细胞计数

前言当我们进行细胞实验的时候，很多时候都会对培养或者消化细胞的数量进行计算，最常规的就是细胞计数了。原始的细胞计数方法是通过对细胞进行染色，在显微镜下人工观察细胞状态判断细胞死活，进行计数。显微观察是细胞计数的基本原理，但是人工细胞计数是一件非常耗时耗力的工作，特别是要面对大量样本的计数需求时，因此就衍生出了细胞计数仪。我们常见的细胞计数仪是这样的：图源：网络，侵删这些自动细胞计数仪的原理又是怎样的呢？它们的底层原理是这样的：图源：网络，侵删其实自动细胞计数仪就是一个简化版的显微镜，然后搭载了对图片进行识别的软件功能，从而实现对细胞的计数。既然自动细胞计数仪可以做到，那么专业显微镜一定可以做得更好。Echo Rebel和传统的细胞计数仪不同，其具有极高的普适性，无需细胞计数仪的专用耗材，无论载玻片还是培养皿都可以进行计数。Echo Rebel的细胞计数仪是这样的：还可以是这样的：与传统的细胞计数仪相比，Echo Rebel细胞计数采用嵌入式设计，与显微镜完美融合，细胞计数时间短，普适性高，无需专用耗材，使用和维护成本低。你以为这就结束了，不，我们还可以这样：

2021年7月1日，《GB/T 39730-2020细胞计数通用要求-流式细胞测定法》（Genaeral requirements for cell counting--Flow cytometry）正式实施。该标准由国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会于2020年12月14日发布。本文件起草单位：中国计量科学研究院。 流式细胞术是对液体中悬浮单颗粒或细胞进行高速、多参数分析的技术。通过流式细胞术可对生物制备样本中的细胞进行直接技术，即可以实现样本中总细胞计数，还可以根据细胞特性进行分型计数。为了实现不同实验室、平台、操作人员等测量系统条件之间的数据一致性，需要对通过流式细胞术进行细胞计数试验的技术环节标准化。

日本研究人员日前宣布，他们开发出了利用实验鼠的诱导多功能干细胞(iPS细胞)高效制造造血干细胞的技术。医生未来在治疗白血病时，有望利用这种技术制造大量造血干细胞，从而代替骨髓移植。　　造血干细胞位于骨髓中，可以分化为红细胞和白细胞。东京都临床医学综合研究所与大阪大学的研究人员利用iPS细胞先制作出了中胚层细胞。这种细胞可以发育为血管和肌肉等组织。随后研究人员向中胚层细胞植入LhX2基因，最终生成了大量的造血干细胞。　　研究人员接下来用放射线照射实验鼠，使其失去造血功能，再将用上述方法得到的造血干细胞移植到一部分实验鼠体内。结果显示，和没有接受造血干细胞移植的实验鼠相比，接受移植的实验鼠寿命大幅延长，生存了4个月。　　研究人员指出，此前利用iPS细胞培养造血干细胞时，难以单纯生成造血干细胞，还会混杂其他细胞，而这次开发出的新技术使造血干细胞的生成效率达到了原有方法的四五倍。　　目前在对白血病患者进行治疗时，主要是移植与患者血液类型接近的正常人骨髓，以利用其中的造血干细胞，帮助患者恢复。研究人员希望在确认安全性后，将这种新技术用于人类的白血病治疗。相关论文已刊登在新一期美国《血液》杂志网络版上。

详细信息 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目公开招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2023-06-11 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目公开招标公告 2023年06月11日 10:12 公告信息： 采购项目名称 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 品目 货物/通用设备/仪器仪表/其他仪器仪表 采购单位 北京大学 行政区域 北京市 公告时间 2023年06月11日 10:12 获取招标文件时间 2023年06月11日至2023年06月16日每日上午:9:00 至 12:00 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥600 获取招标文件的地点 登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。 开标时间 2023年07月03日 13:30 开标地点 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 预算金额 ￥140.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 吴老师 项目联系电话 010-62758587 采购单位 北京大学 采购单位地址 北京市海淀区颐和园路5号 采购单位联系方式 010-62758587；吴老师 代理机构名称 东方国际招标有限责任公司 代理机构地址 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 代理机构联系方式 王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010- 68290530 附件： 附件1 采购需求800.docx 项目概况 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 招标项目的潜在投标人应在登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。获取招标文件，并于2023年07月03日 13点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：OITC-G230310800 项目名称：北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 预算金额：140.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：140.0000000 万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 简要技术规格 是否允许采购进口产品 采购 预算 1 流式细胞分析仪 1套 采用流式细胞分析仪对单个细胞进行快速定量分析或分选，在单细胞水平上定量测量细胞状态；本实验平台需要可以检测到小至80nm的流式设备，该功能可以满足微颗粒检测需求；同时申购的设备具有较高的荧光灵敏度，FITC30MESF和PE10MESF，满足稀有样本或弱表达样本的检测需求；具有2500万单样本数据存储能力，满足极低含量细胞的检测；中英文操作界面，操作更加简便，可以满足学生独立操作需求，提高机器使用率。 是 140 万元 注： 1)投标人须对整个包中全部内容进行投标，不得转包、分包。评标、授标以整个包为单位。具体技术要求详见招标公告所附附件（即，本招标文件第六章）。 2、技术要求详见公告附件。 合同履行期限：合同签订后 45 日内交货并安装完毕。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目不属于专门面向中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位采购的项目。 3.本项目的特定资格要求：1） 投标人须符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条的规定；(具体为供应商参加政府采购活动应当具备下列条件：（一）具有独立承担民事责任的能力；（二）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（三）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（四）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（五）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（六）法律、行政法规规定的其他条件。)2） 投标人须在中华人民共和国境内合法注册、有法人资格并符合工商局或相关行业主管部门核准的经营范围或经营许可(进口产品投标必须委托国内代理商投标)；3） 代理商投标必须有制造厂家针对本项目的直接授权（仅针对进口产品投标）；4） 投标人按照招标公告要求购买了招标文件；5） 投标人不得为招标人或招标代理机构的附属或相关机构；6） 投标人不得为列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商。7） 为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得参加本项目投标；8） 投标单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动；9）本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2023年06月11日 至 2023年06月16日，每天上午9:00至12:00，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。 方式：登陆“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/），点击“获取采购文件”链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 售价：￥600.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2023年07月03日 13点30分（北京时间） 开标时间：2023年07月03日 13点30分（北京时间） 地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 2、招标文件采用网上电子发售购买方式： 1）登陆 东方招标 平台（http://www.oitccas.com/），点击 获取采购文件 链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 2）投标人可以电汇的形式支付标书款（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3）投标人应在平台上填写开票信息。在投标人足额缴纳标书款后，标书款电子发票将发送至投标人在平台上登记的电子邮箱，投标人自行下载打印。 4）投标人可以电汇的形式支付标书款（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3、以电汇方式购买招标文件和递交投标保证金的，须在电汇凭据附言栏中写明招标编号、包号及用途（如未标明招标编号，有可能导致投标无效）。 4、采购项目需要落实的政府采购政策： （1）政府采购促进中小企业发展 （2）政府采购支持监狱企业发展 （3）政府采购促进残疾人就业 （4）政府采购鼓励采购节能环保产品 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：北京大学 地址：北京市海淀区颐和园路5号 联系方式：010-62758587；吴老师 2.采购代理机构信息 名 称：东方国际招标有限责任公司 地 址：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 联系方式：王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010- 68290530 3.项目联系方式 项目联系人：吴老师 电 话： 010-62758587 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：颗粒计数器,流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：2023-07-03 13:30 预算金额：140.00万元 采购单位：北京大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：东方国际招标有限责任公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目公开招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2023-06-11 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目公开招标公告 2023年06月11日 10:12 公告信息： 采购项目名称 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 品目 货物/通用设备/仪器仪表/其他仪器仪表 采购单位 北京大学 行政区域 北京市 公告时间 2023年06月11日 10:12 获取招标文件时间 2023年06月11日至2023年06月16日每日上午:9:00 至 12:00 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥600 获取招标文件的地点 登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。 开标时间 2023年07月03日 13:30 开标地点 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 预算金额 ￥140.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 吴老师 项目联系电话 010-62758587 采购单位 北京大学 采购单位地址 北京市海淀区颐和园路5号 采购单位联系方式 010-62758587；吴老师 代理机构名称 东方国际招标有限责任公司 代理机构地址 北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 代理机构联系方式 王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010- 68290530 附件： 附件1 采购需求800.docx 项目概况 北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 招标项目的潜在投标人应在登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。获取招标文件，并于2023年07月03日 13点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：OITC-G230310800 项目名称：北京大学前沿交叉学科研究院流式细胞分析仪采购项目 预算金额：140.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：140.0000000 万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 简要技术规格 是否允许采购进口产品 采购 预算 1 流式细胞分析仪 1套 采用流式细胞分析仪对单个细胞进行快速定量分析或分选，在单细胞水平上定量测量细胞状态；本实验平台需要可以检测到小至80nm的流式设备，该功能可以满足微颗粒检测需求；同时申购的设备具有较高的荧光灵敏度，FITC30MESF和PE10MESF，满足稀有样本或弱表达样本的检测需求；具有2500万单样本数据存储能力，满足极低含量细胞的检测；中英文操作界面，操作更加简便，可以满足学生独立操作需求，提高机器使用率。 是 140 万元 注： 1)投标人须对整个包中全部内容进行投标，不得转包、分包。评标、授标以整个包为单位。具体技术要求详见招标公告所附附件（即，本招标文件第六章）。 2、技术要求详见公告附件。 合同履行期限：合同签订后 45 日内交货并安装完毕。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目不属于专门面向中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位采购的项目。 3.本项目的特定资格要求：1） 投标人须符合《中华人民共和国政府采购法》第二十二条的规定；(具体为供应商参加政府采购活动应当具备下列条件：（一）具有独立承担民事责任的能力；（二）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（三）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（四）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（五）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（六）法律、行政法规规定的其他条件。)2） 投标人须在中华人民共和国境内合法注册、有法人资格并符合工商局或相关行业主管部门核准的经营范围或经营许可(进口产品投标必须委托国内代理商投标)；3） 代理商投标必须有制造厂家针对本项目的直接授权（仅针对进口产品投标）；4） 投标人按照招标公告要求购买了招标文件；5） 投标人不得为招标人或招标代理机构的附属或相关机构；6） 投标人不得为列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商。7） 为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得参加本项目投标；8） 投标单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动；9）本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2023年06月11日 至 2023年06月16日，每天上午9:00至12:00，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：登录“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/）注册并购买。 方式：登陆“东方招标”平台（http://www.oitccas.com/），点击“获取采购文件”链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 售价：￥600.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2023年07月03日 13点30分（北京时间） 开标时间：2023年07月03日 13点30分（北京时间） 地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1、投标文件递交地点：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层科创厅 2、招标文件采用网上电子发售购买方式： 1）登陆 东方招标 平台（http://www.oitccas.com/），点击 获取采购文件 链接图标，或直接输入访问地址（http://www.oitccas.com/pages/sign_in.html?page=mine）完成投标人注册手续（免费），然后登陆系统寻找有意向参与的项目，已注册的投标人无需重新注册。招标文件售价：每包人民币600 元。如决定购买招标文件，请完成标书款缴费及标书下载手续。 2）投标人可以电汇的形式支付标书款（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3）投标人应在平台上填写开票信息。在投标人足额缴纳标书款后，标书款电子发票将发送至投标人在平台上登记的电子邮箱，投标人自行下载打印。 4）投标人可以电汇的形式支付标书款（应以公司名义汇款至下述指定账号）。 开户名称：东方国际招标有限责任公司 开户行：招商银行北京西三环支行 账 号：862081657710001 3、以电汇方式购买招标文件和递交投标保证金的，须在电汇凭据附言栏中写明招标编号、包号及用途（如未标明招标编号，有可能导致投标无效）。 4、采购项目需要落实的政府采购政策： （1）政府采购促进中小企业发展 （2）政府采购支持监狱企业发展 （3）政府采购促进残疾人就业 （4）政府采购鼓励采购节能环保产品 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：北京大学 地址：北京市海淀区颐和园路5号 联系方式：010-62758587；吴老师 2.采购代理机构信息 名 称：东方国际招标有限责任公司 地 址：北京市海淀区丹棱街1号互联网金融中心20层 联系方式：王军、郭宇涵、李雯； 010-68290508；010- 68290530 3.项目联系方式 项目联系人：吴老师 电 话： 010-62758587

单细胞测序在疾病诊断和细胞异质性研究中发挥着重要作用。然而目前的单细胞测序手段需要将细胞消化并裂解才能够进行，而细胞状态在这一操作中不可避免的会发生改变，因此很难掌握细胞真实的基因表达情况，尤其对于基因通路上表达变化的检测为不利。近期苏伊士理工大学使用FluidFM创建了一种原位活细胞基因测序方法，这种方法能够在不杀死细胞的情况下完成对细胞的测序工作。通过这种技术该团队成功完成单细胞RNA基因测序，并通过这种方法检测到了细胞的基因表达和细胞周期状态变化。下面本文就这项工作的具体内容进行阐述。1. Live-Seq测序技术简述由于单个细胞的RNA总量仅有10 pg。为了实现无损的单细胞测序，该团队先使用FluidFM对现有的scRNA-Seq单细胞测序的方法进行了优化。为了尽可能的接近Smart-Seq的测试条件，该团队采用了先将缓冲液吸入探针，然后再进行细胞提取的操作。这样可以确保所提取的RNA能够很快与缓冲液混合，从而避免RNA的降解。通过这一方法，该团队成功实现了IBA细胞的测序，证明了这种方法的可行性（图1）。图1. Live-Seq技术a. Live-Seq技术的示意图和代表图片，黑色箭头指代液面；b. IBA细胞测序的质量控制图（n=10）。2. Live-Seq技术分析细胞系和细胞状态为了证实Live-Seq的有效性，该团队对多种细胞系进行了测序，这其中包括IBA细胞、小鼠脂肪干细胞和祖细胞（ASPCs）以及脂多糖处理的RAW264.7细胞和Mock处理的RAW264.7细胞。通过对这些细胞系进行测序发现，该方法能够区分上述细胞系，并且在特征基因检测中能够找到每种细胞所对应的特征基因，证明了Live-Seq方法的有效性（图2）。图2. Live-Seq单细胞测序区分细胞型及细胞状态a. 实验方法示意图，使用LPS和PBS对RAW细胞进行处理；b. 前500个高度易变基因的tSNE图；c. 前十的细胞型、细胞状态差别基因的热图；d. 小鼠基因图谱预测，使用前100个标记基因的团簇；e. Live-Seq对比scRNA-Seq的锚点分析，显示两者没有显著差异。3. Live-Seq技术对细胞的活力基本没有影响Live-Seq技术的显著优势在于提取过程中不会破坏细胞。通过对提取前后的测序对比可以发现，提取组与空白组之间的团簇没有显著性差异。并且通过对细胞形态的观察，发现细胞的形态基本没有改变，并且多数细胞仍然能够正常分裂（图3）。图3. Live-Seq对细胞活力的影响a. 细胞实验的示意图；b. Live-Seq测序后不同时间点（1h,4h）的scRNA-Seq的tSNE图；c.不同时间点scRNA-Seq所有能够发现差异的基因（共12个）；d.不同时间点的细胞形态图片。4. Live-Seq技术能够记录细胞下游分子表型事件由于Live-Seq对细胞生理状态影响小，因此能够监测在细胞代谢过程中的基因变化。通过对比LPS处理的巨噬细胞周期实验发现，Live-seq技术与对照组的细胞代谢水平相比没有明显变化，因此这种方法测量的数据十分接近细胞代谢中基因表达的真实水平。通过测序对比LPS处理与空白的测序结果发现Nfkbia与Tnf的表达为相关。这一结果也验证这种测序方法在检测细胞下游表型时的优势。图4. Live-Seq技术的单细胞纵向分析a. 实验示意图；b. 不同处理细胞的mCherry强度变化；c. 3~7.5h之间mCherry强度变化；d. Tnf-mCherry强度变化的线性回归模型；e. Nfkbia与Tnf在Live-Seq测序中的表达关系；f. Nfkbia与Tnf在scRNA-Seq测序中的表达关系；g. Live-Seq测序中细胞处于S期的评分；h. Live-Seq测序中细胞周期的mTnf-mCherry强度变化；i.Tnf-mCherry的荧光强度增量（3~7.5h）。5. Live-Seq技术对同一细胞多次测序Live-Seq技术的无损性甚至能够实现对单个细胞的多次测序。通过对单个细胞两次提取后细胞活力变化的观察中发现，细胞的活力即使在2次提取后仍没有发生明显的变化，基因型分析也没有发现明显的基因表型改变。图5. Live-Seq对细胞的多次提取j.连续测序的示意图和代表图像；k.Live-Seq的tSNE图；l.整合Live-Seq和scRNA-Seq的tSNE图。 6. 总结Live-Seq是一种十分具有前景的单细胞测序的新方法，得益于FluidFM技术的无损提取的优势，Live-Seq技术除了能够实现传统测序的功能外，还降低了细胞的损伤，能够提供更加原生和真实的测序信息。这种特点甚至让单细胞的基因表达动力学研究成为可能。相信随着这种技术自动化的提高，将为单细胞测序技术带来更多可能。 参考文献：[1]. Genome-wide molecular recording using Live-seq, Wanze Chen, Orane Guillaume-Gentil, Riccardo Dainese, Pernille Yde Rainer, Magda Zachara, Christoph G. Gäbelein, Julia A. Vorholt, Bart Deplancke, bioRxiv 2021.03.24.436752 DOI: https://doi.org/10.1101/2021.03.24.436752

