小鼠胚胎初始淋巴管

[b]小鼠胚胎初始淋巴管形成的多步机制[/b]Rene′ Ha¨ gerling1,7, Cathrin Pollmann1,7,Martin Andreas1, Christian Schmidt1,Harri Nurmi2, Ralf H Adams3, Kari Alitalo2,Volker Andresen4, Stefan Schulte-Merker5,6and Friedemann Kiefer1,* [i][b]The EMBO Journal[/b][/i] (2013), 1-16在哺乳动物发育过程中，主静脉血管中的一个内部细胞亚群开始表达淋巴管特异基因，进而发育出初级的淋巴结构，被共同命名为淋巴囊。淋巴内皮细胞的出芽，扩展，膨胀被认为是淋巴内皮细胞从主静脉中产生的基础，但是淋巴管形成的确切机制仍然不为人所了解。使用选择性光片照明显微镜Ultramicroscope来观察进行整体免疫染色的小鼠胚胎，我们观察到细胞分辨率的完整的发育中的血管系统。本文中，我们报道了可以被检测到的最早的淋巴内皮细胞松散的连接在主静脉和浅表的脉管丛。下一步的淋巴内皮细胞聚集导致了两个清晰的，未被预先确认的淋巴结构，背部外周纵向淋巴管和腹侧初级胸导管，它们在后期阶段形成了一个与主静脉的直接连接。我们发现血管内皮生长因子C和基质组分CCBE1对于淋巴内皮细胞出芽和迁移是必不可少的。总之，我们提供了一个明显更加细节化的视角和早期淋巴管发育的新颖模型。[img=,591,756]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal1.jpg[/img]图1. 初始淋巴祖细胞从主静脉中产生。（A-D）受精后9.5/9.75(A,C)和10.5（B，D）天小鼠胚胎血管系统的整体染色。PECAM-1优先染动脉、静脉血管中的内源粘蛋白。Prox1识别的淋巴内皮细胞。（A）中框出了胸颈静脉区，淋巴内皮细胞。DA，背主动脉；ISA，节间动脉；PAAs，咽弓动脉。标尺100um。E 图示箭头穿越一对主静脉之一。静脉内皮细胞，蓝色；发育中的心脏，暗绿；浅表静脉丛的位置被标示出来。CCV，一般主静脉；SV，静脉窦；H，心脏；ISV，节间血管。（F）成对CCV和导流入心脏的SV的三维重构。移开一半对称主静脉后的ISVs和生肌刀（M）。蓝色箭头指示静脉血的流动。（G）胸颈静脉区的横切面。DA，ISA和动脉丛标记红色；CV，ISV和sVP标记蓝色。NT，神经管；DRG,背根神经节；iLECs，初始淋巴内皮细胞。（H-K）整体免疫染色胚胎的图片左侧标注的蛋白分布的光学切片的3维重建。E，受精后几天的发育阶段（H，I，K横切面；J矢状切面）。白色箭头，新出现的iLECs；点线，CV的背根。标尺100um。（L-O）在E10.0和E10.25期间出现的最早iLECs的图解。Prox1+细胞，绿色，黄色为细胞核。以绿色表面表明在CCV移开分支中的Prox1表达区。[img=,591,330]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal2.jpg[/img]图2. 淋巴内皮细胞从CV的出芽伴随着细胞和核的形状改变，以及一个蛋白标记开关的表达。（A,B）整体免疫染色胚胎的CCV中左侧标注蛋白的矢状视图。受精后的发育阶段（E）；iLECs初始淋巴内皮细胞；头盖处，左；尾部，右。标尺100um。CV的上出口，从鳞状到纺锤状的LEC形状改变（箭头指示CV根中的Prox1+ ECs）。白色箭头，iLECs间极薄的连接；红色箭头，照亮的静脉血管中频繁的发现红细胞（但iLECs中从没有）。（B）也可以看到相应的图解1O。（C）在E10.5阶段，出现的iLECs中的VEGFR-3及其联合受体Nrp2水平被上调，而CV和iLECs中的Lyve-1水平保持不变。***P0.001，NS，不显著。（D,E）随着iLECs的出现核的形状从圆形转变为椭圆形。通过核表面重构描述了CCV内部和外部的Prox1+细胞核以及对球率和椭球率做散点图（E）。标尺100um。（F-H）矢状（F）和横切面（G，H）视图中整体免疫染色小鼠胚胎的CCV内部和外部的Prox1+细胞核表面重构。（F，G）通过热成像赋以伪色标记的Prox1表达强度图，例如，最高强度的表达标记为红色，低强度表达标记为蓝色。（H）通过图像的叠加进行细胞的解剖学定位软件包：Imaris Vantage，标尺100um。[img=,591,785]http://qd-china.com//bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal3.jpg[/img]图3. iLECs在节间血管主要分支的水平上浓缩来形成照亮的外周纵向淋巴管（PLLV）。（A-D）每张图所展示蛋白的整体免疫染色胚胎光学切片的矢状图重构。E，受精后的发育天数；头盖的，左；尾端的，右。（A）在iLECs出现的早期阶段，iLECs以扇形模式分布，从CCV向头部和尾部扩展。虚线，iLECs检测的边界。（A-D）iLECs在节间血管第一侧枝的水平上立即浓缩形成PLLV。长的阴影线指示了CCV和SV的位置；短的阴影线，iLECs浓缩和PLLV形成的区域。（E-H）图解iLECs的位置，在E10.5和E10.7阶段出现在CV的背部。CCV之外的Prox1+iLECs以淡绿色标记，CV内的Prox1+细胞和心肌以深绿色标记。在CCV移开的分支中的Prox1表达域（P1ED）以淡绿色表面显示。浅表静脉丛作为iLECs的一个可能的备选来源，其位置标注为蓝色（G，H）。sVP内的Prox1+内皮细胞被标注为红色。sVP，浅表静脉丛；标尺100um。 [img=,591,846]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal4.jpg[/img]图4. CV和PLLV之间的LECs聚集并形成不断增长的更大的被照亮结构并最终形成原始的胸导管。来自整体免疫染色的小鼠胚胎光学切片的图中标注蛋白的（A-C）矢状图和（D）截面图。（A)箭头指示了位于CV和PLLV之间的LECs快速和不断进行的聚集，这导致了更大照明结构pTD的形成（B-D）。（C，D）浅表淋巴管sLECs开始从PLLV背侧和pTD旁边伸展。PLLV和pTD在pTD头盖端连接到一起。（F-H）图示了导致pTD成形的细胞聚集和浓缩事件。（I）在E11.5阶段，sLECs中的VEGFR-3和它的联合受体Nrp2水平上调，而Lyve-1水平与CV和iLECs相比强烈下调。***P0.001。发育阶段（E）；头盖，左，尾端，右。ACV，前主静脉；CCV，一般主静脉；PCV，后主静脉；ISV，节间静脉；PLLV，外周纵向淋巴管；pTD，原始胸导管；sLECs，浅表淋巴结。标尺100um。[img=,591,734]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal5.jpg[/img]图5. 通过最高水平表达的Prox1表征的pTD和CV间新形成的成对的接触点。（A-C）整体免疫染色胚胎的矢状图。新形成中的pTD快速巩固进一个巨大的照明结构，头颅部以U形连接到PLLV（左侧A，B）。CV和pTD间的两个连接表达最高水平的Prox1（箭头）。（B-E）一个总是位于pTD和CV连接间的作为锁骨下动脉的短暂存在的侧枝被星号标记出来。（C）红色箭头：pTD内堆积的红细胞。箭头标注pTD连接端对面的Prox1+细胞。（D，E）通过pTD和CV连接区域的单个平面（光学切片）。（F-H）图示pTD和CV间接触点的发育，接触点处高表达的Prox1+细胞标记为暗绿色和红色的细胞核。标尺100um。[img=,591,963]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal6.jpg[/img]图6. 不同的淋巴内皮细胞群表达不同的标记蛋白组。（A-G）所示发育阶段的免疫染色胚胎的横向冷冻切片。可见的抗原被以每幅图上所标记的相应颜色标记。典型例证标记表达的面板在（I）中汇总。（A）在E10.0阶段的LECs细胞中没有粘蛋白的表达，在E11.0阶段首先被检测到并在E12.0的LECs中变得丰富。注意CV中的Prox1+细胞在所有阶段都是阴性。在E11.5阶段，Nrp2在CV和pTD内中等强度的表达，而CV外的iLECs强烈的表现为阳性。（C）内皮粘蛋白在iLECs中只有短暂的留存。（D）在CV和pTD的Prox1+ ECs中Lyve-1强烈表达，而在展示的sLECs中仅有残留的表达（箭头）。（E）在所有血管结构中，整合蛋白α6有中等程度的表达。（F）在E11.5阶段，神经生长因子Netrin-4在BECs中强烈表达，在CV中很弱的表达，在pTD内中等程度的表达，但在iLECs中（箭头）没有被检测到。（G，H）Unc5B在iLECs（G，箭头）和sLECs（H，箭头）中强烈表达，而在pTD中表达微弱。 (H)来自整体免疫染色的小鼠胚胎的Prox1 (绿) 和Unc5B (蓝)光学切片的矢状重构. (I)在妊娠中期，不同LEC群中标注蛋白的表达。数据来自免疫染色的冷冻切片或整体免疫染色。表示的结构和细胞群： CV, 主静脉 iLECs, 初始LECs (第一轮从CV中出现的纺锤状LE,松散连接的细胞) sLECS, 浅表LECs (从PLLV (背侧)中伸出的LECs) pTD, 初始胸导管. CV*, 对CV背侧Prox1+细胞的表达限制。标尺100um。 [img=,591,781]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal7.jpg[/img]图7. CCBE1缺陷导致的Prox1+细胞从CV分离的失败，并导致初始淋巴结构的快速损失。 (A, B, F, G) 对标注蛋白进行整体免疫染色的野生型(A) 和Ccbe1_/_ (B, F, G)胚胎的3D重构。(A, B)E10.5阶段的矢状图. (B) 在CCBE1-缺陷胚胎中，在CV和初始PLLV中检测到丰富的Prox1+细胞，紧邻浅表静脉丛。与野生型胚胎(A)相比,CCV和PLLV间没有纺锤状的iLECs。 (B, F) Prox1+细胞描绘出CCV和SV的边界, 当非典型的，大的，照明的分支从CV（箭头）中出现。(G) 含大量VEGFR-3+的异形分支从CV（箭头）和ISVs（箭头）中伸展。(C-E)图示野生型(C)和CCBE1-缺陷型(D, E)胚胎中的Prox1+ cells。含大量VEGFR-3+的静脉内皮标注为深蓝色。sVP, 浅表静脉丛。标尺100um。[img=,295,591]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal8.jpg[/img]Figure 8VEGF-C（血管内皮因子C）缺陷的小鼠胚胎中的Prox1+内皮细胞因为不能离开它们起源处的血管从而标记了LECs的静脉来源。E10.75阶段野生型(A, B)和Vegfc_/_型(C-F)胚胎的矢状图3D重构，对标注蛋白做了整体免疫染色。在VEGF-C缺陷胚胎中，Prox1+内皮细胞不能离开静脉血管导致没有出现发育中的淋巴结构。(E, F) 除了CV（箭）中的Prox1+ 细胞, 在腹侧sVP（箭头）处更大的静脉血管中捕获了第二群Prox1t淋巴初始组织 。(G, H) 图示了野生型 (G) 和VEGF-C缺陷型(H)胚胎中的Prox1+细胞。NE, 神经元的Prox1+表达条纹。sVP, 浅表静脉丛。标尺100 um。[img]http://qd-china.com/bio%20application/Lavision%20Ultramicroscope/The%20EMBO%20Journal/The%20EMBO%20Journal9.jpg[/img]Figure 9. 在iLECs外出和淋巴管形成过程中，CCBE1和VEGF-C协同的相互作用。对E10.5阶段所标注蛋白整体免疫染色的野生型(A-C), Vegfct/_ (D-F), Ccbe1t/_ (G-I) 和 Vegfct/_/Ccbe1t/_ (J-L) 胚胎矢状图的3维重构。CCV和ISVs的根部用虚线标注，Prox1+细胞用箭头标注。与野生型同窝小崽相比，Vegfct/_胚胎(A-C)表现出iLECs从CCV中迁出的下降(D, E)。与之相反，Ccbe1t/_胚胎中，受损的ISVs形成被检测到。而且，不典型的，照亮的分支出现在Prox1+和高水平VEGFR-3表达的主静脉根部(G-I). (J-L) 在复合的杂合胚胎中，这种表型非常夸张地表明了VEGF-C 和CCBE1在淋巴管形成过程中的协同作用。标尺100um。

