未知有关物质

请问一张高相液相有关物质的图谱怎样确定哪些是已知杂质峰哪些是未知杂质峰？谢谢各位

平常统计有关物质列出来的单杂（最大单杂）是不是特指未知杂质的啊？

梯度程序检有关物质，主峰的位置也出梯度峰，影响自身对照的面积，不知道啥原因，请各位大侠帮忙看看是啥原因导致的啊

在做有关物质方法验证时需要测定检测限。依据中国药典2005版2部附录药品质量标准分析方法验证指导原则，检测限可以用信噪比法测定，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低 浓度或量。一般以信噪比为3 ：1 或2 ：1 时相应的浓度或注入仪器的量确定检测限。在杂质已知的情况下，可以通过配置杂质溶液测定其最低 浓度。但在杂质未知的情况下，怎样确定有关物质的最低 检测浓度？大部分文献中，有关物质的最低 检测浓度采用供试样品溶液稀释或对照品溶液稀释进行测定，这样测定出的是主药的最低检测浓度，而不是其有关物质的最低检测浓度。

请问大家复方制剂有关物质中未知杂质如何计算呢？制剂中有两个主要成分，标示量是4：1的关系，已知杂质可以归属，分别计算，但是未知单杂要怎么办呢，要做杂质归属吗？能不能简单的全部用一个标示量计算呢？大家有没有这方面的经验，或者知道相关的指导原则？恳请不吝赐教，谢谢了！

