人重组干扰素

据说，干扰素是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒。但是，对于多种由病毒引起的疾病来说，好像很有一定的效果。你了解干扰素吗？你的认识有多少？

近日，国际著名学术期刊《血液》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所分子风湿病学研究组的最新研究发现：来自于同一前体的miR-155和miR-155*协同调控浆细胞样树突状细胞（pDC）I型干扰素的产生。　　系统性红斑狼疮是一种以T细胞功能缺陷和B细胞过度活化及多种自身抗体产生为特点的自身免疫性疾病。已有的研究表明，I型干扰素的过度产生在系统性红斑狼疮的发病过程中起着十分重要的作用。它通过直接作用于T细胞和B细胞，促进自身免疫反应。因此，如何能够有效调控I型干扰素的产生，对于该自身免疫疾病的治疗有十分重要的意义。　　近年来，microRNA作为一种非编码RNA分子，被证明在免疫调节的各个方面均有很重要的作用。因此，在沈南教授的指导下，整合中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所的基础研究力量和上海交通大学附属仁济医院风湿科的临床优势，周海波和黄新芳等深入研究了microRNA 在I型干扰素主要产生细胞——浆细胞样树突状细胞（pDC）中的调控作用。　　该研究发现，pDC激活后伴随着大量I型干扰素的产生，miR-155*和miR-155分别在不同的时间被显著诱导。MiR-155*主要在早期被诱导，而miR-155则主要在刺激的后期被诱导。进一步研究表明，miR-155*通过靶向IRAKM，促进I型干扰素的产生，而miR-155通过靶向TAB2，抑制I型干扰素的产生。这些结果表明，它们在pDC活化的不同阶段协同发挥作用。此外，通过对miR-155和miR-155*产生机制的研究，发现pDC自身分泌的I型干扰素以及被激活的KHSRP蛋白可以在转录后水平反向调控miR-155和miR-155*的产生，这一结果解释了来自于同一前体的miR-155*和miR-155却能在不同的时间点被诱导的原因。　　该研究不仅揭示了来自于同一前体microRNA和microRNA*的产生，在同一刺激过程中可以被精确调控，从而使它们能够协同调控这一过程，而且阐明了新的有效调控I型干扰素产生的机制，为系统性红斑狼疮疾病的的治疗提供了新的理论依据和潜在靶点。　　该项工作得到国家科技部、国家自然科学基金和上海市科委的经费支持。

本法系依据干扰素可以保护人羊膜细胞(WISH)免受水泡性口炎病毒(VSV)破坏的作用，用结晶紫对存活的WISH细胞染色，于波长570nm处测定其吸光度，可得到干扰素对WISH细胞的保护效应曲线，以此测定干扰素生物学活性。试剂 (1)MEM或RPMI 1640 培养液取MEM或RPMI 1640培养基粉末1袋(规格为1L)，加水溶解并稀释至1000ml，加青霉素105IU和链霉素105IU，再加碳酸氢钠2.1g，溶解后，混匀，除菌过滤，4℃保存。(2)完全培养液量取新生牛血清10ml，加MEM或RPMI 1640培养液90ml。4℃保存。(3)测定培养液量取新生牛血清7ml，加MEM或RPMI 1640培养液93ml。4℃保存。(4)攻毒培养液量取新生牛血清3ml，加MEM或RPMI 1640培养液97ml。4℃保存。(5)消化液取乙二胺四乙酸二钠0.2g、氯化钠8.0g、氯化钾０.2g、磷酸氢二钠1.152g、磷酸二氢钾0.2g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。(6)染色液取结晶紫50mg，加无水乙醇20ml溶解后，加水稀释至100ml，即得。(7)脱色液取无水乙醇50ml、乙酸0.1ml，加水稀释至100ml。(8)PBS取氯化钠8.0g、氯化钾0.20g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。标准品溶液的制备 取人干扰素生物学活性测定的国家标准品，按说明书复溶后，用测定培养液稀释至每1ml含1000IU。在96孔细胞培养板中，做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个稀释度做2孔。在无菌条件下操作。

中国科技网讯 尽管医学界早在上世纪五十年代就发现和证实了“干扰素”的抗病毒作用，但它究竟是如何发挥作用的具体机制，仍是不解之谜。复旦大学近日发布消息，专家已解开其中谜团。 据透露，该校上海医学院基础医学院教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室主任袁正宏课题组研究发现，“干扰素-a”通过促使细胞分泌的“外体”所携带的具有抗病毒作用的蛋白和核酸等分子，在细胞间传递后发挥抗病毒作用的新机制。该发现对今后开发治疗慢性乙肝和其它病毒感染性疾病的新药有重大意义。该成果7月7日已在线发表在国际权威期刊《自然·免疫学》上。 干扰素是一组有多种功能的活性蛋白质，具有广泛的抗病毒作用。肝脏中的肝细胞是乙肝病毒活动、复制的唯一场所；而肝脏中的非实质细胞则连接、支撑肝细胞。“外体”是一种由细胞主动分泌出的微囊结构。“外体”在细胞间的通讯中发挥重要作用，在不同条件下，对于肿瘤发生、发展起到或促进或抑制的作用。课题组研究发现，在肝脏中，肝非实质细胞中的肝窦内皮细胞和巨噬细胞会分泌“外体”，在“干扰素-a”的诱导下，通过特定方式转运到易受到病毒感染的肝细胞中后，“外体”会“拼命”抵抗或清除乙肝病毒感染。 研究人员称，在应对病的变异、耐药性方面，这些存在于“外体”中的抗病毒分子好比“免疫军工厂”制造出的一种“火力十足”的“先进武器”，迫使病毒无法变异或产生耐药性。由此，“干扰素-a”诱导细胞分泌的“外体”，具有广谱、高效的抗病毒作用。该课题组已将有关“干扰素-a”处理细胞分泌“外体”用于抗病毒治疗的项目申请国家专利，相关的临床前研究工作也在进行中。（孙国根 记者 王春） 《科技日报》（2013-7-12 一版）

请教：大蒜的农残检测方法。我用检测其他蔬菜的方法检测大蒜，发现干扰素特别多，无法分析。请专家赐教！

大家都知道AGLIENT的ICP是通过冷锥来减少尾焰，主要是这能使自吸收和重组干扰降到最低，提供宽动态线性范围和低背景以获得最佳检出限。那么您是如何理解光谱分析中的自吸收与重组干扰的？

细胞因子（cytokine）是由免疫细胞及相关细胞产生的一类调节细胞功能的高活性、多功能的多肽分子，不包括免疫球蛋白、补体和一般生理性的细胞产物。细胞因子通常由淋巴细胞、单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞等相关细胞产生，按其功能及与免疫学的关系可分为：⑴具有抗病毒活性的细胞因子，如干扰素（interferon，IFN）；⑵具有免疫调节活性的细胞因子，包括白细胞介素（interleukin，IL）类的IL 2、IL 4、IL 5、IL 7、IL 9、IL 10和IL 12，以及β型转化生长因子（transforming growth factor β，TGF β）；⑶具有炎症介导活性的细胞因子，包括以肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）及IL 1、IL 6和IL 8为代表的结构相似的小分子趋化因子；⑷具有造血生长活性的细胞因子，包括IL 3、IL 11、集落刺激因子（colony-stimulating factor，CSF）、促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）、干细胞因子（stem cell factor，SCF）和白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）等。 重组细胞因子是利用基因工程技术生产的细胞因子产品，作为药物用于治疗肿瘤、感染、造血障碍等，可收到良好的疗效。近十多年来，重组细胞因子类药物的研制有较快发展，相关的新药陆续上市。本文重点介绍各类药物的研究进展、不同表达系统的表达水平和基因来源情况，以及各类重组细胞因子的基本特点和适应症。 国内外研究动态和市场现状 目前国内市场上主要的国产重组细胞因子类药物包括乙肝疫苗、IFN、IL 2、G-CSF、重组链激酶（recombinant streptokinase， rSK）、重组表皮生长因子（recombinant endothelial growth factor，rEGF）等15种基因工程药物。组织溶纤原激活剂（tissue plasminogen activator，T-PA）、IL 3、重组人胰岛素、尿激酶等十几种多肽药物正处于临床Ⅱ期试验阶段，单克隆抗体的研制已从实验阶段进入临床阶段。正在开发研究中的项目包括采用新的高效表达系统生产重组凝乳酶等40多种基因工程新药。 在欧美市场上，对现有重组药物进行分子改造而开发的某些第二代基因药物已经上市，如重组新钠素、胞内多肽等。另外，重组细胞因子融合蛋白、人源单克隆抗体、反义核酸，以及基因治疗、新的抗原制备技术、转基因动物生产等，均取得了实质性的进展。国外生物医药的目前发展动向，主要反映在以下几方面。 与血管发生有关的细胞因子 肿瘤血管生长因子（tumor angiogenesis factors，TAF）包括研究较多的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）、血小板源生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）等，它们促进肿瘤新生微血管的生长。临床研究表明，阻断VEGF受体2（VEGFR 2）和PDGF受体β（PDGFR β）等，可达到通过抗血管生成来治疗肿瘤的目的。1998年，美国科研人员发现两种用于治疗癌症的血管发生抑制因子（即抗血管生长因子）和内皮抑制素，以及一种抗血管生长蛋白，即血管抑制素（vasculostatin），都有较好的疗效。另外，VEGF、FGF和血管生长素（angiopoietin）等能够通过刺激动脉内壁的内皮细胞生长来促进形成新的血管，从而对冠状动脉疾病和局部缺血产生治疗作用。

