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小鼠心肺

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小鼠心肺相关的论坛

  • 国务院再出三项举措以消除公众的“心肺之患”。

    国务院再出三项举措治理大气污染,以消除公众的“心肺之患”。国务院总理李克强2月12日日主持召开国务院常务会议,研究部署进一步加强雾霾等大气污染治理。三项举措包括加快调整能源结构,发挥价格、税收、补贴等的激励和导向作用,中央财政安排100亿元对重点区域大气污染防治实行“以奖代补”等。 第一项措施是“加快调整能源结构”,具体措施包括实施跨区送电项目,合理控制煤炭消费总量,推广使用洁净煤。促进车用成品油质量升级,今年年底前全面供应国四车用柴油。推行供热计量改革,开展建筑节能,促进城镇污染减排。加快淘汰老旧低效锅炉,提升燃煤锅炉节能环保水平。提前一年全面完成“十二五”落后产能淘汰任务。 第二项措施就是发挥价格、税收、补贴等的激励和导向作用,对煤层气发电等给予税收政策支持。而对于重点区域的大气污染防治,会议确定由中央财政设立专项资金,今年安排100亿元,实行“以奖代补”。去年,中央财政新增设大气污染防治专项资金,首批安排50亿元支持北京、天津、河北等5省份大气污染治理。  第三项措施是在具体的经济措施方面,要求制定重点行业能效、排污强度“领跑者”标准,对达标企业予以激励。完善购买新能源汽车的补贴政策,加大力度淘汰黄标车和老旧汽车。大力支持节能环保核心技术攻关和相关产业发展。

  • 【资讯】国家食品药品监督管理局对西安西京医疗用品有限公司生产的人工心肺机体外循环管道采取紧急控制措施

    国家食品药品监督管理局(简称“国家局”)日前采取紧急措施,责令西安西京医疗用品有限公司召回其生产的“希健医用”牌人工心肺机体外循环管道产品。  2007年4月22日下午,国家局收到广东省食品药品监督管理局报告,称广东省中医院珠海医院在为先天性心脏病患者(幼儿)手术中使用了西安西京医疗用品有限公司(西京公司)生产的“希健医用”牌人工心肺机体外循环管道,数名患者出现肝功能异常症状,高度怀疑与该产品有关。为保障患者健康和医疗安全,4月23日,国家局责令西京公司立即主动召回所有批号的人工心肺机体外循环管道,暂停生产和销售,并进一步查找原因。国家局派出工作组会同陕西省局,对生产企业进行调查,监督企业落实产品召回。国家局已发文要求各省(区、市)局对该企业的产品召回落实情况进行监督检查;对本辖区内同类产品的生产企业质量体系进行全面检查;加强对此类医疗器械不良事件监测,对发生的可疑医疗器械不良事件,及时报告国家局和国家药品不良反应监测中心。  目前,该企业的相关产品已得到了有效控制,尚未收到新的使用该产品导致肝功能异常和其它损害的可疑不良事件报告。国家局正在组织有关专家对患者肝功能异常与人工心肺机体外循环管道的关联性进行评价。

  • 建立糖尿病小鼠模型最好用什么品系的小鼠?

    [font=&][color=#4d5865]网上看资料觉得应该用C57小鼠比较合适,可以C57 小鼠也有好几个亚型,比如C57BL/6J和C57BL/6N,另外我看实验室是有3-8W,9-12W和4-7月龄的,选哪个年龄段的比较好呢?[/color][/font]

  • 【求助】求锰肥,锌肥,铁肥,镁肥,铜肥 肥料含量测定的国家标准

    公司进了不少微肥,主要成分:锰肥:七水硫酸锰.锌肥:七水硫酸锌.铁肥:七水硫酸铁镁肥:七水硫酸镁铜肥:五水硫酸铜但不知是真是假,也不知真实含量是多少,想测定一下,哪位朋友有相关的国家标准,给发一份吧.顺便教教我在不知道标准名的情况下,如何找标准吧[em09509]

  • 小鼠MRI立体定位器

    [url=http://www.f-lab.cn/stereotaxis/srp-6m-ht2.html][b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b][/url]是用于核磁共振环境的[b]小鼠立体定位仪器[/b],它采用兼容MRI的材料制造,是[b]小鼠核磁共振[/b]和显微操作实验的理想选择。[b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b]头部固定器组件是由100%塑料制成,AP框架棒和基板都由金属制成,保证了稳定和精确的立体定位记录,头部固定组件能够从基板拆卸下来,使得MRI可以扫描固定在相应位置的动物,核磁共振扫描之后,相应位置固定着动物的头部固定组件,能够轻易地放回在基板的原有位置,[b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2[/b]能够用于多种多样的应用,只需更换头部固定组件用于小鼠,结合该设备可以注入标记或造影剂,用于MRI扫描,头部固定组件可以进行立体定位,记录对准动物的MRI扫描点。[img=小鼠MRI立体定位器]http://www.f-lab.cn/Upload/srp-6m-ht2_.jpg[/img][b]小鼠MRI立体定位器SRP-6M-HT2特色[/b]自从NARISHIGE的立体定位操作器根据此标准制作后,AP框架具有18.7mm的方形形状。如提供的 SM-15 立体定位显微操作器。需要带显微操作器的版本请访问SRP-6M。SRP-5M-HT2 和 SRP-6M-HT2 之间的差别在于AP框架杆的数目。 SRP-5装配有一个AP框架杆,而SRP-6装配有两个AP框架杆。用于大鼠的版本分别是SRP-5R-HT2 和 SRP-6R-HT2(SRP-5R 和 SRP-6R不带显微操作器)小鼠MRI立体定位器:[url]http://www.f-lab.cn/stereotaxis/srp-6m-ht2.html[/url]

  • 小鼠骨髓细胞数检测的仪器

    大神们,帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器,再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类,计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

