色谱柱筛选

高效色谱柱筛选尿嘧啶和黄嘌呤，即咖啡因、可可碱和茶碱，是一组在各种生物过程和人类消费中起重要作用的有机化合物[1-3]。这些分子属于杂环化合物，其特点是含有碳原子和氮原子的环状结构。尿嘧啶是 RNA(核糖核酸)的基本组成部分，RNA 是形成遗传密码并参与蛋白质合成的基本核碱基之一。另一方面，黄嘌呤、咖啡因、可可碱和茶碱是一类结构相似但生物效应不同的生物碱[1-3]。这些黄嘌呤存在于各种植物中，是一种众所周知的兴奋剂，可以穿过血脑屏障，影响中枢神经系统。在 RP(反相色谱)[1-3]条件下(SN_802_2023)， LC(液相色谱)可分离生物碱。超临界流体色谱(SFC)是一种使用超临界二氧化碳(CO2)作为流动相的基本成分的色谱技术。这种状态的二氧化碳被称为超临界，它具有独特的特性，如高扩散系数和低粘度，使其成为分离和分析化合物的绝佳溶剂。与传统色谱方法相比，SFC 提供了许多优势，包括更快的分析时间，更低的溶剂消耗和分离的差异选择性。此外，与 RP-LC 相比，SFC 代表了一种正交技术，为各种分析挑战提供了互补的分离能力。在 SFC 中，色谱柱筛选包括测试不同的固定相，以找到最适合特定分离任务的固定相。固定相是色谱系统的重要组成部分，因为它直接影响色谱的选择性。不同的固定相具有不同的化学功能和与分析物的相互作用，使它们或多或少地选择特定的化合物。通过筛选和选择合适的色谱柱，可以优化分离条件，以获得更好的目标分析物的分辨率和灵敏度。本文描述了使用 Sepmatix 8x SFC 仪器对尿嘧啶、咖啡因、可可碱和茶碱混合物进行平行柱筛选，随后转移到制备的 Sepiatec SFC-50。1设备Sepiatec SFC-50 instrumentSepmatix 8x SFC instrumentPrepPure Silica, 5μm, 250 x 10mmPrepPure Diol, 5μm, 250 x 10mmPrepPure Silica, 5μm, 250 x 4.6mmPrepPure Diol, 5μm, 250 x 4.6mmPrepPure Amino, 5μm, 250 x 4.6mmPrepPure 2-EP, 5μm, 250 x 4.6mmReprosil 4-EP, 5μm, 250 x 4.6mm (Dr. Maisch GmbH)PrepPure PEI, 5μm, 250 x 4.6mmPrepPure CBD, 5μm, 250 x 4.6mmCyano, 5μm, 250 x 4.6mm, (Dr. Maisch GmbH)2试剂和材料二氧化碳(99.9%)甲醇(≥99%)尿嘧啶(99% + %)可可素(99%)咖啡(99%以上)茶碱(99%)3实验样品制备：在 50/2.5mL 甲醇/水混合液中，40℃ 下用超声水浴溶解 0.05g 尿嘧啶，0.07g 咖啡因，0.055g 可可碱，0.085g 茶碱。Sepmatix 8x SFC 筛选运行条件：流动相：A =二氧化碳：甲醇流速：3ml /min(每柱)流动相条件：0-0.5min：5% B0.5-8.0min：5 - 50%8.0-9.4min：50%9.4-9.5min：50 - 5%9.5-10min：5% B检测：紫外扫描波段：200nm - 600nm筛选运行是自动开始的。使用流量控制单元将流量设置为每通道 3mL/min，并平衡色谱柱。自动进样(V=5 μL)，开始平行筛选(运行时间=10min)。背压调节器设置为 150bar，柱箱加热至 32°C。SFC-50 运行条件：流动相：A =二氧化碳；B=甲醇流动相条件：等度运行条件检测：紫外波长 270nmSFC 柱在规定的流速下条件预热 3 分钟，使用定量环自动注入样品并开始运行。背压调节器设置为 150bar，柱箱加热至 40°C。3结果与讨论用 Sepmatix 8x SFC 筛选色谱柱：为了确定样品的最佳分离选择性，进行了不同色谱柱的筛选。使用 Sepmatix 8x SFC 仪器可以高效地同时筛选8个色谱柱。因此，最佳选择性可以在很短的时间内确定。为此，使用了 8 种不同的固定相:硅胶、二醇基、氨基、氰基、2-EP、4-EP、PEI 和 CBD，图1显示了筛选的结果。▲图1：Sepmatix 8x SFC 仪器筛选结果。从左到右依次为:硅胶、氨基、氰基、二醇基；下从左至右依次为：2-EP、4-EP、PEI、CBD 柱；运行时间=10分钟用分辨率(R)来衡量色谱方法在色谱图中分离和区分两个相邻峰的能力，它量化了分析物相互分离的程度。表 1 显示了 4 组分分离的分辨率值。使用 Sepmatix 软件和以下公式自动确定：其中tR1 和 tR2 代表 组分 1 或组分 2的保留时间W1 和W2 代表分量1或分量 2 峰高一半处的宽度在处理复杂的混合物时，分辨率尤其重要，因为它确保每个分析物都被很好地分离，并且可以准确地识别和定量。分辨率为 1 表示峰值根本没有被分解，基本上是合并的，而更高的分辨率值表示峰值之间的分离更好。在使用过程中，分辨率至少应达到 1.5，才能以适当的定量和鉴定分析物。色谱柱R1R2R3硅胶1.574.183.79氨基5.421.264.44氰基未分离3.351.69二醇3.925.12.292-EP3.622.72未分离4-EP9.462.87未分离PEI9.931.8610.8CBD5.011.274.51表1：SFC 不同筛选条件下的分辨率值R 值的筛选和评价表明，硅胶、二醇基和 PEI 相对样品的分离选择性最好。二醇基在运行时间和分辨率方面表现出最佳性能。硅胶柱上的分离并不完全是茶碱和咖啡因的基线分离。PEI 相的运行时间相对较长，因为样品分子的位阻较大。表 2 为洗脱顺序，这是通过测定的光谱和组分的单独进样来确定的。与其他相相比，硅胶显示出不同的洗脱顺序。对于氰基、2-EP 和 4-EP，不能完全确定洗脱顺序。色谱柱洗脱顺序硅胶茶碱，咖啡因，尿嘧啶，可可碱氨基咖啡因，茶碱，可可碱，尿嘧啶氰基咖啡因和茶碱的双峰，可可碱，尿嘧啶二醇咖啡因，茶碱，可可碱，尿嘧啶2-EP咖啡因，茶碱，可可碱和尿嘧啶的双峰4-EP咖啡因，茶碱，可可碱和尿嘧啶的双峰PEI咖啡因，茶碱，可可碱，尿嘧啶CBD咖啡因，茶碱，可可碱，尿嘧啶表2：SFC 不同色谱柱筛选条件下的洗脱顺序将开发方法通过 SFC-50 放大：由于二醇基取得了最好的结果，因此选择了 5μm, 250 x 10mm 的 PrepPure 二醇基进行 Sepiatec SFC-50 方法放大制备。由于通过堆叠注射法纯化混合物的效率明显高于多次梯度注射法，该方法是在等度运行条件下实施的，这是使用堆叠进样的要求。在等度条件下，样品只能在低甲醇含量下分离(见图2，下)。在高甲醇浓度下，由于流动相的高洗脱强度，尿嘧啶、咖啡因、茶碱和茶碱是不可分离的(见图2，上)。▲图2：使用 PrepPure Diol 5 μm, 250 x 10mm 色谱柱分离样品。上:流速= 20 mL/min, 150 bar, 40℃，270nm, 33% B，进样量= 0.09 mL，运行时间= 4 min；下:流量= 20 mL/min 150 bar 40°C, 270 nm, 12%甲醇，0.09 mL，运行时间= 5 min改变压力和温度可以优化分辨率。最佳分离条件为 40℃ 和 150bar。图 3 为图 2(下)实验条件下的堆叠进样情况，堆叠时间为 2.42min，因此每 2.42min 进样一次。在这种情况下，由于每次额外注入节省了平衡时间，因此提高了产能。为了更有效的多次分离，可以使用硅胶填料。使用 34% 的甲醇作为改性剂，将堆叠时间缩短至 2.15min。与二醇基相比，硅胶填料在 100bar 下表现出更好的性能。然而，在 1.5 的分辨率下，咖啡因和茶碱并不能获得理想的基线分离。由于硅胶的极性比二元醇高，为了快速洗脱，必须增加改性剂的含量，但这也导致溶剂消耗增加。4结论在本文中，使用 Sepmatix 8x SFC 进行柱筛选，并将开发结果转移到 Sepiatec SFC-50 进行放大。在色谱参数分辨率和运行时间方面，二醇基表现出最好的效果。对于二醇基，根据筛选结果，在 Sepiatec SFC-50 仪器上采用 250 × 10 mm 柱进行等度堆叠进样。作为比较，开发了另一种用于硅胶填料的方法，但分辨率值略差。这种分离表明，要想在 prep-SFC 中获得一个好的分离方法，事先通过柱筛选确定最佳选择性是很重要的。然后，该方法可以在 prep-SFC 上简单实现，并进行了优化。最理想的是，该方法在等度条件下应用，以最大限度地提高产量。每次注射后的叠加紫外信号表明该方法具有良好的再现性(图3和4，下面)。垂直线描述了收集相应分数的时间窗口。▲图3：堆叠进样与二醇柱分离。流速= 20 mL/min, 150 bar, 40℃，270 nm, 12% B，进样量= 0.12 mL；堆叠时间:2.42 min，注射次数：8次；上图：最终色谱图；下图为各注射剂的紫外信号叠加图▲图4：堆叠进样与硅胶柱分离。流速= 16 mL/min, 100 bar, 40℃，270 nm, 34% B，进样量= 0.09 mL；堆叠时间:2.15 min，注射次数：7次；上图：最终色谱图；下图：分别在254 nm和270 nm处注射的叠加紫外信号5参考文献https://doi.org/10.1093/chromsci/46.2.144DOI: 10.1021/jf030817mDOI: 10.1016/j.foodchem.2004.11.013DOI: 10.1016/j.saa.2004.03.030Laboratory Chromatography Gμide, ISBN 3-033-00339-7, by Büchi Labortechnik AG (Switzerland)

高效筛选色谱条件 在色谱的方法开发过程中，我们往往围绕着流动相、梯度比例以及色谱柱填料这三相进行筛选。传统分析型高效色谱液相（HPLC）或超临界色谱（SFC）在方法筛选时会采用溶剂泵，单检测器与单上样模块配合柱切换阀，以序列的形式逐一筛选合适的色谱柱填料。如果筛选后的结果不佳，则需要更换流动相或梯度比例再进行一次筛选，整个过程非常费时费力。▲传统分析型 HPLC 与 SFC自 2022 年 8 月瑞士步琦公司收购德国 Sepiatec 之后，其拥有 Sepmatix 8x 超高效平行色谱系统也被合并入步琦的色谱产品线中。Sepmatix 8x 平行色谱系统为 HPLC 以及 SFC 方法提供了更加高效的筛选速度，可以通过独特的流量控制器实现一次进样筛选 8 种不同色谱填料的功能。▲Sepmatix 8x 超高效平行色谱系统▲Sepmatix 8x 可一次进样筛选 8 根色谱柱Sepmatix 8x 平行色谱系统通过专利的 8 通道流量控制器、压力控制技术，再结合 8 通道全自动进样器、8 个独立的紫外检测器，以及多组电动阀门等的精密组件，保证分析方法的一致性和稳定性。▲通过流量控制器实时调整不同流速使其均一化如果为同一样品筛选 8 种色谱填料，Sepmatix 8x SFC色谱系统可以比传统分析型 SFC 节省 87% 的运行时间。筛选8种色谱填料Sepmatix 8x SFC 色谱系统传统分析型 SFC平衡时间5 分钟40 分钟运行时间15 分钟120 分钟总耗时20 分钟160 分钟这显著加速了方法开发的过程，而其维护费用、使用空间等仅相当于 1 台传统的 HPLC/SFC。Sepmatix 8x 平行色谱系统主要分为 3 个型号：Sepmatix 8x SFC 色谱系统 CO2 泵 100mL/min；改性剂泵 100mL/min最大背压 300 bar；柱温箱 10℃ – 70℃8 通道流量控制器，每个通道可控制在 3 – 6 mL/min最大支持 8 根 4.6x250mm 分析型色谱柱通过溶剂架可扩展支持18种改性剂流动相8 组独立紫外检测器，波长范围 195 - 390 nm8 组独立定量环和上样阀门尺寸：125 x 55 x 105 cm (W x D x H)Sepmatix 8x HPLC 色谱系统 泵流速 10mL/min，最大压力 400bar；集成在线脱气装置8 通道流量控制器，每个通道可控制在 0.5 – 1.25 mL/min最大支持 8 根 4.6x250mm 分析型色谱柱通过溶剂架可扩展支持 24 种流动相8 组独立紫外检测器，波长范围 195 - 390nm8 组独立定量环和上样阀门尺寸：110 x 55 x 105 cm (W x D x H)Sepmatix 8x HPLC Prep 色谱系统 泵流速 100mL/min，最大压力 400bar8 通道流量控制器，每个通道可控制在 3 – 18 mL/min最大支持 8 根 20x250mm 制备色谱柱通过溶剂架可扩展支持 24 种流动相8 组独立紫外检测器，波长范围 195 - 390nm8 组独立定量环和上样阀门馏分收集器支持1152x10mL, 2304x6mL, 4608x2.2mL尺寸：242 x 55 x 105 cm (W x D x H)在得到多组运行结果后，可通过独家的 CCS（Chiral Column Screening Wizard）软件同屏显示，最多支持 80 张色谱图。仅需几小时，就可以得到并同时观察单一样品在 8 根不同色谱柱，10 种不同流动相条件下的分离结果，迅速找出最佳的色谱条件。▲CCS 软件查看 64 张结果图谱，横坐标为 8 种色谱柱，纵坐标为 8 种流动相如果您对我们的 Sepmatix 8x 平行色谱系统感兴趣的话，请通过下方的联系方式与我们的产品专家沟通，获取更详细的资料。也可以关注我们的微信公众号，了解更多瑞士步琦的色谱产品信息。

一、项目编号：XPNZ2021146（招标文件编号：XPNZ2021146）二、项目名称：同步-红外-气相色谱/质谱联用仪、快速筛选量热仪采购三、中标（成交）信息供应商名称：上海般诺生物科技有限公司供应商地址：上海丰华公路1200号C303B中标（成交）金额：206.8800000（万元）四、主要标的信息序号 供应商名称 货物名称 货物品牌 货物型号 货物数量 货物单价(元) 1 上海般诺生物科技有限公司 同步-红外-气相色谱/质谱联用仪、快速筛选量热仪 美国铂金埃尔默、德国耐驰 详见招标文件的规格型号 数量若干 合计206.88万元 五、评审专家（单一来源采购人员）名单：邹跃、汪德华、王璟初、邢志鸿、李月华六、代理服务收费标准及金额：本项目代理费收费标准：按招标文件规定收取本项目代理费总金额：2.4405000 万元（人民币）七、公告期限自本公告发布之日起1个工作日。八、其它补充事宜如对评标结果有异议，请于本评标结果公布之日起7个工作日内以书面形式向上海祥浦建设工程监理咨询有限责任公司提出质疑。九、凡对本次公告内容提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：上海化工研究院有限公司　　　　　地址：上海市云岭东路345号　　　　　　　　联系方式：张春晖，021-31015267　　　　　　2.采购代理机构信息名 称：上海祥浦建设工程监理咨询有限责任公司　　　　　　　　　　　　地　址：上海市杨浦区宁国路129号10层、14层　　　　　　　　　　　　联系方式：陆晨晖，021-65198205　　　　　　　　　　　　3.项目联系方式项目联系人：陆晨晖电　话：　　021-65198205

