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丝素蛋白冻干粉

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丝素蛋白冻干粉相关的论坛

  • 冻干粉如何制作？

    看到有人做果蔬汗的能力验证，发的样品是果蔬汗还是冻干粉，冻干粉如何制作？想着果蔬汁在运输过程可能有泄漏。

  • 关于冻干粉的的复原问题

    最近在做能力验证样品油麦菜冻干粉中六六六和滴滴涕的测定，样品给的指导书说是1:19倍的水复原就是原样，我是直接称取的干样再加水呢？还是按照比例复原再称取呢？感觉先称取干样再加水更好，但是所加的水并不参与计算，我可以不按照比例加水，这样最后计算是以干样计和以湿样计结果理论应该是一样的，可一般结果还是会有出入。而且能力验证样品复水后的样品才更接近原样，但是我问周边同行都是称取干样，最后以干样计，这不就是偏离了接近原样的初衷了么？

  • 总大肠菌群冻干粉质控样品

    第一次买了瓶总大肠菌群冻干粉质控样，有点看不懂质控证书，证书上的特性值和特性值区间，是不是就是真值和真值范围，但特性值那栏又有个对数是什么意思，

  • 46.5 注射用辛芍(冻干粉针)指纹图谱研究

    46.5 注射用辛芍(冻干粉针)指纹图谱研究

    【作者中文名】苏红; 王爱民; 王永林; 兰燕宇; 何迅; 李勇军;【作者英文名】SU Hong; WANG Ai-min; WANG Yong-lin; LAN Yan-yu; HE Xun; LI Yong-jun（School of Pharmacy; Guiyang Medical College; Guiyang 550004; China）;【作者单位】贵阳医学院药学院; 贵阳医学院药学院 贵州贵阳; 贵州贵阳;【摘要】目的:采用RP-HPLC建立注射用辛芍(冻干粉针)的指纹图谱测定方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱,80%乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温40℃,检测波长为230 nm。结果:在相同色谱条件下获得药材、中间体和制剂的各色谱峰分离较好,建立了注射用辛芍的HPLC对照指纹图谱,标注了制剂中的8个共有指纹峰,制剂与药材、中间体的指纹图谱有良好的相关性,10批样品相似度大于0.97,达到指纹图谱的技术要求。结论:该方法准确、重复性好,可作为注射用辛芍(冻干粉针)质量控制的重要依据之一。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131742_383598_2379123_3.jpg