【序号】：3【作者】： 刘泓源1葛同鑫1林晓曦1,2【题名】：静脉/淋巴管畸形靶向治疗的研究进展【期刊】：组织工程与重建外科杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2020,16(03)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2020&filename=ZZCW202003009&v=As9Hh4gWbAv1xgPNeKetPqad3Cv6Dtm1Gp7yyMQVC6VpS5NExL%25mmd2BHO8ThoCDsSXyC[/url]【序号】：4【作者】： 张朋1赵成鹏1王晓晖2【题名】：两种方案治疗小儿淋巴管畸形效果比较【期刊】：医药导报. 【年、卷、期、起止页码】：2019,38(03)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2019&filename=YYDB201903017&v=1XLtD%25mmd2FnmpBCzUTMbNNZyW4HYhj2ii4UufnPEhv4eMyyjE3UZ5uZNMpB3SLSt0va4[/url]

【序号】：1【作者】： 刘金平黄海金陈枫【题名】：小儿淋巴管畸形诊治进展【期刊】：赣南医学院学报. 【年、卷、期、起止页码】：2020,40(02)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2020&filename=GNYX202002021&v=tpGKfcfkKVY0CDBHvuCoGwx3qYHAZomfu60NgmowlFbxnzGRBcvsXQ%25mmd2BeDawjfSe7[/url]【序号】：2【作者】： 中华医学会整形外科分会血管瘤和脉管畸形学组【题名】：血管瘤和脉管畸形的诊断及治疗指南（2019版）【期刊】：组织工程与重建外科杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2019,15(05)【全文链接】：[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2019&filename=ZZCW201905002&v=Jn5IqnOggJS%25mmd2F5Cqi74p%25mmd2FZnvQISyMHnHlfk4uE395jwrRxtaRk33v6daQhIBmpwaQ[/url]

[size=15px][color=#595959]近年来，[b]淋巴脉管系统[/b]和淋巴运输在胃肠道疾病中的作用受到越来越多的研究关注，淋巴[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]畸形[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]和淋巴结重塑已被认为是许多胃肠道疾病的标志。此外，胃肠道淋巴引流受损和[b]淋巴淤滞[/b]会阻碍大分子、死细胞和病原体离开肠道的清除，从而加剧感染并延迟[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]反应。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]近年来，肠道和肠系膜淋巴管在肠道疾病，特别是炎症性肠病(IBD)中的作用已被广泛研究。然而，对[b]胃淋巴管(GLVs)[/b]的研究一直落后于胃肠学本身的发展。虽然最早对[b]胃淋巴泵(GLP)[/b]的可视化研究可以追溯到Nagata和Guth在1984年的报告，但在随后的40年里，关于GLP在胃疾病中的作用以及针对GLP的药物的报道很少。[/color][/size] [b][size=15px][color=#595959]半夏泻心汤(BXD)[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]出自《伤寒论》，在现代医学实践中被广泛应用于治疗各种肠胃疾病，对[b]应激性胃溃疡(SIGU)[/b]等多种胃肠道疾病有明确的治疗效果，但对胃淋巴泵(GLP)的影响尚不清楚。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]阐明GLP在SIGU和BXD治疗中的作用，探讨GLP调控的分子机制。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]对SIGU大鼠模型进行体内GLP显像，评价淋巴动力学参数。采集胃窦组织及血清进行宏观、组织病理学及溃疡参数分析。收集胃淋巴管(GLV)组织进行RNA-Seq检测。从RNA-Seq结果中筛选差异表达基因(DEGs)并用于转录组学分析。采用qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和WB检测关键DEGs及其衍生蛋白。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]SIGU大鼠GLP明显受到抑制。[b]BXD能恢复GLP，改善胃淋巴淤积，减轻溃疡损害[/b]。GLV转录组分析显示，上调的DEGs集中在[b]平滑肌收缩信号通路[/b]，下调的DEGs集中在能量代谢通路，尤其是脂肪酸降解通路，说明BXD可以促进淋巴平滑肌收缩，调节能量代谢，减少脂肪酸降解。这些机制最有可能的目标是驱动GLP的[b]淋巴平滑肌细胞(LSMCs)[/b]。qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和WB对关键基因和蛋白水平的评估进一步验证了这一推测。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size] [color=#3573b9]结论[/color][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=mp-quote, -apple-system-font, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#595959][/color][/size][/font] [b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][font=&][/font][font=&][/font][/color][/size][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][/b][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][b][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959]BXD通过激[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959][b]活平滑肌收缩信号通路，恢复能量供应，调节能量代谢程序，减少脂肪酸降解，有效回收GLP，减轻胃内炎症细胞因子和代谢废物的积累[/b]，是其治疗SIGU的重要作用机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size][font=&][size=16px][color=#232323][/color][/size][/font][size=15px][color=#595959][/color][/size][size=15px][color=#595959][/color][/size]

