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植物组织样品

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  • 【求助】植物组织消解问题

    用干法消化植物组织,根据国标方法,高温消化多个小时后,加入稀硝酸溶解,但是很多不溶物,为什么呢?茎叶是已经灰白色了,植物茎还是有明显褐色物质……请有经验者帮分析一下,谢谢!

  • 如何高通量高效破碎动植物组织和微生物

    如何高通量高效破碎动植物组织和微生物

    破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时,人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然,也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机,发现自己那顽固的样品依然无法被完全破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。 分享个高通量高效破碎动植物组织和微生物的方法,别逗,当然不是靠徒手研磨能做到的,必须入手个神器——tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多样品组织研磨机。对于动植物组织和微生物,包括一些难以破碎的组织样品,都可以使用这个研磨机对其进行完全粉碎。 特别地,一些尤其坚硬/韧性比较强的样品,或要求维持低温条件进行破碎提取的样品,需要结合液氮进行研磨,如:皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等;使用普通机械研磨方法,很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态,尤其是提取RNA、酶等对温度敏感的物质时,低温状态的控制显得尤为关键。入手一台上海净信的多样品组织研磨机,这些都不再是问题了。看招:注:由于样品的具体差异及实验要求的不同,下文数据部分请咨询厂家。第一部分 破碎动物组织1)样品:猪肌肉组织2)仪器:Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3)步骤:a.取***克左右肌肉组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和800μLPBS裂解液,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。d.研磨完全停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的肌肉组织样品。4)结果:研磨后的效果如图1,猪肌肉组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对猪肉组织的研磨效果良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150947_546190_3397_3.jpg图1 猪肌肉研磨对比第二部分 破碎植物组织1)样品:水稻叶片2)仪器: Tissuelyser多样品组织研磨机(品牌:上海净信);耗材:***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3)步骤:a.取***克左右叶片组织样品,均匀地剪切成少量样品块,分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠,分别盖紧管盖后,置入24孔研磨适配器中,再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹,研磨***秒,启动研磨器。d.研磨完全停止后,拿出研磨离心管,旋开管盖,取出研磨好的叶片组织样品。4)结果:研磨后的效果如图2,叶片组织成很细腻的泥浆状,说明Tissuelyser多样品组织研磨机对叶片组织的研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆(坚硬的植物种子)的研磨对比图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546191_3397_3.jpg图2 水稻叶片研磨对比http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546192_3397_3.jpg图3 黄豆研磨对比第三部分 结合液氮使用tissuelyser研磨机 当样品死活无法破碎完全/样品傲娇要低温环境时,Tissuelyser多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例,具体操作方法如下: 血管: 取0.1克新鲜血管,用剪刀剪成若干小块,然后放入2毫升离心管中,加入1颗6mm研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后放入机器处理30秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取缓冲液,可以进行接下来的后续提取,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。 叶片: 取0.2克植物叶片,清洁叶片表面后放入离心管中,加入1颗直径5mm不锈钢研磨钢珠,盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾,然后取出放入研磨机器中机器处理30秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末,然后加入提取缓冲液,进行接下来的后续提取即可,加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。后记 想入手这个神器,但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴,现在上海净信部分研磨机产品可申请试用,是时候下手了。激动人心的还有,近期研磨机好价,试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。