  • 59.10多烯紫杉醇羟丙基-磺丁基-β-环糊精包合物冻干粉质量评价及药代动力学研究

    59.10多烯紫杉醇羟丙基-磺丁基-β-环糊精包合物冻干粉质量评价及药代动力学研究

    【作者】 葛文娜（东南大学）【摘要】 多烯紫杉醇（Docetaxel，商品名为Taxotere）是新一代紫杉烷类抗肿瘤药物，对乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、头颈癌、卵巢癌以及前列腺癌等均具有良好疗效。目前，多烯紫杉醇上市剂型为注射用浓溶液，该剂型稳定性较差，临床用药不方便并时常引发严重的过敏反应。利用羟丙基-磺丁基-β-环糊精作为药物赋形剂水溶性好、溶血性小、毒性低的特点，实验室开发了多烯紫杉醇羟丙基-磺丁基-β-环糊精包合物冻干粉制剂，以期达到避免或者缓解现有制剂缺点的目的。 本文建立了多烯紫杉醇冻干粉质量的高效液相（HPLC）分析方法，以及生物样本（血浆和组织）中多烯紫杉醇的检测方法，进行了该制剂质量的评价和动物体内的药代动力学研究，为制剂的有效性和安全性评价提供方法学基础；首次提出基于电纺尼龙6纳米纤维的固相膜萃取技术，并以多烯紫杉醇为目标分子，进行了这一样品前处理的新技术在生物样本分析中的应用研究。论文主要工作如下： 一、反相高效液相色谱-紫外法测定多烯紫杉醇冻干粉含量及有关物质 采用Dikma Platisil C18柱（150mm×4．6mm，5μm），检测波长227nm，柱温：30℃。有关物质检查时以乙腈-水（40：60，v：v）为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，流速1．5mL/min；含量测定时紫杉醇为内标，以乙腈-水（60：40，v/v）为流动相，进行等度洗脱，流速为1．0mL/min。结果表明：多烯紫杉醇与各有关物质分离良好。在0．05～100μg/mL的浓度范围内具有良好的线性关系（r=0．9993），检出限（LOD）为0．01μg/mL（以S/N=3计）。三个批次样品的多烯紫杉醇标示含量分别为98．79％、99．56％、100．9％，有关物质含量分别为2．8％、2．2％、2．5％。本法准确可靠，专属性强，能满足多烯紫杉醇包合物冻干粉质量控制的要求。 二、多烯紫杉醇包合物冻干粉家兔体内药代动力学的研究 本文建立了灵敏、准确的家兔血浆中多烯紫杉醇的HPLC-UV测定方法，为多烯紫杉醇包合物冻干粉家兔体内药代动力学的研究提供方法学基础。血浆中杂质不干扰样品的测定，多烯紫杉醇在0．04～10μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0．9996），检出限为0．02μg/mL（以S/N=3计），平均提取回收率为90．1％～93．7％，相对标准偏差（RSD）为3．2％～12％。以上方法验证结果表明，此方法满足药代动力学研究的要求。 采用血药浓度法研究了多烯紫杉醇包合物冻干粉的家兔体内药代动力学，通过测定血药浓度经时变化曲线，得出了多烯紫杉醇冻干粉（受试制剂）药代动力学参数；以上市的多烯紫杉醇注射液为参比制剂，研究了受试制剂的相对生物利用度。参比制剂的t1/2β为5．32±1．72h，AUC和CL分别为1．29±0．459μg/mL·h和5．82±1．27mL/h；受试制剂t1/2β为7．00±1．90min，AUC和CL分别为1．59±0．798μg/mL·h和4．72±2．12 mL/h。其平均相对生物利用度为123％。结果表明家兔给予受试制剂t1/2β和AUC均大于参比制剂，清除率CL小于参比制剂（P0．05），提示在相同剂量的条件下，多烯紫杉醇羟丙基-磺丁基-β-环糊精包合物冻干粉在体内可保持相对较高的血药浓度，提高了生物利用度，在一定程度上增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用，从而产生较好的临床效果。 三、基于电纺尼龙6纳米纤维的固相膜萃取技术及其在生物样本中的应用研究 研究了基于电纺尼龙6纳米纤维的同相膜萃取技术，研制了相应的装置，在此基础上，对生物样本（家兔血浆和小鼠组织）进行前处理，全面考察了影响萃取效率的因素：蛋白酶的种类、酶解时间和温度、介质pH和离子强度、洗脱溶剂、洗脱溶剂体积，建立了基于电纺尼龙6纳米纤维的固相膜萃取富集生物样本中多烯紫杉醇的分析方法。在优化的条件下，多烯紫杉醇平均提取回收率为72．1％～78．5％（RSD8％），检出限0．015μg/mL（以S/N=3计）。与传统液-液萃取法、C18柱固相萃取法相比，此萃取方法解决了常规提取方法有机溶剂用最大、提取时间长、净化效果差的缺点，不仅使得检测灵敏度增高、干扰减少，而且提取过程快速、环保，符合“绿色化学”发展趋势。【谱图】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208211806_385130_1609970_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208211803_385128_1609970_3.jpg