第四种淋巴细胞—NKT细胞 通常认为，构成机体免疫系统的淋巴细胞有三种细胞系组成，一是由胸腺产生的T细胞，二是由骨髓分化而来的产生抗体的B细胞，三是自然杀伤（NK）细胞。而新近发现存在第四种淋巴细胞—NKT细胞。1. NKT细胞的发现1986年，克隆成功了NKT细胞的特征性抗原受体基因。将其命名为Va14基因，与其他T细胞抗原受体的（TCR）基因不同，有其独特的结构特征。1987年美国国立卫生研究所的Fawlkes与瑞士的Budd分别领导的两个研究小组报告指出，胸腺细胞中的T细胞通常不能表达受体，仅有部分未成熟T细胞选择表达V-β8.2受体。随后的研究证明这种细胞不是T细胞，考虑是NK细胞的受体，这种细胞集团的数量极少，生理意义不明。1994年，这两个研究小组的研究人员发现，他们报道的细胞为同一细胞，从此NKT细胞的研究引起人们的广泛关注。T细胞识别的抗原是蛋白质，而NKT细胞是别的抗原是α-Gal-Cer即所谓的糖脂质，这是该免疫系统与通常的免疫系统重要的不同点。NKT细胞的分化与T细胞不同的是在胸腺形成前的胎生初期6.5日在胸腺外组织分化。NKT细胞与T细胞比较，机能处于不发达状态。T细胞分化为功能不同的Th1和Th2细胞群，Th1细胞产生INFγ及IL-2，引起迟发行过敏症等细胞性炎症。Th2细胞能产生IL-4和IL-10，参与变态反应及抗体产生等体液免疫反应。而NKT细胞不但能分泌Th1和Th2细胞因子，同时还具有与CD8+伤害性T细胞（cytotox-ic Tlymphocyte,CTL）相同的杀伤靶细胞作用。毫无疑问，NKT细胞在免疫调节系统中占有重要位置。NKT细胞与疾病可能有诸多关系，可能与自身免疫性疾病的发病机制、变态反应的调节、抗肿瘤作用、及抑制寄生虫感染等有关。2. NKT细胞的多样性分化NKT细胞具有T细胞和NK细胞细胞两重性质，既能表达Va14/Ja281特定的T细胞受体又能由CD1介导识别脂质抗原。NKT细胞的分化是否依赖胸腺尚有争议。根据其表达TCR等多种表面抗原的不同，提示NKT细胞存在两个以上细胞群。从CD4/8的表达看，可将其分为（1）CD4-NKT细胞，（2）CD8-NKT细胞，（3）CD4和CD8均不能表达的DN-NKT细胞。第一类的全部和第二类的半数是Va14/Ja281-T细胞。3.人类NKT细胞人末梢血中的DN-NKT细胞V区域，可高度表达Va24/JaQ（这与鼠的Va14/Ja281高度相似）及Vβ11(与鼠Vβ18高度相似)。这种TCR的组合表达可见于DN-NKT细胞和CD4+细胞。而未见于CD8+细胞。小鼠的CD1相当于人的CD1d的Va24/JaQ。此外，人末梢血中1～2%的T细胞能表达抑制性受体，即抑制型NK细胞受体（KIR），而Va24/JaQ+细胞则不能表达。它的NK相关分子是CD16、CD56或CD57，Va24/JaQ+细胞异不能表达这些分子。在小鼠中还可以看到Va24/Ja281+T细胞以外的NKT细胞。人类Va24/JaQ+细胞与KIR+T细胞能形成不同的亚群。且具有不同的功能。4. NKT细胞分化的胸腺依赖性这是目前存在争议的问题，可以肯定地说NKT细胞分化过程中胸腺是有作用的。NKT细胞多见于胸腺及脾脏以外的肝脏和骨髓种，胸腺缺损的小鼠与正常小鼠比较，NKT的分化并不少。将出生三日小鼠的胸腺摘除，虽然NKT细胞的分化显著受到抑制，但此时CD8+NKT细胞的分化未受到影响。由此认为CD8+NKT细胞在胸腺外分化的可能。5. NKT细胞产生细胞因子的意义 NKT细胞是指能够表达NKT细胞标志NKT1.1的T细胞,其机能具有T细胞和NKT细胞双重特征。NKT细胞在TCR和NKR介导下，产生大量的IL-4及INFγ,对肿瘤细胞有细胞伤害作用。 NKT细胞能表达T细胞的TCR与NK细胞的NKR-P1两种受体，特别是NKT细胞多数表达Va14TCR，识别CD1抗原，而NKR-P1识别各种糖链。 NKT细胞，特别是CD4-NKT细胞，对TCR刺激可产生大量IL-4及IFNγ,同时具有ThO型细胞因子产生能力。NKT细胞不但产生IL-4的主要细胞，而且强力产生IFNγ。IFNγ参与自身Th1诱导，具有极强的Th1诱导能力，从而是IL-2产生亢进。它同时还具有Th2细胞分化抑制功能。IL-12能诱导NKT细胞产生IFNγ。IL-12对TCR的刺激是IFNγ的产生显著亢进。综上所述，NKT细胞不但是IL-4和IFNγ的强力产生细胞，同时参与Th1/Th2分化的抑制，而这些作用都不是单纯的。 虽然NKT细胞能大量产生细胞因子，但仅在机体内保持这种功能。当初一度认为，NKT细胞只是IL-4的产生细胞，而不是Th2分化的必需细胞。并不认为在CD1缺损的小鼠中NKT细胞的分化和对TCR刺激使IL-4产生减少，且对Th2分化必需的IL-4及IgE的产生没有多大影响。但给小鼠投于α-GalCer可使NKT细胞活化，IL-4的产生诱导Th2的应答。有报告指出，同样投于α-GalCer，可使NKT细胞产生IFNγ而致IgE产生低下。由此可见，NKT细胞能产生IL-4与IFNγ两种功能相反的细胞因子。这种微妙的协调作用可能是NKT机能表达的重要特征。NKT细胞的活化通常伴有T细胞、B细胞及NK细胞的活化，这对NKT细胞活化后的免疫应答有较大影响。

