指纹图谱研究

（一）中药指纹图谱的定义、特点和分类 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。 中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描（TLCS）、高效液相色谱法（HPLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法（GC）和高效毛细管电泳法（HPCE）等色谱法以及紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振法（NMR）和X—射线衍射法等光谱法。其中色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认的三种常规分析手段。由于HPLC具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点；中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，且积累较丰富的应用经验。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。随着HPLC— MS和GC—MS等联用技术的应用，中药指纹图谱技术更趋完善。 （二）中药指纹图谱建立的意义 中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别和含量测定等方法都不足以解决这一问题，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整体学说。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。 （三）中药指纹图谱研究概况 以指纹图谱作为中药（天然药物）提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，各种符合中药（天然药物）特色的指纹图谱控制技术体系正在研究和建立。美国食品药品管理局（FDA）允许草药保健品申报资料中提供色谱指纹图谱；世界卫生组织（WHO）在1996年草药评价指导原则中也规定，如果草药的活性成分不明确，可以提供色谱指纹图谱以证明产品质量的一致；欧共体在草药质量指南中亦称，单靠测定某种有效成分考查质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。色谱指纹图谱尤其是薄层色谱的鲜明的指纹图谱是很有用的。国外指纹图谱的应用，目的在于解决成分复杂，有效成分不明确的植物药质量检测和产品批次间质量差异的问题。其中德国研制的银杏叶提取物制剂是一个突出的例子。他们应用指纹图谱制定了相应的标准，该图谱体现了制剂所含的33个化学成分（主要为黄酮类和内酯类）和各自的含量。经化学成分和药效相关性研究，发现约24%银杏黄酮和约6%银杏内酯组成的提取物具有最佳疗效。此外，采用“混批勾兑”法，可使最终产品质量稳定，指纹图谱重现性良好，含量浮动范围为5%左右。 20世纪70年代我国已有学者尝试使用TLCS对中成药进行分析，因主客观条件的限制，技术和时机的不成熟，没有得到公认；20世纪90年代《中国药典》增设了中药化学对照品和对照药材，为中药指纹图谱的研究奠定了基础。随着色谱技术的迅速发展和检测能力的显著增强，为指纹图谱的研究和应用提供了良好的技术保证。目前我国已对中药注射剂做出了必须用指纹图谱进行检测的规定，同时提出了具体的技术要求；在中药材规范化生产实施过程中指纹图谱亦有较广泛的应用。 但是作为一项新技术，中药指纹图谱在实际应用中还面临许多问题，只有进一步加强中药材种植加工和中成药生产贮存的规范化；中药化学成分和中药药理研究的系统化和标准化；以及技术上多学科的渗透，才能保证中药质量的稳定，进而保证中药指纹图谱的建立

中药指纹图谱是指 某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描（TLCS）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和高效毛细管电泳法（HPCE）等色谱法以及紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振法（NMR）和X—射线衍射法等光谱法。其中色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认三种常规分析手段。由于HPLC具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点；中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，且积累较丰富的应用经验。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。 中药指纹图谱1、可以鉴别药材的真伪2、考察商品药材及成药的质量3、区分药材不同部位4、追踪制剂工艺过程及某些化学成分变化5、监测原料与成品之间、成品批间质量的一致性和稳定性 随着现代分析技术的发展，指纹图谱技术是当今国际公认的控制中药质量的质控模式。它能从原药材的栽培、引种，中成药生产工艺的规范与优化，到产品质量标准的制定提供全方位的质量保证。近年来国外对草药产品的质量评价也在提倡指纹图谱随着各种分析技术的创新和提高以及计算机应用技术的不断发展，世界各国对天然药物的了解和研究在不断深入，中药指纹图谱技术在国内外已成为一种发展趋势,其研究的方法和技术更趋成熟完善，成为国际公认的控制中药和天然药质量最有效的方法和手段。

