人血清蛋白与干扰素

各位大神，最近在册牛血清蛋白标准曲线，资料上显示说，牛血清蛋白与考马斯亮蓝结合之后在595 nm处显示最大吸收，可是为什么我用紫外扫谱发现在578 nm处才是最大吸收，但是测出来的不同浓度的吸光度线性关系也不好，排出紫外检测器的问题，到底是什么原因呢？？？？

【百度百科】牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。CAS：9048-46-8希望知道的板油介绍一下

用纯水配制了溶液，含有30mg/L的海藻酸钠，5mg/L的牛血清蛋白，5mg/L的富里酸。测定了TOC为10左右，放置了一天，TOC降低1，再放一天，TOC又降低1，放置几天后，TOC值连续降低，想问问这个溶液中是哪种物质会引起TOC的改变?是不是因为水中滋生微生物导致水质变差，但是为什么TOC会升高呢？

甲醇沉淀法除血清中蛋白时，加入甲醇的比例是多少．多谢指教！[em62]

【序号】：3【作者】： 张立彦焦文娟包丽坤【题名】：三种离子物质对壳聚糖/果胶聚电解质复合物牛血清蛋白释放特性的影响【期刊】：现代食品科技. 【年、卷、期、起止页码】：2015,31(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2015&filename=GZSP201501008&uniplatform=NZKPT&v=ivma19ZMvHJaZIHyKyZR30CRPGu_zXf0CQAbNA5bBl48WAinaKwsKcGGTr_Z_rV2

[font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin[/font][font=宋体]，简称[/font][font=Calibri]rHSA[/font][font=宋体]）是一种通过基因工程技术合成的白蛋白。其结构和功能与天然人血清白蛋白相似，因此可以作为血浆替代物，适用于临床治疗、细胞培养和生物技术领域的研究等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]人血清白蛋白是一种由[/font][font=Calibri]585[/font][font=宋体]个氨基酸组成的单链蛋白质，分子量为[/font][font=Calibri]66.5kDa[/font][font=宋体]，含有[/font][font=Calibri]17[/font][font=宋体]个二硫键和一个自由半胱氨酸。人血清白蛋白的结构包括三个结构上相似的功能域，而每个功能域又可分为包含两个相似的α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]螺旋结构的亚域，形成了一个心型分子。[/font][/font][b][font=宋体]人血清白蛋白在人体内负责许多细胞功能，如：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]维持胶体渗透压，调节体液平衡[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]结合和运输脂肪酸，胆红素和药物等各种物质[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]通过清除自由基和活性氧作为抗氧化剂[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]调节血液的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值和缓冲能力[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]调节免疫反应和炎症[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]提供配体代谢修饰，使潜在的毒素无害等[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]人血清白蛋白的用途与重要性[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]人血清白蛋白在医学领域的应用广泛，涉及治疗多种疾病和病症。其用途包括但不限于：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]治疗多种疾病：血容量不足、休克、烧伤、手术失血、外伤、出血、体外循环、急性呼吸窘迫综合征等。[/font][font=宋体]支持肝功能：急性与慢性肝病的治疗中，人血清白蛋白有助于肝功能恢复。[/font][font=宋体]营养支持：为患者提供必要的营养。[/font][font=宋体]蛋白质与肽的半衰期延长：有助于药物研发中延长蛋白质和肽的活性时间。[/font][font=宋体]细胞培养中的应用：在细胞培养中，人血清白蛋白的作用包括限制细胞聚集、保护蛋白质免于降解、结合与运输代谢物以及增加疏水分子溶解度。它还能增强培养中细胞的生长和活力，提高重组蛋白的产量和质量。[/font][font=宋体]生物反应器中的用途：在生物反应器中，人血清白蛋白用于减轻物理冲击和剪切，保护细胞。[/font][font=宋体]全球需求增长：随着其在生物学领域的广泛应用，全球对人血清白蛋白的需求逐年增加。[/font][font=宋体]人血清白蛋白的供应挑战与重组人血清白蛋白的发展[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]由于人血清白蛋白的多种重要用途，其全球需求持续增长，但供应却面临挑战：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]供应有限：传统上，人血清白蛋白是通过人类血浆分馏生产的，受限于血浆供应。[/font][font=宋体]原材料的不一致性：这可能影响患者安全、治疗效果，并存在潜在的血液来源病原体污染风险。[/font][font=宋体][font=宋体]重组人血清白蛋白的兴起：鉴于上述挑战，科学家们努力开发重组人血清白蛋白（[/font][font=Calibri]Recombinant Human Serum Albumin, rHSA[/font][font=宋体]）。多个宿主生物（如大肠杆菌、酵母等）被尝试用于生产重组蛋白，最终基于毕赤酵母和水稻的表达系统成为主要选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service][b]重组蛋白表达纯化服务[/b][/url]，[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/recombinant-protein-expression-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-productio][b]重组蛋白生产[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

本法系依据干扰素可以保护人羊膜细胞(WISH)免受水泡性口炎病毒(VSV)破坏的作用，用结晶紫对存活的WISH细胞染色，于波长570nm处测定其吸光度，可得到干扰素对WISH细胞的保护效应曲线，以此测定干扰素生物学活性。试剂 (1)MEM或RPMI 1640 培养液取MEM或RPMI 1640培养基粉末1袋(规格为1L)，加水溶解并稀释至1000ml，加青霉素105IU和链霉素105IU，再加碳酸氢钠2.1g，溶解后，混匀，除菌过滤，4℃保存。(2)完全培养液量取新生牛血清10ml，加MEM或RPMI 1640培养液90ml。4℃保存。(3)测定培养液量取新生牛血清7ml，加MEM或RPMI 1640培养液93ml。4℃保存。(4)攻毒培养液量取新生牛血清3ml，加MEM或RPMI 1640培养液97ml。4℃保存。(5)消化液取乙二胺四乙酸二钠0.2g、氯化钠8.0g、氯化钾０.2g、磷酸氢二钠1.152g、磷酸二氢钾0.2g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。(6)染色液取结晶紫50mg，加无水乙醇20ml溶解后，加水稀释至100ml，即得。(7)脱色液取无水乙醇50ml、乙酸0.1ml，加水稀释至100ml。(8)PBS取氯化钠8.0g、氯化钾0.20g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃15分钟灭菌。标准品溶液的制备 取人干扰素生物学活性测定的国家标准品，按说明书复溶后，用测定培养液稀释至每1ml含1000IU。在96孔细胞培养板中，做4倍系列稀释，共8个稀释度，每个稀释度做2孔。在无菌条件下操作。