用注射器抽取血淋巴每只蟹0.5mL移入装有0.5mLACD抗凝剂的ePpendorf管中。为什么抽的血和抗凝剂要一样多,谢谢

自去年10月开始，分子生物学家Katsuhiko Hayashi就陆陆续续收到了许多夫妻的邮件，这些夫妻大多人到中年，仍然在为了一件事情焦急：要一个孩子。其中有一位英国的更年期妇女，希望到他位于日本京都大学的实验室，在他的帮助下怀上孩子，她写道：“这是我唯一的愿望。”这些请求开始于Hayashi一篇文章的发表——他原以为只有发育生物学家才会对他的实验结果感兴趣。在体外条件下，利用小鼠的皮肤细胞创造可以发育成精子和卵子的原始生殖细胞（PGCs）。为了证明这些实验室培养的原始生殖细胞与自然发育而成的原始生殖细胞类似，他利用它们生成了卵子，进而创造小鼠生命。他表示，这个创造出来的小鼠生命仅仅是他研究的一个“副产品”，他的研究将意味着更多——利用不孕妇女的皮肤细胞为她们提供可受精的卵细胞。与此同时他还提出，男性的皮肤细胞也可以用来创造卵子，同样，女性的皮肤细胞也可以生成精子。（事实上，研究结果发表后，许多同性恋发邮件给Hayashi ，索要更多的信息。）尽管这是一项创新研究，但是公众的广泛关注还是令Hayashi和他的教授Mitinori Saitou感到非常惊讶。他们花了十多年不断挖掘哺乳动物配子产生的微妙细节，然后在体外条件下重新创建该过程——一切都是为了科研，而非医疗。现在他们的方法使研究人员能够创建无限的原始生殖细胞，这种在以前很难获得的珍贵细胞的正常供应有助于推动哺乳动物生殖研究。但是，当他们将这个科学挑战自小鼠到猴子，再到人类推进时，这一过程被公众定义为治疗不孕不育的过程，于是相关的道德争议随之出现。“毫无疑问，他们在小鼠身上给这一领域带来了重大的改变，” 洛杉矶加州大学的生育专家Amander Clark说，“但是，在这项技术展示它的实用性之前，我们必须讨论一下使用这种方式创造配子的伦理问题。”回到最初在小鼠体内，胚胎发育一周后，便出现约40个左右的原始生殖细胞。这个小小的细胞团进而在雌性小鼠体内形成成千上万的卵细胞，在雄性小鼠体内每天都能生成几百万个精细胞，并能够遗传小鼠的全套遗传信息。Saitou想要了解在这些细胞发育过程中受到了那些信号的控制。在过去的十年中，Saitou已经通过辛苦研究确定了几个基因——包括Stella, Blimp1 和Prdm14 ——这些基因的某种组合在某些时候对于PGCs的发育起到了至关重要的作用。利用这些基因作为标记，可以从其他细胞中筛选原始生殖细胞以观察这些细胞的变化。2009年，在日本神户的RIKEN发育生物学中心，他发现，当培养条件适当时，在精确的时间加入骨形态发生蛋白4（BMP4），可以胚胎干细胞转化为原始生殖细胞的。为了验证这一发现，他向胚胎干细胞提供高浓度的BMP4，结果显示，几乎所有的胚胎干细胞都变成了PGCs。他和科学家们都预计这一过程非常复杂。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201308/25/095620gaqefeejnqejxuu3.jpg人造小鼠生殖细胞产生小鼠胚胎的过程（点击图片查看大图）Saitou的方法严格遵循了自然过程，这与其他从事类似研究的人形成了鲜明的对比，以色列魏茨曼科学研究所的干细胞专家Jacob Hanna说。许多科学家尝试通过信号分子轰击干细胞在体外创造特定类型的细胞，然后筛选细胞混合物得到他们想要的细胞。但是他们忽略了这些细胞的自然形成过程和这些人造细胞与自然形成细胞的相似程度。Saitou找出了形成生殖细胞所需的条件，去除多余的信号干扰并将每个过程的时间精确控制，给他的同事们留下了深刻的印象。英国谢菲尔德大学的干细胞生物学家Harry Moore将这种生殖细胞发育的精确重现视为一场“胜利”。到了2009年， Saitou在小鼠生殖细胞出现之前从外胚层取了一些细胞，这成了研究的起点。但是想要真正掌握这个过程中，Saitou希望从细胞培养开始。当时正值Hayashi从英国剑桥大学回到日本，和Saitou一样，Hayashi在该领域先驱Azim Surani英国的实验室里完成了4年的研究。Surani盛赞这两位科学家说，他们的“气质、风格和解决问题的方法能够相互补充”。 Saitou “处理事情时很有系统性、完成目标一心一意”，而Hayashi“工作时更有直觉、视角更广阔、处理问题方法相对更加宽松”，他说。“他们确实形成了一个非常强大的团队。”Hayashi加入了Saitou京都大学的团队，他很快就发现，那里不同于剑桥。在京都大学，Hayashi用在理论讨论上的时间比曾经少得多，而更多的时间都花在实验上。他说“在日本，我们只管‘做’，这有时是非常低效的，但有时又酝酿着巨大的成功”。Hayashi同样以外胚层细胞作为起点，但与Saitou不同的是，他试图培养一个能够产生原始生殖细胞的稳定细胞系。可惜这种方法没有奏效。Hayashi借鉴其他研究结果——一个关键调控分子(activin A)和生长因子（bFGF）可以将培养的早期胚胎干细胞转化成类似于外胚层细胞的细胞类型。这引发了Hayashi将这两个因素结合起来的想法，诱导胚胎干细胞分化为外胚层，然后采用Saitou之前的方法把这些细胞成为的PGCs。通过这种新的方法，他最终获得了成功。为了证明这些人造的原始生殖细胞是真实的拷贝，他们必须证明这些细胞可以进一步发育成精子和卵子。这一进程是非常复杂和难以理解的。所以研究小组将这一工作留给了自然——Hayashi将PGCs植入无法产生精子的小鼠的睾丸，观察这些细胞是否会发育。Saitou认为，这是可行的，但还是感到有些担忧。当实验进行到第3或4只小鼠时，他们发现小鼠的输精管里充满了精子。“这一切都发生得恰如其分，我知道他们会产生幼仔，”Hayashi说。研究小组将这些精子注入卵细胞中并植入雌性小鼠的胚胎，结果产生了大量的雌性和雄性后代。他们利用诱导多能干细胞（iPS）进行反复的实验，成熟的细胞被重新编程为胚胎状态。此外，精子被用于生产幼仔，证明它们具有基本功能——这是干细胞分化领域的罕见成就。Clark说：“这是整个多能性干细胞研究领域里在培养皿中生成全功能细胞类型少有的成功案例之一。”他们预计形成卵细胞更复杂，但是在去年，Hayashi在体外条件下制作有正常着色的原始生殖细胞并转入白化小鼠的卵巢，将产生的卵细胞体外受精后植入代孕。当透过幼崽半透明的眼睑看到黑色的眼睛时，他知道这一切又成功了。生殖细胞的回馈目前，许多研究人员已经能够复制验室培养原始生殖细胞的过程。人造原始生殖细胞特定用于表观遗传学研究：通过修饰DNA确定哪些基因表达。最常见的修饰就是为DNA碱基加上甲基，这些修饰在有些情况下，能够反映生物所经历的历史过程。与其它类型的细胞类似，表观遗传标记改变了原始生殖细胞在胚胎发育过程中的命运，但原始生殖细胞有个与众不同的特点，就是当它们发育成精子和卵子后，表观遗传标记被擦除。这就允许细胞创建能够形成任何类型细胞的受精卵。表观遗传微妙变化中出现错误将会导致不孕不育并出现器官故障，如如睾丸癌。Surani和Hanna的团队已经利用人造原始生殖细胞研究不同酶在表观遗传调控中的作用，也许有一天，能够解答表观遗传网络如何参与疾病调控。事实上，体外产生的原始生殖细胞可以为研究提供数百万个细胞，而不是供科学家研究了40个左右，这些细胞可以通过解剖早期胚胎获得。Hanna说：“这是一个大问题，因为我们这里有这些稀有的原始生殖细胞正在经历我们尚不了解的全基因组表观遗传变化。”“体外模型为科学家们提供了前所未有的方便，” Clark表示认同。临床意义但是Hayashi和Saitou没有办法向乞求帮助的不孕夫妻提供帮助。在这种方法被运用在临床之前，还有许多问题需要梳理。Saitou和Hayashi发现，虽然运用他们的技术所产生的后代通常似乎是健康和大量的，但这些后代产生的原始生殖细胞并生不完全“正常”。 第二代原始生殖细胞产生的卵细胞往往是脆弱、畸形的，并且从支持它们生长的组织上脱离。当受精时，卵细胞内部会分为三组染色体，而不是正常的两组，体外受精的成功率也只有正常原始生殖细胞的三分之一。哈佛医学院从事表观遗传学研究的Yi Zhang，使用Saitou的方法在研究中发现，体外受精过程中，人造的原始生殖细胞不能像自然状态下产生的原始生殖细胞一样，抹去它们的表观遗传标记。“我们必须要知道，这些都是PGCs的类似细胞，而不是真正的原始生殖细胞，”他说。此外，这项技术还存在两个大的挑战。首先是在不将PGCs放回睾丸或卵巢的前提下买入和使它们变成成熟的精子和卵子，Hayashi目前正在试图破解PGCs生成卵子或精子的生物信号，使人工培育条件下完成这一阶段成为可能。但最可怕的挑战是在人体重复上述所有的工作。该小组已经在利用Saitou找到的关键调控基因来调整人类的iPS细胞，但是Saitou 和Hayashi都知道，人类的信息调控网络不同于小鼠。此外，Saitou有无数的小鼠胚胎进行解剖，但无法在人类胚胎进行

我做的恩诺沙星,血淋巴一取完就离心,但我看的文献先加乙睛在离心,而我在加乙睛应该没事把

淋巴按摩按出无瑕肌　　3分钟淋巴按摩按出无瑕肌 　　只要花3分钟时间的按摩，就可达到完美无瑕肌！！ 　　德容：我在每天晚上例行的脸部肌肤保养中，会多加一道按摩程序，一方面可以促进保养成分吸收，另一方面也为肌肤进行有氧运动，只要这样就可以得到意想不到的好效果喔！ 　　*化妆水按摩，抢救沙漠肌 　　只要利用保湿度高的化妆水，就能每日进行脸部轻SPA按摩喔！在涂化妆水的同时，进行1分钟按摩，就能让肌肤每天一点一滴地变好。就像是帮肌肤做运动一样，每天适当且持续地唤醒肌肤，就能让肌肤代谢状况逐渐好住。在任何保养程序后，以温热的手掌服贴脸部1分钟，绝对会让保养效果加分！ 　　*促进血液循环，创造明亮肌 　　●使用左、右手的中指与无名指指腹，先从脸颊、下巴部分开始。 　　●依序从下巴、嘴角及鼻侧，由下往上以画圆方式按摩，并将所有按摩力道往耳珠前方的部位集合。 　　●眼周以无名指往太阳穴部位轻轻滑过即可。 　　●额头部位，则由上方以画圆方式，往太阳穴集中就可以了。提到按摩对于肌肤的好处，最容易让人联想到的就是促进血液循环，尤其利用活肤按摩霜按摩后，能为脸部肌肤带来健康的亮泽感。也许有人会觉得使用按摩霜好像太油腻，其实透过产品成分及按摩技巧，反而可以调整肌肤油水平衡，带走脸上过氧化的皮脂，同时补给滋润成分，让肌肤比较不容易过度分泌油脂。切记，力道要轻柔而持续，而不是用指尖猛推喔！ 　　*淋巴排毒按摩，拒绝毒素滞留 　　●藉由拇指与食指弯曲关节处，轻轻夹捏皮肤进行刺激，能让效果更好。记住，夹捏时不只单纯夹表皮的肉，也要夹捏到骨头筋肉才有效。 　　●额头部分眉上方的按摩，也是拇指与食指弯曲，从眉头往眉尾推俊‖往太阳穴方向捏按，力道一定要轻柔，以免过度拉扯肌肤。如果淋巴循环不畅，脸部便容易累积毒素，最常出现水油分泌失调现象，也容易产生角栓与痘痘。排毒的按摩手法与促进血液循环的按摩手法不同，排毒按摩得先确认淋巴结位置，让淋巴循环顺畅才能与毒素说再见。执行淋巴按摩时最好看着镜子进行，明确找到淋巴结，配合按摩手法，才能真正达到排除毒素的按摩目的。