石柱黄连指纹图谱研究 黄小平，李隆云，瞿显有，崔广林（重庆市中药研究院，重庆400065)摘要目的：建立石柱道地药材黄连的HPLC指纹图谱，为科学评价与有效控制黄连质量提供新方法。方法：RP—HPLC法测定石柱GAP基地10批黄连样品。色谱条件：迪马Diamonsil C18。色谱柱，乙腈一0．05 molfL磷酸二氢钾(磷酸调pH值3)为流动相进行梯度洗脱，检测波长270 am，流速0．8 ml／min，柱温25。C。结果：10批黄连样品得到的指纹图谱有16个共有峰，通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较，11，12，13，14，15号峰分别为伪小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱。结论：建立的HPLC指纹图谱分析法能较好反映黄连中的主要生物碱成分，可用于黄连的质量控制。关键词 黄连；高效液相色谱法；指纹图谱PS:该文献也没有谱图

开展中药指纹图谱研究的五大领域中药指纹图谱的研究内容和实际应用主要包括以下五大领域： 　　一、中药指纹图谱测试 　　针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。 　　１、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。 　　２、色谱分离分析条件优化技术研究。 　　３、多维、联用分析新技术方法学研究。 　　４、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。 　　５、中药指纹图谱分析方法规范化研究。　 　　二、指纹图谱鉴别方法研究 　　１、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。 　　２、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 　　３、指纹图谱相似度计算方法。 　　４、中药指纹图谱的快速处理方法。　　　　 　　５、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。 　　三、中药药效组分筛选及检测方法学 　　针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和方法。 　　１、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立。 　　２、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究。 　　３、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究。 　　４、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究。 　　四、中药指纹图谱组效学 　　在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。　 　　五、中药指纹图谱质量控制 　　将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究　　　１、中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。　 　　２、中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。 　　３、中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。

[B]一、中药指纹图谱测试 [/B]　　针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。 　　１、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。 　　２、色谱分离分析条件优化技术研究。 　　３、多维、联用分析新技术方法学研究。 　　４、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。 　　５、中药指纹图谱分析方法规范化研究。 　　[B]二、指纹图谱鉴别方法研究 [/B]　　１、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。 　　２、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 　　３、指纹图谱相似度计算方法。 　　４、中药指纹图谱的快速处理方法。 　　５、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。 　　[B]三、中药药效组分筛选及检测方法学[/B] 　　针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和方法。 　　１、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立。 　　２、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究。 　　３、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究。 　　４、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究。 　　[B]四、中药指纹图谱组效学[/B] 　　在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。 [B]五、中药指纹图谱质量控制 [/B]　　将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究。 　　１、中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。 　　２、中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。 　　３、中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=72390]山橿药材HPLC指纹图谱研究[/url]目的利用RP-HPLC法对山橿药材进行指纹图谱进行了研究,为科学评价与有效控制山橿药材质量提供新方法。方法采用AgilentHC-C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(60%～100%)线形梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,柱温30℃,在296nm波长下进行检测,记录55min的色谱图。测定10批药材的色谱图,建立山橿的指纹图谱。结果山橿药材有11个共有峰,多数峰可以达到较好的分离,方法学考察表明该方法具有较好的精密度、重复性和稳定性,各色谱图相对保留时间RSD小于0.50%,相对峰面积符合指纹图谱要求。结论建立的共有指纹图谱检测标准可以作为山橿质量评价的和品种鉴别的重要依据。

转载：红外光谱在中药指纹图谱研究中的应用红外光谱在中药指纹图谱中的应用一直不被人们所重视，原因有很多，但我觉得主要是由于传统观念认为红外光谱的专属性差而不足以起到鉴别真伪的作用。在这里我想谈一下现阶段的理论突破，希望能引起足够的重视。中草药的发展历史是以中国药剂学独特的、内在的整体理论为基础的，它倡导的是药物的总体治疗效果。因此，研究药物的单一成分不足以判断药物的功效。像质谱和HPLC等现代分析手段已经大大促进了中药鉴定和区分药物有效成分的能力。然而这些技术的应用往往只着眼于特定化学成分的研究，因此违背了将存在相互作用的多种成分混合在一起来分析的整体观念。20世纪80年代后期曾出现过红外光谱法鉴别中药的某些报道，但由于光谱总体解析知识的贫乏、思路上的保守和缺乏交叉学科的相互渗透，其进展并不显著。。20世纪90年代后期以来，出现了将红外光谱法与计算机辅助解析技术有机的结合应用于中药鉴定的若干报道。二维相关红外分析通过交叉计算获得高分辨的“指纹图谱”作为中药宏观质量判别的依据。虽然各种中草药常常都是由数以百计的成分所组成，但由于各自所含化合物的组成不同，各种化合物的比例也有差异，其红外指纹图谱就不可能相同。将红外光谱技术应用于中药的全面质量控制是一种思路上的创新。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=60659]中药指纹图谱研究技术[/url][em02]