1、C反应蛋白概述 1930年Tillet和Francis在急性大叶性肺炎患者血清中发现一种物质，能在钙离子存在时与肺炎球菌C-多糖起沉淀反应，随后证实这种能与C-多糖反应的物质是一种蛋白质，因而将这种蛋白质命名为C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）。 CRP是机体受到微生物入侵或组织损伤等炎症性刺激时肝细胞合成的急性相蛋白（注：急性时相反应包括感染、炎症及创伤时某些血清蛋白浓度的变化，这些蛋白除CRP外，还包括血清淀粉样蛋白A、纤维蛋白原、触珠蛋白、α1酸性糖蛋白、铜蓝蛋白、α1抗胰蛋白酶等。其中CRP在健康人血清中浓度＜5mg/L，而在细菌感染或组织损伤时，浓度可升高上千倍，循环中的CRP半衰期为19小时，故被认为其最有价值），由五个相同的亚基依靠非共价键形成的环状五聚体，这一特征性结构使其归类于五聚素（一组具有免疫防御特性的钙结合蛋白）家族。CRP是机体非特异性免疫机制的一部分，它结合C-多糖，在Ca2+存在时可结合细胞膜上磷酸胆碱，可激活补体的经典途径，增强白细胞的吞噬作用，调节淋巴细胞或单核/巨噬系统功能，促进巨噬细胞组织因子的生成，在动脉粥样硬化斑块中也可检测到CRP。 人CRP主要生物学功能： 通过与配体（凋亡与坏死的细胞，或入侵的细菌、真菌、寄生虫等的磷酰胆碱）结合，激活补体和单核吞噬细胞系统，将载有配体的病理物质或病原体清除。 （1）识别外来物质，激活补体系统； （2）增强条理作用，增强吞噬细胞吞噬作用； （3）与血小板激活因子（RAF）结合，降低炎症反应； （4）与染色体结合，消除坏死组织里的细胞DNA。

近日，国际著名学术期刊《血液》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所分子风湿病学研究组的最新研究发现：来自于同一前体的miR-155和miR-155*协同调控浆细胞样树突状细胞（pDC）I型干扰素的产生。　　系统性红斑狼疮是一种以T细胞功能缺陷和B细胞过度活化及多种自身抗体产生为特点的自身免疫性疾病。已有的研究表明，I型干扰素的过度产生在系统性红斑狼疮的发病过程中起着十分重要的作用。它通过直接作用于T细胞和B细胞，促进自身免疫反应。因此，如何能够有效调控I型干扰素的产生，对于该自身免疫疾病的治疗有十分重要的意义。　　近年来，microRNA作为一种非编码RNA分子，被证明在免疫调节的各个方面均有很重要的作用。因此，在沈南教授的指导下，整合中国科学院上海生命科学研究院健康科学研究所的基础研究力量和上海交通大学附属仁济医院风湿科的临床优势，周海波和黄新芳等深入研究了microRNA 在I型干扰素主要产生细胞——浆细胞样树突状细胞（pDC）中的调控作用。　　该研究发现，pDC激活后伴随着大量I型干扰素的产生，miR-155*和miR-155分别在不同的时间被显著诱导。MiR-155*主要在早期被诱导，而miR-155则主要在刺激的后期被诱导。进一步研究表明，miR-155*通过靶向IRAKM，促进I型干扰素的产生，而miR-155通过靶向TAB2，抑制I型干扰素的产生。这些结果表明，它们在pDC活化的不同阶段协同发挥作用。此外，通过对miR-155和miR-155*产生机制的研究，发现pDC自身分泌的I型干扰素以及被激活的KHSRP蛋白可以在转录后水平反向调控miR-155和miR-155*的产生，这一结果解释了来自于同一前体的miR-155*和miR-155却能在不同的时间点被诱导的原因。　　该研究不仅揭示了来自于同一前体microRNA和microRNA*的产生，在同一刺激过程中可以被精确调控，从而使它们能够协同调控这一过程，而且阐明了新的有效调控I型干扰素产生的机制，为系统性红斑狼疮疾病的的治疗提供了新的理论依据和潜在靶点。　　该项工作得到国家科技部、国家自然科学基金和上海市科委的经费支持。