作为一个新药，对其纯度的检查是保证安全有效的重要指标之一，而纯度检查的内容，根据各个药物的性质和特点有些不同，但基本上均要涉及各自的“有关物质”检查研究。关于有关物质的检查，在国际上已早为“人用药品注册技术规范协调会(ICH)”所关注，国内在新药的有关文件中也提出了供参阅的一些具体要求，并逐渐引起研制新药者的重视。　　由于一个新药从合成原料药到制备有关的制剂，再经贮藏、运输、使用，要经历一段较为复杂和漫长的过程，在此期间，每一过程都有可能产生有关的物质，如生产中可能带入起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际情况，因此，国内外对药物的研究，可允许含有一定限量的无害或低毒性的有关物质，但对毒性较大，能危害人体健康的、无效的或能影响药物稳定性的有关物质则必须严格控制。　　因有关物质的量微小，故检测方法至关重要，必须选择专属性强、灵敏度高、重复性好的方法。目前，首选的是色谱法，可根据新药的具体品种及其有关物质的性质采用TLC，HPLC及GC等，有的还应采用其他有关的色谱或波谱法。对于一、二类新药更应重视，必要时可采用HPLC/UV二极管阵列、HPLC/MS或GC/MS等联机技术，对有关物质进行定性定量分析。　　现将有关物质检查中常见到的一些问题讨论如下。1　未提供研究方法的专属性　　申报资料中常见到有关物质检查的结论是“未检出有关物质”，甚至在稳定性各影响因素考察中，样品颜色已明显变化，但其结果仍是“未检出降解产物”，因而提供的TLC图上只有1个斑点，HPLC图上只有1个主药的峰。对于此类情况，应考虑方法的专属性，如采用的是HPLC，则在方法研究中可按中国药典附录的要求，进行系统适用性试验，考察方法的专属性，具体方法有：①如有关物质为已知的某中间体、副产物或降解产物，则可在原料药中加入该杂质适量进行试验，以证明能达到分离；②如有关物质为未知，可用含有杂质的粗品进行试验，以证明能达到分离；③将精制品经强光、高温、高湿、氧化剂或酸碱等分别处理，使样品光解、分解、氧化或水解后进行试验，以证明能分离出杂质。经上述方法试验能分离出杂质，即证明采用的方法具有一定的专属性。2　未提供研究方法的灵敏度　　申报资料中，有的把试验的最低浓度作为灵敏度，甚至有的只有文字叙述而无任何数据和图谱，而未提供详细方法学研究资料和图谱来证明该最低浓度为最低检出量。因此，提供的灵敏度缺乏试验依据，不能反映所采用方法的真实检出灵敏度。对此，研究者在研究的方法具有专属性后，应考虑方法的灵敏度。如采用HPLC分析时，一般使最低检出量相当于基线噪音的3倍峰高时注入的样品量；如采用TLC分析时，应将样品配制成一系列的不同浓度，分别点样、展开、显色，以确定灵敏度和最低检出量。3　未提供定性和定量的依据　　在申报资料中，除极少数用已知杂质作对照，对样品中有关物质进行定性、定量外，多数强调了制备杂质对照品的困难。因此，对有关物质的定性和定量是用主成分自身对照法或面积归一化法，但因未提供所检测的杂质在设置的检出波长处的响应因子，而不同杂质的的响应因子有可能不同，且差别较大，至使虽有定性和定量结果，但可靠性较差。因此，有关物质定性、定量的最佳方法是采用已知对照品的方法，使所提供的定性和定量有充分依据。4　未提供有关物质的来源及其性质　　申报新药中的有关物质，绝大多数为未知，即使其有关物质含量大于2%或一类创新药，也常把在HPLC主峰以外的各杂质峰统归为未知的杂质，而未研究其杂质的来源、性质及其确切的含量。为保证新药应有的纯度，特别是一类新药，对有关物质检查应严格要求，对其主要杂质要确证化学结构，对主要杂质和其他杂质要分别定出限量。5　色谱图记录时间太短或进样量过小　　在资料中，有不少HPLC图谱不符合要求，表现在主峰的保留时间记录刚完毕，即停止记录，致使一些比主成分峰保留时间大的有关物质不能检出或进样量过小，杂质检不出。由于有的药物与其有关物质分子结构的极性相差较大，因此，在HPLC分析中，有关物质的保留时间可能在主成分峰之后出现，故记录时间应比主成分峰的保留时间延长2～3倍，并应考虑样品配制浓度或进样量致使主成分峰为一矩形峰，以确保样品中的有关物质能全部检出。6　提供的色谱图不合要求　　资料中常见提供的色谱图失真，例如TLC分析提供的是手工绘制的正圆形示意图，或虽是图谱的照片，但无样品点样点，无溶剂前沿，斑点未标示Rf值，样品无批号或文字说明等；HPLC分析中亦有用手工描绘图谱的，有的原图缩得过小以至图上数据模糊不清，或提供的图谱无样品批号，无保留时间，无文字说明，或各峰积分值与列表数据不相吻合等；在稳定性考察降解产物中，上述情况更为严重，致使无法审查。因此，研究者应认真参考新药审批的有关技术指导原则进行试验，提供符合要求的色谱图。7　资料前后缺乏相关性　　在有关物质检查研究中，有的用HPLC进行了较深入的方法学研究，以已知中间体或杂质作对照，证明方法较好，专属性较强，但在制订质量标准研究中的图谱却未出现相同的杂峰，而是其他杂质峰，致使样品研究中的有关物质与制订标准中的有关物质不相关，且在资料中对此无说明。对此情况，应进一步深入研究，弄清是产品工艺不稳定带入的其他有关物质，还是产品本身不稳定的降解产物或残留有机溶剂所致，使研究的结果与制订标准的结果一致。8　未说明有关物质的个数及其总量　　资料除极少数研究了有关物质的个数和总量，并放入质量标准外，大多数对有关物质的数和量未做精密研究，对有关物质只是笼统的订为不得大于百分之多少，这就难以保证产品的有关物质是否稳定在规定的限度范围内。因此，在研究并确定了有关物质数和量的基础上，应对若干批工艺稳定后的产品进行分析，积累数据，对有关物质订出个数，并对主要有关物质、未知及总的有关物质分别订出限量，以保证产品质量。

此问题代mjxyz版友发帖：请教一下：现在在做一个制剂的有关物质分析方法验证，其专属性，做了破坏试验，现在发现破坏试验的条件很不好摸索，没有规律；酸碱的浓度时间变化对主成分的峰面积下降 不成任何规律。所以想请教是否我自己理解错误，1.破坏降解率是以API的峰面积下降的比率为标准，还是以API计算后的含量下降为准？2.酸 碱破坏完需要加入对应的碱和酸中止破坏吗？3.因供试品中存在一个已知杂质和若干未知杂质，那专属性试验-中未知杂质要怎么考虑？是只设定个鉴别阈值？对未知有没有分离度的要求？4.破坏试验的样品配制是以含量测定方法的步骤配？还是以有关物质检查的稀释流程？