  • 【资料】 植物和动物组织消解处理过程---样品消解资料之一

    我找到一套资料,是关于样品前处理的,原版英文的,希望能对大家分析应用有所帮助。资料比较多,我先试着翻译翻译,不妥之处望大家指正,先发一篇,以后逐步发表,待集成册后上载供大家查阅。DESTRUCTION OF ORGANIC MATTER IN PLANT AND ANIMAL TISSUE WITH PERCHLORIC ACID-NITRIC ACID MIXTURESPublication: Handbook of INDUCTIVELY COUPLED PLASMA SPECTROMETRYAuthors: M. Thompson and J N WalshField: Biology, Animal, Agriculture, plantReagents(i)Nitric acid, ~ 70 % m/m(ii)Perchloric acid ~ 60 % m/m.(iii)Hydrochloric acid ( 6 M). Dilute hydrochloric acid ( 36 % m/m, 534 ml) to 1l.(iv)Calibration blank – hydrochloric acid ( 1 M).Procedure(i)Weigh each sample (2.00 g, dried at 105 °C and ground *) into a clean, dry, numbered conical flask.(ii)Add nitric acid (40 ml) to each flask, cover with a watch glass, and set aside in the fume cupboardOvernight.(iii) Place the flask on the hotplate and warm gently until frothing ceases and the solutions are almost clear. The nitric acid should be boiling gently ( but without major loss of volume) at the end of this stage.(iv)Allow the flasks to cool, and check that there are no fat globules floating in the liquid.(v)Add perchloric acid ( 3 ml), replace the flasks on the hotplace without cover glasses, and very gently heat until the contents have just reached dryness. Do not overheat.(vi)Allow the flasks to cool, and add water (2-3 ml) and hydrochloric acid (2.0 ml, 6 M) to each. Warm to dissolve the residues.(vii)Transfer the cooled solutions either to graduated test-tubes or to graduated flasks, and dilute to volume with water. * Samples which are difficult to dry by heating (e.g soft fruits) can be freeze-dried, or homogenized and weighed wet. Moisture content can be determined separately.植物和动物组织使用高氯酸和硝酸混合物消解发表: ICP 手册作者: M. Thompson and J N Walsh应用领域: 生物学,动物学,农业,植物研究试剂:1.70 % m/m 硝酸2.60 % m/m 高氯酸3.稀释盐酸36% m/m 534ml 至 1 L4.标准空白 盐酸(1M) 过程:1.每个样品称重(2.00g ,在105 °C 下干燥并研碎 *)置于干净、干燥、带刻度的几个锥形烧瓶中2.在每个瓶中添加硝酸 (40 ml), 用玻璃覆盖, 放置在通风橱内,过夜.3.将烧瓶放置在电炉加热盘上,缓慢加热至起泡并溶液几乎是清亮的. 在本步骤最后硝酸应该缓慢沸腾(但主要体积没有损耗)4.让烧瓶冷却并检查溶液中没有漂浮的脂肪球.5.添加高氯酸 ( 3 ml), 再次将烧瓶放置在电炉加热盘上不用盖盖,然后非常缓慢的加热至内部刚好干燥,不要过热 .6.让烧瓶冷却并且添加水 (2-3 ml) 和盐酸 (2.0 ml, 6 M) 到每个烧瓶. 加热并溶解瓶中的剩余物质7.将冷却后的溶液移到最后的试管或测试的容量瓶中,然后用水稀释定容. * 难于加热干燥的样品(如软的水果)可以冷冻干燥,或者结构均匀可以称量湿重,水份可以分开测量.