最近在做雌激素，以前没做过，过完水样的SPE C18小柱，放冰箱零下20℃保存约一个月后，拿出来洗脱，测的值特别异常，基本上都很小 而且有一些严重不平行 不知道大家有没有遇到过这种情况，是小柱子被冰冻过的影响吗？

据悉，珀金埃尔默公司本周宣布，作为重组计划的一部分，公司裁员72人。裁员计划已在今年第二季度完成。　　珀金埃尔默公司表示，在第二季度，公司管理层批准了一项计划，决定将资源转移到高增长地区和终端市场。作为该计划的一部分，公司裁掉了72名劳动力。　　重组计划导致削减人类健康和环境健康业务的人员，但公司没有提供进一步的细节。　　公司表示，在人类健康业务方面，珀金埃尔默裁员和关闭多余的设施需花费税前重组费用220万美元;在环境健康业务方面，人员减少和设施的关闭造成了340万美元的税前重组费用。　　公司还表示，所有被裁员工已经接到通知，珀金埃尔默预计裁员造成的其他遣散费480万美元将在2012年底前完成支付。

第一个产品固定资产投资1亿￥足够，全国市场约3亿￥，两年可收回成本。现在全国有两家国有企业在生产此产品，市场供不应求。现在两家企业只能满足国内五分之一的市场，市场前景看好。第二个产品是一个老产品，现在国内没有人生产。如果有现成的GMP车间，再投资40万￥也就够了，市场在乎你去做，可大可小，全国一年200万￥的市场应该是不成问题的，80%的利润率差不多吧。这个产品就是人白细胞干扰素，注意是人白细胞干扰素，而不是基因工程干扰素，原来全国有七八家生产人白细胞干扰素，后来国家不准生产人白细胞干扰素，只准生产基因工程干扰素，理由是此产品有污染乙肝和艾滋病的潜在可能，我有办法克服这个问题， 人白细胞干扰素与基因工程干扰素最大的区别是它是多型多价的，至少有20多个亚型，可以联合发挥协同效应，效果更好；基因工程干扰素一般是单价的，顶多做成二价或三价，效果就差远了。我的想法是把人白细胞干扰素开发成滴眼剂、滴鼻剂、涂剂、喷剂，其效果肯定比基因工程的同类产品好得多。一人份人白细胞50￥可以产生100ml60000IU干扰素，可以稀释成10000ml产品，每支产品10ml就是1000份产品，每份产品5--10￥，就是5000——10000￥。

一、细胞因子的概念细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有 非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢 等。二、细胞因子的命名细胞因子按其来源可分为：由单个核吞噬细胞产生的细胞因子称为单核因子(monokine)；由淋巴细胞产生的细胞因子称为淋巴因子 (lymphokine)等。按其作用可分为干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、生长因子和趋化因子等。部分由不同细胞分泌的细胞因子，其基因及编码蛋 白与结构清楚者，在免疫调节、造血和炎症中发挥重要作用，又称为白细胞介素(interleukin，IL)。也可以依据结构或者其受体结构分类，我们的 趋化因子目前没有受体产品。三、细胞因子的特征1、低分子量；一般为＜60kD的多肽或糖蛋白。多以单体形式存在，少数为二聚体，三聚体。2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌，通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。3、一种细胞因子可由多种细胞产生，同一种细胞可产生多种细胞因子。4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。四、细胞因子的分类1、白细胞介素(interleukin，IL-s)最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。2、干扰素（interferon,IFN)最早发现的细胞因子，有干扰病毒感染和复制的能力。分α、β和g三种类型。3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor，TNF)1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。4、集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSF)指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。包括G-CSF（粒细胞）、M-CSF（巨噬细胞）、 GM-CSF（粒细胞、巨噬细胞）、Multi-CSF（多重）（IL-3）、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素 (TPO)等。5、趋化因子(chemokine)主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入特定的淋巴器官和组织以及感染发生的部位。根据趋化因子近N端半胱氨酸(Cys)的位置、排列方式和数量，可分为CC、CXC、C、CX3C四个亚家族。6生长因子(growth factor，GF)生长因子(GF)是具有刺激细胞生长作用的细胞因子。五、细胞因子的生物学活性1.介导自然免疫、参与抗肿瘤和抗感染2.调节T、B细胞活化、生长和分化，介导细胞免疫和体液免疫3.刺激造血生成、刺激骨髓祖细胞生长和分化为各种成熟血细胞4.在炎症、感染和内毒素血症中的作用5.在超敏反应和自身免疫病中的作用6.细胞因子通过激活其相应受体（CKR），导致细胞的增殖与分化或分泌某种蛋白质。六、四种蛋白表达体系比较表达细胞优点缺点原核E. coli繁殖快、成本低、产量高遗传背景及基因表达调控机制清楚易于大规模培养，成本低廉蛋白常为包涵体，纯化困难无糖基化（分泌蛋白，细胞膜上蛋白不可用），生物活性不定无翻译后修饰，内毒素含量高酵母Pichia使用简单，表达量高，His-tag便于纯化，一定的翻译后加工可进行糖基化修饰，操作简单，适合大规模生产可诱导表达，也可分泌表达，产物便于纯化有时会出现蛋白切割问题糖基化不能满足要求昆虫High-5产量高 ，翻译后加工与哺乳动物相似对于部分有毒性或较难表达蛋白有优势无内毒素污染蛋白活性不如哺乳动物适合表达激酶等定位于细胞内的真核蛋白哺乳CHO HEK293完善的翻译后加工，活性接近天然蛋白周期长、技术要求高表达产量低