[报告简介] 单细胞的操纵一直是细胞生物学领域的热点和难点，尤其是在不损害细胞活力的情况下从细胞中提取细胞器或将外源物质直接导入到细胞中。截止到目前，尽管单细胞技术有了较大的发展，但要实现将细胞器从一个细胞移植到另一个细胞，除了更大的卵母细胞外，几乎是不可能实现的。 线粒体和复杂的内膜系统是真核细胞的重要特征，是细胞中能量转换的核心，与细胞代谢和信号通路以及细胞命运紧密联系在一起。线粒体含有自身的遗传成分(mtDNA)，通常是严格垂直遗传给子细胞的。到目前为止，对活细胞内的细胞器进行操纵十分困难，将线粒体地转移到细胞的手段有限，对于线粒体移植后的剂量-反应关系分析更是十分困难，这样我们就很难从机制上了解健康或疾病细胞的线粒体移植后的生物学效应。多功能单细胞显微操作FluidFM技术能够从活细胞中提取、注射细胞器，将定量的线粒体移植到细胞中，同时保持它们的活力。 本报告分为两部分：1. 来自ETH的Dr. Christoph G. Gäbelein使用多功能单细胞显微操作FluidFM技术，将线粒体移植至培养的细胞中，并实时跟踪线粒体注射后的情况，监测它们在新宿主细胞中的命运。通过跟踪发现被移植线粒体与受体细胞线粒体网络融合发生在移植后20分钟，持续16小时以上。活细胞之间移植线粒体不仅为细胞器生理学的研究开辟了新的前景，也为机械生物学、合成生物学和疾病治疗开辟了新的前景。本次报告Dr. Christoph G. Gäbelein将对上述文章和数据进行详细分享。2. 2020年9月，国内套FluidFM多功能单细胞显微操作系统在北京大学生命科学学院顺利安装并交付使用。期间，在北京大学生命科学学院公共仪器中心光学成像平台覃思颖老师和Quantum Design中国工程师胡西博士的帮助下，成功举办多场workshop，FluidFM多功能单细胞显微操作系统助力北大发表多篇paper。本次报告中，覃思颖老师将分享多功能单细胞显微操作系统FluidFM技术的实验操作案例与运行维护经验。[直播入口]请扫描下方二维码进入FluidFM单细胞显微操作技术群，届时会在微信群中实时更新直播入口，无需注册！扫码进群，即刻获取直播链接，无需注册！[报告时间]06月08日 下午15:00-16:00 [主讲人介绍]Christoph G. Gäbelein，ETHChristoph是一名来自ETH的青年科学家，科研中他一直致力于将FluidFM单细胞显微操作技术应用于更多的生命科学场景中。在过去两年间，他以一作或参与者的身份发表了FluidFM多篇文章：2022 Mitochondria transplantation between living cells2022 Injection into and extraction from single fungal cells.2021 Single cell engineering using fluidic force microscopy.2021 Genome-wide molecular recording using Live-seq.Christoph对于FluidFM技术的应用具备丰富而完善的经验，文章也是高产的，目前Christoph已经成为了FluidFM技术领域的专家。本次Webinar，Christoph将介绍他应用技术的新成果，并详细阐述从活细胞中提取、注射线粒体，将定量的线粒体移植到细胞中，同时保持它们的活力的技术细节。Christoph的座右铭是：Curiosity-driven young scientist interested in fundamental cell biology 覃思颖，北京大学生命科学学院公共仪器中心光学成像平台工程师。2016年于北京大学获得生物物理学博士学位，博士期间以作者在Nature Materials发表论文，博士后期间入选届北京大学博雅博士后项目。2019年加入北京大学生科院公共仪器中心，负责原子力显微镜、多功能单细胞显微操作系统、共聚焦显微镜等大型仪器的技术支持与运行管理，在多尺度生物样品的原子力制样与成像力学检测、单细胞注射与分离等显微操作、生物荧光成像与图像处理分析等方面有着丰富的经验，为校内外100余课题组提供技术服务，辅助课题组在Nature、Cell、Nature Cell Biology等国际期刊发表论文30余篇。本次报告将分享多功能单细胞显微操作系统FluidFM技术的实验操作案例与运行维护经验。[应用简介]1. 从活细胞中提取线粒体 为了检测FluidFM探针对单细胞细胞器采样的能力。作者使用了两种探针，分别是锥型探针(A=1.2 μm2)和圆柱型探针(A=1.6 μm2)(图1B)。实验结果表明，使用这两种探针都可以对单个线粒体及多个线粒体进行提取或大量抽提。图1：(A) 示意图：使用FluidFM技术进行细胞器提取。通过调整悬臂探针中的负压(-Δp)进行提取。(B) 通过调节孔径大小和流体作用力的适用范围，选择性地提取不同的细胞器成分。1行：用悬梁臂探针提取单细胞细胞器的示意图。2行：不同孔径的悬臂扫描电镜图。3行：FluidFM悬臂探针孔径与对应的流体力范围。(C) 示意图：使用FluidFM技术进行细胞器注射。通过调整悬臂探针中的正压(+Δp)进行将探针中的细胞器注射到受体细胞内。 对线粒体提取后的细胞活力进行了检测，发现细胞仍保持较高的细胞活力 (95%)。为了进一步确保FluidFM提取方案在探针插入时不会破坏细胞质膜，作者使用荧光探针(mito-R-GECO1)监测细胞培养基中可能发生的Ca2+内流。实验显示，在操作过程中和操作后都没有Ca2+流入，表明细胞器提取过程中细胞质膜的完整性。 本研究还发现暴露在FluidFM负压下的线粒体小体会经历形状的转变，类似于“串上珍珠”的形态。 其特征是离散的线粒体基质球体状，并且通过细长的膜结构相互连接，在进一步负压拉力的作用下，这些球状结构终被拉断，并在悬臂中呈现为球状线粒体(图2E)。进一步探究显示，施加FluidFM负压后，力诱导的形状转变沿线粒体小管在毫秒到秒的范围内传播了数十微米。形状转变沿这一方向均匀传播，而外层线粒体膜(OMM)保持了初的完整性。当牵引力保持数秒后，OMM在先前形成的“珍珠”之间的一个或多个收缩点分离，从而产生立的球形线粒体，而管状结构的其余部分放松并恢复。结合线粒体牵引实验和线粒体定位的钙流实验，结果证明线粒体的串上珍珠表型的形状转变以及随后细胞质内的线粒体裂变是不依赖钙的。图2(A) FluidFM悬臂探针的扫描电子显微镜图像。具体尺寸参数是：L = 200 μm, W = 35 μm, H = 1 μm。Scale bar = 5 μm。(B) 提取线粒体后的FluidFM悬臂的荧光显微镜图像。由于折射率不同，可以看到提取物和悬臂探针填充物之间的边界。Scale bar = 10 μm。(C) 是图(B)的示意图，提取物的体积是1170 fL。(D- F) 活细胞器提取的延时图像和提取后金字塔悬臂图像。黄框表示细胞内的悬臂的位置。(D) 对表达su9-BFP(线粒体)和Sec61-GFP (ER) 的U2OS细胞进行提取。箭头表示ER区域。使用孔径为0.5 µm2的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。(E) 从表达su9-BFP的U2OS细胞中提取单个线粒体。使用1 µm2孔径的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。(F) 从表达su9-BFP的U2OS细胞中提取数个线粒体。使用1 µm2孔径的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。 2. 将线粒体移植至新细胞 研究人员的下一个目标是将线粒体移植到新的宿主细胞中，并保持细胞活性。FluidFM技术为线粒体转移提供了两种可能性方案：方案一、用FluidFM技术直接提取线粒体而后注入到新的宿主细胞中；方案二、将从细胞中分离纯化的线粒体回充入FluidFM探针，然后注射(图3A-D)。作者比较了两种方法，为了实现可视化的线粒体的转移，作者在供体和受体细胞中分别对线粒体进行了差异化标记 (图3E-F 供体细胞线粒体su9-mCherry和受体细胞线粒体su9-BFP)。当使用FluidFM直接将线粒体从一个细胞移植到另一个细胞时，成功率高达95%，而且保持了细胞活力(图3G, 41个移植细胞中有39个)。在注射纯化线粒体后，作者观察到46%的样本(19/41)发生了线粒体转移且保持了细胞活力(图3G)。移植的定量结果显示，这些实验中移植的线粒体数量从3到15个线粒体每个细胞不等(图3H)。两种替代方案的不同成功率可以由线粒体分离获取的条件差异来解释。在评估线粒体提取方案时，作者观察到部分提取的线粒体外膜发生破裂。线粒体的不可逆损伤导致细胞内降解，细胞色素C释放可能导致细胞凋亡。 虽然线粒体的细胞间移植降低了通量，但它的优点是细胞外时间短(1分钟)，并且通过FluidFM采样的线粒体大限度地集中在原生细胞质液中，完全避免了人工缓冲液的使用。在提取和移植之前，作者通过在探针中填充不混溶的C8F18来确保提取液在提取过程中保持在孔径附近。因此，只有很小的体积(0.5 - 2pL)被注入到宿主细胞中(图3B)。 除了标记供体细胞的线粒体(su9-mCherry)外，还标记了受体细胞的线粒体(su9- BFP)，这样就能够观察移植细胞线粒体网络的实时状态。在上述两种移植方案(移植和纯化后注射)中，宿主-线粒体网络的管状状态不会因注射过程而产生影响。此外，标记可以让作者可视化地监测线粒体地移植，观察线粒体地融合。 无论移植方法是细胞到细胞(图3I)，还是注射纯化线粒体(图3J)，都可以观察到这些过程。实验跟踪了22个细胞的移植命运：18个细胞显示移植的线粒体完全融合，4个细胞的线粒体发生降解。多数细胞样本(18个细胞中的14个)在移植后30分钟内次观察到融合事件。 如上所述，细胞间移植即方案一的效率高，并可以直接观察单个移植线粒体的命运。为了展示这一点，作者将标记好的线粒体(su9-mCherry)从HeLa细胞移植到差异标记的U2OS细胞(su9-BFP)中，这种细胞通常用于研究动态线粒体行为。高灵敏度相机可以用于追踪受体细胞内的单个线粒体(图3L)。作者观察到荧光线粒体基质标签在移植后23分钟的发生初始融合而后扩展到线粒体网络。 综上所述，作者建立了两种将线粒体转移到单个培养细胞的方法。 一种方法是活细胞间移植。该方案显示移植后细胞活力高，允许观察移植后线粒体的动态行为，是一种高效方案。二种方法是大量纯化线粒体并将其注射到受体细胞中。 注射速度相当快，但不可避免地损害线粒体和细胞功能。图3(A) 方案一示意图（活细胞间线粒体移植）：通过FluidFM吸入法提取线粒体。 随后，将带有提取物的悬臂探针移至受体细胞插入并注入提取物。(B) 方案一预填充C8F18的FluidFM悬臂梁的图像，被移植线粒体通过su9-mCherry标记，提取量~0.8 pL。Scale bar = 10 μm。(C) 方案二示意图（纯化线粒体注入细胞）：使用标准线粒体纯化方案纯化的线粒体进行线粒体移植的方案。 将纯化的线粒体重悬在HEPES-2缓冲液中，直接填充到FluidFM探针中并对细胞进行注射。(D) 方案二由su9-mCherry标记的FluidFM悬臂充满线粒体的图像。Scale bar = 10 μm。(E) 通过方案一（活细胞间线粒体移植）进行线粒体移植后的宿主细胞图像。宿主细胞的线粒体通过su9-BFP标记，移植细胞线粒体通过su9-mCherry标记。Scale bar = 10 μm。(F) 通过方案二（纯化线粒体注入细胞）进行线粒体移植后的受体细胞图像。宿主细胞的线粒体通过su9-BFP标记，移植细胞线粒体通过su9-mCherry标记。Scale bar = 10 μm。(G) 通过光学成像对两种方案注射的细胞进行评估。每种方法评估了40个细胞。(H) 两种方案的线粒体的计数评估。每种方法评估了22个细胞。(I) 方案一移植线粒体后，对移植线粒体(su9-mCherry)和宿主线粒体网络(su9-BFP)使用不同的荧光标记进行成像，融合。Scale bar = 5μm。(J) 方案二注入纯化线粒体后移的融合状态，标记方案同(I)。Scale bar = 5 μm。(K) 移植线粒体发生降解，分裂成多个更小的荧光囊泡(su9-mCherry)，荧光与标记的宿主细胞线粒体网络(su9-BFP)没有重叠。Scale bar=5 μm。 (L) 单个移植线粒体的延时图像序列(su9-mCherry)。细胞器供体为HeLa细胞，受体细胞为U2OS细胞，带有荧光标记线粒体网络(su9-BFP)。Scale bar = 10 μm。 讨论 FluidFM技术采用微型探针，可以在微环境中以高时空分辨率操纵单细胞或者对单个细胞进行采样，并与组学方法相结合，使细胞器的研究成为可能。FluidFM技术将原子力显微镜的高精度力学调节手段与光学检测下的纳米尺度微流控系统相结合，提供与单细胞操作相关的力学和定量的体积控制。这些特性在现有微型探针中是的，在本研究中，作者将FluidFM单细胞技术用于活细胞真核内和细胞间的细胞器微操作。成功实现了活细胞之间的线粒体移植。 该研究将启发人们将FluidFM技术应用于更多领域，例如，干细胞治疗中低代谢活性细胞的再生，作为线粒体替代治疗方法的一种备选方案等。此外，FluidFM技术为解决细胞生物学、生物力学和细胞工程等问题提供了新的视角。

01 两种通量选择CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪镁伽CCEasy全自动高通量细胞计数分析仪，以高通量细胞分析技术为核心，兼容台盼蓝、荧光（AO/PI）两种染色方式，能自动化完成细胞计数、活率检测及生长情况分析，实现高效率、高质量、标准化的活细胞在线检测。机型提供24位转盘和96孔板两种选择，支持进行自动化整合，充分满足多领域的细胞分析实验需求。全自动24通量细胞计数分析仪全自动96通量细胞计数分析仪 滑动查看更多 CCEasy的软件系统通过高精度视觉检测系统结合智能主动学习Al算法，能在短时间内对多细胞样本进行高精度识别和计算，为细胞分析和质量控制提供更加可靠的自动化解决方案！02 全流程自动化无需人工介入，让细胞计数分析更智能标准高效全程标准化检测，无需人工介入，兼容24位转盘或96孔板不间断连续测样；无需设置细胞参数，即可准确识别细胞状态和数量。快速灵敏解放双手，预置试剂包，无需人工混合染料与样品；检测耗时短，1min内即可完成单个样品的制备及检测。智能管理多级用户、多级权限管理，支持电子签名、电子记录存档，符合FDA21 Part11要求。降本增效内置可长期持续使用的检测池，无需一次性细胞计数板，帮助客户节省耗材成本。 细胞计数分析仪运行流程 03 数据验证符合GMP规范，细胞质量控制更可靠标准颗粒梯度测试结果通过CCEasy细胞计数分析仪测试多种稀释倍数下标准颗粒的数量，测试数据呈现良好线性趋势，R2高达0.998，表明CCEasy细胞计数仪具有良好的准确性和一致性。以下分别为镁伽CCEasy24通道细胞计数仪测试数据和96通道细胞计数仪测试数据。多细胞样本直径测定通过CCEasy细胞计数仪对多细胞样本的直径进行测试，结果显示，通过24通道和96通道的细胞计数仪测量细胞直径，两台设备测量结果偏差非常小，具有良好的重复性。

