微量维生素

为迎接《饲料和饲料添加剂管理条例》实施，2012年9月20日&mdash 21日，来自全国的10余名技术人员齐聚天津博纳艾杰尔科技有限公司，参加&ldquo 饲料中维生素、氨基酸及微量元素检测技术交流会&rdquo ！ 此次会议围绕饲料中维生素、氨基酸及微量元素检测展开。会上特聘请中国农业科学院，饲料研究所，董颖超博士做了&ldquo 实验室质量控制要求及饲料生产企业实验室要求&rdquo 和&ldquo 预混合饲料中维生素的检测&rdquo 的专题报告。而后是博纳艾杰尔技术工程师奉上的饲料中氨基酸、三聚氰胺检测主题讲座。培训内容十分精彩，参会人员认真听取并进行提问。 此次交流会另一热点是参会人员均可实地操作&ldquo LC-10F高效液相色谱仪&rdquo &mdash &mdash 为饲料企业量身打造的检测仪器！人手一机，根据国标方法进行实际检测方法操作，包括：饲料中维生素检测、氨基酸检测、微量元素检测。有些技术员甚至带来了饲料样品，博纳艾杰尔技术工程师根据要求，现场对其进行分析。 会后，参会人员均表示已掌握相关检测方法，并能分析处理检测过程中出现的问题，符合《饲料和饲料添加剂管理条例》对检测技术人员和能力的要求。此次技术交流会圆满成功！ 上机操作前，博纳艾杰尔技术工程师为参会人员进行详细讲解 培训人员合影

本文来源： 柯瑞斯质谱平台摘 要目的　 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)、维生素E(α-、β-和γ-生育酚)的方法。 方法　 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈(50:50, v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取，以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱，2.5mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相，梯度洗脱，电喷雾电离(ESI~+)、多反应监测(MRM)模式下检测，同位素内标法定量。结果　 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好，相关系数r0.995；6种脂溶性维生素的检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL；加标回收率为86.6%～107.7%，日内精密度9.6%，日间精密度9.3%。NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度，结果偏差均在5%以内。结论　 本方法准确度高、重现性好、用血量少，适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测。正 文维生素在人体生长代谢过程中发挥着重要作用，是人体必须的微量营养素，缺乏或过量都会对人体健康产生不利影响。维生素A、D、E是脂溶性维生素，研究表明缺乏这些维生素会增加患夜盲症、骨质疏松、心血管疾病及免疫系统相关疾病的风险[1],婴幼儿及未成年人缺乏其对生长发育的影响则更为明显[2-4]。目前维生素检测的方法主要有高效液相色谱法[5-7]、液相色谱-串联质谱法[8-14]等，其中液相色谱-串联质谱法因其灵敏度高、重现性好、可同时快速检测多种维生素已成为很多临床实验室的首选方法。但是目前的液相色谱-串联质谱方法血液需求量较大[10,13],检测项目单一[8-9,14]或检测时间较长[11],不能满足临床同时快速检测多个项目的需求，特别是婴幼儿采血困难采血量很难满足需求。虽然已有部分学者建立微量检测方法用于维生素检测，但是这些方法需要衍生化过程，前处理复杂耗时较长[8-9,14]。因此，建立能够用微量血液同时快速检测多种维生素的方法满足临床不同年龄段的检测需求显得尤为必要。此外，视黄醇，维生素D的代谢产物25-OH-VD2、25-OH-VD3,α-生育酚是脂溶性维生素A、D、E在血液循环中的主要存在形式，常作为脂溶性维生素检测的首选指标[15-18]。γ-生育酚是维生素E主要的饮食摄入形式，但其与α-生育酚转移蛋白(α-TTP)的亲和力较低，在体内含量较α-生育酚低，但是，近年来文献报道其在人体健康活动中也扮演着重要角色[19]。本文建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中视黄醇，维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)和α-、β-、γ-生育酚的方法，满足临床各年龄段尤其是对婴幼儿同时快速检测多种维生素的需求。１实验部分１.１　 仪器与试剂　液质联用仪；高速冷冻离心机；涡旋振荡仪；超声波振荡器；氮吹仪(Agela)；紫外分光光度计。视黄醇、25-OH-VD2、25-OH-VD3、α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚均购自美国Sigma-Aldrich；视黄醇-d6标准品购自上海谱芬生物；25-OH-VD2-d3购自美国IsoSciences、25-OH-VD3-d6、α-生育酚-d6标准品购自加拿大TRC 血清质控样品购自美国NIST 收集安徽省第二人民医院近期健康体检正常儿童血液样本17份，避光保存。LC-MS级甲醇，色谱级乙腈、正已烷及甲酸均购自美国Fisher；甲酸铵、牛血清白蛋白(BSA)购自美国Sigma-Aldrich；色谱级乙醇购自国药集团。实验用水由Milipore纯水仪(美国密理博)提供。１.２　 标准溶液和内标溶液的配制　 用无水乙醇配制视黄醇标准品储备液100μg/mL；α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚标准品储备液各1000μg/mL，并用紫外分光光度计对其浓度进行校正[18,20]。用甲醇配制25-OH-VD2标准品储备液25μg/mL和25-OH-VD3标准品储备液100μg/mL，视黄醇-d6标准品储备液100μg/mL，25-OH-VD2-d3标准品储备液50μg/mL，25-OH-VD3-d6标准品储备液50μg/mL，α-生育酚-d6标准品储备液1000μg/mL。将各目标化合物标准储备液用复溶液(初始流动相)稀释混匀，配制成混合标准溶液(视黄醇2.50μg/mL、25-OH-VD2 0.20μg/mL、25-OH-VD3 0.40μg/mL、α-生育酚50.00μg/mL、β-生育酚5.00μg/mL、γ-生育酚 5.00μg/mL)；将各同位素标品储备液用甲醇稀释混匀，配制成混合内标工作液(视黄醇-d6 2.00μg/mL、25-OH-VD2-d3 0.10μg/mL、25-OH-VD3 0.20μg/mL、α-生育酚-d6 20.0μg/mL)。取4g BSA溶解于100mL水中配成4% BSA溶液。１.３　 样本前处理　 取血清样品20μL至2mL离心管中，加入10μL同位素内标工作液，80μL水，2000r/min涡旋振荡30s后加入200μL甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，2000r/min混匀60s；加入800μL正己烷，2000r/min，混匀5min，然后4℃，12000r/min离心5min；吸取600μL上清液至1.5mL离心管中，室温下氮气吹干；加100μL初始流动相复溶，涡旋振荡60s，4℃，12000r/min离心5min，上清液转移至进样瓶中待分析。１.４　 色谱 － 质谱条件　 采用Phenomenex Kinetex F5(100mm × 2.1mm, 2.6μm)色谱柱，柱温35℃，流动相A含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的水溶液；流动相B含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸的甲醇溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，70%B，2.0～2.5min，70%～88% B，2.5～3.5min，88% B，3.5～3.51min，88%～81%B，3.51～11.0min，81% B，11.0～12.0min，81%～70%B，流速0.5mL/min。进样量：20μL。采用多反应监测(MRM)、电喷雾正离子模式(ESI+)，离子源温度 150℃，脱溶剂温度500℃，毛细管电压3kV，脱溶剂气流速1000L/h；6种脂溶性维生素的MRM 离子参数见表1。２　 结果与讨论２.１　 前处理条件优化　 对血清前处理过程中蛋白沉淀剂(甲醇、乙腈、乙醇)的选择及萃取溶剂正己烷的用量(400μL、600μL、800μL)进行了优化，结果表明，甲醇-乙腈(50∶50,v/v)，沉淀效果最好，色谱图杂峰明显减少；正己烷用量较大时萃取更完全，信号值更高。另外，考察了不同复溶液体系：甲醇-水(50∶50,v/v)、甲醇-水(70∶30,v/v)、甲醇均含2.5mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸对色谱分离的影响，结果如图1所示，使用b组复溶液即初始流动相时视黄醇响应值较a组增加1倍以上，c组视黄醇峰宽变大且峰形不对称。同时b组中25-OH-VD3和25-OH-VD2响应值是a组的2倍、c组的4倍以上，且峰形明显改善有利于25-OH-VD3和 25-OH-VD2的分离检测。最终，采用血清样加水混匀后用200μL沉淀剂(甲醇：乙腈(50∶50,v/v)沉淀蛋白，800μL正已烷液液萃取，取600μL上清液氮吹，初始流动相复溶进样。２.２ 　 液 相 色 谱 条 件 优 化 　 Kinetex F5色谱柱可以实现所有组分包括β、γ-生育酚的分离。此外，25-OH-VD3同分异构体3-epi-25-OH-VD3在婴幼儿体内含量较高，对维生素D含量测定影响较大[21]，该色谱柱可以实现25-OH-VD3和3-epi-25-OH-VD3的分离，减少3-epi-25-OH-VD3对检测结果的影响。故采用Kinetex F5色谱柱进行所有组分的分离(见图2)。研究发现在流动相中加入甲酸铵后其促进目标化合物离子化的效果较加入乙酸铵好，响应值增加明显，故在水相和有机相中均加入2.5mmol/L甲酸铵。２.３　 线性范围、检出限和定量限　 将混合标准溶液用复溶液逐级稀释，得到一系列标准工作液，各取20μL，分别加入10μL内标工作液和80μL 4% BSA溶液，其余操作同样本前处理。由于人血中存在内源性脂溶性维生素，故在标曲制作中加入4% BSA。以各目标化合物的色谱峰与其相对应的同位素内标色谱峰的峰面积比值-浓度比值作图，得到各目标化合物的标准系列工作溶液的直线拟合方程，并计算相应的线性相关系数。6种脂溶性维生素的标准曲线和线性范围见表2。结果表明，6种脂溶性维生素在对应的浓度范围内线性关系良好，相关系数0.995，标准溶液色谱图如图3所示。每个浓度重复检测6次，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥3的最低浓度值定为检测限，满足相对标准偏差20%且信噪比S/N≥10的最低浓度值定为定量限。6种脂溶性维生素检测限为0.20～1.25ng/mL，定量限为0.39～3.88ng/mL(见表2)。２.４　 方法精密度　将低、中、高三个浓度标准品溶液加入4% BSA混合血清样本经本法处理后进行检测，每个浓度重复6次，连续检测三天，计算日内精密度为0.9%～9.6%，日间精密度为3.0%～9.3%(见表3)。该方法同时测定6种脂溶性维生素的日内精密度和日间精密度均在15%以内，方法精密度满足检测需求。２.５　 方法准确度　 将低、中、高浓度的标准品溶液加入混合血清样本中按本法进行前处理后进行检测，每个浓度重复6次，计算加标回收率，3个水平的加标回收率为86.6%～107.7%，相对标准偏差(RSD)为1.46%～9.39%(见表4)。该方法加标回收率均在80%～120%以内，方法准确度高满足检测需求。２.６　 方法验证　 采用建立的UPLC-MS/MS方法对美国国家标准技术研究所(NIST)制定的标准参照品SRM 968f进行检测，每个水平重复2次取平均值，验证方法准确度。结果表明，除25-OH-VD2含量较低未能检出外，其它检测结果与靶值偏差均在5%以内，该方法检测结果准确可靠(表5)。２.７　 实际样品测定　 使用本方法对17份健康儿童血液样本进行检测，其中视黄醇含量为0.22～0.43μg/mL，25-OH-VD2含量为未检出～5.19ng/mL，25-OH-VD3含量为6.83～49.21ng/mL，α-生育酚含量为5.63～12.73μg/mL，β-生育酚含量为0.03～1.37μg/mL，γ-生育酚含量为0.11～1.68μg/mL。本法适用于微量临床血液样本6种脂溶性维生素的同时快速检测。３结　 论本研究建立了超高效液相色谱串联质谱法同时测定微量血清样本中多种脂溶性维生素的方法，并对前处理过程中的蛋白沉淀试剂、萃取液用量，复溶液等进行了优化，以减少色谱图中噪音干扰，改善色谱峰形，提高检测灵敏度。并比较了不同色谱柱对多种脂溶性维生素尤其是不同类型维生素E的分离效果，最终选择Phenomenex Kinetex F5色谱柱，该色谱柱可以实现β-生育酚和γ-生育酚的有效分离。本研究中只需20μL血清就能够快速完成6种脂溶性维生素的测定。该方法测定样本需求量少、操作简单、检测结果准确快速可实现大量临床样本的同时检测，尤其对采血较为困难的婴幼儿可以实现少量血液样本检测多数项目的需求。参考文献（略）本文引用来源： 李雪梅,吴慧慧,陈竞,赵盼,唐玉菲.超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素[J].现代预防医学,2022,49(07):1297-1302.