如果说一个人一次献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献的血——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白——转基因水稻胚乳可提取血清白蛋白2012年09月01日 来源： 中国科技网 关注转基因 白蛋白供应紧张一直困扰着人类。我国每年需求150—160吨，全球每年需求量则高达500吨，由于血浆来源紧张，我国目前从血浆中提取量仅可供应1/3，其中2/3依赖进口。 2011年10月31日，武汉大学生命科学学院教授杨代常撰写的论文《利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白》在《美国科学院院报》发表，吸引了世界的目光。 文章用翔实的科学数据证明，植物来源的重组人血清白蛋白与临床使用的血浆来源血清白蛋白，无论是在生理生化性质，还是功能用途等方面，都具有高度的等同性。 为何这项研究引发种种关注？稻米血清白蛋白是否会危及生态及人身安全？其何时能用于临床治疗？……带着这些问题，记者采访了杨代常和他的团队。 “借腹生子”：从水稻胚乳中提取血清白蛋白 植物种子生物反应器，是将植物种子作为一个蛋白质“生产车间”，利用植物作为合成蛋白质的“机器”来合成人类所需的蛋白质。“通俗地解释，便是‘借腹生子’。”杨代常说。 国外从1989年已开始利用DNA重组技术生产血清白蛋白，但由于血清白蛋白产量低、纯化工艺复杂、生产成本远高于市场成本，始终无法进入市场。 杨代常带领研究团队，从水稻基因组数据入手，根据水稻种子储藏蛋白与血清白蛋白的生化性质差异，设计出从提取到纯化的一整套工艺方案，最大限度地提取血清白蛋白，最低限度去除种子的内源蛋白，成为一项原始创新的科研成果。 “具体来说，是由表达元件组成的载体，通过遗传工程整合到水稻基因组内，在种子特异性调控元件的指导下，水稻种子在成熟过程中也不断地合成和积累人血清白蛋白，然后通过规模化种植获得原料，再经过提取、纯化等步骤获得高纯度的血清白蛋白。”杨代常介绍，目前大约每亩水稻可以产生1.5—2公斤血清白蛋白，如果说一个人一次能献血200ml，一亩转基因水稻产出的血清白蛋白量约等于300人献血。 “天然屏蔽”：可杜绝肝炎、艾滋病毒等风险 植物源重组血清白蛋白优势明显，它来源于非动物，避免了各种病毒和病原菌的污染，并由于不受血浆供应限制，可无限量供应。但是转基因农业作物安全性向来争议不断，植物源血清白蛋白有望未来直接应用于人体中，有人担心会危及生态及人身安全。 对此，杨代常解释，首先，就人血清白蛋白本身安全性而言，血清白蛋白本就是人体的蛋白质，占血浆中蛋白的30%，是一种安全的蛋白质。目前，根据获取的数据，植物来源的人血清白蛋白从生物活性、分子结构和理化性质与血浆来源的人血清白蛋白完全一致，从水稻胚乳中提取的血清白蛋白可杜绝携带如肝炎病毒、艾滋病毒等风险。研究发现，人体对植物蛋白的耐受能力大于对细菌和酵母的耐受能力。从安全性考虑，已建立高纯度符合医药级别纯度的血清白蛋白。其次，就转基因生物安全而言，由于采取地理和时间双重隔离方法，要求比美国更为严格。第三，为杜绝进入食物链，在研究中采取了专用收割机、烘干机、稻米加工设备以及专用仓库等措施，建立了严格的监管规范，能做到可管可控和可追溯。 未来预期：进入临床需4至5年 从2005年始，杨代常自主研发的水稻胚乳细胞蛋白质高效表达技术平台，填补了国际上此项技术规模化生产的空白，已获美、日、欧盟以及我国的多项专利。 杨代常说，目前，植物源重组血清白蛋白的质量已达到非临床应用标准，可替代血源人血白蛋白用于细胞培养基添加剂，成为细胞培养中血浆来源的血清白蛋白的替代品；可减少培养基中胎牛血清的使用量；还可用于高纯试剂、细胞冷冻保护剂、医疗器械包埋剂、药物载体、化妆品组分、体外诊断等。 国外已在疫苗及生物医药产品的细胞培养的稳定剂上使用。我国按照国家药监局的要求，要通过临床研究后才能进入临床应用。 通过治疗大鼠肝硬化腹水对比，进行植物源重组血清白蛋白的药效研究，发现大鼠肝硬化腹水的治疗效果在降低腹围、增加尿量和尿蛋白量等指标优于血浆来源的血清白蛋白。 “植物源重组血清白蛋白正在进行临床前研究，已完成大部分的药学研究，预计在2013年上半年可望完成临床前研究；预计进入临床研究至少需要2年时间，进入临床应用至少需要4—5年或更长的时间，这取决于临床研究的结果与进度以及国家的法规。”杨代常说。 从实验室走向产业化 去年年初，杨代常带着多年的研发成果，入驻武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城，一年内实现了项目产业化。 “这一过程我们走得很艰难。”杨代常说，为了让投资者更有信心，他在商业模式上从长中短期产品计划入手，将技术做好做精。在科技部转基因重大专项、国家863计划和武汉东湖国家自主创新示范区光谷生物城的支持下，加速了项目产业化进程。 “我国生物产业要走在世界前列，在心理上要打破‘奴性’思维，在政策上要突破传统观念，要敢做别人不能做或不敢做的事情。”杨代常说，“现在一谈到转基因，很多人就‘谈虎色变’。实际上，理解上存在很多误区。转基因技术是通过遗传工程的手段，将人类需要的基因（一段DNA片段）导入到植物或任何一种生物的一项高科技技术，是人类由必然王国走向自由王国的必由之路。” 近日，杨代常的科研团队又传出喜讯，在水稻中“种”出了“人抗胰蛋白酶”。目前，重组抗胰蛋白酶与重组血清白蛋白一样，有效地避免人血液中病毒病原菌感染的风险，但需要进行一系列的免疫原性、急性、毒性等相关实验和临床研究后，方能应用于临床。 杨代常透露，未来，其团队研发重心将着重原创性技术研究，建立单克隆抗体的表达平台，使我国的单克隆抗体药物的价格降到5万元左右，重组血清白蛋白进入临床应用。（记者 马爱平） 《科技日报》（2012-09-01 三版）

人血清中血红蛋白的[color=red]分子荧光[/color]光谱法测定

中国科技网讯 尽管医学界早在上世纪五十年代就发现和证实了“干扰素”的抗病毒作用，但它究竟是如何发挥作用的具体机制，仍是不解之谜。复旦大学近日发布消息，专家已解开其中谜团。 据透露，该校上海医学院基础医学院教育部、卫生部医学分子病毒学重点实验室主任袁正宏课题组研究发现，“干扰素-a”通过促使细胞分泌的“外体”所携带的具有抗病毒作用的蛋白和核酸等分子，在细胞间传递后发挥抗病毒作用的新机制。该发现对今后开发治疗慢性乙肝和其它病毒感染性疾病的新药有重大意义。该成果7月7日已在线发表在国际权威期刊《自然·免疫学》上。 干扰素是一组有多种功能的活性蛋白质，具有广泛的抗病毒作用。肝脏中的肝细胞是乙肝病毒活动、复制的唯一场所；而肝脏中的非实质细胞则连接、支撑肝细胞。“外体”是一种由细胞主动分泌出的微囊结构。“外体”在细胞间的通讯中发挥重要作用，在不同条件下，对于肿瘤发生、发展起到或促进或抑制的作用。课题组研究发现，在肝脏中，肝非实质细胞中的肝窦内皮细胞和巨噬细胞会分泌“外体”，在“干扰素-a”的诱导下，通过特定方式转运到易受到病毒感染的肝细胞中后，“外体”会“拼命”抵抗或清除乙肝病毒感染。 研究人员称，在应对病的变异、耐药性方面，这些存在于“外体”中的抗病毒分子好比“免疫军工厂”制造出的一种“火力十足”的“先进武器”，迫使病毒无法变异或产生耐药性。由此，“干扰素-a”诱导细胞分泌的“外体”，具有广谱、高效的抗病毒作用。该课题组已将有关“干扰素-a”处理细胞分泌“外体”用于抗病毒治疗的项目申请国家专利，相关的临床前研究工作也在进行中。（孙国根 记者 王春） 《科技日报》（2013-7-12 一版）