  • 资料 小鼠养殖环境

    小白鼠俗称“小鼠”、尖嘴鼠,由于颜色纯白而得名。我国饲养小白鼠历史最早,据记载,公元307~1641年就有人捕获野生小鼠进行饲养,并作为古代僧侣们的祭物。据资料介绍,从18世纪开始,小鼠开始成为实验动物,有的也进行观赏饲养。一、生物学特性(一)分类学地位小白鼠是野生鼷鼠的变种,隶属于动物界,脊椎动物门,哺乳纲,啮齿目,鼠种。我国目前饲养最广泛的是1946年从印度某研究所引入到云南昆明饲养的品种,又名昆明种。50年代由昆明引到北京生物制品研究所,以后输送到全国各地饲养。(二)形态特生小白鼠经过人们长期选择,定向培育,已形成许多品种类型。一般人们把它分为普通常用小白鼠和满足特殊需要的特种小白鼠两种。特种小白鼠有高癌鼠、低癌鼠、糖尿病鼠及先天性肌肉萎缩病鼠等。有的将小白鼠根据不同杂交方法和获得遗传特性而划分为近交品系、突变品系、远交和杂交群等。1972年以前,国际上公认的小白鼠近交系已有250多个。各品种小白鼠形态特征略有差异,但基本上相差不多。普通小白鼠体长约8厘米,尾略短或略长于体长,面部尖实,嘴前部有长长的触毛,耳耸立呈半圆形,眼睛大,嘴尖,被毛有纯白色和白斑色。90日龄昆明种小白鼠,体长9~11.0厘米,一般雄鼠大于雌鼠,尾有四小白鼠经过人们无数代的定向选择,生活习性有了一定的改变,环境适应性较差。如果把它们放回到室外环境,往往会因缺乏竞争力而难以生存。在人工饲养条件下的小白鼠,胆小怕惊,温顺,较易捕捉。当它受惊时,尾巴挺直并猛力甩动。夜间比白天活跃,喜群居。白日常集群而卧,下午4~5点钟以后活动加强,尤其在晚上更加活跃。当人在晚上进入鼠舍,即可听到小鼠不停地活动与啃咬所发出的沙沙响声。小白鼠喜阴暗、安静的环境,对环境温度、湿度很敏感,经不起温度的骤变和过高的温度。夏季温度过高常影响种母鼠的受胎率和仔鼠生长发育。冬季室温过低,不仅会影响种鼠的生长繁殖,且易发生多种疾病。小白鼠最适宜的室温是18~22℃,相对湿度为50~60%时较理想。此外,小白鼠尚有在干燥角落营巢的习性。白化小白鼠怕强光,在比较强烈光照下,哺乳母鼠易发生神经紊乱,可能发生吃仔鼠的现象。受到噪音的刺激,也会吃仔鼠。雄鼠好斗,性成熟的雄鼠放在一起,常发生互斗咬伤。雄鼠具有分泌醋酸氨臭气的特征,是引起饲养室内特殊臭气的原因。小白鼠为杂食性动物,可供利用的饲料很多,但作为实验动物饲养,应针对不同类型的小白鼠和各个生长发育阶段来制定合理的日粮标准。健康小白鼠一般能活存18个月至20个月,最长的可活至二年半。但年老的小鼠常体弱毛稀,多死于各种疾病,尤以肿瘤为多。(一)饲养设施经过长期入工饲养的小白鼠,对环境的适应性差,不耐冷热,要求生活在清洁无尘,空气新鲜,温度在18~22℃,相对湿度50~60%,噪音85分贝以下,氨浓度20PPm.通风换气8~12次/小时的环境中。因此,它对饲养房舍的建筑、环境条件要求比较严格。目前,国外饲养实验小白鼠多采用全封闭式的饲养设施,室内温度。湿度、光照、通风全部自动控制。国内饲养条件,尽管因陋就简,也要满足小白鼠对生活环境的基本要求。此外,笼具是小白鼠的生活场所,也是从事饲养人员每天都得操作的用具,因而笼具的结构、质量、式样以及重量等,是否合乎科学饲养要求,这对动物的生长繁殖,改善工作人员的劳动条件和提高工作效率等,都是十分重要的。1.鼠舍饲养小白鼠的房舍不宜过大,以20~25平方米为宜。这样有利于鼠群的调整及房舍的消毒。如果是平房,每幢房舍之间应有一定的距离,至少不少于15米,这样既可保证周围环境的宽敞,又可较有效地控制疾病的传播。除饲养房舍之外,还应合理设计辅助设施。例清洁消毒室,饲料、笼具、垫料贮藏室以及工作人员的更衣室、消毒室等。2.鼠罐当前在国内使用的有白瓷罐。泥瓦罐和塑料罐3种,还包括配备相应的罐盖。白瓷罐外形呈桶状,上口直径22厘米,下底直径18厘米,罐高吸厘米。其优点是上口较大,空气流通,夏季小白鼠居住凉爽,因其不渗水,不易引起铁鼠架的腐蚀。缺点是冬季保温性能差,笨重不易操作。泥瓦罐外形呈鼓状,有二个耳把。上口直径16厘米,下底直径15厘米,中间直径18厘米,罐高17厘米。优点是冬季保温性能好,使用轻便,价格便宜。具有防潮、暗光、价廉以及减少疾病传播等优点,是我国饲养小白鼠的传统用具。缺点是易渗水,腐蚀铁架,长期使用时,鼠粪和鼠尿熏染的臭气大。经过洗刷煮沸消毒,其臭味仍不易除去,有的破损率较大,过于笨重。塑料罐外形呈桶状,上口直径23厘米,下底直径19厘米,罐高14厘米,罐口上缘有卷边,罐重约150克。原料为聚乙烯塑料。其优点是使用轻便,不吸水,耐磨损,便于洗刷消毒,易干燥,贮存方便,耐腐蚀,耐用,破损少,老化后仍可回收,劳动强度轻。各种罐盖的外形结构及其大小都是按照鼠罐上口边缘的外形大小用铁丝编制而成。盖面上有填装饲料及饮水瓶的同斗,其孔大小,以逃不出仔鼠为原则。3.鼠盒小型盒长37厘米,宽26厘米,高17厘米。鼠盒可用于一公多母配种生产使用,也可用作待发小白鼠或饲养试验用鼠。利用鼠盒饲养小白鼠,其活动面积较大,但铁皮制作的盒底,容易被鼠的粪尿腐蚀。鼠盒盖的制法与要求同鼠罐。4.鼠架鼠架有木制及铁制两种。现在多为铁制的,材料多选用三角铁和薄铁皮(或塑料板)焊接而成。鼠架的大小根据条件、饲养数量等情况而定。一般的尺寸为高171厘米,长160厘米,宽50厘米,连同架盖分为五层。除顶盖外,每层鼠架可容纳鼠罐12个,每个鼠架分4层,共容纳鼠罐48个。目前国外已推广使用能够拆开的活动鼠架,用不锈钢制成,有很好的防腐性能。5.饮水器饮水器是饲养小白鼠的必备用具。常用的有玻璃瓶、塑料瓶和乳头式自动饮水器3种。其中以玻璃瓶使用最为广泛,一般采用容量250毫升和5吗毫升两种型号的玻璃瓶,瓶口使用生理盐水瓶上的瓶塞,从中间打孔插入铝管或玻璃管,其内径为0.5厘米,外径0.7厘米。6.铺垫物垫料,能吸附水分、动物的排泄物,维持笼内和动物本身的清洁卫生,垫料应不含挥发性、刺激性物质,无毒性,不会干扰动物实验。垫料的原料常用锯末、木刨花、木屑、碎玉米芯等。垫料的原材料常会携带各种微生物和寄生虫,使用前要经加工处理、消毒灭菌、除虫等。欧洲国家多用白杨木屑做垫料,而美国多用碎玉米芯,考虑到了材料的毒性因素和取材的难易。目前我国实验动物垫料尚未标准化,多采用混合木屑,其成分和毒性都不确定,可喜的是,现已开展了相关的研究,莎适合国情的标准化垫料,指日可待。