  • 【“仪”起享奥运】变更原料药冻干粉的冻干曲线，应做哪些变更研究？

    问题：化药口服固体制剂变更原料药冻干粉的冻干曲线，应做哪些变更研究？回答：[size=15px]要看原料药变更前后的工艺差距大，还是不大？还要看原料药变更前后关键理化性质和杂质谱的变化大小。[/size][size=15px]然后，根据变更前后原料药的对比，在车间中试制剂，看制剂CQA受影响情况。[/size][size=15px][/size]问题：中药产品浸膏由真空干燥箱变成带式干燥机，如何开展变更研究？属于几类变更？回答：[size=15px]需要在车间模拟测试。看数据再确定变更类别。目前看，很可能是中等变更。[/size]

  • 70.8 RP-HPLC测定注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量

    70.8 RP-HPLC测定注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量

    【作者】 兰燕宇； 王爱民； 何迅； 李勇军； 刘丽娜； 王永林； 【Author】 LAN Yan-yu, WANG Ai-min, HE Xun, LI Yong-jun, LIU Li-na, WANG Yong-lin(School of Pharmacy, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China) 【机构】 贵阳医学院药学院； 贵阳医学院药学院 贵州 贵阳 550004； 贵州 贵阳 550004； 贵州 贵阳 550004； 【摘要】 目的建立注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素含量的RP—HPLC测定方法。方法色谱柱:Diamonsil ODS(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(18:82),流速:1 mI·min-1,柱温:40℃;检测波长350 nm。结果被测定峰与其他组分峰可达到基线分离,异荭草素、荭草素线性范围分别为0.049 6～0.794 0μg(r=0.999 9),0.031 6～0.506 0 μg(r= 0.999 9),回收率分别为98.4%,99.9%,RSD分别为2.2%,1.3%(n=9)。结论该法简便、准确、重现性好,适用于该制剂的质量控制。 【关键词】 反相高效液相色谱法； 复方荭草冻干粉针； 异荭草素； 荭草素； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209022122_388015_1838299_3.jpg