[color=#DC143C][center]全球制药25年大事件回顾[/center][/color]1981－2006年全球制药25年大事件回顾来源: Dr.He 与现在相比，上世纪80年代的制药界相对简单，那时非专利药畅销的潮流尚未出现，品牌药的竞争也远不及当前激烈，制药企业还无需为产品生命周期管理而绞尽脑汁，如火如荼的DTC（直面消费者）广告还未广泛开展……从1981～2006年的25年间，全球制药界到底走了多远？从历年来的里程碑事件中，或许能够找到答案。 1981年 首次检测出AIDS病毒 1981年6月5日美国疾病控制中心的每周发病率和死亡率报告公布了5例患者的具体症状，此后被证实为AIDS患者。此次公布日期被官方认定为HIV/AIDS流行的起始时间。 首个ACE抑制剂上市，百时美施贵宝公司（Bristol-Myers Squibb）的卡托普利（captopril，Capoten）获准用于治疗高血压和充血性心力衰竭，成为首个上市的血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂和首批口服抗高血压药之一。本品的上市是药物结构开发方面的重大突破。此后10余年，ACE类药物迅猛发展，截至1997年，共计16种ACE抑制剂投入市场。 1982年 首个重组DNA产品上市 1982年，FDA批准了礼来公司（Eli Lilly）的重组人胰岛素（insulin，Humulin），本品是全球首个采用重组NDA技术的产品，也标志着全球首个基因工程药物的诞生。 1983年 罕用药法案出台 为鼓励针对罕见疾病的药物开发，1983年美国通过罕用药法案，法案给予罕用药7年的市场独占期，并允许临床研究成本进行税收抵扣。法案的出台为罕用药市场发展起到巨大的推动作用。 20年来外科手术领域的突破——环孢霉素上市 至1983年肾移植手术已实施30余年，但患者仍面临体内排异问题的困扰，诺华公司（Novartis）环孢霉素（cyclosporin， Sandimmune）的上市很大程度上缓解了体内免疫系统对移植器官的排异作用，本品可选择性抑制T细胞，是20年来外科手术领域的重大突破。 1984年Hatch-Waxman法案 1984年通过的Hatch-Waxman法案为非专利药企业提供了诸多优惠的政策措施，本质上刺激了现代非专利药工业的发展。 1985年 人生长激素上市 基因技术公司（Genentech）的人生长激素（Protropin）是制药工业中1个重要产品，事实上，这是生物制药公司首次生产并上市自身的生物药品，无论对基因技术公司还是对整个制药工业而言，本品都是1个重要的里程碑。 1986年氟西汀上市 礼来公司的革命性抗抑郁药——首个选择性5羟色胺再摄取抑制剂（SSRIs）氟西汀（fluoxetine，百忧解，Prozac）在比利时获得上市批准，美国FDA随后于1987年批准本品上市。多年来，氟西汀销售强劲，已成为全球销售额领先的重磅炸弹级药物之一。 首个单克隆抗体药物上市 1986 年，由Ortho开发、用于治疗器官移植出现的排斥反应的首个单克隆抗体药物——莫罗单抗-CD3（muromonabCD3， hoclone OKT3）获得了FDA的批准，由此拉开了单克隆抗体药物发展的序幕。20年后的今天，单克隆抗体药物已经成为生物医药最重要的发展领域之一，到2006年，FDA共批准23个治疗性单克隆抗体药物。 干扰素上市 1957年干扰素被首次发现，但由于基因工程和纯化技术尚不成熟，干扰素稀少而昂贵，难以用于临床。直到1986年，先灵公司（Schering）和霍夫曼罗氏公司（Hoffman–La-Roche）首次向市场推出了干扰素类药物——干扰素α2b（interferon α2b，Intron A）和干扰素α2a （interferon α2a，Roferon A），用于治疗白血病，才真正实现了干扰素的大批量生产。 首个重组疫苗 默克公司（Merck）的重组乙型肝炎疫苗（Recombivax）是首个基于病毒蛋白质基因序列重组而产生的疫苗产品。 1987年 首个他汀类药物上市 1987 年，默克公司推出了全球首个他汀类药物洛伐他汀（lovastatin，Mevacor），并耗费巨资启动了1项大规模的胆固醇健康教育活动，不足20年后，HDL（高密度脂蛋白）和LDL（低密度脂蛋白）已成为家喻户晓的专业词汇，民众对血脂水平的重视和理解也大大提高，这一切与默克公司的教育普及活动密不可分。此后参与高脂血症市场中竞争的他汀类药物越来越多，截至目前，他汀类仍是重磅炸弹级药物频出、竞争异常激烈的产品领域。 生命周期管理的典范——环丙沙星 1987年FDA批准了拜耳公司（Bayer）的氟喹诺酮类药物环丙沙星（ciprofloxacin，Cipro）用于治疗多种感染，本品后来成为成功利用生命周期管理的典范。 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=116942]中国生物制药行业分析报告[/url]

充足睡眠使人外表更迷人 一般人常会说晚间10时至凌晨2时是睡“美容觉”的黄金时间。据台湾“今日新闻网”16日报道，瑞典研究人员证实，除了精心打扮能增加人的外在吸引力外，充足的睡眠更能使人较为较康，且是为美丽加分的关键因素。瑞典斯德哥尔摩的卡罗琳斯卡研究所(Karolinska Institute)针对23名18岁到31岁的男女自愿受试者，请他们在第一天晚间11时前入睡，次日7时准时起床，在睡满8小时后拍摄第一张素颜照。第二天则只让受试者睡5个小时，并在他们维持清醒后的31小时后拍摄第二张素颜照；此外，除了要求受试者的两组照片必须保持表情放松外，相机与人物也须维持相同距离。之后，研究人员邀请到65位民众针对受试者前后两张照片的吸引力做比较；研究结果显示，民众普遍认为第二组照片中的受试者看起来较不健康，吸引力也相对降低。对此，主持此项研究的亚克索森(John Axelsson)表示，充足的睡眠除了能改善生理健康，也会提升外在吸引力；换句话说，“如果想看起来迷人，上床睡觉吧！”

【序号】1【作者】 朱勇； 金伯泉； 刘雪松【题名】用生物传感器测定重组人α2a-干扰素单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位【期刊】中国免疫学杂志【年、卷、期、起止页码】,2000年，06期【全文链接】http://www.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=cjfq&dbname=cjfq2000&filename=zmxz200006012&uid=&p=

[font=宋体]重组蛋白是生物科学领域的重要研究对象，其类型多样且具有广泛的应用。然而，在研究和使用过程中，人们可能会遇到各种问题。本文将对这些常见问题进行解析，以帮助读者更好地理解和应用重组蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组蛋白的主要类型包括：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①生长因子：一组细胞间信号转导蛋白，由细胞产生并用于通信。其等可刺激多种细胞过程，包括细胞分裂、分化、迁移和存活。主要生长因子家族包括： [/font][font=宋体][font=Calibri]FGF[/font][font=宋体]：成纤维细胞生长因子[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]VEGF[/font][font=宋体]：血管内皮生长因子[/font][/font][font=宋体]神经营养因子：一个生长因子亚群，主要作用于大脑和神经系统相关的细胞[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②细胞因子：包括对免疫细胞功能和通信至关重要的干扰素、白细胞介素、促炎性细胞因子和趋化因子[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③酶：可进行化学转化的生物活性蛋白；包括重组蛋白酶、激酶和核酸酶[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review]重组蛋白[/url]常见问题解析：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①如何准确评估重组蛋白的生物活性？[/font][font=宋体][font=宋体]生物测定旨在测量给定生长因子或细胞因子的生物活性。在大多数情况下，生物测定是基于细胞的检测，会使用不同的指示细胞，例如原代细胞或细胞系。常用的生物测定包括细胞增殖检测、趋化作用检测、细胞因子生成检测和细胞毒性检测。给定细胞因子的生物活性以[/font] [font=Calibri]ED50 [/font][font=宋体]表达，它代表诱导 [/font][font=Calibri]50% [/font][font=宋体]最大反应的细胞因子浓度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②应如何有效地复溶重组蛋白？[/font][font=宋体][font=宋体]首先，对容器进行离心，使粉末聚集在管的底部。我们通常建议将其复溶至[/font] [font=Calibri]0.1 [/font][font=宋体]至 [/font][font=Calibri]1.0 mg/mL [/font][font=宋体]浓度。大多数蛋白可通过加入无菌蒸馏水复溶。但产品数据表或 [/font][font=Calibri]CoA [/font][font=宋体]将说明何时需要使用水以外的稀释液。也可在这些文档中找到推荐的溶液、载体蛋白浓度和扩展的储存条件。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③重组蛋白如何保存？[/font][font=宋体][font=宋体]通常，我们建议将冻干重组蛋白储存在[/font] [font=宋体]–[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下，但可在 [/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]或室温下短期储存。复溶蛋白溶液时，我们建议您制备至少含 [/font][font=Calibri]10 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]L [/font][font=宋体]蛋白溶液的工作等份试液，并在 –[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]至 –[/font][font=Calibri]80[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下储存。不允许进行多次反复冻融。有关储存冻干和复溶重组蛋白的产品特定说明，请见产品手册、数据表或检验证书 [/font][font=Calibri](CoA)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④在冻干重组蛋白瓶中未发现蛋白沉淀的可能原因是什么？[/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白通常不含载体蛋白或添加剂（如[/font] [font=Calibri]BSA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HSA[/font][font=宋体]、蔗糖等）。因此在冻干过程中，蛋白成品可能为薄薄的，有时肉眼不可见的薄膜形式沉积在小瓶上，而非颗粒状。沉淀物的大小（如果有）与样品瓶中的重组蛋白数量没有直接关系。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为确保蛋白产物的完全回收，在打开冻干重组蛋白瓶之前，建议对其进行离心[/font] [font=Calibri]20[/font][font=宋体]–[/font][font=Calibri]30 [/font][font=宋体]秒，以将可能残留在瓶盖或侧面的任何蛋白聚集到瓶底。复溶后，您可以通过在 [/font][font=Calibri]SDS-PAGE [/font][font=宋体]上运行少量产品来确认是否存在产品蛋白。通常来说，只要在丙烯酰胺凝胶上上样 [/font][font=Calibri]10 ng [/font][font=宋体]的蛋白，应该就能看到预期大小的蛋白条带。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service][b]重组蛋白表达服务[/b][/url]，同时可以根据客户需求，选用不同表达[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]纯化标签、表达宿主等，真正为客户实现深度私人定制。多种纯化体系，为蛋白表达、纯化提供多种选择，帮助客户最大限度提高研究项目的成功率。有需求可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font]