  • 小鼠骨髓细胞数检测的仪器

    大神们,帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器,再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类,计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

  • 【求助】消解小鼠器官侧金属含量

    我现在想要消解小鼠器官,测器官里面金属“金”的含量。由于实验室没有微波消解。所以想采用湿法消解。想请教一下各位该怎么做?直接加入王水,加热,至澄清?还是用高氯酸和双氧水,再加入王水?我是第一次做,实验室以前也没人做过。比较着急,大家能不能给一个现成的操作步骤?万分感激!!!

  • 【金秋计划】健脾调肝饮通过调节肠道微生物群和粪便代谢减少小鼠肥胖

    [b][size=15px][color=#595959]健脾调肝饮(JPTGY)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]具有[b]疏肝、理气、健脾、化痰[/b]的功效,长期临床实践发现其可[b]有效治疗肥胖[/b]。前期研究发现,JPTGY对肥胖患者的减肥效果令人满意,显著降低了患者的总胆固醇和甘油三酯水平,没有任何副作用。然而,由于中药制剂具有多途径和多靶点的特点,JPTGY治疗肥胖症的[b]机制尚不充分[/b]。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]该研究旨在采用[b]高脂饮食(HFD)诱导的肥胖小鼠[/b]模型来评估[b]健脾调肝饮(JPTGY)的作用与肠道微生物群和粪便代谢变化之间的关系[/b]。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]通过HFD诱导C57BL/6小鼠建立肥胖动物模型。采用[b]脂质代谢的血清生化指标[/b]评价JPTGY在肥胖小鼠中的药效学。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]通过16s rDNA基因序列结合基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url])的[b]非靶向粪便代谢组学技术[/b],对对照组、HFD组和JPTGY暴露肥胖组的[b]粪便样本中的细菌群落和代谢产物[/b]进行了研究。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]JPTGY显著降低总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]JPTGY可以上调粪便微生物群的丰度和多样性[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959],其特征是蛋白质细菌门较高。一致地,在属水平上,补充JPTGY诱导毛螺菌科NK4A136组、大肠杆菌、Turicibacter、梭状芽胞杆菌1和拟杆菌的富集,它们与14种关键的粪便代谢产物密切相关,对JPTGY治疗有反应。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]代谢组学进一步分析表明,JPTGY对肥胖的治疗作用涉及亚油酸(LA)代谢途径、α-亚麻酸(ALA)代谢途径,甘油磷脂代谢途径、花生四烯酸(AA)代谢途径和嘧啶代谢途径,这暗示了JPTGY治疗肥胖的潜在机制。[/color][/size][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]肥胖表型与肠道菌群和粪便代谢的联系揭示了JPTGY治疗高脂血症和肥胖的潜在因果关系[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size]

  • 小鼠读脑仪在美研制成功

    中国科技网讯 (记者何屹)据每日科学网站2月20日(北京时间)报道,斯坦福大学的科学家开发出一种系统,可以实时观察活鼠大脑活动情况,对研究诸如阿尔茨海默氏症等神经退行性疾病的新治疗手段具有十分重要的作用。该研究发表在近期出版的《自然·神经科学》杂志上。 研究人员首先利用基因疗法令老鼠神经细胞表达绿色荧光蛋白,该蛋白对钙离子敏感。当神经元受到刺激时,细胞内充满钙离子,荧光蛋白被激活,整个细胞会发出明亮的绿色荧光,就像一朵灿烂的绿色小烟花在黑色背景下绽放。随后,研究人员在老鼠大脑负责空间和情景记忆的海马体上方植入一个微型显微镜,显微镜与相机芯片相连,并可将数字图片传送到电脑,在电脑屏幕上显示老鼠大脑活动的实时视频。 海马体对环境非常敏感,在不同的环境下会有不同的细胞响应。当老鼠在实验环境的某个特定区域挠墙时,刺激特定的神经元闪烁绿色荧光。当小鼠流窜到别的区域时,绿色荧光会从某个神经元褪色,转而刺激新的神经元细胞发光。科学家在掌握了小鼠行为和神经元之间的关联后,仅仅通过小鼠脑部荧光闪烁的混乱图景,就能够清楚地了解老鼠究竟位于何处。 该研究小组发现,小鼠神经元的刺激模式十分稳定,实验间隔时间长达一月之后,仍可保持不变。而观察相同的细胞对于了解脑部疾病非常重要。如果某一个特定的神经元在测试时发生功能障碍,表明正常神经元已经死亡或出现神经退化疾病。研究人员就可以利用某些实验性的治疗试剂进行治疗,然后在相同刺激条件下,确定神经元能否恢复功能。 目前这项技术尚不能应用于人类,但小鼠模型是研究人类神经退行性疾病新疗法的一个重要起点,该系统将成为临床前研究评估的一种非常有用的工具。目前研究人员已经成立了一个公司,生产和销售该设备。 总编辑圈点 一般所说的“读脑仪”,通常指对脑意识进行探测和显现的电子设备,譬如测谎仪就算一种读脑设备。但在本文的研究中,“读脑”是为了找出实验对象的行为和神经元之间的关联,再进行医学药理学的分析。与意识探测相同的是,关乎“脑”研究,人类都还只是接触到皮毛,不过,随着近几年新进展的不断出炉,无论是“倾听大脑的思想”,还是将小鼠模型应用于研究人类神经退行性疾病新疗法,相信只是时间问题。 《科技日报》(2013-02-21 一版)