关键词（必填项目）：胚胎干细胞培养目的（必填项目）：正确规范胚胎干细胞培养背景知识（选填项目）：无。原理（选填项目）：无主体内容：目录一、细胞二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代三、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法四、移植细胞的准备细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。4．J1rtTA-rtTA表达J1细胞，由Dr. Jaenish的实验室友情提供。5．表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞，由Dr. Nagy的实验室提供。一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶DMEM是500ml。贮存液 DMEM(高糖) [/s

目的：通过观察盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群，肠道组织病理学改变，血中淋巴细胞数的影响规律，以期为科学研究正确使用盐酸林可霉素造成菌群失调动物模型提供参考资料。方法：盐酸林可霉素连续灌胃3d停止给药，于停药后第1天，第4天，第7天，和第10天检测肠球菌数，双歧杆菌数，血中淋巴细胞数和肠道病理改变，评价盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群的影响规律。结果：灌胃3d停止用药后第1天和第4天双歧杆菌减少，肠球菌增加，与正常组比较差异有统计学意义(P0．05)，肠道黏膜皱褶变浅，上皮内杯状细胞减少。停药后第1天出现血中淋巴细胞数减少。结论：盐酸林可霉素短期大量给药，可造成小鼠菌群失调，肠道组织损伤，免疫功能受损，该损伤持续约1周。盐酸林可霉素是科学研究中用于造成菌群失调动物模型的常用抗生素，其抑制细菌生长，尤其抑制益生菌的作用非常明显，但各家用该药的方法、剂量有较大差别，由于动物的耐受性较强，菌群失调能持续的时间不清，本实验尝试在肠道菌群变化、肠组织损伤等方面来研究林可霉素造成菌群失调的规律。以期为该药在科学研究中的使用提供数据依据，现报告如下。

在忙碌的上班路上、公交站台、地铁出口，买一个煎饼、包子做早饭，非常的方便实惠，但是您有没有想过，这些食物是否都干净卫生呢？近期，我们接到观众反映，说在南京地铁3号线五塘广场站，有一个卖肉夹馍的早餐流动摊点，生意非常红火，但背后有着不可告人的秘密。那么这个秘密到底是什么呢？生意红火的早餐肉夹馍在南京地铁3号线五塘广场站2号出口附近，每天早上都会有四五个摊点卖早餐，其中这家“刘氏正宗西安肉夹馍”，5元一个，生意红火。这个摊点每天能卖出上百个肉夹馍，摊主热情，馍馍里面夹的肉馅分量也很大，摊主还会根据客人的要求多放肥肉或者瘦肉。而且，摊主还说自己选用的都是上好的五花肉，可以放心食用。打开这个摊点销售的肉夹馍，记者发现，里面肉块的品相跟正常的五花肉有所不同，知情人表示，这里面掺杂了其它便宜的肉。摊主行踪诡秘 暗藏玄机随后的几天时间内，记者对这位摊主进行了持续跟踪。上午九点收摊，将相关物品送到上元门附近的这个院子里之后，十点钟左右，摊主又骑着这辆早餐车出门，来到金陵新三村菜场的一个肉铺，见有陌生人围观，摊主的神情紧张，拿上买来的肉快速离开。肉夹馍摊主为什么会紧张呢？肉铺老板表示，刚刚拿走的是带淋巴的槽头肉。肉铺老板称，卖肉夹馍的都要这种肉，而且还是越肥越好，一般每天都来拿10斤，多的时候一天要拿20斤。槽头肉，是指猪头与躯干连接部位的颈脖肉，这个部位气管、血管比较多，而且还有淋巴结，不少细菌、病毒进入了猪体内并被淋巴腺等免疫器官所抑制，即使高温处理，毒害也难以彻底清除，对人体有害。我国《生猪屠宰操作规程》规定，对屠宰后的猪必须割除槽头，完成这些操作规程后，专业人士再对猪肉检验，合格才加盖章印。肉铺老板表示，槽头肉都是他们低价收过来的，只能偷偷的卖，价格是五花肉的三分之一。肉铺老板称，像这种糟头肉一般只要六元一斤，如果可以长期供货的话，只要五块五一斤。肉夹馍以次充好 执法部门展开调查25日中午，南京鼓楼市场监督执法人员对这家肉夹馍摊点进行突击检查，面对询问，这位摊主表示，他确实购买过低价的槽头肉，但都将肉转给了亲戚使用，自己并未用这种肉做肉夹馍。但当执法人员表示，使用含有淋巴组织的槽头肉存在安全隐患，涉嫌违法时，摊主终于承认，他曾经用槽头肉做肉夹馍。虽然执法人员在现场并未搜查到摊主刚刚购买的槽头肉，但在这个加工点内，执法人员发现了大量煮熟的鸡肉，它的价格同样只有五六元一斤，涉嫌冒充猪肉使用。目前，执法部门正在对这个肉夹馍摊点和加工点做进一步调查处理。在调查中我们记者发现，使用价格低廉的槽头肉做肉馅，已经是食品行业内一个公开的秘密。那么，根据国家规定，在屠宰过程中就应该被割除的槽头肉为什么会流入食品市场呢？对于这个环节，记者会保持关注。

淋巴结核乌贼骨共2两，磨成粉，用猪胆汁调成糊状，涂患处，再用胶布贴牢，过10小时揭去，一日一次，连用10天。

为什么收集血淋巴不用分装,而肌肉需要分装

新华社日内瓦9月3日电 瑞士苏黎世联邦理工学院3日宣布，该校人员参与的一项研究表明，通常用于抗高血脂的他汀类药物可能有助于抗癌。 据瑞士媒体3日报道，来自苏黎世联邦理工学院和美国加利福尼亚大学伯克利分校的研究人员研发出一种细胞培养系，并使用这一细胞系对1000余种物质进行测试。测试中他们发现30多种物质具备抑制淋巴管发育的作用，并对其中两种物质进行详细分析，这两种物质中的一种属于他汀类药物。 研究人员说，淋巴管发育能促进肌体内癌细胞的转移，一些癌细胞正是通过淋巴管才得以扩散，某些肿瘤还能分泌促进淋巴管发育的物质。 研究人员随后用实验鼠进行了实验，证实服用这种他汀类药物的实验鼠体内淋巴管发育受到抑制，癌细胞的转移也得到防止。 研究人员认为，某些癌症患者可服用他汀类药物阻断癌细胞转移。不过他们表示，还需要进一步研究，以确定患者应服用多少剂量的他汀类药物来防止癌细胞转移。（记者王昭 杨京德）

四军医大发现并命名一种新的肿瘤类型 作者: 来源:科技日报 发布者: 亦云 类别:新闻扫描 日前，一种起源于淋巴管内皮细胞的恶性肿瘤类型，即真正意义上的淋巴管肉瘤，在第四军医大学被首次发现并证实。该项发现，填补了WHO淋巴管肿瘤分类中空缺淋巴管恶性肿瘤的空白，对肿瘤学的分类、诊断和治疗具有重要的理论和临床意义。 　　据了解，该肿瘤由第四军医大学基础部病理学与病理生理学教研室王哲、黄高昇两位教授领衔的科研团队发现，并将其命名为“炎症性单形性未分化肉瘤”。所撰写的论文，已经全文发表在肿瘤学国际权威杂志临床肿瘤学(《J Clinical Oncology》)上。 　　据介绍，该肿瘤常发生于年轻患者的骨和软组织，患者临床表现为疼痛性肿物生长，肿物局部有红、肿、热、痛等化脓性炎症，伴有全身发热、白细胞升高的化脓性炎症表现。 　　肿瘤形态非常特殊，由单一的胞浆丰富的上皮样细胞组成，胞浆嗜酸性，胞膜明显；泡状肿瘤细胞核大、圆形或卵圆形，染色质开放，具有巨大的嗜酸性核仁；肿瘤中可见大量的嗜中性粒细胞浸润，并有许多微脓肿形成。该肿瘤生长迅速，早期发生局部复发和淋巴结转移，对多种化疗方案无反应，患者均在发病后4月内死于广泛转移和严重并发症。肿瘤局部可穿刺抽出脓液，但多种微生物培养均为阴性结果，多种抗生素治疗无效。通过免疫组化和电镜等技术，未能发现肿瘤细胞特异的分化。 　　王哲说，炎症性单形性未分化肉瘤的临床表现、病理学形态和预后特征独特，与目前已发现的肿瘤都不相同，在世界卫生组织的肿瘤病理学分类中没有相似类型。澳大利亚皇家病理学院的官方病理专业杂志对此次新肿瘤类型的发现进行了报道。 　　肿瘤类型是由第四军医大学首次发现并命名的，具有自主知识产权，是我国病理界学者首个自主发现和命名的新的肿瘤类型。