题目：聚乙二醇化重组人生长激素的性质及活性

不含干扰素治愈率95％ 据新华社华盛顿4月13日电 丙肝是最常见的肝脏疾病之一。常用的干扰素治疗对同时患有肝硬化的丙肝患者存在较大的毒副作用。美国研究人员的最新报告说，为此，他们新研制了一种不含干扰素的药物，此药对肝硬化丙肝患者的治愈率甚至可达95％以上。 美国得克萨斯州大学研究人员在美国《新英格兰医学杂志》网络版及正在伦敦举行的国际肝病大会上报告说，他们于2013年在英国、西班牙、德国和美国的78家医院随机选取了380名同时患有肝硬化的丙肝患者，将其分为两组，使用新药分别进行了为期12周和24周的治疗。 结果显示，接受12周治疗的208名患者中，191人在疗程结束后血液中检测不出丙肝病毒，治愈率达91.8％；而接受24周治疗的172名患者中，165人的血液中检测不出丙肝病毒，治愈率达到95.9％。 研究人员还表示，这种新药的药物耐受性也比较好，这对于患有肝硬化的丙肝患者来说也是个好消息。研究人员预计，此药有望在今年年底或2015年初进行市场化生产。

蛋白质纯化及复性 重组蛋白在大肠杆菌（E. coli）高效表达时，往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体，即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出包涵体，采用高浓度变性剂（如7.0mol/L盐酸胍、8.0mol/L脲）溶解包涵体，然后除去变性剂或降低变性剂的浓度，使包涵体蛋白得以复性，最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白的复性和纯化是整个过程中的核心。 目前重组蛋白生产中普遍存在的问题是：（1）复性效率低。传统的复性方法稀释法和透析法。稀释复性法对样品几十倍，甚至上百倍的稀释会使样品的体积急剧增大，给后续的分离纯化带来很大的困难，而且复性过程中需要较大的复性容器。透析法耗时较长，而且要多次更换透析溶液。这两种方法的共同缺点是蛋白质在复性过程中会发生聚集而产生大量沉淀，复性效率低，通常蛋白质的活性回收率只有5~20%，而且复性后的蛋白质溶液中含有大量的杂蛋白，需要进行进一步的分离纯化。（2）工艺路线烦琐，生产周期长。在传统的重组蛋白质分离纯化工艺中，大多采用经典的软凝胶分离介质，由于这种介质的颗粒较大，分离效率较差，因此常常需要采用多种不同模式的色谱操作联用对目标蛋白质进行纯化，才能得到纯度符合一定标准的目标蛋白质。另外，这种色谱介质的耐压性很差，只能在流速较低的情况下进行操作，分离纯化时间较长。分离纯化步骤多和分离时间长使得蛋白质的质量回收率和活性回收率很低。而且在传统的重组蛋白质生产工艺中，蛋白质的复性和纯化是生产过程中两个独立的单元操作，也在很大程度上制约着生产效率。（3）生产成本高，设备投资大。由于复性和分离纯化分别单独进行，而且分离纯化步骤多，每一步都需要有与之配套的设备，致使设备投资大，生产成本高。随着生产规模的增加，这种弊端会愈来愈严重。 1991年耿信笃教授首先将高效疏水相互作用色谱(HPHIC)用于变性蛋白的复性，很好的解决了上述问题，现已成功用于重组人干扰素-g(rhIFN-g)、重组人干扰素-a(rhIFN-a)、人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)、重组人胰岛素原(proinsulin)、重组牛朊病毒(prion)等重组蛋白以及溶菌酶和核搪核酸酶等标准模型蛋白的复性与同时纯化中。目前，排阻色谱法、离子交换色谱法和亲合色谱法也已用于蛋白质的复性和同时纯化中。与传统的稀释法及透析法比较，用色谱法进行蛋白复性的优点是：①在进样后可很快除去变性剂；②由于色谱固定相对变性蛋白质的吸附，可明显地减少、甚至完全消除复性过程中蛋白质聚集体和沉淀的产生，从而提高蛋白质复性的质量和活性回收率；③在蛋白质复性的同时可使目标蛋白质与杂蛋白分离以达到纯化的目的，使复性和纯化同时进行；④便于回收变性剂，以降低废水处理成本。简言之，色谱法复性可以提高蛋白质的活性和质量回收率，将蛋白复性和纯化集成在一步操作完成，缩短了操作步骤和生产时间，减少了设备投资，使生产成本大大降低，已经引起了全世界范围内许多生化研究者和重组蛋白药物生产厂家的关注。由于高效液相色谱（HPLC）分离效率高，往往在一步操作中便可得到纯度符合要求的蛋白质，而且分离速度快，在应用方面具有更大的优势。

多方求助无果，希望有高人指点。急急我们实验室在做重组人复合α干扰素（cIFN）的聚合与降解研究。cIFN单体中有两条分子内二硫键，它们在巯基乙醇作用下可以被还原打开，并且在空气中会形成分子间二硫键，进而引起cIFN聚合。再向这些聚合体中添加过量巯基乙醇后绝大多数的聚合体都被离解成单体，但是通过还原SDS-PAGE仍可以看到有微量的二聚体。理论上还原条件下二硫键是不存在的，所以我们推测这个二聚体应该是其他化学键引起的。我想知道的是：1、蛋白质除了二硫键是否还有其他的化学键可以引起蛋白质共价聚合体。2、用什么方法可以鉴定蛋白质聚合体中单体间的化学键？[em0812][em0812][em0811][em0811][em0811]