  • 【转帖】哈佛育出能“闻”出光线的小鼠

    哈佛育出能“闻”出光线的小鼠 为气味和感受间关系的研究开辟新途径 据美国物理学家组织网10月18日(北京时间)报道,哈佛大学神经生物学家培养出一种能“闻”出光线的小鼠,为研究人员更好地理解嗅觉功能的神经机制提供了一种新工具。本周的《自然·神经科学》杂志详述了这项研究,这为未来研究气味和感受之间的关系以及其他感知系统的神经机制开辟了新方向。 要分析大脑的嗅觉感知是如何辨别气味的,最好的方法是研究大脑的活动方式。但气味种类繁多,化学成分非常复杂,变化微细让人难以捉摸,因此追寻这些由嗅觉刺激形成的大脑模式非常困难。 如果让鼻子作为视网膜那会怎么样呢?哈佛大学分子与细胞生物学教授温卡泰斯·默西和冷泉港实验室的同事利用遗传光学技术,把一种光敏蛋白质跟小鼠的嗅觉输入系统结合,培育了一批转基因小鼠,它们的所有嗅觉感受神经元都能表达视网膜素转导通道2(channelrhodopsin-2)蛋白质,这些转基因小鼠的嗅觉路径因此变成由光来激活,代替气味来研究大脑神经细胞如何区别不同气味。 嗅觉信息会在大脑中形成不同的三维空间组织形态,由于光输入很容易被控制,研究人员因此能设计一系列试验,利用光选择性地刺激鼻子里的特定感觉神经,研究大脑中嗅球的激活模式。 默西说,因为用外来光照代替气味在大脑中形成的空间组织只是一种临时性结构,新研究也存在一定的局限,并不能完全解释气味感受能力。研究还显示,在气味被感受的过程中,“嗅闻”的时机起着很大作用。

  • 转基因小鼠制备实验

    1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。4、10:30左右,断颈处死供体,手术取出整个输卵管,放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下,用镊子撕开输卵管壶腹部,受精卵随同颗粒细胞即一同流出。5、仔细观察放在透明质酸酶M2液中的受精卵,当受精卵周围的颗粒细胞脱离时,将受精卵吸出,放入M2液中洗涤,最后放在M16液中放入5% CO2,37C0培养箱培养。6、在显微镜下观察,挑选细胞饱满,透明带清晰,雄原核清晰可见的受精卵待用。7、安装持卵针和注射针,使其末端平行于载物台,在凹玻片的中央滴入一滴M2液,覆盖石蜡油,移入待注射的受精卵。DNA在注射针中的气泡应在先前全部弹走。8、在高倍镜下,将注射针轻触持卵管,使DNA缓慢流出并控制其流量;反复吹吸受精卵,使其处于最佳位置,将注射针刺入受精卵的雄原核,直至看到原核膨大即退出。将注射过的和未注射过的受精卵上下分开放置,不致于混搅,注射完毕后,放入5% CO2,37C0培养箱培养。9、将受体麻醉,注射计量为1%戊巴比妥钠0.01ml/g,腹腔注射。手术取出卵巢连接输卵管,用脂肪镊固定,在显微镜下找到输卵管开口。吸取注射后经培养成活的受精卵,吸取方法是先吸一段较长的M2,吸一个气泡,然后吸取受精卵,尽量紧密排列,再吸一段液体,吸一个气泡,再吸一段液体,共四段液体三个气泡。除较长的那段液体,其余的液体大致1cm左右,气泡0.2cm左右。将移植管口插入输卵管口,轻轻将移植管内的液体吹入,看到输卵管壶腹部膨大并清晰地看到三个气泡,即移植成功。将卵巢连同输卵管放回腹腔,缝合肌肉和皮肤。10、受体每隔一个星期称体重一次,当第二次比第一次称重增加时,即可初步判断怀孕。手术后19~21天仔鼠分娩,待仔鼠3周后,剪耳、编号,剪尾,交分子组检测。(一般选取4-5周龄的雌鼠作为供体,此时的小鼠卵数较多,状态较好。用pms诱导卵细胞成熟,用hcg超排。)

  • 求助:小鼠囊胚透射电镜样品制备

    [em53] 俺是个新手,老板刚给定下来课题,做小鼠囊胚的免疫电镜,有没有同仁做过,小鼠囊胚这么小怎么固定,脱水,包埋。很愁人,给点建议,帮帮俺吧,谢谢!