细胞生物学前沿技术交流会（流式细胞分析分选技术专场）通 知近年来，生命科学前沿深入研究和公共健康领域应用的迫切需求都对相关仪器技术、实验方法的迭代更新起到了极大的推动作用，尤其是交叉学科不断融合，促进了包括流式细胞分析分选技术在内的细胞生物学研究手段的快速发展，全光谱流式、质谱流式、成像流式、纳米流式、拉曼流式等创新技术层出不穷，流式细胞技术在生命科学基础研究、医学临床诊断等领域的发展和应用场景越来越广泛，运用方案越来越深入。兹定于2023年4月13-14日在上海召开“细胞生物学前沿技术交流会（流式细胞分析分选技术专场）”。本次会议由中国科学院上海生命科学大型仪器区域中心主办，中国科学院分子细胞科学卓越创新中心公共技术中心承办，旨在邀请流式前沿领域的技术专家向与会人员详细介绍各类技术的原理、技术特点及应用场景，拓展科研人员在技术方向上的认知，促进这些前沿技术为更多从事科研、研发及检测人员所灵活、高效、高质运用。现将有关事宜通知如下：一、会议时间与地点会议时间：2023年4月13-14日会议地点：上海市徐汇区岳阳路320号新生化大楼312报告厅二、会议内容会议将围绕多种类型、不同技术路线的分选技术（成像型光谱流式细胞分选、空气激发型光谱流式细胞分选、拉曼细胞分选）和分析技术（质谱流式细胞分析、在体流式细胞分析、成像型流式细胞分析、微流控单细胞分析、纳米流式分析）等前沿流式相关技术的技术特点及运用场景展开介绍与讨论交流。为支持国产仪器自主创新，会议还将优先推介国产流式细胞分析分选设备。三、会议日程2023年4月13日时 间内 容报告人主持人09:00-09:05区域中心领导致欢迎辞09:05-09:20相关主管部门领导致辞09:20-09:50高通量流式拉曼细胞分选仪及应用马 波中科院青岛生物能源与过程所研究员张文娟09:50-10:20拉曼分选技术前沿——细胞表型探索新工具李 备中科院长春光机所研究员10:20-10:35茶歇10:35-11:05循环细胞的活体无创光学动态监测魏勋斌北京大学教授张文娟11:05-11:35“图鉴不同，像由心选”BD高速图像光谱流式分选技术钱 璟碧迪医疗器械（上海）有限公司高级产品应用经理11:35-13:30午餐，自由讨论与交流13:30-14:00全光谱流式原理与分选技术的应用冯定龙Cytek华东区高级技术经理边 玮14:00-15:30谱康光谱流式细胞仪技术及应用杨 凡谱康医学应用技术支持15:30-15:45茶歇15:45-16:15空气激发型光谱分选技术用于高活性细胞分选及单细胞分选应用李 凌赛默飞世尔科技（中国）有限公司高级技术应用经理边 玮16:15-16:45全光谱流式前沿技术和应用曾令武索尼生命科学高级市场经理16:45-18:00自由讨论与交流2023年4月14日时 间内 容报告人主持人09:30-10:00纳米尺度生物颗粒的精准表征利器 — 纳米流式检测技术颜晓梅厦门大学特聘教授边 玮10:00-10:30新一代单细胞靶向蛋白质组学平台——Starion星瀚流式质谱系统刘浥坤上海宸安生物科技有限公司高级应用科学家 10:30-10:45茶歇10:45-11:15基于流式光片的斑马鱼高通量三维成像技术研究李 辉中科院苏州医工所研究员边 玮11:15-11:45“功能为王”-单细胞功能高通量深度表征平台开启单细胞多组学研究新篇章朱 凯PhenomeX资深应用科学家 11:45-13:30午餐，自由讨论与交流13:30-14:00新概念柔性流式细胞分选技术及其应用张 萍德国美天旎全国科研应用经理俞珺璟14:00-14:30Namocell 微流控单细胞分选技术的原理和应用陈科立Namocell经理14:30-15:00成像增强型流式细胞分析结合AI图像技术用于细胞表型和形态研究应用李 凌赛默飞世尔科技（中国）有限公司高级技术应用经理15:00-17:00自由讨论与交流四、报名方式本次会议免注册费用。请参会人员扫描下方二维码填写会议回执，并于2023年4月11日中午12点前提交反馈，以便会务组安排相关事宜。五、会议联系方式姜颖文：15721565165，jiangyingwen@sibcb.ac.cn何 钧：13611699686，jun.he@sibcb.ac.cn中国科学院上海生命科学大型仪器区域中心中国科学院分子细胞科学卓越创新中心公共技术中心2023年4月6日

前所未有的全自动高精度单细胞操纵平台！多功能单细胞显微操作FluidFM技术首次将原子力系统、显微成像系统、微流控系统、活细胞培养系统融为一体的单细胞显微操作平台，其核心技术——FluidFM技术采用了纳米级别中空探针，完美实现了单个细胞水平、fL级别超高精度、全自动化的细胞及细胞器的操作。是一套超温柔，纳米级，全自动的细胞操纵方案。这项技术将传统细胞显微操作实验无法触及领域的大门彻底打开，科学家可以在单个细胞上实现前所未有的精妙操纵。其主要功能包括单细胞提取、单细胞分离、活细胞细胞器移植、单细胞注射、单细胞力谱等。图1 FluidFM技术整机外观及原理示意图在活细胞中也能进行细胞器操纵？多功能单细胞显微操作FluidFM技术首次实现活细胞间线粒体移植线粒体和复杂的内膜系统是真核细胞的重要特征。到目前为止，对活细胞内的细胞器进行操纵仍然十分困难。多功能单细胞显微操作FluidFM技术能够从活细胞中提取、注射细胞器，将定量的线粒体移植到细胞中，同时保持它们的活力。近期，Julia A. Vorholt课题组使用多功能单细胞显微操作FluidFM技术，将线粒体移植至培养的细胞中，并实时跟踪线粒体注射后的情况，监测它们在新宿主细胞中的命运。通过跟踪，作者发现与受体细胞线粒体网络融合发生在移植后20分钟，持续16小时以上。活细胞之间移植线粒体不仅为细胞器生理学的研究开辟了新的前景，也为机械生物学、合成生物学和疾病治疗开辟了新的前景。该篇文章以” Mitochondria transplantation between living cells.”为题，发表在BioRxiv.上。1从活细胞中提取线粒体在FluidFM负压下的线粒体小体会经历形状的转变，类似于“串上珍珠”的形态。其特征是离散的线粒体基质球体状，并且通过细长的膜结构相互连接，在进一步负压拉力的作用下，这些球状结构最终被拉断，并在悬臂中呈现为球状线粒体（图2）。当牵引力保持数秒后，OMM在先前形成的“珍珠”之间的一个或多个收缩点分离，从而产生独立的球形线粒体，而管状结构的其余部分放松并恢复。图2 提取线粒体后的FluidFM悬臂探针的显微图像及示意图2线粒体移植至新细胞研究人员的下一个目标是将线粒体移植到新的宿主细胞中，并保持细胞活性。FluidFM技术为线粒体转移提供了最佳的两步走方案：第一步，用FluidFM技术直接提取线粒体，第二步，将提取的线粒体注入到新的宿主细胞中。该方案的成功率高达95%，而且保持了细胞活力，其优点是细胞器在细胞外停留的时间短(1分钟)，并且通过FluidFM采样的线粒体最大限度地集中在原生细胞质液中，完全避免了人工缓冲液的使用。保持了线粒体和细胞的纯度，避免了其他因素的影响。作者标记供体细胞的线粒体(su9-mCherry)和受体细胞的线粒体(su9- BFP)，能够观察移植细胞线粒体网络的实时状态（图3）。实验跟踪了22个细胞的移植命运：18个细胞显示移植的线粒体完全融合，4个细胞的线粒体发生降解。多数细胞样本(18个细胞中的14个)在移植后30分钟内首次观察到融合事件而后扩展到线粒体网络。综上所述，作者建立了将线粒体转移到单个培养细胞的方法。该方案显示移植后细胞活力高，允许观察移植后线粒体的动态行为，是一种高效方案。图3 单个移植线粒体的延时图像序列(su9-mCherry)。细胞器供体为HeLa细胞，受体细胞为U2OS细胞，带有荧光标记线粒体网络(su9-BFP)。Scale bar = 10 μm。本文使用的FluidFM技术采用微型探针，可以在微环境中以高时空分辨率操纵单细胞或者对单个细胞进行采样，并与组学方法相结合，使细胞器的研究成为可能。FluidFM技术将原子力显微镜的高精度力学调节手段与光学检测下的纳米尺度微流控系统相结合，提供与单细胞操作相关的力学和定量的体积控制。这些特性在现有微型探针中是独一无二的，在本研究中，作者将FluidFM单细胞技术用于活细胞真核内和细胞间的细胞器微操作。成功实现了活细胞之间的线粒体移植。，时长00:07单个线粒体移植视频该研究将启发人们将FluidFM技术应用于更多领域，例如，干细胞治疗中低代谢活性细胞的再生，作为线粒体替代治疗方法的一种备选方案等。此外，FluidFM技术为解决细胞生物学、生物力学和细胞工程等问题提供了新的视角。

摘要：线粒体和复杂的内膜系统是真核细胞的重要特征。到目前为止，对活细胞内的细胞器进行操纵仍然十分困难。多功能单细胞显微操作FluidFM技术能够从活细胞中提取、注射细胞器，将定量的线粒体移植到细胞中，同时保持它们的活力。近期，Julia A. Vorholt课题组使用多功能单细胞显微操作FluidFM技术，将线粒体移植至培养的细胞中，并实时跟踪线粒体注射后的情况，监测它们在新宿主细胞中的命运。通过跟踪，作者发现与受体细胞线粒体网络融合发生在移植后20分钟，持续16小时以上。活细胞之间移植线粒体不仅为细胞器生理学的研究开辟了新的前景，也为机械生物学、合成生物学和疾病治疗开辟了新的前景。该篇文章以” Mitochondria transplantation between living cells.”为题，发表在BioRxiv.上。 结果：1. 从活细胞中提取线粒体为了检测FluidFM探针对单细胞细胞器采样的能力。作者使用了两种探针，分别是锥型探针(A=1.2 um2)和圆柱型探针(A=1.6 um2)(图1B)。实验结果表明，使用这两种探针都可以对线粒体及单个线粒体进行提取或大量抽提。作者对内质网（ER）和线粒体提取后的细胞活力进行了检测，发现细胞仍保持较高的细胞活力 (95%)。为了进一步确保FluidFM提取方案在探针插入时不会破坏细胞质膜，作者使用荧光探针(mito-R-GECO1)监测细胞培养基中可能发生的Ca2+内流。实验显示，在操作过程中和操作后都没有Ca2+流入，表明细胞器提取过程中细胞质膜的完整性。本研究还发现暴露在FluidFM负压下的线粒体小体会经历形状的转变，类似于“串上珍珠”的形态。 其特征是离散的线粒体基质球体状，并且通过细长的膜结构相互连接，在进一步负压拉力的作用下，这些球状结构终被拉断，并在悬臂中呈现为球状线粒体(图2E)。进一步探究显示，施加FluidFM负压后，力诱导的形状转变沿线粒体小管在毫秒到秒的范围内传播了数十微米。形状转变沿这一方向均匀传播，而外层线粒体膜(OMM)保持了初的完整性。当牵引力保持数秒后，OMM在先前形成的“珍珠”之间的一个或多个收缩点分离，从而产生立的球形线粒体，而管状结构的其余部分放松并恢复。结合线粒体牵引实验和线粒体定位的钙流实验，结果证明线粒体的串上珍珠表型的形状转变以及随后细胞质内的线粒体裂变是不依赖钙的。 图1：(A) 示意图：使用FluidFM技术进行细胞器提取。通过调整悬臂探针中的负压(-Δp)进行提取。(B) 通过调节孔径大小和流体作用力的适用范围，选择性地提取不同的细胞器成分。1行：用悬梁臂探针提取单细胞细胞器的示意图。2行：不同孔径的悬臂扫描电镜图。3行：FluidFM悬臂探针孔径与对应的流体力范围。(C) 示意图：使用FluidFM技术进行细胞器注射。通过调整悬臂探针中的正压(+Δp)进行将探针中的细胞器注射到受体细胞内。 图2：(A) FluidFM悬臂探针的扫描电子显微镜图像。具体尺寸参数是：L = 200 μm, W = 35 μm, H = 1 μm。Scale bar = 5 μm。(B) 提取线粒体后的FluidFM悬臂的荧光显微镜图像。由于折射率不同，可以看到提取物和悬臂探针填充物之间的边界。Scale bar = 10 μm。(C) 是图(B)的示意图，提取物的体积是1170 fL。(D- F) 活细胞器提取的延时图像和提取后金字塔悬臂图像。黄框表示细胞内的悬臂的位置。(D) 对表达su9-BFP(线粒体)和Sec61-GFP (ER) 的U2OS细胞进行提取。箭头表示ER区域。使用孔径为0.5µm2的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。(E) 从表达su9-BFP的U2OS细胞中提取单个线粒体。使用1µm2孔径的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。(F) 从表达su9-BFP的U2OS细胞中提取数个线粒体。使用1µm2孔径的悬臂梁探针。Scale bar = 10 μm。 2. 线粒体移植至新细胞研究人员的下一个目标是将线粒体移植到新的宿主细胞中，并保持细胞活性。FluidFM技术为线粒体转移提供了两种可能性方案：方案一、用FluidFM技术直接提取线粒体而后注入到新的宿主细胞中；方案二、将从细胞中分离纯化的线粒体回充入FluidFM探针，然后注射(图3A-D)。作者比较了两种方法，为了实现可视化的线粒体的转移，作者在供体和受体细胞中分别对线粒体进行了差异化标记 (图3E-F 供体细胞线粒体su9-mCherry和受体细胞线粒体su9-BFP)。当使用FluidFM直接将线粒体从一个细胞移植到另一个细胞时，成功率高达95%，而且保持了细胞活力(图3G, 41个移植细胞中有39个)。在注射纯化线粒体后，作者观察到46%的样本(19/41)发生了线粒体转移且保持了细胞活力(图3G)。移植的定量结果显示，这些实验中移植的线粒体数量从3到15个线粒体每个细胞不等(图3H)。两种替代方案的不同成功率可以由线粒体分离获取的条件差异来解释。在评估线粒体提取方案时，作者观察到部分提取的线粒体外膜发生破裂。线粒体的不可逆损伤导致细胞内降解，细胞色素C释放可能导致细胞凋亡。虽然线粒体的细胞间移植降低了通量，但它的优点是细胞外时间短(1分钟)，并且通过FluidFM采样的线粒体大限度地集中在原生细胞质液中，完全避免了人工缓冲液的使用。在提取和移植之前，作者通过在探针中填充不混溶的C8F18来确保提取液在提取过程中保持在孔径附近。因此，只有很小的体积(0.5 - 2pL)被注入到宿主细胞中(图3B)。除了标记供体细胞的线粒体(su9-mCherry)外，还标记了受体细胞的线粒体(su9- BFP)，这样就能够观察移植细胞线粒体网络的实时状态。在上述两种移植方案(移植和纯化后注射)中，宿主-线粒体网络的管状状态不会因注射过程而产生影响。此外，标记可以让作者可视化地监测线粒体地移植，观察线粒体地融合。 无论移植方法是细胞到细胞(图3I)，还是注射纯化线粒体(图3J)，都可以观察到这些过程。实验跟踪了22个细胞的移植命运：18个细胞显示移植的线粒体完全融合，4个细胞的线粒体发生降解。多数细胞样本(18个细胞中的14个)在移植后30分钟内次观察到融合事件。如上所述，细胞间移植即方案一的效率高，并可以直接观察单个移植线粒体的命运。为了展示这一点，作者将标记好的线粒体(su9-mCherry)从HeLa细胞移植到差异标记的U2OS细胞(su9-BFP)中，这种细胞通常用于研究动态线粒体行为。高灵敏度相机可以用于追踪受体细胞内的单个线粒体(图3L)。作者观察到荧光线粒体基质标签在移植后23分钟的发生初始融合而后扩展到线粒体网络。综上所述，作者建立了两种将线粒体转移到单个培养细胞的方法。 一种方法是活细胞间移植。该方案显示移植后细胞活力高，允许观察移植后线粒体的动态行为，是一种高效方案。二种方法是大量纯化线粒体并将其注射到受体细胞中。 注射速度相当快，但不可避免地损害线粒体和细胞功能。图3：(A) 方案一示意图（活细胞间线粒体移植）：通过FluidFM吸入法提取线粒体。 随后，将带有提取物的悬臂探针移至受体细胞插入并注入提取物。(B) 方案一预填充C8F18的FluidFM悬臂梁的图像，被移植线粒体通过su9-mCherry标记，提取量~0.8 pL。Scale bar = 10 μm。(C) 方案二示意图（纯化线粒体注入细胞）：使用标准线粒体纯化方案纯化的线粒体进行线粒体移植的方案。 将纯化的线粒体重悬在HEPES-2缓冲液中，直接填充到FluidFM探针中并对细胞进行注射。(D) 方案二由su9-mCherry标记的FluidFM悬臂充满线粒体的图像。Scale bar = 10 μm。(E) 通过方案一（活细胞间线粒体移植）进行线粒体移植后的宿主细胞图像。宿主细胞的线粒体通过su9-BFP标记，移植细胞线粒体通过su9-mCherry标记。Scale bar = 10 μm。(F) 通过方案二（纯化线粒体注入细胞）进行线粒体移植后的受体细胞图像。宿主细胞的线粒体通过su9-BFP标记，移植细胞线粒体通过su9-mCherry标记。Scale bar = 10 μm。(G) 通过光学成像对两种方案注射的细胞进行评估。每种方法评估了40个细胞。(H) 两种方案的线粒体的计数评估。每种方法评估了22个细胞。(I) 方案一移植线粒体后，对移植线粒体(su9-mCherry)和宿主线粒体网络(su9-BFP)使用不同的荧光标记进行成像，融合。Scale bar = 5μm。(J) 方案二注入纯化线粒体后移的融合状态，标记方案同(I)。Scale bar = 5 μm。(K) 移植线粒体发生降解，分裂成多个更小的荧光囊泡(su9-mCherry)，荧光与标记的宿主细胞线粒体网络(su9-BFP)没有重叠。Scale bar=5 μm。 (L) 单个移植线粒体的延时图像序列(su9-mCherry)。细胞器供体为HeLa细胞，受体细胞为U2OS细胞，带有荧光标记线粒体网络(su9-BFP)。Scale bar = 10 μm。 讨论单细胞的操纵一直是细胞生物学领域的热点和难点，尤其是在不损害细胞活力的情况下从细胞中提取细胞器或将外源物质直接导入到细胞中。截止到目前，尽管单细胞技术有了较大的发展，但要实现将细胞器从一个细胞移植到另一个细胞，除了更大的卵母细胞外，几乎是不可能实现的。线粒体是细胞中的能量转换的核心，与细胞代谢和信号通路以及细胞命运紧密联系在一起。线粒体含有自身的遗传成分(mtDNA)，通常是严格垂直遗传给子细胞的。目前将线粒体地转移到细胞的手段有限，对于线粒体移植后的剂量-反应关系分析更是十分困难，这样我们就很难从机制上了解健康或疾病细胞的线粒体移植后的生物学效应。本文使用的FluidFM技术采用微型探针，可以在微环境中以高时空分辨率操纵单细胞或者对单个细胞进行采样，并与组学方法相结合，使细胞器的研究成为可能。FluidFM技术将原子力显微镜的高精度力学调节手段与光学检测下的纳米尺度微流控系统相结合，提供与单细胞操作相关的力学和定量的体积控制。这些特性在现有微型探针中是的，在本研究中，作者将FluidFM单细胞技术用于活细胞真核内和细胞间的细胞器微操作。成功实现了活细胞之间的线粒体移植。该研究将启发人们将FluidFM技术应用于更多领域，例如，干细胞治疗中低代谢活性细胞的再生，作为线粒体替代治疗方法的一种备选方案等。此外，FluidFM技术为解决细胞生物学、生物力学和细胞工程等问题提供了新的视角。 多功能单细胞显微操作系统- FluidFM OMNIUM参考文献[1].C. Gäbelein, Q. Feng, E. Sarajlic, T. Zambelli, O. Guillaume-Gentil, B. Kornmann & J. Vorholt. Mitochondria transplantation between living cells. (2021). BioRxiv.