安捷伦科技推出创新的液相色谱柱和生物色谱柱全新的多糖分析色谱柱和Poroshell HPH 色谱柱将面向极具挑战性的生物治疗药物研究和高 pH 应用 2014 年 6 月 17 日，北京 — 安捷伦科技公司（纽约证交所：A) 今日宣布推出用于小分子超高效液相色谱分析和生物大分子分析的新型色谱柱产品系列。 AdvanceBio 多糖分析色谱柱是 AdvanceBio 色谱柱系列的最新产品，其经过专门的设计可提供快速、高分离度的糖链分离。Poroshell HPH-C18 和 Poroshell HPH-C8 固定相是 Poroshell 120 系列的新成员，它们非常适用于高 pH 应用。这些针对特定应用的液相色谱柱有助于提高实验室通量，为重要应用提供快速、高重现性和高分离度的结果。 安捷伦化学部的总经理 Anne Jones 说道：“多糖分析是生物治疗药物、生物仿制药和改良型生物相似药开发中较为复杂的工作流程之一。准确度和速度极其重要，因此，若想将新型生物治疗药物抢先上市，找到一条准确获取结果的捷径至关重要”。 “使用高 pH 方法进行药物开发的小分子药物分析实验室同样面临着特有的挑战，它们必须优化 pH 稳定性，尽可能地开发出最高效的分离方法，”她补充说道。 AdvanceBio 多糖分析色谱柱 AdvanceBio 多糖分析色谱柱可让实验室在 10 分钟之内完成高分离度的糖链分离分析。其采用两种 UHPLC 配置：2.7 μm 的表面多孔填料和 1.8 μm 的表面多孔填料，前者适用于高分离度和低背压（在 600 bar 压力下保持稳定）条件下的分析，后者适用于要求最高分离度的分析，可在 1200 bar 压力下保持稳定。 Poroshell HPH-C18 和 Poroshell HPH-C8 色谱柱 安捷伦的 Poroshell 120 色谱柱备受分析实验室的青睐。新的 Poroshell HPH-C18 和 HPH-C8 固定相由经过化学改性处理的 Poroshell 120 填料制成，其制造过程采用了专利工艺以提高 pH 稳定性。这些色谱柱是目前市场上唯一的具有有机改性的硅胶载体，并可实现高 pH 分析的表面多孔色谱柱。 安捷伦最先推出的表面多孔填料技术可提供类似于亚 2 μm 填料的分析分离度，同时显著降低背压，在任何高效液相色谱仪或超高效液相色谱仪上都能实现快速液相色谱分析。使用新的 HPH 固定相，色谱工作者可以在不影响色谱柱寿命的情况下选择适用于低、中、高 pH 条件下的不同固定相来开发筛选方法。 “这两款产品完全由安捷伦独自研发，以满足端对端生产的精密度和高标准的质量控制要求，从而获得市场领先的液相色谱柱所需具备的高重现性，”Jones 说道。 关于安捷伦科技公司 安捷伦科技公司（纽约证交所：A) 是全球领先的测试测量公司，同时也是化学分析、生命科学、诊断、电子和通信领域的技术领导者。公司拥有 20600 名员工，遍及全球 100 多个国家，为客户提供卓越服务。在 2013 财年，安捷伦的净收入达到 68 亿美元。要了解安捷伦科技的信息，请访问：www.agilent.com.cn。 2013 年 9 月 19 日，安捷伦宣布将通过对旗下电子测量公司进行免税剥离，分拆为两家上市公司的计划。分拆后的电子测量公司命名为是德科技 (Keysight Technologies, Inc.)，此次分拆预计将于 2014 年 11 月初完成。 编者注：更多有关安捷伦科技公司的技术、企业社会责任和行政新闻，请访问安捷伦新闻网站：www.agilent.com.cn/go/news。

Accucore 色谱柱[ 增强核技术] 　　为了满足色谱柱的卓越表现不受所用仪器的限制这一需求，我们应用全新的"表面多孔增强核技术“，研发出创新的AccucoreTM HPLC 色谱柱。该技术的四大重要特点： 　　1.2.6µ m颗粒包含实心核和表面多孔层，在常规反压下实现高速高效的分析。 　　2.改进的颗粒筛选流程使粒径分布范围最小，从而提到柱效。 　　3.先进的自动装填过程确保所有色谱柱都有最高的装填质量和优异的批次重现性。 　　4.提供6种键合相，满足不同的选择性需求。优化的固定相键合技术使固定相更加致密和耐用。 　　详细情况见：http://www.thermo.com.cn/Product5787.html

p 　　洛杉矶时间2015年3月13日，仪器信息网一行三人拜访了Phenomenex公司，Phenomenex国际销售经理Shang Tsai、产品技术主管Jeff Layne博士、市场战略经理Simon Lomas和国际市场部企划Jess Xu热情地接待了我们。 /p p 　　据我们之前的了解，Phenomenex一直聚焦色谱耗材的研发和生产，其色谱柱在全球市场占有率很高，但在中国的业绩相比其全球市场份额还有不小的差距。此次的拜访本想了解一下Phenomenex对中国市场的看法及下一步的品牌推广计划，但没有料到，Phenomenex之行却完全颠覆了我们对仪器制造企业的传统印象。 /p p 　　走进Phenomenex，我们就迎来了一轮无法阻挡的视觉冲击，这是我们要拜访的色谱柱的生产企业吗?简直就是一个文化创意公司! /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541492530.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / & nbsp img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541492553.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 充满文化氛围的公司环境 /strong /p p 　　原来，Phenomenex公司的创始人Fasha Mahjoor之前是学建筑设计的出身，而这里的一切都是他自己设计的。紫、黄、绿，不同的颜色搭配让你的心情顿时放松 拐角、楼梯，甚至每一面墙上不同的雕塑或者挂件让这里充满了文化底蕴。自1982年公司创立开始，Phenomenex在专注于产品研发之外，并尽其所能为员工提供最好的工作环境，并将此奉为公司的宗旨与使命。所以，这里曾被华尔街日报授予“最佳工作场所”也丝毫不让人意外。 /p p 　　从公司的内部陈设来看，我们很难将一个色谱耗材的生产工厂与这一份创意的环境联系在一起，而随着拜访的深入，我们发现Phenomenex与众不同的“用心”之处还远不仅如此。 /p p span style=" color: #ff0000" 　　 strong 创新的力量：1/3的营收来源于近五年的新产品 /strong /span /p p 　　据介绍，Phenomenex的主要产品包括(超)高效液相色谱、制备色谱、气相色谱、固相萃取以及样品制备产品。Phenomenex每年拿出11%的盈利用于研发，远高于仪器行业平均5%左右的水平，“即使在不景气的时候，Phenomenex也保持着两位数的成长速度，并坚持执着于研发的投入，确保新产品得以满足客户的需求。”甚至为了能够坚守这份对创新的执着，Phenomenex没有选择很多仪器公司都希望走的上市这条路。“如果上市之后，就会涉及到股东利益等多方面的问题，那样就很难保证拿出那么多的资金来做研发”。当然，据Shang Tsai先生介绍，以公司目前的运营状况，Phenomenex也没有必要走上市这条路。 /p p 　　正是因为有了这份近乎“倔强”的执着，Phenomenex几乎每年都会推出新产品，而且连续多年每年都有产品获得R& amp D大奖。“对很多仪器公司来说，营业收入很大一部分依赖五年、甚至十年以上的产品，而对于Phenomenex来说，不断推出的新产品已经成为一个显著的业绩增长点。”Shang Tsai先生介绍到，“目前Phenomenex全球营收的三分之一来源于近五年推出的新产品。” /p p 　　不仅如此，Phenomenex的创新永远是超前的，虽然Core-Shell色谱柱依然是公司业绩的一个高增长点，但Phenomenex已经在想下一个突破点会是什么了。此外，公司的产品也开始走向多元化，比如目前看好临床、血液检测等新兴市场，据悉，Phenomenex去年刚成立的一个子公司就在做采样笔等医疗器材。 /p p 　　其实，在Phenomenex公司里，我们随处都可以看到一些极具想象力的文化元素，这也正好契合了公司的创新理念。比如，公司门口就有一尊雕塑，一个小男孩站在折叠的飞机上，打破传统，创意无限。其实，稍微细心一点你就会发现在Phenomenex员工的名片上都会有这样的标识：“breaking with tradition”。 /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541492733.jpg" style=" width: 250px height: 279px" width=" 537" height=" 600" / /strong /p p style=" text-align: center" strong “打破传统，坚持创新” /strong /p p 　　 span style=" color: #ff0000" strong “奢华”的硬件：上百台液相为色谱柱“保驾护航” /strong /span /p p 　　在很多人的认识中，色谱柱是为色谱仪器服务的，但在Phenomenex，我们却发现上百台的液相在为色谱柱“保驾护航”! /p p 　　据介绍，为了保障研发、生产和质控，公司配备了色谱、质谱等一系列的仪器设备，其中仅液相色谱就有100多台，几乎走进每一间实验室都会发现有几台甚至十几台的液相齐刷刷的摆放在那里。 /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493423.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / & nbsp img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493219.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493457.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / & nbsp img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493521.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong “奢华”的硬件设施 /strong /p p 　　据介绍，Phenomenex公司的所有液相色谱柱都在这里研发、筛选，并进行一些应用实验。 /p p 　　为了保证产品的质量，这么多年以来Phenomenex所有的产品都坚持在美国生产，甚至曾经为了产品的质量放弃了厂区搬迁的计划。 /p p 　　其实，在工厂参观的时候，我们也能感受到Phenomenex对产品品质的重视。从填料的生产、柱子的设计以及柱子的填料等所有的过程全部自己来做，甚至是柱管，也是从外面买来钢管自己加工。而且，Phenomenex的生产全部采用全自动化的模式，不仅减少了人力成本，提高了效率，而且保证了批次之间的一致性。 /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493558.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / & nbsp img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493611.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 自动化的生产车间 /strong /p p 　　不仅如此，Phenomenex对产品质控的要求非常严格，其质量管理系统获得ISO 9001:2008认证。我们发现，每一根色谱柱都有自己独一无二的标签，任何时候都可以很容易地查找到它所属的批次以及所有质量测试相关信息。虽然已经是全自动化的操作，很多产品在最后封装的时候还是要求员工逐个地检查。即使产品已经经过层层把关入库，如果产品在库房放置3个月以上的时间，就必须重新进行检验。 /p p style=" text-align: center" & nbsp /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493638.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 封装之前的人工筛选 /strong /p p span style=" color: #ff0000" strong 　　和客户做朋友 /strong /span /p p 　　在拜访之前，我们还很好奇，色谱柱的生产厂家很多，而且很多知名的色谱仪器生产商都有自己的色谱柱，Phenomenex的竞争优势到底体现在哪里? /p p 　　对此，Shang Tsai先生告诉我们，“Phenomenex本身不做仪器，所以不会像色谱仪器公司有那么大的品牌效应，Phenomenex最大的优势就是对客户服务的态度，虽然30年间，公司发生了很多的变化，但是对客户的服务态度始终没有变，这也是今天这么成功的一个非常重要的因素。” /p p 　　“中国的很多用户也许不会了解Phenomenex有多大，但我敢保证在美国从事过色谱研究的科学家都用过Phenomenex的色谱柱，而且很多与我们都是很好的朋友。” /p p 　　“对于Phenomenex来说，客户服务和科研同样重要，无论是电话营销，还是拜访客户。而且，所有的员工，包括生产和技术支持，对客人服务至上都是最高的要求。”Shang Tsai先生介绍到， /p p 　　为了更好地服务客户，Phenomenex专门设立了方法开发和应用支持团队Phenologix，为客户的方法开发、过程优化、故障排除、咨询/培训、国际间分析方法转移等各方面的需求提供技术支援。 /p p 　　而且在该应用实验室里，我们还看到了Phenomenex自己设计的仪器，可以24小时不间断的进行色谱柱的筛选。 /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493733.jpg" style=" width: 450px height: 301px" width=" 600" height=" 401" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 高效率的色谱柱筛选仪器 /strong /p p 　　此外，Phenomenex还注重发展与顾客之间良好的关系，重视顾客的反馈，当然，Phenomenex也从中受益良多，据悉，很多产品就是因为客户的反馈而开发出来。 /p p 　　 span style=" color: #ff0000" strong 看好中国市场 为中国用户提供便利服务 /strong /span /p p 　　“相对于Phenomenex的整体业绩来说，中国市场仅占很小的一部分，中国市场未来还有很大的成长空间。”Shang Tsai先生介绍到。 /p p 　　毋庸置疑，中国是Phenomenex现在非常重视的市场之一，而且，Phenomenex也会在今年加大对中国市场的开发力度，他们希望能给中国的客户提供更好的技术和检测方式，同时也希望能与中国的专家多交流，更多地了解中国的发展趋向。 /p p 　　此外，Phenomenex也会给中国的客户提供更多的专业技术资源：如《气相色谱故障诊断与排除指南》、《液相色谱故障诊断与排除指南》、《食品安全解决方案手册》、《Lux手性方法开发海报》等中文手册或者海报都是Phenomenex请色谱行业专家根据中国客户的需求进行定制。 /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/20154149389.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / & nbsp img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/20154149396.jpg" style=" width: 250px height: 167px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 拜访现场 /strong /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493925.jpg" style=" width: 450px height: 300px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong 拜访合影 /strong /p p style=" text-align: center" strong img alt=" " src=" http://img1.17img.cn/17img/old/NewsImags/images/201541493945.jpg" style=" width: 450px height: 300px" width=" 450" height=" 300" / /strong /p p style=" text-align: center" strong Phenomenex公司外景 /strong /p p 　　 strong 关于Phenomenex公司 /strong /p p 　　Phenomenex公司创建于1982年，开始以经销商的方式运营；1986年开始生产自己的色谱柱；1987年开始走向国际化；1989年申请第一项固定相专利；1996年生产Luna产品；1997年开始推出用于生物分析的柱子；1998年正式生产气相柱；2000年开始做固相萃取小柱；2004年推出了氨基酸检测包；2005年推出填充制备柱AXIA；2006年推出用于核苷酸检测的柱子；2008年开始做手性的柱子；2009年推出Core-Shell的柱子......目前，Phenomenex已经成为业内屈指可数的专注于色谱耗材研发的公司，可以提供液相色谱柱、固相萃取柱、气相色谱柱、色谱填料、制备色谱柱、核苷酸和氨基酸分析柱子等多类别的产品和服务。 /p p 　　经过30多年的发展，Phenomenex目前Phenomenex的客户遍布99个国家，在全球拥有13家分公司，近800名员工，直销平台覆盖25个国家，并在几十个国家建立了代理商服务网络。 /p

伴随着药物研究领域高通量的筛选需要、食品安全问题的加剧，生活节奏的加快与时间成本的提升，试剂成本的上涨导致分析成本的提高，色谱工作者对快速液相色谱的需求急速增加。Sigma-Aldrich公司旗下分析品牌 Supelco于2008年首发推出具有革命性突破的熔融核填料技术（Fused-CoreTM)的Ascentis Express 2.7&mu m液相色谱柱，可提高色谱分离速率、辨别率和敏锐度，而无须本钱投入更新仪器。在HPLC上能够实现UPLC的效果，在UPLC上实现更好的效果。 Sigma-Aldrich公司旗下分析品牌 Supelco 于2012年8月又首发推出 Ascentis Express 5&mu m 熔融核液相色谱柱。该色谱柱基于熔融核技术，性能超越传统全孔5&mu m和3&mu m色谱柱，在不增加柱压的情况下，实现快速高效分离，可作为传统5&mu m色谱柱的新型标准柱。 　 为让广大分析工作者了解Sigma-Aldrich公司5&mu m熔融核技术的原理和应用， Sigma-Aldrich公司产品专员陈娟将做客仪器信息网网络讲堂，为您解读Ascentis Express 5&mu m 熔融核液相色谱柱技术和应用。 　　一、活动组办方 　　主办：仪器信息网 　　协办：西格玛-奥德里奇(上海)有限公司 二、讲座时间 　　开课时间：2012-12-20 10:00 （教室于 2012-12-20 9:30:00开放） 会议时长： 2小时 三、活动地点 　　仪器信息网&mdash &mdash 网络讲堂&mdash &mdash Ascentis Express 5um熔融核快速液相色谱柱技术及应用 　　 四、活动内容 　　1、主讲人：西格玛-奥德里奇公司分析业务产品专员陈娟 2、主讲内容： 第一部分 快速液相的发展 第二部分 Ascentis Express的熔融核技术原理 第三部分 Ascentis Express 5&mu m熔融核色谱柱产品介绍 第四部分 Ascentis Express 5&mu m熔融核色谱柱的应用 第五部分 Ascentis Express 5&mu m熔融核色谱柱的特点总结 第六部分 答疑 您可直接点击如下链接http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/645 报名参加Sigma-Aldrich 2012年12月20日在仪器信息网的网络讲堂《Ascentis Express 5um熔融核快速液相色谱柱技术及应用》在线听讲并提问。 更多信息可致电021-61415566-8242或者email至connie.chen@sial.com咨询