  • 【原创大赛】一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法

    【原创大赛】一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法

    [align=center]一种简便测定小鼠耗氧量的实验方法[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心:苏敏[/align][b] 1引言[/b]小鼠在密闭的缺氧瓶内不断消耗氧气,而产生CO[sub]2[/sub],CO[sub]2[/sub]被缺氧瓶中的钠石灰所吸收,瓶内氧分压逐渐降低而产生负压,缺氧瓶与水减压计接通,由于负压吸引将水柱内侧液面上升。及时由滴定管中滴入一定水,使水减压计恢复至原先的压力水平,保持小鼠处于常压状态下,记录所滴入装置中的水容积,以此表示在一定时间内,小鼠吸取的O[sub]2[/sub]的容积。黄芪是经典的补气药,具有利尿,强壮,降压,提高机体免疫功能等作用。本实验通过黄芪降低耗氧量的实验研究,介绍了小鼠整体耗氧量的测定的装置。[b]2材料与方法[/b]2.1材料动物:小鼠,体重18~22g,雌雄均有。器材:小鼠氧耗量装置(125ml缺氧瓶,200ml具塞广口瓶和微量滴定管,水减压计),秒表。药品及试剂:黄芪水煎液(2g/ml),普萘洛尔,钠石灰,凡士林。2.2方法2.2.1分组及给药选取体重18~22g健康小鼠48只,雌雄兼用,分别称重,编号,按体重和性别均分为4组: 生理盐水组,黄芪水煎液组,普萘洛尔组。生理盐水组小鼠每只腹腔注射等容量的生理盐水,黄芪水煎液组每只腹腔注射黄芪水煎液3g/kg,每只皮下注射ISP20mg/kg 普萘洛尔组,每只皮下注射普萘洛尔30 mg/kg。2.2.2测定方法 在室温25℃条件下,将微量滴定管及通气管插入200ml具塞广口瓶内;125ml缺氧瓶内,插上水减压计;用导管将缺氧瓶与广口瓶相接,如图1所示。20~45分钟后,测定小鼠5分钟内的耗氧量。将小鼠放入缺氧瓶内,盖好盖子,关闭与大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]通的地方(空气入口处和滴定管活塞,水减压计开口处),通入空气,此时水减压计的压力即为常压状态下的压强。立即停止通气,此时开始记录时间,当小鼠呼出的CO[sub]2[/sub],被钠石灰吸收时,装置内的气体容积减少,水减压计压力降低,及时从滴定管加水至装置中,使水减压计恢复至常压状态下压强。由滴定管放入装置中的水容积,即代表5分钟内该小鼠吸取O[sub]2[/sub]的容积,可以毫升表示,从而判断药物有无降低机体的氧耗量作用。 [align=center][img=,690,512]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011428075958_3362_2904018_3.png!w690x512.jpg[/img] [/align][align=center]图1 氧耗量测定装置[/align][align=center]1.缺氧瓶2.水减压计3.滴定管4.广口瓶[/align][b]3结果[/b]普萘洛尔和黄芪水煎液组耗氧率显著降低,黄芪组的耗氧量降低幅度稍弱于普萘洛尔组。[b] 表1 黄芪水煎液对小鼠整体耗氧量的影响([/b][img=,14,18]file:///C:\Users\ADMINI~1\AppData\Local\Temp\ksohtml\wpsF5F9.tmp.png[/img][b]±ѕ , n=10)[/b][table][tr][td][align=center][b]组别[/b][/align][/td][td][align=center][b]剂量(mg/kg)[/b][/align][/td][td][align=center][b]5分钟累积耗氧量(ml/只)[/b][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生理盐水[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]5.43±0.33[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]普萘洛尔组[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][td][align=center]3.2±0.55[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]黄芪水煎液[/align][/td][td][align=center]3000[/align][/td][td][align=center]4.25±0.42[sup]**[/sup][/align][/td][/tr][/table]与生理盐水组比较:[sup]*[/sup][i]P[/i]0.05,[sup]**[/sup][i]P[/i]0.01[b]4讨论[/b]本文介绍一种在缺氧实验及抗心肌缺氧药物筛选中简易的方法,所用装置使用方便,耗资少。测定装置各接口处应密封无漏气,可涂少许凡士林于口密封。实验测氧耗量时,计时应准确。动物体重、室温、玻瓶容积等因素对实验结果有一定影响,实验中应加以控制。当小鼠耗氧量较多时,由于水比重小,水很容易通过虹吸现象进入缺氧瓶内,影响实验的进行。因此,连接缺氧瓶与广口瓶的导管不应离液面太近。应及时补充滴入水。由于钠石灰吸收CO[sub]2[/sub]会饱和,每测定1只小鼠要换钠石灰,否则影响实验结果准确性。小鼠整体氧耗量测定还可用小鼠放在密封小瓶内,通过连接测氧仪测定氧耗量。各组实验在一个时间段内进行。也可以用测氧仪来测耗氧量。[align=left][b]参考文献[/b]陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,2006:782.[/align]

  • 【原创大赛】姜黄素对β-淀粉样蛋白致小鼠空间学习记忆障碍的改善作用

    【原创大赛】姜黄素对β-淀粉样蛋白致小鼠空间学习记忆障碍的改善作用

    姜黄素对β-淀粉样蛋白致小鼠空间学习记忆障碍的改善作用阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种常见的慢性进行性精神功能衰退性疾病。近年来,研究发现AD患者大脑中的主要成分β-淀粉样蛋白(Aβ)明显增多,Aβ可能是该病发病机制的起始因素和关键环节。 姜黄素为二苯庚烷类化合物具有较明显的抗炎、抗菌、降血脂、抗老年痴呆,但其是否可以对抗Aβ引起的神经毒性未见报道。本文通过研究其对Aβ引起的记忆障碍模型小鼠的保护作用],为临床可能应用姜黄素治疗老年性痴呆症提供依据。 本题为探讨姜黄素对β[font=Times New Roman]-[font=宋体]淀粉样蛋白[font=Times New Roman]25-35[font=宋体]致小鼠空间学习记忆障碍的改善作用。方法采用侧脑室一次性注射[font=Times New Roman]β-[font=宋体]淀粉样蛋白4μl[font=宋体]导致小鼠空间学习记忆障碍模型,采用隐藏平台获得实验和空间搜索实验,观察姜黄素[font=Times New Roman]J(5、2、1 mg·kg-1[font=宋体])对空间学习记忆障碍模型小鼠的保护作用。结果显示姜黄素各个剂量组均能明显改善β-淀粉样蛋白致小鼠空间学习记忆障碍,能明显缩短寻找站台潜伏期和游泳路径。材料与方法1 材料与仪器1.1 [font=楷体_GB2312]动物 雄性昆明种小鼠,上海实验动物中心提供。1.2 药品和试剂[font='Times