维生素（vitamin）是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的y类微量有机物质，对生命机体的新陈代谢、生长发育和保持健康具有j重要作用。目前，市场上很多食品均含有维生素，其添加种类和成分的多寡，对身体健康与否显然起到举足轻重的关系。因此，百灵威为食品检测提供品种齐全的维生素标样，可协助相关部门快速精确地检测食品中维生素的营养成分及其比例，以保障人们的饮食安全与营养均衡。百灵威作为分析l域行业引l者，拥有全球化大型标样库，产品系列涉及农药、石化、环境、食品、无机、烟草等多个l域。所有化学对照物质都达到或c过了美g化学会z新的分析试剂规格标准，符合ACS 标准、NIST/NVLAP、ISO9001 认证的要求，可满足z高质量控制体系要求，每份标准样品均附带原批次质检报告、材料安全数据卡，确保实验可溯源，并且可以为用户提供专业标样的定制服务。 ■ 水溶性维生素系列标样 产品编号 产品名称 CAS 包装 目录价 VIT-001N 维生素B1盐酸盐 / 硫胺素 Vitamin B1 hydrochloride 67-03-8 1 g ￥195 C 17455500 硝酸硫胺 / 维生素B1硝酸盐 Thiamine mononitrate 532-43-4 0.25 g ￥432 C 17561000 硫代硫胺素 Thiothiamine 299-35-4 1 g ￥540 VIT-002N 维生素B2 / 核黄素 Vitamin B2 83-88-5 1 g ￥195 C 16813610 核黄素磷酸钠 Riboflavine-5 phosphate sodium 130-40-5 0.25 g ￥432 VIT-003N 维生素B6 / 盐酸吡哆辛 / 盐酸吡哆醇Vitamin B6 58-56-0 1 g ￥195 VIT-004N 抗坏血酸 / 维生素C Vitamin C 50-81-7 1 g ￥195 C 10303100 抗坏血酸钙盐 Ascorbic acid calcium salt 5743-28-2 0.25 g ￥432 C 10303900 抗坏血酸钠盐 / 维生素C钠盐 L-Ascorbic acid sodium salt 134-03-2 0.25 g ￥396C 10303930 维生素C棕榈酸酯 / L-抗坏血酸棕榈酸酯Ascorbyl palmitate 137-66-6 0.25 g ￥432 VIT-005N 烟酸 / 吡啶-3-羧酸 / 尼克酸 Vitamin B3 59-67-6 1 g ￥195 VIT-006N 烟酰胺 / 尼克酰胺 / 维生素B3 Nicotinamide 98-92-0 1 g ￥195 C 15521030 烟酸苄酯 Nicotinic acid-benzyl ester 94-44-0 0.25 g ￥360 VIT-007N 叶酸 Vitamin M 59-30-3 1 g ￥195 VIT-008N D-泛酸 / 维生素B5 D-Pantothenic acid 79-83-4 0.1 g ￥370 C 15844500 D-泛酰醇 D-Panthenol 81-13-0 0.5 g ￥936 CA15845000 泛酸钙单水合物 Pantothenic acid calcium salt 63409-48-3 0.25 g ￥360 VIT-009N-R1 D-生物素 / 维生素H / 辅酶R Vitamin H 58-85-5 0.1 g ￥195 VIT-010N-R1 维生素B12 Vitamin B12 68-19-9 0.025 g ￥234 VIT-WSK-R1-SET 水溶性维生素套装，包括：VIT-001N to VIT-010N 10 units ￥1,264 ■ 脂溶性维生素系列标样产品编号 产品名称 CAS号 规格 目录价 VIT-012N 维它命E Vitamin E 10191-41-0 0.1 g ￥273 CA17924320 维生素E醋酸酯 Vitamin E acetate 7695-91-2 0.5 g ￥540 VIT-013N 胆骨化醇 / 维生素D3 Vitamin D3 67-97-0 0.1 g ￥273 CA17924100 骨化二醇 Vitamin D3 25-hydroxy monohydrate 63283-36-3 0.05 g ￥1,134 VIT-014N 维生素A棕榈酸酯 Vitamin A palmitate79-81-2 0.1 g ￥1,206 VIT-015N 维生素E醋酸酯 Vitamin E acetate 7695-91-2 0.1 g ￥273 VIT-016N 维生素K1 / 2-甲基十六碳烯-1,4-萘二酮 Vitamin K1 84-80-0 0.1 g ￥273 VIT-017N 维生素K2 Vitamin K2 11032-49-8 0.1 g ￥1,556 VIT-018N 维生素K3 / 甲萘醌 Vitamin K3 58-27-5 0.1 g ￥273 VIT-019N BETA-胡萝卜素 b-Carotene 7235-40-7 0.01 g ￥389 CA10290900 beta-阿扑-8' -胡萝卜醛 8' -Apoaldehyde 1107-26-2 0.05 g ￥936 VIT-020N 维生素 E 琥珀酸酯 Vitamin E succinate 4345-03-3 0.1 g ￥273 VIT-022N 维生素D2 Vitamin D2 50-14-6 0.1 g ￥273 VIT-FSK-R2-SET 脂溶性维生素套装，包扩：VIT-012N to VIT-022N 10 units ￥2,457 ■ 相关分析耗材产品 产品编号产品名称 规格 目录价 116481 甲醇 99.9% [HPLC/ACS] 4 L ￥180 134752 乙腈 99.9% [HPLC/ACS] 4 L ￥400 187553 水 [HPLC] 4 L ￥375 904802 乙醇 95% 500 mL ￥22 S02001 C18 柱，150 mm× 4.6 mm, 5 &mu m 1 支￥2,500 S02302 C18 柱，250 mm× 4.6 mm, 5 &mu m 1 支 ￥2,800 S010125-3002 AB-1气相柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m 1 支 ￥3,960 S010525-3002 AB-5气相柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 &mu m 1 支 ￥3,960 ZTLMGL-4.1 针筒式滤膜过滤器 Ф13 0.2 &mu m（有机相） 100 片/包 ￥150 WKLM-4.2 微孔滤膜 Ф50 0.45 &mu m （有机相） 100 片/包 ￥210 901275 J＆K 瓶口分配器（5.0-50.0 mL） 1 支 ￥2,000 958945 J＆K单道手动可调移液器（100-1000 &mu L） 1 支 ￥645 928429 J＆K磁力搅拌器（数显、加热、不锈钢） 1 台 ￥3,112 5182-0553 螺纹透明样品瓶（蓝色螺纹盖，PTFE红色硅橡隔垫） 100 个/包 ￥527 5182-0728 聚丙烯螺纹瓶盖（无隔垫） 100 个/包 ￥109 5183-4759 高j绿色隔垫（带预穿孔） 50 个/包 ￥699 CER-001-1 1.5 mL标准毛细储存瓶 1 个 ￥240 5183-2086 400 &mu L 脱活的玻璃平底内插管 500 个/包 ￥1,441 5183-4696 单细径锥不分流衬管 25 个/包 ￥6,030 5183-4693 单细径锥，带玻璃毛不分流衬管 5 个/包 ￥1,460 5188-5365 衬管O形圈 10 个/包 ￥143 5188-5367 进样口密封垫（配备垫圈，*金属铸模工艺，镀金密封工具包） 1 个 ￥389

近日，英国维生素 D 室间质量评价计划（vitamin D external quality assessment scheme，DEQAS）结果公布。金域质谱维生素D项目再次100%通过。自2011年开始，金域质谱维生素D项目至今已连续11年满分通过DEQAS室间质评计划，彰显出金域质谱在维生素D检测项目上具有良好的结果溯源性和严格的质量管理，检验结果受国际认可。为解决25-羟基维生素D检测结果互通性的问题，2010年，美国健康研究署膳食摄入部成立了维生素D标准化项目（Vitamin D Standardization Program，VDSP），通过美国国家标准与技术研究院（National Institute of Standards and Technology，NIST）和参考测量体系，促进全球所有相关实验室检测方法的标准化。其中英国维生素 D 室间质量评价计划（vitamin D external quality assessment scheme，DEQAS）会将参加此室间质量评价（EQA）计划的实验室检测结果，与NIST结果进行比较，从而帮助实验室发现并纠正方法中存在的问题，在推进维生素D标准化检测过程中发挥重要作用。维生素D是类固醇衍生物，主要包括维生素 D2（麦角钙化醇）和维生素 D3（胆钙化醇），在人体钙磷代谢和骨质钙化中起着重要作用，维生素D缺乏可能导致佝偻病、软骨病和骨质疏松等疾病。有多项研究表明，维生素D的营养水平若不能维持在最佳范围内，有增加患糖尿病、高血压、乳腺癌等疾病的风险。25-羟基维生素D[25(OH)D]作为维生素D在体内的主要代谢形式之一，其半衰期长，存在形式稳定，成为人体维生素D营养评估的最佳检测指标。金域质谱自2011年起使用LC-MS/MS平台，开展血清25-羟基维生素D检测，连续多年零缺陷通过CAP和ISO15189质量体系评审，可为临床提供25-羟基维生素D的精准检测服务。其使用LC-MS/MS平台，开展血清25-羟基维生素D检测，具有灵敏度高，特异性好等优点，能同时准确测定25(OH)D2和25(OH)D3的浓度，并实现25(OH)D3和 3-epi-25(OH)D3的分离，结果更精准。多年来，金域质谱25-羟基维生素D项目参加DEQAS的检测结果一直与NIST靶值高度吻合，呈高度相关性，检测结果准确可靠，具有良好的室间可比性。金域质谱25(OH)D项目参加DEQAS的检测结果与NIST靶值相关性（以2022年结果为例）此外，金域质谱25-羟基维生素D项目还参与了国家卫生健康委临床检验中心（NCCL）、美国病理家学院（CAP）等国内外多个权威机构的室间质量评价计划，其结果均以优异的成绩通过。

省时省力, 二维液相分析配方奶粉中的维生素A D E 关注我们，更多干货和惊喜好礼配方乳——脂溶性维生素维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必须从食物中获得的一种微量有机物质，根据物理性质不同分为水溶性和脂溶性两大类，其中脂溶性维生素A、D、E在人体的视觉能力、免疫功能、抗氧化抗衰老能力等诸方面都有着重要的生理功能。维生素不足会造成人体的亚健康，因此对于维生素的补充越来越受到人们的重视。婴幼儿及成人配方乳品是脂溶性维生素强化的重要形式之一。配方奶粉基质复杂，我国和欧洲的关于食品中维生素 D 现行标准方法中，需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套仪器，分别进行净化制备和分析，分析效率很低。 赛默飞很早提出了二维液相的解决方案，采用一套液相两根色谱柱中心切割的方法可以将维生素A、D、E异构体完全分离，方案被伊利、君乐宝等诸多乳品企业所采用。本文在前期研究的基础上，介绍更省时的超快速在线二维方案和既省时又省力的在线固相萃取-二维液相方案。超快速在线二维方案 本方案仪器配置如下仪器：Thermo Fisher Vanquish高效液相色谱仪泵：Vanquish Dual Pump（VF-P32-A-01）自动进样器：Vanquish Autosampler (VF-A10-A, 100 μL Sample Loop）柱温箱：Vanquish Column Compartment（VH-C10-A, 含两个Viper Only 2p-6p切换阀）检测器：Vanquish Diode Array Detector HL（含10mm或60mm光纤池）样品收集环体积：500 μL色谱软件：变色龙Chromeleon 7.3仪器连接图见图2。图2 仪器连接图（超快速在线二维方案）（点击查看大图） 供试品溶液制备参考GB 5009.82-2016的方法，精密称取固体奶粉试样约10 g（精确到0.01 g）于150 mL平底烧瓶中，用约30 mL 45 ℃～50 ℃温水使其溶解，混匀。于上述处理的试样溶液中加入1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT，混匀，加入30 mL无水乙醇，充分混匀后加入约20 mL 0.5 g/g的氢氧化钾水溶液混匀，在80 ℃恒温水浴振荡皂化约30 min后，取出立刻用冷水冷却到室温。 将上述皂化液转移入250 mL分液漏斗中，加入50 mL石油醚-乙醚混合液（1:1, V:V），振荡萃取5 min，将下层溶液转移至另一个250 mL分液漏斗，加入50 mL石油醚-乙醚混合液再次萃取，合并醚液，用约100 mL水洗涤醚液，重复3次，至醚液洗至中性。醚液通过无水硫酸钠脱水过滤，滤液收入250 mL圆底烧瓶中，于旋转蒸发仪上在40 ℃水浴旋蒸至约2 mL，立即氮气吹干，用甲醇复溶转移至10 mL容量瓶后定容，上机分析。12min即可完成维生素A、D、E异构体7个化合物的分析，测定谱图见图3。图3维生素A、D和E混合标准溶液分析谱图（a：维生素A；b：维生素D2和D3；c：维生素E）（点击查看大图） 在线固相萃取-二维液相方法 上面介绍的超高效液相平台方案给大家节省了分析时间，下面这个方案可在赛默飞常规液相上运行，结合在线固相萃取，可以实现皂化液直接上机分析，省时又省力。样品皂化过程同上，皂化后，取出立刻用冷水冷却到室温，用50%乙醇水溶液转移并定容到100mL量瓶中。皂化液高速离心5～10min（5000rpm）后用0.22μm尼龙材质针式过滤器过滤后上机分析。 该方案仪器配置上采用三泵两检测器双阀实验所用仪器配置如下：仪器：Thermo Fisher Vanquish高效液相色谱仪泵：Vanquish Dual Pump（VF-P32-A-01）和Vanquish quatery Pump (VF-P20-A)自动进样器：Vanquish Autosampler (VF-A10-A, 100 μL Sample Loop）柱温箱：Vanquish Column Compartment（VH-C10-A, 含两个Viper Only 2p-6p切换阀检测器：Vanquish Diode Array Detector HL（含10mm或60mm光纤池），U3000 VWD3100 Detector（含11 μL流通池）样品收集环体积：500 μL色谱软件：变色龙Chromeleon 7.3 仪器连接图见图4，测定谱图见图5和图6。图4 仪器连接图（在线固相萃取-二维方案）（点击查看大图）图5. Vd测定谱图（a为对照品，b为样品）图6. Va和Ve测定谱图（a为对照品，b为样品）（点击查看大图） 总结 赛默飞为大家提供了多种维生素A、D、E异构体的测定方案，方案涵盖常规液相和超高效液相、离线SPE和在线SPE，无论是对于现有仪器的升级改造还是全新平台的建立都可以找到对应的选择。现代化的仪器方法提高了奶粉样品中脂溶性维生素的分析效率，减少了每日多批次样品检测任务的繁重。 “码”上下载填写表单即刻获取【Thermo Scientific Vanquish UHPLC系统样本】 如需合作转载本文，请文末留言 扫描下方二维码即可获取赛默飞全行业解决方案，或关注“赛默飞色谱与质谱中国”公众号，了解更多资讯+了解更多的产品及应用资讯，可至赛默飞色谱与质谱展台。https://www.instrument.com.cn/netshow/sh100244/