由武汉大学生命科学院教授、武汉禾元生物科技有限公司董事长杨代常领衔的研发团队从2006年开始进行植物源替代血浆来源的医药蛋白的研究与开发，现已取得突破性进展并已跨入规模化生产的阶段，填补了国际上此项技术空白。相关论文“Large-scale production of functional human serum albumin from transgenic rice seeds ”(利用转基因水稻规模化生产重组人血清白蛋白)于2011年10月31日在线发表于《美国科学院院报》( PNAS ) 。该论文在线之际，受到国外Scientist ， Nature news , The Australian , Thomson Reuters, Fox News , Agence France Presse (AFP法新社) 等美国、英国、俄罗斯、德国、巴西、印度各专业杂志及媒体的广泛关注和报道。该研究表明由转基因水稻种子生产的重组人血清白蛋白(OsrHSA)在生理生化性质、物理结构，生物学功能、免疫原性与血浆来源的人血清白蛋白一致；并建立了大规模生产重组人血清白蛋白的生产工艺，获得了高纯度和高产量重组人血清白蛋白产品。利用大量数据证明了转基因水稻种子可取代现有基于发酵的表达技术来生产重组蛋白质是经济有效的。正如PNAS 审稿人对该文章的评价：“这篇文章解决了在科学上振奋人心、在经济上都非常重要的议题－－即用转基因植物生产血浆产品或其他蛋白产品的技术平台，可代替其他基于发酵的表达技术，其重要性也不言而喻……这篇文章近乎完美地证实了植物生产的医药蛋白和批准临床使用的血浆来源医药蛋白是完全相同的，并提供了翔实数据证明植物系统规模化容易和成本优势。”目前，人血清白蛋白(human serum albumin)广泛应用于临床治疗和细胞培养领域。常见的人血清白蛋白大多数从人的血浆中提取，这样的生产方式不仅受到血浆供应的限制，而且还具有携带病毒传播的高风险性。国际上以重组人血白蛋白替代血源产品的应用已成为趋势，国内市场需求也逐年扩大，2010年已达150吨。尽管市场广阔，但高纯度重组人血白蛋白的规模化生产技术和质量控制技术却是世界性难题。武汉禾元历经多年的技术攻关，利用水稻胚乳表达技术平台，研发出国际先进水平的重组人血白蛋白产品生产技术，并成功实现重组人血白蛋白规模化和产业化，完全摆脱了相关制约，具有纯度更高、无动物组分、安全、高效、绿色环保、廉价、无限量供应等优势。随着植物源重组人血清白蛋白的发展，我国人血清白蛋白日益紧张的局面必将得到缓解。详细论文，请点击下载：http://www.oryzogen.com/category/22/2011-11-01/93315359.html注：《美国科学院院报》(Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 缩写 PNAS，ISSN：0027-8424)是被引用次数最多的综合学科文献之一。它是美国科学院的院刊。自1914年创刊至今，PNAS提供具有高水平的前沿研究报告、学术评论、学科回顾及前瞻、学术论文以及美国国家科学学会学术动态的报道和出版。PNAS收录的文献涵盖生物、物理和社会科学，2008年的影响因子为9.38，2009年影响因子为9.432, 2010年影响因子为9.771。在SCI综合科学类排名第三位，因而已成为全球科研人不可缺少的科研资料。

最近在做公司产品含药量的释放情况，释放液是加了牛血清白蛋白的PBS液，释放后产品从释放液中取出，注射用水洗净后晾干。产品上残留药品再用乙酸乙酯超声洗脱，用UV测定乙酸乙酯中的药品浓度。因最近新换了牛血清白蛋白，后来实验数据与前比似乎有点偏低，怀疑产品上牛血清白蛋白没洗干净，对UV吸收有影响？牛血清白蛋白对UV吸光度值有什么影响呢？哪里有供应质量稳定的牛血清白蛋白？

生物质谱技术帮助发现精神分裂症特征蛋白 (2006-12-28 9:34:47,新闻来源：人民网) 日前，四川泸州医学院附属医院硕士研究生姜伟，在导师王开正教授指导下，利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术，发现了一组对精神分裂症的早期预警、鉴别诊断、治疗观察具有重要意义的蛋白标志物。 　　目前鉴别诊断精神分裂症缺乏有效的病理学、影像学和实验诊断依据，也缺乏客观的检查指标用于早期诊断，这也是造成对某些精神分裂症的评定产生分歧、鉴定困难的原因之一。 　　姜伟等人应用获得诺贝尔化学奖、高灵敏度高解析度的表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术，检测精神分裂症血清蛋白质指纹图谱，将40名精神分裂症患者血清与44名其他人对照血清随机分为训练集和验证集，将筛选训练集精神分裂症差异蛋白建立人工神经网络诊断模型，再将验证集验证该模型的诊断效率。结果发现精神分裂症患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有15个差异表达的蛋白质荷比峰，筛选出其中6个有明显表达差异的标志蛋白，建立的人工神经网络诊断模型对精神分裂症的诊断灵敏度和特异性分别为95.0％和95.8％，阴性预测值和阳性预测值分别为95.8％和95.0％。姜伟等人依据这一结果认为，精神分裂症患者血清具有高表达的特征蛋白，建立的人工神经网络模型为精神分裂症的实验诊断提供了一种蛋白组学的新方法。这种方法检查过程快速、简便，不会破坏所测定的蛋白质，结果可靠，可重复检测。 ————2006.12.27健康报也有报道--------------------------------------------------------------------另：两毫升血５小时鉴别精神分裂症 作者：周丽 文章来源：泸州晚报 点击数：0 更新时间：2006-12-20 　　只需要从体内抽取两毫升鲜血，经过５个小时的实验室检测，就能诊断是否患有精神分裂症。昨（１９）日记者获悉，如此简便的方法已经在我市投入使用，这也是西南地区首次将诺贝尔化学奖应用到精神分裂症的实验室诊断中。　　据悉，该技术在泸医附院检验科正式投入使用。泸医附院检验科主任王元正告诉记者，泸医附院引进的表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术是获得２００２年诺贝尔化学奖的高新技术，通过对患者的抽血检测，发现了一组对精神分裂症的早期预警、鉴别诊断、治疗观察具有重要意义的蛋白标志物。　　而泸医附院引进的这种技术，将精神分裂症患者血清蛋白指纹图与健康人做差异蛋白组学分析，利用计算机程序找到了精神分裂症患者特征表达的蛋白质，将６个蛋白的相对含量建立人工神经网络诊断模型并进行盲法验证。结果显示，对精神分裂症的诊断灵敏度为９５．０％，特异性为９５．８％。整个实验检测过程只需要５个小时。　　目前，全国对此技术的利用并不广泛，泸医附院在西南地区率先引进使用。这种技术还用于肿瘤、心血管疾病、风湿免疫性疾病、感染性疾病等疑难疾病的鉴别诊断，特别是对各种肿瘤的早期诊断灵敏度和特异性都在９５％以上。