[font=宋体][font=宋体]重组蛋白是由操作基因[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]重组基因编码的蛋白，由特异性重组表达系统生产。重组基因是一种新的遗传组合，其中插入了来自不同分子或来自其他物种的一个或多个[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]片段或基因。与天然蛋白相比，重组蛋白可以相对轻松地实现大量生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白在细胞因子和生长因子的研究、酶和激酶的研究以及补体系统功能等生物过程方面发挥着重要作用。此外，重组蛋白被称为高效药物，不会产生脱靶副作用，比小分子药物的开发时间更短。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]下面是关于重组蛋白资源常见问题解析：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白为什么要冻干？冻干对蛋白的影响有哪些？[/font][/font][font=宋体]蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂？一般冻干保护剂有哪几种？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加[/font][font=Calibri]8%[/font][font=宋体]（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集；甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂，可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]温馨提示：对于大多数蛋白，重悬后在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃仅能短期保存[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]约[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。如想长期保存，请先配制成稀释液[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]其中必须含有载体蛋白，如[/font][font=Calibri]0.1%BSA[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]5%HSA[/font][font=宋体]，或[/font][font=Calibri]10%FBS)[/font][font=宋体]，然后分装冻存于[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃或[/font][font=Calibri]-80[/font][font=宋体]℃。一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]如何重构冻干粉？[/font][/font][font=宋体]请查看您的货物随附的分析证书以获取有关重构的确切说明，因为并非所有产品都在相同条件下重构。一般来说，我们建议使用无菌水进行复溶。将推荐体积的无菌水加入小瓶中，轻轻摇晃以完全溶解蛋白质。不要涡旋。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]为什么我的管内几乎看不见蛋白产品？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如牛血清白蛋白[/font][font=Calibri](BSA)[/font][font=宋体]，人血清白蛋白[/font][font=Calibri](HSA)[/font][font=宋体]和蔗糖等，并以最低含盐量的溶液进行冻干时，常常不能形成白色网架结构，而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]应如何确定细胞因子的种属交叉活性？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1)[/font][font=宋体]除少数例外，大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。[/font][font=Calibri]2)[/font][font=宋体]许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞，但比活性可能低于对应的人类细胞因子。[/font][font=Calibri]3)IL-7[/font][font=宋体]等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。[/font][font=Calibri]4)[/font][font=宋体]干扰素，[/font][font=Calibri]GM-CSF,IL-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]等细胞因子种属特异，对非同源细胞几乎没有活性。[/font][font=Calibri]5)[/font][font=宋体]相反，成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGFs)[/font][font=宋体]和神经营养素[/font][font=Calibri](neurotrophins)[/font][font=宋体]高度保守，在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]什么是载体蛋白？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]载体蛋白如[/font][font=Calibri]HSA[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]BSA[/font][font=宋体]用于提高重组蛋白的稳定性，并有助于避免产品粘在小瓶壁上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]我应该如何储存重组蛋白？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]对于长期储存，蛋白质溶液应与载体蛋白（例如[/font][font=Calibri]0.1%BSA[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]0.1%HSA[/font][font=宋体]）分装保存，并在[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]下冷冻保存。请记住，每个冷冻[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]解冻循环都可能导致蛋白质变性。除非分析证书上另有说明，否则大多数重组蛋白的保质期为一年。如果将它们保存在分析证书上所述的最佳存储条件下，则提供此保证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]如何确定重组蛋白的数量？为什么我的检测产生的蛋白质数量与您的结果不同？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]我们通过[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]等方法确定重组蛋白的数量。不同的测定产生不同的量化结果。有时，如果您进行不同的检测，差异可能会很大。蛋白质也有可能在储存过程中形成聚集体，在重组和离心后导致损失。我们对每批产品进行质量控制测试，但是，同一批次中的一些小瓶可能与其他小瓶不同（这种情况很少发生）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]9.[/font][font=宋体]如何区分重组蛋白、融合蛋白和天然蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白是利用基因工程技术产生的，通常是由转基因动物的乳腺产生，其作为生物制药在医学领域中作用显著。利用基因工程技术，可以使哺乳动物本身变成[/font][font=宋体]“批量生产药物的工厂”。方法：是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品，因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白又称为[/font][font=宋体]“标签蛋白”，常用的标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]标签。融合蛋白是通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连，通过这种方式表达出来的蛋白质，就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]天然蛋白质是在自然界中存在的，不经过人工的任何修饰或加工，比如大豆中的蛋白质和病毒表面的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白资源[/b][/url]详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font]

2016年9月9日，江苏省药品采购中心公布了2015年江苏省药品集中采购申报资质审核情况，共有28654个药品厂家品规参与招标，其中31%是低价药。28654个药品厂家品规属于6177个通用名，这从侧面反映了随着药品采购招标的政策推进，医院在销常见的通用名有可能缩减到10000个以下。保护期内的专利产品有65个，其中国内生产厂家的产品有16个，江苏恒瑞医药股份有限公司和北京凯因科技股份有限公司各有2个产品在专利保护期内。专利已过期的产品共466个。表1 在专利保护期的国内生产厂家产品药品名称生产企业盐酸安妥沙星片(薄膜衣)安徽环球药业股份有限公司重组人干扰素α2b阴道泡腾片北京凯因科技股份有限公司重组人干扰素α2b注射液北京凯因科技股份有限公司盐酸埃克替尼片(薄膜衣)贝达药业股份有限公司康柏西普眼用注射液成都康弘生物科技有限公司帕拉米韦氯化钠注射液广州南新制药有限公司复方米非司酮片湖北葛店人福药业有限责任公司艾瑞昔布片(薄膜衣)江苏恒瑞医药股份有限公司甲磺酸阿帕替尼片(薄膜衣)江苏恒瑞医药股份有限公司注射用美洛西林钠舒巴坦钠山西仟源医药集团股份有限公司重组人5型腺病毒注射液上海三维生物技术有限公司阿德福韦酯片上海益生源药业有限公司马来酸依那普利叶酸片深圳奥萨制药有限公司阿利沙坦酯片（薄膜衣）深圳信立泰药业股份有限公司复方福尔可定糖浆宜昌人福药业有限责任公司阿德福韦酯胶囊正大天晴药业集团股份有限公司数据来源：江苏省药品采购中心 识敏信息整理江苏省本次还公布了首仿药名单701个，识敏信息发现目前江苏报名的产品中，首仿药最多的厂家是江苏恒瑞医药股份有限公司，其次是江苏豪森药业股份有限公司和齐鲁制药有限公司。若以注射剂统计，江苏恒瑞依然以15个首仿注射剂排名第一，其次是江苏豪森的7个，海正辉瑞以6个排名第三。表2 首仿药品数量厂家排名生产企业首仿药品数量江苏恒瑞医药股份有限公司23江苏豪森药业股份有限公司15齐鲁制药有限公司15正大天晴药业集团股份有限公司13丽珠集团丽珠制药厂12重庆华邦制药有限公司11珠海联邦制药股份有限公司中山分公司9海正辉瑞制药有限公司8山东罗欣药业集团股份有限公司8四川科伦药业股份有限公司8数据来源：江苏省药品采购中心 识敏信息整理江苏省认可的国家中药保护处方有23个，云南白药集团股份有限公司所拥有的云南白药系列共有3个进入国家中药保护处方。云南白药是拥有最多国家中药保护处方的生产厂家。有3个中药注射剂属于国家中药保护处方，分别是贵州益佰制药股份有限公司的艾迪注射液，江西青峰药业有限公司的喜炎平注射液和天津红日药业股份有限公司的血必净注射液。表3 国家中药保密处方的厂家产品生产企业药品名称东阿阿胶股份有限公司复方阿胶浆福建众安药业有限公司安多霖胶囊甘肃天水岐黄药业有限责任公司苁蓉通便口服液广州白云山奇星药业有限公司华佗再造丸(浓缩水蜜丸)贵州益佰制药股份有限公司艾迪注射液国药集团同济堂（贵州）制药有限公司仙灵骨葆胶囊吉泰安（四川）药业有限公司心元胶囊[/a