  • 美用藻类生产出低成本抗疟疾疫苗 已在小鼠试验中获得成功

    科技日报 2012年05月19日 星期六 本报讯 据物理学家组织网5月17日报道,美国加州大学圣迭戈分校的科学家宣称,他们用工程藻类生产出一种抗疟疾疫苗,并在小鼠试验中获得成功。这种疫苗易于生产,成本低廉,有望成为对抗疟疾的有力武器。相关论文5月17日发表在美国《公共科学图书馆—综合》杂志网站上。 疟疾是一种由疟原虫造成的、通过疟蚊传播的全球性急性寄生虫传染病。在世界范围内,每年受该病威胁的人数近5亿,致死人数在100万到200万之间。虽然目前已有部分疫苗能够起到防止感染的作用,但由于价格昂贵无法在易感地区大范围推广。 领导该项研究的加州大学圣迭戈分校生物学教授斯蒂芬·梅菲尔德说,制造抗疟疾疫苗面临的一大挑战就是必须找到能生产出具有复杂三维结构、类似于寄生虫生产出来的蛋白质,只有这样才能使人体产生抗体,扰乱疟疾的传播。目前,大多数疫苗的制造都采用由工程菌生产出的简单蛋白质,复杂蛋白质也可以生产,但需要使用哺乳动物细胞培养,过程复杂且较为昂贵;此外,人工生产过程中还会伴随发生一种被称为糖基化的过程,使这些蛋白质表面附上一层糖。引发疟疾的寄生虫所生产的就是一种复杂蛋白质,但这些寄生虫并不会让糖附着在这些蛋白质上。“如果你有一个被糖包裹着的蛋白质并将其作为疫苗注入某人体内,这些‘疫苗’对抗的将是糖而不是那些侵入机体的有害蛋白。”梅菲尔德说。 为解决这一问题,研究人员曾尝试通过无糖的细菌制造疫苗,而后再将其折叠成正确的三维形状,但效果并不理想。之后,他们将注意力转向了一种可以食用的绿藻,这种名为莱茵衣藻的藻类如同果蝇和大肠杆菌一样,在实验室中的使用极为广泛。此前就有研究表明,可以使用莱茵衣藻生产如单克隆抗体和生长激素这样的复杂蛋白。 这引起了在梅菲尔德实验室工作的博士后研究员詹姆斯·格雷戈里的注意,他设想,如果能够通过藻类生产复杂蛋白,将能完美解决上述问题。目前对抗疟疾的最大困难就是抗疟疾疫苗的生产成本较高,而藻类不但成本低廉,还几乎可以在地球上任何有水的地方进行生长,无论是池塘里还是浴缸中。 梅菲尔德小组的研究人员随即与该校热带病专家约瑟夫·文斯利用这一方法制造出抗疟疾疫苗,并在实验室中对小鼠进行了实验。结果发现,实验鼠体内产生了抗体,成功阻止了蚊虫对疟疾的传播。 格雷戈里说,虽然目前还很难说这种疫苗是完美的,但实验结果表明,这种由藻类生产的蛋白成功产生了抗体并阻止了疟疾传播。就目前而言还没有比这更经济有效的抗疟疾疫苗生产方法。 研究人员已经对该发现申请了专利,下一步他们将确定这种疫苗能否在人体中起效,以及能否通过直接食用的方式产生抗体。(王小龙)

  • 【金秋计划】中药附子对肾阳虚小鼠的急性毒性作用因代谢差异而加重

    [size=15px][color=#595959]正确使用有毒药物是中医的特点之一。最新公布的《古代经典名方中药复方制剂简化注册审批[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]管理[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]规定》取消了对有毒中药的使用限制,表明有毒中药在临床实践中的使用是不可替代的。目前对这些药物的毒性评价通常遵循现代药物毒性评价体系,然而,[b]中药毒性反应[/b]的发生不仅与药物本身的性质有关,而且与人体的状态有关。中医的使用遵循辨证论治的原则,因此有必要将不同的“证”或“病”状态与中药的毒性结合起来,形成可靠的毒性评价体系。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]附子[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]是乌头的子根,在临床应用中,附子对胸闷心痛、四肢冰冷、脉弱等疾病有奇效。因此,它被认为是治疗与[b]阳虚[/b]和寒凝疼痛相关的各种证候的关键草药。但在临床实践中,附子的用量经常超过药典规定的用量,其毒副作用极大地限制了其临床应用。该研究探讨附子对[b]肾阳虚证候模型[/b]的毒性作用,并试图揭示其潜在机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]首先,通过肌肉注射氢化可的松25 mg/kg / d,连续10天建立肾阳虚证小鼠模型。然后探讨附子对正常小鼠和肾阳虚模型小鼠的[b]急性毒性[/b]。最后,通过血浆代谢物浓度和肝脏[b]CYP3A4[/b]酶活性分析,揭示附子在不同体质个体中产生不同药理学和毒理学效应的可能机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]附子(138 g/kg)对肾阳虚小鼠有严重的毒性作用,80%的小鼠死亡,而对[b]正常小鼠无致死毒性[/b]。说明附子对肾阳虚小鼠的毒性大于正常小鼠。肾阳虚小鼠肝脏CYP3A4酶活性较对照组降低20%,导致附子中毒性二酯二萜生物碱代谢减慢。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][font=&][/font][font=&][/font][/color][/size][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]综上所述,该研究表明,[b]不同证候个体代谢酶活性的变化导致了中药的不同毒性作用[/b],强调了在中医临床应用中[b]考虑个体体质证候的重要性[/b],以及对中药特定证候动物模型进行[b]安全性评价和剂量预测的重要性[/b]。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size]