一般指纹图谱初步研究都是用短柱，大家都不否认长柱效果一般比短柱要好，但是我们短柱换长柱需要注意哪些问题呢？

摘要：目的：采用高效液相色谱法建立白茅指纹图谱，并进行分析比较。方法：应用HPLC法测定白茅饮片的指纹图谱，用Kromasil Ｃ18(46×150ｍｍ,5μｍ)色谱柱,0.05%冰醋酸溶液—甲醇为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长320nm。结果：初步建立了白茅饮片的指纹图谱，其精密度、重现性、稳定性试验中共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%。结论：该方法简便、准确、重复性好。关键词：白茅;指纹图谱 白茅为禾本科植物白茅（Imperata cylindrica Beauv. var. major(Nees) C. E.Hubb.）的干燥根茎，是常用中药，自魏代沿用至今，始载于《神农本草经》并列为草部中品，味甘，性寒。主劳伤虚嬴，补中益气，除瘀血，血闭寒热，利小便。常用于血热妄行的多种出血证，热淋。目前，人们对白茅研究在质量控制方面比较肤浅，2010版《中国药典》也没有明确给出白茅的含量测定方法，生品与炮制品皆缺乏质量控制标准和行之有效的检测手段，本实验对白茅的指纹图谱进行初探，并进行了相似度数据计算，为充实其质量标准研究提供有关资料。1.方法学研究1.1仪器与试药Waters515高效液相色谱仪,Waters 2487双波长紫外检测器（Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector），2002 Waters公司 Empower pro 工作站（美国Waters公司），KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），色谱柱:中科院大连化学物理所，C18柱：Kromasil C18(4.6×150mm，5μm)，乙腈为色谱纯（美国Tedia公司， 批号：040702），甲醇（色谱醇，江苏汉邦科技有限公司，批号：004072166）。娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；冰醋酸为分析纯(AR级) （广东•汕头市西陇化工厂）；绿原酸对照品（供含量测定用，批号：110753－200413）,购自中国药品生物制品检定所；白茅饮片均购自不同产地见表1。 表1 十批不同产地的白茅序号产地白茅饮片编号1安徽生12湖北生23湖南生34江苏生45浙江生56河北生67山西生78[/

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=72389]桔梗的高效液相指纹图谱研究[/url]

[color=#8f0197][size=4][font=SimHei][b]【求助】指纹图谱相关的分析软件最近在做一个中药提取物原料和制剂的质量控制方法研究，准备用指纹图谱，查了很多文献才发现，用HPLC测出来的数据，还要经过软件处理，比如：国家药典委员会颁布的中药指纹图谱相似度评价系统2004A版，还有其他公司开发的类似软件等等。哪位朋友有免费的指纹图谱处理软件，共享一下，在此表示衷心的感谢！[/b][/font][/size][/color]