日期: 2018年3月27日时间: 14:00 – 16:00地点: 网络讲座语言: 简体中文 色谱柱的选择性，是药物分析过程中的重要一环，直接反映的药物质量的真实性。这里将从有药典参考的色谱柱选择及没有药典参考时色谱柱的选择两方面和大家分享。 讲座概要： 1.有药典参考的色谱柱选择 -方法不能重现时，您需考虑哪些关键点？ -项目非常紧迫时，您又需考虑哪些关键点？ 2.无药典参考的色谱柱选择 -了解色谱柱选择性，获得最优的分析结果 -实际案例的分享 主讲人：吴柳柳（沃特世应用工程师） 登录沃特世官网并搜索“药物分析方法开发中的色谱柱的选择”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加，收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前一天通过电子邮件给您发送讲座登录链接。如有任何问题请拨打电话：021-61562642或发送邮件至minxing_guo@waters.com，谢谢。

日期: 2018年2月6日时间: 14:00 – 15:30地点: 网络讲座语言: 简体中文 金鸡报晓去, 瑞犬迎新来！新春佳节即将来临，7天长假，超激动的，有木有！当然，在享受假期前，也不要忘记管理好自己的色谱柱哦！我们将从新柱启用、日常故障排查及使用习惯培养等方面与大家分享我们的心得，希望帮助大家更好的做好色谱柱维护管理工作！ 讲座概要： 新柱启用注意事项色谱柱日常故障排查如何培养良好的色谱柱使用习惯 主讲人：杨凯琳（沃特世应用工程师） 登录沃特世官网并搜索“关机维护，做好色谱柱管家”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加，收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前一天通过电子邮件给您发送讲座登录链接。如有任何问题请拨打电话：021-61562642或发送邮件至minxing_guo@waters.com，谢谢。

工业微生物常用于重要的生物和化学制品的生产，优良菌株的选育是生物产业的核心工作之一。近年来合成生物技术的快速发展使得高性能工业菌株基因型的理性构建性显著增加，但如何从海量候选菌株库中高通量筛选到规模生产用的工业菌株仍面临挑战。多孔板（MTP）筛选系统和流式细胞术（FACS）是研究者常用的筛选手段，但MTP通量较低，而FACS难以用于检测胞外分泌的代谢物。液滴微流控技术在微生物育种领域的应用，成功实现了大容量突变库的全面评价以及高效筛选，不仅在筛选通量方面实现了大幅度提升，有效提高了菌株选育工作效率，而且在筛选成本方面也展现出巨大优势，可显著降低筛选过程中试剂耗材的用量，将单克隆的筛选成本降低至十分之一或百分之一，实现高通量、低消耗的优良工业菌株选育。天木生物基于液滴微流控技术开发了皮升级单细胞分选平台--DREM cell（Droplet entrapping microfluidic cell-sorter）具有体积小、通量高、体系封闭、无交叉污染等特点，越来越成为科学研究和企业生产的重要技术手段。近日，清华大学张翀、安徽工程大学薛正莲研究团队应用DREM cell将液滴微流控技术与基因编码荧光生物传感器相结合，成功实现了高产谷氨酰胺酶突变株的超高通量筛选，相关研究成果以“Combining genetically encoded biosensors with droplet microfluidic system for enhanced glutaminase production by Bacillus amyloliquefaciens”为题，发表在生物化工领域专业期刊《Biochemical Engineering Journal》上。研究团队开发了一种利用谷氨酸拟荧光蛋白传感器 iGluSnFR 的谷氨酰胺酶荧光检测方法，相较于传统的高效液相色谱法，速度提高了700倍。基于iGlusnFR传感器，结合DREM cell单细胞分选平台实现谷氨酰胺酶生产菌株的高通量筛选，单次实验可筛选10万克隆，效率远远超过传统孔板筛选技术。最终项目团队对常压室温等离子体（ARTP）诱变的解淀粉芽孢杆菌全基因组突变文库进行超高通量筛选，成功获得了一株谷氨酰胺酶产量提高47%以上的突变株。该筛选平台，与微孔板筛选系统相比，筛选率提高500倍，试剂用量减少2万倍，并且可以节省大量的多孔板、培养皿、枪头等耗材。▲图丨液滴微流控高通量筛选平台流程图背景信息研究团队所使用的液滴微流控细胞分选仪（DREM cell）是天木生物基于液滴微流控技术开发的皮升级液滴微流控单细胞分选平台，可将待筛选细胞进行包被形成单细胞微液滴，结合荧光筛选模型，可以在细胞水平完成微生物的高通量分离、培养、检测、分选等。▲图丨液滴微流控细胞分选仪（来源：天木生物）高通量皮升级液滴单细胞分选系统（DREM cell）相比于传统筛选方法，筛选效率可提升1万倍，试剂消耗量可下降至百万分之一，在筛选通量显著提升的同时，单克隆筛选成本大幅度降低。该仪器不仅可广泛应用于细菌、酵母、动物细胞等的高通量筛选，还可以应用于蛋白、核酸、抗体等生物大分子筛选等相关研究领域。项目技术参数液滴体积1-1000pL荧光激发与检测可选波段：（1）激发波长488nm，检测波长525±15nm，灵敏度1μM荧光素/单液滴（2）激发波长532nm，检测波长578±11nm，灵敏度100nM试卤灵/单液滴液滴生产频率0-10000个/s液滴分选频率0-1000个/s微注入速度0-1000个/s样品低温控制系统4℃恒温控制，±0.5℃工作环境常压状态下，室温，30%≤湿度≤80%，洁净暗室整机功率600W应用范围细胞、酵母、细菌、蛋白、核酸等

日期: 2018年3月6日时间: 14:00 – 16:00地点: 网络讲座语言: 简体中文 爆竹声中一岁除，春风送暖入屠苏！ 在欢声笑语中度过新春长假后，大家是否已经准备好精神抖擞地投入工作了呢？ 新的一年开始了，可别忘了那些与你并肩作战的"好战友"！ 如何规范操作让你的精密仪器顺利运行？手中的色谱柱你都了解吗？遇到仪器或色谱柱问题我们该如何进行排查？如何用好它们让项目顺利进行？ 本次讲座我们将与大家分享仪器及色谱柱的正确打开方式、常见问题如何处理等知识，希望帮助大家更好更顺利地开展工作！ 讲座概要：1.仪器篇：开机启用及全年使用维护纪律2.色谱柱篇：柱使用管理与常见故障排查 主讲人：周莉（沃特世资深培训专家）；杨凯琳（沃特世应用工程师）登录沃特世官网并搜索“仪器&色谱柱之全年使用好习惯”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加，收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前一天通过电子邮件给您发送讲座登录链接。如有任何问题请拨打电话：021-61562642或发送邮件至minxing_guo@waters.com，谢谢。

仪器信息网讯 2011年10月12-15日，第十四届北京分析测试学术报告会及展览会(BCEIA 2011)在北京展览馆隆重举行。为让广大网友及仪器用户深入了解BCEIA 2011仪器新品动态，仪器信息网特别开展了以“盘点行业新品 聚焦最新技术”为主题大型视频采访活动，力争将科学仪器行业最新创新产品、最新技术进展及最具有代表性应用解决方案直观地呈现给业内人士。以下是仪器信息网编辑采访赛默飞实验室设备与耗材新产品的视频。 　　赛默飞世尔科技是科学服务领域的世界领导者，致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。公司年销售额接近110亿美元，拥有员工约37000人。赛默飞世尔科技进入中国发展已有30余年，目前在华员工人数已经超过1900名。 　　在采访中，赛默飞色谱耗材产品应用专家洪浩博士、移液产品支持专家叶健先生、温度控制产品高级渠道销售经理冯铮先生、纯水/蠕动泵产品专员刘云龙先生向我们介绍了赛默飞实验室设备与耗材新产品的情况。 　　洪浩博士为我们展示了该公司于2011年6月推出的一款色谱柱新品——Accucore HPLC色谱柱。“我们应用全新的‘表面多孔增强核技术’研发出创新的Accucore HPLC色谱柱。该技术的四大重要特点：一、2.6µ m颗粒包含实心核和表面多孔层，在常规反压下实现高速高效的分析；二、改进的颗粒筛选流程使粒径分布范围最小，从而提到柱效；三、先进的自动装填过程确保所有色谱柱都有最高的装填质量和优异的批次重现性；四、提供6种键合相，满足不同的选择性需求。优化的固定相键合技术使固定相更加致密和耐用。尤其值得一提的是，如果采用Accucore这款产品，可在高效液相色谱上达到超高压液相色谱的效果。让顾客花更少的钱，做更多的事情。” 　　欲了解更多关于赛默飞参展BCEIA2011的详细信息，请点击：www.thermo.com.cn/BCEIA2011

随着社会发展和科学技术的不断进步，色谱技术已广泛应用于食品、药品、生物样品及环境等方面的检测。这些实验室大多都要遵循数据完整性原则，色谱柱作为分离系统的核心，直接影响到检测结果的真实性和有效性。因此建立一套合理的色谱柱管理系统，随时监测色谱柱的使用状态，并对色谱柱的分析结果进行检查和追踪，是完善数据完整性的关键措施。 多数实验室目前仍在使用人工记录的方式来进行色谱柱管理，这种方式缺乏审计追踪及防篡改等基本措施，很容易导致转录错误、记录不全或缺失的情况发生。在审核相关信息时，还需要在不同的记录之间进行切换，无法提高工作效率和实验室的管理水平。 未来无论从法规要求还是提高实验室管理效率的角度出发，电子化管理色谱柱都将成为趋势。在此背景之下，岛津的网络版色谱工作站LabSolutions CS已经配备了色谱柱管理功能，下面就带大家来了解岛津的色谱柱管理功能。 功能一、色谱柱台账LabSolutions CS内置的色谱柱管理，可以登记及编辑色谱柱信息（名称、色谱柱 ID、内径和长度等与色谱柱规格相关的内容），为防止篡改还可以禁止对色谱柱信息进行更改。 功能二、色谱柱使用信息追溯每根登记过的色谱柱（不限定品牌及型号）的进样总次数、最后分析日期、最后分析者等色谱柱相关信息均可在色谱柱列表中直接查看。 每根色谱柱的分析历史中，每次的分析时间、样品名称、仪器编号、项目名称、分析者、方法文件名、数据文件名、批处理文件名、数据文件名等相关信息全部自动记录。同时也支持把这些历史记录打印成纸质或者PDF报告，存档保存。 功能三、色谱柱性能确认除了对色谱柱使用进行使用信息追溯，还可定期进行色谱柱确认，并对确认结果进行保存。通过色谱柱数据浏览器模块可以有效协助用户进行定期确认，将定期确认时的相关性能参数（例如分离度、理论塔板数等）以列表方式进行筛选，并用可视化的方式呈现这些参数的变化趋势，有助于更好的分析色谱柱使用行为对色谱柱寿命的影响，从而延长色谱柱寿命，以及合理规划色谱柱库存。 功能四、色谱柱审计追踪激活色谱柱管理的审查追踪功能后，可以通过显示审查追踪日志来确认色谱柱信息以及与仪器连接设置的更改记录，全面应对数据可靠性的要求，满足越来越严格的法规要求。化繁为简、高效合规，你想要的色谱柱管理功能这里都有。什么？还没有启用？这可是LabSolutions CS网络版工作站内置的标准功能呦，小伙伴们赶快开启色谱柱管理功能来体验小岛给大家带来的福利吧。 本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。

近日，中国科学院深圳先进技术研究院司同课题组联合中国医学科学院杨兆勇课题组，在国际学术期刊 Chemical Science 在线发表了题为：Directed evolution of a cyclodipeptide synthase with new activities via label-free mass spectrometric screening 的研究论文。该研究依托深圳合成生物研究重大科技基础设施（简称为“合成生物大设施”），开发了无标记质谱筛选技术，应用于环二肽合酶的定向进化改造，快速得到了 F186L 突变体催化合成野生型天然酶无法产生的新二酮哌嗪分子。定向进化是酶工程的重要方法，需要开展反复多轮的突变文库构建和筛选。现有面向酶定向进化的高通量筛选方法，通常利用偶联反应、生物传感器等手段，将底物或产物浓度信息转化成光学、电化学等信号。开发筛选方法的过程不但费事费力，且通常需要使用衍生化、特殊标记底物等方法，不利于发现新的催化活性。另一方面，质谱分析基于离子的质荷比（m/z）对反应物进行定性与定量测定，具有更好的普适性。更为重要的是，基于无标记（label-free）原理，可以通过非靶向质谱方法识别新的酶促产物，从而发现对应的新催化活性。但质谱筛选的这一能力在酶定向进化中的应用还非常有限，主要限制因素是检测样品进入质谱仪之前通常需要经过耗时的样品制备和色谱分离步骤，限制了质谱筛选的通量该研究依托深圳合成生物大设施的机器人平台，针对酶突变文库构建和筛选过程中的不同环节，如分子克隆、微生物培养、产物乙酸乙酯萃取、MALDI-TOF 质谱分析、数据处理等，开发了对应的自动化流程和方法，实现了微生物发酵产物的无标记质谱筛选，通量为每样品5秒钟（图1）。图1：高通量、无标记质谱筛选用于酶新催化活性的定向进化研究文章以环二肽合酶（cyclodipeptide synthases, CDPSs）为研究对象，验证无标记质谱筛选在酶定向进化中的应用。环二肽合酶利用氨酰-tRNA底物可以合成二酮哌嗪（diketopiperazines, DKPs）骨架；含有这类骨架的天然产物可以通过肠屏障、血脑屏障，是重要的药物先导化合物。然而，基于蛋白质工程改造环二肽合酶的成功案例非常有限，部分原因在于缺乏高通量的产物分析方法，相关研究仅限于少数理性设计突变。研究团队以链霉菌（Streptomyces noursei）来源的 AlbC 作为研究模型，使用大肠杆菌底盘进行文库构建与筛选。重组表达野生型 AlbC 的大肠杆菌的主要环二肽产物为 cFL。作者首先利用半理性设计，选取底物结合口袋附近的10个位点及口袋外与 tRNA 密切作用的4个位点，构建和筛选了定点饱和突变（site-saturation mutagenesis，SSM），快速发现了多个产物谱发生明显变化的突变体。其中，有文献报道的8个突变体数据与本文实验结果相符，验证了方法的可行性与准确性；在此基础上，结合新的质谱筛选方法，本文首次对选取的14个位点的266个可能突变体中的238个进行了系统性表征，大大拓展了环二肽酶关键位点的突变效应数据。遗憾的是，从半理性设计文库中并未发现可以合成新产物的 AlbC 突变体。研究团队进一步利用易错 PCR 技术构建了 AlbC 随机突变文库，对4500个随机挑选的克隆开展无标记质谱分析，最终筛选得到3个突变体。与野生型相比，这3个突变体质谱谱图中出现了新的质荷比为247的离子峰，经高分辨质谱和二级质谱分析，新的产物鉴定为cFV，在表达野生型AlbC的菌株中未被检测到。并且，这3个突变体经 DNA 测序分析发现均只含有F186L单一突变（图2）。文章最后，作者利用分子动力模拟技术，对 F186L 突变效应的分子机制进行了推测。图2：无标记质谱方法筛选得到AlbC突变体生产新的环二肽产物cFV总的来说，该研究依托深圳合成生物大设施的机器人平台，开发了面向酶定向进化的无标记质谱筛选技术，在新催化活性发现这一工程目标方面进行了概念性验证。未来发展方向包括进一步提高筛选通量、扩大适用分子范围、对接不同类型质谱仪等。论文链接：https://doi.org/10.1039/D2SC01637K