  • 【转帖】盐酸林可霉素造成小鼠肠道菌群失调规律的研究

    目的:通过观察盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群,肠道组织病理学改变,血中淋巴细胞数的影响规律,以期为科学研究正确使用盐酸林可霉素造成菌群失调动物模型提供参考资料。方法:盐酸林可霉素连续灌胃3d停止给药,于停药后第1天,第4天,第7天,和第10天检测肠球菌数,双歧杆菌数,血中淋巴细胞数和肠道病理改变,评价盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群的影响规律。结果:灌胃3d停止用药后第1天和第4天双歧杆菌减少,肠球菌增加,与正常组比较差异有统计学意义(P0.05),肠道黏膜皱褶变浅,上皮内杯状细胞减少。停药后第1天出现血中淋巴细胞数减少。结论:盐酸林可霉素短期大量给药,可造成小鼠菌群失调,肠道组织损伤,免疫功能受损,该损伤持续约1周。盐酸林可霉素是科学研究中用于造成菌群失调动物模型的常用抗生素,其抑制细菌生长,尤其抑制益生菌的作用非常明显,但各家用该药的方法、剂量有较大差别,由于动物的耐受性较强,菌群失调能持续的时间不清,本实验尝试在肠道菌群变化、肠组织损伤等方面来研究林可霉素造成菌群失调的规律。以期为该药在科学研究中的使用提供数据依据,现报告如下。

  • 【经典精读】一篇小鼠造血干细胞研究方法综述的精读笔记

    原文是Purton, L.E., and Scadden, D.T. (2007). Limiting Factors in Murine Hematopoietic Stem Cell Assays. Cell Stem Cell 1, 263-270.发表在2007年cell stem cell 杂志上,最近由于要进行相应的课题研究,拿来精读了一番,做了一个笔记,发上来和大家分享,由于初涉小鼠造血干细胞这个领域,肯定有很多地方理解不全和错误,请大家指正。下面是我的精读笔记:小鼠造血干细胞研究方法综述一.关于HSC 免疫表型1. Thy1.1lo,Lin-Sca-1+Cells:其缺点是Thy1.1只表达于C57BL/Ka-Thy1.1小鼠,不表达于常用的C57BL/6小鼠;2. Lin- c-Kit+ Sca-1+ Cells(LSK):异质性,含有祖细胞,HSC含量不超过10%;结合CD34和Flt3可以分为long-term repopulating HSCs (LKS+ CD34- Flt3-) ,short-term repopulating HSCs (LKS+ CD34+ Flt3-) ,以及multipotent progenitors(LKS+ CD34+ Flt3+);3.荧光染料标记HSC: Rhodamine 123, Hoescht 33342, 以及Side Population,Rhodamine 123为线粒体染料,Hoescht 33342为DNA染料,HSC能够更多地将这两种染料泵出细胞外,所以染色较浅;4. SLAM Family Members:SLAM antigens (CD150+ CD244-CD48- cells),其优点是不像Thy1.1和Sca-1其表达受到品系和发育阶段等的影响,在更多的种系的小鼠中适用二.克隆形成实验:主要反映的是祖细胞的造血能力,不反映HSC,检测T系和B系需要另外特定的培养条件;三.Cobblestone Area-Forming Cells/Long-Term Culture-Initiating Cells,鹅卵石样区域形成细胞实验/长期培养-启动细胞实验:体外检测更早期造血干/祖细胞的方法,但由于feeder layers和培养条件不同,实验结果在不同实验室间稳定性较差,对于其是否真正能检测造血干细胞也比较有争议,不过在一些情况下,比如归巢(homing)或植入(engraftment)有缺陷导致体内造血重建实验无法进行时,这两个方法是较好的替代方法;四.Colony-forming unit-spleen (CFU-S)脾集落单位形成实验:属于短期(1-3周)体内重建实验,检测的干祖细胞比体外CFC早,但比HSC晚;五.long-term repopulating assays,长期重建实验,包括:1. competitive repopulation assay:竞争重建实验:属于定性或者半定量研究HSC重建能力的方法,不能区别是HSC的数量还是质量造成的结果差异,得到的结果为RU即重建单位;2. limiting dilution assay:统计的指标是造血重建失败的小鼠数目,采用泊松分布来计算HSC的频率,得到的结果为CRU即竞争重建单位;Stem Cell公司的免费软件L-Calc,可用于分析实验结果。limiting dilution assay有两种方法:1CRU assay,采用最小数的HSC作为竞争细胞,可以在单细胞水平检测HSC;2也称为CRU assay,采用标准的,足量的HSC作为竞争细胞,不能在单细胞水平检测HSC;3serial transplant assay,多代移植,最为严格的检测造血干细胞的方法;六:Limiting Dilution Assays需要考虑的几个重要因素:1.竞争细胞:1compromised bone marrow,即连续两代重建成功的骨髓细胞,比较耗时2W41/W41受体小鼠:c-kit基因发生突变,具有更加敏感的宿主微环境,能够检测更少的植入的HSC,不需要另外的HSC作为支持细胞(竞争细胞);3全骨髓细胞(whole bone marrow cells):经验表明2 X105 competing bone marrow cells比较适合2.受测细胞(Test Cells, Unknown HSC Potential):有人用LKS+ CD34- cells,但作者认为全骨髓细胞最好,原因是这种方法是在功能上评价HSC,避免了HSC在基因修饰的小鼠中免疫表型发生变化导致的结果的不可靠,在作者实验室通常采用的受测全骨髓细胞数为8 X 103到2 X106;3.重建失败的标准:现在一般认为受测细胞的重建比例小于1%为重建失败;在重建比例中,红细胞是不计算在内的,因为其不表达CD45,但一般认为只要其他系重建成功,红系应该也会重建成功;4.分析重建的时间点:看长期造血重建,最少要16周,最佳是六个月;5.其他考虑因素:归巢,HSC各系分化阻滞或减弱,祖细胞增殖动力学特性的改变,造血微环境对HSC的影响等等七.区分供体,受体的遗传学标志:最常用的是CD45.1,CD45.2系统,还有可以通过性别(Y染色体)来区分。