经常听到研究中药要用到指纹图谱~何谓指纹图谱，我真的不清楚？有没有高手给解释一下~

红外光谱在中药指纹图谱中的应用一直不被人们所重视，原因有很多，但我觉得主要是由于传统观念认为红外光谱的专属性差而不足以起到鉴别真伪的作用。在这里我想谈一下现阶段的理论突破，希望能引起足够的重视。中草药的发展历史是以中国药剂学独特的、内在的整体理论为基础的，它倡导的是药物的总体治疗效果。因此，研究药物的单一成分不足以判断药物的功效。像质谱和HPLC等现代分析手段已经大大促进了中药鉴定和区分药物有效成分的能力。然而这些技术的应用往往只着眼于特定化学成分的研究，因此违背了将存在相互作用的多种成分混合在一起来分析的整体观念。20世纪80年代后期曾出现过红外光谱法鉴别中药的某些报道，但由于光谱总体解析知识的贫乏、思路上的保守和缺乏交叉学科的相互渗透，其进展并不显著。。20世纪90年代后期以来，出现了将红外光谱法与计算机辅助解析技术有机的结合应用于中药鉴定的若干报道。二维相关红外分析通过交叉计算获得高分辨的“指纹图谱”作为中药宏观质量判别的依据。虽然各种中草药常常都是由数以百计的成分所组成，但由于各自所含化合物的组成不同，各种化合物的比例也有差异，其红外指纹图谱就不可能相同。将红外光谱技术应用于中药的全面质量控制是一种思路上的创新。今后我将就红外光谱在中药（包括药材和制剂）指纹图谱研究中的应用作更多的论述，希望大家能踊跃交流。红外指纹图谱反映的是中药整体质量信息，体现了中药作用的整体性和模糊性。由清华大学化学系分析中心孙素琴副教授等所承担的国家中医药管理局中医药科技重大项目"中药材光谱法快速检测系统的研究"，于2月9日在北京通过了由国家中医药管理局组织的专家组验收。　　该课题组首次将经典的红外光谱法进行了深层次拓展，创建了中药红外宏观指纹方法，并对野生与栽培、不同产地、不同生境、不同药用部位及不同等级的白芷和丹参药材的735个样品直接进行了分析测试。实验结果表明，在相对保证药材的真实性、道地性和代表性的前提下，凭借红外光谱法的可重复性和可靠性等特点，采用对各种中药材不经分离提取而直接进行检定，并以强有力的计算机辅助解析技术和模式别系统，对来自不同产区的栽培白芷样品的近红外谱图和中红外谱图进行模式识别系统分析研究，达到了分类识别的目的，且识别率达到了90％。同时对来自六省的栽培丹参样品和3省的野生样品进行模式识别系统研究，同样达到了分类识别的目的，对野生与栽培的丹参样品识别率也达到了90％。此外，该课题组还对280种中药材、400多种中药配方颗粒以及20种中药注射剂进行了较为深入的系统研究和分析，大量的实验数据证明，每一味中药，正如每个人都有指纹而且指纹各不相同一样，即具有一定的相似性，又显示出自身的特性。借助与计算机和模式识别技术，可以将中药的特性描绘出来，使每味中药都拥有如人的指纹一样的标准图谱。 根据这些标准谱图，可鉴别药材的道地性、生长环境；并可针对不同生产批次和不同生产厂家的同一产品在物质组成上的差异性评价其真伪优劣，从而非常直观地进行鉴定、鉴别与质量控制。　　专家们一致认为：该课题组经过攻关所建立的无需对中药进行提取分离等繁杂的化学处理而直接进行红外光谱分析检测的方法是目前中药材及其制剂最直接、快速、准确的鉴定鉴别和质量控制方法。该方法强调中药的整体性，不丧失其原本性、配伍性，符合中药中医辩证施治原则，以综合的、宏观的、非线性的分析理念和质量控制模式来评价中药的真伪优劣，以一定的量化指标（辅料的添加量或中药的特征峰峰强比）评价中药产品的稳定性和一致性，基本解决了质量标准化的问题。在现代中药宏观质量（整体）控制技术上取得了重大突破，为中药内在质量的宏观可控建立了一个适用性很强的监控方法。 浙江大学的程翼宇教授也做了相关的研究