近日，中国科学院深圳先进技术研究院司同课题组联合中国医学科学院杨兆勇课题组，在国际学术期刊 Chemical Science 在线发表了题为：Directed evolution of a cyclodipeptide synthase with new activities via label-free mass spectrometric screening 的研究论文。该研究依托深圳合成生物研究重大科技基础设施（简称为“合成生物大设施”），开发了无标记质谱筛选技术，应用于环二肽合酶的定向进化改造，快速得到了 F186L 突变体催化合成野生型天然酶无法产生的新二酮哌嗪分子。定向进化是酶工程的重要方法，需要开展反复多轮的突变文库构建和筛选。现有面向酶定向进化的高通量筛选方法，通常利用偶联反应、生物传感器等手段，将底物或产物浓度信息转化成光学、电化学等信号。开发筛选方法的过程不但费事费力，且通常需要使用衍生化、特殊标记底物等方法，不利于发现新的催化活性。另一方面，质谱分析基于离子的质荷比（m/z）对反应物进行定性与定量测定，具有更好的普适性。更为重要的是，基于无标记（label-free）原理，可以通过非靶向质谱方法识别新的酶促产物，从而发现对应的新催化活性。但质谱筛选的这一能力在酶定向进化中的应用还非常有限，主要限制因素是检测样品进入质谱仪之前通常需要经过耗时的样品制备和色谱分离步骤，限制了质谱筛选的通量。该研究依托深圳合成生物大设施的机器人平台，针对酶突变文库构建和筛选过程中的不同环节，如分子克隆、微生物培养、产物乙酸乙酯萃取、MALDI-TOF 质谱分析、数据处理等，开发了对应的自动化流程和方法，实现了微生物发酵产物的无标记质谱筛选，通量为每样品5秒钟（图1）。图1：高通量、无标记质谱筛选用于酶新催化活性的定向进化研究文章以环二肽合酶（cyclodipeptide synthases, CDPSs）为研究对象，验证无标记质谱筛选在酶定向进化中的应用。环二肽合酶利用氨酰-tRNA底物可以合成二酮哌嗪（diketopiperazines, DKPs）骨架；含有这类骨架的天然产物可以通过肠屏障、血脑屏障，是重要的药物先导化合物。然而，基于蛋白质工程改造环二肽合酶的成功案例非常有限，部分原因在于缺乏高通量的产物分析方法，相关研究仅限于少数理性设计突变。研究团队以链霉菌（Streptomyces noursei）来源的 AlbC 作为研究模型，使用大肠杆菌底盘进行文库构建与筛选。重组表达野生型 AlbC 的大肠杆菌的主要环二肽产物为 cFL。作者首先利用半理性设计，选取底物结合口袋附近的10个位点及口袋外与 tRNA 密切作用的4个位点，构建和筛选了定点饱和突变（site-saturation mutagenesis，SSM），快速发现了多个产物谱发生明显变化的突变体。其中，有文献报道的8个突变体数据与本文实验结果相符，验证了方法的可行性与准确性；在此基础上，结合新的质谱筛选方法，本文首次对选取的14个位点的266个可能突变体中的238个进行了系统性表征，大大拓展了环二肽酶关键位点的突变效应数据。遗憾的是，从半理性设计文库中并未发现可以合成新产物的 AlbC 突变体。研究团队进一步利用易错 PCR 技术构建了 AlbC 随机突变文库，对4500个随机挑选的克隆开展无标记质谱分析，最终筛选得到3个突变体。与野生型相比，这3个突变体质谱谱图中出现了新的质荷比为247的离子峰，经高分辨质谱和二级质谱分析，新的产物鉴定为cFV，在表达野生型AlbC的菌株中未被检测到。并且，这3个突变体经 DNA 测序分析发现均只含有F186L单一突变（图2）。文章最后，作者利用分子动力模拟技术，对 F186L 突变效应的分子机制进行了推测。图2：无标记质谱方法筛选得到AlbC突变体生产新的环二肽产物cFV总的来说，该研究依托深圳合成生物大设施的机器人平台，开发了面向酶定向进化的无标记质谱筛选技术，在新催化活性发现这一工程目标方面进行了概念性验证。未来发展方向包括进一步提高筛选通量、扩大适用分子范围、对接不同类型质谱仪等。

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日期: 2017年8月24日时间: 14:00 – 16:00地点: 网络讲座语言: 简体中文 本次网络讲座专为沃特世UPLC与Arc仪器客户以及Waters小颗粒色谱柱客户所开，帮助勤奋好学的制药分析用户了解： 1.如何更好的使用与管理小颗粒色谱柱，提高实验室工作效率，并减少不合格数据2.如何正确使用并定期检查和维护Acquity UPLC与Arc系统，从而确保系统的良好状态 讲座概要：1.色谱柱篇：如何更好的使用与维护小颗粒色谱柱2.UPLC/UHPLC仪器篇：启用、操作及故障排查 适合参加人群： 实验室技术管理者仪器/色谱柱耗材管理人员Acquity UPLC与Arc使用者Waters小颗粒色谱柱使用者希望提前了解并储备知识的任何人员 主讲人： 余琴 （沃特世LC school资深应用工程师）；吴柳柳（沃特世应用工程师） 登录沃特世官网并搜索“沃特世UPLC/Arc仪器及小颗粒色谱柱的使用维护”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加，如果您需要在讲座中加入讨论或语音提问，请您提前准备好麦克风。收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前一天通过电子邮件给您发送讲座登录链接。如有任何问题请拨打电话：021-61562642或发送邮件至minxing_guo@waters.com，谢谢。

日期: 2017年10月31日时间: 14:00 – 16:00地点: 网络讲座语言: 简体中文 今年我们根据2015版中国药典化药品种系统适应性要求做了超过100个品种的HPLC、UHPLC和UPLC分析谱图。我们发现： 有些品种，使用高盐浓度、较高柱温、添加三乙胺扫尾、甚至中-高pH的流动相条件，这对常用硅胶色谱柱寿命有较大考验；有些品种，API或者特定杂质极性较高、保留弱；有些品种，是大家都比较关注的一致性评价项目，临床用量大，企业需要提高检测通量； 如何根据项目需要、根据色谱柱填料性质，有目的的选择色谱柱？在当前的实验室中，应该如何更好、更合理的使用与管理色谱柱？ 另外，在目前的法规环境下，我们该如何更高效的使用Empower的数据处理功能？比如系统适用性的深度应用及稳定性试验中的含量检测等一系列数据管理的小技巧！我们将与大家分享我们的心得，希望帮助大家更好、更高效的开展药品检测工作。色谱柱篇：在药典规范下，如何可靠高效的使用色谱柱？ 讲座概要： 色谱柱篇：在药典规范下，如何可靠高效的使用色谱柱？软件篇：在法规环境下，如何更高效的使用Empower处理数据？ 主讲人：张玉书（沃特世软件应用高级工程师）；杨凯琳（沃特世应用工程师） 登录沃特世官网并搜索“在药典规范下，如何选择色谱柱及利用Empower处理数据”即可进行注册报名。 此网络讲座免费报名参加。您只需要使用一台链接网络的电脑即可参加，如果您需要在讲座中加入讨论或语音提问，请您提前准备好麦克风。收到您的注册信息后我们会筛选并在讲座前一天通过电子邮件给您发送讲座登录链接。如有任何问题请拨打电话：021-61562642或发送邮件至minxing_guo@waters.com，谢谢。

2019年3月17日至3月21日，全球科学仪器行业内历史悠久、享誉盛名的Pittcon展会(匹兹堡分析化学和光谱应用会议暨展览会)在美国费城宾夕法尼亚会议中心盛大召开。 在第三届Pittcon Today卓越奖名单中，东曹公司的高效液相亲和色谱柱TSKgel FcR-ⅢA-NPR获得了银奖。该色谱柱是专为快速测定单克隆抗体的ADCC活性而开发。 Pittcon Today奖项的设置旨在识别今年展会上的创新，并为参展商提供一个新的渠道以展示他们的研究进展和技术进步。本次奖项由来自学术、工业和贸易媒体组成的评委团评选，主要考察产品的独创性、创造力、实用和结果，以及该产品在行业和广泛公众中的影响力。奖项根据各公司申报的销售额分为三个类别，分别评选出了金奖、银奖和铜奖。 东曹生命科学美国分公司的产品经理Cara Tomasek表示：“我们非常高兴Pittcon Today奖项的评委团能够认同TSKgel FcR-ⅢA-NPR的创新性，并授予我们这个十分荣耀的奖项。随着生物制药行业的发展，越来越多的研究人员在寻求一种可以在短时间内快速分离并且测定单克隆抗体的ADCC生物活性的方法。TSKgel FcR-ⅢA-NPR色谱柱正好满足了这一需求，不仅可以应用在研发前期的细胞株筛选、抗体发酵工艺条件优化，也可应用在过程监控分析和最终产品批次的质量控制中。”银奖：TSKgel FcR-ⅢA-NPR高效液相亲和色谱柱（Tosoh Bioscience LLC）

为全面掌握我国土壤资源情况，国务院决定自2022年起开展第三次全国土壤普查。第三次全国土壤普查是在中国特色社会主义进入新发展阶段开展的一项重要的国情国力调查，普查成果将为守住耕地红线、优化农业生产布局、确保国家食物安全等奠定坚实基础，也将为提升国家治理体系和治理能力现代化提供数据支撑。各省市根据《国务院关于开展第三次全国土壤普查的通知》要求，按照“一年试点、两年铺开、一年收尾”的时间安排进度陆续开展土壤普查试点工作。根据《第三次全国土壤普查工作方案》确定的全国统一筛选测试化验专业机构的技术路线，国务院第三次全国土壤普查领导小组办公室组织开展了土壤普查实验室筛选工作，并于4月公布了第一批土壤三普检测实验室，共计126家。目前，土壤普查试点工作正在如火如荼开展，据不完全统计，福建、海南、广西、四川已陆续启动土壤三普第二批检测实验室筛选工作，具体事项如下：点击查看：附件1：关于开展全国第三次土壤普查实验室筛选工作的通知附件2：第三次全国土壤普查第一批检测实验室名单公示 126家单位入选

2018年4月17日，第十二届全国生物医药色谱及相关技术交流会在贵阳召开。该学术会议两年一届，为广大生物医药色谱行业内人士提供了交流、学习和展示的平台。此次会议为期两天，吸引了来自生物医药色谱领域的近500位专家学者、企业代表参加，就生命科学、生物技术、医药、食品及环境等相关领域中的色谱理论与技术应用进行广泛研讨。 东曹作为银牌赞助商，在会议中展台展示了生物制药分离与纯化领域的最新解决方案，东曹技术中心应用开发部的张琳博士还发表了《TSKgel 色谱柱在抗体药物分析与表征中的最新应用》技术报告。在报告中张博士通过具体实例数据，介绍了最新的高分辨率UHPLC色谱柱TSKgel UP-SW3000在抗体多聚体、片段高通量分析上的优异性能，且在SEC/MS连用中可用于抗体精确质量数的测定。 此外，张博士还举例了其他分离模式的色谱柱在抗体药物分析中的应用。例如，阳离子交换色谱柱TSKgel CM-STAT、TSKgel SP-STAT可以对抗体电荷异构体进行高分辨率分析；疏水作用色谱色谱柱TSKgel Butyl-NPR具有杰出的分辨率和的回收率，在ADC药物分析中，可进行药物抗体结合比率（DAR）的测定；亲水作用色谱柱TSKgel Amide-80可以对抗体聚糖进行高分辨率分析，配合HILIC/MS连用，可用于抗体聚糖谱的表征；亲和色谱柱TSKgel Protein A-5PW可用于细胞培养上清中抗体滴度的高通量、宽线性范围定量分析，TSKgel FcR-IIIA-NPR可用于抗体的抗体依赖细胞介导细胞毒性作用（ADCC）活性表征与细胞系筛选。 东曹公司还连续五年独家赞助大会的“优秀青年论文奖”奖项，今年也不例外。在18号下午的大会闭幕式上，组委会公布了“青年论坛优秀奖”、“青年论坛鼓励奖”以及“优秀墙报奖”获奖名单。东曹（上海）生物科技有限公司的总经理二木研辅先生为24位获奖青年学者进行了颁奖并致辞，二木先生表示：“东曹希望通过赞助大会论文奖以支持生物医药色谱领域的青年学者的科研工作，为整个行业创造更大的价值。”东曹展台张琳博士做《TSKgel 色谱柱在抗体药物分析与表征中的最新应用》技术报告东曹奖颁奖仪式东曹（上海）生物科技有限公司总经理二木先生颁奖并致辞