有关物质分为已知杂质和未知杂质，如果是未知杂货需要做的有：1.系统适用性试验2.专属性3.检测限4.溶液的稳定性5.耐用性已知杂质需要做的有：1.系统适用性2.准确度3.精密度4.专属性5.定量限6.线性7.溶液的稳定性8.耐用性问题1：其中已知杂质的系统适用性是配制6份相同浓度的杂质溶液进行分析，该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%。那么未知杂质的系统适用性试验应该如何进行呢？问题2：未知杂质中检测限的测定，因无法获得杂质来源，是否应该用供试品溶液测定，观察杂质峰与噪音响应的比例？问题3：如果有多个已知杂质，且都是用同种HPLC条件分离测定的，那上述7个验证项目（除专属性外）是否都需要用不同的杂质配制溶液后重复检测呢？

有关物质检查，包括对产品中残留合成原料、中间体、副产物及可能的降解产物的检查，是控制药品质量的重要指标，目的是检查药品中所含的上述杂质是否符合安全性的要求,同时也是药品稳定性评价中需重点考察的项目。 有关物质检查常用的方法之一是HPLC主成分自身对照法（紫外检测器），即将HPLC色谱图中杂质峰面积与主成分自身对照液峰面积进行比较，以确定杂质限度是否合格。采用此方法时确定的检测波长是否合理直接影响到方法的可行性，因此检测波长的选择是方法学研究的重要内容。 在审评中发现一些申报单位在采用HPLC主成分自身对照法检查有关物质时直接或间接地以主成分的最大吸收波长作为检测波长，由于有关物质检查的对象是杂质，若将主药的最大吸收波长确定为检测波长，则杂质在此波长下的吸收可能偏低，某些杂质甚至无吸收，这样会造成对杂质含量的低估甚至漏检，从而不能反映产品的真实质量，影响了对品种质量可控性及稳定性的评价。1．直接将主药的最大吸收波长选作检测波长。2．简单地套用含量测定的色谱条件。在HPLC法进行含量测定时，为提高方法的灵敏度，降低干扰，往往选用主成分的最大吸收波长作为检测波长。若套用含量测定的色谱条件，实际仍是以主药的最大吸收波长作为有关物质检测波长。 3.以样品进行破坏性试验（酸、碱、热、光照、氧化等）后的溶液做紫外扫描，将扫描图谱中最大吸收波长确定为有关物质的检测波长。因破坏性试验后溶液中存在尚未破坏的主药、降解产物、辅料等，此溶液的紫外吸收为各成分紫外吸收的加和，并不能反映降解产物的紫外吸收特性。由于未破坏主药所占比例较大，故破坏性试验后溶液的最大吸收波长一般仍为主药的最大吸收波长。 采用HPLC主成分自身对照法检查有关物质，其前提之一是需检查的杂质与主成分在确定的检测波长下应有相近的紫外吸收（响应值接近），选择检测波长时需对产品中可能存在的杂质（合成原料、中间体、副产物以及降解产物）的紫外吸收特性进行研究。已知杂质的紫外吸收特性可采用对其流动相溶液直接进行扫描的方法考察，未知杂质（如未知降解产物等）可通过二极管阵列检测器考察其紫外吸收情况，根据各主要杂质及主成分的紫外吸收特性，选取响应值基本一致的波长作为有关物质的检测波长。若对不同杂质难于找到均适宜的检测波长，可考虑选择在不同波长下分别测定，也可考虑采用加校正因子的主成分自身对照法。只有经试验研究确认主成分的最大吸收波长符合有关物质检查对测定波长的要求时，为方便操作，可选作有关物质的检测波长，以与含量测定的色谱条件一致。 另外，HPLC主成分自身对照法检查有关物质比较适用于对微量杂质总量的控制，也可用于单个杂质的限度（一般不超过0.5%）控制。对于具有明确归属的已知杂质，建议采用杂质对照品法进行检查。对于有毒有害杂质，更应采用杂质对照品法单独测定，并制定严格的限度。 转自——中国植提论坛