据说，干扰素是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒。但是，对于多种由病毒引起的疾病来说，好像很有一定的效果。你了解干扰素吗？你的认识有多少？

最近，用6520Q-TOF分析细胞色素C，牛血清蛋白。样品从计量院取得。每次进样得出的峰都不是想要的，最大m/z才800多，明显不是蛋白质的质谱峰。而且细胞色素C和牛血清蛋白测出来的m/z居然差不多（最困惑的现象）。自己思考：样品保存问题、实验条件问题因为第一次接触质谱分析蛋白质，很困惑。望各位大侠指导一番。

70kDa）中的七个得到了可溶性表达，而其它的融合标签（GST，MBP和hexahistidine）系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用参考文献a目的蛋白数目目的插入序列种属目标蛋白大小范围NusA融合蛋白可溶性比例Shih等（2002）40酵母，哺乳动物，植物，昆虫9-10060Korf等（2005）75人6-12760bKohl等（2008）96人1-11844ca. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器，质膜或者骨架的蛋白，相对于其它标签系统来讲，NusA标签是最好的可溶性表达的选择。Kohl等（2008）也发现只要在20-25℃诱导表达，NusA标签能够大大提高难表达的蛋白比如膜蛋白的可溶性。与Korf等的研究结果一致，Kohl等也发现25℃诱导表达比30℃或37℃诱导表达可以纯化得到更多的NusA融合蛋白。切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白表2总结了16个采用NusA标签成功获得可溶性蛋白，在切除标签后这些蛋白仍有正确折叠结构和活性。大部分这种研究是是关于分子量小于或接近20kDa的目标蛋白。纯化后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括：■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶（Ermolova 2003）——目标蛋白切除标签后用BDA（蓝色葡聚糖）亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。■ Xklp3a，Tep3Ag和E8R（De Marco 2004）——用蛋白酶切割后，His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除。与Ni2+亲和结合的标签被紧密地结合在树脂上，在流出液中则可以得到纯化的目的蛋白。所有这三种蛋白在纯化后都正确折叠且均一分散在溶液中。纯化的膜结合蛋白E8R牛痘病毒蛋白在Tris缓冲液中除去NusA后出现了沉淀，然而加入0.02%的月桂酰基麦芽糖苷和150mM的氯化钠后，蛋白又重新变得可溶。■ 环麦芽糖糊精酶（Turner 2005）——这个蛋白属于α-淀粉酶家族。这个家族的蛋白通常在大肠杆菌中很难以活性形式表达出来。将其与肠激酶混合孵育24小时以上会使其活性逐渐增强，直到达到未经肠激酶处理过的融合蛋白的2倍以上，这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。■ 八种人趋化因子（Magis-trelli 2005）——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag（亲和素）生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性，而没有一个融合蛋白有这样的活性。■ 蚯蚓血红蛋白（Karlsen 2005）——酶切后，用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白，纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致，且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。■ 人白介素-29（Li 2006）——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后，用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒（VSV）处理固定的人羊膜上皮细胞（WISH 细胞）后，通过检测纯化的IL-29对细胞的保护效应来检测其抗病毒活性。■ 人干扰素-λ2（Li 2007）——酶切后，用Novagen提供的EKaptureTM琼脂除去重组的肠激酶。先用纯化后的干扰素-λ2处理WISH细胞，24小时后加入VSV病毒，可以观察到干扰素-λ2可以有效地保护细胞免于病毒介导的病变。表2. 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白参考文献目的蛋白目的蛋白分子量（kDa）切割用蛋白酶融合蛋白亲和层析固定介质纯化后目的蛋白产量（mg/L）Ermolova等（2003）植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶32凝血酶Ni2+1.5De Marco等（2004）Xklp3ATep3AgE8R15NRa32bTEV酶TEV酶TEV酶Ni2+5.02.54.0Turner等（2005）环麦芽糖糊精酶69肠激酶Cu2+1.6Magistrelli等（2005）八种人趋化因子8-21Xa因子Ni2+30-100Karlsen等（2005）蚯蚓血红蛋白15TEV酶Ni2+NRaLi和He（2006）人白介素-2920凝血酶S-蛋白60Li和Huang（2007）人干扰素-λ220肠激酶Ni2+65a. 未报道b. 根据NCBI报道预测的全长蛋白分子量与NusA标签融合且具有活性的蛋白 与这些切除NusA标签后保持活性且正确折叠的蛋白不同，还有很多报道指出目的蛋白在“NusA-目的蛋白”的融合形式时具有很好的活性。比如单链（ScFv）催化活性抗体14D9（Zheng 2003），来自Aequorea victoria的绿色荧光蛋白（Nallamsetty 2006），人二氢叶酸还原酶（Nallamsetty 2006），来自Ensis directus蛏子的精氨酸酶激酶（Compaan 2003），来自B. thuringiensis的修饰δ-内毒素（Kumar 2005），人BCMA跨膜受体（Guan 2006），植物α-双加氧酶1（Liu 2006），以及来自Plasmodium falciparum的b-ketoacyl-acyl载体蛋白合成酶（Lack 2006）等，反映了各种不同背景的蛋白都显示出了与NusA标签融合后的活性。NusA标签提高蛋白可溶性的可能机制 Houry（1999）等揭示NusA蛋白是分子伴侣GroEL在体内的必须底物。而GroEL与其共作用因子GroES是大肠杆菌唯一的在所有生长条件下必需的分子伴侣系统。Douette等（2005）研究了融合蛋白NusA-UCP1（uncoupling protein 1）的可溶产量。UCP1是一种线粒体膜蛋白。这些作者发现16℃培养时，当GroEL共过表达的情况下，融合蛋白的可溶性有更大的提高。这个结果也表明NusA与分子伴侣途径相作用，从而阻止参与蛋白的聚集。总结 已有充分的证据证明NusA标签系统能显著提高多种不同来源蛋白的可溶性表达，而这些蛋白在单独表达时往往形成不可溶的包涵体。在一些研究报告中，用蛋白酶切除NusA标签能使目的蛋白仍保持正确折叠和生物学活性；相反，在另外许多报道中也指出当目的蛋白与NusA融合而非切除时，融合蛋白也同样具有活性。NusA标签系统的成功至少部分地是由于其与大肠杆菌分子伴侣系统相互作用的结果。