p style=" text-align: center " 　　 strong 液相色谱柱进展及其在药品标准中的应用(三) /strong /p p style=" text-align: right " strong 　　——液相色谱柱在药典标准中的应用情况分析 /strong /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 3　液相色谱柱在药典标准中的应用情况分析 /span /strong /p p 　　新颁布的2015 年版《中国药典》自2015 年12月1 日起正式实施。新版药典的最大变化是将原来各部的附录整合成了第四部，形成通则并对通则制定了更为合理的编码，液相色谱法列于2015 年版《中国药典》(四部)中通则0512 中。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 3.1　《中国药典》中使用的各类色谱柱 /span /strong /p p 　　液相色谱方法在新版《中国药典》中得到了更广泛的应用，使用方法也更加合理。以二部化药为例，在修订的415 个品种中，有的新增了液相色谱检测方法，如本芴醇在有关物质检查项下，采用液相色谱法取代原来的薄层色谱法，规定杂质Ⅰ与主成分的分离度，以及杂质峰面积等要求，并列出了杂质Ⅰ的结构信息，这不仅使杂质的信息更加明确，而且对杂质限量的控制更加准确 有的对流动相进行了修订，如叶酸的含量检测中，通过添加离子对试剂―四丁基氢氧化铵，增加了叶酸的保留，流动相中甲醇的比例也从原来的每升80 mL 增加到270 mL，这样有利于防止色谱柱C18 键合相在高水相比例下产生疏水塌陷。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/01c4db8b-eba9-4447-9396-504936620f73.jpg" style=" " title=" 表1_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 表1　2015 年版和2010 年版中国药典一部中液相色谱柱的使用情况 /span /strong /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/77e42643-539c-48fa-a129-075f52643f0f.jpg" style=" " title=" 表2_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 表2　2015 年版和2010 年版《中国药典》二部中色谱柱的使用情况 /span /strong /p p 　　但是，与液相色谱柱和填料种类的快速发展相比，在中国药品标准中，包括在《中国药典》中，高效液相色谱柱的应用显得较为单调，缺乏活力。表1、表2 分别列出2015 年版和2010 年版《中国药典》一部和二部使用液相色谱柱的情况。由表2 可以看出，在各类药品分析中，绝大部分方法采用的是反相液相色谱法，色谱柱则是以C18 柱为主 与2010 年版相比，2015 年版《中国药典》中C8 柱的使用数量翻了1 倍 而其他各种类的液相色谱柱使用比例则较少。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 3.2　各国药典对液相色谱柱规定 /span /strong /p p 　　 strong 3.2.1　关于色谱柱类型描述的差异 /strong /p p 　　美国药典对色谱柱分类则较为详细，收载的各类液相色谱固定相(柱)类型已经超过80 种，除C18 柱、C8 柱、氰基柱、氨基柱、苯基柱外，还有C6 柱、C4 柱、C1 柱、五氟苯基(PFP)柱等。根据是否化学改性，是否封端，是否增加多官能基团以及是核壳结构还是多孔型结构等不同，以C18 为基质的色谱柱分类为L1、L2、L42 和L67等，以C8 为基质的色谱柱分别有L7、L28、L42 和L44 等。L1 柱对应于目前使用的各种C18 分析柱，L2柱常作为保护柱使用。由此可知，美国药典提供的可选择的色谱柱比较丰富。 /p p 　　不过，尽管各厂家或品牌C18 在分离效果上存在一定差异，美国药典却没有对各种商品化C18 再进一步细分。 /p p 　　在英国药典中，当用到特定色谱柱时，色谱柱信息描述会具体到色谱键合相类型、尺寸、键合相官能团描述、是否封端、是否通过碱性脱活处理等。团描述、是否封端、是否通过碱性脱活处理等。 /p p 　　和欧美药典相比，《中国药典》对液相色谱法的色谱柱描述过于简单粗放，色谱柱的种类明显偏少。方法中仅描述色谱柱填料种类的主要大类：如十八烷基硅烷键合硅胶(C18 柱)、辛烷基硅烷键合硅胶(C8柱)，氰基硅烷键合硅胶(氰基柱)、氨基硅烷键合硅胶(氨基柱)，苯基硅烷键合硅胶(苯基柱)等。使用者无法根据不同性质的化合物选择适合分离的色谱柱。 /p p 　　为解决这一矛盾，满足某些特殊分析目的，或为了简化色谱柱选择的过程，新版药典在某些品种的标准正文中对色谱柱给出了具体描述及品牌的信息。 /p p 　　如在新颁布的2015 年版《中国药典》新增品种拉米夫定及片剂中，含量测定及有关物质测定项对所使用的色谱柱描述为“用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Zorbax XDB-C18，4.6 mm× 250 mm，5 μm 或效能相当的色谱柱)”。检测人员可直接选择对应色谱柱进行检测，避免进行盲目的大量色谱柱筛选工作。但详细列明色谱柱信息描述似乎从一个极端走到了另一个极端，从完全的粗放转到特定的选择。在一定程度上，这种具体至色谱柱厂家或品牌仍不是很客观的方法。因为某种色谱柱并不一定仅有1 家公司生产或提供，除非经过同类型不同厂家多根色谱柱的充分研究和实验对比，才能规定具体的色谱柱品牌，否则就意味着可能放弃了使用分离更好的色谱柱。 /p p 　　表3列举了中国药典与英美药典中几个色谱柱使用实例，以便比较各药典对色谱柱分类及应用情况。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/b9c5dbd6-b7db-4675-8dc1-e4583a4f4ce2.jpg" title=" 表3_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 表3　中国药典与欧美药典中几个色谱柱使用实例的比较 /span /strong /p p 　　由表3可以看出，美国药典列出了色谱柱的尺寸、填料类型编号 而英国药典不仅列出了色谱柱的尺寸和颗粒粒径，还对固定相进行了详细的描述，如封端的十八烷基键合硅胶，适合高比例水为流动相的烷基键合硅胶，碱去活封端十八烷基硅烷硅胶，二异丙基氰基柱等。 /p p 　　另外，以埃索美拉唑(esomeprazole)缓释胶囊为例，表4 列出在美国药典(USP 35-NF 30)官方网站中可以查询到分析用到的色谱柱信息。 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/4620d675-45bb-4f17-8713-e21264ea69f6.jpg" title=" 表4_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong 表4　美国药典中埃索美拉唑使用的色谱柱信息 /strong /p p 　　从表4 可见，美国药典对方法中用到的色谱柱进行了归类和详细描述，也列出了替代的色谱柱。对于分析人员来说，提供了色谱柱选择方面的便利性。总之，在中国药典中，无论是色谱柱填料种类，还是色谱柱填料粒径和孔径等方面的描述，均显得较为简单、粗放，科学性和严谨度均有待提高。 br/ /p p 　　 strong 3.2.2　关于使用不同色谱柱时的方法转化 /strong /p p 　　为满足系统适用性的要求，当选择1 根合适的色谱柱时，其尺寸应在一定要求的范围内。根据待分离分析药品的特性和实际分析需要，当使用的色谱柱填料尺寸规格发生变化时，各国药典对色谱柱柱径和填料粒径分别有相应的限定。美国药典(& lt 621& gt CHROMATOGRAPHY)在色谱适应性要求中对色谱柱长度、粒径、内径等变化范围作了限定。在USP 36及以前的版本中，无论是等度还是梯度条件，色谱柱的粒径可以减小50%，不能增大 柱长有70% 的变化选择余地，流速也可有50% 的变化范围，色谱柱的内径以及进样量可根据情况调整。不过，从USP 37 起，在等度条件下，色谱柱尺寸发生变化的范围采用柱长与粒径的比值(L/dp)或柱效N 来进行限定，要求L/dp 保持恒定，或者N 的值介于-25%~+50% 之间。在梯度条件下，则色谱柱尺寸不宜发生变化，否则需要做方法的验证，见表5。 !--621-- /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201709/insimg/51f50c94-cd62-4ae5-a52a-d6da0390e989.jpg" title=" 表5_副本.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 表5　美国药典对色谱柱尺寸及条件变化的限定 /span /strong /p p 　　中国药典虽然对色谱柱柱径和填料粒径也有相应规定，但是仅仅区分亚2 微米柱和常规柱(中国药典现在实际上使用的几乎都是常规柱)。某些特殊分析中，如复杂组分、指纹图谱和有关物质的分离，常对色谱柱有更苛刻的要求，即使明确了色谱柱填料具体种类，常规柱的柱内径和填料粒径范围定义太宽，会由于色谱柱的内径和填料粒径的差异，无法实现理想的分离和重现性的效果。 /p p 　　按照仪器公司商业化的概念，采用亚2 微米色谱柱的方法为超高效液相色谱法，采用常规柱的方法为高效液相色谱法。但是，简单地根据粒径的不同将色谱填料分为亚2 微米填料与常规柱填料(3~10 μm)并不是一种科学的分类法，至少未能涵盖粒径为2~3 μm 的色谱填料柱。以美国药典要求的色谱柱粒径变化要求，当选择粒径2.7 μm 的色谱住替代5 μm的色谱柱时，其变化的范围是允许的，只要保持L/dp或N 值在-25%~+50% 范围内。实际上，填料粒径对色谱分离的影响是一个量变过程，粒径在限制性范围内改变不会引起分离机理的改变。但是，量变到一定程度必然引起质变，质变是量变的必然结果，当粒径降低到一定程度时，高效液相色谱仪到超高效液相色谱仪的质变归因于填料粒径大小降低到一定程度引起的压力突变，进而可导致分离机理的改变和各成分峰的保留时间变化。因此，使用常规柱填料或亚2 微米填料的色谱方法转化时，方法验证是必要的，但是，中国药典还没有明确规定应如何验证以及选择何参数进行验证。 /p p 　　尽管中国药典2015 年版没有将超高效液相色谱法作为一个新方法单独收载，并不是否认此技术革新，而是在高效液相色谱法中作了系统的、科学的、实事求是的描述。这样既解决了概念上混乱的问题，也是对这一技术革新在药物分析，特别是在标准中应用的一种认同，对这一技术在药物分析、药品检验中的广泛应用将起着一定的积极推动、引导作用。毫无疑问，亚2 微米填料以及表面多孔型填料技术将是高效液相色谱发展的一个重要方向。 /p p 　　 strong 3.2.3　对药典或药品标准中使用和描述色谱柱的建议 /strong /p p 　　由于商品化的色谱柱填料种类、粒径尺寸、颗粒类型或选择性差异等非常丰富，为了避免方法描述中的不确定性，建议对中国药品标准中包括中国药典使用的色谱柱种类进行归纳总结，国家药典委员会适时对各种可在药品中获得应用的色谱柱进行科学的归类划分，建立相应的色谱柱列表，以便药品标准工作者或检验人员参照使用 各色谱柱生产商或供应经销商应对归类划分工作积极密切配合，提供必要、准确、科学、可靠的相关信息和全面的技术支持。同时，为建立方法提供了更多的选择，应鼓励在建立分析方法时，药物分析工作者应大胆尝试使用各种有利于提高选择性的色谱柱，不要仅限于常规C18 柱等。 /p p 　　从欧美药典对固定相描述或提供的信息来看，细化色谱柱的分类能给色谱分离分析带来积极影响：一方面，由于可从一大类填料中选择到最适合的色谱柱用于分析，从而可获得最佳的分离效果 另一方面，在复杂体系分离时，如中药成分分析或化学药有关物质测定中，如在药品标准中明确规定了色谱填料性质参数的描述信息，有利于克服复杂基质的干扰，提高方法的可靠性，或提高色谱柱的选择性。 /p p 　　在建立相关药品标准时，应适当增加色谱柱尺寸如长度、内径、粒径等的描述 必要时，在充分比对验证的前提下，是否对使用何种色谱柱品牌予以具体规定也是可以探讨的。 /p p 　　为了提高色谱柱的使用寿命，当进行一些具有复杂基质或辅料的原料药或制剂分析时，建议尽可能地使用保护柱，并在方法中说明。在许多品种分离分析中，美国药典都采用了预柱，这对保护色谱柱不受污染，提高色谱柱寿命是极为有利的。 /p p 　　建议中国药典适时在相关的通则中增加对方法转化的描述，提出方法转化的要求，这样有利于分析人员在方法转化时有据可依。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(112, 48, 160) " 4　结语 /span /strong /p p 　　液相色谱柱技术的发展趋势是高效快速分离，亚2 微米填料色谱柱及亚3 μm 的表面多孔型填料在近年来得到了飞速的发展和应用，各种选择性的色谱固定相和多种分离模式解决了许多分离难题。色谱柱填料类型和种类繁多，在制定药典或相关药品标准时，有必要细化色谱柱的分类，从而有利于更科学、更高效地选择和利用恰当的分离技术实现药物中复杂组分的可靠分析。 /p p 　　 span style=" font-family: 微软雅黑, " microsoft=" " strong 注：近年来，液相色谱柱技术发展的非常迅速，这同时也促进了高效液相色谱法在药物分析中更为广泛的应用。据统计，一个典型的制药企业甚至可能会拥有成百上千支液相色谱柱，在一种药物分析方法的开发过程中，如何选择适当的色谱柱往往会给实验人员带来很多困扰。 /strong /span /p p span style=" font-family: 微软雅黑, " microsoft=" " strong 　　本文献原文刊登于《药物分析杂志》2017年37卷第2期，作者为洪小栩、石莹、宋雪洁等八人，分别来自国家药典委员会、扬子江药业、安捷伦科技和江苏省食品药品监督检验研究院等单位。本文为该文献的最后部分，详细介绍了世界主流药典及中国药典中液相色谱柱的使用情况，为广大色谱柱用户以及色谱柱供应商提供了相关参考。 /strong /span /p p br/ /p

仪器信息网讯 色谱柱技术始于上世纪50年代，随着填料和填充技术的发展，色谱柱技术日益成熟，功能也日趋完善，目前已被广泛应用于生命科学、环保、材料、食品、药物开发等领域。近几年，我国色谱行业发展迅速，色谱柱也迎来高速发展时代。尽管2020年新冠疫情肆虐，很多仪器厂商受到牵连，但色谱柱市场似乎并未受太大影响，各主流品牌竞争依旧激烈，瑞思泰康、岛津（上海）实验器材有限公司（SGLC）、纳谱、安捷伦、沃特世、月旭科技等厂家相继推出色谱柱新品与新技术。接下来，仪器信息网就将为大家介绍一下2020年上市的色谱柱新品，我们一起来了解下这些色谱柱都有哪些亮点？在此特别需要说明的是，由于篇幅有限，本次盘点不包括SPE柱，且本次盘点为不完全统计，如有遗漏，欢迎补充。（该排名不分先后）瑞思泰康：Raptor Polar X色谱柱2020年，瑞思泰康特别推出了新一代色谱柱——Raptor Polar X色谱柱，该款柱子的固定相可以通过两个保留机制之间的平衡，选择性地保留极性分析物。用户在进行实验分析的时候，只需要简单的改变流动相条件，就可以在两种保留模式间进行切换，从而保留各种极性化合物。SGLC：SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱+SK系列高性价比气相色谱柱+ShimCap系列石化常用色谱柱2020年，岛津（上海）实验器材有限公司围绕着高柱效、高分离度和高性价比推出了三款新产品——SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱、SK系列高性价比气相色谱柱和ShimCap系列石化常用色谱柱。SHIMSEN Ankylo通用型液相色谱柱SHIMSEN Ankylo系列通过优化的表面键合密度、更均一的填料粒径大小，在保证高分离度的前提下，使得化合物的洗脱更快，分析效率更高；该系列色谱柱具有10种不同固定相、两种孔径的选择，具有高分离度、高惰性、高柱效、耐污染等特点，并能在较宽pH范围、较高比例水相流动相条件下稳定使用，可广泛应用于食品、药品、环境等多个领域的分析检测项目。SK系列气相色谱柱SK（Shimadzu Krypton）系列气相色谱柱包含了日常分析常用及通用型色谱柱，例如5MS、624、Wax、FFAP等固定相的常用型号，可为客户提供高性能、高品质、高性价比的气相色谱柱。ShimCap系列石化常用色谱柱ShimCap系列气相色谱柱是岛津为石油、化工等应用特殊设计和定制的一类色谱柱，包括色谱分析常用的一些型号之外，还包括如硫化物分析、石油烃分析、气体分析以及定制分析系统（系统GC）涉及的OXY、Gaspro、氧化铝等色谱柱。纳谱: 生物大分子液相色谱柱+小分子分离液相色谱柱1、生物大分子液相色谱柱BioCore HIC-Butyl高性能疏水蛋白分离色谱柱BioCore HIC-Butyl是一款基于疏水相互作用分离原理的高性能蛋白分离柱，它采用先进的单分散大孔硅胶微球为基质，结合独特的表面键合技术，适用于单抗以及单抗偶联药物分子的分离表征。BioCore Protein A色谱柱BioCore Protein A是一款以单分散大孔高交联度PS/DVB微球为基质，表面涂覆中性亲水涂层后，再通过环氧反应键合一种特殊的耐碱型重组Protein A亲和基团制得的高性能Protein A亲和色谱柱，适用于单克隆抗体（mAbs）和Fc融合蛋白的高速效价分析。BioCore WCX色谱柱BioCore WCX是一款以先进的单分散无孔聚合物微球为基质，结合独特的表面键合技术而成的高性能弱阳离子交换蛋白分离色谱柱，适用于单抗、双抗以及单抗偶联药物中电荷异质体的分离，广泛地应用于生物制药、医疗、科研等领域。BioCore SEC-120BioCore SEC是纳谱分析推出的全新高性能体积排阻色谱柱系列。该产品采用高性能体积排阻分离介质，以孔道结构经过特殊设计的单分散多孔硅胶为基质，在硅胶表面键合中性亲水层以将分析物与固定相之间的相互作用降到最低。BioCore SEC-120色谱柱主要用于小分子化药及聚体，多肽、多糖、低分子量寡糖核苷酸和蛋白。2、小分子分离液相色谱柱ChromCoreTM系列的120C18-T、AR C18及BR C18液相色谱柱ChromCore AR C18色谱柱采用粒径高度均一的高纯硅胶微球，先进成熟的表面键合，无封尾处理，可在低pH条件下免受水解的作用，避免了因封尾试剂在酸性条件下易水解而改变C18选择性的问题，使其在酸性流动相条件下具有更出色的分离性能、稳定性和更长的使用寿命，特别适合在极低pH至中等pH条件下分离极性化合物。ChromCore BR C18色谱柱是基于在单分散硅胶微球表面首先进行有机硅胶层杂化处理，然后进行十八烷基多点键合和完全封端处理的键合相，可以在强碱性和强酸性条件下使用，广泛应用于制药、食品、环境、化工等领域。多环芳烃专用柱ChromCore PAH色谱柱是针对US EPA Method 610方法中16种多环芳烃（PAH）的检测而设计的专用液相色谱柱。具有良好的批次重现性和稳定性，基线分离EPA方法610中的16 种多环芳烃，适用于脂溶性维生素的异构体分离。阿卡波糖专用柱阿卡波糖专用色谱柱是纳谱分析基于《中国药典》中阿卡波糖含量项下方法研发出的专用色谱柱。该款色谱柱采用了独特的氨基键合技术，配合以专用的阿卡波糖保护柱使用，可有效增强色 谱柱的稳定性以及使用寿命。安捷伦：Poroshell 120 CS-C18 色谱柱2020年，安捷伦在慕尼黑展会上发布了Poroshell 120 CS-C18色谱柱。该款色谱柱将表面多孔型杂化颗粒与表面电荷技术相结合，既保留了高效低压的优势，又能耐受广泛的pH范围，满足LC和LC/MS方法开发高效快速的需求。沃特世：推出全新ACQUITY PREMIER色谱柱该系列色谱柱采用MaxPeak高性能表面（HPS）技术，不仅可配合各品牌的UHPLC系统使用，还能减少因分析物-表面相互作用导致的分析物损失，从而显著提升数据质量。此外，Waters ACQUITY PREMIER色谱柱采用MaxPeak HPS技术，这种有机/无机杂化表面技术能在样品与不锈钢色谱柱之间形成屏障表层。使得色谱柱灵敏度提高，可顺利检出以往因与金属结合而无法检出或观察不到的低浓度分析物；整体峰形和峰容量更出色，还能降低吸附损失，提高分离的重现性。月旭科技：Ultimate® OAA有机酸检测专用液相色谱柱等多款专用柱齐发2020年月旭科技不断丰富色谱柱产品线，共推出了7款新品。接下来介绍其中最具代表行的四款柱子：Ultimate® OAA有机酸检测专用液相色谱柱该款柱子是月旭科技推出的针对水溶性有机酸分子检测的反相专用色谱柱。通过独特键合工艺改进，OAA专用柱相较于常规反相C18色谱柱，色谱性能更佳，分离度更高，色谱峰更均匀，在分离羟基脂肪酸和芳香有机酸方面具有优异的性能。Blossmate® SAX草甘膦检测专用色谱柱这是一款针对草甘膦难点推出的全新阴离子色谱柱。该款柱子采用超高纯球形色谱硅胶为基质，键合高密度季铵基官能团，具有较高的机械强度，同时在测定草甘膦在高浓度进样条件下，连续运行500针以上，其色谱峰形依旧理想，具有出色的分离能力和良好的使用的寿命。Ultimate® Amino Acid Plus氨基酸分析专用柱该款柱子是月旭科技在原有的氨基酸分析专用色谱柱的基础上，进一步优化分析方法，推出全新的专用色谱柱，使用蒸发光散射检测器，不需进行氨基酸的衍生，可检测氨基酸种类更多，结果稳定性更高。Blossmate® PSV C18防腐剂分析专用柱Blossmate® PSV C18防腐剂分析专用柱在与诸如LC-MS等技术联用时也表现出十足的兼容性，可广泛应用于寡糖、氨基酸、小肽、核苷酸和有机酸等多种成分分析。Blossmate® PSV C18对于食品添加剂拥有很强的保留能力，改善拖尾效果明显，分离度也十分出色。此外，Blossmate® PSV C18在连续进样1000针以上，分离度依旧符合国标要求，柱压依旧没有明显升高，寿命依旧坚挺！