[b]摘要[/b]从首次感染部位向邻近基质的转移入侵是肿瘤发展过程中的关键步骤，研究成果较少。肿瘤入侵的原理以各种体外模型给出了实验性的表述；但是，体内的关键性步骤和机制仍然不清楚。这里，我们通过落射荧光成像和多光子显微镜建立了一个修正的皮肤折叠室模型来阐述关于HT-1080纤维肉瘤细胞的原位移植，生长和入侵。这种策略允许对作为独立细胞或者集体粘丝或者细胞团沿着富含胶原的细胞外基质和增补宿主组织包括纹状肌肉丝和淋巴管的肿瘤生长、肿瘤诱导血管形成和入侵进行重复成像。这个修正的窗口模型将适用于阐述肿瘤转移和入侵的机制，以及相关的实验性治疗。[b]材料与方法[/b]HT-1080双色纤维肉瘤细胞表达细胞质DsRed2和核组蛋白2B（H2B）-EGFP -EGFP (Yamamoto et al. 2004)培养在改良的鹰培养基(PAN Biotech GmbH, Aidenbach, Germany)中，补充10%的胎牛血清(Aurion, Wageningen, The Netherlands)，盘尼西林和链霉素（都100ug/ml PAN)和潮霉素B（0.2mg/ml；Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)在37%湿润的5%CO2的培养环境中。小鼠被用异氟烷麻醉并被稳定固定在37℃的温控平台上。使用一个落射多光子显微镜[color=red]（[/color][color=red]TriM Scope, LaVision BioTec[/color][color=red]）[/color]，并配备了OPO装置(OPO APE, Berlin, Germany)用于1100nm波段的双光子激发，以及红外修正的20X/0.95N.A(Olympus)物镜。如果没有特定声明，EGFP，DsRed2和SHG的获取都是使用的832nm的激发光。由带通滤波器确定的检测光波段为400/40(蓝），535/50（绿），605/70（红），和710/75（红外）。以5um的步长对深达250um的成像深度进行顺序3D堆栈。通过向尾静脉注射4mg荧光葡聚糖对血管显影。在注射了淋巴归巢环肽LyP-1（100ug）之后活化的淋巴管被检测到。(Laakkonen et al. 2002)图像被使用ImageJ 1.40 g (W. Rasband, NIH), ImSpector 3.4 (LaVision Bio- Tec GmbH), and Photoshop CS 8.0.1 (Adobe Systems Inc.)重构和分析。以宽的平方X长Xπ/6计算肿瘤体积。有丝分裂和细胞凋亡的比例通过H2B-EGFP模式从每区域30到100个细胞中确定。[b]主要结果 [/b][img=,593,498]http://qd-china.com/uploads/bio-product/51.jpg[/img]Fig.1 在背侧皮肤褶皱室中HT-1080纤维肉瘤细胞的滴落和注射方法比较.6（c）、7（d）天后通过明场和落射荧光显微镜观察的细胞应用，生长位置（a，b）和宏观肿瘤形态。在建立的模型中，允许细胞悬浮液或者细胞球粘附到外科手术准备好的真皮组织表面上，获得了在真皮层与盖玻片（a.c）间的3D肿瘤生长。使用细针将细胞球注射进真皮中阻止盖玻片和真皮内产量增加间的反应（b,d)。标尺1mm（概图）和250um（细节）。 [img=,604,379]http://qd-china.com/uploads/bio-product/52.jpg[/img]Fig 2. 肿瘤生长阶段。 a 由落射荧光显微镜监测的移植瘤生长和入侵的时间进程。新生血管的插入，不存在（3天）和存在（7天）。标尺1mm。b 通过以day 1的体积进行归一化的肿瘤体积。mean+-SD（n=9）。c HT-1080移植肿瘤在6天的时候的肿瘤形态，血管化，分生和凋亡。使用多光子显微镜以激发波长1100nm（左）和832nm（右）获取的一个中央中流区域的3D重构。核形态包括了有丝分裂（白色箭头）和凋亡图（黑色箭头）。标尺50um。插图显示了前相（P）、中相（M）和后相（LA）以及凋亡图（A）。d 对时间依赖的分生和凋亡定量化。数据显示3个非依赖性肿瘤的10-25个独立区域的Mean±SEM。 [img=,617,642]http://qd-china.com/uploads/bio-product/53.jpg[/img]Fig 3. 近红外多光子显微镜显示环绕HT-1080双色肿瘤的肿瘤诱导产生血管及其结构。Z轴为一个6天大肿瘤的从肿瘤边缘（-50um）到肿瘤内部区域（-80um）（红色细胞质；黄色细胞核）。通过FITC-葡聚糖注射现实的密布血管（绿），先前存在的线形血管（绿色箭头）和不规则形状的新生血管（蓝色箭头）。胶原纤维（黑色箭头）和肌肉丝（白色箭头），通过二次谐波检测（灰度）。标尺50um。 [img=,583,768]http://qd-china.com/uploads/bio-product/54.jpg[/img]Fig 4. HT-1080双色细胞的原位入侵模型。a 注射后6天入侵类型的分类。缺少入侵（上，左）并且散布单个细胞（上，右；白色箭头），散射的或者紧密地丝状整体入侵（下图）。标尺250um。 b 45个连续的非依赖性肿瘤的按中所分入侵模式的频率。11天时，沿着纹状肌肉纤维集体入侵丝的定位。标尺100um。d 单一细胞侵入脂肪组织随后进行分散的，部分整体的入侵。对照-少量圆的脂肪细胞（星号）被HT-1080细胞包围。1100nm的激发光来检测遍布的血管(Alexa Fluor 660-dextran,红色),，肿瘤细胞质（绿色假彩），SHG（灰度）；832nm用于肿瘤细胞核（白色）。标尺100um。[img]http://qd-china.com/uploads/bio-product/55.jpg[/img]Fig 5. HT-1080细胞沿淋巴管的入侵。a 由多光子显微镜对边缘而非肿瘤中心的活化淋巴管产生的单幅图片。用FITC连接的LyP-1缩氨酸来检测。深度已标明在图上（um）。b 3D堆栈投影表明淋巴管内（白色箭头）和外淋巴管入侵（黑色箭头）。标尺100um。

胚胎干细胞实验虽然具有很高的医疗价值，但也由于伦理问题而饱受争议。英国《每日邮报》7月23日报道，有关英国多家实验室正在进行人兽杂交胚胎干细胞实验的新闻于近日曝光，在政界和学界引起强烈反响。制造150多个杂交胚胎根据《每日邮报》目前掌握的数字，英国多家实验室在过去3年中一直秘密进行人兽杂交胚胎的实验，并且已经制造了150多个同时包含人类和动物基因的杂交胚胎。这些实验都是在《人类受精与胚胎学法案》颁布之后实施的，目的据称是为了通过胚胎干细胞的研究为多种疾病寻找有效的疗法。这一消息曝光后立即引起了英国社会的广泛关注。在英国议会质询会上了解到这一事件的议员阿尔顿勋爵表示，胚胎干细胞实验无论是从伦理上还是科学上都无法成功，而人兽杂交的干细胞胚胎实验更是无法容忍。“科学家对这一实验唯一能给出的解释是：如果你们让我们做下去的话，我们就会向你们证明它的疗效。但我认为这完全是感情上的敲诈。毕竟到目前为止，所有80种干细胞治疗方法全部来自成年人的干细胞，而不是胚胎干细胞。”是否正当引发争议英国公益组织“生殖伦理学评论”的约瑟芬·昆塔瓦莱告诉记者：“为什么他们要躲避公众的视线呢？如果他们所做的是正大光明的事情，我们也就根本不需要通过议会问询的方式才能了解真相了。”很多科学家“为了实验而实验”，这根本不是正确的科学态度。科学界的反应略有不同。罗宾·洛威尔·巴奇教授来自英国医学研究理事会的国家医学研究院，他认为，近期披露的人兽杂交胚胎实验并不足虑，因为根据相关法律，这些胚胎必须在创造后14天内销毁；相反，更值得人们警惕的是那种将人类基因植入动物胚胎体内的实验。2008年颁布的《人类受精与胚胎学法案》使多种杂交物种合法化，并赋予伦敦国王学院、华威大学等3所研究机构进行相关实验的权利。所有实验目前均因为经费不足而终止，但科学家相信这一领域具有光明的未来。（来源：现代快报）

大家好： 我想利用免疫电镜检测热应激前后小鼠囊胚中热休克蛋白70的定位情况，有两种方案：1.包埋前免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，然后清洗，渗透，封闭，分别与一抗和二抗反应，然后再用锇酸固定，脱水，812包埋。2.包埋后的免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，脱水，体温包埋剂渗透，包埋，聚合，超薄切片，最后进行免疫染色。 第一种方案：不知道热休克蛋白70的抗原性保存如何？另外，不知道免疫标记效果如何就进行包埋，是不是有点盲目？ 第二种方案 超微结构和抗原性都保存较好，试验重复性好。但是包埋剂比较贵，而且本试验室没有聚合用的低温冰箱和紫外灯。 请各位大虾帮帮我！