液相做有关物质，最后计算的标准上 写着小于灵敏度溶液的峰忽略不计，公式：A单杂/A总杂 那我这个分母的位置A总杂里的小于灵敏度溶液的峰是否要算进去

[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多：[url=https://www.woyaoce.cn/service/info-37552.html]https://www.woyaoce.cn/service/info-37552.htm[/url]l服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][font=黑体, SimHei][size=16px] 有关物质是指在生产和储存过程中产生的工艺杂质和降解杂质，有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是药品审评中最关注的要点之一。其中，医药检测领域的主要服务范围有药包材相容性研究、药包材密封性验证、药品测试、中药测试、药品成分分析、稳定性试验研究等[/size][/font][font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]有关物质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]简介：有关物质是指在生产和储存过程中产生的工艺杂质和降解杂质，有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是药品审评中最关注的要点之一。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]已知杂质方法学验证[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]查询国内外药典，确定杂质种类。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]测定原研制剂的杂质，并进行破坏性试验，确定杂质属于降解杂质还是工艺杂质。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]对于降解杂质，应获得杂质对照品进行全套的分析方法验证。[/size][/font][img=@`EXN74)1INNQE1}8L0(N9X.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160215_1702.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]未知杂质结构鉴定及方法验证[/size][/font][img=U`AG)$X7M6L(8I$LN1QX1UE.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160215_4104.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]案例：《精氨酸有关物质方法验证》[/size][/font][img=@T@UK8BTT6R@@_YFE8WJW}H.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160215_7112.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]元素杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]简介：元素杂质是指药品生产或贮存过程中生成、加入或无意引入的杂质。随着原料药生产过程中催化剂应用越来越广泛，现有的元素杂质检测方法缺乏专属性，特别是对于低水平金属催化剂，检测灵敏度往往达不到要求，不能对单个元素杂质进行定量分析。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]参照标准及方法：《USP232-233元素杂质-限度方法》、《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、《ICH Q3D》、《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱[/color][/url]法》。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]服务项目及能力：我司具有电感耦合等离子体原子发射光谱仪（ICP-OES） 和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱仪[/color][/url]（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]ICP-MS[/color][/url]）设备，能够分析近80种金属元素。覆盖ICH Q3D要求的24种金属元素，并根据实际情况分析其他元素。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]案例：《枸橼酸铋钾中镉、汞、铅、砷元素方法学验证》[/size][/font][img=1}FXGHPNCBY15NRTEDJM_X3.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160215_9416.jpg[/img][img=F7NVF7DGL8H}U4ZP6SE217X.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160216_1438.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]基因毒性杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]简介：基因毒性泛指各种因素（物理，化学因素）与细胞或者生物体的遗传物质发生作用而产生的毒性。基因毒性物质在很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]可能产生基因毒性杂质的情况：新药、仿制药、变更工艺[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]潜在毒性杂质的分类[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]（1）已知的、具有基因毒性（突变性）和致癌性的杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]（2）知的、具有基因毒性（突变性）和致癌性未知的杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]（3）具有警示结构、与API无关、基因毒性（突变性）未知的杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]（4）具有警示结构、与API有关、基因毒性（突变性）未知的杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]（5）没有警示结构、没有基因毒性（突变性）的杂质[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]致癌警示结构物质[/size][/font][img=034XAV`RP{_TQ)@({1NCJ`M.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160216_6605.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]遗传毒性杂质的评估和处理方式[/size][/font][img=@0{YUL}SFW7BZH)N}1$R]6H.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160217_3889.jpg[/img][font=黑体, SimHei][size=16px]溶剂残留[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]简介：药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]方法学验证：专属性、线性、准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、检测限、定量限、耐用性。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]检测项目：苯、二氧六环、醋酸、甲基异丁基酮、丙酮、异丁醇、乙二醇、正戊烷、正丁醇、 正戊醇等。[/size][/font][font=黑体, SimHei][size=16px]案例：[/size][/font][img=[UPDEINSJTJV54SD{TI8@}N.png]https://img2.17img.cn/pic/kind/20211020/20211020160217_6858.jpg[/img]