  • 植物组织培养及其在中草药研究中的运用

    植物组织培养(Plant Tissue Culture)是应用无菌培养的方法培养植物的一个离体部分,也即是一种将自然环境中分离出来的植物细胞或组织放入含有合成培养基的瓶中,在无菌条件下使之生长或发育的方法。这项工作自动控制50年代后期至今巳取得了很大的进展,如诱导培养胡萝卜的体细胞分化成完整植株,由曼陀罗的花药培养形成了单倍体的植株。  从而证明了植物每个体细胞都有形成整体植物的潜在能力,如植物细胞具有“全能性”,在离体培养的一定条件下能诱导其分化器官和再生成植株。70年代以后有关植物原生质体培养和体细胞杂交的研究得到了很诀发展,如烟草、曼陀罗、颠茄、胡萝卜、油菜等能从其原生质体经培养再生分化长成胚或完整的植物,利用原生质体融合已经能使烟草属和矮牵牛属的杂种细胞增殖分化成杂种植株。  因此,运用组织培养方法可以在比较简单易观察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、生长和分化,以及各种外界因素对它们的影响,从而为解决农业生产和药物生产中的某些问题开辟了广阔的前景,目前已有若干重要成果应用于生产实践中,一为营养繁殖系的快速繁殖,如以甘蔗为例,原来每亩要用蔗种0.5~1吨,用组织培养快速繁殖的幼苗进行栽培可节省大量蔗种。又如贝母繁殖率非常低,而用组织培养分化出的三个月左右的鳞茎,其大小就相当于用种子繁殖二年生的鳞茎,另一为药物和生物制品的工业生产,药用植物的有效成分一般都从植物体提得,其产量和质量难免要受到植物的遗传性、生长条件、收获时间及贮藏和运输等因素所影响,如果能采用类似培养微生物产生抗菌素的方法生产有效成分,就可克服这些缺点,这对生长条件要求严格、生长缓慢、产量低、价值贵重的植物药更有意义。如近年来已大量培养人参组织,并提取有效成分,因此利用组织培养生产药用成分,探索天然药物生产工业化的途径是当前药物生产的一个新方向,随着大规模人工培养技术的成功,就有可能用组织培养法来代替全植物提取有效成分,这项工作将是未来研究植物药的中心课题之一。一、培养基的组成和配制法  近年来用的化学合成培养基大致由6种成分组成:(1)糖类,②多种无机盐类,(3)微量元素,(4)氨基酸、酰胺、嘌呤:(5)维生素;③生长素。此外,有些培养基还可添加天然的汁液,如椰子汁、酵母提取液、水解酪蛋白、麦芽浸出液等,培养基中如加入0.5~1%的琼脂即为静止培养的固体培养基,否则为悬浮培养的液体培养基。不同植物材料常需要改变配方,如维持生长和诱导细胞分裂和分化的培养基配方就不同,因此配方的种类很多,目前以Ms (Murashige and Skoog)培养基配方为最常用的一种基本培养基,它利于一般植物组织和细胞的快速生长。  总之,在进行组织培养研究时应根据研究目的和培养植物的种类来确定培养基的组成,除营养、诱导作用外还应当注意离子平衡和毒性问题,如水一般都采用重蒸馏水,无机盐类一般都需用化学纯的药品, pH值可用1N KoH(或NaOH)溶液和2N HCI调整。有时可以用普通药品代替,但须注意这些药品不仅应有营养价值,还须无毒。如果在工业上使用大缸深层培养细胞或组织生产有效成分和生物制品、应用培养基的量将要以吨位计量时,则采用什么代用品较为经济实用更应慎重考虑。   二、培养条件   (一)温度: 对大多数植物组织20~28℃即可满足生长所需,其中26~27℃最适合。   (二)光: 组织培养通常在散射光线下进行。光的影响可导致不同的结果。有些植物组织在暗处生长较好,而另一些植物组织在光亮处生长较好,但由愈伤组织分化成器官时,则每日必须要有一定时间的光照才能形成芽和根。有些次生物质的形成,光是决定三因素。   (三)渗透压: 渗透压对植物组织的生长和分化很有关系。在培养基中添加食盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇等物质可以调整渗透压。通常1~2个大气压可促进植物组织生长,2个大气压以上时,出现生长障碍,6个大气压时植物组织即无法生存。   (四)酸碱度: 一般植物组织生长的最适宜pH为5~6.5。在培养过程中pH可发生变化,加进磷酸氢盐或二氢盐,可起稳定作用。   (五)通气: 悬浮培养中细胞的旺盛生长必须有良好的通气条件。小量悬浮培养时巨常转动或振荡,可起通气和搅拌作用。大量培养中可采用专门的通气和搅拌装置。  三、材料和方法  从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。  