中药指纹图谱理论和实际应用 罗国安 王义明 曹进 杨学东（清华大学药物研究所，北京，100084）http://www.cbcf.org.cn/jsjl/061.htm1. 引言中医药是中华古老文明的灿烂结晶，它为我国各族人民的身体健康作出了巨大贡献。随着科学的发展，中药现代化成为当前中药产业和新药研究领域的迫切需要，其关键科学问题之一是建立中药现代质量评价体系。中药指纹图谱是目前能够为国内外广泛接受的一种中药质量评价模式。作为中药质量控制方法，国内外对指纹图谱的研究方兴未艾。由于国情和传统的原因，不同国家的应用方法和思路有某些差异。日本把采用地道药材按饮片配方煎煮得到的煎汁作为标准提取物，标准提取物的指纹图谱即为标准指纹图谱，以此对生产的原料、配方和工艺作严格控制，使成品指纹图与标准指纹图谱一致。法国和德国的植物药制剂大多以"标准浸膏"投料，减少了以植物药为直接原料带来的不稳定性，然后严格控制生产工艺的各个过程，保证成药指纹图谱的稳定性。美国FDA也开始接受指纹图谱，在申报IND（Investigational NewDrug）的CMC(Chemistry ,Manufacture and Control)资料时，植物药物质（BotanicalDrug Substance）和植物药产品(Botanical Drug Product)的质量控制可以采用指纹图谱。此外，英国、印度以及WHO等都采用指纹图谱技术进行植物药（草药）的质量评价。在国外对植物制剂的指纹图谱研究中，主要是针对单味药材提取物而言，在植物制剂的整体性作用和药效相关性方面缺乏理论依据和相应的理论指导，并不适用于中药材及中药制剂的质量评价。 国内中药指纹图谱研究开始仅作为一种指纹性对比，用于鉴定中药材的种属。自从国家药品监督管理局对中药注射剂提出了建立质量控制指纹图谱的要求以后，开展了较多的指纹图谱研究工作，成为当前各方面关注的研究热点。近期在分析方法上使用了各种手段，如HPLC、GC、CE、IR等以及一些联用技术。但是研究仍处于起始阶段，对指纹图谱在质量控制方面的全面认识仍较为浅显，仅把它作为一种简单的质量鉴别项目，大多数研究者侧重于研究指纹图谱获取方法，缺乏理论深度。这样所建立的中药质量指纹图谱往往既缺乏方法学依据，又缺少足够的科学数据证明其可靠性。因此，尚存在许多关键问题，如中药指纹图谱的建立仅仅考虑其化学成分，没有以药效作为指纹性的依据。这极大地影响了中药指纹图谱的深入发展，并在一定程度上阻碍了中药走向国际的进程。因此，中药指纹图谱的研究是中药整体提升的关键，也是中药现代化的瓶颈，充分重视中药指纹图谱的应用，开展中药指纹图谱应用基础研究，将建立我国中药乃至创新药物的重要理论和实践基础。 2. 药指纹图谱理论及其重要意义我们认为，中药指纹图谱具有整体、宏观和模糊分析等特点，特别适应于中医药传统理论的需要。它是使用多学科交叉综合技术手段对复杂物质组成体系质量稳定性进行评价的计算机辅助分析检测方法，同时中药指纹图谱研究是分析科学、中药学、分离科学以及化学和生物信息学等二级学科（内含多个三级学科）交叉、综合应用的研究课题。因此需要多学科研究人员的协同攻关。目前为止，在中药生产和流通中，还没有一种质量控制手段能够全面的、综合的反映出中药产品的质量变异，可以有效地进行全过程的质量控制，中药指纹图谱的研究和建立正是为了解决药品质量控制和监督的这一关键问题而采取的一种方法。它从药材的生产、粗加工、贮存；制剂的原料、中间品、成品、流通样品等等各个角度和方面，进行中药样品的理化分析，通过相似性和相关性对比，发现质量变异和缺陷，从而全面、特异地把握住中药的质量命脉。另外，从中药新药的角度，中药指纹图谱又为之带来了一种崭新的研究模式，它从药材、成方入手，通过把握其中有效部位或有效组分的理化特性，直接将化学物质基础与药效相结合，形成既充分吸收中医用药理论精华，又蕴含现代药物活性特征，从整体综合的角度把握住了药物作用的针对性，为新药产生和快速筛选提供了思路和方法。具体的方面，中药指纹图谱是通过寻找有效部位或有效组分的图谱与活性效应之间的组效学特征来指导新药研究和筛选，它不同于西药研究中的药物构效关系，因为中药指纹图谱研究的是一个活性成分群的整体特性，而并不仅仅限于某个或几个成分；另一方面，也不同于较前提出的谱效关系，这里指纹图谱是直接针对有效成分群而设立的，而不仅仅限于物质成分的理化表征。因此从多维联用分析技术、药效检测和信息处理三个方面入手，多学科协同攻关，开展中药指纹图谱理论和实践研究，以发展形成先进实用的中药指纹图谱分析技术。从中药物质基础的角度出发，运用现代分离分析科学的手段，获取中药化学指纹图谱；并结合药效研究和相关物质成分的分离鉴定，经组效关系研究，获取中药有效组分指纹图谱；将中药化学指纹图谱和中药有效组分指纹图谱用于中药材、中间体和中药复方制剂的质量控制，以及药物创新等实践中。最终解决中药质量评价的科学性等中药质量关键科学问题，建立完备的中药质量评价体系，为中药走向国际市场、推进中药现代化事业的发展打下坚实的基础。3. 药指纹图谱的研究内容和实际应用3．1中药指纹图谱测试针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。A、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。B、色谱分离分析条件优化技术研究。C、多维、联用分析新技术方法学研究。D、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。E、中药指纹图谱分析方法规范化研究。3．2指纹图谱鉴别方法研究A、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。B、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 C、指纹图谱相似度计算方法。D、中药指纹图谱的快速处理方法。E、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。3．3中药药效组分筛选及检测方法学针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和法。A、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立B、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究C、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究D、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究3．4中药指纹图谱组效学在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。3．5中药指纹图谱质量控制将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究。3．5．1中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。3．5．2中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。3．5．3中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。4. 总结中药的质量一直是中药产业化进程中的一个瓶颈问题，同时随着中国进入WTO，中国的医药市场必然会受到来自全球医药大市场的冲击，直面困难，发挥中国本身具有的医药创新特色，走自己的路，发展具有现代化水平的，自主创新的新型医药研发和质量控制评价体系，是当今中国医药研究人员的目标和必然途径。 中药指纹图谱的提出和深入的研究，将为中药质量控制、中药产业化、中医药体系的研发提供素材和研究思路，为中药最终走向国际，成为保障人类健康的有益资源，发挥出自己应有的光和热。参考文献王义明,罗国安,曹进. 2002. 中药指纹图谱理论和实际应用.中药现代化杂志，待发表曹进，罗国安等. 2001.中药注射剂指纹图谱分析，世界科学技术--中药现代化3（4）：20罗国安，王义明，曹进. 2000.多维多息特征谱及其应用.中成药,22（6）：395罗国安，王义明. 1999.中药复方物质基础和药效相关性研究.世界科学技术-中药现代化杂志， (1):11-15罗国安，王义明. 1999.中药材的质量标准.中药研究与信息,(6):21-23罗国安，王义明. 1999.中药复方的化学研究体系.世界科学技术--中药现代化杂志, (1):16-19罗国安，王义明，饶毅. 2000.中药中成药现代化进

