分离体外代谢实验中得到的代谢物? 利用 Agilent 6520 QTOF 质谱仪采集用于计算机辅助代谢物鉴定的数据? 利用 Agilent MassHunter 代谢物鉴定软件高效鉴定预期代谢物? 奈法唑酮药物预期代谢物的代谢物鉴定数据分析结果

本应用通过基于 UHPLC-Q-TOF/MS 的非靶向代谢组学分析方法探讨了白茶中非挥发性化合物对茶叶风味特征的影响。使用 UHPLC-Q-TOF/MS 分析茶叶的提取物，然后进行特征化合物的提取和比对，得到 1915 种化合物。基于这些化合物的主成分分析 (PCA) 和有监督的偏最小二乘差异分析 (PLSDA) 表明，三种不同品质白茶样品可以很好地分离。通过与标准品和数据库进行匹配，鉴定出多达 99 种代谢物。经由显著性检验和相关性分析发现，有显著差异的代谢物中有 41 种与风味高度相关；其中，茶氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺和 AMP 与鲜味呈正相关，而黄烷-3-醇、聚酯型儿茶素、原花青素 B3 和可可碱与苦味和涩味呈正相关。结果表明，代谢组学技术是一种有效的发现茶叶中特征代谢物的手段，这些特征代谢物有望作为潜在标记物用来区分不同品质的白茶，以应对人为掺假和标签错贴的现象。

无需酶水解即可分析所有代谢物，适用于由26种阿片类药物和阿片类镇痛化合物构成的综合性药物组，样品制备过程快速简单，所有分析物和代谢物具有线性响应，线性、准确度和精密度与稀释法相比都得到了提高，基质效应降低

硝基呋喃类因为价格较低且效果好，而广泛应用于畜禽及水产养殖业，以治疗由大肠杆菌或沙门氏菌引起的肠炎、疥疮、赤鳍病、溃疡病等。由于硝基呋喃类药物及其代谢物对人体有致癌、致畸胎副作用，个别国家已经禁止硝基呋喃类药物在畜禽及水产动物食品中使用，并严格执行对水产品中硝基呋喃的残留检测。本文参考国标20752-2006《猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》进行了鱼肉样品中硝基呋喃代谢物的检测。

10月27日海关总署紧急发布公函：从11月28日起，所有出口的动物性食品批批必检氯霉素、硝基呋喃代谢物、孔雀石绿和结晶紫。这些物质相关监管单位一直在检测，但在这次加急的公函中，紧急增加了硝呋索尔代谢物，并纳入了硝基呋喃代谢物中（现共5种）。10月31日，农业部、国家卫健委、国家市场总局联合紧急发布《水产品中硝呋索尔代谢物残留量的测定》征求意见稿，也就意味着，未来硝呋索尔代谢物不但出口产品需要检测，国内相关水产品等也将加入检测行列。

本文参考国标20752-2006《猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》进行了鱼肉样品中硝基呋喃代谢物的检测。

2019年12月27日，硝基呋喃被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单，并严格执行对畜禽和水产品中硝基呋喃的残留检测。本文参考国标20752-2006《猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》进行了鸡肉样品中硝基呋喃代谢物的检测。

采用高效液相色谱/串联质谱法检测动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量的分析实例介绍。实验中使用TSKgel ODS-100V （2.0 mmID X 15cm）反相色谱柱，对硝基呋喃代谢物AHD、AOZ以及AMOZ进行了分析。

建立以加压流体萃取、LCMSMS定性定量提取毛发中12种毒品及代谢物的方法。本方法用甲醇作为萃取溶剂，用加压流体进行萃取，萃取溶剂用真空平行浓缩仪进行浓缩，用LCMSMS进行分析。

本文建立了使用岛津超高效液相色谱三重四极杆质谱联用测定毛发中38种滥用药物及代谢物残留量的方法。化合物在0.05 ~5 ng/mL浓度范围内线性良好，相关系数r2在0.99以上。平行测定4份浓度为0.05 ng/mg的质控样品，38种化合物的回收率在79.8~109.0%之间，RSD在0.94~10.9%之间。该方法灵敏度高，分析时间短，结果准确，可用于毛发中滥用药物及代谢物残留量的准确定量检测。