由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(1~10%)、次氯酸钠溶液(0.5~10%)、升汞溶液(0.01%)、乙醇(70%)或过氧化氢(3~10%)等处理后,再用无菌水反复冲洗至净,然后在无菌室内,将所取的组织迅速培养在固体培养基上。在适宜的条件下,受伤组织切口表面不久即能长出一种脱分化的组织堆块,称为愈伤组织(Callus),此种愈伤组织在适当的培养基上经一定时间即能诱导生长成整株植物,因此愈伤组织既可是某种植物代谢产物的来源,又是诱导成株的主要途径之一。  在适宜的培养条件下,还可使愈伤组织长期传代生存下去,这种培养称为继代培养。但在继代培养中,不少植物培养的组织或细胞随着再培养代数的增加,分化能力就逐渐降低甚至丧失,其原因可能是由于在培养过程中原有母体中存在的、与器官形成有关的特殊物质被逐渐消耗所致,因此可以用激素或改善营养条件使之恢复,也有认为是组织和细胞在长期培养中遗传往的改变,主要是染色体的变化,出现大量多倍性或非整倍性细胞,这种改变恢复的可能住较小。不同的培养基可以使愈伤组织具有不同的生长速度,结构也可松可紧,利用这些特性可使之分散成为单细胞或很小的细胞团。要形成单细胞培养宜在较高盐分、高生长素及高水解酪蛋白的培养基中进行,然后移入液体并经搅拌而分散成单细胞。也有用加入一些果胶酶的办法,但一般来说要得到纯一的单细胞是很少的。  在培养药用植物选材时,还应考虑到所需要的次生物质在植物体中的合成部位,如果选材和培养方法适当,可使原植物内所产主的代谢物通过细胞或组织培养发生生化转变而获得。  通过组织培养可获得有效成分,但实际上只有大量培养成功才有经济价值。因此在生产上常采用悬浮培养法来代替含有琼脂的固体培养基。愈伤组织悬浮培养的生长通常比静止培养快,这是由于悬浮培养时营养成分可较快地渗入细胞,抑制生长的代谢废物可较快地除去,同时供氧情况也较好,在进行这种培养时要注意通气与定期更新营养液,这是保证生长稳定,次生物质产量高的关键之一。  四、有效成分的形成  列举用组织培养方法合成的一些有效成分。  利用组织培养方法产生药用成分,已渐渐成为药物生产的新方向之一。六十年代以来,有些国家已经开展了薯蓣及其他有关科属植物的组织培养,研究薯蓣皂甙元的形成,探讨其生物合成机制;已知有7种薯蓣属植物经组织培养后,可获得薯蓣皂甙元或其它甾体化合物,其中三角叶薯蓣Dioscorea deltoides Wal1。经组织培养得到薯蓣皂甙元的含量为0.3~2.5%,此外尚有鱼藤酮、甘草甜素,菸碱等,例如从烟草根尖细胞悬浮培养可产生2.9%(干重)菸碱。  在通常应用的基本培养基中适当添加生长激素、维生素或其他化学药品有时能使代谢物增加,如白花曼陀罗组织培养时,在培养基中加进0.1%酪氨酸可使阿托品的产量增加7倍多,芸香组织培养时在培养基中添加4一羟基-2喹啉酚,可促进白藓碱的合成和积累,在这两例中的添加物被认为是生物合成的前体。又如培养三分三愈伤组织时,在生长后期供给1my/1激动素,可使东莨菪碱的含量达到0.495%,比原植物中的含量提高很多。  除了培养基的组成外,环境因素也影响次生物质的产生。例如石芹的组织培养在黑暗中虽也增殖,但不形成黄酮类,而当暴露于光线中时,就能测出芹菜甙。组织培养应用在药学方面的工作虽然历史不长,但发展很迅速,它具有如下一些优点:  1.利用组织培养代替原植物的栽培以获得所需的有效成分,达到产量高,成本低的目的,还可节约土地。  2.除了应用于产生次生物质外,还可应用于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去甲基后可能生成吗啡。  3.从组织培养的定性分析中发现新化合物。例如在芸香组织培养中,合成和积累了芸香素(Rutacultin),它是一个至今尚未能从原植物或其他植物的呋喃香豆精中检测到的化合物。因而,组织培养将是获得新的生物活性化合物的一个来源。  4.一般情况下,组织培养是异养的,但也有自养的细胞系株,它们具有光合作用的能力而不依赖外界的糖类供应。这种特性将使细胞培养技术优越于全植物,并更为经济。  目前中国有关单位已成功地将麦角菌、灵芝、猴头菇等真菌进行工业化生产,高等植物组织培养在工业化中的应用也正在研究。  总之,植物组织培养这一新技术在中草药方面应用的前途是无限广阔的,它不仅有利于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生物合成等一系列理论问题,而且一旦工业化生产问题得到解决,将可以为防病治病做出很大的贡献。