摘要:目的:研究獐牙菜总苷的高效液相色谱指纹图谱,http://www.39kf.com/Txt2Img/iuy87612.png科学评价及有效控制其工艺和质量提供可靠方法http://www.39kf.com/Txt2Img/ju.png方法：利用HPLC-DAD方法,梯度洗脱,测定了10批獐牙菜总苷样品。色谱条件为: Kromusil C18分析柱(250mm×4.6 mm D, 5μm) ;柱温40℃;流动相A为10%甲醇-水,流动相B为80%甲醇-水,流动相A梯度洗脱(100%→0%),分析时间32 min, 0-15min A∶B从100%∶0→0∶100% , 15-32min保持在0% A;流速为1.0mL/min;检测波长为260nm。结果: 10批獐牙菜总苷样品得到的色谱指纹图谱有16http://www.39kf.com/Txt2Img/503.png共有峰,分为3个部分:保留时间0 - 10min,出现1个峰;保留时间10-15 min,出现9个峰,主要特征峰1-7号峰均在此区域,保留时间15-30 min出现5个峰。通过与对照品的保留时间、紫外光谱及LC/MS所得分子量信息, 1 - 7号峰分别鉴定为獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷当药黄素、异当药黄素、獐牙菜山酮苷;时间15-30 min,出现6个峰。通过峰面积及含量测定结果,确定最强峰为1号峰。相同色谱条件下测定了不同工艺提取的獐牙菜提取物及獐牙菜药材的HPLC图谱,其结果与獐牙菜总苷有很好的相关性。结论　獐牙菜总苷的指纹图谱特征性及专属性强,可结合含量测定用于全面控制獐牙菜总苷的质量,确保每批产品的均http://www.39kf.com/Txt2Img/2008-9-13.png性。关键词: 獐牙菜; 总苷; 高效液相色谱; 指纹图谱