[font='times new roman'][size=21px]ODC1[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]在[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]弥漫大[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]B[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]细胞淋巴瘤[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]治疗中的意义[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]进入二十一世纪以来，淋巴瘤的发病率逐年上升，现已跻身十大最常见的肿瘤之列。据[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]2020[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]年全球癌症报告统计，淋巴瘤新发病例约[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]63[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]万，约占所有新发癌症病例的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]3.2[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]％，死亡病例约[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]28[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]万，约占癌症总死亡人数的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]2.8[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]％。其中弥漫大[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]B[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]细胞淋巴瘤（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）约占所有非霍奇金淋巴瘤的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]30%[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，是最常见的病理亚型。因其起病具有一定的隐匿性且缺乏快速有效的早期筛查手段，故大多数病例确诊时已为晚期，多伴有远处转移，大约[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]60%[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的患者可通过[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]R-CHOP[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]利妥昔单[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]抗、环磷酰胺、阿霉素、长春新[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]碱和泼尼[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]松）免疫化疗治愈，而复发难治性[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]仍是淋巴瘤治疗领域的一大棘手问题。临床上，患者通常表现为无痛性进行性淋巴结肿大[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]伴结外[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]侵犯表现，一旦确诊，即需积极治疗。传统的化疗和放疗均因作用位点的选择性低而易产生严重的毒副反应，不仅给患者带来生理和心理上的极大痛苦，也往往是治疗失败的主要原因之一。在过去的二十年里，人们对其在流行病学、预后因素和生物学异质性等方面的研究有了跨越式的进展，随着对[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]疾病本质理解的逐步深入，以分子事件为基础的更为细化的分类标准蓬勃发展，免疫治疗和[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]靶向[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]治疗药物也层出不穷。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]2016[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]年，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]WHO[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在淋巴造血系统肿瘤的分类中提出了“双打击淋巴瘤”的概念，为临床工作中的危险分层、预后判断和治疗方案的选择提供了更坚实的依据。尽管在分子机制方面的研究取得了长足的进步，但仍有大约[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]40%[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的临床治疗效果仍然不尽如人意，因此，为[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]探寻更多的治疗靶点并研制高效低毒的靶[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]向药物[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]已成为科学研究中亟待解决的关键问题。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]基因包括[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]和[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC2[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]定位于[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]2p25.1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，普遍存在于生物体内，是主要的功能基因。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]基因编码的蛋白产物是多胺生物合成的关键酶，通过[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]介[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]导鸟氨酸生成腐胺促进多胺的合成。腐胺、精[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]脒[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]和精胺总称为多胺，至今已被发现[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]340[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]余年，是生物体生命活动的重要物质，生物学作用极为广泛，并与肿瘤的发生发展密切相关。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]过度表达可引起细胞内腐胺水平升高从而抑制甲基汞诱导的线粒体功能障碍相关细胞凋亡。另有相关报道，由甲基汞引起的线粒体功能障碍和活性氧（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ROS[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]）生成也可被[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]和腐胺的表达升高所抑制。这些结果表明，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的过度表达可能通过增加细胞内腐胺水平途径抑制线粒体[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]介[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]导的细胞凋亡。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Bachmann[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]等的研究发现，生物体细胞内存在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MYC-ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]轴，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]调节[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]RNA[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的转录和翻译、核糖体功能、蛋白[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]酶体降解、生物钟和免疫等功能是由[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MYC[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]基因调控的。大量的研究结果表明，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在大肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等癌细胞中的表达量均显著高于相应的癌[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]旁正常[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]组织。本实验室前期利用公共数据库分析了[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]33[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]种肿瘤类型、各种癌细胞系和正常组织中的表达，结果：[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在包括[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在内的许多肿瘤类型和细胞系中呈[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]高表达[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]状态，说明[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的恶性发生发展中发挥着重要作用，因此本研究对[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ODC1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]中的生物学功能和分子机制进行了初步探索，旨在为[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]诊治提供新思路，为[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]DLBCL[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的治疗以及改善患者预后提供有力的临床前研究依据。[/color][/size][/font]

【序号】：1【作者】： 郭逸君周琛张凡【题名】：CAR-T细胞治疗B细胞淋巴瘤存在的问题及应对策略【期刊】：药物生物技术. 【年、卷、期、起止页码】：2022,29(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iJTKGjg9uTdeTsOI_ra5_XXGP-2cCnxHFvyQzX46SmBpJzxoU8YSnqdPFG62NrF4M&uniplatform=NZKPT

北京：支持生育，将宫腔内人工授精术、胚胎移植术、精子优选处理等16项辅助生殖技术项目纳入门诊报销.

美国南加州大学科学家表示，他们新发现的名为IQ－1的小分子在防止胞胎干细胞分化成一种或多种特殊细胞方面具有决定性作用，该研究成果有望帮助人们开发出无污染大规模培养胚胎干细胞的方法。有关研究刊登在美国《国家科学院院报》网站上。　　干细胞疗法是许多科学家研究的热门项目，大规模培养胚胎干细胞是干细胞疗法成功发展的前提。目前，实验鼠纤维原细胞饲养层是唯一被证明为能够培养胚胎干细胞的方法。在此方法中，必要的化学信号能促使胚胎干细胞不断分裂而不分化。然而，南加州大学凯克医学院医学和药学教授迈克尔卡恩博士表示，人体胚胎干细胞用饲养层培养会遭受实验鼠糖蛋白标识的污染，如果将培养的干细胞用于人体，或许出现可怕的免疫反应。　　作为发现IQ－1小分子的研究小组主要研究人员，卡恩表示，他们发现的小分子帮助人们向实现无实验鼠纤维原细胞饲养层培养胚胎干细胞的方法往前迈进了一步。对于IQ－1的工作原理，卡恩解释说，Wnt通道（也就是细胞信号通道）对干细胞具有分叉效应（dichotomouseffects），IQ－1能够在阻断Wnt通道一个分叉的同时，增强来自Wnt通道另分叉的信号。这样，人们可以从根本上维持干细胞的生长和所需的力量。　　卡恩认为，如果人们能够创造出一个化学物质环境的系统来培养人体胚胎干细胞，那么就可以避免干细胞受污染的危险，它将让科学家的工作更加容易，这是研究小组的奋斗目标。凯克医学院干细胞和再生医学中心主任马丁佩拉博士表示，卡恩他们的研究让人们能够观察胚胎干细胞内部分子控制机制，其新发现有望帮助人们开发出大规模繁殖纯胚胎干细胞的技术。