牛血清里的球蛋白有商品化的试剂卖吗？

功能性蛋白及一例分析自19世纪中叶荷兰化学家Gerardus Mul-der从动物组织和植物体中提取出蛋白质以来，人们发现了越来越多的蛋白质，据估计生物界中蛋白质的种类可达1010～1012之多;在这如此众多的蛋白质中，功能性蛋白发挥着极其重要的生理功能 。功能性蛋白也有人称其为活性蛋白。它们的特点是都有识别功能，能与其他分子特异性结合.完成各种复杂的生命活动:在结构上主要是一些球状蛋白质。1 功能性蛋白的种类按其作用方式不同可分为酶蛋白、运输蛋白、运动蛋白、免疫球蛋白、毒蛋白、激素蛋白（1）酶蛋白： 细胞的生长和繁殖、代谢物的合成和分解、能量的产生和利用，这些过程所需要的物质都是通过无数的生物化学反应来提供的.而这些反应又都是在一类特殊蛋白质—酶蛋白的催化下完成的。酶的催化效率极高，且具有高度的专一性，也正是这种高度的专一性使一种特定的酶只能作用于一种或少数几种结构相似的化合物，这就要求有各种不同的酶去作用于不同的化合物。在酶的作用下，生物细胞才得以合成各种复杂的化合物，也才能使各种大分子物质被分解、吸收和利用.且这些反应都要在适合于生物体本身的温度、压力和pH值等非常温和的条件下进行，能使生物细胞按照这种方式进行化学变化是蛋白质最重要的功能之一。常见的酶蛋白如淀粉酶使淀粉分解形成葡萄糖，蛋白酶、肽酶使蛋白质分解为氨基酸;溶菌酶使细菌细胞壁中的肤聚糖被破坏;凝血系统酶的有序作用使凝血过程得以有条不紊地进行.合成酶能合成多种体内所需要的大分子物质。应用举例：由于近年来鱼粉资源价格上涨，冷向军等人通过向鱼粉含量较低(10﹪)的饲料个添加蛋白酶AG使鱼的前肠蛋白酶有显著提高。同样有实验证明在玉米-豆粕型粮食中添加蛋白酶可以改善肉鸡的生长性能，提高蛋白质的消化率。（2）运输蛋白：有些蛋白质起载体的作用可以运输特定的物质到达必须的部位，使其完成特定的功能，这种蛋白质称为运输蛋白。如哺乳动物的血红蛋白能将氧从氧气充裕的肺内运送到各个组织中去:血清蛋白能与游离脂肪酶等多种物质结合，并将这些物质在脂肪组织与身体的其他部位间运送（最典型的β1-脂蛋白可随血流运输脂肪)，铁传递蛋白能传递血液中的铁。无脊椎动物体内的血蓝蛋白，大豆根瘤中的豆血红蛋白也起着输送氧气的作用。另外还有一些能携带物质通过细胞膜进出细胞的蛋白质，如细菌过膜运输中的载体蛋白等，它们都属于运输蛋白。（3）运动蛋白：参与运动功能的蛋白质种类较多如脊椎动物中骨骼肌的主要成分就是肌动蛋白和肌球蛋白，肌肉的收缩就是靠着这两种互相联系的平行丝状蛋白相对滑动来完成的；细菌的运动器官——鞭毛也是由鞭毛蛋白组成的；绿藻的运动也离不开蛋白质；有丝分裂的完成，精子的运动等都与运动蛋白有关，所以绝大多数生物的运动和收缩过程都是运动蛋白参与的结果。应用举例：邱永忠等人在研究烟草花叶病毒（TMV）在植物细胞间的运动时发现用体外定位突变引起L株上，被点突变的DNA体外转录成RNA后感染感病烟草，结果定位突变的L株表型30kD蛋白基因四种位点不同的移码突变和一种基因中间大部分缺失的突变体均使病毒不能感染植株。这证明TMV 30kD蛋白与病毒运动有关，而与病毒复制无关。同时因为胞间连丝一般只能让小于1kD的分子通过，其通透范围远小于病毒颗粒，也小于折叠的病毒核酸分子，Wolf等实验证明正时因为30kD蛋白才使得植株分子半径扩散了三倍多。（4）免疫球蛋白：指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。脊椎动物的免疫系统能抵抗外来的入侵物质，如病毒、细菌以及其他机体的细胞，当外来的这些入侵物质(抗原)进入机体后就会激发机体的免疫系统而产生特异性的免疫球蛋白(抗体)，通常每一种抗体对于相应的某一特定抗原具有高度的专一性，抗原与抗体结合形成抗原-抗体复合物．使入侵物质——抗原失活而排出体外，从而消除外来物质对机体的干扰。由此看来蛋白质不仅参与了高等动物的免疫反应，而且起着重要的作用，由于抗原和抗体结合的高度专一性，必然有数量众多的抗体作用于不同的抗原物质，据估计抗体的类型可能有10O万种，即免疫球蛋白可能有100万种之多。（5）毒蛋白：动物、植物和微生物都可以产生某些特殊的物质来防御敌害，这些物质中绝大多数是蛋白质类物质，由于它们对高等动物具有毒性，故称为毒蛋白。蝎类能产生毒性很强的蝎毒蛋白．用来攻击敌害，保护自己；蛇类产生的神经毒素和心赃毒素其主要成分也是小分子量的蛋白质；毒蘑菇中的相当一部分蘑菇毒素也是蛋白质；细菌产生的毒素，毒性极强的肉毒梭菌毒素(人的致死量小于19m)和破伤风痉挛毒素、白喉杆菌毒素等外毒素均是蛋白质。应用举例：王峰等人研究核糖体失活蛋白（RIPS)是一类能够抑制细胞核糖体合成蛋白质，从而导致宿主死亡的毒蛋白，广泛存在于植物、细菌中。发现其在在细胞内的转运途径研究很多，目前较为清楚的是逆向转运途径，其中以蓖麻毒素、志贺菌毒素、霍乱毒素为代表，大体过程为：内吞一内吞小体一高尔基体一内质网一胞液。（6）激素蛋白：是由特殊细胞所产生的一类物质，它们通过与靶细胞或系统内其它器官的相互作用来发挥其代谢上的功能，其实许多激素本身就是蛋白质，这样的蛋白质称为激素蛋白，它们在生物合成上具有重要的功能。如胰高血糖素、胰岛素、胃泌素、生长激素、促甲状腺激素、促肾上腺皮质激素和促脂解激素等均是蛋白