上一期，我整理了：中国市场色谱柱排行榜 || 进口主流色谱柱篇，有一些朋友说我列的不全，比如Merck，资生堂，Alltech等等色谱柱怎么没列上，那这次在进口的非主流色谱柱排行榜上，我会全部加上，包大家满意！非主流篇即年销量低于一万支的常规进口柱，如果还有未收录的品牌，欢迎大家留言补充！对于Daicel，TSK等这些蛋白，手性等专用柱，我会在后期编入专用色谱柱系列，后续我还会再写国产色谱柱和主要的色谱耗材经销商。中国色谱柱市场在十几年前是个短缺的市场，信息闭塞，那时只要有产品就能卖出去，而且供不应求，每年销量都是快速增长。所以这十几年，各大公司都在抢占中国市场，不断有新的品牌进入中国，或者通过总代理，或者成立中国代表处甚至中国公司。下面九家公司是我认为的低于一万支销量的，最重要的九家非主流色谱柱公司，也是最有机会挑战主流色谱柱前五强的力量！进口非主流色谱柱品牌排行榜 1 .Merck-Sigma | 色谱柱有SM两大系列，左手冰霜，右手火焰默克是做大化工的，硅胶产量全球第一，顺便拿了一小部分硅胶生产色谱柱和薄层板。Merck主要是液相色谱柱，NT萃取柱，还有薄层板（进口薄层板里的老大，遥遥领先领先第二名德国MN，其他进口品牌就忽略不计了，主要的竞争对手是国产青岛海洋）；Sigma气相和液相色谱柱都有，还有SPE小柱和微萃取（固相微萃取基本是独家产品，无奈产品太小众，而萃取小柱在进口品牌中能居前三，前面应该是Waters，Agilent，不过这几年受国产小柱冲击较大，如艾杰尔，安谱，迪马等）。Merck和Sigma的色谱柱单拿出来在市场上都算不上主流，在公司里都算小众产品，不过合并后还是有一定分量的。 Merck和Sigma合并后的色谱柱在中国市场上接近1万根，在第二梯队中稳居领先位置。其中Merck的主打色谱柱是Purospher色谱柱，因为硅胶是自己生产，所以产品稳定和重现性还是非常不错的，价格为中低档￥2000-3000，早期产品是Lichrospher卡套色谱柱，还是有很多忠实的老客户。Sigma的主打色谱柱是Supelco和Discovery两大系列，价格为中低档￥2000-3000，也是非常畅销的产品。此外，还有Chromolith整体化柱，ZIC HILIC亲水柱，Ascentis核壳柱，Astec手性柱，也都是非常有特色的产品。因为Merck主营业务是试剂和纯水机，色谱耗材只是小众产品，市场推广不足，大多数Merck代理商对色谱柱也不重视，而Sigma是以直销为主，也是把主要精力放在生化试剂上，而色谱耗材一直不受重视。 发展建议：公司整合之后，色谱耗材业务得到了完善和增强，未来在中国色谱耗材市场上分量加倍了，期待默克公司把色谱耗材业务单独运营，培养专业的代理商，共同加强市场宣传推广，如果未来销售政策更灵活和激进，很有希望挤入第一集团。 2 .Kromasil | 错失发展先机的化工巨头阿克苏和默克一样都是化工巨头，而Kromasil色谱柱也是阿克苏的一个小产品，并不受重视。十多年前，Kromasil色谱柱和ThermoFisher的Hypersil色谱柱都是以进口填料国产填装为主，并驾齐驱。与迪马钻石柱，兰化所的气相柱，并称国产柱F4。2010年，Thermo在中国组建色谱耗材业务部门，增加了几十家代理商，加强了市场营销；而Kromasil更重视填料业务，忽视了色谱柱业务发展，直接导致两个品牌的销量差距越来越大。为了提高Kromasil的进口柱的份额，曾在2008年停止供应中国市场Kromasil 5um的填料。不过推广力度不够，增长不大。2017年初取消振翔的独家代理后，现由两家新代理商销售。目前市场推广力度不足，主要依靠简单的二级分销。在中国市场，Kromasil色谱柱大概5000-7000支，价格中低档￥2000-3000。未来渠道稳定后，价格有可能提高。Kromaisl能提供优异的硅胶，产品的重现性和稳定性是非常不错的，有供应硅胶给行业内一些知名色谱柱公司做色谱柱。 发展建议：应选择更专业的几家代理商，加强代理商目标考核，加大新客户开发，加强市场推广，不过因为Kromasil填料业务更为出色，对色谱柱业务难免不够重视，我估计很难实现！ 3 .Hichrom | 我是色谱柱收割机，结果??万万没想到??我也被人收割了！大家可能很少听说Hichrom这个公司。Hichrom公司主要有Hichrom和ACE两大色谱柱系列，最近几年，陆续收购了Whatman，Beckman和Grace-Alltech的色谱柱业务，干得风生水起。结果自己在2015年被VWR集团收割了！Hichrom公司是一家靠填装色谱柱起家的小公司，不仅有自己的色谱柱品牌，还代理了市场上几乎全部品牌的色谱柱，这与Phenomenex公司在海外的经营思路非常相似。Grace-Alltech 之前的代理商，借助Alltech的蒸发光检测器，在中国经营多年后，有一批忠实客户。这些代理商分区域经营，发展的也算中规中矩，所以Grace色谱柱在中国本来就有一定销量。而 ACE 和 Hichrom 的色谱柱之前被跃胜代理十年，作为一家做得风生水起的溶剂代理商，对小小的色谱柱业务难免不够重视，销量一直没起色。2012年初，Hichrom公司取消了其总代理资格，改为几家一级代理一起做。 Hichrom 的各系列色谱柱，在中国市场年销量5000支左右，价位为中档，大概￥3000-4000，目前各子品牌的销售情况应该是：GraceACEHichromWhatmanBeckman。 发展建议：中国市场已经过了跑马圈地的野蛮发展阶段，未来必然增速放缓，总代理制已经过时。如果要继续保持增长，那就需要细分市场，让多家代理商精耕细作各自优势区域，厂家和代理商紧密配合，共同努力才有发展机会！ 4 .资生堂 | 我不光卖化妆品，还卖色谱柱，还好，现在终于脱手了！2017年，资生堂的色谱业务（包含色谱仪器），以6000万人民币的价格卖给了日本大曹。我看完感觉卖的好便宜啊，真的好羡慕大曹，这么知名的产品，卖的这么便宜！！！从此我感觉，行业内的国际收购其实离我们也并不遥远嘛！对于化妆品巨头资生堂来说，这块业务盈利能力太弱了，连鸡肋都算不上，卖了更省心吧。资生堂的色谱柱在行业内口碑还是非常不错的，技术一点不鸡肋，其主营化妆品，所以盛产高品质的硅胶。将化妆品合成中的粉末表面处理技术首次应用于硅胶填料加工，为硅胶填料包覆上一层聚合物，俗称胶囊技术。这次跨行业的技术转移得非常成功，使其色谱柱峰型和柱寿命都表现得非常出色。 资生堂色谱柱在中国年销量5000支左右，价格￥4000-5000，算中高档。目前采用直销的方式，这种方式需要不断增加更多的销售人员才能带来业绩的大幅增长，而且单一产品线的销量低，很难支撑起足够数量的销售，所以直销销售人数难以持续增加，自然不能覆盖足够多的客户，导致其未来的增长潜力有限。大曹收购资生堂业务之后，其填料与资生堂色谱柱是非常相关的产品，是一个很好的补充，可以提高单一客户的回报率！ 发展建议：中国的人口红利已过，现在色谱行业的用人成本很高，靠直销的模式不够经济，无法覆盖足够多的客户。毕竟中国市场大，而且因为发展快导致瞬息万变，客户不仅数量非常多，而且经常发生变化，需要大量的销售人员与客户实时沟通。所以我认为资生堂应与代理商共同推广产品，采取更灵活的销售模式。 5 .YMC | 其实我也是最优秀的色谱柱和填料生产商之一YMC色谱柱在中国年销量5000支左右，色谱柱中低档，￥2000-3000。目前在中国没有成立公司，2009年以代表处方式经营，主要依靠几个代理商经营中国市场。日本公司普遍在考核方面都不太严格，代表处以及各个代理商对YMC产品的推广活动很少，除了一年参加1-2次展会基本没有市场活动。 发展建议：模式没有问题，不过现有的代理商没有危机感，都在吃老本，应加强代理商管理和考核，代理商应该能上也能下。 6 .Restek | 背靠大树好乘凉，不过请不要在打雷的时候Restek色谱柱在中国年销量5000支左右，主要是气相柱，色谱柱中高档，￥4000-5000。曾经是岛津气相仪器的标配，所以气相柱的占有率还是非常不错的。而液相柱在市场上非常少见。目前在国内有几家代理商，推广活动寥寥。虽然Restek在几年前已经在中国注册了公司，但是对代理商管理松懈，没有看到市场上有效的推广，主要还是吃老本。而岛津的仪器这几年开始改配自己品牌的色谱柱，Restek销量很受影响。如市场推广再没有改进，销量必然持续下滑！ 发展建议：与YMC相同建议，重点是加强代理商的管理和考核！ 7 .Ecosil | 籍籍无名的性价比之王Ecosil色谱柱在中国年销量3000支左右，价格低档￥2000+。虽然是广州绿百草的品牌，但是由日本和德国知名的色谱柱工厂生产，当之无愧的性价比之王。然而知名度太低，市场推广不够，主要依靠直销和经销商，目前没有合作的代理商。 发展建议：加强直销，增加产品知名度，这样就有更多有实力的代理商慕名而来，从中挑选有实力的区域代理商，共同推广当地市场，可以打开局面！ 8 .PE | 被光谱的光芒掩盖了色谱产品，其实色谱柱还不错！PE色谱柱在中国销量3000支左右，价格中高档，￥4000-5000。光谱算主流，市场上比较多见；气相色谱还可以，而液相色谱市场上很少。所以PE的色谱柱主要是气相柱，数量不多，主要通过直销销售，代理商少，推广不足。发展建议：增加更多的市场活动，稳定的代理政策，灵活的推广活动。 9 .COSMOSIL | 代理政策一直摇摆不定，目前的政策也有缺陷！COSMOSIL色谱柱在中国年销量3000支左右，色谱柱中低档，￥2000-3000。之前是多家代理，目前应该是改为一家独家代理。市场上推广活动很少，毕竟一个代理商的人力有限。长此以往，COSMOSIL的销量能维持都有困难。 发展建议：代理政策一定要稳定。多家代理虽然会引起价格竞争，但是市场推广还是需要更多的推动者，选择合适的代理商一直是厂家最重要的课题。 10 .其他500支以下的品牌 | 品牌太多，而销售数量太少这一系列的品牌众多，我在此列出品牌，就不再一一介绍了！日本Develsil，Mightysil，Imtakt，Wakosil，CERI L-column，Shenshu，Frontier，美国Sielc，Cloversil，Zichrom，GS-TEK，ES industries德国MNNucleosil，MZ，Bischoff，Knauer澳大利亚 SGE英国Fortis如果有我没有列举完全的，欢迎大家留言补充，我非常愿意学习！对未来色谱柱市场推广和发展的建议：与主流五强色谱柱不同，非主流色谱柱都没有强大的仪器配套背景，也不像Thermo和Phenomenex拥有完整的色谱耗材产品线，而且进入中国的时间也晚一些。目前竞争的激烈程度已经远大于十年前，我们可以预见，未来想要让一个不知名品牌杀出重围成为了主流色谱柱，这几乎是不可能完成的任务。在非主流色谱柱之中，我认为最有希望的依次是Merck，Hichrom，资生堂，Kromasil。这几个品牌的产品还是非常不错的，知名度也可以，只要采用了最合适的且稳定的代理政策，选对代理商，经过几年的努力我认为还是有机会挑战前五强！什么样的代理政策是最合适的？目前见到的模式主要有厂家直销，全国总代理，完全分销，区域代理。当然不管采取什么政策，一定要稳定持续，频繁的摇摆非常不可取。一些公司换领导就换政策，公司整合也换政策，这都会对业务产生不良影响，影响合作伙伴的信任度。色谱柱业务虽然小众，但与其他仪器、试剂等相关产品销售方式不太一样，最好能独立运营，要有稳定的战略，灵活的战术。1、 直销模式强势的厂家都很喜欢直销，因为销售的执行力更强，更专业，资源最多，可以很快看到数字增长。我认为厂家直销成本太高，并不是一个经济的选择，长期增长是不可持续的，因为厂家养活一个销售需要600万以上的数字，代理商养活一个销售需要300万以上的数字，如果达不到这个数字，要么公司亏本，要么销售嫌收入低会离职，这种问题不仅发生在代理商身上，在一些品牌厂家同样发生。所以直销的方式只是适合服务少量的核心大客户，对于大多数的中小客户还是需要代理来管理。2、 全国总代理制这是一个存在了几十年的古老方式了，在市场不大时还是有意义的。当今市场充分竞争，越来越多的厂家加强控制和管理，只是放个总代理就万事大吉的方式必然输得很惨。中国仪器市场这么大，已经占到了全球市场的15%以上，这个方式已经非常落伍了，一个总代理公司怎么可能覆盖到全中国的客户，所以必然是大量的依靠分销，这样的推广效率可想而已。3、 完全分销有些公司进入中国后，采取最简单的销售模式：谁买都卖，客户和经销商全部一视同仁。其实这算是总代理的一个变种，区别不大！没有代理商帮助推广，全靠产品自发增长，是非常低效的方式。4、 区域代理制因为中国市场非常大，据我了解行业内没有哪家代理商能完全覆盖全国的业务。需要按各自优势区域分片区经营，加上厂家的市场推广，并且对代理商进行严格管理和考核，通过奖励和惩罚，共同推广市场，我认为这是目前最适合中国国情的方式。 那么什么样的代理商是最应该选择的呢？色谱耗材代理商目前在全国范围内并没有发现规模很大的，单靠色谱耗材能做到1-2亿规模的公司更是凤毛麟角，能同时拥有几十人的耗材销售团队的公司也是非常的少。大都是区域性的公司，而且通常是仪器和耗材同时做。因为色谱耗材的业务量不高，所以专职的耗材销售数量并不是太多。这自然会影响到品牌的推广能力，所以很多代理商会借助分销，这对于市场推广几乎没有太大作用。所以寻找区域内的色谱耗材集成代理商至关重要，多品牌互补，不完全冲突，给客户提供最完善的解决方案。可以提高单个销售的输出，自然可以集结更多的销售力量，覆盖到整个区域。如果在全国，你能找到4-6家耗材业务亿元左右的地头蛇，在各自区域内都有几十个专业的耗材销售帮你推广市场，必然无往不利。作为厂家要做的是提供有效的激励方案，确保代理商足够努力，厂家与代理商共同推广市场！与一些厂家沟通过程时，发现总有厂家会觉得广州绿百草同时代理这么多色谱耗材品牌，什么品牌都卖，是不是会影响对厂家产品的忠诚度？其实作为厂家，只要你的渠道激励政策有效，能让代理商全力配合推广活动，这已经比尸位素餐的代理商强太多了。如果一些代理商其他品牌不推，自己代理的产品也不推，对厂家算完全的忠诚，这才是真正可悲的事情吧。美国Phenomenex和欧洲Hichrom，都是色谱柱行业最专业，发展的也最好的色谱耗材代理商，他们不仅有自主产品，还代理几乎全部的知名色谱柱品牌，这应该就是目前中国代理商发展的方向吧！ PS：对于色谱柱技术和市场感兴趣的朋友，欢迎加入色谱柱讨论微信群，因为色谱柱是小众产品，希望加入的朋友是相关的，所以限50人加入！加入方法：请关注广州绿百草公众号，在对话框输入“色谱柱群”即可获得入群方式！ 未完待续，后续我还会更新专用色谱柱，国产色谱柱，以及主要的经销商等，敬请期待！● ● ●精选原创文章列表 获奖公布：实验室最美小师妹评比，结果新鲜出炉~ 广州仪器人森林大会 || 仪器生态圈存在的问题及发展趋势 仪器有个圈，90后菜鸟如何找对工作，入职后又该怎样发展 ? 我敢保证，这是仪器圈最无聊的招聘广告 作为仪器销售，你真了解拜访吗 神秘的湘西，我们充满动力的回来了~~~ 关于日常使用移液器，仅看这一篇就够了！（三） 某药厂"飞行检查"遭省药监警告，竟然是因为小小的天平？ 十个好用不贵的小物，让你瞬间提高实验幸福感~ 全球仅有的烷基汞气相专用柱，到底好不好用？ 90后广药女生的抉择之一：毕业了要不要去小私企？ 十载 ? 人物 | 一个分析仪器行业“小”老板的打工创业之路 阿蛋学仪器 | 色谱分离的原理 So Easy ！