  • 植物样品测定

    麻烦大家,想请教一下,我最近需要测植物中重金属,需要采用微波消解法对植物进行预处理,我有很多疑问:首先,我看到很多文献中都提到了要同时做试剂空白实验,这里我不太理解,试剂空白指的是在消解管中加入与样品质量相同的去离子水,并加入相同的试剂,随后与样品在同样的条件下消解,赶酸,定容么?其次,有的文献中还同时做了质量控制样品的消解,想问这个一定要做么,如果必须做的话,质量控制样品怎么选择呢?最后,有的文献中还计算了加标回收率什么的,我就是仅仅想要得到植物中重金属浓度,那这些还必须要计算么?希望大家能帮我解答一下,谢谢了

  • 求助:植物样品前处理

    我要测植物中的氮磷,还有Cu,Pb,Zn,Cd,As等重金属 在40度烘箱内烘,会不会对氮磷有影响? 植物样品烘干后 研磨碎怎么这么难 一般是不是还要过40目尼龙筛? 尼龙筛哪里能买到?一般的仪器店怎么都没有尼龙筛,都是不锈钢的 有谁有关于植物样品前处理的资料, 请各位多多指教,多谢!

  • 【求助】由植物样品压片时想到的

    有个项目做 采集了部分植物样品,要求做Cu,Pb,Zn等多元素,我本着快速方便的思路,想到了用压片法做做试试,随即遇到两个问题1,这种方法是否可行,植物样品采用压片法做2,在压片过程中,发现,由于以前的都是地质样品,用植物样品时,由于样品轻,称取同样重的植物样品时,植物样品显得多,在压片时,容易裂,要解决这个问题,有什么方法?

  • 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)

    动植物样品的采集及DNA样品的提取1.动物样品的采集及处理方法 遗传学数据在野生动物和圈养动物的保护和管理中变得日益重要。在本文中,我们总结了一些能简便而有效地获得样品及数据的方法。 我们在采集样品之前,最好对将要进行的遗传学分析有所了解。然而,采集者并非都是研究者,当采集地与实验室有相当距离时,采集者常常要保存好样品直到有合适的接受者或存放地,这就要求采集者应具备一定的经验。 首先,所有样品均应以个体序号进行标注,并且应写上种名、性别、采样者姓名以及采集日期,越详尽越好,以便同一个体的不同类数据可以相互引用,另外,地理来源的标注也很重要,需要注明。对于野外捕获的动物,有条件者最好在地图上标明捕获地及其经纬度。对圈养动物的每个野外捕获种源都要有同样的记录和详尽的谱系图,因为谱系图可用于计算近交系数。 总之,背景资料越详细越好,即使不能得到这里所列的全部信息,也要尽可能详尽。1.1 样品的测量方法在一定数量的分类群中采用的标准测量方法可用于以下四个方面:(1)分类学上:一套理想的测量方法应能大致上重建机体每个主要硬件部分的形状和大小。(2)不对称性分析:机体各部分的起伏不对称,也许表明进化过程在一定程度上正在变得不稳定,这可能是环境压力或近交的结果。测量不对称时机体左右两部分均应考虑在内。(3)遗传变异:在科级水平上,如果对同一年龄的个体采用同样的测量方法,就有可能对所选特征中的遗传成分变异进行粗略的估计。虽然并非总是能做到这样,但能使遗传学家对所选特征(如生殖特征方面遗传变异的任何丢失)进行监视。(4)生理检测或记录:采用标准测量方法得到的记录,也许会有助于与用其他手段得到的数据联系起来分析。例如,如果有了精子形态的记录,或是特殊寄生物的感染记录,遗传学家就能因此寻找在不同群体中这些因素与变异水平的相关性。1.2 组织样品的采集和保存 下面详细给出针对不同研究目的的适当方法。当然,每个实验室都有各自习惯的组织处理方法,因此,本文仅给出快速保存的有关要求,但对每种组织的可用性都有所评述,以便在用途有冲突时,能对潜在数据的可能应用作出迅速判断。 使用肿瘤、毛发及精子样品,保存时应特别注意。使用细胞培养样品可减少对活体或新杀动物的依赖,如果培养物来源于肿瘤组织细胞,则可大量减少对同种动物组织的进一步需求。组织材料必须在数小时内送到有关实验室或用于其他的细胞培养。如果已经知道DNA 序列的一小部分,就可利用PCR 技术从很少一部分组织中扩增DNA,从而使极其稀少的样品(如一根毛发或单个精子)具有更高的利用价值和更大的可信度。组织必须取自活体动物或死后1~2 分钟内的动物,并且要快速保存起来,除非出现下述情况:在野外条件或是匆忙安排的活体取样,因此没有时间同实验室联系。此时要有目的地扩大采集和储存量。如果已经详细知道样品的确切用途,则有时条件可以放宽。例如,对血液样品来说,有些酶是不要求立即冻存的。快速冻存时样品可放人液氮、干冰中或直接放入-70℃冰箱。冻存样品可在—70℃液氮、冰箱、干冰或-20℃冰箱中保存和运输。样品冻存及运输均以放入液氮中效果较好。非冻结冰箱是不能用的。