基本信息 关键内容： 流式细胞仪,细胞计数器 开标时间： 2021-11-30 10:00 采购金额： 150.00万元 采购单位： 复旦大学附属儿科医院 采购联系人： 朱老师 采购联系方式： 立即查看 招标代理机构： 上海沪港建设咨询有限公司 代理联系人： 刘未 代理联系方式： 立即查看 详细信息 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪公开招标公告 上海市-徐汇区 状态：公告 更新时间： 2021-11-07 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪公开招标公告 发布日期：2021-11-07 项目概况 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 招标项目的潜在投标人应在上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口）获取招标文件，并于2021年11月30日 10点00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：21工080543（代理机构内部编号） 项目名称：复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 预算金额：150.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：150.0000000 万元（人民币） 采购需求： 1．标的的名称：复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 2．项目基本概况介绍：本项目拟采购流式细胞仪一台，用于细胞分型、细胞凋亡和周期分析、细胞表面抗原的免疫学分析、细胞因子多重分析等，用于血液样本、体液样本、培养细胞样本、组织样本的流式细胞分析。（具体内容及所应达到的具体要求，详见招标文件第三章 技术规格及要求相应规定为准。） 合同履行期限：要求合同生效的90天内交货，到货后以院方通知30天内安装调试完成，并提供至少三年的原厂整机维保。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目面向大、中、小、微型等各类供应商采购。 3.本项目的特定资格要求：3.1具有承接本项目必须具备的资质证明文件（1）投标产品具备国家相关行业主管部门颁发的有效期内的医疗器械注册证（备案凭证）（2）投标人具备与本次招标内容相适应的医疗器械经营许可证（备案凭证），如投标人是投标货物制造厂家，则具备与本次招标内容相适应的医疗器械生产许可证（备案凭证）替代；3.2投标人未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)失信被执行人名单、重大税收违法案件当事人名单和中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)政府采购严重违法失信行为记录名单；3.3投标人与项目参与各方（采购人或代理机构或参与本项目其他的供应商或与之关联单位）不存在控股、管理等利害关系；3.4本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2021年11月08日 至 2021年11月12日，每天上午9:30至11:30，下午13:30至16:30。（北京时间，法定节假日除外） 地点：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 方式：本项目实行网上（以邮件形式）报名，符合条件的单位在获取采购文件时间内将下列有效报名资料彩色扫描后发送至liu331517378@163.com。提交资料审核通过后，按要求缴纳费用并填写信息提交（快递）报名材料至上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口）。招标文件工本费500元/本，售后不退。获取采购文件需提交的资料：1.供应商的证明文件（如：营业执照）（加盖公章的复印件）；2.法定代表人授权书（原件）及被委托人身份证（加盖公章的复印件）；3.“信用中国网”（www.creditchina.gov.cn）信用信息报告（加盖公章）及“中国政府采购网”（www.ccgp.gov.cn）政府采购严重违法失信行为记录（截图并加盖公章），查询显示时间不早于本公告发布之日，若存不良记录需提供完整的处罚信息。以上资料如有缺漏，代理机构将拒绝接受其报名。如需现场报名请先咨询预约招标业务人员，否则不予接待。采购代理机构对报名资料的审验并不作为投标单位资格条件的最终认定，投标单位对报名资料的真实性、有效性负责，原件开标现场备查。评审时仍由评标委员会对投标单位的资格证明材料进行资格审核，不符合招标资格条件的投标单位将被拒绝。 售价：￥500.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2021年11月30日 10点00分（北京时间） 开标时间：2021年11月30日 10点00分（北京时间） 地点：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 鼓励节能、环保政策：在性能、技术、服务等指标同等条件下，优先采购属于国家公布的节能、环保清单中产品。扶持鼓励福利企业政策：在同等条件下优先采购福利企业（提供福利企业证书）的产品和服务。扶持中小企业政策：小型、微型企业产品价格扣除比例：6%。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 如果潜在供应商认为本供应商资格条件或采购内容中存在倾向性或排斥性的内容，可以在投标截止时间10天前以书面形式向上海沪港建设咨询有限公司提出，并附相关证明资料。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：复旦大学附属儿科医院 地址：上海市闵行区万源路399号 联系方式：朱老师 电话021-64932646 2.采购代理机构信息 名 称：上海沪港建设咨询有限公司 地 址：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 联系方式：刘未、褚利18721731902、15901825520 3.项目联系方式 项目联系人：刘未 电 话： 18721731902 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：2021-11-30 10:00 预算金额：150.00万元 采购单位：复旦大学附属儿科医院 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：上海沪港建设咨询有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪公开招标公告 上海市-徐汇区 状态：公告 更新时间： 2021-11-07 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪公开招标公告 发布日期：2021-11-07 项目概况 复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 招标项目的潜在投标人应在上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口）获取招标文件，并于2021年11月30日 10点00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：21工080543（代理机构内部编号） 项目名称：复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 预算金额：150.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：150.0000000 万元（人民币） 采购需求： 1．标的的名称：复旦大学附属儿科医院流式细胞仪 2．项目基本概况介绍：本项目拟采购流式细胞仪一台，用于细胞分型、细胞凋亡和周期分析、细胞表面抗原的免疫学分析、细胞因子多重分析等，用于血液样本、体液样本、培养细胞样本、组织样本的流式细胞分析。（具体内容及所应达到的具体要求，详见招标文件第三章 技术规格及要求相应规定为准。） 合同履行期限：要求合同生效的90天内交货，到货后以院方通知30天内安装调试完成，并提供至少三年的原厂整机维保。 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 本项目面向大、中、小、微型等各类供应商采购。 3.本项目的特定资格要求：3.1具有承接本项目必须具备的资质证明文件（1）投标产品具备国家相关行业主管部门颁发的有效期内的医疗器械注册证（备案凭证）（2）投标人具备与本次招标内容相适应的医疗器械经营许可证（备案凭证），如投标人是投标货物制造厂家，则具备与本次招标内容相适应的医疗器械生产许可证（备案凭证）替代；3.2投标人未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)失信被执行人名单、重大税收违法案件当事人名单和中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)政府采购严重违法失信行为记录名单；3.3投标人与项目参与各方（采购人或代理机构或参与本项目其他的供应商或与之关联单位）不存在控股、管理等利害关系；3.4本项目不接受联合体投标。 三、获取招标文件 时间：2021年11月08日 至 2021年11月12日，每天上午9:30至11:30，下午13:30至16:30。（北京时间，法定节假日除外） 地点：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 方式：本项目实行网上（以邮件形式）报名，符合条件的单位在获取采购文件时间内将下列有效报名资料彩色扫描后发送至liu331517378@163.com。提交资料审核通过后，按要求缴纳费用并填写信息提交（快递）报名材料至上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口）。招标文件工本费500元/本，售后不退。获取采购文件需提交的资料：1.供应商的证明文件（如：营业执照）（加盖公章的复印件）；2.法定代表人授权书（原件）及被委托人身份证（加盖公章的复印件）；3.“信用中国网”（www.creditchina.gov.cn）信用信息报告（加盖公章）及“中国政府采购网”（www.ccgp.gov.cn）政府采购严重违法失信行为记录（截图并加盖公章），查询显示时间不早于本公告发布之日，若存不良记录需提供完整的处罚信息。以上资料如有缺漏，代理机构将拒绝接受其报名。如需现场报名请先咨询预约招标业务人员，否则不予接待。采购代理机构对报名资料的审验并不作为投标单位资格条件的最终认定，投标单位对报名资料的真实性、有效性负责，原件开标现场备查。评审时仍由评标委员会对投标单位的资格证明材料进行资格审核，不符合招标资格条件的投标单位将被拒绝。 售价：￥500.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2021年11月30日 10点00分（北京时间） 开标时间：2021年11月30日 10点00分（北京时间） 地点：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 鼓励节能、环保政策：在性能、技术、服务等指标同等条件下，优先采购属于国家公布的节能、环保清单中产品。扶持鼓励福利企业政策：在同等条件下优先采购福利企业（提供福利企业证书）的产品和服务。扶持中小企业政策：小型、微型企业产品价格扣除比例：6%。监狱企业、残疾人福利性单位视同小型、微型企业。 如果潜在供应商认为本供应商资格条件或采购内容中存在倾向性或排斥性的内容，可以在投标截止时间10天前以书面形式向上海沪港建设咨询有限公司提出，并附相关证明资料。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：复旦大学附属儿科医院 地址：上海市闵行区万源路399号 联系方式：朱老师 电话021-64932646 2.采购代理机构信息 名 称：上海沪港建设咨询有限公司 地 址：上海市徐汇区斜土路2358号（车行入口）斜土路2364号（人行入口） 联系方式：刘未、褚利18721731902、15901825520 3.项目联系方式 项目联系人：刘未 电 话： 18721731902

（杭州，2011年5月16日讯）－－迅数科技，中国领先的微生物检测技术和仪器供应商，日前发布了其创新的“迅数__Algacount微囊藻细胞计数分析”模块，并宣布将其整合进入倍受赞誉的“迅数__Algacount藻类智能鉴定计数仪”，致力于解决广大藻类监测机构的“微囊藻细胞计数”难题。 水体中“微囊藻密度”监测数据将为有毒藻华的预警提供关键的第一手资料，并指导人们控制和去除微囊藻毒素的发生风险。微囊藻细胞产生的微囊藻毒素(Microcystin：简称MCYST，MC)直接存在于饮用水和娱乐用水（游泳池、游乐场等）中，严重威胁人类的健康。近年来，中国水体富营养化引起的蓝藻水华频发，水华藻类的优势种群就是能产生微囊藻毒素的微囊藻。 “微囊藻细胞计数”可更科学的反映准确的“微囊藻密度”，然而该类藻由于内部包含的细胞数量很多，人工计数十分困难。 当前，“微囊藻密度计数”方法分为个体计数法和细胞计数法两种。由于生物个体存在差异，特别是集群的微囊藻，不同个体间细胞数差异非常大，能达到几百甚至上千倍，所以通常采用细胞计数法，以便更科学地确定藻类的生长状况。 “Algacount微囊藻细胞计数分析”模块是迅数科技专门针对于微囊藻等团状结构藻类的“细胞计数”难题而研究开发。“微囊藻细胞计数”法通常用浮游植物计数框在光学显微镜下肉眼观察并人工计数，此法较费时，计数误差也较大。因为自然水体生长的微囊藻都是群体生长，有公共的粘液层包围着，都是成千上万的细胞聚集在一起，这给微囊藻细胞计数带来了很大困难。 “Algacount微囊藻细胞计数分析”模块由“团状藻结构分析”软件模块和“团状藻细胞统计流程自动化”软件模块组成。“团状藻结构分析”软件模块具有“微囊藻”等团状结构藻类的“内含细胞数”自动分析功能。“团状藻细胞统计流程自动化”软件模块包括了专利的细胞统计流程设计：“将藻类图象通过CCD光电传感器转换为数字图像－输入计算机处理器－自动分析出含有细胞的团状藻实体部分－选择其中的典型细胞为基本单位、团状藻结构分析软件即自动计算出所含藻细胞个数”。引入该分析模块，将极大的方便藻类工作者进行多细胞藻类的统计与分析。据悉，该项技术已先期服务于长江三峡库区等中国重要淡水湖库的藻类监测事业。 控制微囊藻毒素的生物安全危害刻不容缓！世界卫生组织（ World Health Organization：简称WHO）关于微囊藻毒素的一项全球医学研究发现：人们在洗澡、游泳及其他水上休闲和运动时，皮肤接触含藻毒素水体可引起敏感部位(如眼睛)和皮肤过敏；少量喝入可引起急性肠胃炎；长期饮用则可能引发肝癌，是强烈促癌剂。已证明某些地区的肝癌高发率与饮用水源中的水华大量发生有关，部分国家还先后报道了多起因藻毒素污染导致人群、家畜、鱼类患病甚至死亡的事件。 迅数科技开发的“Algacount微囊藻细胞计数分析”创新技术，将帮助各藻类监测机构更加快速准确的进行“微囊藻”监测和早期预测并控制“微囊藻毒素”危害，保障人民的健康与生命安全！

1. ADAM能否用于细胞增殖实验分析？ 答：ADAM细胞活力分析与计数仪的专长在于能够进行精确的细胞计数和活力分析。对于在24孔板中进行的实验，如果计数的次数不是太多，就可以考虑使用ADAM来做；而对于那些需要用96孔板来做通量分析的实验，因为每孔细胞的数量太小，细胞计数法已不再适用，因此，还是建议使用酶标仪来做。 如，2012发表的一篇文章《Ethanol extract of Gleditsia sinensis thorn suppresses angiogenesis in vitro and in vivo》使用ADAM做了皂角刺的乙醇提取物对人脐静脉内皮细胞的增殖影响分析。 再如，2012发表的另一篇文章《Metronomic Ceramide Analogs Inhibit Angiogenesis in Pancreatic Cancer through Up-regulation of Caveolin-1 and Thrombospondin-1 and Down regulation of Cyclin D1》则使用ADAM做了四种不同类型的神经酰胺类似物抗肿瘤药物分别对两个人内皮细胞系和两个胰腺癌细胞系细胞的增殖影响分析。2．ADAM能否用于其它非哺乳类细胞的计数？ 答：ADAM细胞活力分析与计数仪通常用于哺乳类动物细胞的计数，当然您也可以尝试用在其它非哺乳类细胞上面。 如，2012年发表的一篇文章《Osteoblast and osteoclast behavior in zebrafish cultured scales》则首次报道了使用ADAM计数斑马鱼鱼鳞细胞，为ADAM的应用范围作出了积极的拓展。（斑马鱼鱼鳞细胞的制备：取成年斑马鱼（6月龄）的体侧鱼鳞，用胶原酶消化后，收集鱼鳞细胞。）更多产品信息请浏览：http://www.biomart.cn/infosupply/10050648.htm