导读维生素作为一类人体必须的微量营养素，在新陈代谢过程中扮演着十分重要的角色。无论是儿童、青少年，还是中老年人，都需要维生素的合理摄入来促进和保证身体的正常生长发育；无论是病人、亚健康人群，还是健康群体，也都需要维生素的合理摄入来改善和保障身体的健康状态。尽管“维生素”这个词耳熟能详，但您真的了解它吗？维生素是什么？维生素是维持人体正常生理功能的微量有机物质，在人体生长、代谢、发育过程中发挥重要作用。是除了水、糖类、脂肪、蛋白质、膳食纤维和矿物质外，人体的一种必须营养素。对于多数维生素来说，人体自身不能合成或合成量不足，需从食物获取。全谱维生素的种类及生理作用全谱维生素脂溶性维生素 &bull A，D（D2,D3)，E，K(K1,MK-4,MK-7)溶于脂肪而不溶于水；人体摄入后，需经胆汁的乳化，而后被小肠吸收易在体内储存，摄入过多会造成“中毒”现象&bull 水溶性维生素 &bull B1，B2，B3，B5，B6，B7，B9，B12，C溶于水而不溶于非极性有机溶剂；在人体中不需消化，直接由肠道吸收在体内储存量较少，多余的会随尿液排出，易出现缺乏症状表1. 全谱维生素的生理作用维生素监测方法有哪些？常规的维生素检测方法有免疫法、分光光度法、化学发光法、微生物法、高效液相色谱法等，这些方法灵敏度低、特异性差，且通量小，难以实现多种维生素的同时测定。高效液相色谱-串联质谱法克服了以上方法的诸多缺点，逐渐成为维生素检测的“金标准”。岛津全谱维生素检测方案岛津三重四级杆液质联用仪具有高灵敏度、强抗干扰能力和超快扫描速度等性能优势，分别建立了一针法测定7种脂溶性维生素和一针法测定9种水溶性维生素的方法，检测时间分别仅需8 min和6 min，大大提高了分析效率和检测通量。岛津三重四级杆液质联用仪&bull 简便快捷的前处理操作，为高效率检测提供基础脂溶性维生素水溶性维生素前处理方法液液萃取法蛋白沉淀法方案优势稳定性好，可有效去除基质成分，避免对待测化合物产生基质干扰成本低廉、流程简单，去除蛋白效率高，同时可最大程度保证水溶性维生素在处理过程中的稳定性&bull 丰富多样的仪器配置，为高灵敏度检测提供保障岛津三重四级杆液质联用仪不仅可以搭载常规ESI离子源和APCI离子源，也可使用DUIS离子源同时进行ESI和APCI两种离子化过程，丰富多样的配置可实现全谱维生素的高灵敏度检测。七种脂溶性维生素质量色谱图九种水溶性维生素质量色谱图&bull 可靠耐用的色谱柱，为高通量检测提供支撑脂溶性维生素水溶性维生素色谱柱型号Shim-pack GIST C18Shim-pack GIST C18-AQ色谱柱规格50 mm×2.1 mm I.D., 2 μm100 mm×2.1 mm I.D.,1.9 μmP/N227-30001-02227-30807-02特点pH耐受范围1-10；通用性强；高惰性硅胶提高分析精度和重现性；可用于分离离子型化合物pH耐受范围1-10；键合距离优化技术，提升极性化合物保留，改善分离；高惰性硅胶提升耐久性；纯水条件下具有更高耐受性和稳定性&bull 优良的方法学性能，为样品的定量检测保驾护航采用同位素内标法进行定量，16种维生素的校准曲线相关系数r均在0.995以上，校准点的准确度在86.4%~110.4%之间，线性拟合度良好。通过测定质控品，考察方法的准确度和精密度。高低两水平的质控品测定准确度在90%~105%以内，精密度RSD（n=6）在1.0%~5.3%以内，准确度和精密度良好。表2. 岛津全谱维生素检测方案方法学性能案例分享对某样品进行检测，结果如下。表3. 某样品检测结果ng/mL结语维生素关乎每个人的身体健康，精准检测血液中维生素含量对于营养状况的评估、疾病的辅助治疗都有着重要的意义。岛津全谱维生素检测方案从仪器配置，到样品前处理流程和样品分析检测，均提供了稳定、可靠、高效的方法。精准检测，合理补充，方能保证维生素在体内正常发挥生理作用。呼吁大家多样化饮食，营养均衡，增加户外运动，迎接大健康时代！注：文中推荐技术方法方案仅用于相关专业人士技术交流，不作为临床诊断依据。撰稿人：郭磊文内容非商业广告，仅供专业人士参考。

果维康以维生素C、维生素C纳、山梨醇粉、天然香料、硬脂酸镁、阿斯巴甜、色淀为主要原料的保健食品，具有补充维生素C的保健功能。维生素C又称L-抗坏血酸，具有抗氧化自由基的作用、并能刺激身体制造干扰素来破坏病毒以减少白血球与病毒的组合，保持白血球的数目，提高中性细胞和淋巴细胞的杀菌和抗病毒能力，对提高人体免疫力有着重要作用。维生素C还具有抗氧化作用。感冒时中性白细胞会释放出大量氧化自由基及氧化性物质，从而引起相关症状，而白细胞内的维生素C则能促进组织这些有毒物质跑到白细胞之外。感冒时，白细胞内的维生素C浓度会大量降低，如果补充大剂量维生素C的浓度，减轻感冒症状。因此，在感冒早期服用维生素C，可以减轻感冒症状，缩短近1/4的感冒时间。 本实验我们使用的是上海禾工科学仪器有限公司研发生产的AT-6全自动滴定仪对果维康中维生素C的含量进行测定。 AT-6电位滴定仪是一款智能的滴定分析器，采用7英寸中文人机对话全彩触摸屏，高精度滴定管、电磁切换阀以及多样的高分辨检测模块，将简单易懂的操作和最高精确性以及出色的可靠性完美地结合在一起。根据样品性质，仪器选用不同电极可进行酸碱滴定、氧化还原滴定、络合滴定、非水滴定和pH测量等多种滴定。AT-6电位滴定仪具备多项专利技术，仪器运行安静平稳，检测精度高，测量结果重复性好，各项性能指标达到进口同类产品，同时仪器故障率及使用寿命远高于国内同类产品。仪器具有串口通讯连接打印机实现分析结果打印，具有USB接口连接U盘实现数据备份，具有WLAN接口连接电脑实现联机控制。 技术参数显 示 屏：7.0英寸高清全彩触摸式显示屏测量范围：-2000mV-2000mV；0-14PH值；0-200μA分 辨 率：0.1mV；0.001PH；0.1μA；0.1℃准 确 度：±0.2mV；±0.003PH；0.2μA输入阻抗：大于1×1012Ω，补偿电流：小于1×10-12A滴定管规格：20mL（标配）；5mL，10mL （精度0.15%级）滴定模式：动态等当点滴定模式、增量等当点滴定模式、（电位或PH值）EP终点永停滴定模式、PH校正及测量应用范围：酸碱滴定、氧化还原滴定、络合滴定、非水滴定、pH测量、颜色滴定滴定精度：1/20000滴定管体积电极接口：直插式、BNC ，配有温度电极接口测量方法：20种记录存储：200条（可批量导出U盘）滴 定 台：带升降支架的磁力搅拌台（标配），杆式螺旋搅拌器数据接口：RS232串口，USB接口，WLAN接口环境温度：5-40℃环境湿度：≤80%电 源：220V/50H实验仪器AT-6电位滴定仪 （自动电位滴定仪AT-V6、自动滴定仪AT-E6)铂复合电极10ml滴定管单元测定方法含量测定：取样品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/l）在T960电位滴定仪上滴定至终点，同时做空白实验。每1ml碘滴定液（0.05mol/l）相当于8.806mg的C6H8O6.试剂滴定剂:C（I2))=0.050mol/L, 滴定剂的浓度按照国标标定.稀醋酸果维康维生素C片（市售）实验步骤仪器准备，请参照说明。取样品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/l）在T960电位滴定仪上滴定至终点，同时做空白实验。每1ml碘滴定液（0.05mol/l）相当于8.806mg的C6H8O6。测试结果（1）参数设定: 常量滴定（2) 实验数据 空白体积：V0=0.335ml滴定剂浓度：C(I2)=0.05155mol/L 式中C为碘标准溶液的浓度V1为样品所消耗的滴定液的体积V0为空白所消耗的滴定液的体积m为所称样品的质量0.008806为1ml碘（0.05mol/l）相当于8.806mgC6H8O6. （3）曲线样品量：0.790g, 终点体积：11.389ml样品量：0.790g, 终点体积：11.436ml样品量：0.790g, 终点体积：11.674ml 实验结果从实验中可以看出该果维康中维生素C平均含量为12.83%。AT-6电位滴定仪完全可以满足果维康中维生素c含量的测定需求。 关键词：电位滴定仪，全自动滴定仪，全自动电位滴定仪，滴定仪，AT-6

2014年7月15日，上海 ——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技（以下简称：赛默飞）近日发布在线二维柱切换法同时测定饲料中维生素A、D和E含量的解决方案。维生素是维持机体正常活动必不可少的物质，适量的各种维生素作为饲料添加剂能促进禽畜生长，增强禽畜体质，产生显著的经济效益。 GBT17817-2010、17818-2010 和17812-2010采用HPLC法分别测定饲料中维生素A、D 和E 的含量，样品均需要经过皂化、乙醚萃取过程。通常Vitamin A 和Vitamin E 在样品中含量较高，受基质干扰较少，可直接进样分析；但Vitamin D 含量较低，易受基质干扰，需要经过制备液相色谱的净化，收集含有Vitamin D 的流出物后，再以RP 或NP-LC 进行分析，前处理过程极其繁琐。本方案采用在线二维中心切割方法可同时完成维生素A、D和E 的测定。DGLC双三元液相色谱系统连接图赛默飞利用DGLC双三元液相色谱建立的在线二维柱切换法同时测定饲料中脂溶性维生素A、D和E含量的方法，与常规方法比较，本方法简便、快速，简化了样品前处理过程，提高了样品分析效率。同时，采用二维色谱分离可以减少色谱峰的重叠，改善方法的专属性。 下载应用文章请点击： http://www.instrument.com.cn/download/DownLoadFile.asp?id=332025 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技（纽约证交所代码：TMO）是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元，在50个国家拥有员工约50,000人。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战，促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于Thermo Scientific、 Life Technologies、 Fisher Scientific 和 Unity? Lab Services四个首要品牌，我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合，为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息，请浏览公司网站：www.thermofisher.com 。赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国已超过30年，在中国的总部设于上海，并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司，员工人数超过3800名。为了满足中国市场的需求，现有8家工厂分别在上海、北京、广州和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心，将世界级的前沿技术和产品带给国内客户，并提供应用开发与培训等多项服务；位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术，研发适合中国的技术和产品；我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队，在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息，请登录www.thermofisher.cn。

近日，国家卫生健康委员会、国家市场监管总局联合发布了2023年第6号文件，关于85项食品安全国家标准和3项修改单的公告，其中包括了GB 5009. 296-2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》（以下称新标准）。本标准代替GB 5009.82-2016《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》中第三法“食品中维生素D的测定液相色谱串联质谱法”和第四法“食品中维生素D的测定高效液相色谱法”。一、主要变化本标准与GB 5009.82-2016相比，主要变化如下：标准名称修改为《食品安全国家标准食品中维生素D的测定》 增加了在线柱切换反相液相色谱法；增加了样品预制备方法 修改了液相色谱串联质谱法的线性范围和仪器参考条件；修改了附录中标准校正溶液的配制方法。二、标准的主要技术内容第一法为正相纯化制备-反相液相色谱法。当固体试样取样量为10.00 g，定容2mL时，维生素D3的检出限为0.7 μg/100 g，定量限为2 μg/100 g。当液体试样取样量为50.00 g时，维生素D3的检出限为0.15 μg/100g，定量限为0.5 μg/100 g。当维生素D2、维生素D3的浓度在50 μg/L-1 000 μg/L范围内，线性关系良好。三水平加标平均回收率为89.0%-102.8%，典型基质样品实验室验证重复性相对标准偏差为1.99%-6.72%。第二法为在线柱切换-反相液相色谱法。当固体试样取样量为0.500g，定容5 mL时，维生素D2、维生素D3的检出限为0.6 µg/100 g，定量限为2.0 µg/100 g。当液体试样取样量为5.00 g，定容5 mL时，维生素D2、维生素D3的检出限为0.06 μg/100 g，定量限为0.2 μg/100 g。当维生素D2、维生素D3的浓度在2.5 μg/L-100μg/L范围内，线性关系良好。三水平加标平均回收率为90.7%-102.4%，典型基质样品实验室验证重复性相对标准偏差为2.99%-6.24%。第三法为液相色谱-串联质谱法。当固体样品取样量为2.00 g，定容1mL时，维生素D2的检出限为0.3μg/100 g，定量限为1.00 μg/100 g；维生素D3的检出限为0.15 μg/100 g；定量限为0.50 μg/100g。当液体样品取样量为10.00 g，定容1mL时，维生素D2的检出限为0.05 μg/100 g，定量限为0.20 μg/100 g；维生素D3的检出限为0.03 μg/100 g；定量限为0.10 μg/100g。当维生素D2、维生素D3的浓度在2.5 μg/L-100 μg/L范围内，线性关系良好。三水平加标平均回收率为88.7%-99.7%，典型基质样品实验室验证重复性相对标准偏差为2.51%-8.69%。 三、国内外相关法规标准情况 我国食品安全国家标准食品中营养强化剂使用标准（GB 14880-2012）对维生素D使用范围要求在0.2 μg/100 g-15.6 μg/100 g。下列食品安全国家标准：婴儿配方食品（GB 10765-2010）、较大婴儿和幼儿配方食品（GB 10767-2010）、 婴幼儿谷类辅助食品（GB 10769-2010）、特殊医学用途婴儿配方食品通则（GB 25596-2010）、特殊医学用途配方食品通则（GB 29922-2013）和婴儿配方食品（GB 10765-2021）、食品安全国家标准较大婴儿配方食品（GB 10766-2021）和幼儿配方食品（GB 10767-2021）中规定的维生素D的标准范围在0.25 μg/100KJ-1.20 μg/100KJ。本方法标准能与上述标准相配套。国内外涉及到的主要检测标准情况如表 1 所示。在此次新标准中，最大的变化便是增加了在线柱切换反相液相色谱法作为维生素D检测的第二法。在线柱切换二维液相法是将不同选择性分离柱组合，加强分离能力的联用技术。柱切换液相色谱系统通常由第一维分离柱和第二维分离柱串联组成，两柱之间以切换阀作为接口，通过流动相流路的改变，将部分或全部第一维柱流出的组分，导入第二维柱进行二次分离，从而起到净化目标化合物，提高系统分离能力的作用。四、更多解决方案通过二维柱切换的液相色谱技术不仅可以提升系统分离能力，改善结构相似化合物的分离分析；同时可以通过第一维的粗分去除样品中大量基质成分干扰，实现样品净化等。小编也整理了各大公司针对维生素D检测推出的相关解决方案，以飨读者。乳制品中维生素A、维生素D和四种维生素E检测方(液相色谱仪)在线二维柱切换-高效液相色谱法同时测定婴幼儿强化奶粉中维生素A、D3、E的含量岛津柱切换二维液相，助您轻松应对“0722维生素D测定法”采用二维液相色谱法测定维生素 AD 制剂中维生素 D 的含量复杂样品自动化分析中的在线前处理技术① | 二维柱切换系统更多食品检测解决方案请点击查看：食品领域解决方案》》》