  • 做植物代谢组学样品平行样

    想问一下大家做植物代谢组学样品平行样时,这个平行样如果是6个,那是要6颗 相同处理的植物,还是一颗植物萃取后分成6份呢?

  • 植物样品 预消解

    急问:植物样品(茶叶标准物质),0.2/0.5g样品,加7ml HNO3,1ml H2O2,预消解时即剧烈反应,溢出了消解罐,这种情况正常吗?怎么避免啊?ps:做实际样品时,反应没有这么剧烈啊。

  • 【资料】15N土壤、植物标准样品

    1 主题内容与适用范围  本标准样品有土壤和植物材料。本标准适用于校准15N分析的质谱和光谱仪器、检验15N分析方法和各实验室15N分析数据的15N土壤、植物标准样品。 2 15N标准样品的来源及制备 2.1 富集15N土壤样品  取自北京农业大学校园的北京褐土,1983年在微区内施入高丰度15N的液氨,种了一茬水稻。土壤又放置了一年,混匀磨碎,过筛,再充分混匀,装瓶,每瓶30g 。 2.2 富集15N植物样品  水稻茎叶,于田间微区内在后期施入高丰度15N硫铵,待水稻成熟后收割,去掉根和穗子,洗净晾干,切碎,磨成粉,过筛,充分混匀,分装在塑料袋中,每袋2g。 2.3 15N自然丰度植物样品  取自大田的旱稻植株茎叶,经洗净、晾干,切碎,磨成粉末,过筛,充分混匀,分装在塑料袋中,每袋2g。  植物样品和土壤样品封盖后,用钴60γ-射线4.9Mrad照射后,在室温下(10~35℃)保存在暗处。 3 标准样品的细度、均匀度 3.1 细度:植物样品全部通过60目(孔径0.25mm),土壤样品通过100目(孔径0.149mm)筛孔。 3.2 均匀度:随机抽样20袋,经200次测定。富集15N植物样品的丰度为0.691±4.9×10-3,C.V%为0.71;富集15N土壤样品的丰度为0.441±2.9×10-3,C.V%为0.66。结果表明,样品是混合均匀的。 4 标准样品的标准值 协作组对本标准样品进行了多次反复,长期的测定,结果如下: 样品名称 15N原子% N% 15N自然丰度植物样品 0.366±0.001 1.026 富集15N植物样品 0.688±0.003 0.745 富集15N土壤样品 0.441±0.003 0.077   注:N%的参比值,供参考。 5 标准样品的保存和使用方法 5.1 避光、干燥保存,温度不超过30℃。 5.2 使用前先用牛角勺搅动,使再度混匀。 5.3 一般分析用量:土壤至少称取1g,植物样品至少0.2g。

  • 【求助】植物样品制备相关问题

    各位前辈,我想对植物根、茎、叶进行红外光谱分析,以前没有做过这方面的实验。文献中说要使用样品粉末,请问对粉末的粒度有什么要求吗?多细的样品有利于红外光谱分析?先谢谢大家啦!