清华大学的孙素琴教授研究的中药指纹图谱，大家有没有了解的？用的是近红外还是红外？该技术还在研究中还是已经有实际应用了？

中药是中华民族的宝贵财富，它的疗效已为世人所瞩目。然而众所周知在我国中药材的质量极不稳定，市场也较为混乱。中药的质量问题已成为中药现代化、国际化的一大障碍。 多年以来中药材质量控制基本上是以传统的性状鉴别和显微鉴别确定真伪，以理化鉴别评价优劣。前者属于定性分析且需要鉴定者具有丰富的实践经验，人为影响因素较大，后者只考虑众多复杂成分中的个别“活性成分”，而忽略了中药材诸多成分间的协同作用。随着现代分析技术的发展，把已知的主要或有药效作用的成分，作为指标予以检测控制，比过去有了很大进步．但是从传统中医药理论的观点来看，指标成分的控制难以真正控制中药的质量。国际上已认可用中药指纹图谱来作为控制中药质量的质控模式。用中药指纹图谱监控中药质量，并不要求指纹图谱中的每一个组分都清楚，也不要求对每一个组分都精确测定，但要求图谱具有指纹特征，即要求专属、稳定、实用。中药指纹图谱研究包括中药材或中成药指纹图谱的获得和指纹图谱的分析、应用两方面。本文以近年来国内外在指纹图谱的构建和解析方面的研究为材料，综述了构建和解析指纹图谱的各种方法，并比较了它们的适用范围。 1指纹图谱的构建 目前获得指纹图谱的主要手段是色谱法和光谱法，其中比较常用的有以下几种 1．1 薄层色谱法 薄层色谱法常用于中药中各种成分的鉴定。薄层扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确，具有更好的指纹鉴别意义。运用薄层扫描法已获得了黄连、黄芩等中药的指纹图谱，还获得了高良姜中黄酮类成分的指纹图谱，同时薄层扫描法还可用于成药的分析，如六味地黄丸中各味药的鉴定。但由于薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响，会引起一定的实验误差。 1．2 高效液相色谱法 高效液相色谱法是构建指纹图谱的主要方法之一。由于中药成分的复杂性，构建指纹图谱一般采用梯度洗脱，因为逐步提高流动相洗脱能力可获得较多色谱峰，提供更多指纹信息。 配置紫外检测器的高效液相色谱在指纹图谱构建中较为常用，如贾晓斌等采用梯度洗脱制定了复方人参注射液的指纹图谱；赵燕燕等进行白茅根氯仿提取液的指纹图谱研究，由指纹图谱可判定其正伪，但对目前所知的白茅根药材中保肝利尿的主要有效成分葡萄糖和钾盐则无法检测，因此其指纹图谱只能用于定性鉴定其正伪，而不能确定其质量的优劣。应用光电二极管阵列检测器(DAD)构建指纹图谱的研究也较多，如黄芩中黄酮类成分指纹图谱的确定；侯艳鹏等在不同来源旋覆花药材指纹图谱研究中还发现仅比较色谱峰的保留时间是不够的，还需校对峰的紫外光谱是否一致。对于无紫外吸收的中药或其制剂可改用其它检测器，如蒸发光检测器(ELSD)等。如注射用七叶皂甙钠用HPLC分离，用ELSD检测，得到的指纹图谱直观准确地反映了产品质量，但ELSD的使用受样品组分和流动相挥发性的影响。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]技术可提供大量信息，符合解决中药复杂体系的要求，已用于指纹图谱的构建中，如桂枝汤A部分指纹图谱的确定及比较；张尊建等采用HPLC-UV-MS法对丹参药材、丹参注射液中间体及丹参注射液进行指纹图谱研究，得到了分离度好的指纹图谱。但由于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]价格昂贵，推广应用有一定的困难。 液相色谱具有重现性好、稳定性好的优点，适宜于构建指纹图谱。由于药材和成药不能直接进样，需经提取纯化，在考察条件时要避免只对“指标成分”予以考虑，而忽视“非指标成分”，对于中药注射剂应尽量采用直接进样、梯度洗脱，以避免上述偏差。又由于药材中各种成分的吸收波长及对不同检测器的响应不同，在构建指纹图谱也需要加以考察。 1．3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法适合于挥发性药材及制剂的指纹图谱研究。