每个人都应该知道的关于维生素C的事奥豪斯助力检测肉制品 维生素C含量测定 爱美的小仙女都知道， 你的饮食不仅仅与你的整体健康有关，更重要是你的饮食也会影响你的皮肤健康。除了摄入富含维生素和矿物质的食物之外，摄入新鲜水果和蔬菜能让你的身体获得抗氧化剂，帮助促进皮肤健康，保护皮肤免受阳光伤害。 因为新鲜水果和蔬菜中， 富含丰富的维生素C， 维生素c一直是维生素家族中的明星，具有美白和增强免疫力等作用。由于人体不能制造维生素c，而且维生素c在人体内只能停留4个小时，因此每天至少补充两次。同时由于一支香烟可破坏25mg的维生素c，长期吸烟的人更需要服用维生素c。除了新鲜水果和蔬菜中富含维生素C， 小仙女们知道吗，肉制品中， 也含有维生素C 呢。是不是对于热爱美食的你，是个很好的消息呢 ！ 今天我们就来看一下， 奥豪斯助力检测肉制品 维生素C含量测定1 范围GB/T 9695的本部分规定了肉制品维生素C含量的测定方法。本部分适用于肉制品中维生素C含量的测定 2 原理试样中的维生素C用偏磷酸提取后，经2,6-二氯靛酚氧化成脱氢维生素C，与邻苯二胺反应，生成 具有紫蓝色荧光的喹噁啉衍生物。在激发波长350 nm、发射波长430 nm处测定其荧光强度，标准曲线法定量。脱氢维生素C与硼酸可形成复合物而不与邻苯二胺反应， 以此排除试样中荧光杂质产生的干扰。 3 仪器和设备实验室常规设备及下列仪器3.1 机械设备3.2 荧光分光光度计3.3 分析天平：可准确称重至 0.1mg 4. 分析步骤4.1 提取4.2 氧化4.3 荧光反应4.4 测定4.5 平行实验4.6 标准曲线的绘制 5. 本部分的检出限：2mg/kg 客户为什么选择奥豪斯分析天平？奥豪斯Adventurer® AX 分析天平，320x 0.1mg 大量程万分之一天平，适合任何样品。 其中对于测试肉类样品，AX 天平非常易于清洁。 天平体积小巧，有助于实验室节约操作台空间。对于繁复的实验室检测工作，非常的有帮助哦 ！以下，小编就带您看一看AX 的官宣吧~~ 无懈可击！奥豪斯在称量性能、外观设计、天平应用功能中不断进取，研发了新款Adventurer AX系列电子天平。Adventurer AX系列搭载彩色触摸显示屏，符合GLP/GMP法规。前置U盘读取接口，整体空间节省的风罩设计，全面满足实验室所有称量需求。Adventurer AX系列是同等级别天平中，您的最佳选择。 产品特点快速稳定且准确的称量特性，确保了天平的理想称量结果三者结合，确保让您在实验室称量中用最短时间，获取精准的称量结果。彩色触摸显示屏和U盘数据保存功能，带来更现代化的称量体验 宽视角彩色触摸屏方便您对 天平的称量操作和应用设置。前置U盘读取接口方便保存历史称量数据，输出符合GLP/GMP的要求。风罩整体设计有效节约实验室桌面空间，改善和提高用户体验 两片式的顶部和两侧风罩门设 计，巧妙地节省了在侧门推开时后方所需的桌面空间。1mg天平拥有上开门，提供更宽敞的称量室，样品放入更为便捷；0.01g和0.1g天平有更大的称量盘。 如果您想了解更多天平系列或奥豪斯其他产品信息，或正在寻求更专业细致的选型指导，请速速拨打4008-217-188，或点击进入“阅读原文”，并留下相关信息，我们专业的工程师们会竭诚为您服务！参考文献: 《GBT9695.29-2008》

维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。在食物中缺乏任何一种维生素，人和动物都会发生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C时，可分别引起夜盲症、脚气病和坏血病等，严重时足以致命。维生素含量的高低，是评价农产品品质的重要指标之一。维生素广泛存在于各种生物体中，其种类繁多，化学结构与功能各异。按其溶解性可分为脂溶性(VA、VD、VE、VK)和水溶性(VBl、VB2、VB6、VB12、VC)两大类。维生素的分析测定是一项比较复杂的工作。其样品分析的一般程序是:首先用酸、碱或酶分解样品，使其中的维生素游离出来再用溶剂进行提取，提取后对样液进行分离提纯，最后用适当的方法进行定量等。维生素的前处理方法很多，选用方法时应根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量以及干扰物质多少等因素来决定。复杂的前处理过程往往需要智能高效的前处理仪器来进行，Detelogy参考GB 5009.82-2016 提供食品中维生素的前处理解决方案。一、食品中维生素E的测定1、 植物油脂称取2 g油样于25 mL的棕色容量瓶中，加入0.1g BHT，加入10 mL流动相于MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡溶解后，用流动相定容至刻度，摇匀。过滤膜，待进样。注：流动相：正己烷 [叔丁基甲基醚-四氢呋喃-甲醇混合液(20 1 0.1)]=90 10，临用前配制。2 、奶油、黄油称取5 g样品于离心管中，加入0.1 g BHT 45℃水浴融化，加入5 g无水硫酸钠，MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋1 min，混匀，加入25 mL流动相后MultiVortex涡旋振荡提取，离心，将上清液完全转移至浓缩瓶中，并将其放入FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪上，于40℃水浴中浓缩至近干。用流动相定容10 mL，混匀。溶液过滤膜后，待测。3、坚果、豆类、辣椒粉等干基植物样品称取5 g 样品，用iQSE-02/06智能快速溶剂萃取仪提取其中的植物油脂，提取液于FlexiVap12/24全自动智能平行浓缩仪40℃水浴中氮吹浓缩至干，用10 mL流动相将油脂转移至25 mL容量瓶中，加入0.1g BHT，MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡溶解后，用流动相定容至刻度，摇匀。过滤膜，待进样。iQSE-02/06萃取条件萃取温度105℃萃取压力1000 psi加热时间5 min静态时间10 min冲洗体积100%N2吹扫时间60 s萃取溶剂石油醚静态萃取次数3次注：iQSE-02/06智能快速溶剂萃取仪可与FlexiVap-12/24全自动智能平行浓缩仪无缝衔接。二、 食品中维生素 D的测定 液相色谱串联质谱法1、皂化称取2 g试样于50 mL具塞离心管中，加入100 μL维生素 D2-d3和维生素D3-d3混合内标溶液，（含淀粉样品需加入0.4 g淀粉酶、10 mL约40℃温水，60℃避光恒温振荡 30 min后，取出冷却）加入0.4 g 抗坏血酸、6 mL约40℃温水于MultiVortex涡旋1 min，加入12 mL乙醇MultiVortex涡旋混匀，再加入6 mL氢氧化钾溶液MultiVortex涡旋混匀后，80℃避光恒温水浴振荡30 min（如样品组织较为紧密，可每隔 5 min~10 min 取出MultiVortex涡旋0.5 min），取出放入冷水浴降温。2、提取向冷却后的皂化液中加入20 mL正己烷，MultiVortex涡旋提取3 min，离心后转移上层清液到50 mL离心管，加入25 mL水，轻微晃动30次，离心后取上层有机相备用。3、净化将样品提取液置于安装好硅胶固相萃取柱的iSPE-864全自动智能固相萃取仪中进行净化，收集洗脱液于FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪40℃下氮气吹干，加入1.0 mL甲醇，MultiVortex涡旋混匀，过有机滤膜供仪器测定。iSPE-216/864固相萃取条件步骤溶剂用量（mL）流速(mL/min)活化乙酸乙酯82活化正己烷82上样样液202淋洗乙酸乙酯：正己烷（5 95）62洗脱乙酸乙酯：正己烷（15 85）62三、食品中维生素A和维生素E的测定皂化称取10 g固体试样或50 g液体试样于150 mL平底烧瓶中，固体试样需加入约30 mL温水，混匀，（若样品含淀粉时需加入1.0g淀粉酶， 60℃水浴避光恒温振荡30 min后，取出）再加1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT，混匀，加入30 mL无水乙醇，加入20 mL氢氧化钾溶液，混匀后于80℃恒温水浴震荡皂化30 min，冷却。注:1、皂化时间一般为30 min，如皂化液冷却后，液面有浮油，需要加入适量氢氧化钾溶液，并适当延长皂化时间。2、使用的所有器皿不得含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油；处理过程应避免紫外光照，尽可能避光操作；提取过程应在通风柜中操作。提取将皂化液转移至分液漏斗中，加入50 mL石油醚-乙醚混合液，振荡萃取5 min，将下层溶液转移至另一分液漏斗中，加入50 mL的混合醚液再次萃取，合并醚层。洗涤用约100 mL水洗涤醚层，需重复 3 次，直至将醚层洗至中性，去除下层水相。浓缩将洗涤后的醚层完全转移至FlexiVap-12全自动智能平行浓缩仪上，于40℃水浴中氮吹浓缩至近干。用甲醇分次将蒸发瓶中残留物溶解并转移至10 mL 容量瓶中，定容至刻度。溶液过有机相滤膜后供高效液相色谱测定。四 、食品中维生素 D的测定 高效液相色谱法皂化称取10 g固体试样或 50 g液体样品于150 mL平底烧瓶中，固体试样需加入30 mL温水，加入1.00 mL内标使用溶液(如测定维生素D2，用维生素D3作内标；如测定维生素D3，用维生素D2作内标，含淀粉样品需加入1g淀粉酶进行酶解)，再加入1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT混匀。加入30 mL无水乙醇，加入20 mL氢氧化钾液，边加边振摇，混匀后于恒温磁力搅拌器上80℃回流皂化30 min，皂化后立即用冷水冷却至室温。后续步骤同食品中维生素A和维生素E的测定方法Detelogy优选仪器MultiVortex多样品涡旋混合器⚪ 高通量，配置多种规格样品管⚪ 高转速，应对各种难溶样品⚪ 可预存12种涡旋程序iQSE-06智能快速溶剂萃取仪⚪ 6个通道并联使用，每个通道可独立启停⚪ 萃取池自动密封，运行开始后自动升温升压⚪ 图形化界面全方位监控萃取流程iSPE-864全自动智能固相萃取仪⚪ 八通道，可批量处理64个样品⚪ 采用先进的柱塞杆密封过柱技术，支持串柱功能⚪ 主机与智能终端一体化设计，无需外接电脑FlexiVap-12/24 全自动智能平行浓缩仪⚪ 实验过程中可随时启停增减样品⚪ 氮吹角度自动调节（0-90°），先斜吹后直吹⚪ 各个通道均可独立控制，自动定量浓缩1 mL或0.5 mLFV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪⚪ 兼容针追随式氮吹和涡旋式氮吹针。⚪ 三面水浴可视窗具备多色照明功能，智能快插排水口。⚪ 各个通道均可独立控制，自动定量浓缩1 mL或0.5 mL

随着检测技术的不断进步和发展，市场对于物质的检测需求也在不断提高，这对于做分析仪器的厂家来说，既是挑战也是机遇，检测要求的提高，既是国家对于民众健康的重视，也是对市场的一次考察，市场环境的改变势必会带来一些阵痛，但阵痛过后，经历过优胜劣汰的规律筛选，留下的必然是适应性更强的产品。针对此次新国标GB 5009. 296-2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》的发布，其中最明显的无非是增加了在线柱切换反向液相色谱法，当然，还有其他内容的改动，例如：细化了试样的类型，从原来的“不含淀粉样品和含淀粉样品”，增加了各类食品分类，如：1.婴幼儿配方食品、特殊医学用途配方食品、乳及乳制品、冷冻饮品和饮料；2.谷物及其制品、烘烤食品、婴幼儿谷物类辅助食品及其他含淀粉试样；3.油脂及其制品、肉及肉制品、水产及其制品、蛋及蛋制品；4.水果、蔬菜、豆类、食用菌、坚果和籽类；5.含蜂蜡等粘稠胶质试样和其他食品。从上述分类可以看出，国家对于食品的分类更加细化、详细和准确了，不再是笼统的称呼，并针对每种不同类型的试样制定了更为详细的处理过程，这样避免的各检测机构以前所面临的针对一些特殊制品，检测方法不清洗，处理过程多样化的问题。其次还将食品中维生素D2和D3的检出限和定量限做出了调整，这对于各个仪器厂商来说，这将会是一场挑战。但同时也认识到，我们对于每天所摄入的营养物质，有了更高的要求标准，对于这个跟健康息息相关的物质，民众的更加关注。在此背景下，为了进一步促进维生素D检测工作的交流与合作，仪器信息网特别发起“维生素D新标准解读与应对”话题。本文邀请到成都珂睿科技有限公司应用开发部负责人邓异凡分享相关的技术及解决方案。在新国标发布之前，本公司一直在致力于研究二维液相，在线柱切换技术，其主要产品为人体内血药浓度检测仪（TDM），因此针对此次新国标的发布，我司立即组织人员开展了新国标方法的研究和开发工作。根据新国标的要求反相柱切换方法六通阀共两种状态，如上图所示。首先需要在色谱柱1上对杂质进行分离，再通过柱切换的方式将维D转移至富集柱上，第三次切阀再通过泵2将富集柱上的维D转移至色谱柱2上进行分析。对于在杂质的分离需要在第一个检测器上观察结果，维D的分析需要通过第二个检测器观察。我司对新国标反相柱切换液相色谱法的管路连接方式进行了微调，使用单边切阀的方式，让维生素D经过2次检测器，做到分离检测。使用此方法，可以同时分析维生素A D E，且所有化合物结果信息在一张色谱图上，包括维生素E的四种构型以及维生素D2和D3，结果图如下：图1.从左往右依次为维生素A 0.05μg/mL、维生素E四种构型δ、β、γ、α 0.2μg/mL图2.从左往右依次为维生素D2和D3 0.5ng/mL 所有化合物的信噪比S/N均大于3。并验证了该方法的线性和重复性，结果均比较好。图3.维生素A和E四种构型的重复性结果图4.维生素D2和D3重复性结果图5. 维生素A、E标曲图6. 维生素D标曲 使用此方法，维生素D会过两次检测器，第一次过检测器时D2和D3没有分离，两个峰重叠为一个峰出，位置在维A和维E中间，经过泵2分析柱的分离后再次经过检测器时分离为两个色谱峰。该方法减少了一个检测器的使用，缩短了方法时间，提高了分析效率。表一、方法对比值此时刻，正是我们国产仪器发力的时刻，也是我们向市场证明国产仪器实力的机会，在尊重国标要求的前提下，我们能做到更高的标准，更能符合我们市场的实际需求。为食品行业的发展尽一份力。投稿人：成都珂睿科技有限公司应用开发部负责人 邓异凡关于成都珂睿科技有限公司：成都珂睿科技是一家专注于色谱、质谱产品研发的国家级高新技术企业，成立于2016年，公司立足于色谱、质谱及配套自动化产品的国产化自主研发。公司目前50%以上员工为研发人员，研发投入累计超5千万，我们已建立起全国销售和服务网络。产品涵盖液相色谱仪、液相色谱-三重四级杆质谱联用仪、气相色谱单四级杆及三重串联四极杆质谱联用仪、配套色谱柱产品开发以及为这些产品提供自动化前处理产品，并依靠这些产品不断提供众多解决行业痛点的特殊应用方案。