  • 【原创大赛】“第四届原创”+《液质联用技术测定蜂王浆及蜂王浆冻干粉中多种抗生素残留》

    【原创大赛】“第四届原创”+《液质联用技术测定蜂王浆及蜂王浆冻干粉中多种抗生素残留》

    0.9970；蜂王浆八种抗生素和蜂王浆冻干粉中的林可霉素、红霉素、克林霉素、泰乐菌素和交沙霉素方法检出限（LOD）为2.0µg/kg，蜂王浆冻干粉中替米考星、螺旋霉素、吉它霉素方法检出限（LOD）为5.0µg/kg。回收率在72.5％～110.0％；RSDr在1.65%～6.11%， RSDR在7.95%～14.94%之间，满足检测要求。关键词：蜂王浆；蜂王浆冻干粉；大环内酯；SPE；HPLS-MS-MS； 中图分类号：O 657.7 文献标识码：A 文章编号：作为预防和治疗蜜蜂病害用药，抗生素一般有较强的抗革兰氏阳性菌及某些革兰氏阴性球菌活性，可造成蜂王浆及蜂王浆冻干粉中存在残留。基于世界各国对抗生素药物残留均有严格的限量要求，建立蜂王浆及蜂王浆冻干粉中抗生素的多残留方法是十分必要的。据文献报道，主要分析方法微生物法、荧光光度法、紫外分光光度法、气相色谱、薄层谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法(CE)和液质联用技术LC-MSn法法。前处理采用缓冲溶液提取与固相萃取，采用液相色谱-串联质谱方法检测组合方法，灵敏度高、选择性和特异性好，能够对低浓度的样品进行很好的定性确认。文献报道的测定方法多应用于动物、食品中，蜂王浆及蜂王浆冻干粉中同时测定多种类抗生素残留方法未见报道。在参考以上文献的基础上，建立了用pH为9的Tris缓冲溶液提取蜂王浆和蜂王浆冻干粉及其制品中8种抗生素残留、Oasis HLB固相萃取柱萃取、净化，标准加入法，LC-MS-MS检测林可霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、螺旋霉素、吉它霉素、克林霉素和交沙霉素残留的新方法。经过4年的使用证明，该方法有效克服了基质干扰。蜂王浆8种抗生素检出限达到2.0µg/kg；蜂王浆冻干粉中的林可霉素、红霉素、克林霉素、泰乐菌素和交沙霉素达到2.0µg/kg，替米考星、螺旋霉素、吉它霉素达到5.0µg/kg。低于国际上该类药物残留限量的检测要求。1 实验1.1 主要试剂水为GB/T 6682规定的一级水；甲醇，乙腈：色谱纯；乙酸铵，盐酸，三羟甲基氨基甲烷（Tris，C4H11NO3），氯化钙：CaCl2•2H2O：优级纯；甲醇溶液（2+3），0.01 mol/L乙酸铵溶液，定容液为0.01 mol/L乙酸铵-乙腈溶液（17+3），Tris提取液（依次溶解12.0 g三羟甲基氨基甲烷和7.35 g氯化钙于水中，用盐酸调节pH=9，定容于1000 ml），标准物质：林可霉素(CAS 7179-49-9。lincomycin，LIN)、红霉素(CAS 59319-72-1。erythromycin，ERY)、替米考星(CAS 108050-54-0。tilmicosin，TIM)、泰乐菌素(CAS 74610-55-2。tylosin，TYL)、螺旋霉素(CAS 8025-81-8。spiramycin，SPI)、克林霉素(CAS 21462-39-5。clindamycin，CLI)、吉它霉素(CAS 1392-21-8。kitasamycin，KIT)和交沙霉素(CAS 16846-24-5。josamycin，JOS)纯度≥95%。单标溶液：1 000 μg/mL。各准确称取各种标准物质（按纯度折合为100%）0.0100 g于10.0 ml容量瓶中，用甲醇定容。并根据需要，经过适当稀释至浓度为10.0 μg/mL的标准工作溶液。蜂王浆用基质标准混合工作溶液：分别吸取各浓度为10.0 μg/mL的单标标准工作溶液1.0 μL、2.0 μL、5.0 μL、25.0 μL标准工作溶液，依次加入相应的阴性样品中，按1.4步骤制备

  • 纳豆冻干粉和水飞蓟片GB微生物培养

    纳豆冻干粉和水飞蓟片GB微生物培养

    照国标做了纳豆冻干粉和水飞蓟素的微生物检验，发张图上来大家讨论下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310291545_473868_1982570_3.jpg这一张是纳豆的玫瑰红钠琼脂培养基照片，这上面至少两种菌。请问下谁做过纳豆啊，这是什么啊？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/10/201310291549_473870_1982570_3.jpg这一张是水飞蓟片的伊红美蓝琼脂培养基，上面这三驼菌在琼脂培养基上也长了，颜色形状都一样，请问下这是什么啊？