详细信息 山东大学12色多功能流式细胞分析仪（第二次）竞争性磋商公告 山东省-济南市-历下区 状态：公告 更新时间： 2023-09-03 项目概况 山东大学12色多功能流式细胞分析仪采购项目的潜在供应商应在山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27层招标三部获取采购文件，并于2023年09月15日09点00分（北京时间）前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号：SDJDHF20230261-Z120/HYHA2023-1661 项目名称：山东大学12色多功能流式细胞分析仪 采购方式：竞争性磋商 预算金额：149.9000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：149.9000000 万元（人民币） 采购需求： 采购12色多功能流式细胞分析仪，具体详见采购文件“第四章 采购内容及项目要求” 合同履行期限：详见采购文件 本项目(不接受)联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无； 3.本项目的特定资格要求：1）在“信用中国”、中国政府采购网网站中被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商，不得参加本次政府采购活动；2）单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下（同一包号）的政府采购活动；3）所投产品为进口设备的，供应商需提供针对此项目的产品授权书。（授权可追溯） 三、获取采购文件 时间：2023年09月04日至2023年09月08日，每天上午8:30至11:30，下午13:00至16:30。（北京时间，法定节假日除外） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27层招标三部 方式：第一步：供应商在海逸恒安项目管理有限公司网站上录入单位名称、联系人及电话等信息； 链接：http://www.sdhyha.cn/qpoaweb/prg/gys/baoming.aspx?id=35703giVs 第二步：将采购文件工本费网银汇款截图或银行电汇凭证扫描件（备注供应商名称），发送至xiangyihan@sdhyha.com邮箱。开户单位名称：海逸恒安项目管理有限公司；开户银行：中信银行济南龙奥支行；账号：8112501013101275518；联系电话：0531-82667533；注：本项目实行资格后审，获取采购文件成功不代表资格后审的通过。 售价：￥300.0 元（人民币） 四、响应文件提交 截止时间：2023年09月15日09点00分（北京时间） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场6号楼26层2603会议室 五、开启 时间：2023年09月15日 09点00分（北京时间） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场6号楼26层2603会议室 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 1.技术参数参考附件，实际以采购文件为准； 2.本采购项目允许进口产品参与报价。 八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称：山东大学 地址：山东大学中心校区明德楼 联系方式：马老师0531-88369797 2.采购代理机构信息 名称：海逸恒安项目管理有限公司 地址：山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27楼招标三部 联系方式：陈晓楠、向忆寒0531-82667533、18780039059 3.项目联系方式 项目联系人：陈晓楠、向忆寒 电话：0531-82667533、18780039059 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：null 预算金额：149.90万元 采购单位：山东大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：海逸恒安项目管理有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 山东大学12色多功能流式细胞分析仪（第二次）竞争性磋商公告 山东省-济南市-历下区 状态：公告 更新时间： 2023-09-03 项目概况 山东大学12色多功能流式细胞分析仪采购项目的潜在供应商应在山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27层招标三部获取采购文件，并于2023年09月15日09点00分（北京时间）前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号：SDJDHF20230261-Z120/HYHA2023-1661 项目名称：山东大学12色多功能流式细胞分析仪 采购方式：竞争性磋商 预算金额：149.9000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：149.9000000 万元（人民币） 采购需求： 采购12色多功能流式细胞分析仪，具体详见采购文件“第四章 采购内容及项目要求” 合同履行期限：详见采购文件 本项目(不接受)联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无； 3.本项目的特定资格要求：1）在“信用中国”、中国政府采购网网站中被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商，不得参加本次政府采购活动；2）单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下（同一包号）的政府采购活动；3）所投产品为进口设备的，供应商需提供针对此项目的产品授权书。（授权可追溯） 三、获取采购文件 时间：2023年09月04日至2023年09月08日，每天上午8:30至11:30，下午13:00至16:30。（北京时间，法定节假日除外） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27层招标三部 方式：第一步：供应商在海逸恒安项目管理有限公司网站上录入单位名称、联系人及电话等信息； 链接：http://www.sdhyha.cn/qpoaweb/prg/gys/baoming.aspx?id=35703giVs 第二步：将采购文件工本费网银汇款截图或银行电汇凭证扫描件（备注供应商名称），发送至xiangyihan@sdhyha.com邮箱。开户单位名称：海逸恒安项目管理有限公司；开户银行：中信银行济南龙奥支行；账号：8112501013101275518；联系电话：0531-82667533；注：本项目实行资格后审，获取采购文件成功不代表资格后审的通过。 售价：￥300.0 元（人民币） 四、响应文件提交 截止时间：2023年09月15日09点00分（北京时间） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场6号楼26层2603会议室 五、开启 时间：2023年09月15日 09点00分（北京时间） 地点：山东省济南市历下区华润置地广场6号楼26层2603会议室 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 1.技术参数参考附件，实际以采购文件为准； 2.本采购项目允许进口产品参与报价。 八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称：山东大学 地址：山东大学中心校区明德楼 联系方式：马老师0531-88369797 2.采购代理机构信息 名称：海逸恒安项目管理有限公司 地址：山东省济南市历下区华润置地广场A5-6号楼27楼招标三部 联系方式：陈晓楠、向忆寒0531-82667533、18780039059 3.项目联系方式 项目联系人：陈晓楠、向忆寒 电话：0531-82667533、18780039059

详细信息 复旦大学附属华山医院多色流式细胞分析仪公开招标公告 上海市-普陀区 状态：公告 更新时间： 2022-07-03 复旦大学附属华山医院多色流式细胞分析仪公开招标公告 2022年07月03日 09:53 公告信息： 采购项目名称 多色流式细胞分析仪 品目 货物/专用设备/医疗设备/临床检验设备 采购单位 复旦大学附属华山医院 行政区域 上海市 公告时间 2022年07月03日 09:53 获取招标文件时间 2022年07月03日至2022年07月08日每日上午:9:00 至 12:00 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥800 获取招标文件的地点 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室 开标时间 2022年07月27日 09:30 开标地点 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦10楼多功能厅 预算金额 ￥280.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 孙瑞强、应贇豪 项目联系电话 021-32557738、32557809 采购单位 复旦大学附属华山医院 采购单位地址 上海市静安区乌鲁木齐中路12号 采购单位联系方式 曹燕 021-52889999 代理机构名称 上海机电设备招标有限公司 代理机构地址 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼 代理机构联系方式 孙瑞强、应贇豪，021-32557738、32557809，电子邮箱：srq@shbid.com 项目概况 多色流式细胞分析仪 招标项目的潜在投标人应在上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室获取招标文件，并于2022年07月27日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：0613-227123072103 项目名称：多色流式细胞分析仪 预算金额：280.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：280.0000000 万元（人民币） 采购需求： 多色流式细胞分析仪 1套，配置3根固体激光器： 405nm，488nm，640nm，3个激光孔，快轴平顶光束技术以及慢轴上高度优化的窄光束技术。 合同履行期限：合同签订后90日内指定地点交货 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： / 3.本项目的特定资格要求：3.1投标人未被“信用中国网站”（www.creditchina.gov.cn）列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单或政府采购严重违法失信名单。3.2在投标截止时间前三年内投标人或其单位负责人、拟委任的项目负责人无行贿犯罪行为的。3.3与本项目招标代理机构的负责人为同一人或者存在直接控股和管理关系的供应商不得参加本次政府采购活动。3.4单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人，不得同时参加同一包件的投标或者未划分包件的同一招标项目的投标。3.5为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本次政府采购活动。3.6本项目非专门面向中小企业采购。3.7本项目接受进口产品投标（进口产品指源产地来自中华人民共和国境外的产品） 三、获取招标文件 时间：2022年07月03日 至 2022年07月08日，每天上午9:00至12:00，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室 方式：疫情期间建议汇款购买，在汇款附言中注明：“227123072103标书款”，请购标人在“获取招标文件期间内”将汇款凭证、开票信息、联系方式，通过电子邮件方式提交至srq@shbid.com 售价：￥800.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年07月27日 09点30分（北京时间） 开标时间：2022年07月27日 09点30分（北京时间） 地点：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦10楼多功能厅 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本次招标执行优先采购节能产品、鼓励环保产品、支持中小微企业、促进残疾人就业、支持监狱和戒毒企业、扶持不发达地区和少数民族地区等相关政策。2.收款人账户信息如下：开 户 名：上海机电设备招标有限公司开 户 行：建行上海市分行营业部帐 号：31001550400055646341行 号：105290036005投标人须保证获得招标文件需提交的资料和所填写内容真实、完整、有效、一致，如因投标人递交虚假材料或填写信息错误导致的与本项目有关的任何损失由投标人承担。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：复旦大学附属华山医院 地址：上海市静安区乌鲁木齐中路12号 联系方式：曹燕 021-52889999 2.采购代理机构信息 名 称：上海机电设备招标有限公司 地 址：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼 联系方式：孙瑞强、应贇豪，021-32557738、32557809，电子邮箱：srq@shbid.com 3.项目联系方式 项目联系人：孙瑞强、应贇豪 电 话： 021-32557738、32557809 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：2022-07-27 09:30 预算金额：280.00万元 采购单位：复旦大学附属华山医院 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：上海机电设备招标有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 复旦大学附属华山医院多色流式细胞分析仪公开招标公告 上海市-普陀区 状态：公告 更新时间： 2022-07-03 复旦大学附属华山医院多色流式细胞分析仪公开招标公告 2022年07月03日 09:53 公告信息： 采购项目名称 多色流式细胞分析仪 品目 货物/专用设备/医疗设备/临床检验设备 采购单位 复旦大学附属华山医院 行政区域 上海市 公告时间 2022年07月03日 09:53 获取招标文件时间 2022年07月03日至2022年07月08日每日上午:9:00 至 12:00 下午:13:00 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 招标文件售价 ￥800 获取招标文件的地点 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室 开标时间 2022年07月27日 09:30 开标地点 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦10楼多功能厅 预算金额 ￥280.000000万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 孙瑞强、应贇豪 项目联系电话 021-32557738、32557809 采购单位 复旦大学附属华山医院 采购单位地址 上海市静安区乌鲁木齐中路12号 采购单位联系方式 曹燕 021-52889999 代理机构名称 上海机电设备招标有限公司 代理机构地址 上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼 代理机构联系方式 孙瑞强、应贇豪，021-32557738、32557809，电子邮箱：srq@shbid.com 项目概况 多色流式细胞分析仪 招标项目的潜在投标人应在上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室获取招标文件，并于2022年07月27日 09点30分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：0613-227123072103 项目名称：多色流式细胞分析仪 预算金额：280.0000000 万元（人民币） 最高限价（如有）：280.0000000 万元（人民币） 采购需求： 多色流式细胞分析仪 1套，配置3根固体激光器： 405nm，488nm，640nm，3个激光孔，快轴平顶光束技术以及慢轴上高度优化的窄光束技术。 合同履行期限：合同签订后90日内指定地点交货 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： / 3.本项目的特定资格要求：3.1投标人未被“信用中国网站”（www.creditchina.gov.cn）列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单或政府采购严重违法失信名单。3.2在投标截止时间前三年内投标人或其单位负责人、拟委任的项目负责人无行贿犯罪行为的。3.3与本项目招标代理机构的负责人为同一人或者存在直接控股和管理关系的供应商不得参加本次政府采购活动。3.4单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同投标人，不得同时参加同一包件的投标或者未划分包件的同一招标项目的投标。3.5为本项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商不得参加本次政府采购活动。3.6本项目非专门面向中小企业采购。3.7本项目接受进口产品投标（进口产品指源产地来自中华人民共和国境外的产品） 三、获取招标文件 时间：2022年07月03日 至 2022年07月08日，每天上午9:00至12:00，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼1606室 方式：疫情期间建议汇款购买，在汇款附言中注明：“227123072103标书款”，请购标人在“获取招标文件期间内”将汇款凭证、开票信息、联系方式，通过电子邮件方式提交至srq@shbid.com 售价：￥800.0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年07月27日 09点30分（北京时间） 开标时间：2022年07月27日 09点30分（北京时间） 地点：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦10楼多功能厅 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.本次招标执行优先采购节能产品、鼓励环保产品、支持中小微企业、促进残疾人就业、支持监狱和戒毒企业、扶持不发达地区和少数民族地区等相关政策。2.收款人账户信息如下：开 户 名：上海机电设备招标有限公司开 户 行：建行上海市分行营业部帐 号：31001550400055646341行 号：105290036005投标人须保证获得招标文件需提交的资料和所填写内容真实、完整、有效、一致，如因投标人递交虚假材料或填写信息错误导致的与本项目有关的任何损失由投标人承担。 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：复旦大学附属华山医院 地址：上海市静安区乌鲁木齐中路12号 联系方式：曹燕 021-52889999 2.采购代理机构信息 名 称：上海机电设备招标有限公司 地 址：上海市普陀区长寿路285号恒达大厦16楼 联系方式：孙瑞强、应贇豪，021-32557738、32557809，电子邮箱：srq@shbid.com 3.项目联系方式 项目联系人：孙瑞强、应贇豪 电 话： 021-32557738、32557809

基本信息 关键内容： 流式细胞仪,细胞计数器 开标时间： 2021-09-24 09:00 采购金额： 400.50万元 采购单位： 湖南大学 采购联系人： 彭老师 采购联系方式： 立即查看 招标代理机构： 湖南建业管理咨询有限公司 代理联系人： 周磊 代理联系方式： 立即查看 详细信息 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目公开招标公告 湖南省-长沙市-雨花区 状态：公告 更新时间： 2021-09-19 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目公开招标公告 项目概况 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目招标项目的潜在投标人应在湖南建业管理咨询有限公司(长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座1011室)获取招标文件，并于2021年9月24日 09点00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：JYCZ202101188 项目名称：湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目 预算金额：400.5万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 采购项目预算（万元人民币） 一 流式细胞分析系统 1台 80 二 低能电子衍射仪 1台 25 三 实验室通风改造及废气治理系统 1批 41.5 四 多通道激光环幕系统 1套 47 五 细胞平台承载设备 1批 61 六 深地工程土箱及加载系统 1套 55 七 热压罐 1台 25 八 排布机 1台 31 九 快速弛豫分析仪 1台 35 注：本次采购活动将按包划分来确定中标供应商。投标人可分别对以上包号进行投标，但不得拆分包号内所包含的所有内容，否则投标将被拒绝。 合同履行期限：按各包合同约定执行。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： （1）强制采购：政府采购实行强制采购的节能产品 （2）优先采购：政府采购鼓励采购节能产品、环境标志产品 （3）价格评审优惠：政府采购促进小微企业发展（包括政府采购支持监狱企业发展、政府采购促进残疾人就业） 3.本项目的特定资格要求：无。 三、获取招标文件 时间：2021年9月3日至2021年9月10日，每天上午08:30至12:00，下午14:30至17:00（北京时间，法定节假日除外） 地点：湖南建业管理咨询有限公司（长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座1011室） 方式：现场购买，投标人在购买招标文件时须持法定代表人授权委托书、个人身份证、现金或公对公转账方式购买招标文件，并注明联系方式、邮箱号码及所投包号，招标文件售后不退。 售价：400元/套 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 时间：2021年9月24日09点00分（北京时间） 地点：湖南大学招标与采购中心101室（长沙市岳麓区潇湘中路和天马路交汇处，天麓大酒店斜对面） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 招标文件费、采购代理服务费汇款账户： 开户名称: 湖南建业管理咨询有限公司 开 户 行：长沙银行股份有限公司高升路支行 银行账号： 800 315 699 802010 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系 1.采购人信息 名称：湖南大学 地址：湖南省长沙市岳麓区麓山南路 联系方式：彭老师、周老师 0731-88821512 2.采购代理机构信息 名称：湖南建业管理咨询有限公司 地址：长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座10楼 联系方式：周磊、李小梅、张维 0731-84452348、84455989 3.项目联系方式 项目联系人：周磊、李小梅、张维 电话：0731-84452348、84455989 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：2021-09-24 09:00 预算金额：400.50万元 采购单位：湖南大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：湖南建业管理咨询有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目公开招标公告 湖南省-长沙市-雨花区 状态：公告 更新时间： 2021-09-19 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目公开招标公告 项目概况 湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目招标项目的潜在投标人应在湖南建业管理咨询有限公司(长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座1011室)获取招标文件，并于2021年9月24日 09点00分（北京时间）前递交投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：JYCZ202101188 项目名称：湖南大学JY-2021005货物及服务采购项目 预算金额：400.5万元（人民币） 采购需求： 包号 货物名称 数量 采购项目预算（万元人民币） 一 流式细胞分析系统 1台 80 二 低能电子衍射仪 1台 25 三 实验室通风改造及废气治理系统 1批 41.5 四 多通道激光环幕系统 1套 47 五 细胞平台承载设备 1批 61 六 深地工程土箱及加载系统 1套 55 七 热压罐 1台 25 八 排布机 1台 31 九 快速弛豫分析仪 1台 35 注：本次采购活动将按包划分来确定中标供应商。投标人可分别对以上包号进行投标，但不得拆分包号内所包含的所有内容，否则投标将被拒绝。 合同履行期限：按各包合同约定执行。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： （1）强制采购：政府采购实行强制采购的节能产品 （2）优先采购：政府采购鼓励采购节能产品、环境标志产品 （3）价格评审优惠：政府采购促进小微企业发展（包括政府采购支持监狱企业发展、政府采购促进残疾人就业） 3.本项目的特定资格要求：无。 三、获取招标文件 时间：2021年9月3日至2021年9月10日，每天上午08:30至12:00，下午14:30至17:00（北京时间，法定节假日除外） 地点：湖南建业管理咨询有限公司（长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座1011室） 方式：现场购买，投标人在购买招标文件时须持法定代表人授权委托书、个人身份证、现金或公对公转账方式购买招标文件，并注明联系方式、邮箱号码及所投包号，招标文件售后不退。 售价：400元/套 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 时间：2021年9月24日09点00分（北京时间） 地点：湖南大学招标与采购中心101室（长沙市岳麓区潇湘中路和天马路交汇处，天麓大酒店斜对面） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 招标文件费、采购代理服务费汇款账户： 开户名称: 湖南建业管理咨询有限公司 开 户 行：长沙银行股份有限公司高升路支行 银行账号： 800 315 699 802010 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系 1.采购人信息 名称：湖南大学 地址：湖南省长沙市岳麓区麓山南路 联系方式：彭老师、周老师 0731-88821512 2.采购代理机构信息 名称：湖南建业管理咨询有限公司 地址：长沙市雨花区时代阳光大道西388号轻盐阳光CEO大厦A座10楼 联系方式：周磊、李小梅、张维 0731-84452348、84455989 3.项目联系方式 项目联系人：周磊、李小梅、张维 电话：0731-84452348、84455989