国家卫生健康委员会、国家市场监管总局联合发布了85项食品安全国家标准和3项修改单的公告，其中包括了GB 5009. 296-2023《食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》（以下称新标准）。新标准代替GB 5009.82-2016《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》中第三法“食品中维生素D的测定液相色谱串联质谱法”和第四法“食品中维生素D的测定高效液相色谱法”。新标准最大的变化便是增加了在线柱切换反相液相色谱法。在此背景下，为了进一步促进维生素D检测工作的交流与合作，仪器信息网特别发起“维生素D新标准解读与应对”话题。本文邀请到科诺美（北京）科技有限公司液相色谱产品经理公敬欣分享相关的技术及解决方案。 01 引言维生素D是机体维持正常代谢和调节机能所必须的脂溶性维生素，主要包括维生素D2（麦角钙化醇）和维生素D3（胆钙化醇），具有促进肠道对钙、磷的吸收和在骨骼中沉积，维持骨骼的正常生长与发育的作用，因此维生素D的准确测定对于产品质量控制具有重要的意义。在维生素D的测定中，由于添加量相对较低，且样品基质复杂，存在脂肪、蛋白等干扰物。现行标准GB 5009.82-2016中第四法中，在对样品进行皂化、提取、洗涤、浓缩后，通过正相液相色谱净化，浓缩复溶后再通过反相色谱法分离检测。该方法分析单个样品的时间较长，降低了分析效率，并且过于繁琐的前处理操作，也会对回收率的结果产生较大影响。因此，在即将生效的《GB 5009.296-2023食品国家安全标准 食品中维生素D的测定》中，将在线柱切换-反相液相色谱法作为该标准的第二法，优化了样品前处理流程，提升检测灵敏度，更快速地获取分析结果，提高了样品的检测效率。面对新标准的即将实施，科诺美的技术应用团队制定了符合标准要求的解决方案。本方案采用Chromai Lotus C8作为一维色谱柱，Lotus PAH作为二维色谱柱，基于Chromai Leaps双三元二维液相色谱平台，建立了在线柱切换-反相液相色谱测定食品中维生素D的方法，并通过实际样品的测试，确认该方法稳定可靠。 02 实验方法2.1 仪器Chromai Leaps高效液相色谱系统（1）一维、二维泵：Leaps双三元梯度泵（P60）（2）自动进样器：Leaps标准型自动进样器（带制冷）（A10C）（3）柱温箱：Leaps 标准加热型柱温箱（1个两位六通+1个两位10通）（C10V6）（4）检测器：Leaps紫外-可见检测器（D10）Leaps紫外二极管阵列检测器（D20）2.2 色谱柱一维色谱柱：Chromai Lotus C8（4.6*100 mm, 5 μm）二维色谱柱：Chromai Lotus PAH（4.6*150mm, 5 μm）富集柱：Chromai Louts TC C1（4.0*10mm，5 μm）2.3 软件Eyoulab CDS企业版2.4 色谱条件流动相一维流动相：A：水，B：乙腈/甲醇（75/25,V/V)，梯度洗脱，流速：1mL/min二维流动相：A：乙腈/水(95/5,V/V)，B：甲醇，等度洗脱，流速：0.6 mL/min梯度洗脱及阀切换程序一维梯度洗脱程序二维等度洗脱阀切换程序检测波长264 nm进样量100 μL 03 实验结果3.1 标准曲线的测定将不同浓度的标准系列工作溶液分别进样100 μL，得到维生素D2和维生素D3标准曲线结果见表3。在2.5 -100 μg/L浓度范围内，维生素D2和维生素D3线性良好，线性相关系数均大于0.999。表3 维生素D2和维生素D3标准曲线测定结果图1 维生素D2和维生素D3标准曲线图图2 维生素D2和维生素D3标准溶液（2.5 ng/mL）二维液相色谱图3.2 实际样品测定参考GB 5009.296-2023第二法对样品进行皂化、液液萃取等前处理操作，得到样品溶液后上机分析，计算得到样品含量结果见表4。图3 某婴配粉样品1和2测定二维液相色谱图表4 某婴配粉样品测定结果 04 结论本解决方案采用科诺美自主研发的Leaps双三元液相色谱系统，参考GB 5009.296-2023第二法在线柱切换-反相液相色谱法，实现了维生素D测定中高效的样品前处理，检测效率显著提高。Leaps双三元液相色谱系统模块式组装，仅使用一个双三元泵就可以实现二维液相操作，避免了两组泵模块组装占地面积大或者仪器系统高度过高、操作不便的弊端，该系统可作为维生素D测定的首选配置。对于需要一次进样实现样品中维生素A、维生素D及四种维生素E异构体的同时测定分析，科诺美也可以提供在线前处理—二维液相色谱的完整解决方案。该方案灵敏度高、专属性强，可以有效去除样品中的杂质对维生素A、D、E的分析干扰。供稿人：科诺美（北京）科技有限公司液相色谱产品经理 公敬欣科诺美（英文：Chromai），是中国领先的从事分析检测仪器与医疗诊断研发、生产、销售和服务的高科技技术企业。是中国仪器仪表学会、中国分析测试协会、中国医疗器械行业协会会员。公司旗下设立北京研发中心、苏州供应链中心等多家子公司。科诺美公司一直致力于脂溶性维生素测定方法的研究与应用，除了食品中维生素的测定外，Chromai二维液相色谱系统已经取得二类医疗器械注册证（苏械注准20222222069），该系统已经成功应用于血清中脂溶维生素的测定。

背景维生素（vitamin）是人和动物维持正常的生理功能所需要的一种微量有机物质，参与人体多种代谢，是食品的一类重要成分。人体必需维生素可分为两类：水溶性维生素和脂溶性维生素，其中水溶性维生素中又以B族维生素最为重要。B族维生素主要包括VB1（盐酸硫胺素）、VB2（核黄素）、VB3（烟酰胺、烟酸）、VB5（泛酸）、VB6（吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺）、VB7（游离生物素）、VB9（叶酸）、VB12（氰钴维生素）等，它们虽然在体内的含量很少，却是调节人体各种新陈代谢必不可少的物质，是婴儿配方乳粉的重要组成部分。乳制品中维生素B7/B9/B12的检测由于食品安全国家标准有关于B7/B9/B12含量的要求，因此乳制品行业需要对其进行定量检测。目前针对维生素B7/B9/B12的国家标准检测方法是微生物方法。微生物法虽然试验周期长、对环境要求高，但因其是国标方法所以是抽检单位必用的检测依据，同时也适用于没有液相色谱仪或质谱仪等大型实验仪器的用户。乳制品中其他维生素的检测方法包括了液相色谱HPLC（或液质联用LCMSMS）、分光光度计、荧光光度计等仪器方法，这些可以为维生素B7/B9/B12的检测提供一些参考。乳制品维生素B7/B9/B12检测方案珀金埃尔默为您提供维生素B7/B9/B12整体检测解决方案，从检测试剂、前处理柱到仪器设备，“从繁至简，从慢到快，从国标方法到仪器确证”，全线产品满足不同条件的客户需求。针对我国国家标准微生物法实验周期长的特点，推出改进的微生物方法检测试剂盒以及ELISA试剂盒的产品。针对目前检测标准，步骤繁锁且重复性稍差的缺点，推出免疫亲和柱配合液相色谱或液质联用的方案。另外维生素B7/B9/B12，对热和氧极其敏感，在加工、储存中容易损失，且在样品中浓度差异较大，在进行样品前处理时也是需要解决的难点。A 微生物法检测试剂盒原理：某种微生物会对某种维生素具有极强的特异性，是其正常生长所必需的维生素，并且在一定条件下，其生长、繁殖速度与溶液中该维生素的含量成一定的对应关系，含量高则生长快，反之则慢，微生物法便利用了这种对应关系间接地测定出样品中该维生素的含量。该微生物检测试剂盒与国际规范保持一致，但试剂盒法相对缩短了检测周期，由原来的5-7天缩短为3-4天。B ELISA试剂盒原理：间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被抗原，样本和此抗原竞争抗体，同时抗体与酶标二抗（酶标物）相结合，经TMB底物显色得出样品中维生素的含量。特点：快速（1-2小时）、简便和灵敏度高C 液相色谱或液质联用方法特点：快速（1-2小时），方法重复性好。1 采用免疫亲和色谱法对乳制品提取液中的维生素进行富集并去除部分杂质，精密度及特异性高，处理后样品进入高效液相色谱进行分析。免疫亲和净化柱净化 FlexarTM液相色谱仪 免疫亲和柱产品介绍2 采用固相萃取的方法进行除杂，而后用液质联用仪器进行多种B族维生素分析。固相萃取 QSightTM LC/MS/MS 8种B族维生素色谱图扫码获得维生素检测的应用报告和产品介绍。

维生素D是人体内重要的微量元素之一，可调节钙、磷代谢、促进骨骼生长、调节细胞生长分化、调节免疫功能，但据不完全统计，目前有50%以上的中国人群存在维生素D缺乏的现象。维生素D在体内转化成25-羟基维生素D2/D3，因其半衰期长、含量高、易于检测，已成为评估VD含量的最佳指标。传统VD测定试剂盒多采用免疫分析法，因抗体特异性差异等因素影响，常存在干扰，影响了定量的准确度。为助力精准诊断，近日，上海药明奥测医疗科技有限公司（以下简称“药明奥测”）自主开发推出了“25-羟基维生素D测定试剂盒（液相色谱-串联质谱法）”，且该试剂盒已获批二类医疗器械注册证。据了解，药明奥测是中国第一家践行整合诊断的赋能平台公司，公司依托Mayo Clinic的整合诊疗理念与经验，凭借融合多平台、多组学及临床数据驱动的开放式赋能平台，通过算法整合升级，不断推出创新诊断服务和产品，同时加速诊疗创新者从研发到应用的技术转化，创造共赢共享的产业新生态。值得关注的是，为打造领先的临床质谱平台，药明奥测独家引进Mayo Clinic的400余项质谱项目，提供肿瘤、个体化用药、人体营养和代谢、激素、金属元素检测等服务，其质谱法25-羟基维生素D测定试剂盒，更是经过严格质量体系验证，可溯源至美国国家标准与技术研究院（NIST）Standard Reference Material® 2972a。液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）检测特异性及灵敏度高，可对25-羟基维生素D2、25-羟基维生素D3分别测定，保证了测试准确度。同时，作为一家高新技术企业，药明奥测始终坚持国际高标准自主创新，在试剂盒的开发过程中，药明奥测秉承以客户为中心的理念，积极提出差异化的解决方案并落实到产品性能优化中。在前处理阶段，采用“蛋白沉淀一步法”，显著减少了前处理步骤，操作方便快捷，有效地提高通量。此外，鉴于25-羟基稳定性差，目前市场上诸多解决方案采用-20℃冷冻保存或冻干粉基质，增加了客户使用成本，影响了用户体验。奥测试剂盒创新的采用独特配方新基质，产品为液体剂型，2-8℃稳定保存。据悉，截至目前，公司已累计申请体外诊断（IVD）专利近200项，涉及免疫、分子及质谱技术平台。目前，国内疫情仍处于不平静阶段，疫情常态化推动了诊疗场景拓展，在社区、在第三方检测机构、在家庭，方便快捷地采集、检测，已成为广大人民群众的需求，药明奥测国际高标准的试剂开发与整体解决方案创新，不仅大大提高了维生素D检测准确性与便捷性，实现了应用场景拓宽，也让更多人获益于高质量的医疗服务。此后，药明奥测将持续凭借强大的医疗及商业资源整合能力，基于临床需求布局丰富的研发管线，通过算法整合升级，不断创新整合诊断服务和产品，以“自主研发+授权合作”双模式，推动诊疗药险全新生态，促进诊疗场景的融合与拓展，让更多人在医院、在社区、在家庭中，都能获得高品质的医疗服务。

维生素 A（维生素 A 乙酸酯）、维生素 D3和维生素 E（维生素 E 乙酸酯）对于人类的健康至关重要。其中维生素 D3（胆钙化醇）是哺乳动物重要的营养成分，具有促进哺乳动物钙磷代谢和成骨的作用。因此，维生素 A、维生素E 和维生素 D3 是婴幼儿奶粉和米粉的营养成分主要营养成分，也是各种保健食品的重要组成部分。维生素 A 和维生素 E 紫外吸收较强并且在食品中的含量较高，一维色谱即可实现这两种化合物的准确定量。维生素 D3含量较低、紫外吸收不强、易受基质干扰，难以通过一维色谱实现其与基质的分离和准确定量。因此，同时定量食品中维生素 A、维生素 D3 和维生素 E 难以实现。 AOAC 采用 LC-MS/MS 技术定量奶粉中维生素 D3，该方法效果较好，但测试成本较高。欧盟和中国采用两套方法定量维生素 A、维生素 D3 和维生素 E，即反相色谱（一维色谱）定量维生素 A 和维生素 E，离线二维法（正相色谱制备+反相色谱分析）定量维生素 D3。制备液相加分析液相的方法主要解决两方面的问题：1. 维生素 D 馏分的两次净化（维生素 D 与基质的分离）；2. 二维正交性分离，维生素 D3 与维生素 D2 的分离、维生素 D3 与基质的分离。该方法具有比LC-MS/MS 方法成本更低的优点，但工作量较大且不利于大量样品的分析（自动化程度较低）。岛津采用中心切割方法，第一维色谱柱定量维生素 A 和维生素 E，同时净化维生素 D。定量环收集维生素 D 组分，并由二维液相泵引入第二维色谱柱，利用一维和二维色谱柱不同的分离选择性实现维生素 D3 与基质的分离，以及维生素D3 和维生素 D2 的分离，最终实现维生素 D3 的定量。综上所述，本方法只需一次进样，即可实现维生素 A、维生素 D3 和维生素 E 同时定量，节约了大量样品制备时间、避免正相溶剂对分析人员的伤害，同时具有稳定性好、准确度高的特点，可用于米粉、婴幼儿奶粉、多维片和钙片中维生素 A（维生素 A 乙酸酯）、维生素 D3 和维生素 E（维生素 E 乙酸酯）的含量检测。关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。