  • 细胞因子和重组蛋白溶解必读(一）

    我们知道，PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20℃或-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中经常遇到的问题。 那么，应该如何进行正确的溶解呢？ 下面我们以Recombinant Human IL-4 (重组人IL-4，产品编号：200-04)的说明书为例，对细胞因子或蛋白的溶解方法进行详细的阐述。 拿到重组人IL-4的说明书后，您会发现有一段关于Reconstitution(重悬)的叙述，这段内容含有溶解相关的所有信息。 1. Centrifuge the vial prior to opening.第1步：开盖前离心试剂管 PeproTech的细胞因子或蛋白冻干粉装盛在塑料管中，为无菌包装。冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上，所以在打开塑料瓶盖前，需将冻干粉通过离心收集到管底，以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。 有很多用户会问一个问题，即应该用多少转速、多长时间离心试剂管，才能达到良好的收集效果？答：有些小型高速离心机(多为进口品牌)的面板上有一个Spin键，按了此键后，离心机会自动快速上升到其最大速度(10000rpm或12000rpm)，上升到最高点后速度即刻下降，直至停止旋转，整个过程大约30s。这个Spin键足以很好的将细胞因子或蛋白收集到管底。 但有些实验室没有这样的高速离心机，只有最高转速为4000-4500rpm的离心机。这种情况下，需3000-3500rpm离心5min，也能达到类似的效果。 2. Reconstitute in water to a concentration of 0.1-1.0 mg/ml. Do not vortex.第2步：用无菌水重悬至0.1-1.0 mg/ml，不可振荡。 这个步骤即为溶解步骤，非常重要。 1) 一定要用推荐的溶液重悬(或溶解)冻干粉 用于溶解细胞因子或蛋白的溶液千差万别。此例中的重组人IL-4需用水溶解，而重组人IL-2 (产品编号：200-02)则需用100mM Acetic Acid (醋酸)溶解，重组人TGF-beta1 (产品编号：100-21)需用10mMCitric Acid (柠檬酸)，pH3.0溶解，重组人FGF-basic(产品编号：100-18B)需用5mMTris，pH7.6溶解，重组人FGF-10(产品编号：100-26)需用5mMSodium Phosphate(磷酸钠)，pH7.4溶解，重组IL-13(产品编号：200-13)需用20mMMHCl溶解。(注：即使同一重组细胞因子或蛋白，不同批次的溶解方法也可能有所不同，因此上面的叙述仅供参考。具体应该如何溶解应以相应批次的官方说明书为准)。后续的文章中将对各种溶解液的配制方法进行详细的阐述，望继续关注。 经常有用户会问，为什么会有这么多种溶解方法？答：我们知道，蛋白的溶解性与很多因素有关，其中比较重要的是pH值和离子强度。PeproTech的细胞因子或重组蛋白在出厂前均经严格测试，说明上所标明的溶解液是能够将该细胞因子或重组蛋白完全溶解的液体。如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符，很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解，这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。 有不少用户没注意说明书上的描述，而是根据习惯，直接用PBS或培养液(1640或DMEM等)等溶解细胞因子或蛋白的冻干粉。这样做可以吗？答：有时可以，要看具体情况。PeproTech的大多数细胞因子或蛋白冻干粉的溶解液不是PBS，此时千万不能用PBS或培养液直接来溶解，具体原因在上面已经叙述过。而有部分细胞因子，如重组人KGF(产品编号：100-19)和重组人FGF-23(产品编号：100-52)等，说明书上的溶解液即为1x PBS，此时用PBS溶解完全没问题，那么用培养液溶解也是可以的，不过最好还是用先用PBS溶解，然后再用培养液稀释。

  • 注射用九种水溶性维生素冻干粉针的制备及其含量测定

    注射用九种水溶性维生素冻干粉针的制备及其含量测定

    作者：施卉摘要：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667577_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433567_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433568_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433569_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433570_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433571_2583865_3.jpg谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433572_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433573_2583865_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304022202_433574_2583865_3.jpg附件：注射用九种水溶性维生素冻干粉针的制备及其含量测定

  • 【分享】蛋白测定（FIB）标准操作规程(SOP)

    原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂。加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过PercentageDetection Method方法求得凝血时间。一、仪器：（一）型号：Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪（二）分析和计算参数：1．处理量：约120个测试/小时2．所需样本量：10μl 3．检验时间：在最长检验时间之内测出结果，典型最长检验时间：100秒4．重复性：CV≤4%5. 计算参数：纤维蛋白原浓度（Fbg）二、试剂及配套品：（一）试剂：1. 凝血酶试剂（Thrombin Reagent）（1）商标：德灵（DADE BEHRING）（2）包装规格：Pack for 10×1ml（3）代码：B4233 G25 E0533 (961) W（4）成分：牛凝血酶冻干粉（lyophilized preparation of bovine thrombin）（近似100 NIH units/ml）