关于HPLC主成分自身对照法检查有关物质时检测波长确定的讨论审评二部张玉琥有关物质检查，包括对产品中残留合成原料、中间体、副产物及可能的降解产物的检查，是控制药品质量的重要指标，目的是检查药品中所含的上述杂质是否符合安全性的要求,同时也是药品稳定性评价中需重点考察的项目。有关物质检查常用的方法之一是HPLC主成分自身对照法（紫外检测器），即将HPLC色谱图中杂质峰面积与主成分自身对照液峰面积进行比较，以确定杂质限度是否合格。采用此方法时确定的检测波长是否合理直接影响到方法的可行性，因此检测波长的选择是方法学研究的重要内容。在审评中发现一些申报单位在采用HPLC主成分自身对照法检查有关物质时直接或间接地以主成分的最大吸收波长作为检测波长，由于有关物质检查的对象是杂质，若将主药的最大吸收波长确定为检测波长，则杂质在此波长下的吸收可能偏低，某些杂质甚至无吸收，这样会造成对杂质含量的低估甚至漏检，从而不能反映产品的真实质量，影响了对品种质量可控性及稳定性的评价。在有关物质检测波长确定方面，申报资料中比较常见的做法有：1．直接将主药的最大吸收波长选作检测波长。2．简单地套用含量测定的色谱条件。在HPLC法进行含量测定时，为提高方法的灵敏度，降低干扰，往往选用主成分的最大吸收波长作为检测波长。若套用含量测定的色谱条件，实际仍是以主药的最大吸收波长作为有关物质检测波长。3．以样品进行破坏性试验（酸、碱、热、光照、氧化等）后的溶液做紫外扫描，将扫描图谱中最大吸收波长确定为有关物质的检测波长。因破坏性试验后溶液中存在尚未破坏的主药、降解产物、辅料等，此溶液的紫外吸收为各成分紫外吸收的加和，并不能反映降解产物的紫外吸收特性。由于未破坏主药所占比例较大，故破坏性试验后溶液的最大吸收波长一般仍为主药的最大吸收波长。采用HPLC主成分自身对照法检查有关物质，其前提之一是需检查的杂质与主成分在确定的检测波长下应有相近的紫外吸收（响应值接近），选择检测波长时需对产品中可能存在的杂质（合成原料、中间体、副产物以及降解产物）的紫外吸收特性进行研究。已知杂质的紫外吸收特性可采用对其流动相溶液直接进行扫描的方法考察，未知杂质（如未知降解产物等）可通过二极管阵列检测器考察其紫外吸收情况，根据各主要杂质及主成分的紫外吸收特性，选取响应值基本一致的波长作为有关物质的检测波长。若对不同杂质难于找到均适宜的检测波长，可考虑选择在不同波长下分别测定，也可考虑采用加校正因子的主成分自身对照法。只有经试验研究确认主成分的最大吸收波长符合有关物质检查对测定波长的要求时，为方便操作，可选作有关物质的检测波长，以与含量测定的色谱条件一致。另外，HPLC主成分自身对照法检查有关物质比较适用于对微量杂质总量的控制，也可用于单个杂质的限度（一般不超过0.5%）控制。对于具有明确归属的已知杂质，建议采用杂质对照品法进行检查。对于有毒有害杂质，更应采用质对照品法单独测定，并制定严格的限度。