  • 【原创】-土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定

    【原创】-土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定

    土壤、鱼肉、植物样品中DDT和六六六农药的测定1.样品的制备一、土壤样品:将土壤样品中的树根、石块等杂质除去后,风干后磨碎过40目筛子(0.45mm)。二、鱼肉样品:将鱼中的骨骼和鱼皮除去,将肉切成小块用冷冻干燥法去水后用研磨粉末。(或者先用组织捣碎机捣碎后再进行干燥)。三、植物样品:主要包括大米、玉米、植物叶、茎和根。样品风干后用组织捣碎机磨碎后过10~20目筛。2.提取用索氏提取:称取10g左右样品和约2g无水硫酸钠混合后置于滤纸筒中,然后分别加入200ng的2,4,5,6-四氯间二甲苯和十氯联苯作为指示物。用150mL正己烷/丙酮混合溶液(体积比为1)提取12小时。提取结束后将提取液用旋转蒸发浓缩为30mL左右(水浴温度40℃,旋转速度不能太快,若有暴沸现象可以加入适量的沸石;旋转蒸发过程需要加入正己烷以除去丙酮。)若使用超声波提取,可以先将样品用提取液浸泡过夜,然后用分步提取方式进行提取。3.净化磺化法净化:将上述的浓缩液转移至分液漏斗中,然后加入3mL的MOS级别浓硫酸,进行磺化,直至硫酸层无色。若在上述过程中,需要进行多次磺化,则每次加入浓硫酸的体积为提取液的10%左右。若在浓缩液中有丙酮存在,则磺化时溶液会变为黑色。磺化结束后,用20%的硫酸钠水溶液洗涤有机相至中性。然后将有机相用无水硫酸钠除水。将有机相用氮气吹扫进行浓缩(氮气应该为柔和,使得液面稍有振动,可以在45℃水浴中进行氮吹浓缩)。浓缩至1mL后,可以用GC-ECD进行分析。上述样品中,鱼肉、大米和玉米可以不用磺化,用弗罗里硅土柱净化也可。取层析柱(ф0.8cm×30cm)(预先用丙酮和正己烷淋洗,风干)干法装柱:自下而上依次装入少量的玻璃纤维(用丙酮和正己烷和混合液抽提)、1cm无水硫酸钠、5g降活后的佛罗里硅土和1cm无水硫酸钠,敲实。用20mL的正己烷淋洗,待顶层的硫酸钠即将要接触空气时,加入2mL左右的滤液,用100mL6%的乙醚正己烷混合液淋洗,淋洗液接至具尾茄形瓶中,用旋转浓缩至小体积,再用柔和的氮气吹至1mL。(佛罗里硅土,在650℃条件下烘3小时,冷却至常温加入2%的水降活2小时备用;无水硫酸钠,在450℃条件下烘4小时,冷却至常温,贮于干燥器中备用;乙醚,在30℃条件下加入适量无水硫酸亚铁重蒸。)4. 测定[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]条件(供参考):进样口温度260℃,无分流进样,进样量1μL。压力10psi,总流量7mL/min.,柱流量1.0mL/min.。吹扫流量3mL/min.,柱箱温度:程序升温,初始温度100℃保持2 min.,以5℃/min的速率升至200℃,不保持,以1℃/min.的速率升至290℃,保持10min.,再以20℃/min.的速率升至300℃;检测器温度320℃,尾吹流量40mL/min.(在分析有机氯农药之前,先用p,p'-DDT测分解率)。DM-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)。注:上述的柱箱温度是在有十氯联苯替代物的条件下设定的,如果没有加入替代物,可以将升温程序变为更短。由于p,p'-DDT可能会在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]的进样口分解为p,p'-DDE和p,p'-DDD,因此在用气谱分析有机氯农药时,应先测定p,p'-DDT分解率(本实验每测定12个样品后分别用p,p'-DDT测定一次)。参照美国EPA8081B方法,当两者中任何物质的分解率大于15%时,应该对气谱进样口(包括内衬管和进样垫)进行清洗或者硅烷化,并将毛细管柱连接进样口的一端截去一段。分解率的计算公式如下:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/01/200701152033_39030_1613333_3.jpg[/img]

  • 【求助】请教:如何测定植物样品中的碘?

    请教:如何测定植物样品中的碘?请教各位,怎么测定植物样品中的痕量碘?主要是样品前处理。目前使用测定饲料中碘的国标,但发现重复性很不好,回收率也很差。能不能用湿化的方法进行消解啊?各位有没有什么好的办法?先谢谢大家!

  • 【求助】做植物样品消解时,样品与酸的比例应该是多少啊

    我在做植物样品消解时,发现很多人都是0.5克样品+5ML酸,然后加热。 为什么我加的酸的量都10ML了,还老是炭化?难道是因为我用的是加热套加热,比较难以控温? 但我把样品量改为0.2克+10ML酸的时候,就可以正常消解了,谁知道这是怎么回事?