  • 重组蛋白溶解必读：PeproTech技术指南

    2 hours before use. (将重悬液在4 ℃ 静置2小时以上)第 3 步：该重悬液在 2-8 ℃ 最长可保存 1 周。用说明书上推荐的溶液将细胞因子或重组蛋白重悬到推荐的浓度后，细胞因子或重组蛋白可放置在2-8 ℃ ，即冰箱的冷藏室。在这种条件下，细胞因子或重组蛋白的活性最长可保持1周。这对一个周期为5-7天的实验，如DC(树突状细胞)的诱导成熟是足够的。在此期间，只要每次从冰箱里吸取一定量的细胞因子或重组蛋白溶液加入到培养体系内即可。其实，说明书上推荐的浓度对于一般的实验来讲是比较高的。所以用户通常会将该溶液进一步稀释后再放在4 ℃ 保存，待1周内用完。如进行稀释，必须遵照下面第4步的方法，即需用含载体蛋白的溶液进行稀释，否则稀释后的细胞因子或重组蛋白很容易会粘附在管壁或瓶壁上，使得溶液中的细胞因子或重组蛋白的浓度下降，细胞因子或重组蛋白的总活性则大为减弱。第 4 步：如要长期保存，则需用含载体蛋白 ( 如 0.1% BSA ，或 10% FBS ，或 5% HSA) 的溶液进一步稀释，然后分装冻存于 -20 ℃ 至 -80 ℃ 。如果一个实验周期长于一周，或配制的细胞因子或重组蛋白一次用不完，我们就需对细胞因子或重组蛋白进行长期保存。方法是：将已重悬的细胞因子或蛋白用含载体蛋白，如0.1% BSA(牛血清白蛋白)，10% FBS(胎牛血清)，5% HSA(人血清白蛋白)的溶液将重悬液进一步稀释，然后分装冻存于-20 ℃ 至-80 ℃ ，即常规冰箱的冷冻室或超低温冰箱中。问：经常有人会在细胞因子或重组蛋白冻干粉用推荐的溶液重悬后直接分装冻存于-20 ℃ 至-80 ℃ ，这样可以吗? 答：不行。我们知道，塑料管壁对多数蛋白均有很好的吸附作用，也就是说溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。粘附后，蛋白是很难与管壁分离的。做过ELISA实验的人都知道，ELISA的包被抗体(Capture antibody)就是通过这种粘附作用包被到酶标板上的。载体蛋白，如1% BSA，10% FBS (胎牛血清)和5% HSA等的主要作用是预先封

  • 【求助】冻干粉针的冻干问题

    冻干的产品出现了萎缩，有的甚至化水，有部分是好的。冻干直至压塞时，外观还是很好的，骨架也很好看，但是在冻干机中放置一晚后（因为想第二天轧盖），就出现了上面提到的现象，以前从来没出现过，郁闷死了，请各位高手前辈给予指点～～～～～～～～～在线等候[em58]

  • 最终结果以干粉计怎么理解呢？

    这两天收到一个盲样，基质为鸡肉冻干粉，要求称取两（用数字审核不通过只能用汉字[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif[/img]）克冻干粉，加入六克的水进行复原，复原比例为一比四，称取复原样进行检测，最终结果以干粉计（给的要求就这么多[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif[/img]）我是称取5g复原样，稀释倍数是2，定容体积为1ml，检测出来的浓度为1.2ng/ml。最终结果怎么计算呢？是0.48ug/kg吗？以干粉计又怎么理解呢？