有谁知道如何用牛血清白蛋白配制空白血浆？文献报道如下：Reconstituted plasma was prepared by dissolving 0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl, 0.02 g of KH2PO4, 0.11 g Na2HPO4 and 4 g of bovine albumin (Sigma, St. Louis, MO, USA) in 100 ml of water.但是0.8 g of NaCl, 0.02 g of NaCl肯定有一个是重复的，哪位大侠知道如何配制啊

北京易斯威特生物医学科技有限公司产品介绍 铁蛋白（FER）检测试剂盒 （胶体金法）1.国内第一家免疫层析法检测FER的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金（纳米金）免疫层析技术，以双抗体夹心法快速定性检测人血清，血浆中的铁蛋白，适用于急性贫血，肝脏损伤等相关疾病的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.血清铁蛋白是血液去铁蛋白和铁核心Fe3+形成的复合物。是检查体内铁缺乏的最灵敏的指标。血清铁蛋白测定在临床上常用于缺铁性贫血的诊断。简单 便捷 快速 灵敏 环保 肌红蛋白/肌酸激酶/心肌肌钙蛋白I，心梗三项检测试剂盒（胶体金法）1.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金（纳米金）免疫层析技术，以双抗体夹心法快速定性检测人血清，血浆中的肌红蛋白，肌酸激酶，心肌肌钙蛋白I检测，用于临床快速诊断急性心肌梗塞（AMI）.2.最快速准确的辅助诊断方法。3.肌红蛋白：是心肌梗死的标志物，增高表示冠状动脉堵塞引起心肌严重缺血造成心肌梗死；4.肌钙蛋白：是一种心肌蛋白，升高见于心肌损伤，多见于心肌梗死，也见于心肌炎和心肺复苏后患者，特异性较高，阳性的话一般可确诊心肌损伤，阴性的话不能排除，因为肌钙蛋白的升高出现在心肌梗塞3-6小时之后，之前可能出现阴性。肌酸激酶敏感性较高，特异性较低，升高也出现在心梗3-8小时之后。5.肌酸激酶：主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也存在，是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2－4小时，血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。 简单 便捷 快速 灵敏 环保 C反应蛋白（CRP）检测试剂盒（胶体金法）1.国内第一家免疫层析法检测CRP的产品。2.本产品应用世界上最先进的单克隆抗体技术结合胶体金（纳米金）免疫层析技术，以双抗体夹心法快速定性检测人血清，血浆中的C反应蛋白，适用于感染，炎性疾病，组织损伤，手术创伤及组织坏死等病变情况的辅助诊断3.最快速准确的辅助诊断方法。4.是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。可用于细菌和病毒感染的鉴别诊断简单 便捷 快速 灵敏 环保

请问用高效液相色谱法检测牛血清白蛋白标准品（BSA），用什么柱子比较好？

荧光光谱研究阿司匹林键联金属卟啉与牛血清白蛋白的相互作用

稀土离子铈(Ⅳ)[color=red]分子荧光[/color]光谱法测定血清白蛋白的含量

[font=宋体][b]重组蛋白、融合蛋白与天然蛋白的区别：[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白是利用基因工程技术产生的，通常是由转基因动物的乳腺产生，其作为生物制药在医学领域中作用显著。利用基因工程技术，可以使哺乳动物本身变成[/font][font=宋体]“批量生产药物的工厂”。方法：是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋白质药品，因而称为动物乳腺生物反应器或乳房生物反应器。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白又称为[/font][font=宋体]“标签蛋白”，常用的标签有[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Strep[/font][font=宋体]标签。融合蛋白是通过[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将要表达的目的蛋白基因和表达载体上融合蛋白基因相连，通过这种方式表达出来的蛋白质，就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重组蛋白。融合蛋白表达是重组蛋白表达的一种策略，融合表达是一种方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]天然蛋白质是在自然界中存在的，不经过人工的任何修饰或加工，比如大豆中的蛋白质和病毒表面的蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组蛋白常见问题解析：[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]蛋白为什么要冻干？冻干对蛋白的影响有哪些？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质对热敏感，冻干能使绝大部分蛋白质的活性保留下来，提高蛋白的稳定性并延长保存时间，同时降低运费。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]冻干前为什么向蛋白溶液中加保护剂？一般冻干保护剂有哪几种？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]保护剂是用来在冻干和储存过程中保护蛋白的。常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加[/font][font=Calibri]8%[/font][font=宋体]（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集；甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂，可以降低某些蛋白的冻干后聚集情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]温馨提示：对于大多数蛋白，重悬后在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃仅能短期保存[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]约[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。如想长期保存，请先配制成稀释液[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]其中必须含有载体蛋白，如[/font][font=Calibri]0.1% BSA[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]5%HSA[/font][font=宋体]，或[/font][font=Calibri]10% FBS)[/font][font=宋体]，然后分装冻存于[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃或[/font][font=Calibri]-80[/font][font=宋体]℃。一定要避免反复冻融，因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]如何重构冻干粉？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]请查看您的货物随附的分析证书以获取有关重构的确切说明，因为并非所有产品都在相同条件下重构。一般来说，我们建议使用无菌水进行复溶。将推荐体积的无菌水加入小瓶中，轻轻摇晃以完全溶解蛋白质。不要涡旋。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]为什么我的管内几乎看不见蛋白产品？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白产品中不含载体蛋白或其它添加物[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如牛血清白蛋白[/font][font=Calibri](BSA)[/font][font=宋体]，人血清白蛋白[/font][font=Calibri](HSA)[/font][font=宋体]和蔗糖等，并以最低含盐量的溶液进行冻干时，常常不能形成白色网架结构，而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]应如何确定细胞因子的种属交叉活性？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]除少数例外，大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。[/font][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞，但比活性可能低于对应的人类细胞因子。 [/font][font=Calibri]3) IL-7[/font][font=宋体]等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。[/font][font=Calibri]4) [/font][font=宋体]干扰素，[/font][font=Calibri]GM-CSF, IL-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]等细胞因子种属特异，对非同源细胞几乎没有活性。[/font][font=Calibri]5) [/font][font=宋体]相反，成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGFs)[/font][font=宋体]和神经营养素[/font][font=Calibri](neurotrophins)[/font][font=宋体]高度保守，在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]什么是载体蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]载体蛋白如[/font] [font=Calibri]HSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]用于提高重组蛋白的稳定性，并有助于避免产品粘在小瓶壁上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]我应该如何储存重组蛋白？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于长期储存，蛋白质溶液应与载体蛋白（例如[/font] [font=Calibri]0.1% BSA [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]0.1% HSA[/font][font=宋体]）分装保存，并在 [/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]下冷冻保存。请记住，每个冷冻[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]解冻循环都可能导致蛋白质变性。除非分析证书上另有说明，否则大多数重组蛋白的保质期为一年。如果将它们保存在分析证书上所述的最佳存储条件下，则提供此保证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8.[/font][font=宋体]如何确定重组蛋白的数量？为什么我的检测产生的蛋白质数量与您的结果不同？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]我们通过[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HPLC[/font][font=宋体]等方法确定重组蛋白的数量。不同的测定产生不同的量化结果。有时，如果您进行不同的检测，差异可能会很大。蛋白质也有可能在储存过程中形成聚集体，在重组和离心后导致损失。我们对每批产品进行质量控制测试，但是，同一批次中的一些小瓶可能与其他小瓶不同（这种情况很少发生）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]重组蛋白资源[/b][/url]详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font]