[size=14px] [/size] [size=14px]造血干细胞（HSC）是维持血液和免疫系统健康的重要基础。在机体衰老过程中，HSC功能随之退化，表现出重建造血能力下降以及谱系分化异常，是衰老的十二大特征之一。寻找能有效改善HSC衰老的药物，对于延缓衰老助力健康老龄化具有极其重要的意义。何首乌是传统补益精血、延缓衰老的著名中药，王伽伯团队前期研究表明其所含主要成分反式二苯乙烯苷（TSG）安全性良好，不会引起肝损伤，且根据文献可知TSG可通过清除自由基、调节脂质代谢紊乱及保护神经等方式发挥良好的抗衰老作用，但其在改善HSC衰老及增强衰老机体造血免疫功能方面的活性及机制尚未有报道。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]著名抗衰老中药何首乌的主要成分反式二苯乙烯苷（TSG）具有最显著的改善造血干/祖细胞衰老的作用。机制上，TSG通过直接结合并激活能量感受器AMPK增强衰老造血干/祖细胞再生功能，并通过AMPK介导的Tet2表观遗传调控促进HSC向淋系细胞分化，部分改善HSC的髓系分化偏移。这项研究开辟了一条通过激活AMPK来减缓 HSC 衰老的途径，并肯定TSG是一种非常有前途的候选者，可以作为天然AMPK激活剂，用于开发抗衰老药物。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]Highlights[/size] [size=14px]1）首先测试了9种选定的药物对全身辐射（TBI）小鼠造血系统过早衰老的影响；[/size] [size=14px]2）何首乌主要活性成分TSG被成功鉴定为衰老HSC的有效再生剂；[/size] [size=14px]3）TSG治疗增加2种衰老小鼠中共同淋巴祖细胞CLP及其B淋巴细胞的数量；[/size] [size=14px]4）TSG 治疗增强衰老小鼠的HSC/CLP增殖潜力，且无明显副作用；[/size] [size=14px]5）TSG可通过AMPK-Tet2轴恢复再生能力的丧失和淋巴细胞生成的下降。[/size] [size=14px]研究结果[/size] [size=14px]1、筛选能够使衰老的HSC恢复活力的化合物[/size] [size=14px]作者首先基于文献及临床试验调研，确定9种源自抗衰老中药的天然产物，这9种天然产物是经过精心挑选的来自9个不同中药配方的化合物，已知对人类造血具有高度有益的作用。随后利用辐射诱导（TBI）的早衰小鼠模型筛选，结果发现何首乌TSG不仅展现出最显著的改善HSC衰老作用，并诱导骨髓淋系祖细胞（CLP）以及下游的各发育阶段B细胞和不同类型T细胞数目显著增加，恢复到接近正常对照组的水平。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、TSG 恢复自然衰老的 HSC活力且无任何明显副作用[/size] [size=14px]进一步作者评估TSG是否也可以使自然衰老小鼠中老化的HSC恢复活力。结果证实TSG能够显著提高骨髓中CLP和B细胞、胸腺T细胞各发育阶段绝对数目及外周血中淋系细胞比例，将老龄小鼠恢复到接近年轻小鼠的水平，TSG 治疗并没有以任何显著的方式改变体重、外周血细胞、血液化学和肝脏的组织学特征。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、TSG可以增强衰老HSC的再生潜力[/size] [size=14px]老化的HSC 会显著降低再生潜力，作者随后检查了TSG是否可以增强衰老小鼠中HSC的增殖能力，通过HSC和CLP移植实验结果的两组实验数据表明，显示用TSG治疗衰老小鼠可显著增强造血干/祖细胞造血的增殖能力。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、TSG诱导显著的转录变化并促进静止特征[/size] [size=14px]作者接着研究了TSG治疗对衰老HSC影响的潜在机制，发现TSG 治疗对CLP增殖和凋亡以及ROS无显著影响，进一步对年轻小鼠、衰老小鼠和TSG治疗的小鼠的HSC进行转录组分析，发现与未治疗的衰老小鼠相比，经TSG治疗的衰老小鼠的HSC转录组表现出与“年轻”HSC类似的转录组特征，转录组分析的结果还表明，TSG处理导致氧化磷酸化（OXPHOS）基因的表达显著减少，但静止相关基因的表达水平增加，这些结果表明TSG 治疗可以通过将衰老的转录组逆转到与年轻 HSC 相似的状态来促进衰老 HSC 的年轻化。此外，TSG可以抑制衰老 HSC的代谢，促进AMPK通路的激活以及向静止状态的转变。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、TSG使衰老 HSC恢复活力的作用依赖于AMPK通路[/size][size=14px]为了进一步验证TSG中AMPK对HSC衰老的再生作用，作者利用特异性AMPK抑制剂（Com C）和AMPK 激活剂（AICAR）来抑制或激活AMPK，探讨TSG对小鼠HSC衰老的影响，发现Com C显著阻断了 TSG 对骨髓中CLP和下游B细胞数量以及衰老小鼠外周血中 B 细胞比例的保护作用，AICAR治疗可以增加骨髓中CLP的数量和/或B细胞和前B细胞的总数，并通过增加 B细胞百分比来纠正外周血的不平衡。这些结果表明TSG主要通过激活AMPK来有效增强HSC功能和淋巴分化。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、TSG可以在体外与 AMPK 发生直接互作[/size] [size=14px]为了进一步研究TSG通过激活AMPK导致HSC衰老的分子机制，作者采用分子对接发现TSG 可以与 AMPKα1β1γ1 和 AMPKα2β1γ1 蛋白的激酶结构域结合，通过SPR实验发现TSG能够以比AMPKα2β1γ1更高的亲和力与AMPKα1β1γ1结合。ADPGlo? 激酶测定发现TSG可激活AMPKα1β1γ1和AMPKα2β1γ1活性。结果表明TSG可以通过与AMPK直接互作来促进AMPK激活。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、TSG可以通过AMPK-Tet2轴逆转衰老 HSC的甲基化谱[/size] [size=14px]表观遗传改变与HSC的表型和功能变化密切相关，Tet2被认为是重要的表观遗传调节因子，在HSC的稳态和分化中发挥着重要作用，而AMPK激活对于维持Tet2稳定性至关重要。因此，作者分析了TSG对AMPK激活和Tet2表达的影响，亚硫酸氢盐测序评估全基因组 DNA 甲基化状态发现衰老小鼠的 LT 整体 DNA 甲基化水平显著增加，TSG治疗衰老小鼠的DNA甲基化水平显著下降，降至与年轻小鼠非常相似的水平。此外，这种效果随着Com C的共同处理而减弱。TSG治疗并没有导致Tet2突变小鼠中CLP和B细胞绝对数量的显著增加，TSG治疗导致8周龄小鼠骨髓LSK的淋巴细胞生成潜力显著增加，并且这种效应被Tet2抑制剂Bobcat339减弱。这些结果表明Tet2作为AMPK激活的下游效应子，促进HSC的淋巴细胞生成潜力，而TSG可以通过影响该AMPK-Tet2轴来促进淋巴细胞生成。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]该研究筛选了一组源自几种著名中药配方的假定天然抗衰老化合物，并鉴定出TSG作为老化HSC的强效再生剂。TSG是中药何首乌中多酚的天然衍生物，具有多种功效，包括抗氧化、抗炎、抗高脂血症和神经保护以及抗衰老。作者发现TSG治疗不仅大大提高了CLP及其下游B淋巴细胞的绝对数量，而且还通过衰老供体嵌合的快速扩张增强了HSC/CLP的再增殖能力。此外，TSG可以恢复衰老HSC的静止状态，促进表观遗传重编程，通过激活AMPK及其底物Tet2，改变 DNA 甲基化谱，从而控制HSC的命运决定。这项研究开辟了一条通过激活AMPK来减缓 HSC 衰老的途径，并确定TSG是一种非常有前途的候选者，可以作为天然AMPK激活剂用于开发抗衰老药物。[/size]

美国食品药品监督管理局（FDA）近日批准了Gazyva（obinutuzumab）与苯丁酸氮芥联用治疗初治型慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者。CLL是一种缓慢加重的渐进性血液与骨髓系统疾病。根据美国国家癌症研究所估计，今年将有15680名美国人被确诊患有该疾病，4580人因CLL死亡。Gazyva有助于免疫系统的某些细胞攻击癌细胞，并且需要与另一种CLL治疗药物——苯丁酸氮芥合用。在对重症CLL患者的治疗过程中，Gazyva在安全性和有效性方面表现出显著改善，此外，FDA还授予此药优先审查和孤儿药地位。FDA药物评价研究中心血液/肿瘤部门主管，Richard Pazdur博士说：“FDA对Gazyva的批准意味着对CLL患者疗法的重要补充，同时也反映了突破性疗法认定的优势，此项认定使我们与企业共同合作，加快重要新药物的开发、评估和上市。”此次批准是基于一项涉及356名受试者的随机、开放性、多中心临床研究，评估了Gazyva-苯丁酸氮芥联用组和苯丁酸氮芥单用组的药效。结果表明，联用组患者的无进展生存期得到显著提高（23个月vs11.1个月）。联用组患者的最常见不良反应包括输液反应、白细胞减少（中性粒细胞减少症）、血小板水平降低（血小板减少症）、红细胞数目降低（贫血）、肌肉和骨骼疼痛、发热等。Gazyva的说明书中含有黑框警告，提示Gazyva与乙肝病毒的再活化及一种罕见病有关，该罕见病（进行性多灶性白质脑病）能损伤大脑白质中覆盖和保护神经的物质，这是此类药物（包括其它单克隆抗体）共有的已知风险。Gazyva由罗氏子公司基因泰克上市销售。转自：http://www.hfoom.com/industry/20131106/376.html

10月6日出版的新一期英国《自然》杂志刊登报告说，美国研究人员用人类卵细胞培养出了胚胎干细胞，虽然这项成果还存在一些缺陷，但已是“黄禹锡造假事件”后最接近培养出正常人类胚胎干细胞的成果。这一成果可能引起有关克隆问题的新一轮大争论。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201110/2011100911202350.jpg（图片来自原文）将体细胞中的遗传物质植入卵细胞中，将其培育成为胚胎干细胞甚至最终培养出新的个体，就是常说的克隆技术，著名的克隆羊“多利”就是用这种技术得到的。2004年，韩国研究人员黄禹锡曾宣称用这种方法培育出了人类胚胎干细胞，引起一时轰动，但后来证明这是一起造假事件。此后，许多科研人员都进行了这方面的尝试，但一直没有成功。相关研究面临的障碍是，如果先将人类卵细胞中的遗传物质去掉，再植入另一个体细胞的遗传物质，这样得到的卵细胞分裂几次后就会停止发育。而美国纽约干细胞基金实验室等机构的研究人员报告说，如果留下一部分原有卵细胞中的遗传物质，再另外加上体细胞的部分遗传物质，这样得到的卵细胞可以发育到具有70至100个细胞的囊胚阶段，达到可以提取胚胎干细胞的阶段。胚胎干细胞具备发育成各种组织和器官的潜力，如果能够培育出人类胚胎干细胞，就意味着能够培育出属于某个人自己的组织和器官，可用于个性化的医疗。当然这也会引起有关克隆人的争议。本次研究虽然能够培育出人类胚胎干细胞，但也存在一些缺陷。最重要的是这些细胞中存在3组染色体，即卵细胞原有的1组染色体和来自体细胞的2组染色体，而正常的人类细胞只有2组染色体。因此，这种人类胚胎干细胞还不具备实用性。但是《自然》杂志同时发表的社论指出，这是自“黄禹锡造假事件”后最接近培养出可用人类胚胎干细胞的成果，在大方向上证明这仍然是一条可行的道路。社论认为，这将引起新一轮的有关克隆人的大争论，甚至提出联合国有必要开始考虑制订监管克隆的规章制度。

小鼠肺管均质实验