  • 48.10 5'-DFUR在小鼠结直肠癌模型内转化分析

    48.10 5'-DFUR在小鼠结直肠癌模型内转化分析

    【作者】 但操;【导师】 张继民; 【作者单位】 广州医学院, 外科学,【摘要】 研究背景:5’-脱氧氟尿苷(5’-deoxy-5-fluorouridine, 5’-DFUR)是临床治疗消化道恶性肿瘤的口服抗癌药物,为5-氟尿嘧啶(5-FU)的前体药物。其本身没有细胞毒作用,需要在细胞内经过胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)转化为5-FU才能发挥抗肿瘤作用。已有文献报道乳腺癌和胃癌细胞可以表达TP活性,而大肠癌细胞是否表达TP则持论不同。我们在前期研究中发现大肠癌组织中TP活性主要由间质细胞中的巨噬细胞表达,而测定6株结肠癌细胞系也几乎没有TP蛋白表达。在癌细胞不表达TP的情况下5’-DFUR在结直肠癌组织中如何转化尚属疑问。我们前期体内实验对结肠癌小鼠动物模型应用化疗药物5’-DFUR进行治疗,结果发现与5-FU相比平均荷瘤生存期更长,平均瘤重轻,同期平均体重下降缓慢,提示5’-DFUR在小鼠结肠癌组织比正常组织中转化率高,抗癌选择性高。其原因可能是TP酶在癌组织中分布较正常组织多。前期体外实验把5’-DFUR加入培养基中同人血单核细胞一起培养24h,5’-DFUR对4种癌细胞的IC50明显下降,提示血液中单核细胞也可表达TP。由于尚未发现实验比较在癌组织和血液中TP含量,故两者TP的含量高低尚需要实验进一步证实。本实验应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定应用5’-DFUR后癌组织和血液中5-FU的转化情况,间接推断TP酶在癌组织和血液中分布差异,为进一步研究5’-DFUR在结直肠癌组织中转化及TP酶调控机制提供资料。实验材料:1、实验动物SPF级近交系BALB/c小鼠28只,6-8周龄,雄性,体重20.00±2.34g,购自广东省医学实验动物中心。2、肿瘤细胞株BALB/c小鼠结肠腺癌细胞株(CT26),购自美国菌种保藏中心(American Type Culture Collection, ATCC)。3、实验药物5’-DFUR由Roche公司日本研究中心提供; 5-FU注射液,江苏南通精华制药有限公司生产(批号: 080607);5-FU标准品购自Sigma有限公司提供(批号: 097K1352)。4、实验仪器岛津高效液相系统;色谱柱:Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)实验方法:1、小鼠结肠癌CT-26细胞株的培养10%胎牛血清1640培养基,含青霉素100×103 U/L和链霉素100 mg/L,37℃,5%CO2水浴恒温培养箱中培养,隔日换液,2-3天酶消化法传代。2、细胞悬液制备制备模型当天取指数生长期的细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,机械吹打成细胞悬液,2 000r/min离心5 min,弃上清液,加适量生理盐水调整细胞浓度至1×107个/ml,以台盼蓝测定细胞活力在95%以上。3、结肠癌模型制作方法将体外培养的CT26细胞悬液0.2ml注入小鼠(BALB/c)背部皮下,约2周后基本可以形成肉眼可见的肿瘤隆起。4、动物分组及给药荷瘤小鼠28只随机分为4组:①5’-DFUR给药15分钟组;②5’-DFUR给药30分钟组;③5-FU给药15分钟组;④5-FU给药30分钟组。根据动物体重,5-FU用量0.020mg/g ,配制浓度为1.0 mg/ml。5’-DFUR用量0.038mg/g;配置浓度为2.0mg/ml。各组分别腹腔注射给药15分钟、30分钟后处死小鼠立即取血和瘤组织。5、标本处理小鼠眼眶动静脉取血0.5 ml后放置入37℃水浴30分钟,3200rpm离心5min,取上清液4℃保存。肿瘤组织用滤纸吸干血迹后称重,然后按0.5g组织与4 ml生理盐水(1:8)加入匀浆器匀浆5min, 3200rpm离心5min,取上清液4℃保存。6、制作血液和肿瘤组织的5-FU药物标准曲线取未给药小鼠血清7份,每份90μL,分别加入由5-FU对照品和蒸馏水配制的系列标准液适量并混匀配成100μL,使血清中药物浓度分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100.0,200.0,400.0μg·mL-1,制作血清标准曲线;取未给药小鼠肿瘤组织匀浆液7份,每份90μL,分别加入由5-FU对照品和蒸馏水配制的系列标准液适量并混匀配成100μL,使肿瘤匀浆液中药物浓度分别为1.0,2.0,4.0,8.0,16.0,32.0,64.0μg·mL-1,制作肿瘤标准曲线。7、测量各标本浓度取血清100μL,置于5mL玻璃试管中,加入乙酸乙酯2mL,漩涡振荡2min后,3200rpm离心5min,取上层析液置于另一玻璃试管中。再次加入乙酸乙酯2mL进行第二次提取,漩涡振荡2min后,3200rpm离心5min,取上层析液,然后合并两次提取的上层析液,离心浓缩挥干。加入100μL流动相定容,混匀取出,置于EP管中,10000rpm离心7min,取上层析液20μL进样。记录药物峰面积,代入相应标准曲线计算药物浓度;取肿瘤匀浆液100μL,以同样方法处理标本测量浓度。8、观测指标给药15分钟、30分钟处死组5’-DFUR组和5-FU组小鼠血液与癌组织5-FU浓度。9、统计学方法应用统计软件SPSS13.0数据包对5’-DFUR组和5-FU组小鼠血液与癌组织5-FU浓度采用配对样本t检验进行比较。当P0.05时,认为差异有统计学意义。结果:1、注射药物5’-DFUR 15、30分钟后,癌组织转化的5-FU浓度分别54.64μg/g±12.80μg/g和45.58μg/g±18.82μg/g,血清中中5-FU浓度分别为8.83μg/ml±1.68μg/ml和9.82μg/ml±2.93μg/ml,15分钟、30分钟组癌组织5-FU浓度分别为血清的6.36、4.47倍(P0.05);2、注射药物5-FU 15、30分钟后,癌组织转化的5-FU浓度分别86.13μg/g±15.42μg/g和94.68μg/g±39.89μg/g,血清中5-FU浓度分别为133.35μg/ml±20.69μg/ml和112.70μg/ml±26.27μg/ml,15分钟、30分钟组血清5-FU浓度分别为癌组织的1.59、1.62倍(P0.05)。结论:小鼠结肠癌模型体内,癌组织内5’-DFUR转化率高于血液,考虑分布在癌组织中的PyNPase酶比血液高。 【谱图】http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142214_383901_1609970_3.jpg

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