β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分？最近看到有两种版本，其一，说是属于乳白蛋白里面的一种成分，乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二，乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白，乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对，请各位指教！！！谢谢！！！

一、原理：本法系依据特异性抗体（免疫球蛋白）F a b段与红细胞上已包被的相应抗原结合，抗体暴露出F c段补体Clq的结合位点，从而激活后续的补体各成分，最终导致红细胞的细胞膜受到攻击、破裂，释放出血红蛋白。通过溶血反应动力学曲线，计算人免疫球蛋白激活补体活性的功能指数（4 ) ，以此测定供试品F c段生物学活性。二、试剂（1) P B S (pH7.2) 称取无水磷酸氢二钠1.02g,无水磷酸二氢钠0.34g、氣化钠8.77g，加适量水溶解，用lmol/L氢氧化钠溶液或盐酸溶液调p H 值至7.2，再加水稀释至1000ml。( 2 )钙-镁贮备液 称取氯化钙1.10g、氯化镁5. 0 8 g ,加水25ml使溶解。( 3 )巴比妥-钙镁贮备液称取氯化钠51.85g、巴比妥钠6.37g，加水1000ml使溶解，加人钙-镁贮备液3.125ml，用lmol/L盐酸溶液调p H 值至7. 3，再加水稀释至1250ml。除菌过滤后4°C保存备用。( 4 )牛白蛋白-巴比妥缓冲液称取牛血清白蛋白0. 15g加入巴比妥-钙镁贮备液20 m l中，加水溶解并稀释至100ml。临用前配制。(5) 1. 3mg/L 鞣酸 P B S (pH7. 2) 溶液A 液称取鞣酸l m g ,加PBS (pH7.2) 10ml，使溶解。B 液量取 A 液 0.1ml，加 F*BS (pH7. 2) 7.5ml，混匀，即得，临用前配制。(6) 10%氯化铬溶液称取氯化铬5g，加生理氯化钠溶液50ml使溶解。4°C保存（可保存半年）。(7) 1 % 氯化铬溶液取1 0 %氯化铬溶液0. lml，加生理氯化钠溶液0.9ml，混匀。临用前配制。（8）敏化红细胞的制备A 液取健康人抗凝的O 型血3 人份以上混合，用P B S 洗涤3 次，最后一次以每分钟2 0 0 0转离心1 0分钟分离红细胞。取适量压积红细胞悬浮于1 . 3 m g / L鞣酸P B S(1 : 4 0 ) , 置3 7 ° C水浴中轻摇3 0分钟后再用P B S 洗涤3次，最后用P B S 制备成2. 5 % 红细胞悬浮液。B 液用P B S适当稀释的白喉类毒素或腮腺炎病毒与1 % 氯化铬溶液0.25ml混合（1 0 : 1 ) 后，置37°C水浴中轻摇1 5分钟。将A 液、B 液按1 : 4 混合，置37°C水浴中轻摇3 0分钟。离心，去上清液，用P B S将沉淀（敏化红细胞）洗涤3 次，用牛白蛋白-巴比妥缓冲液悬浮红细胞，调节至适宜浓度，使其在波长5 4 1 n m处的吸光度为1.0土0. 1。

[font=微软雅黑][color=#444444]实验步骤如下：[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]变性，还原、烷基化、加入内标肽，酶解后固相萃取，干燥复溶，最后LC-ESI-MS/MS检测特征肽和内标肽，碰撞能和流动相都优化后，纯蛋白响应值很高。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]之后开始做血清标本，比处理蛋白多了一步去除高丰度蛋白步骤，也是严格按照试剂盒步骤做的，然而检测响应值只有500~1000。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]血清中是有目标蛋白的，因为质谱检测前已经在自动生化分析仪上面检测到靶蛋白浓度大约有20ug/ml。[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]PS：质谱仪是AB SCIEX 5500QTRAP，以前师姐用上述的方法是可以在仪器上做出10000多的响应值，是不是说明方法建立这块没什么大问题。目前仪器坏了，借用了别处的仪器，型号和厂家也是相同的，响应值却很低[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444]求问各位大佬血清中检测不出是什么原因，万分感谢！[/color][/font][font=微软雅黑][color=#444444][/color][/font]