上海纬冉科技推出创新仪器——纬冉科技I500细胞计数仪一、仪器创新点：●快速便捷：单个计数只需20秒，多个样本一次性计数，节约时间。●准确高效：设备通过严格的质量控制，保证每次使用的可靠性。用户友好型设计，操作简单一目了然，结果易读。●参数全面：细胞密度（总细胞、活细胞、死细胞）、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径。●可靠易操作：先进的计数算法，可以区分聚团细胞和各种类型的细胞，使得计数结果更加精确。CI500细胞计数仪是一款高效、准确、易操作、可靠的细胞计数工具。基于台盼蓝染色法，整合先进的图像分析技术，在节约时间的同时，准确地计算出细胞数量，配备数据和图像存储功能，帮助您更好地了解细胞状态的变化趋势。二、仪器适用领域：仪器适用于生物、医学、农业等多个领域，为您的研究和实验带来很大的帮助。纬冉科技了解可靠结果对您的研究的重要性，对产品实施严格的质量控制流程，确保仪器始终提供可靠和一致的结果三、仪器参数：主要指标参数计数时间20秒计数板载量多个样本一次性计数，节约时间数据输出细胞密度(总细胞，活细胞，死细胞）、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径四、仪器创新点：●快速便捷：单个计数只需20秒，多个样本一次性计数，节约时间。●准确高效：设备通过严格的质量控制，保证每次使用的可靠性。用户友好型设计，操作简单一目了然，结果易读。●参数全面：细胞密度（总细胞、活细胞、死细胞）、细胞图像、细胞活率、细胞圆度、细胞聚团率、细胞平均直径。●可靠易操作：先进的计数算法，可以区分聚团细胞和各种类型的细胞，使得计数结果更加精确。五、仪器使用流程：●加入混合台盼蓝的细胞悬液。●将计数板插入检测口。●旋转挡位旋钮，选择样本。●软件输出计数结果。▍仪器软件介绍：●纬冉CI500细胞计数仪为用户提供从细胞计数、分析、数据管理到输出的整套解决方案。软件界面简洁、操作简单、输出参数全面，结合全自动化的设计，实现了生物制药和科研领域中细胞计数和活率的快速、准确、标准化分析。●软件默认存储数据和图片，便于溯源统计，掌握细胞变化趋势。●支持查看导出数据与图像，进行数据分析和文献发表。如您对细胞计数仪的仪器感兴趣，可通过仪器信息网400-860-5168转6056联系我们！

亲，计数仪还在花钱买？你out了~Countstar细胞计数仪免费用活动内容： 为了让更多的客户体验Countstar细胞计数仪带来的高效与便捷，特推出此次优惠活动，只要您在定期内使用Countstar细胞计数板达到规定数量，就免费提供一台Countstar细胞计数仪供您使用。 凡向公司申请者均可获得免费一周的仪器试用机会，您可根据试用效果决定是否申请长期免费使用。申请者需与公司签订使用协议。在免费使用期间，公司会保证仪器持续、稳定的运行。当您累计使用的耗材量达到规定的最低检测量时，仪器可免费赠送！ 活动时间：3月1日至3月31日活动时间有限赶快拿起电话申请吧！艾力特国际贸易有限公司电话：021-62297958　62299622　62290336传真：传真：021-62299650邮箱：liyanlin@alit.com.cnCountstar全自动细胞计数仪概述： Countstar全自动细胞计数仪是一款基于经典的台盼蓝染色法，整合先进的光学成像技术和智能图像识别技术的细胞计数仪。其强大的分析软件系统集基础计数功能，细胞形态分析，细胞统计图表分析和数据管理功能于一体。1. 准确快速的基础计数功能：应用高分辨率，自动光学对焦，多视野分析及高统计抽样量等多重技术保证计数结果的准确性和重复性。2. 创新的聚团细胞校正功能：针对普通细胞及易结团细胞，预设不同模式，创新式的针对易结团细胞的具有聚团细胞校正功能。3. 严谨的人工修正杂质功能：可在软件分析的基础上人工去除杂质异物引起的结果偏差。4. 一站式数据统计分析功能：具有细胞增殖曲线（CTC），细胞直径分布图，细胞结团分布图，各统计图的叠加分析。5. 灵活多样的数据输出功能：Countstar提供客观严谨形式多样的实验数据输出报告支持PDF, EXCEL,JPG输出。6. 先进的数据安全保护功能：配备软件操作安全密钥，软件系统设置用户登录权限并且对所有实验结果自动存储。技术特点： 1. 快速准确的自动化检测：20秒钟, 20ul样本------快速精准的满足您实验需求。2. 宽泛的样本检测范围：测量浓度范围：1× 104&mdash 3× 107/ml；直径范围：5-180µ m，可检测各种传代细胞及原代细胞，干细胞，藻类，浮游生物，酵母细胞，白细胞等。3. 卓越的专业级自动优化成像系统：专业级520万高像素光学成像，大拍摄面积，多视野成像，高统计抽样量 ，实时显示细胞图像，自动过滤图像背景。无需人工调焦, 摒除人工调节焦距的误差，减少人工操作的繁冗步骤4. 经济节约的配套耗材成本：每个样品测量盘可检测5个样品，提供实验结果的平行性及可重复性检测，最大化的为您节约实验耗材成本。5. 一键式便捷操作：体积精巧，无需专人维护，全程电脑控制，配备硬件密钥，完美进行操作监控及数据分析。检测结果： 细胞浓度(总细胞，活细胞，死细胞）、细胞存活率（台盼兰染色）、细胞平均直径、细胞圆度、细胞聚团率、细胞直径分布图 、细胞增长曲线及统计曲线叠加。

时间：2018年11月29日 19:30 - 20:30内容简介：在特异的组织或细胞群中，实际存在大量的细胞类型，且每种细胞类型拥有大相径庭的细胞谱系和功能。而由这些细胞有机构成的组织、器官和生物个体或微生物群落，才是发挥完整的生物学功能的基础。单细胞研究（Single-cell Analysis）作为一种系统生物学研究方法，可以弥补传统方法存在的缺陷，在单细胞水平对生物信息进行解析。流式单细胞分选技术由于其高通量、多参数、低成本等特性一直作为单细胞分离的 zui jia 方法。本讲座给大家介绍了流式单细胞分选的上下游连接以及分选中主要注意环节。主讲人简介：宋兴辉浙江大学医学院公共技术平台副主任浙江大学医学院公共技术平台副主任，主持课题多项，曾在国内外期刊上发表多篇文章

1973年，BD公司与美国斯坦福大学合作，研制开发并生产了世界第一台商用流式细胞仪FACSⅠ 1979年，北京师范大学引进了中国第一台流式细胞仪(FACS Ⅲ) 1983年河北肿瘤研究所引进了中国第一台分选型流式细胞仪(FACS420)……　　追溯历史，流式细胞仪走过了42年的发展历程(1973-2015)，在这四十多年的发展历程中，流式细胞仪器在结构上发生了一系列的演变：由简单到复杂、由单激光到多激光、由单色到多色、由分析到分选、由空气激发到石英杯激发、由标配型到特殊定制型等。总体来说，流式细胞仪的硬件发展远超科研发展需要，但应用技术相对滞后。　　在第八届中国生命科学公共平台管理与发展研讨会的流式细胞仪技术论坛上，北京大学医学部分析仪器中心细胞室吴后男主任不仅介绍了流式细胞仪的发展历程，还指出了未来的发展趋势。据其介绍，未来流式细胞仪趋向于多色标记、多参数、更精细、微观指标观察、稀有细胞或多功能特性细胞的研究，向高难度、挑战性技术迈进。　　而据第三军医大学医学分析测试中心万瑛教授介绍，多色流式(Multi-color Flow Cytometry)指同时使用多种(四色以上)颜色荧光标记的流式检测与分析，该技术是随着新荧光分子的不断问世和流式细胞仪分析参数的增加而出现的，是目前实现多参数细胞表型检测的主要手段。　　不过，传统的流式技术主要基于对荧光发射光谱的检测，但荧光基团发射光谱一般比较宽，其间往往会发生重叠。不仅限制了检测通道的数量(20个)，还会带来严重的串色问题，很多通道的信号需要复杂的补偿计算。　　为了解决这些问题，最新的质谱流式细胞术(CyTOF)应运而生。据万瑛介绍，传统的流式技术主要使用各种荧光基团作为抗体的标签，使用激光器和光电倍增管作为检测手段，而CyTOF用金属元素偶联抗体作为标记手段，以ICP质谱为检测手段，通过这些改进，质谱流式技术巧妙的实现了更多参数的检测。总体来说，CyTOF具有很多优势：通道多，通道数110个，检测范围88-210Da 无漏光，通道间相互影响小于0.3%，无需计算补偿 背景低，标记元素在细胞内含量极低(1原子/细胞)等。不过，目前国内的CyTOF产品还比较少。　　大家都知道，最近的诺贝尔医学奖给了两位干细胞研究者，John Gurdon和Shinya Yamanaka，以奖励他们在干细胞研究和体细胞重编程领域的卓越贡献，而流式细胞术天生就是在临床和研究领域分析、鉴定和分离干细胞和祖细胞的理想工具。近20年来，随着流式细胞仪及其检测技术的日臻完善，样品制备、细胞标记、软件开发等方面不断获得新突破，使得流式细胞仪已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作，成为细胞分选，细胞周期分析，DNA倍体测定，免疫活性细胞分型纯化，血细胞分型分类，药物在细胞中的分布，细胞凋亡等工作中重要的研究工具。　　从仪器类型上来说，目前市面上销售的主要是两种流式细胞仪，一种是分析式流式细胞仪，细胞样本经这种仪器分析后最终进入废液桶，不能回收利用 另一种是分选型流式细胞仪，它既能进行流式分析，还能对分析的目的细胞进行分选。总体来说，市场上分析型的产品多于分选型。　　相关调研报告预计，2012年全球流式细胞仪的市场为30亿美元，预计2020年市场规模将达到65亿美元，2012到2020年间复合年增长率为30.9%。而据相关网站预计，2016年我国流式细胞仪发展规模将达到7.1亿元，市场主要被BD和Beckman两家企业占领。第八届中国生命科学公共平台管理与发展研讨会的流式细胞仪技术论坛现场撰稿：叶建

作为现代生物学实验室的&ldquo 基石&ldquo 技术，细胞培养方法和试剂的改变，可能比其他领域发生的更为缓慢。但是这并不意味着来年在细胞培养和分析领域不会发生什么惊人的进展。为了找出这些可能发生的进展，BioTechniques的编辑对来年的细胞培养和分析进行了大胆的预测。　　1. 细胞的3D生物打印。把它看作是下一个十年的细胞培养。长久以来，我们一直在讨论，在各种惰性材料制成的3D支架上种植和培育细胞。我们已经了解如何改变支架的物理性能，以使不同的细胞过程(例如干细胞的分化)成为可能，以及如何将生长因子和其他生物大分子放置到支架中，以与细胞相互作用。所有这一切，都是利用传统移液器将细胞滴入这些支架中。但是，在细胞培养世界中，随着细胞的3D生物打印在世界范围内的更为普遍，我们可能会突破这一技术限制。事实上，澳大利亚墨尔本St. Vincent医院的研究人员正在致力于生物打印干细胞，最终为神经系统疾病的研究生成人脑组织。3D打印机的特异性与它们对生物学样本的适应性相结合，让我们在2015年有良好的时机，不仅能看到打印的脑组织，而且还能生物打印其他组织和细胞排列。　　2. 最后了解你的细胞?我们继续把它作为每年的一个预测问题。人们越来越了解生物学中的可重复性问题，已经导致人们强烈抗议用定义明确、经过验证的试剂开展的精确描述的实验。然而，问题仍在于，使用的是未经验证的细胞系。来年我们能够看到这方面发生重大变化吗?也许在提供资金之前，资助机构将需要细胞系的认证数据?也许用于认证的资金将被补充到研究资金里面?或者也许该出现一种用于好用细胞系认证的单一数据库和程序。　　3. &ldquo 太空细胞&rdquo 。现在我们来做出2015年最深远的预测：更多检测有限重力对细胞的影响，将对真实感3D细胞培养和再生医学应用，提供一种更好的路径。让我解释一下。随着航天任务的增多，以前在太空检测细胞的工作已经有经验了，在接下来的几个月，太空细胞培养将变得越来越普遍。在2014年，英国杜伦大学的Stefan Przyborski，将细胞送到国际空间站，以检测3D细胞培养，并研究微重力对细胞的生理学影响。Przyborski一直热切地参与3D细胞培养方法的发展，他开发了一种支架，可使一种比传统2D平板更加现实的培养环境成为可能。但事实证明，在微重力环境下，细胞更容易聚集在一起，一些学者甚至认为，这样的环境可能对于推动再生医学工作而言是完美的。因此，在来年，商业太空旅行可能会大大增加，细胞太空培养方面的见解，可能为再生医学进步做了更好的准备，我们认为，2015年可以看到新的空间细胞生物学研究。

[color=#DC143C][size=4][font=楷体_GB2312]细胞状态实时追踪分析系统[/font][/size][/color] 生物、药物等许多的研究均需要通过观察细胞体积的变化或细胞数目增减的来判断和评估实验的效果。由于细胞所处环境的改变可促使其自身体积做出相应的变化，以便适应改变后的环境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道该种细胞体积变化规律，因此必须检测其体积或细胞数目随条件、时间的变化。 由贝克曼库尔特公司出品的Multisizer 3 库尔特细胞特性分析仪是目前最权威的细胞体积、细胞计数的分析仪器，应用文献多不胜数。无可逾越的领先技术更使Multisizer 3 成为分辨率最高的仪器。国外的用户统计表明，Multisizer 3 已成为细胞实验室必备的研究工具。 Multisizer 3 先进的DPP 数码脉冲处理器，使测量过程中的数以百万计的脉冲信号无须经压缩而保存。数据因无损失而能实现再分析功能。DPP的功能使得Multisizer 3 能够实时监测样品在分析过程中的原始变化。 DPP同样可用于检测细胞体积的改变。在许多的生化过程中细胞体积是一个重要的参考因素。如细胞发育、细胞周期、细胞死亡、渗透压的补偿、致病机理和吞噬作用等。 Multisizer 3 可以观测细胞粒径与体积从几秒到几小时内的变化。 细胞的发育与细胞分裂周期级数递增均需要连续不断的细胞增殖。 在培养液中正在增殖的细胞在其分裂前其体积将增大至原体积的两倍。然而对细胞发育与分裂的速度作如何调整才能保证细胞体积的不变并不明确。因此，测量细胞的体积的变化对了解与控制细胞的发育和周期非常重要。 任何种类的细胞都有可能因处于不利环境而死亡。细胞犹如多孔的网筛极易因渗入已溶解于周围环境的化学物而使渗透压受影响。细胞内外环境中该些溶解物颗粒数目的不平衡，将会导致水份透进细胞而使其体积涨大，或者是水份从细胞渗出使其体积收缩。 当细胞或微生物遭受环境变化时，它们将通过自身调整以图适应新的环境。一些例子中细胞需要改变自身体积以便达到适合的目标。 使用Beckman Coulter 的Multisizer™ 3 库尔特体积粒度分析仪将能方便而精确地测量细胞平均体积（MCV）的各种变化。