[font=宋体][b]重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白的区别：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白是利用基因工程技术产生的，通常是由转基因动物的乳腺产生，其作为生物制药在医学领域中作用显著。利用基因工程技术，可以使哺乳动物本身变成[/font][font=宋体]“批量生产药物的工厂”。方法：是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品，因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白又称为[/font][font=宋体]“标签蛋白”，常用的标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]标签。融合蛋白是通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连，通过这种方式表达出来的蛋白质，就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]天然蛋白质是在自然界中存在的，不经过人工的任何修饰或加工，比如大豆中的蛋白质和病毒表面的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组蛋白常见问题解析：[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白为什么要冻干？冻干对蛋白的影响有哪些？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂？一般冻干保护剂有哪几种？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加[/font][font=Calibri]8%[/font][font=宋体]（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集；甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂，可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]温馨提示：对于大多数蛋白，重悬后在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃仅能短期保存[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]约[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。如想长期保存，请先配制成稀释液[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]其中必须含有载体蛋白，如[/font][font=Calibri]0.1% BSA[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]5%HSA[/font][font=宋体]，或[/font][font=Calibri]10% FBS)[/font][font=宋体]，然后分装冻存于[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃或[/font][font=Calibri]-80[/font][font=宋体]℃。一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]如何重构冻干粉？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]请查看您的货物随附的分析证书以获取有关重构的确切说明，因为并非所有产品都在相同条件下重构。一般来说，我们建议使用无菌水进行复溶。将推荐体积的无菌水加入小瓶中，轻轻摇晃以完全溶解蛋白质。不要涡旋。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]为什么我的管内几乎看不见蛋白产品？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如牛血清白蛋白[/font][font=Calibri](BSA)[/font][font=宋体]，人血清白蛋白[/font][font=Calibri](HSA)[/font][font=宋体]和蔗糖等，并以最低含盐量的溶液进行冻干时，常常不能形成白色网架结构，而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]应如何确定细胞因子的种属交叉活性？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]除少数例外，大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。[/font][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞，但比活性可能低于对应的人类细胞因子。 [/font][font=Calibri]3) IL-7[/font][font=宋体]等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。[/font][font=Calibri]4) [/font][font=宋体]干扰素，[/font][font=Calibri]GM-CSF, IL-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]等细胞因子种属特异，对非同源细胞几乎没有活性。[/font][font=Calibri]5) [/font][font=宋体]相反，成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGFs)[/font][font=宋体]和神经营养素[/font][font=Calibri](neurotrophins)[/font][font=宋体]高度保守，在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]什么是载体蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]载体蛋白如[/font] [font=Calibri]HSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]用于提高重组蛋白的稳定性，并有助于避免产品粘在小瓶壁上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]我应该如何储存重组蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于长期储存，蛋白质溶液应与载体蛋白（例如[/font] [font=Calibri]0.1% BSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]0.1% HSA[/font][font=宋体]）分装保存，并在 [/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下冷冻保存。请记住，每个冷冻[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]解冻循环都可能导致蛋白质变性。除非分析证书上另有说明，否则大多数重组蛋白的保质期为一年。如果将它们保存在分析证书上所述的最佳存储条件下，则提供此保证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]如何确定重组蛋白的数量？为什么我的检测产生的蛋白质数量与您的结果不同？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]我们通过[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]等方法确定重组蛋白的数量。不同的测定产生不同的量化结果。有时，如果您进行不同的检测，差异可能会很大。蛋白质也有可能在储存过程中形成聚集体，在重组和离心后导致损失。我们对每批产品进行质量控制测试，但是，同一批次中的一些小瓶可能与其他小瓶不同（这种情况很少发生）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白资源[/b][/url]详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font]

五谷道场破产重组案尘埃落定 中粮集团入主五谷道场 ２月１２日上午９时许，主审五谷道场破产重整一案的北京房山区法院民二庭庭长纪红勇宣布法院最终裁定，批准五谷道场破产重整方案。该方案规定，五谷道场原股东将其所持有的五谷道场公司的股份全部无偿让渡给重组方，重组投资方承诺出资１．０９亿元专门用于五谷道场清偿债务及支付破产费用，重组后在同等条件下，优先与原债权人进行合作，在首次招工时优先录用公司原职工。作为重组方代表的中粮集团总裁助理曲喆当庭便向五谷道场破产重整案件管理人支付了１．０９亿元的支票。 据资料显示，中旺集团创始人王中旺１９９９年在河北省邢台隆尧县乡下出资１７０万元成立了一家小型方便面企业，并且迅速发展。为加速发展，王中旺上马五谷道场“非油炸”方便面项目。２００４年１０月１０日，北京五谷道场食品技术开发有限公司正式成立，注册资本为５１００万元，该公司月产值曾高达６０００万元。 但由于企业扩张和广告支出及研发新品等各种费用的集中使用，五谷道场出现了供应商货款给付不及时，以及无法给经销商正常发货、拖欠广告费和员工工资等问题，并且引发诸多官司。 五谷道场的迅速崛起和衰败引起了社会各界的密切关注，并引发各种猜测。２００８年１０月１６日，五谷道场向房山法院正式提交了一份破产重整申请书，这份申请书几乎回答了大家对五谷的疑问，也道出了五谷走向衰败的真正原因。 申请书中称，因原材料大幅涨价，方便面行业整体效益下滑；加之公司创立之初，前期费用和广告宣传投入过大等因素，造成公司全面亏损。随之而来的负面报道，导致五谷道场在２００７年１０月、１１月全面爆发财务危机。此后公司经营状况持续恶化，劳动争议、法律诉讼不断增加。 经过会计师事务所审计，截止到２００８年１０月，五谷道场负债总额为６．２亿元，严重资不抵债。然而，五谷道场认为公司仍有继续发展的价值和必要性。所以，向房山法院提出重整申请。 房山区法院受理此案后，于２００８年１２月２６日依法召开第一次债权人会议，向债权人通报了五谷道场的财产、财务情况，审核了相关债权。最终确认五谷道场债权人人数为６２９人，债权总金额为５．２９亿元。２００９年１月１６日，房山区法院召开第二次债权人会议，宣布了重整计划方案，并就该计划草案进行投票。最终，五谷道场破产重整计划草案得到了全体出资人和债权人的通过。２月１２日，房山区法院依法裁定批准了重整计划草案。至此，五谷道场破产重组迈出了决定性的一步。 房山区法院副院长张仲侠表示，五谷道场重组成功将盘活该公司存量资产，解决数千人就业；同时其３００多家供应商和销售商可以继续与之合作。而对所有债权人来说，破产重组成功将实现清偿比例高、实际清偿率大、清偿期限短的效果，有利于维护经济秩序和金融安全。 中粮集团总裁助理曲喆在庭审后接受记者采访时表示，五谷道场的健康理念与中粮集团的理念向吻合，中粮集团一直希望能够重组成功，今天得到这个结果非常满意。重组五谷道场后，将把方便食品业务纳入到中粮集团食品管理架构中，并且希望能够尽快将方便食品业务注入到中粮集团在香港上市公司的业务中。

据新华社华盛顿5月24日电 美国加州大学戴维斯分校的研究人员日前报告说，他们开发出一种可检测潜伏性结核病的微流控芯片，其优点是成本更低且更快速可靠。 目前对潜伏性结核病检测主要基于伽马干扰素，后者是免疫系统细胞制造的一种抗病化学物质。目前市面上常用的检测方法要求将送检者的血液样品交给实验室，而且样品通常只能使用一次。 研究人员将能与伽马干扰素结合的一小段单链DNA片段涂在一片金晶片上，然后将这个晶片植入芯片中，后者含有为血液样本准备的微小通道。如果伽马干扰素存在于血样中，它就会与DNA结合，并触发一个可被医生读取的电信号。因此，如果芯片读出高浓度的伽马干扰素，送检者即可被确诊为潜伏性结核病患者。 研究人员说，已就这一技术申请专利，并希望美国食品和药物管理局能批准这一新的检测技术投入使用。（记者任海军）

