辛硫磷残留

我最近在做HPLC检测鱼体中的辛硫磷-一种有机磷农药，其实我建立检测方法的目的是为后面做辛硫磷在鱼体中的动态残留打基础的。我用的机子是 Waters的（具体型号没注意），自动进样，检测器是2996PDA的，可全波段扫描。标品购自国家标准开发中心，含量100ug/ml，溶解介质是石油醚。刚开始我是想用40%辛硫磷乳油来做的，结果做了很多次都不出峰。刚开始直接用纯甲醇溶解乳油，配置成各浓度的溶液，进样后出的峰很怪异，即使浓度很大检测器的响应值也很小，而且跟标品对比保留时间相差太远。后面用流动相稀释乳油，还是跟标品保留时间不一致。一直做了一两个星期问题依旧无法解决。后来查阅文献，发现做这种农药残留的大都用农药原药来做，原药的话一般纯度能达到90%以上，杂质的影响较小。没的说，买原药吧。还好比较顺利，三四天后原药就搞到手了，纯度为92%，液体。原药是中午拿到手的，下午立刻就去扫了紫外，扫出来的图跟标品几乎完全相同，当时那叫一个兴奋啊，恨不得立刻上 Warters试试看。但是我没有这条件，液相是整个学院公用的，一两个星期才能排到一次，一次也就10小时，没办法，等呗。好容易等到上机的那天，极度兴奋。因为还在摸条件，流动相是80%的甲醇，流速1，柱温当时也没设置，进样量20，柱子是国产的比较垃圾，凑合着还能使吧。先跑平基线，进标品，再进原药（原药是直接用甲醇溶解的），结果大失所望，标品5min出峰，原药8min出峰（最大峰），这这完全无法解释啊，本来是一种物质的差距怎么就这么大呢？再进标品，再进原药，色谱峰还是那样，真叫一郁闷啊。希望破灭，美梦落空。后来考虑到溶剂效应，直接用流动相稀释配置原药溶液，峰依旧没有改观。后面也试了其他配比的流动相，60%，50%都试过，柱温后来也设置为恒定的35°了，但是问题依旧存在，实在是束手无策了。后来去论坛求助，说是在在原药及乳油中加标实验，看是不是溶剂有问题。前几天我又重新做了一下，标品，原药及乳油的浓度是一样的，然后将标品和原药、标品和乳油等量混合，结果原药和乳油的出峰时间是一致的，在8.5左右，但标品还是在2.9.应该能确定原药及乳油的色谱图上最大的峰就是辛硫磷峰，毕竟原药中辛硫磷的含量达90%以上，而且从PDA扫出的光谱图看出二者的吸收峰是不同的。从加标的情况看，8.5分钟和2.9分钟肯定不是同种物质了。标品是在中国标准技术开发公司购买的，前后购买了两批，出峰时间都是一致的。另外我的色谱条件和国标（GB9556-2008）上的差不多，国标是75%甲醇，1ml/min的流速，我的是80%的甲醇，流速也是1ml/min，柱温恒定30，国标上的保留时间是8.6.我的在8.5，相差不大。由于我的流动相强度比较大，原药和乳油在2.9分钟左右有一些杂乱的小峰没有完全分开，将这些峰的峰面积和标品的进行对比，应该能确定这些组分不是辛硫磷。不知道各位有没有做过辛硫磷的，可否将色谱条件和保留时间告知，好有一个参照（文献上的保留时间也很乱，不可信啊）。无奈，没钱做质谱，不然问题还好解决一点。谢谢大家。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912311052_193176_1848329_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912311052_193177_1848329_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912311052_193178_1848329_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912311053_193179_1848329_3.jpg[/img]

急诊部第一期：进样口温度与柱温对辛硫磷的影响摘要：辛硫磷是一种公认的高效、低毒、低残留广谱有机磷农药，其在无光照条件下残效期很长，遇光则很快分解。辛硫磷在常温下很稳定，但在高温时(120—130℃)容易分解，这增加了在高温条件下检测辛硫磷的难度。因为它的沸点低，易分解，响应值低，致使峰形难看，改变气相条件能不能提高响应值，提高灵敏度呢？进样口温度与柱温不同会对它有什么影响呢？请看本试验。1 实验部分1.1 仪器与试剂瓦里安气相GC450，GC450气相色谱仪（美国布鲁克公司），PFPD、ECD检测器，自动进样器。试剂：辛硫磷标液2.0ug/mL。1.2实验条件：有机磷检测条件色谱柱：DB1701（30m×0.25mm×0.25um）；进样体积：1uL；不分流进样；检测器300℃；氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空气流速：17mL/min；氢气流速14mL/min。1.3实验方法　　本实验从两个方法入手，一是柱温不变，进样口温度逐步升高，看出峰情况；二是降低柱温，改变进样口温度，看出峰情况。（一）、柱温不变，进样口温度逐步升高程序升温程序：初始温度80℃，保持1min，20℃/min升到250℃，保持8min，共17.50min。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411261244_524678_1645480_3.jpg1.3.1进样口温度：150℃，出两个峰，峰面积分别为45.0、77.4。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411261245_524679_1645480_3.jpg1.3.2进样口温度：180℃，出几个峰，峰面积明显增大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411261245_524680_1645480_3.jpg1.3.3进样口温度：220℃，出三个峰，峰面积明显增大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/11/201411261246_524681_1645480_3.jpg1.3.4进样口温度：250℃，出两个峰，峰面积为499.5、2151.8。

http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603171151_587219_1898985_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603171151_587220_1898985_3.png同事 12年时用GC2010-fpd测辛硫磷 50ppb 峰面积为 40万左右 峰尖锐无拖尾最近 我也开始琢磨辛硫磷检测 却只能做到 1ppm 300万左右峰面积 可是100ppb不出锋。方法条件相同，均是单独做辛硫磷 短柱10m的1701 进样口低温160不知道问题出在哪里