2010年6月9日～11日，在甘肃省敦煌召开的第二届全国香料香精化妆品标准化技术委员会化妆品分技术委员会第四次会议中，由浙江磐安县金华名仕化妆品有限公司主导修订的《指甲油》行业标准通过了审定。 　　会议由化妆品分技术委员会主任委员魏少敏、副主任委员董树芬、李琼主持，参加会议的有来自政府管理部门、大专院校、科研院所、质检机构、生产企业的标委会委员、委员单位的代表以及标准起草单位等的代表共 69名，磐安县企业代表与质监局领导也参加了本次会议。会议中，与会代表对金华名仕化妆品有限公司主导修订的《指甲油》行标进行了认真讨论，对有关条款的表述和指标规定等提出了相应修改意见。最后，会议同意通过对该标准送审稿的审查，同意起草小组按会议审查的意见做适当修改后报批。 　　据悉，本次通过审定的还有《睫毛膏》等5项产品标准、《化妆品中维生素B5及维生素原B5》等5项方法标准、《化妆品用三氯生》等12项原料标准。

专家称超标900多倍易致中毒，或导致恶心、呕吐和嗜睡等症状 　　去年曾因在广州被抽检含有强致癌性物质黄曲霉毒素M1而下架的南山奶粉，最近又遭到消费者投诉称，该品牌一款配方奶粉中添加的维生素K1超标900多倍。 　　对此，专家分析婴幼儿奶粉中维生素K1超过标准900多倍，对不同体质的婴幼儿来说会导致不同的不良反应，大体来说会产生恶心、呕吐和嗜睡等症状，对婴幼儿血液的凝血系统也会造成迟缓影响。“总之，维生素K1严重超标会导致婴幼儿神经系统、血液系统和消化系统等多系统的不良反应，这些都是维生素中毒的症状”。 　　1 　　维生素K1超标竟然成为卖点 　　据媒体近日报道，消费者黄先生在超市购买了几罐南山金装倍慧婴儿配方奶粉(1段)，回家后发现，该奶粉配料表上标有营养强化剂——维生素K1(添加量：70mg/100g)。在查阅相关法规后，黄先生认为，该奶粉中添加的维生素K1，超过我国1994年施行的GB14880-1994《食品营养强化剂使用卫生标准》，即每1000克奶粉中只能添加维生素420到750微克的规定中最大限量的约933倍。 　　而研究显示，大量或超量添加维生素K1，可导致新生儿肝损伤、溶血性贫血等。黄先生随后向省市质监局举报，要求相关部门对亚华乳业进行查处处罚。新快报记者查询广州本地消费者购买的罐装南山金装倍慧婴儿配方奶粉(1段)外包装发现，此次遭消费者投诉添加量超标的维生素K1，竟是这款售价约250元的南山金装倍慧1段奶粉的主打卖点。记者在包装上看到，这款南山奶粉背面包装的正上方，以较显眼字样注明“南山金装倍慧婴儿配方奶粉1段，强化维生素K1含量。”并在下方还附有说明称，“大量临床研究发现，母乳中维生素K1的缺乏，是造成0-6个月宝宝颅内出血的主要原因。维生素K1使宝宝更加健康的成长”。并且，在这一背面的外包装上，也的确注明了“维生素K1(添加量70mg/100g)”。 　　2 　　专家称超标900多倍可致中毒 　　“维生素K1是人体必不可少的营养元素，对婴幼儿更是如此。但是婴幼儿对于这一元素的摄入也不能过高，因为它含量过量了对人体也是有害的。”亚洲儿科营养联盟主席丁宗一告诉记者，维生素K1过量对人体特别是婴幼儿的影响与过量的“度”有关，如果超过标准900多倍的话问题就严重了，比如对婴幼儿的神经系统可以产生两个不同方向的极端不良反应，一是产生神经抑制的症状，二是产生神经兴奋的症状。维生素K1的明显超标，对婴幼儿血液系统的凝血功能也可能产生影响，这会令血液凝固迟缓，令他们受伤了血液比较难凝固 这也有可能对消化系统比如说胃产生影响，导致食欲下降、恶心和呕吐等症状。“这些是多系统的反应，不见得在同一个孩子身上都能看到，所以有可能没有经验的大夫会看不出来，这些其实是维生素中毒的症状。”丁宗一称。 　　中山大学营养学系教授蒋卓勤则表示，维生素K1对婴幼儿来说是非常重要的营养元素，如果缺乏的话容易出现出血、骨头不够硬等情况，所以一般奶粉中都会含有。但是，如果奶粉中维生素K1过量的话，则会导致维生素中毒现象，比如说恶心、呕吐和肝功能下降等，严重的话可能会导致死亡。“如果超标900多倍可能不会有那么严重的毒性，但肯定是对婴幼儿健康不利的，并且也说明绝对是不合格奶粉。”蒋卓勤表示。 　　3 　　南山产品存在不符合国标事实 　　对于消费者的投诉和专家的担忧，南山方面却并未表现出歉意，反而大呼委屈。 　　据长沙当地多家媒体报道，南山奶粉所属的湖南亚华乳业有限公司法人兼总经理龙飞称，“维生素K1很贵的，其它品牌的奶粉都舍不得添加，我们南山倍慧奶粉中添加了，却被消费者举报，说是加多了，真是好心不得好报。” 　　新快报记者昨前两日多次致电湖南亚华乳业有限公司咨询热线，但却被告知该热线只负责产品及消费者售后服务，不接受媒体采访，随后告知记者可拨打送奶到家热线。但当记者再拨通送奶热线后又被告知，该热线只负责送奶不负责其他业务，且无法向记者提供公司电话。至本报记者截稿时止，南山方面仍无人正面回应维生素K1严重超标消息是否属实。 　　另据湖南当地媒体报道，亚华乳业研究所技术方面负责人解释，南山金装倍慧婴儿配方奶粉(1段)维生素K1的标注，是依据GB14880-2004版的要求标注的，符合国家相关规定。但根据记者查询，GB14880只有《食品营养强化剂使用卫生标准》(GB14880-1994)和《食品安全国家标准食品营养强化剂使用标准》(GB14880-2012)两个版本，根本没有GB14880-2004版。 　　值得注意的是，在两个版本的GB14880中，GB14880-2012发布时间为2012年3月15日，正式实施为2013年1月1日。而此次黄先生购买的南山金装倍慧婴儿配方奶粉(1段)，生产日期分别为：2012年6月21日、2012年12月20日等。新快报记者所了解的广州本地消费者购买的产品生产日期亦在2013年以前。也就是说，湖南长沙亚华乳业有限公司生产上述奶粉时，GB14880-2012尚未正式实施。据此，南山金装倍慧婴儿配方奶粉(1段)营养强化剂的使用应符合GB14880-1994的规定。以此计算，上年生产的“旧产品”确实如消费者所指，在维生素K1的量上也并不符合当时正在实行的“旧国标”。 　　■相关报道 　　南山奶粉曾被检出含剧毒物 　　问题批次产品曾在穗遭下架 　　近年来，南山奶粉频频被指出现质量问题。去年7月，广州市工商局通报称，抽检了5个批次南山倍慧婴幼儿奶粉，全部含有强致癌性物质黄曲霉毒素M1。这批产品生产日期在2011年7月至12月间，涉及盒装和罐装。 　　广州市工商部门当时还表示，黄曲霉毒素M1具有剧毒性和强致癌性，所以问题批次产品已下架。记者了解到，由于南山品牌相对低端，在广州市非城区方有南山婴幼儿奶粉售卖。此外，由于南山奶粉检测结果问题严重，工商部门采称会取严厉处罚措施。 　　随后，南山乳业也终于就事件发出声明称，除了暂停生产，还会对现有库存产品封存，并送样到第三方权威部门进行检测，确保出厂产品合格。同时，以原料、检测手段、生产工艺为重点，针对产品所有生产流程开展全面自查，并全面整改。不过，公司客服仅表示，提供购得相关批次的顾客去购买点退货，但并未涉及赔偿。

维生素B12（Vitamin B12）是唯一一种含主要矿物质钴的维生素，故又称钴胺素。维生素B12需要肠道分泌物的帮助才能够被吸收，主要的生理功能是参与制造骨髓红细胞，以及防止大脑神经受到破坏，严重缺乏可导致恶性贫血。本报告参考GB/T 5009.217-2008第二法-免疫亲和法，与直接提取法相比，免疫亲和法的检测限较低，可达到0.026 μg/g，比直接提取法低10倍左右。应用Primaide 系统，采用免疫亲和法进行样品前处理，对保健食品中的维生素B12进行了测定。样品中成功检测到维生素B12，且在样品中加入维生素B12标准品进行了加标回收率的测定。 标准样品测定例仪器配置 : Primaide 1110 泵，1210 自动进样器，1310 柱温箱，1410 紫外检测器。n 精密度GB/T 5009.217-2008中规定，重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过算术平均值的20%。我们这里采用了计算相对标准偏差的方法，PM的重复性结果如上图所示，6次重复性实验，保留时间重现性RSD是0.07%，峰面积重现性RSD是0.26%，结果要优于标准规定。n 线性结果维生素B12在0.5 ~ 50.0 mg/L标准溶液的浓度范围R2 = 1.0000，线性关系良好。样品测定例n 样品前处理方法n 测定结果对维生素饮料和多维元素片中的维生素B12进行了测定，检测到两种样品中均含有维生素B12。为了验证准确性，进行加标回收率测定，在两种样品中加入维生素B12标准样品，进行回收率的测定，回收率分别为102%和87%，测定结果准确可靠。

维生素检测通常使用电化学法、紫外光谱法、红外光谱法、气相色谱、液相色谱、液质联用、微生物检测法、荧光法、ELISA等检测方法。而可以实现高通量自动化多重维生素检测的，只有电化学法！检测原理：维生素电化学分析仪，先利用正向电压将被测物质沉积在传感器表面，然后施加反向电压使富集在传感器上的物质溶出，根据溶出过程的极化曲线分析被测物质的含量。不同的维生素在玻碳电极上具有不同的吸附电压，通过施加反向线性电压，计算机实时监测玻碳电极和辅助电极回路中的电流值，其峰值与项目含量成比例关系，通过与标准物质比较，可以精确测出待测项目的含量。华奋生物，研发、生产的全自动维生素分析仪，自主创新，独立发明，多项专利，举全国首创！拿下国内第一张全自动维生素分析仪注册证，自动清洗，自动加样，自动检测，自动出结果，全程自动化，可以同时检测16种人体血液样本中维生素，包括A、B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B9、B12、C、D、D3、E、K1、K3的含量。它由四组检测电极组成，其中一组电极检测脂溶性维生素（A,D,E,K），其他三组检测水溶性的12种元素。每个电极测固定的四个维生素，每个维生素吸附电压不一样，加反向电压可以监测到四个不同的峰电流，从而实现检测到含量多少。关于华奋生物湖南华奋生物科技有限公司坐落于湖南省长沙市高新技术产业开发区，依山傍水、人杰地灵。华奋生物是一家集研发，生产，销售，服务，应用为一体的创新型医疗科技公司，专注于研发实验室临床医学检验仪器及配套试剂，维生素检测仪，全自动维生素分析仪，氨基酸测定仪，血清药物浓度测定仪，及相关配套试剂，将科学技术深耕细作，坚定不移技术创新、践行工匠精神，弘扬匠心筑梦。公司建立了从产品研发，设计，生产，销售，服务，应用为一体的全体系过程。

维生素B族是一组水溶性维生素，包括多种不同的维生素，如B1、B2、B3、B5、B6、B9等。它们参与人体生长发育、新陈代谢及生命活动等过程，包括维持皮肤和肌肉的健康，增进免疫系统和神经系统功能，促进细胞生长和分裂等，是所有人体组织必不可少的营养素。福立仪器采用LC5090Plus高效液相色谱仪，使用双波长法高效准确测定上述6种维生素B。 分析检测方法 方法提要试样经反相液相色谱分离，紫外检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性仪器配置 福立LC5090Plus高效液相色谱仪:配备LC5090Plus在线脱气机+LC5090Plus四元低压输液泵+LC5090Plus自动进样器+LC5090Plus柱温箱+紫外检测器色谱柱PolyPak C18 AQ，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm 分析检测数据 6种维生素B混合对照品溶液色谱图（285nm)6种维生素B混合对照品溶液色谱图（210nm)福立液相色谱紫外检测器具备双波长功能，能够同时在两个不同的紫外波长下监测和记录化合物的信号，在复杂样品分析中表现出更高的选择性和准确性&zwnj 。双波长检测的优势高选择性：通过在特定波长下检测特定化合物，可以减少样品中其他组分的干扰。灵敏度提高：对于某些化合物，选择其最大吸收波长进行检测可以提高检测灵敏度。数据验证，准确度提高：通过比较两个波长下的检测结果，可以更可靠地分析检测化合物。多组分同时分析，实现高效率：当样品中含有多种需要检测的组分时，双波长检测可以在一次运行中同时获得各组分数据，提高实验效率。