国务院常务会议近期审议通过了《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》，会议指出，推动新一轮大规模设备更新和消费品以旧换新，是党中央着眼于我国高质量发展大局作出的重大决策。旨在加快构建先进适用、系统完备、集约高效、安全绿色的现代化基础设施体系。细胞计数作为细胞培养中的一项基本研究，是帮助我们了解细胞生长状态，测定培养基、血清和药物等物质生物作用的重要手段。而人工细胞计数是一项非常繁琐、耗时的工作。它需要实验员高度集中注意力，容易导致实验员精神疲劳和出现错误。所以细胞计数仪应运而生，它只需要人工计数的一小部分时间，便可精确获得细胞数量、活细胞和死细胞浓度、细胞平均体积大小、生存能力、细胞大小或体积分布曲线图等数据。这可以为大家腾出宝贵的时间和精力用于其他重要任务。因此，为了更好地给广大用户提供细胞计数仪设备更新选型参考，以及为厂商提供市场机会参考，本期小编对2018年1月1日到2024年3月22日细胞计数仪中标标讯进行了整理分析。（本文用于统计分析的中标讯息来源于中国政府采购网，不包括非招标形式采购以及未公开采购项目。本次调查共统计到437条有效标讯，结果仅供定性参考。）一、国产和进口品牌竞争激烈本次统计共涉及到37个品牌，国产和进口品牌分别占比49%和51%，几乎各占一半，竞争激烈，不分上下。图1.国产/进口品牌占比图小编统计了近六年热门中标品牌TOP10供大家参考。其中，荣登榜首的是睿钰（Countstar），占比18.10%；第二名是美国赛默飞，占比15.13%；第三名是美国伯乐，占比7.72%；第四名是美国丹诺尔，占比6.82%；博大博聚、瑞沃德和卓微紧跟其后，并列第五，分别占比6.23%。近6年热门中标品牌TOP10排名品牌占比国产/进口1睿钰（Countstar）18.10%国产2美国赛默飞15.13%进口3美国伯乐7.72%进口4美国丹诺尔6.82%进口5博大博聚6.23%国产瑞沃德6.23%国产卓微6.23%国产6美国耐细隆5.04%进口牛顿光学5.04%国产7美国贝克曼4.15%进口除了上表列出的TOP10外，还有萌薇、德国默克密理博、韩国Logos、丹麦Chemometec、高分、美国康宁、韩国NanoEntek等品牌参与市场。以下为热门中标型号TOP10排行榜。第一名是美国伯乐的TC20；第二名是睿钰（Countstar）的IC1000；美国赛默飞的Countess3和Countess3FL排第三、第五名；第四名是瑞沃德的C100。其余热门的型号还有美国丹诺尔的CellDrop BF，博大博聚的JSY-SC-031N，睿钰（Countstar）的Rigel S2、Mira BF和美国赛默飞的Countess 2等。近6年热门中标型号TOP10排名型号品牌国产/进口1TC20 美国伯乐进口2IC1000 睿钰（Countstar）国产3Countess 3 美国赛默飞进口4C100 瑞沃德国产5Countess 3FL 美国赛默飞进口6CellDrop BF美国丹诺尔进口7JSY-SC-031N 博大博聚国产8Rigel S2 睿钰（Countstar）国产9Mira BF 睿钰（Countstar）国产10Countess 2美国赛默飞进口二、高校、医院是“大买家”，需求旺盛。从采购单位类型分布情况来看，高校的采购量占比最大，为40%。许多医药大学和综合类高校中的生物及医药专业实验室都需要采购细胞计数仪。医院的采购量占比第二，为37%，精准智能的细胞计数仪对他们来说必不可少。科研（院/所）的采购量占比第三，为10%。疾病预防控制中心的采购量占比第四，为5%。食品药品检验中心的采购量占比第五，为3%。此外，还有职业教育、卫健委、血站等其他单位占少量采购份额。因此，高校、医院和科研（院/所）是细胞计数仪设备更新采购的主要单位。三、 细胞计数仪“畅销价”区间——5-10万从招标采购的细胞计数仪价格区间来看，多数细胞计数仪价格集中在5-10万，这部分占比为39%，符合大多数单位的招标预算。占比第二的价格是小于等于5万，占比24%。占比第三的价格是10-15万，占比13%。15-20万的细胞计数仪占比9%，20-25万占比6%，30-50万占比4%。而25-30万和大于50万的细胞计数仪占比更低，仅为3%和2%。对标品牌和采购单位来看，价格高于25万的细胞计数仪主要都是进口品牌，采购主体是少数医院和高校。四、采购数量逐年攀升，市场需求稳定。从统计到的近6年有效标讯数量情况来看，除2023年稍有回落以外，整体数据基本呈现上涨趋势。2022年出现高点是受到国家2022年9月推出的2.5%财政贴息贷款政策和人民银行设立2000亿元专项再贷款项目的驱动。图4.各年份中标标讯数量折线统计图————————————————————————————————————————————“3i生仪社”是仪器信息网旗下的官方微信公众号之一，专为生命科学仪器领域用户提供信息的平台。“3i”代表仪器信息网的用户服务理念：互动（interactive）、创新（innovation）、整合（integrative），“生仪社”是生命科学仪器社的简写。

为了进一步提高广大师生对Countstar细胞计数仪的认知度，提升校园师生对Countstar细胞计数仪的体验度，同时为了给科研团队带来更大的使用价值，Countstar细胞计数团队举办了此次校园行活动。 本次活动得到了广大师生的热烈欢迎与大力支持，现场前来展台体验与交流的师生络绎不绝，而Countstar细胞计数仪方便、高效、准确、快速的产品特性给在场师生留下了深刻印象。 此外，为了给广大师生带来更多的使用价值，Countstar细胞计数团队在南通校区设立了两处Countstar细胞计数仪试用专区，让广大师生在不花一分钱的情况下进行免费使用，同时对于在使用过程中遇到的技术问题也及时给予电话或现场指导，免费试用活动受到了广大师生极大的关注与参与。 Countstar细胞计数仪校园行仍在继续，下一站期待你的参与，如你对Countstar校园行活动很感兴趣，请与我方联系，我们会尽快安排相关活动，电话：400-820-2912 邮箱：marketing@alit.com.cn

详细信息 公开招标公告-WMU-2022949 流式细胞分析仪（重） 浙江省-温州市-瓯海区 状态：公告 更新时间： 2022-05-27 浙江乐诚工程咨询有限公司关于温州医科大学流式细胞分析仪（重）的公开招标公告 项目概况 流式细胞分析仪（重）招标项目的潜在投标人应在政府采购云平台（https://login.zcygov.cn）获取（下载）招标文件，并于2022年06月17日 09:30（北京时间）前递交（上传）投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：WMU-2022949 项目名称：流式细胞分析仪（重） 预算金额（元）：2000000 最高限价（元）：/ 采购需求： 标项名称: 流式细胞分析仪（重） 数量: 1 预算金额（元）: 2000000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途：详见采购需求 备注： 合同履约期限：标项 1，进口免税产品在收到免税办妥通知并信用证（L/C）开出后60天内、进口含税产品在合同签订后70天内、国产产品在合同签订后30天内交货并完成安装调试，交使用方验收。 本项目（否）接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；未被“信用中国”（www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网（www.ccgp.gov.cn）列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无 3.本项目的特定资格要求：无 三、获取招标文件 时间：/至2022年06月17日，每天上午00:00至12:00，下午12:00至23:59（北京时间，线上获取法定节假日均可，线下获取文件法定节假日除外） 地点（网址）：政府采购云平台（https://login.zcygov.cn） 方式：府采购云平台在线获取：（操作步骤：潜在投标人登陆政府采购云平台，项目采购--获取采购文件菜单，点击申请获取采购文件，填写获取采购文件的申请信息，提交后点击下载采购文件即可获取招标文件）（公告规定的招标文件获取方式为依法获取招标文件的方式，未按照公告规定的方式获取招标文件的，不得对招标文件提起质疑、投诉。） 售价（元）：0 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年06月17日 09:30（北京时间） 投标地点（网址）：政府采购云平台（https://login.zcygov.cn） 开标时间：2022年06月17日 09:30 开标地点（网址）：浙江乐诚工程咨询有限公司评审室（温州市瓯海区三垟街道桥头河大桥温州生命健康小镇B03）（政府采购云平台（https://login.zcygov.cn）） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.《浙江省财政厅关于进一步发挥政府采购政策功能全力推动经济稳进提质的通知》 （浙财采监（2022）3号）、《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》（浙财采监（2021）22号）已分别于2022年1月29日和2022年2月1日开始实施，此前有关规定与上述文件内容不一致的，按上述文件要求执行。 2.根据《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》（浙财采监（2021）22号）文件关于“健全行政裁决机制”要求，鼓励供应商在线提起询问，路径为：政采云-项目采购-询问质疑投诉-询问列表:鼓励供应商在线提起质疑，路径为：政采云-项目采购-询问质疑投诉-质疑列表。质疑供应商对在线质疑答复不满意的，可在线提起投诉，路径为：浙江政府服务网-政府采购投诉处理-在线办理。 3.供应商认为采购文件使自己的权益受到损害的，可以自获取采购文件之日或者采购公告期限届满之日（公告期限届满后获取采购文件的，以公告期限届满之日为准）起7个工作日内，对采购文件需求的以书面形式向采购人提出质疑，对其他内容的以书面形式向采购人和采购代理机构提出质疑。质疑供应商对采购人、采购代理机构的答复不满意或者采购人、采购代理机构未在规定的时间内作出答复的，可以在答复期满后十五个工作日内向同级政府采购监督管理部门投诉。质疑函范本、投诉书范本请到浙江政府采购网下载专区下载。 4.其他事项：无 七、对本次采购提出询问、质疑、投诉，请按以下方式联系 1.采购人信息 名 称：温州医科大学 地 址：温州医科大学茶山校区 传 真： 项目联系人（询问）：金老师 项目联系方式（询问）：0577-86699890 质疑联系人：王老师 质疑联系方式：0577-86699052 2.采购代理机构信息 名 称：浙江乐诚工程咨询有限公司 地 址：温州市瓯海区三垟街道桥头河大桥温州生命健康小镇B03 传 真： 项目联系人（询问）：计女士 项目联系方式（询问）：0577-86077722 质疑联系人：陈素芳 质疑联系方式：15805779720 3.同级政府采购监督管理部门 名 称：浙江省财政厅政府采购监管处 地 址：杭州市环城西路37号 传 真：/ 联系人 ：倪文良、吴聪瑜 监督投诉电话：0571-87057615、87058489 政策咨询：何一平、冯华，0571-87058424、87055741 若对项目采购电子交易系统操作有疑问，可登录政采云（https://www.zcygov.cn/），点击右侧咨询小采，获取采小蜜智能服务管家帮助，或拨打政采云服务热线400-881-7190获取热线服务帮助。CA问题联系电话（人工）：汇信CA 400-888-4636；天谷CA 400-087-8198。 温州医科大学 浙江乐诚工程咨询有限公司 2022年05月27日 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：流式细胞仪,细胞计数器 开标时间：2022-06-17 09:30 预算金额：200.00万元 采购单位：温州医科大学 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：浙江乐诚工程咨询有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 公开招标公告-WMU-2022949 流式细胞分析仪（重） 浙江省-温州市-瓯海区 状态：公告 更新时间： 2022-05-27 浙江乐诚工程咨询有限公司关于温州医科大学流式细胞分析仪（重）的公开招标公告 项目概况 流式细胞分析仪（重）招标项目的潜在投标人应在政府采购云平台（https://login.zcygov.cn）获取（下载）招标文件，并于2022年06月17日 09:30（北京时间）前递交（上传）投标文件。 一、项目基本情况 项目编号：WMU-2022949 项目名称：流式细胞分析仪（重） 预算金额（元）：2000000 最高限价（元）：/ 采购需求： 标项名称: 流式细胞分析仪（重） 数量: 1 预算金额（元）: 2000000 简要规格描述或项目基本概况介绍、用途：详见采购需求 备注： 合同履约期限：标项 1，进口免税产品在收到免税办妥通知并信用证（L/C）开出后60天内、进口含税产品在合同签订后70天内、国产产品在合同签订后30天内交货并完成安装调试，交使用方验收。 本项目（否）接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；未被“信用中国”（www.creditchina.gov.cn)、中国政府采购网（www.ccgp.gov.cn）列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无 3.本项目的特定资格要求：无 三、获取招标文件 时间：/至2022年06月17日，每天上午00:00至12:00，下午12:00至23:59（北京时间，线上获取法定节假日均可，线下获取文件法定节假日除外） 地点（网址）：政府采购云平台（https://login.zcygov.cn） 方式：府采购云平台在线获取：（操作步骤：潜在投标人登陆政府采购云平台，项目采购--获取采购文件菜单，点击申请获取采购文件，填写获取采购文件的申请信息，提交后点击下载采购文件即可获取招标文件）（公告规定的招标文件获取方式为依法获取招标文件的方式，未按照公告规定的方式获取招标文件的，不得对招标文件提起质疑、投诉。） 售价（元）：0 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 提交投标文件截止时间：2022年06月17日 09:30（北京时间） 投标地点（网址）：政府采购云平台（https://login.zcygov.cn） 开标时间：2022年06月17日 09:30 开标地点（网址）：浙江乐诚工程咨询有限公司评审室（温州市瓯海区三垟街道桥头河大桥温州生命健康小镇B03）（政府采购云平台（https://login.zcygov.cn）） 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 1.《浙江省财政厅关于进一步发挥政府采购政策功能全力推动经济稳进提质的通知》 （浙财采监（2022）3号）、《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》（浙财采监（2021）22号）已分别于2022年1月29日和2022年2月1日开始实施，此前有关规定与上述文件内容不一致的，按上述文件要求执行。 2.根据《浙江省财政厅关于进一步促进政府采购公平竞争打造最优营商环境的通知》（浙财采监（2021）22号）文件关于“健全行政裁决机制”要求，鼓励供应商在线提起询问，路径为：政采云-项目采购-询问质疑投诉-询问列表:鼓励供应商在线提起质疑，路径为：政采云-项目采购-询问质疑投诉-质疑列表。质疑供应商对在线质疑答复不满意的，可在线提起投诉，路径为：浙江政府服务网-政府采购投诉处理-在线办理。 3.供应商认为采购文件使自己的权益受到损害的，可以自获取采购文件之日或者采购公告期限届满之日（公告期限届满后获取采购文件的，以公告期限届满之日为准）起7个工作日内，对采购文件需求的以书面形式向采购人提出质疑，对其他内容的以书面形式向采购人和采购代理机构提出质疑。质疑供应商对采购人、采购代理机构的答复不满意或者采购人、采购代理机构未在规定的时间内作出答复的，可以在答复期满后十五个工作日内向同级政府采购监督管理部门投诉。质疑函范本、投诉书范本请到浙江政府采购网下载专区下载。 4.其他事项：无 七、对本次采购提出询问、质疑、投诉，请按以下方式联系 1.采购人信息 名 称：温州医科大学 地 址：温州医科大学茶山校区 传 真： 项目联系人（询问）：金老师 项目联系方式（询问）：0577-86699890 质疑联系人：王老师 质疑联系方式：0577-86699052 2.采购代理机构信息 名 称：浙江乐诚工程咨询有限公司 地 址：温州市瓯海区三垟街道桥头河大桥温州生命健康小镇B03 传 真： 项目联系人（询问）：计女士 项目联系方式（询问）：0577-86077722 质疑联系人：陈素芳 质疑联系方式：15805779720 3.同级政府采购监督管理部门 名 称：浙江省财政厅政府采购监管处 地 址：杭州市环城西路37号 传 真：/ 联系人 ：倪文良、吴聪瑜 监督投诉电话：0571-87057615、87058489 政策咨询：何一平、冯华，0571-87058424、87055741 若对项目采购电子交易系统操作有疑问，可登录政采云（https://www.zcygov.cn/），点击右侧咨询小采，获取采小蜜智能服务管家帮助，或拨打政采云服务热线400-881-7190获取热线服务帮助。CA问题联系电话（人工）：汇信CA 400-888-4636；天谷CA 400-087-8198。 温州医科大学 浙江乐诚工程咨询有限公司 2022年05月27日