开此贴跟大家讨论一下复方制剂杂质的控制以及分析方法建立的一些相关问题。本人在分析实验室做了6-7年仿制药申报，负责药物CMC方面的质量研究工作，接触了十几个项目。基本了解FDA/SFDA审评人员的一些要求和想法。此贴会结合本人的一些经验，探讨复方制剂有关物质分析的一些注意点，并且会结合产品申报以后FDA给的缺陷信，提示大家如何避免同样的问题。更希望抛砖引玉，各位版友和专家踊跃参与，共同提高。废话少说，对于有关物质的研究，最近几年国家法规的要求越来越高，可能大家也越来越重视此项研究。不过一个不可否认的事实是，我们的杂质研究水平和欧美或者印度等国家差距很大。我们的绝大部分药品企业基本处于食物链的最底端，以前经常听我们老板说他在美国的药厂工作的时候，要从其他公司买API，很多都是西班牙的，意大利的，或者印度的药厂以极其低廉的价格从国内厂家购买的粗品，然后拿回去做一到两步的提纯，再做一些法规文件，就可以以很多倍的价格卖出去。我们消耗了主要的人力，物力，牺牲了环境，结果回报只有人家的零头，可悲又可气！所以我们就要具体的看一看到底存在哪些差距。复方制剂有关物质控制的基本原则和单方一样，你就把他当作是在做两个或者三个产品，只不过是同时分析几个物质。相关的指导原则大家也应该都知道， ICH Q3A和Q3B; FDA也有相关的工业指南，跟这两个基本差不多。做杂质研究和其他大部分质量研究工作一样，首先要做的第一步就是去收集资料，包括：1． API厂家的技术资料，一般有DMF的会提供它的open part, 里面会大致列出它的工艺流程，合成路径和所有潜在的杂质。2． 药典的各论，包括USP, EP等等，看看药典有那些要求检测的杂质。3． 查阅文献，看看化合物的潜在杂质和降解产物。这一点对于制剂的杂质控制有时会提供很有用的信息。4． 国内申报仿制药最好弄到进口注册标准，看看原研厂家是怎样控制杂质的。收集完相关的资料后，下面就是分析方法的建立。杂质分析方法的建立又是一个巨大的topic，这里不细说，一个基本的原则就是你开发的方法要是可以用的并且用着比较舒服的，如果连方法开发的人自己都用的疙疙瘩瘩的，经常出问题，可想而知其他人用的会怎么样。另外很重要的一点就是测定有关物质的方法必须具有稳定性指示功能（stability indicating）,这是在FDA deficiency letter里面最常见的一条关于分析方法的缺陷。含量测定和有关物质都有稳定性指示功能的要求，因此含量测定和有关物质测定方法一般采用相同的色谱条件，只是浓度有差别。评价方法是否具有稳定性指示功能的主要依据就是stress study (破坏实验)，关于这一点，本人会在后面单独论述。杂质分析方法的建立，常见的方法有以下几种：1． 直接用杂质外标法定量这种方法最直接，精确。前提是你的杂质对照品充足而且来源可靠。2．带校正因子的外标法。一般按杂质的限度配置主成分对照品，计算各已知杂质的量时考虑校正因子即可，未知杂质校正因子按“1”算。90%的杂质分析都采用这种方法。3. 面积归一化法计算各杂质的面积百分比，这种方法如果单独作为杂质的检测方法申报，是基本不会被FDA接受的。

有些药品需要做两个有关物质，这两个有关物质有什么不同？

梯度方法测定药物头孢克洛中有关物质时，空白溶剂在主峰后面总有许多杂峰，样品溶液和对照溶液相应位置也有。这是什么原因？当使用高纯试剂时要少点。

人本刚接触质谱，看到一片文献是通过ultrahigh performance liquid chromatography (UHPLC) (Thermo,USA) coupled to a linear ion trap Orbitrap hybrid mass spectrometer(LTQ Orbitrap XL) equipped with a heated-electrospray ionization probe这个方法和仪器 做的未知物质（代谢物和衍生物），物质都是和农药有关的。未知物质是通过二维质谱和三维质谱推导出来的。请问各位前辈，MS/MS和MS/MS/MS有什么区别。未知物质是什么原理推导出来的？多谢赐教啦！！！