坚果是植物的精华部分，营养丰富，果皮坚硬，例如榛子，松子，葵花籽，花生等。坚果中都含有丰富的维生素E。维生素E是一种脂溶性抗氧化剂，能够阻断自由基链式反应，从而抑制油脂的氧化，被称为最有效的抗氧化剂。维生素E有8种异构体结构，生理活性也相差甚远，其中α-维生素E是自然界中分布最广泛，活性最高的维生素E形式。坚果中α-维生素E是衡量坚果营养水平的重要指标。北京吉天仪器有限公司应用实验室利用具有完全自主知识产权的快速溶图1.坚果剂萃取联合液相色谱仪开发出快速测定坚果中的维生素E含量的新方法，相关结果以《快速溶剂萃取-高效液相色谱法联用测定坚果中α?维生素E含量》为题发表在最新一期的《分析仪器》上。实验仪器APLE-3500快速溶剂萃取仪，配11 mL萃取池（北京吉天仪器有限公司）；LC-10A高效液相色谱仪（日本岛津公司）；分析天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司，十万分之一）；TM-2000超级恒温混匀仪（北京吉天仪器有限公司）。 实验方案准确称取粉碎好的坚果样品2.00 g，硅藻土和坚果样品按照1：1混匀倒入预装纤维素膜的11mL萃取池中，萃取溶剂为正己烷，温度为110℃，萃取时间为300S，萃取结束后将收集瓶中萃取液全部转移定容到10mL，涡旋震荡均匀澄清后，过滤膜，待HPLC分析。 色谱条件液相色谱采用二元高压梯度洗脱方式。色谱柱采用Athena C18柱，4.6×250mm，粒径5μm；流速：0.8mL/min；波长：294nm；进样量：20μL。梯度洗脱如表1所示 线性范围在表1的色谱条件下，对配制不同标准系列溶液进行分析，从低浓度到高浓度进样，在2-100μg/mL的条件下，得出标准曲线方程为Y=11037.30645X+4764.28303，相关系数r =0.9999，标准曲线如图4所示，α-VE的质量浓度与其峰面积线性关系良好。α-VE标样（40μg /mL）的高效液相色谱图见图3。以3倍信噪比确定最低检出限，检出限为0.04μg/mL。 方法回收率实验选取杏仁作为基质样品，根据样品制备和萃取条件，并加入一定量的α-VE标准溶液，考察α-维生素E的加标回收情况，回收率见表2。样品测试 根据上述方法对市购的四种坚果中α-VE的含量进行测定，结果如表3所示。其中葵花籽的含量最高，达到154.65μg/g。 结论本文采用快速溶剂萃取技术萃取坚果（生花生，山核桃，杏仁以及葵花籽）中的α-VE。快速溶剂萃取技术自动化程度高，操作简单方便，方法与传统方法比较萃取所需溶剂少，萃取时间短，对α-VE的提取效率高。实验通过高效液相法对提取的α-VE进行检测，峰形良好，加标回收率为90.1～97.2%之间。本研究使用的快速溶剂萃取技术快速高效，为提取研究食品中的维生素E提供新的方法。

国家质检总局昨天公布最新一期进口不合格食品、化妆品黑名单，亨氏公司澳大利亚有限公司生产的一款亨氏婴儿配方奶粉，因维生素B2超标等问题在入境时被销毁。 　　此次共有126批次不合格食品、化妆品被拦截在国门外。质检总局强调，这些食品、化妆品都是入境口岸实施检验检疫时发现的，都已依法做退货、销毁或改作他用处理，未在国内市场销售。 　　黑名单上显示，重量为0.072吨的亨氏婴儿配方奶粉因维生素B2超标、泛酸未达标准而被进境口岸予以销毁处理。制造商为亨氏公司澳大利亚有限公司。据悉，维生素B2摄取过多，可能引起瘙痒、麻痹、流鼻血、灼热感、刺痛等 泛酸未达标准时，可导致儿童出现烦躁不安，食欲减退，消化不良，胃液分泌减少，抗体产生明显减少等症状。 　　另外，韩国乐天株式会社生产的2.428吨乐天蛋黄派，查出菌落总数超标 来自韩国的两吨多农心浣熊乌龙面，产品成分未获检疫准入 北京市品利食品有限公司从西班牙帕斯卡乳业集团公司进口的3.56吨草莓、香蕉酸乳(儿童酸奶全脂)未提供所需证书 棒点国际贸易(北京)有限公司从美国进口的甘菊茶、草本薄荷茶、英式早餐茶等发现大肠菌群、霉菌超标，上述食品均被销毁。

p 　　维生素是生物生长和代谢所必需的微量有机物。分为脂溶性维生素和水溶性维生素两类。前者包括维生素A、维生素D、维生素E等，后者有B族维生素和维生素C。人和动物缺乏维生素时不能正常生长，并发生特异性病变，即所谓维生素缺乏症。目前随着国家对食品安全的重视，及国家GB5009. 82 — 2016新国标的执行，《食品安全国家标准 食品中维生素 A 、 D 、 E 的测定》，HPLC 法作为国标第一法测试维生素A,E及第四法测定维生素D的方法。此处，安捷伦液相色谱仪及EYELA前处理仪器则为新国标的实施诠释了完美的解决方案。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/3b0de762-c5f2-4811-add2-548a611ab3be.jpg" title=" 640-15.jpeg" / /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 　　1、维生素A、D、E的测定原理： /strong /span /p p 　　食品或保健食品试样经过皂化后，经石油醚萃取，用液相色谱法分离，外标法定量。 /p p 检测试样举例：市售奶粉、奶粉伴侣、米粉、婴幼儿葡萄糖和复合维生素片维生素AD制剂或鱼肝油等样品。 /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　2、试剂与材料 /span /strong /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp MILLIPORE MILLI-Q 一级超纯水 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 无水硫酸钠：化学纯 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 乙醇：色谱纯 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 氢氧化钾：化学纯 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 石油醚：沸程30 ℃～60 ℃，化学纯 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 甲醇：色谱纯 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 0.22um有机系针筒式微孔滤膜过滤器 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 维生素A,D,E 标准品，美国 SIGMA 公司 /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 　　3、仪器和设备 /strong /span /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp AGILENT 1220II-DAD梯度高效液相色谱仪 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 旋转蒸发器EYELA N-1300V-WB /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 恒温震荡空气浴摇床：EYELA NTS-4000BH(控温：》60度） /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 氮吹仪EYELA MGS-2200 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 超声波清洗器PM5-2000TD /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 天平：感量为 0.1 mgMETTLER MS-204TS /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp HAIER 低温冰箱 DW-25L278(-20度）（保存标准品储备液） /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 聚四氟乙烯漏斗 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 500ml分析漏斗 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 快速滤纸 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 分液漏斗木头架 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 分液漏斗振摇器EYELA MMV-1000W /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 　　4、分析检测方法步骤 /strong /span /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 1. 皂化： /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 1）准确称取样品：5-20g到250m皂化瓶中； /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 2）加入40ml 含16g/l抗坏血酸的无水乙醇溶液，搅拌均匀后，加入氢氧化钾（KOH:H2O=1:1）25ml。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 3）确保在EYELA NTS-4000BH 水浴振荡箱 60℃下皂化60min 摇匀，避光 使皂化完全，皂化后立即置于冰水浴冷却； /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 2.提取 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 1）皂化液转入500ml分液漏斗，用150ml石油醚提取于 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " EYELA MMV-1000W /span /strong 分液漏斗振摇器振摇5min，静止5min分层。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/32679560-a669-4dc4-b648-16b597efa4a2.jpg" title=" 640-16.jpeg" / /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 2）分层后转移至另一个分液漏斗，加100ml石油醚同法萃取，合并醚液， /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 3）水洗有机相3次至中性 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 醚液过无水硫酸钠，用250ml鸡心瓶收集。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 4）40℃EYELA N1300V-WB旋蒸蒸发旋蒸至1ml左右 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 5) 用约5ml石油醚洗待测组分于50ml塑料离心管，EYELA MGS-2200氮吹仪吹干。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 6) 用10ml色谱甲醇复溶解，涡旋混合仪混匀。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 7) 样品过0.22μm滤膜，进样10ul上Agilent 1220HPLC. /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 5F维生素A、D、E 测定色谱 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 色谱柱：Agilent色谱柱：Prooshell 120 PFP(五氟苯基）， 50 mm × 4.6 mm, 2.7μm，（备注：PFP柱对位置异构体具有良好的选择性的保留时间） /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 检测波长：维生素A(325nm)；维生素:(294nm)；维生素D:264nm。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 波长检测方法：（0-4.5）min 325nm，（4.5-6）min 改变为294nm，5min左右切阀（时间长短0.4-0.45min）（6-15）min改变为264nm. /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 柱温：35 ℃± 2℃。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 进样量：10 μL。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 时间：15min /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 流动相：一维:甲醇,水；流速：:1ml/min； /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 维生素A D E 标准曲线的绘制 /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 　　标准曲线的制作 /strong /span /p p 　　本法采用外标法定量。将维生素A 和维生素 E 标准系列工作溶液分别注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以峰面积为纵坐标,以标准测定液浓度为横坐标绘制标准曲线,计算直线回归方程。 /p

依利特公司使用最新推出的EClassical 3200L超高效液相色谱仪搭建二维色谱系统，用自主研发的Kromstation 色谱数据工作站控制阀切换，参考《GB 5009.296-2023 食品安全国家标准 食品中维生素D的测定》提出了在线柱切换-反相液相色谱法（二维色谱法）分离维生素D2、D3的分析解决方案，供相关人员参考使用。色谱条件色谱柱：Supersil C8 3μm，120&angst ，ID4.6×150mm（一维色谱柱） SinoPak C18 3μm，120 &angst ，ID4.6×150mm（二维色谱柱） Supersil ODS2 5μm ，300 &angst ，ID4.6×10mm（富集柱）检测波长 (nm)：264柱温(℃)：室温一维色谱条件：流动相组成(V/V)：A：水 B：乙腈/甲醇=3/1，梯度洗脱流速 (mL/min)：1.0进样体积(μL)：100梯度表：二维色谱条件：流速 (mL/min)：1.0流动相组成(V/V)：乙腈：甲醇：水=90：5：5，等度洗脱 一维柱维生素D2、D3色谱图（50μg/mL）二维柱维生素D2、D3色谱图（50μg/mL）样品信息以 Kromstation 色谱数据工作站搭配 EClassical 3200L 在线柱切换（二维液相） 系统，连续进样 7 针，重复性谱图及数据如下：二维液相系统分离维生素D2、D3重复性色谱图结论使用依利特最新推出的EClassical 3200L搭建二维系统，对维生素D2、D3进行分析检测。结果表明，Kromstation 色谱数据工作站可以自动实现二维系统的阀切换完成维生素 D2、D3的分离，且实验结果具有良好的重复性和分离度。满足对维生素D同分异构体的分离检测需求。EClassical 3200L超高效液相色谱仪是依利特自主研发的一款，具有自主知识产权的新型超高效液相色谱仪，在满足不断升级的法规要求的同时，重新定义国产液相的外观设计，完善分析过程中的自动性、连续性、完整性，展现试剂选择时的灵活性、实验室结果的稳定性，满足了实验室低成本、超高效率运行的可行性。其积木式单元模块，可根据客户需求灵活实现等度、二元高压梯度、四元低压梯度、DAD系统配置；色谱柱温箱、自动进样器、脱气机、馏分收集器、柱后衍生器、荧光检测器、示差检测器、蒸发光检测器、激光诱导荧光检测器等单元模块任意选配，可广泛用于中控、质检及实验室，满足不同客户需求。看到这里大家一定知道维生素D对我们的身体有多么重要了吧！建议大家可以在阳光充足的季节，多出去晒晒太阳，小面积（如双手、胳膊）、短时间（10-40分钟）、没有防晒措施的光照是能够获得充足的维生素D的，但注意不要暴晒哦！在这个充满阳光和活力的季节里，让我们一起关注维生素D，为自己的健康加分！

各有关单位：我会批准《纺织品 维生素E含量的测定》《纺织品 甾醇含量的测定》《职业时装分级评价技术规范》《复合面料型防寒保暖服装功能性技术要求》等4项标准为中国纺织工程学会团体标准，上述团体标准自2023年12月1日起实施，现予以公布。上述团体标准编号、名称及主要内容见附件。 附件：团体标准编号、名称及主要内容中国纺织工程学会2023年11月4日附件团体标准编号、名称及主要内容标准编号标准名称标准主要内容T/CTES 1057—2023纺织品 维生素E含量的测定本文件描述了纺织品中维生素E（α-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚）含量测定的试验方法。本文件适用于各类纺织品。T/CTES 1058—2023纺织品 甾醇含量的测定本文件描述了纺织品中甾醇（β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇）含量测定的试验方法。本文件适用于各类纺织品。T/CTES 1059—2023职业时装分级评价技术规范本文件规定了职业时装分级评价的技术要求、试验方法、检验规则以及标志、包装、运输和贮存。本文件适用于批量或定制生产的以纺织织物为主要材料生产的职业时装，包括机织、针织西服、西裤、裙套、衬衫、大衣等产品。本文件不适用于防护服等特种作业服装。T/CTES 1060—2023复合面料型防寒保暖服装功能性技术要求本文件规定了复合面料型防寒保暖服装功能性技术要求。本文件适用于以保暖复合织物为主要面料生产的防寒保暖服装。保暖复合织物或使用本文件定义的保暖层生产的其他保暖类纺织产品可参考使用。本文件不适用于以羽绒和（或）纤维填充的防寒保暖服装。附件：团体标准编号、名称及主要内容.docx关于发布《纺织品 维生素E含量的测定》等4项中国纺织工程学会团体标准的通知.pdf