构建指纹图谱时一般使用质量型检测器—氢火焰离子化检测器(FID)。苏薇薇等对中成药乌鸡白凤丸石油醚提取物进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获得的指纹图谱可作为乌鸡白凤丸质量评价的标准。钱浩泉等用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法建立了高良姜及其近缘植物挥发油成分的指纹图谱。赵陆华等用挥发油提取器对降香进行提取，用十四醇为内标，建立了降香药材的指纹图谱。在中药复方制剂上，冯毅凡等对华佗再造丸及其主要药味的石油醚提取液进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获取其[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]指纹特征，可作为成药及其原料药真伪鉴别的依据。而GC-MS联用，不仅具有GC的高分离效能，而且兼备了MS鉴定的高灵敏性和准确性。苏薇薇等对45个细辛样品进行了GC-MS分析，经PRIMA法处理，实现了计算机对多种细辛的分类鉴别；魏刚等采用GC-MS法对不同产地广藿香、组织培养广藿香以及超临界提取广藿香、广藿香对照品共21个样品进行主成分分析，并建立了指纹图谱。 1．4毛细管电泳技术 毛细管电泳已用于中草药中生物碱、黄酮／黄酮苷、酚酸、香豆素、醌类、强心苷、葡萄糖异硫氰酸盐等物质的分析。龙虹等报道了金银花、银黄口服液和双黄连的毛细管电泳图谱，均含较多未知峰，指纹特征好；赵霞等以毛细管区带电泳模式，用内标法分析了9种贝母药材中生物碱的含量；王刚力等采用HPCE的MECC分离模式对18个卷柏属植物样品的乙酸乙酯提取物进行测定，建立了18个样品的指纹图谱。由于指纹图谱构建中样品的预处理以获得尽量多的指纹特征为前提，而毛细管电泳可以对大小分子、解离非解离分子同时分析，故适宜中药指纹图谱构建。 1．5红外光谱法 红外光谱法研究指纹图谱可用于药材鉴定，如甘草、延胡索与全叶延胡索、苍耳子与东北苍耳子、粉葛与野葛等药材的鉴别。红外光谱法还用于成药的鉴别，如田进国等对同仁乌鸡白凤丸与消栓再造丸红外指纹图谱的研究，结果两样品都具有独特而稳定的红外指纹图谱，可作为质量控制和真伪鉴别的依据。矿物类中药可直接压片测定其红外光谱，禹余粮有褐铁矿结核和普通褐铁矿两种，两者的化学成分相同，光学性质相似，而其红外光谱有很大区别。红外光谱是由分子的振动—转动跃迁引起的，确定其专属性和特征性有较大困难。 1．6紫外光谱法 紫外光谱是电子光谱，形状变化不大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。故紫外光谱法较少应用于指纹图谱的构建中。 1．7分子生物学方法 不同生物体有各自相对稳定的DNA序列，因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图谱。限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术和随机扩增多态DNA(RAPD)是目前最常用的构建DNA指纹图谱的方法。但RFLP技术繁琐，要求的DNA量大，实验材料必须新鲜，因此其应用受到限制；而RAPD法可以在特异DNA序列尚不清楚的情况下检测DNA的多态性，具有灵敏度高、多态性强的优点，同时分析的是基因型而非表现型，结果不受材料来源、环境因素、样品形态等影响，为干燥药材鉴定提供了更加准确的手段。罗志勇等E361采用RFLP技术，分析了人参、西洋参基因DNA指纹图谱。刘塔斯等采用RAPD方法对3个产地玉竹及其2种混淆品进行分析，准确区分了正品与混淆品。但RAPD法的重复性差等问题引起了许多争议。而且，色谱法与DNA指纹图谱相比其优点在于：不但有特征的体现(各种化学成分的个数和相对位置一保留时间)可作定性鉴别使用，还可体现量的概念。 2指纹图谱的解析 对两张色谱指纹图谱仅靠人们的主观比较很难客观、公正、科学地判断它的相同、相似或不同，往往由于人为的主观误差可能做出不同判断，缺乏科学的评判标准。