未知物质求定性麻烦帮忙看看RT 32.99RT33.16RT 32.757 RT 34.152 是什么成分，结构近似于indole。

未知物求定性，，RT 41.156 RT 41.435 同一物质其碎片近似 Sandolen 出峰时间也有区别。各位看看是什么原料？

含量的高低会不会影响有关物质的高低，含量高，有关物质就会低，含量与有关物质之间的关系，有没有大佬解释一下，萌新化验员

有关物质研究一直是药物药学研究和评价中的重点和难点。随着我们对有关物质认识的不断深入，对有关物质的技术要求也在不断提高，其中对有关物质进行定性（鉴定）研究已经成为有关物质研究技术要求的重要组成部分，受到广泛关注。但目前有关物质的定性研究仍然是国内有关物质研究中的薄弱环节，研究水平与国外先进国家相比有较大的差距，也限制了我国药品研究水平和药品质量提高，需要引起国内研发者的充分重视，主动进行深入研究，提高研究水平。 对药物中的有关物质进行定性研究具有重要意义，通过对有关物质的定性研究，我们可以获得有关物质的结构信息，分析其形成过程，合成时可设法避免该杂质的形成，或经纯化使之降至可接受的水平。另外，还可以通过检索毒性物质数据库获知该杂质的毒性数据，为其限度的确定提供有力的依据。同时，定性研究也是分析方法确定的重要参考，对贮藏条件的确定也有指导意义。如果不了解有关物质的结构，后续的研究将无法继续进行。 对药物中的有关物质进行定性分析也是我国药品研发与国际接轨的需要。按照ICH Q3A/Q3B指导原则以及2005年SFDA《化学药物杂质研究技术指导原则》的要求，对药物中超过鉴定限度的有关物质皆应明确其来源，并推测可能的结构。我国的药物研发要想与国际接轨，就必须在有关物质研究的完整性和规范性上符合相关的要求。 按照研究方法的不同，有关物质的定性研究可以分为理论推导法、直接测定法和间接测定法等，在实际的应用中，这几种方法常常结合使用，相互印证。一般而言，由于有关物质的定性研究不能像原料药的结构确证一样提供全面的信息，因而需要尽可能采用多种方法（直接测定法例外），提供尽可能多的信息和证据，否则，有可能得到错误的结论。下面对几种方法进行分别说明：

香水未知物求定性麻烦各位看看RT 27.087 是什么物质？谢谢~

梯度测有关物质 流动相为：A:0.057%磷酸二氢铵 B：乙腈 时间程序：0到25分钟B由0升到25%用A做溶样 结果在19分钟位置有个杂质峰 同一份样品现配现进几针之后杂质会逐渐增高，单独进溶剂又没有峰 请各路高手给分析分 不胜感激！

这两未知物质也挺久了一直未解答，继续丢上来问问，麻烦各位解答一下~~RT 51.631RT 54.346感谢！！

想请教一下各位：如果给你一个未知物质，你如何确认它，方法是什么，首先会想到用啥仪器？是如何想出来的？

香水未知物求定性，RT 67.786和RT 70.768 分别是什么物质？RT 67.786 碎片近似 abmer xtreme麻烦各位版友解答~谢谢！

做有关物质检查的系统适用性试验和日常检验时，主成分的峰面积相差一倍，原因会出现在哪里呢？

我们在建立有关物质测定方法时，我们采用自身对照法测定，建立的方法显示，供试品溶液的主峰有点拖尾，其他杂质的分离度均符合要求，对照溶液的主峰良好不拖尾，请教大家我们建立的方法可以用吗？仅仅供试品溶液的主峰拖尾，杂质分离度良好，对照溶液的主峰不拖尾。这样的方法是否可以用量测定有关物质？

2．9 样品中有关物质测定精密量取甲磺酸罗哌卡因注射液1 mL，置20 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照溶液。取对照溶液20u L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为[color=#ff7a4e]满量程[/color]的10％ ；再精密量取上述两种溶液各20u L 分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主成分峰的峰面积，即规定甲磺酸罗哌卡因注射液样品中的有关物质应不超过1．0％。以上是我从一篇文献里摘出来的关于有关物质测定的步骤。有几点不明白之处，想向朋友们请教一下，这个供试品溶液浓度和对照溶液浓度之间是怎么一个关系？上面说的“[color=#ff9d7d]满量程[/color]”是什么意思啊？

做有关物质时，所以的杂峰都要积分吗？还是特别小的不用积分呢？

现在手上有一组氨酸原料药，几乎相当于纯品。老板要我做组氨酸的有关物质，除了其他的氨基酸，其他杂质是什么无从下手。DAD,CAD检测几乎没有杂质，进样量40ul才有点杂质峰出来。手上有一台q-e，不知道能否先直接分析组氨酸原料药里的组分，然后再寻找合适的液相条件开发有关物质的分析方法。由于原料药杂质含量太低了，但是的确有，实在不知道怎么进行了，哎