2014年7月11日，上海 ——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技（以下简称：赛默飞）近日发布同时检测功能饮料中维生素B6、烟酸和咖啡因含量的解决方案。维生素B6、烟酸等B 族维生素是人体不可缺少的重要营养素，对于多种疾病的预防治疗有重要辅助作用，已被作为功效成分添加于功能饮料中。目前国家标准规定的方法（GB ／ T 5009．197-2003）使用高效液相色谱法测定维生素B6、烟酸和咖啡因需以硫酸月桂酸钠、1- 癸烷磺酸钠等离子对试剂为流动相。本方法采用常规液相色谱配合可变波长紫外检测器，可以实现在不加离子对试剂的前提下实现维生素B6、烟酸和咖啡因的同时分离。饮料样品只需简单过滤，即可进样。 图1 VB6、烟酸、咖啡因分子结构图 赛默飞根据功能饮料样品的标识含量，选取相关浓度的标准品对VB6、烟酸和咖啡因做标准曲线，线性范围在40倍以上，线性良好，根据标准曲线得出的数据接近饮料中标明的浓度（咖啡因200ppm，烟酸40ppm，VB64ppm），结果证明该方法适合饮料类样品中相关化合物的检测。大量数据显示赛默飞UltiMate 3000 系列液相色谱仪适合对该类型饮料进行检测。该方法样品仅需简单过滤后，即可直接检测。分析时间短，26min 即可完成三种化合物的检测。下载应用文章请点击：http://www.instrument.com.cn/download/DownLoadFile.asp?id=331648 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技（纽约证交所代码：TMO）是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元，在50个国家拥有员工约50,000人。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战，促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于Thermo Scientific、 Life Technologies、 Fisher Scientific 和 Unity? Lab Services四个首要品牌，我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合，为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息，请浏览公司网站：www.thermofisher.com。赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国已超过30年，在中国的总部设于上海，并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司，员工人数超过3800名。为了满足中国市场的需求，现有8家工厂分别在上海、北京、广州和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心，将世界级的前沿技术和产品带给国内客户，并提供应用开发与培训等多项服务；位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术，研发适合中国的技术和产品；我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队，在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息，请登录www.thermofisher.cn 。

近年，我国饲料工业飞速发展，饲料总产量逐年递增，现已成为全球第一饲料生产大国。随之而来的饲料品质和安全性等问题引起人们的高度关注，因为饲料安全与否会通过动物制品影响人类健康，因此对饲料质量进行监测是非常有必要的。 2012年起国家陆续颁布了《饲料和饲料添加剂管理条例》、《饲料和饲料添加剂生产许可管理方法》、《饲料生产企业许可条件》和《混合型饲料添加剂生产企业许可条件》等法规，对饲料生产企业提出了更高的检测仪器配备和人员等要求。 日立高新针对此次饲料新规，开展了关于维生素、氨基酸、三聚氰胺、金属元素等的检测解决方案工作。此次跟大家介绍的是饲料中维生素B12的测定，参考GB/T17819-1999维生素预混料中维生素B12的测定高效液相色谱法。 维生素B12参与体内一碳基团的代谢，是传递甲基的辅酶，与叶酸的作用相互联系，影响生物合成所需的活性甲基的形成和其他一碳基团的代谢。参与许多代谢过程，其中最重要的是参与核酸和蛋白质的生物合成，促进红细胞的发育和成熟。[分析条件]:样品: 10 &mu L Std.(100 mg/L)流速: 1.7 mL/min色谱柱填料: &mu Bondapak NH2 (5 &mu m)柱温: 30 ℃色谱柱规格: 3.9 mm I.D.× 300 mm 仪器配置:Chromaster高效液相色谱仪 5110 泵, 5210自动进样器, 5310 柱温箱, 5410 UV 检测器 流动相: 3% H3PO4/CH3CN=26/70 检测波长: 361 nm [标样谱图]:[重现性]: 样品名称保留时间RSD% (n=6)峰面积RSD% (n=6)维生素 B120.050.24[工作曲线]:R2=0.9999此次检测使用的仪器是日立Chromaster高效液相色谱仪，关于此仪器请参考：http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102446/C137940.htm关于日立高新技术公司:　　日立高新技术公司是一家全球雇员超过10,000人，有百余处经营网点的跨国公司。企业发展目标是&ldquo 成为独步全球的高新技术和解决方案提供商&rdquo ，即兼有掌握最先进技术水准的开发、设计、制造能力和满足企业不同需求的解决方案提供商身份的综合性高新技术公司。日立高新技术公司的生命科学系统本部，通过提供高端的科学仪器，提高了分析技术和工作效率，有力推进了生命科学领域的研究开发。我们衷心地希望通过所有的努力，为实现人类光明的未来贡献力量。更多信息请关注日立高新技术公司网站：http://www.hitachi-hitec.cn

脂溶性维生素A、D、E是人体维持正常代谢和机能所必需的营养素。准确测定食品中维生素含量对于科学营养膳食并保证食品安全，具有重要意义。GB5009.82-2016是现行的关于食品中维生素A、D、E测定的标准方法，覆盖了婴幼儿食品、乳品等多种食品，实现了维生素A、D、E的含量测定。其中，维生素D在食品中含量低，样品基质复杂，检测相对困难，在国家现行标准法中采用液-质联用或半制备正相净化的方式对其进行检测。但液-质联用维护成本高，半制备正相处理过程非常繁琐，大大影响样品分离效率。《GB 5009.82-2016 食品安全国家标准 《食品中维生素A、D、E的测定》现有检测难点：01维生素A、D、E分开检测：▲多种方法来回切换，仪器稳定时间长▲使用质谱成本高02样品处理前处理繁琐：▲需要多次前处理，步骤多，时间长▲结果稳定性差，人员要求高03维生素E异构体的分离：▲在限定的条件下难以分离维生素E的四种异构体今年9月已新发布GB5009.296-2023，将于2024年3月6日正式实施，旧标准中关于维生素D的测定，只有第三法“液相色谱-串联质谱法”和第四法“高效液相色谱法”，新标准在以上2个方法的基础上，新增了“在线柱切换-反相液相色谱法”，适用于食品中维生素D₂ 和D₃ 的测定。新增的这一方法引入了在线柱切换-反相液相色谱仪，大大提高了维生素D的检测效率。GB 5009.296-2023 食品安全国家标准《食品中维生素 D 的测定》珂睿科技最新二维液相技术分析脂溶性维生素A、D、E检测方案，满足国标要求，轻松解决原有检测中的问题，实现维生素 A、D、E 的良好分离！效率更高同一个液相条件可同时检测维生素A、D、E，无需来回切换方法，提高检测效率速度更快一个样品只需要15min左右完成多种维生素的分析维生素A、D、E整体图更低的检测限同一个液相条件可同时检测维生素A、D、E，无需来回切换方法，提高检测效率LOD按照GB要求进样，浓度为0.5μg/L的维生素D和0.05μg/mL的维生素A、0.2μg/mL的维生素E-异构体溶液在该仪器条件下，检出限的信噪比均能达到3倍以上，满足检测需求LOQ按照GB要求进样，浓度为2μg/L的维生素D和0.15μg/mL的维生素A、0.6μg/mL的维生素E-异构体溶液在该仪器条件下，能稳定重现，检出限的信噪比均能达到10倍以上，满足检测需求有效分离维生素D₂ 、D₃ 有效分离维生素D₂ 与D₃ ，不受基质杂质干扰维生素D定量下限放大图稳定的重现性稳定的检测条件，出峰时间和峰面积重现性好，确保结果的准确性重现性在该仪器条件下，进样维生素A、D、E溶液，出峰时间和峰面积均可以稳定的重现，确保切阀转移的准确性，出峰时间RSD＜0.3%，峰面积RSD＜1%关于珂睿珂睿科技成立于2016年，是一家专注于色谱、质谱产品研发的国家级高新技术企业、四川省专精特新企业，公司立足于色谱、质谱及配套自动化产品的国产化自主研发。产品线涵盖超高效液相色谱仪、液相色谱-三重四级杆质谱联用仪、气相色谱单四级杆及三重串联四极杆质谱联用仪、配套色谱柱，以及自动化前处理平台，并有包括TDM血药浓度检测系统，双鱼Pisce-I污水毒/品含量液质检测系统，Orion猎户系列GPC凝胶渗透色谱系统等，为众多行业的特殊应用提供专业解决方案。珂睿科技依靠自身研发助力国产超高效液相色谱快速发展的步伐也不会停止，我们将继续秉持“专业，严谨，不走捷径，做难而正确的事情”的专业精神，再接再厉，为您提供完整而专业的应用分析。

近日，国家标准委印发《2016年全国标准化工作要点》，提出加强化妆品检测、食品检测方法的标准化工作，加快强制性标准、团体标准及企业标准化管理等规章制度制修订。随着更加严格的政策法规相继推出，各个分析检测机构及生产企业正着手加大对实验室建设和发展的投入力度。　　实验室是提供分析检测结果的载体，其管理水平和运行效率直接影响到所提供产品的质量。同时，实验报告的准确性与可信度，以及如何保证实验室安全有效地运行，则是每一位实验室管理人员需要克服的难题。随着分析检测实验室规模的扩大，实验室的科学性和经济性正受到前所未有的挑战。　　作为全球生命科学、诊断和应用市场的领导者及领先的实验室合作伙伴，安捷伦始终关注分析检测技术的发展以及不同实验室面临的挑战和需求，致力于为用户和行业提供更为完善、更加创新的解决方案，推进实验室的科学性和经济性，帮助用户创造更高的价值。　　创新技术带来更高效益　　近年来，汽车销量不断攀升，而车内空气污染不仅成为继装饰装修和家具污染、PM2.5污染之后的第三大室内环境污染问题，同时也严重危害着人体健康，车内空气质量已成为判定汽车质量的一个重要指标。日前，环保部对现行的《乘用车内空气质量评价指南》(以下简称《指南》)征求意见，拟将此项推荐性标准修改为强制性标准，并将车内空气质量有害物质限值严格化。汽车厂商面临将更严苛的行业标准，车内空气检测技术和方法、相关检测机构实验室的分析检测能力也面临着考验。　　安捷伦科技解决方案帮助实验室快速分析检测车内空气有害物质　　某大型第三方检测机构在检验、鉴定、测试和认证方面是全球公认的质量和诚信基准。作为其全球战略合作伙伴，安捷伦与该机构一道以业界前沿的技术，服务于各个行业。检测新车车内的醛、酮类化合物是该机构的强项业务之一。过去，该机构使用传统的低压液相方法来检测新车车内空气样品中的不同目标化合物，传统方法需通过方法切换实现检测，同时也要更换多个色谱柱和流动相，更换过程麻烦和耗时。由于每月需要分析的样品量巨大，该机构面临着如何进行高通量、高质量分析的挑战。　　安捷伦中国应用团队发现了这一方法提高的空间，利用安捷伦领先的超高效液相色谱技术(UHPLC)和消耗品，开发出了为该机构量身打造的企业级解决方案。该方法高度集成，优化了之前分析周期长、效率不高、流动相要频繁切换等问题。优化方法使用一个色谱柱和两种流动相，并将样品分析时间缩短了近4倍，同时也减少了溶剂的消耗。由于切换方法时无需人工干预，该方法的创新还同时带来了实验室效率的大幅提升。　　通过与安捷伦的合作创新，这家第三方检测机构简化了分析流程，提高了分析效率，也帮助其客户，即各大汽车厂商和材料供应商等上下游企业从中获益。安捷伦对分析检测技术的创新，帮助了商业实验室实现效率的优化，更有助于整个行业的健康发展。　　完善方案实现优质产品　　随着中国“二胎”政策效应的发挥，乳制品尤其是婴幼儿奶粉市场迎来了春天，奶粉质量的安全也备受关注。近几年，国家对乳品企业的监管已越来越严，不少企业对自身的标准提出了更高的要求，为了给消费者提供更优质的奶产品，主动加大研发、奶源、品控等方面的建设，提高产品检测技术水平。　　现行的《婴幼儿配方乳粉生产许可审查细则(2013版)》规定婴儿配方乳粉实施全检，且检测项目多达60余项。如何在最短的时间内掌握分析仪器并检测出更多的目标物质，成为每个婴幼儿配方乳粉生产企业需要克服的技术难题。　　例如，利用传统高效液相色谱法(HPLC)分析检测奶粉中的维生素A、D、E时，由于维生素D含量较低且样品基质干扰较大，传统HPLC分析方法需要通过两套系统和三个方法来分别分析维生素A、D、E，灵敏度低，操作过程繁琐，非常耗费人工和溶剂。在安捷伦乳品行业整体解决方案的推动下，蒙牛中心实验室与安捷伦达成战略合作，由蒙牛雅士利实验室与安捷伦一起验证2D-HPLC方法学，以期改善传统方法的弊端。蒙牛雅士利负责样品处理和2D系统的建立，安捷伦则负责方法学的初步验证和数据管理，并派驻应用工程师现场支持新方法的建立和雅士利技术人员的培训。最终，双方一起成功开发出了基于Agilent 2D-LC中心切割技术的创新分析检测方法。该方法简化了分析流程，只需一套系统和一个方法便可同时分析三种维生素，不仅大大缩短了分析时间，还减少了氮气、溶剂的消耗以及废液排放，节省了人力，降低了分析检测成本。　　安捷伦科技2D-LC在线方法大大简化维生素A、D、E分析流程　　在确保分析结果的准确性方面，新方法也有所突破。过去利用传统HPLC分析方法分析维生素A、D、E时，奶粉样品基质复杂，样品前处理过程不易控制且回收率差，容易造成样品损失，影响分析结果的准确性。如今，中国对婴幼儿奶粉的管理已上升到药品的级别，婴幼儿奶粉的配方即将从备案制改为注册制，奶粉企业检测结果的准确性对终端产品质量来说至关重要。而安捷伦与蒙牛雅士利合作开发的新方法，采用了Agilent 2D-LC中心切割技术，具备高灵敏度和强大的分离能力，能够快速、准确地分析复杂样品。经过对大量不同的奶制品进行长达数月的严格测试发现，安捷伦创新方案的测试结果与《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素A、D、E的测定》(GB5413.9-2010)方法分析的结果完全一致，这一测试结果也获得了蒙牛雅士利的赞赏。　　对于企业用户来说，安捷伦提供的是先进可靠的仪器，更是技术、方法、经验和服务等各方面的强力支持。安捷伦与蒙牛雅士利的成功合作表明，安捷伦创新的方法和完善的解决方案不仅有助于企业提升生产效益，还能帮助他们提高生产质量，为消费者带来更加高品质的产品。　　随着环境保护、食品农产品安全与营养、汽车、建筑材料等领域的热点和难点问题不断更新和变化，更多的未知物有待发现和掌握。实验室检测与分析技术的不断发展进步，也使得更多更先进的科学仪器设备投入使用，用以解决各类与生活息息相关的行业难题。而可靠的仪器产品，专业的服务以及训练有素，反应快速的售后服务工程师团队，是安捷伦为用户提供长期价值的保障。秉承“启迪科学探索，普惠健康生活”这一宗旨，安捷伦致力于科学技术的未来发展，不断推出创新的解决方案来帮助用户应对更多挑战，帮助企业提高市场竞争力，带来更多经济效益，推动行业的可持续发展。