  • 【转帖】植物RNA提取的利器

    有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA, 而阻碍了其分子生物学方面研究的进展。这些植物组织中,或富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定的次级代谢产物,或RNase的活性较高。在完整的细胞内这些物质在空间上与核酸是分离的,但当组织被研磨,细胞破碎后,这些物质就会与RNA相互作用。酚类化合物被氧化后会与RNA不可逆地结合,导致RNA活性丧失及在用苯酚、氯仿抽提时RNA的丢失,或形成不溶性复合物;而多糖会形成难溶的胶状物,与RNA共沉淀下来;萜类化合物和RNase会分别造成RNA的化学降解和酶解。对于这些植物材料,用常规的RNA提取方法(如胍法、苯酚法和十六烷基三甲基溴化胺法等)难以提取出其RNA。纵观国际上RNA提取的试剂盒,如常见的Trizol,以及一些知名名牌的RNA提取试剂盒均很难从多糖多酚的植物中提取高质量的RNA,酚类物质的含量会随着植物的生长而增加。因而从幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,针叶类植物的针叶中多酚的含量比在落叶植物的叶子中要高得多。在植物材料匀浆时,酚类物质会释放出来,氧化后使匀浆液变为褐色,并随氧化程度的增加而加深,这一现象被称为褐化效应。被氧化的酚类化合物(如醌类)能与RNA稳定地结合,从而影响RNA的分离纯化;多糖的污染是提取植物RNA时常遇到的另一个棘手的问题。植物组织中往往富含多糖,而多糖的许多理化性质与RNA很相似,因此很难将它们分开。在去除多糖的同时RNA也被裹携走了,造成RNA产量的减少;而在沉淀RNA时,也产生多糖的凝胶状沉淀,这种含有多糖的RNA沉淀难溶于水,或溶解后产生粘稠状的溶液。由于多糖可以抑制许多酶的活性,因此污染了多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究。Trizol主要成份是异硫氰酸胍和苯酚,没有特殊去除多糖和多酚的试剂,所以对于大多数多糖多酚的植物无法成功提取,即使添加了如2-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)或半胱氨酸之类的防止酚氧化的试剂也很难提取。RNeasy Plant Mini Kit主要裂解液是盐酸胍或则异硫氰酸胍,有些公司进行改进之后添加了诸如PVP40等结合多酚的试剂,亦无法取得让人满意的结果。百泰克公司在RNA提取方面积累了丰富的实践经验,开发出通用植物总RNA快速提取试剂盒,在试验的一百多例多糖多酚植物中,无一例外的提取出来高质量的RNA,其中包括棉花、苹果、葡萄、草莓、香蕉、龙眼、荔枝、番茄果实、茄子、松针、杨树、拟南芥种子、菠萝蜜、马蹄金、早熟禾、高羊茅、云杉、松树、紫椴、花楸、白桦、山毛榉、海棠花、槭槭、紫罗兰、毛爪草、丁香、月季、天竺葵、仙客来、菊花、牵牛花、紫松果、彩叶草、一品红、夹竹桃、垂叶榕等。

  • 如何用硫酸+双氧水处理植物样品?

    本人有一植物样品,除了测定铁、铜、锰、锌、钙、钠、钾、镁之外,还要测氮、磷、硼。为了节省人力物力,试图用硫酸+双氧水处理样品,以便消解液能用于所有元素的测定(铁、铜、锰、锌、钙、钠、钾、镁用原子吸收,氮、磷、硼用其他方法)。今天摸索了一下,同时称取两份相同质量的样品,一份用硝酸+高氯酸消解。一份用硫酸=双氧水消解。上机测试,对比两种前处理的方法差异如何,最后发现,两种处理方法的结果。除了铁元素无显著差异,铜、锌的测定结果都差了许多……由于本人新手,好多东西还不懂,现阶段所了解的理论知识也仅仅是从书本、文献获得,亲自动手操作的经验非常欠缺。现在请教论坛各位老师,植物样品是否可以用硫酸+双氧水消解?如果可以,应该如何操作,有哪些需要注意的要领?还有,为什么两种处理方法处理出来的样品测试结果差别会那么大?

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