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong 仪器信息网讯 /strong 2018年12月7日，由北京理化分析测试技术学会、北京色谱学会共同主办的“2018年北京色谱年会”于北京世纪金源香山商务酒店成功举行。来自科研院校、仪器企业等约300余名业内相关人士参加了本次会议。与会专家分别就色谱技术在生命健康、环境、药物分析、食品分析等方面的最新成果与应用进展进行了分享。仪器信息网全程参与并报道了此次会议。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/b28d8c05-33d2-462d-bbb1-4a350107312c.jpg" style=" " title=" 会场.jpg" / /p p style=" text-align: center " 会议现场 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/3e12acac-a001-40f8-8f53-fe27058460a0.jpg" style=" " title=" 刘虎威.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " span style=" text-indent: 2em " 北京大学教授刘虎威致辞 /span br/ /p p style=" text-indent: 2em " span style=" text-indent: 2em " /span /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/04888a27-1b7b-4265-af62-3256bd3a1c70.jpg" title=" 江桂斌.jpg" alt=" 江桂斌.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院生态环境研究中心院士江桂斌 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《大气细颗粒污染的毒理与健康危害》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 近10多年来，我国的癌症发病率和死亡率高居不下，且有数据显示每分钟约有7人确诊癌症。相关研究表明，雾霾天二噁英与石英晶体浓度显著高于非雾霾天，且大气PM2.5颗粒中的重金属与肿瘤病人体内暴露有很高的相关度。江桂斌在报告中介绍了针对大气细颗粒污染的毒理与健康效应开展的相关研究以及取得的成果。其课题组开发了ITA方法研究细颗粒组成，通过AhR信号通路影响研究细颗粒毒理机制；基于不同污染源具有不同的Si同位素指纹，进行大气PM2.5的溯源研究，并建立了五种同位素分馏的高精度方法。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 江桂斌接着介绍了其课题组开发的分析方法，包括优化GC xGC-TOFMS 实现了& gt 11900化合物的分离；利用GC xGC-ECNI-TOFMS方法分析PM2.5中的有机卤化物，发现了2200余种氯溴代化合物；利用GC xGC-EI-TOFMS方法分析PM2.5中的有机化合物，识别出& gt 1800种多环芳烃及其衍生物等。运用已建立的平台，通过大数据解析技术海量毒理组学数据，建立污染暴露于通路扰动及疾病标志物的关联，发展细颗粒污染流行病学评估方法。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/11f7e59e-2963-4170-bfc6-70a4c4877818.jpg" title=" 许国旺.jpg" alt=" 许国旺.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院大连化学物理研究所研究员许国旺 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《二维液相色谱-质谱三维信息用于代谢组深度覆盖的研究》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 代谢物通过与生物分子之间的相互作用调控着各种生理病理过程，对维持机体的正常生理功能具有重要意义。许国旺在报告中讲述，越来越多的研究需要借助于大规模样本的代谢组学分析。基于此，许国旺课题组开展了二维色谱-质谱技术的相关研究。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 许国旺表示，为了提供深度的生物意义，代谢组学研究应该定性代谢物，基于此其课题组研发了多种分离技术的组合、多种质谱离子源及检测器、使用正交或互补分离机理提高覆盖度，实现了一次进样对亲水性和疏水性化合物的互补分离，而且增加了峰容量，通过切换通路的设计实现了多种形式的二维色谱。再与高分辨质谱联用，实现了第三维的分离分析。因此分析的特异性和灵敏度都得到改进，对代谢物的深度分析具有显著促进作用。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/dbe251b8-c63f-412a-8b11-85dae8aee5fa.jpg" title=" 武杰.jpg" alt=" 武杰.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 北京杰宇广谱科技有限公司董事长武杰 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《色谱应用整体解决方案的研究》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 色谱分析整体解决方案是色谱分析研究从分析方法建立开始的最终实际目标，并广泛应用于石油、环境、食品等领域。武杰在报告中介绍了色谱分析整体解决方案的三种模式，以天然气为例介绍了仪器改装型、在色谱分析应用包型中提到白酒分析以及石油模拟蒸馏的实例、以环境、土壤中VOCs分析为例介绍了仪器组合型。并讲述了其解决方案的具体内容、核心要素等。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/4a9c707f-2f6f-46d7-b84b-d923b3f0872c.jpg" style=" " title=" 安捷伦.jpg" / /p p style=" text-align: center " 安捷伦科技（中国）有限公司陈艳凤 /p p style=" text-align: center " 报告题目：《安捷伦创新产品Intuvo GC助力实验室分析效率倍增-环境食品材料等领域最新应用进展》 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/ebb70063-0916-49c1-b1e6-fc20f201dc46.jpg" style=" " title=" 岛津.jpg" / /p p style=" text-align: center " 岛津企业管理(中国)有限公司王子君 /p p style=" text-align: center " 报告题目：《环境空气VOCs监测解决方案》 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/44806276-3897-4c3c-987e-ea1a100a5aec.jpg" style=" " title=" 赛默飞.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 赛默飞世尔科技(中国)有限公司刘晓达 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《高分辨高通量色谱质谱技术在临床医学领域的应用》 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/2cf947b7-712e-4950-a4b9-765e2d5771e1.jpg" title=" 邱洪灯.jpg" alt=" 邱洪灯.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院兰州化学物理研究所研究员邱洪灯 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《功能化硅胶色谱固定相研究》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 邱洪灯在报告中主要介绍了其课题组围绕分离分析新材料新方法相关的研究工作，包括离子液体相关的色谱固定相以及碳纳米材料的相关研究。兰州化学物理研究所率先将离子液体用作高效液相色谱流动相添加剂。基于此，邱洪灯课题组开展了咪唑离子修饰硅胶表面作色谱固定相的相关工作，通过利用咪唑离子液体的强设计性，改变硅胶的表面性质，有效地避免了分离麻黄碱等碱性药物化合物时的拖尾现象。邱洪灯还提到，低共熔溶剂（DES）作为一种新型的离子液体，其与传统的离子液体相比具有低成本、合成更为简单、可生物降解等特点。基于此，邱洪灯课题组开展了将DES作绿色溶剂制备葡萄糖胺固定相的相关研究工作。证明了DES中可以制备新型硅基色谱固定相，不仅可替代传统有机溶剂还可再生利用。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/ce2e3280-0b37-4ae9-8266-b86510c79477.jpg" title=" 张金兰.jpg" alt=" 张金兰.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国医学科学院药物研究所研究员张金兰 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《中药有效成分及其代谢分析新技术研究及应用》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 国家提出中药现代化战略这一重要举措，有力推动了中药产业的发展。我国中药质量标准经历了从无到有、从简单到逐步完善的过程，但中药的质量控制和评价作为中药现代化的关键问题之一，目前依旧在不断探索之中。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 张金兰在报告中主要介绍了中药现代化研究聚焦质量控制现状方面的内容以及中草药成分与代谢研究的科学问题。张金兰提到，中药成分结构因其多样性、生物基质的复杂性和体内成分及代谢产物微量等特点，使得分析研究面临挑战。基于此，张金兰课题组建立了全面定性和定量分析中草药成分的分析新方法，开发了中草药复杂成分体内微量代谢物快速发现和鉴定的新策略以及建立了基于代谢途径诠释和反向分子对接活性预测的中草药多成分药代动力学研究的新方法等。并介绍了其课题组开展研究的成果转化与应用，包括深入研究了中药复方二仙汤等的成分，分析和鉴定了小续命汤在大鼠体内暴露成分和代谢产物，阐明了其体内代谢转化特点，也开展了天麻、淫羊藿等多成分药代动力学的研究。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/165be18d-67ee-4ac9-9713-8a7cecd23fae.jpg" title=" 黄嫣嫣.jpg" alt=" 黄嫣嫣.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院化学研究所副研究员黄嫣嫣& nbsp /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《基于肽识别的蛋白质靶向探测》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 蛋白质是生命的物质基础也是生命活动的执行者。据预测，人体体内具有25万-100万种蛋白质，当蛋白质的结构、含量或分布发生异常时，会引发很多的重大疾病，比如癌症的发生发展是由于肿瘤标志蛋白的异常表达。其中多肽具有丰富的构建单元、可变的肽键长度、灵活构象以及可化学合成等特点。基于此，黄嫣嫣课题组开展了将多肽作为靶向分子的相关研究工作，建立了基于多肽识别诱导荧光等的筛选方法，进一步将多肽耦联物用于肿瘤标志物检测、靶向治疗以及克服肿瘤耐药性的研究中。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/31c150bc-7362-4f90-9a68-2b9d4c2f351f.jpg" title=" 聂宗秀.jpg" alt=" 聂宗秀.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院化学研究所研究员聂宗秀 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《活体质谱与成像》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 基质辅助激光解吸电离（MALDI）质谱成为蛋白质组学、基因组学、代谢组学以及质谱成像等研究中不可或缺的工具。聂宗秀表示，由于传统基质在小分子区域的严重背景干扰，阻碍了MALDI对小分子化合物的质谱分析。基于此，聂宗秀课题组致力于新型无背景干扰基质的研究，用于复杂生物体系中小分子化合物的质谱分析与成像。并开发出了系列高耐盐性，低背景干扰的有机盐新基质，实现了生物组织切片的质谱成像。此外，聂宗秀课题组基于碳纳米材料低分子量区域的特征指纹质谱方法，获得了碳纳米管，碳纳米点，氧化石墨烯等碳纳米材料在生物组织以及组织亚器官中的分布，同时对其进行了定量质谱成像研究。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/604a0d3a-91a3-44df-afed-e3c9ab5436e8.jpg" title=" 白玉.jpg" alt=" 白玉.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 北京大学副教授白玉 /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《基于常压质谱的超灵敏分析检测》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 白玉在报告中讲述了其课题组针对重要的蛋白质疾病标志物以及肿瘤发展过程中重要的糖蛋白末端糖开展的工作，利用信号放大策略和常压质谱技术，分别建立了超灵敏分析方法以及质谱成像方法。白玉介绍道，针对临床蛋白标志物的检测，课题组基于抗体/适配体的特异性识别特点以及一系列结构类似的有机分子作为质谱信号分子，构建了针对目标物的特异性探针方法，该探针可同时实现细胞的荧光成像和质谱检测双功能。利用该方法成功实现13个细胞表面肿瘤标志物CA125的检出。根据此方法的策略，白玉课题组基于AP-MALDI-MS实现了临床肿瘤组织和癌旁组织中特定糖苷的成像。得到的成像结果直观反映出组织中糖苷的表达与组织病变及微观结构的相关性。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/f04bd66d-3c02-4d50-9127-d81f233a315d.jpg" title=" 汪海林.jpg" alt=" 汪海林.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 中国科学院生态环境研究中心研究员汪海林& nbsp /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 报告题目：《DNA修饰分析与表观遗传研究》 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 90年代，英国MRC环境流行病学研究所 David Barker课题组提出了人类疾病的胚胎源性的理论(The fetal origins hypothesis)。 Barker博士认为,胚胎时期和1岁以前的营养状况与其成年后的疾病相关，此猜想的生物化学基础来源于表观遗传修饰。表观遗传学是指基于非基因序列改变所致基因表达水平变化，如DNA甲基化和染色质构象变化等。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 汪海林在报告中介绍道，表观遗传通过体细胞的有丝分裂稳定遗传和减数分裂的跨代遗传产生着长期的影响。基于此，汪海林课题组开展了围绕5hmC在TET酶介导DNA去甲基化过程功能的相关研究，建立了碳酸氢铵增强LC-MS/MS方法，提高了检测灵敏度，实现了检测细胞内的痕量5hmC。并有研究表明在莱茵衣藻、秀丽隐杆线虫、 果蝇 、真菌等真核生物中发现了DNA-6mA的存在，并发现6mA甲基化参与了调控基因和转座子的表达。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 本届色谱年会受到了多家仪器厂商的赞助，包括安捷伦科技(中国)有限公司、岛津企业管理(中国)有限公司、赛默飞世尔科技(中国)有限公司、德祥科技有限公司、北京阿斯雷尔生物科技技术有限公司、北京历元电子仪器有限公司、北京普立泰科仪器有限公司、成都科林分析技术有限公司、东曹（上海）生物科技有限公司、日立高新技术公司、北京安泰瑞科科技有限公司、北京捷安杰科技发展有限公司、成都奥普乐仪器有限公司等。各家厂商在会议上展示了各自的产品，吸引了大量与会者驻足。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/d9f9e65a-ae41-4e52-b6e8-d37b49e79720.jpg" style=" " title=" 赞助厂商.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/e13f9014-6cc0-488c-ac3b-92d0c8bfce60.jpg" style=" " title=" 赞助厂商部分2.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/f6385230-7127-4570-8383-9efa15a6eb01.jpg" style=" " title=" 赞助厂商部分3.jpg" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/c5ace511-5b9d-490c-b4cb-5e8709d952c1.jpg" style=" " title=" 北京历元.jpg" / /p p style=" text-align: center " 参会厂商 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/b1a0ff51-47e2-4254-9483-48c0a72c9960.jpg" style=" " title=" 签售会.jpg" / /p p style=" text-align: center text-indent: 2em " 图书签售现场 br/ /p p br/ /p

p 　　药物与受体相互作用研究在药物研发过程中发挥着非常重要的作用，其研究方法的便捷程度以及准确度直接影响 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/industry-S22.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 药物研发 /strong /span /a 的效率。一般研究药物受体的相互作用均采用放射配基结合分析法和亲和色谱法，但因放射配基结合分析法操作复杂，需要制备特定的放射性配基，使应用受到一定的限制 而通常的亲和色谱法需要制备一定数量及一定纯度的受体，难度较大，且可能会影响受体对药物的选择性。 /p p 　　1996 年，西安交通大学贺浪冲教授提出细胞膜色谱法(cell membrane chromatography，CMC)，经过20 年的不断发展，CMC法已逐步成为研究药物与膜受体亲和作用的有力工具之一。CMC系统将完整的细胞膜包覆于硅胶表面，在仿生理条件下制备成色谱柱进行成分受体相互作用研究，可以快速筛选中药复杂体系中的活性成分，并准确计算出其与受体间的配位亲和常数。 /p p 　　近日，西安交通大学王嗣岑教授等人在《药学进展》杂志发表文章“ 细胞膜色谱法用于药物与受体相互作用研究进展”，详细介绍了细胞膜色谱法的前世今生及相关应用。 /p p 　　传统的CMC方法经历了2 次“更新换代”：首先，原CMC 模型中分离鉴别采用离线方式完成，即通过筛选发现在特定细胞膜固定相上有保留的中药部位，采用人工方法将保留组分接收并进行下一步分离及鉴定。十几年来通过对CMC 模型的改造，现已成功构建集“ 活性识别- 色谱分离- 分析鉴定”于一体的CMC/HPLC(GC)/MS 在线二维分析系统 利用“ 双捕集环” 和“ 双富集柱”交替富集- 分析模式，将原有色谱系统成功改造为新的在线二维分析系统 并成功研制了在线阀控切换装置，真正实现了高通量筛选。其次，原CMC法中，靶细胞是通过生物组织和一般培养方法获得的，其细胞膜上的非“目标”受体的表达数量很多，而“目标”受体表达数量有限且不可控，由此建立的CMC 法对配体的特异性、敏感性和选择性受到了不同程度的限制。近年来，随着生物技术的不断发展，研究者利用现代分子生物学手段，利用外源重组质粒构建了稳定高表达野生型表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)、血管内皮生长因子受体(vascular epidermal growth factor receptor，VEGFR)、成纤维生长因子受体-1 (fibroblast growth factor receptor-1，FGFR-1)等受体的人胚肾HEK293 细胞株，并以相应受体选择性拮抗剂为对照样品，成功建立了受体高表达CMC模型，发现了苦参、独活、虎杖、黄芪、川乌和红毛七中选择性作用于上述受体的活性组分 分子药理学实验证明筛选得到的化合物可以抑制相应受体蛋白的表达，并具有剂量依赖性。 /p p 　　药物-受体的亲和作用直接影响药物的代谢过程及药效学，细胞膜色谱作为一种全新的生物亲和色谱，实现了高效液相色谱分离和受体药理学的有机结合，用于表征药物- 受体的亲和作用并求解药物作用的解离常数。但这个过程往往不是几种简单理想的模型能够准确描述，所以如何避免测定中的干扰、增强方法的专属性是今后研究的重点所在。此外，细胞膜色谱有其特殊性，载体表面的细胞膜活性随时间不断衰减， 因此如何将亲和色谱理论应用到细胞膜色谱法中，在较短的时间内观察配体在细胞膜固定相上的保留特征，建立快速表征药物– 受体亲和作用的研究方法，也是一个非常重要的研究课题。 /p p br/ /p