马钱子主要有效成分士的宁（strychnine）又名番木鳖碱，属于中枢神经兴奋剂，临床用于偏瘫、瘫痪及因注射链霉素引起的骨骼肌松弛、弱视症等和巴比妥类中毒等。此外，添加士的宁的饲料诱饵可用来消灭老鼠等啮齿类有害动物，然而这些动物体内残留士的宁会通过食物链传递, 对整个生态圈造成影响，故有必要对其代谢产物进行深入研究，为临床用药、环保、司法等部门提供可靠的分析手段和数据。LTQ Orbitrap XL结合了线性离子阱和Orbitrap高分辨质量分析器，具有高灵敏度的多级高分辨能力。Mass Frontier为Thermo专业的结构解析软件，利用其丰富的碎裂数据库，可快速的对士的宁多级碎裂规律进行准确推测和归属，碎片离子检索功能将母药与代谢物相关性与可能的代谢途径有机的结合起来，从繁杂的基质样品质谱信号中准确的筛选到未知代谢物信息，进一步对代谢位点进行推测，最终获得全面的代谢物信息。

du品问题一直是社会高度关注的焦点，污水中du品及其代谢物的检测不仅能够反映当地的du品滥用情况，更能反映某个特定区域禁毒工作效果，警方能通过污水du品检测客观分析，构建毒情形势监测体系，有利于把控du品发展态势，全面科学分析du品滥用情况、确定毒情泛滥区域，进而强有力地推进禁毒工作。本文参考《污水中13种du品及其代谢物的固相萃取方法研究》，使用莱伯泰科SPE1000全自动固相萃取系统进行污水中的du品及其代谢物的萃取处理，经M64高通量平行浓缩仪浓缩后用液相色谱-串联质谱检测，从而测定污水中du品及其代谢物的含量，该方法能够快速、高效、稳定地达到实验的要求。

标准规定了水产品中呋喃妥因代谢物1-氨基-2内酰脲(AHD)、呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)和呋喃西林代谢氨基脲（SEM）残留量的高效液相色谱测定方法(样品为龙利鱼)。

酶联免疫法测定水产品中呋喃唑酮代谢物AOZ的残留运用酶联免疫法对水产品中呋喃唑酮代谢物残留测定的方法进行研究。结果表明，稀释倍数对回收率影 响显著，而乙酸乙酯提取次数、光照条件和放置时间对测定结果无显著影响。

为了在分析中实现对多种常见内源性代谢物类别的全面覆盖，开发了高 pH 和低 pH亲水相互作用色谱 (HILIC) 法。这些方法适用于高分辨率的精确质量数 LC/Q-TOF 质谱仪 (MS)。靶向代谢物类别包括维生素、氨基酸、聚胺、糖、磷酸糖、有机酸、核苷酸和辅酶 A (CoA) 衍生物。对液相色谱梯度和离子源进行了系统优化，以获得良好的异构体色谱分离效果，并获得所研究的所有代谢物类别的最佳信号响应。为验证此方法的稳定性，使用 HILIC LC/Q-TOF MS 方法运行 25 小时对酵母提取物进行了评估。

GB 23200.121-2021 食品安全国家标准 《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱—质谱联用法》已正式实施，此标准采用QuEChERS前处理方法、液相色谱-三重四极杆串联质谱一次进样正负源切换同时测定331种农药及其代谢物残留量，解决了现行液质标准适用农产品基质种类少、农药及代谢物品种不全、前处理操作复杂、部分农药方法定量限高于最大残留限量等诸多问题。本文分别以杏鲍菇、上海青、大豆、红茶为植源性样品基质，选取了国标GB23200.121-2021中的164种农药，采用纳谱分析的SelectCore QuEChERS萃取盐包及净化管分别对样品基质进行前处理，使用超高效三重四级杆液相色谱-质谱联用仪进行测定，实验数据表明纳谱分析的SelectCore QuEChERS前处理产品可以有效避免基质杂质干扰，并且实验结果稳定，回收率满足检测要求。