你可能经常能够在耳边听到别说干细胞，干细胞是一个什么样的概率，是个什么东西你真的了解吗？今天小编就带你来深入了解我们常说的：干细胞！什么是干细胞？干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞、能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞，干细胞(stem cell，SC)的“干"，译自英文“stem”，意为“茎干”，“干”和"起源”。干细胞群的功能即为控制和维持细胞的再生。 一般来说，在干细胞和其终末分化的子代细胞之间存在着被称为“定向祖细胞”的中间祖细胞群，它们具有有限的扩增能力和限制性分化潜能。这些细胞群的功能是增加干细胞每次分裂后产生的分化细胞的数量。干细胞是具有多向分化潜能、自我更新能力的细胞，是处于细胞系起源顶端的最原始细胞，在体内能够分化产生某种特定组织类型的细胞。干细胞与衰老的关系构成人体的200余种细胞中，大部分为终末分化细胞，高度分化使其失去了再分裂的能力，最终会衰老、死亡；但同时机体也保留了一部分未分化的原始细胞，即干细胞。这些细胞在特定条件下或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡，当衰退的进程大于再生长的能力时表现为衰老；如果细胞再生能力更强，那么组织衰老的进程将被延缓甚至阻断。 干细胞的功能、特点使得其在创伤修复、神经再生和抗衰老等临床医学领域具有广阔应用前景。已有研究证明，干细胞在心血管疾病、代谢病、帕金森氏综合征、肝硬化、白血病等多种疾病的治疗中疗效显著；而干细胞抗衰老更是《Science》杂志评选出的1999年度10大科学进展之一，由此引发的“再生医学”革命不容小觑。可想而知，干细胞抗衰老效应的发挥取决于是否能够动员足够数量的理想的干细胞。 干细胞美容应用延缓衰老、永葆青春，自古以来就是人类不懈追求的目标，美容行业所说的抗衰老是以形体形象为主，祛皱、提拉等项目都属于抗衰项目，延缓肌肤衰老！尚恩控股集团联合国内外医美领域专家，对干细胞美容应用展开深入研究，干细胞美容抗衰老是目前临床上的主要应用，主要通过对自体干细胞进行体外培养、扩增、纯化，再移植到人体指定部位，激活皮肤干细胞的再生和修复，降低细胞老化速率，增强肌肤内部支撑结构，从而达到除皱、祛疤、减肥、丰胸等效果，医佳颜活性因子抗衰便是运用了干细胞再生特性，对面部凹陷进行再生填充，修饰面部脸型，起到紧致提拉祛皱的美容抗衰功能。

艾力特国际贸易有限公司是一家专业代理全球高端实验室仪器设备的公司,拥有众多国际著名仪器品牌的总代理权公司为了更好更便捷的服务于全国各地的客户，已先后在上海、北京、广州设立分公司，并建立起了完善的售前售后体系和专业的技术支持团队，致力于为生命科学、生物工程、制药、精细化工、食品等领域客户提供最佳的产品和技术服务，让您的产品研发，生产过程控制，产品质量控制始终与世界同步。 艾力特国际贸易有限公司作为Countstar自动细胞计数仪全国总代理，将秉承精诚合作、互惠互利的原则携手八方朋友为用户提供最满意的服务。为了促进计数仪的推广，现推出以下系列活动：针对代理商的活动方案活动一： 2012年10月10日至2013年1月31日期间签单细胞计数仪满3台的代理商，可享受赠送3000个检测样的耗材作为奖励。活动二： 2012年10月10日至2013年1月31日期间签单细胞计数仪满5台的代理商，可享受赠送一台细胞计数仪作为奖励。注：活动一与活动二不可同时享受，只可选择其一。 针对终端客户的活动方案活动时间：2012.10.10-11.30活动一: 抢机行动！全国限量80台细胞计数仪免费使用，使用期限两个月，客户需购买耗材（最低300个检测样）。活动二: 乐购有礼！乐购1： 活动期间凡购买Countstar自动细胞计数仪的客户可获得苹果 (Apple) ipod nano 6代8G或等值礼品；乐购2： 活动期间凡购买Countstar自动细胞计数仪+50盒计数板的客户，可获得免费计数板10盒。 如对上述促销活动有任何疑问，请致电021-62299622或Mail到marketing@alit.com.cn,本活动的最终解释权归艾力特国际贸易有限公司所有。更多产品详情请登陆官网www.alit.com.cn全国客服专线:400-820-2912

多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT，是将原子力系统、微流控系统、细胞培养系统合为一体的单细胞操作系统，采用不同孔径的微型纳米注射器，可实现单细胞注射（Injection）、活细胞内物质提取（Extraction）、单细胞分离（Isolation）、粘附力测定（Adhesion）、纳米打印(Nano-printing)等多种功能，更多功能及应用请参考如下文章。点击了解更多详情：多功能单细胞显微操作系统FluidFM BOT的原理与应用介绍本次讲座与培训将介绍FluidFM技术的原理及应用，着重讲解在活细胞单细胞组学领域的进展，Live-Seq技术可直接在活细胞无损提取细胞内容物进行测序工作，能够提供更加原生和真实的测序信息，让单细胞的基因表达动力学研究成为可能。报告信息：应用讲座：5月25日北京大学金光楼311上午09:30—10:30上机培训（扫码报名，名额有限）：5月25日北京大学金光楼126下午13:00—17:30报告人: 胡西 博士报名注册：点击此处或扫描下方二维码即可报名扫码即刻报名报告人简介：胡西，Application Scientist of Quantum Design China，加州大学洛杉矶分校博士后。主要负责单细胞显微操作设备的技术支持和市场推广活动，并具有丰富的流体力显微镜（FluidFM）的操作经验。主办单位：凤凰工程北大基地光学成像平台协办单位：Quantum Design 中国科研进展文章导读：单细胞测序在疾病诊断和细胞异质性研究中发挥着重要作用。然而目前的单细胞测序手段需要将细胞消化并裂解才能够进行，而细胞状态在这一操作中不可避免的会发生改变，因此很难掌握细胞真实的基因表达情况， 尤其对于基因通路上表达变化的检测为不利。近期苏黎世联邦理工学院使用FluidFM创建了一种原位活细胞基因测序方法，这种方法能够在不杀死细胞的情况下完成对细胞的测序工作。通过这种技术该团队成功完成单细胞RNA基因测序，并通过这种方法检测到了细胞的基因表达和细胞周期状态变化。下面本文就这项工作的具体内容进行阐述。1. Live-Seq测序技术简述由于单个细胞的RNA总量仅有10 pg。为了实现无损的单细胞测序，该团队先使用FluidFM对现有的scRNA-Seq单细胞测序的方法进行了优化。为了尽可能的接近Smart-Seq的测试条件，该团队采用了先将缓冲液吸入探针，然后再进行细胞提取的操作。这样可以确保所提取的RNA能够先与缓冲液混合，从而避免RNA的降解。通过这一方法，该团队成功实现了IBA细胞的测序，证明了这种方法的可行性（图1）。图1. Live-Seq技术a. Live-Seq技术的示意图和代表图片，黑色箭头指代液面；b. IBA细胞测序的质量控制图（n=10）。2. Live-Seq技术分析细胞系和细胞状态为了证实Live-Seq的有效性，该团队对多种细胞系进行了测序，这其中包括IBA细胞、小鼠脂肪干细胞和祖细胞（ASPCs）以及脂多糖处理的RAW264.7细胞和Mock处理的RAW264.7细胞。通过对这些细胞系进行测序发现，该方法能够区分上述细胞系，并且在特征基因检测中能够找到每种细胞所对应的特征基因，证明了Live-Seq方法的有效性（图2）。图2. Live-Seq单细胞测序区分细胞型及细胞状态a. 实验方法示意图，使用LPS和PBS对RAW细胞进行处理；b. 前500个高度易变基因的tSNE图；c. 前十的细胞型、细胞状态差别基因的热图；d. 小鼠基因图谱预测，使用前100个标记基因的团簇；e. Live-Seq对比scRNA-Seq的锚点分析，显示两者没有显著差异。3. Live-Seq技术对细胞的活力基本没有影响Live-Seq技术的优势在于提取过程中不会破坏细胞。通过对提取前后的测序对比可以发现，提取组与空白组之间的团簇没有显著性差异。并且通过对细胞形态的观察中，发现细胞的形态基本没有改变，并且多数细胞仍然能够正常分裂（图3）。图3. Live-Seq对细胞活力的影响a. 细胞实验的示意图；b. Live-Seq测序后不同时间点（1h,4h）的scRNA-Seq的tSNE图；c.不同时间点scRNA-Seq所有能够发现差异的基因（共12个）；d.不同时间点的细胞形态图片。4. Live-Seq技术能够记录细胞下游分子表型事件由于Live-Seq对细胞生理状态影响小，因此能够监测在细胞代谢过程中的基因变化。通过对比LPS处理的巨噬细胞周期实验中发现，Live-seq技术与对照组的细胞代谢水平相比没有明显变化，因此这种方法测量的数据十分接近细胞代谢中基因表达的真实水平。通过测序对比LPS处理与空白的测序结果发现Nfkbia与Tnf的表达为相关。这一结果也验证这种测序方法在检测细胞下游表型时的优势。图4. Live-Seq技术的单细胞纵向分析a. 实验示意图；b. 不同处理细胞的mCherry强度变化；c. 3~7.5h之间mCherry强度变化；d. Tnf-mCherry强度变化的线性回归模型；e. Nfkbia与Tnf在Live-Seq测序中的表达关系；f. Nfkbia与Tnf在scRNA-Seq测序中的表达关系；g. Live-Seq测序中细胞处于S期的评分；h. Live-Seq测序中细胞周期的mTnf-mCherry强度变化；i.Tnf-mCherry的荧光强度增量（3~7.5h）。5. Live-Seq技术对同一细胞多次测序Live-Seq技术的无损性甚至能够实现对单个细胞的多次测序。通过对单个细胞两次提取后细胞活力变化的观察中发现，细胞的活力即使在2次提取后仍没有发生明显的变化，基因型分析也没有发现明显的基因表型改变。图5. Live-Seq对细胞的多次提取j.连续测序的示意图和代表图像；k.Live-Seq的tSNE图；l.整合Live-Seq和scRNA-Seq的tSNE图。6. 总结Live-Seq是一种十分具有前景的单细胞测序的新方法，得益于FluidFM技术的无损提取的优势，Live-Seq技术除了能够实现传统测序的功能外，还降低了细胞的损伤，能够提供更加原生和真实的测序信息。这种特点甚至让单细胞的基因表达动力学研究成为可能。相信随着这种技术自动化的提高，将为单细胞测序技术带来更多可能。参考文献：[1]. Genome-wide molecular recording using Live-seq, Wanze Chen, Orane Guillaume-Gentil, Riccardo Dainese, Pernille Yde Rainer, Magda Zachara, Christoph G. Gäbelein, Julia A. Vorholt, Bart Deplancke, bioRxiv 2021.03.24.436752；doi: https://doi.org/10.1101/2021.03.24.436752

我是一颗小小的细胞，从哪里来到哪里去，被安排的明明白白。图源：网络别看我小，我可厉害了，我可是生物体形态结构和生命活动的基本单位哈，可以形成组织，组织形成器官，器官组合形成个体。图源：网络我可以通过分裂，一分为二，二分四，以此类推，我逐渐变多，但是为了不让我太膨胀，科研小伙伴非要给我测下数，他们用了一个试剂名叫胰酶，将我们分散，然后又将我们稀释，我的兄弟姐妹都被冲到好远，我也找不到它们，大部分我们还是活的好好的，那些体弱多病的经过这么一折腾game over了 ，科研小伙伴为了区分死活，还给我们用台盼兰染色，这样我们就很容易被区分，还能算算存活率。图源：网络不过我们也都是见过大场面的，什么大风大浪我们都经历过（内心os），正在这沉思中，我就被装到了一个名叫细胞计数板的板板上，就听外面的科研小伙伴说，数上不数下，数左不数右，别打扰我，我都数错了，还得重新按计数器。作为细胞的我，看着他们摇摇头，现在都啥年代了，还得用手动算，我之前见过一台很高端的仪器，既能当显微镜观察我，又可以数数我有多少的复制品，把我拍的可美了。我给大家介绍一下，它就是Rebel正倒置一体显微镜，方便小巧，一机多能，小小的身体，大大的能量。作为显微镜，Rebel具有优秀的硬件素质：8MP高分辨率彩色相机高度还原色彩、Apple iPad Pro触控显示操作就像玩APP一样简单、内置10X目镜全视观察技术、远程滑鼠式控制器（电动调焦），想怎么拍就怎么拍，高能LED光源寿命长… … 优点太多啦，就不多说了，怕骄傲。Rebel还可以进行智能细胞计数，几秒内快速分析图像，告别以往费时费力的人工计数，轻轻一点，自动计算存活率，so easy。实现多张图片采集，多次计算，消除人为误差，精准度特别高。轻松实现自动捏合缩放，查看单个细胞进行质控和纠偏，还可以快速计算不同直径大小的细胞数。Rebel细胞计数不挑耗材，在培养皿、玻片、血球计数板上通通可以。今天就介绍到这吧，期待我们下次再见。

6月2日，《自然-实验手册》（Nature Protocols）在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心周斌研究组与西湖大学何灵娟研究组合作完成的研究成果（Genetic recording of in vivo cell proliferation by ProTracer）。该研究阐释了细胞增殖示踪技术——ProTracer的构建及应用，并以肝细胞增殖的示踪为例，论述了如何利用ProTracer技术示踪成体哺乳动物在器官稳态与修复再生过程中的细胞增殖。细胞增殖是多种组织器官发育、稳态维持及修复再生过程中细胞来源的基础。体内细胞增殖由于细胞类型以及所处的时期不同存在较大差异。此前，领域内较为常用的检测细胞增殖的方法主要分为细胞增殖标志物染色、核苷酸类似物掺入及同位素掺入。上述方法对于检测体内细胞增殖均有一定的局限性：细胞增殖标志物染色方法只能检测某个瞬间的细胞增殖状态，核苷酸类似物可以进行长时程的掺入却有一定的细胞毒性，同位素掺入的检测方法比较复杂且不便捷。此外，上述检测方法均无法做到细胞类型特异性的细胞增殖检测。当目的细胞的增殖速率较为缓慢时，利用上述检测方法易出现目的细胞的增殖信号被其他增殖速率较快的细胞增殖信号干扰或淹没的问题。为了解决上述问题，周斌研究组最近建立了能够示踪体内细胞增殖的遗传示踪技术——Proliferation Tracer（ProTracer）。该技术实现了在体内长时间不间断地示踪细胞增殖、细胞类型特异性的细胞增殖检测以及活体检测细胞增殖等多方面的突破。该工作剖析了使用ProTracer技术进行细胞增殖示踪的技术细节，包括小鼠品系的构建、鉴定、交配策略以及细胞增殖示踪的最终检测方法。为了实现体内无缝隙捕捉细胞增殖，研究构建了一个可被诱导变成Cre的CreER小鼠品系——Ki67-Cre-rox-ER-rox（Ki67-CrexER），其中rox是Dre同源重组酶的识别位点。当将Ki67-CrexER小鼠与特定的DreER小鼠结合后，DreER能够在Tamoxifen诱导后入核并识别Ki67-CrexER中的rox位点，同时发生Dre-rox同源重组反应将位于两个rox位点之间的ER序列切割掉，从而在DreER表达的细胞中将诱导性表达的Ki67-CrexER转变为持续性表达的Ki67-Cre，实现时空可控以及细胞特异性的细胞增殖的不间断捕捉。此外，结合荧光素酶报告基因，ProTracer技术也可以实现终身无创检测活体动物内特定细胞类型的增殖，无需处死动物。该工作以成体小鼠肝脏作为示例，探究了对成年小鼠组织中细胞增殖的示踪，包括小鼠交配策略、tamoxifen诱导策略、小鼠损伤模型与组织样本分析等。科研人员利用ProTracer技术探讨了肝脏在成体组织稳态及损伤再生中的肝细胞增殖，并量化了肝脏稳态以及损伤状态下的新生肝细胞数量，发现了肝细胞增殖的区域性富集现象，揭示了成体肝脏中新生肝细胞的主要来源。该工作的发表为领域内使用ProTracer技术研究特定细胞类型的体内增殖示踪提供了便利。研究工作得到中国科学院、国家自然科学基金、科学技术部、上海市科学技术委员会，以及分子细胞卓越中心动物平台和细胞平台等的支持。红色：GS+肝细胞；紫色：E-Cad+肝细胞；绿色：GFP+肝细胞