柱压问题在我们所熟悉的基本色谱分离方程式中，分离度R和柱效（N）、选择因子（a）以及容量因子k' 相关，和柱压无关。 但柱压（P）仍是HPLC方法中的最重要参数之一，因为柱压反映了色谱柱的内部状况。——色谱分离基本方程 现今能承受400 bar压力的HPLC泵很常见，色谱柱如在远低于上限的压力下正常运行，不需要我们重点关注；当柱压升高接近上限或者柱压有异常升高，往往意味着色谱柱出状况了，需及时进行维护和补救，严重时色谱柱就已报废了。本节将详细考察柱压问题并提出可行的解决方案。 柱压方程不难看出，对填充色谱柱，柱压与黏度 (η)、柱长 (L)和流速 (F)成正比，与填料粒径（d p）以及柱管半径（r）的平方成反比。K0是比渗透性系数，对填充床，其值约为0.001。（通过此公式可近似计算出给定色谱条件下的理论柱压。只有当新柱实际测得的柱压和理论柱压相差很大，才能说柱压存在问题。）黏度 (η)取决于流动相溶剂的选择，为降低柱压，反相色谱中倾向于选择低黏度的乙腈，而不是高黏度的异丙醇。当然选择时还需考虑溶剂强度、极性、分析物的溶解度以及和分析物兼容性等。柱长（L）增加可以提高分离度（R），流速（F）提高能加快分离，但都会导致柱压上升，选择确定这些运行参数时，需综合平衡和折中。填料粒径对柱压影响极大，dp降低一倍，柱压将增加4倍。UHPLC中采用的sub-2 μm填料，柱压超过普通HPLC泵的400Bar上限很多。提高柱温可降低黏度η，相应降低柱压。在梯度洗脱时，黏度随流动相组成的变化而改变，柱压也会处在不断变化中。对水/甲醇流动相体系，在55：45时，黏度和柱压有个极大值。内径的影响同样很大，根据线流速相同柱压相同的原则，4.6mm内径的色谱柱流速为1ml/min，约相当于在2.1mm内径色谱柱上的0.2ml/min流速，在10mm半制备色谱柱上的5ml/min，计算公式为v＝1.0ml/min x（内径r/4.6）2。所以在换不同内径色谱柱时，请及时调整流速，以免因高柱压损伤色谱系统。Tips柱压下降的原因一般是仪器系统的连接有泄漏，柱压不稳定一般认为是流路中有气泡或空穴，和色谱柱相关的柱压问题是一般都是柱压上升。色谱柱构造图1 Compress型不锈钢色谱柱的基本构造 图2 Modular Column基本构造通过观察色谱柱基本构造，不难想象，和柱压相关最大的是进口端筛板（inlet frit）以及其后面1-2cm长度的柱头填料。筛板上有比填料粒径小的小孔，筛板上的小孔或柱头填料的间隙被部分堵塞，是柱压上升的主要原因。有以下几类情况可能导致这种情况：1填料破碎和使用后有填料粉末生成填料破碎一般在装柱过程中发生，装柱压力过大或所选硅胶机械强度过低所至，设定柱压出厂标准可解决。而流动相中高pH值缓冲盐使硅胶溶解并重新形成填料粉末，则会堵塞出口端筛板。这种情况下反冲不起作用，只有更换后筛板，不过打开承压的后筛板，对柱床会有不好影响。2颗粒物堵塞引起柱压上升和对策可能堵塞进口端筛板（前筛板）和柱头填料间隙的颗粒物来源有：样品（制样时灰尘和滤纸等带入）；进样阀密封圈磨损；流动相（溶剂本身含有和配制过程进入）；液相仪器中泵阀密封圈的磨损；缓冲盐析出（一般在梯度运行和进样时盐的溶剂环境改变导致）；水和缓冲盐流动相内生长的细菌，也是颗粒物来源的一种，可堵塞筛板和填料间隙。应避免将这类流动相在室温下久放，可放入冰箱存放。对此，我们能做的预防措施和解决办法有：1) 预防措施过滤：样品（甚至标准品）和流动相过滤，既预防了筛板、柱头和毛细管堵塞，又能减少进样阀、活塞杆和截止阀等仪器关键部件的磨损。普通用0.45um孔径滤膜过滤样品和流动相，对使用2um以下填料的超高压柱的，可用0.20um滤膜。滤膜材质有再生纤维素、聚四氟乙烯、尼龙、硝酸纤维和醋酸纤维等，须根据和样品溶剂及分析物的适应性慎重选择。使用在线过滤器：在线过滤器内装有可更换的滤片，滤片孔径一般有2um和0.5um两种。安装位置有两个可选择：在进样器和色谱柱之间时，对样品和流动相中的颗粒物都有效；在泵和进样器之间，则只对流动相有过滤作用。使用保护柱：保护柱是缩小版的色谱柱，内含带填料的可更换的柱芯，安装在进样阀和色谱柱之间，用于防止色谱柱的化学污染为主，也有过滤颗粒物的作用。2) 故障排除反冲色谱柱：不连接检测器，直接将堵在前筛板上的颗粒物冲出排到废液瓶中。开始时反冲压力可低于正常使用压力，待颗粒物有冲出后，逐步提高冲洗压力。有时颗粒物已非常牢固嵌入到筛板内部，反冲不一定凑效，早反冲、勤反冲相对效果更好。有的厂商为避免堵塞，使用了较大孔径（2-5um）的前筛板，这种情况反冲会将填料冲出。换筛板：一般不建议这样做，因为换筛板会带走粘在筛板上的部分填料，使柱床的均一性受影响，导致柱效下降。不过如果反冲不能解决问题，也只能不得已而为之，要不然就要把色谱柱报废了。如果系统中不接色谱柱，柱压仍然高，说明泵出口到色谱柱之间的其它部位，包括进样器、在线过滤器和保护柱等有堵塞，可逐一排查。为了减少死体积，毛细管都做得尽可能的细，也可能被堵。3化学污染物引起柱压上升和对策来源同样是样品、流动相和系统，不过来源于样品的污染最普遍，特别是对复杂基体样品未经前处理或前处理不够的时候。化学污染物主要有：分子量很大的化合物、盐类、脂质、蜡类、油脂、腐殖酸、蛋白质等其它生物来源的物质。像盐类这样的保留能力极小的污染物会在死体积处很快从柱中洗脱出去，检测器一般对此类物质响应不大，有时表现为干扰峰、基线波动、斑点甚至负峰。保留能力中等的污染物，会被慢慢洗出色谱柱，表现为宽峰、基线馒头形波动和基线缓慢漂移。对强保留的污染物，一般流动相强度不足以将其从柱中洗出，会逐步在柱头累积。有时，累积在柱头的污染物可作为新固定相对分析物起作用，引起保留时间改变、峰拖尾和峰分叉等。污染物在柱头累积到一定程度，如果不采取措施，会堵塞填料间隙，引起柱压上升。最好的办法是选用合适的溶剂冲洗溶解这些物质，同时又不对填料本身有损害。如聚合物柱中累积的蛋白类污染物可用pH13-14的强碱溶液洗掉，但这种方法不适合硅胶基质色谱柱。1） 预防措施2） 故障排除已经累积很多污染物，用甲醇或乙腈简单冲洗不奏效，推荐使用下面方法清洗反相柱100％甲醇---100％乙晴---75％乙晴/25％异丙醇---100％异丙醇---100％二氯甲烷---100％正己烷用每种溶剂冲洗至少10个柱体积，对于250mm×4.6mm的分析柱，合适的冲洗流速是1～2ml/min。最后用10柱体积的异丙醇过渡，然后回到原来的流动相体系。

随着 21 世纪 “回归自然” 浪潮的兴起以及世界各地对药物毒副作用和耐药性的认知，在天然产物中寻找安全有效的药物这一课题已经引起国内外学者的高度重视，但如何在研发过程中实现这个目标? 今天就让我们一起探讨，并分享一下最新的解决方法。天然产物因其成分的多样性及其作用机制的复杂性，致使天然活性成分的筛选一直是药物研究的瓶颈。再加上传统的实验室仍主要依靠人力操作，分离纯化过程费时费力、容易出现人为错误，且生产成本高、效率低，因此各大制药企业和科研机构日益重视实验设备的自动化与智能化，以攻克天然药物成分提取的难题。全自动分离制备及薄层色谱系统助力中药粗提物快速分离随着天然产物与中药开发的快速发展，市场上对批量样品处理的需求日益提高，而传统的活性成分提取纯化方法除了费时费力，更会常常破坏活性成分的结构，影响实验效果，所以一些现代化、智能化的提取分离技术越来越显现出特有的优势，凭借这些技术进行高通量的活性成份筛选，有助加速研发。以糙苏为例，块根糙苏 (Phlomis tuberosa L．） 作为中草药，在亚洲国家被广泛应用于糖尿病、胃溃疡等病症的治疗，其作用机制与酶活性抑制相关，筛选确定其活性成分是深入研究的重中之重。✦块根糙苏早在 2015 年，上海中医药大学中药研究所的杨博士就以自动化技术实现对天然活性产物的快速分离，对 α-葡萄糖苷酶抑制活性实现快速筛查，并在 PLoS ONE 期刊发表了其研究成果[1][2]。研究当中通过 Sepiatec Sepbox 2D-2000 全自动分离制备系统对中草药粗提物进行快速分离，系统仅利用 20 小时的自动运转，便能快速得到 150个馏分，大大加快了药效物质的发现进程，证明了自动化技术助力天然产物的快速分离及制备的成效。活性化合物结构图为了进一步寻找活性成分，更利用薄层色谱生物自显影活性筛查模型，实现了对这 150 个馏分的超快速筛查，其中 15 个馏分对比阳性对照具有明显的抑制活性。再经过细分纯化工作，最终得到 20 个活性化合物。从粗提物到得到活性单体，工作周期不超过 5 个工作日!基于薄层生物自显影技术部分馏分 a-葡萄糖苷酶抑制活性筛查结果出众的分离成效归功于两大重要自动化技术天然药物相对于其他药物，成份更复杂，而且研发过程中涉及较多提取、分离、纯化等前处理操作。以上案例当中用到的技术 - Sepiatec Sepbox 2D-2000 全自动分离制备系统，由力扬企业从德国引入的，能够实现高通量的活性成份筛选，快速获得可重复且可靠的分离效果，加速纯化过程，而且单次粗提物样品处理量多达 2g，单样品制备时间不超过 24 小时，还能在实验过程中减少有机溶剂的消耗，免去了人手和研发设备的大量投资，极大地节省了时间和金钱，降低了生产成本。Sepiatec Sepbox 2D-2000 全自动分离制备系统薄层色谱分析方面，力扬全新引进的全自动数字薄层色谱系统 CAMAG HPTLC PRO 也有助完成快速的活性筛选，系统能够在无人干预的情况下完成在线全流程 (“点样 – 展开 – 衍生 –检测 – 分析 – 报告” 等) 的自动化薄层样品分析及评价，尤其适用于复杂成分样品的分离及检测，更攻克了薄层色谱的重现性难题，大幅度降低研发和检测实验室的人力和时间成本消耗。通过全面的自动化能够高效地生产大量可靠数据，构建薄层色谱信息数据库，实现信息化和数字化管理，并建立实验室智能化的基础。在稳健而高效的实验设备辅助下，天然产物研究相信将迎来更进一步的发展。参考文献：[1] Baatar D, et al., Ethanol Extract of Phlomis Tuberosa L. Promotes Glucose Uptake in 3T3-L1 Preadipocytes via Insulin Signaling Pathway, The FASEB Journal, April 2017 31(9). doi: 10.1096/fj.1530-6860.[2] Yingbo Y, et al., Identification of α-Glucosidase Inhibitors from Phlomis tuberosa, PLoS ONE 10(2), February 6, 2015. doi: 10.1371/journal.pone.0116922.

固体颗粒污染，pH超标，强保留物质污染是色谱柱使用过程中最常遇到的影响色谱柱寿命的三大“杀手”。固体颗粒物质固体颗粒物质——空气中的粉尘、流动相中的固体颗粒、样品中的固体颗粒、泵和密封圈的磨损以及管路老化等都是固体颗粒物质的来源，众多来源让人防不胜防，特别是泵和密封圈的磨损更是让人无处可逃，液相厂家也莫可奈何。使用保护柱和在线过滤器是可以防止此等固体颗粒物质的有效途径，能保色谱柱无忧，毕竟保护柱可以反向高流速将固体颗粒物质冲下，而色谱柱不行。单纯的固体颗粒污染采用在线过滤器更好，简单的计算一下成本就明白，一个筛板总比保护柱芯便宜吧。而对于复杂样品和多源头污染，保护柱芯则更能否发挥其优势，大大提高色谱柱的使用寿命。pH超标目前硅胶基质的色谱柱是主流，在市面上买到的98%以上都是硅胶基质的色谱柱，因为硅胶基质的色谱柱柱效高、质量稳定性好，以硅胶基质为主流确实无可厚非。但是，硅胶基质的色谱柱也有其脆弱之处，首先，硅胶在碱性条件下是容易被侵蚀、溶解的，所以pH应在7.0以内使用，此外，C18色谱柱的填料是在硅胶颗粒上键合上了C18长链，C18长链与硅胶颗粒是以Si-O-Si键的形式连接的，Si-O-Si键容易在pH如果只是样品溶液的pH超标，那么用保护柱可以有效的保护色谱柱（保护柱填料和色谱柱填料要相同保护效果最好），毕竟进样的量大多是1～20ul，量很小，损坏填料的物质可以被保护柱提前消耗掉，等样品溶液到达柱子的时候破坏威力已是强弩之末，因此保护柱对此类样品溶液pH超标是能有效延长色谱柱的使用寿命的。但是，如果是流动相的pH超标，就请换pH范围更广的柱子吧，此类流动相pH超标的情况保护柱是没法保护你的柱子的。强保留物质成份复杂的样品比如中药，做中药样品的时候色谱柱使用寿命通常不会太长，缩短使用寿命的最大元凶就要数强保留物质了。每一次做中药样品的客户发回色谱柱维护的时候，通常都会发现柱压高的状况，而且打开柱头几乎都会发现柱前端填料颜色或黑或黄，有时候深挖5mm也仍见颜色异常。对于色谱柱的维护而言5mm的深度已经是非常忌讳的了，需特别经验丰富的人才敢挖这么深，一般不会超过2mm的。强保留物质也是防不胜防，因为这是样品中自带的成份，我们要么就在前处理上加上诸多耗钱耗力的程序，否则你毫无办法，即使再号称超长使用寿命的色谱柱也无法抵挡它的攻势，毕竟强保留物质对所有品牌柱子的污染都是平等的。其实此类杀手是最适合的做法还是使用保护柱，一般的保护柱填料都有10mm长，比深挖5mm的办法来处理色谱柱而言，换个保护柱芯则要简单省力得多。

光学活性（手性）物质是分子内具有不对称碳、呈镜像对称而无法完全重合的化合物。以往利用色谱法分离手性化合物以HPLC为主，但近年来，使用超临界流体色谱法（Supercritical FluidChromatography：SFC）进行分析的方法日益增加。通过SFC法对手性化合物进行分析时，主要使用低极性、低粘度、高扩散的超临界二氧化碳作为流动相，向其添加极性有机溶剂（改性剂）来控制溶解性和极性。HPLC分析中，正相条件实现手性化合物的常规分离和高速分析，还能够减少有机溶剂的使用量，因而分析成本和环境负荷低。 但是，使用SFC法分析手性化合物时，需要探索各种柱和改性剂，因此需要花费大量人力和时间。本文中的岛津Nexera UC手性筛选系统能够最多切换12个色谱柱和4种改性剂及各种溶液混合比例，自动探索多种分离条件，从而大幅度提高了分析效率。 亮相BCEIA2015的岛津Nexera UC 了解详情，敬请点击《使用Nexera UC手性筛选系统自动优化手性化合物的分离条件》 关于岛津 岛津企业管理（中国）有限公司是（株）岛津制作所于1999年100%出资，在中国设立的现地法人公司，在中国全境拥有13个分公司，事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心，并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站，已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念，始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务，为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。 岛津官方微博地址http://weibo.com/chinashimadzu。岛津微信平台