氨基甲酸酯类化合物是在有机磷农药之后发展起来的杀虫剂和除草剂，因其高效、低毒、残留期短等特点，在农作物保护中有广泛的使用，但随之而来的农药残留等问题更需引起重视。本文参考GB 23200.112-2018《食品安全国家标准 植物源性食品中9种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-柱后衍生法》，采用睿科全自动固相萃取系统和柱后衍-荧光检测的高效液相色谱法对小麦中氨基甲酸酯类农药及其代谢物进行多残留的快速测定，平均回收率在76.4%~103.5%，平均相对标准偏差小于5%。

岛津公司开发了使用高效三重四极杆液质联用仪对脂质介质同时进行分析的方法包。方法包包括158种成分的非常好的MRM参数，LC条件和保留时间。成分包括花生四烯酸代谢物、EPA代谢物、DHA代谢物、乙醇酰胺类成分、其他脂肪酸代谢物等。

迪马科技建立猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物解决方案，对比《GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，本方案：1.不需要甲酸溶液消化、蛋白酶酶解、盐酸酸化等复杂操作步骤，采用2%甲酸乙酸乙酯作为提取液，采用ProElut PXA固相萃取柱，水、甲醇淋洗，2%甲酸乙酸乙酯洗脱；2.简化前处理步骤，降低实验成本，节省大量时间，并降低基质效应的影响，回收率达85%以上，保证实验结果的准确性、重现性；3.方法检出限为0.27 μg/kg，较国标方法《GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》 的方法检测限0.5 μg/kg低，可供广大分析工作者使用。

岛津公司开发了使用高效三重四极杆液质联用仪对脂质介质同时进行分析的方法包。方法包包括158种成分非常好的MRM参数，LC条件和保留时间。成分包括花生四烯酸代谢物、EPA代谢物、DHA代谢物、乙醇酰胺类成分、其他脂肪酸代谢物等。

岛津公司开发了使用高效三重四极杆液质联用仪对脂质介质同时进行分析的方法包。方法包包括158种成分非常好的MRM参数，LC条件和保留时间。成分包括花生四烯酸代谢物、EPA代谢物、DHA代谢物、乙醇酰胺类成分、其他脂肪酸代谢物等。

Waters产品应用-TQD测定硝基呋喃代谢物Water的ACQUITY TQD应用报告：要点：0.025秒驻留时间（dwell time）每个峰可采集14个点。最低检测限是0.05 ng/mL（相当于虾中0.025 ug/kg）。这比EU最小检测量MPRL要求低40倍。校正曲线0.05-5 ng/mL，线性相应因子r2＝0.9972。对所有的四种对虾中硝基呋喃代谢物，使用50 uL进样量，TQD获得的最低定量限为0.05 ng/mL，这时的信噪比为5:1，这个水平比EU要求的MPRL低20倍。结论：已经建立的测定定硝基呋喃代谢物的UPLC方法，被成功移植到了ACQUITY TQD上。ACQUITY TQD测定硝基呋喃代谢物，比欧盟要求的MPRL最低检测限的要求低20倍。稳定性来说，50针进样序列，偏差11％或更小。使用UPLC的优点：提高速度，减少溶剂耗量，从而降低了溶剂耗费的成本和溶剂的后处理。

本实验采用Orbitrap ID-X Tribrid MS高分辨液质联用技术，结合Compound Discoverer软件中的代谢物分析工作流程，对中药柴胡体外肠内菌代谢物进行了快速准确的分析。Compound Discoverer内置I相+II相代谢途径，针对已知和未知代谢物开采用质量亏损过滤（MDF），碎片离子搜索策略（FISh），特征同位素，共有碎片检索等方式，寻找代谢物；同时软件提供多种统计学工具，通过不同给药时间点或不同处理方式统计学差异，确证代谢物。选择柴胡中鉴定到的代表性物质柴胡皂苷A和绿原酸为母药，在孵育基质样品中柴胡皂苷A正离子模式共鉴定出14种可能的代谢物，负离子模式鉴定出11种可能的代谢物；绿原酸共鉴定出5种可能的代谢物。

建立高效的气相色谱质谱检测方法，灵敏、快速测定牛奶中的双甲脒及其代谢物的含量牛奶中的双甲脒及其代谢物在酸性条件下水解为2,4- 二甲基苯胺，正己烷提取后，气质联用仪分析方法检出限远远低于食品安全国家标准中规定的双甲脒最大残留限量0.05mg/kg