[font=宋体][font=宋体]重组蛋白（[/font][font=Calibri]recombinant protein[/font][font=宋体]）是指应用重组 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]或重组 [/font][font=Calibri]RNA [/font][font=宋体]技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因（[/font][font=Calibri]gene of interest[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]GOI[/font][font=宋体]），连接到适合的表达载体，导入到特定的宿主细胞，利用宿主细胞的遗传系统，表达出有功能的蛋白质分子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][b]当前重组蛋白的生产主要有四大系统[/b]：原核表达系统：最常用的大肠杆菌蛋白表达，真核表达系统如酵母，哺乳动物细胞蛋白表达（常用的细胞[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]）及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用转基因动物的乳腺或者植物产生，产生的重组蛋白作为生物制药的产物，在医学中作用显著。利用基因工程技术，可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例：其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品，因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。科学家已在牛和山羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗胰蛋白酶等重要的医药产品。[/font][/font][font=宋体]重组蛋白在制药工业上主要是指表达获得的细胞因子、凝血因子或者人工设计的蛋白分子。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前，重组蛋白试剂已被广泛应用于生物药、细胞免疫治疗及诊断试剂的研发和生产中。其中重组蛋白药物是生物药物的重要组成成分，常被被广泛应用于医疗领域[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]包括肿瘤治疗、免疫调节、神经保护、结缔组织疾病、肾病治疗等。包括细胞因子类、抗体治疗性疫苗、激素及酶等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州致力于提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白生产[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-expression][b]重组蛋白表达[/b][/url]及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production-systems][b]重组蛋白系统[/b][/url]详情的咨询与解决方案。为实验中特定的应用选择正确的表达系统是成功的关键所在。在选择表达系统时，蛋白溶解度、功能、纯化速度和产量通常是必须考虑的重要因素。此外，每个表达系统都有其独特的优势和挑战，这一点在选择时也需着重考虑。我们的专业团队将为您提供个性化的建议，以帮助您根据实验需求选择最合适的表达系统。[/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][font=Calibri] [/font]

维生素C在大家心目中，应该是常见化学试剂，也是我们在医院常用的药。但它还有抗氧化、防癌、防贫血等，希望大家平时支持吃点，健康我们化学人！把相关功效摘抄，贴在下面：胶原蛋白的合成　　胶原蛋白的合成需要维生素C参加，所以VC缺乏 食用富含维生素C的食物可防晒，胶原蛋白不能正常合成，导致细胞连接障碍。人体由细胞组成，细胞靠细胞间质把它们联系起来，细胞间质的关键成分是胶原蛋白。胶原蛋白占身体蛋白质的1/3，生成结缔组织，构成身体骨架。如骨骼、血管、韧带等，决定了皮肤的弹性，保护大脑，并且有助于人体创伤的愈合。 治疗坏血病　　血管壁的强度和VC有很大关系。微血管是所有血管中最细小的，管壁可能只有一个细胞的厚度，其强度、弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定。当体内VC不足，微血管容易破裂，血液流到邻近组织。这种情况在皮肤表面发生，则产生淤血、紫癍；在体内发生则引起疼痛和关节涨痛。严重情况在胃、肠道、鼻、肾脏及骨膜下面均可有出血现象，乃至死亡。 预防牙龈萎缩、出血　　健康的牙床紧紧包住每一颗牙齿。牙龈是软组织，当缺乏蛋白质、钙、VC时易产生牙龈萎缩、出血。 　　维生素C 略带酸性，作为微量营养素被摄入体内，经体内溶解、消化，其酸碱性对人体的影响是微乎其微的，所以不必过份在意它的酸碱性。安利维生素C有助巩固细胞组织，有助于胶原蛋白的合成，能强健骨骼及牙齿，还可预防牙龈出血，长期服用对牙齿、牙龈无害而且有益。 预防动脉硬化　　可促进胆固醇的排泄，防止胆固醇在动脉内壁沉积，甚至可以使沉积的粥样斑块溶解。 抗氧化剂　　可以保护其它抗氧化剂，如维生素A、维生素E、不饱和脂肪酸，防止自由基对人体的伤害。治疗贫血　　使难以吸收利用的三价铁还原成二价铁，促进肠道对铁的吸收，提高肝脏对铁的利用率，有助于治疗缺铁性贫血。 防癌　　丰富的胶原蛋白有助于防止癌细胞的扩散；VC的抗氧化作用可以抵御自由基对细胞的伤害防止细胞的变异；阻断亚硝酸盐和仲胺形成强致癌物亚硝胺。曾有人对因癌症死亡病人解剖发现病人体内的VC含量几乎为零。 保护细胞、解毒，保护肝脏　　在人的生命活动中，保证细胞的完整性和代谢的正常进行至关重要。为此，谷胱甘肽和酶起着重要作用。 　　谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成的短肽，在体内有氧化还原作用。它有两种存在形式，即氧化型和还原型，还原型对保证细胞膜的完整性起重要作用。VC是一种强抗氧化剂，其本身被氧化，而使氧化型谷胱甘肽还原为还原型谷胱甘肽，从而发挥抗氧化作用。 　　酶是生化反应的催化剂，有些酶需要有自由的巯基（-SH）才能保持活性。VC能够使双硫键（-S-S）还原为-SH，从而提高相关酶的活性，发挥抗氧化的作用。 　　从以上可知，只要VC充足，则VC、谷胱甘肽、-SH形成有力的抗氧化组合拳，清除自由基，阻止脂类过氧化及某些化学物质的毒害作用，保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢。 提高人体的免疫力　　白细胞含有丰富的VC，当机体感染时白细胞内的VC急剧减少。VC可增强中性粒细胞的趋化性和变形能力，提高杀菌能力。 　　促进淋巴母细胞的生成，提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭。 　　参与免疫球蛋白的合成。 　　提高CI补体酯酶活性，增加补体CI的产生。 　　促进干扰素的产生，干扰病毒mRNA的转录，抑制病毒的增生。 提高机体的应急能力　　人体受到异常的刺激，如剧痛、寒冷、缺氧、精神强刺激，会引发抵御异常刺激的紧张状态。该状态伴有一系列身体，包括交感神经兴奋、肾上腺髓质和皮质激素分泌增多。肾上腺髓质所分泌的肾上腺素和去甲肾上腺素是有酪氨酸转化而来，在此过程需要VC的参与。

[font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白[/b][/url]（[/font][font=Calibri]recombinant protein[/font][font=宋体]）技术原理是现代生物技术的核心之一，它通过将目的基因插入到表达载体中，在宿主细胞中进行表达，从而获得所需的重组蛋白。这一技术的关键是选择合适的表达载体和宿主细胞，以确保目的基因的正确表达和蛋白质的正确折叠。重组蛋白技术的应用范围非常广泛，包括药物研发、疫苗生产、诊断试剂、生物治疗等领域。通过重组蛋白技术，我们可以快速、高效地获得具有特定结构和功能的蛋白质，为科学研究、医学和工业应用提供重要的工具和资源。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]构建重组蛋白的技术路线主要包括以下几个步骤：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①目的基因的获取：根据所需蛋白质的氨基酸序列，设计并合成相应的基因片段，或者从基因文库中筛选出相应的基因。[/font][font=宋体]②表达载体的构建：将目的基因插入到表达载体中，常用的表达载体包括质粒、病毒等，它们可以在宿主细胞中进行复制和表达。[/font][font=宋体]③宿主细胞的选择：选择适合的宿主细胞，如细菌、酵母、昆虫、哺乳动物等，以确保目的基因的正确表达和蛋白质的正确折叠。[/font][font=宋体]④重组蛋白的表达：将构建好的表达载体转入宿主细胞，进行培养或诱导，使目的基因在细胞内表达，产生重组蛋白。[/font][font=宋体]⑤重组蛋白的纯化：通过各种分离纯化技术，如离心、过滤、沉淀、色谱等，将重组蛋白从细胞中提取出来，并进行纯化和精制。[/font][font=宋体]⑥重组蛋白的鉴定：通过各种检测技术，如质谱、免疫学检测等，对重组蛋白进行鉴定和质量控制。[/font][font=宋体]通过以上技术路线，可以构建出具有特定结构和功能的重组蛋白，为科学研究、医学和工业应用提供重要的工具和资源。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]重组蛋白技术应用：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]一、药物研发与生产：[/font][font=宋体]靶点验证：在药物研发初期，可以使用重组蛋白来验证药物作用的靶点。[/font][font=宋体]抗体药物：利用重组蛋白技术可以生产人源化抗体，用于癌症治疗、自身免疫性疾病治疗等。[/font][font=宋体]直接药物：某些重组蛋白本身就是药物，如胰岛素、生长激素等。[/font][font=宋体]二、疫苗开发：[/font][font=宋体]基因工程疫苗：使用重组蛋白技术生产疫苗，例如针对乙肝、流感等疾病的疫苗。[/font][font=宋体]三、诊断试剂：[/font][font=宋体][font=宋体]免疫检测：重组蛋白可以用作抗原或抗体，用于各种免疫检测技术，如[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、免疫荧光等。[/font][/font][font=宋体]四、生物治疗：[/font][font=宋体]细胞因子：重组蛋白技术可以生产各种细胞因子，用于促进细胞生长、分化、凋亡等。[/font][font=宋体]五、基础研究：[/font][font=宋体]结构生物学：利用重组蛋白研究蛋白质的结构与功能关系。[/font][font=宋体]信号转导研究：通过重组蛋白研究细胞内信号转导过程。[/font][font=宋体]六、其他应用：[/font][font=宋体]酶工程：生产具有特定性质的酶。[/font][font=宋体]七、农业应用：如生产抗虫作物或具有特定性状的动物。[/font][font=宋体]通过以上几个方面，重组蛋白技术在生物医药领域中发挥着越来越重要的作用，为疾病治疗、疫苗开发、基础研究等提供了有力的技术支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白纯化服务：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多重组蛋白详情可以以关注义翘神州：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