  • 如何明辨重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白：重组蛋白常见问题详解

    [font=宋体][b]重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白的区别：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白是利用基因工程技术产生的，通常是由转基因动物的乳腺产生，其作为生物制药在医学领域中作用显著。利用基因工程技术，可以使哺乳动物本身变成[/font][font=宋体]“批量生产药物的工厂”。方法：是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品，因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白又称为[/font][font=宋体]“标签蛋白”，常用的标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]标签。融合蛋白是通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连，通过这种方式表达出来的蛋白质，就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]天然蛋白质是在自然界中存在的，不经过人工的任何修饰或加工，比如大豆中的蛋白质和病毒表面的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组蛋白常见问题解析：[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白为什么要冻干？冻干对蛋白的影响有哪些？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂？一般冻干保护剂有哪几种？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加[/font][font=Calibri]8%[/font][font=宋体]（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集；甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂，可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]温馨提示：对于大多数蛋白，重悬后在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃仅能短期保存[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]约[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。如想长期保存，请先配制成稀释液[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]其中必须含有载体蛋白，如[/font][font=Calibri]0.1% BSA[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]5%HSA[/font][font=宋体]，或[/font][font=Calibri]10% FBS)[/font][font=宋体]，然后分装冻存于[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃或[/font][font=Calibri]-80[/font][font=宋体]℃。一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]如何重构冻干粉？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]请查看您的货物随附的分析证书以获取有关重构的确切说明，因为并非所有产品都在相同条件下重构。一般来说，我们建议使用无菌水进行复溶。将推荐体积的无菌水加入小瓶中，轻轻摇晃以完全溶解蛋白质。不要涡旋。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]为什么我的管内几乎看不见蛋白产品？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如牛血清白蛋白[/font][font=Calibri](BSA)[/font][font=宋体]，人血清白蛋白[/font][font=Calibri](HSA)[/font][font=宋体]和蔗糖等，并以最低含盐量的溶液进行冻干时，常常不能形成白色网架结构，而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]应如何确定细胞因子的种属交叉活性？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]除少数例外，大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。[/font][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞，但比活性可能低于对应的人类细胞因子。 [/font][font=Calibri]3) IL-7[/font][font=宋体]等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。[/font][font=Calibri]4) [/font][font=宋体]干扰素，[/font][font=Calibri]GM-CSF, IL-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]等细胞因子种属特异，对非同源细胞几乎没有活性。[/font][font=Calibri]5) [/font][font=宋体]相反，成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGFs)[/font][font=宋体]和神经营养素[/font][font=Calibri](neurotrophins)[/font][font=宋体]高度保守，在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]什么是载体蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]载体蛋白如[/font] [font=Calibri]HSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]用于提高重组蛋白的稳定性，并有助于避免产品粘在小瓶壁上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]我应该如何储存重组蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于长期储存，蛋白质溶液应与载体蛋白（例如[/font] [font=Calibri]0.1% BSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]0.1% HSA[/font][font=宋体]）分装保存，并在 [/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下冷冻保存。请记住，每个冷冻[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]解冻循环都可能导致蛋白质变性。除非分析证书上另有说明，否则大多数重组蛋白的保质期为一年。如果将它们保存在分析证书上所述的最佳存储条件下，则提供此保证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]如何确定重组蛋白的数量？为什么我的检测产生的蛋白质数量与您的结果不同？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]我们通过[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]等方法确定重组蛋白的数量。不同的测定产生不同的量化结果。有时，如果您进行不同的检测，差异可能会很大。蛋白质也有可能在储存过程中形成聚集体，在重组和离心后导致损失。我们对每批产品进行质量控制测试，但是，同一批次中的一些小瓶可能与其他小瓶不同（这种情况很少发生）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白资源[/b][/url]详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font]

  • 原料组分大小和注射用冻干成品组分大小有必然关系吗？

    最近做项目时接触到某注射用冻干粉针的组分问题，想请教大家一下。在做液相组分时，原料的某一个组分的检测结果是89.5%，而对其生产的注射用冻干粉针进行液相组分检测时，该组分的含量是87.7%。这个过程中原料和成品的组分含量是不是不应该相差这么大？会是什么原因导致有这样的差距呢？原料和成品的组分检测是由不同人在不同仪器不同色谱柱上完成的。请教大家~多多指教！

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