[font='calibri'][size=13px]重组抗体的制备方法[/size][/font][font='calibri'][size=13px]及过程[/size][/font][font='calibri'][size=13px]分享[/size][/font]重组抗体，也称为基因工程抗体，是指通过DNA重组技术将抗体相应的基因序列根据需要进行改造和重组，并构建在质粒上，再通过蛋白外源表达技术将构建好的质粒转染/转化入适合的宿主细胞表达获得的抗体。重组抗体很好的解决了动物源抗体引起的人体排斥反应，使得抗体实现人源化，使抗体的效能更为完善抗体生产的三个阶段抗体广泛应用于疾病的诊断和治疗，是研究和应用领域最有价值的研究对象之一。抗体制备技术经历了三个阶段，第一阶段，通过抗原免疫高等动物，从动物的血清中纯化获得抗体，该抗体为多克隆抗体；第二阶段，杂交瘤技术问世，通过将无限增殖的骨髓瘤细胞与产生抗体的B淋巴细胞融合生产出针对单一抗原决定簇的单克隆抗体；第三阶段，通过基因工程技术改造动物生产的单克隆抗体的基因序列，使单抗性能更加符合应用需要，并能通过大规模细胞培养获得，该阶段抗体为重组抗体。重组抗体有哪些类型？重组抗体分为五大类：嵌合抗体、人源化抗体、全人源化抗体、小分子抗体、双特异性抗体嵌合抗体抗体的恒定区和可变区分别来源于不同的物种，常见的嵌合抗体是将动物源抗体的可变区与人源抗体的恒定区结合。嵌合抗体的特点：1. 抗体可变区为动物源区域，保留了抗体对抗原的特异性和亲和性 2. 抗体有近70%的部分是人源的，很大程度上降低了抗体的异源性，其中人源性Fc片段能有效介导ADCC（抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应）和CDC（补体依赖的淋巴细胞毒效应）作用；3. 可以根据需要选择不同的抗体类型、亚型、大小、修饰位点等；4. 通过成熟的质粒构建体系及蛋白表达平台，可高效大量的获得目的抗体。嵌合抗体的生产方式：①免疫动物，获得杂交瘤细胞②杂交瘤细胞测序，获得抗体可变区序列③选择人源恒定去亚型④构建重组表达质粒⑤转入合适的宿主细胞表达⑥抗体纯化及检测人源化抗体将人抗体的CDR区域替换成动物源单抗的CDR，也称CDR嫁接抗体。CDR：即互补决定区（complementarity－determining regions），抗体每个可变区含有三个氨基酸顺序超变区，这些超变区是抗原的结合位点，与抗原决定簇结构互补，被称为CDR。可变区里其他氨基酸作为骨架支持部分，称为框架残基（Framework Residue）。人源化抗体特点：1. 人源化抗体在嵌合抗体的基础上将抗体中人源性区域进一步扩大，人源化比例可达80%-90%，使得抗体在应用过程中降低人体的异源排斥反应；2. CDR与抗原结合过程受到FR区域的影响，动物源CDR与人源Fr结合，可能会改变抗体原有CDR的空间结构，进而降低重组抗体与抗原的亲和力。在设计人源化抗体时，可将人源FR区域的关键性氨基酸残基更改为动物源FR，以减少对CDR结构域的影响。人源化抗体生产方式：重组抗体的类型及生产流程全人源化抗体采用基因敲出技术将动物抗体基因敲除，造成动物抗体基因缺失，将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术，移至抗体基因缺失动物中，通过动物表达人类抗体，达到抗体完全人源化。采用动物基因敲除和插入的方式获得抗体，操作难度大，成本高，并且依然存在人体排斥反应，噬菌体展示技术应运而生。将人抗体的可变区基因插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，人抗体可变区随噬菌体外壳蛋白的表达而表达，同时，随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面。再通过展示库筛选和细胞表达获得全人源抗体。重组抗体的载体如何选择？全人源化抗体特点:全人源化抗体对人体的免疫原性极小，是抗体药研发最重要的对象，在疾病和癌症的治疗中具备广泛的应用，非常具备研究和生产价值。全人源化抗体生产方式:重组抗体的类型及生产流程小分子抗体小分子抗体顾名思义是分子量较小的抗体，一般为完整Ig的一部分，现有的小分子抗体有Fab、Fv、 scFv、SdAb、微抗体、纳米抗体。重组抗体的类型及生产流程小分子抗体特点:小分子抗体分子量大小只有完整Ig大小的1/12~1/2，穿透性强，同时具备抗原亲和力，并且可通过基因工程系统来操作编辑，通过各种重组蛋白表达系统来大量生产。小分子抗体生产方式:重组抗体的类型及生产流程双特异性抗体具备两种特异性抗原结合位点的抗体，可同时与两种抗原结合，例如可同时结合靶细胞（癌症细胞）和效应细胞（T细胞），定向介导效应细胞对靶细胞的杀伤作用，是抗体药物领域的重要研究对象，在肿瘤治疗方面具有卓越的成效。双特异性抗体特点:1. 拥有两种特异性抗原结合位点，作为抗体药物，是治疗肿瘤的“抗体炸弹”，比普通的抗体药具有更强的导向性、更强的治疗效果，是最为理想的肿瘤治疗药物；2. 自然状态不存在，只能通过人工制备获得。双特异性抗体生产方式:[align=left][font='calibri'][size=13px]义翘神州推出[/size][/font][font='calibri'][size=13px]大规模重组抗体生产服务[/size][/font][font='calibri'][size=13px]，服务周期大概在4-10周；[/size][/font][/align][size=13px]服务内容[/size][size=13px]可以查看：[/size][url=https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service][size=13px]https://cn.sinobiological.com/services/large-scale-antibody-production-service[/size][/url][size=13px] 里面有更详尽的内容服务。[/size]

高效凝胶色谱法测定重组人白介素-l1的含量 来自《东方医药网》 摘要 目的：建立重组人白介素-11的高效凝胶色谱含量测定方法。方法：采用外标法，色谱柱：Biosep SEC-S2000 (300mm×7.8 mm)，流动相：0.2mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 6.8)，流速：0.5 mL/min，检测渡长：280nm。结果：线性范围：2.5～30μg(r=0.9990)，平均回收率101.1％～101.9％(RSD 1.8％，n=9) 精密度：RSD= 0.75％( n=5)；最低检测限0.15μg。结论：该法用于测定重组人白介素-11的含量，简便，准确，重现性好。 关键词：重组人白介素-11；高效凝胶色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=21282]高效凝胶色谱法测定重组人白介素-l1的含量[/url]